CN112881692A - 一种用于结直肠癌及腺瘤早期筛查的蛋白定量检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于结直肠癌及腺瘤早期筛查的蛋白定量检测方法。本发明采用label‑free质谱的技术对结直肠癌及其腺瘤组织进行大规模蛋白组的鉴定及定量，筛选出32个蛋白标志物，特别是其中3个蛋白即TFR1、SAHH及HV307，在结直肠癌及腺瘤的组织、血浆不同样本类型中均检出一致，且与对照组具显著表达差异，ROC曲线AUC面积最高达1。本发明筛选的蛋白标志物在结直肠癌及其癌前病变腺瘤的早期筛查性能优于传统蛋白肿瘤标志物。本发明采用MRM质谱技术对测试血浆样本进行靶蛋白鉴定及定量，取代了传统ELISA技术，不依赖于抗体，基于物理的质谱信号，灵敏度高、重现性好、准确度高、通量高。

Description

一种用于结直肠癌及腺瘤早期筛查的蛋白定量检测方法
技术领域
本发明涉及生物医学领域，具体涉及一种用于结直肠癌及腺瘤早期筛查的蛋白定量检测方法。
背景技术
结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)又称大肠癌，是指发生在人体下消化道结肠或直肠部位的恶性肿瘤。早期症状不明显，随着癌肿的增大而表现排便习惯改变、便血、腹泻、腹泻与便秘交替、局部腹痛等症状，晚期则表现贫血、体重减轻等全身症状。2018年全球结直肠癌发病率居恶性肿瘤第3位，死亡率居第2位。结直肠癌的经典发病模式为肠腺上皮-腺瘤-腺癌-转移癌，是一个多因素、多阶段、多基因变异所致的病理过程和结果。研究指出，早期大肠癌治疗后的五年生存率可达90％，而晚期远端转移的肠癌治疗后5年生存率只有不到20％。每1％的腺瘤检出率，能够减少3％的结肠癌发病率和4％的死亡率。《中国早期结直肠癌筛查流程专家共识意见(2019，上海)》显示，目前我国85％以上结直肠癌发现即属晚期，我国CRC五年生存率低于40％，早期结直肠癌诊断率低于10％。世界卫生组织也明确指出，如果能早期诊断并及时治疗，90％～95％的肿瘤是可以治愈的。肠癌筛查不仅提高医学资源使用率，更重要地是提高肿瘤早诊率，减轻社会负担。
结直肠癌早期筛查方法可分为粪便检查和全部(或部分)结构性检查，其中粪便检查包括：愈创木脂法便隐血试验、免疫化学便隐血试验、粪便中DNA检测；全部结构性检查：乙状结肠镜检查、结肠镜检测、钡灌肠、CT结肠成像检查。目前在用的传统方法都有各自的弊端：肠镜成像对技术及经验依赖高，具有侵入性或放射性，接受度低，并且检测灵敏度低，仪器成本要求高。大便检测技术灵敏度低，易漏检。随着科技的发展，肿瘤分子标志物检测也进入到结直肠癌的检测方法中。
结直肠癌早期筛查核酸检测技术主要有利用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)、高通量测序等技术检测粪便或血浆样本类型的基因突变、甲基化、基因表达等特征，有单靶点和多靶点方案，也可与粪便隐血试验免疫化学法联合检测。但目前几乎没有用途为结直肠癌普通或高风险人群筛查的蛋白标志物及其相关产品或服务在临床或体检机构应用。
中心法则的标准流程是指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译的过程。DNA制造RNA，RNA制造蛋白质，蛋白质反过来协助前两项流程，并协助DNA自我复制。蛋白水平的异常表达可能参与了肿瘤的发生与发展。研究肠癌蛋白水平的表达、蛋白标志物的筛选以及临床样本的验证，有助于更好地理解结直肠癌的发生发展进程，在临床实践中也适合开发出非侵入性、高性能的蛋白标志物。
肿瘤标志物是指特征性存在于恶性肿瘤细胞，或由恶性肿瘤细胞异常产生的物质，或是宿主对肿瘤的刺激反应而产生的物质，并能反映肿瘤发生、发展，监测肿瘤对治疗反应的一类物质。肿瘤标志物存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物中，能够用免疫学、生物学及化学的方法检测到。临床上常用的肿瘤标志物通常为蛋白标志物，比如血清癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、CA-153、CA-125、CA-50等，癌胚抗原(CEA)等，来源主要有：1)肿瘤细胞的代谢产物，如：糖酵解产物、组织多肽抗原、核酸分解产物。2)分化紊乱的细胞基因产物，如：异位的ACTH片段，甲胎蛋白、癌胚抗原、胎儿同工酶。3)肿瘤细胞坏死崩解释放进入血液循环的物质，主要是某些细胞骨架蛋白成分，如细胞角质素片段抗原21-1(Cyfra21-1)，多胺类物质。4)肿瘤宿主细胞的细胞反应性产物。
蛋白标志物检测通常采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbentassay，简写ELISA)技术，将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测。可分为有夹心法、间接法、竞争法等，检测灵敏度通常较高。
传统的肿瘤标志物比如CEA，单个标记物的敏感性或特异性往往偏低，不能满足临床要求，理论上和实践上都提倡一次同时测定多种标志物，以提高敏感性和特异性。另外，某些肿瘤标志手段物在某些生理情况下或某些良性疾病也可以异常升高，需注意鉴别。漏检率高，假阳性率、假阴性率高，主要用于治疗、复发、预后监测，对早期癌症检测的准确度较低，不适合用于普通人群及高风险人群的癌症筛查。
ELISA技术的缺点是：高特异性的抗体获得难，周期长；如果没有相应的抗体，则无法进行检测；一个抗体仅可以检测一种目标蛋白，通量低；无法检测异构体、突变、修饰等蛋白变异形式；准确度因受影响，受抗体影响较大，抗体质量参差不齐，图像信号影响因素较多，不同实验室之间结果差异大，缺乏统一标准。
发明内容
本发明主要解决两个技术问题。一是通过蛋白质非标记定量技术(label-free)筛选到的蛋白标志物性能优于传统肿瘤标志物比如CEA，使得蛋白标志物有可能应用于结直肠癌及腺瘤的筛查。二是取代传统的ELISA技术，解决ELISA技术的缺点，采用MRM质谱检测技术，采集无创的血浆、粪便样本，对第一步筛选出的目标蛋白进行质谱鉴定及定量，应用于结直肠癌及其癌前病变腺瘤的筛查。MRM与目前蛋白定量的黄金标准ELISA相比，其优势是不依赖抗体。一次MRM分析可完成多个目标蛋白的定量检测，通量高；可检测异构体、突变、修饰等蛋白变异形式；基于稳定统一的质谱物理信号，定量结果更为可信公认。
第一方面，本发明要求保护如下32个目标蛋白中的全部或部分作为标记物在制备用于筛查结直肠癌和/或结直肠腺瘤的产品中的应用：KVD20、AL1A1、F13A、CFAD、IGJ、LV147、HV307、IGHA1、APOA2、AMBP、A1AG1、ALBU、TFR1、TRFE、TRFL、HEMO、KLKB1、A1BG、CO6A3、A1AG2、FLNA、CPN2、EST1、SAHH、RNAS4、ALS、AFAM、SEPP1、LUM、LYSC、FBLN3和ITLN1(各目标蛋白在UniProt数据库中的蛋白ID如表1所示，下同)。
第二方面，本发明要求保护物质A在制备用于筛查结直肠癌和/或结直肠腺瘤的产品中的应用；
所述物质A为用于检测如下32个目标蛋白中的全部或部分的物质：KVD20、AL1A1、F13A、CFAD、IGJ、LV147、HV307、IGHA1、APOA2、AMBP、A1AG1、ALBU、TFR1、TRFE、TRFL、HEMO、KLKB1、A1BG、CO6A3、A1AG2、FLNA、CPN2、EST1、SAHH、RNAS4、ALS、AFAM、SEPP1、LUM、LYSC、FBLN3和ITLN1。
在上述第一方面和第二方面中，所述32个目标蛋白中的全部或部分优选为如下3个目标蛋白中的全部或部分：TFR1、SAHH和HV307。
其中，所述物质A可为能够检测所述32个目标蛋白中的全部或部分的任何物质，如能够与目标蛋白相结合的抗体，或者能够用于检测目标蛋白的仪器设备，当然还可以含有配合仪器设备使用的所述目标蛋白的标准品。
在本发明中，所述物质A具体为三重四级杆质谱仪(如下第三方面中所述的三重四级杆质谱仪)。
第三方面，本发明要求保护一种三重四级杆质谱仪。
本发明要求保护的三重四级杆质谱仪，被配置为检测选自由以下(1)-(327)所示的MRM母子离子对组成的组A中的MRM母子离子对：
(1)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.1所示多肽片段的母离子的M/Z值为632.8302，+2y9子离子的M/Z值为1007.515636；
(2)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.1所示多肽片段的母离子的M/Z值为632.8302，+2y8子离子的M/Z值为920.483607；
(3)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.1所示多肽片段的母离子的M/Z值为632.8302，+2y7子离子的M/Z值为819.435929；
(4)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.1所示多肽片段的母离子的M/Z值为632.8302，+2y5子离子的M/Z值为576.335152；
(5)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.1所示多肽片段的母离子的M/Z值为632.8302，+2y4子离子的M/Z值为475.287474；
(6)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.2所示多肽片段的母离子的M/Z值为544.796，+2y9子离子的M/Z值为916.499926；
(7)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.2所示多肽片段的母离子的M/Z值为544.796，+2y8子离子的M/Z值为730.420613；
(8)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.2所示多肽片段的母离子的M/Z值为544.796，+2y7子离子的M/Z值为643.388585；
(9)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.2所示多肽片段的母离子的M/Z值为544.796，+2y5子离子的M/Z值为515.330007；
(10)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.2所示多肽片段的母离子的M/Z值为544.796，+2y4子离子的M/Z值为416.261593；
(11)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.2所示多肽片段的母离子的M/Z值为544.796，+2y3子离子的M/Z值为303.177529；
(12)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.3所示多肽片段的母离子的M/Z值为766.0659，+3y11子离子的M/Z值为1245.61233；
(13)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.3所示多肽片段的母离子的M/Z值为766.0659，+3y9子离子的M/Z值为999.475502；
(14)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.3所示多肽片段的母离子的M/Z值为766.0659，+3y8子离子的M/Z值为942.454039；
(15)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.3所示多肽片段的母离子的M/Z值为766.0659，+3y6子离子的M/Z值为717.342697；
(16)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.3所示多肽片段的母离子的M/Z值为766.0659，+3y5子离子的M/Z值为580.283785；
(17)源自蛋白A1BG的SEQIDNo.3所示多肽片段的母离子的M/Z值为766.0659，+3y4子离子的M/Z值为509.246672；
(18)源自蛋白KVD20的SEQIDNo.4所示多肽片段的母离子的M/Z值为519.2849，+2y7子离子的M/Z值为811.394458；
(19)源自蛋白KVD20的SEQIDNo.4所示多肽片段的母离子的M/Z值为519.2849，+2y6子离子的M/Z值为698.310394；
(20)源自蛋白KVD20的SEQIDNo.4所示多肽片段的母离子的M/Z值为519.2849，+2y5子离子的M/Z值为535.247065；
(21)源自蛋白KVD20的SEQIDNo.4所示多肽片段的母离子的M/Z值为519.2849，+2y4子离子的M/Z值为420.220122；
(22)源自蛋白KVD20的SEQIDNo.4所示多肽片段的母离子的M/Z值为519.2849，+2b2子离子的M/Z值为227.175404；
(23)源自蛋白AL1A1的SEQIDNo.5所示多肽片段的母离子的M/Z值为595.3093，+2y8子离子的M/Z值为990.515576；
(24)源自蛋白AL1A1的SEQIDNo.5所示多肽片段的母离子的M/Z值为595.3093，+2y7子离子的M/Z值为843.447162；
(25)源自蛋白AL1A1的SEQIDNo.5所示多肽片段的母离子的M/Z值为595.3093，+2y6子离子的M/Z值为715.388585；
(26)源自蛋白AL1A1的SEQIDNo.5所示多肽片段的母离子的M/Z值为595.3093，+2y5子离子的M/Z值为602.304521；
(27)源自蛋白AL1A1的SEQIDNo.5所示多肽片段的母离子的M/Z值为595.3093，+2y3+2子离子的M/Z值为229.629152；
(28)源自蛋白AL1A1的SEQIDNo.5所示多肽片段的母离子的M/Z值为595.3093，+2b3子离子的M/Z值为347.171381；
(29)源自蛋白IGJ的SEQIDNo.6所示多肽片段的母离子的M/Z值为828.9187，+2y10子离子的M/Z值为1062.582987；
(30)源自蛋白IGJ的SEQIDNo.6所示多肽片段的母离子的M/Z值为828.9187，+2y9子离子的M/Z值为963.514573；
(31)源自蛋白IGJ的SEQIDNo.6所示多肽片段的母离子的M/Z值为828.9187，+2y6子离子的M/Z值为654.309331；
(32)源自蛋白IGJ的SEQIDNo.6所示多肽片段的母离子的M/Z值为828.9187，+2y5子离子的M/Z值为491.246003；
(33)源自蛋白IGJ的SEQIDNo.6所示多肽片段的母离子的M/Z值为828.9187，+2b2子离子的M/Z值为324.101253；
(34)源自蛋白IGJ的SEQIDNo.6所示多肽片段的母离子的M/Z值为828.9187，+2b3子离子的M/Z值为425.148932；
(35)源自蛋白|LV147的SEQIDNo.7所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.3357，+2y10子离子的M/Z值为974.56292；
(36)源自蛋白|LV147的SEQIDNo.7所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.3357，+2y9子离子的M/Z值为887.530892；
(37)源自蛋白|LV147的SEQIDNo.7所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.3357，+2y8子离子的M/Z值为816.493778；
(38)源自蛋白|LV147的SEQIDNo.7所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.3357，+2y7子离子的M/Z值为729.46175；
(39)源自蛋白|LV147的SEQIDNo.7所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.3357，+2y6子离子的M/Z值为616.377686；
(40)源自蛋白|LV147的SEQIDNo.7所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.3357，+2y5子离子的M/Z值为545.340572；
(41)源自蛋白HV307的SEQIDNo.8所示多肽片段的母离子的M/Z值为515.29，+2y7子离子的M/Z值为859.467229；
(42)源自蛋白HV307的SEQIDNo.8所示多肽片段的母离子的M/Z值为515.29，+2y6子离子的M/Z值为730.424636；
(43)源自蛋白HV307的SEQIDNo.8所示多肽片段的母离子的M/Z值为515.29，+2y5子离子的M/Z值为544.345323；
(44)源自蛋白HV307的SEQIDNo.8所示多肽片段的母离子的M/Z值为515.29，+2y4子离子的M/Z值为445.276909；
(45)源自蛋白HV307的SEQIDNo.8所示多肽片段的母离子的M/Z值为515.29，+2y3子离子的M/Z值为374.239795；
(46)源自蛋白HV307的SEQIDNo.8所示多肽片段的母离子的M/Z值为515.29，+2y2子离子的M/Z值为260.196868；
(47)源自蛋白A1AG2的SEQIDNo.9所示多肽片段的母离子的M/Z值为617.8564，+2y8子离子的M/Z值为968.603997；
(48)源自蛋白A1AG2的SEQIDNo.9所示多肽片段的母离子的M/Z值为617.8564，+2y7子离子的M/Z值为869.535583；
(49)源自蛋白A1AG2的SEQIDNo.9所示多肽片段的母离子的M/Z值为617.8564，+2y6子离子的M/Z值为798.49847；
(50)源自蛋白A1AG2的SEQIDNo.9所示多肽片段的母离子的M/Z值为617.8564，+2y5子离子的M/Z值为661.439558；
(51)源自蛋白A1AG2的SEQIDNo.9所示多肽片段的母离子的M/Z值为617.8564，+2b2子离子的M/Z值为267.108781；
(52)源自蛋白A1AG2的SEQIDNo.9所示多肽片段的母离子的M/Z值为617.8564，+2b3子离子的M/Z值为366.177195；
(53)源自蛋白A1AG2的SEQIDNo.10所示多肽片段的母离子的M/Z值为878.9307，+2y9子离子的M/Z值为1052.525866；
(54)源自蛋白A1AG2的SEQIDNo.10所示多肽片段的母离子的M/Z值为878.9307，+2y8子离子的M/Z值为889.462538；
(55)源自蛋白A1AG2的SEQIDNo.10所示多肽片段的母离子的M/Z值为878.9307，+2y6子离子的M/Z值为703.398481；
(56)源自蛋白A1AG2的SEQIDNo.10所示多肽片段的母离子的M/Z值为878.9307，+2y5子离子的M/Z值为575.303518；
(57)源自蛋白A1AG2的SEQIDNo.10所示多肽片段的母离子的M/Z值为878.9307，+2b2子离子的M/Z值为301.129516；
(58)源自蛋白A1AG2的SEQIDNo.10所示多肽片段的母离子的M/Z值为878.9307，+2b3子离子的M/Z值为358.15098；
(59)源自蛋白FLNA的SEQIDNo.11所示多肽片段的母离子的M/Z值为717.8648，+2y10子离子的M/Z值为1136.558229；
(60)源自蛋白FLNA的SEQIDNo.11所示多肽片段的母离子的M/Z值为717.8648，+2y8子离子的M/Z值为911.446888；
(61)源自蛋白FLNA的SEQIDNo.11所示多肽片段的母离子的M/Z值为717.8648，+2y4子离子的M/Z值为450.219454；
(62)源自蛋白FLNA的SEQIDNo.11所示多肽片段的母离子的M/Z值为717.8648，+2y3子离子的M/Z值为335.192511；
(63)源自蛋白FLNA的SEQIDNo.11所示多肽片段的母离子的M/Z值为717.8648，+2y10+2子离子的M/Z值为568.782753；
(64)源自蛋白FLNA的SEQIDNo.11所示多肽片段的母离子的M/Z值为717.8648，+2b3子离子的M/Z值为299.171381；
(65)源自蛋白FLNA的SEQIDNo.12所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.6298，+3y9子离子的M/Z值为977.493838；
(66)源自蛋白FLNA的SEQIDNo.12所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.6298，+3y6子离子的M/Z值为680.361367；
(67)源自蛋白FLNA的SEQIDNo.12所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.6298，+3y5子离子的M/Z值为533.292953；
(68)源自蛋白FLNA的SEQIDNo.12所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.6298，+3y2子离子的M/Z值为218.149918；
(69)源自蛋白FLNA的SEQIDNo.12所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.6298，+3y13+2子离子的M/Z值为695.372266；
(70)源自蛋白EST1的SEQIDNo.13所示多肽片段的母离子的M/Z值为796.4074，+2y10子离子的M/Z值为1001.537434；
(71)源自蛋白EST1的SEQIDNo.13所示多肽片段的母离子的M/Z值为796.4074，+2y9子离子的M/Z值为888.45337；
(72)源自蛋白EST1的SEQIDNo.13所示多肽片段的母离子的M/Z值为796.4074，+2y4子离子的M/Z值为417.245609；
(73)源自蛋白EST1的SEQIDNo.13所示多肽片段的母离子的M/Z值为796.4074，+2y3子离子的M/Z值为346.208495；
(74)源自蛋白EST1的SEQIDNo.13所示多肽片段的母离子的M/Z值为796.4074，+2y9+2子离子的M/Z值为444.730323；
(75)源自蛋白EST1的SEQIDNo.13所示多肽片段的母离子的M/Z值为796.4074，+2b3子离子的M/Z值为350.134661；
(76)源自蛋白SAHH的SEQIDNo.14所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.8113，+2y7子离子的M/Z值为695.335881；
(77)源自蛋白SAHH的SEQIDNo.14所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.8113，+2y3子离子的M/Z值为303.202681；
(78)源自蛋白SAHH的SEQIDNo.14所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.8113，+2y2子离子的M/Z值为204.134267；
(79)源自蛋白SAHH的SEQIDNo.14所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.8113，+2b3子离子的M/Z值为270.181218；
(80)源自蛋白SAHH的SEQIDNo.15所示多肽片段的母离子的M/Z值为628.8459，+2y10子离子的M/Z值为1060.563314；
(81)源自蛋白SAHH的SEQIDNo.15所示多肽片段的母离子的M/Z值为628.8459，+2y9子离子的M/Z值为989.526201；
(82)源自蛋白SAHH的SEQIDNo.15所示多肽片段的母离子的M/Z值为628.8459，+2y2子离子的M/Z值为248.160482；
(83)源自蛋白SAHH的SEQIDNo.15所示多肽片段的母离子的M/Z值为628.8459，+2y11+2子离子的M/Z值为579.311677；
(84)源自蛋白RNAS4的SEQIDNo.16所示多肽片段的母离子的M/Z值为656.3052，+2y9子离子的M/Z值为1111.487055；
(85)源自蛋白RNAS4的SEQIDNo.16所示多肽片段的母离子的M/Z值为656.3052，+2y8子离子的M/Z值为951.456407；
(86)源自蛋白RNAS4的SEQIDNo.16所示多肽片段的母离子的M/Z值为656.3052，+2y7子离子的M/Z值为864.424378；
(87)源自蛋白RNAS4的SEQIDNo.16所示多肽片段的母离子的M/Z值为656.3052，+2y6子离子的M/Z值为763.3767；
(88)源自蛋白RNAS4的SEQIDNo.16所示多肽片段的母离子的M/Z值为656.3052，+2y2子离子的M/Z值为307.143452；
(89)源自蛋白RNAS4的SEQIDNo.16所示多肽片段的母离子的M/Z值为656.3052，+2b2子离子的M/Z值为201.123368；
(90)源自蛋白AFAM的SEQIDNo.17所示多肽片段的母离子的M/Z值为516.808，+2y7子离子的M/Z值为848.48763；
(91)源自蛋白AFAM的SEQIDNo.17所示多肽片段的母离子的M/Z值为516.808，+2y6子离子的M/Z值为751.434866；
(92)源自蛋白AFAM的SEQIDNo.17所示多肽片段的母离子的M/Z值为516.808，+2y5子离子的M/Z值为652.366452；
(93)源自蛋白AFAM的SEQIDNo.17所示多肽片段的母离子的M/Z值为516.808，+2y2子离子的M/Z值为260.196868；
(94)源自蛋白AFAM的SEQIDNo.17所示多肽片段的母离子的M/Z值为516.808，+2y7+2子离子的M/Z值为424.747453；
(95)源自蛋白LYSC的SEQIDNo.18所示多肽片段的母离子的M/Z值为700.8439，+2y8子离子的M/Z值为934.510491；
(96)源自蛋白LYSC的SEQIDNo.18所示多肽片段的母离子的M/Z值为700.8439，+2y7子离子的M/Z值为877.489027；
(97)源自蛋白LYSC的SEQIDNo.18所示多肽片段的母离子的M/Z值为700.8439，+2y6子离子的M/Z值为764.404963；
