CN112386678A

CN112386678A - 多肽或其衍生物的应用

Info

Publication number: CN112386678A
Application number: CN201910743680.9A
Authority: CN
Inventors: 韦德; 李小梅; 丁怡; 肖玲
Original assignee: Chengdu Huitai Biomedicine Co ltd
Current assignee: Chengdu Huitai Biomedicine Co ltd
Priority date: 2019-08-13
Filing date: 2019-08-13
Publication date: 2021-02-23
Anticipated expiration: 2039-08-13
Also published as: KR20220044291A; CA3146530A1; EP4014986A1; IL290137A; EP4014986A4; CN112386678B; WO2021027704A1; JP2022544481A; MX2022001717A; US20220280594A1; AU2020327457A1

Abstract

本发明涉及医药技术领域，特别涉及多肽或其衍生物的应用。本发明提供了抗肿瘤多肽类药物(如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列，如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经缺失、替换、添加和/或修饰一个或多个氨基酸获得的氨基酸序列)，在药物靶点特异性、药物生物活性、药物毒副反应、治疗成本等各方面均具有显著优势。本发明中，基于对肿瘤微环境形成与稳态维持涉及的细胞因子，设计可以抑制肿瘤细胞的活性和肿瘤的转移的多肽或其衍生物，并进一步将该多肽或其衍生物应用于制备抗肿瘤药物。

Description

多肽或其衍生物的应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别涉及多肽或其衍生物的应用。

背景技术

癌症(恶性肿瘤)是一类严重性致死性疾病，其发病率和死亡率居高不下，严重威胁人类健康。虽然对肿瘤发生机制的研究认识正不断深入，但恶性肿瘤的临床治疗仍是世界性难题，尤其针对肿瘤转移与复发。近几年，由于恶性肿瘤早期诊断和靶向性抑制肿瘤生长治疗方案应用于临床，恶性肿瘤患者的存活率得到一定提升；同时，新一代抗肿瘤药物不断应用于临床，尤其是针对各种生长因子的中和抗体或小分子激酶抑制剂等靶向药物，在抑制肿瘤生长和转移方面起一定效果。然而，目前临床常用的抗肿瘤一线疗法：化疗和放疗，靶向性差、副作用大，且易产生治疗抗性，在恶性肿瘤临床治疗方面应用受限；而新的靶向性药物同样存在脱靶率高、毒副作用强、疗效有限等缺陷，远远不能满足临床上对抗肿瘤药物有效性和安全性的需求；此外，恶性肿瘤转移的临床治疗仍然是世界性难题。因此，靶向性高、特异性强、毒副作用小的新型抗肿瘤药物已成为抗肿瘤药物研发的重点发展方向，真正提高肿瘤的临床治疗效果和治疗可及性。

传统肿瘤分类通常以肿瘤的病发组织或器官为基础，如恶性实体瘤可分为黑色素瘤、神经胶质瘤、淋巴瘤、食管癌、肺癌、肝癌、胰腺癌、肾癌、乳腺癌、胃癌、甲状腺癌、尿路上皮癌、前列腺癌、结肠癌等。虽然病发组织器官不同，但恶性实体瘤在肿瘤病理机制特征方面存在共通之处即肿瘤微环境的形成和维持，包括肿瘤免疫抑制微环境的形成、肿瘤相关细胞活化、肿瘤相关细胞因子和胞外基质的累积等。肿瘤微环境的形成和维持在肿瘤的发生、发展以及转移过程中发挥关键作用。

肿瘤微环境是指由肿瘤细胞、肿瘤基质细胞(如：肿瘤相关纤维母细胞)、免疫细胞(如：肿瘤相关巨噬细胞)、胞外基质(如：纤粘蛋白、胶原蛋白)等组成的复杂微环境。细胞与细胞、细胞与胞外基质相互作用共同调节肿瘤微环境，促进肿瘤发生发展。在肿瘤发展初期，肿瘤细胞与肿瘤相关基质细胞的相互作用促进了肿瘤微环境的形成，肿瘤细胞通过分泌多种细胞因子(如：TGF-β、IL-10、LOX、ROS等)活化肿瘤相关基质细胞，活化的基质细胞大量表达分泌胞外基质导致肿瘤微环境中胞外基质的积累；活化的基质细胞同样分泌多种细胞因子(如：TGF-β、PDGF、VEGF、FGF、CTGF等)促进肿瘤发生发展。同时，肿瘤微环境的形成促使肿瘤细胞逃避免疫系统清除，在肿瘤微环境中存在大量免疫抑制因子(PD-L1、TGF-β、IL-10、CSF-1、GM-CSF)，如：肿瘤细胞表达分泌的程序性死亡配体1(PD-L1)能够特异性结合细胞毒性T细胞表面程序性死亡分子(PD-1)进而抑制细胞毒性T细胞对肿瘤细胞的清除作用；来源于肿瘤细胞、肿瘤基质细胞、肿瘤相关免疫细胞等多种细胞的转化生长因子β(TGF-β)在肿瘤微环境中可以有效抑制细胞毒性T细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)、抗原提呈细胞(APC)、巨噬细胞等多种免疫细胞的免疫活性，促使肿瘤细胞逃避机体免疫系统清除。此外，肿瘤微环境的发展促进肿瘤的转移。研究证实，肿瘤发展到后期，肿瘤细胞受肿瘤微环境因素(如：胞外基质累积、细胞因子调控)的影响，肿瘤细胞间质化，肿瘤细胞中纤粘蛋白、N-钙粘蛋白、波形蛋白等细胞迁移与侵袭相关蛋白表达量增高，表现为肿瘤细胞迁移与侵袭能力增强，最终导致肿瘤细胞向机体其他部位转移即肿瘤转移(如：肺转移)。

因此，针对肿瘤微环境中的关键因子开发靶向性药物，将直接抑制或破坏肿瘤微环境，增强机体免疫系统对肿瘤的清除，阻断肿瘤的浸润和转移，实现治疗肿瘤的目的。此外，选择肿瘤微环境形成的关键因子作为药物作用靶点，将实现针对多种恶性实体瘤的广谱抗癌效果。例如：目前已上市药物Keytruda为抗PD-1抗体药物(Pembrolizumab)，其通过抑制肿瘤微环境中PD-1/PD-L1免疫逃逸功能，增强机体免疫系统对肿瘤细胞的清除进而实现治疗肿瘤的目的；据药物适应症数据显示，目前Keytruda已被批准用于包括黑色素瘤、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、经典型霍奇金淋巴瘤、肾癌、头颈鳞状细胞癌、尿路上皮癌、结直肠癌、肝细胞癌、胃癌等在内的多种恶性实体瘤适应症的临床治疗。

近年来，多肽靶向性药物已成为抗肿瘤药物研发的重点领域之一。现有抗肿瘤药物主要为化学小分子药物和抗体药物，在有效性、靶向性、特异性或毒副作用方面仍远不能满足临床抗肿瘤治疗需求。多肽药物的有效成分为具有生物活性的，一般是由少于100个氨基酸脱水所形成的氨基酸链，可从动植物和微生物体内分离提取、蛋白质酶解、人工合成等三种方式获得。目前的多肽药物多数源于或模拟内源性肽或其他天然肽，其结构清楚，作用机制明确，代谢产物氨基酸为机体基本组分，不会蓄积体内，毒副作用低。近年来，随着多肽合成与修饰技术的发展，人工合成多肽在制备工艺、产出率、成品纯度、特异性修饰等方面已能满足多肽药物研发的需求。多肽药物在药物研发领域具有明显的优势：与一般有机小分子药物相比，多肽药物具有活性高、用药剂量小、毒副作用低等突出优点；而与蛋白质药物相比，较小的多肽免疫原性相对较小，可化学合成，产品纯度高，质量可控。因此，开发抗肿瘤多肽靶向性药物在抗肿瘤治疗方面有明显优势，并且将是生物医药技术领域的重点研发方向。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了多肽或其衍生物的应用。本发明提供的多肽或其衍生物(N1-N54)对肿瘤细胞的迁移能力均有抑制作用，能够抑制肿瘤细胞中波形蛋白、纤粘蛋白、N-钙黏蛋白表达，能够抑制肿瘤细胞的侵袭能力。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了多肽或其衍生物在制备治疗预防和/或治疗肿瘤的药物中的应用，所述多肽具有：

(I)、如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列；或

(II)、如(I)所述氨基酸序列经缺失、替换、添加和/或修饰一个或多个氨基酸获得的氨基酸序列，且与如(I)所述氨基酸序列功能相同的氨基酸序列；或

(III)、与(I)或(II)所述氨基酸序列具有80％以上同源性的氨基酸序列。

本发明所述的多肽是指由氨基酸通过肽键相连构成的一类化合物，是不限于氨基酸数目的产物。

本发明所述的衍生物是指多肽的一种变型，在本发明中可以是对多肽序列进行氨基酸缺失、替换或添加后的产物，也可以是在多肽分子主链或侧链末端的氨基、羧基、巯基、酚羟基、咪唑基、胍基、吲哚基、甲硫基等作为修饰位点进行化学修饰后的产物。

本发明所述的化学修饰是在多肽水平上，使用合适的修饰方法和修饰剂对其进行化学修饰，使修饰后的多肽类药物的溶解度提高，稳定性增加，半衰期延长，具体可由本领域技术人员以常规方式确定。

本发明所述的对多肽SEQ ID No.1的氨基酸序列进行氨基酸缺失、添加、替换或修饰的目的是为了使其适于不偏离本发明在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的应用。

本发明对所述的氨基酸的缺失、替换、添加和/或修饰可以分别进行，也可以同时进行，可以在同一氨基酸位置进行，也可以在不同氨基酸位置进行。

本发明所述的氨基酸位置是指在多肽的氨基酸序列中，由氨基端向羧基端依次排列的氨基酸所在的位置数，但氨基酸位置是相对的，当氨基酸序列中进行氨基酸缺失或添加时，氨基酸的位置可能发生变化，这种变化可以由本领域技术人员确定。

本发明所述的用于替换或/和添加的氨基酸包括天然氨基酸和非天然氨基酸，其中，天然氨基酸指自然界存在的氨基酸，非天然氨基酸包括D型氨基酸及其它人工合成的氨基酸。

在本发明的一些具体实施方案中，所述缺失为对所述多肽的氨基端的氨基酸进行缺失、对所述多肽的羧基端的氨基酸进行缺失或对所述多肽的序列内部的氨基酸进行缺失中的一种或多种的组合。

在本发明的一些具体实施方案中，所述缺失为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸分别进行缺失。

在本发明的一些具体实施方案中，所述缺失为对所述多肽的氨基端的氨基酸和所述多肽的羧基端的氨基酸同时进行缺失。

在本发明的一些具体实施方案中，所述缺失为对所述多肽的氨基端的氨基酸、所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行缺失。

