CN112390802A - 吡咯并吡唑类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及吡咯并吡唑类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。具体的说，本发明涉及一类通式(I)所示的新的吡咯并吡唑类衍生物、其制备方法以及其本身或含有此类衍生物的药物组合物作为治疗剂，特别是作为胃酸分泌抑制剂和钾离子竞争性酸阻滞剂(P‑CABs)在生物医药中的用途。其中通式(I)中的各取代基(R1、R2、R3、R4)与说明书中的定义相同。

Description

吡咯并吡唑类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
技术领域
本发明涉及一类新的吡咯并吡唑类衍生物、其制备方法以及其本身或含有此类衍生物的药物组合物作为治疗剂特别是作为胃酸分泌抑制剂和钾离子竞争性酸阻滞剂(P-CABs)的用途。
背景技术
消化性溃疡主要指发生于胃和十二指肠的慢性溃疡。虽然有地区差异，但消化性溃疡发病率通常占总人口的10％～20％，是一多发病、常见病。溃疡的形成有各种因素，其中酸性胃液对黏膜的消化作用是溃疡形成的基本因素。因此，抑制胃酸分泌逐渐成为治疗消化性溃疡类疾病的首选方法。
自1988年第一个质子泵抑制剂(Proton Pump Inhibitors，PPIs)奥美拉唑上市以来，至今全球已有数个PPIs产品上市，包括兰索拉唑、泮托拉唑、雷贝拉唑和艾司奥美拉唑等。PPIs已经成为治疗胃酸相关性疾病包括消化性溃疡、反流性食管炎和卓-艾综合征等疾病的首选药物。质子泵(Proton Pump)实质为H+/K+-腺苷三磷酸酶(H+/K+-ATPase)，它特异性的将质子(H+)泵入胃腔从而形成胃内的强酸性。质子泵抑制剂可以抑制质子泵的活性从而调节质子泵介导的胃酸分泌。
钾离子竞争性酸阻滞剂(Potassium-Competitive Acid Blockers，P-CABs)是一类新型的胃酸阻滞剂，它通过可逆的、与钾离子(K+)竞争性的结合H+/K+-ATPase从而起到抑制H+/K+-ATPase酶活性的作用。与PPIs相比较，P-CABs具有亲脂性、弱碱性以及在酸性(低pH)条件下稳定等特点。同时，P-CABs具有起效迅速以及比较容易达到抑酸效果等优势。
第一款P-CABs新药沃诺拉赞于2014年在日本上市，用于治疗胃酸相关疾病如消化性溃疡。一系列的钾离子竞争性酸阻滞剂结构也已经被公开。但仍然需要开发结构类型多样性的具有更好成药性的新化合物。
发明内容
针对上述问题，本发明的目的在于提供新的结构类型且具有优异的效果和作用的用于治疗胃酸相关疾病如消化性溃疡的化合物。
一方面，本发明提供一种通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure BDA0002168009430000021
其中：
R1、R2各自独立选自氢原子、卤素、羟基或任选地被取代的烷基；
R3选自氢原子、卤素、羟基或烷基；
R4选自氢原子、卤素或任选地被取代的烷基。
优选地，R1、R2各自独立选自氢原子、卤素、羟基或任选地被一个或多个氟原子取代的烷基；
R3选自氢原子或C1～3烷基；
R4选自氢原子、卤素或任选地被一个或多个羟基或氟原子取代的烷基。
优选地，R1、R2各自独立选自氢原子、卤素、羟基或任选地被一个或多个氟原子取代的C1～3烷基；
R3选自氢原子或C1～3烷基；
R4选自氢原子、卤素或任选地被一个或多个氟原子取代的C1～3烷基。
优选地，R1、R2各自独立选自氢原子、氟原子、氯原子、羟基、甲基、三氟甲基；
R3选自氢原子或甲基；
R4选自氢原子、氟原子、溴原子或甲基。
优选地，所述化合物选自：
3-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
3-((3-(2-氯苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
2-溴-4-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
3-溴-5-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
3-(1-(5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)乙基)苯酚；
3-((3-(4-羟基苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
3-(2-(3-羟基苄基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑-3-基)苯酚；
3-((3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
4-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
3-((5-甲基-3-(邻甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
2-甲基-5-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
2-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚。
第二方面，本发明提供一种药物组合物，包括通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
第三方面，本发明提供通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐或上述药物组合物在制备胃酸分泌抑制剂中的用途。
第四方面，本发明提供通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐或上述药物组合物在制备H+/K+-腺苷三磷酸酶(H+/K+-ATPase)抑制剂中的用途。
第五方面，本发明提供通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐或上述药物组合物在制备钾离子竞争性酸阻滞剂(P-CABs)中的用途。
第六方面，本发明提供通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐或上述药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗和/或预防消化性溃疡、卓-艾综合征、胃炎、糜烂性食管炎、反流性食管炎、症状性胃食管反流疾病、巴雷特食管炎、功能性消化不良、幽门螺旋杆菌感染、胃癌、胃MALT淋巴瘤、非甾体抗炎药引起的溃疡或手术后应激导致的胃酸过多或溃疡；或者抑制消化性溃疡、急性应激性溃疡、出血性胃炎或侵入性应激造成的上消化道出血。
具体实施方式
以下通过下述实施方式进一步说明本发明，应理解，下述实施方式仅用于说明本发明，而非限制本发明。
除非有相反陈述，下列用在说明书和权利要求中的术语具有下述含义。
术语“烷基”指饱和的脂族烃基团，包括1至10个碳原子的直链或支链基团。优选含有1至5个碳原子的烷基。更优选含有1至3个碳原子的烷基，例如甲基，乙基，正丙基，异丙基。
各种含碳氢结构部分的碳原子含量由该部分的标有最小和最大碳原子数目的前缀表示，即前缀Ci～j表示该部分的碳原子数为整数“i”至整数“j”(包括i和j)。因此，例如，C1～3烷基是指1至3个碳原子的烷基(包括1和3)。
术语“羟基”指-OH基团。
术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。
术语“任选地被取代”是指取代是任选的，因此，其既包括未取代的原子和基团，又包括取代的原子和基团。“取代的”原子或基团表示所指定原子或基团上的任意氢均可被来自所指定取代基组的选择替换(直至所指定原子或基团上的每个氢原子均被来自所指定取代基组的选择替换)，条件是不超过所指定原子或基团的正常化合价，并且所述取代产生稳定的化合物。例如，如果甲基(即，CH3)是任选取代的，则碳原子上的至多3个氢原子可被取代基替换。如果原子或基团被描述为任选地被一个或多个非氢取代基取代，则它可被至多所述原子或基团上的可取代位置的最大数的非氢取代基取代。
除非特别说明，本发明中，所有出现的化合物均意在包括所有可能的异构体，例如互变异构体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式。
术语“本发明化合物”指通式(I)所示的化合物。该术语还包括通式(I)化合物的各种晶型形式、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物。
术语“药学上可接受的盐”指本发明化合物与酸或碱所形成的适合用作药物的盐。药学上可接受的盐包括无机盐和有机盐。一类优选的盐是本发明化合物与酸形成的盐。适合形成盐的酸包括但不限于：盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、苯甲磺酸，苯磺酸等有机酸；以及天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸。
术语“药学上可接受的载体”表示能用于制备药物组合物的载体，它们一般是安全的、无毒性的，不是生物上或其他方面不期待的，且包括能被动物和人类药学上接受的载体。在说明书和权利要求书中使用的“药学上可接受的载体”包括一种或一种以上的这类载体。
术语“含有”、“包含”或“包括”表示各种成分可一起应用于本发明的混合物或组合物中。因此，术语“主要由...组成”和“由...组成”包含在术语“含有”中。
术语“预防”例如是指在可能暴露或预先处置于疾病但尚未经历或显示疾病症状的哺乳动物中使疾病临床症状不发展。
术语“治疗”可指抑制疾病，例如阻止或降低疾病或其临床症状的发展，或者缓解疾病，例如使疾病或其临床症状退化。
通式(I)化合物
Figure BDA0002168009430000051
本发明一些实施方式中，R1、R2各自独立选自氢原子、卤素、羟基或任选地被取代的烷基。所述任选地被取代的烷基例如是任选地被一个或多个氟原子取代的烷基，优选为任选地被一个或多个氟原子取代的C1～3烷基。
一些实施方式中，R1、R2各自独立选自氢原子、氟原子、氯原子、羟基、甲基、三氟甲基。
一些实施方式中，R1、R2中一者为氢原子，另一者选自氟原子、氯原子、羟基、甲基。
一些实施方式中，R1、R2中有一者不为氢原子且位于2位、3位、或4位，优选位于2位。该位置是指以苯环上与吡唑环连接的碳原子为1位时的位置。
一些实施方式中，R1、R2均不为氢原子且位于相间的位置。
一些实施方式中，R1、R2中一者为卤素，另一者为任选地被取代的烷基。
本发明一些实施方式中，R3选自氢原子、卤素、羟基或烷基。优选实施方式中，R3选自氢原子或C1～3烷基。更优选实施方式中，R3选自氢原子或甲基。
本发明一些实施方式中，R4选自氢原子、卤素或任选地被取代的烷基。所述任选地被取代的烷基例如是任选地被一个或多个羟基或氟原子取代的烷基，优选为任选地被一个或多个氟原子取代的C1～3烷基。优选实施方式中，R4选自氢原子、氟原子、溴原子或甲基。
一些实施方式中，-OH位于2位、3位、或4位。该位置是指以苯环上的与R3和N之间的碳原子连接的碳原子为1位时的位置。
一些实施方式中，-OH和R4位于相邻、相间或相对的位置。
一些实施方式中，R4位于3位或4位。
本发明一些实施方式中，通式(I)化合物选自表1中所示的化合物。
表1
Figure BDA0002168009430000052
Figure BDA0002168009430000061
Figure BDA0002168009430000071
通式(I)化合物的制备方法
本发明一些实施方式中，通式(I)化合物的制备可采用如下通用合成路线1：
通用合成路线1
Figure BDA0002168009430000072
其中，R1、R2、R3、R4的定义如上所述。
P1基可为本领域公知的氨基保护基，例如可选自苄基、对甲氧基苯基甲基、邻硝基苯基甲基等可被取代的C7-11芳烷基；乙酰基、三氟乙酰基等可被取代的C1-6烷羰基；苯甲酰基等可被取代的C6-10芳羰基；甲氧羰基、乙氧羰基、Boc基(叔丁氧羰基)、Cbz基(苄氧羰基)、Fmoc基(芴甲氧羰基)、Teoc基(三甲基甲硅烷基乙氧羰基)等可被取代的C1-6烷氧羰基；Alloc基(烯丙氧羰基)等烯氧羰基；甲磺酰基等烷基磺酰基；对甲苯磺酰基等可被取代的C6-10芳基磺酰基。
X1基可选自氯原子、溴原子、碘原子等卤素原子。
X2基可为本领域公知的离去基团，例如可选自氟原子、氯原子、溴原子、碘原子等卤素原子。
P2基可为本领域公知的羟基保护基，例如可选自酯类保护基、硅醚类保护基、烷基醚类保护基(例如甲基、叔丁基等)、烷氧基烷基醚类保护基(例如THP(四氢吡喃基)、MOM(甲氧基甲基)、MTM(甲硫基甲基)等)等。
步骤(a)中，将式I-1化合物与卤化试剂反应，得到式I-2化合物。卤化试剂例如可为N-碘代丁二酰亚胺、N-溴代丁二酰亚胺等。
步骤(b)中，式I-2化合物与式I-3化合物反应，得到式I-4化合物。式I-2化合物和式I-3化合物的摩尔比可为1：(0.5～3.0)。反应溶剂可为乙腈、丙酮、四氢呋喃、二氧六环、N，N-二甲基甲酰胺等。步骤(b)的反应可在碱存在下进行。所述碱可选自：碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钠等。式I-2化合物与碱的摩尔比可为1：(1.0～6.0)。步骤(b)的反应温度可以由本领域技术人员适当设定，例如可为0～100℃。
步骤(c)中，式I-4化合物与式I-5化合物反应，得到式I-6化合物。式I-4化合物与式I-5化合物的摩尔比可为1：(0.5～5.0)。反应溶剂可为乙二醇二甲醚、二氧六环、四氢呋喃、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺等。步骤(c)可在钯催化剂存在下进行。所述钯催化剂可选自：四(三苯基膦)钯、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯、氯化烯丙基钯(II)二聚物、三(二亚苄基丙酮)二钯、氯化钯等。另外，步骤(c)的反应可在碱存在下进行。所述碱可选自：碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸铯、磷酸钾等。式I-4化合物与碱的摩尔比可为1：(0.5～5.0)。步骤(c)的反应温度可以由本领域技术人员适当设定，例如可为40～150℃。
