CN112673113A - 用于校正靶标分析物测量中的生物素干扰的多重测定的组合物、试剂盒和方法 - Google Patents

用于校正靶标分析物测量中的生物素干扰的多重测定的组合物、试剂盒和方法 Download PDF

Info

Publication number
CN112673113A
CN112673113A CN201980061548.8A CN201980061548A CN112673113A CN 112673113 A CN112673113 A CN 112673113A CN 201980061548 A CN201980061548 A CN 201980061548A CN 112673113 A CN112673113 A CN 112673113A
Authority
CN
China
Prior art keywords
biotin
analyte
specific binding
target analyte
binding partner
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201980061548.8A
Other languages
English (en)
Inventor
T·魏
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Siemens Healthcare Diagnostics Inc
Original Assignee
Siemens Healthcare Diagnostics Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Siemens Healthcare Diagnostics Inc filed Critical Siemens Healthcare Diagnostics Inc
Publication of CN112673113A publication Critical patent/CN112673113A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/582—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with fluorescent label
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/502715—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by interfacing components, e.g. fluidic, electrical, optical or mechanical interfaces
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/76—Chemiluminescence; Bioluminescence
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
    • G01N33/542—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with steric inhibition or signal modification, e.g. fluorescent quenching

Abstract

公开了含有多重化学发光检测系统的试剂盒以及用于检测样品中的生物素和至少一种靶标分析物的存在和/或浓度的微流体装置和方法。所述试剂盒、微流体装置和方法利用单线态氧可激活化学发光化合物与两个或更多个发射不同波长的光的荧光分子的组合。

