CN112584850A - 抗疱疹病毒剂 - Google Patents

抗疱疹病毒剂 Download PDF

Info

Publication number
CN112584850A
CN112584850A CN201980050286.5A CN201980050286A CN112584850A CN 112584850 A CN112584850 A CN 112584850A CN 201980050286 A CN201980050286 A CN 201980050286A CN 112584850 A CN112584850 A CN 112584850A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mgdg
fatty acids
monoglycalactosyldiglycerides
day
thymidine
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201980050286.5A
Other languages
English (en)
Inventor
浅野真菜
久野齐
渥美欣也
林京子
河原敏男
小松聪子
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
School Corp Chubu University
Denso Corp
Chubu University Educational Foundation
Original Assignee
School Corp Chubu University
Denso Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by School Corp Chubu University, Denso Corp filed Critical School Corp Chubu University
Publication of CN112584850A publication Critical patent/CN112584850A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/02—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • A01N43/04—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom
    • A01N43/14—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings
    • A01N43/16—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings with oxygen as the ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
    • A01N65/03—Algae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
    • A23L33/12—Fatty acids or derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7032—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a polyol, i.e. compounds having two or more free or esterified hydroxy groups, including the hydroxy group involved in the glycosidic linkage, e.g. monoglucosyldiacylglycerides, lactobionic acid, gangliosides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/68—Protozoa, e.g. flagella, amoebas, sporozoans, plasmodium or toxoplasma
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/748—Cyanobacteria, i.e. blue-green bacteria or blue-green algae, e.g. spirulina
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/02—Algae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/02—Algae
    • A61K36/05—Chlorophycota or chlorophyta (green algae), e.g. Chlorella
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)

