CN112451431A - 一种平衡皮肤微生态的组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种平衡皮肤微生态的组合物及其制备方法和应用。所述平衡皮肤微生态的组合物包括酵母菌发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、乳酸杆菌发酵产物、海藻糖和糖类同分异构体。本发明中，各组分间相互配合，协同增效，使得平衡皮肤微生态的组合物能够保湿、提高皮肤屏障功能、促进皮肤有益菌增殖并抑制有害菌，还能够修复紫外线损伤的朗格汉斯细胞并增强皮肤对紫外线免疫功能。含有所述平衡皮肤微生态的组合物的防晒乳，能够有效保湿，修复紫外线损伤，且能够减少炎症斑点，改善皮肤瑕疵，增强皮肤光泽，在化妆品领域具有广阔的发展前景。
Description
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，涉及一种平衡皮肤微生态的组合物及其制备方法和应用。
背景技术
人体皮肤表面存在多种微生物，皮肤微生物群落构成隔离人体内环境与外界环境的第一道生物屏障，具有维持皮肤微生态平衡与自净的作用。当皮肤受到侵扰时，皮肤有益菌群会降低，而有害菌和/或暂居菌的数量就会剧增，导致皮肤菌群紊乱，皮肤屏障受损，皮肤自身防御能力不足，从而会出现皮肤油脂分泌旺盛、皮肤炎症、粉刺痤疮或头屑头痒等一系列皮肤问题。
研究表明紫外线照射、免疫力下降等均会引起皮肤微生物群落失衡，导致一系列皮肤问题，现有技术中常通过开发修护皮肤屏障、调节皮肤微生态的产品解决上述问题。
CN110384650A公开了一种用于皮肤保湿、屏障保护的益生菌组合物及其在化妆品中的应用，所述组合物包括酵母菌/大米发酵产物、乳酸菌溶胞物、二裂酵母菌发酵产物溶胞物等，具有保湿及修复皮肤屏障的功效，但并不具备调节皮肤微生态的作用。
CN109498543A公开了一种可调节皮肤微生态平衡的组合物及其应用以及包含其的润肤乳和润肤乳的制备方法，所述组合物包括白参菌提取物、益生菌代谢产物和珠贝肉抗氧化肽，具备抗敏消炎及调节皮肤微生态平衡的功效，但不能防护紫外线对皮肤微生物群落的影响。
CN110638740A公开了一种具有调节皮肤微生态的组合物及其应用，所述组合物包括二裂酵母发酵产物溶胞物、酵母菌发酵产物滤液、乳酸杆菌/藻提取物发酵产物、淡黑巨海藻提取物和海水，具有调节皮肤微生态的组合物能够被皮肤表面的益生菌利用并且可以选择性保护益生菌的同时抑制病原菌，但并不具备修复损伤细胞的效果。
综上所述，提供一种平衡皮肤微生态的组合物，能够调节皮肤微生态平衡，且能修复损伤细胞，对于化妆品领域具有重要意义。
发明内容
本发明提供一种平衡皮肤微生态的组合物及其制备方法和应用，所述平衡皮肤微生态的组合物能够保湿并增强皮肤屏障功能、平衡皮肤微生态、修复紫外损伤、抑制炎症以及减少炎症斑点。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种平衡皮肤微生态的组合物，所述平衡皮肤微生态的组合物包括酵母菌发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、乳酸杆菌发酵产物、海藻糖和糖类同分异构体。
本发明中，酵母菌发酵产物滤液含有丰富的小分子生物多肽和氨基酸，能快速透皮吸收，打开皮肤补水通道；二裂酵母发酵产物溶胞物能通过细胞的信号途径来调节细胞的基因表达和代谢，从而发挥改善皮肤状态的效果；乳酸杆菌发酵产物保留了细菌完整细胞壁结构，通过增强抑菌肽的表达，增强皮肤对致病菌的抵抗力；海藻糖能够促进有益菌群富集；糖类同分异构体与人体皮肤中的碳水化合物组成相似，能够提高皮肤内源性水含量，促进神经鞘脂酶的生成，增强皮肤屏障功能。
酵母菌发酵产物滤液可快速打开补水通道，海藻糖能迅速增加细胞水合功能，糖类同分异构体能够促进丝聚蛋白的生成，提高皮肤内源性含水量，三者协同增效保湿。二裂酵母发酵产物溶胞物和乳酸杆菌发酵产物中的修复因子能增强皮肤屏障完整性，糖类同分异构体能促进兜甲蛋白的生成，三者协同增强皮肤屏障功能。酵母菌发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、乳酸杆菌发酵产物和海藻糖是益生元和益生素，能够促进有益菌的增殖，并对有害菌有抑制作用，而糖类同分异构体能够增强皮肤屏障功能，提高皮肤自身对有害菌的抵抗力，各组分协同增效，从多方面相互配合，促进有益菌增殖，抑制有害菌生长。酵母菌发酵产物滤液主要是核酸、氨基酸和肽小分子的代谢产物，二裂酵母发酵产物溶胞物包括代谢产物和细胞壁免疫多糖等溶胞产物，乳酸杆菌发酵产物是益生菌成分，具有完整的细胞结构，能够开启皮肤本能的防御机制，酵母菌发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物和乳酸杆菌发酵产物三者相互配合，使得平衡皮肤微生态的组合物具有显著修复功效，能够有效修复紫外线损伤的朗格汉斯细胞。