步骤(d)中，将式I-6化合物脱除P1和P2保护基，得到式I-7化合物。反应条件优选采用本领域常用的可同时脱除氨基保护基和羟基保护基的反应条件。
步骤(e)中，对式I-7化合物进行氨基甲基化反应，得到式I-8化合物。该步骤可采用本领域公知的氨基甲基化反应条件。一些实施方式中，将式I-7化合物与甲醛搅拌一段时间生成席夫碱，然后加入还原剂例如醋酸硼氢化钠反应一段时间，得到式I化合物。
本发明一些实施方式中，通式(I)化合物的制备可采用如下通用合成路线2：
通用合成路线2
Figure BDA0002168009430000091
其中，R1、R2、R3、R4的定义如上所述。
X3基可选自氯原子、溴原子、碘原子等卤素原子。
步骤(m)中，将式I-1化合物与式I-3化合物反应，得到式I-4化合物。式I-1化合物和式I-3化合物的摩尔比可为1：(0.5～3.0)。反应溶剂可为乙腈、丙酮、四氢呋喃、二氧六环、N，N-二甲基甲酰胺等。步骤(m)的反应可在碱存在下进行。所述碱可选自：碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钠等。式I-1化合物与碱的摩尔比可为1：(1.0～6.0)。步骤(m)的反应温度可以由本领域技术人员适当设定，例如可为0～100℃。
步骤(n)中，将式I-4化合物与式I-9化合物反应，得到式I-6化合物。式I-4化合物和式I-9化合物的摩尔比可为1：(0.5～3.0)。反应溶剂可为N，N-二甲基乙酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、甲苯、乙腈等。步骤(n)可在钯催化剂存在下进行。所述钯催化剂可选自：氯化烯丙基钯(II)二聚物、三(二亚苄基丙酮)二钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯、氯化钯等。另外，步骤(n)的反应可在碱存在下进行。所述碱可选自：乙酸钾、乙酸钠、磷酸钾、磷酸二氢钾、双三甲基硅基胺基钾、双三甲基硅基胺基钠等。式I-4化合物与碱的摩尔比可为1：(0.5～3.0)。步骤(n)的反应温度可以由本领域技术人员适当设定，例如可为40～150℃。
步骤(o)中，将式I-6化合物脱除P1保护基，得到式I-10化合物。反应条件可采用本领域常用的脱除氨基保护基的反应条件。例如，P1为Boc时，可以用质子酸(例如三氟乙酸)或路易斯酸进行处理。
步骤(p)中，对式I-10化合物进行氨基甲基化反应，得到式I-11化合物。该步骤可采用本领域公知的氨基甲基化反应条件。一些实施方式中，将式I-10化合物与甲醛搅拌一段时间生成席夫碱，然后加入还原剂例如醋酸硼氢化钠反应一段时间，得到式I-11化合物。
步骤(q)中，将式I-11化合物脱除P2保护基，得到式I化合物。反应条件可采用本领域常用的脱除羟基保护基的反应条件。
另外，也可以是将式I-6化合物同时脱除P1和P2保护基，再进行氨基甲基化反应，得到式I化合物。
通式(I)化合物的应用
通式(I)化合物可作为胃酸分泌抑制剂。
通式(I)化合物可作为H+/K+-腺苷三磷酸酶(H+/K+-ATPase)抑制剂。
通式(I)化合物可作为钾离子竞争性酸阻滞剂(P-CABs)。
通式(I)化合物可用于治疗和/或预防消化性溃疡、卓-艾综合征、胃炎、糜烂性食管炎、反流性食管炎、症状性胃食管反流疾病、巴雷特食管炎、功能性消化不良、幽门螺旋杆菌感染、胃癌、胃MALT淋巴瘤、非甾体抗炎药引起的溃疡或手术后应激导致的胃酸过多或溃疡；或者抑制消化性溃疡、急性应激性溃疡、出血性胃炎或侵入性应激造成的上消化道出血。上述消化性溃疡包括但不限于胃溃疡、十二指肠溃疡或吻合口溃疡。症状性胃食管反流疾病包括但不限于非糜烂性的反流性疾病或无食管炎的胃食管反流疾病。
药物组合物
本发明的药物组合物包含有效量的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐、及其药学上可接受的载体或赋形剂或稀释剂。
“有效量”意指本发明化合物：(i)治疗特定疾病、病症或障碍，(ii)减弱、改善或消除特定疾病、病症或障碍的一或多种症状，或(iii)预防或延迟本文所述特定疾病、病症或障碍的一或多种症状发作的量。
药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如
Figure BDA0002168009430000111
)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。
本发明化合物或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、瘤内、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、和局部给药。
本发明化合物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的化合物联合给药。
本发明的另一方面涉及一种抑制胃酸分泌的方法，该方法包括给予需要治疗的患者有效剂量的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐或其药物组合物。
本发明的另一方面涉及一种抑制H+/K+-腺苷三磷酸酶(H+/K+-ATPase)的方法，该方法包括给予需要治疗的患者有效剂量的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐或其药物组合物。
下面进一步例举实施例以详细说明本发明。同样应理解，以下实施例只用于对本发明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域的技术人员根据本发明的上述内容作出的一些非本质的改进和调整均属于本发明的保护范围。下述示例具体的工艺参数等也仅是合适范围中的一个示例，即本领域技术人员可以通过本文的说明做合适的范围内选择，而并非要限定于下文示例的具体数值。
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或质谱(MS)来确定的，化合物的纯度是通过液相高压色谱仪(HPLC)测定的。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁共振仪，溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)或氘代甲醇(MeOH-d4)，内标为四甲基硅烷(TMS)，化学位移以ppm为单位。MS的测定使用安捷伦6120质谱仪。HPLC使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪测定。
实施例1：3-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
Figure BDA0002168009430000112
Figure BDA0002168009430000121
第一步：2-(间甲苯基氧基)四氢-2H-吡喃
在500mL三口瓶中依次加入间甲酚1a(104g，0.96mol)、对甲苯磺酸吡啶盐(24.1g，0.096mol)及二氯甲烷(250mL)。换气(氮气)三次后，氮气保护下，小心加入3,4-二氢-2H-吡喃(97.2g，1.15mol)，室温搅拌2小时。TLC显示反应已完成，向反应液中加入水(80mL)，萃取分离。有机相依次用水(40mL)及盐水(40mL)洗，然后用无水硫酸钠干燥、过滤及浓缩。粗品用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝20/1)得无色油状物2-(间甲苯基氧基)四氢-2H-吡喃1b(141.1g)，产率：76.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.15(t,J＝8.0Hz,1H),6.87-6.84(m,2H),6.78(d,J＝8.0Hz,1H),5.39(s,1H),3.94-3.88(m,1H),3.61-3.56(m,1H),2.31(s,3H),2.03-1.98(m,1H),1.84-1.81(m,2H),1.65-1.60(m,3H)。
第二步：2-(3-(溴甲基)苯氧基)四氢-2H-吡喃
在500mL茄形瓶中依次加入2-(间甲苯基氧基)四氢-2H-吡喃1b(32g，166.45mmol)、四氯化碳(200mL)及N-溴代丁二酰亚胺(32g，179.77mmol)，氮气置换三次。氮气保护下，小心加入偶氮二异丁腈(31.5g，192mmol)，加热至100℃回流搅拌3个小时。TLC显示反应完成，将反应恢复至室温，过滤除去不溶物；滤液再静置2小时，再次过滤，滤液蒸干得到2-(3-(溴甲基)苯氧基)四氢-2H-吡喃1c(42g，淡黄色油状物)，产率：77.8％。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.18(t,J＝8.0Hz,1H),7.02(s,1H),6.93(d,J＝8.0Hz,1H),5.36(s,1H),4.39(s,2H),3.81(t,J＝8.0Hz,1H),3.51(t,J＝8.0Hz,1H),1.97-1.91(m,1H),1.80-1.78(m,2H),1.65-1.61(m,4H)。
第三步：3-碘-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
在装有机械搅拌及冷凝装置的500mL三口瓶中依次加入2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯1d(40g，191mmol)、1,2-二氯乙烷(300mL)及N-碘代丁二酰亚胺(64.6g，287mmol)，氮气置换三次。油浴加热至80℃回流搅拌过夜。LCMS及TLC均显示反应已完成，将反应恢复至室温，过滤除去不溶物，滤液蒸干。所得粗品经Combi-flash(正相硅胶柱，80g，石油醚/二氯甲烷＝0-40％)纯化得3-碘-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯1e(45g，黄色固体)，产率：70.3％。MS m/z(ESI)：336.0[M+H]。
第四步：3-碘-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
向100mL单口瓶中依次放入3-碘-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯1e(4.65g，13.88mmol)、2-(3-(溴甲基)苯氧基)四氢-2H-吡喃1c(4.52g，16.66mmol)、碳酸铯(9.0g，27.76mmol)及乙腈(40mL)，氮气换气3次，置于80℃油浴中反应3小时。反应结束后，将反应液过滤，滤液浓缩。残留物用Combi-flash(正相硅胶柱，25g，石油醚/乙酸乙酯＝0-30％)纯化，得到3-碘-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯1f(2.55g，淡黄色固体，产率35.0％)。MS m/z(ESI)：526.0[M+H]。
第五步：3-(2-氟苯基)-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H))-甲酸乙酯
在100mL单口瓶中依次加入3-碘-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯1f(2.34g，4.46mmol)、(2-氟苯基)硼酸(0.75g，5.35mmol)、碳酸钠(1.18g，11.15mmol)、乙二醇二甲醚(8.0mL)及去离子水(4.0mL)。换气(氮气)三次后，氮气保护下，小心加入四(三苯基膦)钯(0.26g，0.223mmol)，加完后，油浴升温到100℃，保温搅拌过夜。LCMS显示反应已完成，将反应液降至室温，减压脱溶，残留物再加入水(10mL)及乙酸乙酯(60mL)，萃取分离。有机相依次用水(15mL)及盐水(15mL)洗，然后用无水硫酸钠干燥、过滤及浓缩。粗品用Combi-flash(正相硅胶柱，25g，石油醚：石油醚/乙酸乙酯(体积比v/v＝3/1＝0-40％得副产物，增大极性至70％)纯化，得到3-(2-氟苯基)-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H))-甲酸乙酯1g(470mg，淡黄色油状物，产率21.4％)MS m/z(ESI)：494.2[M+H]。
第六步：3-((3-(2-氟苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
将三氟乙酸(4mL)加入到3-(2-氟苯基)-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H))-甲酸乙酯1g(3.96g，8.03mmol)的二氯甲烷(2.0mL)溶液中，室温反应1小时。反应结束后，直接浓缩得到粗品3-((3-(2-氟苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚1h(2.5g，黄色油状物)，产率：96％。MS m/z(ESI)：310.3[M+H]。
第七步：3-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