Abstract

本发明的课题在于，提供对疱疹病毒感染症的治疗或预防有效的新手段。本发明提供一种抗疱疹病毒剂，其包含源自单细胞藻类的物质作为有效成分。

Description

抗疱疹病毒剂
技术领域
本发明涉及抗疱疹病毒剂。详细而言，本发明涉及使用源自微型藻类的物质的抗疱疹病毒剂及其用途等。本申请主张基于2018年7月31日提出申请的日本专利申请第2018-143051号的优先权，并通过参照援引该专利申请的全部内容。
背景技术
疱疹病毒为具有双链DNA作为基因组的DNA病毒。疱疹病毒分为α疱疹病毒亚科、β疱疹病毒亚科和γ疱疹病毒亚科。属于α疱疹病毒亚科的单纯疱疹病毒(HSV)在人体中引起各种疾病。作为HSV感染症的代表性疾病，可举出单纯疱疹病毒1型(HSV-1)为病原体的口唇疱疹、单纯疱疹病毒2型(HSV-2)为病原体的生殖器疱疹。疱疹病毒的特征是在首次感染后，进行潜伏感染(在体内持续感染)，因各种原因(紫外线、发热、各种应激、月经、免疫抑制等)而再次活化，再次在局部引发病变(复发症)。没有针对疱疹病毒感染的根本性治疗方法，感染疱疹病毒的个体会反复经历局部的病变/症状。
在针对疱疹病毒感染的治疗中，使用核酸类似物、DNA合成抑制剂等(例如，阿昔洛韦、伐昔洛韦)(例如，参照非专利文献1、2)，但是未充分得到治疗效果的病例多，迫切希望建立新的治疗策略。
现有技术文献
非专利文献
非专利文献1:John M.Douglas et al.,N Engl J Med 1984；310:1551-1556.
非专利文献2:Lisa G.Kaplowitz et al.,JAMA.1991；265(6):747-751.
发明内容
发明所要解决的技术问题
在以上的背景下，本申请发明的课题在于，提供对疱疹病毒感染症的治疗或预防有效的新手段。
用于解决问题的技术方案
为了解决上述课题进行深入研究，结果发现：胶球藻属(Coccomyxa)微型藻类的提取物(含有单半乳糖甘油二酯的提取物)具有疱疹病毒感染症发病的抑制效果和病毒增殖抑制效果。另外发现：通过并用胸苷可飞跃性地增强该效果(发挥协同效应)。另外，不仅提取物，而且胶球藻属微型藻类的干燥粉末(藻体)也确认到相同效果，与提取物的情形相同，通过并用胸苷可显著增强该效果。另一方面，通过进一步的研究，阐明提取物中的有效成分即单半乳糖甘油二酯的结构。另外，得到了证明该提取物的利用价值非常高进一步的见解。
另一方面，明确了：对于源自小球藻(Chlorella vulgaris)、微拟球藻(Nannochloropsis oculata)、钝顶节旋藻(Arthrospira platensis)(螺旋藻(Spirulina))和纤细裸藻(Euglena gracilis)的含有单半乳糖甘油二酯的提取物，也可预期与源自胶球藻属微型藻类的含有单半乳糖甘油二酯的提取物同样的效果。
主要基于上述成果和讨论，提供以下发明。
[1]一种抗疱疹病毒剂，其含有源自单细胞藻类的物质作为有效成分。
[2]根据[1]记载的抗疱疹病毒剂，其中，上述单细胞藻类为属于胶球藻属、小球藻属、微拟球藻属、节旋藻属或裸藻属的微型藻类。
[3]根据[1]记载的抗疱疹病毒剂，其中，上述单细胞藻类为属于胶球藻属的微型藻类。
[4]根据[3]记载的抗疱疹病毒剂，其中，上述微型藻类为胶球藻KJ株或其突变株、或者、胶球藻MBIC11204株或其突变株。
[5]根据[1]～[4]中任一项记载的抗疱疹病毒剂，其中，上述有效成分为上述单细胞藻类的含有单半乳糖甘油二酯的提取物。
[6]根据[5]记载的抗疱疹病毒剂，其中，主要成分为单半乳糖甘油二酯。
[7]根据[6]记载的抗疱疹病毒剂，其中，上述单半乳糖甘油二酯为选自以下(1)～(6)中的一种以上的单半乳糖甘油二酯：
(1)构成脂肪酸为C16:3和C18:3的单半乳糖甘油二酯；
(2)构成脂肪酸为C16:2和C18:3的单半乳糖甘油二酯；
(3)构成脂肪酸为C18:3和C18:3的单半乳糖甘油二酯；
(4)构成脂肪酸为C16:2和C18:2的单半乳糖甘油二酯；
(5)构成脂肪酸为C18:3和C18:2的单半乳糖甘油二酯；以及
(6)构成脂肪酸为C16:1和C18:2的单半乳糖甘油二酯。
[8]根据[5]～[7]中任一项记载的抗疱疹病毒剂，其中，上述有效成分为对上述单细胞藻类的乙醇提取物进行色谱纯化，提高单半乳糖甘油二酯的含量而得到的物质。
[9]根据[5]～[8]中任一项记载的抗疱疹病毒剂，其中，上述有效成分中的单半乳糖甘油二酯含量为70％(w/v)～99％(w/v)。
[10]根据[1]～[4]中任一项记载的抗疱疹病毒剂，其中，上述有效成分为藻体。
[11]根据[1]～[4]中任一项记载的抗疱疹病毒剂，其中，上述有效成分为藻体的干燥粉末。
[12]一种抗疱疹病毒剂，其有效成分为选自以下(1)～(6)中的一种以上的单半乳糖甘油二酯：
(1)构成脂肪酸为C16:3和C18:3的单半乳糖甘油二酯；
(2)构成脂肪酸为C16:2和C18:3的单半乳糖甘油二酯；
(3)构成脂肪酸为C18:3和C18:3的单半乳糖甘油二酯；
(4)构成脂肪酸为C16:2和C18:2的单半乳糖甘油二酯；
(5)构成脂肪酸为C18:3和C18:2的单半乳糖甘油二酯；以及
(6)构成脂肪酸为C16:1和C18:2的单半乳糖甘油二酯。
[13]根据[1]～[12]中任一项记载的抗疱疹病毒剂，其特征在于，并用胸苷。
[14]根据[13]记载的抗疱疹病毒剂，其为含有上述有效成分和胸苷的配合剂。
[15]根据[1]～[14]中任一项记载的抗疱疹病毒剂，其中，目标疱疹病毒为单纯疱疹病毒1型或单纯疱疹病毒2型。
[16]一种组合物，其包含[1]～[15]中任一项记载的抗疱疹病毒剂。
[17]根据[16]记载的组合物，上述组合物为针对疱疹病毒感染症的药物。
[18]根据[16]记载的组合物，上述组合物为食品或饲料。
附图说明
图1为HSV-2感染(生殖器疱疹)实验的结果。比较单独给药时的发病经过。试验区#1：对照(蒸馏水)、试验区#2：ACV(阿昔洛韦)(1mg/天)、试验区#3：MGDG制备物(0.1mg/天)、试验区#4：MGDG制备物(1mg/天)、试验区#5：胸苷(1mg/天)、试验区#6：胸苷(5mg/天)、试验区#7：胸苷(20mg/天)。
图2为HSV-2感染(生殖器疱疹)实验的结果。比较并用MGDG制备物(给药0.1mg)和胸苷时的发病经过。试验区#1：对照(蒸馏水)、试验区#2：ACV(阿昔洛韦)(1mg/天)、试验区#3：MGDG制备物(0.1mg/天)、试验区#8：MGDG制备物(0.1mg/天)+胸苷(1mg/天)、试验区#9：MGDG制备物(0.1mg/天)+胸苷(5mg/天)、试验区#10：MGDG制备物(0.1mg/天)+胸苷(20mg/天)。
图3为HSV-2感染(生殖器疱疹)实验的结果。比较并用MGDG制备物(1mg给药)和胸苷时的发病经过。试验区#1：对照(蒸馏水)、试验区#2：ACV(阿昔洛韦)(1mg/天)、试验区#4：MGDG制备物(1mg/天)、试验区#11：MGDG制备物(1mg/天)+胸苷(1mg/天)、试验区#12：MGDG制备物(1mg/天)+胸苷(5mg/天)、试验区#13：MGDG制备物(1mg/天)+胸苷(20mg/天)。
图4为HSV-2感染(生殖器疱疹)实验的结果。比较单独给药藻体(干燥粉末)或并用藻体和胸苷时的发病经过。试验区#1：对照(蒸馏水)、试验区#2：ACV(阿昔洛韦)(1mg/天)、试验区#14：藻体(20mg/天)、试验区#15：藻体(20mg/天)+胸苷(1mg/天)、试验区#16：藻体(20mg/天)+胸苷(5mg/天)、试验区#17：藻体(20mg/天)+胸苷(20mg/天)。
图5为HSV-2感染(生殖器疱疹)实验的结果。比较生存率、发病例。
图6为HSV-2感染(生殖器疱疹)实验的结果。比较感染3天后的病毒量。*p<0.05相对于对照。
图7为HSV-1感染(皮肤疱疹)实验的结果。比较局部给药(涂布)时的发病经过。试验区#19：对照(PBS)(涂布)、试验区#20：5％ACV(涂布)、试验区#21：5％MGDG制备物(涂布)、试验区#22：5％胸苷(涂布)、试验区#23：5％MGDG制备物+5％胸苷(涂布)。
图8为HSV-1感染(皮肤疱疹)实验的结果。比较口服给药时的发病经过。试验区#24：对照(蒸馏水)、试验区#25：ACV(1mg/天)、试验区#26：MGDG制备物(1mg/天)、试验区#27：胸苷(20mg/天)、试验区#28：ACV(1mg/天)+MGDG制备物(1mg/天)。
图9为HSV-1感染(皮肤疱疹)实验的结果。比较生存率、发病例。
图10为MGDG制备物与胸苷的相互作用的研究。为表示胸苷的HSV-2增殖抑制作用被MGDG制备物增强的等效线图。
图11为MGDG制备物与胸苷的相互作用的研究。为表示MGDG制备物的抗HSV-2作用被胸苷增强的等效线图。
图12为使用胶球藻KJ株的藻体(干燥粉末)的HSV-2感染(生殖器疱疹)实验的结果。比较单独给药藻体(干燥粉末)或并用藻体和胸苷时的发病经过。试验区#1：对照(蒸馏水)、试验区#2：ACV(1mg/天)、试验区#3：藻体(干燥粉末)(5mg/天)、试验区#4：藻体(干燥粉末)(5mg/天)+胸苷(0.5mg/天)、试验区#5：藻体(干燥粉末)(10mg/天)。
图13为使用胶球藻KJ株的藻体(干燥粉末)的HSV-2感染(生殖器疱疹)实验的结果。比较感染3天后的病毒量。*p<0.05,**p<0.01相对于对照。
图14为小球藻属微型藻类的培养中使用的培养基的示例(C培养基)和微拟球藻属微型藻类的培养中使用的培养基的示例(ESM培养基)。
图15为节旋藻属微型藻类的培养中使用的培养基的示例(MA培养基)和裸藻属藻类的培养中使用的培养基的示例(HUT培养基)。
图16为对口唇疱疹的效果(患者1：45岁女性)。将配合有MGDG制备物的膏剂每天3次涂布于患部，观察经过。
图17为对口唇疱疹的效果(患者2：25岁男性)。将配合有MGDG制备物的膏剂每天涂布于患部，观察经过。