综合上述，本发明的平衡皮肤微生态的组合物中各组分间相互配合，协同增效，使得平衡皮肤微生态的组合物能够保湿、提高皮肤屏障功能、促进皮肤有益菌增殖并抑制有害菌，还能够修复紫外线损伤的朗格汉斯细胞并增强皮肤对紫外线免疫功能。
优选地，所述酵母菌发酵产物滤液在所述平衡皮肤微生态的组合物中的质量百分比为1％～40％，包括但不限于2％、3％、4％、6％、10％、15％、20％、30％、35％、36％、37％、38％或39％，优选为10％～40％，进一步优选为20％～35％。
优选地，所述二裂酵母发酵产物溶胞物在所述平衡皮肤微生态的组合物中的质量百分比为1％～30％，包括但不限于2％、3％、4％、6％、10％、15％、20％、22％、25％、26％、27％、28％或29％，优选为10％～30％，进一步优选为20％～30％。
优选地，所述乳酸杆菌发酵产物在所述平衡皮肤微生态的组合物中的质量百分比为1％～10％，包括但不限于2％、3％、4％、5％、6％、7％或9％，优选为5％～10％。
优选地，所述海藻糖在所述平衡皮肤微生态的组合物中的质量百分比为1％～10％，包括但不限于2％、3％、4％、5％、6％、7％或9％，优选为5％～10％。
优选地，所述糖类同分异构体在所述平衡皮肤微生态的组合物中的质量百分比为1％～20％，包括但不限于2％、3％、4％、5％、6％、10％、12％、15％、16％、17％或19％，优选为5％～20％，进一步优选为5％～15％。
优选地，所述平衡皮肤微生态的组合物还包括甘油。
优选地，所述甘油在所述平衡皮肤微生态的组合物中的质量百分比为10％～60％，包括但不限于12％、15％、20％、30％、40％、45％、48％、55％、56％、57％、58％或59％。
优选地，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液1％～40％、二裂酵母发酵产物溶胞物1％～30％、乳酸杆菌发酵产物1％～10％、海藻糖1％～10％和糖类同分异构体1％～20％，余量为甘油。
优选地，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液10％～40％、二裂酵母发酵产物溶胞物10％～30％、乳酸杆菌发酵产物5％～10％、海藻糖1％～10％和糖类同分异构体5％～20％，余量为甘油。
优选地，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液20％～35％、二裂酵母发酵产物溶胞物20％～30％、乳酸杆菌发酵产物5％～10％、海藻糖5％～10％和糖类同分异构体5％～15％，余量为甘油。
优选地，所述酵母菌发酵产物滤液来源于酵母菌的发酵产物。
优选地，所述酵母菌包括啤酒酵母、葡萄汁酵母、球拟酵母、假丝酵母、毕赤氏酵母或红酵母中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述二裂酵母发酵产物溶胞物来源于双歧杆菌的发酵产物。
优选地，所述乳酸杆菌发酵产物来源于乳酸杆菌的发酵产物。
优选地，所述乳酸杆菌包括保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、胚芽乳杆菌或鼠李糖乳杆菌中的任意一种或至少两种的组合。
第二方面，本发明提供一种第一方面所述的平衡皮肤微生态的组合物的制备方法，所述制备方法包括：
按比例将酵母菌发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、乳酸杆菌发酵产物和甘油混合，随后加入海藻糖和糖类同分异构体，得到所述平衡皮肤微生态的组合物。
第三方面，本发明提供第一方面所述的平衡皮肤微生态的组合物在制备化妆品中的应用。
第四方面，本发明提供一种防晒乳，所述防晒乳包括第一方面所述的平衡皮肤微生态的组合物。
优选地，所述平衡皮肤微生态的组合物在所述防晒乳中的质量百分比为2％～10％，包括但不限于3％、4％、5％、6％、8％或9％。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明的平衡皮肤微生态的组合物中各组分间相互配合，协同增效，使得平衡皮肤微生态的组合物能够保湿、提高皮肤屏障功能、促进皮肤有益菌增殖并抑制有害菌，还能够修复紫外线损伤的朗格汉斯细胞并增强皮肤对紫外线免疫功能；
(2)本发明的平衡皮肤微生态的组合物能够有保湿，增强皮肤屏障功能，测试者7天TEWL低于-13.64，14天TEWL低于-15.32％；能够有效促进皮肤正常菌群表皮葡萄球菌和青春双歧杆菌的增殖，抑制皮肤病原菌金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的增殖，平衡皮肤微生态；能够有效修复紫外线损伤的朗格汉斯细胞，防止了紫外线照射所导致的免疫抑制，增强了皮肤对紫外线的免疫功能；
(3)本发明中含有所述平衡皮肤微生态的组合物的防晒乳，能够有效保湿，修复紫外线造成的损伤，且能够减少炎症斑点，改善皮肤瑕疵，增强皮肤光泽，在化妆品领域具有广阔的发展前景。
具体实施方式
为进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合实施例对本发明作进一步地说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施方式仅仅用于解释本发明，而非对本发明的限定。
实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购获得的常规产品。
本发明实施例中，酵母菌发酵产物滤液购于安琪酵母股份有限公司，二裂酵母发酵产物溶胞物购于安琪酵母股份有限公司，乳酸杆菌发酵产物(SymReboot L19)购于Symrise，海藻糖购于上海紫邦生物医药有限公司，糖类同分异构体
购于DSM，硅氧烷处理的氧化锌购于先进化学科技有限公司。
实施例1
本实施例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液10％、二裂酵母发酵产物溶胞物15％、乳酸杆菌发酵产物5％、海藻糖5％、糖类同分异构体5％和甘油60％。
所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法为：于室温下按比例将酵母菌发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、乳酸杆菌发酵产物与甘油混合，随后按比例加入海藻糖和糖类同分异构体，搅拌均匀，得到所述平衡皮肤微生态的组合物。
实施例2
本实施例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液20％、二裂酵母发酵产物溶胞物10％、乳酸杆菌发酵产物5％、海藻糖10％、糖类同分异构体5％和甘油50％。所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法与实施例1相同。
实施例3
本实施例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液30％、二裂酵母发酵产物溶胞物20％、乳酸杆菌发酵产物10％、海藻糖5％、糖类同分异构体10％和甘油25％。所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法与实施例1相同。
实施例4
本实施例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液35％、二裂酵母发酵产物溶胞物25％、乳酸杆菌发酵产物10％、海藻糖8％、糖类同分异构体12％和甘油10％。所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法与实施例1相同。
实施例5
本实施例提供一种平衡皮肤微生态组合物，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液30％、二裂酵母发酵产物溶胞物30％、乳酸杆菌发酵产物10％、海藻糖5％、糖类同分异构体15％和甘油10％。所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法与实施例1相同。
实施例6
本实施例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液20％、二裂酵母发酵产物溶胞物30％、乳酸杆菌发酵产物10％、海藻糖8％、糖类同分异构体7％和甘油25％。所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法与实施例1相同。
实施例7
本实施例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液1％、二裂酵母发酵产物溶胞物30％、乳酸杆菌发酵产物10％、海藻糖1％、糖类同分异构体20％和甘油38％。所述平衡皮肤微生态组的合物的制备方法与实施例1相同。
实施例8
本实施例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液30％、二裂酵母发酵产物溶胞物20％、乳酸杆菌发酵产物1％、海藻糖8％、糖类同分异构体20％和甘油21％。所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法与实施例1相同。
实施例9
本实施例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液40％、二裂酵母发酵产物溶胞物1％、乳酸杆菌发酵产物10％、海藻糖10％、糖类同分异构体1％和甘油38％。所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法与实施例1相同。
对比例1
本对比例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，与实施例1相比，区别在于所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为二裂酵母发酵产物溶胞物15％、乳酸杆菌发酵产物5％、海藻糖5％、糖类同分异构体5％，余量为甘油。所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法与实施例1相同。
对比例2
本对比例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，与实施例1相比，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液10％、乳酸杆菌发酵产物5％、海藻糖5％、糖类同分异构体5％，余量为甘油。所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法与实施例1相同。
对比例3
本对比例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，与实施例1相比，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液10％、二裂酵母发酵产物溶胞物15％、海藻糖5％、糖类同分异构体5％，余量为甘油。所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法与实施例1相同。
对比例4
本实施例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，与实施例1相比，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液10％、二裂酵母发酵产物溶胞物15％、乳酸杆菌发酵产物5％和海藻糖5％，余量为甘油。所述平衡皮肤微生态组合物的制备方法与实施例1相同。
对比例5
本对比例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，与实施例1相比，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液10％、二裂酵母发酵产物溶胞物15％、乳酸杆菌发酵产物5％和糖类同分异构体5％，余量为甘油。所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法与实施例1相同。
对比例6
本对比例提供一种平衡皮肤微生态组合物，所述平衡皮肤微生态组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液40％、二裂酵母发酵产物溶胞物35％和甘油25％。所述平衡皮肤微生态组合物的制备方法与实施例1相同。
对比例7
本对比例提供一种平衡皮肤微生态的组合物，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为乳酸杆菌发酵产物20％、海藻糖10％、糖类同分异构体10％和甘油60％。所述平衡皮肤微生态的组合物的制备方法与实施例1相同。
应用实施例1-5
为了更好的说明本发明中平衡皮肤微生态的组合物的功效，将实施例5制备的平衡皮肤微生态的组合物应用于制备防晒乳中，应用实施例1-5分别制备一种防晒乳，所述防晒乳的配方如表1所示。
表1
应用实施例1-5所述防晒乳的制备方法为：用C12-15醇苯甲酸酯将硅氧烷处理的氧化锌研磨分散，随后加入B相其它组分，于80℃分散均匀，乳化前加入聚二甲基硅氧烷，于80℃将A相溶解完全，缓慢将A相加入B相中，并搅拌低速均质，加入去离子水，高速均质3min，降温至50℃，加入C相，搅拌均匀，得到所述防晒乳。
应用对比例1-4
将对比例4制备的平衡皮肤微生态的组合物应用于制备防晒乳中，应用对比例1-4分别制备一种防晒乳，所述防晒乳的配方如表2所示。
表2
制备方法与应用实施例1-5的制备方法相同。
试验例1皮肤水分含量及皮肤水分流失测试
1.1测试仪器
皮肤水分含量Corneometer测试探头(德国CK公司)，皮肤水分流失(Transepidermal Water Loss，TEWL)Tewameter TM300测试探头(德国CK公司)。
1.2测试方法
采用电容法测试水分含量。皮肤水分流失TEWL是评估皮肤衰老和皮肤屏障功能的关键参数，TEWL值越高，表明经皮肤散失的水分越多，角质层的屏障功能较差，其测试原理来源于Fick菲克扩散定律，如式(1)所示。
式中，dm/dt代表单位时间内通过垂直扩散方向的单位截面积扩散物质流量；D代表扩散系数；A·dp/dx为浓度梯度。
1.3面部水分含量及TEWL评估
以额头作为测试部位，在额头选取2cm2的固定区域作为测试区域，在20℃、相对湿度为50％的室内环境中，用Corneometer CM820皮肤水分测量仪对每组5名年龄在18～50岁之间的女性志愿者前额皮肤进行皮肤的水分含量测试，将实施例1～9和对比例1～7制备的样品，随机涂抹于测试区域，并在0min、30min(T0.5h)和2h(T2h)时检测皮肤的含水量，结果如表3所示。
选取90名年龄为40～50岁的志愿者，随机分为9组，选取志愿者的左右鼻唇沟部分进行TEWL测试，测试3次，取平均值作为鼻唇沟皮肤TEWL的数据(D0)，志愿者半脸测实施例1～9的样品，另半边脸测试对比例1～7的样品，使用时，使用右手涂抹右侧面部，左手涂抹左侧面部，禁止交叉污染，每天早晚使用2次样品，连续使用14天，并于第7天(D7)和第14天(D14)测试TWEL，结果如表3所示。
表3
| 测试指标 | T<sub>0.5h</sub>含水量 | T<sub>2h</sub>含水量 | D<sub>7</sub> TWEL | D<sub>14</sub> TWEL |
| 实施例1 | 47.98 | 46.13 | -13.64 | -15.32 |
| 实施例2 | 48.74 | 46.98 | -14.21 | -16.02 |
| 实施例3 | 50.12 | 48.76 | -15.14 | -17.32 |
| 实施例4 | 51.43 | 48.19 | -16.89 | -18.47 |
| 实施例5 | 49.98 | 46.74 | -17.45 | -19.02 |
| 实施例6 | 49.04 | 46.77 | -17.15 | -18.76 |
| 实施例7 | 46.67 | 45.14 | -12.12 | -14.08 |
| 实施例8 | 47.18 | 46.09 | -14.87 | -15.94 |
| 实施例9 | 48.07 | 47.32 | -15.14 | -16.12 |
| 对比例1 | 44.37 | 41.98 | -8.40 | -9.22 |
| 对比例2 | 46.12 | 43.74 | -7.38 | -9.65 |
| 对比例3 | 45.78 | 43.21 | -9.24 | -10.65 |
| 对比例4 | 45.94 | 42.17 | -8.31 | -9.98 |
| 对比例5 | 46.58 | 44.03 | -9.87 | -10.34 |
| 对比例6 | 44.74 | 42.34 | -10.80 | -11.01 |
| 对比例7 | 45.18 | 44.03 | -6.72 | -7.21 |
由表3可知，实施例1-9同时采用酵母菌发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、乳酸杆菌发酵产物、海藻糖和糖类同分异构体制备平衡皮肤微生态的组合物，志愿者使用0.5h和2h后的皮肤含水量分别高于46.67和45.14，最大值分别为54.43和48.76，使用7天和14天后的TWEL分别低于-12.12和-14.08，最低值分别为-17.45和-19.02，与之相比，对比例1-7未同时采用上述原料制备平衡皮肤微生态的组合物，志愿者使用0.5h和2h后的皮肤含水量分的最大值分别为46.58和44.03，使用7天和14天后的TWEL最小值分别为-10.80和-11.01，可见，志愿者使用实施例1-9制备的平衡皮肤微生态的组合物后，其皮肤含水量高于使用对比例1-7制备的平衡皮肤微生态的组合物的志愿者，而TWEL低于使用对比例1-7制备的平衡皮肤微生态的组合物的志愿者，说明实施例1-9制备的平衡皮肤微生态的组合物能够提高皮肤含水量并降低水分流失，即各组分间能够相互配合，协同增效，使得平衡皮肤微生态的组合物具备优良的保湿和增强皮肤屏障功能的功效。
试验例2皮肤微生态平衡测试
2.1实验原理
本发明中平衡皮肤微生态的组合物具有维护皮肤微生态平衡的功效，即可促进有益菌表皮葡萄球菌和青春双歧杆菌的增殖，抑制有害菌金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的增殖。
2.2实验方法
采用玻璃培养皿及牛肉膏蛋白胨培养基分别培养表皮葡萄球菌ATCC 12228、青春双歧杆菌ATCC 15704、金黄色葡萄球菌ATCC 6538和痤疮丙酸杆菌ATCC 6919，接种的量为1×105CFU，随后在接种表面涂抹0.5mL实施例1～9的平衡皮肤微生态的组合物、对比例1～7的平衡皮肤微生态的组合物和对照组(去离子水)，自然光照24h后对菌落数目进行检测，结果如表4所示。
表4
由表4可知，实施例1-9制备的平衡皮肤微生态的组合物的试验组中，表皮葡萄球菌的菌落数高于2.09×107CFU，青春双歧杆菌的菌落数高于2.23×107CFU，而金黄色葡萄球菌的菌落数低于4.23×105CFU，痤疮丙酸杆菌的菌落数低于5.08×105CFU，与对照组相比，有益菌表皮葡萄球菌和青春双歧杆菌的数量增加，有害菌金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的数量降低，表明实施例1-9制备的平衡皮肤微生态的组合物能够有效促进皮肤正常菌群的增殖，并抑制皮肤病原菌的增殖。对比例1-7制备的平衡皮肤微生态的组合物的试验组中，表皮葡萄球菌的菌落数最高仅为2.13×107CFU，青春双歧杆菌最高仅为1.15×107CFU，而金黄色葡萄球菌的菌落数最低为6.14×105CFU，痤疮丙酸杆菌的菌落数最低为8.14×105CFU，说明对比例1-7制备的平衡皮肤微生态的组合物促进有益菌和抑制有害菌效果均低于实施例1-9制备的平衡皮肤微生态的组合物，表明本发明的平衡皮肤微生态的组合物中各组分协同增效，能够高效促进有益菌生长并抑制有害菌生长。
试验例3朗格汉斯细胞修复实验
3.1测试仪器与试剂
日光模拟器GS-2000(中国计量科学研究院)，450W氙灯和WG320滤光片(Schott，Clichy，France)，光线输出模拟连续的290～400nm的日光紫外线输出；CD1a单克隆抗体(编号为MAB-0226)和二抗均为美国Maxim公司产品，购自福州迈新生物技术公司。
3.2测试原理
皮肤在紫外线损伤时，朗格汉斯细胞会减少或衰竭，这一过程涉及紫外线损伤过程中的免疫抑制环节。观察使用样品对紫外线照射后朗格汉斯细胞的影响，进而评估样品对皮肤损伤的修复作用。
3.3实验方法
选取48名无日光过敏史的志愿者，随机分为12组，每组4名，志愿者需要进行5次测试，第1天采用25％六孔递增法在每位志愿者的臀部测定其初始最小红斑量(MinimalErythema Dose，MED)值，第2天读取MED的数值。在志愿者的背部选定4处7cm×3cm大小的皮肤并做相应标记，分别记为G1、G2、G3和G4，其中G1组不作任何处理；G2组连续3天接受2倍MED值日光模拟照射；G3组先使用外用基质(8g葡萄籽原花青素溶于100mL 50％的乙醇溶液)处理，30min后接受2倍MED值日光模拟照射，连续3天均进行同样处理；G4组先用实施例或对比例的样品处理，30min接受2倍MED值日光模拟照射，连续3天均进行同样处理。样品和基质的涂抹量均为2μL/cm2，第5天使用2倍MED值日光模拟照射24h后，分别用3mm孔径的环钻在四个标记部位的中心钻取皮肤，用福尔马林液固定，石蜡包埋，切片于4℃冰箱保存备用，然后进行朗格汉斯细胞免疫染色，每张切片于阳性表达区域连续选择十个无重叠视野进行计数，结果如表5所示。
表5
由表5可知，与G1组相比，G2组和G3的组朗格汉斯细胞数下降，表明光照能够损伤朗格汉斯细胞。与G2组相比，G3组的朗格汉斯细胞较低，表明使用外用基质并不能缓解朗格汉斯细胞损伤；G4组的朗格汉斯细胞增高，表明使用实施例1-9和对比例1-7制备的平衡皮肤微生态的组合物均能够修复损伤的朗格汉斯细胞，此外，实施例1-9制备的平衡皮肤微生态的组合物的G4组的朗格汉斯细胞数高于38±3，最高为70±2，明显高于对比例1-7制备的平衡皮肤微生态的组合物的G4组，表明本发明的平衡皮肤微生态的组合物中各组分协同增效，能够高效修复损伤的朗格汉斯细胞。
试验例4人体评价测试
4.1测试仪器
氙弧灯日光模拟器。
4.2测试方法
选取54名年龄为18～60岁健康志愿者，皮肤类型为I或II型，将志愿者随机分为6组，在受试者背部，取6个点并使用紫外线照射，观察出现红斑的最小剂量为该受试者正常皮肤的MED，按2mg/cm2的用量称取样品并使用乳胶手套将样品均匀涂抹于测试区内，15min后进行测试，以MED量进行照射，并记录出现红斑的时间(6个点均需出现红斑)，对照组为不对受试志愿者涂抹防晒产品，结果如表6所示。
表6
| 样品 | 出现红斑的最短时间 |
| 应用实施例1 | 11.5h |
| 应用实施例2 | 12h |
| 应用实施例3 | 13h |
| 应用实施例4 | 13.5h |
| 应用实施例5 | 13.5h |
| 应用对比例1 | 10h |
| 应用对比例2 | 10.5h |
| 应用对比例3 | 10.5h |
| 应用对比例4 | 11.0h |
| 对照组 | 20min |
应用实施例1-5制备的防晒乳含有实施例5制备的平衡皮肤微生态的组合物，受试者出现红斑的最短时间长于11.5h，最长为13.5h，显著高于对照组，表明所述防晒乳能够修复紫外损伤，延长了红斑的出现时间，而应用对比例1-4制备的防晒乳含有对比例4制备的平衡皮肤微生态的组合物，受试者出现红斑的最短时间短于11.0h，其修复效果较差，由此表明，含有本发明所述平衡皮肤微生态的组合物的防晒乳能够高效修复紫外损伤并抑制紫外线炎症。
试验例5体外炎症斑点测试
5.1测试仪器
VISIA面部图像分析系统(美国CANFIELD科技公司)。
5.2测试方法
选取30名年龄为20～40岁的志愿者，同样护肤之后，于左侧和右侧面部分别使用应用实施例3和应用对比例1的样品，利用VISIA检测涂抹前和涂抹30天后面部的色斑变化情况。
使用30天后，使用应用实施例3制备的防晒乳的面部斑点明显减少，而使用应用对比例1制备的防晒乳的面部斑点无明显变化，表明含有本发明平衡皮肤微生态的组合物的防晒乳在防晒的同时，还能减少炎症斑点，增加皮肤光泽，在化妆品领域具有广阔的发展前景。
综上所述，本发明的平衡皮肤微生态的组合物各组分间相互配合，协同增效，使得平衡皮肤微生态的组合物能够保湿、提高皮肤屏障功能、促进皮肤有益菌增殖并抑制有害菌以及修复紫外线损伤的朗格汉斯细胞并增强皮肤对紫外线免疫功能；含有所述平衡皮肤微生态的组合物的防晒乳，能够有效保湿，修复紫外线损伤，且能够减少炎症斑点，改善皮肤瑕疵，增强皮肤光泽，在化妆品领域具有广阔的发展前景。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (10)
1.一种平衡皮肤微生态的组合物，其特征在于，所述平衡皮肤微生态的组合物包括酵母菌发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、乳酸杆菌发酵产物、海藻糖和糖类同分异构体。
2.根据权利要求1所述的平衡皮肤微生态的组合物，其特征在于，所述酵母菌发酵产物滤液在所述平衡皮肤微生态的组合物中的质量百分比为1％～40％，优选为10％～40％，进一步优选为20％～35％；
优选地，所述二裂酵母发酵产物溶胞物在所述平衡皮肤微生态的组合物中的质量百分比为1％～30％，优选为10％～30％，进一步优选为20％～30％；
优选地，所述乳酸杆菌发酵产物在所述平衡皮肤微生态的组合物中的质量百分比为1％～10％，优选为5％～10％；
优选地，所述海藻糖在所述平衡皮肤微生态的组合物中的质量百分比为1％～10％，优选为5％～10％；
优选地，所述糖类同分异构体在所述平衡皮肤微生态的组合物中的质量百分比为1％～20％，优选为5％～20％，进一步优选为5％～15％。
3.根据权利要求1或2所述的平衡皮肤微生态的组合物，其特征在于，所述平衡皮肤微生态的组合物还包括甘油；
优选地，所述甘油在所述平衡皮肤微生态的组合物中的质量百分比为10％～60％。
4.根据权利要求1-3任一项所述的平衡皮肤微生态的组合物，其特征在于，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液1％～40％、二裂酵母发酵产物溶胞物1％～30％、乳酸杆菌发酵产物1％～10％、海藻糖1％～10％和糖类同分异构体1％～20％，余量为甘油；
优选地，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液10％～40％、二裂酵母发酵产物溶胞物10％～30％、乳酸杆菌发酵产物5％～10％、海藻糖1％～10％和糖类同分异构体5％～20％，余量为甘油；
优选地，所述平衡皮肤微生态的组合物按质量百分比为酵母菌发酵产物滤液20％～35％、二裂酵母发酵产物溶胞物20％～30％、乳酸杆菌发酵产物5％～10％、海藻糖5％～10％和糖类同分异构体5％～15％，余量为甘油。
5.根据权利要求1-4任一项所述的平衡皮肤微生态的组合物，其特征在于，所述酵母菌发酵产物滤液来源于酵母菌的发酵产物；
优选地，所述酵母菌包括啤酒酵母、葡萄汁酵母、球拟酵母、假丝酵母、毕赤氏酵母或红酵母中的任意一种或至少两种的组合。
6.根据权利要求1-5任一项所述的平衡皮肤微生态的组合物，其特征在于，所述二裂酵母发酵产物溶胞物来源于双歧杆菌的发酵产物。
7.根据权利要求1-6任一项所述的平衡皮肤微生态的组合物，其特征在于，所述乳酸杆菌发酵产物来源于乳酸杆菌的发酵产物；
优选地，所述乳酸杆菌包括保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、胚芽乳杆菌或鼠李糖乳杆菌中的任意一种或至少两种的组合。
8.一种权利要求1-7任一项所述的平衡皮肤微生态的组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
按比例将酵母菌发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、乳酸杆菌发酵产物和甘油混合，随后加入海藻糖和糖类同分异构体，得到所述平衡皮肤微生态的组合物。
9.权利要求1-7任一项所述的平衡皮肤微生态的组合物在制备化妆品中的应用。
10.一种防晒乳，其特征在于，所述防晒乳包括权利要求1-7任一项所述的平衡皮肤微生态的组合物；
优选地，所述平衡皮肤微生态的组合物在所述防晒乳中的质量百分比为2％～10％。
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Address after: 510663 No.15, Kelin Road, Guangzhou Science City, Guangzhou high tech Industrial Development Zone, Guangdong Province Applicant after: Guangzhou Huanya cosmetics technology Co.,Ltd. Address before: 510663 No.15, Kelin Road, Guangzhou Science City, Guangzhou high tech Industrial Development Zone, Guangdong Province Applicant before: GUANGZHOU HUANYA COSMETICS TECHNOLOGY Co.,Ltd. |
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210309 |