将甲醛水溶液(37％w/w，2.6g，24.27mmol)加入到3-((3-(2-氟苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚1h(2.5g，8.09mmol)的甲醇(15mL)溶液中，室温搅拌1小时。将冰醋酸(0.2mL)及醋酸硼氢化钠(3.4g，16.18mmol)缓慢加入反应液中，再室温反应1小时。反应液浓缩后，加入水(40mL)，用乙酸乙酯(160mL)溶解稀释，再依次用氨水/水(10mLx 2，1/5)、饱和食盐水(20mL x 2)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、浓缩。残留物用Combi-flash(正相硅胶柱，25g，二氯甲烷/甲醇＝0-5％)纯化得到3-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚1(2.3g，黄色固体)，产率：88.5％。MS m/z(ESI)：324.1[M+H]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38(q,J＝8.0Hz,1H),7.22-7.18(m,1H),7.16-7.11(m,2H),7.02(t,J＝8.0Hz,1H),6.63(dd,1H),6.46(d,J＝8.0Hz,8.0Hz,1H),6.38(s,1H),5.16(s,2H),4.02(s,2H),3.96(s,2H),2.74(s,3H)。
实施例2：3-((3-(2-氯苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
Figure BDA0002168009430000141
第一步：3-(氯甲基)苯酚
冰浴下将二氯亚砜(17.8mL)滴加到化合物3-(羟甲基)苯酚2a(20g，0.16mol)、三乙胺(34mL)、二氯甲烷(320mL)的混合物中，室温搅拌3小时。反应液用饱和碳酸氢钠溶液(100mL×3)、食盐水(100mL×2)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后得到化合物3-(氯甲基)苯酚2b粗品(27g，淡黄色油状物)。
第二步：2-(3-(氯甲基)苯氧基)四氢-2H-吡喃
将二氢吡喃(31mL)加到化合物3-(氯甲基)苯酚2b(24g，0.17mol)、对甲基苯磺酸(3.8g，0.02mol)、二氯甲烷(340mL)的混合物中，室温搅拌3小时。反应液用饱和碳酸氢钠溶液(100mL×3)、食盐水(100mL×2)洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后得到化合物2-(3-(氯甲基)苯氧基)四氢-2H-吡喃2c粗品(44g，淡黄色油状物)。
第三步：2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
将乙腈(200mL)加入到化合物2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯1d(10.8g，51.6mmol)、2-(3-(氯甲基)苯氧基)四氢-2H-吡喃2c(14.0g，61.9mmol)和碳酸铯(33.6g，103.2mmol)的混合物中，80℃反应16小时。反应结束后，将反应液过滤，滤液浓缩后柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)得到化合物2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯2d粗品(18.5g，浅黄色油状物)。MSm/z(ESI)：400.3[M+1]。
第四步：3-(3-((3-(2-氯苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯氧基)-N-(2-羟乙基)丙酰胺
依次在茄形瓶中加入2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯2d(1.0g，2.5mmol)、乙酸钾(1.47g，15mmol)、氯化烯丙基钯(II)二聚物(91mg，0.25mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(25mL)及1-氯-2-碘苯(1.2g，5.0mmol)。油泵换气(氩气)四次后放入提前升温到100℃的油浴中反应2小时。反应恢复至室温后，把反应液直接倒入水(40mL)中，用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取。有机相用盐水(40mL x 2)洗，然后用无水硫酸钠干燥、过滤及浓缩。粗品经combi-flash(正相硅胶柱，80g，石油醚：石油醚/乙酸乙酯(体积比v/v＝10/1＝0-100％至石油醚：石油醚/乙酸乙酯(体积比v/v＝5/1＝100％)分离得到3-(3-((3-(2-氯苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯氧基)-N-(2-羟乙基)丙酰胺2e(187mg，黄色油状物)，产率：14.7％。MS m/z(ESI)：510.3[M+H]。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.48(d,J＝8.0Hz,1H),7.36(t,J＝8.0Hz,1H),7.31–7.25(m,1H),7.21-7.19(m,1H),7.13(t,J＝8.0Hz,1H),6.91(d,J＝8.0Hz,1H),6.67(d,J＝8.0Hz,1H),6.58(d,J＝8.0Hz,1H),5.30(t,J＝4.0Hz,1H),5.13(s,2H),4.58(s,1H),4.51(s,1H),4.41(s,1H),4.37(s,1H),3.84(t,J＝10.0Hz,1H),3.58-3.53(m,1H),2.02–1.90(m,2H),1.88–1.76(m,2H),1.49(s,9H)。
第五步：3-((3-(2-氯苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚将三氟乙酸(0.5mL)加入到3-(3-((3-(2-氯苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯氧基)-N-(2-羟乙基)丙酰胺2e(187mg，0.367mmol)的二氯甲烷(1.0mL)溶液中，室温反应1小时。反应结束后，直接浓缩得到粗品3-((3-(2-氯苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚2f(100mg，棕色油状物)，产率：94％。MS m/z(ESI)：326.1[M+H]。
第六步：3-((3-(2-氯苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
将甲醛水溶液(37％w/w，70mg，2.2mmol)加入到3-((3-(2-氯苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚2f(100mg，0.30mmol)的甲醇(3mL)溶液中，室温搅拌半小时。将冰醋酸(0.5mL)及醋酸硼氢化钠(311mg，1.47mmol)缓慢加入反应液中，再室温反应过夜。反应液浓缩后用二氯甲烷(90mL)溶解稀释，再依次用氨水/水(10mL x 2，1/5)、饱和食盐水(20mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、浓缩。残留物用combi-flash(正相硅胶柱，20g，二氯甲烷：二氯甲烷/甲醇混合溶剂(体积比v/v＝10/1)＝0-50％)分离得到3-((3-(2-氯苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚2(165mg，黄色油状物)，产率：90.0％。MS m/z(ESI)：340.1[M+H]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38(s,1H),7.31-7.06(m,4H),6.89(s,1H),6.74(d,J＝32.6Hz,2H),5.31-5.11(m,2H),4.01-3.58(m,4H),2.77-2.46(m,3H)。MS m/z(ESI)：340.2[M+1]。
实施例3：2-溴-4-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
Figure BDA0002168009430000161
Figure BDA0002168009430000171
第一步：2-溴-4-(溴甲基)-1-甲氧基苯
在茄形瓶中加入2-溴-1-甲氧基-4-甲基苯3a(5g，24.8mmol)，溶于二氯甲烷30mL，加入N-溴代丁二酰亚胺(5.3g，29.8mmol)，偶氮二异丁腈(6.8g，42mmol)，加热40℃回流过夜。反应结束后，将反应恢复至室温，并加入水(20mL)用乙酸乙酯(40mL x 3)和盐水(40mL x 2)洗，然后用无水硫酸钠干燥、过滤及浓缩，得到2-溴-4-(溴甲基)-1-甲氧基苯1b(5.6g，黄色固体)，产率：81.5％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.59(d,J＝2.0Hz,1H),7.32-7.26(m,1H),6.86(d,J＝8.4Hz,1H),4.44(s,2H),3.89(s,3H).MS m/z(ESI)：278.8[M+H]。
第二步：2-(3-溴-4-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯将2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯(2.8g，13.5mmol)溶于乙腈(50mL)中，加入2-溴-4-(溴甲基)-1-甲氧基苯3b(4.5g，16.2mmol)及碳酸铯(32.5g，47mmol)，氮气换气3次，置于80℃油浴中反应3小时。将反应液过滤，滤液浓缩。残留物通过柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝2：1)进行纯化，得到2-(3-溴-4-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯3c(6g，黄色油状物)，产率：91％。MS m/z(ESI)：408.0[M+H]。
第三步：2-(3-溴-4-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
依次在茄形瓶中加入2-(3-溴-4-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯3c(4.6g，13.7mmol)、乙酸钾(8g，82.2mmol)、氯化烯丙基钯(II)二聚物(499mg，1.37mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(50mL)及邻氟碘苯(6.1g，27.4mmol)。油泵换气(氩气)四次后放入提前升温到100℃的油浴中反应3小时。反应恢复至室温后，把反应液直接倒入水(80mL)中，用乙酸乙酯(40mL x 3)萃取。有机相用盐水(40mL x 2)洗，然后用无水硫酸钠干燥、过滤及浓缩。粗品经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/l)分离得到2-(3-溴-4-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯3d(729mg，黄色油状物)，产率：10.6％。MS m/z(ESI)：502.1[M+H]。
第四步：2-(3-溴-4-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑将三氟乙酸(0.5mL)加入到2-(3-溴-4-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯3d(729mg，1.45mmol)的二氯甲烷(1.5mL)溶液中，室温反应1小时。反应结束后，直接浓缩得到粗品2-(3-溴-4-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑1e(581mg，棕色油状)，产率：100％。MS m/z(ESI)：403.2[M+H]。
第五步：2-(3-溴-4-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑
将甲醛水溶液(37％，1.2g，14.5mmol)加入到2-(3-溴-4-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑3e(581mg，1.45mmol)的二氯甲烷/甲醇(6mL，2/1)溶液中，室温搅拌半小时。将醋酸硼氢化钠(1.8g，8.7mmol)缓慢加入反应液中，再室温反应过夜。反应液浓缩后用二氯甲烷(10mL)溶解稀释，再依次用氨水/水(10mL x 2，1/5)、饱和食盐水(10mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、浓缩。取50mg粗品用高压液相色谱制备(乙腈/水(含0.05％三氟乙酸)得到2-(3-溴-4-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑3f(三氟乙酸盐，盐系数＝1.3，20.1mg，黄色油状物)，产率：24.5％。MS m/z(ESI)：416.0[M+H]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.50-7.46(m,1H),7.25–7.07(m,4H),6.97(d,J＝8.4Hz,1H),6.80(d,J＝8.4Hz,1H),5.17(s,2H),4.96(s,1H),4.09–4.01(m,2H),3.86(s,3H),3.18(s,3H)。
第六步：2-溴-4-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
称2-(3-溴-4-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑3f(50mg，0.11mmol)于茄形瓶中，加入二氯甲烷(1mL)，冰浴下加入三溴化硼(0.1mL)反应2小时。反应结束后用水(5mL)淬灭，用二氯甲烷(5mL x 3)萃取。有机相用盐水(5mL x 2)洗，然后用无水硫酸钠干燥、过滤及浓缩，所得粗品用高压液相色谱制备(乙腈/水(含0.05％三氟乙酸)得到2-溴-4-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚3(三氟乙酸盐，盐系数＝1.6，29.9mg，淡黄色油状物)，产率：46.5％。MS m/z(ESI)：402.2[M+H]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.52-7.47(m,1H),7.27–7.10(m,4H),6.87(q,J＝8.4Hz,2H),6.70(s,1H),5.15(s,2H),4.94(d,J＝12.8Hz,2H),4.12-4.02(m,2H),3.13(s,3H)。