在本发明的一些具体实施方案中，所述缺失为对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行缺失。

在本发明的一些具体实施方案中，所述缺失为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行缺失。

在本发明的一些具体实施方案中，所述缺失的氨基酸数目是1个，2个，3个，4个，5个，6个，7个，8个或9个。

在本发明的一些具体实施方案中，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.2、SEQ IDNo.4、SEQ ID No.6、SEQ ID No.8、SEQ ID No.12或SEQ ID No.13所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端缺失1个氨基酸(第18位)获得的，其序列如SEQ ID No.2所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时在氨基端缺失3个氨基酸(第1-3位)获得的，其序列如SEQ ID No.4所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)获得的，其序列如SEQ ID No.6所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时在序列内部缺失3个氨基酸(第3位、第4位、第11位)获得的，其序列如SEQ ID No.8所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端缺失1个氨基酸(第18位)，同时在氨基端缺失2个氨基酸(第1-2位)获得的，其序列如SEQ ID No.12所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时在氨基端缺失5个氨基酸(第1-5位)获得的，其序列如SEQ ID No.13所示。

在本发明的一些具体实施方案中，所述添加为对所述多肽的氨基端的氨基酸进行添加、对所述多肽的羧基端的氨基酸进行添加或对所述多肽的序列内部的氨基酸进行添加中的一种或多种的组合。

在本发明的一些具体实施方案中，所述添加为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸分别进行添加。

在本发明的一些具体实施方案中，所述添加为对所述多肽的氨基端的氨基酸和所述多肽的羧基端的氨基酸同时进行添加。

在本发明的一些具体实施方案中，所述添加为对所述多肽的氨基端的氨基酸、所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行添加。

在本发明的一些具体实施方案中，所述添加为对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行添加。

在本发明的一些具体实施方案中，所述添加为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行添加。

在本发明的一些具体实施方案中，所述添加的氨基酸数目是1个，2个，3个，4个或5个。

在本发明的一些具体实施方案中，用于添加的氨基酸包括天然氨基酸和/或非天然氨基酸。

在本发明的一些具体实施方案中，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.17或如SEQ ID No.18所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端添加2个氨基酸获得的，其序列如SEQ ID No.17所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端添加1个氨基酸，同时在羧基端添加1个氨基酸获得的，其序列如SEQ ID No.18所示。

在本发明的一些具体实施方案中，所述替换为对所述多肽的氨基端的氨基酸进行替换、对所述多肽的羧基端的氨基酸进行替换或对所述多肽的序列内部的氨基酸进行替换中的一种或多种的组合。

在本发明的一些具体实施方案中，所述替换为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸分别进行替换。

在本发明的一些具体实施方案中，所述替换为对所述多肽的氨基端的氨基酸和所述多肽的羧基端的氨基酸同时进行替换。

在本发明的一些具体实施方案中，所述替换为对所述多肽的氨基端的氨基酸、所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行替换。

在本发明的一些具体实施方案中，所述替换为对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行替换。

在本发明的一些具体实施方案中，所述替换为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行替换。

在本发明的一些具体实施方案中，所述替换的氨基酸数目是1个，2个，3个，4个或5个。

在本发明的一些具体实施方案中，用于替换的氨基酸包括天然氨基酸和/或非天然氨基酸。

在本发明的一些具体实施方案中，所述修饰为对所述多肽的氨基端的氨基酸进行修饰、对所述多肽的羧基端的氨基酸进行修饰或对所述多肽的序列内部的氨基酸进行修饰中的一种或多种的组合。

在本发明的一些具体实施方案中，所述修饰为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸分别进行修饰。

在本发明的一些具体实施方案中，所述修饰为对所述多肽的氨基端的氨基酸和所述多肽的羧基端的氨基酸同时进行修饰。

在本发明的一些具体实施方案中，所述修饰为对所述多肽的氨基端的氨基酸、所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行修饰。

在本发明的一些具体实施方案中，所述修饰为对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行修饰。

在本发明的一些具体实施方案中，所述修饰为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行修饰。

在本发明的一些具体实施方案中，所述修饰为化学修饰。

在本发明的一些具体实施方案中，所述的化学修饰能够改变肽链的主链结构或侧链基团，包括乙酰化、酰胺化、糖基化、聚乙二醇(PEG)修饰、脂肪酸修饰或本领域已知的其它多肽修饰技术中的一种或多种的组合。

本发明所述的乙酰化和酰胺化是多肽常用的主链末端修饰方法，通常是在多肽主链N端乙酰化，多肽主链C端酰胺化。

本发明所述的糖基化修饰是指将糖结构与蛋白质多肽分子中某些特殊功能团以共价键相连接，包括N-糖基化、O-糖基化、S-糖基化、C-糖基化以及糖基磷脂酰肌醇修饰等。所述的N-糖基化是通过天冬酰胺使侧链的酰胺氮进行连接，O-糖基化是与丝氨酸或苏氨酸残基上的氧相连。所述的糖结构包括各种单糖、寡糖和多糖。

本发明所述的PEG修饰是指以多肽主链氨基、侧链氨基、主链羧基、侧链羧基、咪唑基、巯基及羟基等官能团为修饰位点选择相应类型的PEG进行修饰。所述的PEG是由环氧乙烷聚合的大分子聚合物，不限结构，也不限分子量。所述PEG修饰类型包括直链PEG，支链PEG，同双官能团PEG衍生物，异官能团双取代PEG衍生物和多臂官能团PEG衍生物等。

本发明所述的脂肪酸修饰是指将脂肪酸结构与蛋白质多肽分子中的某些特殊官能团以共价连接，包括氨基、羧基、巯基和羟基等的修饰。脂肪酸修饰可分为不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸修饰，饱和脂肪酸主要以肉豆蔻酸、棕榈酸进行修饰；不饱和脂肪酸修饰主要是以油酸、亚油酸等进行修饰。

本发明所述的多肽修饰可以使用本领域技术人员所熟知的方法。本发明所述的修饰目的是为了改变多肽序列的理化性质，提高多肽的成药性。

在本发明的一些具体实施方案中，所述修饰的氨基酸数目是1个，2个，3个，4个，5个，6个，7个，8个或9个。

在本发明的一些具体实施方案中，用于修饰的氨基酸包括天然氨基酸和/或非天然氨基酸。

本发明提供的多肽或其衍生物是对SEQ ID No.1所示多肽进行氨基酸缺失、替换、添加和/或修饰的多肽。其可以是对SEQ ID No.1所示多肽分别进行缺失、替换、添加或修饰。也可以是对SEQ ID No.1所示多肽同时进行缺失、替换、添加或修饰中的至少两种处理。缺失、替换、添加或修饰的位置可以是在多肽SEQ ID NO：1的氨基酸序列的氨基端、羧基端或者氨基酸序列内部，分别进行氨基酸缺失、替换、添加或修饰；也可以是在多肽SEQ IDNO：1的氨基酸序列的氨基端和羧基端，同时进行氨基酸缺失、替换、添加或修饰；也可以是在多肽SEQ ID NO：1的氨基酸序列的氨基端和序列内部，同时进行氨基酸缺失、替换、添加或修饰；也可以是在多肽SEQ ID NO：1的氨基酸序列的羧基端和序列内部，同时进行氨基酸缺失、替换、添加或修饰；也可以是在多肽SEQ ID NO：1的氨基酸序列的氨基端、羧基端和序列内部，同时进行氨基酸缺失、替换、添加或修饰。所述的氨基酸缺失、替换、添加或修饰可以在所述多肽的氨基酸序列的包括氨基端、羧基端和序列内部的任意氨基酸位置进行氨基酸缺失、替换、添加或修饰。

在本发明的一些具体实施方案中，是对如SEQ ID No.1所示氨基酸序列的多肽同时进行缺失和添加氨基酸，同时进行替换和添加氨基酸，同时进行缺失和替换氨基酸，同时进行缺失和修饰氨基酸，同时进行添加和修饰氨基酸，同时进行替换和修饰氨基酸，同时进行缺失、添加和修饰氨基酸，同时进行替换、添加和修饰氨基酸，同时进行缺失、替换和修饰氨基酸或同时进行缺失、替换、添加和修饰氨基酸中的一种或多种。

在本发明的一些具体实施方案中，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.5、如SEQID No.14、如SEQ ID No.19、如SEQ ID No.20、如SEQ ID No.21、如SEQ ID No.7、如SEQ IDNo.15、如SEQ ID No.16、如SEQ ID No.25、如SEQ ID No.26、如SEQ ID No.22、如SEQ IDNo.23、如SEQ ID No.24、如SEQ ID No.3、如SEQ ID No.9、如SEQ ID No.10、如SEQ IDNo.11、如SEQ ID No.28、如SEQ ID No.29、如SEQ ID No.30、如SEQ ID No.31、如SEQ IDNo.27、如SEQ ID No.37、如SEQ ID No.38、如SEQ ID No.39、如SEQ ID No.32、如SEQ IDNo.33、如SEQ ID No.40、如SEQ ID No.41、如SEQ ID No.42、如SEQ ID No.43、如SEQ IDNo.44、如SEQ ID No.34、如SEQ ID No.35、如SEQ ID No.36、如SEQ ID No.50、如SEQ IDNo.51所示、如SEQ ID No.52、如SEQ ID No.53所示、如SEQ ID No.54、如SEQ ID No.45、如SEQ ID No.46、如SEQ ID No.48、如SEQ ID No.49或如SEQ ID No.47所示。

在本发明的一些具体实施方案中，对如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列同时进行缺失和添加氨基酸，获得的多肽具有如SEQ ID No.5、如SEQ ID No.14、如SEQ ID No.19、如SEQ ID No.20或如SEQ ID No.21所示的氨基酸序列。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端添加1个氨基酸，同时在氨基端缺失3个氨基酸(第1-3位)获得的，其序列如SEQID No.5所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端缺失5个氨基酸(第1-5位)，同时在羧基端添加1个氨基酸获得的，其序列如SEQID No.14所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端缺失5个氨基酸(第1-5位)，同时在羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时在羧基端添加2个氨基酸获得的，其序列如SEQ ID No.19所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端添加1个氨基酸，同时在羧基端缺失1个氨基酸(第18位)获得的，其序列如SEQID No.20所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端缺失5个氨基酸(第1-5位)，同时在羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时在氨基端添加1个氨基酸获得的，其序列如SEQ ID No.21所示。

在本发明的一些具体实施方案中，对如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列同时进行替换和添加氨基酸，获得的多肽具有如如SEQ ID No.7、如SEQ ID No.15、如SEQ ID No.16、如SEQ ID No.25或如SEQ ID No.26所示的核苷酸序列。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端添加1个氨基酸，同时在序列内部第15位替换1个氨基酸(A15R)获得的，其序列如SEQ ID No.7所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端第18位替换1个氨基酸(N18R)，同时在羧基端添加1个氨基酸获得的，其序列如SEQ ID No.15所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第7位替换1个氨基酸(A7R)，同时在羧基端添加1个氨基酸获得的，其序列如SEQ ID No.16所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端替换1个氨基酸(N18R)，同时在羧基端添加2个氨基酸获得的，其序列如SEQ IDNo.25所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第15位替换1个氨基酸(A15R)，同时在氨基端添加1个氨基酸，同时在羧基端添加1个氨基酸获得的，其序列如SEQ ID No.26所示。

