CN112557563A

CN112557563A - 一种江西道地药材枳壳的鉴别方法

Info

Publication number: CN112557563A
Application number: CN201910852758.0A
Authority: CN
Inventors: 梁鑫淼; 金红利; 戚华文; 徐鑫; 高德嵩; 刘艳芳; 王超然
Original assignee: Taizhou Medical City Guoke Huawu Biomedical Technology Co ltd
Current assignee: Taizhou Medical City Guoke Huawu Biomedical Technology Co ltd
Priority date: 2019-09-10
Filing date: 2019-09-10
Publication date: 2021-03-26

Abstract

本发明公开了一种江西道地药材枳壳的鉴别方法，包括：a)对照品溶液制备；b)供试品溶液制备；c)高效液相色谱测定；d)取15批江西道地药材枳壳分别制备供试品溶液，依次高效液相色谱测定，记录指纹图谱，将指纹图谱全部导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，选择不同批次枳壳的指纹图谱中均存在的色谱峰作为共有色谱峰，生成标准对照指纹图谱，计算各共有色谱峰的相对保留时间、峰面积；e)采用液相色谱‑串联质谱仪鉴定共有色谱峰；f)采用聚类分析、主成分分析。本发明方法操作简便、重现性好且稳定，采用液质联用技术，明确所有共有色谱峰的化合物结构，结合聚类分析和主成分分析能特征性地区分江西道地产区与其他产区枳壳。

Description

一种江西道地药材枳壳的鉴别方法

技术领域

本发明涉及中药材的指纹图谱技术领域，具体涉及一种江西道地药材枳壳的鉴别方法。

背景技术

枳壳为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实，具有理气宽中，行滞消胀的功效，现代药理学表明枳壳还具有调节胃肠功能、利胆排石、降血脂和抗肿瘤等药理作用，枳壳的功效和药理作用与其化学成分息息相关，其主要成分包括生物碱类、挥发油和黄酮类，此外还有三萜内酯类、香豆素类和无机盐等，这些不同的成分对枳壳的临床应用发挥都有一定的作用。

枳壳产地主要分布于江西、四川、湖南、福建等地。由于各地的生态环境条件不同，枳壳药材的质量差异较大，历代对于枳壳的规格等级划分强调产地质量，以江西和重庆为道地产区，当前药材市场枳壳药材主要是按产地来区分规格，以江西樟树、新干的江枳壳为道地药材，具有皮青，肉厚而白，质坚硬，气香的特征。

现代研究表明，江西道地产区的枳壳药材，其有效成分含量高，质量好，但由于形状上难以区分不同产地的枳壳药材，药材市场上常出现产地混淆的现象。因此有必要建立一种准确有效的方法实现江西道地和其他产区来源枳壳的鉴别分析。目前《中国药典》对枳壳药材的质量控制仅限于新橙皮苷和柚皮苷含量的测定，不能系统完整地反应枳壳的内在质量，单一成分的含量测定难以实现枳壳药材产地的溯源与区分。

发明内容

有鉴于此，本发明期望提供一种江西道地药材枳壳的鉴别方法，操作简便、重现性好且稳定，采用液质联用技术，明确所有共有色谱峰的化合物结构，结合聚类分析和主成分分析能特征性地区分江西道地产区与其他产区枳壳。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

本发明一种江西道地药材枳壳的鉴别方法，包括以下步骤：

a)对照品溶液制备：取适量柚皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、桔皮苷，精密称定，加甲醇或乙腈制成含柚皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、桔皮苷的混合对照品溶液；

b)供试品溶液制备：取枳壳药材粉末，精密称定，过三号筛，置具塞锥形瓶中，加入甲醇或乙醇，浓度为50％-100％，料液比为1：10～1：100，称定重量，回流或超声处理15min-45min，放冷，再称定重量，用甲醇或乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液；

c)高效液相色谱测定：分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录指纹图谱；所述色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相A为纯甲醇或纯乙腈，流动相B为含添加剂浓度0.1％～0.5％甲酸或乙酸的水相，流速为0.8mL/min-1.2mL/min，所述进样量为5μL-10μL，所述检测波长为240nm-340nm；

d)指纹图谱的建立：取15批江西道地药材枳壳分别按步骤b)制备供试品溶液，按步骤c)依次高效液相色谱测定，记录指纹图谱，将所述指纹图谱全部导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，选择不同批次枳壳的指纹图谱中均存在的色谱峰作为共有色谱峰，生成标准对照指纹图谱，计算各共有色谱峰的相对保留时间、峰面积；

e)共有色谱峰结构的鉴定：采用液相色谱-串联质谱仪鉴定共有色谱峰，液相色谱方法与步骤c)一致，质谱所用的电离模式为电喷雾正离子电离，所述气帘气：25-45psi；Gas1：30-70psi；Gas 2：30-70psi；温度：550-650℃；离子化压力：4500-5500V；去簇电压：60-80V；裂解电压：30-40V；CE Spread：10-20V；

f)鉴别分析：以步骤d)指纹图谱中共有色谱峰峰面积为变量，导入SPSS22.0软件(统计产品与服务解决方案22.0版本)，采用组间均连法，选择平方欧式距离为测度对江西道地药材枳壳与其他地区枳壳进行聚类分析；或者以步骤d)指纹图谱中共有色谱峰峰面积为数据，用SIMICA 14.1(维护信息收集和分析的软件界面14.1版本)进行主成分分析，确定主成分及方差贡献率，以此区别江西道地药材枳壳与其他地区枳壳。

进一步地，所述步骤a)中，取适量柚皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、桔皮苷，精密称定，加50％甲醇制成每1mL含柚皮苷80μg～150μg、新橙皮苷80μg～150μg、芸香柚皮苷80μg～150μg、桔皮苷80μg～150μg的混合对照品溶液。

进一步地，所述步骤b)中，取枳壳药材粉末，精密称定，过三号筛，置具塞锥形瓶中，加入浓度为50％-100％的甲醇，料液比为1：10～1：100，称定重量，超声处理20min-40min，放冷，再称定重量，用甲醇或乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液。

进一步地，所述步骤c)中，色谱柱长度为100mm-250mm，直径为2.1mm-4.6mm，粒径为1.7μm-5μm，流动相A为纯乙腈，流动相B为含添加剂浓度0.1％～0.5％甲酸的水相，采用梯度洗脱，0min～65min内流动相A的比例从5％～95％，流动相B的比例从95％～5％。

进一步地，确定11个共有色谱峰，生成标准对照指纹图谱。

进一步地，所述步骤e)中，Gas 1为45-60psi，Gas 2为45-60psi。

本发明有益效果如下：本发明方法操作简便、重现性好且稳定，采用液质联用技术，明确所有共有色谱峰的化合物结构，结合聚类分析和主成分分析能特征性地区分江西道地产区与其他产区枳壳。

附图说明

图1为本发明一种江西道地药材枳壳的鉴别方法流程示意图；

图2为本发明实施例中15批江西枳壳药材的HPLC指纹图谱；

图3为本发明实施例中江西枳壳标准对照指纹图谱；

图4为本发明实施例25批枳壳药材聚类分析树状图；

图5为本发明实施例25批枳壳主成分分析得分图。

具体实施方式

为了能够更加详尽地了解本发明的特点与技术内容，下面对本发明的实现进行详细阐述。

本发明一种江西道地药材枳壳的鉴别方法流程如图1所示，包括以下步骤：

步骤101：对照品溶液制备，取适量柚皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、桔皮苷，精密称定，加甲醇或乙腈制成含柚皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、桔皮苷的混合对照品溶液；

进一步地，取适量柚皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、桔皮苷，精密称定，加50％甲醇制成每1mL含柚皮苷80μg～150μg、新橙皮苷80μg～150μg、芸香柚皮苷80μg～150μg、桔皮苷80μg～150μg的混合对照品溶液；

步骤102：供试品溶液制备，取枳壳药材粉末，精密称定，过三号筛，置具塞锥形瓶中，加入甲醇或乙醇，浓度为50％-100％，料液比为1：10～1：100，称定重量，回流或超声处理15min-45min，放冷，再称定重量，用甲醇或乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液；

进一步地，取枳壳药材粉末，精密称定，过三号筛，置具塞锥形瓶中，加入浓度为50％-100％的甲醇，料液比为1：10～1：100，称定重量，超声处理20min-40min，放冷，再称定重量，用甲醇或乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液；

这里，超声处理可以为功率500W，频率40kHz；

步骤103：高效液相色谱测定，分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录指纹图谱；所述色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相A为纯甲醇或纯乙腈，流动相B为含添加剂浓度0.1％～0.5％甲酸或乙酸的水相，流速为0.8mL/min-1.2mL/min，所述进样量为5μL-10μL，所述检测波长为240nm-340nm；

进一步地，色谱柱长度为100mm-250mm，直径为2.1mm-4.6mm，粒径为1.7μm-5μm，流动相A为纯乙腈，流动相B为含添加剂浓度0.1％～0.5％甲酸的水相，采用梯度洗脱，0min～65min内流动相A的比例从5％～95％，流动相B的比例从95％～5％；

具体地，梯度洗脱程序如表1所示：

表1梯度洗脱程序

步骤104：指纹图谱的建立，取15批江西道地药材枳壳分别按步骤102制备供试品溶液，按步骤103依次高效液相色谱测定，记录指纹图谱，将所述指纹图谱全部导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，选择不同批次枳壳的指纹图谱中均存在的色谱峰作为共有色谱峰，生成标准对照指纹图谱，计算各共有色谱峰的相对保留时间、峰面积；

进一步地，优选确定11个共有色谱峰，生成标准对照指纹图谱，以4号峰为参照峰，11个共有色谱峰的保留时间、相对保留时间、峰面积、相对峰面积如表2所示；

表2标准对照指纹图谱的保留时间、相对保留时间、峰面积、相对峰面积

步骤105：共有色谱峰结构的鉴定，采用液相色谱-串联质谱仪鉴定共有色谱峰，液相色谱方法与步骤103一致，质谱所用的电离模式为电喷雾正离子电离，所述气帘气：25-45psi；Gas 1：30-70psi；Gas 2：30-70psi；温度：550-650℃；离子化压力：4500-5500V；去簇电压：60-80V；裂解电压：30-40V；CE Spread：10-20V；

进一步地，Gas 1为45-60psi，Gas 2为45-60psi；

步骤106：鉴别分析，以步骤104指纹图谱中共有色谱峰峰面积为变量，导入SPSS22.0软件，采用组间均连法，选择平方欧式距离为测度对江西道地药材枳壳与其他地区枳壳进行聚类分析；或者以步骤104指纹图谱中共有色谱峰峰面积为数据，用SIMICA14.1进行主成分分析，确定主成分及方差贡献率，以此区别江西道地药材枳壳与其他地区枳壳。

下面将通过具体实施例来进一步详细阐述：

1仪器与试药

1.1仪器

Waters Alliance高效液相色谱系统，包括2695梯度泵，2998二极管阵列检测器，自动进样器，柱恒温系统，Empower色谱工作站。MS204TS电子分析天平(梅特勒-托利多有限公司)，岛津超高效液相色谱系统，SPD-20A紫外检测器，AB SCIEX X500系列QTOF质谱仪。

1.2试药

对照品：芸香柚皮苷(批号P25J9L66553，规格5mg，纯度99.70％)购自上海源叶生物科技有限公司；柚皮苷、新橙皮苷、桔皮苷，均购自成都普瑞法科技开发有限公司。对照药材：枳壳(批号120981-201605，0.5g/支)购自中国食品药品检定研究院；药材：枳壳药材共25批，采自江西刘公庙横塘村、吴城塘下村、新干金川镇，以及湖南、福建等市场药材，由江西樟树天齐堂中药饮片有限公司提供，质量符合2015年版《中国药典》。经中国科学院大连化学物理研究所鉴定，研究样品均为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.的干燥未成熟果实，具体信息见表3。

表3 25批枳壳样品信息

试剂：乙腈(色谱级)、乙腈(质谱级)、甲醇(色谱级)、乙醇(色谱级)均购自Sigma-Aldrich。磷酸(色谱级)购自Sigma-Aldrich。甲酸(色谱级)购自Aladdin。实验室用水来自Milli-Q超纯水净化系统(Billerica,MA,USA)。

2方法

2.1色谱条件

HPLC-DAD色谱条件色谱柱：Tnature-ACCHROM C18柱(4.6×250mm,5μm,美国沃特世公司)，流动相A为纯乙腈、流动相B为含添加剂浓度0.5％甲酸的水相进行梯度洗脱，0～65min内流动相A的比例从5％～95％，流动相B的比例从95％～5％；流速为每分钟1mL；进样量为10μL；柱温为30℃；检测波长为320nm。

2.2溶液的制备

2.2.1对照品溶液制备：取适量柚皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、桔皮苷，精密称定，精密称定，加50％甲醇制成每1mL含柚皮苷80μg、橙皮苷8μg、新橙皮苷80μg的混合对照品溶液。

2.2.2供试品溶液制备：取枳壳药材粉末2g，精密称定，过三号筛，置具塞锥形瓶中，精密加入100％纯甲醇50mL，称定重量，超声处理(功率500W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液。

2.3耐用性试验

色谱柱的影响：取同一供试品溶液，分别使用Symmetry C18(250mm×4.6mm i.d.，5μm)、Eclipse XDB-C18(250mm×4.6mm i.d.，5μm)和Tnature C18(250mm×4.6mm i.d.，5μm)等不同品牌C18色谱柱对特征图谱的影响，在三根不同品牌C18色谱柱上，枳壳特征图谱的色谱峰数目和分离度均无明显差异，因此上述三根不同品牌C18色谱柱对枳壳特征图谱的影响较小。实验最终选用Tnature C18色谱柱，考察了4根不同批次Tnature C18色谱柱的重现性(SN：3213719914044，SN：3233722612448、SN：3133702414022、SN：3143708912428)取同一供试品溶液在4根Tnature C18色谱柱上测试，结果分析谱图无明显差异。

柱温的影响：取同一供试品溶液，考察25℃、30℃、35℃、40℃等不同柱温对枳壳特征图谱的影响，4种柱温条件下特征图谱的分离效果无明显差异，各色谱峰峰形和分离度均较好，柱温25℃～40℃对枳壳药材特征图谱的影响较小。

不同流速的影响：取同一供试品溶液，考察0.8mL/min、0.9mL/min、1.0mL/min、1.1mL/min、1.2mL/min等不同流速的影响，流速加大，特征图谱中各色谱峰的保留时间减小，分离度和峰形均较好。

不同流动相pH的影响：取同一供试品溶液，考察pH 2.67、pH 2.49和pH 2.24等不同流动相pH的影响。在不同流动相PH条件下，枳壳特征图谱的色谱峰数目和分离度均无明显差异，上述三种不同流动相pH对枳壳特征图谱的影响较小。

不同仪器的影响：取同一供试品溶液，分别用2台Waters Alliance e2695HPLC和SHIMADZU LC-X500(均为二级管阵列检测器，200～400nm)获取特征图谱，结果表明，在不同仪器上，枳壳特征图谱中色谱峰的保留时间有明显差异，但整体分离效果基本相同，特征信息差异性较小，因此本方法能适用于Waters和SHIMADZU液相色谱仪。

3操作分析

3.1江西道地药材枳壳指纹图谱的建立

取15批(S1～S15)江西道地药材枳壳分别按2.2.2方法制备供试品溶液，按2.1.1方法依次高效液相色谱测定，记录指纹图谱，如图2所示，将所述指纹图谱全部导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012版)，以S1批药材的图谱为校正参照，使用中位数进行自动匹配，加以多点校正，确定11个共有色谱峰，得到江西枳壳药材标准对照指纹图谱，如图3所示。以4号峰为参照峰，11个共有色谱峰的保留时间、相对保留时间、峰面积、相对峰面积如表2所示。

3.2江西枳壳指纹图谱中共有色谱峰结构的鉴定

采用高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(HPLC-QTOF-MS)技术对枳壳指纹图谱中的共有色谱峰进行结构鉴定，液相色谱方法与2.1.1方法一致，质谱条件：离子源：ESI离子源；正离子模式；气帘气：35psi；Gas1：65psi；Gas 2：65psi；温度：620℃；离子化压力：5500V，去簇电压：80V；全扫描范围：m/z 50～1500；裂解电压：40V；CE Spread：20V。通过前述保留时间、碎片离子以及与对照品对照分析，对枳壳指纹图谱中的共有色谱峰进行结构鉴定，结果见表4。

表4江西枳壳指纹图谱中共有峰的鉴定

4鉴别分析

4.1方法学考察

4.1.1精密度试验取同一批次枳壳药材，制备供试品溶液，连续进样6次，各共有色谱峰的相对保留时间RSD均小于1％，共有色谱峰的相对峰面积RSD小于5％，表明仪器精密度良好。

4.1.2稳定性试验取同一批次枳壳药材，制备供试品溶液，分别于0h、6h、12h、18h、24h注入液相色谱仪，各共有色谱峰的相对保留时间RSD均小于1％，共有色谱峰的相对峰面积RSD小于5％，表明供试品溶液24h内稳定性良好。

4.1.3重复性试验取同一批次枳壳药材，制备6份供试品溶液，进样，各共有色谱峰的相对保留时间RSD均小于1％，共有色谱峰的相对峰面积RSD小于5％，表明该方法重复性良好。

4.2枳壳样品的聚类分析

以指纹图谱中11个共有色谱峰峰面积为变量，导入SPSS 22.0软件，采用组间均连法，选择平方欧式距离为测度对江西15批枳壳及其他产区10批枳壳进行聚类分析，如图4所示，聚类结果显示，当临界值为25时，分为两大类，S1～S15批(江西药材)聚为一类，S16～S25批(其他产地)聚为一类。

4.3枳壳样品的主成分分析

主成分分析是研究如何通过降维使少数几个主成分来揭示多个变量间的内部结构，即从原始变量中导出少数几个主成分，使它们尽可能多地保留原始变量的信息，且彼此间互不相关的一种多元统计方法。采用主成分分析对江西枳壳和其他产区枳壳共25批进行降维分析，如图5所示，经交互验证，第一主成分方差贡献率为64.8％，第二主成分方差贡献率为24.2％，从主成分分析得分图看出，江西枳壳和其他产区枳壳可以很明显地分开，各自聚为一类，表明其化学成分差异较大。

现有方法相似度计算

取10批(S16～S25)其他产区枳壳分别按2.2.2方法制备供试品溶液，按2.1.1方法依次高效液相色谱测定，记录指纹图谱，将所述指纹图谱全部导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012版)，计算相似度，与图3江西枳壳药材标准对照指纹图谱对比，结果显示，与江西枳壳药材标准对照指纹图谱对比，15批江西枳壳(S1～S15)的相似度分别为1.000、0.998、0.995、0.998、0.998、0.997、0.998、0.999、1.000、0.997、0.998、0.999、0.999、0.992、0.998，其他产区(S16～S25)枳壳的相似度分别为0.915、0.914、0.907、0.926、0.927、0.944、0.906、0.938、0.927、0.951，相似度结果显示25批枳壳药材在相似度均在0.9以上，不易区分江西和其他产区的枳壳药材。

