CN112679481A

CN112679481A - 一种新化合物及其制备方法和镇痛用途

Info

Publication number: CN112679481A
Application number: CN202011608985.8A
Authority: CN
Inventors: 党玉洁; 李爱婧
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2020-12-30
Filing date: 2020-12-30
Publication date: 2021-04-20

Abstract

本发明公开了一种新化合物及其制备方法和镇痛用途，所述化合物结构式为：

所述化合物可降低醋酸诱发的小鼠扭体次数，抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进，具有良好的镇痛抗炎作用，可用于镇痛药物的开发。

Description

一种新化合物及其制备方法和镇痛用途

技术领域

本发明属于药物技术领域，具体涉及一种新化合物及其制备方法和镇痛用途。

背景技术

疼痛是人类最原始、最普遍存在的一种痛苦。多种疾病均可引起疼痛，长期持续的疼痛导致影响睡眠、不能工作、抑郁症等诸多问题，使患者精神上、身心上生产极大痛苦，严重影响患者的生活质量。目前临床上常用的止痛药存在成瘾性、耐药性、肝肾损害等诸多副作用，尤其癌症晚期患者痛不欲生，对大多数止痛药均产生耐药性，急需有效的止痛药来改善生活质量。新型止痛剂的市场需求极大，从中药中寻找具有镇痛作用的活性成分是镇痛新药开发的一个重要方向。

金线吊乌龟Stephania cepharantha Hayata为防已科千金藤属植物，民间常用其块根入药，味苦性寒，具有清热解毒、消肿止痛的功效。常用于治疗咽喉肿痛、风湿痹痛等病症。其镇痛的有效成分尚不明确。

发明内容

本发明的目的是提供一种新化合物，具有镇痛作用，本发明还提供其制备方法，对金线吊乌龟块根进行系统分离，得到本发明所述化合物。

本发明所述的新化合物，其化学结构如下：

本发明所述的新化合物的制备方法，包括如下步骤：

(1)取金线吊乌龟干燥块根，加入提取溶剂回流提取，提取液浓缩后得到粗提物浓缩液；

(2)粗提物浓缩液用稀盐酸调节pH3-4，用三氯甲烷萃取，收集三氯甲烷萃取液，浓缩后得到三氯甲烷萃取浸膏；

(3)取三氯甲烷萃取浸膏，用硅胶柱进行分离，先用三氯甲烷-甲醇(100:1)洗脱5个柱体积，弃去洗脱液，再用三氯甲烷-甲醇(50:1)洗脱10个柱体积，收集洗脱液，浓缩成浸膏；

(4)将步骤(3)所得浸膏继续经Sephadex LH-20柱层析进一步分离，以甲醇为流动相，收集黄色色带洗脱液，浓缩；

(5)采用制备型高效液相色谱对步骤(4)所得产物进一步分离，高效液相色谱条件为：C18色谱柱，流动相为64％甲醇进行洗脱，检验波长为284nm，收集主峰洗脱液，回收溶剂，即获得目标化合物。

其中：提取溶剂选任意比例的乙醇-水溶液，优选为70％乙醇-水溶液。

本发明所述的新化合物的应用为用于制备镇痛药物。

一、本发明中所述的化合物的结构确证

黄色无定型粉末，溶于甲醇。高分辨质谱得到m/z 289.1552[M+H]⁺(计算值289.1552)的分子离子峰，再结合¹H NMR谱图和¹³C NMR谱图数据推测化合物的分子式为C₁₆H₂₀N₂O₃，进一步可知其不饱和度为8。在¹H NMR谱图中，δH 6.69(dd,1H,J＝1.77,3.43Hz,H-4′),7.19(m,1H,H-3′),和7.89(d,1H,J＝1.02,H-5′),δH8.49(d,1H,J＝1.39Hz,H-6)及δH8.89(d,1H,J＝1.40Hz,H-3)为芳环上的质子信号，δH 1.42(m,6H,H-3″,4″,5″),δH1.62(m,2H,H-6″),δH 1.66(m,2H,H-2″),δH 2.12(t,2H,J＝7.17Hz,H-7″)及δH 2.34(t,2H,J＝7.17Hz,H-1″)为脂肪链上的质子信号。在¹³C NMR谱图中，给出了δC 24.7(C-6″)、δC 28.6(C-2″)、δC 29.0(C-5″)、δC 29.8(C-4″)、δC 29.9(C-3″)、δC 34.0(C-7″)、δC 35.1(C-1″)、δC 109.9(C-3′)、δC 112.4(C-4′)、δC 138.7(C-3)、δC 141.7(C-2)、δC 144.8(C-6,5′)、δC151.0(C-2′)、δC 154.2(C-5)、δC 177.9(C-8″)碳信号。结合HSQC、HMBC谱，对相关碳氢信号进行了归属，见表1。在HMBC谱中，δH 7.19(H-3′)与δC 141.7(C-2)相关，确定了结构中的呋喃环与吡嗪环的连接方式；δH 2.34(H-1″)与δC 154.2(C-5)及δC 144.8(C-6)相关，确定结构中的脂肪链与C-5相连。

综上，本发明所述的新化合物的化学结构为：

表1 ¹H(600MHz)and ¹³C(150MHz)NMR Spectroscopic Data in DMSO(δin ppm,Jin Hz).

