CN112704009A - 一种铁皮石斛种植种苗预处理方法 - Google Patents

一种铁皮石斛种植种苗预处理方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及铁片石斛种植技术领域，具体为一种铁皮石斛种植种苗预处理方法，包括吲哚乙酸和萘乙酸钠，具体步骤为：从铁皮石斛植株上剪取，放入酒精中进行消毒，将其以茎节为中心切成小段，浸泡后除水，用戊二醛水溶液进行循环冲洗，将腋芽苞叶切除，再次用戊二醛水溶液进行循环冲洗并除水，将处理后的铁皮石斛种苗分别放入到培养基，加入分化水溶液，将铁皮石斛幼苗放入到生根培养瓶中进行培养，生根水溶液，最后将铁皮石斛幼苗清洗烘干并放入驯化培养基中。通过对比实施例一到三，当使用水培以及加入不同含量比例的吲哚乙酸和萘乙酸钠可以对幼苗的生根率以及生根效果进行提升，间接地增加了幼苗在后续种植中的存活率。

Description

一种铁皮石斛种植种苗预处理方法
技术领域
本发明涉及铁皮石斛技术领域，具体为一种铁皮石斛种植种苗预处理方法。
背景技术
铁皮石斛：茎直立，圆柱形，长9-35厘米，粗2-4毫米，不分枝，具多节；叶二列，纸质，长圆状披针形，边缘和中肋常带淡紫色。总状花序常从落了叶的老茎上部发出，具2-3朵花；花苞片干膜质，浅白色，卵形，长5-7毫米，萼片和花瓣黄绿色，近相似，长圆状披针形，唇瓣白色，基部具1个绿色或黄色的胼胝体，卵状披针形，比萼片稍短，中部反折。
铁皮石斛具有消炎去热、养阴生津、补益脾胃等功效，其有很强的药用价值。野生铁皮石斛的生长条件极为苛刻，为了实现量产人们开始进行人工培育，目前人工培养中最为关键的步骤就是铁皮石斛的种植苗处理，现在的种植苗大致可分为截取枝干转种以及种子瓶配，其中截取枝干虽然可以更加快速地获取铁皮石斛的种植苗，但是后续在驯化幼苗时往往生根较慢，这样就容易使得幼苗发黑、病变甚至腐烂，最终导致幼苗的死亡，因此需要设计一种铁皮石斛种植种苗预处理方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种铁皮石斛种植种苗预处理方法，以解决上述背景技术中提出的现在的种植苗大致可分为截取枝干转种以及种子瓶配，其中截取枝干虽然可以更加快速地获取铁皮石斛的种植苗，但是后续在驯化幼苗时往往生根较慢，这样就容易使得幼苗发黑、病变甚至腐烂，最终导致幼苗的死亡的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种铁皮石斛种植种苗预处理方法，包括吲哚乙酸和萘乙酸钠，具体步骤如下：
步骤一、从铁皮石斛植株上剪取，得到铁皮石斛种苗并放入60～ 75％浓度的酒精中进行杀菌消毒；
步骤二、将消毒过后的铁皮石斛种苗以其茎节为中心切成小段，保准每节茎节上下两端预留长度为0.5～0.7cm，放置在水中浸泡5～ 10min，使用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤三、将铁皮石斛种苗用戊二醛含量为8～10％的水溶液进行循环冲洗，使用刀具将铁皮石斛种苗的腋芽苞叶抛去，再次使用戊二醛含量为8～10％的水溶液进行循环冲洗，再次使用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤四、将处理后的铁皮石斛种苗分别放入到培养基中20～28 ℃下培养三周，最终得到具有愈伤组织的铁皮石斛种苗；
步骤五、随后在培养基中入含有椰子汁、酵母提取液和麦芽浸出液的水溶液，得到铁皮石斛幼苗；
步骤六、将铁皮石斛幼苗放入到生根培养瓶中进行培养并将铁皮石斛的两端进行固定，加入含有氨基酸、钾、钙、酒精、白糖、吲哚乙酸、萘乙酸钠以及维生素物质的生根水溶液，其中吲哚乙酸在水溶液中的占比为30～40％、萘乙酸钠在水溶液中的占比为50～55％，铁皮石斛幼苗浸泡的时间为10～20min；
步骤七、将铁皮石斛幼苗从生根水溶液中取出，使用含量为70～ 60％的酒精进行冲洗后再使用蒸馏水进行二次冲洗，用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤八、将铁皮石斛幼苗放入到驯化培养基中进行培养，保持驯化环境和实际种植环境一样，培养时间为10～15天。