图18为MGDG制备物的含有成分(MGDG1)的分析结果(GC/FID的色谱图)。
图19为MGDG制备物的含有成分(MGDG2)的分析结果(GC/FID的色谱图)。
图20为MGDG制备物的含有成分(MGDG3)的分析结果(GC/FID的色谱图)。
图21为MGDG制备物的含有成分(MGDG4)的分析结果(GC/FID的色谱图)。
图22为MGDG制备物的含有成分(MGDG5)的分析结果(GC/FID的色谱图)。
图23为各MGDG级分(MGDG1～MGDG5)的杀病毒活性。比较MGDG1～MGDG5和MGDG制备物(混合品)对流感病毒、单纯疱疹病毒2型、猫杯状病毒和脊髓灰质炎病毒的杀病毒活性。
图24为各种生物(胶球藻KJ株、小球藻、微拟球藻、螺旋藻(Spirulina))的MGDG制备物的HPLC色谱图。MGDG-1～MGDG-5为源自KJ株MGDG制备物的峰，利用＊表示推定与其为相同结构的峰。
图25为各种生物(胶球藻KJ株、纤细裸藻(Inochi Euglena、BIO ZYME)、菠菜)的MGDG制备物的HPLC色谱图。MGDG-1～MGDG-5为源自KJ株MGDG制备物的峰，利用＊表示推定与其为相同结构的峰。
具体实施方式
1.术语、作用
抗疱疹病毒剂是指以疱疹病毒为靶的抗病毒剂。如后述的实施例所示，可预期本发明的抗疱疹病毒剂对疱疹病毒感染症具有治疗或预防效果。虽然不受理论约束，但是鉴于后述实施例所示的实验结果，可以说本发明的抗疱疹病毒剂介由抑制疱疹病毒的增殖而发挥其效果。如上述所示，疱疹病毒分为3种疱疹病毒亚科(α疱疹病毒亚科、β疱疹病毒亚科、γ疱疹病毒亚科)。单纯疱疹病毒(HSV-1)1型、单纯疱疹病毒2型(HSV-2)、水痘·带状疱疹病毒(HHV-3)属于α疱疹病毒亚科，巨细胞病毒(HHV-5)、人疱疹病毒6(HHV-6)、人疱疹病毒7(HHV-7)属于β疱疹病毒亚科，EB病毒(HHV-4)、人疱疹病毒8(HHV-8，别名：卡波西肉瘤疱疹病毒(KSHV))属于γ疱疹病毒亚科。本发明的抗疱疹病毒剂特别适合的靶为单纯疱疹病毒1型(HSV-1)或单纯疱疹病毒2型(HSV-2)。
2.抗疱疹病毒剂的有效成分
本发明的抗疱疹病毒剂以源自单细胞藻类的物质为有效成分。只要确认到抗疱疹病毒活性，则不特别限定于单细胞藻类(共球藻纲(Trebouxiophyceae)、真眼点藻纲、蓝藻纲、裸藻纲等)。作为优选的单细胞藻类，可举出胶球藻属(Coccomyxa)微型藻类(具体例为胶球藻KJ株)、小球藻属(Chlorella)微型藻类(具体例：小球藻)、微拟球藻属(Nannochloropsis)微型藻类(具体例：微拟球藻)、节旋藻属(Arthrospira)微型藻类(具体例：钝顶节旋藻(螺旋藻))或裸藻属(Euglena)微型藻类(具体例为纤细裸藻)。其中，特别优选胶球藻属微型藻类。胶球藻属微型藻类没有特别限定，作为优选例，可举出胶球藻KJ株或其突变株、或者胶球藻MBIC11204株或其突变株。胶球藻KJ株(KJ DENSO)于2013年6月4日以保藏编号FERM P-22254保藏于国家高级工业科学技术学院国际专利生物保藏中心(NITE-IPOD)(千叶县木更津市KAZUSA镰足2-5-8 120号室)，并于2015年6月2日以保藏编号FERMBP-22254移交为符合布达佩斯条约规定的国际保藏。另一方面，胶球藻MBIC11204株(N1)于2006年1月18日以保藏编号FERM BP-10485保藏于国际专利生物保藏中心(IPOD)(现在的国家高级工业科学技术学院国际专利生物保藏中心(NITE-IPOD)(千叶县木更津市KAZUSA镰足2-5-8 120号室)进行了国际保藏。胶球藻MBIC11204株(N1)于2016年6月14日以NBRC编号NBRC112354保藏于在日本技术评价研究所生物资源中心(NBRC)NBRC培养物中心。
胶球藻KJ株的变异株及胶球藻MBIC11204株的变异株可通过紫外线、X射线、γ射线等的照射、诱变剂处理、重离子束照射、基因操作(外源基因的导入、基因破坏、通过基因组编辑进行的基因修饰等)等得到。只要能够得到产生显示抗疱疹病毒活性的单半乳糖甘油二酯的变异株，则变异株的取得方法、特性等没有特别限定。
胶球藻属微型藻类的培养方法没有特别限定。作为用于培养胶球藻属微型藻类的培养基，为微型藻类的培养中通常使用的培养基即可，例如，可使用包含各种营养盐、微量金属盐、维生素等的公知的淡水产微型藻类用培养基、海水产微型藻类用培养基中的任一种。作为培养基，例如可举出AF6培养基。AF6培养基的组成(每100ml)如以下所示。
NaNO3 14mg
NH4NO3 2.2mg
MgSO4·7H2O 3mg
KH2PO4 1mg
K2HPO4 0.5mg
CaCl2·2H2O 1mg
CaCO3 1mg
柠檬酸铁 0.2mg
柠檬酸 0.2mg
生物素 0.2μg
盐酸硫胺素 1μg
维生素B6 0.1μg
维生素B12 0.1μg
微量金属 0.5mL
蒸馏水 99.5mL。
作为营养盐，例如可举出NaNO3、KNO3、NH4Cl、尿素等氮源；K2HPO4、KH2PO4、甘油磷酸钠等磷源。另外，作为微量金属，可举出铁、镁、锰、钙、锌等，作为维生素，可举出维生素B1、维生素B12等。
培养方法可以在通气条件下，在供给二氧化碳同时进行搅拌。此时，在利用荧光灯进行带有12小时的光照射，12小时的黑暗条件等明暗周期的光照射，或者，连续进行光照射而进行培养。培养条件只要是在对胶球藻属微型藻类的增殖不产生不良影响的范围内就没有特别限制，例如，培养液的pH设为3～9、培养温度设为10～35℃。
应予说明，关于胶球藻KJ株的培养方法，可参考日本特开2015-15918、WO2015/190116A1，Satoh,A.et al.,Characterization of the Lipid Accumulation in a NewMicroalgal Species,Pseudochoricystis ellipsoidea(Trebouxiophyceae)J.Jpn.Inst.Energy(2010)89:909-913.等。同样，关于胶球藻MBIC11204株的培养方法，可参考WO2006/109588等。
作为有效成分，可使用单细胞藻类(特别优选属于胶球藻属的微型藻类)的含有单半乳糖甘油二酯的提取物(第1方式)，或者，藻体或其干燥粉末(第2方式)。以下对各方式进行说明。应予说明，通常含有单半乳糖甘油二酯的提取物，或者，藻体或其干燥粉末中的任一者为有效成分，但是使用这两者作为有效成分的方式也没有问题。
(1)含有单半乳糖甘油二酯的提取物
本发明的一个方式中，作为有效成分，使用“单细胞藻类(特别优选属于胶球藻属的微型藻类)的含有单半乳糖甘油二酯的提取物”。提取方法，只要可得到含有单半乳糖甘油二酯的提取物就没有特别限定。作为提取方法，例如可采用乙醇提取。优选使用在乙醇提取后进行纯化，提高单半乳糖甘油二酯的含量而得到的物质作为“单细胞藻类(特别优选属于胶球藻属的微型藻类)的含有单半乳糖甘油二酯的提取物”。作为纯化方法的示例，可例示使用硅胶、氧化铝等填充剂的柱色谱、凝胶过滤色谱、浓缩等。
在提取之前，可以将回收的藻体供于干燥处理和/或破碎处理。换而言之，可以制备干燥藻体、干燥且破碎的藻体(典型的为干燥粉末)、或破碎藻体并使用其进行提取操作。也可以获得预先对单细胞藻类进行加工处理的产物(例如，干燥藻体、其粉末/粉体、或者片剂(可以包含赋形剂等)等)，并供于提取操作。例如，对于小球藻、微拟球藻、钝顶节旋螺(螺旋藻)、纤细裸藻等，可购买其加工品。
有效成分中的单半乳糖甘油二酯含量只要使提取物显示抗疱疹病毒活性就没有特别限定，例如为70％(w/v)～99％(w/v)，优选为80％(w/v)～99％(w/v)，进一步优选为90％(w/v)～99％(w/v)，更进一步优选为95％(w/v)～99％(w/v)(作为具体例，为96％(w/v)、97％(w/v)、98％(w/v))。原则上，单半乳糖甘油二酯的含量越高，则越可预期强的抗疱疹病毒活性。“单半乳糖甘油二酯”为甘油糖脂之一，已知其为植物叶绿体的类囊体膜的构成成分。单半乳糖甘油二酯具有半乳糖与甘油进行β键合而得到的骨架。
本发明的抗疱疹病毒剂中，优选以单半乳糖甘油二酯为主要成分。如果举出本发明的抗疱疹病毒剂可含有的单半乳糖甘油二酯的示例，则为：(1)构成脂肪酸为C16:3和C18:3的单半乳糖甘油二酯，(2)构成脂肪酸为C16:2和C18:3的单半乳糖甘油二酯，(3)构成脂肪酸为C18:3和C18:3的单半乳糖甘油二酯，(4)构成脂肪酸为C16:2和C18:2的单半乳糖甘油二酯，(5)构成脂肪酸为C18:3和C18:2的单半乳糖甘油二酯，以及(6)构成脂肪酸为C16:1和C18:2的单半乳糖甘油二酯。经鉴定，上述单半乳糖甘油二酯为显示抗疱疹病毒活性的胶球藻属微型藻类提取物包含的成分(具体参见后述的实施例栏所示的“8.MGDG制备物中的成分的鉴定2”)。如果也考虑后述的实施例栏所示的“7.MGDG制备物中的成分的鉴定1”的解析结果，则上述(1)的构成脂肪酸C18:3优选为C18:3(n-3)，上述(3)的构成脂肪酸C18:3中的至少一者优选为C18:3(n-3)，上述(4)的构成脂肪酸C18:2优选为C18:2(n-6)，上述(5)的构成脂肪酸C18:3优选为C18:3(n-3)，C18:2优选为C18:2(n-6)。虽然并不排除单独含有特定的单半乳糖甘油二酯的情况，但是通常本发明的抗疱疹病毒剂含有结构不同的两种以上单半乳糖甘油二酯，这种情况下的组合、含有比率等没有特别限定。本发明的抗疱疹病毒剂优选含有上述(1)～(6)中的两种以上，进一步优选含有上述(1)～(6)中的三种以上，再进一步优选含有上述(1)～(6)中的四种以上，更加优选含有上述(1)～(6)中的五种以上，更进一步优选含有上述(1)～(6)全部。如后述实施例所示，可观察到(5)的单半乳糖甘油二酯(MGDG5)具有特别高的活性。因此，特别优选的方式的抗疱疹病毒剂中，可单独含有(5)的单半乳糖甘油二酯，或者，含有(5)的单半乳糖甘油二酯与(1)、(2)～(4)和(6)中的一种以上的组合。