实施例4：3-溴-5-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
Figure BDA0002168009430000191
第一步：1-溴-3-(溴甲基)-5-甲氧基苯
依次在茄形瓶中加入1-溴-3-甲氧基-5-甲基苯4a(22.8g，113mmol)，溶于二氯甲烷(100mL)，加入N-溴代丁二酰亚胺(242g，136mmol)及偶氮二异丁腈(31.5g，192mmol)，加热至45℃回流过夜。反应结束后，将反应恢复至室温，用乙酸乙酯(40mL x 3)萃取。有机相依次用水(40mL x 2)和盐水(40mL*2)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥、过滤及浓缩，所得粗品经正相硅胶柱分离(石油醚:乙酸乙脂＝20:1)得到1-溴-3-(溴甲基)-5-甲氧基苯4b(20g，黄色固体)，产率：63％。MS m/z(ESI)：278.8[M+H]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.12(s,1H),6.98(s,1H),6.85(s,1H),4.38(s,3H),3.80(s,4H)。
第二步：2-(3-溴-5-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯将2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯(12g，56.7mmol)溶于乙腈(100mL)中，加入1-溴-3-(溴甲基)-5-甲氧基苯4b(19g，68.1mmol)、碳酸铯(64.8g，199mmol)，氮气置换3次，置于80℃油浴中反应3小时。将反应液过滤，滤液浓缩。残留物通过柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝2：1)进行纯化，得到2-(3-溴-5-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯4c(23g，黄色油状物)，产率：82.9％。MS m/z(ESI)：408.0[M+H]。
第三步：2-(3-溴-5-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
依次在茄形瓶中加入2-(3-溴-5-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯4c(22g，54.1mmol)、乙酸钾(31.8g，324.6mmol)、氯化烯丙基钯(II)二聚物(1.9mg，5.41mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(100mL)及邻氟碘苯(24g，108.2mmol)。油泵换气(氩气)四次后放入提前升温到100℃的油浴中反应3小时。反应恢复至室温后，把反应液直接倒入水(80mL)中，用乙酸乙酯(40mL x3)萃取。有机相依次用水(40mL x2)和盐水(40mL x2)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥、过滤及浓缩。粗品经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/l)分离得到2-(3-溴-5-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯4d(2.7g，黄色油状物)，产率：9.1％。MS m/z(ESI)：502.1[M+H]。
第四步：2-(3-溴-5-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑将三氟乙酸(7mL)加入到2-(3-溴-5-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯4d(2.7g，5.5mmol)的二氯甲烷(21mL)溶液中，室温反应1小时。反应结束后，直接浓缩得到粗品2-(3-溴-5-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑4e(2.1g，黑色液体)，产率：100％。MS m/z(ESI)：403.2[M+H]。
第五步：2-(3-溴-5-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑
将甲醛水溶液(37％，1.39g，55mmol)加入到2-(3-溴-5-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑4e(2.2g，5.5mmol)的二氯甲烷/甲醇(20mL，2/1)溶液中，室温搅拌半小时。将醋酸硼氢化钠(6.9g，33mmol)缓慢加入反应液中，再室温反应过夜。反应液浓缩后用二氯甲烷(10mL)溶解稀释，再依次用氨水/水(10mL x 2，1/5)、饱和食盐水(10mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、浓缩得粗品。取50mg粗品用高压液相色谱制备(乙腈/水(含0.05％三氟乙酸)得到2-(3-溴-5-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑4f(三氟乙酸盐，盐系数＝2，4.1mg，黄色油状物)，产率：5.1％。MSm/z(ESI)：416.3[M+H]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.49(s,2H),7.25(s,2H),6.95(s,1H),6.77(s,1H),6.50(s,1H),5.20(s,2H),5.01(s,2H),4.22–3.97(m,2H),3.73(s,3H),3.16(s,3H)。
第六步：3-溴-5-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
称2-(3-溴-5-甲氧基苄基)-3-(2-氟苯基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑4f(6g，14.5mmol)于茄形瓶中，加入二氯甲烷(10mL)，冰浴下加入三溴化硼(12mL)反应2小时。反应结束后用水(10mL)淬灭，用二氯甲烷(15mL x 3)萃取。有机相用盐水(10mL x 2)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥、过滤及浓缩，所得粗品取50mg用高压液相色谱制备(乙腈/水(含0.05％三氟乙酸)得到3-溴-5-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚4(三氟乙酸盐，盐系数＝1.7，23mg，淡黄色油状物)，产率：30.5％。MSm/z(ESI)：404.2[M+H]。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.58-7.53(m,1H),7.40-7.26(m,2H),6.80(s,1H),6.56(s,1H),6.39(s,1H),5.24(s,2H),4.60(s,4H),3.18(s,3H)。
实施例5：3-(1-(5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)乙基)苯酚
Figure BDA0002168009430000211
第一步：1-(3-甲氧基苯基)乙-1-醇
冰浴下，将NaBH4(3.8g，100mmol)分批加入化合物1-(3-甲氧基苯基)乙烷-1-酮5a(10.0g，66.7mmol)的甲醇(120mL)溶液中，混合物室温搅拌18小时，加氯化铵水溶液(300mL)淬灭反应，然后用乙酸乙酯(200mL×3)萃取。有机相合并后用饱和食盐水(200mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩得到化合物1-(3-甲氧基苯基)乙-1-醇5b(10g，微黄色液体)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.22-7.27(m,1H),6.91-6.94(m,2H),6.78-6.81(m,1H)，4.83-4.85(m,1H)，3.80(s,3H)，2.19(s,1H)，1.46(d,3H)。
第二步：1-(1-溴乙基)-3-甲氧基苯
将PPh3(36g，138mmol)分批加入化合物1-(3-甲氧基苯基)乙-1-醇5b(10.5g，69.1mmol)和CBr4(46g，138mmol)的乙醚(150mL)溶液中，白色混浊产生，混合物室温搅拌18小时。混合物用乙醚(200mL)稀释，过滤，滤液浓缩，残留物通过柱层析分离(纯石油醚到石油醚/乙酸乙酯＝1/50)，得到化合物1-(1-溴乙基)-3-甲氧基苯5c(10g，黄色油状物)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.22-7.27(m,1H),6.97-7.02(m,2H),6.79-6.82(m,1H)，5.16(q,1H)，3.81(s,3H)，2.02(d,3H)。
第三步：2-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
将2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯1d(2g，9.57mmol)溶于乙腈(35mL)中，加入1-(1-溴乙基)-3-甲氧基苯5c(3.07g，14.35mmol)、碳酸铯(4.67g，14.35mmol)，在氩气气氛中于80℃反应过夜。将反应液过滤，滤液浓缩。残留物通过柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝6：1)，得到化合物2-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯5d粗品(1.1g，黄色油状物)。MS m/z(ESI)：344.2[M+1]。
第四步：2-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
依次在反应瓶中加入2-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯5d粗品(1.0g，2.92mmol)、醋酸钾(1.72g，17.5mmol)、氯化烯丙基钯(II)二聚物(107mg，0.29mmol)、邻碘甲苯(1.27g，5.84mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(30mL)，在氩气气氛中于100℃反应过夜。将反应液直接倒入水(150mL)中，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。有机相合并后用饱和食盐水(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩。残留物通过柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝2：1)，得到化合物2-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯5e(150mg，黄色油状物)。MS m/z(ESI)：434.4[M+1].
第五步：2-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-3-(邻甲苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑
将三氟乙酸(3mL)加入到化合物2-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯5e(150mg，0.35mmol)的二氯甲烷(9mL)溶液中，室温反应1小时。反应液直接浓缩得到化合物2-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-3-(邻甲苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑5f(120mg，黄色油状)粗品用于下一步反应。MS m/z(ESI)：334.3[M+1]。
第六步：2-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-5-甲基-3-(邻甲苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑
将甲醛水溶液(37％，438mg，5.41mmol)加入到粗品化合物2-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-3-(邻甲苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑5f(120mg，0.36mmol)的二氯甲烷/甲醇(12mL，2/1)溶液中，室温搅拌0.5小时。将醋酸硼氢化钠(1.15g，5.41mmol)缓慢加入反应液中，再室温反应过夜。反应液浓缩，残留物经HPLC制备(乙腈/水(含0.05％NH3)梯度冲洗)得化合物2-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-5-甲基-3-(邻甲苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑5g(70mg，浅黄色固体)。MS m/z(ESI)：348.4[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.31(t,J＝5.0Hz,1H),7.28(d,J＝10.2Hz,1H),7.25-7.08(m,2H),7.08-6.88(m,1H),6.72(ddd,J＝15.4,10.5,3.3Hz,2H),6.49(dd,J＝8.0,4.9Hz,1H),5.06(dq,J＝79.1,7.0Hz,1H),3.99-3.77(m,2H),3.70(dd,J＝22.3,8.4Hz,3H),3.66-3.49(m,2H),2.62(d,J＝3.3Hz,3H),2.22(s,2H),1.85(dd,J＝24.7,7.0Hz,3H),1.78(s,1H)。