二、本发明所述化合物对醋酸诱发小鼠腹痛的影响

1材料

1.1动物昆明种小鼠，18～22g，辽宁长生生物技术股份有限公司。

1.2试剂与仪器

冰乙酸，天津市富宇精细化工有限公司。

布洛芬片，山东新华制药股份有限公司。

醋酸溶液：取冰乙酸，加蒸馏水配制成0.17mol/L的醋酸溶液。

2实验方法与结果

小鼠20只，雌雄各半，随机分为5组，分别灌胃给予本发明所述化合物(高剂量组：6.0mg/kg；中剂量组：3.0mg/kg；低剂量组：1.5mg/kg)3d，每天1次。以布洛芬组作为阳性对照组，以蒸馏水组作为空白对照组。第3天给药后30min，每只小鼠按每10g体重腹腔注射0.17mol/L醋酸溶液0.1mL操作，致使小鼠产生歪扭反应(腹部内凹，躯干与后腿伸张，臀部高起)。记录出现第一次扭体的时间及其20min内的扭体次数。结果见表2。

表2本发明所述化合物对醋酸诱发小鼠腹痛的影响

以上结果表明，本发明所述化合物无论低、中、高剂量组的镇痛作用均远优于阳性对照布洛芬组。

三、本发明所述化合物对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响

1材料

1.2试剂与仪器

冰乙酸，天津市富宇精细化工有限公司。

氯化钠注射液，石家庄四药有限公司。

伊文思蓝，aladdin。

2实验方法与结果

小白鼠40只，雌雄各半，随机分为5组，分别灌胃给予本发明所述化合物(高剂量组：6.0mg/kg；中剂量组：3.0mg/kg；低剂量组：1.5mg/kg)7d，每天1次，以蒸馏水组作空白对照组。第7天给药后30min尾静脉注射0.5％伊文思蓝的生理盐水溶液每10g小鼠体重0.1mL，然后腹腔注射0.7％的醋酸生理盐水溶液每10g小鼠体重0.1mL，20min后处死小鼠，腹腔注射蒸馏水5.0mL，使腹腔液混合均匀，吸出腹腔液，离心，取上清液在590nm处测定吸收度，计算抑制率。结果见表3。

表3本发明所述化合物对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响

以上结果表明，本发明所述化合物对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进有明显的抑制作用，且量效关系明显，进一步说明本发明所述化合物能较强地抑制炎症早期的毛细血管通透性亢进、渗出和水肿，从而起到对炎症反应的抑制作用。因疼痛与炎症的关系密切，炎症时释放的炎症介质有致痛作用，抑制炎症反应也可以起到一定的镇痛作用。

综上所述，本发明所述化合物对疼痛及炎症均有较好的效果。

附图说明

图1为本发明所述新化合物的核磁共振¹H-NMR谱

图2为本发明所述新化合物的核磁共振¹³C-NMR谱

图3为本发明所述新化合物的核磁共振HMBC谱

图4为本发明所述新化合物的核磁共振HSQC谱

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但其并不限制本发明的实施。

实施例1

(1)取金线吊乌龟干燥块根10kg，加入100L70％乙醇-水溶液回流提取1小时，提取液浓缩后得到粗提物浓缩液；

(2)粗提物浓缩液用稀盐酸调节pH3-4，用等体积三氯甲烷萃取3次，收集三氯甲烷萃取液，浓缩后得到三氯甲烷萃取浸膏；

(3)取三氯甲烷萃取浸膏，以50kg硅胶(200-300目)为柱层析填料进行分离，径高比为1:10，先用三氯甲烷-甲醇(100:1)洗脱5个柱体积，弃去洗脱液，再用三氯甲烷-甲醇(50:1)洗脱10个柱体积，收集洗脱液，浓缩成浸膏；

(4)将步骤(3)所得浸膏继续经Sephadex LH-20柱层析进一步分离，径膏比为1:100，以甲醇为流动相，收集黄色色带洗脱液，浓缩，用薄层色谱检视，反复这一步骤，至薄层色谱检视为单一斑点；

Claims

1.一种新化合物，其特征在于，其化学结构如下：

2.一种权利要求1所述的新化合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的新化合物的制备方法，其特征在于：所述提取溶剂为70％乙醇-水溶液。

4.根据权利要求1所述的新化合物，其特征在于：用于制备镇痛药物。