被鉴定为显示抗疱疹病毒活性的胶球藻属微型藻类提取物的主要含有成分的单半乳糖甘油二酯其本身也可预期抗疱疹病毒活性。因此，本发明的一个方式提供一种抗疱疹病毒剂，其有效成分为选自上述(1)～(6)中的一种以上的单半乳糖甘油二酯。以两种以上单半乳糖甘油二酯为有效成分时的组合、含有比率等没有特别限定。在该方式中，优选含有上述(1)～(6)中的两种以上，进一步优选含有上述(1)～(6)中的三种以上，再进一步优选含有上述(1)～(6)中的四种以上，更加优选含有上述(1)～(6)中的五种以上，更进一步优选含有上述(1)～(6)全部。如上述所示，可观察到(5)的单半乳糖甘油二酯(MGDG5)具有特别高的活性。因此，在特别优选的方式中，(5)的单半乳糖甘油二酯为有效成分中的至少一种。
在此，存在包含各种脂肪酸(将脂肪酸的示例示于如下)作为构成脂肪酸的单半乳糖甘油二酯。如果考虑到本发明的启示，则可合理预期：包含公知的单半乳糖甘油二酯在内的单半乳糖甘油二酯通常可发挥抗疱疹病毒活性。
＜脂肪酸的示例＞
C12:0,C13:0,C14:0,C14:1,C14:2,C15:0,C15:1,C16:0,C16:1,C16:4,C17:0,C17:1,C18:0,C18:1,C18:4,C19:0,C19:1,C20:0,C20:1,C20:2,C20:3,C20:4,C20:5,C22:0,C22:5,C24:0。
(2)藻体或其干燥粉末
在该方式中，不使用来自藻体的提取物，而使用藻体或其干燥粉末作为有效成分。干燥粉末可通过将回收的藻体供于干燥处理和破碎(粉碎)处理来制备。作为干燥处理，例如可采用转鼓干燥、喷雾干燥、冷冻干燥等。破碎处理可利用珠式破碎装置、均质机、弗氏压碎器、混合机/搅拌机、微粉碎机等。干燥处理和破碎处理的顺序没有限定。另外，也可以利用具备干燥功能和破碎功能的装置，同时进行干燥处理和破碎处理。
干燥粉末的粒径没有特别限定。例如，制成平均粒径为0.2μm～2mm、优选0.4μm～400μm的干燥粉末。
3.胸苷的并用
本发明的一个方式中，在上述有效成分(属于胶球藻属的微型藻类的含有单半乳糖甘油二酯的提取物、藻体、藻体的干燥粉末)中并用胸苷。换而言之，该方式的抗疱疹病毒剂以属于胶球藻属的微型藻类的含有单半乳糖甘油二酯的提取物、藻体或藻体的干燥粉末与胸苷为有效成分。通过并用胸苷，形成可发挥协同效应，且抗疱疹病毒活性高(即，增强对疱疹病毒感染症的治疗效果/预防效果)的抗疱疹病毒剂。胸苷(CAS编号50-89-5)为DNA核苷之一，其具有脱氧核糖与嘧啶碱基的胸腺嘧啶连接而成的结构。
并用的胸苷的量没有特别限定，在使用属于胶球藻属的微型藻类的含有单半乳糖甘油二酯的提取物作为上述有效成分的情况下，该有效成分和胸苷的量，以重量比计，例如为1：1～1：500，优选为1:10～1：200。另一方面，在使用属于胶球藻属的微型藻类的藻体或其干燥粉末作为上述有效成分的情况下，该有效成分和胸苷的量，以重量比计(其中，在藻体的情况下，为干燥重量)，例如为100：1～1:10，优选为20：1～1：1。
典型的，作为将上述有效成分和胸苷混合而成的配合剂，可提供上述方式的抗疱疹病毒剂。但是，以包含含有上述有效成分的第1构成要素和含有胸苷的第2构成要素的试剂盒形式，也可提供上述方式的抗疱疹病毒剂。这种情况下，可同时使用第1构成要素和第2构成要素。此处的同时，不要求严格的同时性，只要形成在应用对象中共存有第1构成要素的有效成分(属于胶球藻属的微型藻类的含有单半乳糖甘油二酯的提取物、藻体、藻体的干燥粉末)和第2构成要素的有效成分(胸苷)的状态，可发挥并用胸苷产生的协同效应，则满足“同时”的条件。例如，在使用本发明的抗疱疹病毒剂构成药物的情况下，对于治疗或预防的对象(典型的为人)，例如可以在将两要素混合后给药，或者，在给药一种后迅速地给药另一种。另外，只要得到并用胸苷产生的效果，则也可以在给药一种后，以特定的时间差给药另一种。在这种情况下，优选将时间差设为尽量短，例如，在给药一种后的1小时以内(优选为30分钟以内)给药另一种。
4.抗疱疹病毒剂的用途·使用方法
本发明的抗疱疹病毒剂典型的以含有其的组合物形式，能够用于疱疹病毒的感染对策。此处的组合物的示例为药物、食品、饲料。
如后述实施例证明所示，优选在针对HSV-1所引起的感染症(口唇疱疹、疱疹性口内炎、角膜疱疹、单纯疱疹性脑炎等)或HSV-2引起的感染症(阴部(生殖器)疱疹、新生儿疱疹、脊髄炎等)的药物等中，实现本发明的抗疱疹病毒剂的利用。
本发明的药物可对疱疹病毒感染症发挥治疗效果或预防效果(将这两种效果统称为“药物效果”)。此处的药物效果包括：(1)阻止、抑制或延迟疱疹病毒感染症的发病；(2)缓解(减轻)疱疹病毒感染症的特征性症状或相关症状；(3)阻止、抑制或延迟疱疹病毒感染症的特征性症状或相关症状的恶化等。应予说明，治疗效果和预防效果是部分重叠的概念，因此有时难以明确区分掌握，另外这样做的实际意义少。
药物的制剂化可按照常规方法进行。在制剂化的情况下，可含有制剂上可接受的其它成分(例如，载体、赋形剂、崩解剂、缓冲剂、乳化剂、悬浮剂、止痛剂、稳定剂、保存剂、防腐剂、生理盐水等)。作为赋形剂，可使用乳糖、淀粉、山梨糖醇、D-甘露醇、白糖等。作为崩解剂，可使用淀粉、羧甲基纤维素、碳酸钙等。作为缓冲剂，可使用磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐等。作为乳化剂，可使用阿拉伯胶、海藻酸钠、黄蓍胶等。作为悬浮剂，可使用单硬脂酸甘油酯、单硬脂酸铝、甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟甲基纤维素、月桂基硫酸钠等。作为止痛剂，可使用苄醇、氯丁醇、山梨糖醇等。作为稳定剂，可使用丙二醇、抗坏血酸等。作为保存剂，可使用苯酚、苯扎氯铵、苄醇、氯丁醇、对羟基苯甲酸甲酯等。作为防腐剂，可使用苯扎氯铵、对羟基苯甲酸、氯丁醇等。
制剂化时的剂型也没有特别限定。剂型的示例为片剂、散剂、细粒剂、颗粒剂、胶囊剂、糖浆剂、注射剂、外用剂(软膏剂、膏剂、洗剂、液剂、凝胶剂、巴布剂、硬膏剂、胶带剂、气雾剂等)和栓剂。药物可根据其剂型而通过口服给药或非口服给药(对患部的局部注入、静脉内、动脉内、皮下、皮内、肌肉内、或腹腔内注射、经皮、经鼻、经粘膜等)应用于对象。另外，可根据对象而应用全身给药和局部给药。这些给药途径彼此不相互排斥，可并用任意选择的两种以上。
本发明的药物含有得到预期效果而必需的量(即治疗或预防有效量)的有效成分。本发明的药物中的有效成分量通常因剂型不同而不同，可将有效成分量例如在约0.1重量％～约99重量％的范围内设定，使其可达到期望的给药量。
可对本发明的药物的给药量进行设定，使其得到预期效果。在设定治疗或预防有效给药量时，通常考虑症状、患者的年龄、性别和体重等。本领域技术人员考虑上述事项就能够设定合适的给药量。如果示出给予量的示例，以成人(体重约60kg)为对象，可按照每天的有效成分量达到1mg～20mg，优选2mg～10mg的方式来设定给药量。作为给药日程，例如可采用1天1次～数次、2天1次、或者3天1次等。在制作给药日程时，可考虑患者的状态、有效成分的效果持续时间等。
由以上记载可以明确，本申请还提供治疗或预防疱疹病毒症的方法，其特征在于，对罹患疱疹病毒感染症的对象或可能罹患疱疹病毒感染症的对象，给药治疗或预防有效量的包含本发明的抗疱疹病毒剂的药物。治疗或预防的对象典型地为人，也可以应用于人以外的哺乳动物(例如猴、牛、猪、马、山羊、绵羊、狗、猫、兔等)、鸟类(鸡、鹌鹑、火鸡、鹅、鸭、鸵鸟、野鸭、鹦哥、文鸟等)等。
如上述所示，作为本发明的抗疱疹病毒剂的利用方式之一，可举出包含本发明的抗疱疹病毒剂的食品或饲料。作为本发明的食品的示例，可举出通常的食品(谷物、蔬菜、肉食类、各种加工食品、点心·甜点类、牛奶、清凉饮料、果汁饮料、咖啡饮料、蔬菜汁饮料、酒精饮料等)、营养辅助食品(补充剂、能量饮料等)、食品添加物、宠物用食品、宠物用营养辅助食品。在为营养辅助食品或食品添加物的情况下，能够以粉末、颗粒末、片剂、糊剂、液体等形态提供。通过以食品组合物的形态提供，容易日常摄取或持续摄取本发明的有效成分。
本发明的饲料的示例为饲料(例如家畜、家禽等的饲料)、宠物食品。
本发明的食品或饲料优选含有可预期治疗或预防效果的量的有效成分。添加量可考虑使用其的对象的状态、年龄、性别、体重等来确定。
实施例
1.胶球藻属微型藻类的干燥粉末(藻体)和提取物的制备以及提取物的纯化
1-1.胶球藻KJ株
根据现有的方法培养胶球藻KJ株。具体而言，在AF6培养基中种植胶球藻KJ株后，通入2％CO2(v/v)，一边照射光(300μmol/m2/s)一边在室温(25℃)下培养48小时。通过离心分离从培养液回收藻体。利用转鼓干燥将回收的藻体干燥，并利用微粉碎机粉碎，制成粉末状(藻体的干燥粉末)。接着，在100g的干燥粉末中添加1l乙醇而使其分散，在暗处静置3天。静置后进行过滤，分离为1次滤液和残渣。在该残渣中，与上述相同添加1l乙醇而使其分散，静置3天后再次过滤，分离为2次滤液和残渣。将该过滤操作再重复进行一次，得到3次滤液和残渣。
