CN112842956B - 紫花香茅用于调理肌肤的用途 - Google Patents

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Abstract

一种紫花香茅汁液的用途，其是用于制备改善肌肤的用途。其中，所述紫花香茅汁液是由含水的溶剂进行提取。

Description

紫花香茅用于调理肌肤的用途
技术领域
本发明涉及一种紫花香茅汁液的用途，特别是关于紫花香茅汁液用于制备改善肌肤组合物的用途。其中，所述改善肌肤包含肌肤抗氧化能力的提升、抗醣化能力的提升、肌肤紧致的提升、减缓肌肤泛红与紧致肌肤毛孔。
背景技术
紫花香茅(学名：Moslachinensis Maxim.)又称为石香薷、香薷、细叶香藿，唇形科石荠苎属下的一个种。紫花香茅为一年生草本植物，主要分布于亚洲，其茎高9-4公分、花冠紫红，可用于治疗中暑发热、胃痛呕吐、急性肠胃炎及消化不良。
肌肤老化可以分为内源性和外源性。高达70％属外源性衰老，而其最主要的诱因是紫外线所造成的光老化；而有30％属于内源性衰老。而此30％中，仅10％是源自于人体自然老化，另外20％则受到体内或外来因子所产生的醣化及氧化反应，进而造成肌肤损伤及老化。
而日常生活中过度摄取醣类，是导致身体醣化的主要原因。这些多余的醣类和体内的蛋白质结合后，会在体温的加热之下引起醣化反应，进而产生醣化蛋白及醣化终产物(Advanced Glycation Endproducts,AGEs)。AGEs会蓄积在身体里面，造成氧化压力，导致肌肤出现慢性发炎现象，肌肤中的胶原蛋白结构也产生受损、断裂的情形，皱纹与松弛等老化问题也随之产生。
发明内容
因此，为了解决肌肤老化及改善肌肤状况，并拓展紫花香茅的开发与应用，故而提出一种紫花香茅汁液及调理肌肤的组合物，其可应用于制备肌肤抗氧化能力的提升、抗醣化能力的提升、肌肤紧致的提升、减缓肌肤泛红及紧致肌肤毛孔组合物的用途。
一些实施例中，紫花香茅汁液可以抑制最终醣化产物(Adavanced GlycationEndproducts,AGEs)的生成。在一些实施例中，紫花香茅汁液可以提升肌肤的抗醣化能力。
在一些实施例中，紫花香茅汁液可透过提升肌肤的抗醣化能力以达到维持皮肤紧致功效。在一些实施例中，紫花香茅汁液可以减缓或防止肌肤松弛。
在一些实施例中，紫花香茅汁液可以维持肌肤紧致，且其中所述紫花香茅汁液是以一种含水的溶剂进行提取。
在一些实施例中，紫花香茅汁液可以清除细胞中自由基，其中所述紫花香茅汁液是以一种含水的溶剂进行提取。在一些实施例中，所述细胞为皮肤细胞。
在一些实施例中，紫花香茅汁液可以降低自由基对肌肤细胞的破坏，以达到提升肌肤抗氧化能力的用途。
在一些实施例中，紫花香茅汁液可以抑制、减缓或降低细胞内自由基或过氧化物的形成。
在一些实施例中，紫花香茅汁液可以紧致肌肤毛孔，且其中所述紫花香茅汁液是以一种含水的水溶剂进行提取。
在一些实施例中，紫花香茅汁液的浓度为0.5wt％。
在一些实施例中，紫花香茅汁液的白利糖度(Degrees Brix)值为10.0以上。
在一些实施例中，紫花香茅汁液的总黄酮量为12000ppm以上。
在一些实施例中，一种紫花香茅汁液用于制备改善或/及调理肌肤状态的组合物的用途，其中所述紫花香茅汁液是以一种含水的溶剂进行提取。
在一些实施例中，一种紫花香茅汁液用于制备减缓肌肤泛红的组合物的用途，其中所述紫花香茅汁液是以一种含水的溶剂进行提取。
在一些实施例中，一种紫花香茅汁液用于制备舒缓肌肤泛红的组合物的用途，其中所述紫花香茅汁液是以一种含水的溶剂进行提取。
在一些实施例中，一种紫花香茅汁液用于制备紧致肌肤毛孔的组合物的用途，其中所述紫花香茅汁液是以一含水的溶剂进行提取。
在一些实施例中，一种紫花香茅汁液用于制备紧致肌肤、减缓皮肤、或防止肌肤松弛的组合物的用途，其中所述紫花香茅汁液是以一含水的溶剂进行提取。