在本发明的一些具体实施方案中，对如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列同时进行缺失和替换氨基酸，获得的多肽具有如如SEQ ID No.22、如SEQ ID No.23或如SEQ IDNo.24所示的核苷酸序列。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第7位替换1个氨基酸(A7R)，同时在氨基端缺失3个氨基酸(第1-3位)，同时在羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)获得的，其序列如SEQ ID No.22所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第7位替换1个氨基酸(A7R)，同时在序列内部第11位缺失1个氨基酸，同时在羧基端缺失1个氨基酸(第18位)获得的，其序列如SEQ ID No.23所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第7位替换1个氨基酸(A7R)，同时在氨基端缺失2个氨基酸(第1-2位)，同时在羧基端缺失1个氨基酸(第18位)获得的，其序列如SEQ ID No.24所示。

在本发明的一些具体实施方案中，对如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列同时进行缺失和修饰氨基酸，获得的多肽具有如如SEQ ID No.3、如SEQ ID No.9、如SEQ ID No.10、如SEQ ID No.11、如SEQ ID No.28、如SEQ ID No.29、如SEQ ID No.30或如SEQ ID No.31所示的核苷酸序列。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端缺失1个氨基酸(第18位)，同时在氨基端(第1位)进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.3所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时在氨基端(第1位)进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.9所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时在氨基端缺失3个氨基酸(第1-3位)之后，在序列羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.10所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时在氨基端缺失3个氨基酸(第1-3位)之后，在氨基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.11所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端缺失2个氨基酸(第1-2位)，同时在羧基端缺失1个氨基酸(第18位)后，同时对氨基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.28所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端缺失5个氨基酸(第1-5位)，同时在羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时对氨基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.29所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端缺失5个氨基酸(第1-5位)，同时在羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.30所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部缺失3个氨基酸(第3位、第4位、第11位)，同时在羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时对氨基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.31所示。

在本发明的一些具体实施方案中，对如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列同时进行添加和修饰氨基酸，获得的多肽具有如如SEQ ID No.27、如SEQ ID No.37、如SEQ ID No.38或如SEQ ID No.39所示的核苷酸序列。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端添加1个氨基酸后，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQID No.27所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端添加2个氨基酸，同时对氨基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQID No.37所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端添加1个氨基酸，同时在羧基端添加1个氨基酸，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.38所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端添加2个氨基酸，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQID No.39所示。

在本发明的一些具体实施方案中，对如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列同时进行缺失、添加和修饰氨基酸，获得的多肽具有如如SEQ ID No.32、如SEQ ID No.33、如SEQ IDNo.40、如SEQ ID No.41、如SEQ ID No.42、如SEQ ID No.43或如SEQ ID No.44所示的核苷酸序列。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端缺失3个氨基酸(第1-3位)，同时在羧基端添加1个氨基酸，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.32所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端缺失5个氨基酸(第1-5位)，同时在羧基端添加1个氨基酸，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.33所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端缺失5个氨基酸(第1-5位)，同时在羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时对氨基端进行聚乙二醇(PEG)修饰，同时在羧基端添加2个氨基酸获得的，其序列如SEQ IDNo.40所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端添加2个氨基酸，同时在羧基端缺失1个氨基酸(第18位)，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.41所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端缺失5个氨基酸(第1-5位)，同时在羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时对氨基端进行聚乙二醇(PEG)修饰，同时在羧基端添加1个氨基酸获得的，其序列如SEQ IDNo.42所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的氨基端添加1个氨基酸，同时在羧基端缺失1个氨基酸(第18位)，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.43所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部(第2位与第3位之间)添加1个氨基酸，同时在羧基端缺失1个氨基酸(第18位)，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.44所示。

在本发明的一些具体实施方案中，对如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列同时进行替换、添加和修饰氨基酸，获得的多肽具有如SEQ ID No.34、如SEQ ID No.35、如SEQ IDNo.36、如SEQ ID No.50、如SEQ ID No.51所示、如SEQ ID No.52、如SEQ ID No.53所示或如SEQ ID No.54所示的核苷酸序列。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第15位替换1个氨基酸(A15R)，同时在羧基端添加1个氨基酸，同时对氨基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.34所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第15位替换1个氨基酸(A15R)，同时在羧基端添加1个氨基酸，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.35所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第7位替换1个氨基酸(A7R)，同时在羧基端添加1个氨基酸，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.36所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端替换1个氨基酸(N18R)，同时在羧基端添加2个氨基酸，同时对氨基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.50所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第15位替换1个氨基酸(A15R)，同时在羧基端添加1个氨基酸，同时在氨基端添加1个氨基酸，同时对氨基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.51所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端替换1个氨基酸(N18R)，同时在羧基端添加2个氨基酸，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.52所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部的第15位替换1个氨基酸(A15R)，同时在氨基端添加1个氨基酸，同时在羧基端添加1个氨基酸，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.53所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部的第7位替换1个氨基酸(A7R)，同时在羧基端添加2个氨基酸，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.54所示。

在本发明的一些具体实施方案中，对如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列同时进行缺失、替换和修饰氨基酸，获得的多肽具有如如SEQ ID No.45、如SEQ ID No.46、如SEQ IDNo.48或如SEQ ID No.49所示的核苷酸序列。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第11位替换1个氨基酸(V11R)，同时在氨基端缺失5个氨基酸(第1-5位)，同时在羧基端缺失4个氨基酸(第15-18位)，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.45所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第7位替换1个氨基酸(A7R)，同时在序列内部缺失1个氨基酸(第11位)，同时在羧基端缺失1个氨基酸(第18位)，同时对氨基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.46所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第7位替换1个氨基酸(A7R)，同时在序列内部缺失1个氨基酸(第11位)，同时在羧基端缺失1个氨基酸(第18位)，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.48所示。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的序列内部第7位替换1个氨基酸(A7R)，同时在氨基端缺失2个氨基酸(第1-2位)，同时在羧基端缺失1个氨基酸(第18位)，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.49所示。

在本发明的一些具体实施方案中，对如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列同时进行缺失、替换、添加和修饰氨基酸，获得的多肽具有如SEQ ID No.47所示的核苷酸序列。

在本发明的一个具体实施方案中，所述多肽是在如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的羧基端替换1个氨基酸(N18R)，同时在氨基端缺失2个氨基酸(第1-2位)，同时在羧基端添加1个氨基酸，同时对羧基端进行聚乙二醇(PEG)修饰获得的，其序列如SEQ ID No.47所示。

在本发明中，所述多肽与(I)或(II)所述氨基酸序列具有80％以上同源性的氨基酸序列；优选的，所述多肽与(I)或(II)所述氨基酸序列具有85％以上同源性的氨基酸序列；更优选的，所述多肽与(I)或(II)所述氨基酸序列具有90％以上同源性的氨基酸序列；更优选的，所述多肽与(I)或(II)所述氨基酸序列具有95％以上同源性的氨基酸序列；最优选的，所述多肽与(I)或(II)所述氨基酸序列具有97％以上同源性的氨基酸序列。

本发明中所述多肽或其衍生物的制备方法包括自然提取、酶水解法、发酵法、基因重组表达、化学合成。

在本发明的一些具体实施方案中，所述肿瘤包括头颈癌、呼吸系统肿瘤、消化道肿瘤、泌尿系统肿瘤、男性器官肿瘤、女性器官肿瘤、皮肤癌、内皮细胞肿瘤、脑部肿瘤、神经系统肿瘤、内分泌器官肿瘤中的一种或多种。

在本发明的一些具体实施方案中，所述头颈癌包括唇癌、口腔癌、唾液腺癌、口咽癌、鼻咽癌或下咽癌中的一种或多种。

在本发明的一些具体实施方案中，所述呼吸系统肿瘤包括喉癌、肺癌或间皮瘤中的一种或多种。

在本发明的一些具体实施方案中，所述消化道肿瘤包括结直肠癌、肛门癌、食管癌、胃癌、肝癌、胆囊癌或胰腺癌中的一种或多种。

在本发明的一些具体实施方案中，所述泌尿系统肿瘤包括肾癌或膀胱癌中的一种或两种。

在本发明的一些具体实施方案中，所述男性器官肿瘤包括阴茎癌、前列腺癌或睾丸癌中的一种或多种。

在本发明的一些具体实施方案中，所述女性器官肿瘤包括乳腺癌、外阴癌、阴道癌、宫颈癌、子宫体癌或卵巢癌中的一种或多种。

在本发明的一些具体实施方案中，所述皮肤癌包括皮肤黑色素瘤或非黑色素瘤皮肤癌中的一种或两种。

在本发明的一些具体实施方案中，所述内皮细胞肿瘤包括卡波西肉瘤；所述脑部肿瘤包括脑癌；所述神经系统肿瘤包括中枢神经系统肿瘤；所述内分泌器官肿瘤包括甲状腺癌。

在本发明的一些具体实施方案中，所述药物包括所述多肽或其衍生物作为单一活性成分，所述多肽或其衍生物互相联用，所述多肽或其衍生物与其他药物联合作为活性成分，经化学标记或生物标记的所述多肽或其衍生物形成的结合物作为活性成分，所述多肽或其衍生物或所述结合物与固体介质或半固体介质偶联制得的偶联物作为活性成分中的一种或多种，以及药学上可接受的载体。

本发明提供的预防和/或治疗肿瘤的药物中包含安全和有效量的本发明所述的多肽或其衍生物。安全和有效量是指在合理的医学判断范围内，给予所需对象足以有效且可避免严重副作用的活性成分含量。虽然其安全和有效量随如下因素变化：所选择的多肽(例如，考虑多肽的结构、稳定性和半衰期)；选择的给药途径；待治疗的病症及严重程度；待治疗对象的年龄、体型、体重和身体状况；待治疗对象的病史；治疗持续时间；期望的治疗效果及类似因素，但可由本领域技术人员以常规方式确定。

本发明提供的多肽或其衍生物可以直接作为原料药使用，也可以通过药学上可接受的载体来制备预防和/或治疗肿瘤的药物。

在本发明的一些具体实施方案中，所述药学上可接受的载体包括稀释剂、填充剂、赋形剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、泡腾剂、表面活性剂、吸收促进剂、润滑剂、吸附载体、缓释微球、埋植剂、原位微球、脂质体、微乳、原位水凝胶、纳米粒、蛋白酶抑制剂、生物黏附剂、融合蛋白、抗体或多肽中的一种或两者以上的混合物。

