CN112618550A - 抗肿瘤的尿嘧啶类化合物及其脂质组合物 - Google Patents

抗肿瘤的尿嘧啶类化合物及其脂质组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN112618550A
CN112618550A CN202110058056.2A CN202110058056A CN112618550A CN 112618550 A CN112618550 A CN 112618550A CN 202110058056 A CN202110058056 A CN 202110058056A CN 112618550 A CN112618550 A CN 112618550A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
cancer
fluoro
dioxo
dihydropyrimidin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202110058056.2A
Other languages
English (en)
Inventor
夏桂民
刘明亮
王雪蕾
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Medicinal Biotechnology of CAMS
Original Assignee
Institute of Medicinal Biotechnology of CAMS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Medicinal Biotechnology of CAMS filed Critical Institute of Medicinal Biotechnology of CAMS
Priority to CN202110058056.2A priority Critical patent/CN112618550A/zh
Publication of CN112618550A publication Critical patent/CN112618550A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/28—Steroids, e.g. cholesterol, bile acids or glycyrrhetinic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1277—Processes for preparing; Proliposomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/141—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers
    • A61K9/146—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers with organic macromolecular compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及抗肿瘤的尿嘧啶类化合物及其脂质组合物。一方面提供了一种脂质组合物，其包含式(I)化合物、磷脂、聚乙二醇化磷脂、胆固醇和赋形剂。式(I)化合物如下所示，其中各取代基如说明书所述。还提供了制备该脂质组合物的方法，通过将式(I)化合物制备成脂质组合物从而提高抗肿瘤药物的抗肿瘤活性的方法，还提供了此类脂质组合物作为抗肿瘤药剂的用途，例如用于结直肠癌、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、头颈部鳞癌、皮肤癌、肝癌、膀胱癌、肺癌、宫颈癌、肝癌、胆道系统肿瘤和胰腺癌，等等。本发明方法和脂质组合物可以有效地提高药物的抗肿瘤活性，并且本发明方法制备得到的脂质组合物呈现优良的制剂学性质。