Description

用于校正靶标分析物测量中的生物素干扰的多重测定的组合 物、试剂盒和方法
相关申请的交叉引用/通过引用并入声明
本申请根据35 USC § 119(e)要求2018年9月25日提交的美国临时申请号62/735,905的权益。上述引用的专利申请的全部内容在此明确通过引入并入本文。
关于联邦资助的研究或开发的声明
不适用。
背景
诊断测定试剂经常包括抗体或其他小药物分子与半抗原(诸如生物素和荧光素)的缀合物。这些半抗原与包被在固体支持物或表面上的大蛋白分子(例如，用于生物素的抗生物素蛋白/链霉抗生物素蛋白以及用于荧光素的抗FITC)的紧密结合提供了将半抗原-抗体或半抗原-药物缀合物固定在固体支持物/表面上的方便方法。
生物素由于其作为食品补充剂的用途在本领域中众所周知；例如，生物素用于促进健康的毛发和指甲生长并治疗各种疾病状况。鉴于这种用途，可以在生物样品、诸如(但不限于)血液中发现显著水平的生物素。由于生物素用于许多诊断测定中(例如，以包被固体支持物)，因此在采用生物素化测定组分的任何测定中，测试样品中的高水平的生物素可以干扰测定信号。这对于测定、诸如在Siemens的ADVIA CENTAUR®免疫测定系统、DIMENSION EXL™集成化学系统和DIMENSION VISTA® LOCI®系统(Siemens HealthcareDiagnostics Inc., Tarrytown, NY)中发现的那些(其中期望生物素化的测定组分结合链霉抗生物素蛋白-包被的固体支持物)，尤其如此。
因为在不同生物素浓度的各种测定方法中观察到干扰，所以应当定量患者样品中存在的生物素水平以确定样品是否适合用于特定测定中。然而，大多数当前可用的生物素测定具有窄范围(即，0-50 ng/ml)，其不适合用于检测通常在实际患者样品中发现的宽动态范围的生物素浓度(即，0-1500 ng/ml)。
使用生物素作为实例，存在三种减轻半抗原干扰的问题的方式。一种是使用预制的试剂，即在试剂生产期间将生物素化的测定组分与链霉抗生物素蛋白-包被的固体支持物“预结合”。由于链霉抗生物素蛋白和生物素之间的紧密结合和缓慢的解离速率，用患者样品中的进入生物素从链霉抗生物素蛋白替换已经结合的生物素不是一个主要过程。第二种方式是增加固相支持物上的链霉抗生物素蛋白结合位点，使得除了生物素化的测定组分外，还有额外的可用于样品生物素分子的结合位点。第三种方式是上述两者的组合。然而，除非完全避免使用生物素-链霉抗生物素蛋白作为活性测定组分，否则这三种策略均无法真正解决生物素干扰的问题。所有上述解决方案的另一个主要问题是测定组分参与防止干扰，并且这可以容易影响测定信号本身的幅度。
美国专利5,212,063教导了使用具有生物素结合核心和蛋白、碳水化合物或共聚物的覆盖层的聚合物颗粒用于过滤游离生物素的目的，但不过滤缀合至大分子的生物素。这种方法对于一些测定形式可能是有效的，但其也引入可能生成会干扰测定信号的额外吸光度的颗粒。
医学诊断领域利用许多不同形式的测定技术。商业使用的测定的一个实例是发光氧通道测定(LOCI®)技术。LOCI®先进化学发光测定描述于例如美国专利号5,340,716(Ullman等人)，其全部内容明确地通过引用并入本文。当前可用的LOCI®技术具有高灵敏度，并且使用几种试剂。具体而言，LOCI®测定要求这些试剂中的两种(被称为“sensibead”和“chemibead”)通过其他特异性结合配偶体测定试剂以如下的方式保持，其中sensibead和chemibead彼此密切接近以实现信号。在暴露于特定波长的光后，sensibead释放单线态氧，并且如果两个珠粒密切接近，则单线态氧被转移至chemibead；这引起化学反应，其导致所述chemibead发出光，所述光可以在不同波长处测量。
然而，没有以LOCI®形式可用的生物素测定或LOCI®形式的消除由样品生物素引起的干扰的任何目前可用的方法。
因此，在本领域中需要克服现有技术的缺点和缺陷的新的和改进的用于检测和校正生物素干扰的测定法。本公开涉及此类测定法，以及含有其的试剂盒和微流体装置及其使用方法。
附图简述
图1示意性地描绘在本公开的一个非限制性实施方案中使用的多重测定组分。
图2示意性地描绘由图1的多重测定组分形成的复合物，这取决于测试样品中是否存在生物素和靶标分析物。
图3示意性地描绘可以根据本公开利用的受体珠粒(上小图)以及根据本公开进行的多重测定(下小图)的两个非限制性实施方案。
图4描绘根据本公开构建的多重测定的一个非限制性实施方案的测定顺序，其中测量两种分析物：蛋白X (PrX)和生物素。S，样品。S生物素，样品生物素。Ab1，针对PrX的第一抗体。Ab2，针对PrX的二抗。CB，chemibead。SB，sensibead。“::”代表结合。
图5图形描绘如何通过适当的校准将生物素信号转化为浓度([生物素] ng/ml)。
图6图形描绘在根据本公开的多重测定的一个非限制性实施方案中与生物素对靶标分析物信号的干扰及其校正相关的各种情况。
图7包含一个表，其提供了通过根据本公开的多重测定获得的数据的假设情景，并展示样品生物素对靶标分析物信号的干扰百分比。
图8含有一种非限制性方法，通过所述方法可以基于样品生物素信号或浓度来校正靶标分析物信号。
图9含有另一种非限制性方法，通过所述方法可以基于样品生物素信号或浓度来校正靶标分析物信号。
详细描述
在通过示例性语言和结果的方式详细解释本公开的至少一个实施方案之前，应理解，所述本公开不限于下面的描述中阐述的其对组分的构造和排列的细节的应用。本公开能够具有其他实施方案，或者能够以各种方式实践或实施。因此，本文使用的语言意欲被给予最广泛的可能范围和含义；并且实施方案意味着是示例性的—而非穷举性的。而且，应该理解，本文采用的措辞和术语是为了描述的目的，并且不应被认为是限制性的。
除非本文另有定义，否则结合本公开使用的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员通常理解的含义。进一步，除非上下文另有要求，否则单数术语应包括复数，并且复数术语应包括单数。前述技术和程序通常根据本领域众所周知的常规方法、并且如在本说明书通篇引用和讨论的各种一般和更具体的参考文献中所述而实施。与本文所述的分析化学、合成有机化学以及药用和药物化学结合利用的命名及其实验室程序和技术是本领域中众所周知和常用的那些。标准技术用于化学合成和化学分析。
本说明书中提及的所有专利、公开的专利申请和非专利出版物指示本公开所属领域的技术人员的技术水平。在本申请的任何部分中引用的所有专利、公开的专利申请和非专利出版物在本文中明确地通过引用以其整体并入，其程度如同每个单独的专利或出版物被具体和个别地指出通过引用并入一样。
鉴于本公开，无需过度实验即可制备和执行本文公开的所有物品、组合物、试剂盒和/或方法。尽管已经在具体实施方案的方面描述了所述物品、组合物、试剂盒和/或方法，但对于本领域技术人员将显而易见的是，在不脱离本公开的构思、精神和范围的情况下，可对所述物品、组合物、试剂盒和/或方法、以及在本文描述的方法的步骤或步骤顺序中应用变化。认为对于本领域技术人员显而易见的所有此类类似的取代和修改在如所附权利要求书限定的本公开的精神、范围和构思内。
如根据本公开所利用，除非另有指示，否则以下术语应理解为具有以下含义：
与权利要求和/或说明书中的术语“包括”结合使用时，术语“一个/种(a)”或“一个/种(an)”的使用可意味着“一个/种(one)”，但它也与“一个/种或多个/种”、“至少一个/种”和“一个/种或多于一个/种”的含义一致。因此，术语“一个/种(a)”、“一个/种(an)”和“该/所述(the)”包括复数指示物，除非上下文另有明确指示。因此，例如，对“一种化合物”的提及可指一种或多种化合物、2种或更多种化合物、3种或更多种化合物、4种或更多种化合物或更大数目的化合物。术语“多个/种”是指“两个/种或更多个/种”。
术语“至少一个/种”的使用将被理解为包括一个/种以及多于一个/种的任何数量，包括但不限于2、3、4、5、10、15、20、30、40、50、100个/种等。术语“至少一个/种”可延伸多至100或1000或更多个/种，这取决于它所附接的术语；此外，100/1000的数量不视为限制性的，因为更高的限值也可产生令人满意的结果。此外，术语“X、Y和Z中的至少一个/种”的使用将被理解为包括单独的X，单独的Y和单独的Z，以及X、Y和Z的任何组合。序数术语(即，“第一”、“第二”、“第三”、“第四”等)的使用仅用于区分两个或更多个事项的目的，并且不意味着暗示例如一个事项相对于另一事项的任何顺序或次序或重要性、或任何添加次序。
在权利要求中使用术语“或”用于意指包括性的“和/或”，除非明确指出仅指替代方案或者除非替代方案是互相排斥的。例如，以下任一种都满足条件“A或B”：A为真(或存在)且B为假(或不存在)，A为假(或不存在)且B为真(或存在)，并且A和B两者均为真(或存在)。
如本文所用，对“一个实施方案(one embodiment)”、“一个实施方案(anembodiment)”、“一些实施方案”、“一个实例(one example)”、“例如”或“一个实例(anexample)”的任何引用意指结合该实施方案描述的具体要素、特征、结构或特点包括在至少一个实施方案中。例如，说明书中各个地方出现的短语“在一些实施方案中”或“一个实例”不一定全部是指同一实施方案。此外，对一个或多个实施方案或实例的所有引用都应被解释为对权利要求非限定性的。
在整个申请中，术语“约”用于指示，值包括用于测定该值的组合物/仪器/装置、方法的误差的固有变化，或研究受试者间存在的变化。例如，但不限于，当利用术语“约”时，指定值可以与列举值相差正负20%，或15%，或12%，或11%，或10%，或9%，或8%，或7%，或6%，或5%，或4%，或3%，或2%，或1%，因为此类变化适用于执行公开的方法并由本领域普通技术人员所理解。
如在本说明书和一个或多个权利要求中所用，术语“包含(comprising)”(和任何形式的包含，例如“包含(comprise)”和“包含(comprises)”)、“具有(having)”(和任何形式的具有，例如“具有(have)”和“具有(has)”)、“包括(including)”(和任何形式的包括，例如“包括(includes)”和“包括(include)”)或“含有(containing)”(和任何形式的含有，例如“含有(contains)”和“含有(contain)”)都是包括性的或开放式的，并且不排除另外的未列举的要素或方法步骤。
