CN112544798B - 一种改善大菱鲆肠道健康和机体免疫力的合生元及饲料 - Google Patents
一种改善大菱鲆肠道健康和机体免疫力的合生元及饲料 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种改善大菱鲆肠道健康和机体免疫力的合生元及饲料，属于水产养殖饲料益生菌添加剂技术领域，所述的合生元由水苏糖和干酪乳杆菌组成。本发明还提供含有所述合生元的大菱鲆饲料，所述合生元中水苏糖在大菱鲆饲料中的质量比为2.0‑3.0％，所述合生元中的干酪乳杆菌在大菱鲆饲料中的浓度为1×107‑1×109CFU/g。所述饲料能够显著提高肠道中特定益生菌菌株干酪乳杆菌的丰度、改善肠道形态及结构完整性、提高大菱鲆免疫应答能力、从而提高养殖大菱鲆的肠道健康和抗病力。
Description
技术领域
本发明属于水产养殖饲料添加剂技术领域，具体地涉及一种促进大菱鲆肠道健康和免疫应答水平的合生元添加剂及饲料，该合生元由水苏糖和干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)配伍而成。
背景技术
近年来，水产养殖对世界粮食生产的贡献显著增加，养殖技术的进步、新物种的引进刺激了水产养殖业的快速发展。然而目前由于受水环境、土地等水产养殖资源的限制，高密度养殖仍然是必然趋势。此外，因为鱼粉资源的极度紧张，来源稳定、价格低廉的植物蛋白源广泛应用在水产饲料中，而其在应用过程中通常容易引发养殖鱼类，尤其是肉食性养殖鱼类的肠炎发生。肠道是鱼类重要的消化和吸收器官，同时还具有免疫、内分泌以及新陈代谢的功能，肠炎的发生严重损害养殖鱼类的机体健康及其经济价值。而高密度养殖模式下水质污染加重、病原菌传染性增强，养殖鱼类发生肠炎极易引发疾病的爆发，严重危害水产养殖的健康发展。
鱼类肠道是营养物质消化吸收的主要场所，肠道组织形态如皱襞的高低和疏密、微绒毛的发达程度等与消化吸收能力密切相关。肠道粘膜屏障是防止病原菌入侵的第一道防线，其中肠上皮细胞和细胞之间的紧密连接构成机械屏障。紧密连接的结构及功能完整性对于维持肠道通透性、防止抗原入侵以及介导细胞旁路途经调节水分和离子转运等过程具有重要作用。紧密连接损伤导致肠道粘膜屏障通透性的增加，为病原菌等有害物质进入循环系统提供便利，能够诱发肠道乃至全身性的病理反应。在哺乳动物中的研究中表明，紧密连接的损伤是多种炎症性肠病发生、发展和持续的重要因素。在鱼类中，肠道紧密连接的破坏与鱼类肠炎的发生关系密切，并最终导致消化吸收能力受阻以及鱼体生长和品质的下降。鱼类具有非特异性和特异性免疫机制。非特异性免疫包括存在于血液和粘膜中的生物化学成分，如溶菌酶、补体因子和其他溶解因子，能够帮助鱼体抵御病原菌的侵袭和定殖。特异性免疫主要由B淋巴细胞和T淋巴细胞介导，在受到病原菌侵袭后，淋巴细胞产生抗体，特异性识别并消除抗原。鱼类通过特异性免疫和非特异性免疫共同发挥作用以应对复杂多变的水域环境。
在水产养殖中常常使用抗生素对抗病菌感染并促进生长，然而，抗生素的滥用导致耐药细菌的产生以及药物残留，严重危害养殖环境和人体健康。过去二十年中，大量研究揭示了鱼类营养、免疫反应和肠道健康之间的联系，因此通过营养手段改善鱼类免疫水平及肠道健康切实可行。益生菌、益生元以及合生元由于其高效、环保、无副作用的特点，是替代抗生素、维持水产养殖可持续发展的合理选择。益生菌通过分泌代谢产物、占位效应、帮助分解营养物质以及与肠道细胞之间的相互作用等方式调节鱼体免疫并促进肠道健康；益生元主要作为益生菌的底物发挥作用；而合生元综合了益生菌和益生元的特点，通过选择性地刺激一种或有限数量的益生菌的生长和/或激活其代谢，从而改善益生菌添加剂在胃肠道中的存活和定植，帮助益生菌更好的发挥其益生作用。
目前，我国水产添加剂产业尽管增幅较快，但它仍然只是一个新兴产业，产业规模小，市场鱼龙混杂。对于合生元产品来说，很多产品配伍不具备科学依据，不但不能达到预期效果，还造成了资源的浪费。水苏糖是一种天然存在的四糖，被誉为超强双歧因子，可以选择性作为多种益生菌的发酵底物，优化肠道微生物群落组成，促进肠道健康。在哺乳动物中的实验中表明，德施普水苏糖产品(水苏糖含量55.3％)能够增加肠道中双歧杆菌和乳杆菌的数量，降低致病菌产气荚膜梭菌的数量，提升便秘人群的肠道功能。在小鼠中，日常饮食中添加水苏糖能够增加肠道益生菌的丰度，减轻葡聚糖硫酸钠引起的结肠炎。随着水产养殖业的飞速发展，集约化程度不断提高，尤其是农业农村部规定:自2020年7月1日起，禁止添加抗生素到饲料中宣布以来，如何通过营养手段提高养殖鱼类的肠道健康和免疫力，对保障食品安全、保护养殖水环境、实现水产养殖长期、健康的可持续发展具有重要意义。所以，寻找能够与水苏糖进行配伍，发挥二者的协同作用，针对性地提高鱼类肠道健康和机体免疫水平的合生元具有重要应用价值和意义。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种配伍科学、高效的合生元添加剂及饲料，所述饲料能够增加大菱鲆免疫应答能力、改善肠道形态及紧密连接完整性，从而提高养殖大菱鲆的抗病力和肠道健康。
为了实现上述目的，本发明提供了一种合生元添加剂，该添加剂包括提取自唇形科草石蚕的益生元水苏糖，以及能利用水苏糖作为底物生长的益生菌干酪乳杆菌。
本发明是通过以下技术方案来实现的：
一种改善大菱鲆肠道健康和机体免疫力的合生元，所述的合生元由水苏糖和干酪乳杆菌组成。
进一步，所述的水苏糖提取自唇形科草石蚕；所述的干酪乳杆菌购置于中国工业微生物菌种保藏管理中心(China Center of Industrial Culture Collection，简称CICC)，菌种保藏编号为CICC 6117。
一种含有上述合生元的大菱鲆饲料，所述大菱鲆饲料由基础饲料和合生元组成，所述合生元中水苏糖在大菱鲆饲料中的质量分数为2.0-3.0％，所述合生元中的干酪乳杆菌在大菱鲆饲料中的浓度为1×107-1×109CFU/g。
进一步，所述的大菱鲆饲料其他成分及质量百分比为：鱼粉36.00％、豆粕15.68％、玉米蛋白粉8.00％、谷朊粉5.12％、花生粕3.20％、啤酒酵母2.5％、小麦粉14.13％、牛磺酸1％、复合氨基酸1.37％、鱼油8％、大豆卵磷脂1％、多维多矿预混料1％、氯化胆碱0.25％、乙氧基喹啉0.05％、丙酸钙0.1％。
本发明与现有技术相比的有益效果：
1.本发明的合生元专注于改善肠道组织形态和紧密连接屏障功能、提高肠道内益生菌丰度，促进肠道健康并提高鱼体免疫应答水平，为高密度养殖下鱼体抵抗力下降、疾病频发以及肠道功能障碍等问题提供针对性的解决策略。
2.本发明具有使用方便，无毒副作用，无污染，无残留等特点。
3.本发明只含2种成分，因此与多种成分复合的益生元相比配伍简单明确，受不同成分变动的影响较小，因此效果更加稳定。
4.本发明所使用的干酪乳杆菌菌株来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心，信息明确、性质稳定；水苏糖来源于中国食品工程发酵研究院有限公司，质量保证、纯度高(≥80％)。更重要的是，本品水苏糖添加剂量和菌株的搭配均以实际养殖实验结果为依据。因此无论在关键的菌株选取还是水苏糖用量上均是对此前配伍的优化和创新，为本品的效果提供了保证。
附图说明
图1水苏糖对摄食高剂量棉粕饲料的大菱鲆血清中D-乳酸含量和二胺氧化酶活性的影响:误差线表示平均值的标准误(n＝3)，不同字母表示数值差异显著(P<0.05)。
图2水苏糖对摄食高水平棉粕饲料的大菱鲆后肠肠道组织形态和肠道绒毛周长比的影响。I)大菱鲆后肠组织结构的切片图。鱼粉组(A)，棉粕组(B)，1.4％水苏糖组(C)和2.8％水苏糖组(D)。比例尺，200μm。II)饲料中添加水苏糖对摄食高水平棉粕大菱鲆后肠的周长比的影响。误差线表示标准误(n＝3)，不同字母表示数值差异显著(P<0.05)。
图3摄食不同饲料大菱鲆后肠微生物群落的LEfSe(LDA Effect Size)分析。
图4合生元对大菱鲆后肠粘膜及内容物中干酪乳杆菌数量的影响：*表示不同处理之间差异显著。
图5合生元对大菱鲆后肠紧密连接蛋白基因表达水平的影响：图中上标字母不同者之间表示存在显著差异(P<0.05)。
图6合生元对大菱鲆后肠肠道组织结构形态的影响。
图7合生元对大菱鲆后肠绒毛周长比影响：图中上标字母不同者表示存在显著差异(P<0.05)。
具体实施方式
下面通过实施例详细叙述本发明的制备及应用方法：
实施例1
首先，通过养殖实验评估水苏糖对摄食高水平棉粕的大菱鲆肠道健康的保护作用，确定水苏糖在饲料中适宜的添加剂量，并结合肠道菌群的高通量测序分析结果，筛选出适合与水苏糖搭配的益生菌菌株。
具体操作方法如下：配制4种等氮等脂的饲料，粗蛋白含量为52％，粗脂肪含量为12％。鱼粉组以鱼粉为主要蛋白源，用棉粕代替40％的鱼粉蛋白制成棉粕组，分别在棉粕组饲料基底中添加水苏糖制成1.4％水苏糖组和2.8％水苏糖组。本实验中使用的水苏糖(纯度≥80.0％)购自中国食品与发酵工业研究院。四种实验饲料配方中水苏糖的实际含量分别为0.13％(FM)、0.31％(CM)、1.60％(S1)和2.61％(S2)。将所有饲料原料研磨成细粉，过60目筛网，之后与鱼油和大豆卵磷脂充分混合，加水制成坚硬的面团。使用单螺杆饲料制粒机制成直径3毫米的短颗粒。将制成的饲料在通风烘箱中于55℃下烘干约12小时，并储存在-20℃的冰箱中备用。表1列出了试验饲料的配方和粗营养成分组成。
表1实验饲料配方及营养组成(％干物质)
a鱼粉(干物质，％)：CP 72.47，CL 9.00；棉粕(干物质，％)：CP 58.17，CL 3.74；小麦粉(干物质，％)：CP 17.68，CL 2.05。
b维生素和矿物质预混合物(mg/kg)：维生素A醋酸酯，150；维生素D3，3.75；DL-α-维生素E，4000；维生素K3，500；硫胺素500；核黄素800；盐酸吡哆醇，600；维生素B12，2；L-抗坏血酸-2-单磷酸钠，10000；泛酸钙，2000；烟酸，3000；肌醇，10000；生物素，5；叶酸，170，水分<10％；铁，12000；锌，6000；铜，400；锰，3000；碘，100；钴，10；硒，10；镁，15000。
c购自中国食品发酵工业研究院。纯度≥80％。
采用上述配方制成的饲料，在山东蓬莱天源养殖场的流水养殖系统中开展养殖实验，养殖周期为12周。每天向各处理组投喂相应的饲料。投喂频率：一日2次(08:00和17:00)，将大菱鲆慢慢投喂至表观饱食。海水从相邻海岸输入，经沉淀和砂滤处理后泵送至室内流水系统。在饲养期间，控制好环境因素，使之保持在大菱鲆生长的适宜条件。试验结束后，测定不同饲料对大菱鲆生长、饲料利用、肠道组织形态、肠道紧密连接蛋白和肠道细胞凋亡相关基因表达量影响，结果如下：
表2水苏糖对摄食高水平棉粕饲料的大菱鲆幼鱼生长性能和饲料利用的影响。
a所有数据表示为平均值±标准误。同一行中上标字母不同的数值存在显着差异(P<0.05)。
由表2可知，与鱼粉组相比，棉粕组大菱鲆的增重率、特定生长率和饲料效率显着降低(P<0.05)。与棉粕组相比，饲料中添加水苏糖提高了大菱鲆的增重率、特定生长率和饲料效率，与鱼粉组无显着差异(P>0.05)。
表3水苏糖对摄食高剂量棉粕饲料的大菱鲆幼鱼后肠细胞凋亡相关基因表达量影响。
a所有数据表示为平均值±标准误。同一行中上标字母不同的数值存在显着差异(P<0.05)。
由表3可见，与鱼粉组相比，棉粕组的大菱鲆后肠caspase-3、caspase-7和caspase-9的基因表达水平显着上升，bcl-2/bax显着降低(P<0.05)。与棉粕相比，2.8％水苏糖组的大菱鲆后肠caspase-3、caspase-7和caspase-9的基因表达水平显著下调，同时bcl-2/bax的表达水平显著上调(P<0.05)，并均与鱼粉组无显著差异(P>0.05)。
表4水苏糖对饲喂高水平棉粕饲料大菱鲆幼鱼后肠紧密连接蛋白基因表达量影响。
| FM | CM | S1 | S2 | |
| zo-1 | 1.00±0.03<sup>b</sup> | 0.59±0.05<sup>a</sup> | 0.50±0.06<sup>a</sup> | 1.04±0.09<sup>b</sup> |
| claudin-3 | 1.02±0.09 | 1.28±0.18 | 1.03±0.17 | 1.34±0.16 |
| occludin | 1.10±0.05<sup>b</sup> | 0.86±0.06<sup>a</sup> | 0.87±0.05<sup>a</sup> | 1.0±0.04<sup>ab</sup> |
注：所有数据表示为平均值±标准误。同一行中上标字母不同的数值存在显着差异(P<0.05)。
由表4可见，与鱼粉组相比，棉粕组的大菱鲆后肠occludin和zo-1基因表达水平显着降低(P<0.05)。与棉粕组相比，S2处理组大菱鲆后肠zo-1的基因表达量显著升高(P<0.05)，occludin表达量上升，与鱼粉组无显着性差异(P>0.05)。
由图1可知，与鱼粉相比，高剂量棉粕显著提高了大菱鲆血清中D-乳酸含量和二胺氧化酶活性(P<0.05)。与棉粕组相比，S2处理组的鱼体血清D-乳酸含量和二胺氧化酶活性显着降低(P<0.05)。
图2中I)大菱鲆后肠组织结构的切片图。鱼粉组(A)，棉粕组(B)，1.4％水苏糖组(C)和2.8％水苏糖组(D)。比例尺，200μm。II)饲料中添加水苏糖对摄食高水平棉粕大菱鲆后肠的周长比的影响。误差线表示标准误(n＝3)，不同字母表示数值差异显著(P<0.05)。
由图2可见，在所有处理组中均未观察到典型的形态学变化，例如固有层的增宽以及炎性细胞大量浸润。粘膜下层也未观察到炎性细胞浸润，吸收细胞中未见明显的核上空泡丧失。然而，与鱼粉组相比，棉粕组大菱鲆后肠绒毛的周长比显着降低(P<0.05)。而添加水苏糖处理组的大菱后肠绒毛的周长比高于棉粕组，达到与鱼粉组无显着差异的水平(P>0.05)。
图3LEfSe分析柱状图显示了大菱后肠丰度差异显著的生物标志物，柱状图的长度代表差异物种的影响大小，即LDA score。图3中筛选为LDA score≥2的物种。图3A为在2.8％水苏糖组中大菱鲆后肠粘膜相对丰度显著上升的细菌分类单元，图3B为在棉粕组中大菱鲆后肠粘膜相对丰度显著升高的细菌分类单元。
由图3(A和B)可知，与棉粕组相比，饲料中添加2.8％水苏糖能够显著提高大菱鲆后肠乳杆菌属以及干酪乳杆菌的相对丰度(P<0.05)。
上述实验表明，饲料中添加2.8％的水苏糖能够显著提高大菱鲆后肠干酪乳杆菌的相对丰度、促进肠道组织形态结构完整性、缓解由于添加高剂量棉粕导致的肠道紧密连接损伤和细胞凋亡，进而提高大菱鲆生长性能和饲料利用率。
因此，我们选择性地将水苏糖和干酪乳杆菌进行配伍成为一种合生元。具体所采用的技术方法为：在基础饲料中添加2.5％的水苏糖，另添加1×108CFU/g的干酪乳杆菌。基础饲料中的其他各原料组分主要有：鱼粉36.00％、豆粕15.68％、玉米蛋白粉8.00％、谷朊粉5.12％、花生粕3.20％、啤酒酵母2.5％、小麦粉14.13％、牛磺酸1％、复合氨基酸1.37％、鱼油8％、大豆卵磷脂1％、多维多矿预混料1％、氯化胆碱0.25％、乙氧基喹啉0.05％、丙酸钙0.1％。
上述合生元添加剂的制备方法如下：
将2.5％水苏糖与其它饲料原料混匀后，经挤压干燥后制成硬颗粒饲料。将菌种于MRS培养基中培养过夜，取1ml菌液于3500g离心5min，PBS重悬两次后，酶标仪计算OD值，根据预先绘制好的菌种数量-OD值曲线计算菌种浓度，按照1×108CFU/g的浓度，将其喷洒至含水苏糖的饲料中并完全混合均匀。
所述水苏糖购置于中国食品发酵工业研究院有限公司(China NationalResearch Institute of Food and Fermentation industries Co.,Ltd)，提取自草石蚕，纯度≥80％。
所述干酪乳杆菌购置于中国工业微生物菌种保藏管理中心(China Center ofIndustrial Culture Collection,简称CICC)，菌种保藏编号为CICC 6117。其特点在于能够分泌P40和P75两种蛋白，这两种蛋白能够激活人肠道上皮细胞AKT蛋白的表达，缓解炎症因子引起的细胞凋亡和肠道屏障功能损伤。
实施例2大菱鲆合生元的制备：
将2.5％水苏糖与其它原料混匀后，经挤压干燥后制成硬颗粒饲料。将菌种于MRS培养基中培养过夜，取1ml菌液于3500g离心5min，PBS重悬两次后，酶标仪计算OD值，根据预先绘制好的菌种数量-OD值曲线计算菌种浓度，按照1×108CFU/g的浓度，将其喷洒至含水苏糖的饲料中并完全混合均匀。
所述水苏糖购置于中国食品发酵工业研究院有限公司(China NationalResearch Institute of Food and Fermentation industries Co.,Ltd)，提取自草石蚕，纯度≥80％。
所述干酪乳杆菌购置于中国工业微生物菌种保藏管理中心(China Center ofIndustrial Culture Collection，简称CICC)，菌种保藏编号为CICC 6117。
实施例3合生元提高大菱鲆免疫应答能力和肠道健康的应用
基础饲料中分别添加2.5％水苏糖、添加1×108CFU/g干酪乳杆菌以及同时添加2.5％水苏糖和1×108CFU/g干酪乳杆菌(合生元组)，对照组为不添加水苏糖及干酪乳杆菌的基础饲料，制成等氮等能的4组饲料，其中添加水苏糖和对照组的基础饲料配方如表5，干酪乳杆菌分别在基础饲料和含水苏糖的饲料中添加(两组未列出)。饲料原料经超微粉碎过60目筛网，各原料按配比定量后混合均匀，经双螺杆挤条机挤压出3mm粒径的饲料，在55℃的通风烤箱中干燥约12h，后贮存于-20℃冰箱中备用。按照1×108CFU/g的浓度，用喷壶将PBS重悬后的干酪乳杆菌分次均匀喷洒至含水苏糖的饲料上，每次喷涂后用混料袋将菌液与饲料完全混合均匀。制备好的饲料储存于4℃冰箱中可保存1周，饲料每周更换一次。每个处理3个养殖桶，每桶30尾鱼。所得试验数据采用平均值±标准误表示，用SPSS 22.0分析软件进行单因素方差分析，采用Tukey's检验方法比较组间差异显著性，P<0.05表明各组差异显著水平显著。
表5实验基础饲料配方
a鱼粉(干物质，％)：CP 72.28，CL 10.62；豆粕(干物质，％)：CP 52.03，CL 1.32；小麦粉(干物质，％)：CP 21.39，CL 1.85；谷朊粉(干物质，％)：CP 87.511，CL 0.93；玉米蛋白粉(干物质，％)：CP 65.30，CL 1.22；花生粕(干物质，％)：CP 56.89，CL 1.78；啤酒酵母(干物质，％)：CP 44.88，CL 1.74。
b维生素和矿物质预混合物(mg/kg)：维生素A醋酸酯，150；维生素D3，3.75；DL-α-维生素E，4000；维生素K3，500；硫胺素500；核黄素800；盐酸吡哆醇，600；维生素B12，2；L-抗坏血酸-2-单磷酸钠，10000；泛酸钙，2000；烟酸，3000；肌醇，10000；生物素，5；叶酸，170，水分<10％；铁，12000；锌，6000；铜，400；锰，3000；碘，100；钴，10；硒，10；镁，15000。