优选的，所述步骤二中所使用的水为蒸馏水，水温为5～10℃。
优选的，所述步骤三中所选用的种植环境为空气相对湿度70～ 75％、光照3000～3500lx。
优选的，所述步骤四中两次使用的戊二醛含量为8～10％水溶液冲洗时间均为10～15min。
优选的，所述步骤四中所使用的刀具为经过液体浸泡的消毒刀具，所使用的消毒水溶液中含有酒精和甲醛，二者的比重为7∶3。
优选的，所述步骤五中所使用的分化水溶液中椰子汁、酵母提取液和麦芽浸出液的含量分别为35％、35％和30％。
优选的，所述步骤六中培养基的种植环境每天的光照时间不低于10h。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：通过对比实施例一到三，当使用水培以及加入不同含量比例的吲哚乙酸和萘乙酸钠可以对幼苗的生根率以及生根效果进行提升，间接地增加了幼苗在后续种植中的存活率，同时减少幼苗种植时根腐烂情况可降低幼苗种植时对土地的污染效果。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种铁皮石斛种植种苗预处理方法，包括吲哚乙酸和萘乙酸钠，具体步骤如下：
步骤一、从铁皮石斛植株上剪取，得到铁皮石斛种苗并放入60～ 75％浓度的酒精中进行杀菌消毒；
步骤二、将消毒过后的铁皮石斛种苗以其茎节为中心切成小段，保准每节茎节上下两端预留长度为0.5～0.7cm，放置在水中浸泡5～ 10min，使用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤三、将铁皮石斛种苗用戊二醛含量为8～10％的水溶液进行循环冲洗，使用刀具将铁皮石斛种苗的腋芽苞叶抛去，再次使用戊二醛含量为8～10％的水溶液进行循环冲洗，再次使用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤四、将处理后的铁皮石斛种苗分别放入到培养基中20～28 ℃下培养三周，最终得到具有愈伤组织的铁皮石斛种苗；
步骤五、随后在培养基中入含有椰子汁、酵母提取液和麦芽浸出液的水溶液，得到铁皮石斛幼苗；
步骤六、将铁皮石斛幼苗放入到生根培养瓶中进行培养并将铁皮石斛的两端进行固定，加入含有氨基酸、钾、钙、酒精、白糖、吲哚乙酸、萘乙酸钠以及维生素物质的生根水溶液，其中吲哚乙酸在水溶液中的占比为30～40％、萘乙酸钠在水溶液中的占比为50～55％，铁皮石斛幼苗浸泡的时间为10～20min；
步骤七、将铁皮石斛幼苗从生根水溶液中取出，使用含量为70～ 60％的酒精进行冲洗后再使用蒸馏水进行二次冲洗，用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤八、将铁皮石斛幼苗放入到驯化培养基中进行培养，保持驯化环境和实际种植环境一样，培养时间为10～15天。
进一步的，所述步骤二中所使用的水为蒸馏水，水温为5～10 ℃。
进一步的，所述步骤三中所选用的种植环境为空气相对湿度 70～75％、光照3000～3500lx。
进一步的，所述步骤四中两次使用的戊二醛含量为8～10％水溶液冲洗时间均为10～15min。
进一步的，所述步骤四中所使用的刀具为经过液体浸泡的消毒刀具，所使用的消毒水溶液中含有酒精和甲醛，二者的比重为7∶3。
进一步的，所述步骤五中所使用的分化水溶液中椰子汁、酵母提取液和麦芽浸出液的含量分别为35％、35％和30％。
进一步的，所述步骤六中培养基的种植环境每天的光照时间不低于10h。
实施例一；
步骤一、从铁皮石斛植株上剪取，得到铁皮石斛种苗并放入60％浓度的酒精中进行杀菌消毒；
步骤二、将消毒过后的铁皮石斛种苗以其茎节为中心切成小段，保准每节茎节上下两端预留长度为0.7cm，放置在水中浸泡5～ 10min，使用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤三、将铁皮石斛种苗用戊二醛含量为10％的水溶液进行循环冲洗，使用刀具将铁皮石斛种苗的腋芽苞叶抛去，再次使用戊二醛含量为10％的水溶液进行循环冲洗，再次使用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤四、将处理后的铁皮石斛种苗分别放入到培养基中25℃下培养三周，最终得到具有愈伤组织的铁皮石斛种苗；