(98)源自蛋白LYSC的SEQIDNo.18所示多肽片段的母离子的M/Z值为700.8439，+2y5子离子的M/Z值为617.336549；
(99)源自蛋白LYSC的SEQIDNo.18所示多肽片段的母离子的M/Z值为700.8439，+2b3子离子的M/Z值为304.113926；
(100)源自蛋白CO6A3的SEQIDNo.19所示多肽片段的母离子的M/Z值为723.4073，+3y9子离子的M/Z值为975.562192；
(101)源自蛋白CO6A3的SEQIDNo.19所示多肽片段的母离子的M/Z值为723.4073，+3y7子离子的M/Z值为847.503615；
(102)源自蛋白CO6A3的SEQIDNo.19所示多肽片段的母离子的M/Z值为723.4073，+3y6子离子的M/Z值为776.466501；
(103)源自蛋白CO6A3的SEQIDNo.19所示多肽片段的母离子的M/Z值为723.4073，+3y5子离子的M/Z值为663.382437；
(104)源自蛋白CO6A3的SEQIDNo.19所示多肽片段的母离子的M/Z值为723.4073，+3b3子离子的M/Z值为343.197596；
(105)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.20所示多肽片段的母离子的M/Z值为801.4359，+2y11子离子的M/Z值为1102.625521；
(106)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.20所示多肽片段的母离子的M/Z值为801.4359，+2y10子离子的M/Z值为989.541457；
(107)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.20所示多肽片段的母离子的M/Z值为801.4359，+2y9子离子的M/Z值为902.509428；
(108)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.20所示多肽片段的母离子的M/Z值为801.4359，+2y7子离子的M/Z值为732.403901；
(109)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.20所示多肽片段的母离子的M/Z值为801.4359，+2y3子离子的M/Z值为351.202681；
(110)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.21所示多肽片段的母离子的M/Z值为451.7815，+2y7子离子的M/Z值为789.471646；
(111)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.21所示多肽片段的母离子的M/Z值为451.7815，+2y6子离子的M/Z值为660.429053；
(112)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.21所示多肽片段的母离子的M/Z值为451.7815，+2y5子离子的M/Z值为547.344989；
(113)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.21所示多肽片段的母离子的M/Z值为451.7815，+2y4子离子的M/Z值为434.260925；
(114)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.21所示多肽片段的母离子的M/Z值为451.7815，+2y2子离子的M/Z值为234.144832；
(115)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.21所示多肽片段的母离子的M/Z值为451.7815，+2b2子离子的M/Z值为243.133933；
(116)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.22所示多肽片段的母离子的M/Z值为829.8941，+2y7子离子的M/Z值为862.394124；
(117)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.22所示多肽片段的母离子的M/Z值为829.8941，+2y6子离子的M/Z值为761.346445；
(118)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.22所示多肽片段的母离子的M/Z值为829.8941，+2y5子离子的M/Z值为575.267132；
(119)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.22所示多肽片段的母离子的M/Z值为829.8941，+2b2子离子的M/Z值为253.093131；
(120)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.22所示多肽片段的母离子的M/Z值为829.8941，+2b3子离子的M/Z值为366.177195；
(121)源自蛋白CPN2的SEQIDNo.22所示多肽片段的母离子的M/Z值为829.8941，+2b5子离子的M/Z值为570.267073；
(122)源自蛋白ALS的SEQIDNo.23所示多肽片段的母离子的M/Z值为727.9401，+2y12子离子的M/Z值为1114.661906；
(123)源自蛋白ALS的SEQIDNo.23所示多肽片段的母离子的M/Z值为727.9401，+2y10子离子的M/Z值为972.587679；
(124)源自蛋白ALS的SEQIDNo.23所示多肽片段的母离子的M/Z值为727.9401，+2y9子离子的M/Z值为873.519265；
(125)源自蛋白ALS的SEQIDNo.23所示多肽片段的母离子的M/Z值为727.9401，+2y8子离子的M/Z值为802.482151；
(126)源自蛋白ALS的SEQIDNo.23所示多肽片段的母离子的M/Z值为727.9401，+2b2子离子的M/Z值为228.134267；
(127)源自蛋白ALS的SEQIDNo.23所示多肽片段的母离子的M/Z值为727.9401，+2b3子离子的M/Z值为341.218332；
(128)源自蛋白ALS的SEQIDNo.24所示多肽片段的母离子的M/Z值为835.9774，+2y11子离子的M/Z值为1217.652464；
(129)源自蛋白ALS的SEQIDNo.24所示多肽片段的母离子的M/Z值为835.9774，+2y10子离子的M/Z值为1088.609871；
(130)源自蛋白ALS的SEQIDNo.24所示多肽片段的母离子的M/Z值为835.9774，+2y9子离子的M/Z值为973.582928；
(131)源自蛋白ALS的SEQIDNo.24所示多肽片段的母离子的M/Z值为835.9774，+2y8子离子的M/Z值为872.535249；
(132)源自蛋白ALS的SEQIDNo.24所示多肽片段的母离子的M/Z值为835.9774，+2y7子离子的M/Z值为725.466835；
(133)源自蛋白ALS的SEQIDNo.24所示多肽片段的母离子的M/Z值为835.9774，+2b3子离子的M/Z值为228.134267；
(134)源自蛋白SEPP1的SEQIDNo.25所示多肽片段的母离子的M/Z值为528.7535，+2y6子离子的M/Z值为826.445765；
(135)源自蛋白SEPP1的SEQIDNo.25所示多肽片段的母离子的M/Z值为528.7535，+2y5子离子的M/Z值为679.377351；
(136)源自蛋白SEPP1的SEQIDNo.25所示多肽片段的母离子的M/Z值为528.7535，+2y4子离子的M/Z值为566.293287；
(137)源自蛋白SEPP1的SEQIDNo.25所示多肽片段的母离子的M/Z值为528.7535，+2y3子离子的M/Z值为453.209223；
(138)源自蛋白SEPP1的SEQIDNo.25所示多肽片段的母离子的M/Z值为528.7535，+2b2子离子的M/Z值为231.061162；
(139)源自蛋白SEPP1的SEQIDNo.25所示多肽片段的母离子的M/Z值为528.7535，+2b3子离子的M/Z值为378.129576；
(140)源自蛋白SEPP1的SEQIDNo.26所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.7931，+2y9子离子的M/Z值为985.4949；
(141)源自蛋白SEPP1的SEQIDNo.26所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.7931，+2y8子离子的M/Z值为888.442137；
(142)源自蛋白SEPP1的SEQIDNo.26所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.7931，+2y7子离子的M/Z值为787.394458；
(143)源自蛋白SEPP1的SEQIDNo.26所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.7931，+2y6子离子的M/Z值为672.367515；
(144)源自蛋白SEPP1的SEQIDNo.26所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.7931，+2y4子离子的M/Z值为456.292893；
(145)源自蛋白SEPP1的SEQIDNo.26所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.7931，+2y3子离子的M/Z值为343.208829；
(146)源自蛋白LUM的SEQIDNo.27所示多肽片段的母离子的M/Z值为834.9332，+2y10子离子的M/Z值为1176.637148；
(147)源自蛋白LUM的SEQIDNo.27所示多肽片段的母离子的M/Z值为834.9332，+2y9子离子的M/Z值为1063.553084；
(148)源自蛋白LUM的SEQIDNo.27所示多肽片段的母离子的M/Z值为834.9332，+2y8子离子的M/Z值为948.526141；
(149)源自蛋白LUM的SEQIDNo.27所示多肽片段的母离子的M/Z值为834.9332，+2y6子离子的M/Z值为748.410049；
(150)源自蛋白LUM的SEQIDNo.27所示多肽片段的母离子的M/Z值为834.9332，+2b2子离子的M/Z值为201.123368；
(151)源自蛋白LUM的SEQIDNo.27所示多肽片段的母离子的M/Z值为834.9332，+2b3子离子的M/Z值为330.165962；
(152)源自蛋白LUM的SEQIDNo.28所示多肽片段的母离子的M/Z值为979.0539，+2y6子离子的M/Z值为766.372994；
(153)源自蛋白LUM的SEQIDNo.28所示多肽片段的母离子的M/Z值为979.0539，+2y5子离子的M/Z值为603.309666；
(154)源自蛋白LUM的SEQIDNo.28所示多肽片段的母离子的M/Z值为979.0539，+2y4子离子的M/Z值为490.225602；
(155)源自蛋白LUM的SEQIDNo.28所示多肽片段的母离子的M/Z值为979.0539，+2y7+2子离子的M/Z值为440.232167；
(156)源自蛋白LUM的SEQIDNo.28所示多肽片段的母离子的M/Z值为979.0539，+2b4子离子的M/Z值为355.197596；
(157)源自蛋白LUM的SEQIDNo.28所示多肽片段的母离子的M/Z值为979.0539，+2b5子离子的M/Z值为468.28166；
(158)源自蛋白FBLN3的SEQIDNo.29所示多肽片段的母离子的M/Z值为538.803，+2y7子离子的M/Z值为834.47198；
(159)源自蛋白FBLN3的SEQIDNo.29所示多肽片段的母离子的M/Z值为538.803，+2y6子离子的M/Z值为737.419216；
(160)源自蛋白FBLN3的SEQIDNo.29所示多肽片段的母离子的M/Z值为538.803，+2y2子离子的M/Z值为310.176132；
(161)源自蛋白FBLN3的SEQIDNo.29所示多肽片段的母离子的M/Z值为538.803，+2y8+2子离子的M/Z值为474.28166；
(162)源自蛋白FBLN3的SEQIDNo.29所示多肽片段的母离子的M/Z值为538.803，+2b2子离子的M/Z值为243.133933；
(163)源自蛋白FBLN3的SEQIDNo.30所示多肽片段的母离子的M/Z值为867.45，+3y9子离子的M/Z值为1099.553084；
(164)源自蛋白FBLN3的SEQIDNo.30所示多肽片段的母离子的M/Z值为867.45，+3y7子离子的M/Z值为865.452642；
(165)源自蛋白FBLN3的SEQIDNo.30所示多肽片段的母离子的M/Z值为867.45，+3y5子离子的M/Z值为650.362036；
(166)源自蛋白FBLN3的SEQIDNo.30所示多肽片段的母离子的M/Z值为867.45，+3y4子离子的M/Z值为537.277972；
(167)源自蛋白ITLN1的SEQIDNo.31所示多肽片段的母离子的M/Z值为718.3724，+3y8子离子的M/Z值为982.535643；
(168)源自蛋白ITLN1的SEQIDNo.31所示多肽片段的母离子的M/Z值为718.3724，+3y6子离子的M/Z值为755.408652；
(169)源自蛋白ITLN1的SEQIDNo.31所示多肽片段的母离子的M/Z值为718.3724，+3y5子离子的M/Z值为608.340238；
(170)源自蛋白ITLN1的SEQIDNo.31所示多肽片段的母离子的M/Z值为718.3724，+3y3子离子的M/Z值为438.23471；
(171)源自蛋白ITLN1的SEQIDNo.31所示多肽片段的母离子的M/Z值为718.3724，+3b2子离子的M/Z值为217.081898；
(172)源自蛋白ITLN1的SEQIDNo.32所示多肽片段的母离子的M/Z值为601.3037，+2y8子离子的M/Z值为925.489027；
(173)源自蛋白ITLN1的SEQIDNo.32所示多肽片段的母离子的M/Z值为601.3037，+2y7子离子的M/Z值为824.441349；
(174)源自蛋白ITLN1的SEQIDNo.32所示多肽片段的母离子的M/Z值为601.3037，+2y6子离子的M/Z值为753.404235；
(175)源自蛋白ITLN1的SEQIDNo.32所示多肽片段的母离子的M/Z值为601.3037，+2y5子离子的M/Z值为696.382771；
(176)源自蛋白ITLN1的SEQIDNo.32所示多肽片段的母离子的M/Z值为601.3037，+2y4子离子的M/Z值为549.314357；
(177)源自蛋白ITLN1的SEQIDNo.32所示多肽片段的母离子的M/Z值为601.3037，+2y3子离子的M/Z值为450.245943；
(178)源自蛋白F13A的SEQIDNo.33所示多肽片段的母离子的M/Z值为649.0229，+3y9子离子的M/Z值为1044.583656；
(179)源自蛋白F13A的SEQIDNo.33所示多肽片段的母离子的M/Z值为649.0229，+3y8子离子的M/Z值为930.540728；
(180)源自蛋白F13A的SEQIDNo.33所示多肽片段的母离子的M/Z值为649.0229，+3y7子离子的M/Z值为831.472314；
(181)源自蛋白F13A的SEQIDNo.33所示多肽片段的母离子的M/Z值为649.0229，+3y6子离子的M/Z值为730.424636；
(182)源自蛋白F13A的SEQIDNo.33所示多肽片段的母离子的M/Z值为649.0229，+3y4子离子的M/Z值为544.324194；
(183)源自蛋白F13A的SEQIDNo.33所示多肽片段的母离子的M/Z值为649.0229，+3b3子离子的M/Z值为271.140081；
(184)源自蛋白F13A的SEQIDNo.34所示多肽片段的母离子的M/Z值为844.4669，+2y11子离子的M/Z值为1156.657215；
(185)源自蛋白F13A的SEQIDNo.34所示多肽片段的母离子的M/Z值为844.4669，+2y10子离子的M/Z值为1057.588801；
(186)源自蛋白F13A的SEQIDNo.34所示多肽片段的母离子的M/Z值为844.4669，+2y8子离子的M/Z值为847.451973；
(187)源自蛋白F13A的SEQIDNo.34所示多肽片段的母离子的M/Z值为844.4669，+2y7子离子的M/Z值为748.383559；
(188)源自蛋白F13A的SEQIDNo.34所示多肽片段的母离子的M/Z值为844.4669，+2b3子离子的M/Z值为322.139747；
(189)源自蛋白F13A的SEQIDNo.34所示多肽片段的母离子的M/Z值为844.4669，+2b4子离子的M/Z值为435.223811；
(190)源自蛋白F13A的SEQIDNo.35所示多肽片段的母离子的M/Z值为663.9158，+2y8子离子的M/Z值为926.592095；
(191)源自蛋白F13A的SEQIDNo.35所示多肽片段的母离子的M/Z值为663.9158，+2y7子离子的M/Z值为825.544417；
(192)源自蛋白F13A的SEQIDNo.35所示多肽片段的母离子的M/Z值为663.9158，+2y6子离子的M/Z值为712.460353；
(193)源自蛋白F13A的SEQIDNo.35所示多肽片段的母离子的M/Z值为663.9158，+2b3子离子的M/Z值为288.155397；
(194)源自蛋白CFAD的SEQIDNo.36所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.1，+4y7子离子的M/Z值为830.498195；
(195)源自蛋白CFAD的SEQIDNo.36所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.1，+4y6子离子的M/Z值为717.414131；
(196)源自蛋白CFAD的SEQIDNo.36所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.1，+4y4子离子的M/Z值为476.271489；
(197)源自蛋白CFAD的SEQIDNo.36所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.1，+4y3子离子的M/Z值为363.187425；
(198)源自蛋白CFAD的SEQIDNo.36所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.1，+4b8子离子的M/Z值为832.394792；
(199)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.37所示多肽片段的母离子的M/Z值为770.8675，+2y10子离子的M/Z值为1111.541851；
(200)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.37所示多肽片段的母离子的M/Z值为770.8675，+2y9子离子的M/Z值为1010.494172；
(201)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.37所示多肽片段的母离子的M/Z值为770.8675，+2y8子离子的M/Z值为863.425758；
(202)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.37所示多肽片段的母离子的M/Z值为770.8675，+2y7子离子的M/Z值为762.37808；
(203)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.37所示多肽片段的母离子的M/Z值为770.8675，+2y6子离子的M/Z值为576.298767；
(204)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.37所示多肽片段的母离子的M/Z值为770.8675，+2y5子离子的M/Z值为475.251088；
(205)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.38所示多肽片段的母离子的M/Z值为865.0471，+3y10子离子的M/Z值为1155.500003；
(206)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.38所示多肽片段的母离子的M/Z值为865.0471，+3y6子离子的M/Z值为738.368184；
(207)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.38所示多肽片段的母离子的M/Z值为865.0471，+3y4子离子的M/Z值为455.236107；
(208)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.38所示多肽片段的母离子的M/Z值为865.0471，+3y3子离子的M/Z值为341.193179；
(209)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.38所示多肽片段的母离子的M/Z值为865.0471，+3b2子离子的M/Z值为229.118283；
(210)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.38所示多肽片段的母离子的M/Z值为865.0471，+3b3子离子的M/Z值为389.148932；
(211)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.39所示多肽片段的母离子的M/Z值为918.4785，+2y10子离子的M/Z值为1108.636085；
(212)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.39所示多肽片段的母离子的M/Z值为918.4785，+2y9子离子的M/Z值为1007.588407；
(213)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.39所示多肽片段的母离子的M/Z值为918.4785，+2y7子离子的M/Z值为759.472314；
(214)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.39所示多肽片段的母离子的M/Z值为918.4785，+2y6子离子的M/Z值为688.435201；
(215)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.39所示多肽片段的母离子的M/Z值为918.4785，+2y5子离子的M/Z值为589.366787；
(216)源自蛋白IGHA1的SEQIDNo.39所示多肽片段的母离子的M/Z值为918.4785，+2y5+2子离子的M/Z值为295.187031；
(217)源自蛋白APOA2的SEQIDNo.40所示多肽片段的母离子的M/Z值为784.0351，+3y8子离子的M/Z值为911.446888；
(218)源自蛋白APOA2的SEQIDNo.40所示多肽片段的母离子的M/Z值为784.0351，+3y7子离子的M/Z值为783.38831；
(219)源自蛋白APOA2的SEQIDNo.40所示多肽片段的母离子的M/Z值为784.0351，+3y5子离子的M/Z值为583.272218；
(220)源自蛋白APOA2的SEQIDNo.40所示多肽片段的母离子的M/Z值为784.0351，+3y3子离子的M/Z值为367.197596；
(221)源自蛋白APOA2的SEQIDNo.40所示多肽片段的母离子的M/Z值为784.0351，+3b7子离子的M/Z值为815.360381；
(222)源自蛋白APOA2的SEQIDNo.41所示多肽片段的母离子的M/Z值为486.7535，+2y7子离子的M/Z值为788.414859；
(223)源自蛋白APOA2的SEQIDNo.41所示多肽片段的母离子的M/Z值为486.7535，+2y6子离子的M/Z值为659.372266；
(224)源自蛋白APOA2的SEQIDNo.41所示多肽片段的母离子的M/Z值为486.7535，+2y5子离子的M/Z值为546.288202；
(225)源自蛋白APOA2的SEQIDNo.41所示多肽片段的母离子的M/Z值为486.7535，+2y2子离子的M/Z值为218.149918；
(226)源自蛋白APOA2的SEQIDNo.41所示多肽片段的母离子的M/Z值为486.7535，+2b3子离子的M/Z值为314.134661；
(227)源自蛋白AMBP的SEQIDNo.42所示多肽片段的母离子的M/Z值为511.2693，+2y6子离子的M/Z值为791.441014；
(228)源自蛋白AMBP的SEQIDNo.42所示多肽片段的母离子的M/Z值为511.2693，+2y5子离子的M/Z值为678.35695；
(229)源自蛋白AMBP的SEQIDNo.42所示多肽片段的母离子的M/Z值为511.2693，+2y4子离子的M/Z值为565.272886；
(230)源自蛋白AMBP的SEQIDNo.42所示多肽片段的母离子的M/Z值为511.2693，+2y3子离子的M/Z值为437.214309；
(231)源自蛋白AMBP的SEQIDNo.42所示多肽片段的母离子的M/Z值为511.2693，+2y2子离子的M/Z值为322.187366；
(232)源自蛋白AMBP的SEQIDNo.42所示多肽片段的母离子的M/Z值为511.2693，+2b2子离子的M/Z值为231.097548；
(233)源自蛋白AMBP的SEQIDNo.43所示多肽片段的母离子的M/Z值为960.4802，+2y9子离子的M/Z值为1063.614622；
(234)源自蛋白AMBP的SEQIDNo.43所示多肽片段的母离子的M/Z值为960.4802，+2y8子离子的M/Z值为934.572029；
(235)源自蛋白AMBP的SEQIDNo.43所示多肽片段的母离子的M/Z值为960.4802，+2y6子离子的M/Z值为708.476672；
(236)源自蛋白AMBP的SEQIDNo.43所示多肽片段的母离子的M/Z值为960.4802，+2y2子离子的M/Z值为272.171716；
(237)源自蛋白AMBP的SEQIDNo.43所示多肽片段的母离子的M/Z值为960.4802，+2y6+2子离子的M/Z值为354.741974；
(238)源自蛋白AMBP的SEQIDNo.43所示多肽片段的母离子的M/Z值为960.4802，+2b3子离子的M/Z值为347.101981；
(239)源自蛋白A1AG1的SEQIDNo.44所示多肽片段的母离子的M/Z值为584.9897，+3y8子离子的M/Z值为982.619647；
(240)源自蛋白A1AG1的SEQIDNo.44所示多肽片段的母离子的M/Z值为584.9897，+3y7子离子的M/Z值为835.551233；
(241)源自蛋白A1AG1的SEQIDNo.44所示多肽片段的母离子的M/Z值为584.9897，+3y6子离子的M/Z值为764.51412；
(242)源自蛋白A1AG1的SEQIDNo.44所示多肽片段的母离子的M/Z值为584.9897，+3y5子离子的M/Z值为627.455208；
(243)源自蛋白A1AG1的SEQIDNo.44所示多肽片段的母离子的M/Z值为584.9897，+3y4子离子的M/Z值为514.371144；
(244)源自蛋白A1AG1的SEQIDNo.44所示多肽片段的母离子的M/Z值为584.9897，+3b2子离子的M/Z值为263.139019；
(245)源自蛋白A1AG1的SEQIDNo.45所示多肽片段的母离子的M/Z值为570.2895，+3y9子离子的M/Z值为1052.525866；
(246)源自蛋白A1AG1的SEQIDNo.45所示多肽片段的母离子的M/Z值为570.2895，+3y5子离子的M/Z值为575.303518；
(247)源自蛋白A1AG1的SEQIDNo.45所示多肽片段的母离子的M/Z值为570.2895，+3y13+2子离子的M/Z值为704.869556；
(248)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.46所示多肽片段的母离子的M/Z值为830.7665，+3y9子离子的M/Z值为1159.52007；
(249)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.46所示多肽片段的母离子的M/Z值为830.7665，+3y8子离子的M/Z值为1031.461492；
(250)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.46所示多肽片段的母离子的M/Z值为830.7665，+3y7子离子的M/Z值为871.430844；
(251)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.46所示多肽片段的母离子的M/Z值为830.7665，+3y3子离子的M/Z值为383.24013；
(252)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.46所示多肽片段的母离子的M/Z值为830.7665，+3b3子离子的M/Z值为284.196868；
(253)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.46所示多肽片段的母离子的M/Z值为830.7665，+3b4子离子的M/Z值为397.280932；
(254)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.47所示多肽片段的母离子的M/Z值为575.3111，+2y8子离子的M/Z值为937.462538；
(255)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.47所示多肽片段的母离子的M/Z值为575.3111，+2y7子离子的M/Z值为823.41961；
(256)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.47所示多肽片段的母离子的M/Z值为575.3111，+2y6子离子的M/Z值为694.377017；
(257)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.47所示多肽片段的母离子的M/Z值为575.3111，+2y5子离子的M/Z值为595.308603；
(258)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.47所示多肽片段的母离子的M/Z值为575.3111，+2y3子离子的M/Z值为365.218332；
(259)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.47所示多肽片段的母离子的M/Z值为575.3111，+2b2子离子的M/Z值为213.159754；
(260)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.48所示多肽片段的母离子的M/Z值为686.287，+2y10子离子的M/Z值为1229.492535；
(261)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.48所示多肽片段的母离子的M/Z值为686.287，+2y9子离子的M/Z值为1082.424121；
(262)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.48所示多肽片段的母离子的M/Z值为686.287，+2y8子离子的M/Z值为981.376442；
(263)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.48所示多肽片段的母离子的M/Z值为686.287，+2y7子离子的M/Z值为852.333849；
(264)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.48所示多肽片段的母离子的M/Z值为686.287，+2y6子离子的M/Z值为692.3032；
(265)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.48所示多肽片段的母离子的M/Z值为686.287，+2y3子离子的M/Z值为333.176861；
(266)源自蛋白TFR1的SEQIDNo.49所示多肽片段的母离子的M/Z值为602.8197，+2y9子离子的M/Z值为1091.547999；
(267)源自蛋白TFR1的SEQIDNo.49所示多肽片段的母离子的M/Z值为602.8197，+2y8子离子的M/Z值为978.463935；
(268)源自蛋白TFR1的SEQIDNo.49所示多肽片段的母离子的M/Z值为602.8197，+2y7子离子的M/Z值为864.421007；
(269)源自蛋白TFR1的SEQIDNo.49所示多肽片段的母离子的M/Z值为602.8197，+2y6子离子的M/Z值为735.378414；
(270)源自蛋白TFR1的SEQIDNo.49所示多肽片段的母离子的M/Z值为602.8197，+2y5子离子的M/Z值为621.335487；
(271)源自蛋白TFR1的SEQIDNo.50所示多肽片段的母离子的M/Z值为886.4669，+2y11子离子的M/Z值为1184.558229；
(272)源自蛋白TFR1的SEQIDNo.50所示多肽片段的母离子的M/Z值为886.4669，+2y9子离子的M/Z值为941.472708；
(273)源自蛋白TFR1的SEQIDNo.50所示多肽片段的母离子的M/Z值为886.4669，+2y8+2子离子的M/Z值为422.71361；
(274)源自蛋白TFR1的SEQIDNo.50所示多肽片段的母离子的M/Z值为886.4669，+2b3子离子的M/Z值为376.223083；
(275)源自蛋白TFR1的SEQIDNo.50所示多肽片段的母离子的M/Z值为886.4669，+2b4子离子的M/Z值为489.307147；
(276)源自蛋白TRFE的SEQIDNo.51所示多肽片段的母离子的M/Z值为642.2882，+2y8子离子的M/Z值为934.441743；
(277)源自蛋白TRFE的SEQIDNo.51所示多肽片段的母离子的M/Z值为642.2882，+2y7子离子的M/Z值为771.378414；
(278)源自蛋白TRFE的SEQIDNo.51所示多肽片段的母离子的M/Z值为642.2882，+2y6子离子的M/Z值为714.35695；
(279)源自蛋白TRFE的SEQIDNo.51所示多肽片段的母离子的M/Z值为642.2882，+2y5子离子的M/Z值为551.293622；
(280)源自蛋白TRFE的SEQIDNo.51所示多肽片段的母离子的M/Z值为642.2882，+2y4子离子的M/Z值为450.245943；
(281)源自蛋白TRFE的SEQIDNo.51所示多肽片段的母离子的M/Z值为642.2882，+2b3子离子的M/Z值为350.134661；
(282)源自蛋白TRFE的SEQIDNo.52所示多肽片段的母离子的M/Z值为500.7529，+2y7子离子的M/Z值为837.43526；
(283)源自蛋白TRFE的SEQIDNo.52所示多肽片段的母离子的M/Z值为500.7529，+2y6子离子的M/Z值为724.351196；
(284)源自蛋白TRFE的SEQIDNo.52所示多肽片段的母离子的M/Z值为500.7529，+2y4子离子的M/Z值为538.287139；
(285)源自蛋白TRFE的SEQIDNo.52所示多肽片段的母离子的M/Z值为500.7529，+2y3子离子的M/Z值为409.244546；
(286)源自蛋白TRFE的SEQIDNo.52所示多肽片段的母离子的M/Z值为500.7529，+2y2子离子的M/Z值为246.181218；
(287)源自蛋白TRFE的SEQIDNo.52所示多肽片段的母离子的M/Z值为500.7529，+2b2子离子的M/Z值为277.154669；
(288)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.53所示多肽片段的母离子的M/Z值为487.6001，+3y5子离子的M/Z值为625.294016；
(289)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.53所示多肽片段的母离子的M/Z值为487.6001，+3y4子离子的M/Z值为462.230687；
(290)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.53所示多肽片段的母离子的M/Z值为487.6001，+3b6子离子的M/Z值为608.387856；
(291)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.53所示多肽片段的母离子的M/Z值为487.6001，+3b7子离子的M/Z值为737.43045；
(292)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.53所示多肽片段的母离子的M/Z值为487.6001，+3b8子离子的M/Z值为836.498864；
(293)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.54所示多肽片段的母离子的M/Z值为510.7591，+2y7子离子的M/Z值为777.425364；
(294)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.54所示多肽片段的母离子的M/Z值为510.7591，+2y6子离子的M/Z值为720.403901；
(295)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.54所示多肽片段的母离子的M/Z值为510.7591，+2y5子离子的M/Z值为605.376957；
(296)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.54所示多肽片段的母离子的M/Z值为510.7591，+2y4子离子的M/Z值为506.308544；
(297)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.54所示多肽片段的母离子的M/Z值为510.7591，+2y3子离子的M/Z值为435.27143；
(298)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.54所示多肽片段的母离子的M/Z值为510.7591，+2b3子离子的M/Z值为244.092797；
(299)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.55所示多肽片段的母离子的M/Z值为598.3089，+2y9子离子的M/Z值为920.483607；
(300)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.55所示多肽片段的母离子的M/Z值为598.3089，+2y8子离子的M/Z值为807.399543；
(301)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.55所示多肽片段的母离子的M/Z值为598.3089，+2y7子离子的M/Z值为660.33113；
(302)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.55所示多肽片段的母离子的M/Z值为598.3089，+2y5子离子的M/Z值为516.277637；
(303)源自蛋白TRFL的SEQIDNo.55所示多肽片段的母离子的M/Z值为598.3089，+2b2子离子的M/Z值为276.134267；
(304)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.56所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.8066，+2y9子离子的M/Z值为959.494506；
(305)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.56所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.8066，+2y8子离子的M/Z值为862.441743；
(306)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.56所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.8066，+2y7子离子的M/Z值为775.409714；
(307)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.56所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.8066，+2y5子离子的M/Z值为579.288536；
(308)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.56所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.8066，+2y4子离子的M/Z值为464.261593；
(309)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.56所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.8066，+2b2子离子的M/Z值为262.118617；
(310)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.57所示多肽片段的母离子的M/Z值为748.343，+2y9子离子的M/Z值为1169.552038；
(311)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.57所示多肽片段的母离子的M/Z值为748.343，+2y8子离子的M/Z值为1009.52139；
(312)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.57所示多肽片段的母离子的M/Z值为748.343，+2y7子离子的M/Z值为862.452976；
(313)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.57所示多肽片段的母离子的M/Z值为748.343，+2y6子离子的M/Z值为734.394398；
(314)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.57所示多肽片段的母离子的M/Z值为748.343，+2b2子离子的M/Z值为327.133933；
(315)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.57所示多肽片段的母离子的M/Z值为748.343，+2b3子离子的M/Z值为487.164582；
(316)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.58所示多肽片段的母离子的M/Z值为833.4163，+3y11子离子的M/Z值为1180.541533；
(317)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.58所示多肽片段的母离子的M/Z值为833.4163，+3y9子离子的M/Z值为994.477476；
(318)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.58所示多肽片段的母离子的M/Z值为833.4163，+3y8子离子的M/Z值为923.440363；
(319)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.58所示多肽片段的母离子的M/Z值为833.4163，+3y7子离子的M/Z值为776.371949；
(320)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.58所示多肽片段的母离子的M/Z值为833.4163，+3y6子离子的M/Z值为663.287885；
(321)源自蛋白HEMO的SEQIDNo.58所示多肽片段的母离子的M/Z值为833.4163，+3y5子离子的M/Z值为503.257236；
(322)源自蛋白KLKB1的SEQIDNo.59所示多肽片段的母离子的M/Z值为730.3624，+2y11子离子的M/Z值为1112.533077；
(323)源自蛋白KLKB1的SEQIDNo.59所示多肽片段的母离子的M/Z值为730.3624，+2y10子离子的M/Z值为1055.511613；
(324)源自蛋白KLKB1的SEQIDNo.59所示多肽片段的母离子的M/Z值为730.3624，+2y9子离子的M/Z值为954.463935；
(325)源自蛋白KLKB1的SEQIDNo.59所示多肽片段的母离子的M/Z值为730.3624，+2y8子离子的M/Z值为826.405357；
(326)源自蛋白KLKB1的SEQIDNo.59所示多肽片段的母离子的M/Z值为730.3624，+2y7子离子的M/Z值为769.383893；
(327)源自蛋白KLKB1的SEQIDNo.59所示多肽片段的母离子的M/Z值为730.3624，+2y6子离子的M/Z值为682.351865。
进一步地，所述三重四级杆质谱仪，被配置为检测选自所述组A中的MRM母子离子对和由以下(328)-(369)所示的MRM母子离子对组成的组B中的MRM母子离子对：
(328)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.60所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.0551，+4y9子离子的M/Z值为1045.542519；
(329)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.60所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.0551，+4y8子离子的M/Z值为932.458455；
(330)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.60所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.0551，+4y6子离子的M/Z值为730.399484；
(331)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.60所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.0551，+4y4子离子的M/Z值为446.272158；
(332)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.60所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.0551，+4y3子离子的M/Z值为347.203744；
(333)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.60所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.0551，+4b2子离子的M/Z值为215.102633；
(334)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.61所示多肽片段的母离子的M/Z值为681.3642，+2y9子离子的M/Z值为1062.557835；
(335)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.61所示多肽片段的母离子的M/Z值为681.3642，+2y8子离子的M/Z值为975.525807；
(336)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.61所示多肽片段的母离子的M/Z值为681.3642，+2y7子离子的M/Z值为904.488693；
(337)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.61所示多肽片段的母离子的M/Z值为681.3642，+2y6子离子的M/Z值为775.4461；
(338)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.61所示多肽片段的母离子的M/Z值为681.3642，+2y5子离子的M/Z值为662.362036；
(339)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.61所示多肽片段的母离子的M/Z值为681.3642，+2b2子离子的M/Z值为300.170653；
(340)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.62所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.3379，+2y9子离子的M/Z值为998.530558；
(341)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.62所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.3379，+2y7子离子的M/Z值为755.445037；
(342)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.62所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.3379，+2y5子离子的M/Z值为511.323859；
(343)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.62所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.3379，+2y2子离子的M/Z值为244.165568；
(344)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.62所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.3379，+2b2子离子的M/Z值为215.102633；
(345)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.62所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.3379，+2b5子离子的M/Z值为587.230747；
(346)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.63所示多肽片段的母离子的M/Z值为729.3652，+2y11子离子的M/Z值为1176.549121；
(347)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.63所示多肽片段的母离子的M/Z值为729.3652，+2y10子离子的M/Z值为1061.522178；
(348)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.63所示多肽片段的母离子的M/Z值为729.3652，+2y9子离子的M/Z值为947.47925；