将1次滤液、2次滤液和3次滤液混合，利用蒸发器馏去乙醇，减压干燥而制成乙醇提取物DE。接着，将DE供于DIAION HP-20(三菱化学(株)制造，3.5×57cm)柱色谱。依次利用H2O、50％乙醇(EtOH)、EtOH和丙酮进行洗脱，将各洗脱级分在室温下减压干燥(DE1,400.9mg；DE2,310.3mg；DE3,2.25g；DE4,4.86g)。将丙酮级分(DE4)供于硅胶柱(3×42cm)色谱。依次利用己烷、己烷-乙酸乙酯(AcOEt)(1:1)、AcOHt、AcOHt-丙酮(1:1)、丙酮和甲醇(MeOH)进行洗脱，得到各洗脱级分：即DE4A(55.4mg)、DE4B(2.0g)、DE4C(89.0mg)、DE4D(1.01g)、DE4E(95.5mg)及DE4F(177.1mg)。接着，将DE4D供于以AcOEt-丙酮为溶剂系统的硅胶柱(1.5×35cm)色谱，得到3个级分：DE4D1(49.9mg)、DE4D2(705.1mg)和DE4D3(16.2mg)。接着，将DE4D2供于硅胶柱(1.5×35cm)色谱，利用CHCl3-MeOH-H20(10:1:0.1)进行洗脱，得到DE4D2A(15.6mg)和DE4D2B(686.5mg)。其中，将DE4D2B供于以氯仿(CHCl3)-MeOH(3:1)为溶剂系统的LH-20柱(Sigma Aldrich公司制造)色谱，得到DE4D2Bl(11.6mg)和DE4D2B2(652.3mg)。将DE4D2B2供于硅胶柱(2×50cm)色谱，利用CHCl3、CHCl3-MeOH(20:1)和CHCl3-MeOH-H20(10：3：1)进行洗脱，得到4个级分：DE4D2B2A(4.8mg)、DE4D2B2B(3.5mg)、DE4D2B2C(25.1mg)和DE4D2B2D(620.5mg)。最后，通过利用CHCl3-MeOH-乙酸(AcOH)-H2O(80:9:12:2)进行展开的制备液相色谱(PLC)将DE4D2B2D纯化，制成MGDG制备物(578.9mg)。
1-2.胶球藻MBIC11204株
基于1-1.的方法·操作，从胶球藻MBIC11204株得到藻体的干燥粉末和MGDG制备物。
2.HSV-2感染(生殖器疱疹)和HSV-1感染(皮肤疱疹)实验(胶球藻MBIC11204株的MGDG制备物和藻体的效果)
对于胶球藻MBIC11204株的MGDG制备物和藻体(干燥粉末)，评价对HSV-2感染症和HSV-1感染症的有效性。还研究了与胸苷并用时的有效性的变化。
＜方法＞
病毒株使用HSV-2(UW268株)和HSV-1(HAY株)。
(A)HSV-2感染引起的生殖器疱疹的治疗实验
(1)在病毒接种6天前和1天前，对BALB/c小鼠(6周龄，雌性)皮下注射醋酸甲羟孕酮(Medroxyprogesterone 17-acetate)(3mg/小鼠)。
(2)设置以下试验区，在病毒接种3天前至7天后期间，1天2次(9时和18时)口服给药样品。
试验区#1：对照(蒸馏水)
试验区#2：ACV(阿昔洛韦)(1mg/天)
试验区#3：MGDG制备物(0.1mg/天)
试验区#4：MGDG制备物(1mg/天)
试验区#5：胸苷(1mg/天)
试验区#6：胸苷(5mg/天)
试验区#7：胸苷(20mg/天)
试验区#8：MGDG制备物(0.1mg/天)+胸苷(1mg/天)
试验区#9：MGDG制备物(0.1mg/天)+胸苷(5mg/天)
试验区#10：MGDG制备物(0.1mg/天)+胸苷(20mg/天)
试验区#11：MGDG制备物(1mg/天)+胸苷(1mg/天)
试验区#12：MGDG制备物(1mg/天)+胸苷(5mg/天)
试验区#13：MGDG制备物(1mg/天)+胸苷(20mg/天)
试验区#14：藻体(20mg/天)
试验区#15：藻体(20mg/天)+胸苷(1mg/天)
试验区#16：藻体(20mg/天)+胸苷(5mg/天)
试验区#17：藻体(20mg/天)+胸苷(20mg/天)。
(3)局部接种HSV-2(1×103PFU/20μl/只小鼠)。
(4)3天后，利用冷PBS(100μl)进行局部洗涤，通过噬菌斑测定来测定其病毒量。
(5)在14天内记录疱疹症状的病变评分(lesion score)和死亡病例。
(B)HSV-1感染引起的皮肤疱疹的治疗实验
(1)在麻醉下将BALB/c小鼠(6周龄，雌性)的左侧腹部剃毛(理发推子+脱毛霜)。
(2)设置以下试验区，涂布组(#19～#22)，在病毒接种1天前至14天后期间，1天2次(9时和18时)给药样品，口服给药组(#23～#27)，在病毒接种3天前至7天后1天2次(9时和18时)期间，给药样品。(涂布组中，利用棉棒涂布于剃毛部分，此时1次的涂布量以乳液计为约50～60mg/只小鼠)。
试验区#19：对照(PBS)(涂布)
试验区#20：5％ACV(涂布)
试验区#21：5％MGDG制备物(涂布)
试验区#22：5％胸苷(涂布)
试验区#23：5％MGDG制备物+5％胸苷(涂布)
试验区#24：对照(蒸馏水)
试验区#25：ACV(1mg/天)。
试验区#26：MGDG制备物(1mg/天)
试验区#27：胸苷(20mg/天)
试验区#28：胸苷(20mg/天)+MGDG制备物(1mg/天)
(3)利用微型注射器对剃毛部分注射HSV-1(2×105PFU/50μl/小鼠)。
(4)在14天内记录疱疹症状(以带状出现)的病变评分(lesion score)和死亡病例。
＜结果·讨论＞
(A)HSV-2生殖器疱疹模型
(1)发病经过及生存率(图1～5)
单独给药的MGDG制备物在0.1mg和1mg/天给药组(#3、#4)中显著抑制发病(图1)，也没有死亡病例(图5)。胸苷用量依赖地抑制发病和死亡率，特别是在20mg/天给药组(#7)中观察到显著的治疗效果(图1、5)。
如果并用MGDG制备物(0.1mg,1mg/天)和胸苷，则与各自单独给药时相比，发病被完全抑制(图2、3)，也未观察到死亡病例(图5)。
在单独给药干燥粉末20mg/天时(#14)，未观察到显著的发病抑制(图4)，5只中出现2只死亡病例(图5)。但是，与胸苷并用时(#15-17)，发病和死亡显著被抑制(图4、5)。
(2)病毒增殖抑制效果(图6)
无论是单独给药还是组合给药，全部观察到高的效果，特别是并用(#8～#13、#15～#17)的效果显著。
病毒接种量越低，单独给药的MGDG制备物越显示强的病毒增殖抑制效果，即使是0.1mg/天也可得到充分的效果。与此相对，在胸苷(1mg,5mg)的情况下，未观察到病毒接种量的差异导致的效果差异，20mg/天给药组中观察到显著的抑制效果。MGDG制备物与胸苷的并用时，在低接种量时出现显著的并用效果，MGDG制备物0.1mg+胸苷1mg/天的少量给药时也观察到显著效果。
单独给药干燥粉末时，虽然效果低于MGDG制备物，但也抑制病毒增殖。另外，如果减少病毒接种量，则在与胸苷并用时可观察到显著的增殖抑制效果。
(B)HSV-1皮肤疱疹模型
在局部给药(涂布)(图7、9)的情况下，与单独给药MGDG制备物(#21)、胸苷(#22)时相比，并用两者时(#23)在发病经过、生存率方面优异。
在口服给药(图8、9)的情况下，与对照(#24)相比，MGDG制备物(#26)显著抑制发病，而胸苷(#27)未观察到显著的发病抑制效果。并用两者时(#28)，可观察到匹敌ACV(#25)的发病抑制效果，也没有死亡病例。
3.MGDG制备物的抗HSV-2活性以及与胸苷的相互作用(体外实验)
对于胶球藻MBIC11204株的MGDG制备物，研究与胸苷并用时的抗HSV-2活性增强效果。
＜方法＞
(1)在48孔板中培养Vero细胞。
(2)次日，以0.1PFU/细胞感染HSV-2(UW268株)(室温，1小时)。
(3)利用PBS清洗2次后，加入分别添加有MGDG制备物(0～20μg/ml)和胸苷(0～2μg/ml)的培养基，并进行培养。
(4)24小时后，回收平板，进行3次冻融处理(-80℃下冷冻后，恢复至室温)。
(5)使用在35mm培养皿中培养为单层状的Vero细胞，进行噬菌斑测定。
(6)从各自的噬菌斑数计算IC50值，再基于以下计算式制作等效线图。
[图10所示的等效线图的计算式]
x轴：胸苷的浓度/MGDG制备物不存在时的胸苷的IC50(1.2μg/ml)。
y轴：存在一定浓度的胸苷时的MGDG制备物的IC50/胸苷不存在时的MGDG制备物的IC50(12μg/ml)。
[图11所示的等效线图的计算式]
x轴：MGDG制备物的浓度/MGDG制备物不存在时的胸苷的IC50(12μg/ml)。
y轴：存在一定浓度的MGDG制备物时的胸苷的IC50/MGDG制备物不存在时的MGDG制备物的IC50(1.2μg/ml)。
＜结果·讨论＞
各IC50值是由2次测定的平均值算出的。MGDG制备物的IC50值为12μg/ml，胸苷的IC50为1.2μg/ml(表1)。
[表1]
Figure BDA0002919986580000211
MGDG制备物的 12 11 5.8 1.7 0.20 0.048 0.011 -
IC50(μg/ml)
研究并用两者产生的活性变化，其结果，胸苷的HSV-2增殖抑制作用被MGDG制备物增强(图10)，另外，MGDG制备物的抗HSV-2作用被胸苷增强(图11)，可确认到两物质间的协同效应。
4.HSV-2感染(生殖器疱疹)实验(胶球藻KJ株的效果)
对于胶球藻KJ株，与胶球藻MBIC11204株同样，验证对HSV-2感染症有效。另外，研究与胸苷(0.5mg/天)并用时的有效性的变化。
＜方法＞
(1)在病毒接种6天前和1天前，对于BALB/c小鼠(6周龄，雌性)，皮下注射醋酸甲羟孕酮(Medroxyprogesterone 17-acetate)(3mg/小鼠)。
(2)设置以下试验区，在病毒接种3天前至7天后期间，1天2次(9时和18时)口服给药样品。
试验区#1：对照(蒸馏水)
试验区#2：ACV(1mg/天)
试验区#3：藻体(干燥粉末)(5mg/天)
试验区#4：藻体(干燥粉末)(5mg/天)+胸苷(0.5mg/天)
试验区#5：藻体(干燥粉末)(10mg/天)。
(3)局部接种HSV-2(UW268株)(1×103PFU/20μl/小鼠)。
(4)3天后，利用冷PBS(100μl)进行局部清洗，通过噬菌斑测定来测定其病毒量。
(5)在14天内记录疱疹症状的病变评分(lesion score)和死亡病例。
＜结果·讨论＞
虽然KJ株藻体的单独给药为低用量(5mg或10mg/天)，但也抑制了发病(图12)和死亡，病毒量(图13)也显著降低。两用量间未观察到显著差异。另一方面，如果在胸苷中并用KJ株藻体，则与单独给药时相比疱疹治疗效果提高。