如本文所用的术语“或其组合”是指所述术语之前列出的事项的所有排列和组合。例如，“A、B、C或其组合”意欲包括以下中的至少一个：A、B、C、AB、AC、BC或ABC，并且如果次序在特定上下文中是重要的，则也包括BA、CA、CB、CBA、BCA、ACB、BAC或CAB。继续该实例，明确包括的是含有一个或多个事项或术语的重复的组合，例如BB、AAA、AAB、BBC、AAABCCCC、CBBAAA、CABABB等等。本领域技术人员将理解，除非从上下文可见，否则通常对任何组合中的事项或术语的数量没有限制。
如本文所用，术语“实质上(substantially)”意味着随后描述的事件或情况完全发生或者随后描述的事件或情况在大范围或程度上发生。例如，当与具体事件或环境相关时，术语“实质上”意味着随后描述的事件或情况发生在至少80％的时间、或至少85％的时间、或至少90％的时间、或至少95％的时间。术语“实质上相邻”可以意指两个事项与彼此100%相邻，或者两个事项与彼此密切接近，但与彼此不是100%相邻，或者两个事项之一的一部分与另一事项不是100%相邻，而是与另一事项密切接近。
如本文所用，短语“与…缔合(associated with)”和“与…偶联(coupled to)”包括两个部分彼此直接缔合/结合以及两个部分彼此间接缔合/结合二者。缔合/偶联的非限制性实例包括例如通过直接的键或通过间隔基团将一个部分与另一个部分共价结合，直接或借助与所述部分结合的特异性结合对成员将一个部分与另一个部分非共价结合，诸如通过将一个部分溶解在另一个部分中或通过合成而将一个部分掺入另一个部分，和将一个部分涂覆在另一个部分上。
术语“类似物”和“衍生物”在本文中可互换使用，并且是指如下的物质，其在其结构中包含与给定化合物相同的基本碳骨架和碳官能度，但也可以含有对其的一个或多个取代。如本文中所用，术语“取代”将被理解为是指用残基R替换化合物上的至少一个取代基。在某些非限制性实施方案中，R可以包括H，羟基，硫醇，选自氟化物、氯化物、溴化物或碘化物的卤化物，选自下列之一的C1-C4化合物：任选取代的直链、支链或环状烷基，和直链支链或环状烯基，其中任选的取代基选自一种或多种烯基烷基、炔基烷基、环烷基、环烯基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环烷基、任选取代的杂环烯基烷基、芳基环烷基和芳基杂环烷基，其中每个是任选取代的，其中所述任选的取代基选自下列中的一种或多种：烯基烷基、炔基烷基、环烷基、环烯基烷基、芳基烷基、烷基芳基、杂芳基烷基、杂环烷基、任选取代的杂环烯基烷基、芳基环烷基和芳基杂环烷基、苯基、氰基、羟基、烷基、芳基、环烷基、氰基、烷氧基、烷硫基、氨基、-NH(烷基)、-NH(环烷基)2、羧基和-C(O))-烷基。
如本文所用的术语“样品”将被理解为包括可以根据本公开利用的任何类型的生物样品。可利用的流体生物样品的实例包括但不限于：全血或其任何部分(即，血浆或血清)、尿液、唾液、痰、脑脊液(CSF)、皮肤、肠液、腹膜内液、囊液(cystic fluid)、汗液、间质液、细胞外液、泪液、粘液、膀胱洗液(bladder wash)、精液、粪便、胸膜液、鼻咽液、其组合等。
如本文在术语“生物素-特异性结合配偶体”或“靶标分析物-特异性结合配偶体”中具体(但不以限制方式)使用的术语“特异性结合配偶体”应理解为是指能够分别与生物素或靶标分析物特异性缔合的任何分子。例如但非限定地，所述结合配偶体可以是抗体、受体、配体、适体、分子印迹聚合物(即，无机基质)、其组合或衍生物，以及能够分别特异性结合生物素或靶标分析物的任何其他分子。
术语“抗体”在本文中以最广义使用，并且是指例如完整单克隆抗体和多克隆抗体，多特异性抗体(例如，双特异性抗体)，其表现出结合分析物的期望生物活性的抗体片段及缀合物(诸如但不限于Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、scFv、Fd、双抗体、单链抗体和其他抗体片段及其缀合物，其保留完整抗体的可变区的至少一部分)，抗体替代蛋白或肽(即，工程改造的结合蛋白/肽)及其组合或衍生物。所述抗体可以是任何类型或类别(例如，IgG、IgE、IgM、IgD和IgA)或亚类(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)。
如本文所用的术语“半抗原”是指能够被靶标分析物-特异性结合配偶体、诸如(但不限于)抗体识别的小的蛋白性或非蛋白抗原决定簇(或“表位”)。如本文所用的术语“多半抗原”应理解为是指含有多个与其附接的表位/抗原决定簇的合成分子。
“分析物”是能够被分析物-特异性结合配偶体、诸如(但不限于)抗体识别的大分子。分析物和半抗原两者均包含至少一个抗原决定簇或“表位”，其为结合分析物-特异性结合配偶体(即抗体)的抗原或半抗原的区域。通常，半抗原上的表位是整个分子。
本公开的某些非限制性实施方案涉及用于检测样品中的生物素和一种或多种靶标分析物两者的多重测定法以及含有其的试剂盒及其使用方法。在一些测定实施方案中，信号产生系统(sps)成员包括敏化剂，诸如，例如，光敏剂，和两种或更多种化学发光-荧光分子组合物(其中第一化学发光组合物产生与生物素的存在相关的信号，而至少第二化学发光组合物产生与靶标分析物的存在相关的信号)；在这些测定实施方案中，所述敏化剂的激活产生的产物激活一种或多种化学发光组合物，由此生成可检测信号，所述可检测信号涉及所检测的结合的靶标分析物和结合的生物素的量。本公开可基于的测定平台的一个示例性(但非限制性)实施方案是发光氧通道测定(LOCI®; Siemens HealthcareDiagnostics Inc., Tarrytown, NY)。LOCI®测定描述于例如美国专利号5,340,716(Ullman等人)，其全部内容明确地通过引用并入本文。
能够经由本文描述或以其他方式考虑的测定形式检测的任何靶标分析物可以通过本公开的多重测定进行检测。靶标分析物的非限制性实例包括：原降钙素(PCT)、BNP、NT-proBNP、D-二聚体、CKMB、肌红蛋白、髓过氧化物酶、ST2、hCG、LH、FSH、iPTH、TSH、fT4、T4、PSA、fPSA和cPSA及其组合。
本公开的某些非限制性实施方案涉及用于进行多重测定的试剂盒，所述多重测定利用化学发光检测系统，所述化学发光检测系统用于测定样品中的生物素和至少一种额外靶标分析物的浓度。所述试剂盒包括：(a) 组合物，其包含具有与其直接或间接结合的生物素或其类似物的单线态氧可激活的化学发光化合物，以及被激活的化学发光化合物激发的荧光分子；(b)组合物，其包含具有与其直接或间接结合的对靶标分析物的第一分析物-特异性结合配偶体的单线态氧可激活的化学发光化合物，以及被激活的化学发光化合物激发的荧光分子，其中所述荧光分子与(a)的荧光分子不同，且发射与(a)的荧光分子不同波长的光；(c)生物素化的对靶标分析物的第二分析物-特异性结合配偶体，其中所述第二分析物-特异性结合配偶体结合所述靶标分析物的与(b)的第一分析物-特异性结合配偶体不同的表位；和(d)组合物，其包含能够在其激发态下生成单线态氧且具有与其直接或间接结合的生物素-特异性结合配偶体的敏化剂。
在某些非限制性实施方案中，所述试剂盒进一步包括：(e)组合物，其包含具有与其直接或间接结合的对第二靶标分析物的第一分析物-特异性结合配偶体的单线态氧可激活的化学发光化合物，以及被激活的化学发光化合物激发的荧光分子，其中所述荧光分子与(a)和(b)的荧光分子不同，且发射与(a)和(b)的荧光分子不同波长的光；和(f)生物素化的对第二靶标分析物的第二分析物-特异性结合配偶体，其中所述第二分析物-特异性结合配偶体结合所述第二靶标分析物的与所述第一分析物-特异性结合配偶体不同的表位。
化学发光化合物(化学发光剂)是化学可激活且作为这种激活的结果而发射特定波长的光的化合物。通过举例说明而非限制性地，化学发光剂的实例包括例如：能够与单线态氧或过氧化物反应以形成可以分解成酮类或羧酸衍生物的氢过氧化物或二氧环丁烷(dioxetane)的烯烃类；可以通过光的作用分解的稳定二氧环丁烷；可以与单线态氧反应以形成二酮类的炔烃类；可以形成偶氮化合物或偶氮羰基化合物的腙类或酰肼类，诸如(但不限于)鲁米诺；和可以形成内过氧化物的芳族化合物。作为激活反应的结果，化学发光剂直接或间接引起发光。
在某些实施方案中，单线态氧可激活的化学发光化合物可以是这样的物质，其经历与单线态氧的化学反应以形成亚稳态中间物质，所述亚稳态中间物质可分解，并同时或随后发射光。包含化学发光化合物的组合物可通过激活的化学发光化合物直接激发；或者，所述组合物可进一步包含至少一种荧光分子，所述荧光分子由激活的化学发光化合物激发。
敏化剂是生成用于激活化学发光化合物的反应性中间产物(诸如例如单线态氧)的分子，通常是化合物。在一些非限制性实施方案中，所述敏化剂是光敏剂。通过实例而非限制性地，可以化学激活(通过，例如酶和金属盐)的其他敏化剂包括，借助外部光源的激活或不借助外部光源的激活而可以产生单线态氧的其他物质和组合物。例如，某些化合物已经显示催化过氧化氢转化为单线态氧和水。其他敏化剂物质和组合物的非限制性实例包括碱土金属Ca、Sr和Ba的氧化物；d0构型中的3A、4A、SA和6A族的元素的衍生物；锕系元素和镧系元素的氧化物；和氧化剂CIO-、BrO-、Au3+、IO3 -和IO4 -；和具体而言，钼酸根、过氧钼酸根、钨酸根和过氧钨酸根离子，和乙腈。下列参考文献(其在此明确地以其整体通过引用并入)提供了关于也落入本公开的范围内的敏化剂物质和组合物的进一步公开内容：Aubry, J. Am. Chem. Soc., 107:5844-5849 (1985)；Aubry, J. Org. Chem., 54:726-728 (1989)；Böhme和Brauer, Inorg. Chem., 31:3468-3471 (1992)；Niu和Foote, Inorg. Chem., 31:3472-3476 (1992)；Nardello等人, Inorg. Chem., 34:4950-4957 (1995)；Aubry和Bouttemy, J. Am. Chem. Soc., 119:5286-5294 (1997)；和Almeida等人, Anal. Chim. Acta, 482:99-104 (2003)；其各自的完整内容在此明确地通过引用并入本文。