在本发明的一些具体实施方案中，所述药物的剂型包括片剂、注射剂、胶囊剂、颗粒剂、眼用制剂、吸入制剂、软膏剂、乳膏剂、喷雾剂、气雾剂、凝胶剂、散剂、涂剂、植入剂、洗剂中的一种或多种。

在本发明的一些具体实施方案中，所述药物的给药途径包括口服给药、肺部给药、鼻腔给药、经皮给药、眼部给药、静脉滴注、腹腔注射、皮下注射或肌肉注射中的一种或多种。

在本发明的一些具体实施方案中，所述肿瘤的细胞包括但不限于：人肺癌细胞(95D)、人肺鳞癌细胞(NCI-H226)、人肺癌细胞(A549)、荧光素酶标记人肺癌细胞A549-luc细胞、人胰腺癌细胞(PANC-1)、人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)、人肝癌细胞(HepG2)、人乳腺癌细胞(MDA-MB-453)、人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人黑色素瘤细胞(A375)、人口腔表皮样癌细胞(KB)、人咽鳞癌细胞(Fadu)、人结肠癌细胞(HCT-116)、人甲状腺癌细胞(FRO)、人前列腺癌细胞(22RV1)。

本发明中，所用肿瘤细胞：A549-luc细胞来源于上海美轩生物科技有限公司，其余肿瘤细胞来源于中国科学院细胞库、美国典型培养物保藏中心(ATCC)。所用的实验动物：4-6周龄雌性免疫缺陷小鼠(BALB/c-nu/nu，北京维通利华实验动物技术有限公司)。肿瘤动物模型：皮下异种移植瘤动物模型，小鼠皮下接种细胞数量约为2×10⁶/200μL，当皮下瘤块体积大于100mm³时开始进行随机分组给药实验；当肿瘤模型对照组肿瘤瘤块体积达到2000mm³或动物死亡时治疗结束，并进行动物解剖剥离肿瘤瘤块，测量瘤块重量和体积；整个实验期间每隔一天进行小鼠笼旁观察并测量体重。转移瘤动物模型，尾静脉接种肿瘤细胞数量约为2×10⁶/100μL，接种1小时后进行分组给药实验；实验持续时间28天，治疗结束后进行小鼠活体肺部荧光成像；整个实验期间每隔一周进行小鼠笼旁观察并检测小鼠肺部荧光强度。给药方式：瘤内注射给药或静脉注射给药，给药剂量和频次根据具体实验设计确定。实验分组：模型对照组，多肽或其衍生物治疗实验组(N1-N54)；实验动物数量：每个治疗组5只实验动物。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人非小细胞肺癌(A549)迁移能力抑制效果。图1为细胞迁移显微照片，表1为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物(N1-N54)处理48h后，A549的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对A549细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人肺癌细胞(95D)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图2为细胞迁移显微照片，表2为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，10μM多肽或其衍生物处理48h后，95D的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对95D细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人肺鳞癌细胞(NCI-H226)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图3为细胞迁移显微照片，表3为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，NCI-H226的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对NCI-H226细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为肺癌皮下异种移植瘤动物模型药效试验，肿瘤细胞为人肺癌细胞A549细胞系，给药方式为瘤内注射给药。实验分组：肿瘤模型对照组和多肽或其衍生物治疗实验组(多肽序列：N1-N12)。实验组给药剂量：N1-N12治疗组为5mg/kg，每隔一天给药一次，治疗时间持续10天。表4为肿瘤瘤块重量和体积测定值统计结果(mean±SD,P)，结果显示，与模型对照组相比，N1-N12治疗组肿瘤瘤块重量和体积均有不同程度的显著性减小，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)有效抑制了人肺癌细胞相关肿瘤的发展。

本发明的一个实施例为肺癌皮下异种移植瘤动物模型药效试验。肿瘤细胞为人肺癌细胞A549细胞系，给药方式为瘤内注射给药。实验分组：肿瘤模型对照组和多肽或其衍生物治疗实验组(多肽序列：N13-N32)。实验组给药剂量：N13-N32治疗组为5mg/kg，每隔一天给药一次，治疗持续时间为20天。表5为肿瘤瘤块重量和体积测定值统计结果(mean±SD,P)，结果显示，与模型对照组相比，N13-N32治疗组肿瘤瘤块重量和体积均有不同程度的显著性减小，表明本发明所述多肽或其衍生物(N13-N32)有效抑制了人肺癌细胞相关肿瘤的发展。

本发明的一个实施例为肺癌皮下异种移植瘤动物模型药效试验，肺癌细胞为人肺癌细胞A549细胞系，给药方式为静脉注射给药。本实施例共涉及3次实验，分别评估N1-N15、N16-N30和N31-N54，其中所涉及实验流程、给药方式、给药剂量与频次以及指标检测方法等3次实验均保持一致。实验分组为模型对照组和多肽或其衍生物治疗组(N1-N15、N16-N30、或N31-N54)。实验组给药剂量：N1-N54治疗组为60mg/kg，每隔一天给药一次，治疗持续时间为20天。实验结果如图4、表6所示，图4显示了治疗结束后各组肿瘤瘤块代表性照片，表6为肿瘤瘤块重量和体积测定值统计结果(mean±SD,P)，结果显示，与模型对照组相比，N1-N54治疗组肿瘤瘤块重量和体积均有不同程度的显著性减小，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)有效抑制了人肺癌细胞相关肿瘤的发展。

本发明的一个实施例为肺癌转移瘤动物模型药效试验，肺癌细胞为人肺癌细胞A549-luc细胞系，给药方式为静脉注射给药。实验分组为模型对照组和多肽或其衍生物治疗实验组(N1-N12)。给药剂量：N1-N12治疗组为30mg/kg，每隔一天给药一次。图5显示了治疗前后后各组实验动物活体肺部荧光成像照片。与模型对照组相比，N1-N12治疗组实验动物肺部荧光强度均有不同程度的减弱，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)可有效抑制肺部转移肿瘤的发展。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人胰腺癌细胞(PANC-1)迁移能力抑制效果。图6为细胞迁移显微照片，表7为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，PANC-1的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对PANC-1细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为Transwell细胞迁移实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人胰腺癌细胞(PANC-1)迁移能力抑制效果。图7为迁移至半透膜下表面的细胞在显微照片，表8是对迁移至半透膜下表面的细胞数量统计结果(mean±SD,P)，结果显示N1-N54处理组迁移至半透膜下表面细胞数显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)抑制了人胰腺癌细胞的迁移能力。

本发明的一个实施例为Transwell细胞侵袭实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人胰腺癌细胞(PANC-1)侵袭能力抑制效果。图8为迁移至半透膜下表面的细胞在显微照片，表9是对迁移至半透膜下表面的细胞数量统计结果(mean±SD,P)，结果显示N1-N54处理组迁移至半透膜下表面细胞数显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)抑制了人胰腺癌细胞的侵袭能力。

本发明的一个实施例为胰腺癌皮下异种移植瘤动物模型药效试验，胰腺癌细胞为人胰腺癌细胞PANC-1细胞系，给药方式为瘤内注射给药。实验分组分为模型对照组和多肽或其衍生物治疗组(N1-N12)。N1-N12治疗组给药剂量为5mg/kg，每隔一天给药一次，瘤内注射给药。治疗持续时间为24天。实验结果如图9、表10所示，图9显示了治疗结束后各组肿瘤瘤块照片，表10为肿瘤瘤块重量和体积测定值统计结果，结果显示，N1-N12治疗组肿瘤瘤块重量和体积均比模型对照组组小，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)有效抑制了人胰腺癌细胞相关肿瘤的发展。

本发明的一个实施例为Transwell细胞迁移实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)迁移能力抑制效果。图10为迁移至半透膜下表面的细胞在显微照片，表11是对迁移至半透膜下表面的细胞数量统计结果(mean±SD,P)，结果显示N1-N54处理组迁移至半透膜下表面细胞数显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)抑制了人肝癌细胞的迁移能力。

本发明的一个实施例为Transwell细胞侵袭实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)侵袭能力抑制效果。图11为迁移至半透膜下表面的细胞在显微照片，表12是对迁移至半透膜下表面的细胞数量统计结果(mean±SD,P)，结果显示N1-N54处理组迁移至半透膜下表面细胞数显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)抑制了人肝癌细胞的侵袭能力。

本发明的一个实施例对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)中纤粘蛋白表达抑制试验。体外培养SK-HEP-1细胞，收集对数生长期细胞，将细胞均匀铺于24孔板，保证每孔细胞数量为1-3×10⁵，于细胞培养箱中培养4-5h，对照组加入PBS作为对照，实验组上室加入含多肽或其衍生物(N1-N12)的PBS溶液，小室内多肽或其衍生物终浓度为10μM，继续孵育24小时后收集细胞并提取总蛋白，ELISA法检测总蛋白中纤粘蛋白含量。结果如图12、表13所示，N1-N12处理组纤粘蛋白显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)抑制了人肝癌细胞中纤粘蛋白表达。

本发明的一个实施例为多肽或其衍生物(N1-N12)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)中N-钙黏蛋白表达抑制实验。结果如图13、表14所示，N1-N12处理组N-钙黏蛋白显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)抑制了人肝癌细胞中N-钙黏蛋白表达。

本发明的一个实施例为多肽或其衍生物(N1-N12)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)中波形蛋白表达抑制实验。结果如图14、表15所示，N1-N12处理组波形蛋白显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)抑制了人肝癌细胞中波形蛋白表达。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人肝癌细胞(HepG2)迁移能力抑制效果。图15为细胞迁移显微照片，表16为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，HepG2的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对HepG2细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-453)迁移能力抑制效果。图16为细胞迁移显微照片，表17为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，MDA-MB-453的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对MDA-MB-453细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)迁移能力抑制效果。图17为细胞迁移显微照片，表18为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，MDA-MB-231的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物对MDA-MB-231细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人乳腺癌细胞(MCF-7)迁移能力抑制效果。图18为细胞迁移显微照片，表19为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，MCF-7的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对MCF-7细迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人黑色素瘤细胞(A375)迁移能力抑制效果。图19为细胞迁移显微照片，表20为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，A375的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对A375细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人口腔表皮样癌细胞(KB)迁移能力抑制效果。图20为细胞迁移显微照片，表21为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，KB的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对KB细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人咽鳞癌细胞(Fadu)迁移能力抑制效果。图21为细胞迁移显微照片，表22为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，10μM多肽或其衍生物处理48h后，Fadu的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对Fadu细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人结肠癌细胞(HCT-116)迁移能力抑制效果。图22为细胞迁移显微照片，表23为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，10μM多肽或其衍生物处理48h后，HCT-116的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物对HCT-116细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人甲状腺癌细胞(FRO)迁移能力抑制效果。图23为细胞迁移显微照片，表24为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，10μM多肽或其衍生物处理48h后，FRO的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对FRO细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人前列腺癌细胞(22RV1)迁移能力抑制效果。图24为细胞迁移显微照片，表25为迁移率统计结果，结果显示，10μM多肽或其衍生物处理48h后，22RV1的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对22RV1细胞迁移能力均有抑制作用。