第七步：3-(1-(5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)乙基)苯酚
将化合物2-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-5-甲基-3-(邻甲苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑5g(60mg，0.173mmol)置于反应瓶中，在氩气气氛中，加入二氯甲烷(6mL)，再于冰浴下缓慢加入三溴化硼(17％的二氯甲烷溶液，0.4ml)，逐渐恢复至室温搅拌1小时，慢慢加入甲醇(2ml)淬灭反应。反应液浓缩后用二氯甲烷(3ml)溶解稀释，再依次用氨水/水(1ml×2，1/10)、饱和食盐水(2ml)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、浓缩。残留物经HPLC制备(乙腈/水(含0.05％NH3)梯度冲洗)得化合物3-(1-(5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)乙基)苯酚5(10mg，黄色油状物)。MS m/z(ESI)：334.3[M+1]。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.28(m,2H),7.22-7.15(m,1H),7.15-7.02(m,1H),7.01-6.86(m,1H),6.71-6.49(m,2H),6.40(dd,J＝62.2,8.0Hz,1H),5.22-4.91(m,1H),4.06(dd,J＝23.1,12.5Hz,1H),3.98-3.82(m,2H),3.72(dd,J＝22.9,12.5Hz,1H),2.71(s,3H),2.20(s,2H),1.84(dd,J＝18.2,7.0Hz,3H),1.78(s,1H)。
实施例6：3-((3-(4-羟基苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
Figure BDA0002168009430000231
第一步：3-(4-异丙氧基苯基)-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H))-甲酸乙酯
冰浴下氢化钠(0.96g，24mmol)加入化合物对碘苯酚(4.4g，20mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(100ml)溶液中，室温搅拌1小时后加入碘代异丙烷(4mL)，继续室温搅拌24小时后冰浴下缓慢加入纯水(200ml)淬灭反应，乙酸乙酯(200ml×4)萃取，有机相合并后用饱和食盐水(200mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩。残留物通过柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝10：1,Rf＝0.3)进行纯化，得到化合物1-碘-4-异丙氧基苯(4.7g，黄色油状物)。
依次在反应瓶中加入化合物2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯2d(800mg，2.0mmol)、醋酸钾(1.2g，12.0mmol)、氯化烯丙基钯(II)二聚物(73mg，0.2mmol)、化合物1-碘-4-异丙氧基苯(786mg，3.0mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(30mL)，氩气气氛中于100℃反应过夜。将反应液直接倒入水(80mL)中，用乙酸乙酯(80mL×3)萃取。有机相合并后用饱和食盐水(30mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩。残留物通过柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝4：1)进行纯化，得到化合物3-(4-异丙氧基苯基)-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H))-甲酸乙酯6a(100mg，黄色油状物)。MS m/z(ESI)：534.5[M+1]。
第二步：3-((3-(4-异丙氧基苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
将三氟乙酸(0.3mL)加入到化合物3-(4-异丙氧基苯基)-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H))-甲酸乙酯6a(100mg，0.19mmol)的二氯甲烷(1.0mL)溶液中，室温反应1小时。反应结束后，反应液直接浓缩得到化合物3-((3-(4-异丙氧基苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚6b(70mg，黑色油状)粗品用于下一步反应。MS m/z(ESI)：350.3[M+1]。
第三步：3-((3-(4-异丙氧基苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
将甲醛水溶液(37％，0.5mL)加入到化合物3-((3-(4-异丙氧基苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚6b(60mg，0.17mmol)的二氯甲烷/甲醇(1.5mL，2/1)溶液中，室温搅拌1小时。将醋酸硼氢化钠(216mg，1.02mmol)缓慢加入反应液中，再室温反应1小时。反应液浓缩后用HPLC制备(乙腈/水(含0.05％NH3)梯度冲洗)得化合物3-((3-(4-异丙氧基苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚6c(38mg，黄色油状物)。MS m/z(ESI)：364.4[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38(s,1H),7.31-7.06(m,4H),6.89(s,1H),6.74(d,J＝32.6Hz,2H),5.31-5.11(m,2H),4.01-3.58(m,4H),2.77-2.46(m,3H)。
第四步：3-((3-(4-羟基苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
将化合物3-((3-(4-异丙氧基苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚6c(30mg，0.08mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，在冰浴下逐滴加入三溴化硼(0.4mL，0.41mmol)，室温反应2小时。反应结束后滴加甲醇(1mL)淬灭反应。反应液浓缩后用HPLC制备(乙腈/水(含0.05％NH3)梯度冲洗)得化合物3-((3-(4-羟基苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚6(7.1mg，棕色油状物)。MS m/z(ESI)：322.2[M+1]。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.19-7.13(m,2H),7.07(t,J＝7.9Hz,1H),6.88-6.78(m,2H),6.64(dd,J＝8.0,1.9Hz,1H),6.52-6.40(m,2H),5.23(s,2H),3.86(d,J＝9.6Hz,4H),2.67(s,3H)。
实施例7：3-(2-(3-羟基苄基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑-3-基)苯酚
Figure BDA0002168009430000251
第一步：2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)-2,6-叔丁基-2,4,5,6-四氢吡咯[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
将对甲苯磺酸(86mg，0.45mmol)加入到化合物3-碘苯酚(1.0g，4.55mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中后，再加入3,4-二氢吡喃(763mg，9.09mmol)室温反应2小时。将反应液倒入水中(50mL×2)洗涤后，用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩，得到化合物2-(3-碘苯氧基)四氢-2H-吡喃(1.0g，黄色油状物)，粗品用于下一步反应。1H NMR(400MHz,CDCl)δ7.42(t,J＝1.7Hz,1H),7.31(m,1H),7.04-6.97(m,2H),5.39(t,J＝3.1Hz,1H),3.93-3.78(m,1H),3.71-3.53(m,1H),1.96(m,1H),1.88-1.77(m,2H),1.71-1.58(m,3H)。
依次在反应瓶中加入化合物2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯2d(656mg，1.64mmol)、醋酸钾(967mg，9.87mmol)、氯化烯丙基钯(II)二聚物(179mg，0.49mmol)、化合物2-(3-碘苯氧基)四氢-2H-吡喃(1.0g，3.29mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(40mL)，在氩气气氛中于100℃反应2小时。将反应液直接倒入水(100mL)中，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。有机相合并后用饱和食盐水(50mL×2)洗涤，然后使用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩。残留物通过柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝3：1)，得到化合物2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)-2,6-叔丁基-2,4,5,6-四氢吡咯[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯7a(200mg，黄色油状物)。MS m/z(ESI)：576.5[M+1]。
第二步：3-(2-(3-羟基苄基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑-3-基)苯酚
将三氟乙酸(1mL)加入到化合物2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)-2,6-叔丁基-2,4,5,6-四氢吡咯[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯7a(100mg，0.174mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中，室温反应1小时。反应结束后，反应液直接浓缩得到化合物3-(2-(3-羟基苄基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑-3-基)苯酚7b(90mg，黄色油状)，粗品用于下一步反应。MS m/z(ESI)：308.3[M+1]。
第三步：3-(2-(3-羟基苄基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑-3-基)苯酚
将甲醛水溶液(37％，188mg，2.35mmol)加入到化合物3-(2-(3-羟基苄基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑-3-基)苯酚7b(90mg，0.29mmol)的二氯甲烷/甲醇(3mL，2/1)溶液中，室温搅拌0.5小时。将醋酸硼氢化钠(497mg，2.35mmol)缓慢加入反应液中，再室温反应1小时。反应液浓缩后用HPLC制备(乙腈/水(含0.05％NH3)梯度冲洗)得化合物3-(2-(3-羟基苄基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑-3-基)苯酚7(6mg，白色固体)。MS m/z(ESI)：322.3[M+1]。1H NMR(400MHz,MeOH)δ7.20(s,1H),7.05(s,1H),6.76(s,3H),6.63(s,1H),6.45(d,J＝18.5Hz,2H),5.25(s,2H),3.80(s,4H),2.63(s,3H)。
实施例8：3-((3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
Figure BDA0002168009430000261
Figure BDA0002168009430000271
第一步：2-(3-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
化合物2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯1d(1.0g，4.78mmol)，碳酸铯(4.7g，14.3mmol)，三甲氧基苄基溴(1.1g，5.74mmol)，乙腈(40mL)依次加入反应器中，80℃反应1小时。将反应液降至室温，过滤，浓缩，残余物经柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯＝4/1)得到粗品化合物2-(3-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯8a(1.4g，粘稠物)。MS m/z(ESI)：330.3[M+1]。