光敏剂的范围内还包括不是真的敏化剂、但在热、光、电离辐射或化学激活的激发下将释放单线态氧分子的化合物。此类化合物的成员包括例如(但非限制性地)，内过氧化物，诸如1,4-二羧基乙基-1,4-萘内过氧化物、9,10-二苯基蒽-9,10-内过氧化物和5,6,11,12-四苯基萘5,12-内过氧化物。加热这些化合物或这些化合物直接吸收光而释放单线态氧。
光敏剂是用于通过例如用光激发生成单线态氧而激活光活性化合物的敏化剂。光敏剂是光可激活的，且包括例如染料和芳族化合物，并且通常是由共价键合的原子构成的化合物，通常具有多个共轭的双键或三键。所述化合物应当吸收在约200 nm至约1,100 nm的波长范围内、诸如(但不限于)约300 nm至约1,000 nm的范围内或约450 nm至950 nm的范围内的光，在激发波长下，其最大吸光度时的消光系数大于500 M-1 cm-1，或大于5,000 M-1cm-1，或大于50,000 M-1 cm-1。光敏剂应当是相对光稳定的，且可以不与单线态氧有效反应。通过举例说明而非限制性地，光敏剂的实例包括：丙酮；二苯甲酮；9-噻吨酮；伊红；9,10-二溴蒽；亚甲基蓝；金属卟啉类诸如(但不限于)血卟啉；酞菁；叶绿素；玫瑰红；和巴克敏斯特富勒烯以及这些化合物的衍生物。
可以根据本公开利用的化学发光化合物和光敏剂的具体、非限制性实例记载于美国专利号5,340,716 (Ullman，等人)，其完整内容在此明确地通过引用并入本文。
可以根据本公开内容利用本领域中已知或本文另外考虑的任何靶标分析物-特异性结合配偶体。对靶标分析物的分析物-特异性结合配偶体的非限制性实例包括抗体、受体、配体、适体、分子印迹聚合物(即，无机基质)及其任何组合或衍生物以及能够特异性结合靶标分析物的任何其他分子。在一个具体(但非限制性)实例中，(a)和(b)的第一和第二分析物-特异性结合配偶体各自是针对靶标分析物的抗体。同样，在一个具体(但非限制性)实施方案中，如果存在，(e)和(f)的第一和第二分析物-特异性结合配偶体各自可以是针对第二靶标分析物的抗体。
可以根据本公开内容利用本领域中已知或本文另外考虑的任何生物素-特异性结合配偶体。在某些非限制性实施方案中，所述生物素-特异性结合配偶体是针对生物素的抗体。在其他非限制性实施方案中，所述生物素-特异性结合配偶体是抗生物素蛋白或其类似物。
根据本公开，可以利用本领域已知或本文另外考虑的任何抗生物素蛋白类似物，只要抗生物素蛋白或抗生物素蛋白类似物：(1)能够与敏化剂缔合；(2)能够结合生物素化的分析物-特异性结合配偶体；和(3)能够结合样品中可能存在的生物素。可以根据本公开利用的抗生物素蛋白类似物的非限制性实例包括Kang等人(J Drug Target (1995) 3:159-65)(其全部内容明确地通过引用并入本文)中公开的那些。抗生物素蛋白类似物的具体非限制性实例包括抗生物素蛋白、链霉抗生物素蛋白、traptavidin、中性抗生物素蛋白、Neutralite抗生物素蛋白、Neutravidin、Lite-抗生物素蛋白、琥珀酰化抗生物素蛋白、其他形式的修饰或基因工程改造的抗生物素蛋白，上述任一种的酯、盐和/或衍生物等。
在某些非限制性实施方案中，(a)和/或(b)的单线态氧可激活化学发光化合物具有与其直接或间接结合的半抗原。
能够被激活的化学发光化合物激发并以特定的、可检测的波长发光的本领域中已知的任何荧光分子可以根据本公开用作(a)和(b)(以及(e)，如果存在的话)的荧光分子，只要由每个荧光分子产生的信号都可与由利用的其他荧光分子产生的信号不同地检测到。也就是说，(a)的荧光分子必须发射与(b)的荧光分子发射光的波长充分不同的波长的光，使得当同时检测时两个信号可以与彼此区分。在一个具体(但非限制性)实例中，根据本公开利用的每种荧光分子独立地选自铽、铀、钐、铕、钆和镝。例如(但不通过限制的方式)，关于当同时检测时可以与彼此区分的两种或三种信号的生成，铽发射约545 nm的波长的光，铀发射约612 nm的波长的光，且钐发射约645 nm的波长的光。
可以以任何形式提供组合物/试剂盒/微流体装置/方法的测定组分/试剂，所述形式允许它们根据本公开概念发挥功能。例如但非限制性地，每种试剂可以以液体形式提供并且以散装和/或单一等分试样形式设置在试剂盒内。或者，在一个具体(但非限制性)实施方案中，一种或多种试剂可以以单一等分试样冻干试剂的形式设置于试剂盒中。微流体装置中干燥试剂的使用详细描述于美国专利号9,244,085 (Samproni)，其完整内容在此明确地通过引用并入本文。
除了上文详细描述的测定组分/试剂以外，所述试剂盒可以进一步含有用于进行本文描述或另外考虑的任何特定测定的其他试剂。这些额外的试剂的性质将取决于特定的测定形式，并且其鉴定完全在本领域普通技术人员的技能范围内；因此，认为没有必要对其另外描述。此外，试剂盒中存在的组分/试剂可以各自在分开的容器/隔室中，或者各种组分/试剂可以被组合于一个或多个容器/隔室中，这取决于所述组分/试剂的交叉反应性和稳定性。此外，所述试剂盒可包括其中设置组分/试剂的微流体装置。
所述试剂盒中的各种组分/试剂的相对量可以广泛变化，以提供组分/试剂的浓度，其实质上优化需要在测定方法期间发生的反应，并且进一步实质上优化测定的灵敏度。在适当情况下，试剂盒中的一种或多种组分/试剂可以提供为干燥粉末，诸如冻干粉末，并且所述试剂盒可进一步包括用于溶解干燥试剂的赋形剂；以该方式，可以从这些组分获得具有用于进行根据本公开的方法或测定的适当浓度的试剂溶液。试剂盒也可以包括阳性和/或阴性对照。此外，所述试剂盒可进一步包括解释如何使用试剂盒的一组书面说明。该性质的试剂盒可用于本文描述或另外考虑的任何方法。
本公开的某些额外非限制性实施方案涉及微流体装置，其包括上文所述的任何试剂盒的组分。具体而言，某些非限制性实施方案包括用于测定样品中生物素和至少一种额外靶标分析物的浓度的微流体装置。所述微流体装置包括：(i)通过其施加样品的入口通道；和(ii)至少一个能够与所述入口通道流体连通的第一隔室。(ii)的隔室含有：(a)至少第一组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物且具有与其直接或间接结合的生物素或其类似物，所述第一组合物进一步包含被激活的化学发光化合物激发的荧光分子；(b)至少第二组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物且具有与其直接或间接结合的对靶标分析物的第一分析物-特异性结合配偶体，所述第二组合物进一步包含被激活的化学发光化合物激发的荧光分子，其中所述荧光分子与(a)的荧光分子不同，且发射与(a)的荧光分子不同波长的光；(c)生物素化的对靶标分析物的第二分析物-特异性结合配偶体，其中所述第二分析物-特异性结合配偶体结合所述靶标分析物的与(b)的第一分析物-特异性结合配偶体不同的表位；和(d)组合物，其包含能够在其激发态下生成单线态氧且具有与其直接或间接结合的生物素-特异性结合配偶体的敏化剂。在某些具体(但非限制性)实施方案中，(ii)的隔室进一步含有至少第三组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物且具有与其直接或间接结合的第二靶标分析物或其类似物，所述第二组合物进一步包含被激活的化学发光化合物激发的荧光分子，其中所述荧光分子与(a)和(b)的荧光分子不同，且发射与(a)和(b)的荧光分子不同波长的光。
在本公开的微流体装置中可以利用上文详细描述或本文以其他方式考虑的任何单线态氧可激活化学发光化合物、敏化剂、荧光分子、生物素或其类似物、靶标分析物或其类似物和靶标分析物-特异性结合配偶体。
例如，在某些具体(但非限制性)实施方案中，(a)和(b)的单线态氧可激活化学发光化合物是经历与单线态氧的化学反应以形成亚稳态中间物质的物质，所述亚稳态中间物质可以分解并同时或随后发射光。
在具体(但非限制性)实施方案中，所述敏化剂是光敏剂。
在具体(但非限制性)实施方案中，(b)和(c)的第一和第二分析物-特异性结合配偶体各自是针对所述靶标分析物的抗体。
在具体(但非限制性)实施方案中，(iii)的生物素-特异性结合配偶体是抗生物素蛋白或其类似物，或者是针对生物素的抗体。
在具体(但非限制性)实施方案中，(a)和/或(b)的单线态氧可激活化学发光化合物具有与其直接或间接结合的半抗原。
在具体(但非限制性)实施方案中，(a)和(b)的荧光分子各自独立地选自铽、铀、钐、铕、钆和镝。例如(但不通过限制的方式)，铽发射约545 nm的波长的光，铀发射约612 nm的波长的光，且钐发射约645 nm的波长的光。
在具体(但非限制性)实施方案中，(ii)的隔室进一步含有：(e)至少第三组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物且具有与其直接或间接结合的对第二靶标分析物的第一分析物-特异性结合配偶体，所述第二组合物进一步包含被激活的化学发光化合物激发的荧光分子，其中所述荧光分子与(a)和(b)的荧光分子不同，且发射与(a)和(b)的荧光分子不同波长的光；和(f)生物素化的对第二靶标分析物的第二分析物-特异性结合配偶体，其中所述第二分析物-特异性结合配偶体结合所述第二靶标分析物的与(e)的第一分析物-特异性结合配偶体不同的表位。在一个具体(但非限制性)实施方案中，所述第三组合物的荧光分子选自铽、铀、钐、铕、钆和镝。
在某些非限制性实施方案中，(ii)的所有要素(a)-(d) (和(e)和(f)，当存在时)存在于同一隔室中。在替代非限制性实施方案中，要素(a)-(d) (和(e)和(f)，当存在时)在两个或更多个隔室之间分开。
所述装置可以提供有隔室的任何排列以及各种组分在其之间的分布，其允许所述装置根据本公开发挥功能。
