CN112522128A

CN112522128A - 泛菌属wallisii Lumiteria菌株和包括该菌株培养液的组合物

Info

Publication number: CN112522128A
Application number: CN202010359672.7A
Authority: CN
Inventors: 金美善; 李东杰; 吕炫周; 姜承贤; 朴明三
Original assignee: Cosmax Inc
Current assignee: Cosmax Inc
Priority date: 2019-09-17
Filing date: 2020-04-29
Publication date: 2021-03-19
Anticipated expiration: 2040-04-29
Also published as: CN112522128B; KR102174525B1

Abstract

本公开涉及一种用于改善皮肤美容的组合物，其包括泛菌属(Pantoea)wallisii Lumiteria菌株和/或其菌株培养液。

Description

泛菌属wallisii Lumiteria菌株和包括该菌株培养液的组合物

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年9月17日提交的韩国专利申请No.10-2019-0114367的优先权和权益，其通过引用合并于此用于所有目的，如同在此完全阐述一样。

技术领域

本公开涉及一种用于改善皮肤美容的组合物，其包括泛菌属(Pantoea)wallisiiLumiteria菌株和/或其菌株培养液。

背景技术

皮肤的颜色主要取决于皮肤中存在的被称为黑色素(melanin)的色素含量。黑色素是由存在于皮肤的基底层中的作为黑色素生成细胞的黑素细胞(melanocyte)生物合成的。包括黑痣、雀斑、暗斑，和老年角化病等的过度色素沉着病与黑色素的异常积累有关，并且正在积极研究改善这种病的皮肤美白剂。

作为生成黑色素的主要酶的酪氨酸酶(tyrosinase)在将酪氨酸(tyrosine)转化为3、4-二羟基丙氨酸(多巴；DOPA)的步骤和之后将多巴转化为多巴醌(DOPA quinone)的步骤作为媒介。因此，当酪氨酸酶的表达增加时，使黑色素的生成也增加。相反，可以确定，当酪氨酸酶的表达受阻时，黑色素的生成受到抑制，而具有皮肤美白效果。已知诸如曲酸、熊果苷(arbutin)和对苯二酚(hydroquinone)的几种物质具有酪氨酸酶抑制活性。最常用为美白剂的熊果苷是与L-酪氨酸竞争性地应用的抑制剂。然而，它们具有由于处方系统的稳定性差而分解并着色，或在生物水平上的效能和效果的不分明和安全性问题的缺点。

皮肤的生态系统为微生物提供了各种形式的栖息处，且各种各样的微生物在皮肤上栖息。作为宿主的人类与微生物具有共生关系，并且已知微生物对宿主产生许多正面影响。皮肤形成诸如内凹部和特定的缝隙等的各种栖息处，且有助于多种微生物生长。基本上，皮肤形成一层物理膜，有助于抵御来自外部的潜在危险因素和毒性物质。皮肤是与外部环境的接触点，并且是包括真菌、细菌、病毒和幼虫等的各种微生物的集合所。微生物通过适应专用于物理化学功能的选择的缝隙来置备栖息地。其中，益生菌(Probiotics)是总称对人体起有益作用的微生物的术语，是对我们的身体给予益处(benefit)的微生物。迄今为止已知的大多数益生菌被称为乳酸菌，据报道它们显示出对人体的多种有益效能，但具体而言，关于皮肤常在菌与皮肤的相互关系的研究还是不足。

在这些背景下，本发明人为了克服所述现有技术的问题而进行了辛勤的研究努力，结果，确定了与含有作为皮肤常在菌的Lumiteria培养液作为有效成分的情况相比，显示出在皮肤美白和保湿改善上更卓越的效能。

