CN112515999A - 一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明是一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物及其制备方法，除螨祛痘组合物的具体组成成分及其质量百分比为：橄榄提取物25‑40％，苦参提取物10‑20％，金银花提取物5‑15％，细胞因子冻干粉1‑2％，其余成分为纯化水。所述橄榄提取物是对高纯度橄榄油进行分子改性、离子催化分离而得。所述细胞因子冻干粉是干细胞培养液经过冷冻干燥技术制得。本发明具有显著的除螨、祛痘、抑菌、抗炎、清热解毒、修复受损肌肤、消除痘印等功效，且具有较高的安全性。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品制备的技术领域，尤其涉及一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物及其制备方法。
背景技术
痤疮是毛囊皮脂腺的一种慢性炎症性皮肤病，别名为“青春痘”、“暗疮”或“粉刺”，临床症状以面部的粉刺、丘疹、脓疱、结节等多形性皮损为特点。痤疮的病理形态发生于皮肤的最表层，它不同于美白、黑斑和皱纹等发生在皮肤的内层，它给人们的生活造成了严重的影响：1、暂时性伤痕：皮肤产生红色痕迹称为红斑。2、永久性伤疤：青春痘会留下永久的凹洞等痕迹，当发炎程度较重伤害较多真皮层的胶原蛋白时，会使皮肤塌陷而留下凹洞；3、心理伤害：患有青春痘的人较容易与社会脱节、缺乏自尊心、缺乏自信、给人坏印象、尴尬、沮丧、愤怒、挫折、较高失业率等现象。痤疮的产生主要与皮脂腺分泌增多、雄激素释放增多、毛囊皮脂腺堵塞、发炎、痤疮丙酸杆菌的增殖相关，还同环境、心理、遗传及其他微生物感染有关。因此，祛痘常以抗炎、降低雄激素、抑制痤疮丙酸杆菌及其他微生物的生长为主。
蠕形螨虫包括毛囊蠕形螨(简称长螨)和皮脂蠕形螨(简称短螨)两种。毛囊蠕形螨寄生于毛囊；皮脂蠕形螨寄生于皮脂腺，以吸食皮脂为生。蠕形螨是人体面部皮肤的永久性寄生虫。蠕形螨大量繁殖容易将皮肤表面病原微生物带入毛囊、皮脂腺引起继发感染，导致毛囊炎、皮脂腺炎，即临床表现的青春痘。因此具有抗痤疮相关微生物和除螨的功效成分对祛痘产品尤为重要。其中除螨主要以物理和药物的治疗方式为主，而且大多数人对专门的物理和药物治疗有着天然的抗拒，因此开发温和无刺激的日用除螨祛痘产品是未来发展的重大趋势。
目前常用的眼部除螨剂中，外用的有茶树精油、硝唑霜、苯甲酸苄酯乳剂、二氯苯醚菊酯霜剂和硫磺软膏等；内服药物有甲硝唑和伊维菌素等，但是这些治疗药物存在多种问题，例如刺激性强、容易过敏(如茶树精油)，抗生素药物易产生耐药性(如伊维菌素)，价格昂贵。
发明内容
本发明旨在解决现有技术的不足，而提供一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物及其制备方法。
本发明为实现上述目的，采用以下技术方案：
一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物，具体组成成分及其质量百分比为：
橄榄提取物25-40％，苦参提取物10-20％，金银花提取物5-15％，细胞因子冻干粉1-2％，其余成分为纯化水。
所述橄榄提取物是对高纯度橄榄油进行分子改性、离子催化分离而得。
所述细胞因子冻干粉是干细胞培养液经过冷冻干燥技术制得。
上述富含细胞因子的除螨祛痘组合物的制备方法，具体步骤为：
S1、橄榄提取物的制备
橄榄油经检验消毒后进入分子改性设备反应，与此同时压缩机降温，反应结束后进入膜分离设备，90％以上的高有效成分经过检验后进入混合搅拌罐；
S2、苦参提取物的制备
先将苦参磨成粗粉，然后将苦参粗粉与去离子水按重量与体积的比例为1:15混合，煮沸提取2次，每次1.5h，收集合并2次提取液，滤过，浓缩至密度1.15g/cm3，得苦参提取物；
S3、金银花提取物的制备
先将金银花磨成粗粉，然后将金银花粗粉与去离子水按重量与体积的比例为1:15混合，煮沸提取2次，每次1.5h，收集合并2次提取液，滤过，浓缩至密度1.15g/cm3，得金银花提取物；
S4、细胞因子冻干粉的制备
传代培养人间充质干细胞至P3代，待P3代细胞细胞培养基中培养至其覆盖率≥80％，收集无菌的干细胞培养上清液，4℃保存或-20℃冻存备用；
将收集到的无菌的干细胞培养上清液按照比例加入赋形剂，充分溶解；
溶解后的培养液在-20℃预冷冻8h，然后通过冷冻干燥机冷冻干燥，获得细胞因子冻干粉；
S5、除螨祛痘组合物的制备
将橄榄提取物、苦参提取物、金银花提取物、细胞因子冻干粉、无菌水按比例搅拌均匀后即得除螨祛痘组合物。
步骤S4中，加入的赋形剂为甘露醇和右旋糖酐。
步骤S4中，培养的条件如下：温度为37℃、二氧化碳浓度为5％、湿度为99％。
步骤S4中，细胞培养基为美国ScienCell无血清培养基。
本发明的有益效果是：本发明具有显著的除螨、祛痘、抑菌、抗炎、清热解毒、修复受损肌肤、消除痘印等功效，且具有较高的安全性。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明：
具体实施例1：
一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物，具体组成成分及其质量百分比为：
橄榄提取物40％，苦参提取物15％，金银花提取物15％，细胞因子冻干粉2％，其余成分为纯化水。
所述橄榄提取物是对高纯度橄榄油进行分子改性、离子催化分离而得。
所述细胞因子冻干粉是干细胞培养液经过冷冻干燥技术制得。
上述富含细胞因子的除螨祛痘组合物的制备方法，具体步骤为：
S1、橄榄提取物的制备
橄榄油经检验消毒后进入分子改性设备反应，与此同时压缩机降温，反应结束后进入膜分离设备，90％以上的高有效成分经过检验后进入混合搅拌罐；
S2、苦参提取物的制备
先将苦参磨成粗粉，然后将苦参粗粉与去离子水按重量与体积的比例为1:15混合，煮沸提取2次，每次1.5h，收集合并2次提取液，滤过，浓缩至密度1.15g/cm3，得苦参提取物；
S3、金银花提取物的制备
先将金银花磨成粗粉，然后将金银花粗粉与去离子水按重量与体积的比例为1:15混合，煮沸提取2次，每次1.5h，收集合并2次提取液，滤过，浓缩至密度1.15g/cm3，得金银花提取物；
S4、细胞因子冻干粉的制备
传代培养人间充质干细胞至P3代，待P3代细胞细胞培养基中培养至其覆盖率≥80％，收集无菌的干细胞培养上清液，4℃保存或-20℃冻存备用；
将收集到的无菌的干细胞培养上清液按照比例加入赋形剂，充分溶解；
溶解后的培养液在-20℃预冷冻8h，然后通过冷冻干燥机冷冻干燥，获得细胞因子冻干粉；
S5、除螨祛痘组合物的制备
将橄榄提取物、苦参提取物、金银花提取物、细胞因子冻干粉、无菌水按比例搅拌均匀后即得除螨祛痘组合物。
步骤S4中，加入的赋形剂为甘露醇和右旋糖酐。
步骤S4中，培养的条件如下：温度为37℃、二氧化碳浓度为5％、湿度为99％。
步骤S4中，细胞培养基为美国ScienCell无血清培养基。
具体实施例2：
一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物，具体组成成分及其质量百分比为：
橄榄提取物25％，苦参提取物20％，金银花提取物10％，细胞因子冻干粉1％，其余成分为纯化水。
所述橄榄提取物是对高纯度橄榄油进行分子改性、离子催化分离而得。
所述细胞因子冻干粉是干细胞培养液经过冷冻干燥技术制得。
上述富含细胞因子的除螨祛痘组合物的制备方法，具体步骤为：
S1、橄榄提取物的制备
橄榄油经检验消毒后进入分子改性设备反应，与此同时压缩机降温，反应结束后进入膜分离设备，90％以上的高有效成分经过检验后进入混合搅拌罐；
S2、苦参提取物的制备
先将苦参磨成粗粉，然后将苦参粗粉与去离子水按重量与体积的比例为1:15混合，煮沸提取2次，每次1.5h，收集合并2次提取液，滤过，浓缩至密度1.15g/cm3，得苦参提取物；
S3、金银花提取物的制备
先将金银花磨成粗粉，然后将金银花粗粉与去离子水按重量与体积的比例为1:15混合，煮沸提取2次，每次1.5h，收集合并2次提取液，滤过，浓缩至密度1.15g/cm3，得金银花提取物；
S4、细胞因子冻干粉的制备
传代培养人间充质干细胞至P3代，待P3代细胞细胞培养基中培养至其覆盖率≥80％，收集无菌的干细胞培养上清液，4℃保存或-20℃冻存备用；
将收集到的无菌的干细胞培养上清液按照比例加入赋形剂，充分溶解；
溶解后的培养液在-20℃预冷冻8h，然后通过冷冻干燥机冷冻干燥，获得细胞因子冻干粉；
S5、除螨祛痘组合物的制备
将橄榄提取物、苦参提取物、金银花提取物、细胞因子冻干粉、无菌水按比例搅拌均匀后即得除螨祛痘组合物。
步骤S4中，加入的赋形剂为甘露醇和右旋糖酐。
步骤S4中，培养的条件如下：温度为37℃、二氧化碳浓度为5％、湿度为99％。
步骤S4中，细胞培养基为美国ScienCell无血清培养基。
具体实施例3：
一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物，具体组成成分及其质量百分比为：
橄榄提取物35％，苦参提取物10％，金银花提取物5％，细胞因子冻干粉1.5％，其余成分为纯化水。
所述橄榄提取物是对高纯度橄榄油进行分子改性、离子催化分离而得。
所述细胞因子冻干粉是干细胞培养液经过冷冻干燥技术制得。
上述富含细胞因子的除螨祛痘组合物的制备方法，具体步骤为：
S1、橄榄提取物的制备
橄榄油经检验消毒后进入分子改性设备反应，与此同时压缩机降温，反应结束后进入膜分离设备，90％以上的高有效成分经过检验后进入混合搅拌罐；
S2、苦参提取物的制备
先将苦参磨成粗粉，然后将苦参粗粉与去离子水按重量与体积的比例为1:15混合，煮沸提取2次，每次1.5h，收集合并2次提取液，滤过，浓缩至密度1.15g/cm3，得苦参提取物；
S3、金银花提取物的制备
先将金银花磨成粗粉，然后将金银花粗粉与去离子水按重量与体积的比例为1:15混合，煮沸提取2次，每次1.5h，收集合并2次提取液，滤过，浓缩至密度1.15g/cm3，得金银花提取物；
S4、细胞因子冻干粉的制备
传代培养人间充质干细胞至P3代，待P3代细胞细胞培养基中培养至其覆盖率≥80％，收集无菌的干细胞培养上清液，4℃保存或-20℃冻存备用；
将收集到的无菌的干细胞培养上清液按照比例加入赋形剂，充分溶解；
溶解后的培养液在-20℃预冷冻8h，然后通过冷冻干燥机冷冻干燥，获得细胞因子冻干粉；
S5、除螨祛痘组合物的制备
将橄榄提取物、苦参提取物、金银花提取物、细胞因子冻干粉、无菌水按比例搅拌均匀后即得除螨祛痘组合物。
步骤S4中，加入的赋形剂为甘露醇和右旋糖酐。
步骤S4中，培养的条件如下：温度为37℃、二氧化碳浓度为5％、湿度为99％。
步骤S4中，细胞培养基为美国ScienCell无血清培养基。
本发明的橄榄提取物具有杀菌、抑菌、消炎、镇痛、降温等功效，不含有毒有害的化学物质，安全环保。橄榄提取物富含多种具有抑菌功效的活性成分，具有广谱抑菌效果和抗氧化功能，能有效抑制化妆品生产或使用过程中被金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、沙门氏菌等菌种污染，同时可避免化妆品与空气接触发生氧化，添加到化妆品中可以发挥保湿、美白、抗痘、抑菌、消炎、抗衰老的功效。
本发明的苦参提取物具有抗菌消炎的作用，可有效杀除螨虫、丙酸杆菌等，缓解皮肤瘙痒。
本发明的金银花提取物具有抑菌、抗炎、清热解毒的作用。
本发明的细胞因子冻干粉能促进受损细胞的修复和细胞再生，促使因螨虫痤疮造成的痘印肌肤修复再生，消除痘印，使肌肤顺滑有光泽。细胞因子通过低温冷冻干燥细胞培养液制备获得，充分保证了其中所含细胞因子的活性。
本发明是一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物，具有除螨、祛痘、消除痘印和修复受损肌肤的四合一功效；通过科学合理复配，发挥协调作用，共同发挥清热解毒、祛湿、凉血活血、抗炎、杀虫、消除痘印、修复受损肌肤等作用，可有效清除脸部螨虫，抑制痤疮丙酸杆菌，从而达到良好的除螨和祛痘功效的效果。
对本发明具体实施例1-3中的除螨祛痘组合物与对比例1-3中的组合物的除螨效果、抑制痤疮丙酸杆菌效果、除螨祛痘修复痘印效果进行评价；
其中，
对比例1的成分及其质量百分比为橄榄提取物40％、纯化水60％；
对比例2的成分及其质量百分比为苦参提取物20％、纯化水80％；
对比例3的成分及其质量百分比为金银花提取物15％、纯化水85％。
一、除螨效果评价的试验方法
螨虫抑制率试验：
①在有盖的容器内放入一块厚10mm，边长约200mm的海绵，注入适量的饱和盐水(水的高度恰好浸没海绵)；
②在14个培养皿内分别放入三个试样和三个对照样，将试样均匀，平整、紧密地铺放于培养皿的底部，并在试样上均匀的分散放入0.05g螨虫饲料；
③向每个培养皿中分别放入150只存活的螨虫；将14个培养皿放在容器盒内的海绵上，培养皿之间的距离大于10mm；
④盖上容器盒的上盖，将培养皿置于恒温恒湿的培养箱中，温度为23-27℃，湿度为70-80％；
⑤24h后用解剖镜观察并记录培养皿内成活的螨虫数。
Y表示抑制率，T表示三块试样存活螨虫数的平均值，B表示三块对照样存活螨虫数的平均值，Y＝(B-T)/B×100％，Y≥90％，证明样品具有极强的防螨效果，Y≥75％证明样品具有较强的防螨效果，Y≥60％证明样品具有防螨效果。
螨虫抑制率试验结果见表1。
表1螨虫抑制试验结果
由表1结果可知，该组合物对螨虫的具有显著的杀灭效果，致死率在90％以上；三个对比例提取物对螨虫也有一定的杀灭效果，致死率在20-60％之间。由此可见，本发明制备的植物组合提取物对螨虫有明显杀灭效果，与对比例1-3制备的单方提取物效果好得多，说明经过组方后各组分间发挥了协同增效作用。
二、抑制痤疮丙酸杆菌效果评价的试验方法
测试方法为牛津杯法(管碟法)，此方法是国内外测定抗生素效价通用方法，也是多国药典规定方法。通过抑菌圈测试，判断待测样品对痤疮丙酸杆菌的抑制作用。
实施例1-3和对比例1-3用二甲基亚砜(DMSO)稀释为质量分数5％的待测样品，进行下面试验。
以无菌操作，将经过高温灭菌的培养基倒入直径9cm的无菌培养皿中，使每个培养皿有15-20mL的培养基，冷却后，加入0.2mL痤疮丙酸杆菌菌悬液(浓度为1.0×106个/mL)，用涂布棒将培养基表面涂布均匀，用镊子将牛津杯垂直放上相应培养基表面，轻轻加压，使其与培养基接触无空隙，每个平板可放3支小管，分别向各小管中滴加0.1mL的各种待测样品，并做好标记，勿使其外溢。痤疮丙酸杆菌置37℃培养箱厌氧培养3天后，观察结果。
在培养时，一方面试验菌开始生长，另一方面待测样以牛津杯为原点向四周扩散，形成菌落不能生长的圆形区域，即“抑菌圈”。抑菌圈越大，祛痘效果越好。实验结果按抑菌圈直径大小判定抑菌活性，判断标准参考下表2：
表2抑菌圈大小参照标准
实施例1-3和对比例1-3的抑菌活性实验结果如表3所示。
表3抑制痤疮丙酸杆菌实验结果
对比结果表明，本发明制备的组合物对痤疮丙酸杆菌有明显抑制效果，比对比例1-3制备的单方提取物效果好得多，说明经过组方后各组分间协同作用显著。
三、除螨祛痘修复痘印效果评价的试验方法
评价对象﹕选择面部有痤疮、年龄为15-30岁的年轻人180例，其中男性90例，女性90例。
评价方法﹕采用双盲法，每天早晚涂擦实施例1-3制备的富含细胞因子除螨祛痘组合物，30天为一个疗程。
评价标准：
①显效﹕痘痘明显减少，痘印明显消退，肌肤细腻有光泽，新生痘痘明显减少；
②有效﹕痘痘减少，痘印消退，仍有新痘痘出现；
③无效﹕脸上痘痘无明显变化。
测试的结果如表4所示。
表4除螨祛痘修复痘印试验结果
由上述使用效果可以看出，本发明祛痘玫瑰原液精华液具有较好的祛痘效果，有效率达93％以上。
上面结合具体实施例对本发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种改进，或未经改进直接应用于其它场合的，均在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物，其特征在于，具体组成成分及其质量百分比为：
橄榄提取物25-40％，苦参提取物10-20％，金银花提取物5-15％，细胞因子冻干粉1-2％，其余成分为纯化水。
2.根据权利要求1所述的一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物，其特征在于，所述橄榄提取物是对高纯度橄榄油进行分子改性、离子催化分离而得。
3.根据权利要求2所述的一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物，其特征在于，所述细胞因子冻干粉是干细胞培养液经过冷冻干燥技术制得。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物的制备方法，其特征在于，具体步骤为：
S1、橄榄提取物的制备
橄榄油经检验消毒后进入分子改性设备反应，与此同时压缩机降温，反应结束后进入膜分离设备，90％以上的高有效成分经过检验后进入混合搅拌罐；
S2、苦参提取物的制备
先将苦参磨成粗粉，然后将苦参粗粉与去离子水按重量与体积的比例为1:15混合，煮沸提取2次，每次1.5h，收集合并2次提取液，滤过，浓缩至密度1.15g/cm3，得苦参提取物；
S3、金银花提取物的制备
先将金银花磨成粗粉，然后将金银花粗粉与去离子水按重量与体积的比例为1:15混合，煮沸提取2次，每次1.5h，收集合并2次提取液，滤过，浓缩至密度1.15g/cm3，得金银花提取物；
S4、细胞因子冻干粉的制备
传代培养人间充质干细胞至P3代，待P3代细胞细胞培养基中培养至其覆盖率≥80％，收集无菌的干细胞培养上清液，4℃保存或-20℃冻存备用；
将收集到的无菌的干细胞培养上清液按照比例加入赋形剂，充分溶解；
溶解后的培养液在-20℃预冷冻8h，然后通过冷冻干燥机冷冻干燥，获得细胞因子冻干粉；
S5、除螨祛痘组合物的制备
将橄榄提取物、苦参提取物、金银花提取物、细胞因子冻干粉、无菌水按比例搅拌均匀后即得除螨祛痘组合物。
5.根据权利要求4所述的一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物的制备方法，其特征在于，步骤S4中，加入的赋形剂为甘露醇和右旋糖酐。
6.根据权利要求5所述的一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物的制备方法，其特征在于，步骤S4中，培养的条件如下：温度为37℃、二氧化碳浓度为5％、湿度为99％。
7.根据权利要求6所述的一种富含细胞因子的除螨祛痘组合物的制备方法，其特征在于，步骤S4中，细胞培养基为美国ScienCell无血清培养基。
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20210319 |