CN112544827B - 一种罗氏沼虾饲料添加剂及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种罗氏沼虾饲料添加剂及其制备方法与应用，所述的饲料添加剂包括如下质量百分比的组分：核苷酸10～40％；聚核苷酸2～25％；酵母葡聚糖2～20％；粗蛋白5～60％；氯化钠1～10％；水分5～10％。本发明制备的饲料添加剂为通过技术处理核糖核酸酶解过程中的废固渣所得，与其他高含量核苷酸的产品相比，成本低廉，适合于实际大规模应用。本发明制备的饲料添加剂的蛋白含量远高于其他核苷酸类产品相比，作为饲料添加效果较好，能明显提高水产品免疫力和抗病性，从而提高产量。本发明制备的饲料添加剂是用生物法制备的，绿色无污染，不会对水体造成破坏。
Description
技术领域
本发明属于生物技术及饲料添加剂领域，具体涉及一种罗氏沼虾饲料添加剂及其制备方法与应用。
背景技术
罗氏沼虾属于全球性优良的淡水虾种，因其肉质营养与生长快、食性广与养殖简单等特性，近年来，国内养殖罗氏沼虾发展迅速。罗氏沼虾养殖带来的经济效益明显，是非常有前景的淡水大虾养殖品种。但是当前面临的最大问题是虾病，随着罗氏沼虾养殖的快速发展和集约化养殖程度的提高，以及采用人工饲料喂养，在养殖过程中经常出现大规模暴发性流行病和大批死亡的现象。针对这一种情况，研究工作已转向通过加强营养以增强动物机体的自身免疫力。
酵母和鱼类水解物一直被用作饲料原料，并因其良好的功效而被称为“不明生长因子(UGF)”。现已表明，很多饲料(如动物蛋白水解物、酵母抽提物和单细胞生物等)之所以对动物有生长促进作用，是因为含有大量的核苷酸和天然的多聚核苷酸。由于大多数生物能自己合成核苷酸，故一直被认为它是一种非必需的营养物。近来的研究认为，核苷酸对哺乳动物(包括人类)、家禽、鱼类等是必需的营养物质，尤其当动物处于应激状态下(如疾病、损伤)或者在幼年和生长旺盛期，若缺乏核苷酸对生长和健康不利。但由于高纯度的核苷酸制造成本非常昂贵，而且缺乏其他有机成分做复配，实际应用受到限制。因此，本发明拟通过核苷酸制造过程中的固渣处理技术，得到一种富含核苷酸、聚核苷酸、酵母细胞多糖、蛋白等多种营养物质的产品，并在罗氏沼虾上进行应用，提高其免疫能力，降低病害的发生。
发明内容
发明目的：本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种饲料添加剂。
本发明进一步要解决的技术问题是提供上述饲料添加剂的制备方法。
本发明还要解决的技术问题是提供上述饲料添加剂的应用。
为了解决上述第一个技术问题，本发明公开了一种饲料添加剂，包括如下质量百分比的组分：
优选地，所述的饲料添加剂包括如下质量百分比的组分：
进一步优选地，所述的饲料添加剂包括如下质量百分比的组分：
为了解决上述第二个技术问题，本发明公开了上述饲料添加剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)用核酸酶P1将核糖核酸水溶液酶解后，固液分离，得到废固渣；
(2)向步骤(1)所得的废固渣中加水搅匀后，干燥，即得。
步骤(1)中，所述的核酸酶P1的酶活为1000～5000U/mL。
其中，所述酶活的酶的定义为将1.9mL的底物溶液(含有质量浓度为1％左右的RNA；0.2M pH5.2的醋酸缓冲液以及0.0005M的ZnSO4)于70℃恒温水浴10min后，加入0.1mL经适当稀释的酶液，70℃保温15min后加入2.0mL核酸沉淀剂(0.25％(w/w)钼酸铵-2.5％(w/w)过氯酸)，冰水浴20min后离心，取上清液，用蒸馏水稀释一定倍数，测定其260nm处的吸光值为A260。以先加沉淀剂者作为对照，其它操作同前；在前述条件下，每分钟所生成的核苷酸量在260nm处的吸光值的差值为1.0时定义为1个酶活力单位。
步骤(1)中，所述的核糖核酸水溶液中核糖核酸的含量为3％～7％w/w，优选为5％w/w。
步骤(1)中，所述的核酸酶P1与核糖核酸的体积质量比为0.1～10：1L/g。
步骤(1)中，所述的酶解为在20～100℃，pH3～9下反应1～20h。
步骤(1)中，所述的固液分离为通过板框固液分离。
步骤(2)中，所述的水的用量为所述废固渣体积的0.1-10倍。
步骤(2)中，所述的干燥为喷雾干燥；优选地，所述干燥的温度为120～200℃。
为了解决上述第三个技术问题，本发明公开了上述饲料添加剂在罗氏沼虾饲料中应用。
其中，所述的饲料添加剂为罗氏沼虾饲料的0.1～10wt％。
有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优势：
(1)本发明制备的饲料添加剂为通过技术处理核糖核酸酶解过程中的废固渣所得，与其他高含量核苷酸的产品相比，成本低廉，适合于实际大规模应用。
(2)本发明制备的饲料添加剂的蛋白含量远高于其他核苷酸类产品相比，作为饲料添加效果较好，能明显提高水产品免疫力和抗病性，从而提高产量。
(3)本发明制备的饲料添加剂是用生物法制备的，绿色无污染，不会对水体造成破坏。
具体实施方式
下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
以下实施例中，所述的核酸酶P1的酶活为5000U/mL。
以下实施例中，核苷酸以高效液相法检测，参考公开专利CN2020105651790；酵母葡聚糖的检测参照国标QB/T 4572-2013；粗蛋白参照按照国标GB/T 6432-2018；氯化钠检测参照国标GB/T 12457-90；水分以烘干法检测；聚聚核苷酸的含量为剩下的含量。
实施例1：
用核酸酶P1将5％(w/w)核糖核酸水溶液酶解，酶解反应中，核酸酶P1：核糖核酸(L/g)为0.4:1，反应温度50℃，反应pH5，反应时间3h，反应结束后，经板框固液分离，向所得固渣中加一倍体积水，搅匀后在170℃下喷雾干燥后得到的含核苷酸混合物，组分为：核苷酸11％、聚核苷酸25％，酵母葡聚糖11％，粗蛋白39％、氯化钠7％，水分7％。
实施例2：
用核酸酶P1将5％(w/w)核糖核酸水溶液酶解，酶解反应中，核酸酶P1：核糖核酸(L/g)为0.6:1，反应温度55℃，反应pH5.5，反应时间4h，反应结束后，经板框固液分离，向所得固渣中加一倍体积水，搅匀后在170℃下喷雾干燥后得到的含核苷酸混合物组分为：核苷酸18％、聚核苷酸17％，酵母葡聚糖11％，粗蛋白40％、氯化钠7％，水分7％。
实施例3：
用核酸酶P1将5％(w/w)核糖核酸水溶液酶解，酶解反应中，核酸酶P1：核糖核酸(L/g)为0.9:1，反应温度65℃，反应pH 5.5，反应时间5h，反应结束后，经板框固液分离，向所得固渣中加一倍体积水，搅匀后在180℃下喷雾干燥后得到的含核苷酸混合物组分为：核苷酸20％、聚核苷酸16％，酵母葡聚糖11％，粗蛋白41％、氯化钠6％，水分6％。
实施例4：
用核酸酶P1将5％(w/w)核糖核酸水溶液酶解，酶解反应中，核酸酶P1：核糖核酸(L/g)为1:1，反应温度70℃，反应pH 5.5，反应时间5h，反应结束后，经板框固液分离，向所得固渣中加一倍体积水，搅匀后在190℃下喷雾干燥后得到的含核苷酸混合物组分为：核苷酸27％、聚核苷酸8％，酵母葡聚糖8％，粗蛋白44％、氯化钠6％，水分7％。
实施例5：
用核酸酶P1将5％(w/w)核糖核酸水溶液酶解，酶解反应中，核酸酶P1：核糖核酸(L/g)为1.5:1，反应温度80℃，反应pH 6，反应时间6h，反应结束后，经板框固液分离，向所得固渣中加一倍体积水，搅匀后在190℃下喷雾干燥后得到的含核苷酸混合物组分为：核苷酸20％、聚核苷酸14％，酵母葡聚糖10％，粗蛋白42％、氯化钠7％，水分7％。
实施例6：
用核酸酶P1将5％(w/w)核糖核酸水溶液酶解，酶解反应中，核酸酶P1：核糖核酸(v/w)为3:1，反应温度90℃，反应pH 7，反应时间10h，反应结束后，经板框固液分离，向所得固渣中加一倍体积水，搅匀后在170℃下喷雾干燥后得到的含核苷酸混合物组分为：核苷酸18％、聚核苷酸18％，酵母葡聚糖12％，粗蛋白38％、氯化钠7％，水分7％。
实施例7：在安徽六安地区，对7家农户的养殖塘进行试验，每户分为4个区域，使用的添加剂如下：
组1：使用实施例1制备的添加剂；
组2：使用实施例2制备的添加剂；
组3：使用实施例3制备的添加剂；
组4：使用实施例4制备的添加剂；
组5：使用实施例5制备的添加剂；
组6：使用实施例6制备的添加剂；
组7：不使用任何饲料添加剂。
以上用户使用的罗氏沼虾饲料均为市售同种产品，营养成分见表1。
表1罗氏沼虾饲料的营养成分
| 组分 | 质量百分比(％) |
| 鱼粉 | 34.2 |
| 豆粕 | 12.6 |
| 花生麸高精面粉 | 12.4 |
| 大豆卵磷脂 | 26.3 |
| 鱼油 | 3.6 |
| 氯化胆碱 | 2.2 |
| 维生素C | 2.0 |
| 多维 | 2.0 |
| 多矿 | 2.6 |
| 海藻酸钠 | 2.1 |
每天分别在8:00、15:00和20:00分3次投喂，投料量为罗氏沼虾质量的0.2～2％。从虾种投放到收获，记录收获后的罗氏沼虾养殖效果，具体见表2。
表2喂食3个月后的效果比较
通过以上试验可知，本发明制备的罗氏沼虾饲料添加剂具有很好的效益。其中组4添加量为0.5％时效果最好，增产40.05％，发病率低至4.3％，存活率高达97.8％，单虾重达50.7g。
实施例10：利用实施例4所述成分比例制备的添加剂(添加量0.5％)，用于鲈鱼的喂养，每天喂养3次，8个月后可增产27％。
实施例11：利用实施例4所述成分比例制备的添加剂(添加量0.5％)，用于鳗鱼的喂养，每天喂养3次，9个月后可增产32％。
本发明提供了一种饲料添加剂及其制备方法与应用的思路及方法，具体实现该技术方案的方法和途径很多，以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。本实施例中未明确的各组成部分均可用现有技术加以实现。
Claims (4)
1.一种饲料添加剂，其特征在于，由如下方法制备得到：用核酸酶P1将5％w/w核糖核酸水溶液酶解，酶解反应中，核酸酶P1：核糖核酸L/g为1:1，反应温度70℃，反应pH 5.5，反应时间5h，反应结束后，经板框固液分离，向所得固渣中加一倍体积水，搅匀后在190℃下喷雾干燥后得到的含核苷酸混合物组分为：核苷酸27％、聚核苷酸8％，酵母葡聚糖8％，粗蛋白44％、氯化钠6％，水分7％。
2.根据权利要求1所述的饲料添加剂，其特征在于，所述的核酸酶P1的酶活为1000～5000U/mL。
3.权利要求1或2所述的饲料添加剂在制备罗氏沼虾饲料中应用，其特征在于，所述罗氏沼虾饲料的成分如下；
所述的饲料添加剂为罗氏沼虾饲料的0.1～2wt％。
4.权利要求1或2所述的饲料添加剂在制备鳗鱼或鲈鱼饲料中应用。
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| US5064758A (en) * | 1988-06-14 | 1991-11-12 | Institut Moreologii Cheloveka | Method of preparing a mixture of ribonucleotides |
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| CN110468170A (zh) * | 2019-09-25 | 2019-11-19 | 南京同凯兆业生物技术有限责任公司 | 一种核苷酸混合物粉末及其制备方法与应用 |
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2020
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