发明内容

一方面提供一种泛菌属(Pantoea)wallisii Lumiteria菌株。

另一方面提供一种用于改善皮肤美容的化妆品组合物，其包括泛菌属wallisiiLumiteria菌株、其裂解物，或其培养液。

一方面提供一种泛菌属wallisii Lumiteria菌株。

所述泛菌属wallisii Lumiteria菌株可以为于2019年6月11日保藏于韩国微生物保藏中心，其保藏号为KCCM12560P。

所述泛菌属wallisii Lumiteria菌株可以为具有序列号1的16s rRNA的菌株。

所述泛菌属wallisii Lumiteria菌株可以通过从洗涤和灭菌的皮肤样品中分离出而获得。所述菌株在固体培养基中培养时，可以形成并生长浅黄色圆圆的菌落。在显微镜下观察时，所述菌株显示出杆状杆菌形态，并确定其不运动。

另一方面提供一种所述泛菌属wallisii Lumiteria菌株的培养液。

另一方面提供一种用于改善皮肤美容的食品组合物，其包括泛菌属wallisiiLumiteria菌株、其裂解物，或其培养液。

所述菌株为如上所述。

在本公开中使用的术语″培养液″是指包括泛菌属wallisii Lumiteria菌株通过在能够提供营养以使所述菌株能够在试管内生长和生存的培养基中培养一定时间而获得的菌株、其代谢物、额外的营养物等的整个培养基。另外，所述培养液可以指从通过培养菌株获得的菌体培养液中去除菌体的培养液。从所述培养液中去除菌体的液体被称为″上清液″，其通过将培养液放置一段时间并只取除沉淀在下层的部分之外的上层液体，通过过滤除去菌体，或将培养液离心以除去下层沉淀物来仅取上层液体而可获得。所述″菌体″是指本公开的菌株，包括从皮肤样品等中分离并挑选的菌株，或通过培养所述菌株来从培养液分离的菌株。所述菌体可以通过将培养液离心来取沉淀在下层的部分而获得，或者所述菌体由于通过重力而沉淀在培养液的下层，因此通过将培养液静置一定时间然后去除上部液体来获得。

在本公开中使用的术语″裂解物(lysate)″是通过破碎菌株的细胞壁而获得的产物，所述菌株的细胞壁可以自发地破碎或包括化学破碎或通过物理力破碎。

基于所属组合物的总重量，可以包括以下含量的泛菌属wallisii Lumiteria菌株：0.1重量％至30重量％，例如，0.1重量％至25重量％，0.1重量％至20重量％，0.1重量％至18重量％，0.1重量％至16重量％，0.1重量％至14重量％，0.5至20重量％，0.5重量％至18重量％，0.5重量％至16重量％，0.5重量％至14重量％，1重量％至20重量％，1重量％至18重量％，1重量％至16重量％，1重量％至14重量％，3重量％至20重量％，3重量％至18重量％，3重量％至16重量％，3重量％至14重量％。

所述组合物可以抑制酪氨酸酶活性或表达。具体地，所述组合物可以通过抑制酪氨酸酶活性或表达来表现出皮肤美白的效果。

所述组合物可以增加选自透明质酸合成酶3(HAS3)、丝聚合蛋白(filaggrin)，和紧密连接蛋白1抗体(Claudin 1)中至少一种的基因的表达。具体地，所述组合物可以通过增加选自透明质酸合成酶3、丝聚合蛋白，或紧密连接蛋白1抗体的表达来表现出增强皮肤屏障效果和皮肤保湿效果。

在本公开中使用的术语″改善皮肤美容″可以是皮肤美白、皮肤屏障增强，或皮肤保湿。由于泛菌属wallisii Lumiteria菌株与通常已知的美白成分(例如熊果苷)相比，具有更优异的皮肤美白、皮肤屏障增强，或皮肤保湿效果，因此包括所述泛菌属wallisiiLumiteria菌株的组合物可以用作用于皮肤美白、增强皮肤屏障，或皮肤保湿的组合物。