Description

抗肿瘤的尿嘧啶类化合物及其脂质组合物
技术领域
本发明属于医药化学领域，涉及提高5-氟尿嘧啶抗肿瘤活性的方法，尤其是涉及一组具有抗肿瘤活性的5-氟尿嘧啶前药及其制备方法，以及在抗肿瘤方面的应用。此外，本发明还提供了上述5-氟尿嘧啶前药的脂质组合物、该脂质组合物的制备方法。本发明脂质组合物呈现优异技术效果。
背景技术
氟尿嘧啶，Fluorouracil，又称5-氟尿嘧啶，化学名为5-氟-2,4(1H,3H)-嘧啶二酮，CAS号51-21-8，分子式C4H3FN2O2，分子量130.08，其化学结构式如以下式(II)所示：
Figure BDA0002901389060000011
5-氟尿嘧啶是第一个根据一定设想而合成的嘧啶类抗代谢药，其在胸苷磷酸化酶(TP)的作用下转化为5-氟脱氧尿苷(5-FdUrd)，后者能将叶酸辅助因子N5-10-亚甲基四氢叶酸与胸腺嘧啶合成酶(TS)共价结合形成一个聚合体，该聚合体能抑制尿嘧啶转化为胸腺嘧啶，从而干扰DNA的合成，导致细胞死亡。同时，5-FdUrd能在胸腺嘧啶激酶的催化下代谢为氟尿苷单磷酸(FdUMP)和氟尿苷三磷酸(FdUTP)，两者能直接插入DNA，产生病态DNA结构。此外，mRNA聚合酶能识别FdUTP，使得FdUTP代替UTP加入RNA，合成错误的RNA，导致mRNA翻译和蛋白质合成的阻断而发挥抗瘤作用。
5-氟尿嘧啶具有广谱抗实体瘤活性，临床主要用于治疗结直肠癌、前列腺癌以及对紫杉醇和多柔比星等药物无效的晚期原发性或转移性乳腺癌，以及其他实体瘤(胃癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、头颈部鳞癌、皮肤癌、肝癌、膀胱癌等)。然而，由于本品对肿瘤的选择性差，故该疗法对骨髓抑制、胃肠道、中枢神经系统和皮肤等的不良反应发生率很高。此外，本品的血浆半衰期短(t1/2：5-20min)，需要静脉持续用药(口服吸收不完全且难以预测)，故患者的依从性差(Shimma N，等.Bioorganic&Medicinal Chemistry 8(2000)1697-1706)。为此，药学家已陆续研发出氟脲苷、替加氟、卡莫氟、多西氟尿啶、卡培他滨等5-氟尿嘧啶前药并成功用于临床，但各自仍存在若干缺憾。
现有技术仍然期待有新的方法并且预期具有某种或某些更优异效果来治疗肿瘤，例如期待有性能更加优良的抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶类似物例如其前药应用于临床，包括该5-氟尿嘧啶前药化合物适应临床应用的组合物。
发明内容
本发明的目的是提供新的、并且期待具有某种或某些更优异效果的方法来治疗肿瘤，例如提供具有更加优良性能的抗肿瘤药物应用于临床。本发明人出人意料地发现，具有本发明结构的化合物作为抗肿瘤药物呈现一个或者多个方面的优异效果，还发现将本发明活性化合物制备成脂质组合物呈现优良技术效果。本发明基于此类发现而得以完成。
为此，本发明第一方面提供了以下式(I)化合物(其在本发明中亦可称为5-氟尿嘧啶前药化合物、前药、尿嘧啶类化合物等)，
Figure BDA0002901389060000021
或其药用盐、溶剂合物、多晶型，
其中：
X代表O、NH；
R代表C6-22直链或支链的饱和烷基或不饱和烯基，其中碳链中的1个或2个CH2可任选被O替代。
根据本发明第一方面的化合物，其中所述R选自：正己烷基、正癸烷基、正十二烷基、正十四烷基、正十六烷基、正十八烷基、正二十烷基、正二十二烷基、正癸基-9-烯-1-基、正十二烷基-11-烯-1-基、5-(2-甲氧基乙氧基)戊基、7-(2-甲氧基乙氧基)庚基、9-(2-甲氧基乙氧基)壬基、正十六烷氧丙基、正十八烷氧乙基、(9-烯)正十烷基、(11-烯)正十二烷基、(11-烯)正十二烷乙基。
根据本发明第一方面的化合物，其也可以溶剂化物(例如水合物)的形式存在，因此，这些溶剂化物(例如水合物)也包括在本发明的化合物之内。
根据本发明第一方面的化合物，其为选自下列的化合物1～化合物17：
化合物1：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正己基氧基甲酸酯，
化合物2：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正癸基氧基甲酸酯，
化合物3：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十四烷基氧基甲酸酯，
化合物4：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十六烷基氧基甲酸酯，
化合物5：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十八烷基氧基甲酸酯，
化合物6：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正二十烷基氧基甲酸酯，
化合物7：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正二十二烷基氧基甲酸酯，
化合物8：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正癸基-9-烯-1-基氧基甲酸酯，
化合物9：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十二烷基-11-烯-1-基氧基甲酸酯，
化合物10：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基(5-(2-甲氧基乙氧基)戊基)氧基甲酸酯，
化合物11：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基(7-(2-甲氧基乙氧基)庚基)氧基甲酸酯，
化合物12：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基(9-(2-甲氧基乙氧基)壬基)氧基甲酸酯，
化合物13：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正己基氨基甲酸酯，
化合物14：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正癸基氨基甲酸酯，
化合物15：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十四烷基氨基甲酸酯，
化合物16：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十六烷基氨基甲酸酯，
化合物17：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正二十二烷基氨基甲酸酯。
进一步的，本发明第二方面提供了制备式(I)化合物的方法，该方法如以下反应路线所示：
Figure BDA0002901389060000031
在上述反应路线中，X和R如本发明第一方面任一实施方案所定义的。
具体地说，该制备方法包括如下步骤：
1)使式(II)化合物(国内市售途径获得)溶于1.5～3倍当量的37％的甲醛水溶液中，于0～50℃下搅拌反应3～10小时，得到式(III)化合物；
2)将式(III)化合物溶于选自如下的非极性溶剂中：二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、二氧六环，在选自如下的1～3倍当量的有机碱存在下：三乙胺、N,N-二甲基吡啶、吡啶、4-二甲氨基吡啶，与1.5～2倍当量的式(IV)化合物(国内市售途径获得)在室温～40℃下搅拌反应1～5小时，得到X为O的式(I)化合物；或者
将式(III)化合物与1.5～2倍当量的式(V)化合物(国内市售途径获得)加至选自如下的无水偶极溶剂中：乙腈、丙酮、二甲亚砜(DMSO)、二甲基甲酰胺(DMF)，在-10℃-室温下搅拌反应10-20小时，得到X为NH的式(I)化合物。
进一步的，本发明第三方面提供了本发明第一方面任一项所述化合物或者本发明第二方面任一项所述方法制备的化合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。
根据本发明第三方面的用途，其中所述肿瘤为实体瘤。
根据本发明第三方面的用途，其中所述肿瘤为选自：结直肠癌、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、头颈部鳞癌、皮肤癌、肝癌、膀胱癌、肺癌、宫颈癌、其它消化道肿瘤(包括肝癌、胆道系统肿瘤和胰腺癌)，等等。
进一步的，本发明第四方面提供了一种脂质组合物，其包含：
API(本发明第一方面任一项所述式(I)化合物)：100重量份，
磷脂：100～2000重量份(例如200～1500重量份)，
聚乙二醇化磷脂：30～300重量份(例如50～200重量份)，
胆固醇：20～200重量份(例如50～150重量份)，和
赋形剂。
根据本发明第四方面的脂质组合物，其是呈液体状态的组合物(例如是脂质混悬液)，其中所述赋形剂是水性溶媒。例如，其选自：水、0.8～1％氯化钠溶液(例如0.9％氯化钠溶液)、2～10％葡萄糖溶液(例如5％葡萄糖溶液)。例如，该水性溶媒的用量是使得式(I)化合物在该液体组合物中的浓度为0.2～20mg/ml，例如为0.25～15mg/ml，例如0.5～10mg/ml，例如0.5～5mg/ml。
根据本发明第四方面的脂质组合物，其是呈固体状态的组合物(例如是冷冻干燥组合物)，其中所述赋形剂是冻干赋形剂。例如，该冻干赋形剂选自：甘露醇、山梨醇、乳糖、甘氨酸、右旋糖苷、蔗糖、葡萄糖等等。例如，式(I)化合物与冻干赋形剂的重量比为1：20～200，例如重量比为1：20～150，例如重量比为1：20～100。
根据本发明第四方面的脂质组合物，其中所述磷脂选自：蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、鞘磷脂、磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(即DMPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(即DMPG)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二硬酯酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、及其组合。
根据本发明第四方面的脂质组合物，其中所述聚乙二醇化磷脂(可简称为PEG化磷脂)是用分子量为1000～10000道尔顿修饰的磷脂，其例如是聚乙二醇化二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺，其可表述为二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(可缩写为PEG-DSPE或DSPE-PEG)。例如，所述PEG化磷脂选自：二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇1000(可缩写为PEG1000-DSPE，其余亦可类似表述)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇3350、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇4000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇5000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇6000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇8000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇10000。