5.小球藻、微拟球藻、钝顶节旋藻(螺旋藻)和纤细裸藻的MGDG的制备
从小球藻、微拟球藻、钝顶节旋藻(螺旋藻)和纤细裸藻提取MGDG。各藻类的培养使用适应各自的培养基(例如，如果是小球藻，则为图14所示的C培养基；如果为微拟球藻，则为图14所示的ESM培养基；如果钝顶节旋藻(螺旋藻)，则为图15所示的MA培养基；如果是纤细裸藻，则为图15所示的HUT培养基)，按照常规方法进行即可(可以采用与上述胶球藻KJ株相同的培养条件)。利用转鼓干燥对通过离心分离从培养液回收的藻体进行干燥，并利用微粉碎机进行粉碎，由此可得到各藻体的干燥粉末。可通过与胶球藻KJ株的情形相同的提取操作从干燥粉末得到各藻类的MGDG制备物。但是，在此次研究中，购买各藻类的加工品(小球藻为“小球藻干燥粉末”(株式会社葵制茶)、微拟球藻为“微拟球藻冷冻品”(Marinetech株式会社)、钝顶节旋藻(螺旋藻)为“Spirulina POWDER”(DIC LIFETEC株式会社)、纤细裸藻为“Inochi Euglena Extreme(いのちのユーグレナ極み)”(Sixth Sense Lab株式会社)和BIO ZYME(裸藻)，供于MGDG的提取(提取操作与胶球藻KJ株的情形相同)。将得到的各MGDG制备物用于以下研究。也从市售的菠菜(Spinacia oleracea)，在冷冻干燥后利用微粉碎机粉碎并提取MGDG，从而得到MGDG制备物。
6.对口唇疱疹的效果
验证了MGDG制备物对口唇疱疹的效果。
＜方法＞
(1)准备硬膏剂(moina，DENSO制造)30g。
(2)在橄榄油((株)J-OIL MILLS公司制造)0.610g中添加胶球藻KJ株MGDG制备物0.165g，混炼而使其溶解(MGDG溶解物)。
(3)对(1)中准备的硬膏剂，一边混炼而使其达到均匀，一边少量逐次添加MGDG溶解物，将全部加入而得到的物质作为涂布用样品。
(4)对口唇疱疹发病的患者(将以下2位患者作为受试者)的患部，每天(1～3次)涂抹合适的量，经时观察患部的情况。
患者1：45岁女性；有口唇疱疹的发病经历(多次)。通常使用以阿糖腺苷为有效成分的市售药Arasena S(佐藤制药株式会社)治疗，治愈为止需要2～3周。
患者2：25岁男性；有口唇疱疹的发病经历(多次)，通常不用药(等待自然痊愈)，2～3周后会恢复到不显眼的程度。
＜结果·讨论＞
将观察结果示于图16(患者1)和图17(患者2)。在患者1中涂布第3天确认到明显的改善，在涂布第5天达到接近完全治愈的状态(图16)。另外，在患者2的情况下，从涂布第2天开始确认到治疗效果，在涂布第8天几乎完全治愈。如此，MGDG制备物对口唇疱疹发挥优异的治疗效果。值得注意的是，显示出优于市售药的惊人治疗效果(患者1)。
7.MGDG制备物中的成分的鉴定1
通过HPLC分析，推定胶球藻KJ株MGDG制备物中包含5种MGDG(称为MGDG1、MGDG2、MGDG3、MGDG4、MGDG5)。为了明确这些MGDG的结构，利用气相色谱(GC/FID)对脂肪酸组成进行了分析。分析使用BPX90柱(长度100m×内径0.25mm、膜厚0.25μm)，以氢气为载气。鉴定用标准试样使用FAME Standard(F.A.M.E.混合,C4-C24,SUPELCO公司制造)和MGDG(MGDGplant,Avanti公司制造)。
将各样品(MGDG1、MGDG2、MGDG3、MGDG4、MGDG5)的色谱图示于图18～22。在此，关于C6:0，通常常见的脂质的脂肪酸组成也同时包含相近的碳原子数(偶数)的脂肪酸，但是在此次分析中几乎没有检测到它们，因此认为该峰不是脂肪酸的可能性高。另外，未知1和未知2在这些峰的保留时间内检测到的脂肪酸在常见的脂质中难以预期，因此认为脂肪酸以外的成分的可能性高。另一方面，由保留时间可推定未知3和未知4分别为C16:2和C18:2(n-6以外)。
将分析结果示于以下表2、表3。表2为以面积百分率法表示各样品的脂肪酸组成比的表。表3为汇总了排除C6:0和不明成分1、2(未知1,2)而算出的结果的表。应予说明，关于MGDG3，二个成分的面积比极端偏向于3：1。这可以解释为：脂肪酸残基的组合为(C18:2(n-6以外)和C18:2(n-6以外))与(C18:2(n-6以外)和C18:3n3)这2种MGDG以约1:1的比例混合而成的。
[表2]
Figure BDA0002919986580000251
“-”表示未检测到。
[表3]
Figure BDA0002919986580000252
“-”表示未检测到。
如上述所示，可知MGDG制备物中含有(1)构成脂肪酸为C16:3和C18:3(n-3)的单半乳糖甘油二酯(MGDG1)，(2)构成脂肪酸为C16:2和C18:2的单半乳糖甘油二酯(MGDG2)，(3)构成脂肪酸为C18:2和C18:3(n-3)的单半乳糖甘油二酯(MGDG3)，(4)构成脂肪酸为C18:2和C18:2的单半乳糖甘油二酯(MGDG3)，(5)构成脂肪酸为C16:2和C18:2(n-6)的单半乳糖甘油二酯(MGDG4)，以及(6)构成脂肪酸为C18:2(n-6)和C18:3(n-3)的单半乳糖甘油二酯(MGDG5)。
8.MGDG制备物中的成分的鉴定2
使用三重四级杆LC/MS系统，进一步详细地研究胶球藻KJ株MGDG制备物所包含的MGDG的结构。
＜解析条件＞
装置名:三重四级杆LC/MS系统
LC柱:YMC Triant C-18(长度100mm×内径2.1mm、粒径1.9μm)
流动相：甲醇、乙腈、水、乙酸铵
离子源：ESI
测定模式：MS2 scan、Product ion scan。
＜结果＞
利用制备液相色谱(PLC)检测到的5种MGDG(参照7.MGDG制备物中的成分的鉴定1部分))以外，通过三重四级杆LC/MS解析，新检测到第6个MGDG。对于这些MGDG(6个峰)，由MSscan和Product ion scan的结果，可鉴定构成各MGDG(峰1：MGDG1、峰2：MGDG2、峰3：MGDG3、峰4：MGDG4、峰5：MGDG5、峰6：MGDG6)的2种脂肪酸侧链。将各MGDG的脂肪酸侧链示于以下表。
[表4]
各MGDG的脂肪酸侧链
Figure BDA0002919986580000261
9.各MGDG级分的杀病毒活性
比较构成MGDG制备物的各MGDG(MGDG1～MGDG5)的杀病毒活性。
＜方法＞
(1)将源自胶球藻KJ株的MGDG制备物供于HPLC，通过对各峰进行分离，从而得到5种MGDG纯化物(MGDG1、MGDG2、MGDG3、MGDG4、MGDG5)。另外，准备了分离前的MGDG制备物(含有MGDG1～MGDG5)作为混合品。
(2)在各病毒液(2×105PFU/m1)中混合各样品，使得终浓度达到50μg/ml，在37℃下静置60分钟。将使用的病毒和宿主细胞示于表5。
[表5]
评价病毒和宿主细胞
评价病毒 宿主细胞
甲型流感病毒(IFV) MDCK细胞
单纯疱疹病毒2型(HSV-2) Vero细胞
猫杯状病毒(FCV) CRFK细胞
脊髓灰质炎病毒1型(Pol-1) Vero细胞
(3)利用不含胎牛血清的MEM培养基将(2)的混合液稀释后，叠加噬菌斑测定用培养基，在37℃下培养2～3天。
(4)确认出现噬菌斑后，利用中性红液将细胞固定·染色，在显微镜下测定噬菌斑数。以不添加样品时的病毒的出现数为基准(100％)，算出各样品的病毒残存率。由病毒残存率评价各样品的杀病毒性能。
<结果·讨论>
虽然靶病毒不同而使活性存在差异，但是MGDG制备物(混合品)和MGDG1～MGDG5均确认到杀病毒(灭活)活性(图23)。对流感病毒和单纯疱疹病毒2型，MGDG5与MGDG制备物(混合品)相比，显示显著的灭活效果。在不具有包膜的猫杯状病毒及脊髓灰质炎病毒中，并未显示出显著高于其它样品的活性。以上结果证明MGDG制备物及构成其的各MGDG具有杀病毒活性，并且表明MGDG5对流感病毒、单纯疱疹病毒2型等具有包膜的病毒发挥特别高的杀病毒活性。
10.各种MGDG制备物的成分比较
利用反相HPLC分析胶球藻KJ株MGDG制备物、小球藻MGDG制备物、微拟球藻MGDG制备物、钝顶节旋藻(螺旋藻)MGDG制备物、纤细裸藻MGDG制备物和菠菜MGDG制备物，比较含有成分(MGDG)。
<HPLC分析条件>
装置名：Alliance2695
柱：YMC-Actus Triart C18
流动相：甲醇、水、乙腈混合溶液
检测波长：205nm。
将HPLC的测定结果(色谱图)示于图24和图25。色谱图的纵轴进行了标准化，使得各样品的峰最大值达到1。
·KJ株的MGDG制备物中，检测到至少5个峰。另一方面，KJ株以外的各生物的MGDG制备物中，也检测到至少一个与KJ株的MGDG制备物的保留时间一致或非常接近的峰。对于保留时间一致的峰，推测具有与源自KJ株的MGDG相同的化学结构。
·确认到源自KJ株MGDG制备物的5个峰对HSV-2、IFV和FCV的杀病毒活性(9.的实验、图23)。如上述所示，在KJ株以外的各生物的MGDG制备物中，确认到至少1个对应于源自KJ株MGDG制备物的5个峰中的峰，因此推测同样具有杀病毒活性。即，可预期这些MGDG制备物与KJ株MGDG制备物相同的效果。应予说明，可知KJ株MGDG制备物的第5个峰对HSV-2、IFV具有高杀病毒活性(图23)。
产业上的可利用性
本发明的抗疱疹病毒剂以源自单细胞藻类(优选为微型藻类)的物质为有效成分，可基于不同于现有的抗疱疹病毒剂的作用机制发挥抗疱疹病毒活性。因此，也适合与现有的抗疱疹病毒剂并用而提供新治疗策略。另一方面，本发明的抗疱疹病毒剂中，有效成分为单细胞藻类(优选为微型藻类)的藻体，因此还可预期高安全性。
本发明完全不限定与上述发明的实施方式和实施例的说明。不脱离权利要求书的记载，在本领域技术人员容易想到的范围内的各种变形方式也包括于本发明。关于本说明书中明示的论文、公开专利公报和专利公报等的内容，通过援引而引用其全部内容。
PCT/RO/134表
Figure 000001
Figure 000002