附图说明
图1是一实施例的紫花香茅汁液制备方法流程图。
图2是范例三中实验组与控制组的最终醣化蛋白相对生成量比例图。
图3是范例四中实验组、对照组及控制组受双氧水刺激后自由基生成量比较图。
图4是范例五中使用含本发明的紫花香茅汁液的精华液与使用安慰剂精华液于第2周的肌肤泛红比较图。
图5是范例五中使用含本发明的紫花香茅汁液的精华液与使用安慰剂精华液于第2周的肌肤松弛程度比较图。
图6是范例八中使用含本发明的紫花香茅汁液的精华液与使用安慰剂精华液于第2周的肌肤毛孔量比较图。
具体实施方式
以下将描述本案的部分具体实施态样。在不背离本案精神下，本案尚可以多种不同形式的态样来实践，不应将保护范围限于说明书所具体陈述的条件。
本案使用Excel软件进行统计分析。数据以平均值±标准偏差(SD)表示，各组之间的差异以学生t检验(student’s t-test)进行分析。图式中「*」代表p值小于0.05，「**」代表p值小于0.01，以及「***」代表p值小于0.001。当「*」越多时，代表统计上的差异越显著。
本文中所使用数值为近似值，所有实验数据皆表示在正负10％的范围内，最佳为在正负5％的范围内。
本文中的「wt％」是指重量百分比，而「vol％」是指体积百分比。
如本文中所使用，术语「汁液」是指藉由提取作用所制备的产物。所述汁液可以溶于溶剂中之溶液形式呈现，或汁液可为不含或大体上不含溶剂的浓缩物或精华呈现。
如本文所用「紫花香茅原料」通常是指整株植物，其中整株植物可包含原始、经干燥或以其他物理方式加工以利于处理的整株植物，其可进一步包含完整、剁碎、切丁、碾磨、研磨或以其他方式经加工以影响原物料的大小及实体完整性的整株植物。
参考图1。在一些实施例中，一种紫花香茅汁液，其是由一种含水的溶剂对紫花香茅原料进行提取。在一些实施例中，紫花香茅汁液(Moslachinensis Maxim.extract)是将紫花香茅原料依序进行粉碎程序S01、加热程序S02、过滤程序S03、及浓缩程序S04后得到。
在一些实施例中，紫花香茅原料可以是整株植物。在一些实施例中，紫花香茅原料可以是新鲜或干燥的整株紫花香茅。
在一些实施例中，粉碎程序S01是指将紫花香茅原料搅打至分裂为粉碎状。举例而言，粉碎可以采用果汁机、调理机或均质机。
在一些实施例中，加热程序S02是指将粉碎状的紫花香茅原料与含水的溶剂混合后加热一段固定时间。在一些实施例中，加热是指将紫花香茅原料与含水的溶剂的温度提升到50℃～100℃。在一些实施例中，一段固定时间是指0.5小时到3小时。举例而言，将紫花香茅原料与含水的溶剂的温度提升到85℃进行提取1小时。
在一些实施例中，加热程序S02中的重量比例(含水的溶剂：紫花香茅原料)为5：1～20：1。举例而言，含水的溶剂：紫花香茅原料为10:1。
举例而言，采用90公斤重的紫花香茅原料、900公斤重的水及0.63公斤重的柠檬酸混合后持续加热到100℃，并维持100℃持续0.5小时。举例而言，采用90公斤重的紫花香茅原料、900公斤重的水及0.7公斤重的柠檬酸混合后持续加热到85℃，并维持85℃持续1小时。
在一些实施例中，过滤程序S03是指将经加热程序S02后的紫花香茅原料及溶剂通过筛网以将溶剂内的固体滤除形成过滤液。举例而言，筛网可以是400网目(mesh)的筛网。
在一些实施例中，加热程序S02与过滤程序S03之间还包括降温程序，其中所述降温程序是指将加热后的紫花香茅原料及溶剂静置以自然降温至室温。
在一些实施例中，浓缩程序S04是指将过滤程序S03所得到的过滤液进行减压浓缩(厂牌/型号：BUCHI-Rotavapor R-100)以得到初萃液。在一些实施例中，浓缩程序S04所得的初萃液可即为紫花香茅汁液。在浓缩程序S04的一些实施例中，在40℃～70℃之间进行减压浓缩。举例而言，紫花香茅汁液是将紫花香茅原料依序进行粉碎程序S01、加热程序S02、过滤程序S03及浓缩程序S04后得到。
在一些实施例，紫花香茅汁液用于制备抗醣化组合物的用途，且紫花香茅汁液是以一种含水的溶剂进行提取。
在一些实施例中，紫花香茅汁液用于制备抗氧化组合物的用途，且紫花香茅汁液是以一种含水的溶剂进行提取。
在一些实施例中，抗氧化是指减缓或防止氧化作用。而氧化是一种使电子自物质转移至氧化剂的化学反应，过程中可生成自由基，进而启动链反应。当链反应发生于细胞中，细胞易受到破坏或凋亡。在一些实施例中，紫花香茅汁液能去除自由基，终止连锁反应并且抑制其它氧化反应。在一些实施例中，自由基的产生是因为光照、化学物质、或生物体自然衰老的过程中所产生。在一些实施例中，前述化学物质包含醣化终产物。
如前所述，超氧化物(Superoxide Anion)与过氧化氢(Hydrogen Peroxide)等自由基会导致皮肤细胞受损。其中，紫花香茅汁液能降低去除自由基，举例而言，其可促进抗氧化相关基因的表现，提升其所转录出的蛋白质(超氧化物歧化酶)，进而增加超氧化物分解为过氧化氢的量。
在一些实施例中，0.125mg/ml以上的紫花香茅汁液可透过清除细胞内自由基，达到抗氧化的功效。
在一些实施例中，白利糖度(Degrees Brix)值为10.0以上的紫花香茅汁液可透过清除细胞内自由基，达到抗氧化的功效。
在一些实施例中，浓度为0.5wt％以上的紫花香茅汁液可以用于减缓肌肤泛红。在一些实施例中，所述肌肤泛红是因肌肤发炎所造成。在一些实施例中，浓度为0.5wt％以上的紫花香茅汁液可以用于舒缓肌肤泛红。
在一些实施例中，白利糖度(Degrees Brix)值为10.0以上的紫花香茅汁液可以用于舒缓肌肤泛红及/或减缓肌肤泛红。
玻尿酸(hyaluronic acid,HA)存在于人体的结缔组织及真皮层中，是一种透明的胶状物质，负责结合及保留肌肤中的水分子。而皮肤中的玻尿酸占超过50％的人体玻尿酸，且其为细胞外间质的主要成分，可维持皮肤本身的弹性。随着年龄的增长，人体内的玻尿酸会逐渐流失，30岁时皮肤中的玻尿酸含量会剩下不到六成的含量。而此造成皮肤产生空隙，进而逐渐失去弹力而老化。
在一些实施例中，浓度为0.5wt％以上的紫花香茅汁液可以用于改善肌肤松弛。
在一些实施例中，浓度为0.5wt％以上的紫花香茅汁液可以用于提升肌肤紧致程度。
在一些实施例中，浓度为0.5wt％以上的紫花香茅汁液可以用于紧致肌肤毛孔。
在一些实施例中，前述的组合物可为医药品。换言之，此医药品包含有有效含量的紫花香茅汁液。换言之，此医药品包含有有效含量的紫花香茅汁液。
在一些实施例中，前述的医药品可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成一适合于经肠道或口服的投药剂型。这些投药剂型包括，但不限于：锭剂(tablet)、片剂(troche)、口含锭(lozenge)、丸剂(pill)、胶囊(capsule)、分散性粉末(dispersiblepowder)或细颗粒(granule)、溶液、悬浮液(suspension)、乳剂(emulsion)、糖浆(syrup)、酏剂(elixir)、浓浆(slurry)以及类似物。
在一些实施例中，前述的医药品可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成一适合于非经肠道地(parenterally)或局部地(topically)投药的剂型，这些投药剂型包括，但不限于：注射品(injection)、无菌的粉末(sterile powder)、外部制剂(externalpreparation)以及类似物。在一些实施例中，所述医药品可以一选自于由下列所构成群组中的非经肠道途径(parenteral routes)来投药：皮下注射(subcutaneous injection)、表皮内注射(intraepidermal injection)、皮内注射(intradermal injection)以及病灶内注射(intralesional injection)。
在一些实施例中，医药品可进一步包含有被广泛地使用于药物制造技术的医药上可接受的载剂(pharmaceutically acceptable carrier)。例如，医药上可接受的载剂可包含下列的试剂中一种或多种：溶剂(solvent)、缓冲液(buffer)、乳化剂(emulsifier)、悬浮剂(suspending agent)、分解剂(decomposer)、崩解剂(disintegrating agent)、分散剂(dispersing agent)、黏结剂(binding agent)、赋形剂(excipient)、安定剂(stabilizingagent)、螯合剂(chelating agent)、稀释剂(diluent)、胶凝剂(gelling agent)、防腐剂(preservative)、润湿剂(wetting agent)、润滑剂(lubricant)、吸收延迟剂(absorptiondelaying agent)、脂质体(liposome)以及类似物。有关这些试剂的选用与数量是落在熟习此项技术人士的专业素养与例行技术范畴内。
在一些实施例中，医药上可接受的载剂包含有一选自于由下列所构成群组中的溶剂：水、生理盐水(normal saline)、磷酸盐缓冲生理盐水(phosphate buffered saline,PBS)、含有醇的水性溶液(aqueous solution containing alcohol)。
在一些实施例中，前述的组合物可为可食用组合物。在一些实施例中，此可食用组合物可以制成食品产品或可为食品添加物(food additive)，意即藉由现有技术方法于食材制备时添加而制得食品产品，或是于食品产品的制作过程中添加。于此，食品产品可以是与可食性材料配制成供人类或动物摄食的产品。
在一些实施例中，食品产品可为但不限于：饮料(beverages)、发酵食品(fermented foods)、烘培产品(bakery products)、健康食品(health foods)以及膳食补充品(dietary supplements)。
在一些实施例中，前述组合物可为保养品组合物。在一些实施例中，此保养品组合物可为但不限于化妆水、凝胶、精华液、乳液、乳霜、洗脸或沐浴产品、防晒产品、美白产品、香膏、软膏、面膜。
范例一：本发明之制备-紫花香茅汁液的制备
粉碎程序中将紫花香茅整株植物作为紫花香茅原料并进行粉碎。于此，采用osterizer品牌的10speed blender进行粉碎。接着，加热程序中以水为溶剂，将粉碎后的紫花香茅原料与水以1:15的重量比例混合后在85±5℃下提取30分钟。于此，提取可以是将紫花香茅原料浸泡在水中。后续，降温程序将粉碎后的紫花香茅原料与水降温到室温(25℃)。此后，过滤程序将降温后的紫花香茅原料及水通过400网目的筛网以形成过滤液。接着，于60℃下对过滤液进行减压浓缩而得本发明的紫花香茅汁液。
范例二：定量实验-紫花香茅汁液总黄酮定量实验
将范例一中所得到的紫花香茅汁液以水，依其体积做10倍稀释后，取200μL到试管中。于此试管内加入1000μL的水混合均匀后再加入200μL 5wt％亚硝酸钠(购自Sigma，商品编号31443)水溶液，混合均匀后静置反应6分钟。
接着，加入200μL 10wt％硝酸铝(购自Alfa Aesar，商品编号12360)水溶液，混合均匀后静置反应6分钟，再加入2mL 4wt％氢氧化钠水溶液(氢氧化钠购自Macron，产品编号7708-10)，使其混合均匀。最后再加入1.4mL的水于试管中并混合均匀得到反应液，取试管中200μL反应液至96孔反应盘中，以分光亮度计(Jasco，型号V-730)于500nm的波长下侦测吸光值。
接着配制标准品以制作检量线。本案以芸香素(rutin，购自ChromaDex，商品编号ASB-00018440)当量作为总黄酮相对含量的表示。先配制200μg/mL的芸香素甲醇溶液，作为芸香素标准液。取所述芸香素标准液0μL、200μL、400μL、600μL、800μL、1000μL及1200μL分别加入至不同试管中，再于所述些试管中加入水，使其各试管内的总体积为1200μL。于此试管内加入200μL 5wt％亚硝酸钠水溶液，混合均匀后静置反应6分钟。接着加入200μL 10wt％硝酸铝水溶液，混合均匀后静置反应6分钟，再加入2mL 4wt％氢氧化钠水溶液，使其混合均匀。最后再加入1.4mL的水于此试管中并混合均匀得到反应液，取试管中200μL反应液至96孔反应盘中，以分光亮度计于500nm的波长下检测吸光值。将六种不同浓度的芸香素溶液依相同方式所测得的吸光值，绘制成检量线。
接着，利用检量线将稀释后的紫花香茅汁液的吸光值换算成总黄酮含量。于此，可推算出稀释前的紫花香茅汁液(即范例一中所得到的紫花香茅汁液)的总黄酮含量为12000ppm。
已知黄酮并非为本案所述改善肌肤状态或抗氧化的活性成分，但由于已知黄酮可具有其他例如预防心血管疾病等的用途，而由本案提取方式所得的紫花香茅汁液具有高总黄酮含量，故本案的紫花香茅汁液可具有多种复合用途。此外，在一些实施例中，此总黄酮含量亦可作为浓缩终点的判断基准。
范例三：试管实验-抗醣化试验
当蛋白质经醣化反应后将生成多种醣化终产物(Advanced glycation endproducts，AGEs)，其为不可还原的物质，并改变及影响蛋白质的正常功能，导致胶原蛋白硬化、产生斑点、造成肌肤松弛、肌肤机能降低。因此，若能抑止胶原蛋白醣化则可防止胶原蛋白链断裂，并降低胶原蛋白的流失速度、推迟肌肤老化与松弛。而为确认紫花香茅汁液是否具有抑止胶原蛋白醣化的功效，进行胶原蛋白醣化量测试如下。
样品配制：
使用前述范例一中所制得的紫花香茅汁液，以浓度200mM的磷酸盐缓冲生理盐水(Phosphate-Buffered Saline，PBS，是以NaH2PO3(Honeywell，#04269)、Na2HPO4(Sigma，#V900061)与水配制而成，其pH值为7.4)作为溶剂，配制出浓度为10mg/mL的紫花香茅汁液溶液。
使用前述浓度200mM的磷酸盐缓冲生理盐水以及胶原蛋白粉末(胶原蛋白购自Rousselot，型号#P2000HD)，配制浓度为60mg/mL的胶原蛋白溶液。另加入迭氮化钠于胶原蛋白溶液中，使胶原蛋白溶液中含有0.06wt％的迭氮化钠。(迭氮化钠购自Sigma，#S2002)
使用前述浓度200mM的磷酸盐缓冲生理盐水与果糖(果糖购自Sigma，#F0127)，配制浓度为1.5M的果糖溶液。
胶原蛋白醣化测试：
将前述的紫花香茅汁液溶液0.2mL，与0.2mL前述胶原蛋白溶液以及0.2mL前述果糖溶液进行混合，配制出样品溶液。
将0.2mL的去离子水与0.2mL前述胶原蛋白溶液以及0.2mL前述果糖溶液进行混合，配制出空白溶液作为控制组。
将样品溶液以及空白溶液于进行胶原蛋白醣化反应前，使用分光荧光计(spectrofluorometer，厂商/型号：BioTekFLx 800)测量其荧光强度(激发波长360nm，放射波长460nm)。
将样品溶液以及空白溶液置于50℃反应24小时，使各溶液进行胶原蛋白醣化反应。
将反应后的样品溶液以及空白溶液，同样以分光荧光计测量其荧光强度(激发波长360nm，放射波长460nm)。
依下列公式计算蛋白质醣化终产物相对生成率：
[(样品荧光强度反应后-样品荧光强度反应前)/(控制组荧光强度反应后-控制组荧光强度反应前)]×100％
样品相对于控制组的蛋白质醣化终产物相对生成率显示于图2。
如图2所示，在经本发明的紫花香茅汁液处理后，醣化终产物的生成率降低，显示本发明的紫花香茅汁液具有抑止胶原蛋白的醣化终产物产生的效果。其中，样品溶液中的蛋白质醣化终产物相对生成率仅为控制组的33％。显示本发明的紫花香茅汁液确实可抑止胶原蛋白的醣化反应，减少醣化终产物的生成，进而降低体内胶原蛋白的流失，达到减缓肌肤老化及肌肤机能丧失的功效。
范例四：细胞实验-抑制ROS生成
于此，以荧光探针DCFH-DA配合流式细胞仪，测定人类皮肤纤维母细胞CCD-966sk经本发明的紫花香茅汁液处理后，其活性氧物质含量的变化。
材料与仪器
1.细胞株：人类皮肤纤维母细胞CCD-966sk，取自生物资源保存及研究中心(BCRC)；Cat.60153，以下简称CCD-966sk细胞。
2.细胞培养基：含有10vol％FBS(购自Gibco)的基础培养基。其中，基础培养基是由Eagle’s最低限度基本培养基(Eagle’s minimum essential medium(MEM)，购自Gibco，产品编号15188-319)额外添加成分使其含有1mM丙酮酸钠(sodium pyruvate，购自Gibco)、1.5g/L碳酸氢钠(sodium bicarbonate，购自Sigma，Cat.S5761-500G)及0.1mM非必需胺基酸(non-essential amino acid solution，购自Gibco)所配制而成。
3.磷酸缓冲盐溶液(PBS溶液)：购自Gibco，产品编号10437-028。
4.DCFH-DA溶液：将二氯二氢荧光素二乙酸酯(2,7-dichloro-dihydro-fluorescein diacetate，DCFH-DA；产品编号SI-D6883，购自Sigma)溶于二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO，购自Sigma，产品编号SI-D6883-50MG)以配制成5mg/ml的DCFH-DA溶液。
5.流式细胞仪(Flow cytometry)，BD Accuri C6 Plus
6.双氧水(H2O2)：购自Sigma-Aldrich，产品型号95299-1L。
7.胰蛋白酶(Trypsin-EDTA)：10X Trypsin-EDTA(购自Gibco)以1X PBS溶液稀释10倍。
8.紫花香茅汁液：此实验中所使用的紫花香茅汁液，是以范例一的方式制备而成。
实验步骤
实验将会分为实验组、空白控制组(未添加本发明的紫花香茅汁液、亦无经过双氧水处理的组别)、以及对照组(未添加本发明的紫花香茅汁液，但经过双氧水处理的组别)三组进行，各组分别进行三重复试验：
1.将CCD-966sk细胞以每孔1×105个的方式，接种于每孔含2ml培养基的6孔培养盘中。
2.将培养盘置于5％CO2、37℃下，培养24小时。
3.移除培养基。
4.加入2mL实验培养基至培养盘的各孔中，并于37℃下培养1小时。
实验组的实验培养基为添加有5μL的实施例1得到的本发明的紫花香茅汁液的2mL细胞培养基(即本发明的紫花香茅汁液占细胞培养基的体积百分比为0.25％)。
控制组的实验培养基为单纯的2mL细胞培养基(即不含本发明的紫花香茅汁液)。
对照组的实验培养基为单纯的2mL细胞培养基(即不含本发明的紫花香茅汁液)。
5.添加浓度为5μg/mL的DCFH-DA溶液2μL于每孔中的细胞培养基，使DCFH-DA处理细胞15分钟。
6.于DCFH-DA处理后，于实验组的实验培养基以及对照组的实验培养基分别加入H2O2，并于37℃下反应1小时。具体来说，35％wt的双氧水先稀释成100mM(将10μL的双氧水加入990μL的二次蒸馏水)，再取20μL的100mM的双氧水加入2mL的细胞培养盘中。
7.反应后，每孔以1mL的1X PBS溶液润洗2次。
8.将200μL胰蛋白酶加至每孔中并在暗处反应5分钟。反应后，添加6mL细胞培养基终止反应。
9.将各孔中的细胞与细胞培养基收集至分别对应的1.5mL离心管内，并将含有细胞与培养基的离心管以400xg离心10分钟。
10.离心后，移除上清液，并以1X PBS溶液回溶细胞沉淀物。
11.再以400xg离心10分钟。
12.离心后，移除上清液，于暗处以1mL的1X PBS溶液再次悬浮细胞，以得到待测细胞液。
13.使用流式细胞仪检测各孔的待测细胞液中DCFH-DA的荧光信号。进行荧光检测的激发波长为450-490nm，放射波长为510-550nm。由于DCFH-DA进入细胞后会先被水解为DCFH(二氯二氢荧光素)，再被活性氧物质氧化为可发出绿色荧光的DCF(二氯荧光素)，经DCFH-DA处理的细胞的荧光强度可反映细胞内活性氧物质含量，并藉此得知细胞内活性氧物质高度表现的细胞数占原细胞数的比例。因实验是进行二重复，故将各组的二重复实验的量测结果平均以取得平均值，然后以控制组的平均值为1之相对ROS的生成量，将对照组与实验组的平均值换算为相对ROS的生成量，如图3所示。
实验结果
如图3所示，由比较控制组、对照组的结果可知，在经过双氧水处理后，相对ROS的生成量(高荧光表现)会大幅增加(约5.37倍，且达统计上的显著，p值小于0.001)；其显示双氧水处理确实会导致细胞内产生活性氧化物质，进而对皮肤纤维母细胞产生后续伤害。另一方面，根据比较对照组以及实验组的结果可知，当细胞经过本发明的紫花香茅汁液处理后，相对ROS的生成量明显减少约96％(达统计上的显著，p值小于0.001)，甚至低于控制组；其显示本发明的紫花香茅汁液可有效减少活性氧化物质在细胞内的产生或累积。换言之，本发明的紫花香茅汁液可作为一种活性氧化物质清除剂。亦即，本发明的紫花香茅汁液可透过降低细胞内活性氧化物质含量，减少细胞受到活性氧化物质等所导致的氧化伤害。
范例五：人体试验-以外用方式使用紫花香茅汁液
于此，令受试者使用含本发明的紫花香茅汁液的精华液，探讨以外用的方式使用本发明的紫花香茅提取的肌肤改善效果。
使用样品：含紫花香茅汁液精华液以及安慰剂精华液(其中的紫花香茅汁液替换成等重的水，其余成分均相同)。
含有紫花香茅汁液的精华液成分：三仙胶0.2wt％、馨鲜酮0.6wt％、1,3-丁二醇5wt％、三乙醇胺0.1wt％、己二醇0.6wt％、紫花香茅汁液0.5wt％、增稠剂U21 0.1wt％，其余为水。其中，此紫花香茅汁液是由范例一的制备方式而得。
受试者人数：8位25-60岁以上肌肤松弛或肌肤泛红的受试者。
实验方式
受试者将全脸清洁后，依据不同检测项目，使用对应的仪器及测量方式，纪录左右半脸于使用精华液前的数值、或拍摄使用前的照片。而后，令受试者每日早晚于清洗完脸部后，分别将含紫花香茅汁液精华液以及安慰剂精华液施用于受试者的右半脸及左半脸上，再以指腹稍加按摩左半脸与右半脸。每日早晚使用上述两种精华液两周后，以对应的仪器及测量方式，进行测量或拍摄照片，再与自身原左半脸、或右半脸的数值进行对照(使用前与使用后欲进行检测时，受试者所在的测试区域的温度与湿度为一致，以减少外界的温湿度等因素会对皮肤所造成的影响)。
检测项目
将分别进行1.肌肤泛红、2.肌肤松弛程度、3.肌肤毛孔状态检测。
1.肌肤泛红
使用德国Courage+Khazaka electronic公司的肌肤红色素指数检测探头
Figure BDA0002802379720000141
MX18(C+K Multi Probe Adapter System,Germany)对同一受试者在使用精华液前与后的面部肌肤进行检测。所述仪器乃透过测定特定波长的光照在人体皮肤上后的反射量来确定皮肤中血红素的含量。测量数值越高，说明皮肤中红色素含量越高。
2.肌肤松弛程度
使用购自德国Courage+Khazaka electronic公司的肌肤弹力检测探头
Figure BDA0002802379720000142
MPA580(C+K Multi Probe Adapter System,Germany)对同一受试者在使用精华液前与后的面部肌肤进行检测。测试原理是基于吸力和拉伸原理，在被测试的皮肤表面产生一个负压将皮肤吸进一个测试探头内，透过光学测试系统检测皮肤被吸进探头内的深度，并以软件分析计算皮肤松弛程度。
3.肌肤毛孔状态
使用美国Canfield所贩卖的VISIA高阶数字肤质检测仪进行检测，透过高分辨率的相机镜头对同一受试者在使用精华液前与后的面部肌肤进行检测。藉由标准白光照射，造成毛孔凹陷处产生阴影，毛孔会比周围的肤色更黑，故可以此检测毛孔，然后利用软件根据毛孔数目、面积分析得到一数值，而数值越高则显示其毛孔数量、面积较多。
请参阅图4。所述图为使用含本发明的紫花香茅汁液精华液及安慰剂精华液前与使用前述两者精华液两周后的肌肤红色素含量比较。其中，使用含本发明的紫花香茅汁液精华液的改善人数比例占达受试人数的87.5％。其中，当受试者于使用精华液前的平均肌肤红色素含量为100％时，使用含本发明的紫花香茅提取精华液2周后的平均肌肤红色素含量为92.0％，达统计上的显著(「**」符号代表与使用前相比p值小于0.01)，且与使用安慰剂精华液相比，较安慰剂组低7.3％(「#」符号代表与安慰剂精华液相比p值小于0.05)。由此可见，本发明的紫花香茅汁液具有舒缓肌肤泛红及降低肌肤红色素的功能。
请参阅图5。所述图为使用含本发明的紫花香茅汁液精华液及安慰剂精华液前与使用前述两者精华液两周后的肌肤松弛程度比较。其中，使用含本发明的紫花香茅汁液精华液的改善人数比例占达受试人数的62.5％。其中，当受试者于使用精华液前的平均肌肤松弛程度为100％时，使用含本发明的紫花香茅提取精华液2周后的平均肌肤松弛程度为93.8％，且与使用安慰剂精华液相比，较安慰剂组低4.9％。由此可见，本发明之紫花香茅汁液具有改善肌肤松弛、提升肌肤紧致度的功能。
请参阅图6。所述图为使用含本发明的紫花香茅汁液精华液及安慰剂精华液前与使用前述两者精华液两周后的肌肤毛孔状态比较。其中，使用含本发明的紫花香茅汁液精华液的改善人数比例占达受试人数的75％。其中，当受试者于使用精华液前的平均肌肤毛孔量为100％时，使用含本发明的紫花香茅提取精华液2周后的平均肌肤毛孔量为89.9％，且与使用安慰剂精华液相比，较安慰剂组低11％。由此可见，本发明的紫花香茅汁液具有缩小及紧致肌肤毛孔的功能。
当然，本发明还可有其它多种实施例，在不背离本发明精神及其实质的情况下，熟悉本领域的技术人员可根据本发明作出各种相应的改变和变形，但这些相应的改变和变形都应属于本发明权利要求的保护范围。

Claims (10)

1.一种紫花香茅汁液用于制备一调理肌肤状态的组合物的用途，其中所述紫花香茅汁液是以一含水的溶剂对一紫花香茅进行提取所得，其中所述调理肌肤状态是包含提升肌肤抗氧化能力、舒缓肌肤泛红或紧致肌肤毛孔，所述含水的溶剂为水或含柠檬酸之水溶液。
2.如权利要求1所述的用途，其中所述调理肌肤状态更包含提升肌肤抗醣化能力或提升肌肤紧致度。
3.如权利要求1所述的用途，其中所述组合物是透过清除皮肤细胞内自由基的含量以达到所述提升肌肤抗氧化能力。
4.如权利要求2所述的用途，其中所述组合物是透过抑制或减缓细胞内的醣化终产物的含量以达到所述提升肌肤抗醣化能力。
5.如权利要求1所述的用途，其中所述肌肤泛红是因肌肤发炎所产生。
6.如权利要求1所述的用途，其中所述紫花香茅汁液的总黄酮量大于12000ppm。
7.如权利要求1所述的用途，其中所述紫花香茅汁液的brix值为10.0以上。
8.如权利要求1所述的用途，其中所述紫花香茅汁液占所述组合物的重量百分比为0.1％～5％。
9.如权利要求1所述的用途，其中所述含水的提取溶剂与所述紫花香茅的液固比为5：1～20：1。
10.如权利要求1所述的用途，其中所述组合物为一保健食品组合物、一食品组合物、或一保养品组合物。
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