CN112795509A - 利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂及制备方法，其组成成分包括枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉和粪肠球菌，所述枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉和粪肠球菌按质量比例为0.1‑0.4:0.1‑0.5:1‑4:0.01‑0.04进行混合，本发明涉及农副产品增值利用及微生物菌剂技术领域。该利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂及制备方法，本发明制备的菌剂对香蕉具有明显的促生作用，对香蕉根茎的生长和增加地上植株总重有明显的促进作用，另外可在很大程度上预防香蕉枯萎病，促进香蕉健康生长，发酵速度快，成本低且制备过程简单，在很大程度上改善了百香果果皮资源浪费和污染环境的现状，经济环保，应用价值大，市场前景广泛。
Description
技术领域
本发明涉及农副产品增值利用及微生物菌剂技术领域，具体为利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂及制备方法。
背景技术
百香果，学名Passiflora edulis Sims，又称鸡蛋果，属西番莲科，广泛种植于热带、亚热带地区，以黄果和紫果为主。百香果果实含有人体所需17种氨基酸、多种维生素和类胡萝素，其中包括非常丰富的天然维他命C和维他命A、B1、B2等，另外还含有丰富的钙、磷、铁和多种氨基酸等物质及微量元素，百香果的根、茎、叶均可入药，有消炎止痛、活血强身、滋阴补肾、降脂降压、提神醒酒、消除疲劳、排毒养颜、增强免疫力等神奇保健作用；果肉可溶性固形物为5％-16％，总酸量为3.8％-4％，甜酸适中，加工制成果汁、果露、果酱、果冻，风味独特；而加工过程中产生的副产物果皮，未得到综合利用。传统方法中，除少量用于制作果脯外，大多数百香果果皮被填埋处理。填埋常常引起霉变和恶臭，造成环境污染。同时果皮资源没有得到合理利用，造成极大浪费。百香果果皮进行无害化固体发酵，可减轻果皮渣废弃给环境带来的污染，具有明显的经济效益和生态效益。制成固体发酵培养基可培养枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌等有益菌种，能促进香蕉健康生长。
本发明把生物发酵技术应用于百香果果肉加工的废弃物的资源化利用，不但可以促进百香果种植和深加工的发展，而且为我国香蕉种植行业提供一种新的益生菌剂，应用价值大，市场前景广泛。
经查阅相关文献，均没有利用百香果果皮发酵，生产香蕉促生益生菌剂。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂及制备方法，实现对百香果加工副产物的综合利用，最大程度提高百香果皮附加值。
(二)技术方案
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂，其组成成分包括枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉和粪肠球菌，所述枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉和粪肠球菌按质量比例为0.1-0.4:0.1-0.5:1-4:0.01-0.04进行混合。
优选的，所述香蕉促生益生菌剂为喷雾干燥所得。
优选的，所述益生菌剂在香蕉促生方面的应用。
优选的，所述枯草芽孢杆菌为保藏号CGMCC No.1.12939的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。
优选的，所述淡紫拟青霉为保藏号CGMCC No.17069的淡紫拟青霉(Paecilomyceslilacinus)。
优选的，所述木霉为保藏号CGMCC No.3.2942的绿色木霉(Trichoderma viride)。
优选的，所述粪肠球菌为保藏号CGMCC No.1.2135的粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)。
优选的，所述枯草芽孢杆菌的菌数为105-107CFU/g，更优选为106CFU/g。
优选的，所述淡紫拟青霉的菌数为106-108CFU/g，更优选为107CFU/g。
优选的，所述木霉的菌数为106-108CFU/g，更优选为107CFU/g。
优选的，所述粪肠球菌的菌数为105-107CFU/g，更优选为106CFU/g。
本发明还公开了利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：
S1、将百香果果皮原料洗净，压榨烘干脱水(含水率为10％左右)，粉碎；
S2、将步骤S1所得物加入葡萄糖3％，水5％-34％，豆渣3％-20％，尿素0.2％-1％，磷酸氢二钾0.01％-0.05％，镁离子0.01％-0.05％进行混料，混料时间为6-10分钟，制成固体发酵培养基，在121℃下高压蒸汽灭菌20min；
S3、将枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌按照2％-10％(V/W)分别接种于固体发酵培养基中，置于发酵罐中单独发酵；
S4、发酵完成后检测菌液中活菌数；
S5、按质量比例0.1-0.4:0.1-0.5:1-4:0.01-0.04混合枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉和粪肠球菌四种菌，喷雾干燥。
