CN112522154B - 一种枯草芽孢杆菌在生物防治黄柏枝枯病中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种用于抑制黄柏枝枯病的枯草芽孢杆菌，保藏编号为ATCC NO.6051，该菌株对黄柏枝枯病具有良好的防治效果。

Description

一种枯草芽孢杆菌在生物防治黄柏枝枯病中的应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，具体为涉及一种枯草芽孢杆菌及其在生物防治黄柏枝枯病中的应用。
背景技术
黄柏(别名：黄檗)是中药材中常用的一味中药，其为树皮内层经炮制后入药。味苦，性寒。清热解毒，泻火燥湿。主治急性细菌性痢疾、急性肠炎、急性黄疸型肝炎、泌尿系统感染等炎症。外用治火烫伤、中耳炎、急性结膜炎等。黄柏是芸香科黄檗属落叶乔木，树皮灰褐色至黑灰色，木栓层发达，柔软，内皮鲜黄色；小枝橙黄色或淡黄灰色，裸芽生于叶痕内，黄褐色，奇数羽状复叶，对生或近互生；花单性，雌雄异株，聚伞状圆锥花序顶生；花小，黄绿色，花瓣长圆形，子房倒卵圆形，浆果状核果近球形，成熟时黑色，有特殊香气与苦味；种子半卵形，带黑色。
黄柏枝枯病黄柏幼林的一个主要病害，发病非常普遍，幼林发病株率可达 60％以上。主要发生在1-2年生小枝上，侧枝也可发生。初期病斑灰褐色，圆形至长条形，下陷，边缘明显，后期病枝上密生灰黑色小点，为病菌分生孢子器。分生孢子器埋生于寄主表皮下，器壁基部淡黑褐色，顶部孔口处黑褐色至黑色。
随着社会经济的发展和人们环境保护意识的增强以及生物防治技术的愈加成熟，用生物防治的方法治理黄柏枝枯病极有可能成为取代化学防治的有效方法。然而目前现有技术中鲜有对黄柏枝枯病菌有抑制作用的菌株被报道，因此迫切需要筛选可用于生物防治黄柏枝枯病的菌株。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题，发明人通过对枯草芽孢杆菌菌种的大量筛选，获得一株对黄柏枝枯病病菌具有良好抑制作用的枯草芽孢杆菌，所述菌株保藏号为ATCCNO.6051。
本发明还同时提供了一种微生物制剂：为含有枯草芽孢杆菌ATCC NO.6051的发酵液。
本发明的另一方面，提供一种防治黄柏枝枯病的生物防治制剂，所述制剂包括枯草芽孢杆菌ATCC NO.6051。
所述的本发明的另一方面，提供一种防治黄柏枝枯病的生物防治方法，包括向具有溃疡病的杨树植株施用上述枯草芽孢杆菌ATCC NO.6051或者上述生物防治制剂。
所述的本发明的另一方面，还同时提供了枯草芽孢杆菌ATCC NO.6051及其发酵液的用途：抑制黄柏枝枯病病菌的生长。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明提供的防治黄柏枝枯病的枯草芽孢杆菌ATCC NO.6051能够有效防治黄柏枝枯病病菌的生长，可为微生物源农药开发提供优良的菌株，具有良好的应用前景。
具体实施方式
以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1黄柏枝枯病生防菌的筛选
1.取黄柏枝枯病病样，选取后期病枝，刮下枝上密生灰黑色小点病斑，研碎，于水中震荡10min,制成悬浮液，然后在9ml的无菌水中加入1ml悬浮液，再依次逐级稀释到10-7倍。上述得到的菌悬液，均匀涂于NA和PDA平板上，设2重复，在28℃恒温条件下培养3-7d，挑取不同性状的单个菌落，细菌移至 NA试管斜面保存待筛选使用。
2.将市售的枯草芽孢杆菌ATCC NO.6051、ATCC NO.11744、CGMCC NO.1.1080、CGMCC NO.1.406分别置于牛肉膏蛋白胨培养基中，30℃活化30h, 使用平板菌落对峙法来测定上述四种枯草芽孢杆菌对黄柏枝枯病病菌的抑制活性。测定方法:在配置好的PDA培养基的培养皿底部找到中心点，然后在其上划十字线，将直径为6mm的黄柏枝枯病病原菌菌饼接种到中心；将上述菌的单菌落分别接种到距离中心30mm的3个方向，剩余一个方向不接种，用作空白对照。在PDA培养基中心接种病原菌而在其他地方不接种来作为对照组。在对照组的病原菌铺满整个培养基平板时，再测量实验组中不同枯草芽孢杆菌对黄柏枝枯病病菌的拮抗宽度。每组试验做3个重复。
抑制菌丝生长率(％)＝(对照菌落的平均直径－处理菌落的平均直径)/ 对照菌落的平均直径×100％；
结果如下表所示：
表1不同枯草芽孢杆菌对黄柏枝枯病病菌的抑制率
Figure RE-GDA0002940285380000051
发明人从筛选中意外地发现枯草芽孢杆菌ATCC NO.6051对黄柏枝枯病病菌具有良好的抑制率，而菌株CGMCC NO.1.1080和CGMCC NO.1.406对于黄柏枝枯病病菌无明显抑制效果，菌株ATCC NO.11744对于黄柏枝枯病病菌抑制效果也较差，不适合进一步用作抑菌剂使用。
实施例2防治效果测试
将枯草芽孢杆菌菌株ATCC NO.6051按照本领域常规方法种子培养和小规模发酵培养，获得枯草芽孢杆菌菌株ATCC NO.6051发酵液，将发酵液菌种浓度调整为1×109/毫升菌液，用于1年生黄柏园地实验。
本试验在1年生黄柏园地中进行，施药时施药对象均处于黄柏枝枯病发病初期，共设3个实验组，分别为枯草芽孢杆菌菌株ATCC NO.6051发酵液10 倍液组、50％多菌灵可湿性粉剂800倍液、清水组(对照组)，每组处理黄柏 50株，每隔30天喷洒一次。最后一次施药后15d进行发病率调查，调查部位为全部小枝和侧枝部位。
结果如下表所示：
Figure RE-GDA0002940285380000061
结果显示，枯草芽孢杆菌菌株ATCC 11744发酵液和70％甲基硫菌灵可湿性粉剂对黄柏枝枯病防治效果相当，防治效果达到98％以上。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (2)