第二步：3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(3-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
依次在反应瓶中加入化合物2-(3-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯8a(2.0g，6.08mmol)、醋酸钾(3.58g，36.48mmol)、氯化烯丙基钯(II)二聚物(664mg，1.82mmol)、5-氯-2-碘三氟甲苯(3.73g，12.16mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(40mL)，氩气气氛中于100℃反应3小时。将反应液直接倒入水(200mL)中，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。有机相合并后用饱和食盐水(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩。残留物通过柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)，得到化合物3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(3-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯8b(200mg，黄色油状物)。MS m/z(ESI)：508.2[M+1]。
第三步：3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(3-甲氧基苄基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑
将三氟乙酸(1mL)加入到化合物3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(3-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯8b(100mg，0.197mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中，室温反应1小时。反应结束后，反应液直接浓缩得到化合物3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(3-甲氧基苄基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑8c(50mg，黄色油状)粗品用于下一步反应。MS m/z(ESI)：408.2[M+1]。
第四步：3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(3-甲氧基苄基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑
将甲醛水溶液(37％，127mg，1.57mmol)加入到化合物3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(3-甲氧基苄基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑8c(80mg，0.197mmol)的二氯甲烷/甲醇(3mL，2/1)溶液中，室温搅拌0.5小时。将醋酸硼氢化钠(333mg，1.57mmol)缓慢加入反应液中，再室温反应1小时。反应液浓缩后用HPLC制备(乙腈/水(含0.05％TFA)梯度冲洗)得化合物3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(3-甲氧基苄基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑8d(20mg，无色油状物)。MS m/z(ESI)：422.4[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.79(s,1H),7.55(d,J＝7.9Hz,1H),7.19(t,J＝8.1Hz,1H),7.13(d,J＝7.1Hz,1H),6.88-6.75(m,1H),6.53(s,2H),5.13(t,J＝27.4Hz,2H),4.84(d,J＝15.3Hz,2H),4.01(dd,J＝92.4,11.8Hz,2H),3.74(s,3H),3.10(s,3H)。
第五步：3-((3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
将化合物3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(3-甲氧基苄基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑8d(15mg，0.036mmol)置于反应瓶中，氩气气氛中加入二氯甲烷(1mL)，再于-78℃干冰-丙酮浴下缓慢加入三溴化硼(17％的二氯甲烷溶液，0.14mL)，逐渐恢复至室温搅拌2小时，慢慢加入甲醇(2mL)淬灭反应。反应液浓缩，残留物用二氯甲烷(2mL)溶解，再依次用氨水/水(1mL×2，1/10)、饱和食盐水(1mL)洗，有机相用无水硫酸钠干燥、浓缩。残留物后用HPLC制备(乙腈/水(含0.05％TFA)梯度冲洗)得化合物3-((3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚8(6mg，黄色固体)。MSm/z(ESI)：408.2[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77(s,1H),7.39(d,J＝61.2Hz,1H),7.18-7.03(m,2H),6.73(d,J＝7.4Hz,1H),6.44(d,J＝7.1Hz,1H),6.21(s,1H),5.36-4.51(m,4H),3.96(s,2H),3.09(s,3H)。
实施例9：4-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
Figure BDA0002168009430000281
第一步：2-(4-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
取2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯1d(1g，4.8mmol)于茄形瓶中，依次加入碳酸铯(3.1g，9.6mmol)、4-甲氧基苄基氯(0.82g，5.3mmol)、乙腈(15ml)。混合物在80℃下搅拌1.5小时后将反应液恢复至室温。将反应液过滤浓缩，粗品经柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯＝4/1)得到2-(4-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯9a(1.3g，无色油状)，产率75％。MS m/z(ESI)：330.2[M+1]。
第二步：2-(4-甲氧基苄基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
依次在茄形瓶中加入2-(4-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯9a(1.3g，4.0mmol)、乙酸钾(2.4g，24mmol)、氯化烯丙基钯(II)二聚物(146mg，0.4mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(20mL)、邻碘甲苯(1.7g，8.0mmol)。油泵换气(氩气)四次后放入提前升温到120℃的油浴中反应16小时。反应恢复至室温后，把反应液直接倒入水(40mL)中，用乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相用盐水(20mL*2)洗，然后用无水硫酸钠干燥、过滤、浓缩。粗品经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝4/l)分离得到2-(4-甲氧基苄基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯9b(600mg，淡黄色油状，产率36％)。MS m/z(ESI)：420.4[M+1]。
第三步：2-(4-甲氧基苄基)-3-(邻甲苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑
将三氟乙酸(2mL)加入到2-(4-甲氧基苄基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯9b(300mg，0.72mmol)的二氯甲烷(6mL)溶液中，室温反应1小时。反应结束后，直接浓缩得到2-(4-甲氧基苄基)-3-(邻甲苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑9c粗品用于下一步反应(210mg，黑色油状)，产率90％。MS m/z(ESI)：320.3[M+1]。
第四步：2-(4-甲氧基苄基)-5-甲基-3-(邻甲苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑将甲醛水溶液(37％，453mg，5.6mmol)加入到2-(4-甲氧基苄基)-3-(邻甲苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑9c(210mg，0.67mmol)的二氯甲烷/甲醇(6mL，2/1)溶液中，室温搅拌半小时。将醋酸硼氢化钠(890mg，4.2mmol)缓慢加入反应液中，再室温反应过夜。反应液浓缩后用二氯甲烷(10ml)溶解稀释，再依次用氨水/水(10ml*2，1/1)、饱和食盐水(10ml)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、浓缩。浓缩后粗品经制备板分离(二氯甲烷/甲醇＝10/1)得到2-(4-甲氧基苄基)-5-甲基-3-(邻甲苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑9d(150mg，无色油状)，产率64％。MS m/z(ESI)：334.2[M+1]。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.39-7.37(m，1H)，7.28-7.13(m，3H)，6.89-6.74(m，4H)，5.02(d，J＝20Hz，2H)，4.40-4.18(m，4H)，3.76(s，3H)，2.98(s，3H)，2.00(s，3H)。
第五步：4-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
取2-(4-甲氧基苄基)-5-甲基-3-(邻甲苯基)-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑9d(100mg，0.3mmol)于反应瓶中，换入氩气，加入二氯甲烷(2mL)，再于冰浴下缓慢加入三溴化硼(17％的二氯甲烷溶液，1.2ml)，逐渐恢复至室温搅拌1小时，反应完全。慢慢加入甲醇(4ml)淬灭反应，反应液浓缩后用二氯甲烷(4ml)溶解稀释，再依次用氨水/水(2ml*2，1/10)、饱和食盐水(2ml)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥、浓缩。浓缩后粗品经制备板分离(二氯甲烷/甲醇＝10/1)得到4-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚9(24mg，淡黄色粉末)，产率25％。MS m/z(ESI)：320.2[M+1]。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.38-7.34(m，1H)，7.26-7.13(m，3H)，6.73-6.59(m，4H)，4.99(d，J＝12Hz，2H)，4.15-4.10(m，4H)，2.91(s，3H)，1.96(s，3H)。
实施例10：3-((5-甲基-3-(邻甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
Figure BDA0002168009430000301
第一步：2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
依次在250mL茄型瓶中加入2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯2d(6.94g，17.4mmol)、醋酸钾(10.25g，104.4mmol)、氯化烯丙基钯(II)二聚物(634mg，1.74mmol)、邻碘甲苯(7.60g，34.8mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(120mL)，油泵换气三次后置于提前升温到100℃的油浴中反应过夜。将反应液直接倒入水(500mL)中，然后用乙酸乙酯(150mL*3)萃取。有机相合并后用饱和食盐水(150mL*2)洗涤，然后使用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩。残留物通过柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝2：1)进行纯化，得到2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯10a(1.25g，黄色固体)，产率15％。MS m/z(ESI)：490.3[M+1].