优选的，所述单独发酵条件为：
T1、枯草芽孢杆菌发酵温度37℃，发酵时间12-24h；
T2、淡紫拟青霉发酵温度26℃-28℃，发酵时间12-24h；
T3、木霉发酵温度26℃-28℃，发酵时间12-36h；
T4、粪肠球菌发酵温度30℃-35℃，发酵时间12-24h。
优选的，所述检测菌剂中活菌数的方法为平板计数法。
所述香蕉促生益生菌剂为将计数后的枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌按质量比0.1-0.4:0.1-0.5:1-4:0.01-0.04混合后喷雾干燥所得。
(三)有益效果
本发明提供了利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂及制备方法。与现有技术相比具备以下有益效果：该利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂及制备方法，其组成成分包括枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉和粪肠球菌，枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉和粪肠球菌按质量比例为0.1-0.4:0.1-0.5:1-4:0.01-0.04进行混合，本发明制备的菌剂对香蕉具有明显的促生作用，对香蕉根茎的生长和增加地上植株总重有明显的促进作用，另外可在很大程度上预防香蕉枯萎病，促进香蕉健康生长，发酵速度快，成本低且制备过程简单，在很大程度上改善了百香果果皮资源浪费和污染环境的现状，经济环保，通过把生物发酵技术应用于百香果果肉加工的废弃物的资源化利用，不但可以促进百香果种植和深加工的发展，而且为我国香蕉种植行业提供一种新的益生菌剂，应用价值大，市场前景广泛。
附图说明
图1为本发明香蕉促生益生菌剂制备方法的流程图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1，本发明实施例提供三种技术方案：利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂及制备方法，具体包括以下实施例：
实施例1
本实施例对枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌的混合比例进行了考察，分别按照5％(V/W)接种量将不同比例的枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌液接入向干制百香果皮渣中加入葡萄糖3％，水34％，豆渣10％，尿素0.6％，磷酸氢二钾0.03％，镁离子0.03％进行混料的固体发酵培养基中，置于发酵罐中，发酵温度分别为37℃、28℃、28℃、35℃，发酵时间24h，枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌的混合比例分别为0.4:0.3:2:0.02、0.2:0.5:2:0.02、0.2:0.3:4:0.02、0.2:0.3:2:0.04测定植株的株高、假茎围、平均最长根的长度、新生主根数、新生叶片数，与不添加该益生菌剂对比结果可知：枯草芽孢杆菌和粪肠球菌对香蕉的根、叶数量增多有明显的促进作用，木霉、淡紫拟青霉可促进主根长度和假茎围的增大，总体来看，质量比0.2:0.3:4:0.02的枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌混合制成的益生菌剂促进香蕉植株的生长效果最好。
实施例2
本实施例对枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌的混合比例进行了考察，分别按照5％(V/W)接种量将不同比例的枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌液接入向干制百香果皮渣中加入葡萄糖3％，水34％，豆渣10％，尿素0.6％，磷酸氢二钾0.03％，镁离子0.03％进行混料的固体发酵培养基中，置于发酵罐中，发酵温度分别为37℃、28℃、28℃、35℃，发酵时间24h。枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌的混合比例分别为0.4:0.4:3:0.02、0.3:0.5:2:0.02、0.2:0.3:4:0.02、0.2:0.3:2:0.04观察香蕉得枯萎病情况，即接种香蕉枯萎病致病菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC)，从香蕉植株出现第一株病株开始，每天调查发病隋况，进行病情指数统计，与不添加该益生菌剂对比结果可知：枯草芽孢杆菌和淡紫拟青霉对预防香蕉枯萎病有显著效果，其中淡紫拟青霉效果更强，木霉对香蕉枯萎病也有一定的预防作用，预防香蕉枯萎病的最佳配比为枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌按质量比0.4:0.4:3:0.02。
实施例3