步骤五、随后在培养基中入含有椰子汁、酵母提取液和麦芽浸出液的水溶液，得到铁皮石斛幼苗；
步骤六、将铁皮石斛幼苗放入到生根培养瓶中进行培养并将铁皮石斛的两端进行固定，加入含有氨基酸、钾、钙、酒精、白糖、吲哚乙酸、萘乙酸钠以及维生素物质的生根水溶液，其中吲哚乙酸在水溶液中的占比为30％、萘乙酸钠在水溶液中的占比为50％，铁皮石斛幼苗浸泡的时间为10～20min；
步骤七、将铁皮石斛幼苗从生根水溶液中取出，使用含量为60％的酒精进行冲洗后再使用蒸馏水进行二次冲洗，用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤八、将铁皮石斛幼苗放入到驯化培养基中进行培养，保持驯化环境和实际种植环境一样，培养时间为10～15天。
将铁皮石斛幼苗从循环培养基中取出，观察其每百株的黑根率为15％以及烂根率为12％。
实施例二；
步骤一、从铁皮石斛植株上剪取，得到铁皮石斛种苗并放入60％浓度的酒精中进行杀菌消毒；
步骤二、将消毒过后的铁皮石斛种苗以其茎节为中心切成小段，保准每节茎节上下两端预留长度为0.7cm，放置在水中浸泡5～ 10min，使用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤三、将铁皮石斛种苗用戊二醛含量为10％的水溶液进行循环冲洗，使用刀具将铁皮石斛种苗的腋芽苞叶抛去，再次使用戊二醛含量为10％的水溶液进行循环冲洗，再次使用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤四、将处理后的铁皮石斛种苗分别放入到培养基中25℃下培养三周，最终得到具有愈伤组织的铁皮石斛种苗；
步骤五、随后在培养基中入含有椰子汁、酵母提取液和麦芽浸出液的水溶液，得到铁皮石斛幼苗；
步骤六、将铁皮石斛幼苗放入到生根培养瓶中进行培养并将铁皮石斛的两端进行固定，加入含有氨基酸、钾、钙、酒精、白糖、吲哚乙酸、萘乙酸钠以及维生素物质的生根水溶液，其中吲哚乙酸在水溶液中的占比为35％、萘乙酸钠在水溶液中的占比为55％，铁皮石斛幼苗浸泡的时间为10～20min；
步骤七、将铁皮石斛幼苗从生根水溶液中取出，使用含量为60％的酒精进行冲洗后再使用蒸馏水进行二次冲洗，用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤八、将铁皮石斛幼苗放入到驯化培养基中进行培养，保持驯化环境和实际种植环境一样，培养时间为10～15天。
将铁皮石斛幼苗从循环培养基中取出，观察其每百株的黑根率为9％以及烂根率为8％。
实施例三；
步骤一、从铁皮石斛植株上剪取，得到铁皮石斛种苗并放入60％浓度的酒精中进行杀菌消毒；
步骤二、将消毒过后的铁皮石斛种苗以其茎节为中心切成小段，保准每节茎节上下两端预留长度为0.7cm，放置在水中浸泡5～10min，使用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤三、将铁皮石斛种苗用戊二醛含量为10％的水溶液进行循环冲洗，使用刀具将铁皮石斛种苗的腋芽苞叶抛去，再次使用戊二醛含量为10％的水溶液进行循环冲洗，再次使用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤四、将处理后的铁皮石斛种苗分别放入到培养基中25℃下培养三周，最终得到具有愈伤组织的铁皮石斛种苗；
步骤五、随后在培养基中入含有椰子汁、酵母提取液和麦芽浸出液的水溶液，得到铁皮石斛幼苗；
步骤六、将铁皮石斛幼苗放入到生根培养瓶中进行培养并将铁皮石斛的两端进行固定，加入含有氨基酸、钾、钙、酒精、白糖、吲哚乙酸、萘乙酸钠以及维生素物质的生根水溶液，其中吲哚乙酸在水溶液中的占比为40％、萘乙酸钠在水溶液中的占比为55％，铁皮石斛幼苗浸泡的时间为10～20min；