第二步：3-((3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
将三氟乙酸(2mL)加入到2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯10a(96mg，0.20mmol)的二氯甲烷(6mL)溶液中，室温反应1小时。反应结束后，直接浓缩得到3-((3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚10b(60mg，黄色油状)，产率99％。MS m/z(ESI)：306.3[M+1]。
第三步：3-((5-甲基-3-(邻甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
将甲醛水溶液(37％，130mg，1.6mmol)加入到3-((3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚10b(60mg，0.2mmol)的二氯甲烷/甲醇(6mL，2/1)溶液中，室温搅拌半小时。将醋酸硼氢化钠(340mg，1.6mmol)缓慢加入反应液中，再室温反应过夜。反应液浓缩后用高压液相色谱(乙腈/水(含0.05％NH3)梯度冲洗)制备得3-((5-甲基-3-(邻甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚10(35.0mg，黄色固体，产率56％)。MS m/z(ESI)：320.2[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.30(d,J＝5.9Hz,2H),7.25–7.16(m,2H),7.12(d,J＝7.6Hz,1H),7.00(t,J＝7.9Hz,1H),6.62(d,J＝8.2Hz,1H),6.44(s,1H),6.37(d,J＝7.6Hz,1H),5.03(s,2H),3.87(s,2H),3.70(s,2H),2.66(d,J＝12.0Hz,3H),2.04(d,J＝11.9Hz,3H)。
实施例11：2-甲基-5-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
Figure BDA0002168009430000311
Figure BDA0002168009430000321
第一步：5-(羟甲基)-2-甲基苯酚
将底物3-羟基-4-甲基苯甲酸11a(4.5g，29.6mmol)加入溶剂四氢呋喃(25mL)中，氩气置换后,冰水浴下滴加硼烷的四氢呋喃溶液(50mL，1mmol/mL,50mmol)。滴加完毕后，外温升至60度反应两小时。冷却后，加入饱和碳酸氢钠水溶液将(200mL)，再用乙酸乙酯(200mL*3)萃取。合并有机相并用饱和食盐水(200mL*1)洗涤后，用硫酸钠干燥，然后过滤，浓缩，得粗品5-(羟甲基)-2-甲基苯酚11b(4.0g，淡黄色固体)，产率98％。MS m/z(ESI)：121.1[M-18]。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.06(d，J＝7.5Hz,1H)，6.78-6.74(m，2H)，6.12(s，1H)，4.55(s，1H)，2.21(s，3H)。
第二步：5-(溴甲基)-2-甲基苯酚
将底物5-(羟甲基)-2-甲基苯酚11b(2.76g，20.0mmol)、三苯基磷(13.1g，50mmol)、四溴化碳(16.4g，50mmol)加入溶剂四氢呋喃(300mL)中，室温搅拌4小时。将反应液过滤，滤液浓缩。粗品经柱层析纯化得5-(溴甲基)-2-甲基苯酚11c(1.8g，淡黄色固体)，产率45％。1HNMR(400MHz，CDCl3)：δ7.08(d，J＝7.6Hz,1H)，6.87(d，J＝7.6Hz,1H)，6.81(s，1H)，4.80(s，1H)，4.43(s，2H)2.24(s，3H)。
第三步：2-(5-(溴甲基)-2-甲基苯氧基)四氢-2H-吡喃
将底物5-(溴甲基)-2-甲基苯酚11c(1.8g，9.0mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(2.27g，27mmol)、一水合对甲基苯磺酸(17mg，0.09mmol)加入溶剂二氯甲烷(20mL)中，室温搅拌3小时。将反应液浓缩。粗品经柱层析纯化得2-(5-(溴甲基)-2-甲基苯氧基)四氢-2H-吡喃11d(1.45g，淡黄色固体)，产率57％。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.09(d，J＝3.8Hz,1H)，5.92(d，J＝7.7Hz,1H)，5.44(s，1H)，4.47(q，J＝10.1Hz,2H)，3.98-3.79(m，1H),3.67–3.54(m,1H),2.24(s，3H),2.08-1.97(m,1H),1.90-1.85(m,2H),1.77–1.56(m,4H)。
第四步：2-(4-甲基-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
将底物2-(5-(溴甲基)-2-甲基苯氧基)四氢-2H-吡喃11d(1.45g，5.1mmol)、2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯1d(0.89g，4.25mmol)、碳酸铯(4.16g，12.75mmol)加入溶剂乙腈(30mL)中，加热至80度搅拌2小时。冷却后，将反应液过滤，滤液浓缩。粗品经柱层析纯化得粗品2-(4-甲基-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯11e(1.46g，淡黄色固体)，产率83％。MS m/z(ESI)：414.3[M+1]。
第五步：2-(4-甲基-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑叔丁基-5(4H)-羧酸叔丁酯
依次在100mL茄型瓶中加入底物2-(4-甲基-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯11e(1.46g，3.54mmol)、醋酸钾(2.08g，21.2mmol)、氯化烯丙基钯(II)二聚物(129mg，0.354mmol)、邻甲基碘苯(1.54g，7.07mmol)和N，N-二甲基乙酰胺(40mL)。混合物用油泵换气四次后放入提前升温到100℃的油浴中反应过夜。反应降至室温后，将反应液倒入水(100mL)中，然后用乙酸乙酯(50mL*3)萃取。有机相合并后用饱和食盐水(100mL*2)洗、无水硫酸钠干燥。浓缩后的残留物柱层析纯化得到2-(4-甲基-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑叔丁基-5(4H)-羧酸叔丁酯11f粗品(700mg)。经两次大板纯化得到188f(350mg，淡黄色固体)，产率20％。MS m/z(ESI)：504.4[M+1]。
第六步：2-甲基-5-((3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
将三氟乙酸(2mL)加入到2-(4-甲基-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑叔丁基-5(4H)-羧酸叔丁酯11f(120mg，0.24mmol)的二氯甲烷(6mL)溶液中，室温反应3小时。反应结束后，直接浓缩得到2-甲基-5-((3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚11g(75mg，黄色油状)，产率98％，粗品用于下一步反应。MS m/z(ESI)：320.2[M+1]。
第七步：2-甲基-5-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
将甲醛水溶液(37％，110mg，1.32mmol)加入到2-甲基-5-((3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚11g(73mg，0.22mmol)的二氯甲烷/甲醇(6mL，2/1)溶液中，室温搅拌半小时。将醋酸硼氢化钠(293mg，1.32mmol)缓慢加入反应液中，再室温1小时。将反应液浓缩后用硅胶制备板(二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到2-甲基-5-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚11(25mg，淡黄色固体)，产率34％。MS m/z(ESI)：334.3[M+1]。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.33–7.17(m，3H)，7.11(d，J＝7.1Hz，1H)，6.89(d，J＝7.2Hz，1H)，6.49(s，1H)，6.26(d，J＝7.0Hz，1H)，5.00(s，2H)，3.87(s，2H)，3.73(s，2H)，2.63(s，3H)，2.15(s，3H)，2.04(s，3H)。
实施例12：2-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
Figure BDA0002168009430000341
第一步：2-(2-甲氧基苄基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯
将(2-甲氧基苯基)甲醇(2.0g，14.5mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，并置于冰浴环境下搅拌，在0℃下滴加二氯亚砜(1.06mL，14.6mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液，冰浴环境下反应2小时。反应液直接过滤浓缩，得到1-(氯甲基)-2-甲氧基苯(2.3g，黄色油状，产率102％)粗品用于下一步反应；
将2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯1d(2g，9.60mmol)溶于乙腈(100mL)中，加入1-(氯甲基)-2-甲氧基苯(1.8g，11.54mmol)、碳酸铯(9.4g，28.85mmol)，用水泵换气3次，置于80℃油浴中反应过夜。将反应液过滤，滤液浓缩。残留物通过柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)进行纯化，得到2-(2-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯12a(900mg，黄色油状物)，产率28％。MS m/z(ESI)：330.3[M+1]；
依次在100mL茄型瓶中加入2-(2-甲氧基苄基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯12a(900mg，2.75mmol)、醋酸钾(1.62g，16.50mmol)、氯化烯丙基钯(II)二聚物(100mg，0.28mmol)、邻碘甲苯(1.20g，5.5mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(30mL)，油泵换气三次后置于提前升温到100℃的油浴中反应过夜。将反应液直接倒入水(100mL)中，然后用乙酸乙酯(30mL*3)萃取。有机相合并后用饱和食盐水(30mL*2)洗涤，然后使用无水硫酸钠干燥、过滤并浓缩。残留物通过柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝2：1)进行纯化，得到2-(2-甲氧基苄基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯12b(290mg，黄色油状物)，产率25％。MS m/z(ESI)：420.4[M+1]。
第二步：2-((3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
2-(2-甲氧基苄基)-3-(邻甲苯基)-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-羧酸叔丁酯12b(120mg，0.29mmol)溶于二氯甲烷(6mL)中，在冰浴下逐滴加入三溴化硼(0.64mL，1.15mmol)，在冰浴下反应3小时。反应结束后滴加水(5mL)淬灭反应。反应液直接过滤浓缩，得到2-((3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚12c(70mg，黄色油状物)，产率79％。MS m/z(ESI)：306.1[M+1].
