CN112931428A - 一种用于豌豆蚜饲养的方法 - Google Patents

Abstract

一种用于豌豆蚜饲养的方法，一：准备一个直径12cm，高5cm的圆形透明塑料容器作为培养基容器；二：将花宝原液按照1000倍的浓度配置500ml溶液后倒入烧杯中，备用；三：将第二步所得液体内加入1%的琼脂粉备用；四：将第三步所得放入微波炉进行加热至沸腾后放置在磁力搅拌器上进行搅拌，待温度降至55℃备用；五：将第四步所得90ml溶液倒入步骤一准备的容器内，在室温放置直到冷却凝固；六：将蚕豆叶片正面贴到第五步所得的琼脂表面，再把豌豆蚜接种在蚕豆叶表面，并将培养基倒立放置，即可开始饲养，每隔3天更换或添加一片蚕豆叶即可。本发明饲养的豌豆蚜，个体大小、寿命、发育时间均与其寄主活体植株饲养无显著性差异。

Description

一种用于豌豆蚜饲养的方法

技术领域

本发明涉及一种用于豌豆蚜饲养的方法，属于昆虫饲养技术领域。

背景技术

蚜虫是半翅目蚜总科昆虫的总称，目前世界上已知的种类大约5000种，蚜虫的寄主很广泛，包括蔬菜、果树、花卉、林木等。豌豆蚜也属于蚜总科，主要寄生于豆科作物和牧草上，它不仅能直接对寄主植物造成损伤，还能传播病毒病，造成其寄主产量和质量大幅下降。豌豆蚜也属于蚜总科，其在国内、外的分布均十分广泛。因此，蚜虫的防治方法的研究一直是当前世界许多国家一个基础理论和实际应用并重的重大课题。在豌豆蚜的相关实验中，目前主要使用人工饲料法和活体植株法来进行。人工饲料饲养蚜虫相对于传统的活体植株饲养法的优点是显而易见的，例如：节约饲料，便于观察蚜虫的行为活动等，但是缺点也是很突出的，通过人工饲料饲养的蚜虫，发育时间较长，个体小，繁殖率低，再加上人工饲料配制过程繁琐、成本高以及灭菌困难等问题，使得人工饲料研究进展缓慢。

另一方面，在室内通过活体植株来饲养的蚜虫，其状态最接近自然界的野生蚜虫，。但是，活体植株的培育有时需要耗费大量时间，而且蚜虫时常会躲进植物茎叶的缝隙处，难以观察，导致试验数据不够精确。

发明内容

本发明所要解决的是人工饲料法和活体植株法饲养中数据统计不够精准，虫体观察困难、活体植株培养耗时及营养物质不足等技术问题。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

一种用于豌豆蚜饲养的方法，包括如下步骤：

步骤一：准备一个直径12cm，高5cm的圆形透明塑料容器作为培养基容器；

步骤二：将花宝原液按照1000倍的浓度配置500ml溶液后倒入烧杯中，备用；

步骤三：将步骤二所得液体内加入1%的琼脂粉备用；

步骤四：将步骤三所得放入微波炉进行加热至沸腾后放置在磁力搅拌器上进行搅拌，待温度降至55℃备用；

步骤五：将步骤四所得90ml溶液倒入步骤一准备的容器内，在室温放置直到冷却凝固；

步骤六：将蚕豆叶片正面贴到步骤五所得的琼脂表面，再把豌豆蚜接种在蚕豆叶表面，并将培养基倒立放置，即可开始饲养，每隔3天更换或添加一片蚕豆叶即可。

采用上述技术方案的有益效果是：

本发明可以大大提高相关实验效率。而且，本发明兼顾了人工饲料法和活体植株饲养法的优点（例如：饲养方便有效，能提供昆虫所需的全部营养成分等），同时摒弃了他们的缺点（例如：制作麻烦，观察困难等），可以解决很多蚜虫相关试验的问题，例如个体数的精确定量问题，活体植株饲养蚜虫时的逃逸问题等。因此使用本发明可以很容易的对蚜虫的行为活动以及个体数量进行准确的观察和记录。能为豌豆蚜及其他蚜虫及昆虫的相关研究提供更精准的数据。而且本发明具备一定的叶片保鲜作用，所饲养的豌豆蚜，个体大小、寿命、发育时间均与其寄主（蚕豆）活体植株无显著性差异。

附图说明

图1为本发明对蚕豆叶干重影响，不同的字母表示在0.05显著性水平上有显著性差异。

图2为本发明对蚕豆叶鲜重影响，灰色表示第7天，白色表示第0天, 不同的字母表示在0.05显著性水平上有显著性差异。

图3为本发明对叶面积的影响。

具体实施方式

下面对本发明作进一步详细说明：

一种用于豌豆蚜饲养的方法，包括如下步骤：

步骤一：准备一个直径12cm，高5cm的圆形透明塑料容器作为培养基容器；

步骤二：将花宝原液按照1000倍的浓度配置500ml溶液后倒入烧杯中，备用；

步骤三：将步骤二所得液体内加入1%的琼脂粉备用；

步骤四：将步骤三所得放入微波炉进行加热至沸腾后放置在磁力搅拌器上进行搅拌，待温度降至55℃备用；

步骤五：将步骤四所得90ml溶液倒入步骤一准备的容器内，在室温放置直到冷却凝固；

步骤六：将蚕豆叶片正面贴到步骤五所得的琼脂表面，再把豌豆蚜接种在蚕豆叶表面，并将培养基倒立放置，即可开始饲养，每隔3天更换或添加一片蚕豆叶即可。放置环境条件为豌豆蚜适温区（15-23℃）皆可。由于本发明制作的培养基在20℃条件下不接种蚜虫的情况下可保持28天不变质因此，可以提前制作好备用。