(349)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.63所示多肽片段的母离子的M/Z值为729.3652，+2y8子离子的M/Z值为832.452307；
(350)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.63所示多肽片段的母离子的M/Z值为729.3652，+2y7子离子的M/Z值为719.368243；
(351)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.63所示多肽片段的母离子的M/Z值为729.3652，+2y5子离子的M/Z值为563.278366；
(352)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.64所示多肽片段的母离子的M/Z值为879.4339，+2y11子离子的M/Z值为1245.585841；
(353)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.64所示多肽片段的母离子的M/Z值为879.4339，+2y9子离子的M/Z值为1075.480313；
(354)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.64所示多肽片段的母离子的M/Z值为879.4339，+2y8子离子的M/Z值为1018.458849；
(355)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.64所示多肽片段的母离子的M/Z值为879.4339，+2y3子离子的M/Z值为387.198659；
(356)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.64所示多肽片段的母离子的M/Z值为879.4339，+2b2子离子的M/Z值为214.118617；
(357)源自蛋白BGAL的SEQIDNo.64所示多肽片段的母离子的M/Z值为879.4339，+2b3子离子的M/Z值为400.19793；
(358)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.65所示多肽片段的母离子的M/Z值为582.319，+2y9子离子的M/Z值为1050.546602；
(359)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.65所示多肽片段的母离子的M/Z值为582.319，+2y8子离子的M/Z值为951.478188；
(360)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.65所示多肽片段的母离子的M/Z值为582.319，+2y7子离子的M/Z值为837.43526；
(361)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.65所示多肽片段的母离子的M/Z值为582.319，+2y6子离子的M/Z值为708.392667；
(362)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.65所示多肽片段的母离子的M/Z值为582.319，+2y5子离子的M/Z值为595.308603；
(363)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.65所示多肽片段的母离子的M/Z值为582.319，+2b2子离子的M/Z值为213.159754；
(364)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.66所示多肽片段的母离子的M/Z值为740.4014，+2y10子离子的M/Z值为1180.647319；
(365)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.66所示多肽片段的母离子的M/Z值为740.4014，+2y9子离子的M/Z值为1017.58399；
(366)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.66所示多肽片段的母离子的M/Z值为740.4014，+2y8子离子的M/Z值为960.562526；
(367)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.66所示多肽片段的母离子的M/Z值为740.4014，+2y7子离子的M/Z值为813.494113；
(368)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.66所示多肽片段的母离子的M/Z值为740.4014，+2y6子离子的M/Z值为685.435535；
(369)源自蛋白ALBU的SEQIDNo.66所示多肽片段的母离子的M/Z值为740.4014，+2b3子离子的M/Z值为300.155397。
第四方面，本发明要求保护一种对待测样本中的前文所述32个目标蛋白中的全部或部分进行检测的方法。
本发明要求保护的对待测样本中的前文所述32个目标蛋白中的全部或部分进行检测的方法，可包括使用前文第三方面中所述三重四级杆质谱仪从所述待测样本生成质谱的步骤。
进一步地，所述方法可包括如下步骤：
(a1)从待测样本中提取蛋白，酶解；
(a2)将(a1)酶解后样本进行液相色谱分离；
(a3)使用前文第三方面中所述三重四级杆质谱仪对(a2)分离后样本进行检测生成质谱，进而从中获得所述目标蛋白的定量结果。
在步骤(a1)中，进行所述酶解可采用胰蛋白酶(Trypsin酶)。
在步骤(a2)中，所述液相色谱可为高效液相色谱。采用的色谱柱可为C18柱。(a1)酶解后样本经流动相A(97.9％水，2％ACN，0.1％FA)复溶，离心后取上清进样，洗脱程序为：0-38分钟，流动相B(98％ACN，1.9％水，0.1％FA)从5％线性升至30％；38-42分钟，流动相B从30％升至80％；42-50分钟，80％流动相B(上述％均表示体积百分含量)。液相分离末端直接连接质谱仪。
在步骤(a3)中，喷雾电压为2400V，喷雾气为23。采用MRM扫描模式，Q1和Q3的分辨率均设置为Unit模式。
所述待测样本为离体血浆样本；所述离体血浆样本来自健康人或者结直肠癌患者或者结直肠腺瘤患者。
所述方法为非疾病诊断治性方法。该方法只是对离体的液体样本进行处理、检测以获得作为中间结果的信息，无法从原始质谱数据直接得出疾病的诊断结果或健康状况。
第五方面，本发明要求保护一种用于筛查结直肠癌和/或结直肠腺瘤的系统。
本发明要求保护的用于筛查结直肠癌和/或结直肠腺瘤的系统，可包括前文第三方面中所述的三重四级杆质谱仪和控制装置。
所述控制装置被配置或被编程以执行下述步骤：
接收采用前文第四方面中所述方法对待筛查者的血浆样本进行检测所得的原始质谱数据；
从所述原始质谱数据中获得所述待筛查者的所述目标蛋白的相对定量值；
将所述待筛查者的所述目标蛋白的相对定量值与所述目标蛋白的判断阈值进行比较，获得比较结果；
根据预定判定条件对所述比较结果进行判定，判定符合所述预定判定条件的所述待筛查者为或候选为结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者，判定不符合所述预定判定条件的所述待筛查者不为或候选不为结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者，并输出判定结果。
在本发明中，所述目标蛋白的相对定量值可按照包括如下步骤的方法获得：将所述目标蛋白的每个transition的信号通过外参蛋白(如β-半乳糖苷酶和/或白蛋白)的信号进行归一化，归一化强度后，获取每个肽段的定量值，取该蛋白多个肽段定量的平均值作为该蛋白的定量值。如血浆样本做了技术重复，则取该样本该蛋白每个技术重复的定量均值作为该样本该蛋白的定量均值。
在本发明中，所述目标蛋白的判断阈值可根据健康人及结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者的所述目标蛋白的相对定量值依据受试者工作特征(ROC)曲线及约登指数方法确定。
所述健康人及结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者的所述目标蛋白的相对定量值可按照包括如下步骤的方法获得：1)采用前文第四方面中所述方法对所述健康人及结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者的血浆样本进行检测，得到原始质谱数据；2)从所述原始质谱数据中获得所述健康人的所述目标蛋白的相对定量。
进一步地，所述目标蛋白的判断阈值可设置为所述健康人与结直肠癌患者和/或结直肠腺瘤患者的所述目标蛋白的ROC曲线及约登指数(Youden index)最大时所对应的相对定量值为阈值。
更进一步地，当所述目标蛋白为上调蛋白(即在结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者样本中表达量显著高于健康人样本，如TFR1和/或SAHH和/或FBLN3和/或LYSC和/或TRFL)时，所述预定判定条件为：若所述待筛查者的所述目标蛋白的相对定量值大于所述目标蛋白的判断阈值，则判定所述待筛查者为或候选为结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者；反之，则判定所述待筛查者不为或候选不为结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者。
更进一步地，当所述目标蛋白为下调蛋白(即在结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者样本中表达量显著低于健康人样本，如HV307和/或KVD20和/或AL1A1和/或F13A和/或CFAD和/或IGJ和/或LV147和/或IGHA1和/或APOA2和/或AMBP和/或A1AG1和/或ALBU和/或TRFE和/或HEMO和/或KLKB1和/或A1BG和/或CO6A3和/或A1AG2和/或FLNA和/或CPN2和/或EST1和/或RNAS4和/或ALS和/或AFAM和/或SEPP1和/或LUM和/或ITLN1)时，所述预定判定条件为：若所述待筛查者的所述目标蛋白的相对定量值小于所述目标蛋白的判断阈值，则判定所述待筛查者为或候选为结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者；反之，则判定所述待筛查者不为或候选不为结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者。
在上述系统中，所述控制装置可以是任何能够执行上述步骤的计算机，例如个人计算机(PC)，工业控制计算机等通用计算机。
在本发明中，所述待筛查者可为疑似或潜在的结直肠癌和/或腺瘤患者，或者为非结直肠癌和腺瘤患者(如健康对照)。
本发明主要涉及特定目标蛋白的质谱定量检测，采用无创的方式收集样本，样本类型为血浆、粪便等，采用质谱多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)技术对特定目标蛋白进行定量检测，应用于结直肠癌及其癌前病变腺瘤的早期筛查。本发明采用的MRM质谱检测方法具有灵敏度高、重现性好、准确度高、通量高的优势。
本发明采用label-free质谱的技术对结直肠癌及其腺瘤组织进行大规模蛋白组的鉴定及定量，筛选出32个蛋白标志物，特别是其中的3个蛋白即TFR1、SAHH及HV307，在结直肠癌及腺瘤的组织、血浆不同样本类型中均检出一致，且与对照组(癌旁组织或健康人血浆)具有显著表达差异，ROC曲线下与坐标轴围成的面积(Area Under Curve,AUC)大部分不低于0.8，最高可达1。筛选的蛋白标志物在结直肠癌及其癌前病变腺瘤中的早期筛查性能优于传统蛋白肿瘤标志物比如CEA(表3)。
本发明采用MRM质谱技术对测试血浆样本进行靶蛋白的鉴定及定量，取代了传统的ELISA技术，不依赖于抗体，基于物理的质谱信号，具有灵敏度高、重现性好、准确度高、通量高的优点。
附图说明
图1为蛋白TFR1在人组织(A)、血浆(B)的箱线图。A中腺瘤组织组、肠癌早中期组织组、肠癌晚期组织组、肠癌早中期配对癌旁组织组，每组各30例。B中腺瘤血浆组、肠癌早中期血浆组、肠癌晚期血浆组、正常人即健康人血浆组，每组各5例。从箱型图中可知，相对于对照组，蛋白TFR1在肠癌的组织及血浆中均表达上调。
图2为蛋白SAHH在人组织(A)、血浆(B)的箱线图。A中腺瘤组织组、肠癌早中期组织组、肠癌晚期组织组、肠癌早中期配对癌旁组织组，每组各30例。B中腺瘤血浆组、肠癌早中期血浆组、肠癌晚期血浆组、正常人即健康人血浆组，每组各5例。从箱型图中可知，相对于对照组，蛋白SAHH在肠癌或腺瘤的组织及血浆中均表达上调。
图3为蛋白HV307在组织(A)、血浆(B)的箱线图。A中腺瘤组织组、肠癌早中期组织组、肠癌晚期组织组、肠癌早中期配对癌旁组织组，每组各30例。B中腺瘤血浆组、肠癌早中期血浆组、肠癌晚期血浆组、正常人即健康人血浆组，每组各5例。从箱型图中可知，相对于对照组，蛋白HV307在肠癌的组织及血浆中均表达下调。
注：两两组比较的P值由MSstats R包计算所得。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例将主要从两个方面展开，一是基于蛋白质非标记定量技术(label-free)对结直肠癌及其癌前病变腺瘤组织进行蛋白标志物筛选流程及相应的蛋白标志物集；二是提供了一种蛋白检测方法，采用MRM质谱检测技术，对测试样本(比如血浆样本)进行目标蛋白定量检测，用于结直肠癌及其癌前病变腺瘤的筛查，该技术包括特定目标蛋白的母子离子对(transition)信息和一种MRM质谱检测流程。
实施例1、基于labelfree质谱对结直肠癌及腺瘤组织进行蛋白标志物筛选
采集临床上确诊的结直肠癌早中期癌组织、晚期癌组织、腺瘤组织及CRC早中期配对癌旁组织各30例(供试者的基本信息参见表4)。采样对象纳入标准：经内镜等证实且手术前未经任何治疗的晚期结直肠癌患者、早中期结直肠癌患者、腺瘤患者和正常对照组共4个采样群体。4个群体的年龄在40-60岁之间，每个群体内男女比例尽量相当，对于病例较少例如腺瘤、TNM I、IV期结直肠癌患者，可适当放宽年龄范围和性别比例要求。采样对象排除标准：1)伴有身体其他部位肿瘤；2)有炎症性肠病、其他癌症病史和主要心理疾病；3)有家族结直肠癌病史；4)患有肺结核、乙肝、丙肝、艾滋病等感染性疾病；5)患有糖尿病、冠心病等慢性、复杂疾病。结直肠腺瘤或结直肠癌的病理分期以组织病理活检结果为金标准。
采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)及label-free的技术进行结直肠癌及腺瘤组织的蛋白全谱鉴定及定量，结合生物信息分析，筛选出显著差异蛋白及其相关富集代谢通路、网络互作通路。进一步采用血浆混合样本(癌早中期血浆、癌晚期血浆、腺瘤血浆、正常人血浆各1例)进行蛋白全谱鉴定。最终筛选出32个目标蛋白。具体如下：
1、蛋白提取
(1)称量适量组织样品到1.5ml离心管中；
(2)样品管加入适量裂解缓冲液(7M尿素，2M硫脲，4％CHAPS，40mM tris-HCl，pH8.5)，终浓度为1×Cocktail、2mM的EDTA(厂商：Amersco；货号：010)置于冰上5min后加入终浓度为10mM的DTT(厂商：Amersco；货号：0281)Tissue Lyser充分研磨(功率为55HZ，时间为2min，25000g×4离心15min取上清；
(3)加终浓度10mM DTT 56℃水浴1h；
(4)加终浓度55mM IAM(厂商：SIGMA；货号：IG25)，暗室放置45min；
(5)于25,00 0g×4℃离心15min，上清即为蛋白质溶液。
2、蛋白提取质控
(1)Bradford定量
在96孔酶标板A1至A10位置依次加入标准蛋白(0.2μg/μl BSA)0，2，4，6，8，10，12，14，16，18μl，之后依次加入纯水20，18，16，14，12，10，8，6，4，2μl，之后各孔加入考马斯亮蓝G-250定量工作液180μl。用酶标仪测量OD595，依据OD595与蛋白浓度制作线性标准曲线。稀释待测蛋白质溶液若干倍，在20μl蛋白溶液中加入180μl定量工作液，读取OD595。依据标准曲线以及样品OD595计算样品蛋白浓度。
(2)SDS-PAGE
每样取30μg蛋白溶液加入适量loading buffer混匀后95℃加热5分钟，25,000g离心5分钟，取上清点入12％SDS聚丙烯酰胺凝胶的点样孔中。120V恒压电泳120分钟；
电泳结束后，考马斯亮蓝染色2小时，之后加入适量脱色液(40％乙醇10％乙酸)置于摇床脱色液3～5次，每次30分钟。
3、蛋白酶解
(1)每个样品取100μg蛋白溶液；
(2)按蛋白：酶＝40:1的比例加入Trypsin酶(厂商：Promega；货号：V5280)2.5μg，37℃酶解4小时；
(3)按上述比例再补加Trypsin酶一次，37℃继续酶解8小时；
(4)酶解的肽段利用Strata X柱进行除盐，真空抽干。
4、High pH RP分离
将所有样本各取10μg进行混合后，取量200μg，用2mL流动相A(5％ACN，95％水，pH9.8)(ACN厂商：Fisher；货号：110-18-9)稀释并进样，采用岛津LC-20AB液相系统，分离柱为5μm 4.6×250mm Gemini C18柱对样品进行液相分离。以1mL/分钟的流速梯度洗脱：5％流动相B(95％ACN，5％水，pH9.8)10分钟，5％至35％流动相B 40分钟，35％至95％流动相B1分钟，流动相B持续3分钟，5％流动相B平衡10分钟。以上％均表示体积百分含量。洗脱程序中，各阶段流动相处理流动相B，余量均为流动相A。在214nm波长下监测洗脱峰并每分钟收集一个组分，结合色谱洗脱峰图合并样品得到10个组分，然后冷冻抽干。
5、高效液相
将抽干的肽段样品用流动相A(97.9％水，2％ACN，0.1％FA)(FA厂商：Fisher；货号：A117-50)复溶，20,000g离心10分钟后，取上清进样。通过Thermo公司UltiMate3000UHPLC进行分离。样品首先进入trap柱富集并除盐，随后与自装C18柱(150μm内径，1.8μm柱料粒径，25cm柱长)串联，以500nl/min流速通过如下有效梯度进行分离：0-5min，5％流动相B(98％ACN，1.9％水，0.1％FA)；5-160min，流动相B从5％线性升至35％；160-170min，流动相B从35％升至80％；170-175min，80％流动相B；176-180min，5％流动相B。以上％均表示体积百分含量。洗脱程序中，各阶段流动相处理流动相B，余量均为流动相A。纳升液相分离末端直接连接质谱仪。
6、DDA质谱检测
经过液相分离的肽段通过nanoESI源离子化后进入到串联质谱仪Q-Exactive HF(产商：Thermo)进行DDA(data-dependent acquisition)模式检测。主要参数设置：离子源电压设置为1.6kV；一级质谱扫描范围350～1500m/z；分辨率设置为60,000；二级质谱起始m/z固定为100；分辨率15,000。二级碎裂的母离子筛选条件为：电荷2+到7+，峰强度超过10,000的强度排在前20的母离子。离子碎裂模式为HCD，碎片离子在Orbitrap中进行检测。动态排除时间设定为30s。AGC设置为：一级3E6,二级1E5。
7、DIA质谱检测
经过液相分离的肽段通过nanoESI源离子化后进入到串联质谱仪Q-Exactive HF(Thermo Fisher Scientific,San Jose,CA)进行DIA(data-independent acquisition)模式检测。主要参数设置：离子源电压设置为1.6kV；一级质谱扫描范围350～1500m/z；分辨率设置为120,000；将350-1500Da均分为40个窗口进行碎裂及信号采集。离子碎裂模式为HCD，碎片离子在Orbitrap中进行检测。动态排除时间设定为30s。AGC设置为：一级3E6,二级1E5。
8、信息分析流程
下机的DDA数据使用MaxQuant软件完成鉴定，接着使用Spectronaut软件利用该结果进行谱图库构建。对于大规模的DIA数据，Spectronaut使用构建好的谱图库信息去完成数据的去卷积提取，使用mProphet算法完成数据的分析质控，从而获得大量可靠的定量结果。本流程还会完成GO，KEGG Pathway等功能注释分析。并基于定量结果，采用MSstats，其核心算法为线性混合效应模型(linear mixed-effects models)，根据差异倍数≥2和Pvalue<0.05作为显著性差异的判断标准进行差异蛋白筛选，完成不同比较组间差异蛋白的确认，最后根据显著差异蛋白的富集代谢通路分析及网络互作通路分析进一步筛选蛋白。
9、采用血浆混合样本(癌早中期血浆、癌晚期血浆、腺瘤血浆、正常人血浆各1例)进行蛋白全谱鉴定
(1)混合血浆蛋白提取
取癌早中期血浆、癌晚期血浆、腺瘤血浆、正常人血浆各1例，各取250μl混匀。取混匀血浆100μl+100μl的TEAB混匀，加入5倍体积的冷丙酮，终浓度10mM DTT，-20℃冰箱放置2h；于25,000g×4℃离心15min，弃上清；4℃下风干沉淀，加入适量含SDL的裂解缓冲液(7M尿素，2M硫脲，4％CHAPS，40mM tris-HCl，pH 8.5)，终浓度为1×Cocktail酶抑制剂(含EDTA)，置于冰上5min后加入适量终浓度为10mM的DTT，研磨仪研磨(功率为50HZ，时间为2min)，25000g×4℃离心15min，取上清；加适量终浓度10mM DTT，56℃水浴1h；冷却至室温后，加适量终浓度55mM IAM，暗室放置45min；加入适量预冷的丙酮，-20℃冰箱放置过夜，于25,000g×4℃离心15min，弃上清；4℃下风干沉淀，加入适量裂解缓冲液(7M尿素，2M硫脲，4％CHAPS，40mM tris-HCl，pH 8.5)，研磨仪研磨(功率为50HZ，时间为2min)，25000g×4℃离心15min，取上清；上清即为蛋白质溶液。
(2)使用上述方法确定上清液中的蛋白质定量。蛋白酶解、High pH RP分离与前述相同。
(3)高速液相
将抽干的肽段样品用流动相A(97.9％水，2％ACN，0.1％FA)复溶，20,000g离心10分钟后，取上清进样。通过SCIEX公司的eksigent 415型号的纳升液相色谱仪进行分离。样品首先进入trap柱富集并除盐，随后与自装C18柱(75微米内径，3微米柱料粒径，20厘米柱长)串联，以300nl/分钟流速通过如下有效梯度进行分离：0.1-90分钟，流动相B(98％ACN，1.9％水，0.1％FA)从8％线性升至32％；90-100分钟，流动相B从32％线性升至80％；100-110分钟，80％流动相B；110-120分钟，5％流动相B。以上％均表示体积百分含量。洗脱程序中，各阶段流动相处理流动相B，余量均为流动相A。纳升液相分离末端直接连接质谱仪。
(4)质谱检测
经过液相分离的肽段进入到ESI串联质谱仪：TripleTOF 5600(SCIEX，Framingham，MA，USA)，离子源为Nanospray III source(SCIEX,Framingham，MA，USA)，放射器为石英材料拉制的喷针(New Objectives，Woburn，MA，USA)。数据采集时，质谱仪的参数设置如下：离子源喷雾电压2,300V，氮气压力为35psi，喷雾气为15，喷雾接口处温度150℃。采用高灵敏度模式进行扫描，一级质谱扫描累积时间为250ms，扫描质量范围为350～1,500m/z。基于一级扫描信息，按照一级谱图中的离子强度从高到低，选择强度超过150cp的前40个进行碎裂并扫描二级信息，筛选标准如下：1)m/z范围为350～1,250；2)电荷数目为2～5个电荷；3)母离子动态排除设置为：在一半的出峰时间内(约12s)相同母离子的碎裂不超过2次。二级质谱的扫描累积时间为50ms。碎裂能量选择“Rolling Collision Energy”。
10、结果
采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)及label-free的技术进行结直肠癌及结直肠腺瘤组织的蛋白全谱鉴定及定量，共鉴定出134,812个肽段，9,745个蛋白，在结直肠癌早中期、晚期、腺瘤组与癌旁组的3种比较组合中均具有显著差异的蛋白数交集为409个，并集为2,355个。
进一步采用血浆混合样本(结直肠癌早中期血浆、结直肠癌晚期血浆、结直肠腺瘤血浆、正常人血浆各1例)进行蛋白全谱鉴定，从2,355个差异蛋白中筛选出32个目标蛋白。
最终筛选获得的32个目标蛋白的详细信息详见表1。
表1、32个蛋白信息列表
Figure BDA0002888950760000191
实施例2、采用MRM质谱检测技术检测结直肠癌及腺瘤患者样本中的32个目标蛋白
采用结直肠癌早中期血浆、晚期血浆、腺瘤血浆及健康人血浆各5例(入组标准同实施例1，供试者的基本信息参见表5，CEA结果如表3)。采用多反应监测(MRM)质谱技术进行目标蛋白的鉴定及定量，结合数据分析，以3个蛋白即TFR1(P02786)，SAHH(P23526)及HV307(P01780)作为结直肠癌及腺瘤的早期诊断及筛查的最终指标。
MRM质谱定量检测流程包括蛋白提取、蛋白提取质控、蛋白酶解、高效液相分离、质谱检测、数据分析等步骤。具体如下：
1、蛋白提取
取血浆100μl+100μl TEAB混匀，加入5倍体积的冷丙酮，终浓度10mM DTT，-20℃冰箱放置2h；于25,000g×4℃离心15min，弃上清；4℃下风干沉淀，加入适量含SDL的裂解缓冲液(7M尿素，2M硫脲，4％CHAPS，40mM tris-HCl，pH 8.5)，终浓度为1×Cocktail酶抑制剂(含EDTA)，置于冰上5min后加入适量终浓度为10mM的DTT，研磨仪研磨(功率为50HZ，时间为2min)，25000g×4℃离心15min，取上清；加适量终浓度10mM DTT，56℃水浴1h；冷却至室温后，加适量终浓度55mM IAM，暗室放置45min；加入适量预冷的丙酮，-20℃冰箱放置过夜，于25,000g×4℃离心15min，弃上清；4℃下风干沉淀，加入适量裂解缓冲液(7M尿素，2M硫脲，4％CHAPS，40mM tris-HCl，pH 8.5)，研磨仪研磨(功率为50HZ，时间为2min)，25000g×4℃离心15min，取上清；上清即为蛋白质溶液。
2、蛋白提取质控
同实施例1步骤2。
3、蛋白酶解
将各50fmol外参蛋白β-半乳糖苷酶(Uniport ID：P00722)、白蛋白(Uniport ID：P02769)添加到每个100μg样品中，其他步骤同实施例1步骤3。
4、高效液相分离