步骤七、将铁皮石斛幼苗从生根水溶液中取出，使用含量为60％的酒精进行冲洗后再使用蒸馏水进行二次冲洗，用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤八、将铁皮石斛幼苗放入到驯化培养基中进行培养，保持驯化环境和实际种植环境一样，培养时间为10～15天。
将铁皮石斛幼苗从循环培养基中取出，观察其每百株的黑根率为10％以及烂根率为9％。
通过对比实施例一到三别在于：当使用水培以及加入不同含量比例的吲哚乙酸和萘乙酸钠可以对幼苗的生根率以及生根效果进行提升，间接地增加了幼苗在后续种植中的存活率，同时减少幼苗种植时根腐烂情况可降低幼苗种植时对土地的污染效果。
通过实施例一及实施例二、实施例二和三对比数据进行对比：吲哚乙酸和萘乙酸钠在水培溶液的含量会对幼苗的根部病变率造成影响，但是随着二者含量的不断增加，对病变率的影响也在逐渐降低。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

Claims (7)

1.一种铁皮石斛种植种苗预处理方法，包括吲哚乙酸和萘乙酸钠，具体步骤如下：
步骤一、从铁皮石斛植株上剪取，得到铁皮石斛种苗并放入60～75％浓度的酒精中进行杀菌消毒；
步骤二、将消毒过后的铁皮石斛种苗以其茎节为中心切成小段，保准每节茎节上下两端预留长度为0.5～0.7cm，放置在水中浸泡5～10min，使用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤三、将铁皮石斛种苗用戊二醛含量为8～10％的水溶液进行循环冲洗，使用刀具将铁皮石斛种苗的腋芽苞叶抛去，再次使用戊二醛含量为8～10％的水溶液进行循环冲洗，再次使用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤四、将处理后的铁皮石斛种苗分别放入到培养基中20～28℃下培养三周，最终得到具有愈伤组织的铁皮石斛种苗；
步骤五、随后在培养基中入含有椰子汁、酵母提取液和麦芽浸出液的水溶液，得到铁皮石斛幼苗；
步骤六、将铁皮石斛幼苗放入到生根培养瓶中进行培养并将铁皮石斛的两端进行固定，加入含有氨基酸、钾、钙、酒精、白糖、吲哚乙酸、萘乙酸钠以及维生素物质的生根水溶液，其中吲哚乙酸在水溶液中的占比为30～40％、萘乙酸钠在水溶液中的占比为50～55％，铁皮石斛幼苗浸泡的时间为10～20min；
步骤七、将铁皮石斛幼苗从生根水溶液中取出，使用含量为70～60％的酒精进行冲洗后再使用蒸馏水进行二次冲洗，用无菌绵纸吸净其表面水分；
步骤八、将铁皮石斛幼苗放入到驯化培养基中进行培养，保持驯化环境和实际种植环境一样，培养时间为10～15天。
2.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛种植种苗预处理方法，其特征在于：所述步骤二中所使用的水为蒸馏水，水温为5～10℃。
3.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛种植种苗预处理方法，其特征在于：所述步骤三中所选用的种植环境为空气相对湿度70～75％、光照3000～3500lx。
4.根据权利要-求1所述的一种铁皮石斛种植种苗预处理方法，其特征在于：所述步骤四中两次使用的戊二醛含量为8～10％水溶液冲洗时间均为10～15min。
5.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛种植种苗预处理方法，其特征在于：所述步骤四中所使用的刀具为经过液体浸泡的消毒刀具，所使用的消毒水溶液中含有酒精和甲醛，二者的比重为7∶3。
6.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛种植种苗预处理方法，其特征在于：所述步骤五中所使用的分化水溶液中椰子汁、酵母提取液和麦芽浸出液的含量分别为35％、35％和30％。
7.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛种植种苗预处理方法，其特征在于：所述步骤六中培养基的种植环境每天的光照时间不低于10h。
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