根据本发明第四方面的脂质组合物，其是通过脂质体的制备工艺制备得到的。脂质体的制备工艺是本领域周知，例如但不限于：薄膜分散法、挤压制备法、French压力法、逆相蒸发法、化学梯度法(例如，pH梯度法、硫酸铵梯度法)。
根据本发明第四方面的脂质组合物，其是通过包括如下步骤的薄膜分散法(一种经典的脂质体制备方法)制备得到的：
(21)使磷脂、聚乙二醇化磷脂、胆固醇和活性药物溶解于有机溶剂(例如二氯甲烷、氯仿等，其量为例如达到完全溶解程度的2～4倍)中；
(22)在旋转蒸发仪上将上一步骤所得液体蒸发(例如，温度40～60℃、真空度200～250mbar、转速250rpm)除去溶剂，使残余物在容器内壁形成薄膜；
(23)制备脂质组合物：
(23a)向容器内添加水性溶媒，40～80℃(例如60～70℃)温度下水化1～5小时(例如1.5～2.5小时)，再超声处理15～60min(例如20～45min)，过滤除菌(例如使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物；或者
(23b)向容器内添加预先用水溶解的赋形剂溶液，40～80℃(例如60～70℃)温度下水化1～5小时(例如1.5～2.5小时)，再超声处理15～60min(例如20～45min)，过滤除菌(例如使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，分装到玻璃瓶中，置冷冻干燥机内进行冷冻干燥以除去水分，得到呈固体状态的脂质组合物。
根据本发明第四方面的脂质组合物，其中步骤(23b)中，所述预先用水溶解的赋形剂溶液中赋形剂浓度为3～20％，例如3～15％，例如3～10％。
进一步的，本发明第五方面提供了制备本发明第四方面任一项所述脂质组合物的方法，该方法采用选自下列的方法进行：薄膜分散法、挤压制备法、French压力法、逆相蒸发法、化学梯度法(例如，pH梯度法、硫酸铵梯度法)。
根据本发明第五方面的方法，其中所述薄膜分散法包括如下步骤：
(21)使磷脂、聚乙二醇化磷脂、胆固醇和活性药物溶解于有机溶剂(例如二氯甲烷、氯仿等)中；
(22)在旋转蒸发仪上将上一步骤所得液体蒸发(例如，温度40～60℃、真空度200～250mbar、转速250rpm)除去溶剂，使残余物在容器内壁形成薄膜；
(23)制备脂质组合物：
(23a)向容器内添加水性溶媒，40～80℃(例如60～70℃)温度下水化1～5小时(例如1.5～2.5小时)，再超声处理15～60min(例如20～45min)，过滤除菌(例如使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物；或者
(23b)向容器内添加预先用水溶解的赋形剂溶液，40～80℃(例如60～70℃)温度下水化1～5小时(例如1.5～2.5小时)，再超声处理15～60min(例如20～45min)，过滤除菌(例如使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，分装到玻璃瓶中，置冷冻干燥机内进行冷冻干燥以除去水分，得到呈固体状态的脂质组合物。
根据本发明第五方面的方法，其中步骤(23b)中，所述预先用水溶解的赋形剂溶液中赋形剂浓度为3～20％，例如3～15％，例如3～10％。
进一步的，本发明第六方面提供了本发明第四方面任一项所述脂质组合物或者本发明第五方面任一项所述方法制备的脂质组合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。
根据本发明第六方面的用途，其中所述肿瘤为实体瘤。
根据本发明第六方面的用途，其中所述肿瘤为选自：结直肠癌、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、头颈部鳞癌、皮肤癌、肝癌、膀胱癌、肺癌、宫颈癌、其它消化道肿瘤(包括肝癌、胆道系统肿瘤和胰腺癌)，等等。
根据本发明任一方面的脂质组合物，其为呈液体或固体状态的组合物，其加水稀释或者溶解制成式(I)化合物浓度为0.2mg/ml或更低的药液时，该药液用纳米粒度仪测定，平均粒径小于200nm(例如平均粒径为20～200nm，例如平均粒径为30～200nm，例如平均粒径为40～200nm，例如平均粒径为50～200nm，例如平均粒径为30～180nm，例如平均粒径为30～150nm)，粒径小于10nm的微粒少于5％(例如粒径小于15nm的微粒少于5％)，粒径大于500nm的微粒少于5％(例如粒径大于400nm的微粒少于5％，粒径大于300nm的微粒少于5％)。本项目可称为粒径及粒径分布。
在本发明的任一方面，所制备的呈液体形式的药物组合物或者进一步制成冷冻干燥粉针剂形式的药物组合物，其可以通过控制制备工艺的方式，将该组合物制成供无菌方式使用的无菌制剂。这种工艺的控制是容易的，例如先控制方式，即将各原辅料经无菌处理，再以全程无菌操作制备成无菌制剂；还可以是后控制的方式，即将制备得到的呈液体形式的组合物经例如但不限于微孔滤膜过滤的方式除菌。因此，根据本发明的任一方面，所制备的呈液体形式的药物组合物或者进一步制成冷冻干燥粉针剂形式的药物组合物是无菌制剂。
本发明任一方面或该任一方面的任一实施方案所具有的任一技术特征同样适用其它任一实施方案或其它任一方面的任一实施方案，只要它们不会相互矛盾，当然在相互之间适用时，必要的话可对相应特征作适当修饰。下面对本发明的各个方面和特点作进一步的描述。
本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。
氟尿嘧啶为白色或类白色的结晶或结晶性粉末。在水中略溶，在乙醇中微溶，在氯仿中几乎不溶；在稀盐酸或氢氧化钠溶液中溶解，LD50(小鼠，腹腔)230mg/kg。
氟尿嘧啶为最常用的尿嘧啶抗代谢药，在体内先经过一系列反应变成氟尿嘧啶脱氧核苷酸，然后发挥效应(影响DNA合成)；尚能在体内转化为氟尿嘧啶核苷掺入RNA，从而干扰蛋白质合成。主要作用在S期，但对其他各期细胞也有一定作用。易透过血脑屏障，易进入脑组织及肿瘤转移灶。约10％～30％原型由尿中排出，约60％～80％在肝内灭活变为CO2和尿素，分别由呼吸道和尿排出。氟尿嘧啶抗瘤谱广。
由于氟尿嘧啶是第一个根据一定设想而合成的抗代谢药并在临床上是应用最广的抗嘧啶类药物，对消化道癌及其他实体瘤有良好疗效，在肿瘤内科治疗中占有重要地位。本品需经过酶转化为5-氟脱氧尿嘧啶核苷酸而具有抗肿瘤活性。氟尿嘧啶通过抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶而抑制DNA的合成。此酶的作用可能把甲酰四氢叶酸的一碳单位转移给脱氧尿嘧啶核苷-磷酸合成胸腺嘧啶核苷一酸。氟尿嘧啶对RNA的合成也有一定抑制作用。氟尿嘧啶可以静脉及腔内注射。5-氟尿嘧啶对膀胱癌病人以恒定速率连续滴的本剂后发现，用药浓度最低在10时，而在22时～3时之间用药浓度最高。在不用恒速滴的时，将流速峰值定在凌晨4时，则允许极大地提高剂量而毒性极低，疗效因之增强。本品必须在体内经核糖基化和磷酰化等生物转化作用后，才具有细胞毒性。氟尿嘧啶可经不同途径生成F-dUMP和FUMP。前者可与胸苷酸合成酶的活性中心共价结合，抑制此酶的活性，使脱氧核苷酸缺乏，DNA合成障碍。此外，氟尿嘧啶的代谢物也可以伪代谢物形式惨入到RNA和DNA中，影响细胞功能，产生细胞毒性。氟尿嘧啶是一种不典型的细胞周期特异性药，它除了主要作用于S期外，对其他期的细胞亦有作用。
氟尿嘧啶口服吸收不完全且难以预测，故通常通过注射方式给药，静注后迅速分布到全身各组织：脑脊液和肿瘤组织中。由于氟尿嘧啶在体内才转化成活性核苷酸代谢产物而起作用。代谢降解可在许多组织中进行，尤其是在肝脏。氟尿嘧啶在肝、肠粘膜和其他组织内的二氢嘧啶还原酶的作用下，嘧啶环被还原为5-氟-5，6-二氢尿嘧啶而失活。如若因遗传而缺乏此酶，则对该药的敏感性大大增加，极少数人可因缺乏此酶而对常用剂量的氟尿嘧啶表现出很强的药物毒性。氟尿嘧啶最终的代谢产物为α-氟-β-丙氨酸。快速静注氟尿嘧啶血浆浓度可达0.1～0.3。
氟尿嘧啶在临床上主要用于消化道癌，例如用于结肠癌、直肠癌、胃癌等，还可用于其它实体瘤，例如可用于乳腺癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、头颈部鳞癌、皮肤癌、肝癌、膀胱癌等。氟尿嘧啶单独或与其他药物联合应用于乳腺癌和胃肠道肿瘤手术辅助治疗，也用于一些非手术恶性肿瘤的姑息治疗，尤其是那些胃肠道、乳腺、头颈部、肝、泌尿系统和胰腺的恶性肿瘤。以往经验表明氟尿嘧啶对转移性乳腺癌和胃肠道肉瘤部分反应率为10％～30％。氟尿嘧啶与某些其他药物联合应用常可获较高的反应率、存活率。如合用环磷酰胺和MTX(乳腺癌)、顺铂(卵巢和头颈部癌)、醛氢叶酸(结直肠癌)虽可提高氟尿嘧啶活性，但也增加其毒性。氟尿嘧啶联合应用左旋咪唑(免疫兴奋、副作用弱)治疗结直肠癌可降低疾病的复发率，提高术后存活率。氟尿嘧啶局部外敷治疗皮肤基底细胞癌有效，对严重的难治性牛皮癣亦有效。
氟尿嘧啶在临床上通常剂量较高，静脉注射1次0.25-0.5g，1日或隔日1次，一疗程总量5～10g；静脉滴注1次0.25～0.75g，1日1次或隔日1次，一疗程总量8-10g。临床上可获得的制剂有每瓶125mg(5ml)或250mg(10ml)的注射液，每片50mg的片剂等。
本发明出人意料地发现一类独特的5-氟尿嘧啶结构改造物及制备的脂质组合物具有优良的性能。
具体实施方式
通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。
在以下具体实例部分，如未另外提及，提供的呈液体形式的药物组合物或者呈冷冻干燥组合物形式的配方是每100mg或100重量份式(I)化合物所制得的组合物中各物料的用量来表示的；在实际制备时，以制备包含10g式(I)化合物的药物组合物的量投料。在制备组合物时当需要调节药液pH值时，使用2M盐酸溶液或2M氢氧化钠溶液。以下各实施例在对组合物进行冷冻干燥时，经检测，所得冷冻干燥粉中有机溶剂含量低于检测限。
实施例1、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正己基氧基甲酸酯
Figure BDA0002901389060000081
将市售的5-氟尿嘧啶(式II化合物，1.3g，0.01mol)溶于15mL的37％的甲醛水溶液中，50℃搅拌3小时，TLC检测反应结束。将反应液减压浓缩至干，得化合物III，用于下一步反应。
上述所得0.01mol化合物III溶于20mL二氯甲烷中，加入三乙胺(2.02g,0.02mol)，然后分批加入氯甲酸己氧酯(III’，1.97g,0.012mol)，室温搅拌2小时，TLC监测反应结束。反应液依次用饱和食盐水及饱和碳酸氢钠溶液洗涤，有机相浓缩，残余物经硅胶柱层析(洗脱液V石油醚：V乙酸乙酯＝5：1)分离纯化，真空干燥，得X为O的标题化合物I’(白色固体，2.02g，产率为70％)，其在本发明中可称为化合物1。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.50(s,1H),7.63(d,J＝5.38Hz,1H),5.70(s,2H),4.20(t,J＝6.90Hz,2H),1.34-1.26(m,8H),0.87(t,J＝6.91Hz,3H).