Claims (18)

1.一种抗疱疹病毒剂，其特征在于，包含源自单细胞藻类的物质作为有效成分。
2.根据权利要求1所述的抗疱疹病毒剂，其中，
所述单细胞藻类为属于胶球藻属、小球藻属、微拟球藻属、节旋藻属或裸藻属的微型藻类。
3.根据权利要求1所述的抗疱疹病毒剂，其中，
所述单细胞藻类为属于胶球藻属的微型藻类。
4.根据权利要求3所述的抗疱疹病毒剂，其中，
所述微型藻类为胶球藻KJ株或其突变株、或者为胶球藻MBIC11204株或其突变株。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的抗疱疹病毒剂，其中，
所述有效成分为所述单细胞藻类的含有单半乳糖甘油二酯的提取物。
6.根据权利要求5所述的抗疱疹病毒剂，其中，
所述抗疱疹病毒剂的主要成分为单半乳糖甘油二酯。
7.根据权利要求6所述的抗疱疹病毒剂，其中，
所述单半乳糖甘油二酯为选自以下(1)～(6)中的一种以上的单半乳糖甘油二酯：
(1)构成脂肪酸为C16:3和C18:3的单半乳糖甘油二酯；
(2)构成脂肪酸为C16:2和C18:3的单半乳糖甘油二酯；
(3)构成脂肪酸为C18:3和C18:3的单半乳糖甘油二酯；
(4)构成脂肪酸为C16:2和C18:2的单半乳糖甘油二酯；
(5)构成脂肪酸为C18:3和C18:2的单半乳糖甘油二酯；以及
(6)构成脂肪酸为C16:1和C18:2的单半乳糖甘油二酯。
8.根据权利要求5～7中任一项所述的抗疱疹病毒剂，其中，
所述有效成分为对所述单细胞藻类的乙醇提取物进行色谱纯化，提高单半乳糖甘油二酯的含量而得到的物质。
9.根据权利要求5～8中任一项所述的抗疱疹病毒剂，其中，
所述有效成分中的单半乳糖甘油二酯含量为70％w/v～99％w/v。
10.根据权利要求1～4中任一项所述的抗疱疹病毒剂，其中，
所述有效成分为藻体。
11.根据权利要求1～4中任一项所述的抗疱疹病毒剂，其中，
所述有效成分为藻体的干燥粉末。
12.一种抗疱疹病毒剂，其特征在于，有效成分为选自以下(1)～(6)中的一种以上的单半乳糖甘油二酯：
(1)构成脂肪酸为C16:3和C18:3的单半乳糖甘油二酯；
(2)构成脂肪酸为C16:2和C18:3的单半乳糖甘油二酯；
(3)构成脂肪酸为C18:3和C18:3的单半乳糖甘油二酯；
(4)构成脂肪酸为C16:2和C18:2的单半乳糖甘油二酯；
(5)构成脂肪酸为C18:3和C18:2的单半乳糖甘油二酯；以及
(6)构成脂肪酸为C16:1和C18:2的单半乳糖甘油二酯。
13.根据权利要求1～12中任一项所述的抗疱疹病毒剂，其特征在于，所述的抗疱疹病毒剂并用胸苷。
14.根据权利要求13所述的抗疱疹病毒剂，其中，
所述抗疱疹病毒剂为含有所述有效成分和胸苷的配合剂。
15.根据权利要求1～14中任一项所述的抗疱疹病毒剂，其中，
靶疱疹病毒为单纯疱疹病毒1型或单纯疱疹病毒2型。
16.一种组合物，其特征在于，包含权利要求1～15中任一项所述的抗疱疹病毒剂。
17.根据权利要求16所述的组合物，其中，
所述组合物为针对疱疹病毒感染症的药物。
18.根据权利要求16所述的组合物，其中，
所述组合物为食品或饲料。
CN201980050286.5A 2018-07-31 2019-07-25 抗疱疹病毒剂 Pending CN112584850A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2018-143051 2018-07-31
JP2018143051 2018-07-31
PCT/JP2019/029309 WO2020026953A1 (ja) 2018-07-31 2019-07-25 抗ヘルペスウイルス剤

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112584850A true CN112584850A (zh) 2021-03-30

Family

ID=69231755

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201980050286.5A Pending CN112584850A (zh) 2018-07-31 2019-07-25 抗疱疹病毒剂

Country Status (3)

Country Link
JP (1) JPWO2020026953A1 (zh)
CN (1) CN112584850A (zh)
WO (1) WO2020026953A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP7233043B2 (ja) * 2018-07-31 2023-03-06 株式会社デンソー 抗インフルエンザ剤

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005247757A (ja) * 2004-03-04 2005-09-15 Nikken Sohonsha Corp 抗ウイルス剤
JP2014027929A (ja) * 2012-07-06 2014-02-13 Euglena Co Ltd 生物用飼料添加剤

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0449242A (ja) * 1990-06-15 1992-02-18 Chiba Seifun Kk 抗ヘルペス剤、動物用抗ヘルペス剤
JP4839436B2 (ja) * 2005-11-02 2011-12-21 国立大学法人徳島大学 消化管粘膜保護剤、カベオリン遺伝子発現促進剤及び抗ストレス剤
EP1997381A1 (en) * 2007-06-01 2008-12-03 Commissariat à l'Energie Atomique Use of a compound having a monogalactosyldiacylglycerol synthase inhibitory activity as herbicide or algaecide, herbicide and algaecide compositions
JP2016144399A (ja) * 2013-05-31 2016-08-12 味の素株式会社 糖グリセロールの製造法
JP6088375B2 (ja) * 2013-07-10 2017-03-01 株式会社デンソー 新規微細藻類

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005247757A (ja) * 2004-03-04 2005-09-15 Nikken Sohonsha Corp 抗ウイルス剤
JP2014027929A (ja) * 2012-07-06 2014-02-13 Euglena Co Ltd 生物用飼料添加剤

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ARMIDA HERNANDEZ-CORONA,ET AL: ""Antiviral activity of Spirulina maxima against herpes simplex virus type 2"", 《ANTIVIRAL RESEARCH》 *
DE JULIAN-ORTIZ,J.V.ET AL.: ""Virtual Combinatorial Syntheses and Computational Screening of New Potential Anti-Herpes Compounds"", 《JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》 *
JANWITAYANUCHIT,W.ET AL: ""Synthesis and anti-herpes simplex viral activity of", 《PHYTOCHEMISTRY》 *

Also Published As

Publication number Publication date
WO2020026953A1 (ja) 2020-02-06
JPWO2020026953A1 (ja) 2021-09-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10960036B2 (en) Pharmaceutical composition for preventing and treating alpha herpes virus infection, containing, as active ingredient, Elaeocarpus sylvestris extract or fraction thereof
RU2423139C2 (ru) КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ Actinidia, И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
EP3960154A1 (en) Functional composition containing immortalized stem cell-derived exosome-rich culture medium and rosebud extract as active ingredients
KR101694958B1 (ko) 천심련추출물 또는 안드로그라폴라이드 또는 이의 염을 포함하는 피부상태 개선용 조성물
JP2022524772A (ja) ヘルペスウイルス科によって引き起こされるウイルス感染症の予防および／または治療に使用する、ベリー抽出物を含む製剤
WO2016190661A1 (ko) 이소세코타나파솔라이드를 유효성분으로 함유하는 가려움증 억제 및 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물
CN112584850A (zh) 抗疱疹病毒剂
CN113874044B (zh) 皮肤组合物
KR101841118B1 (ko) 세네데스무스 속 미세조류의 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물
JP2020019729A (ja) ヘルペスウイルス回帰発症抑制剤
AU2015352042B2 (en) Titled extracts of Cynara scolymus for use in the treatment of mesothelioma
KR102507470B1 (ko) 스트렙토코커스 피오게네스의 사균체 또는 SpeA 단백질을 포함하는 알레르기 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
CN111249262A (zh) 烷基间苯二酚类化合物在制备预防或治疗阿兹海默症的药物的应用
US7538137B2 (en) 1-O-β-D-glucopyranosylgeraniol-10,5-olide and use thereof
CN112512542B (zh) 抗诺如病毒剂
US20210346455A1 (en) Pharmaceutical composition comprising purple corn extract for prevention or treatment of skin disease
US20030143282A1 (en) Adenosine A3 receptor agonist
JP7378091B2 (ja) 殺ウイルス剤
Harmenberg et al. ME-609: a treatment for recurrent herpes simplex virus infections
RU2584245C2 (ru) Противовирусная композиция
EP3735257A2 (en) Herbal extracts for treatment of herpesvirus infections
JP2020532588A (ja) シアノバクテリア抽出物、その調製法と利用法
KR20130115727A (ko) 퓨린 유도체 또는 그의 염을 포함하는 아토피성 피부염의 예방 또는 치료용 조성물
WO2018079514A1 (ja) マイタケ抽出物のヘルペス感染症の治療及び／又は予防のための組成物
TW202021604A (zh) 小火菇屬萃取物與其化合物用於提升ａｔｇｌ基因、ｌｉｐｅ基因、ｕｃｐ１基因、及／或ｕｃｐ２基因表現量、及／或抑制脂肪累積的用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20210330

RJ01 Rejection of invention patent application after publication