1.一种防治黄柏枝枯病的生物防治方法，其特征在于，包括向具有黄柏枝枯病的植株施用含有枯草芽孢杆菌的生物防治制剂，所述枯草芽孢杆菌保藏号为ATCC NO.6051。
2.一种枯草芽孢杆菌ATCC NO.6051在黄柏枝枯病生物防治中的应用。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109929782A (zh) * 2019-04-12 2019-06-25 江西省科学院微生物研究所 一种抑制拟茎点霉的枯草芽孢杆菌及其应用
CN110396492A (zh) * 2019-09-02 2019-11-01 新疆农业大学 一株核桃枝枯病拮抗细菌及其应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109929782A (zh) * 2019-04-12 2019-06-25 江西省科学院微生物研究所 一种抑制拟茎点霉的枯草芽孢杆菌及其应用
CN110396492A (zh) * 2019-09-02 2019-11-01 新疆农业大学 一株核桃枝枯病拮抗细菌及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Biocontrol of Bacillus subtilis against infection of Arabidopsis roots by Pseudomonas syringae is facilitated by biofilm formation and surfactin production;Harsh Pal Bais等;《Plant Physiol》;20031218;第134卷(第1期);参见第307-319页全文，尤其是第316页右栏第4段-第317页右栏第1段 *
黄柏、杜仲4种主要枝干病害的初步调查和鉴定;曹福祥;《经济林研究》;19931231(第S1期);参见第333-335页全文 *

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