本发明的一个实施例为高剂量急性毒性试验，结果表明静脉注射N1-N54任一成分均不会对小鼠产生相关的器官毒性。

本发明的一个实施例为对小鼠凝血功能影响实验，结果见表26，N1至N12各给药组与对照组的活化凝血时间(ACT)没有明显变化，表明多肽药物对小鼠凝血功能无影响。

本发明的一个实施例为药物免疫原性检测，结果见表27，N1至N12各给药组分别于给药后第14天和第25天与对照组相比，IgG含量无明显变化，表明多肽药物在体内几乎不产生免疫原性。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1是实施例6人肺癌细胞(A549)细胞迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人肺癌细胞(A549)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人肺癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图2是实施例7人肺癌细胞(95D)细胞迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人肺癌细胞(95D)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人非小细胞肺癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图3是实施例8人肺鳞癌细胞(NCI-H226)细胞迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人肺鳞癌细胞(NCI-H226)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人肺鳞癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图4是实施例11实验动物皮下肿瘤剥离后瘤块照片，该图显示了给药方式为静脉注射给药时，本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对肺癌细胞皮下瘤生长的抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制肺癌细胞相关肿瘤生长；图中分为两组：模型对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；药物用量：N1-N54，60mg/kg，每隔一天给药一次；

图5是实施例12实验动物活体荧光检测结果图，该图显示了给药方式为静脉注射给药时，本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)对肺癌转移瘤生长的抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)能够显著抑制肺部肿瘤的形成；图中分为两组：模型对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N12)；实验组药物用量：N1-N12，60mg/kg，每隔一天给药一次；

图6实施例13人胰腺癌细胞(PANC-1)发生迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人胰腺癌细胞(PANC-1)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人胰腺癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图7实施例14人胰腺癌细胞(PANC-1)发生迁移细胞的显微照片(Transwell细胞迁移实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人胰腺癌细胞(PANC-1)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人胰腺癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为24小时；

图8实施例15人胰腺癌细胞(PANC-1)发生侵袭的细胞显微照片(Transwell细胞侵袭实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人胰腺癌细胞(PANC-1)侵袭能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人胰腺癌细胞侵袭行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为24小时；

图9实施例16实验动物皮下肿瘤剥离后瘤块照片，该图显示了给药方式为瘤内注射给药时，本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)对胰腺癌细胞皮下瘤生长抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)能够显著抑制胰腺肿瘤生长；图中分为两组：模型对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N12)；实验组药物用量：N1-N12，60mg/kg，每隔一天给药一次；

图10实施例17人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)发生迁移细胞的显微照片(Transwell细胞迁移实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人肝腹水腺癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为24小时；

图11实施例18人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)发生侵袭的细胞显微照片(Transwell细胞侵袭实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)侵袭能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人肝腹水腺癌细胞侵袭行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为24小时；

图12实施例19人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)纤粘蛋白(Fibronectin)表达量测定结果图，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)纤粘蛋白表达抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)能够有效抑制肝癌细胞表达纤粘蛋白；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N12)；实验组药物用量：N1-N12，10μM，处理时间为24小时；

图13实施例20人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)N-钙粘蛋白(N-Cadherin)表达量测定结果图，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)N-钙粘蛋白表达抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)能够有效抑制肝癌细胞表达N-钙粘蛋白；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N12)；实验组药物用量：N1-N12，10μM，处理时间为24小时；

图14实施例21人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)波形蛋白(Vimentin)表达量测定结果图，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)波形蛋白表达抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)能够有效抑制肝癌细胞表达波形蛋白；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N12)；实验组药物用量：N1-N12，10μM，处理时间为24小时；

图15实施例22人肝癌细胞(HepG2)发生迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人肝癌细胞(HepG2)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人肝癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图16实施例23人乳腺癌细胞(MDA-MB-453)发生迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-453)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人乳腺癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图17实施例24人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)发生迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人乳腺癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图18实施例25人乳腺癌细胞(MCF-7)发生迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人乳腺癌细胞(MCF-7)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人乳腺癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图19实施例26人黑色素瘤细胞(A375)发生迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人黑色素瘤细胞(A375)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人黑色素瘤细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图20实施例27人口腔表皮样癌细胞(KB)发生迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人口腔表皮样癌细胞(KB)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人口腔表皮样癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图21实施例28人咽鳞癌细胞(Fadu)发生迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人咽鳞癌细胞(Fadu)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人咽鳞癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图22实施例29人结肠癌细胞(HCT 116)发生迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人结肠癌细胞(HCT 116)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人结肠癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图23实施例30人甲状腺癌细胞(FRO)发生迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人甲状腺癌细胞(FRO)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人甲状腺癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图24实施例31人前列腺癌细胞(22RV1)发生迁移照片(细胞划痕实验)，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对人前列腺癌细胞(22RV1)迁移能力抑制试验结果，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)能够显著抑制人前列腺癌细胞迁移行为；图中分为两组：对照组；多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；实验组药物用量：N1-N54，10μM，处理时间为48小时；

图25为实施例32实验动物脑组织病理照片，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对小鼠脑组织无药物毒性作用；

图26为实施例32实验动物心脏组织病理照片，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对小鼠心脏组织无药物毒性作用；

图27为实施例32实验动物肝组织病理照片，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对小鼠肝组织无药物毒性作用；

图28为实施例32实验动物肺组织病理照片，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对小鼠肺组织无药物毒性作用；

图29为实施例32实验动物肾组织病理照片，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对小鼠肾组织无药物毒性作用；

图30为实施例32实验动物脾脏组织病理照片，该图显示了本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)对小鼠脾脏组织无药物毒性作用。

具体实施方式

本发明公开了多肽或其衍生物的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

除非另有定义，本文使用的所有科技术语具有本领域普通技术人员所理解的相同含义。关于本领域的定义及术语，专业人员具体可参考Current Protocols in MolecularBiology(Ausubel)。氨基酸残基的缩写是本领域中所用的指代20个常用L-氨基酸之一的标准3字母和/或1字母代码。

本发明提供的多肽或其衍生物的应用中所用试剂均可由市场购得。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1多肽组分制备

使用多肽固相合成仪，以Fmoc保护的树脂为起始原料，采用Fmoc固相合成法按序列顺序偶联氨基酸，合成全保护的肽树脂，所用氨基酸均为L-氨基酸；使用常用切割试剂切割肽树脂，将多肽从树脂上裂解下来并去除侧链保护基，离心干燥得到多肽粗品；然后使用制备型HPLC纯化粗品肽，收集特定的组分，冷冻干燥得到多肽产品。

PEG修饰方法：分别称取mPEG-SC和多肽(摩尔比为1.5-2.0∶1)置于40mL-100mLPBS缓冲溶液(pH 5-8.5)中，4℃条件下过夜反应，使用半制备型高效液相纯化反应产物，收集目标产物，于-70℃低温冰箱预冻过夜后使用冷冻干燥机冻干30h左右，获得PEG修饰后的多肽产物。

实施例2抑制肿瘤细胞迁移药效实验—细胞划痕实验

在细胞划痕实验中，细胞迁移率与药物组份对肿瘤细胞迁移能力抑制效果成负相关关系。细胞迁移抑制实验方法描述如下：体外培养肿瘤细胞并收集对数生长期细胞，将细胞均匀铺于24孔板，每孔细胞数量为1-2×10⁵，于细胞培养箱中培养至形成单层细胞；用划痕工具在单层细胞上划出呈“一”字的划痕，PBS清洗1-3次后加入含特定试验组分的培养基(含2％胎牛血清)。实验分组：PBS对照组；10μM多肽或其衍生物处理实验组(N1-N54)；每实验组设3个独立平行孔，于细胞培养箱中继续培养48h；分别在0h、48h用倒置显微镜观察并拍照，每孔拍摄至少拍摄3张代表性照片；用ImageJ软件统计细胞的迁移距离，并计算细胞迁移率：细胞迁移率(％)＝(原划痕宽度-现划痕宽度)/原划痕宽度×100。

实施例3抑制肿瘤细胞迁移药效试验—Transwell细胞迁移实验

Transwell细胞迁移实验采用Transwell小室实验系统，小室分为上下两层，中间由人工半透膜隔开，细胞可通过细胞迁移穿过半透膜并附着在半透膜下表面，通过统计半透膜下表面细胞数量评估细胞迁移能力强弱：发生迁移细胞数量与药物组份对肿瘤细胞迁移能力抑制效果成负相关关系。Transwell细胞迁移抑制实验方法如下：体外培养肿瘤细胞，收集对数生长期细胞，并用新鲜无血清培养基制备细胞悬液，每毫升细胞悬液中细胞数量为2-3×10⁵。接种细胞，上室100μL/孔细胞悬液(无血清培养基)，下室600μL/孔完全培养液。37℃，5％CO₂培养箱中孵育4-5小时后，对照组加入无血清培养基(100μL/孔)，实验组上室加入含多肽或其衍生物(N1-N54)的无血清培养基溶液(100μL/孔)，下室内多肽或其衍生物终浓度为10μM，继续孵育24小时后用甲醇固定并用结晶紫染色，显微镜下拍照并用ImageJ统计发生迁移细胞数。

实施例4抑制肿瘤细胞侵袭药效试验—Transwell细胞侵袭实验

Transwell细胞侵袭实验采用Transwell小室实验系统，小室分为上下两层，中间由人工半透膜隔开，半透膜上表面用一层人工基质胶包被模拟细胞外基质，细胞可通过细胞侵袭行为穿过基质胶和半透膜并附着在半透膜下表面，通过统计半透膜下表面细胞数量评估细胞侵袭能力强弱：发生侵袭细胞数量与药物组份对肿瘤细胞迁移能力抑制效果成负相关关系。Transwell细胞侵袭实验方法如下：体外培养肿瘤细胞，收集对数生长期细胞，并用新鲜无血清培养基制备细胞悬液，每毫升细胞悬液中细胞数量为2-3×10⁵。接种细胞，上室100μL/孔细胞悬液(无血清培养基)，下室600μL/孔完全培养液。37℃，5％CO₂培养箱中孵育4-5小时后，对照组加入无血清培养基(100μL/孔)，实验组上室加入含多肽或其衍生物(N1-N54)的无血清培养基溶液(100μL/孔)，下室内多肽或其衍生物终浓度为10μM，继续孵育24小时后用甲醇固定并用结晶紫染色，显微镜下拍照并用ImageJ统计发生迁移细胞数。

实施例5肿瘤动物模型药效评估

肿瘤细胞：A549-luc细胞来源于上海美轩生物科技有限公司，其余肿瘤细胞来源于中国科学院细胞库、美国典型培养物保藏中心(ATCC)。

实验动物：4-6周龄雌性免疫缺陷小鼠(BALB/c-nu/nu，北京维通利华实验动物技术有限公司)。

肿瘤动物模型：皮下异种移植瘤动物模型，小鼠皮下接种细胞数量约为2×10⁶/200μL，当皮下瘤块体积大于100mm³时开始进行随机分组给药实验；当肿瘤模型对照组肿瘤瘤块体积达到2000mm³或动物死亡时治疗结束，并进行动物解剖剥离肿瘤瘤块，测量瘤块重量和体积；整个实验期间每隔一天进行小鼠笼旁观察并测量体重。

转移瘤动物模型，尾静脉接种肿瘤细胞数量约为2×10⁶/100μL，接种1小时后进行分组给药实验；实验持续时间28天，治疗结束后进行小鼠活体肺部荧光成像；整个实验期间每隔一周进行小鼠笼旁观察并检测小鼠肺部荧光强度。

给药方式：瘤内注射给药或静脉注射给药，给药剂量和频次根据具体实验设计确定。

实验分组：模型对照组，多肽或其衍生物治疗实验组(N1-N54)；

实验动物数量：每个治疗组5只实验动物。

实施例6对人非小细胞肺癌细胞(A549)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人非小细胞肺癌(A549)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图1为细胞迁移显微照片，表1为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物(N1-N54)处理48h后，A549的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对A549细胞迁移能力均有抑制作用。

表1细胞迁移率统计表

实施例7对人肺癌细胞(95D)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人肺癌细胞(95D)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图2为细胞迁移显微照片，表2为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，10μM多肽或其衍生物处理48h后，95D的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对95D细胞迁移能力均有抑制作用。

表2细胞迁移率统计表

实施例8对人肺鳞癌细胞(NCI-H226)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人肺鳞癌细胞(NCI-H226)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图3为细胞迁移显微照片，表3为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，NCI-H226的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对NCI-H226细胞迁移能力均有抑制作用。

表3细胞迁移率统计表

实施例9肺癌皮下异种移植瘤动物模型药效试验(瘤内注射给药)

肺癌皮下异种移植瘤动物模型药效试验所采用方法如实施例5所述，肿瘤细胞为人肺癌细胞A549细胞系，给药方式为瘤内注射给药。实验分组：肿瘤模型对照组和多肽或其衍生物治疗实验组(多肽序列：N1-N12)。实验组给药剂量：N1-N12治疗组为5mg/kg，每隔一天给药一次，治疗时间持续10天。表4为肿瘤瘤块重量和体积测定值统计结果(mean±SD,P)，结果显示，与模型对照组相比，N1-N12治疗组肿瘤瘤块重量和体积均有不同程度的显著性减小，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)有效抑制了人肺癌细胞相关肿瘤的发展。

表4治疗结束后肿瘤瘤块重量与体积测定数据

实施例10肺癌皮下异种移植瘤动物模型药效试验(瘤内注射给药)

本实施例中肺癌皮下异种移植瘤动物模型药效试验流程、给药途径与剂量与实施例9一致。实验组多肽序列：N13-N32。治疗持续时间为20天。表5为肿瘤瘤块重量和体积测定值统计结果(mean±SD,P)，结果显示，与模型对照组相比，N13-N32治疗组肿瘤瘤块重量和体积均有不同程度的显著性减小，表明本发明所述多肽或其衍生物(N13-N32)有效抑制了人肺癌细胞相关肿瘤的发展。

表5治疗结束后肿瘤瘤块重量与体积测定数据

实施例11肺癌皮下异种移植瘤动物模型药效实验(静脉注射给药)

肺癌皮下异种移植瘤动物模型药效试验所采用方法如实施例5所述，肺癌细胞为人肺癌细胞A549细胞系，给药方式为静脉注射给药。本实施例共涉及3次实验，分别评估N1-N15、N16-N30和N31-N54，其中所涉及实验流程、给药方式、给药剂量与频次以及指标检测方法等3次实验均保持一致。实验分组为模型对照组和多肽或其衍生物治疗组(N1-N15、N16-N30、或N31-N54)。实验组给药剂量：N1-N54治疗组为60mg/kg，每隔一天给药一次，治疗持续时间为20天。实验结果如图4、表6所示，图4显示了治疗结束后各组肿瘤瘤块代表性照片，表6为肿瘤瘤块重量和体积测定值统计结果(mean±SD,P)，结果显示，与模型对照组相比，N1-N54治疗组肿瘤瘤块重量和体积均有不同程度的显著性减小，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)有效抑制了人肺癌细胞相关肿瘤的发展。

表6治疗结束后肿瘤瘤块重量与体积测定数据

实施例12肺癌转移瘤动物模型药效试验(静脉注射给药)

肺癌转移瘤动物模型药效试验所采用方法如实施例5所述，肺癌细胞为人肺癌细胞A549-luc细胞系，给药方式为静脉注射给药。实验分组为模型对照组和多肽或其衍生物治疗实验组(N1-N12)。给药剂量：N1-N12治疗组为30mg/kg，每隔一天给药一次。图5显示了治疗前后后各组实验动物活体肺部荧光成像照片。与模型对照组相比，N1-N12治疗组实验动物肺部荧光强度均有不同程度的减弱，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)可有效抑制肺部转移肿瘤的发展。

实施例13对人胰腺癌细胞(PANC-1)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人胰腺癌细胞(PANC-1)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图6为细胞迁移显微照片，表7为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，PANC-1的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对PANC-1细胞迁移能力均有抑制作用。

表7细胞迁移率统计表

实施例14对人胰腺癌细胞(PANC-1)迁移能力抑制试验(Transwell细胞迁移实验)

本实施例为Transwell细胞迁移实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人胰腺癌细胞(PANC-1)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例3所述。图7为迁移至半透膜下表面的细胞在显微照片，表8是对迁移至半透膜下表面的细胞数量统计结果(mean±SD,P)，结果显示N1-N54处理组迁移至半透膜下表面细胞数显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)抑制了人胰腺癌细胞的迁移能力。

表8发生细胞迁移细胞数量统计表

实施例15对人胰腺癌细胞(PANC-1)侵袭能力抑制试验(Transwell细胞侵袭实验)

本实施例为Transwell细胞侵袭实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人胰腺癌细胞(PANC-1)侵袭能力抑制效果，实验方法如实施例4所述。图8为迁移至半透膜下表面的细胞在显微照片，表9是对迁移至半透膜下表面的细胞数量统计结果(mean±SD,P)，结果显示N1-N54处理组迁移至半透膜下表面细胞数显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)抑制了人胰腺癌细胞的侵袭能力。

表9发生细胞侵袭细胞数量统计表

实施例16胰腺癌皮下异种移植瘤动物模型药效试验(瘤内注射给药)

胰腺癌皮下异种移植瘤动物模型药效试验所采用方法如实施例5所述，胰腺癌细胞为人胰腺癌细胞PANC-1细胞系，给药方式为瘤内注射给药。实验分组分为模型对照组和多肽或其衍生物治疗组(N1-N12)。N1-N12治疗组给药剂量为5mg/kg，每隔一天给药一次，瘤内注射给药。治疗持续时间为25天。实验结果如图9、表10所示，图9显示了治疗结束后各组肿瘤瘤块照片，表10为肿瘤瘤块重量和体积测定值统计结果，结果显示，N1-N12治疗组肿瘤瘤块重量和体积均比模型对照组组小，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)有效抑制了人胰腺癌细胞相关肿瘤的发展。

表10治疗结束后肿瘤瘤块重量与体积测定数据

实施例17对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)迁移能力抑制试验(Transwell细胞迁移实验)

本实施例为Transwell细胞迁移实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例3所述。图10为迁移至半透膜下表面的细胞在显微照片，表11是对迁移至半透膜下表面的细胞数量统计结果(mean±SD,P)，结果显示N1-N54处理组迁移至半透膜下表面细胞数显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)抑制了人肝癌细胞的迁移能力。

表11发生细胞迁移细胞数量统计表

实施例18对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)侵袭能力抑制试验(Transwell细胞侵袭实验)

本实施例为Transwell细胞侵袭实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)侵袭能力抑制效果，实验方法如实施例4所述。图11为迁移至半透膜下表面的细胞在显微照片，表12是对迁移至半透膜下表面的细胞数量统计结果(mean±SD,P)，结果显示N1-N54处理组迁移至半透膜下表面细胞数显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N54)抑制了人肝癌细胞的侵袭能力。

表12发生细胞侵袭细胞数量统计表

实施例19对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)中纤粘蛋白表达抑制试验

体外培养SK-HEP-1细胞，收集对数生长期细胞，将细胞均匀铺于24孔板，保证每孔细胞数量为1-3×10⁵，于细胞培养箱中培养4-5h，对照组加入PBS作为对照，实验组上室加入含多肽或其衍生物(N1-N12)的PBS溶液，小室内多肽或其衍生物终浓度为10μM，继续孵育24小时后收集细胞并提取总蛋白，ELISA法检测总蛋白中纤粘蛋白含量。结果如图12、表13所示，N1-N12处理组纤粘蛋白显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)抑制了人肝癌细胞中纤粘蛋白表达。

表13

实施例20对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)中N-钙黏蛋白表达抑制试验

多肽或其衍生物(N1-N12)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)中N-钙黏蛋白表达抑制实验方法如实施例19所述。结果如图13、表14所示，N1-N12处理组N-钙黏蛋白显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)抑制了人肝癌细胞中N-钙黏蛋白表达。

表14

实施例21对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)中波形蛋白表达抑制试验

多肽或其衍生物(N1-N12)对人肝腹水腺癌细胞(SK-HEP-1)中波形蛋白表达抑制实验方法如实施例19所述。结果如图14、表15所示，N1-N12处理组波形蛋白显著少于对照组，表明本发明所述多肽或其衍生物(N1-N12)抑制了人肝癌细胞中波形蛋白表达。

表15

实施例22对人肝癌细胞(HepG2)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人肝癌细胞(HepG2)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图15为细胞迁移显微照片，表16为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，HepG2的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对HepG2细胞迁移能力均有抑制作用。

表16细胞迁移率统计表

实施例23对人乳腺癌细胞(MDA-MB-453)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-453)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图16为细胞迁移显微照片，表17为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，MDA-MB-453的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对MDA-MB-453细胞迁移能力均有抑制作用。

表17细胞迁移率统计表

实施例24对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图17为细胞迁移显微照片，表18为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，MDA-MB-231的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物对MDA-MB-231细胞迁移能力均有抑制作用。

表18细胞迁移率统计表

实施例25对人乳腺癌细胞(MCF-7)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人乳腺癌细胞(MCF-7)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图18为细胞迁移显微照片，表19为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，MCF-7的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对MCF-7细迁移能力均有抑制作用。

表19细胞迁移率统计表

实施例26对人黑色素瘤细胞(A375)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人黑色素瘤细胞(A375)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图19为细胞迁移显微照片，表20为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，A375的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对A375细胞迁移能力均有抑制作用。

表20细胞迁移率统计表

实施例27对人口腔表皮样癌细胞(KB)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人口腔表皮样癌细胞(KB)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图20为细胞迁移显微照片，表21为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，多肽或其衍生物处理48h后，KB的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对KB细胞迁移能力均有抑制作用。

表21细胞迁移率统计表

实施例28对人咽鳞癌细胞(Fadu)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人咽鳞癌细胞(Fadu)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图21为细胞迁移显微照片，表22为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，10μM多肽或其衍生物处理48h后，Fadu的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对Fadu细胞迁移能力均有抑制作用。

表22细胞迁移率统计表

实施例29对人结肠癌细胞(HCT-116)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人结肠癌细胞(HCT-116)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图22为细胞迁移显微照片，表23为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，10μM多肽或其衍生物处理48h后，HCT-116的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物对HCT-116细胞迁移能力均有抑制作用。

表23细胞迁移率统计表

实施例30对人甲状腺癌细胞(FRO)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人甲状腺癌细胞(FRO)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图23为细胞迁移显微照片，表24为迁移率统计结果(mean±SD,P)，结果显示，10μM多肽或其衍生物处理48h后，FRO的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对FRO细胞迁移能力均有抑制作用。

表24细胞迁移率统计表

实施例31对人前列腺癌细胞(22RV1)迁移能力抑制试验(细胞划痕实验)

本实施例为细胞划痕实验评估多肽或其衍生物(N1-N54)对人前列腺癌细胞(22RV1)迁移能力抑制效果，实验方法如实施例2所述。图24为细胞迁移显微照片，表25为迁移率统计结果，结果显示，10μM多肽或其衍生物处理48h后，22RV1的迁移率相比对照组均有不同程度的显著性降低，表明多肽或其衍生物(N1-N54)对22RV1细胞迁移能力均有抑制作用。

表25细胞迁移率统计表

实施例32小鼠14天连续给药急性毒性实验

实验动物为C57BL/6J小鼠(成都达硕实验动物有限公司，雄性，4-5周龄)。实验分组：对照组，生理盐水；实验组，多肽或其衍生物(N1-N54)给药组；每组3只实验动物。对照组尾静脉注射生理盐水，100μL/次/天；多肽或其衍生物(N1-N54)尾静脉给药剂量为200mg/kg/day，体积为100μL；连续给药13天。第14天处死实验动物，并剥离大脑、心脏、肝、肺、肾、脾等器官组织用于病理切片分析(HE染色)。实验结果如图25-30所示。图25为脑组织病理照片，N1-N54各给药组与对照组的染色结果没有明显差别，小鼠大脑组织中海马区神经元排列规则，且大脑内无出血点、炎性细胞浸润及疏松水肿等病理现象。图26为心脏组织病理照片，N1-N54各给药组与对照组的染色结果没有明显差别，心肌细胞无水肿、肥大现象，也无炎症细胞浸润、毛细血管及纤维细胞增生等病理现象。图27为肝组织病理照片，N1-N54各给药组与对照组的染色结果没有明显差别，肝细胞以中央静脉为中心呈单行放射状排列，肝细胞无空泡样变性、坏死，也无炎性细胞浸润及边缘纤维化等病理现象。图28为肺组织病理照片，各给药组与对照组的染色结果没有明显差别，即肺泡腔呈空泡状薄壁结构，无肺泡壁增厚、炎性细胞浸润等病理现象。图29为肾组织病理照片，各给药组与对照组的染色结果没有明显差别，肾小球结构清晰，无颗粒样变性、炎性细胞浸润、毛细血管充血等病理现象。图30为脾脏组织病理照片，各给药组与对照组的染色结果没有明显差别，即脾脏结构完整，脾血窦被脾索包围，相互连接成网，无动脉周围淋巴鞘增厚、脾小体数量增加等病理现象。综上所述，高剂量急性毒性结果表明静脉注射N1-N54任一成分均不会对小鼠产生相关的器官毒性。

实施例33对小鼠凝血功能影响实验

以C57BL/6J小鼠为实验对象(购自成都达硕实验动物有限公司，雄性，体重16-17g)，通过尾静脉注射无菌生理盐水或多肽药物，每天注射一次，直至第24天。对照组小鼠注射无菌生理盐水，给药组(N1-N12)小鼠注射多肽药物(200mg/kg)；每组3只实验动物。第25天进行摘眼球取血(50μL)，用ACT检测卡通过雅培i-STAT血气分析仪检测小鼠凝血功能。结果见表26，N1至N12各给药组与对照组的活化凝血时间(ACT)没有明显变化，表明多肽药物对小鼠凝血功能无影响。

表26活化凝血时间(s)

实施例34药物免疫原性检测

以C57BL/6J小鼠为实验对象(购自成都达硕实验动物有限公司，雄性，体重16-17g)，通过尾静脉注射无菌生理盐水或多肽药物，每天注射一次，直至第13天或24天。对照组小鼠注射无菌生理盐水，给药组(N1-N12)小鼠注射多肽药物(200mg/kg)。分别于第14天和第25天进行摘眼球取血(各800μL)，用离心机分离血清，通过ELISA法检测免疫球蛋白G(IgG)的变化。结果见表27，N1至N12各给药组分别于给药后第14天和第25天与对照组相比，IgG含量无明显变化，表明多肽药物在体内几乎不产生免疫原性。

表27免疫球蛋白G(IgG)含量(μg/mL)

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

序列表

<110> 成都惠泰生物医药有限公司

<120> 多肽或其衍生物的应用

<130> MP1915078

<160> 54

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 18

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp Asn

<210> 2

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp

<210> 3

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa（1）为PEG2修饰

<400> 3

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp

<210> 4

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp

1 5 10

<210> 5

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 5

Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu Asp Asn Cys

1 5 10 15

<210> 6

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 6

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp

1 5 10

<210> 7

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 7

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Arg Glu

1 5 10 15

Asp Asn Cys

<210> 8

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 8

Tyr Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Thr Gln Asp

1 5 10

<210> 9

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa(1)为PEG2修饰

<400> 9

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp

1 5 10

<210> 10

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (11)..(11)

<223> Xaa(11)为PEG2修饰

<400> 10

Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp

1 5 10

<210> 11

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa(1)为PEG2修饰

<400> 11

Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp

1 5 10

<210> 12

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 12

Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu Asp

1 5 10 15

<210> 13

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 13

Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp

1 5

<210> 14

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 14

Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu Asp Asn Cys

1 5 10

<210> 15

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 15

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp Arg Cys

<210> 16

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 16

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Arg Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp Asn Cys

<210> 17

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 17

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp Asn Cys Thr

20

<210> 18

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 18

Phe Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala

1 5 10 15

Glu Asp Asn Cys

20

<210> 19

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 19

Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Arg Cys

1 5 10

<210> 20

<211> 18

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 20

Arg Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala

1 5 10 15

Glu Asp

<210> 21

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 21

Ser Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp

1 5 10

<210> 22

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 22

Arg Phe Leu Arg Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp

1 5 10

<210> 23

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 23

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Arg Lys Glu Asn Thr Gln Asp Ala Glu Asp

1 5 10 15

<210> 24

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 24

Val Arg Phe Leu Arg Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu Asp

1 5 10 15

<210> 25

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 25

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp Arg Cys Thr

20

<210> 26

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 26

Phe Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Arg

1 5 10 15

Glu Asp Asn Cys

20

<210> 27

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (19)..(19)

<223> Xaa(19)为PEG2修饰

<400> 27

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp Asn Cys

<210> 28

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa(1)为PEG2修饰

<400> 28

Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu Asp

1 5 10 15

<210> 29

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa(1)为PEG2修饰

<400> 29

Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp

1 5

<210> 30

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (9)..(9)

<223> Xaa(9)为PEG2修饰

<400> 30

Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp

1 5

<210> 31

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa(1)为PEG2修饰

<400> 31

Tyr Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Thr Gln Asp

1 5 10

<210> 32

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (16)..(16)

<223> Xaa(16)为PEG2修饰

<400> 32

Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu Asp Asn Cys

1 5 10 15

<210> 33

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (14)..(14)

<223> Xaa(14)为PEG2修饰

<400> 33

Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu Asp Asn Cys

1 5 10

<210> 34

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa(1)为PEG2修饰

<400> 34

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Arg Glu

1 5 10 15

Asp Asn Cys

<210> 35

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (19)..(19)

<223> Xaa(19)为PEG2修饰

<400> 35

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Arg Glu

1 5 10 15

Asp Asn Cys

<210> 36

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (19)..(19)

<223> Xaa(19)为PEG2修饰

<400> 36

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Arg Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp Asn Cys

<210> 37

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa(1)为PEG2修饰

<400> 37

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp Asn Cys Thr

20

<210> 38

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (20)..(20)

<223> Xaa(20)为PEG2修饰

<400> 38

Phe Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala

1 5 10 15

Glu Asp Asn Cys

20

<210> 39

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (20)..(20)

<223> Xaa(20)为PEG2修饰

<400> 39

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp Asn Thr Cys

20

<210> 40

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa(1)为PEG2修饰

<400> 40

Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Arg Cys

1 5 10

<210> 41

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (19)..(19)

<223> Xaa(19)为PEG2修饰

<400> 41

Phe Arg Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp

1 5 10 15

Ala Glu Asp

<210> 42

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa(1)为PEG2修饰

<400> 42

Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Arg

1 5 10

<210> 43

<211> 18

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (18)..(18)

<223> Xaa(18)为PEG2修饰

<400> 43

Arg Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala

1 5 10 15

Glu Asp

<210> 44

<211> 18

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (18)..(18)

<223> Xaa(18)为PEG2修饰

<400> 44

Tyr Arg Ser Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala

1 5 10 15

Glu Asp

<210> 45

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (9)..(9)

<223> Xaa(9)为PEG2修饰

<400> 45

Leu Ala Lys Glu Asn Arg Thr Gln Asp

1 5

<210> 46

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa(1)为PEG2修饰

<400> 46

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Arg Lys Glu Asn Thr Gln Asp Ala Glu Asp

1 5 10 15

<210> 47

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (17)..(17)

<223> Xaa(17)为PEG2修饰

<400> 47

Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu Asp Arg

1 5 10 15

Cys

<210> 48

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (16)..(16)

<223> Xaa(16)为PEG2修饰

<400> 48

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Arg Lys Glu Asn Thr Gln Asp Ala Glu Asp

1 5 10 15

<210> 49

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (15)..(15)

<223> Xaa(15)为PEG2修饰

<400> 49

Val Arg Phe Leu Arg Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu Asp

1 5 10 15

<210> 50

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa(1)为PEG2修饰

<400> 50

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp Arg Cys Thr

20

<210> 51

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (1)..(1)

<223> Xaa(1)为PEG2修饰

<400> 51

Phe Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Arg

1 5 10 15

Glu Asp Asn Cys

20

<210> 52

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (20)..(20)