将抽干的肽段样品用流动相A(2％ACN，0.1％FA)复溶，20,000g离心10分钟后，取上清进样。通过岛津公司LC-20AD型号的纳升液相色谱仪进行分离。样品首先进入trap柱富集并除盐，随后与自装C18柱(75微米内径，3.6微米柱料粒径，15厘米柱长)串联，以300nl/分钟流速通过如下有效梯度进行分离：0-38分钟，流动相B(98％ACN，0.1％FA)从5％线性升至30％；38-42分钟，流动相B从30％升至80％；42-50分钟，80％流动相B。以上％均表示体积百分含量。洗脱程序中，各阶段流动相处理流动相B，余量均为流动相A。纳升液相分离末端直接连接质谱仪。
5、MRM质谱检测
经过液相分离的肽段进入到ESI串联质谱仪：QTRAP 6500质谱仪(SCIEX,Framingham,MA,USA)，离子源为NanosprayIIIsource(SCIEX,Framingham,MA,USA)，放射器为石英材料拉制的喷针(New Objectives,Woburn,MA，USA)。数据采集时，机器的参数设置如下：喷雾电压为2400V，喷雾气为23。采用MRM扫描模式，Q1和Q3的分辨率均设置为Unit模式。
离子对列表见表2。
表2、目标蛋白的母子离子对(transition)信息表(含2个质控蛋白)
Figure BDA0002888950760000211
Figure BDA0002888950760000221
Figure BDA0002888950760000231
Figure BDA0002888950760000241
Figure BDA0002888950760000251
注：Q1表示三重四极杆第一级即母离子M/Z值；Q3表示三重四极杆第三级即子离子M/Z值；Dwell time表示每个离子的停留扫描时间；Protein.Peptide.Charge/Fragemnt.Label表示Uniport ID+蛋白简称+物种名称+肽段序列+子离子；CE表示该母离子在质谱仪器中最佳的碎裂能量(collision energy)。外参蛋白：β-半乳糖苷酶(UniportID：P00722)、白蛋白(Uniport ID：P02769)。
6、数据分析
目标蛋白在样品中质谱扫描结果导入Skyline软件。目标蛋白的质谱信号其必须符合以下条件才用于样品相对定量：
(1)同一肽段不同的transition具有共洗脱峰；
(2)同一肽段不同的transition的色谱峰面积强度与全谱数据的碎片离子强度相关；
(3)肽段色谱出峰时间在预测出峰时间的±2分钟。
一般情况下，所有transition的信号都会用于目标蛋白的定量，但是如果发现个别transition由于背景干扰导致强度跟其他transition不一致，这些transition会去除。目标蛋白的每个transition的信号会通过外参蛋白β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)和/或白蛋白(Albumin)的信号进行归一化。归一化强度后，获取每个肽段的定量值。取该蛋白多个肽段定量的平均值作为该蛋白的定量值。如血浆样本做了技术重复，则取该样本该蛋白每个技术重复的定量均值作为该样本该蛋白的定量均值。
7、结果
采用结直肠癌早中期血浆、晚期血浆、腺瘤血浆及健康人血浆各5例，采用多反应监测(MRM)质谱技术进行32个目标蛋白的鉴定及定量(表6)，采用实施例1的差异倍数、P值、FDR计算方法及与组织上下调关系一致性的综合比较，确定以3个蛋白即TFR1(P02786)，SAHH(P23526)及HV307(P01780)作为结直肠癌及腺瘤的早期诊断及筛查的指标，以三个蛋白指标中任意两个指标为阳性，则该样本检测结果判断为阳性，否则为阴性。此3个蛋白在组织及血浆样本的箱线图分别参见图1、图2、图3。从箱线图中可知，相对于对照组，蛋白TFR1、SAHH在结直肠癌或腺瘤的组织及血浆中均表达上调；蛋白HV307在结直肠癌的组织及血浆中均表达下调。各供试样本的TFR1、SAHH及HV307这3个目标蛋白的检测结果如表7所示。
表3、血浆样本对应患者的CEA结果
Figure BDA0002888950760000261
Figure BDA0002888950760000271
表4、实施例1供试者的临床基本信息表
Figure BDA0002888950760000272
Figure BDA0002888950760000281
Figure BDA0002888950760000291
表5、实施例2供试者的临床基本信息表
Figure BDA0002888950760000292
Figure BDA0002888950760000301
表6、实施例2中32个目标蛋白的定量结果
Figure BDA0002888950760000302
Figure BDA0002888950760000311
注：N表示正常人；A表示腺瘤；E表示肠癌早期即I期；L表示肠癌晚期即IV期。
表7、实施例2中各样本TFR1、SAHH及HV307这3个目标蛋白的检测结果
Figure BDA0002888950760000312
Figure BDA0002888950760000321
注：N表示正常人；A表示腺瘤；E表示肠癌早期即I期；L表示肠癌晚期即IV期。第3至5列分别表示TFR1、SAHH及HV307 3个目标蛋白的定量值；第6列表示检测结果，以三个蛋白指标中任意两个指标为阳性，则该样本检测结果判断为阳性，否则为阴性。此处，TFR1、SAHH及HV307阈值分别为37349.41025、144077.4998及7787307.153(目标蛋白的ROC曲线及约登指数(Youden index)最大时所对应的相对定量值即为该目标蛋白的阈值)。TFR1、SAHH指标阳性分别指蛋白定量值大于该蛋白阈值；HV307指标阳性值蛋白定量值小于该蛋白阈值。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。
<110> 深圳华大基因股份有限公司；深圳华大临床检验中心；广州华大基因医学检验所有限公司；
<120> 一种用于结直肠癌及腺瘤早期筛查的蛋白定量检测方法
<130> GNCLN210104
<160> 66
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 1
Ser Gly Leu Ser Thr Gly Trp Thr Gln Leu Ser Lys
1 5 10
<210> 2
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 2
Ala Thr Trp Ser Gly Ala Val Leu Ala Gly Arg
1 5 10
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<211> 22
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 3
Thr Pro Gly Ala Ala Ala Asn Leu Glu Leu Ile Phe Val Gly Pro Gln
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His Ala Gly Asn Tyr Arg
20
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Ser Arg
1 5
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Gln Ala Phe Gln Ile Gly Ser Pro Trp Arg
1 5 10
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Cys Tyr Thr Ala Val Val Pro Leu Val Tyr Gly Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 7
Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
1 5 10
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Gly Leu Glu Trp Val Ala Asn Ile Lys
1 5
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<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 9
Glu His Val Ala His Leu Leu Phe Leu Arg
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<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 10
Asn Trp Gly Leu Ser Phe Tyr Ala Asp Lys Pro Glu Thr Thr Lys
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Ala Asn Leu Pro Gln Ser Phe Gln Val Asp Thr Ser Lys
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 12
Thr Gly Val Ala Val Asn Lys Pro Ala Glu Phe Thr Val Asp Ala Lys
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 13
Glu Gly Tyr Leu Gln Ile Gly Ala Asn Thr Gln Ala Ala Gln Lys
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 14
Val Ala Val Val Ala Gly Tyr Gly Asp Val Gly Lys
1 5 10
<210> 15
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 15
Val Pro Ala Ile Asn Val Asn Asp Ser Val Thr Lys
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 16
Ser Ile Cys Ser Thr Thr Asn Ile Gln Cys Lys
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<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Ala Ile Pro Val Thr Gln Tyr Leu Lys
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
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<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 19
Gln Leu Thr Leu Leu Gly Gly Pro Thr Pro Asn Thr Gly Ala Ala Leu
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Glu Phe Val Leu Arg
20
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<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Leu Ser Asn Asn Ala Leu Ser Gly Leu Pro Gln Gly Val Phe Gly Lys
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 24
Val Ala Gly Leu Leu Glu Asp Thr Phe Pro Gly Leu Leu Gly Leu Arg
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
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<213> 人工序列（Artificial sequence）
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<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Ser Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser Phe Asn Gln Ile Ala Arg
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<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Leu Pro Ser Gly Leu Pro Val Ser Leu Leu Thr Leu Tyr Leu Asp Asn
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Asn Lys
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<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Ser Val Pro Ser Asp Ile Phe Gln Ile Gln Ala Thr Thr Ile Tyr Ala
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Asn Thr Ile Asn Thr Phe Arg
20
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<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Thr Asp Thr Gly Phe Leu Gln Thr Leu Gly His Asn Leu Phe Gly Ile
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Tyr Gln Lys
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<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 32
Glu Phe Thr Ala Gly Phe Val Gln Phe Arg
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<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Gly Val Asn Leu Gln Glu Phe Leu Asn Val Thr Ser Val His Leu Phe
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Lys
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<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Gly Thr Tyr Ile Pro Val Pro Ile Val Ser Glu Leu Gln Ser Gly Lys
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<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Leu Leu Leu Gln Leu Ser Glu Lys
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<213> 人工序列（Artificial sequence）
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Asp Ala Ser Gly Val Thr Phe Thr Trp Thr Pro Ser Ser Gly Lys
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Asp Leu Cys Gly Cys Tyr Ser Val Ser Ser Val Leu Pro Gly Cys Ala
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<400> 39
Gln Glu Pro Ser Gln Gly Thr Thr Thr Phe Ala Val Thr Ser Ile Leu
1 5 10 15
Arg
<210> 40
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 40
Glu Pro Cys Val Glu Ser Leu Val Ser Gln Tyr Phe Gln Thr Val Thr
1 5 10 15
Asp Tyr Gly Lys
20
<210> 41
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 41
Ser Pro Glu Leu Gln Ala Glu Ala Lys
1 5
<210> 42
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 42
Glu Thr Leu Leu Gln Asp Phe Arg
1 5
<210> 43
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 43
Gly Glu Cys Val Pro Gly Glu Gln Glu Pro Glu Pro Ile Leu Ile Pro
1 5 10 15
Arg
<210> 44
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 44
Tyr Val Gly Gly Gln Glu His Phe Ala His Leu Leu Ile Leu Arg
1 5 10 15
<210> 45
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 45
Asn Trp Gly Leu Ser Val Tyr Ala Asp Lys Pro Glu Thr Thr Lys
1 5 10 15
<210> 46
<211> 21
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 46
Ala Leu Val Leu Ile Ala Phe Ala Gln Tyr Leu Gln Gln Cys Pro Phe
1 5 10 15
Glu Asp His Val Lys
20
<210> 47
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 47
Leu Val Asn Glu Val Thr Glu Phe Ala Lys
1 5 10
<210> 48
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 48
Ala Ala Phe Thr Glu Cys Cys Gln Ala Ala Asp Lys
1 5 10
<210> 49
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 49
Leu Leu Asn Glu Asn Ser Tyr Val Pro Arg
1 5 10
<210> 50
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 50
Leu Val Tyr Leu Val Glu Asn Pro Gly Gly Tyr Val Ala Tyr Ser Lys
1 5 10 15
<210> 51
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 51
Glu Gly Tyr Tyr Gly Tyr Thr Gly Ala Phe Arg
1 5 10
<210> 52
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 52
Tyr Leu Gly Glu Glu Tyr Val Lys
1 5
<210> 53
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 53
Leu Arg Pro Val Ala Ala Glu Val Tyr Gly Thr Glu Arg
1 5 10
<210> 54
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 54
Asp Gly Ala Gly Asp Val Ala Phe Ile Arg
1 5 10
<210> 55
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 55
Phe Gln Leu Phe Gly Ser Pro Ser Gly Gln Lys
1 5 10
<210> 56
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 56
Asn Phe Pro Ser Pro Val Asp Ala Ala Phe Arg
1 5 10
<210> 57
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 57
Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Asn Gln Phe Leu Arg
1 5 10
<210> 58
<211> 24
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 58
Glu Val Gly Thr Pro His Gly Ile Ile Leu Asp Ser Val Asp Ala Ala
1 5 10 15
Phe Ile Cys Pro Gly Ser Ser Arg
20
<210> 59
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 59
Ile Ala Tyr Gly Thr Gln Gly Ser Ser Gly Tyr Ser Leu Arg
1 5 10
<210> 60
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 60
Asp Val Ser Leu Leu His Lys Pro Thr Thr Gln Ile Ser Asp Phe His
1 5 10 15
Val Ala Thr Arg
20
<210> 61
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 61
Leu Trp Ser Ala Glu Ile Pro Asn Leu Tyr Arg
1 5 10
<210> 62
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 62
Val Asp Glu Asp Gln Pro Phe Pro Ala Val Pro Lys
1 5 10
<210> 63
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 63
Ala Pro Leu Asp Asn Asp Ile Gly Val Ser Glu Ala Thr Arg
1 5 10
<210> 64
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 64
Val Asn Trp Leu Gly Leu Gly Pro Gln Glu Asn Tyr Pro Asp Arg
1 5 10 15
<210> 65
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 65
Leu Val Asn Glu Leu Thr Glu Phe Ala Lys
1 5 10
<210> 66
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial sequence）
<400> 66
Leu Gly Glu Tyr Gly Phe Gln Asn Ala Leu Ile Val Arg
1 5 10

Claims (10)

1.如下32个目标蛋白中的全部或部分作为标记物在制备用于筛查结直肠癌和/或结直肠腺瘤的产品中的应用：KVD20、AL1A1、F13A、CFAD、IGJ、LV147、HV307、IGHA1、APOA2、AMBP、A1AG1、ALBU、TFR1、TRFE、TRFL、HEMO、KLKB1、A1BG、CO6A3、A1AG2、FLNA、CPN2、EST1、SAHH、RNAS4、ALS、AFAM、SEPP1、LUM、LYSC、FBLN3和ITLN1。
2.物质A在制备用于筛查结直肠癌和/或结直肠腺瘤的产品中的应用；
所述物质A为用于检测如下32个目标蛋白中的全部或部分的物质：KVD20、AL1A1、F13A、CFAD、IGJ、LV147、HV307、IGHA1、APOA2、AMBP、A1AG1、ALBU、TFR1、TRFE、TRFL、HEMO、KLKB1、A1BG、CO6A3、A1AG2、FLNA、CPN2、EST1、SAHH、RNAS4、ALS、AFAM、SEPP1、LUM、LYSC、FBLN3和ITLN1。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述32个目标蛋白中的全部或部分为如下3个目标蛋白中的全部或部分：TFR1、SAHH和HV307。
4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于：所述物质A为权利要求5所述的三重四级杆质谱仪。
5.一种三重四级杆质谱仪，被配置为检测选自由以下(1)-(327)所示的MRM母子离子对组成的组A中的MRM母子离子对：
(1)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.1所示多肽片段的母离子的M/Z值为632.8302，+2y9子离子的M/Z值为1007.515636；
(2)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.1所示多肽片段的母离子的M/Z值为632.8302，+2y8子离子的M/Z值为920.483607；
(3)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.1所示多肽片段的母离子的M/Z值为632.8302，+2y7子离子的M/Z值为819.435929；
(4)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.1所示多肽片段的母离子的M/Z值为632.8302，+2y5子离子的M/Z值为576.335152；
(5)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.1所示多肽片段的母离子的M/Z值为632.8302，+2y4子离子的M/Z值为475.287474；
(6)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.2所示多肽片段的母离子的M/Z值为544.796，+2y9子离子的M/Z值为916.499926；
(7)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.2所示多肽片段的母离子的M/Z值为544.796，+2y8子离子的M/Z值为730.420613；
(8)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.2所示多肽片段的母离子的M/Z值为544.796，+2y7子离子的M/Z值为643.388585；
(9)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.2所示多肽片段的母离子的M/Z值为544.796，+2y5子离子的M/Z值为515.330007；
(10)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.2所示多肽片段的母离子的M/Z值为544.796，+2y4子离子的M/Z值为416.261593；
(11)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.2所示多肽片段的母离子的M/Z值为544.796，+2y3子离子的M/Z值为303.177529；
(12)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.3所示多肽片段的母离子的M/Z值为766.0659，+3y11子离子的M/Z值为1245.61233；
(13)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.3所示多肽片段的母离子的M/Z值为766.0659，+3y9子离子的M/Z值为999.475502；
(14)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.3所示多肽片段的母离子的M/Z值为766.0659，+3y8子离子的M/Z值为942.454039；
(15)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.3所示多肽片段的母离子的M/Z值为766.0659，+3y6子离子的M/Z值为717.342697；
(16)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.3所示多肽片段的母离子的M/Z值为766.0659，+3y5子离子的M/Z值为580.283785；
(17)源自蛋白A1BG的SEQ ID No.3所示多肽片段的母离子的M/Z值为766.0659，+3y4子离子的M/Z值为509.246672；
(18)源自蛋白KVD20的SEQ ID No.4所示多肽片段的母离子的M/Z值为519.2849，+2y7子离子的M/Z值为811.394458；
(19)源自蛋白KVD20的SEQ ID No.4所示多肽片段的母离子的M/Z值为519.2849，+2y6子离子的M/Z值为698.310394；
(20)源自蛋白KVD20的SEQ ID No.4所示多肽片段的母离子的M/Z值为519.2849，+2y5子离子的M/Z值为535.247065；
(21)源自蛋白KVD20的SEQ ID No.4所示多肽片段的母离子的M/Z值为519.2849，+2y4子离子的M/Z值为420.220122；
(22)源自蛋白KVD20的SEQ ID No.4所示多肽片段的母离子的M/Z值为519.2849，+2b2子离子的M/Z值为227.175404；
(23)源自蛋白AL1A1的SEQ ID No.5所示多肽片段的母离子的M/Z值为595.3093，+2y8子离子的M/Z值为990.515576；
(24)源自蛋白AL1A1的SEQ ID No.5所示多肽片段的母离子的M/Z值为595.3093，+2y7子离子的M/Z值为843.447162；
(25)源自蛋白AL1A1的SEQ ID No.5所示多肽片段的母离子的M/Z值为595.3093，+2y6子离子的M/Z值为715.388585；
(26)源自蛋白AL1A1的SEQ ID No.5所示多肽片段的母离子的M/Z值为595.3093，+2y5子离子的M/Z值为602.304521；
(27)源自蛋白AL1A1的SEQ ID No.5所示多肽片段的母离子的M/Z值为595.3093，+2y3+2子离子的M/Z值为229.629152；
(28)源自蛋白AL1A1的SEQ ID No.5所示多肽片段的母离子的M/Z值为595.3093，+2b3子离子的M/Z值为347.171381；
(29)源自蛋白IGJ的SEQ ID No.6所示多肽片段的母离子的M/Z值为828.9187，+2y10子离子的M/Z值为1062.582987；
(30)源自蛋白IGJ的SEQ ID No.6所示多肽片段的母离子的M/Z值为828.9187，+2y9子离子的M/Z值为963.514573；
(31)源自蛋白IGJ的SEQ ID No.6所示多肽片段的母离子的M/Z值为828.9187，+2y6子离子的M/Z值为654.309331；
(32)源自蛋白IGJ的SEQ ID No.6所示多肽片段的母离子的M/Z值为828.9187，+2y5子离子的M/Z值为491.246003；
(33)源自蛋白IGJ的SEQ ID No.6所示多肽片段的母离子的M/Z值为828.9187，+2b2子离子的M/Z值为324.101253；
(34)源自蛋白IGJ的SEQ ID No.6所示多肽片段的母离子的M/Z值为828.9187，+2b3子离子的M/Z值为425.148932；
(35)源自蛋白|LV147的SEQ ID No.7所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.3357，+2y10子离子的M/Z值为974.56292；
(36)源自蛋白|LV147的SEQ ID No.7所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.3357，+2y9子离子的M/Z值为887.530892；
(37)源自蛋白|LV147的SEQ ID No.7所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.3357，+2y8子离子的M/Z值为816.493778；
(38)源自蛋白|LV147的SEQ ID No.7所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.3357，+2y7子离子的M/Z值为729.46175；
(39)源自蛋白|LV147的SEQ ID No.7所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.3357，+2y6子离子的M/Z值为616.377686；
(40)源自蛋白|LV147的SEQ ID No.7所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.3357，+2y5子离子的M/Z值为545.340572；
(41)源自蛋白HV307的SEQ ID No.8所示多肽片段的母离子的M/Z值为515.29，+2y7子离子的M/Z值为859.467229；
(42)源自蛋白HV307的SEQ ID No.8所示多肽片段的母离子的M/Z值为515.29，+2y6子离子的M/Z值为730.424636；
(43)源自蛋白HV307的SEQ ID No.8所示多肽片段的母离子的M/Z值为515.29，+2y5子离子的M/Z值为544.345323；
(44)源自蛋白HV307的SEQ ID No.8所示多肽片段的母离子的M/Z值为515.29，+2y4子离子的M/Z值为445.276909；
(45)源自蛋白HV307的SEQ ID No.8所示多肽片段的母离子的M/Z值为515.29，+2y3子离子的M/Z值为374.239795；
(46)源自蛋白HV307的SEQ ID No.8所示多肽片段的母离子的M/Z值为515.29，+2y2子离子的M/Z值为260.196868；
(47)源自蛋白A1AG2的SEQ ID No.9所示多肽片段的母离子的M/Z值为617.8564，+2y8子离子的M/Z值为968.603997；
(48)源自蛋白A1AG2的SEQ ID No.9所示多肽片段的母离子的M/Z值为617.8564，+2y7子离子的M/Z值为869.535583；
(49)源自蛋白A1AG2的SEQ ID No.9所示多肽片段的母离子的M/Z值为617.8564，+2y6子离子的M/Z值为798.49847；
(50)源自蛋白A1AG2的SEQ ID No.9所示多肽片段的母离子的M/Z值为617.8564，+2y5子离子的M/Z值为661.439558；
(51)源自蛋白A1AG2的SEQ ID No.9所示多肽片段的母离子的M/Z值为617.8564，+2b2子离子的M/Z值为267.108781；
(52)源自蛋白A1AG2的SEQ ID No.9所示多肽片段的母离子的M/Z值为617.8564，+2b3子离子的M/Z值为366.177195；
(53)源自蛋白A1AG2的SEQ ID No.10所示多肽片段的母离子的M/Z值为878.9307，+2y9子离子的M/Z值为1052.525866；
(54)源自蛋白A1AG2的SEQ ID No.10所示多肽片段的母离子的M/Z值为878.9307，+2y8子离子的M/Z值为889.462538；
(55)源自蛋白A1AG2的SEQ ID No.10所示多肽片段的母离子的M/Z值为878.9307，+2y6子离子的M/Z值为703.398481；
(56)源自蛋白A1AG2的SEQ ID No.10所示多肽片段的母离子的M/Z值为878.9307，+2y5子离子的M/Z值为575.303518；
(57)源自蛋白A1AG2的SEQ ID No.10所示多肽片段的母离子的M/Z值为878.9307，+2b2子离子的M/Z值为301.129516；
(58)源自蛋白A1AG2的SEQ ID No.10所示多肽片段的母离子的M/Z值为878.9307，+2b3子离子的M/Z值为358.15098；
(59)源自蛋白FLNA的SEQ ID No.11所示多肽片段的母离子的M/Z值为717.8648，+2y10子离子的M/Z值为1136.558229；
(60)源自蛋白FLNA的SEQ ID No.11所示多肽片段的母离子的M/Z值为717.8648，+2y8子离子的M/Z值为911.446888；
(61)源自蛋白FLNA的SEQ ID No.11所示多肽片段的母离子的M/Z值为717.8648，+2y4子离子的M/Z值为450.219454；
(62)源自蛋白FLNA的SEQ ID No.11所示多肽片段的母离子的M/Z值为717.8648，+2y3子离子的M/Z值为335.192511；
(63)源自蛋白FLNA的SEQ ID No.11所示多肽片段的母离子的M/Z值为717.8648，+2y10+2子离子的M/Z值为568.782753；
(64)源自蛋白FLNA的SEQ ID No.11所示多肽片段的母离子的M/Z值为717.8648，+2b3子离子的M/Z值为299.171381；
(65)源自蛋白FLNA的SEQ ID No.12所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.6298，+3y9子离子的M/Z值为977.493838；
(66)源自蛋白FLNA的SEQ ID No.12所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.6298，+3y6子离子的M/Z值为680.361367；
(67)源自蛋白FLNA的SEQ ID No.12所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.6298，+3y5子离子的M/Z值为533.292953；
(68)源自蛋白FLNA的SEQ ID No.12所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.6298，+3y2子离子的M/Z值为218.149918；
(69)源自蛋白FLNA的SEQ ID No.12所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.6298，+3y13+2子离子的M/Z值为695.372266；
(70)源自蛋白EST1的SEQ ID No.13所示多肽片段的母离子的M/Z值为796.4074，+2y10子离子的M/Z值为1001.537434；
(71)源自蛋白EST1的SEQ ID No.13所示多肽片段的母离子的M/Z值为796.4074，+2y9子离子的M/Z值为888.45337；
(72)源自蛋白EST1的SEQ ID No.13所示多肽片段的母离子的M/Z值为796.4074，+2y4子离子的M/Z值为417.245609；
(73)源自蛋白EST1的SEQ ID No.13所示多肽片段的母离子的M/Z值为796.4074，+2y3子离子的M/Z值为346.208495；
(74)源自蛋白EST1的SEQ ID No.13所示多肽片段的母离子的M/Z值为796.4074，+2y9+2子离子的M/Z值为444.730323；
(75)源自蛋白EST1的SEQ ID No.13所示多肽片段的母离子的M/Z值为796.4074，+2b3子离子的M/Z值为350.134661；
(76)源自蛋白SAHH的SEQ ID No.14所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.8113，+2y7子离子的M/Z值为695.335881；
(77)源自蛋白SAHH的SEQ ID No.14所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.8113，+2y3子离子的M/Z值为303.202681；
(78)源自蛋白SAHH的SEQ ID No.14所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.8113，+2y2子离子的M/Z值为204.134267；
(79)源自蛋白SAHH的SEQ ID No.14所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.8113，+2b3子离子的M/Z值为270.181218；
(80)源自蛋白SAHH的SEQ ID No.15所示多肽片段的母离子的M/Z值为628.8459，+2y10子离子的M/Z值为1060.563314；
(81)源自蛋白SAHH的SEQ ID No.15所示多肽片段的母离子的M/Z值为628.8459，+2y9子离子的M/Z值为989.526201；
(82)源自蛋白SAHH的SEQ ID No.15所示多肽片段的母离子的M/Z值为628.8459，+2y2子离子的M/Z值为248.160482；
(83)源自蛋白SAHH的SEQ ID No.15所示多肽片段的母离子的M/Z值为628.8459，+2y11+2子离子的M/Z值为579.311677；
(84)源自蛋白RNAS4的SEQ ID No.16所示多肽片段的母离子的M/Z值为656.3052，+2y9子离子的M/Z值为1111.487055；
(85)源自蛋白RNAS4的SEQ ID No.16所示多肽片段的母离子的M/Z值为656.3052，+2y8子离子的M/Z值为951.456407；
(86)源自蛋白RNAS4的SEQ ID No.16所示多肽片段的母离子的M/Z值为656.3052，+2y7子离子的M/Z值为864.424378；
(87)源自蛋白RNAS4的SEQ ID No.16所示多肽片段的母离子的M/Z值为656.3052，+2y6子离子的M/Z值为763.3767；
(88)源自蛋白RNAS4的SEQ ID No.16所示多肽片段的母离子的M/Z值为656.3052，+2y2子离子的M/Z值为307.143452；
(89)源自蛋白RNAS4的SEQ ID No.16所示多肽片段的母离子的M/Z值为656.3052，+2b2子离子的M/Z值为201.123368；
(90)源自蛋白AFAM的SEQ ID No.17所示多肽片段的母离子的M/Z值为516.808，+2y7子离子的M/Z值为848.48763；
(91)源自蛋白AFAM的SEQ ID No.17所示多肽片段的母离子的M/Z值为516.808，+2y6子离子的M/Z值为751.434866；
(92)源自蛋白AFAM的SEQ ID No.17所示多肽片段的母离子的M/Z值为516.808，+2y5子离子的M/Z值为652.366452；
(93)源自蛋白AFAM的SEQ ID No.17所示多肽片段的母离子的M/Z值为516.808，+2y2子离子的M/Z值为260.196868；
(94)源自蛋白AFAM的SEQ ID No.17所示多肽片段的母离子的M/Z值为516.808，+2y7+2子离子的M/Z值为424.747453；
(95)源自蛋白LYSC的SEQ ID No.18所示多肽片段的母离子的M/Z值为700.8439，+2y8子离子的M/Z值为934.510491；
(96)源自蛋白LYSC的SEQ ID No.18所示多肽片段的母离子的M/Z值为700.8439，+2y7子离子的M/Z值为877.489027；
(97)源自蛋白LYSC的SEQ ID No.18所示多肽片段的母离子的M/Z值为700.8439，+2y6子离子的M/Z值为764.404963；
(98)源自蛋白LYSC的SEQ ID No.18所示多肽片段的母离子的M/Z值为700.8439，+2y5子离子的M/Z值为617.336549；
(99)源自蛋白LYSC的SEQ ID No.18所示多肽片段的母离子的M/Z值为700.8439，+2b3子离子的M/Z值为304.113926；
(100)源自蛋白CO6A3的SEQ ID No.19所示多肽片段的母离子的M/Z值为723.4073，+3y9子离子的M/Z值为975.562192；
(101)源自蛋白CO6A3的SEQ ID No.19所示多肽片段的母离子的M/Z值为723.4073，+3y7子离子的M/Z值为847.503615；
(102)源自蛋白CO6A3的SEQ ID No.19所示多肽片段的母离子的M/Z值为723.4073，+3y6子离子的M/Z值为776.466501；
(103)源自蛋白CO6A3的SEQ ID No.19所示多肽片段的母离子的M/Z值为723.4073，+3y5子离子的M/Z值为663.382437；
(104)源自蛋白CO6A3的SEQ ID No.19所示多肽片段的母离子的M/Z值为723.4073，+3b3子离子的M/Z值为343.197596；
(105)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.20所示多肽片段的母离子的M/Z值为801.4359，+2y11子离子的M/Z值为1102.625521；
(106)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.20所示多肽片段的母离子的M/Z值为801.4359，+2y10子离子的M/Z值为989.541457；
(107)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.20所示多肽片段的母离子的M/Z值为801.4359，+2y9子离子的M/Z值为902.509428；
(108)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.20所示多肽片段的母离子的M/Z值为801.4359，+2y7子离子的M/Z值为732.403901；
(109)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.20所示多肽片段的母离子的M/Z值为801.4359，+2y3子离子的M/Z值为351.202681；
(110)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.21所示多肽片段的母离子的M/Z值为451.7815，+2y7子离子的M/Z值为789.471646；
(111)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.21所示多肽片段的母离子的M/Z值为451.7815，+2y6子离子的M/Z值为660.429053；
(112)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.21所示多肽片段的母离子的M/Z值为451.7815，+2y5子离子的M/Z值为547.344989；
(113)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.21所示多肽片段的母离子的M/Z值为451.7815，+2y4子离子的M/Z值为434.260925；
(114)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.21所示多肽片段的母离子的M/Z值为451.7815，+2y2子离子的M/Z值为234.144832；
(115)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.21所示多肽片段的母离子的M/Z值为451.7815，+2b2子离子的M/Z值为243.133933；
(116)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.22所示多肽片段的母离子的M/Z值为829.8941，+2y7子离子的M/Z值为862.394124；
(117)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.22所示多肽片段的母离子的M/Z值为829.8941，+2y6子离子的M/Z值为761.346445；
(118)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.22所示多肽片段的母离子的M/Z值为829.8941，+2y5子离子的M/Z值为575.267132；
(119)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.22所示多肽片段的母离子的M/Z值为829.8941，+2b2子离子的M/Z值为253.093131；
(120)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.22所示多肽片段的母离子的M/Z值为829.8941，+2b3子离子的M/Z值为366.177195；
(121)源自蛋白CPN2的SEQ ID No.22所示多肽片段的母离子的M/Z值为829.8941，+2b5子离子的M/Z值为570.267073；
(122)源自蛋白ALS的SEQ ID No.23所示多肽片段的母离子的M/Z值为727.9401，+2y12子离子的M/Z值为1114.661906；
(123)源自蛋白ALS的SEQ ID No.23所示多肽片段的母离子的M/Z值为727.9401，+2y10子离子的M/Z值为972.587679；
(124)源自蛋白ALS的SEQ ID No.23所示多肽片段的母离子的M/Z值为727.9401，+2y9子离子的M/Z值为873.519265；
(125)源自蛋白ALS的SEQ ID No.23所示多肽片段的母离子的M/Z值为727.9401，+2y8子离子的M/Z值为802.482151；
(126)源自蛋白ALS的SEQ ID No.23所示多肽片段的母离子的M/Z值为727.9401，+2b2子离子的M/Z值为228.134267；
(127)源自蛋白ALS的SEQ ID No.23所示多肽片段的母离子的M/Z值为727.9401，+2b3子离子的M/Z值为341.218332；
(128)源自蛋白ALS的SEQ ID No.24所示多肽片段的母离子的M/Z值为835.9774，+2y11子离子的M/Z值为1217.652464；
(129)源自蛋白ALS的SEQ ID No.24所示多肽片段的母离子的M/Z值为835.9774，+2y10子离子的M/Z值为1088.609871；
(130)源自蛋白ALS的SEQ ID No.24所示多肽片段的母离子的M/Z值为835.9774，+2y9子离子的M/Z值为973.582928；
(131)源自蛋白ALS的SEQ ID No.24所示多肽片段的母离子的M/Z值为835.9774，+2y8子离子的M/Z值为872.535249；
(132)源自蛋白ALS的SEQ ID No.24所示多肽片段的母离子的M/Z值为835.9774，+2y7子离子的M/Z值为725.466835；
(133)源自蛋白ALS的SEQ ID No.24所示多肽片段的母离子的M/Z值为835.9774，+2b3子离子的M/Z值为228.134267；
(134)源自蛋白SEPP1的SEQ ID No.25所示多肽片段的母离子的M/Z值为528.7535，+2y6子离子的M/Z值为826.445765；
(135)源自蛋白SEPP1的SEQ ID No.25所示多肽片段的母离子的M/Z值为528.7535，+2y5子离子的M/Z值为679.377351；
(136)源自蛋白SEPP1的SEQ ID No.25所示多肽片段的母离子的M/Z值为528.7535，+2y4子离子的M/Z值为566.293287；
(137)源自蛋白SEPP1的SEQ ID No.25所示多肽片段的母离子的M/Z值为528.7535，+2y3子离子的M/Z值为453.209223；
(138)源自蛋白SEPP1的SEQ ID No.25所示多肽片段的母离子的M/Z值为528.7535，+2b2子离子的M/Z值为231.061162；
(139)源自蛋白SEPP1的SEQ ID No.25所示多肽片段的母离子的M/Z值为528.7535，+2b3子离子的M/Z值为378.129576；
(140)源自蛋白SEPP1的SEQ ID No.26所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.7931，+2y9子离子的M/Z值为985.4949；
(141)源自蛋白SEPP1的SEQ ID No.26所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.7931，+2y8子离子的M/Z值为888.442137；
(142)源自蛋白SEPP1的SEQ ID No.26所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.7931，+2y7子离子的M/Z值为787.394458；
(143)源自蛋白SEPP1的SEQ ID No.26所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.7931，+2y6子离子的M/Z值为672.367515；
(144)源自蛋白SEPP1的SEQ ID No.26所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.7931，+2y4子离子的M/Z值为456.292893；
(145)源自蛋白SEPP1的SEQ ID No.26所示多肽片段的母离子的M/Z值为549.7931，+2y3子离子的M/Z值为343.208829；
(146)源自蛋白LUM的SEQ ID No.27所示多肽片段的母离子的M/Z值为834.9332，+2y10子离子的M/Z值为1176.637148；
(147)源自蛋白LUM的SEQ ID No.27所示多肽片段的母离子的M/Z值为834.9332，+2y9子离子的M/Z值为1063.553084；
(148)源自蛋白LUM的SEQ ID No.27所示多肽片段的母离子的M/Z值为834.9332，+2y8子离子的M/Z值为948.526141；
(149)源自蛋白LUM的SEQ ID No.27所示多肽片段的母离子的M/Z值为834.9332，+2y6子离子的M/Z值为748.410049；
(150)源自蛋白LUM的SEQ ID No.27所示多肽片段的母离子的M/Z值为834.9332，+2b2子离子的M/Z值为201.123368；
(151)源自蛋白LUM的SEQ ID No.27所示多肽片段的母离子的M/Z值为834.9332，+2b3子离子的M/Z值为330.165962；
(152)源自蛋白LUM的SEQ ID No.28所示多肽片段的母离子的M/Z值为979.0539，+2y6子离子的M/Z值为766.372994；
(153)源自蛋白LUM的SEQ ID No.28所示多肽片段的母离子的M/Z值为979.0539，+2y5子离子的M/Z值为603.309666；
(154)源自蛋白LUM的SEQ ID No.28所示多肽片段的母离子的M/Z值为979.0539，+2y4子离子的M/Z值为490.225602；
(155)源自蛋白LUM的SEQ ID No.28所示多肽片段的母离子的M/Z值为979.0539，+2y7+2子离子的M/Z值为440.232167；
(156)源自蛋白LUM的SEQ ID No.28所示多肽片段的母离子的M/Z值为979.0539，+2b4子离子的M/Z值为355.197596；
(157)源自蛋白LUM的SEQ ID No.28所示多肽片段的母离子的M/Z值为979.0539，+2b5子离子的M/Z值为468.28166；
(158)源自蛋白FBLN3的SEQ ID No.29所示多肽片段的母离子的M/Z值为538.803，+2y7子离子的M/Z值为834.47198；
(159)源自蛋白FBLN3的SEQ ID No.29所示多肽片段的母离子的M/Z值为538.803，+2y6子离子的M/Z值为737.419216；
(160)源自蛋白FBLN3的SEQ ID No.29所示多肽片段的母离子的M/Z值为538.803，+2y2子离子的M/Z值为310.176132；
(161)源自蛋白FBLN3的SEQ ID No.29所示多肽片段的母离子的M/Z值为538.803，+2y8+2子离子的M/Z值为474.28166；
(162)源自蛋白FBLN3的SEQ ID No.29所示多肽片段的母离子的M/Z值为538.803，+2b2子离子的M/Z值为243.133933；
(163)源自蛋白FBLN3的SEQ ID No.30所示多肽片段的母离子的M/Z值为867.45，+3y9子离子的M/Z值为1099.553084；
(164)源自蛋白FBLN3的SEQ ID No.30所示多肽片段的母离子的M/Z值为867.45，+3y7子离子的M/Z值为865.452642；
(165)源自蛋白FBLN3的SEQ ID No.30所示多肽片段的母离子的M/Z值为867.45，+3y5子离子的M/Z值为650.362036；
(166)源自蛋白FBLN3的SEQ ID No.30所示多肽片段的母离子的M/Z值为867.45，+3y4子离子的M/Z值为537.277972；
(167)源自蛋白ITLN1的SEQ ID No.31所示多肽片段的母离子的M/Z值为718.3724，+3y8子离子的M/Z值为982.535643；
(168)源自蛋白ITLN1的SEQ ID No.31所示多肽片段的母离子的M/Z值为718.3724，+3y6子离子的M/Z值为755.408652；
(169)源自蛋白ITLN1的SEQ ID No.31所示多肽片段的母离子的M/Z值为718.3724，+3y5子离子的M/Z值为608.340238；
(170)源自蛋白ITLN1的SEQ ID No.31所示多肽片段的母离子的M/Z值为718.3724，+3y3子离子的M/Z值为438.23471；
(171)源自蛋白ITLN1的SEQ ID No.31所示多肽片段的母离子的M/Z值为718.3724，+3b2子离子的M/Z值为217.081898；
(172)源自蛋白ITLN1的SEQ ID No.32所示多肽片段的母离子的M/Z值为601.3037，+2y8子离子的M/Z值为925.489027；
(173)源自蛋白ITLN1的SEQ ID No.32所示多肽片段的母离子的M/Z值为601.3037，+2y7子离子的M/Z值为824.441349；
(174)源自蛋白ITLN1的SEQ ID No.32所示多肽片段的母离子的M/Z值为601.3037，+2y6子离子的M/Z值为753.404235；
(175)源自蛋白ITLN1的SEQ ID No.32所示多肽片段的母离子的M/Z值为601.3037，+2y5子离子的M/Z值为696.382771；
(176)源自蛋白ITLN1的SEQ ID No.32所示多肽片段的母离子的M/Z值为601.3037，+2y4子离子的M/Z值为549.314357；
(177)源自蛋白ITLN1的SEQ ID No.32所示多肽片段的母离子的M/Z值为601.3037，+2y3子离子的M/Z值为450.245943；
(178)源自蛋白F13A的SEQ ID No.33所示多肽片段的母离子的M/Z值为649.0229，+3y9子离子的M/Z值为1044.583656；
(179)源自蛋白F13A的SEQ ID No.33所示多肽片段的母离子的M/Z值为649.0229，+3y8子离子的M/Z值为930.540728；
(180)源自蛋白F13A的SEQ ID No.33所示多肽片段的母离子的M/Z值为649.0229，+3y7子离子的M/Z值为831.472314；
(181)源自蛋白F13A的SEQ ID No.33所示多肽片段的母离子的M/Z值为649.0229，+3y6子离子的M/Z值为730.424636；
(182)源自蛋白F13A的SEQ ID No.33所示多肽片段的母离子的M/Z值为649.0229，+3y4子离子的M/Z值为544.324194；
(183)源自蛋白F13A的SEQ ID No.33所示多肽片段的母离子的M/Z值为649.0229，+3b3子离子的M/Z值为271.140081；
(184)源自蛋白F13A的SEQ ID No.34所示多肽片段的母离子的M/Z值为844.4669，+2y11子离子的M/Z值为1156.657215；
(185)源自蛋白F13A的SEQ ID No.34所示多肽片段的母离子的M/Z值为844.4669，+2y10子离子的M/Z值为1057.588801；
(186)源自蛋白F13A的SEQ ID No.34所示多肽片段的母离子的M/Z值为844.4669，+2y8子离子的M/Z值为847.451973；
(187)源自蛋白F13A的SEQ ID No.34所示多肽片段的母离子的M/Z值为844.4669，+2y7子离子的M/Z值为748.383559；
(188)源自蛋白F13A的SEQ ID No.34所示多肽片段的母离子的M/Z值为844.4669，+2b3子离子的M/Z值为322.139747；
(189)源自蛋白F13A的SEQ ID No.34所示多肽片段的母离子的M/Z值为844.4669，+2b4子离子的M/Z值为435.223811；
(190)源自蛋白F13A的SEQ ID No.35所示多肽片段的母离子的M/Z值为663.9158，+2y8子离子的M/Z值为926.592095；
(191)源自蛋白F13A的SEQ ID No.35所示多肽片段的母离子的M/Z值为663.9158，+2y7子离子的M/Z值为825.544417；
(192)源自蛋白F13A的SEQ ID No.35所示多肽片段的母离子的M/Z值为663.9158，+2y6子离子的M/Z值为712.460353；
(193)源自蛋白F13A的SEQ ID No.35所示多肽片段的母离子的M/Z值为663.9158，+2b3子离子的M/Z值为288.155397；
(194)源自蛋白CFAD的SEQ ID No.36所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.1，+4y7子离子的M/Z值为830.498195；
(195)源自蛋白CFAD的SEQ ID No.36所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.1，+4y6子离子的M/Z值为717.414131；
(196)源自蛋白CFAD的SEQ ID No.36所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.1，+4y4子离子的M/Z值为476.271489；
(197)源自蛋白CFAD的SEQ ID No.36所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.1，+4y3子离子的M/Z值为363.187425；
(198)源自蛋白CFAD的SEQ ID No.36所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.1，+4b8子离子的M/Z值为832.394792；
(199)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.37所示多肽片段的母离子的M/Z值为770.8675，+2y10子离子的M/Z值为1111.541851；
(200)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.37所示多肽片段的母离子的M/Z值为770.8675，+2y9子离子的M/Z值为1010.494172；
(201)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.37所示多肽片段的母离子的M/Z值为770.8675，+2y8子离子的M/Z值为863.425758；
(202)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.37所示多肽片段的母离子的M/Z值为770.8675，+2y7子离子的M/Z值为762.37808；
(203)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.37所示多肽片段的母离子的M/Z值为770.8675，+2y6子离子的M/Z值为576.298767；
(204)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.37所示多肽片段的母离子的M/Z值为770.8675，+2y5子离子的M/Z值为475.251088；
(205)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.38所示多肽片段的母离子的M/Z值为865.0471，+3y10子离子的M/Z值为1155.500003；
(206)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.38所示多肽片段的母离子的M/Z值为865.0471，+3y6子离子的M/Z值为738.368184；
(207)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.38所示多肽片段的母离子的M/Z值为865.0471，+3y4子离子的M/Z值为455.236107；
(208)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.38所示多肽片段的母离子的M/Z值为865.0471，+3y3子离子的M/Z值为341.193179；
(209)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.38所示多肽片段的母离子的M/Z值为865.0471，+3b2子离子的M/Z值为229.118283；
(210)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.38所示多肽片段的母离子的M/Z值为865.0471，+3b3子离子的M/Z值为389.148932；
(211)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.39所示多肽片段的母离子的M/Z值为918.4785，+2y10子离子的M/Z值为1108.636085；
(212)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.39所示多肽片段的母离子的M/Z值为918.4785，+2y9子离子的M/Z值为1007.588407；
(213)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.39所示多肽片段的母离子的M/Z值为918.4785，+2y7子离子的M/Z值为759.472314；
(214)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.39所示多肽片段的母离子的M/Z值为918.4785，+2y6子离子的M/Z值为688.435201；
(215)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.39所示多肽片段的母离子的M/Z值为918.4785，+2y5子离子的M/Z值为589.366787；
(216)源自蛋白IGHA1的SEQ ID No.39所示多肽片段的母离子的M/Z值为918.4785，+2y5+2子离子的M/Z值为295.187031；
(217)源自蛋白APOA2的SEQ ID No.40所示多肽片段的母离子的M/Z值为784.0351，+3y8子离子的M/Z值为911.446888；
(218)源自蛋白APOA2的SEQ ID No.40所示多肽片段的母离子的M/Z值为784.0351，+3y7子离子的M/Z值为783.38831；
(219)源自蛋白APOA2的SEQ ID No.40所示多肽片段的母离子的M/Z值为784.0351，+3y5子离子的M/Z值为583.272218；
(220)源自蛋白APOA2的SEQ ID No.40所示多肽片段的母离子的M/Z值为784.0351，+3y3子离子的M/Z值为367.197596；
(221)源自蛋白APOA2的SEQ ID No.40所示多肽片段的母离子的M/Z值为784.0351，+3b7子离子的M/Z值为815.360381；
(222)源自蛋白APOA2的SEQ ID No.41所示多肽片段的母离子的M/Z值为486.7535，+2y7子离子的M/Z值为788.414859；
(223)源自蛋白APOA2的SEQ ID No.41所示多肽片段的母离子的M/Z值为486.7535，+2y6子离子的M/Z值为659.372266；
(224)源自蛋白APOA2的SEQ ID No.41所示多肽片段的母离子的M/Z值为486.7535，+2y5子离子的M/Z值为546.288202；
(225)源自蛋白APOA2的SEQ ID No.41所示多肽片段的母离子的M/Z值为486.7535，+2y2子离子的M/Z值为218.149918；
(226)源自蛋白APOA2的SEQ ID No.41所示多肽片段的母离子的M/Z值为486.7535，+2b3子离子的M/Z值为314.134661；
(227)源自蛋白AMBP的SEQ ID No.42所示多肽片段的母离子的M/Z值为511.2693，+2y6子离子的M/Z值为791.441014；
(228)源自蛋白AMBP的SEQ ID No.42所示多肽片段的母离子的M/Z值为511.2693，+2y5子离子的M/Z值为678.35695；
(229)源自蛋白AMBP的SEQ ID No.42所示多肽片段的母离子的M/Z值为511.2693，+2y4子离子的M/Z值为565.272886；
(230)源自蛋白AMBP的SEQ ID No.42所示多肽片段的母离子的M/Z值为511.2693，+2y3子离子的M/Z值为437.214309；
(231)源自蛋白AMBP的SEQ ID No.42所示多肽片段的母离子的M/Z值为511.2693，+2y2子离子的M/Z值为322.187366；
(232)源自蛋白AMBP的SEQ ID No.42所示多肽片段的母离子的M/Z值为511.2693，+2b2子离子的M/Z值为231.097548；
(233)源自蛋白AMBP的SEQ ID No.43所示多肽片段的母离子的M/Z值为960.4802，+2y9子离子的M/Z值为1063.614622；
(234)源自蛋白AMBP的SEQ ID No.43所示多肽片段的母离子的M/Z值为960.4802，+2y8子离子的M/Z值为934.572029；
(235)源自蛋白AMBP的SEQ ID No.43所示多肽片段的母离子的M/Z值为960.4802，+2y6子离子的M/Z值为708.476672；
(236)源自蛋白AMBP的SEQ ID No.43所示多肽片段的母离子的M/Z值为960.4802，+2y2子离子的M/Z值为272.171716；
(237)源自蛋白AMBP的SEQ ID No.43所示多肽片段的母离子的M/Z值为960.4802，+2y6+2子离子的M/Z值为354.741974；
(238)源自蛋白AMBP的SEQ ID No.43所示多肽片段的母离子的M/Z值为960.4802，+2b3子离子的M/Z值为347.101981；
(239)源自蛋白A1AG1的SEQ ID No.44所示多肽片段的母离子的M/Z值为584.9897，+3y8子离子的M/Z值为982.619647；
(240)源自蛋白A1AG1的SEQ ID No.44所示多肽片段的母离子的M/Z值为584.9897，+3y7子离子的M/Z值为835.551233；
(241)源自蛋白A1AG1的SEQ ID No.44所示多肽片段的母离子的M/Z值为584.9897，+3y6子离子的M/Z值为764.51412；
(242)源自蛋白A1AG1的SEQ ID No.44所示多肽片段的母离子的M/Z值为584.9897，+3y5子离子的M/Z值为627.455208；
(243)源自蛋白A1AG1的SEQ ID No.44所示多肽片段的母离子的M/Z值为584.9897，+3y4子离子的M/Z值为514.371144；
(244)源自蛋白A1AG1的SEQ ID No.44所示多肽片段的母离子的M/Z值为584.9897，+3b2子离子的M/Z值为263.139019；
(245)源自蛋白A1AG1的SEQ ID No.45所示多肽片段的母离子的M/Z值为570.2895，+3y9子离子的M/Z值为1052.525866；
(246)源自蛋白A1AG1的SEQ ID No.45所示多肽片段的母离子的M/Z值为570.2895，+3y5子离子的M/Z值为575.303518；
(247)源自蛋白A1AG1的SEQ ID No.45所示多肽片段的母离子的M/Z值为570.2895，+3y13+2子离子的M/Z值为704.869556；
(248)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.46所示多肽片段的母离子的M/Z值为830.7665，+3y9子离子的M/Z值为1159.52007；
(249)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.46所示多肽片段的母离子的M/Z值为830.7665，+3y8子离子的M/Z值为1031.461492；
(250)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.46所示多肽片段的母离子的M/Z值为830.7665，+3y7子离子的M/Z值为871.430844；
(251)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.46所示多肽片段的母离子的M/Z值为830.7665，+3y3子离子的M/Z值为383.24013；
(252)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.46所示多肽片段的母离子的M/Z值为830.7665，+3b3子离子的M/Z值为284.196868；
(253)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.46所示多肽片段的母离子的M/Z值为830.7665，+3b4子离子的M/Z值为397.280932；
(254)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.47所示多肽片段的母离子的M/Z值为575.3111，+2y8子离子的M/Z值为937.462538；
(255)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.47所示多肽片段的母离子的M/Z值为575.3111，+2y7子离子的M/Z值为823.41961；
(256)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.47所示多肽片段的母离子的M/Z值为575.3111，+2y6子离子的M/Z值为694.377017；
(257)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.47所示多肽片段的母离子的M/Z值为575.3111，+2y5子离子的M/Z值为595.308603；
(258)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.47所示多肽片段的母离子的M/Z值为575.3111，+2y3子离子的M/Z值为365.218332；
(259)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.47所示多肽片段的母离子的M/Z值为575.3111，+2b2子离子的M/Z值为213.159754；
(260)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.48所示多肽片段的母离子的M/Z值为686.287，+2y10子离子的M/Z值为1229.492535；
(261)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.48所示多肽片段的母离子的M/Z值为686.287，+2y9子离子的M/Z值为1082.424121；
(262)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.48所示多肽片段的母离子的M/Z值为686.287，+2y8子离子的M/Z值为981.376442；
(263)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.48所示多肽片段的母离子的M/Z值为686.287，+2y7子离子的M/Z值为852.333849；
(264)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.48所示多肽片段的母离子的M/Z值为686.287，+2y6子离子的M/Z值为692.3032；
(265)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.48所示多肽片段的母离子的M/Z值为686.287，+2y3子离子的M/Z值为333.176861；
(266)源自蛋白TFR1的SEQ ID No.49所示多肽片段的母离子的M/Z值为602.8197，+2y9子离子的M/Z值为1091.547999；
(267)源自蛋白TFR1的SEQ ID No.49所示多肽片段的母离子的M/Z值为602.8197，+2y8子离子的M/Z值为978.463935；
(268)源自蛋白TFR1的SEQ ID No.49所示多肽片段的母离子的M/Z值为602.8197，+2y7子离子的M/Z值为864.421007；
(269)源自蛋白TFR1的SEQ ID No.49所示多肽片段的母离子的M/Z值为602.8197，+2y6子离子的M/Z值为735.378414；
(270)源自蛋白TFR1的SEQ ID No.49所示多肽片段的母离子的M/Z值为602.8197，+2y5子离子的M/Z值为621.335487；
(271)源自蛋白TFR1的SEQ ID No.50所示多肽片段的母离子的M/Z值为886.4669，+2y11子离子的M/Z值为1184.558229；
(272)源自蛋白TFR1的SEQ ID No.50所示多肽片段的母离子的M/Z值为886.4669，+2y9子离子的M/Z值为941.472708；
(273)源自蛋白TFR1的SEQ ID No.50所示多肽片段的母离子的M/Z值为886.4669，+2y8+2子离子的M/Z值为422.71361；
(274)源自蛋白TFR1的SEQ ID No.50所示多肽片段的母离子的M/Z值为886.4669，+2b3子离子的M/Z值为376.223083；
(275)源自蛋白TFR1的SEQ ID No.50所示多肽片段的母离子的M/Z值为886.4669，+2b4子离子的M/Z值为489.307147；
(276)源自蛋白TRFE的SEQ ID No.51所示多肽片段的母离子的M/Z值为642.2882，+2y8子离子的M/Z值为934.441743；
(277)源自蛋白TRFE的SEQ ID No.51所示多肽片段的母离子的M/Z值为642.2882，+2y7子离子的M/Z值为771.378414；
(278)源自蛋白TRFE的SEQ ID No.51所示多肽片段的母离子的M/Z值为642.2882，+2y6子离子的M/Z值为714.35695；
(279)源自蛋白TRFE的SEQ ID No.51所示多肽片段的母离子的M/Z值为642.2882，+2y5子离子的M/Z值为551.293622；
(280)源自蛋白TRFE的SEQ ID No.51所示多肽片段的母离子的M/Z值为642.2882，+2y4子离子的M/Z值为450.245943；
(281)源自蛋白TRFE的SEQ ID No.51所示多肽片段的母离子的M/Z值为642.2882，+2b3子离子的M/Z值为350.134661；
(282)源自蛋白TRFE的SEQ ID No.52所示多肽片段的母离子的M/Z值为500.7529，+2y7子离子的M/Z值为837.43526；
(283)源自蛋白TRFE的SEQ ID No.52所示多肽片段的母离子的M/Z值为500.7529，+2y6子离子的M/Z值为724.351196；
(284)源自蛋白TRFE的SEQ ID No.52所示多肽片段的母离子的M/Z值为500.7529，+2y4子离子的M/Z值为538.287139；
(285)源自蛋白TRFE的SEQ ID No.52所示多肽片段的母离子的M/Z值为500.7529，+2y3子离子的M/Z值为409.244546；
(286)源自蛋白TRFE的SEQ ID No.52所示多肽片段的母离子的M/Z值为500.7529，+2y2子离子的M/Z值为246.181218；
(287)源自蛋白TRFE的SEQ ID No.52所示多肽片段的母离子的M/Z值为500.7529，+2b2子离子的M/Z值为277.154669；
(288)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.53所示多肽片段的母离子的M/Z值为487.6001，+3y5子离子的M/Z值为625.294016；
(289)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.53所示多肽片段的母离子的M/Z值为487.6001，+3y4子离子的M/Z值为462.230687；
(290)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.53所示多肽片段的母离子的M/Z值为487.6001，+3b6子离子的M/Z值为608.387856；
(291)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.53所示多肽片段的母离子的M/Z值为487.6001，+3b7子离子的M/Z值为737.43045；
(292)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.53所示多肽片段的母离子的M/Z值为487.6001，+3b8子离子的M/Z值为836.498864；
(293)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.54所示多肽片段的母离子的M/Z值为510.7591，+2y7子离子的M/Z值为777.425364；
(294)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.54所示多肽片段的母离子的M/Z值为510.7591，+2y6子离子的M/Z值为720.403901；
(295)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.54所示多肽片段的母离子的M/Z值为510.7591，+2y5子离子的M/Z值为605.376957；
(296)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.54所示多肽片段的母离子的M/Z值为510.7591，+2y4子离子的M/Z值为506.308544；
(297)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.54所示多肽片段的母离子的M/Z值为510.7591，+2y3子离子的M/Z值为435.27143；
(298)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.54所示多肽片段的母离子的M/Z值为510.7591，+2b3子离子的M/Z值为244.092797；
(299)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.55所示多肽片段的母离子的M/Z值为598.3089，+2y9子离子的M/Z值为920.483607；
(300)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.55所示多肽片段的母离子的M/Z值为598.3089，+2y8子离子的M/Z值为807.399543；
(301)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.55所示多肽片段的母离子的M/Z值为598.3089，+2y7子离子的M/Z值为660.33113；
(302)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.55所示多肽片段的母离子的M/Z值为598.3089，+2y5子离子的M/Z值为516.277637；
(303)源自蛋白TRFL的SEQ ID No.55所示多肽片段的母离子的M/Z值为598.3089，+2b2子离子的M/Z值为276.134267；
(304)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.56所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.8066，+2y9子离子的M/Z值为959.494506；
(305)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.56所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.8066，+2y8子离子的M/Z值为862.441743；
(306)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.56所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.8066，+2y7子离子的M/Z值为775.409714；
(307)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.56所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.8066，+2y5子离子的M/Z值为579.288536；
(308)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.56所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.8066，+2y4子离子的M/Z值为464.261593；
(309)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.56所示多肽片段的母离子的M/Z值为610.8066，+2b2子离子的M/Z值为262.118617；
(310)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.57所示多肽片段的母离子的M/Z值为748.343，+2y9子离子的M/Z值为1169.552038；
(311)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.57所示多肽片段的母离子的M/Z值为748.343，+2y8子离子的M/Z值为1009.52139；
(312)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.57所示多肽片段的母离子的M/Z值为748.343，+2y7子离子的M/Z值为862.452976；
(313)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.57所示多肽片段的母离子的M/Z值为748.343，+2y6子离子的M/Z值为734.394398；
(314)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.57所示多肽片段的母离子的M/Z值为748.343，+2b2子离子的M/Z值为327.133933；
(315)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.57所示多肽片段的母离子的M/Z值为748.343，+2b3子离子的M/Z值为487.164582；
(316)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.58所示多肽片段的母离子的M/Z值为833.4163，+3y11子离子的M/Z值为1180.541533；
(317)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.58所示多肽片段的母离子的M/Z值为833.4163，+3y9子离子的M/Z值为994.477476；
(318)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.58所示多肽片段的母离子的M/Z值为833.4163，+3y8子离子的M/Z值为923.440363；
(319)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.58所示多肽片段的母离子的M/Z值为833.4163，+3y7子离子的M/Z值为776.371949；
(320)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.58所示多肽片段的母离子的M/Z值为833.4163，+3y6子离子的M/Z值为663.287885；
(321)源自蛋白HEMO的SEQ ID No.58所示多肽片段的母离子的M/Z值为833.4163，+3y5子离子的M/Z值为503.257236；
(322)源自蛋白KLKB1的SEQ ID No.59所示多肽片段的母离子的M/Z值为730.3624，+2y11子离子的M/Z值为1112.533077；
(323)源自蛋白KLKB1的SEQ ID No.59所示多肽片段的母离子的M/Z值为730.3624，+2y10子离子的M/Z值为1055.511613；
(324)源自蛋白KLKB1的SEQ ID No.59所示多肽片段的母离子的M/Z值为730.3624，+2y9子离子的M/Z值为954.463935；
(325)源自蛋白KLKB1的SEQ ID No.59所示多肽片段的母离子的M/Z值为730.3624，+2y8子离子的M/Z值为826.405357；
(326)源自蛋白KLKB1的SEQ ID No.59所示多肽片段的母离子的M/Z值为730.3624，+2y7子离子的M/Z值为769.383893；
(327)源自蛋白KLKB1的SEQ ID No.59所示多肽片段的母离子的M/Z值为730.3624，+2y6子离子的M/Z值为682.351865；
进一步地，所述三重四级杆质谱仪，被配置为检测选自所述组A中的MRM母子离子对和由以下(328)-(369)所示的MRM母子离子对组成的组B中的MRM母子离子对：
(328)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.60所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.0551，+4y9子离子的M/Z值为1045.542519；
(329)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.60所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.0551，+4y8子离子的M/Z值为932.458455；
(330)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.60所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.0551，+4y6子离子的M/Z值为730.399484；
(331)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.60所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.0551，+4y4子离子的M/Z值为446.272158；
(332)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.60所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.0551，+4y3子离子的M/Z值为347.203744；
(333)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.60所示多肽片段的母离子的M/Z值为567.0551，+4b2子离子的M/Z值为215.102633；
(334)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.61所示多肽片段的母离子的M/Z值为681.3642，+2y9子离子的M/Z值为1062.557835；
(335)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.61所示多肽片段的母离子的M/Z值为681.3642，+2y8子离子的M/Z值为975.525807；
(336)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.61所示多肽片段的母离子的M/Z值为681.3642，+2y7子离子的M/Z值为904.488693；
(337)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.61所示多肽片段的母离子的M/Z值为681.3642，+2y6子离子的M/Z值为775.4461；
(338)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.61所示多肽片段的母离子的M/Z值为681.3642，+2y5子离子的M/Z值为662.362036；
(339)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.61所示多肽片段的母离子的M/Z值为681.3642，+2b2子离子的M/Z值为300.170653；
(340)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.62所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.3379，+2y9子离子的M/Z值为998.530558；
(341)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.62所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.3379，+2y7子离子的M/Z值为755.445037；
(342)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.62所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.3379，+2y5子离子的M/Z值为511.323859；
(343)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.62所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.3379，+2y2子离子的M/Z值为244.165568；
(344)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.62所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.3379，+2b2子离子的M/Z值为215.102633；
(345)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.62所示多肽片段的母离子的M/Z值为671.3379，+2b5子离子的M/Z值为587.230747；
(346)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.63所示多肽片段的母离子的M/Z值为729.3652，+2y11子离子的M/Z值为1176.549121；
(347)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.63所示多肽片段的母离子的M/Z值为729.3652，+2y10子离子的M/Z值为1061.522178；
(348)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.63所示多肽片段的母离子的M/Z值为729.3652，+2y9子离子的M/Z值为947.47925；
(349)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.63所示多肽片段的母离子的M/Z值为729.3652，+2y8子离子的M/Z值为832.452307；
(350)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.63所示多肽片段的母离子的M/Z值为729.3652，+2y7子离子的M/Z值为719.368243；
(351)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.63所示多肽片段的母离子的M/Z值为729.3652，+2y5子离子的M/Z值为563.278366；
(352)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.64所示多肽片段的母离子的M/Z值为879.4339，+2y11子离子的M/Z值为1245.585841；
(353)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.64所示多肽片段的母离子的M/Z值为879.4339，+2y9子离子的M/Z值为1075.480313；
(354)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.64所示多肽片段的母离子的M/Z值为879.4339，+2y8子离子的M/Z值为1018.458849；
(355)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.64所示多肽片段的母离子的M/Z值为879.4339，+2y3子离子的M/Z值为387.198659；
(356)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.64所示多肽片段的母离子的M/Z值为879.4339，+2b2子离子的M/Z值为214.118617；
(357)源自蛋白BGAL的SEQ ID No.64所示多肽片段的母离子的M/Z值为879.4339，+2b3子离子的M/Z值为400.19793；
(358)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.65所示多肽片段的母离子的M/Z值为582.319，+2y9子离子的M/Z值为1050.546602；
(359)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.65所示多肽片段的母离子的M/Z值为582.319，+2y8子离子的M/Z值为951.478188；
(360)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.65所示多肽片段的母离子的M/Z值为582.319，+2y7子离子的M/Z值为837.43526；
(361)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.65所示多肽片段的母离子的M/Z值为582.319，+2y6子离子的M/Z值为708.392667；
(362)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.65所示多肽片段的母离子的M/Z值为582.319，+2y5子离子的M/Z值为595.308603；
(363)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.65所示多肽片段的母离子的M/Z值为582.319，+2b2子离子的M/Z值为213.159754；
(364)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.66所示多肽片段的母离子的M/Z值为740.4014，+2y10子离子的M/Z值为1180.647319；
(365)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.66所示多肽片段的母离子的M/Z值为740.4014，+2y9子离子的M/Z值为1017.58399；
(366)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.66所示多肽片段的母离子的M/Z值为740.4014，+2y8子离子的M/Z值为960.562526；
(367)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.66所示多肽片段的母离子的M/Z值为740.4014，+2y7子离子的M/Z值为813.494113；
(368)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.66所示多肽片段的母离子的M/Z值为740.4014，+2y6子离子的M/Z值为685.435535；
(369)源自蛋白ALBU的SEQ ID No.66所示多肽片段的母离子的M/Z值为740.4014，+2b3子离子的M/Z值为300.155397。
6.一种对待测样本中的权利要求1-3任一中所述的32个目标蛋白中的全部或部分进行检测的方法，包括使用权利要求5所述三重四级杆质谱仪从所述待测样本生成质谱的步骤。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：
(a1)从待测样本中提取蛋白，酶解；
(a2)将(a1)酶解后样本进行液相色谱分离；
(a3)使用权利要求5所述三重四级杆质谱仪对(a2)分离后样本进行检测生成质谱。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于：所述待测样本为离体血浆样本；所述离体血浆样本来自健康人或者结直肠癌患者或者结直肠腺瘤患者。
9.用于筛查结直肠癌和/或结直肠腺瘤的系统，包括权利要求5所述的三重四级杆质谱仪和控制装置；
所述控制装置被配置或被编程以执行下述步骤：
接收采用权利要求6-8中任一所述方法对待筛查者的血浆样本进行检测所得的原始质谱数据；
从所述原始质谱数据中获得所述待筛查者的所述目标蛋白的相对定量值；
将所述待筛查者的所述目标蛋白的相对定量值与所述目标蛋白的判断阈值进行比较，获得比较结果；
根据预定判定条件对所述比较结果进行判定，判定符合所述预定判定条件的所述待筛查者为或候选为结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者，判定不符合所述预定判定条件的所述待筛查者不为或候选不为结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者，并输出判定结果。
10.根据权利要求9所述的系统，其特征在于：所述目标蛋白的判断阈值根据所述健康人与结直肠癌患者和/或结直肠腺瘤患者的所述目标蛋白的ROC曲线及约登指数最大时所对应的相对定量值为阈值；
所述健康人的所述目标蛋白的相对定量值按照包括如下步骤的方法获得：1)采用权利要求6-8中任一所述方法对健康人及结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者的血浆样本进行检测，得到原始质谱数据；2)从所述原始质谱数据中获得所述健康人及结直肠癌和/或结直肠腺瘤患者的所述目标蛋白的相对定量。
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