MS-ESI(m/z):289(M+H)+.
实施例2、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正癸基氧基甲酸酯
参照实施例1的方法进行，使化合物Ⅲ与正癸基氧基甲酰氯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物2。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.59(s,1H),7.65(d,J＝5.36Hz,1H),5.67(s,2H),4.20(t,J＝6.88Hz,2H),1.33-1.25(m,16H),0.87(t,J＝6.89Hz,3H).
MS-ESI(m/z):345(M+H)+.
实施例3、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十四烷基氧基甲酸酯
参照实施例1的方法进行，使化合物Ⅲ与正十四烷基氧基甲酰氯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物3。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.63(s,1H),7.62(d,J＝5.36Hz,1H),5.66(s,2H),4.19(t,J＝6.86Hz,2H),1.34-1.25(m,24H),0.87(t,J＝6.99Hz,3H).
MS-ESI(m/z):401(M+H)+.
实施例4、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十六烷基氧基甲酸酯
参照实施例1的方法进行，使化合物Ⅲ与正十六烷基氧基甲酰氯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物4。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.56(s,1H),7.58(d,J＝5.31Hz,1H),5.63(s,2H),4.23(t,J＝6.79Hz,2H),1.35-1.25(m,28H),0.87(t,J＝7.01Hz,3H).
MS-ESI(m/z):429(M+H)+.
实施例5、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十八烷基氧基甲酸酯
参照实施例1的方法进行，使化合物Ⅲ与正十八烷基氧基甲酰氯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物5。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.61(s,1H),7.58(d,J＝5.37Hz,1H),5.69(s,2H),4.23(t,J＝6.83Hz,2H),1.37-1.26(m,32H),0.89(t,J＝6.91Hz,3H).
MS-ESI(m/z):457(M+H)+.
实施例6、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正二十烷基氧基甲酸酯
参照实施例1的方法进行，使化合物Ⅲ与正二十烷基氧基甲酰氯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物6。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.64(s,1H),7.64(d,J＝5.37Hz,1H),5.56(s,2H),4.20(t,J＝6.88Hz,2H),1.37-1.25(m,36H),0.88(t,J＝6.98Hz,3H).
MS-ESI(m/z):485(M+H)+.
实施例7、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正二十二烷基氧基甲酸酯
参照实施例1的方法进行，使化合物Ⅲ与正二十二烷基氧基甲酰氯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物7。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.63(s,1H),7.63(d,J＝5.35Hz,1H),5.66(s,2H),4.22(t,J＝6.90Hz,2H),1.37-1.26(m,40H),0.87(t,J＝6.99Hz,3H).
MS-ESI(m/z):513(M+H)+.
实施例8、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正癸基-9-烯-1-基氧基甲酸酯
参照实施例1的方法进行，使化合物Ⅲ与正癸基-9-烯-1-基氧基甲酰氯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物8。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.59(s,1H),7.60(d,J＝5.40Hz,1H),5.63(s,2H),5.63-5.60(m,1H),4.98-4.93(m,2H),4.17(t,J＝6.79Hz,2H),2.10-2.06(m,2H),1.40-1.25(m,12H).
MS-ESI(m/z):343(M+H)+.
实施例9、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十二烷基-11-烯-1-基氧基甲酸酯
参照实施例1的方法进行，使化合物Ⅲ与正十二烷基-11-烯-1-基氧基甲酰氯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物9。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.58(s,1H),7.19(d,J＝5.46Hz,1H),5.62(s,2H),5.59-3.56(m,1H),4.99-4.96(m,2H),4.16(t,J＝6.83Hz,2H),2.14-2.10(m,2H),1.43-1.25(m,16H).
MS-ESI(m/z):371.19(M+H)+.
实施例10、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基(5-(2-甲氧基乙氧基)戊基)氧基甲酸酯
参照实施例1的方法进行，使化合物Ⅲ与5-(2-甲氧基乙氧基)戊基)氧基甲酰氯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物10。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.65(s,1H),7.61(d,J＝5.33Hz,1H),5.64(s,2H),4.35-4.33(m,2H),3.67-3.64(m,2H),3.62-3.60(m,2H),3.58(s,3H),3.55-3.53(m,2H),1.61-1.53(m,6H).
MS-ESI(m/z):349(M+H)+.
实施例11、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基(7-(2-甲氧基乙氧基)庚基)氧基甲酸酯
参照实施例1的方法进行，使化合物Ⅲ与(7-(2-甲氧基乙氧基)庚基)氧基甲酰氯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物11。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.63(s,1H),7.60(d,J＝5.42Hz,1H),5.61(s,2H),4.37-4.33(m,2H),3.62-3.58(m,2H),3.55-3.53(m,2H),3.51(s,3H),3.49-3.42(m,2H),1.59-1.49(m,10H).
MS-ESI(m/z):377(M+H)+.
实施例12、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基(9-(2-甲氧基乙氧基)壬基)氧基甲酸酯
参照实施例1的方法进行，使化合物Ⅲ与(9-(2-甲氧基乙氧基)壬基)氧基甲酰氯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物12。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.60(s,1H),7.57(d,J＝5.44Hz,1H),5.61(s,2H),4.35-4.31(m,2H),3.59-3.55(m,2H),3.53-3.51(m,2H),3.51(s,3H),3.49-3.44(m,2H),1.70-1.67(m,2H),1.59-1.47(m,12H).
MS-ESI(m/z):405(M+H)+.
以上实施例1～12的产率均在67～72％范围内。
实施例13、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正己基氨基甲酸酯
Figure BDA0002901389060000111
参照实施例1的方法，使化合物II与37％的甲醛反应，得到中间体化合物III，用于下一步反应。
上述所得0.01mol化合物III和异氰酸正己基酯V/(1.52g,0.012mol)的13mL无水二甲基甲酰胺(DMF)悬浊液，于室温下搅拌过夜，TLC监测反应结束。过滤，减压浓缩。残余物中加入10mL乙酸乙酯，充分搅拌，过滤。滤饼依次用二氯甲烷和乙醚洗涤，真空干燥，得X为NH的标题化合物I”(白色固体，1.61g，产率为56％)，其在本发明中可称为化合物13。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.68(s,1H),7.65(d,J＝5.36Hz,1H),6.83(brs,1H),5.64(s,2H),3.30-3.26(m,2H),1.53-1.28(m,8H),0.88(t,J＝7.00Hz,3H).
MS-ESI(m/z):288(M+H)+.
实施例14、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正癸基氨基甲酸酯
参照实施例13的方法进行，使化合物Ⅲ与异氰酸正癸基酯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物14。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.68(s,1H),7.65(d,J＝5.35Hz,1H),6.87(brs,1H),5.63(s,2H),3.37-3.33(m,2H),1.55-1.26(m,16H),0.88(t,J＝6.83Hz,3H).
MS-ESI(m/z):344(M+H)+.
实施例15、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十四烷基氨基甲酸酯
参照实施例13的方法进行，使化合物Ⅲ与异氰酸正十四烷基酯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物15。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.70(s,1H),7.68(d,J＝5.37Hz,1H),6.85(brs,1H),5.65(s,2H),3.40-3.36(m,2H),1.57-1.28(m,24H),0.89(t,J＝6.83Hz,3H).