<223> Xaa(20)为PEG2修饰

<400> 52

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp Arg Cys Thr

20

<210> 53

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (20)..(20)

<223> Xaa(20)为PEG2修饰

<400> 53

Phe Tyr Arg Val Arg Phe Leu Ala Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Arg

1 5 10 15

Glu Asp Asn Cys

20

<210> 54

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> BINDING

<222> (20)..(20)

<223> Xaa(20)为PEG2修饰

<400> 54

Tyr Arg Val Arg Phe Leu Arg Lys Glu Asn Val Thr Gln Asp Ala Glu

1 5 10 15

Asp Asn Thr Cys

20

Claims

1.多肽或其衍生物在制备治疗预防和/或治疗肿瘤的药物中的应用，其特征在于，所述多肽具有：

(I)、如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列；或

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缺失为对所述多肽的氨基端的氨基酸进行缺失、对所述多肽的羧基端的氨基酸进行缺失或对所述多肽的序列内部的氨基酸进行缺失中的一种或多种的组合。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缺失为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸分别进行缺失。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缺失为对所述多肽的氨基端的氨基酸和所述多肽的羧基端的氨基酸同时进行缺失。

5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缺失为对所述多肽的氨基端的氨基酸、所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行缺失。

6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缺失为对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行缺失。

7.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缺失为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行缺失。

8.如权利要求1至7任一项所述的应用，其特征在于，所述缺失的氨基酸数目是1个，2个，3个，4个，5个，6个，7个，8个或9个。

9.如权利要求1至8任一项所述的应用，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ IDNo.2、SEQ ID No.4、SEQ ID No.6、SEQ ID No.8、SEQ ID No.12或SEQ ID No.13所示。

10.如权利要求1至9任一项所述的应用，其特征在于，所述添加为对所述多肽的氨基端的氨基酸进行添加、对所述多肽的羧基端的氨基酸进行添加或对所述多肽的序列内部的氨基酸进行添加中的一种或多种的组合。

11.如权利要求1至10任一项所述的应用，其特征在于，所述添加为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸分别进行添加。

12.如权利要求1至11任一项所述的应用，其特征在于，所述添加为对所述多肽的氨基端的氨基酸和所述多肽的羧基端的氨基酸同时进行添加。

13.如权利要求1至12任一项所述的应用，其特征在于，所述添加为对所述多肽的氨基端的氨基酸、所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行添加。

14.如权利要求1至13任一项所述的应用，其特征在于，所述添加为对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行添加。

15.如权利要求1至14任一项所述的应用，其特征在于，所述添加为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行添加。

16.如权利要求1至15任一项所述的应用，其特征在于，所述添加的氨基酸数目是1个，2个，3个，4个或5个。

17.如权利要求1至16任一项所述的应用，其特征在于，用于添加的氨基酸包括天然氨基酸和/或非天然氨基酸。

18.如权利要求10至16任一项所述的应用，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQID No.17或如SEQ ID No.18所示。

19.如权利要求1至18任一项所述的应用，其特征在于，所述替换为对所述多肽的氨基端的氨基酸进行替换、对所述多肽的羧基端的氨基酸进行替换或对所述多肽的序列内部的氨基酸进行替换中的一种或多种的组合。

20.如权利要求1至19任一项所述的应用，其特征在于，所述替换为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸分别进行替换。

21.如权利要求1至20任一项所述的应用，其特征在于，所述替换为对所述多肽的氨基端的氨基酸和所述多肽的羧基端的氨基酸同时进行替换。

22.如权利要求1至21任一项所述的应用，其特征在于，所述替换为对所述多肽的氨基端的氨基酸、所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行替换。

23.如权利要求1至22任一项所述的应用，其特征在于，所述替换为对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行替换。

24.如权利要求1至23任一项所述的应用，其特征在于，所述替换为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行替换。

25.如权利要求1至24任一项所述的应用，其特征在于，所述替换的氨基酸数目是1个，2个，3个，4个或5个。

26.如权利要求1至25任一项所述的应用，其特征在于，用于替换的氨基酸包括天然氨基酸和/或非天然氨基酸。

27.如权利要求1至26任一项所述的应用，其特征在于，所述修饰为对所述多肽的氨基端的氨基酸进行修饰、对所述多肽的羧基端的氨基酸进行修饰或对所述多肽的序列内部的氨基酸进行修饰中的一种或多种的组合。

28.如权利要求1至27任一项所述的应用，其特征在于，所述修饰为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸分别进行修饰。

29.如权利要求1至28任一项所述的应用，其特征在于，所述修饰为对所述多肽的氨基端的氨基酸和所述多肽的羧基端的氨基酸同时进行修饰。

30.如权利要求1至29任一项所述的应用，其特征在于，所述修饰为对所述多肽的氨基端的氨基酸、所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行修饰。

31.如权利要求1至30任一项所述的应用，其特征在于，所述修饰为对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行修饰。

32.如权利要求1至31任一项所述的应用，其特征在于，所述修饰为对所述多肽的氨基端的氨基酸、对所述多肽的羧基端的氨基酸、对所述多肽的序列内部的氨基酸同时进行修饰。

33.如权利要求1至32任一项所述的应用，其特征在于，所述修饰为化学修饰。

34.如权利要求33所述的应用，其特征在于，所述修饰包括聚乙二醇修饰，脂肪酸修饰，糖基化修饰，乙酰化修饰，酰胺化修饰，磷酸化修饰或多肽领域可接受的其他修饰中的一种或多种的组合。

35.如权利要求1至34任一项所述的应用，其特征在于，所述修饰的氨基酸数目是1个，2个，3个，4个，5个，6个，7个，8个或9个。

36.如权利要求1至35任一项所述的应用，其特征在于，用于修饰的氨基酸包括天然氨基酸和/或非天然氨基酸。

37.如权利要求1至36任一项所述的应用，其特征在于，所述多肽是对如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列同时进行缺失和添加氨基酸，同时进行替换和添加氨基酸，同时进行缺失和替换氨基酸，同时进行缺失和修饰氨基酸，同时进行添加和修饰氨基酸，同时进行替换和修饰氨基酸，同时进行缺失、添加和修饰氨基酸，同时进行替换、添加和修饰氨基酸，同时进行缺失、替换和修饰氨基酸或同时进行缺失、替换、添加和修饰氨基酸中的一种或多种。

38.如权利要求1至37任一项所述的应用，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQID No.5、如SEQ ID No.14、如SEQ ID No.19、如SEQ ID No.20、如SEQ ID No.21、如SEQ IDNo.7、如SEQ ID No.15、如SEQ ID No.16、如SEQ ID No.25、如SEQ ID No.26、如SEQ IDNo.22、如SEQ ID No.23、如SEQ ID No.24、如SEQ ID No.3、如SEQ ID No.9、如SEQ IDNo.10、如SEQ ID No.11、如SEQ ID No.28、如SEQ ID No.29、如SEQ ID No.30、如SEQ IDNo.31、如SEQ ID No.27、如SEQ ID No.37、如SEQ ID No.38、如SEQ ID No.39、如SEQ IDNo.32、如SEQ ID No.33、如SEQ ID No.40、如SEQ ID No.41、如SEQ ID No.42、如SEQ IDNo.43、如SEQ ID No.44、如SEQ ID No.34、如SEQ ID No.35、如SEQ ID No.36、如SEQ IDNo.50、如SEQ ID No.51所示、如SEQ ID No.52、如SEQ ID No.53所示、如SEQ ID No.54、如SEQ ID No.45、如SEQ ID No.46、如SEQ ID No.48、如SEQ ID No.49或如SEQ ID No.47所示。

39.如权利要求1至38任一项所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括头颈癌、呼吸系统肿瘤、消化道肿瘤、泌尿系统肿瘤、男性器官肿瘤、女性器官肿瘤、皮肤癌、内皮细胞肿瘤、脑部肿瘤、神经系统肿瘤、内分泌器官肿瘤中的一种或多种。

40.如权利要求39所述的应用，其特征在于，所述头颈癌包括唇癌、口腔癌、唾液腺癌、口咽癌、鼻咽癌或下咽癌中的一种或多种。

41.如权利要求39所述的应用，其特征在于，所述呼吸系统肿瘤包括喉癌、肺癌或间皮瘤中的一种或多种。

42.如权利要求39所述的应用，其特征在于，所述消化道肿瘤包括结直肠癌、肛门癌、食管癌、胃癌、肝癌、胆囊癌或胰腺癌中的一种或多种。

43.如权利要求39所述的应用，其特征在于，所述泌尿系统肿瘤包括肾癌或膀胱癌中的一种或两种。

44.如权利要求39所述的应用，其特征在于，所述男性器官肿瘤包括阴茎癌、前列腺癌或睾丸癌中的一种或多种。

45.如权利要求39所述的应用，其特征在于，所述女性器官肿瘤包括乳腺癌、外阴癌、阴道癌、宫颈癌、子宫体癌或卵巢癌中的一种或多种。

46.如权利要求39所述的应用，其特征在于，所述皮肤癌包括皮肤黑色素瘤或非黑色素瘤皮肤癌中的一种或两种。

47.如权利要求39所述的应用，其特征在于，所述内皮细胞肿瘤包括卡波西肉瘤；所述脑部肿瘤包括脑癌；所述神经系统肿瘤包括中枢神经系统肿瘤；所述内分泌器官肿瘤包括甲状腺癌。

48.如权利要求1至47任一项所述的应用，其特征在于，所述药物包括所述多肽或其衍生物作为单一活性成分，所述多肽或其衍生物互相联用，所述多肽或其衍生物与其他药物联合作为活性成分，经化学标记或生物标记的所述多肽或其衍生物形成的结合物作为活性成分，所述多肽或其衍生物或所述结合物与固体介质或半固体介质偶联制得的偶联物作为活性成分中的一种或多种，以及药学上可接受的载体。

49.如权利要求48所述的应用，其特征在于，所述药学上可接受的载体包括稀释剂、填充剂、赋形剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、泡腾剂、表面活性剂、吸收促进剂、润滑剂、吸附载体、缓释微球、埋植剂、原位微球、脂质体、微乳、原位水凝胶、纳米粒、蛋白酶抑制剂、生物黏附剂、融合蛋白、抗体或多肽中的一种或两者以上的混合物。

50.如权利要求1至49任一项所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型包括片剂、注射剂、胶囊剂、颗粒剂、眼用制剂、吸入制剂、软膏剂、乳膏剂、喷雾剂、气雾剂、凝胶剂、散剂、涂剂、植入剂、洗剂中的一种或多种。

51.如权利要求1至49任一项所述的应用，其特征在于，所述药物的给药途径包括口服给药、肺部给药、鼻腔给药、经皮给药、眼部给药、静脉滴注、腹腔注射、皮下注射或肌肉注射中的一种或多种。