在本公开中使用的″皮肤美白″不仅意味着通过抑制黑色素色素的合成来增亮肤色，而且还可以改善由于紫外线、荷尔蒙、或遗传引起的皮肤色素过度沉着，例如暗斑和雀斑。

在本公开中使用的术语″增强皮肤屏障″可以表示增强位于皮肤的最外侧以防止水分和营养流失的皮肤屏障功能的任何作用。

在本公开中使用的术语″皮肤保湿″可以表示使皮肤保持水分或防止水分流失的任何作用。

所述组合物可以以有效量包括所述培养液作为有效成分。可以根据个体适当地选择所述有效量。所述有效量可以根据包括以下项的因素以及在生理至医学领域中熟知的其他因素来决定：疾病至疾病状况的严重程度、个体的年龄、体重、健康、性别、个体的对提取物的敏感度、施用时间、施用途径和排出比率、施用期间、与所述组合物混合或同时使用的其他组合物。

所述组合物还可以包括在化妆品学上或食品学上可接受的赋形剂或载体。所述载体可以是赋形剂、崩解剂、结合剂、润滑剂或其组合。所述赋形剂可以是微晶纤维素、乳糖、低取代羟基纤维素或其组合。所述崩解剂可以是淀粉乙醇酸钠、无水磷酸氢钙或其组合。所述结合剂可以是聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素、羟丙基纤维素或其组合。所述润滑剂可以是硬脂酸镁、二氧化硅、滑石或其组合。

所述组合物的剂型可以制成非口服施用剂型。非口服施用剂型可以是注射剂或皮肤外用剂。皮肤外用剂可以是乳膏、凝胶、软膏、皮肤乳化剂、皮肤悬浮液、经皮传递性贴片、含药绷带、乳液或其组合。所述皮肤外用剂可以适当混合乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸三钠、柠檬酸钠、多聚磷酸钠、偏磷酸钠、葡萄糖酸等的金属螯合剂、咖啡因、单宁、戊脉安、甘草提取物、光甘草定、大蓟果实的热水提取物、各种生药、生育酚乙酸酯、甘草酸、氨甲环酸及其衍生物或其盐等药剂、维生素C、抗坏血酸磷酸酯镁、抗坏血酸葡糖苷、熊果苷、曲酸、葡萄糖、果糖、海藻糖等的糖类。

所述化妆品组合物可制备为包括以下的剂型：化妆水(润肤液)、柔肤水、爽肤水、收敛剂(Astringent)、乳液、牛奶润肤露(milk lotion)、保湿乳液、营养液、按摩霜、营养霜、保湿霜、手霜、粉底、精华素、营养精华素、膜、肥皂、洁面泡沫、洁面乳、洁面霜、身体乳液、身体清洁液、悬浮液、凝胶、粉末、粘膏(paste)、面膜或片装面膜或喷雾组合物。可根据本领域常规方法制备此类剂型的组合物。所述化妆品组合物可以进一步包括保存剂、稳定剂、表面活性剂、溶剂、保湿剂、润肤剂、紫外线吸收剂、防腐剂、杀菌剂、抗氧化剂、pH调节剂、有机和无机颜料、香料、冷感剂或止汗剂。在不损害本发明的目的和效果的范围内，本领域技术人员可以容易地选择诸如上述保湿剂等的附加成分的混合量。

所述食品组合物可以制备成本领域已知的常规保健食品的剂型。所述食品组合物可以制备为如散剂、颗粒剂、片剂、丸剂、胶囊剂、悬浮液、油剂、糖浆剂、浸渍剂、液剂、萃取剂等的一般剂型，并制备为肉类、香肠、面包、巧克力、糖果类、零食类、饼干类、比萨饼、拉面、其他面类、口香糖类、果冻、包括冰淇淋类的乳制品、各种汤、饮料、茶、饮剂、酒精饮料和维生素复合物的等任意的保健食品形式。为了将所述保健食品制成制剂，可以使用食品学上可接受的载体或添加剂，并且可以将本领域已知的任何载体或添加剂用于制备想要制备的剂型。作为所述添加剂，可以含有各种营养剂、维生素、电解质、调味剂、着色剂、果胶酸及其盐、藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、醇、用于碳酸饮料的碳酸化剂等。此外，所述添加剂可以含有用于制备天然果汁、果汁饮料和蔬菜饮料的果肉。这些添加剂成分可以单独使用或组合使用。