本发明方法操作简便、重现性好且稳定，采用液质联用技术，明确所有共有色谱峰的化合物结构，结合聚类分析和主成分分析能特征性地区分江西道地产区与其他产区枳壳。

以上所述，仅为本发明的较佳实施例，并非用于限定本发明的保护范围，故凡依照本发明专利范围所做的等效变化或修饰，均属于本发明专利权利要求范围内。

Claims

1.一种江西道地药材枳壳的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：

a) 对照品溶液制备：取适量柚皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、桔皮苷，精密称定，加50%~100%甲醇或乙腈制成含柚皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、桔皮苷的混合对照品溶液；

b) 供试品溶液制备：取枳壳药材粉末，精密称定，过三号筛，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇或乙醇，浓度为50%~100%，料液比为1：10~1：100，称定重量，回流或超声处理15 min-45 min，放冷，再称定重量，用甲醇或乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液；

c) 高效液相色谱测定：分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录指纹图谱；所述色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相A为纯甲醇或纯乙腈，流动相B为含添加剂浓度0.1%~0.5%甲酸或乙酸的水相，流速为0.8 mL/min-1.2 mL/min，所述进样量为5 μL -10 μL，所述检测波长为240nm -340nm；

d) 指纹图谱的建立：取15批江西道地药材枳壳分别按步骤b)制备供试品溶液，按步骤c)依次高效液相色谱测定，记录指纹图谱，将所述指纹图谱全部导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，选择不同批次枳壳的指纹图谱中均存在的色谱峰作为共有色谱峰，生成标准对照指纹图谱，计算各共有色谱峰的相对保留时间、峰面积；

e) 共有色谱峰结构的鉴定：采用液相色谱-串联质谱仪鉴定共有色谱峰，液相色谱方法与步骤c)一致，质谱所用的电离模式为电喷雾正离子电离，所述气帘气：25-45 psi；Gas1：30-70 psi；Gas 2：30-70 psi；温度：550-650 ℃；离子化压力：4500-5500 V；去簇电压：60-80 V；裂解电压：30-40 V; CE Spread：10-20 V；

f) 鉴别分析：以步骤d)指纹图谱中共有色谱峰峰面积为变量，导入SPSS22.0软件，采用组间均连法，选择平方欧式距离为测度对江西道地药材枳壳与其他地区枳壳进行聚类分析；或者以步骤d)指纹图谱中共有色谱峰峰面积为数据，用SIMICA 14.1进行主成分分析，确定主成分及方差贡献率，以此区别江西道地药材枳壳与其他地区枳壳。

2.根据权利要求1所述的一种江西道地药材枳壳的鉴别方法，其特征在于，所述步骤a)中，取适量柚皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、桔皮苷，精密称定，加50%甲醇制成每1 mL含柚皮苷80 μg~150 μg、新橙皮苷80μg ~150 μg、芸香柚皮苷80 μg~150 μg、桔皮苷80 μg~150 μg的混合对照品溶液。

3.根据权利要求1所述的一种江西道地药材枳壳的鉴别方法，其特征在于，所述步骤b)中，取枳壳药材粉末，精密称定，过三号筛，置具塞锥形瓶中，加入浓度为50%-100%的甲醇，料液比为1：10~1：100，称定重量，超声处理20 min-40 min，放冷，再称定重量，用甲醇或乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液。

4.根据权利要求1所述的一种江西道地药材枳壳的鉴别方法，其特征在于，所述步骤c)中，色谱柱长度为100 mm-250 mm，直径为2.1 mm-4.6 mm，粒径为1.7 μm-5 μm，流动相A为纯乙腈，流动相B为含添加剂浓度0.1%~0.5%甲酸的水相，采用梯度洗脱，0 min~65 min内流动相A的比例从5%~95%，流动相B的比例从95%~5%。

5.根据权利要求1所述的一种江西道地药材枳壳的鉴别方法，其特征在于，所述步骤d)中，确定11个共有色谱峰，生成标准对照指纹图谱。

6.根据权利要求1所述的一种江西道地药材枳壳的鉴别方法，其特征在于，所述步骤e)中，Gas 1为45-60 psi，Gas 2为45-60 psi。