MS-ESI(m/z):400(M+H)+.
实施例16、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十六烷基氨基甲酸酯
参照实施例13的方法进行，使化合物Ⅲ与异氰酸正十六烷基酯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物16。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.68(s,1H),7.66(d,J＝5.35Hz,1H),6.88(brs,1H),5.60(s,2H),3.35-3.31(m,2H),1.57-1.24(m,28H),0.88(t,J＝6.83Hz,3H).
MS-ESI(m/z):428(M+H)+.
实施例17、(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正二十二烷基氨基甲酸酯
参照实施例13的方法进行，使化合物Ⅲ与异氰酸正二十二烷基酯反应，制得标题化合物为白色固体，其在本发明中可称为化合物17。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.68(s,1H),7.66(d,J＝5.36Hz,1H),6.81(brs,1H),5.68(s,2H),3.32-3.28(m,2H),1.55-1.26(m,40H),0.88(t,J＝6.88Hz,3H).
MS-ESI(m/z):512(M+H)+
以上实施例13～17的产率均在53～59％范围内。
实施例18、制备氟尿嘧啶前药化合物
分别参照实施例1～17的方法，不同的仅是37％甲醛水溶液中还添加1.2％(w/v)异氰酸乙酯，得到17批分别称之为化合物1～化合物17的氟尿嘧啶前药化合物。在制备X为O的标题化合物I’时终产物的产率均在82～86％范围内，例如参照实施例2且添加异氰酸乙酯方法所得产物的产率为85.7％；在制备X为NH的标题化合物I”时终产物的产率均在68～73％范围内，例如参照实施例13且添加异氰酸乙酯方法所得产物的产率为71.2％。根据本发明，出人预料的发现，在制备式(I)化合物时，所用甲醛水溶液中添加少许异氰酸乙酯能够明显提高终产物的产率。因此，在本发明第二方面提供的制备式(I)化合物的方法的一个实施方案中，所述37％甲醛水溶液中还添加1.2％(w/v)异氰酸乙酯。
实施例21、测定产物中的杂质含量的方法
使用称之为【HPLC-A法】的以下HPLC法测定实施例1～18所得产物中的杂质量。
照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定；分别取实施例1～18所得产物适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成1ml含500μg的溶液，作为供试品溶液；精密量取上述溶液适量，加稀释剂稀释成每1ml约含5μg的溶液，作为对照溶液；照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱规格250mm×4.6mm，5μm，以水(用0.05mol/L磷酸溶液调节pH值至4.0)-甲醇(65:35)为流动相，流速为1ml/min，检测波长为254nm，柱温为30℃；系统适用性要求：理论板数按氟尿嘧啶峰计算不小于3000，氟尿嘧啶峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求；精密量取供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图至主成份峰保留时间的3倍；按对照溶液主峰面积对照法计算杂质的含量。结果：实施例1～17所制得的式I化合物中的杂质总量均在0.72～1.05％范围内，例如实施例1所得化合物1的杂质百分含量为0.936％；实施例18所制得的式I化合物中的杂质总量均在0.69～0.97％范围内，例如实施例1所得化合物1的杂质百分含量为0.911％。这些结果表明实施例18产物的杂质量与实施例1～17基本无差异。
实施例31、药物的抗肿瘤活性
1、试验用细胞
人胰腺癌(AsPC-1)细胞、人胰腺导管癌(SU.86.86)。
2、测试物
氟尿嘧啶、实施例1～17制备的17种氟尿嘧啶前药化合物。
3、实验方法
体外培养AsPC-1、SU.86.86肿瘤细胞，在37℃、5％CO2条件下于细胞培养箱中培养至对数期。将上述细胞接种于96孔板中，接种密度为5000个/孔，每孔100μL，之后继续在细胞培养箱中培养24h。
采用MTT法测定各种测试物对上述肿瘤细胞的毒性，试验中包括设置用氟尿嘧啶前药化合物和氟尿嘧啶作为阳性对照药。用细胞培养液倍比稀释测试物，得到药物浓度为1～500μM的细胞培养基。细胞铺板24h后，分别用200μL含药培养基取代对应孔中的原培养基，每个浓度设4个复孔，同时设置空白对照孔和调零孔。继续孵育24、48、72h后，加入20μL浓度为5mg/mL的MTT溶液，同条件下继续培养4h后弃去培养液，向每孔加入150μL的DMSO溶解甲瓒，平板震荡仪震荡10min，在酶标仪中测定490nm波长处的吸光度值，计算细胞生长抑制率％和IC50(μM)值。部分化合物的IC50(μM)值如下：针对AsPC-1，氟尿嘧啶的IC50(μM)为483.2，化合物1的IC50(μM)为52.7，化合物2～17的IC50(μM)在35.3～92.3范围内；针对SU.86.86，氟尿嘧啶的IC50(μM)为317.3，化合物1的IC50(μM)为18.2，化合物2～17的IC50(μM)在9.5～32.8范围内。从上述可见，化合物1～17这些前药对AsPC-1和SU.86.86的抑制效果显著优于氟尿嘧啶。
实施例32、抑制小鼠移植性肿瘤的药效学试验
1、试验材料
药物：氟尿嘧啶以及化合物1、化合物8、化合物13、化合物16五种化合物，用适量注射用水溶解成适宜浓度，给药剂量为相当于6mg氟尿嘧啶/kg体重/次的剂量。清洁级C57BL/6N小鼠。瘤种：小鼠移植性肿瘤Lewis肺癌、S180肉瘤和H22肝癌。
2、试验方法
(1)小鼠Lewis肺癌：
体重18～22g的雄性C57BL/6N小鼠，随机均分为6组，每组10只，分别设为生理盐水对照组、分别为上述五种化合物的五个组。
颈部脱臼处死Lewis肺癌皮下接种生长12d的C57BL/6N荷瘤小鼠，无菌取新鲜肿瘤组织，以组织研磨器制成细胞匀浆，用生理盐水调整活细胞含量至2～3×107/mL，接种于C57BL/6N小鼠右侧腋部皮下，每只接种0.1mL。
给药剂量和方法：各种试药腹腔注射，间日1次，共8次；对照组平行注射等体积生理盐水。
接种第2天开始给药，末次给药后24h，处死动物，称体重及瘤块重量，按下式计算瘤重抑制率：
瘤重抑制率(％)＝(1-试验组瘤重/生理盐水对照组瘤重)×100％。
三批试验合并统计，以SPSS10.0软件进行统计分析，体重和肿瘤重量的实验数据以x±s表示，以单因素方差分析比较各给药组与生理盐水对照组的差异。
(2)小鼠S180肉瘤
无菌取S180肉瘤腹腔接种生长8d的小鼠腹水，以生理盐水稀释瘤细胞浓度至3～4×107/mL，接种于实验小鼠右侧腋部皮下，每只接种0.1mL。分组及给药情况、统计方法与小鼠Lewis肺癌试验相同。
(3)小鼠H22肝癌
取H22肝癌腹腔接种生长9d的小鼠腹水，以生理盐水稀释至瘤细胞浓度为5～6×107/mL，接种NIH小鼠。分组及给药情况、统计方法与小鼠Lewis肺癌试验相同。
3、对小鼠移植性肿瘤的抑制结果
氟尿嘧啶对Lewis肺癌的瘤重抑制率为58.5％，化合物1、化合物8、化合物13、化合物16对Lewis肺癌的瘤重抑制率在78～84％范围内(例如化合物8为83.2％)；氟尿嘧啶对S180肉瘤的瘤重抑制率为63.3％，化合物1、化合物8、化合物13、化合物16对S180肉瘤的瘤重抑制率在62～67％范围内(例如化合物8为64.7％)；氟尿嘧啶对H22肝癌的瘤重抑制率为64.4％，化合物1、化合物8、化合物13、化合物16对H22肝癌的瘤重抑制率在86～90％范围内(例如化合物8为88.4％)。出人意料的发现，本发明所制得的化合物比之于氟尿嘧啶对某些肿瘤具有明显更好的抑瘤作用。
实施例41、制备脂质组合物
配方：
活性药物：100重量份，
磷脂(DPPC)：500重量份，
聚乙二醇化磷脂(DSPE-PEG2000)：120重量份，
胆固醇：65重量份，和
赋形剂(水性溶媒：5％葡萄糖溶液制成液体组合物，添加量是使活性药物终浓度为1mg/ml；或者冻干赋形剂：甘露醇，制成固体组合物，活性药物与该冻干赋形剂重量比为1：35)。
采用薄膜分散法制备，步骤如下：
(21)使磷脂、聚乙二醇化磷脂、胆固醇和活性药物溶解于有机溶剂(二氯甲烷，添加量为达到完全溶解程度的3倍量)中；
(22)在旋转蒸发仪上将上一步骤所得液体蒸发(50℃，真空度220mbar、转速250rpm)除去溶剂，使残余物在容器内壁形成薄膜；
(23)制备脂质组合物：
(23a)向容器内添加水性溶媒，70℃温度下水化1小时，再超声处理15min，过滤除菌(使用0.22μM聚醚砜材质微孔滤膜)，得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物；或者
(23b)向容器内添加预先用水溶解的赋形剂溶液(浓度为3.5％)，70℃温度下水化1小时，再超声处理15min，过滤除菌(例如使用0.22μM聚醚砜材质微孔滤膜)，分装到玻璃瓶中，置冷冻干燥机内进行冷冻干燥以除去水分，得到呈固体状态的脂质组合物。
在本实施例41中，分别使用氟尿嘧啶以及本发明实施例1～17所得17种化合物，作为活性药物，分别制备得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物(18种液体组合物)，以及呈固体状态的冷冻干燥脂质组合物(18种固体组合物)。
实施例42、制备脂质组合物
配方：
活性药物：100重量份，
磷脂(DMPG)：200重量份，
聚乙二醇化磷脂(PEG1000-DSPE)：250重量份，
胆固醇：80重量份，和
赋形剂(水性溶媒：0.9％氯化钠溶液制成液体组合物，添加量是使活性药物终浓度为3mg/ml；或者冻干赋形剂：甘氨酸，制成固体组合物，活性药物与该冻干赋形剂重量比为1：30)。
采用薄膜分散法制备，步骤如下：
(21)使磷脂、聚乙二醇化磷脂、胆固醇和活性药物溶解于有机溶剂(氯仿，添加量为达到完全溶解程度的2倍量)中；
(22)在旋转蒸发仪上将上一步骤所得液体蒸发(60℃，真空度200mbar、转速250rpm)除去溶剂，使残余物在容器内壁形成薄膜；
(23)制备脂质组合物：
(23a)向容器内添加水性溶媒，60℃温度下水化1.5小时，再超声处理20min，过滤除菌(使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物；或者
(23b)向容器内添加预先用水溶解的赋形剂溶液(浓度为15％)，70℃温度下水化2.5小时，再超声处理45min，过滤除菌(例如使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，分装到玻璃瓶中，置冷冻干燥机内进行冷冻干燥以除去水分，得到呈固体状态的脂质组合物。
在本实施例42中，分别使用氟尿嘧啶以及实施例1、实施例2、实施例13、实施例14五种化合物，作为活性药物，分别制备得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物(5种液体组合物)，以及呈固体状态的冷冻干燥脂质组合物(5种固体组合物)。