另一方面提供一种用于改善个体的皮肤美容的方法，其包括向个体施用所述组合物的步骤。所述组合物为如上所述。

具体地，所述方法可以为使个体的皮肤美白的方法、增强个体的皮肤屏障功能的方法，或有效地保持个体的皮肤水分或防止水分流失的方法。

所述术语″施用的″、″导入的″，或″移植的″可互换使用，并可以指实现根据一个实施例的组合物被至少部分局部化至所需部位的方法或根据路径将根据一个实施例的组合物布置至个体内。根据一个实施例的组合物的培养液或培养液成分的至少一部分可通过任何传送至活体中的期望位置的合适途径来施用。

所述施用是可通过本领域已知的方法来执行。施用可以通过例如静脉内、肌肉内、口服、经皮(transdermal)、粘膜、鼻内(intranasal)、气管内或皮下施用的途径，以任何方式直接向个体执行。所述施用可以全身或局部执行。

所述菌株的施用量可以根据诸如制剂方法、施用方法、个体的年龄、体重、性别、病理状况、食物、施用时间、施用途径、排泄速度及反应灵敏性的因素来不同地处方，本领域技术人员将理解，可以考虑这些因素以适当调整施用量。

附图说明

图1为确定Lumiteria培养液的抑制黑色素生物合成效果的图表。

图2为以肉眼确定的Lumiteria培养液的抑制黑色素生物合成效果的图。

图3为确定Lumiteria培养液的抑制酪氨酸酶活性效果的图表。

图4为确定Lumiteria培养液的抑制酪氨酸酶表达效果的图表。

图5为确定Lumiteria培养液的增加作为保湿因子的透明质酸合成酶3(HAS3)的表达效果的图表。

图6为确定Lumiteria培养液的增加作为保湿因子的透丝聚合蛋白(FLG)的表达效果的图表。

图7为确定Lumiteria培养液的增加作为保湿因子的紧密连接蛋白1抗体(CLD)的表达效果的图表。

具体实施方式

在下文中，将通过实施例更详细地描述本公开。然而，这些实施例是为了描述本公开，本公开的范围不限于这些实施例。

实施例1.Lumiteria菌株的分离

将通过用无菌蒸馏水洗涤健康的女性皮肤而获得的样本(人表皮角质形成细胞)接种在R2A(Reasoner′s 2A)培养基(美国BD公司(Becton Dickinson)，科基斯维尔(Cockeysville)，MD)中。接种后，将在28℃的培养箱中培养48小时后形成的100个菌落纯粹分离并培养，并且将其在28℃的培养箱中再培养48小时。对培养完成的菌落实施16s rRNA基因序列鉴定。策划出此时使用的引物为设计(27F-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG，1492R-GGTTACCTTGTTACGACTT)，以仅针对细菌反应并增幅。PCR增幅在以下的条件执行30个周期：在95℃执行1分钟，在55℃执行1分钟，在75℃执行1分30秒。最后，在72℃下处理8分钟后，在4℃下保存。PCR反应完成后，使用ABI-3730XL(ABI，美国)确定分离和培养的物种的DNA序列。将在分离和培养的微生物菌落中确定的16S rRNA部位的碱基序列与以在美国国立生物技术信息中心(NCBI，National Center for Biotechnology Information)主页中提供的BLAST程序注册的其他菌株进行比较和分析。仅筛选和使用同一性低于97％的新物种，其中，选择同一性为94％以下的新型微生物(以下称为″Lumiteria″)。筛选出的Lumiteria菌株于2019年6月11日保藏在韩国微生物保藏中心，并获得保藏号KCCM12560P，筛选出的Lumiteria菌株具有序列1(互补DNA)的16s rRNA序列，如下表1所示。

【表1】

实施例2.确定筛选的Lumiteria菌株的分类学性质和菌学的性质

在所述实施例1中筛选的Lumiteria菌株在固体培养基中培养时，形成淡黄色圆形的菌落，观察到在形成的菌落周围形成大量的具有粘性的物质，并且在72小时时粘液性物质的生成最大。另外，当在显微镜下观察时Lumiteria菌株显示出杆状杆菌形态，并且是不运动的。