采用上述配方制成的饲料，养殖实验在山东蓬莱天源养殖场的流水养殖系统中开展，养殖周期为12周。每天向各处理组投喂相应的饲料。投喂频率：一日两次(08:00和17:00)，将大菱鲆慢慢投喂至表观饱食。海水从相邻海岸输入，经沉淀和砂滤处理后泵送至室内流水系统。在饲养期间，控制好环境因素，使之保持在大菱鲆生长的适宜条件。测定其对大菱鲆生长、饲料利用、血清免疫指标、肠道组织形态和肠道紧密连接蛋白基因表达量影响，结果如下：
表6合生元对大菱鲆生长性能及饲料利用的影响
注:所有数据表示为平均值±标准误。同一行中上标字母不同的数值存在显着差异(P<0.05)。
由表6可见，各组饲料并未对大菱鲆的生长性能和饲料效率产生显著影响(P>0.05)。
由图4可见，与单独添加干酪乳杆菌组相比，合生元组显著提高了大菱鲆后肠粘膜和内容物中干酪乳杆菌的数量(P<0.05)。
表7合生元对大菱鲆血清免疫指标的影响
注:同行数据上标字母不同者之间表示存在显著差异(P<0.05)。
由表7可见饲料中无论单独添加水苏糖还是合生元均显著提高了大菱鲆血清补体C3、C4、IgM和溶菌酶的活力(P<0.05)。饲料中单独添加干酪乳杆菌与添加合生元组均显著提高了大菱鲆血清补体C4和酸性磷酸酶的活性(P<0.05)，且酸性磷酸酶活性在合生元组中要显著高于单独添加水苏糖组(P<0.05)。
由图5可以看出，饲料中添加合生元能够显著提高大菱鲆后肠紧密连接蛋白zo-1、claudin-3、claudin-4、occludin和mlck的基因表达水平(P<0.05)，单独添加水苏糖能够显著提高zo-1和mlck的基因表达水平(P<0.05)，单独添加干酪乳杆菌各紧密连接蛋白基因表达水平与对照组相比无显著差异(P>0.05)。合生元组claudin-3和mlck基因表达水平显著高于单独添加干酪乳杆菌组(P<0.05)。
由图6可知，各组肠道上皮细胞完整、未见细胞溶解；细胞核排列整齐；未见明显的固有层及粘膜下层增宽、炎性细胞的浸润、核上空泡增多等现象，表明各组肠道组织结构完整性良好，无明显的炎症性损伤。由图7可知，与对照组相比，饲料中添加合生元能够显著提高大菱鲆肠道绒毛周长比(P<0.05)。
小结
饲料中添加合生元够显著提高后肠粘膜和内容物中特定益生菌菌株干酪乳杆菌的丰度；提高大菱鲆血清免疫相关酶活力以及补体和抗体含量；增加肠道绒毛周长比以及促进肠道紧密连接蛋白的基因表达，进而提高肠道吸收功能和防御能力。由此可见，上述发明可针对性地提高大菱鲆肠道特定益生菌丰度，进而改善大菱鲆的免疫应答水平和肠道健康状况，因此具有广阔应用前景。
上述基础饲料配方为模拟常用的商业饲料配方，其实施方式也仅为本发明较佳的具体实施方式，并非对本发明保护范围的限制，在能够满足大菱鲆正常生长的情况下，实施本发明的动态添加方案，均能达到本发明效果。任何在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变的动态实施方案，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (2)
1.一种含有合生元的大菱鲆饲料，其特征在于所述大菱鲆饲料由基础饲料和合生元组成，所述合生元中水苏糖在大菱鲆饲料中的质量分数为2.0-3.0％，所述合生元中的干酪乳杆菌在大菱鲆饲料中的浓度为1×107-1×109CFU/g；所述的水苏糖提取自唇形科草石蚕；所述的干酪乳杆菌购置于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏编号为CICC 6117。
2.根据权利要求1所述的大菱鲆饲料，其特征在于所述的大菱鲆饲料中的基础饲料成分及质量百分比为：鱼粉36.00％、豆粕15.68％、玉米蛋白粉8.00％、谷朊粉5.12％、花生粕3.20％、啤酒酵母2.5％、小麦粉14.13％、牛磺酸1％、复合氨基酸1.37％、鱼油8％、大豆卵磷脂1％、多维多矿预混料1％、氯化胆碱0.25％、乙氧基喹啉0.05％、丙酸钙0.1％。
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