实施例43、制备脂质组合物
配方：
活性药物：100重量份，
磷脂(蛋黄卵磷脂)：1500重量份，
聚乙二醇化磷脂(DSPE-PEG4000)：60重量份，
胆固醇：120重量份，和
赋形剂(水性溶媒：水制成液体组合物，添加量是使活性药物终浓度为0.5mg/ml；或者冻干赋形剂：右旋糖苷，制成固体组合物，活性药物与该冻干赋形剂重量比为1：50)。
采用薄膜分散法制备，步骤如下：
(21)使磷脂、聚乙二醇化磷脂、胆固醇和活性药物溶解于有机溶剂(二氯甲烷，添加量为达到完全溶解程度的4倍量)中；
(22)在旋转蒸发仪上将上一步骤所得液体蒸发(40℃，真空度250mbar)除去溶剂，使残余物在容器内壁形成薄膜；
(23)制备脂质组合物：
(23a)向容器内添加水性溶媒，70℃温度下水化2.5小时，再超声处理45min，过滤除菌(使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物；或者
(23b)向容器内添加预先用水溶解的赋形剂溶液(浓度为3％)，60℃温度下水化1.5小时)，再超声处理20min)，过滤除菌(例如使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，分装到玻璃瓶中，置冷冻干燥机内进行冷冻干燥以除去水分，得到呈固体状态的脂质组合物。
在本实施例43中，分别使用氟尿嘧啶以及实施例1、实施例2、实施例13、实施例14五种化合物，作为活性药物，分别制备得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物(5种液体组合物)，以及呈固体状态的冷冻干燥脂质组合物(5种固体组合物)。
实施例44、制备脂质组合物
配方：
活性药物：100重量份，
磷脂(大豆卵磷脂)：120重量份，
聚乙二醇化磷脂(DSPE-PEG6000)：300重量份，
胆固醇：1450重量份，和
赋形剂(水性溶媒：5％葡萄糖溶液制成液体组合物，添加量是使活性药物终浓度为10mg/ml；或者冻干赋形剂：乳糖，制成固体组合物，活性药物与该冻干赋形剂重量比为1：20)。
采用薄膜分散法制备，步骤如下：
(21)使磷脂、聚乙二醇化磷脂、胆固醇和活性药物溶解于有机溶剂(二氯甲烷，添加量为达到完全溶解程度的2倍量)中；
(22)在旋转蒸发仪上将上一步骤所得液体蒸发(45℃，真空度230mbar)除去溶剂，使残余物在容器内壁形成薄膜；
(23)制备脂质组合物：
(23a)向容器内添加水性溶媒，40℃温度下水化2小时，再超声处理35min，过滤除菌(使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物；或者
(23b)向容器内添加预先用水溶解的赋形剂溶液(浓度为6％)，80℃温度下水化5小时，再超声处理35min，过滤除菌(例如使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，分装到玻璃瓶中，置冷冻干燥机内进行冷冻干燥以除去水分，得到呈固体状态的脂质组合物。
在本实施例44中，分别使用氟尿嘧啶以及实施例1、实施例2、实施例13、实施例14五种化合物，作为活性药物，分别制备得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物(5种液体组合物)，以及呈固体状态的冷冻干燥脂质组合物(5种固体组合物)。
实施例45、制备脂质组合物
配方：
活性药物：100重量份，
磷脂(二棕榈酰磷脂酰胆碱)：1800重量份，
聚乙二醇化磷脂(DSPE-PEG3350)：35重量份，
胆固醇：25重量份，和
赋形剂(水性溶媒：0.9％氯化钠溶液制成液体组合物，添加量是使活性药物终浓度为0.5mg/ml；或者冻干赋形剂：甘露醇，制成固体组合物，活性药物与该冻干赋形剂重量比为1：150)。
采用薄膜分散法制备，步骤如下：
(21)使磷脂、聚乙二醇化磷脂、胆固醇和活性药物溶解于有机溶剂(二氯甲烷，添加量为达到完全溶解程度的2.5倍量)中；
(22)在旋转蒸发仪上将上一步骤所得液体蒸发(50℃，真空度210mbar)除去溶剂，使残余物在容器内壁形成薄膜；
(23)制备脂质组合物：
(23a)向容器内添加水性溶媒，80℃温度下水化2小时，再超声处理40min，过滤除菌(使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物；或者
(23b)向容器内添加预先用水溶解的赋形剂溶液(浓度为3.5％)，40℃温度下水化1小时，再超声处理25min，过滤除菌(例如使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，分装到玻璃瓶中，置冷冻干燥机内进行冷冻干燥以除去水分，得到呈固体状态的脂质组合物。
在本实施例45中，分别使用氟尿嘧啶以及实施例1、实施例2、实施例13、实施例14五种化合物，作为活性药物，分别制备得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物(5种液体组合物)，以及呈固体状态的冷冻干燥脂质组合物(5种固体组合物)。
实施例51、脂质组合物的表征
实施例41～实施例45所得全部液体状态的脂质组合物以及全部固体状态的脂质组合物，各自加水稀释或者溶解后稀释，制成式(I)化合物浓度为0.2mg/ml(如果所得液体组合物本身浓度低于此浓度则不稀释)，用使用马尔文Zetasizer Nano ZS纳米粒度电位仪测定该药液中的微粒粒径，计算平均粒径，并统计粒径小于10nm的微粒的百分数、粒径大于300nm的微粒的百分数。
结果：
实施例41～实施例45所得全部液体脂质组合物，粒径小于10nm的微粒均少于5％、粒径大于300nm的微粒均少于5％，例如实施例41针对化合物1所得液体脂质组合物粒径小于10nm的微粒为1.7％、粒径大于300nm的微粒为0.3％；
实施例41～实施例45所得全部固体脂质组合物，粒径小于10nm的微粒均少于5％、粒径大于300nm的微粒均少于5％，例如实施例41针对化合物1所得固体脂质组合物粒径小于10nm的微粒为1.4％、粒径大于300nm的微粒为0.6％；
实施例41～实施例45所得全部液体脂质组合物的平均粒径在89～143nm范围内，例如实施例41针对化合物1所得液体脂质组合物中粒子的平均粒径为114nm。
实施例41～实施例45所得全部固体脂质组合物的平均粒径在83～134nm范围内，例如实施例41针对化合物1所得液体脂质组合物中粒子的平均粒径为124nm；实施例41～实施例45所得各种液体组合物与其相应的固体组合物之间的粒径无明显差异。
上述粒度测定结果是在组合物制备后的15日内测定的，这些结果并不能反映组合物粒度性能方面的稳定性，它们相当于0月结果。当将实施例41～实施例45所得全部液体脂质组合物置于室温放置18个月后，测定它们的粒度，结果各样品相比于其0月结果，平均粒径增加3～9％，例如18月后实施例41针对化合物1所得液体脂质组合物中粒子的平均粒径增加6.2％。另外，当将实施例41～实施例45所得全部固体脂质组合物置于室温放置18个月后，测定它们的粒度，结果各样品相比于其0月结果，平均粒径增加2～7％，例如18月后实施例41针对化合物1所得固体脂质组合物中粒子的平均粒径增加4.7％。
实施例52、脂质组合物的抗肿瘤活性
本实施例结合实施例31进行。
1、试验用细胞
人胰腺癌(AsPC-1)细胞、人胰腺导管癌(SU.86.86)。
2、测试物
氟尿嘧啶、实施例41～45制备的液体(或固体)脂质组合物。
3、实验方法
体外培养AsPC-1、SU.86.86等肿瘤细胞，在37℃、5％CO2条件下于细胞培养箱中培养至对数期。将上述细胞接种于96孔板中，接种密度为5000个/孔，每孔100μL，之后继续在细胞培养箱中培养24h。
采用MTT法测定各种测试物对上述肿瘤细胞的毒性，试验中包括设置用氟尿嘧啶前药化合物和氟尿嘧啶作为阳性对照药。用细胞培养液倍比稀释测试物，得到药物浓度为1～500μM的细胞培养基。细胞铺板24h后，分别用200μL含药培养基取代对应孔中的原培养基，每个浓度设4个复孔，同时设置空白对照孔和调零孔。继续孵育24、48、72h后，加入20μL浓度为5mg/mL的MTT溶液，同条件下继续培养4h后弃去培养液，向每孔加入150μL的DMSO溶解甲瓒，平板震荡仪震荡10min，在酶标仪中测定490nm波长处的吸光度值，计算细胞生长抑制率％和IC50(μM)值。
在某一肿瘤细胞的测试中，某化学物质在实施例41～45中所得液体脂质组合物的IC50(μM)值除以该化学物质IC50(μM)值再乘以100％所得百分数，作为该液体脂质组合物的相对抑制百分数(％)，该相对抑制百分数(％)值越小表示半数抑制浓度越小，表示脂质体相对于其原化合物而言抑制肿瘤细胞的活性越强，例如实施例41制得的化合物1液体脂质组合物对AsPC-1的IC50值除以化合物1对该肿瘤细胞的IC50值再乘以100％所得百分数，即为实施例41所得化合物1液体脂质组合物的相对抑制百分数(％)，对于冷冻干燥所得固体脂质组合物亦同理计算其相对抑制百分数(％)。结果显示，
对AsPC-1细胞，
(i)实施例41产物，氟尿嘧啶液体和固体脂质组合物(参照实施例41制备)的相对抑制百分数分别为87.5％和83.6％；化合物1～17在实施例41中制得的液体和固体脂质组合物的相对抑制百分数均在22.3～26.4％范围内并且同一化学物质的固体与液体形式的脂质组合物之间无明显区别，例如化合物1液体和固体脂质组合物的相对抑制百分数分别为24.1％和23.5％；
(ii)实施例42～45产物，氟尿嘧啶液体和固体脂质组合物的相对抑制百分数均在89.5～92.7％范围内；化合物1、13液体和固体脂质组合物的相对抑制百分数均在16.2～23.4％范围内并且同一化学物质的固体与液体形式的脂质组合物之间无明显区别，例如实施例42中的化合物1液体和固体脂质组合物的相对抑制百分数分别为18.7％和20.3％；
对SU.86.86细胞，
(a)实施例41产物，氟尿嘧啶液体和固体脂质组合物(参照实施例41制备)的相对抑制百分数分别为77.4％和81.6％；化合物1～17在实施例41中制得的液体和固体脂质组合物的相对抑制百分数均在12.1～17.4％范围内并且同一化学物质的固体与液体形式的脂质组合物之间无明显区别，例如化合物1液体和固体脂质组合物的相对抑制百分数分别为13.3％和12.6％；
(b)实施例42～45产物，氟尿嘧啶液体和固体脂质组合物的相对抑制百分数均在76.3～82.4％范围内；化合物1、13液体和固体脂质组合物的相对抑制百分数均在7.9～9.5％范围内，并且同一化学物质的固体与液体形式的脂质组合物之间无明显区别，例如实施例42中的化合物1液体和固体脂质组合物的相对抑制百分数分别为8.7％和8.2％；
上述结果表明，采用本发明脂质组合物体系无法显著降低氟尿嘧啶的IC50值即无法显著提高抑制肿瘤细胞的效果，采用本发明脂质组合物体系能够显著降低化合物1～17这类氟尿嘧啶前药的IC50值即能够显著提高抑制肿瘤细胞的效果。换言之，本发明脂质组合物体系能够显著降低本发明氟尿嘧啶前药的IC50值即能够显著提高抑制肿瘤细胞的效果，但是令人意外的发现是，此类脂质组合物体系无法有效提高氟尿嘧啶的抑制肿瘤细胞的效果，表明本发明脂质组合物体系能够显著提高本发明氟尿嘧啶前药化合物的抗肿瘤活性。本发明脂质组合物体系能够显著提高前药化合物抑制肿瘤细胞的效果，却无法有效提高氟尿嘧啶本身的效果，这是现有技术根本无法预见的。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