实施例3.Lumiteria培养液的制备

Lumiteria菌株培养液通过使用胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)培养基在50ml试管中实施增菌培养来制备。增菌培养通过以100rpm/分悬浮菌株来进行培养，并且培养在黑暗条件持续的条件下进行。所述培养期间的温度保持在约35℃，培养约72小时后，终止培养。然后，通过使用0.45μm的过滤器对所述培养液进行过滤并实施灭菌，以制备Lumiteria培养液。

试验例1.确定Lumiteria培养液的抑制黑色素生物合成效果

将作为鼠色素细胞的B16-F10(小鼠黑素瘤)细胞(ATCC)悬浮在2ml的包括10％胎牛血清(FBS)的DMEM(HYCLONE)，并且以1x10⁵细胞/孔接种于6孔板中，然后将细胞在37℃和5％二氧化碳下培养24小时，直至40％至50％的细胞粘附在孔的底部。培养后，通过以0.1μM的浓度处理α-黑素细胞刺激素(α-MSH：α-melanocyte stimulating hormone)来诱导黑色素生成，并且以1％或10％的浓度添加Lumiteria培养液，然后在37℃下培养72小时。已知抑制黑色素生成的熊果苷(100ppm，西格玛奥德里奇(Sigma aldrich))被用作阳性对照组。进一步培养后，以磷酸缓冲盐溶液(PBS：phosphate buffered saline，威健(WELGENE))洗涤，并用胰蛋白酶(trypsin，Gibco)回收。然后，通过血细胞计数器(hematocytometer，MARIENFELD)计数来在每个处理组收集相同数目的细胞(1×10^６细胞/mL)，并以1000rpm离心10分钟来仅获得细胞。将回收的细胞在60℃下干燥1小时，然后放入100μL的包括10％二甲基亚砜(DMSO)的1M氢氧化钠(NaOH)液(西格玛奥德里奇)来获得包括细胞中的黑色素的溶液。用酶标仪(Microplate reader，victor3)测量所述溶液在490nm的吸光度，以评估黑色素生成的抑制率。评估式如以下计算式1，结果示于下表2以及图1和图2。

[计算式1]

黑色素含量(Melanin contents)(％)＝(每个样品处理组的吸光度)/(α-MSH处理组的吸光度)×100(％)

【表2】

结果，如图1和表2所示，当仅处理α-MSH的对照组的黑色素生成量为100％时，在Lumiteria培养液分别以1％和10％的浓度处理的情况下，确定了相比现时被称为黑色素生成抑制物质的熊果苷，具有更优异的黑色素生成抑制效果。

另外，如图2所示，根据以肉眼观察通过离心获得的细胞的颜色变化的结果，通过与仅处理α-MSH的对照组相比，在Lumiteria培养液分别以1％和10％的浓度处理的情况下显示明显的色彩减少，并确定比作为阳性对照组的熊果苷显示更浅的颜色。

试验例2.确定Lumiteria培养液的酪氨酸酶活性抑制效果

将作为鼠色素细胞的B16-F10细胞悬浮在2ml的包括10％FBS的DMEM，并且以1x10⁵细胞/孔接种于6孔板中，然后将细胞在37℃和5％二氧化碳下培养24小时，直至40％至50％的细胞粘附在孔的底部。培养后，通过以0.1μM的浓度处理α-MSH，并且以1％或10％的浓度添加Lumiteria培养液，然后在37℃下培养72小时。熊果苷用作阳性对照组。进一步培养后，以磷酸缓冲盐溶液洗涤，并用胰蛋白酶回收。10000rpm离心5分钟回收的细胞通过包括蛋白酶抑制剂(protease inhibitor，西格玛奥德里奇)的RIPA缓冲液(Radio-immunoprecipitation assay buffer)在37℃下溶解细胞1小时。再一次以10000rpm离心15分钟来获得上清液，并使用Brad-ford(Bio-Rad)测定蛋白浓度。将每个样品混合20μg蛋白质和180μL的2mM L-DOPA(sigma)，并以磷酸缓冲盐溶液将最终容量调整为200μL，且置于96孔微孔板(96-well microplate)，然后在37℃下进行反应90分钟。反应后，测定酪氨酸酶活性在490nm处的吸光度，来评估酪氨酸酶活性抑制率。评估式如以下计算式2，结果示于下表3和图3。

[计算式2]

酪氨酸酶活性(％)＝(每个样品处理组的吸光度)/(α-MSH处理组的吸光度)×100(％)

【表3】

结果，如图3和表3所示，当仅处理α-MSH的对照组的酪氨酸酶活性为100％时，在Lumiteria培养液分别以1％和10％的浓度处理的情况下，酪氨酸酶活性被显着抑制，确定其比作为阳性对照组的熊果苷具有更优异的效果。

试验例3.确定Lumiteria培养液的酪氨酸酶表达抑制效果

为了测量Lumiteria培养液的酪氨酸酶基因表达抑制效果，在以下条件下在作为鼠色素细胞的B16-F10细胞中进行了试验。将作为鼠色素细胞的B16-F10细胞悬浮在2ml的包括10％FBS的DMEM，并且以1x10⁵细胞/孔接种于6孔板中，然后将细胞在37℃和5％二氧化碳下培养24小时，直至40％至50％的细胞粘附在孔的底部。培养后，通过以0.1μM的浓度处理α-MSH，并且以1％或10％的浓度添加Lumiteria培养液，然后在37℃下培养72小时。熊果苷用作阳性对照组。然后，在每个样品的细胞中通过使用TRIZOL试剂(RNA提取试剂(RNAiso)，达卡拉(DAKARA)，日本)来分离核糖核酸(RNA)后，使用仪器(nanodrop)在260nm处定量RNA，然后分别使用2μg的RNA在增幅器中合成互补脱氧核糖核酸(cDNA)(C1000 ThermalCycler，Bio-Rad)。对合成的cDNA通过使用添加了作为目标蛋白质的酪氨酸酶引物和作为花青染料的赛博格林(SYBR Green supermix，应用生物系统(Applied Biosystems))的混合物在实时PCR仪(RT-PCR)进行实时聚合酶链反应，以最终评估酪氨酸酶基因的表达程度。通过补正β-肌动蛋白基因来最终分析基因的表达量，并且分析结果示于表3。所述试验中使用的的引物的序列显示在下表4中。

【表4】

结果，根据图4，当仅处理α-MSH对照组的酪氨酸酶相对表达水平为1.0时，在Lumiteria培养液分别以1％和10％的浓度处理的情况下，酪氨酸酶的相对表达水平小于0.1，这显着抑制了酪氨酸酶的表达，确定了与作为阳性对照组的熊果苷相比，可以更有效地抑制酪氨酸酶的表达。

试验例4.确定Lumiteria培养液的保湿因子表达促进效果

为了测量Lumiteria培养液的保湿因子基因表达促进效果，将作为人角质形成细胞株(human keratinocyte)的人永生化角质形成细胞(HaCaT)在包括10％FBS的DMEM培养基(Dulbecco’ smodified Eagle’s Medium，Gibco 1210-0038)中培养，培养在37℃和5％二氧化碳的培养基中进行。所述培养的细胞株中以1％或10％的浓度处理Lumiteria培养液。作为阳性对照组，处理1Mm的诱导保湿因子透明质酸合成酶3(HAS3)的表达增加的视黄醇。然后，再进一步培养HaCaT细胞24小时后，在每个样品的细胞中通过使用TRIZOL试剂(RNA提取试剂(RNA iso)，达卡拉(DAKARA)，日本)来分离RNA后，使用仪器(nanodrop)在260nm处定量RNA，然后分别使用2μg的RNA在增幅器中合成cDNA(C1000 Thermal Cycler，Bio-Rad)。合成的cDNA通过使用添加了作为与增强皮肤屏障和保湿有关的因子的HAS3、丝聚合蛋白(FLG：filaggrin)，和紧密连接蛋白1抗体(CLD：Claudin 1)引物和作为花青染料的赛博格林的混合物在RT-PCR仪进行实时聚合酶链反应，以最终评估HAS3、FLG，和CLD基因的表达程度。通过补正β-肌动蛋白基因来最终分析基因的表达量，并且分析结果示于图5至图7。使用的引物示于下表5。