本发明一种用于豌豆蚜饲养的方法的试验对照情况如下：

1.不同营养液对蚕豆叶片的影响；

从室内种植的蚕豆植株顶芽下部采集36片叶子，用消毒剪刀裁剪成（长×宽=3cm×2cm）的长方形，将它们随机分成3组，每组12片，其中1组作为对照放入烘干器中烘干，用分析天平测量干重，其他的组用分析天平测量鲜重之后，将叶片拍照后导入电脑，用ImageJ测量叶面积。之后，分别准备含有1000倍花宝及蒸馏水的培养基各4个，每个培养基上放置3片剪好的叶子，移入人工气候箱培养（20℃，L:D=16：8）。7天后，测量所有叶片的干重、鲜重以及面积。

结果：

通过Tukey-kramer test分析可知，用琼脂法培养的蚕豆叶，无论是水处理区还是各营养液处理区，都显著大于对照，但是7天后2种溶液之间的干重没有显著性差( p=0.086)。也就是说在本方法能让离体蚕豆叶继续“生长”（图1）。

如图2所示：在试验前，所有试验区的叶片鲜重之间没有显著性差异( p=0.947)。7日后，花宝试验区与水试验区的叶片鲜重均增大，且花宝试验区的叶片鲜重值最大，为0.166g，显著高于水。也就是说，本法在一定时间内能保持离体蚕豆叶片的鲜度，加入营养液比单纯的用水效果更好。

在试验开始前，由于裁剪模板尺寸一样，所以各试验区的初始面积之间没有显著性差异(p=0.595)；7天后，使用花宝原液的试验区叶面积显著高于水试验区（p=0.012）（图3）。

2.不同营养液对豌豆蚜生长的影响：

将15头1龄豌豆蚜幼虫（出生后24小时以内）放入载有1片蚕豆叶的培养基（溶液为1000倍花宝原液），作为第1代，在人工气候箱中饲养。每3天往培养基加一片新鲜的蚕豆叶，记录发育至成虫的时间，然后将成虫做成显微镜标本，拍照后将照片导入电脑，用Image J测量后足腿节和胫节长度之和。将第1代产出的1龄幼虫移动到新的培养基中作为第2代继续饲养，这样一直养到第3代，用同样方法测量第2代和第3代的发育时间以及成虫后足腿节和胫节长度之和。

同时，将1头1龄豌豆蚜幼虫（出生后24小时以内）移到蚕豆苗（发芽后2-5天）上作为第1代，在人工气候箱中饲养。当它变成成虫之后，记录发育时间，然后做成显微镜标本，用Image J 测量后足腿节和胫节长度之和。将第1代产出的1龄幼虫移动到新的蚕豆苗上作为第2代继续饲养，一直养到第3代，用同样方法测量第2代和第3代的发育时间以及成虫后足腿节和胫节长度之和（各处理重复15次）。比较使用不同营养液的琼脂法和蚕豆苗所饲养的豌豆蚜是否存在差异。

接下来，分别准备营养液为1000倍花宝的培养基以及蚕豆苗各1个，分别接上1龄幼虫1头，每隔3天，给培养基添1片叶子，同时去除枯萎的叶片，15天更换1个培养基。用苗饲养的每隔8天，更换一次苗。从成虫产子开始，每天记录新生幼虫数量，然后将幼虫去除，一直到成虫死亡，并记录成虫寿命（各处理重复12次）。

结果：

琼脂法对豌豆蚜发育时间及尺寸的影响；

由双因素方差分析可知，在豌豆蚜从1龄到成虫的发育时间及成虫尺寸上，本方法与活体植株之间以及世代之间均无显著性差异。发育时间（双因素为：方法和世代。方法：F=0.69, p=0.40；世代：F=0.56, p=0.57；方法和世代间的交互作用：F=0.82, P=0.44），后足长（双因素为：方法和世代。方法：F=0.001, p=0.99；世代：F=2.84, p=0.06；方法和世代间的交互作用：F=1.19, p=0.31）。

使用T检验后发现在产子数和寿命上本发明与活体植株之间没有显著性差异（产子数：T=1.85, p=0.08；寿命：T=0.25, p=0.8）。

Claims (1)

1.一种用于豌豆蚜饲养的方法，其特征在于：它包括如下步骤：

步骤一：准备一个直径12cm，高5cm的圆形透明塑料容器作为培养基容器；

步骤二：将花宝原液按照1000倍的浓度配置500ml溶液后倒入烧杯中，备用；

步骤三：将步骤二所得液体内加入1%的琼脂粉备用；

步骤四：将步骤三所得放入微波炉进行加热至沸腾后放置在磁力搅拌器上进行搅拌，待温度降至55℃备用；

步骤五：将步骤四所得90ml溶液倒入步骤一准备的容器内，在室温放置直到冷却凝固；

步骤六：将蚕豆叶片正面贴到步骤五所得的琼脂表面，再把豌豆蚜接种在蚕豆叶表面，并将培养基倒立放置，即可开始饲养，每隔3天更换或添加一片蚕豆叶即可。

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