本实施例对枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌的混合比例进行了考察，分别按照5％(V/W)接种量将不同比例的枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌液接入向干制百香果皮渣中加入葡萄糖3％，水34％，豆渣10％，尿素0.6％，磷酸氢二钾0.03％，镁离子0.03％进行混料的固体发酵培养基中，置于发酵罐中，发酵温度分别为37℃、28℃、28℃、35℃，发酵时间24h。枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌的混合比例分别为0.4:0.2:3:0.02、0.2:0.5:2:0.02、0.2:0.3:4:0.02、0.3:0.3:3:0.04测定地上部分生物量(以鲜重和干重计)，其中干重测定方法为将香蕉植株从营养钵中拔出，在自来水下冲洗掉根部基质，晾干，于105℃下杀菌15min后，70℃烘干至恒重后称量所得香蕉地上部分干重，与不添加该益生菌剂对比结果可知：枯草芽孢杆菌、木霉和粪肠球菌对香蕉植株地上部分重量增长效果较明显，增加香蕉地上部分重量的最佳配比为0.3:0.3:3:0.04。
本发明制备的菌剂对香蕉具有明显的促生作用，对香蕉根茎的生长和增加地上植株总重有明显的促进作用，另外可在很大程度上预防香蕉枯萎病，促进香蕉健康生长，发酵速度快，成本低且制备过程简单，在很大程度上改善了百香果果皮资源浪费和污染环境的现状，经济环保，通过把生物发酵技术应用于百香果果肉加工的废弃物的资源化利用，不但可以促进百香果种植和深加工的发展，而且为我国香蕉种植行业提供一种新的益生菌剂，应用价值大，市场前景广泛。
同时本说明书中未作详细描述的内容均属于本领域技术人员公知的现有技术。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (10)
1.利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂，其特征在于：其组成成分包括枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉和粪肠球菌，所述枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉和粪肠球菌按质量比例为0.1-0.4:0.1-0.5:1-4:0.01-0.04进行混合。
2.根据权利要求1所述的利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂，其特征在于：所述香蕉促生益生菌剂为喷雾干燥所得。
3.根据权利要求1所述的利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂，其特征在于：所述益生菌剂在香蕉促生方面的应用。
4.根据权利要求1所述的利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌为保藏号CGMCC No.1.12939的枯草芽孢杆菌，且枯草芽孢杆菌的菌数为105-107CFU/g，优选为106CFU/g。
5.根据权利要求1所述的利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂，其特征在于：所述淡紫拟青霉为保藏号CGMCC No.17069的淡紫拟青霉，且淡紫拟青霉的菌数为106-108CFU/g，优选为107CFU/g。
6.根据权利要求1所述的利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂，其特征在于：所述木霉为保藏号CGMCC No.3.2942的绿色木霉，且木霉的菌数为106-108CFU/g，优选为107CFU/g。
7.根据权利要求1所述的利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂，其特征在于：所述粪肠球菌为保藏号CGMCC No.1.2135的粪肠球菌。
8.根据权利要求1所述的利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂，其特征在于：所述粪肠球菌的菌数为105-107CFU/g，优选为106CFU/g。
9.制备权利要求1-8任意一项所述利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：
S1、将百香果果皮原料洗净，压榨烘干脱水，粉碎；
S2、将步骤S1所得物加入葡萄糖3％，水5％-34％，豆渣3％-20％，尿素0.2％-1％，磷酸氢二钾0.01％-0.05％，镁离子0.01％-0.05％进行混料，混料时间为6-10分钟，制成固体发酵培养基，在121℃下高压蒸汽灭菌20min；
S3、将枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉、粪肠球菌按照2％-10％(V/W)分别接种于固体发酵培养基中，置于发酵罐中单独发酵；
S4、发酵完成后检测菌液中活菌数；
S5、按质量比例0.1-0.4:0.1-0.5:1-4:0.01-0.04混合枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、木霉和粪肠球菌四种菌，喷雾干燥。
10.根据权利要求9所述的利用百香果皮发酵生产的香蕉促生益生菌剂的制备方法，其特征在于：所述单独发酵条件为：
T1、枯草芽孢杆菌发酵温度37℃，发酵时间12-24h；
T2、淡紫拟青霉发酵温度26℃-28℃，发酵时间12-24h；
T3、木霉发酵温度26℃-28℃，发酵时间12-36h；
T4、粪肠球菌发酵温度30℃-35℃，发酵时间12-24h。
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