【表5】

结果，如图5所示，当仅处理α-MSH的对照组的HAS3的相对表达水平为1.0时，在Lumiteria培养液分别以1％的浓度处理的情况下，HAS3表达增加约2.5倍，特别地，确定了当处理10％浓度的Lumiteria培养液时，HAS3表达显着增加了约5倍。

另外，如图6所示，当仅处理α-MSH的对照组的FLG的相对表达水平为1.0时，在Lumiteria培养液以10％的浓度处理的情况下，确定了FLG表达显着增加了约25倍。

另外，如图7所示，当仅处理α-MSH的对照组的CLD的相对表达水平为1.0时，在Lumiteria培养液以1％的浓度处理的情况下，CLD表达增加了约两倍，特别地，在Lumiteria培养液以10％的浓度处理的情况下，确定了CLD表达显着增加了约4倍。

根据所述结果，可以确定，Lumiteria培养液通过显着增加作为皮肤保湿主要基因的HAS3、丝聚合蛋白，和紧密连接蛋白1抗体基因的表达，显示出优异的皮肤保湿效果。

根据上述结果，可以确定所述化妆品组合物通过包括Lumiteria培养液作为有效成分，显示出显着提高的皮肤美白效果和皮肤保湿效果。

【保藏号】

保藏机构名：韩国微生物保藏中心(国外)

保藏号：KCCM12560

保藏日期：20190611

菌株名称：泛菌属(Pantoea)wallisii Lumiteria菌株(Pantoea wallisiiLumiteria)

根据一方面的新型泛菌属wallisii Lumiteria菌株中，通过应用菌株的各种活性，可以用于改善皮肤美容。

根据另一方面的用于改善皮肤美容的组合物通过包括所述泛菌属wallisiiLumiteria菌株的培养液作为有效成分可以显示出显着改善的皮肤美白和皮肤保湿效果。

序列表

<110> 科丝美诗株式会社

<120> 泛菌属wallisii Lumiteria菌株和包括该菌株培养液的组合物

<130> PX061123

<150> KR 10-2019-0114367

<151> 2019-09-17

<160> 13

<170> KoPatentIn 3.0

<210> 1

<211> 1447

<212> RNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 泛菌属wallisii Lumiteria (KCCM12560P) 16s rRNA

<400> 1

gccgcttcgc gcgctacaca tgcagtcgac ggcagcacag aagagcttgc tctttgggtg 60

gcgagtggcg gacgggtgag taatgtctgg gaaactgccc gatggagggg gataactact 120

ggaaacggta gctaataccg cataacgtcg caagaccaaa gtgggggacc ttcgggcctc 180

acaccatcgg atgtgcccag atgggattag ctagtaggtg gggtaatggc tcacctaggc 240

gacgatccct agctggtctg agaggatgac cagccacact ggaactgaga cacggtccag 300

actcctacgg gaggcagcag tggggaatat tgcacaatgg gcgcaagcct gatgcagcca 360

tgccgcgtgt atgaagaagg ccttcgggtt gtaaagtact ttcagcgggg aggaaggcgg 420

tgaggttaat aacctcgccg attgacgtta cccgcagaag aagcaccggc taactccgtg 480

ccagcagccg cggtaatacg gagggtgcaa gcgttaatcg gaattactgg gcgtaaagcg 540

cacgcaggcg gtctgttaag tcagatgtga aatccccggg cttaacctgg gaactgcatt 600

tgaaactggc aggcttgagt ctcgtagagg ggggtagaat tccaggtgta gcggtgaaat 660

gcgtagagat ctggaggaat accggtggcg aaggcggccc cctggacgaa gactgacgct 720

caggtgcgaa agcgtgggga gcaaacagga ttagataccc tggtagtcca cgccgtaaac 780

gatgtcgact tggaggttgt gcccttgagg cgtggcttcc ggagctaacg cgttaagtcg 840

accgcctggg gagtacggcc gcaaggttaa aactcaaatg aattgacggg ggcccgcaca 900

agcggtggag catgtggttt aattcgatgc aacgcgaaga accttacctg gccttgacat 960

ccagagaact tagcagagat gctttggtgc cttcgggaac tctgagacag gtgctgcatg 1020

gctgtcgtca gctcgtgttg tgaaatgttg ggttaagtcc cgcaacgagc gcaaccctta 1080

tcctttgttg ccagcgattc ggtcgggaac tcaaaggaga ctgccggtga taaaccggag 1140

gaaggtgggg atgacgtcaa gtcatcatgg cccttacggc cagggctaca cacgtgctac 1200

aatggcgcat acaaagagaa gcgacctcgc gagagcaagc ggacctcata aagtgcgtcg 1260

tagtccggat tggagtctgc aactcgactc catgaagtcg gaatcgctag taatcgtaga 1320

tcagaatgct acggtgaata cgttcccggg ccttgtacac accgcccgtc acaccatggg 1380

agtgggtgca aaagaagtag gtagcttaac ctttcgggag ggcgctacca cttttgatca 1440

agtggtc 1447

<210> 2

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 酪氨酸酶引物_正方向

<400> 2

ttacagctga caagggtctt 20

<210> 3

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 酪氨酸酶引物_逆方向

<400> 3

acataccttg aaccgctaga 20

<210> 4

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> β-肌动蛋白引物_正方向

<400> 4

cggttccgat gccctgaggc 20

<210> 5

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> β-肌动蛋白引物_逆方向

<400> 5

cgtcacactt catgatggaa 20

<210> 6

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> HAS3引物_正方向

<400> 6

cttaagggtt gcttgcttgc 20

<210> 7

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> HAS3引物_逆方向

<400> 7

gttcgtggga gatgaaggaa 20

<210> 8

<211> 21

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 丝聚合蛋白引物_正方向

<400> 8

agtgcactca gggggctcac a 21

<210> 9

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 丝聚合蛋白引物_逆方向

<400> 9

ccggcttggc cgtaatgtgt 20

<210> 10

<211> 33

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 紧密连接蛋白1引物_正方向

<400> 10

gctctagaat tccgagcgag tcatggccaa cgc 33

<210> 11

<211> 33

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 紧密连接蛋白1引物_逆方向

<400> 11

gctctagaat tctcacacgt agtctttccc gct 33

<210> 12

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> β-肌动蛋白引物_正方向

<400> 12

ggccatctct tgctcgaagt 20

<210> 13

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> β-肌动蛋白引物_逆方向

<400> 13

gacaccttca acaccccagc 20

Claims

1.一种泛菌属(Pantoea)wallisii Lumiteria菌株，其保藏号为KCCM12560P。

2.根据权利要求1所述的菌株，其具有序列号1的16s rRNA基因。

3.一种根据权利要求1所述的菌株的培养液。

4.一种用于改善皮肤美容的化妆品组合物，其包括泛菌属wallisii Lumiteria菌株、其裂解物、或其培养液作为有效成分。

5.根据权利要求4所述的用于改善皮肤美容的化妆品组合物，其中，所述菌株是以保藏号为KCCM12560P来保藏的菌株。

6.根据权利要求4所述的用于改善皮肤美容的化妆品组合物，其中，所述培养液为从通过培养菌株而获得的菌体培养液中去除菌体而获得。

7.根据权利要求4所述的用于改善皮肤美容的化妆品组合物，其增加选自透明质酸合成酶3(HAS3)、丝聚合蛋白(filaggrin)、和紧密连接蛋白1抗体(Claudin 1)中至少一种的基因的表达，或抑制酪氨酸酶(tyrosinase)的活性或表达。

8.根据权利要求4所述的用于改善皮肤美容的化妆品组合物，其中，所述皮肤美容改善是增强皮肤屏障、皮肤保湿、或皮肤美白。

9.一种用于改善皮肤美容的食品组合物，其包括泛菌属wallisii Lumiteria菌株、其裂解物、或其培养液作为有效成分。