可以密封微流体装置的任何隔室，以便将其中设置的试剂保持于基本上气密的环境中，直至使用它们；例如，可以密封含有冻干试剂的隔室以防止试剂的任何无意重构。入口通道和一个隔室，以及两个隔室可以被描述为“能够与彼此流体连通”；该短语指示所述隔室各自仍可以被密封，但在刺穿在其中或在其之间形成的密封物后，两个隔室能够在其之间具有流体流动。
本公开的微流体装置可以提供有本领域中已知的或本文另外考虑的任何其他期望特征。例如但非限制性地，本公开的微流体装置可以进一步包括读取室；所述读取室可以是含有上文所述的试剂的任何隔室，或者所述读取室可以与所述隔室流体连通。所述微流体装置可以进一步包括一个或多个额外的隔室，其含有其他溶液，诸如(但不限于)洗涤溶液、稀释溶液、赋形剂、干扰溶液、阳性对照、阴性对照、质量对照等。这些额外隔室可以与其他隔室中的一个或多个流体连通。例如，所述微流体装置可以进一步包括一个或多个含有洗涤溶液的隔室，并且这些隔室能够与所述装置的任何其他隔室流体连通。在另一个实例中，所述微流体装置可以进一步包括一个或多个含有用于溶解一种或多种干燥试剂的赋形剂的隔室，并且所述隔室可能够与所述装置的任何其他隔室流体连通。在又一个进一步实例中，所述微流体装置可以包括一个或多个含有稀释溶液的隔室，并且所述隔室能够与所述装置的任何其他隔室流体连通。
此外，本文描述或另外考虑的任何试剂盒/微流体装置可以包括单个试剂盒/装置中与所述生物素测定复用的多于一个靶标分析物测定。当多个靶标分析物测定存在时，所述测定各自可以如本文所述构建和发挥功能。或者，本文所述的生物素和靶标分析物测定可以与本领域已知的能够包含在本公开的试剂盒/微流体装置内的任何其他靶标分析物测定复用。可以与本文公开和请求保护的测定复用的其他测定的非限制性实例包括BNP、NT-proBNP、D-二聚体、CKMB、肌红蛋白、髓过氧化物酶、ST2、PCT、hCG、LH、FSH、iPTH、TSH、fT4、T4、PSA、fPSA和cPSA及其组合。
当多个靶标分析物测定存在于单个微流体装置中时，多个入口通道可以连接至样品应用室。在某些实施方案中，部分样品可以从样品应用室穿过至多个入口通道，而不考虑其内容物。或者，结构可以存在于样品应用室、入口通道和/或其之间的连接，其允许从整个样品分离某些组分并将所述组分递送至不同测定。可以根据本公开利用的样品分配装置的非限制性实例详细描述于美国专利号9,416,776 (Ledden, 等人)，其完整内容在此明确地通过引用并入本文。
某些非限制性实施方案还涉及用于检测样品中生物素和至少一种额外靶标分析物的存在和/或浓度的方法。所述方法包括以下步骤。
在第一步骤中，将怀疑含有生物素和至少一种额外靶标分析物的样品与以下同时或全部或部分依次组合：(a)至少第一组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物且具有与其直接或间接结合的生物素或其类似物，所述第一组合物进一步包含荧光分子，所述荧光分子被激活的化学发光化合物激发；(b)至少第二组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物且具有与其直接或间接结合的对靶标分析物的第一分析物-特异性结合配偶体，所述第二组合物进一步包含被激活的化学发光化合物激发的荧光分子，其中所述荧光分子与(a)的荧光分子不同，且发射与(a)的荧光分子不同波长的光；(c)生物素化的对靶标分析物的第二分析物-特异性结合配偶体，其中所述第二分析物-特异性结合配偶体结合所述靶标分析物的与(b)的第一分析物-特异性结合配偶体不同的表位；和(d)过量的组合物，其包含能够在其激发态下生成单线态氧且具有与其直接或间接结合的生物素-特异性结合配偶体的敏化剂。
在第二步骤中，将所述组分一起孵育以允许(b)和(c)结合样品中存在的靶标分析物以及(c)结合(d)，其中(b)与(d)的间接结合(经由(c)和靶标分析物)导致形成靶标分析物复合物，其中使敏化剂与化学发光化合物密切接近。另外，(a)在样品中不存在生物素的情况下结合(d)并导致形成生物素复合物，其中使敏化剂与化学发光化合物密切接近。
在第三步骤中，所述敏化剂被激活以生成单线态氧，其中生物素复合物和靶标分析物复合物中存在的敏化剂的激活引起每种复合物中存在的化学发光化合物的激活。
在第四步骤中，通过测量由(a)的荧光分子发射的光的量来测定由生物素复合物中激活的化学发光化合物生成的化学发光的量，其中样品中生物素的量与发射的光量成反比。
在第五步骤中，通过测量由(b)的荧光分子发射的光的量来测定由靶标分析物复合物中激活的化学发光化合物生成的化学发光的量，以测定样品中的靶标分析物的量。
在第六步骤中，如果期望，可以任选地重复第二 - 第五步骤。
在第七步骤中，基于在步骤(4)中检测到的任何生物素干扰来校正步骤(5)的结果。或者，如果在步骤(4)中检测到的生物素浓度高于最大阈值水平，则将步骤(5)的结果标记为不可靠。
在所述方法的某些非限制性实施方案中，步骤(1)进一步包括与要素(a)-(d)组合：(e)至少第三组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物，其具有与其直接或间接结合的对第二靶标分析物的第一分析物-特异性结合配偶体，所述第三组合物进一步包含被激活的化学发光化合物激发的荧光分子，其中所述荧光分子与(a)和(b)的荧光分子不同，且发射与(a)和(b)的荧光分子不同波长的光；和(f)生物素化的对第二靶标分析物的第二分析物-特异性结合配偶体，其中所述第二分析物-特异性结合配偶体结合所述第二靶标分析物的与(e)的第一分析物-特异性结合配偶体不同的表位。在该情况下，所述方法可以进一步包括以下步骤：(8)通过测量由(e)的荧光分子发射的光的量来测定由第二靶标分析物复合物中激活的化学发光化合物生成的化学发光的量，以测定样品中的靶标分析物的量；和(9)基于在步骤(4)中检测到的任何生物素干扰来校正步骤(8)的结果，和/或如果在步骤(4)中检测到的生物素浓度高于最大阈值水平，则将步骤(8)的结果标记为不可靠。
在本公开的方法中可以利用上文详细描述或本文以其他方式考虑的任何单线态氧可激活化学发光化合物、敏化剂、荧光分子、生物素或其类似物、靶标分析物或其类似物和靶标分析物-特异性结合配偶体。
例如，在某些具体(但非限制性)实施方案中，(a)和(b)(和(e)，当存在时)的单线态氧可激活化学发光化合物是经历与单线态氧的化学反应以形成亚稳态中间物质的物质，所述亚稳态中间物质可以分解并同时或随后发射光。
在具体(但非限制性)实施方案中，所述敏化剂是光敏剂，且步骤(3)中的敏化剂的激活包括用光照射(诸如，但不限于，在约680 nm处照射)。
在具体(但非限制性)实施方案中，(b)和(c)(以及(e)和(f)，如果存在的话)的第一和第二分析物-特异性结合配偶体各自是针对所述靶标分析物的抗体。
在具体(但非限制性)实施方案中，(d)的生物素-特异性结合配偶体是抗生物素蛋白或其类似物，或者是针对生物素的抗体。
在具体(但非限制性)实施方案中，(a)和/或(b)的单线态氧可激活化学发光化合物具有与其直接或间接结合的半抗原。
在具体(但非限制性)实施方案中，(a)和(b)(和(e)，如果存在的话)的荧光分子各自独立地选自铽、铀、钐、铕、钆和镝。例如(但不通过限制的方式)，铽发射约545 nm的波长的光，铀发射约612 nm的波长的光，且钐发射约645 nm的波长的光。
可以利用期望针对其进行生物素的存在测定的任何样品可以用作根据本公开的方法的样品。样品的非限制性实例包括生物样品，诸如但不限于，全血或其任何部分(即，血浆或血清)、尿液、唾液、痰、脑脊液(CSF)、皮肤、肠液、腹膜内液、囊液、汗液、间质液、细胞外液、泪液、粘液、膀胱洗液、精液、粪便、胸膜液、鼻咽液及其组合。具体非限制性实例包括裂解的全血细胞和裂解的红血细胞。
如上所提及，组合(同时或依次)提供所述方法的各种组分。当依次添加所述方法的各种组分时，可以改变组分的添加次序；本领域普通技术人员可确定向测定添加不同组分的具体期望次序。最简单的添加次序当然是同时添加所有物质，并测定由其产生的信号。或者，可以依次组合每种组分，或组分的组。在某些实施方案中，可以在一次或多次添加之后包括孵育步骤。
在一个替代(但非限制性)实施方案中，所述方法的步骤(1)包括首先将样品与生物素化的靶标分析物-特异性结合配偶体和包含敏化剂的组合物组合，并将其孵育，然后添加包含单线态氧可激活化学发光化合物的组合物。或者，所述方法的步骤(1)可以包括首先将样品与包含单线态氧可激活化学发光化合物的组合物组合，并将其孵育，然后添加包含敏化剂的组合物。在该后者实施方案中，可以在孵育步骤之前或之后添加生物素化的靶标分析物-特异性结合配偶体。
尽管本公开的具体实施方案被描述为具有LOCI®测定形式，但应理解，本公开还涉及其他测定形式(和试剂盒、微流体装置及其执行方法)，对于所述其他测定形式，期望消除样品生物素干扰。例如(但不通过限制的方式)，本公开还包括这样的测定形式，其中可以利用不同的信号分子(诸如(但不限于)与生成不同波长的信号的不同酶连接的不同抗体)来代替上文所述的含有化学发光化合物的组合物。
实施例
下文提供了实施例。然而，应理解本公开，其应用不限于本文公开的具体实验、结果和实验室程序。反而，该实施例仅作为各个实施方案之一提供，并且意在是示例性的，而非穷举性的。
实施例1
图1描绘存在于本公开的某些非限制性实施方案的试剂盒和微流体装置中且在方法中使用的测定组分。这些组分包括(从左至右)：
(i) 第一chemibead，其具有与其直接或间接结合的生物素或其类似物且含有被存在于chemibead中的激活的化学发光化合物激发的第一荧光分子；
(ii) sensibead，其能够在其激发态生成单线态氧且具有与其直接或间接结合的生物素-特异性结合配偶体；
(iii) 生物素化的靶标分析物-特异性结合配偶体；和
(iv) 第二chemibead，其具有与其直接或间接结合的靶标分析物或其类似物且含有被存在于chemibead中的激活的化学发光化合物激发的第二荧光分子。
第一和第二荧光分子与彼此不同，并且发射不同波长的光；以这种方式，可以在同一反应中同时进行生物素和靶标分析物两者的测定，因为在与含有(iv)的复合物不同的波长处检测含有(i)的复合物。
当样品中不存在生物素时，在(i)和(ii)之间形成复合物，如在图2的上部小图的左侧所示，并且在激活敏化剂后生成信号。然而，当样品中存在生物素时，其与(i)竞争结合(ii)，如图2的下部小图的左侧所示。因此，将样品中生物素的存在检测为在用于检测从第一荧光分子发射的光的第一波长处检测到的信号的减少。
另外，在同一反应中，(iii)结合样品中存在的靶标分析物，且然后(iv)结合(iii)，如图2的下部小图的右侧所示。因此，将样品中靶标分析物的存在检测为在用于检测从第二荧光分子发射的光的第二波长处检测到的信号的增加。相反，当不存在靶标分析物时，仅(iii)可以结合(ii)，但(iv)不能与其结合，且因此在靶标分析物不存在的情况下不生成信号(图2的上部小图的左侧)。
如果在样品中检测到生物素，则获得自靶标分析物测定的结果可以基于使用第一chemibead检测到的任何生物素干扰进行校正，和/或如果检测到的生物素浓度高于最大阈值水平，则标记为不可靠。
此外，除了检测生物素干扰以外，本公开的多重测定还可以适于同时检测多于一种靶标分析物。对于待检测的每种额外靶标分析物，添加额外组分(如(iii)和(iv))，其中存在于额外组分(如(iv))中的荧光分子与第一和第二荧光分子的不同之处在于，其在与第一和第二荧光分子不同且可分开检测的波长处发射光。以这种方式，可以在单个反应中检测到两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或更多种靶标分析物，只要用于检测的chemibead各自含有各自在不同且可分开检测的波长处发射光的不同的荧光分子；因此，可以在单个反应中检测到多少靶标分析物的限制因素是如本文所述发挥功能的可用的荧光分子的数量。
实施例2
本实施例提供了生物素和降钙素原(PCT)的多重测定。将生物素共价缀合至用铽染色的chemibead (图3，上部小图的左侧)，并且将用于PCT的捕获抗体共价缀合至用铕染色的chemibead (图3，上部小图的右侧)。用至少含有生物素和PCT两者的多分析物校准物校准多重方法。相同的链霉抗生物素蛋白sensibead用于检测生物素和PCT两者。
如图3的下部小图中所示，sensibead被680 nm处的激发光激活以生成单线态氧，并且单线态氧扩散至两种类型的chemibead中。当与生物素复合时，生物素chemibead在545nm处发光，其被测量为生物素信号。当与PCT复合时，PCT chemibead在612 nm处发射光，其被测量为PCT信号。然后从多重测量生成两条校准曲线：一条用于生物素，且一条用于PCT。
使用铽作为荧光分子在样品中测量的生物素浓度与使用铕作为荧光分子测量的生物素LOCI®信号相关。实验获得通过铕测量的在各种生物素浓度下的LOCI®信号。然后可以预测(外推)在特定生物素浓度下通过铕的生物素LOCI®信号，并且如果必要，随后将其减去(如果观察到对信号的积极影响)或增加(如果观察到对信号的不利影响)以校正靶标分析物的结果。
以这种方式，可以使用以多重方式从生物素测量推导的生物素信号来校正靶标分析物测定结果。或者，如果检测到的生物素浓度高于最大阈值水平，则可以将结果标记为不可靠。
实施例3
图4描绘根据本公开构建的多重测定的一个非限制性实施方案的测定顺序，其中待测量两种分析物：靶标分析物(在本实施例中被称为蛋白X (PrX))和生物素。用于靶标分析物PrX的测定是一种夹心测定，其需要使用两种抗体；将第一抗体(Ab1)包被在chemibead(Ab1-CB)上，并且将第二抗体(Ab2)生物素化。生物素测定使用竞争形式，并且需要使用生物素-(或生物素类似物-)包被的chemibead (生物素-CB)。Ab1-CB和生物素-CB各自含有不同的染料，使得可以在单个反应中分开检测含有两个chemibead的复合物。另外，两种测定均使用相同的链霉抗生物素蛋白-包被的sensibead (SB)。
尽管图4描绘用于该多重测定的一个添加顺序，但这种顺序不应视为对本公开的限制；实际上，可以以任何次序添加各种测定组分，并且可以以任何期望的顺序进行两种测定。因此，图4中所示的测定的添加次序和顺序对本公开的范围是非限定的。
通过利用标准曲线进行适当校准，可以将从上述生物素测定获得的生物素信号转化为样品生物素浓度([生物素] ng/ml)，如图5中所示(且在美国序列号62/711,694 (2018年7月30日提交)中详细描述)。在某些非限制性实施方案中，该浓度可以在测定靶标分析物之前获得。可以以下四种不同方式之一利用计算的生物素浓度：
(1) 如果生物素信号或计算的生物素浓度低于阈值(已知高于所述阈值，生物素开始干扰靶标分析物测定)，则将靶标分析物测定结果报告为正常。
(2) 如果生物素信号或计算的生物素浓度高于阈值水平(即，高于已知生物素开始干扰靶标分析物测定的水平)，则靶标分析物结果被标记为不可靠且不报告。
(3) 如果生物素信号或计算的生物素浓度高于阈值水平，利用生物素浓度或信号值来校正靶标分析物测定结果。
(4) 该选项利用(1)、(2)和(3)的组合 – 即，当生物素水平高于影响靶标分析物测定的阈值水平、但不压倒性地超过阈值水平时，校正受影响的靶标分析物测定结果。如果检测到的生物素信号/计算的浓度低(即低于阈值水平，使得生物素不干扰靶标分析物结果)，则将靶标分析物结果报告为正常。如果检测到的生物素信号/计算的浓度太高(即，高于最大阈值水平)且无法进行校正，则应当进行标记，并将靶标分析物结果标记为不可靠。
图6图示描绘那些与生物素对靶标分析物信号的干扰相关的各种情况及其可能的校正。最上面的曲线指示当不存在生物素时获得的测定值。在最上方曲线正下方的曲线中，存在低生物素浓度，其对靶标分析物信号的影响最小；在这种情况下，不需要校正靶标分析物结果。在下一曲线中，生物素浓度/信号超过阈值，高于所述阈值，生物素干扰靶标分析物测定；在这种情况下，需要基于检测到的生物素干扰量对靶标分析物结果进行校正。即，利用生物素浓度或信号值来校正靶标分析物测定结果。在最下面的曲线中，所述生物素浓度或信号值显著高于阈值，并且超过最大阈值，高于所述最大阈值，不再可以校正靶标分析物浓度；因此，存在的生物素干扰量导致要进行标记，以指示靶标分析物结果不可靠。
关于测定的组分，当样品中不存在生物素或存在最少生物素时，所有生物素-chemibead在图4的“Rxn阶段1”中都与sensibead结合；在这种情况下，靶标分析物信号没有生物素干扰。当样品生物素足够高时，样品生物素和生物素-chemibead中的一些没有与图4的“Rxn阶段1”中添加的sensibead结合，且因此继续存在直至图4的“Rxn阶段2”中的sensibead结合反应。足够量的样品生物素和生物素-chemibead溢出物(spill-over)将影响图4的“Rxn阶段2”中的sensibead/生物素-抗体1/靶标分析物/抗体2-chemibead复合物的形成(在图4中描绘为“SB::生物素-Ab1::PrX::Ab2-CB”)，因此导致靶标分析物信号减少，如图6的图中所示。
图7中的上表描绘在样品生物素不存在和存在的情况下，通过根据本公开的多重测定获得的靶标分析物(PrX)信号(以千计数计)的假想情况。可以看出，在任意的最小样品生物素浓度(10 ng/ml)下，在测试的任何靶标分析物浓度下未观察到对靶标分析物信号的影响。一旦超过阈值生物素浓度(诸如在100 ng/ml和500 ng/ml的任意值)，就可以观察到样品生物素浓度对PrX信号的影响，并且随后可以基于存在的生物素干扰量校正PrX值。然而，一旦达到最大阈值水平(诸如3000 ng/ml的任意值)，生物素干扰对PrX信号的影响就大到使得不再可能校正生物素干扰，且因此必须将PrX信号标记为不可靠。请注意，公开3000ng/ml的任意值仅用于说明性目的；本公开的范围包括如本文所述或以其他方式考虑计算的任何阈值，并且包括远低于3000 ng/ml的阈值以及远高于3000 ng/ml的阈值。
图7的上表描绘检测到的实际靶标分析物信号，而同时图7的下表描绘样品生物素对PrX信号的干扰百分比(基于上表中的值)。可以看出，甚至当样品生物素浓度保持恒定时，在不同的PrX浓度下也看到不同百分比的干扰。
图8和9举例说明两种方法，通过所述两种方法可以基于检测到的样品生物素信号/浓度来校正靶标分析物信号。图9中举例说明的方法利用图7中存在的所有数据，而图8中举例说明的方法利用来自图7的数据的子集。然而，应理解的是，提供这两个实施例用于举例说明的目的，并且可以根据本公开利用对于本领域普通技术人员将显而易见的可以基于样品生物素信号/浓度来校正靶标分析物信号的任何方法。
在图8中，利用上表中的阴影矩形(从图7简单地再现)，使用样品生物素信号/浓度校正PrX信号，以提供对PrX信号的更局部的校正。如图8的下表中所示，重新排列来自阴影矩形的值，且然后将其输入统计软件中，所述统计软件将基于来自阴影矩形的数据进行回归以获得校正方程。在本实施例中获得的回归校正方程显示于图8的底部。
该步骤可以在用含有各种已知浓度的PrX和生物素两者的校准物进行共同校准(在制造中或通过客户校准)期间完成。两种分析物共同校准创建与生物素和PrX各自的校准分开的曲面方程。生物素或PrX单一分析物校准在其他分析物不存在的情况下完成。但是，当两种分析物以各种浓度存在时，进行该共同校准。共同校准的目的是获得曲面方程，其中PrX浓度(或在0 ng/ml生物素下的PrX信号)充当生物素干扰存在的情况下的PrX信号的函数)。
在图8的方法中使用数据子集的原因是确保在更局部的水平上进行更准确回归用于校正。因此，如果已知PrX信号和生物素信号/浓度(ng/ml)，则可以计算出准确的PrX浓度(ng/ml)。
或者，可以通过进行利用获得的整个表格或整个测定范围(生物素和PrX)的类似回归来计算校正的PrX浓度，如图9中所示。在图9的左侧，来自图7的数据已经被简单地重新排列至所示表中。然后，如上文所述进行回归分析以获得回归方程，如图9的右侧所示。
无论使用哪种特定方法，图8和9的方法均产生回归方程，以在生物素干扰存在的情况下预测靶标分析物(PrX)浓度。
因此，根据本公开，已经提供了完全满足上文所述的目的和优点的组合物、试剂盒和装置以及其生产和使用方法。尽管已经结合上文阐述的具体附图、实验、结果和语言描述了本公开，但显然，许多替代、修改和变化对于本领域技术人员将是显而易见的。因此，意欲涵盖落入本公开的精神和广泛范围内的所有此类替代、修改和变化。

Claims (38)

1.用于进行多重测定的试剂盒，所述多重测定利用化学发光检测系统，所述化学发光检测系统用于测定样品中的生物素和至少一种额外靶标分析物的浓度，所述试剂盒包含：
(a) 组合物，其包含：
单线态氧可激活化学发光化合物，其具有与其直接或间接结合的生物素或其类似物；和
荧光分子，其被激活的化学发光化合物激发；
(b) 组合物，其包含：
单线态氧可激活化学发光化合物，其具有与其直接或间接结合的对靶标分析物的第一分析物-特异性结合配偶体；和
荧光分子，其被激活的化学发光化合物激发，其中所述荧光分子与(a)的荧光分子不同，且发射与(a)的荧光分子不同波长的光；
(c) 生物素化的对靶标分析物的第二分析物-特异性结合配偶体，其中所述第二分析物-特异性结合配偶体结合所述靶标分析物的与(b)的第一分析物-特异性结合配偶体不同的表位；和
(d) 组合物，其包含能够在其激发态下生成单线态氧且具有与其直接或间接结合的生物素-特异性结合配偶体的敏化剂。
2.权利要求1的试剂盒，其中所述单线态氧可激活化学发光化合物是经历与单线态氧的化学反应以形成亚稳态中间物质的物质，所述亚稳态中间物质可以分解并同时或随后发射光。
3.权利要求1的试剂盒，其中所述敏化剂是光敏剂。
4.权利要求1的试剂盒，其中(b)和(c)的第一和第二分析物-特异性结合配偶体各自是针对所述靶标分析物的抗体。
5.权利要求1的试剂盒，其中(d)的生物素-特异性结合配偶体是抗生物素蛋白或其类似物。
6.权利要求1的试剂盒，其中(d)的生物素-特异性结合配偶体是针对生物素的抗体。
7.权利要求1的试剂盒，其中(a)和/或(b)的单线态氧可激活化学发光化合物具有与其直接或间接结合的半抗原。
8.权利要求1的试剂盒，其中(a)和(b)的荧光分子各自独立地选自铽、铀、钐、铕、钆和镝。
9.权利要求8的试剂盒，其中：
铽发射约545 nm的波长的光；
铀发射约612 nm的波长的光；且
钐发射约645 nm的波长的光。
10.权利要求1的试剂盒，其进一步包含：
(e) 组合物，其包含：
单线态氧可激活化学发光化合物，其具有与其直接或间接结合的对第二靶标分析物的第一分析物-特异性结合配偶体；和
荧光分子，其被激活的化学发光化合物激发，其中所述荧光分子与(a)和(b)的荧光分子不同，且发射与(a)和(b)的荧光分子不同波长的光；和
(f) 生物素化的对第二靶标分析物的第二分析物-特异性结合配偶体，其中所述第二分析物-特异性结合配偶体结合所述第二靶标分析物的与(e)的第一分析物-特异性结合配偶体不同的表位。
11.权利要求10的试剂盒，其中(e)的荧光分子选自铽、铀、钐、铕、钆和镝。
12.用于测定样品中的生物素和至少一种额外靶标分析物的浓度的微流体装置，所述微流体装置包括：
(i) 通过其施加样品的入口通道；
(ii) 至少第一隔室，其能够与所述入口通道流体连通且含有：
(a) 至少第一组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物且具有与其直接或间接结合的生物素或其类似物，所述第一组合物进一步包含荧光分子，所述荧光分子被激活的化学发光化合物激发；
(b) 至少第二组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物且具有与其直接或间接结合的对靶标分析物的第一分析物-特异性结合配偶体，所述第二组合物进一步包含被激活的化学发光化合物激发的荧光分子，其中所述荧光分子与(a)的荧光分子不同，且发射与(a)的荧光分子不同波长的光；和
(c) 生物素化的对靶标分析物的第二分析物-特异性结合配偶体，其中所述第二分析物-特异性结合配偶体结合所述靶标分析物的与(b)的第一分析物-特异性结合配偶体不同的表位；和
(d) 组合物，其包含能够在其激发态下生成单线态氧且具有与其直接或间接结合的生物素-特异性结合配偶体的敏化剂。
13.权利要求12的微流体装置，其中(a)-(d)存在于同一隔室中。
14.权利要求12的微流体装置，其中(a)-(d)在两个或更多个隔室之间分开。
15.权利要求12的微流体装置，其中(a)和(b)的单线态氧可激活化学发光化合物是经历与单线态氧的化学反应以形成亚稳态中间物质的物质，所述亚稳态中间物质可以分解并同时或随后发射光。
16.权利要求12的微流体装置，其中所述敏化剂是光敏剂。
17.权利要求12的微流体装置，其中(b)和(c)的第一和第二分析物-特异性结合配偶体各自是针对所述靶标分析物的抗体。
18.权利要求12的微流体装置，其中(iii)的生物素-特异性结合配偶体是抗生物素蛋白或其类似物。
19.权利要求12的微流体装置，其中(iii)的生物素-特异性结合配偶体是针对生物素的抗体。
20.权利要求12的微流体装置，其中(a)和/或(b)的单线态氧可激活化学发光化合物具有与其直接或间接结合的半抗原。
21.权利要求12的微流体装置，其中(a)和(b)的荧光分子各自独立地选自铽、铀、钐、铕、钆和镝。
22.权利要求21的微流体装置，其中：
铽发射约545 nm的波长的光；
铀发射约612 nm的波长的光；且
钐发射约645 nm的波长的光。
23.权利要求12的微流体装置，其中(ii)进一步含有：
(e) 至少第三组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物且具有与其直接或间接结合的其第二靶标分析物的第一分析物-特异性结合配偶体，所述组合物进一步包含被激活的化学发光化合物激发的荧光分子，其中所述荧光分子与(a)和(b)的荧光分子不同，且发射与(a)和(b)的荧光分子不同波长的光；和
(f) 生物素化的对第二靶标分析物的第二分析物-特异性结合配偶体，其中所述第二分析物-特异性结合配偶体结合所述第二靶标分析物的与(e)的第一分析物-特异性结合配偶体不同的表位。
24.权利要求23的微流体装置，其中所述第三组合物的荧光分子选自铽、铀、钐、铕、钆和镝。
25.用于检测样品中的生物素和至少一种额外靶标分析物的存在和/或浓度的方法，所述方法包括以下步骤：
(1) 将怀疑含有生物素和至少一种额外靶标分析物的样品与以下同时或全部或部分依次组合：
(a) 至少第一组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物且具有与其直接或间接结合的生物素或其类似物，所述第一组合物进一步包含荧光分子，所述荧光分子被激活的化学发光化合物激发；
(b) 至少第二组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物且具有与其直接或间接结合的对靶标分析物的第一分析物-特异性结合配偶体，所述第二组合物进一步包含被激活的化学发光化合物激发的荧光分子，其中所述荧光分子与(a)的荧光分子不同，且发射与(a)的荧光分子不同波长的光；
(c) 生物素化的对靶标分析物的第二分析物-特异性结合配偶体，其中所述第二分析物-特异性结合配偶体结合所述靶标分析物的与(b)的第一分析物-特异性结合配偶体不同的表位；和
(d) 过量的组合物，其包含能够在其激发态下生成单线态氧且具有与其直接或间接结合的生物素-特异性结合配偶体的敏化剂；
(2) 允许(b)和(c)结合样品中存在的靶标分析物以及(c)结合(d)，其中(b)与(d)的间接结合(经由(c)和靶标分析物)导致形成靶标分析物复合物，其中使敏化剂与化学发光化合物密切接近，且其中(a)在样品中不存在生物素的情况下结合(d)并导致形成生物素复合物，其中使敏化剂与化学发光化合物密切接近，和
(3) 激活所述敏化剂以生成单线态氧，其中生物素复合物和靶标分析物复合物中存在的敏化剂的激活引起每种复合物中存在的化学发光化合物的激活；
(4) 通过测量由(a)的荧光分子发射的光的量来测定由生物素复合物中激活的化学发光化合物生成的化学发光的量，其中样品中生物素的量与发射的光量成反比；
(5) 通过测量由(b)的荧光分子发射的光的量来测定由靶标分析物复合物中激活的化学发光化合物生成的化学发光的量，以测定样品中的靶标分析物的量；
(6) 任选地重复步骤(2)-(5)；和
(7) 基于在步骤(4)中检测到的任何生物素干扰来校正步骤(5)的结果，或如果在步骤(4)中检测到的生物素浓度高于最大阈值水平，则将步骤(5)的结果标记为不可靠。
26.权利要求25的方法，其中所述单线态氧可激活的化学发光化合物是经历与单线态氧的化学反应以形成亚稳态中间物质，所述亚稳态中间物质可以分解，并同时或随后发射光。
27.权利要求25的方法，其中所述敏化剂是光敏剂，且步骤(3)中的敏化剂的激活包括用光照射。
28.权利要求25的方法，其中所述样品是生物样品。
29.权利要求28的方法，其中所述生物样品选自全血或其任何部分、尿液、唾液、痰、脑脊液、皮肤、肠液、腹膜内液、囊液、汗液、间质液、细胞外液、泪液、粘液、膀胱洗液、精液、粪便、胸膜液、鼻咽液及其组合。
30.权利要求25的方法，其中(b)和(c)的第一和第二分析物-特异性结合配偶体各自是针对所述靶标分析物的抗体。
31.权利要求25的方法，其中(d)的生物素-特异性结合配偶体是抗生物素蛋白或其类似物。
32.权利要求25的方法，其中(d)的生物素-特异性结合配偶体是针对生物素的抗体。
33.权利要求25的方法，其中(a)和/或(b)的单线态氧可激活化学发光化合物具有与其直接或间接结合的半抗原。
34.权利要求25的方法，其中(a)和(b)的荧光分子各自独立地选自铽、铀、钐、铕、钆和镝。
35.权利要求34的方法，其中：
铽发射约545 nm的波长的光；
铀发射约612 nm的波长的光；且
钐发射约645 nm的波长的光。
36.权利要求25的方法，其中步骤(1)进一步包括与(a)-(d)组合：
(e) 至少第三组合物，其包含单线态氧可激活化学发光化合物，其具有与其直接或间接结合的对第二靶标分析物的第一分析物-特异性结合配偶体，所述组合物进一步包含被激活的化学发光化合物激发的荧光分子，其中所述荧光分子与(a)和(b)的荧光分子不同，且发射与(a)和(b)的荧光分子不同波长的光；和
(f) 生物素化的对第二靶标分析物的第二分析物-特异性结合配偶体，其中所述第二分析物-特异性结合配偶体结合所述第二靶标分析物的与(e)的第一分析物-特异性结合配偶体不同的表位。
37.权利要求36的方法，其中所述方法还包括以下步骤：
(8) 通过测量由(e)的荧光分子发射的光的量来测定由第二靶标分析物复合物中激活的化学发光化合物生成的化学发光的量，以测定样品中的靶标分析物的量；和
(9) 基于在步骤(4)中检测到的任何生物素干扰来校正步骤(8)的结果，或如果在步骤(4)中检测到的生物素浓度高于最大阈值水平，则将步骤(8)的结果标记为不可靠。
38.权利要求36的方法，其中(e)的荧光分子选自铽、铀、钐、铕、钆和镝。
CN201980061548.8A 2018-09-25 2019-09-19 用于校正靶标分析物测量中的生物素干扰的多重测定的组合物、试剂盒和方法 Pending CN112673113A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862735905P 2018-09-25 2018-09-25
US62/735905 2018-09-25
PCT/US2019/051895 WO2020068548A1 (en) 2018-09-25 2019-09-19 Compositions, kits, and methods for multiplex assays to correct for biotin interference in target analyte measurements

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112673113A true CN112673113A (zh) 2021-04-16

Family

ID=69953543

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201980061548.8A Pending CN112673113A (zh) 2018-09-25 2019-09-19 用于校正靶标分析物测量中的生物素干扰的多重测定的组合物、试剂盒和方法

Country Status (6)

Country Link
US (2) US11287429B2 (zh)
EP (1) EP3856927B1 (zh)
JP (1) JP6984074B2 (zh)
CN (1) CN112673113A (zh)
ES (1) ES2942134T3 (zh)
WO (1) WO2020068548A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023019107A1 (en) * 2021-08-10 2023-02-16 Access Medical Systems, Ltd. Method for using biotin-coated solid support in biochemical assays based on interferometry

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050147531A1 (en) * 1996-11-15 2005-07-07 Biosite, Inc. Devices comprising multiple capillary inducing surfaces
US20100034445A1 (en) * 2008-08-06 2010-02-11 Genome Corporation Continuous imaging of nucleic acids
US20110009293A1 (en) * 2006-05-09 2011-01-13 Beckman Coulter, Inc. Nonseparation Assay Methods
CN102348980A (zh) * 2009-03-12 2012-02-08 西门子医疗保健诊断公司 应用非粒子化学发光试剂的免疫分析
CN103837675A (zh) * 2014-03-07 2014-06-04 常艳敏 多组分同时定量分析的均相发光免疫分析方法及其所使用的试剂盒
US20150198528A1 (en) * 2014-01-11 2015-07-16 Xen Biofluidx, Inc. Assay detection system
CN106662532A (zh) * 2014-03-26 2017-05-10 西门子医疗保健诊断公司 利用三种抗体的发光氧通道免疫测定及其生产和使用方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3915135A1 (de) 1989-05-09 1990-11-15 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zum nachweis spezifisch bindefaehiger substanzen in koerperfluessigkeiten
US5340716A (en) 1991-06-20 1994-08-23 Snytex (U.S.A.) Inc. Assay method utilizing photoactivated chemiluminescent label
EP2760998B1 (en) 2011-11-22 2017-02-01 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Devices containing dried reagents for reconstitution as calibration and/or quality control solutions, and methods of production and use thereof
KR20150009549A (ko) * 2012-04-18 2015-01-26 지멘스 헬쓰케어 다이아그노스틱스 인크. 컨주게이트 시약을 제조하기 위한 화합물 및 방법
EP2972245B1 (en) 2013-03-15 2020-07-15 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Heterogeneous luminescent oxygen channeling immunoassays
US9416776B2 (en) 2013-03-15 2016-08-16 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Microfluidic distributing device
CH713392A1 (de) 2017-01-30 2018-07-31 Clean Air Entpr Ag Steuerelektronik für mehrere Elektrofilter.
JP7122454B2 (ja) * 2018-07-30 2022-08-19 シーメンス・ヘルスケア・ダイアグノスティックス・インコーポレイテッド ビオチンアッセイを実施するためのキット、マイクロ流体デバイス、および方法

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050147531A1 (en) * 1996-11-15 2005-07-07 Biosite, Inc. Devices comprising multiple capillary inducing surfaces
US20110009293A1 (en) * 2006-05-09 2011-01-13 Beckman Coulter, Inc. Nonseparation Assay Methods
US20100034445A1 (en) * 2008-08-06 2010-02-11 Genome Corporation Continuous imaging of nucleic acids
CN102348980A (zh) * 2009-03-12 2012-02-08 西门子医疗保健诊断公司 应用非粒子化学发光试剂的免疫分析
US20150198528A1 (en) * 2014-01-11 2015-07-16 Xen Biofluidx, Inc. Assay detection system
CN103837675A (zh) * 2014-03-07 2014-06-04 常艳敏 多组分同时定量分析的均相发光免疫分析方法及其所使用的试剂盒
CN106662532A (zh) * 2014-03-26 2017-05-10 西门子医疗保健诊断公司 利用三种抗体的发光氧通道免疫测定及其生产和使用方法

Also Published As

Publication number Publication date
US20210247399A1 (en) 2021-08-12
US11287429B2 (en) 2022-03-29
JP6984074B2 (ja) 2021-12-17
US20220163533A1 (en) 2022-05-26
EP3856927A1 (en) 2021-08-04
ES2942134T3 (es) 2023-05-30
EP3856927B1 (en) 2023-01-11
JP2021529975A (ja) 2021-11-04
EP3856927A4 (en) 2021-12-08
WO2020068548A1 (en) 2020-04-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20210231647A1 (en) Luminescent oxygen channeling immunoassay utilizing three antibodies and methods of production and use thereof
US20190170759A1 (en) Heterogeneous luminescent oxygen channeling immunoassays and methods of production and use thereof
US20220163533A1 (en) Compositions, kits, and methods for multiplex assays to correct for biotin interference in target analyte measurements
US20230152318A1 (en) Compositions, kits, and methods for anti-microbial serology assays using anti-human immunoglobulin antibody
JP7122454B2 (ja) ビオチンアッセイを実施するためのキット、マイクロ流体デバイス、および方法
CN112703401A (zh) 用于从使用缀合的分子阱的测定除去生物素干扰的方法和组合物
US10371661B2 (en) Luminescent oxygen channeling immunoassays utilizing electrochemical discharge of singlet oxygen and methods of production and use thereof
US20230152336A1 (en) Calibration and quality control reagents for use with immunoassays for antibodies and methods of production and use thereof
US10371643B2 (en) Luminescent oxygen channeling immunoassays
CN118043347A (zh) 用于抗sars-cov-2抗体的双重免疫测定的组合物、试剂盒和方法
WO2023056143A1 (en) Compositions, kits, and methods for duplex immunoassay for anti-sars-cov-2 antibodies
CN117241884A (zh) 使用抗人免疫球蛋白抗体用于抗微生物血清学测定的组合物、试剂盒和方法
WO2023114993A1 (en) Biotin-trap beads and methods of production and use thereof
CN112703400A (zh) 用于从使用环糊精阱的测定除去生物素干扰的方法和组合物

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination