CN112439009A - 一种中药组合物在制备脂肪肝药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种中药组合物在制备脂肪肝药物中的应用,该组合物是由连翘、夏枯草、白芍、黄芪、金钱草、五味子、山茱萸、丹参、生地、甘草组成,适用于现代医学诊断为脂肪肝见上述症状者。本发明各种药材配伍相宜,制备工艺简单可行,疗效确切,无毒副作用,对脂肪肝有显著的治疗效果。
Description
技术领域
本发明涉及中药领域,特别是涉及一种中药组合物制备脂肪肝药物中的应用。
背景技术
脂肪肝是一种组织学/病理学上的定义,是指由于各种原因引起肝细胞内脂肪蓄积过多,脂质储存量超过肝湿重的5%,或在显微镜下肝组织切片每单位面积见1/3以上的肝细胞内存有脂滴时的一种疾病,又称肝内脂肪变性。脂肪肝可诱发和加重冠心病、高血压,脂肪肝可加重肝脏损害,发展为肝硬化、肝癌等,脂肪肝可促进动脉粥样硬化,诱发或加重糖尿病,损伤机体消化系统,降低人体免疫、解毒功能。
脂肪肝是现代病理学概念,中医学中无脂肪肝的病名,但根据其临床表现大多归属于“积证”、“痞满”、“胁痛”、“痰瘀”等病证范围,与肝郁、痰湿有关。脂肪肝是公认的隐蔽性肝硬化常见病因,也是仅次于病毒性肝炎的第二大肝病。目前,我国慢性肝病的病因发生了显著的变化,病毒性肝炎发病率不断下降,普通人群乙肝病毒感染率已经又原先的9.8%降至7.2%以下。但是我国脂肪肝的发病率近几年却在迅速上升,最近抽样调查表明,我国成人脂肪肝患病率介于12.5-35.4%。40至49岁的男性脂肪肝发病率最高,达28%;而在大城市里,脂肪肝发病率一般在15%左右。在某些职业人群中(白领人士、出租车司机、职业经理人、个体业主、政府官员、高级知识分子等)脂肪肝的平均发病率为25%,肥胖人群与Ⅱ型糖尿病患者中脂肪肝的发病率为60-80%,嗜酒和酗酒者脂肪肝的发病率为58%,在亚健康人群中脂肪肝的发病率约为60%。近年来,我国脂肪肝的患病率不断提升病出现年轻化趋势,据统计,脂肪肝在中国的发病率约为18%,发达城市则更高。因此,脂肪肝已成为当代肝病治疗领域的新挑战和医学界面临的重要课题。
脂肪肝又称脂肪性肝病,是肝细胞弥漫性脂肪变性为主引起肝细胞的结构和功能改变的临床病理综合征,是一种遗传-环境-代谢应激相关性的疾病。是肝内脂肪含量超过湿重的5%或1/3以上的肝细胞有脂肪变性。它是多种病因引起肝脏脂质代谢紊乱,动态平衡失调,以致肝实质---肝细胞内脂质(主要是甘油三酯)蓄积过多,肝细胞脂肪变性的一种病理综合征。其临床表现轻者无症状,重者病情凶猛。一般而言,脂肪肝属可逆性疾病,早期诊断并及时治疗常可恢复正常,如长时间未引起重视,则可发展为脂肪性肝炎成为一种慢性损害,一部分人可能发展为肝纤维化,肝硬化发展。
根据起病方式及其病程,脂肪肝有急性和慢性之分,急性脂肪肝多为小泡性脂肪肝,慢性脂肪肝则为大泡性或以大泡性为主的混合性脂肪肝。而通常所述脂肪肝主要指慢性大泡性脂肪肝。通常脂肪本身不直接损伤肝脏,但在多数情况下,脂肪肝是一些更为严重的疾病发生和发展的“信号”,是人体代谢紊乱的早期指征,如不及早发现和治疗,可进一步发展为脂肪性肝炎、肝纤维化和肝硬化,最终发展为肝衰竭。脂肪肝只是因为肥胖和不良的生活习惯引起的,一般来说,脂肪肝检出率为10%;肥胖者和糖尿病患者中检出率约为50%左右;嗜酒者检出率为57.7%。
与脂肪肝相比,肝纤维化是肝内弥漫性的、过量的细胞外基质(特别是胶原沉积)增生,导致肝组织结构纤维化的病理过程,是各种慢性肝病损伤后的瘢痕的修复反应。各种病毒性肝炎、免疫性肝炎、酒精肝、脂肪肝、药物及毒性物质长期损害肝脏,均可导致肝纤维化的发生。肝纤维化表现为肝组织内细胞外间质成分过度异常地沉积,并影响肝脏的功能。它不是一个独立的疾病,而是许多慢性病的共同病理过程,是各种慢性肝炎向肝硬化发展的必经之路。现认为肝纤维化尚有逆转至正常的可能。肝纤维化的病理改变多数发展较为缓慢,从肝细胞的损伤、炎症、坏死、细胞外基质的异常增生和沉积,有的需要经过数月至数年之久。因此,肝纤维化与脂肪肝在发病原因,病理改变存在显著不同。
脂肪肝是个隐藏在我们身边的“隐形杀手”,由于脂肪肝早期不被人们重视,往往拖延到中重度脂肪肝,出现肝功能异常和肝纤维化,甚至演变成肝硬化后才认真对待。目前,对脂肪肝的治疗,西医尚无疗效显著的药物,主要运用调节血脂的药物作为辅助治疗抗脂肪肝。
中医药辨证论治治疗脂肪肝有其独到的优势,再加之我国传统中医药因其价廉、不良反应小等特点,更易被人们所接受,而且随着现代社会的快速发展,人们对自身健康的需求越来越被重视,因此患者对毒副作用较小的复方中成药制剂的青睐,推动了复方中成药制剂市场。本发明的目的是提供一种中药组合物制剂、制备方法及中药组合物制剂在治疗脂肪肝的应用。该中药组合物的制备工艺简单可行,疗效确切,无毒副作用。
发明内容
基于此,有必要针对西药治疗脂肪肝导致其毒副作用较大,使临床应用受到限制问题,提供一种疗效好、副作用小用于制备治疗脂肪肝的中药组合物的应用。
本发明的目的之一是提供一种中药组合物在制备治疗脂肪肝药物中的应用。
本发明的目的之二是提供一种中药组合物在制备治疗脂肪肝药物中应用的活性成份的制备方法。
本发明的目的之三是提供一种中药组合物在制备治疗脂肪肝药物中应用的膏剂制备方法。
本发明的目的之四是提供一种中药组合物在制备治疗脂肪肝药物中应用的颗粒剂制备方法。
为实现以上目的,本发明提供一种治疗脂肪肝中药组合物,所述中药组合物由以下重量份的原料组成:连翘100-500份、夏枯草100-500份、白芍100-300份、黄芪100-300份、金钱草100-300份、五味子10-300份、山芋肉10-300份、丹参10-300份、生地10-300份、甘草10-200份。
优选的,所述中药组合物由以下重量份数的原料组成:连翘300份、夏枯草300份、白芍200份、黄芪200份、金钱草200份、五味子100份、山芋肉100份、丹参100份、生地100份、甘草60份。
优选的,所述中药组合物由以下重量份数的原料组成:连翘100份、夏枯草100份、白芍200份、黄芪200份、金钱草200份、五味子300份、山芋肉100份、丹参300份、生地200份、甘草60份。
优选的,所述中药组合物由以下重量份数的原料组成:连翘100份、夏枯草300份、白芍100份、黄芪200份、金钱草300份、五味子200份、山芋肉100份、丹参200份、生地100份、甘草60份。
本发明所述中药组合物的活性成份由下面步骤制成:
(1)称取连翘、夏枯草、白芍、黄芪、金钱草、五味子、山芋肉、丹参、生地、甘草;
(2)将所述步骤(1)中称取五味子、夏枯草置粉碎机内粉碎成为药物粗粉,备用;
(3)取步骤(2)中的药材粗粉与所述步骤(1)中称取连翘、山芋肉、生地、金钱草和甘草置提取罐内,加入8-12倍量饮用水加热煮沸提取1-3次,每次1-3小时,过滤,合并滤液;
(4)合并滤液,浓缩得到稠膏,其中过滤合并滤液具体为于70-90℃浓缩至相对密度1.15-1.30的稠膏。
步骤(4)所述稠膏构成该中药组合物的活性成分。
本发明所述药物剂型为:膏剂、颗粒剂、片剂、散剂、口服液、丸剂、糖浆剂或注射液。
本发明所述药物的膏剂由下面步骤制成:
(1)称取连翘、夏枯草、白芍、黄芪、金钱草、五味子、山芋肉、丹参、生地、甘草;
(2)将所述步骤(1)中称取五味子、夏枯草置粉碎机内粉碎成为药物粗粉,备用;
(3)取步骤(2)中的药材粗粉与所述步骤(1)中称取连翘、山芋肉、生地、金钱草和甘草置提取罐内,加入8-12倍量饮用水加热煮沸提取1-3次,每次1-3小时,过滤,合并滤液;
(4)合并滤液,浓缩得到稠膏,其中过滤合并滤液具体为于70-90℃浓缩至相对密度1.15-1.30的稠膏。
本发明所述药物的颗粒剂由下面步骤制成:
(1)称取连翘、夏枯草、白芍、黄芪、金钱草、五味子、山芋肉、丹参、生地、甘草、;
(2)将五味子、夏枯草置粉碎机内粉碎,备用;
(3)取步骤(2)中的药材粗粉与连翘、丹参、白芍、黄芪、山芋肉、生地、金钱草和甘草置提取罐内,加药材量8-12倍饮用水加热提取1-3次,每次1-3小时,过滤,合并滤液,浓缩至密度为1.15-1.25的稠膏;
(4)取步骤(3)的稠膏,与辅料1000份糊精混合,湿法制粒,置烘箱60-80℃烘干,过筛,整粒包装即得。
本发明治疗肝病的中药组合物可以按照常规中成药制备方法,制备成膏剂、颗粒剂、汤剂或其他医学上可接受的剂型,剂型的改变不影响本发明重要的治疗效果。
本发明所示技术方案中的该中药组合物制备工艺简单可行,疗效确切,无毒副作用。
本发明所示中药组合物中由连翘、夏枯草、白芍、黄芪、金钱草、五味子、山芋肉、丹参、生地、甘草、十味组成,其中连翘、夏枯草为君药,白芍、黄芪、金钱草为臣药,五味子、丹参、山芋肉、生地为佐药,甘草为使药。
君药连翘清热解毒、散结消肿,有效成分连翘苷易溶于乙醇,难溶于水;夏枯草清热泻火,明目,散结消肿,主要含有三萜及其皂苷、酚酸、甾醇及其苷、黄酮及其苷、有机酸、挥发油及糖类等成分,抗肿瘤活性的三萜类成分易溶于乙醇而难溶于水;连翘与夏枯草两者同为君药,起清热散结消肿之功效。
臣药白芍具有养血调经、敛阴止汗、柔肝止痛、平抑肝阳之功效,主要活性成分芍药苷易溶于乙醇;黄芪补气固表,利尿托毒,排脓,敛疮生肌,其活性成分黄芪甲苷溶于热乙醇;金钱草有清热利尿、祛风止痛、止血生肌、消炎解毒、杀虫之功,可治急慢性肝炎、黄疸型肝炎,主要有效成分为黄酮类化学成分,黄酮类化合物难溶于水而易溶于乙醇。黄芪补气固表,利尿托毒、排脓、敛疮生肌,有增强机体免疫功能、保肝、利尿等作用,其有效成分黄芪甲苷几乎不溶于水,乙醇加热溶解。白芍、金钱草和黄芪辅助君药,滋阴平肝阳,促进君药软坚散结的功效。
佐药五味子收敛固涩、益气生津、补肾宁心,其有效成分五味子素、去氧五味子素、五味子醇、五味子酯等木质素类脂溶性成分具有保肝降酶的作用;山芋肉补益肝肾,涩精固脱,其含生物类黄酮成分,能促使排便通畅,提高消化器官的功能,滋补肝肾,也可以有效治疗肝炎和黄疸,黄酮类化合物难溶于水而易溶于乙醇;生地主要含B-谷甾醇与甘露醇、及少量豆甾醇、微量的菜油甾醇、地黄素、生物碱、梓醇等有效成分,易溶于水和稀乙醇;丹参具有祛淤活血、活血通经的功效,其脂溶性成分是其主要药理活性成分。四者辅佐君臣,共奏滋阴、软坚散结的功效。依据处方药味及有效成分分析,因此本中药组合物采用乙醇作为提取溶媒。
本发明的中药组合物用于瘀阻肝络证,症见两胁胀满或窜痛,胸闷不舒,胃脘痛、呕逆,胁部刺痛不移,纳食减少,消瘦乏力、口苦口干,小便短赤、大便干结,舌质暗红、苔少或薄黄,脉细数或细涩,现代医学诊断为脂肪肝见上述症状者的治疗。
附图说明
图1为酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导实验肝组织病理HE染色细胞图;
图1-1a为酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导实验肝组织病理HE染色结果正常组肝组织细胞图;
图1-1b为酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导实验肝组织病理HE染色模型组肝组织细胞图;
图1-1c为酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导实验肝组织病理HE染色结果组合物膏剂肝组织细胞图;
图1-1d为酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导实验肝组织病理HE染色结果组合物颗粒剂肝组织细胞图;
图2为酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导实验肝组织病理油红O染色细胞图;
图2-2a为酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导实验肝组织病理油红O染色结果正常组肝组织细胞图;
图2-2b为酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导肝组织病理油红O染色模型组肝组织细胞图;
图2-2c为酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导肝组织病理油红O染色结果组合物膏剂肝组织细胞图;
图2-2d为酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导肝组织病理油红O染色结果组合物颗粒剂肝组织细胞图;
图3为高脂饲料诱导实验为高脂饲料诱导实验肝组织病理HE染色细胞图;
图3-3a为高脂饲料诱导实验肝组织病理HE染色结果正常组肝组织细胞图;
图3-3b为高脂饲料诱导实验肝组织病理HE染色模型组肝组织细胞图;
图3-3c为高脂饲料诱导实验肝组织病理HE染色结果组合物膏剂肝组织细胞图;
图3-3d为高脂饲料诱导实验肝组织病理HE染色结果组合物颗粒剂肝组织细胞图;
图4-4a为高脂饲料诱导实验肝组织病理油红O染色细胞图;
图4-4a为高脂饲料诱导实验肝组织病理油红O染色结果正常组肝组织细胞图;
图4-4b为高脂饲料诱导实验肝组织病理油红O染色模型组肝组织细胞图;
图4-4c为高脂饲料诱导肝组织病理油红O染色结果组合物膏剂肝组织细胞图;
图4-4d为高脂饲料诱导实验肝组织病理油红O染色结果组合物颗粒剂肝组织细胞图。
具体实施方式
本发明提供的治疗肝病的中药组合物中各味原料药的功效简介如下:
连翘:苦,凉。归经:入心、肝、胆经。功能主治:清热,解毒,散结,消肿。治温热,丹毒,斑疹,痈疡肿毒,瘰疬,小便淋闭。
白芍:味苦、酸,性微寒。归经:归肝、脾经。功效:养血调经,敛阴止汗,柔肝止痛,平抑肝阳。主治:用于血虚萎黄,月经不调,自汗,盗汗,胁痛,腹痛,四肢挛痛,头痛眩晕。
黄芪:甘,微温。归经:归肺、脾、肝、肾经。功能主治:补气固表,托毒排脓,利尿,生肌。用于气虚乏力、久泻脱肛、自汗、水肿、子官脱垂、慢性肾炎蛋白尿、糖尿病、疮口久不愈合。
夏枯草:辛、苦,寒。归经:归肝、胆经。功效:清肝泻火,明目,散结消肿。主治:用于目赤肿痛,目珠夜痛,头痛眩晕,瘰疬,瘿瘤,乳痈,乳癖,乳房胀痛。
金钱草:味甘、咸,性微寒。归经:归肝、胆、肾、膀胱经。功效:利湿退黄,利尿通淋,解毒消肿。主治:用于湿热黄疸,胆胀胁痛,石淋,热淋,小便涩痛,痈肿疔疮,蛇虫咬伤。
五味子:味酸、甘,性温。归经:归肺、心、肾经。功效:收敛固涩,益气生津,补肾宁心。主治:用于久嗽虚喘,梦遗滑精,遗尿尿频,久泻不止,自汗盗汗,津伤口渴,内热消渴,心悸失眠。
山芋肉:酸、涩,微温。归经:入肝、肾经。功效:补益肝肾,涩精缩尿,固经止血,敛汗固脱。主治:治腰膝酸痛,眩晕,耳鸣,阳痿,遗精,小便频数,肝虚寒热,虚汗不止,心摇脉散。
丹参:味苦,微寒。归经:归心、肝经。功效:活血祛瘀,通经止痛,清心除烦,凉血消痈。主治:用于胸痹心痛,脘腹胁痛,瘕瘕积聚,热痹疼痛,心烦不眠,月经不调,痛经经闭,疮疡肿痛。
生地:甘苦,凉。归经:入心、肝、肾经。功效:清热生津滋阴,养血。主治:治阴虚发热,消渴,吐血,衄血,血崩,月经不调,胎动不安,阴伤便秘。
甘草:味甘,性平。归经:归心、肺、脾、胃经。功效:补脾益气,清热解毒,祛痰止咳,缓急止痛,调和诸药。主治:用于脾胃虚弱,倦怠乏力,心悸气短,咳嗽痰多,脘腹、四肢挛急疼痛,痈肿疮毒,缓解药物毒性、烈性。
本发明所示中药组合物中由连翘、夏枯草、白芍、黄芪、金钱草、五味子、山芋肉、丹参、生地、甘草、十味组成,其中连翘、夏枯草为君药,白芍、黄芪、金钱草为臣药,五味子、丹参、山芋肉、生地为佐药,甘草为使药。
君药连翘清热解毒、散结消肿,有效成分连翘苷易溶于乙醇,难溶于水;夏枯草清热泻火,明目,散结消肿;主要含有三萜及其皂苷、酚酸、甾醇及其苷、黄酮及其苷、有机酸、挥发油及糖类等成分,抗肿瘤活性的三萜类成分易溶于乙醇而难溶于水;连翘与夏枯草两者同为君药,起清热散结消肿之功效。
臣药白芍具有养血调经、敛阴止汗、柔肝止痛、平抑肝阳之功效,主要活性成分芍药苷易溶于、和乙醇;黄芪补气固表,利尿托毒,排脓,敛疮生肌,其活性成分黄芪甲苷溶于热乙醇;金钱草有清热利尿、祛风止痛、止血生肌、消炎解毒、杀虫之功,可治急慢性肝炎、黄疸型肝炎,主要有效成分为黄酮类化学成分,黄酮类化合物难溶于水而易溶于乙醇。黄芪补气固表,利尿托毒、排脓、敛疮生肌,有增强机体免疫功能、保肝、利尿等作用,其有效成分黄芪甲苷几乎不溶于水,乙醇加热溶解。白芍、金钱草和黄芪辅助君药,滋阴平肝阳,促进君药软坚散结的功效。
佐药五味子收敛固涩、益气生津、补肾宁心,其有效成分五味子素、去氧五味子素、五味子醇、五味子酯等木质素类脂溶性成分具有保肝降酶的作用;山芋肉补益肝肾,涩精固脱,其含生物类黄酮成分,能促使排便通畅,提高消化器官的功能,滋补肝肾,也可以有效治疗肝炎和黄疸,黄酮类化合物难溶于水而易溶于乙醇;生地主要含B-谷甾醇与甘露醇、及少量豆甾醇、微量的菜油甾醇、地黄素、生物碱、梓醇等有效成分,易溶于水和稀乙醇;丹参具有祛淤活血、活血通经的功效,其脂溶性成分是其主要药理活性成分。四者辅佐君臣,共奏滋阴、软坚散结的功效。依据处方药味及有效成分分析,因此本中药组合物采用乙醇作为提取溶媒。
本发明的中药组合物可用于瘀阻肝络证,症见两胁胀满或窜痛,胸闷不舒,胃脘痛、呕逆,胁部刺痛不移,纳食减少,消瘦乏力、口苦口干,小便短赤、大便干结,舌质暗红、苔少或薄黄,脉细数或细涩;现代医学诊断为脂肪肝见上述症状者的治疗。
下面实施例用于举例说明本发明药物的制备,但其不能对本发明的范围构成任何限制。
实施例1:
处方:
连翘300份、夏枯草300份、白芍200份、黄芪200份、金钱草200份、五味子100份、山芋肉100份、丹参100份、生地100份、甘草60份。
所述中药组合物药物的活性成份由下面步骤制成:
(1)称取连翘、夏枯草、白芍、黄芪、金钱草、五味子、山芋肉、丹参、生地、甘草;
(2)将所述步骤(1)中称取五味子、夏枯草置粉碎机内粉碎成为药物粗粉,备用;
(3)取步骤(2)中的药材粗粉与所述步骤(1)中称取连翘、山芋肉、生地、金钱草和甘草置提取罐内,加入8-12倍量饮用水加热煮沸提取1-3次,每次1-3小时,过滤,合并滤液;
(4)合并滤液,浓缩得到稠膏,其中过滤合并滤液具体为于70-90℃浓缩至相对密度1.15-1.30的稠膏。
步骤(4)所得稠膏构成该中药组合物的活性成分。
实施例2:
处方:
连翘100份、夏枯草100份、白芍200份、黄芪200份、金钱草200份、五味子300份、山芋肉100份、丹参300份、生地200份、甘草60份。
所述药物的膏剂由下面步骤制成:
(1)称取连翘、夏枯草、白芍、黄芪、金钱草、五味子、山芋肉、丹参、生地、甘草;
(2)将所述步骤(1)中称取五味子、夏枯草置粉碎机内粉碎成为药物粗粉,备用;
(3)取步骤(2)中的药材粗粉与所述步骤(1)中称取连翘、山芋肉、生地、金钱草和甘草置提取罐内,加入8-12倍量饮用水加热煮沸提取1-3次,每次1-3小时,过滤,合并滤液。
(4)合并滤液,浓缩得到稠膏,其中过滤合并滤液具体为于70-90℃浓缩至相对密度1.15-1.30的稠膏。
实施例3:
处方:
连翘100份、夏枯草300份、白芍100份、黄芪200份、金钱草300份、五味子200份、山芋肉100份、丹参200份、生地100份、甘草60份。
所述药物的颗粒剂由下面步骤制成:
(1)称取连翘、夏枯草、白芍、黄芪、金钱草、五味子、山芋肉、丹参、生地、甘草、;
(2)将五味子、夏枯草置粉碎机内粉碎,备用;
(3)取步骤(2)中的药材粗粉与连翘、丹参、白芍、黄芪、山芋肉、生地、金钱草和甘草置提取罐内,加药材量8-12倍饮用水加热提取1-3次,每次1-3小时,过滤,合并滤液,浓缩至密度为1.15-1.25的稠膏;
(4)取步骤(3)的稠膏,与辅料1000份糊精混合,湿法制粒,置烘箱60-80℃烘干,过筛,整粒包装即得;
为了表明本发明中药组成物膏剂及颗粒剂上述组份在治疗脂肪肝药物中的应用,本发明进行了动物药效学验证实验。试验中所用本发明中药组合物实施例2的胶囊剂本品药效学作用和治疗效果如下,通过其药物实验,可以看到本发明技术实施例针对不同脂肪肝具备有效的作用。
本发明中药组合物实施例2膏剂及中药组合物实施例3颗粒剂对酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导脂肪肝大鼠的作用实验数据及结果如下:
SD大鼠48只,雄性,体重150-170g。动物在20~24℃通风良好、相对湿度45%~65%、光照时间12小时的Ⅱ级动物实验室饲养1周后进行试验。
实验开始,从48只大鼠中12只作为正常组常规饲养,自由饮水;其余36只大鼠均皮下注射40%CCL4香油溶液1ml/kg,10%乙醇为饮料,以后每隔4天注射1次40%CCL4香油溶液。连续造模6周制备大鼠脂肪肝模型。
为了测量药物的有效率,分别称取中药组合物制备方法实施例2膏剂的内容物4g(相当于12g生药)、中药组合物制备方法实施例3的内容物10g(相当于12g生药),加热蒸水碾匀至20ml,即得中药组合物膏剂和中药组合物颗粒剂测试药。
脂肪肝大鼠随机分成3组,每组12只,即模型组,实施例1组,实施例2组;模型组灌胃蒸馏水20ml/kg,中药组合物膏剂组灌胃组合物膏剂4g/kg(相当于12g生药),中药组合物颗粒剂组灌胃组合物颗粒剂内容物10g/kg(相当于12g生药),每天给药治疗1次,连续给药治疗30天,各组大鼠给药期间仍旧以10%乙醇为饮料,每隔4天注射1次CCL4。
治疗结束后大鼠禁食12小时,25%乌来糖腹腔麻醉,腹主动脉取血,分离血浆酶动力学法测定ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)、γ-GT(谷氨酸转肽酶)、ALP(碱性磷酸酶)、GDH(谷氨酸脱氢酶),OCT(鸟氨酸氨甲酰转移酶)、TG(甘油三脂)、CHO(总胆固醇);另取各组肝组织用10%甲醛磷酸缓冲液固定,石蜡包埋、切片,HE染色(苏木精-伊红染色法)观察肝组织损伤程度,油红O染色镜检观察肝组织细胞脂肪性变程度。
表1脂肪肝大鼠血浆ALT、AST、γ-GT、ALP测定结果:(n=12,表示每组的动物数;X±S,表示每组数据的均值与标准差)
与模型组相比较,*P<0.05。
表1结果显示:正常组大鼠血浆AST浓度为80.5U/L,ALT浓度为46.7U/L,γ-GT浓度为53.4U/L,ALP浓度为140.3U/L。与正常组比较,模型组ALT、AST、γ-GT、ALP、浓度均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,中药组合物膏剂和中药组合物颗粒剂两组均可使脂肪肝大鼠血浆升高的ALT、AST、γ-GT、ALP浓度显著降低。该实验表明具体实施例2和实施例3所示的组合物对酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导脂肪肝大鼠血浆酶有显著降低作用。
与模型组相比较,*P<0.05。
表2结果显示:正常组大鼠血浆GDH浓度为6.3U/L,OCT浓度为14.3ng/mL,TG浓度为176.0mg/dl,CHO浓度为2.6mg/dl。与正常组比较,模型组大鼠血浆GDH、OCT均显著增加(P<0.05);TG、CHO略有增减,但无统计学意义。与模型组比较,中药组合物膏剂、中药组合物颗粒剂两组大鼠血浆GDH、OCT、TG均显著降低(P<0.05),LN也与降低但无统计学意义。提示,中药组合物膏剂和中药组合物颗粒剂对酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导脂肪肝大鼠血浆GDH、OCT、TG、CHO有显著降低作用。
酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导脂肪肝实验过程中的肝组织病理HE染色结果,详见说明书附图1。图1-1a为肝组织病理HE染色结果正常组肝组织细胞图,正常组肝组织形态基本正常。图1-1b为肝组织病理HE染色结果模型组肝组织细胞图,模型组大鼠肝细胞明显脂肪性变,变性肝细胞约占整体的3/5,变性的肝细胞核固缩或溃破;枯否细胞增生肥大,窦内皮细胞激活。图1-1c为肝组织病理HE染色结果组合物膏剂肝组织细胞图、图1-1d为肝组织病理HE染色结果组合物颗粒剂肝组织细胞图。如图1c-图1d所示,对于该中药组合物膏剂与颗粒剂大鼠肝组织的肝细胞无脂肪型变,可见枯否细胞增生肥大,肝组织结构基本正常。与模型组比较,酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导脂肪肝肝组织脂肪性变损伤情况明显改善。
酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导脂肪肝实验过程中的肝组织病理油红O染色结果,详见附图2。图2-2a为肝组织病理油红O染色结果正常组肝组织细胞图,正常组肝组织形态基本正常,无红染的脂滴。图2-2b为肝组织病理油红O染色结果模型组肝组织细胞图,模型组大鼠肝组织红染的脂滴大量广泛分布,且呈大泡性脂滴,提示肝组织脂肪性变。图2-2c为肝组织病理油红O染色结果组合物膏剂肝组织细胞图、图2-2d为肝组织病理油红O染色结果组合物颗粒剂肝组织细胞图。如图2-2c图2-2d所示,对于该中药组合物膏剂与颗粒剂大鼠肝组织的肝细胞内红染的显著脂滴较少,成区域性分布。与模型组比较,酒精复合CCL4(四氯化碳)诱导脂肪肝的肝组织细胞内脂滴显著减少,提示脂肪肝状况明显改善。
此外,对于中药组合物实施例2膏剂及实施例3颗粒剂对高脂饲料诱导脂肪肝大鼠的实验结果数据如下:
SD大鼠48只,雄性,体重150-170g。动物在20~24℃通风良好、相对湿度45%~65%、光照时间12小时的Ⅱ级动物实验室饲养1周后进行试验。
实验开始,从48只大鼠中12只作为正常组常规饲养,自由饮水;其余36只大鼠以高脂饲料饲养(普通饲料加2%胆固醇,10%猪油,5%蔗糖,0.5%甲基硫氧嘧啶)。连续造模3周制备大鼠脂肪肝模型。
为了测量药物的有效率,分别称取实施例1膏剂的内容物4g(相当于12g生药)、实施例2颗粒剂的内容物10g(相当于12g生药),加热蒸水碾匀至20ml,即得实施例1膏剂和实施例2颗粒剂测试药。肝纤维大鼠随机分成3组,每组12只,即模型组,实施例1组,实施例2组;模型组灌胃蒸馏水20ml/kg,中药组合物膏剂组灌胃组合物膏剂4g/kg(相当于12g生药),中药组合物颗粒剂组灌胃组合物颗粒剂内容物10g/kg(相当于12g生药),每天给药治疗1次,连续给药治疗20天,各组大鼠给药治疗期间仍旧给与高脂饲料饲养。
治疗结束后大鼠禁食12小时,25%乌来糖腹腔麻醉,腹主动脉取血,分离血浆酶动力学法测定ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)、γ-GT(谷氨酸转肽酶)、ALP(碱性磷酸酶)、GDH(谷氨酸脱氢酶),OCT(鸟氨酸氨甲酰转移酶)、TG(甘油三脂)、CHO(总胆固醇);另取各组肝组织用10%甲醛磷酸缓冲液固定,石蜡包埋、切片,天狼星红、油红O及HE染色(苏木精-伊红染色法),镜检观察肝组织肝细胞变性程度。
表3脂肪肝大鼠血浆ALT、AST、γ-GT、ALP测定结果:(n=12,表示每组的动物数;X±S,表示每组数据的均值与标准差
表3结果显示:对于中药组合物实施例2膏剂及实施例3颗粒剂对高脂饲料诱导脂肪肝大鼠的实验结果表明,正常组大鼠血浆AST浓度为66.1U/L,ALT浓度为40.4U/L,γ-GT浓度为46.4U/L,ALP浓度为160.1U/L。与正常组比较,模型组ALT、AST、γ-GT浓度均显著升高(P<0.05),ALP浓度虽又升高,但无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,中药组合物膏剂和颗粒剂两组均可使高脂饲料诱导脂肪肝大鼠血浆升高的ALT、AST、γ-GT浓度显著降低;ALP略有降低,但无统计学意义(P>0.05)。该实验表明具体实施例1和实施例2所示的组合物对高脂饲料诱导脂肪肝大鼠血浆酶及γ-GT有显著降低作用。
表4脂肪肝大鼠血清血浆GDH、OCT、TG、CHO测定结果:(n=12,表示每组的动物数;X±S,表示每组数据的均值与标准差)
与模型组相比较,*P<0.05。
表4结果显示:对于中药组合物实施例2膏剂及实施例3颗粒剂对高脂饲料诱导脂肪肝大鼠的实验结果表明,正常组大鼠血浆GDH浓度为7.6(U/L),OCT浓度为10.6(ng/mL),TG浓度为90.8mg/dl,CHO浓度为2.2mg/dl。与正常组比较,模型组GDH、OCT、TG、CHO浓度均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,中药组合物膏剂和颗粒剂两组均可使高脂饲料诱导脂肪肝大鼠血浆升高的GDH、OCT、TG、CHO浓度显著降低。该实验表明该中药组合物膏剂和该中药组合物颗粒剂对高脂饲料诱导脂肪肝大鼠血浆酶及TG、CHO有显著降低作用。
对于中药组合物实施例2膏剂及实施例3颗粒剂对高脂饲料诱导脂肪肝大鼠的实验结果表明,肝组织病理HE染色结果,请见附图3。图3-3a为肝组织病理HE染色结果正常组肝组织细胞图,正常组肝组织形态基本正常。图3-3b为肝组织病理HE染色结果模型组肝组织细胞图,模型组大鼠肝细胞明显脂肪性变,变性肝细胞约占整体的3/4,变性的肝细胞核固缩或溃破;肝组织结构疏松。图3-3c为肝组织病理HE染色结果组合物膏剂肝组织细胞图、图3-3d为肝组织病理HE染色结果组合物颗粒剂肝组织细胞图。如图3所示,对于该中药组合物膏剂与颗粒剂大鼠肝组织的肝细胞脂肪性变肝细胞较少,变性肝细胞不足1/5,肝组织结构虽有脂肪性变趋势但结构基本正常。与模型组比较,肝组织脂肪性变损伤情况明显改善。
对于中药组合物实施例2膏剂及实施例3颗粒剂对高脂饲料诱导脂肪肝大鼠的实验结果表明,肝组织病理油红O染色结果,请见附图4。图4-4a为肝组织病理油红O染色结果正常组肝组织细胞图,正常组肝组织形态基本正常,基本无红染的脂滴。图4-4b为肝组织病理油红O染色结果模型组肝组织细胞图,模型组大鼠肝组织红染的脂滴大量分布,提示肝组织脂肪性变。图4-4c为肝组织病理油红O染色结果组合物膏剂肝组织细胞图、图4-4d为肝组织病理油红O染色结果组合物颗粒剂肝组织细胞图。如图4所示,对于该中药组合物膏剂与颗粒剂大鼠肝组织的肝细胞内红染的脂滴较少。与模型组比较,肝组织细胞内脂滴显著降低,提示脂肪肝状况明显改善。
尽管已描述了本申请的优选实施例,但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念,则可对这些实施例做出另外的变更和修改。所以,所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本申请范围的所有变更和修改。
显然,本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样,倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内,则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (8)
1.一种中药组合物在制备脂肪肝药物中的应用,其特征在于,所述中药组合物由以下重量份的原料组成:连翘100-500份、夏枯草100-500份、白芍100-300份、黄芪100-300份、金钱草100-300份、五味子10-300份、山芋肉10-300份、丹参10-300份、生地10-300份、甘草10-200份。
2.根据权利要求1的应用,其特征在于所述中药组合物由以下重量份数的原料组成:连翘300份、夏枯草300份、白芍200份、黄芪200份、金钱草200份、五味子100份、山芋肉100份、丹参100份、生地100份、甘草60份。
3.根据权利要求1的应用,其特征在于所述中药组合物由以下重量份数的原料组成:连翘100份、夏枯草100份、白芍200份、黄芪200份、金钱草200份、五味子300份、山芋肉100份、丹参300份、生地200份、甘草60份。
4.根据权利要求1的应用,其特征在于所述中药组合物由以下重量份数的原料组成:连翘100份、夏枯草300份、白芍100份、黄芪200份、金钱草300份、五味子200份、山芋肉100份、丹参200份、生地100份、甘草60份。
5.根据权利要求1至4任一项应用,其特征在于所述药物的活性成份由下面步骤制成:
(1)称取连翘、夏枯草、白芍、黄芪、金钱草、五味子、山芋肉、丹参、生地、甘草;
(2)将所述步骤(1)中称取五味子、夏枯草置粉碎机内粉碎成为药物粗粉,备用;
(3)取步骤(2)中的药材粗粉与所述步骤(1)中称取连翘、山芋肉、生地、金钱草和甘草置提取罐内,加入8-12倍量饮用水加热煮沸提取1-3次,每次1-3小时,过滤,合并滤液。
(4)合并滤液,浓缩得到稠膏,其中过滤合并滤液具体为于70-90℃浓缩至相对密度1.15-1.30的稠膏。
步骤(4)所得稠膏构成该中药组合物的活性成分。
6.根据权利要求1至4任一项应用,其特征在于所述药物剂型为:膏剂、颗粒剂、片剂、散剂、口服液、丸剂、糖浆剂或注射液。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于所述药物膏剂由下面步骤制成:
(1)称取连翘、夏枯草、白芍、黄芪、金钱草、五味子、山芋肉、丹参、生地、甘草;
(2)将所述步骤(1)中称取五味子、夏枯草置粉碎机内粉碎成为药物粗粉,备用;
(3)取步骤(2)中的药材粗粉与所述步骤(1)中称取连翘、山芋肉、生地、金钱草和甘草置提取罐内,加入8-12倍量饮用水加热煮沸提取1-3次,每次1-3小时,过滤,合并滤液;
(4)合并滤液,浓缩得到稠膏,其中过滤合并滤液具体为于70-90℃浓缩至相对密度1.15-1.30的稠膏。
8.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述药物颗粒剂由下面步骤制成:
(1)称取连翘、夏枯草、白芍、黄芪、金钱草、五味子、山芋肉、丹参、生地、甘草;
(2)将五味子、夏枯草置粉碎机内粉碎,备用;
(3)取步骤(2)中的药材粗粉与连翘、丹参、白芍、黄芪、山芋肉、生地、金钱草和甘草置提取罐内,加药材量8-12倍饮用水加热提取1-3次,每次1-3小时,过滤,合并滤液,浓缩至密度为1.15-1.25的稠膏;
(4)取步骤(3)的稠膏,与辅料1000份糊精混合,湿法制粒,置烘箱60-80℃烘干,过筛,整粒包装即得。
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赵咏梅,等: "连翘苷对营养性肥胖小鼠减肥作用的影响", 《中药材》 * |
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20210305 |
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