第三步：2-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚
将甲醛水溶液(37％，280mg，3.44mmol)加入到2-((3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚12c(70mg，0.23mmol)的二氯甲烷/甲醇(6mL，2/1)溶液中，室温搅拌半小时。将醋酸硼氢化钠(730mg，3.44mmol)缓慢加入反应液中，再室温反应过夜。反应液浓缩后用高压液相色谱(乙腈/水(含0.05％NH3)梯度冲洗)制备得2-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚12(30mg，白色粉末)，产率41％。MS m/z(ESI)：320.3[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.34(s,1H),7.46–7.38(m,1H),7.32(dd,J＝11.2,7.5Hz,2H),7.24–7.16(m,2H),6.97(d,J＝8.1Hz,1H),6.75(t,J＝7.4Hz,1H),6.65(d,J＝7.4Hz,1H),5.00(d,J＝14.7Hz,1H),4.83(d,J＝14.7Hz,1H),3.97–3.75(m,2H),3.66(d,J＝16.1Hz,2H),2.63(s,3H),2.05(d,J＝31.5Hz,3H)。
测试例：化合物对H+/K+ATPase酶活性抑制的测定
下面的实验是用来测定本发明化合物对H+/K+ATPase酶活性的抑制作用。
1.实验材料
Plate reader:SpectraMax M5(MD)
孔雀石绿(Sigma Aldrich,213020-25G)
钼酸铵(Sigma Aldrich,277908-20G)
ATP(Sigma Aldrich,A1852-1VL)。
2.缓冲液配制
酶工作液：对酶进行滴定，用缓冲液1将酶稀释，反应时，取5μl稀释液至50μl的反应体系中
ATP溶液：100mM的ATP用无K+buffer稀释至5mM，取5μl稀释液至50μl的反应体系中，即ATP的终浓度为500μM
MLG显色液：将0.12％的MLG、7.5％钼酸铵、11％的Tween-20按100：25：2的体积混匀，检测时每孔加入15μl
缓冲液1:50mM Tris-HCl pH 6.5,5mM氯化镁(magnesium chloride),10μM缬氨霉素(valinomycin)
缓冲液2:50mM Tris-HCl pH 6.5,5mM氯化镁(magnesium chloride),10μM缬氨霉素(valinomycin),20mM KCl
匀浆缓冲液：10mmol/L Tris-HCl,pH 6.8，0.25M蔗糖(sucrose),1mmol/L EDTA
7.5％Ficoll分层液：匀浆缓冲液+7.5％(W/W)
Figure BDA0002168009430000361
400(聚蔗糖400)。
3.实验步骤
3.1.H+/K+ATP酶提取
(1)分离出兔胃组织，自来水冲洗血迹，食物残留。
(2)利用预冷的NaCl溶液彻底清洗胃底部位，去除表面粘液。
(3)将剥离的粘膜，装于样品袋或50ml离心管，迅速冻于液氮罐中。
(4)取出组织，用手术剪刀剪碎，加入预冷的匀浆缓冲液(4ml/g组织)，于组织匀浆机中匀浆2-10min。
(5)匀浆后，如果有较大的组织颗粒，可离心(600g,10min)去除，然后将上清移至干净的离心管中，20000g离心30min后，然后将上清移至干净的离心管中，进一步离心，100000g离心90min，收集沉淀。
(6)利用匀浆缓冲液重悬沉淀，吹散均匀，等比例加入7.5％Ficoll分层液，100000g离心90min，收集沉淀。
(7)匀浆缓冲液重悬沉淀，吹散均匀，用Bradford测蛋白浓度。分管冻存于-80℃备用。
3.2.H+/K+ATP酶活性实验
(1)每个实验孔中加入35μl反应缓冲液，再加入35μl的缓冲液1
(2)全酶和缓冲液孔中，加入5μl含10％DMSO的缓冲液1
(3)化合物孔中，加入5μl 10X化合物工作液混匀
(4)缓冲液孔中加入5μl的缓冲液1
(5)其余孔中，加入5μl 10X酶工作液混匀于37℃孵育30min
(6)向所有实验孔中加入5μl 10XATP工作液，并混匀于37℃孵育20min
(7)向所有实验孔中加入15μl MLG显色液，并混匀于室温孵5-30min
(8)M5仪器检测620nm的读数
4.数据分析
抑制率用以下公式计算：
抑制率(IC50)＝【OD(样品孔)-OD(含氯化钾的全酶孔)】/【(OD(含氯化钾的全酶孔)-(OD(不含氯化钾的全酶孔)】×100％
5.实验结果
各实施例化合物的抑制率(IC50)在表2中示出
表2
化合物编号 IC<sub>50</sub>(μM)
实施例1 0.07733
实施例2 0.1041
实施例3 0.05693
实施例4 0.1613
实施例5 0.5273
实施例6 3.582
实施例7 1.239
实施例8 1.251
实施例9 0.09896
实施例10 0.09751
实施例11 0.3085
实施例12 3.637
从表2可以看出，本发明化合物具有优异的H+/K+ATPase酶抑制活性，可用于制备胃酸分泌抑制剂。

Claims (10)

1.一种通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure FDA0002168009420000011
其中：
R1、R2各自独立选自氢原子、卤素、羟基或任选地被取代的烷基；
R3选自氢原子、卤素、羟基或烷基；
R4选自氢原子、卤素或任选地被取代的烷基。
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，
R1、R2各自独立选自氢原子、卤素、羟基或任选地被一个或多个氟原子取代的烷基；
R3选自氢原子或C1～3烷基；
R4选自氢原子、卤素或任选地被一个或多个羟基或氟原子取代的烷基。
3.根据权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，
R1、R2各自独立选自氢原子、卤素、羟基或任选地被一个或多个氟原子取代的C1～3烷基；
R3选自氢原子或C1～3烷基；
R4选自氢原子、卤素或任选地被一个或多个氟原子取代的C1～3烷基。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，
R1、R2各自独立选自氢原子、氟原子、氯原子、羟基、甲基、三氟甲基；
R3选自氢原子或甲基；
R4选自氢原子、氟原子、溴原子或甲基。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物选自：
3-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
3-((3-(2-氯苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
2-溴-4-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
3-溴-5-((3-(2-氟苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
3-(1-(5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)乙基)苯酚；
3-((3-(4-羟基苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
3-(2-(3-羟基苄基)-5-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑-3-基)苯酚；
3-((3-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-5-甲基-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
4-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
3-((5-甲基-3-(邻甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
2-甲基-5-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚；
2-((5-甲基-3-(邻-甲苯基)-5,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-2(4H)-基)甲基)苯酚。
6.一种药物组合物，包括权利要求1至5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
7.权利要求1至5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或权利要求6所述的药物组合物在制备胃酸分泌抑制剂中的用途。
8.权利要求1至5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或权利要求6所述的药物组合物在制备H+/K+-腺苷三磷酸酶抑制剂中的用途。
9.权利要求1至5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或权利要求6所述的药物组合物在制备钾离子竞争性酸阻滞剂中的用途。
10.权利要求1至5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或权利要求6所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗和/或预防消化性溃疡、卓-艾综合征、胃炎、糜烂性食管炎、反流性食管炎、症状性胃食管反流疾病、巴雷特食管炎、功能性消化不良、幽门螺旋杆菌感染、胃癌、胃MALT淋巴瘤、非甾体抗炎药引起的溃疡或手术后应激导致的胃酸过多或溃疡；或者抑制消化性溃疡、急性应激性溃疡、出血性胃炎或侵入性应激造成的上消化道出血。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1905774A1 (en) * 2003-09-17 2008-04-02 Janssen Pharmaceutica, N.V. Fused heterocyclic compounds as serotonin receptor modulators
CN105330647A (zh) * 2014-08-14 2016-02-17 江苏柯菲平医药股份有限公司 吡咯磺酰类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CN110117284A (zh) * 2018-02-06 2019-08-13 江苏奥赛康药业有限公司 含氮杂环类化合物及其制备方法和用途
CN110194773A (zh) * 2019-07-26 2019-09-03 上海美迪西生物医药股份有限公司 吡咯并吡唑类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1905774A1 (en) * 2003-09-17 2008-04-02 Janssen Pharmaceutica, N.V. Fused heterocyclic compounds as serotonin receptor modulators
CN105330647A (zh) * 2014-08-14 2016-02-17 江苏柯菲平医药股份有限公司 吡咯磺酰类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CN110117284A (zh) * 2018-02-06 2019-08-13 江苏奥赛康药业有限公司 含氮杂环类化合物及其制备方法和用途
CN110194773A (zh) * 2019-07-26 2019-09-03 上海美迪西生物医药股份有限公司 吡咯并吡唑类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用

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