Claims (10)

1.一种脂质组合物，其包含：
式(I)化合物：100重量份，
磷脂：100～2000重量份(例如200～1500重量份)，
聚乙二醇化磷脂：30～300重量份(例如50～200重量份)，
胆固醇：20～200重量份(例如50～150重量份)，和
赋形剂；
所述式(I)化合物具有如下结构：
Figure FDA0002901389050000011
或其药用盐、溶剂合物、多晶型，
其中：
X代表O、NH；
R代表C6-22直链或支链的饱和烷基或不饱和烯基，其中碳链中的1个或2个CH2可任选被O替代。
2.根据权利要求1的脂质组合物，其中所述R选自：正己烷基、正癸烷基、正十二烷基、正十四烷基、正十六烷基、正十八烷基、正二十烷基、正二十二烷基、正癸基-9-烯-1-基、正十二烷基-11-烯-1-基、5-(2-甲氧基乙氧基)戊基、7-(2-甲氧基乙氧基)庚基、9-(2-甲氧基乙氧基)壬基、正十六烷氧丙基、正十八烷氧乙基、(9-烯)正十烷基、(11-烯)正十二烷基、(11-烯)正十二烷乙基。
3.根据权利要求1的脂质组合物，所述式(I)化合物为选自下列的化合物1～化合物17：
化合物1：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正己基氧基甲酸酯，
化合物2：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正癸基氧基甲酸酯，
化合物3：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十四烷基氧基甲酸酯，
化合物4：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十六烷基氧基甲酸酯，
化合物5：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十八烷基氧基甲酸酯，
化合物6：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正二十烷基氧基甲酸酯，
化合物7：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正二十二烷基氧基甲酸酯，
化合物8：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正癸基-9-烯-1-基氧基甲酸酯，
化合物9：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十二烷基-11-烯-1-基氧基甲酸酯，
化合物10：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基(5-(2-甲氧基乙氧基)戊基)氧基甲酸酯，
化合物11：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基(7-(2-甲氧基乙氧基)庚基)氧基甲酸酯，
化合物12：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基(9-(2-甲氧基乙氧基)壬基)氧基甲酸酯，
化合物13：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正己基氨基甲酸酯，
化合物14：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正癸基氨基甲酸酯，
化合物15：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十四烷基氨基甲酸酯，
化合物16：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正十六烷基氨基甲酸酯，
化合物17：(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基正二十二烷基氨基甲酸酯。
4.根据权利要求1的脂质组合物，其是呈液体状态的组合物(例如是脂质混悬液)，其中所述赋形剂是水性溶媒；例如，其选自：水、0.8～1％氯化钠溶液(例如0.9％氯化钠溶液)、2～10％葡萄糖溶液(例如5％葡萄糖溶液)；例如，该水性溶媒的用量是使得式(I)化合物在该液体组合物中的浓度为0.2～20mg/ml，例如为0.25～15mg/ml，例如0.5～10mg/ml，例如0.5～5mg/ml。
5.根据权利要求1的脂质组合物，其是呈固体状态的组合物(例如是冷冻干燥组合物)，其中所述赋形剂是冻干赋形剂；例如，该冻干赋形剂选自：甘露醇、山梨醇、乳糖、甘氨酸、右旋糖苷、蔗糖、葡萄糖等等；例如，式(I)化合物与冻干赋形剂的重量比为1：20～200，例如重量比为1：20～150，例如重量比为1：20～100。
6.根据权利要求1的脂质组合物，其中：
所述磷脂选自：蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、鞘磷脂、磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(即DMPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(即DMPG)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二硬酯酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、及其组合；或者
所述聚乙二醇化磷脂(可简称为PEG化磷脂)是用分子量为1000～10000道尔顿修饰的磷脂，其例如是聚乙二醇化二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺，其可表述为二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(可缩写为PEG-DSPE或DSPE-PEG)；例如，所述PEG化磷脂选自：二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇1000(可缩写为PEG1000-DSPE，其余亦可类似表述)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇3350、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇4000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇5000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇6000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇8000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇10000。
7.根据权利要求1的脂质组合物，其是通过脂质体的制备工艺制备得到的；例如选自：薄膜分散法、挤压制备法、French压力法、逆相蒸发法、化学梯度法(例如，pH梯度法、硫酸铵梯度法)；例如，其是通过包括如下步骤的薄膜分散法制备得到的：
(21)使磷脂、聚乙二醇化磷脂、胆固醇和活性药物溶解于有机溶剂(例如二氯甲烷、氯仿等，其量为例如达到完全溶解程度的2～4倍)中；
(22)在旋转蒸发仪上将上一步骤所得液体蒸发(例如，温度40～60℃、真空度200～250mbar、转速250rpm)除去溶剂，使残余物在容器内壁形成薄膜；
(23)制备脂质组合物：
(23a)向容器内添加水性溶媒，40～80℃(例如60～70℃)温度下水化1～5小时(例如1.5～2.5小时)，再超声处理15～60min(例如20～45min)，过滤除菌(例如使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，得到呈液体状态的脂质混悬液形式的脂质组合物；或者
(23b)向容器内添加预先用水溶解的赋形剂溶液，40～80℃(例如60～70℃)温度下水化1～5小时(例如1.5～2.5小时)，再超声处理15～60min(例如20～45min)，过滤除菌(例如使用220nm聚醚砜材质微孔滤膜)，分装到玻璃瓶中，置冷冻干燥机内进行冷冻干燥以除去水分，得到呈固体状态的脂质组合物；例如，步骤(23b)中，所述预先用水溶解的赋形剂溶液中赋形剂浓度为3～20％，例如3～15％，例如3～10％。
8.根据权利要求1的脂质组合物，其为呈液体或固体状态的组合物，其加水稀释或者溶解制成式(I)化合物浓度为0.2mg/ml或更低的药液时，该药液用纳米粒度仪测定，平均粒径小于200nm(例如平均粒径为20～200nm，例如平均粒径为30～200nm，例如平均粒径为40～200nm，例如平均粒径为50～200nm，例如平均粒径为30～180nm，例如平均粒径为30～150nm)，粒径小于10nm的微粒少于5％(例如粒径小于15nm的微粒少于5％)，粒径大于500nm的微粒少于5％(例如粒径大于400nm的微粒少于5％，粒径大于300nm的微粒少于5％)。
9.权利要求1～8任一项所述脂质组合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。
10.根据权利要求9的用途，其中所述肿瘤为实体瘤；或者，所述肿瘤为选自：结直肠癌、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、头颈部鳞癌、皮肤癌、肝癌、膀胱癌、肺癌、宫颈癌、其它消化道肿瘤(包括肝癌、胆道系统肿瘤和胰腺癌)，等等。
CN202110058056.2A 2021-01-15 2021-01-15 抗肿瘤的尿嘧啶类化合物及其脂质组合物 Pending CN112618550A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110058056.2A CN112618550A (zh) 2021-01-15 2021-01-15 抗肿瘤的尿嘧啶类化合物及其脂质组合物

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110058056.2A CN112618550A (zh) 2021-01-15 2021-01-15 抗肿瘤的尿嘧啶类化合物及其脂质组合物

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112618550A true CN112618550A (zh) 2021-04-09

Family

ID=75294445

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110058056.2A Pending CN112618550A (zh) 2021-01-15 2021-01-15 抗肿瘤的尿嘧啶类化合物及其脂质组合物

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112618550A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022083679A1 (en) * 2020-10-23 2022-04-28 Liangjiang Medicine Co., Ltd. Prodrugs for sustained releasing therapeutic agents and uses thereof

Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6576257B1 (en) * 1999-10-12 2003-06-10 Yehuda Yarmut Targeted drug activation
US20060286033A1 (en) * 2005-04-04 2006-12-21 Los Angeles Biomedical Research Institute At Harbor Ucla Medical Center Targeting pulmonary epithelium using ADRP
CN101024085A (zh) * 2006-02-23 2007-08-29 中国人民解放军第四军医大学 一种结肠癌靶向治疗前体药物及制备方法
WO2008075201A2 (en) * 2006-12-15 2008-06-26 Universidad De Murcia Epigallocatechin-3-gallate compositions for cancer therapy and chemoprotection
CN101485887A (zh) * 2008-01-17 2009-07-22 中国人民解放军第二军医大学 5-氟尿嘧啶-sn2-磷脂酰胆碱共聚物及其制备方法和用途
CN101987857A (zh) * 2009-08-07 2011-03-23 合肥华方医药科技有限公司 一种抗肿瘤药物卡培他滨及其中间体的合成方法
CN102198150A (zh) * 2010-03-26 2011-09-28 中国医学科学院医药生物技术研究所 双活性成分抗肿瘤药物及其应用
CN102229571A (zh) * 2011-05-11 2011-11-02 温州大学 一种5-氟尿嘧啶类药物中间体及其制备方法和应用
CN104666308A (zh) * 2015-03-16 2015-06-03 辽宁大学 同时含有5-氟尿嘧啶和齐墩果酸衍生物的壳聚糖微球及其制备方法
CN105030674A (zh) * 2015-07-17 2015-11-11 中国药科大学 子母弹型抗肿瘤金纳米结合物杂合脂质体制备方法和应用
CN109761915A (zh) * 2019-03-05 2019-05-17 沈阳药科大学 靶向mct1转运体的5-氟尿嘧啶成酯前药
CN109998996A (zh) * 2019-05-05 2019-07-12 中国医学科学院医药生物技术研究所 脂质组合物及提高药物抗肿瘤活性的方法
CN110840849A (zh) * 2019-12-03 2020-02-28 黑龙江福和制药集团股份有限公司 一种用于5-氟尿嘧啶前药的粉针剂及其制备方法和应用

Patent Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6576257B1 (en) * 1999-10-12 2003-06-10 Yehuda Yarmut Targeted drug activation
US20060286033A1 (en) * 2005-04-04 2006-12-21 Los Angeles Biomedical Research Institute At Harbor Ucla Medical Center Targeting pulmonary epithelium using ADRP
CN101024085A (zh) * 2006-02-23 2007-08-29 中国人民解放军第四军医大学 一种结肠癌靶向治疗前体药物及制备方法
WO2008075201A2 (en) * 2006-12-15 2008-06-26 Universidad De Murcia Epigallocatechin-3-gallate compositions for cancer therapy and chemoprotection
CN101485887A (zh) * 2008-01-17 2009-07-22 中国人民解放军第二军医大学 5-氟尿嘧啶-sn2-磷脂酰胆碱共聚物及其制备方法和用途
CN101987857A (zh) * 2009-08-07 2011-03-23 合肥华方医药科技有限公司 一种抗肿瘤药物卡培他滨及其中间体的合成方法
CN102198150A (zh) * 2010-03-26 2011-09-28 中国医学科学院医药生物技术研究所 双活性成分抗肿瘤药物及其应用
CN102229571A (zh) * 2011-05-11 2011-11-02 温州大学 一种5-氟尿嘧啶类药物中间体及其制备方法和应用
CN104666308A (zh) * 2015-03-16 2015-06-03 辽宁大学 同时含有5-氟尿嘧啶和齐墩果酸衍生物的壳聚糖微球及其制备方法
CN105030674A (zh) * 2015-07-17 2015-11-11 中国药科大学 子母弹型抗肿瘤金纳米结合物杂合脂质体制备方法和应用
CN109761915A (zh) * 2019-03-05 2019-05-17 沈阳药科大学 靶向mct1转运体的5-氟尿嘧啶成酯前药
CN109998996A (zh) * 2019-05-05 2019-07-12 中国医学科学院医药生物技术研究所 脂质组合物及提高药物抗肿瘤活性的方法
CN110840849A (zh) * 2019-12-03 2020-02-28 黑龙江福和制药集团股份有限公司 一种用于5-氟尿嘧啶前药的粉针剂及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
AGASE, TOSHIO 等: "5-Fluorouracil derivatives. XIV. Selective synthesis of 1-[[(alkoxycarbonyl)oxy]methyl]-5-fluorouracils via 1,3-bis(hydroxymethyl)-5-fluorouracil", 《HETEROCYCLES》 *
ZUIFANG LIU 等: "Synthesis and release of 5-fluorouracil from poly(N-vinylpyrrolidinone) bearing 5-fluorouracil derivatives", 《JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE》 *
ZUIFANG LIU 等: "Synthesis of allyloxycarbonyloxymethyl-5-¯uorouracil and copolymerizations with N-vinylpyrrolidinone", 《J. MATER. CHEM》 *
孙维彤 等: "5- 氟尿嘧啶前体药物研究进展", 《生命的化学》 *
曾祎华 等: "前药原理在抗肿瘤药物研究中的应用", 《北方药学》 *
郑雪梅 等: "《现代实用药物学基础与治疗 上》", 30 September 2016, 吉林科学技术出版社 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022083679A1 (en) * 2020-10-23 2022-04-28 Liangjiang Medicine Co., Ltd. Prodrugs for sustained releasing therapeutic agents and uses thereof

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110054659B (zh) 提高药物抗肿瘤活性的方法
CN109998996B (zh) 脂质组合物及提高药物抗肿瘤活性的方法
US4263428A (en) Bis-anthracycline nucleic acid function inhibitors and improved method for administering the same
CN109553651B (zh) 4’-硫代核苷的新型化合物及其制备方法、药物组合物和应用
WO2006029081A2 (en) Nucleoside-lipid conjugates, their method of preparation and uses thereof
CN112724088B (zh) 尿嘧啶类化合物及其抗肿瘤用途
MX2007007228A (es) Profarmaco de amida de gemcitabina, composiciones y uso del mismo.
CN101787064B (zh) 阿糖胞苷衍生物及其在抗癌抗肿瘤中的用途
WO2006102533A2 (en) Pharmaceutically active lipid-based formulation of nucleoside-lipid conjugates
WO2007099981A1 (ja) ガラクトース誘導体、薬物担体及び医薬組成物
EP4181963A1 (en) Drug delivery system for locally delivering therapeutic agents and uses thereof
US20070021380A1 (en) Novel drug delivery compositions
CN112618550A (zh) 抗肿瘤的尿嘧啶类化合物及其脂质组合物
WO2016130271A1 (en) Substituted pyrrolo[2,3-d]pyrimidines for selectively targeting tumor cells with fr-alpha and fr-beta type receptors
CN102942589B (zh) 异磷酰胺芥及其类似物的盐
Schwendener et al. Treatment of l1210 murine leukemia with liposome‐incorporated N4‐hexadecyl‐1‐β‐D‐arabinofuranosyl cytosine
CN112245391A (zh) 抗肿瘤脂质组合物
EP1606233B1 (en) Phospholipid esters of Clofarabin
US6342485B1 (en) Synergistic compositions useful as anti-tumor agents
US20100249055A1 (en) Clofarabine phospholipid derivatives
US10639295B2 (en) Podophyllotoxin derivative with 4-position nitrogen substitution and preparation method and application thereof
CN107001617B (zh) Peg衍生物
US10751358B2 (en) Multitargeted nucleoside derivatives
CN111249252B (zh) 白蛋白纳米粒组合物及其制法
KR19990028344A (ko) 치료 화합물

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination