TWI815063B - 山茶花癒傷組織萃取物於護膚之用途 - Google Patents
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Abstract
本發明提供一種使用山茶花癒傷組織萃取物於製備一護膚的組合物之用途，其中該護膚的組合物用於減少經表皮水分散失、減少肌膚黑色素含量、減少肌膚鬆弛、減少肌膚紋理、減少肌膚皺紋及/或減少肌膚毛孔。本發明另提供一種使用山茶花癒傷組織萃取物於製備一醫藥組合物之用途。
Description
本發明關於一種山茶花癒傷組織萃取物，特別是關於一種山茶花癒傷組織萃取物於護膚之用途。
皮膚屏障的主要功能是防止人體的水分蒸發流失，但當肌膚受到年齡增加、飲食習慣、紫外線、壓力、疾病等因素影響時，皮膚屏障的正常功能會受到影響，加速水分流失，導致皮膚乾燥，進而使乾硬的死皮增加、使肌膚出現細紋、失去光澤而讓肌膚暗沉、減少彈力、肌膚粗糙等各種問題。
已有許多非天然的化學合成保養品、類固醇類藥物以及侵入式的醫療解決方式能解決以上問題，但是所費不貲且可能會有一定的安全風險，因此並非所有消費者皆能接受。
有鑑於此，以更天然的植物性成分協助消費者全面的改善肌膚問題，是發明人重要的目標。
本發明的一目的在於提供一種山茶花癒傷組織萃取物用於製備一護膚組合物之用途，其中萃取物係一山茶花之一葉部位及一莖部位的癒傷組織的極性溶劑萃取物。
在一些實施例中，組合物用以減少經表皮水分散失（TEWL）。
在一些實施例中，組合物用以減少肌膚黑色素含量。
在一些實施例中，組合物用以減少肌膚鬆弛。
在一些實施例中，組合物用以改善肌膚粗糙度。
在一些實施例中，組合物用於以下之至少一者：減少肌膚紋理、減少肌膚皺紋及減少肌膚毛孔。
在一些實施例中，組合物係以精華液之形式提供，且精華液中之山茶花癒傷組織萃取物之濃度係為0.5wt%。
本發明的另一目的在於提供一種山茶花癒傷組織萃取物用於製備一醫藥組合物之用途，其中該醫藥組合物係用於以下至少一者：改善乾癬及改善異位性皮膚炎。
本發明的另一目的在於提供一種山茶花癒傷組織萃取物用於製備一組合物之用途，其中組合物係用於減少經表皮水分散失。
在一些實施例中，極性溶劑係選自以下群組：水、C1-C4醇類、及前述之組合。
本發明提供一種山茶花癒傷組織萃取物用於製備一護膚的組合物之用途。該護膚組合物可進一步用於減少經表皮水分散失、減少肌膚黑色素含量、減少肌膚鬆弛、減少肌膚紋理、減少肌膚皺紋及減少肌膚毛孔。本發明另提供一種山茶花癒傷組織萃取物用於製備一醫藥組合物之用途，該醫藥組合物可進一步用於減少經表皮水分散失、改善乾癬及改善異位性皮膚炎。
以下將配合圖式進一步說明本發明的實施方式，下述所列舉的實施例係用以闡明本發明之發明特點及應用，而非以限定本發明之範圍，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可做些許更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
以下將描述本案的部分具體實施態樣。在不背離本案精神下，本案尚可以多種不同形式之態樣來實踐，不應將保護範圍限於說明書所具體陳述的條件。
本案使用Excel軟體進行統計分析。數據以平均值±標準差（SD）表示，各組之間的差異以學生t
檢驗（student’st
-test）進行分析。圖式中「*」代表p值小於0.05，「**」及「##」代表p值小於0.01，以及「***」代表p值小於0.001。當「*」或「#」越多時，代表統計上的差異越顯著。
本文中所使用數值為近似值，所有實驗數據皆表示在正負10%的範圍內，最佳為在正負5%的範圍內。
山茶花（Camellia japonica
），為山茶屬（Camellia
）植物，又名山茶，山茶屬屬常綠灌木和小喬木，原產於華東地區，現在主要分布在長江流域、珠江流域和山東、台灣，日本、朝鮮半島也有分布。四川、台灣、山東、江西等地有野生種，中國各地廣泛栽培。
本文中所謂「個體」是指人類或非人的哺乳動物，較佳為人類。
本文中所謂「肌膚」所指為人類或非人的哺乳動物的皮膚，較佳為一人類的肌膚。
在一些實施例中，護膚組合物可為保養品組合物。
在一些實施例中，保養品組合物包含有效含量的山茶花癒傷組織萃取物。
在一些實施例中，保養品組合物可進一步包含有一被廣泛地使用於保養品製造技術之可接受的佐劑（acceptable adjuvant）。例如，可接受的佐劑可包含下列一種或多種佐劑：溶劑、膠凝劑、活性劑、防腐劑、抗氧化劑、遮蔽劑（screening agent）、螯合劑、界面活性劑、染色試劑（coloring agent）、增稠劑（thickening agent）、填料（filler）、香料以及氣味吸收劑。可根據實際需求對這些試劑的選用與數量進行合適的調整。
在一些實施例中，保養品組合物可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合個體使用的型態。其中，適合個體使用的型態可為下列中的任一種，但不限於此：水性溶液（aqueous solution）、水-醇溶液（aqueous-alcohol solution）、油性溶液（oily solution）、呈水包油型（oil-in-water type）、油包水型（water-in-oil type）或複合型之乳劑、凝膠、軟膏、乳霜、面膜（mask）、貼片、貼布（pack）、擦劑、粉末、氣溶膠、噴霧、乳液、乳漿、糊劑、泡沫、分散液、滴劑、慕斯（mousse）、防曬油（sunblock）、化妝水（tonic water）、粉底（foundation）、卸妝產品（makeup remover products）、肥皂（soap）以及其他身體清潔產品（body cleansing products）等。
在一些實施例中，保養品組合物亦可進一步包含有下列中之已知活性的外用劑（external use agents）中的一種或多種：美白劑（whitening agents）[諸如維生素A酸（tretinoin）、兒茶素（catechin）、麴酸、熊果苷以及維生素C]、保濕劑、殺菌劑（bactericides）、紫外線吸收劑（ultraviolet absorbers）、植物萃取物（plant extracts）[諸如蘆薈萃取物（aloe extract）]、皮膚營養劑（skin nutrients）、麻醉劑（anesthetics）、抗痘劑（anti-acne agents）、止癢劑（antipruritics）、止痛劑（analgesics）、抗皮膚炎劑（antidermatitis agents）、抗過角化劑（antihyperkeratolytic agents）、抗乾皮膚劑（anti-dry skin agents）、抗汗劑（antipsoriatic agents）、抗老化劑（antiaging agents）、抗皺劑（antiwrinkle agents）、抗皮脂溢出劑（antiseborrheic agents）、傷口治療劑（wound-healing agents）、皮質類固醇（corticosteroids）以及激素（hormones）。有關這些外用劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
在一些實施例中，醫藥組合物包含有效含量的山茶花癒傷組織萃取物。
依據本發明，醫藥組合物可進一步包含有一被廣泛地使用於藥物製造技術之醫藥上可接受的載劑（pharmaceutically acceptable carrier）。例如，醫藥上可接受的載劑可包含下列一種或多種載劑：乳化劑（emulsifier）、懸浮劑（suspending agent）、分解劑（decomposer）、崩解劑（disintegrating agent）、分散劑（dispersing agent）、黏結劑（binding agent）、賦形劑（excipient）、安定劑（stabilizing agent）、螯合劑（chelating agent）、稀釋劑（diluent）、膠凝劑（gelling agent）、防腐劑（preservative）、潤濕劑（wetting agent）、潤滑劑（lubricant）、吸收延遲劑（absorption delaying agent）、脂質體（liposome）以及類似之物。有關這些載劑的選用與數量是熟習此項技術人員可視情況進行選擇的。
在一些實施例中，醫藥上可接受的載劑可進一步包含下列一種溶劑：水、生理鹽水（normal saline）、磷酸鹽緩衝生理鹽水（phosphate buffered saline，PBS）、含有醇的水性溶液（aqueous solution containing alcohol）以及其他任何合適的溶劑。
在一些實施例中，醫藥組合物可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於經腸道地（enterally）、非經腸道地（parenterally）、口服地、或局部地（topically）投藥的劑型。醫藥組合物的劑型例如可為：注射品（injection）[例如，無菌的水性溶液（sterile aqueous solution）或分散液（dispersion）]、無菌的粉末（sterile powder）、外部製劑（external preparation）或其他類似物。
在一些實施例中，醫藥組合物可由下列所述的任一種非經腸道途徑（parenteral routes）來投藥：皮下注射（subcutaneous injection）、表皮內注射（intraepidermal injection）、皮內注射（intradermal injection）以及病灶內注射（intralesional injection）。
在一些實施例中，醫藥組合物可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於局部地施用於皮膚上的外部製劑（external preparation）。舉例而言，外部製劑可為下列所述的任一種，但不限於此：乳劑（emulsion）、凝膠（gel）、軟膏（ointment）、乳霜（cream）、貼片（patch）、擦劑（liniment）、粉末（powder）、氣溶膠（aerosol）、噴霧（spray）、乳液（lotion）、乳漿（serum）、糊劑（paste）、泡沫（foam）、滴劑（drop）、懸浮液（suspension）、油膏（salve）以及繃帶（bandage）。
在一些實施例中，外部製劑是藉由將有效含量的山茶花癒傷組織萃取物與一為熟習此項技藝者所詳知的基底（base）相混合而製成。
在一些實施例中，基底可包含下列一種或多種的添加劑（additives）：水、醇（alcohols）、甘醇（glycol）、碳氫化合物（hydrocarbons）[諸如石油膠（petroleum, jelly）以及白凡士林（white petrolatum,）]、蠟（wax）[諸如石蠟（paraffin）以及黃蠟（yellow wax）]、保存劑（preserving agents）、抗氧化劑（antioxidants）、界面活性劑（surfactants）、吸收增強劑（absorption enhancers）、安定劑（stabilizing agents）、膠凝劑（gelling agents）[諸如卡波普®974P （carbopol®974P）、微結晶纖維素（microcrystalline cellulose）以及羧基甲基纖維素（carboxymethylcellulose）]、活性劑（active agents）、保濕劑（humectants）、氣味吸收劑（odor absorbers）、香料（fragrances）、pH調整劑（pH adjusting agents）、螯合劑（chelating agents）、乳化劑（emulsifiers）、閉塞劑（occlusive agents）、軟化劑（emollients）、增稠劑（thickeners）、助溶劑（solubilizing agents）、滲透增強劑（penetration enhancers）、抗刺激劑（anti-irritants）、著色劑（colorants）以及推進劑（propellants）等。有關這些添加劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
下列範例中的實驗步驟若無特別敘明，即在室溫（25 ℃-30 ℃）、常壓（1 atm）下進行。
實施例
1
：山茶花癒傷組織萃取物的製備
（
1-1
）：
山茶花癒傷組織萃取物的製備例
1
對山茶花（Camellia japonica
）植株施以如下處理，以提供山茶花癒傷組織，所述山茶花植株可來自中國、台灣、韓國或日本等地區：
I. 以1-5 vol%次氯酸鈉溶液沖洗山茶花植株，其後以滅菌水沖洗山茶花植株，視需要地，可重複前述沖洗操作，將植株上的次氯酸鈉溶液洗去；
II. 在山茶花植株之葉片部位及莖部位的表面以割劃、撕裂或剪切之方式製造傷口，以誘導產生白色顆粒狀的癒傷組織（歷時1至3個月，期間使用誘導培養基培育經切出傷口的植株），誘導培養基可以MS培養基（Murashige and Skoog Basal Medium，購自SIGMA公司；產品編號：M5519）或1/2MS培養基（1/2 x Murashige and Skoog Basal Medium；購自SIGMA公司；產品編號：M5524）做為基底，再添加0.1-2.0 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-dichlorophenoxyacetic acid，購自SIGMA公司；產品編號：D7299）、0.05-1.0 mg/L的6-芐基氨基嘌呤（6-Benzylaminopurine，購自SIGMA公司；產品編號：V900316）以及10-50 g/L 蔗糖（購自台灣台糖公司），混合均勻後所得。
III. 接著，更換新的誘導培養基，在25°C、60-80%濕度下，以誘導培養基繼續培養步驟II所得之癒傷組織，歷時1-2個月，使山茶花癒傷組織增量，完成山茶花癒傷組織的培育。
以下列步驟處理上述步驟III所得的山茶花癒傷組織，以製備山茶花癒傷組織萃取物：
1. 將山茶花癒傷組織保存於-20℃進行冷凍乾燥，歷時6-24小時，接著粉碎前述經乾燥之山茶花癒傷組織，以提供山茶花癒傷組織粉末；
2. 將RO水與步驟1之山茶花癒傷組織以20：1至5：1（溶劑：山茶花癒傷組織粉末）的重量比混合，獲得一混合物，其中該溶劑為水或C1-C4醇類；
3. 在60-90℃下，對步驟2所獲得的混合物以超音波萃取、微波萃取、或溶劑加熱萃取法進行萃取，較佳地，此處係以強度300-3000Hz的強度進行微波萃取進行微波萃取，歷時10-60分鐘；
4. 以過濾方式去除步驟3所得之混合物中的山茶花癒傷組織粉末，以提供一濾液；
待步驟4之濾液冷卻後，得到山茶花癒傷組織萃取物，將其分裝並冷藏保存以供後續實驗使用。
（
1-2
）：
山茶花癒傷組織萃取物的製備例
2
此製備例所獲得之山茶花癒傷組織萃取物即為以下實施例2之人體實驗所採用的山茶花癒傷組織萃取物。
首先對產地為台灣鳳凰山區域的山茶（Camellia japonica
）植株施以如下處理，以提供山茶花癒傷組織，詳細而言，此鳳凰山區域的山茶為由早田文藏氏於1918年發表為台灣特有種，又稱鳳凰山茶或台灣山茶，目前為保育等級分為易危（Vulnerable, VU）的物種，為台灣原生茶屬植物之中唯一花為紅色系且花最大者，花瓣5枚，為粉紅色，基部略合生，呈闊鐘形或漏斗狀，花瓣圓或卵形，長 1.5-2 公分，寬 1.2-1.8 公分；葉倒卵狀長橢圓形或長橢圓形，長 8-10 公分，寬 3-5 公分，先端銳尖或鈍，基部銳尖或略為楔形；果實為蒴果，闊圓形，朔果徑約3-4公分：
I. 以2 vol%次氯酸鈉溶液沖洗山茶花植株，其後以滅菌水沖洗山茶花植株，將植株上的次氯酸鈉溶液洗去；
II. 在山茶花之葉片及莖的表面切出傷口，以誘導產生白色顆粒狀的癒傷組織（歷時1至3個月，期間使用誘導培養基培育經切出傷口的植株），誘導培養基為MS培養基（Murashige and Skoog Basal Medium，購自SIGMA公司；產品編號：M5519）再添加0.5 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-dichlorophenoxyacetic acid，購自SIGMA公司；產品編號：D7299）、0.1 mg/L的6-芐基氨基嘌呤（6-Benzylaminopurine，購自SIGMA公司；產品編號：V900316）以及30 g/L 蔗糖（購自台灣台糖公司）。
III. 接著，更換新的誘導培養基，在25°C、70%濕度下，以上述誘導培養基繼續培養步驟II所得之癒傷組織，歷時1-2個月，使山茶花癒傷組織增量，完成山茶花癒傷組織的培育。
以下列步驟處理上述步驟III所得的山茶花癒傷組織，以製備山茶花癒傷組織萃取物：
1. 將山茶花癒傷組織保存於-20℃進行冷凍乾燥，歷時12小時，接著粉碎前述經乾燥之山茶花癒傷組織，以提供山茶花癒傷組織粉末；
2. 將RO水與步驟1之山茶花癒傷組織以10：1.5（RO水：山茶花癒傷組織粉末）的重量比混合，獲得一混合物；
3. 在75℃下，對步驟2所獲得的混合物以萃取機（廠牌IDCO，型號：E-200）進行微波萃取，採強度1500Hz加熱到75℃，而後採300Hz持溫於75℃、攪拌轉速5的方式進行微波萃取，歷時20分鐘；
4. 以400目數的濾膜過濾步驟3所得之混合物，以提供一濾液；
5. 再對步驟4所得之濾液以離心機（廠牌雙鷹企業有限公司，型號4000）進行離心，採轉速4800 rpm歷時10分鐘，接著收集上清液；
6. 加熱由步驟5所獲得之上清液至95℃，並維持30分鐘，以進行滅菌；
7. 待步驟6之上清液冷卻後，得到山茶花癒傷組織萃取物，將其分裝並冷藏保存以供後續實驗使用。
實施例
2
：人體試驗
-
以外用方式使用山茶花癒傷組織萃取物
使用
樣品：
山茶花精華液：含山茶花癒傷組織萃取物的混合液以及安慰劑（不含有山茶花癒傷組織萃取物的混合液）。
山茶花精華液成份：三仙膠 0.1wt%、對羥基苯乙酮 0.5wt%、1,3-丁二醇 5.0wt%、己二醇 0.5wt%、山茶花癒傷組織萃取物0.5wt%，其餘為水。其中，此山茶花癒傷組織萃取物係由實施例（1-2）之製備方式而得。
安慰劑成分：三仙膠 0.1wt%、對羥基苯乙酮0.5wt%、1,3-丁二醇 5.0wt%、三乙醇胺 0.1wt%、己二醇 0.5wt%，其餘為水。
受試者人數：共8位30-55歲之受試者。
實驗方式：
受試者將全臉清潔後，而後，分別將山茶花精華液以及安慰劑分別塗抹於左右半臉，以指腹稍加按摩促進吸收，每日塗抹兩次，連續4周。並於使用前（即第一次塗抹山茶花精華液以及安慰劑前，視為第0週）以及持續使用4週後（第4週）進行檢測。
使用前與使用後欲進行檢測時，受試者所在的測試區域的溫度與濕度需為一致，以減少外界的溫濕度等因素對皮膚所造成的影響。
檢測項目
1.
肌膚膚色（
skin tone
）之檢測方法
使用台灣公司Hofon Spring Co., Ltd.的3D全臉皮膚透視分析儀（型號: IRV Pro），以內建膚色檢測模式對同一受試者在使用山茶花精華液或安慰劑前與後的面部肌膚進行檢測。該儀器係藉由標準白光照射，以得到肌膚之高解析度的影像，藉由內建軟體分析肌膚上血紅素及黑色素結合而成的棕色值，棕色值越低，表示皮膚膚色值越低，代表皮膚越白皙。
由圖1可知，相較於使用山茶花精華液之前，在持續使用山茶花精華液4週後，肌膚膚色顯著改善約8.0%。基此可知，山茶花癒傷組織萃取物以外用方式塗敷於肌膚上，確實可改善肌膚膚色，提升肌膚膚色亮度，使皮膚白皙。
2.
肌膚黑色素（
melanin
）含量之檢測方法
使用購自德國Courage+Khazaka electronic公司之肌膚黑色素檢測探頭Mexameter® MX18（C+K Multi Probe Adapter System, Germany）對同一受試者在使用山茶花精華液或安慰劑前與後的面部肌膚進行檢測。該儀器乃透過測定特定波長的光照在人體皮膚上後的反射量來確定皮膚中黑色素的含量。測量數值越高，說明皮膚中黑色素含量越高。
由圖2可知，相較於使用山茶花精華液之前，在持續使用山茶花精華液4週後，黑色素的含量顯著改善約9.7%。基此可知，山茶花癒傷組織萃取物以外用方式塗敷於肌膚上，確實可使黑色素的含量減少，並提升肌膚的亮白程度。
3.
皮膚保濕能力檢測
角質層扮演著皮膚的天然障壁，防止外來物的經表皮入侵外，也防止內部分子的向外散失，最主要的是防止深層表皮的水分散失，因此減少角質層中的水分散失是維持皮膚保濕能力的決定因素，因此一般常用經表皮水分散失量（Trans-Epidermal Water Loss，簡稱TEWL）來評估肌膚的保水能力；此外，在有些皮膚疾病中，TEWL值會增加，而增加量與損傷程度有關，當皮膚障壁功能恢復時，TEWL值隨之就降低。舉例而言，通常在乾癬、接觸性皮膚炎及異位性皮膚炎的情況下，肌膚障壁功能失調，導致TEWL值增加。
詳細來說，異位性皮膚炎為皮膚角質層功能失常，導致皮膚內水分大量喪失，並使過敏原及化學物質穿透皮膚，造成皮膚產生過敏或發炎反應，因此，提高肌膚保濕功能與屏護力是照護異位性皮膚炎的首要步驟，已有文獻指出，與健康者相比，異位性皮膚炎患者的TEWL值高，且經過口服神經醯胺(Ceramide)類的藥物後，能降低異位性皮膚炎患者的TEWL值，並改善異位性皮膚炎。
前述可參見例如：Reduction of transepidermal water loss by oral intake of glucosylceramides in patients with atopic eczema. Allergy, 60(11), 1454–1455. ，該文獻之全文併於此處以供參考。
此外，乾癬，是一種慢性皮膚疾病，主要特色是在身上出現一塊一塊異常的塊狀皮膚，這些塊狀皮膚異常會發紅、發癢、以及脫屑。乾癬患者的皮膚通透會出現異常，因此TEWL值也會較高。已有臨床研究指出，外用類固醇在患部可降低患者的TEWL值，改善病患的皮膚通透能力。
前述可參見例如：DFD-01 Reduces Transepidermal Water Loss and Improves Skin Hydration and Flexibility，該文獻之全文併於此處以供參考。
因此此處以經表皮水分散失量的測定來評估山茶花癒傷組織萃取物對於肌膚保濕能力以及改善TEWL值異常之相關皮膚疾病之能力。
（
3-1
）：經表皮水分散失（
Trans-Epidermal Water Loss
）檢測
法
使用購自德國Courage+Khazaka electronic公司之肌膚水分散失檢測探頭Tewameter® TM 300（C+K Multi Probe Adapter System, Germany）對同一受試者在使用山茶花精華液或安慰劑前與後的面部肌膚進行檢測。該檢測探頭係使用兩端開放的圓柱形腔體在皮膚表面形成相對穩定的測試環境，通過測定不同兩點的水蒸氣壓梯度，計算出經表皮蒸發的水分量，以此來衡量皮膚表面水分流失情況。
由圖3可知，相較於使用山茶花精華液之前，在持續使用山茶花精華液4週後，經表皮水分散失率顯著改善約11.3%。基此可知，山茶花癒傷組織萃取物以外用方式塗敷於肌膚上，確實可使經表皮水分散失率減少，因此提升肌膚的保濕能力，並具改善TEWL值異常之相關皮膚疾病之潛力。
4.
肌膚鬆弛度（
Skin sagging
）之檢測方法
使用購自德國Courage+Khazaka electronic公司之肌膚彈力檢測探頭Cutometer® MPA580（C+K Multi Probe Adapter System, Germany）對同一受試者在使用山茶花精華液或安慰劑前與後的面部肌膚進行檢測。測試原理是基於吸力和拉伸原理，在被測試的皮膚表面產生一個負壓將皮膚吸進一個測試探頭內，透過光學測試系統檢測皮膚被吸進探頭內的深度，並以軟體分析計算肌膚鬆弛度。
由圖4可知，相較於使用山茶花精華液之前，在持續使用山茶花精華液4週後，肌膚鬆弛度顯著改善約34.8%。基此可知，山茶花癒傷組織萃取物以外用方式塗敷於肌膚上，確實可改善肌膚鬆弛，相當於提升肌膚緊緻程度以及彈性。
5
.
肌膚
粗糙度
檢測
皮膚表面有無數的毛孔，隆起的部分叫皮丘，下陷的部分叫皮溝（又稱皺紋），這些皮丘、皮溝及毛孔的狀態，決定了皮膚粗糙度。一般來說，皮丘越小、皮溝越淺、毛孔越多，皮膚整體來說就越粗糙，光滑度越低。
（
5-1
）：
肌膚紋理之檢測方法
使用台灣公司Hofon Spring Co., Ltd.的3D全臉皮膚透視分析儀（型號: IRV Pro）對同一受試者在使用山茶花精華液或安慰劑前與後的面部肌膚進行檢測，其原理乃以可見光拍攝高解析度之肌膚影像，並以內建軟體根據皮膚的凹陷與凸起進行光滑度分析。測量數值越低，說明皮膚越光滑，亦指皮膚的紋理越少。
由圖5可知，相較於使用山茶花精華液之前，在持續使用山茶花精華液4週後，肌膚紋理情況顯著改善約29.1%。基此可知，山茶花癒傷組織萃取物以外用方式塗敷於肌膚上，確實可使肌膚紋理減少，並提升肌膚的光滑程度。
（
5-2
）：
肌膚皺紋狀況檢測方法
使用台灣公司Hofon Spring Co., Ltd.的3D全臉皮膚透視分析儀（型號: IRV Pro）進行檢測，透過高解析度之相機鏡頭對同一受試者在使用山茶花精華液或安慰劑前與後的面部肌膚進行檢測，藉由標準白光照射、偵測皮膚陰影的變化，即可偵測皺紋深度並得到一數值，可代表面部肌膚的皺紋數量。
由圖6可知，相較於使用山茶花精華液之前，在持續使用山茶花精華液4週後，肌膚皺紋情況顯著改善約29.2%。基此可知，山茶花癒傷組織萃取物以外用方式塗敷於肌膚上，確實可使肌膚皺紋減少。
（
5-3
）：
肌膚毛孔狀態檢測方法
使用台灣公司Hofon Spring Co., Ltd.的3D全臉皮膚透視分析儀（型號: IRV Pro）進行檢測，透過高解析度之相機鏡頭對同一受試者在使用山茶花精華液或安慰劑前與後的面部肌膚進行檢測。藉由標準白光照射，造成毛孔凹陷處產生陰影，毛孔會比周圍的膚色更黑，故可以此偵測毛孔，然後利用軟體根據毛孔數目、面積分析得到一數值，而數值越高則顯示其毛孔數量較多。
由圖7可知，相較於使用山茶花精華液之前，在持續使用山茶花精華液4週後，肌膚毛孔情況顯著改善約28.9%。基此可知，山茶花癒傷組織萃取物以外用方式塗敷於肌膚上，確實可使肌膚毛孔數量減少。
此實驗結果說明山茶花癒傷組織萃取物能改善肌膚狀況。
綜合前述，本案證實山茶花癒傷組織萃取物可減少經表皮水分散失、減少肌膚黑色素含量、減少肌膚鬆弛、減少肌膚紋理、減少肌膚皺紋及/或減少肌膚毛孔，故山茶花癒傷組織萃取物能作為護膚組合物的有效成分。此外，由於山茶花癒傷組織萃取物能減少經表皮水分散失，因此，山茶花癒傷組織萃取物也能作為醫藥組合物的有效成分，特別用於改善TEWL值異常的相關疾病。
雖然本發明的技術內容已經以較佳實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神所作些許之更動與潤飾，皆應涵蓋於本發明的範疇內，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
無
圖1是人體實驗的肌膚膚色結果圖。
圖2是人體實驗的黑色素含量結果圖。
圖3是人體實驗的經表皮水分散失率（TEWL值）結果圖。
圖4是人體實驗的肌膚鬆弛度結果圖。
圖5是人體實驗的肌膚紋理結果圖。
圖6是人體實驗的肌膚皺紋結果圖。
圖7是人體實驗的肌膚毛孔數量結果圖。
Claims (7)
- 一種山茶花(Camellia japonica)癒傷組織萃取物用於製備一護膚組合物之用途，其中該萃取物係一山茶花之一葉部位及一莖部位的癒傷組織的極性溶劑萃取物，且該組合物用以減少肌膚毛孔；其中，該極性溶劑係選自以下群組：水、C1-C4醇類、及前述之組合。
- 如請求項1所述之用途，其中該組合物更用以減少經表皮水分散失。
- 如請求項1所述之用途，其中該組合物更用以減少肌膚黑色素含量。
- 如請求項1所述之用途，其中該組合物更用以減少肌膚鬆弛。
- 如請求項1所述之用途，其中該組合物更用以改善肌膚粗糙度。
- 如請求項1所述之用途，其中該組合物更用於以下至少一者：改善乾癬(psoriasis)及改善異位性皮膚炎(atopic dermatitis)。
- 如請求項1至請求項6中任一項所述之用途，其中該組合物係以精華液之形式提供，且該精華液中之山茶花癒傷組織萃取物之濃度係為0.5wt%。
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