CN112315993A - 大戟脂活性四环三萜组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及从大戟脂中提取纯化活性四环三萜组合物技术领域，是一种大戟脂活性四环三萜组合物及其制备方法和应用，前者包含重量百分比为70%至90%的大戟脂活性四环三萜，大戟脂活性四环三萜包括大戟二烯醇和大戟醇，将大戟脂以乙醇溶液回流提取，并减压浓缩，得到浸膏，将浸膏以乙醇溶液溶解后，硅胶拌样，然后上硅胶柱吸附，收集洗脱液后，得到大戟脂活性四环三萜组合物。本发明具有成本低、无污染、适合工业化的特点，得到的大戟脂活性四环三萜组合物具有良好的抗炎镇痛作用，能减轻二甲苯致小鼠的耳廓肿胀度，提高热板法所致小鼠疼痛模型的痛瘀值，同时能延长醋酸所致的小鼠扭体潜伏期，显著减少小鼠扭体次数，可用于制备抗炎镇痛药物。

Description

大戟脂活性四环三萜组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及从大戟脂中提取纯化活性四环三萜组合物技术领域，是一种大戟脂活性四环三萜组合物及其制备方法和应用。

背景技术

大戟脂(euphorbium)为大戟科Euphorbiaceae植物多脂大戟Euphorbiaresinifera Berger. 的树脂状分泌物，是维吾尔医常用药材，原产欧洲，非洲亦产，英国、原苏联等也有分布。本品最早注载于阿维森纳所著的《医典》之中，《英国准药典》（1949年版）、《苏联药典》（1959年版）也予收载。在植物茎的棱缘处，以快刀切伤皮部，收集流出的乳汁，干燥后储存于瓶内保存，即可供药用。大戟脂具有生干生热，清除异常黏液质，强筋健骨、醒脑除紧，散寒止痛，燥湿退肿，通利肠阻、除白内障等功效，主治湿寒性或黏液质性疾病，如瘫痪、昏迷、抽搐、颤动，坐骨神经痛，关节疼痛，肠梗阻、腹水、白内障等疾病，在驱白派甫云片、艾比派尔非云丸、买日合米派尔非云软膏等维吾尔药复方制剂中有着广泛的应用。

虽然早期国外尚有对大戟脂的研究报道，但到目前为止，国内外关于大戟脂的报道仍比较少，物质基础研究薄弱。近年来有关大戟脂的研究多集中在化学成分分离方面。根据已有文献，大戟脂中含有萜类、黄酮类、花色苷类、生物碱、鞣质类等化学成分，其中多为二萜和三萜类化合物，其中以大戟二烯醇和大戟醇为代表的四环三萜类化合物是其主要特征性活性成分。大戟二烯醇在大戟脂中含量较多，能显著抑制小鼠白血病P388及小鼠皮肤致癌作用，亦有降血压的作用及引产作用。课题组前期专利ZL201710119132.X报道了大戟二烯醇的制剂及其在治疗白内障上的应用。沈阳药科大学报道大戟脂抗肿瘤有效提取物及其组合物的制备方法和其在制备预防及治疗脑胶质瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、肝癌等恶性肿瘤药物中的应用（201510082429.4）。报道了除此之外，大戟脂在药理作用上的相关研究较少。

目前尚无提取纯化大戟脂中活性四环三萜类成分的研究报道，因此大戟脂中活性四环三萜类成分的提取纯化工艺及药理作用有待进一步研究。

发明内容

本发明提供了一种大戟脂活性四环三萜组合物及其制备方法和应用，克服了上述现有技术之不足，其能提供一种新型的天然植物活性成分大戟脂活性四环三萜组合物及其制备方法，并应用于制备治疗或预防关节疼痛和白内障的药物。

本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种大戟脂活性四环三萜组合物，包含重量百分比为70%至90%的大戟脂活性四环三萜，大戟脂活性四环三萜包括大戟二烯醇和大戟醇，其中，大戟二烯醇含量的重量百分比为35%至40%，大戟醇含量的重量百分比为15%至20%。

下面是对上述发明技术方案之一的进一步优化或/和改进：

上述按照下述方法制备得到：第一步，将所需量的大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液回流提取1次至3次，合并提取液后回收乙醇并减压浓缩，得到浸膏，其中，每1g大戟脂加入乙醇的体积为5 ml至20ml；第二步，将浸膏以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液溶解后，硅胶拌样，然后上硅胶柱吸附，先以石油醚洗脱2个至5个柱体积，再以3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱5个至7个柱体积，收集3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱液后，减压浓缩并真空干燥，得到大戟脂活性四环三萜组合物，其中，硅胶拌样时，硅胶重量为浸膏重量的1倍至2倍，硅胶柱内硅胶填料重量为浸膏重量的6倍至20倍。

上述第一步中，以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液提取，每次回流提取时间为0.5小时至3小时。

上述第二步中，硅胶采用100目至200目或200目至300目的孔径。

上述第二步中，用3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱，流速为0.5个至3个柱体积/小时。

本发明的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种大戟脂活性四环三萜组合物的制备方法，按照下述步骤进行：第一步，将所需量的大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液回流提取1次至3次，合并提取液后回收乙醇并减压浓缩，得到浸膏，其中，每1g大戟脂加入乙醇的体积为5 ml至20ml；第二步，将浸膏以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液溶解后，硅胶拌样，然后上硅胶柱吸附，先以石油醚洗脱2个至5个柱体积，再以3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱5个至7个柱体积，收集3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱液后，减压浓缩并真空干燥，得到大戟脂活性四环三萜组合物，其中，硅胶拌样时，硅胶重量为浸膏重量的1倍至2倍，硅胶柱内硅胶填料重量为浸膏重量的6倍至20倍。

下面是对上述发明技术方案之二的进一步优化或/和改进：

上述第一步中，以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液回流提取，每次回流提取时间为0.5小时至3小时。

上述第二步中，硅胶采用100目至200目或200目至300目的孔径；或/和，第二步中，用3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱，流速为0.5个至3个柱体积/小时。

本发明的技术方案之三是通过以下措施来实现的：一种大戟脂活性四环三萜组合物在制备治疗或预防关节疼痛的药物中的应用。

本发明的技术方案之四是通过以下措施来实现的：一种大戟脂活性四环三萜组合物在制备治疗或预防白内障的药物中的应用。

本发明具有成本低、无污染、适合工业化的特点，所得到的大戟脂活性四环三萜组合物具有良好的抗炎镇痛作用，能明显减轻二甲苯致小鼠的耳廓肿胀度，提高热板法所致小鼠疼痛模型的痛瘀值，同时能延长醋酸所致的小鼠扭体潜伏期，显著减少小鼠扭体次数，可用于制备抗炎镇痛药物。

具体实施方式

本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。本发明中所提到各种化学试剂和化学用品如无特殊说明，均为现有技术中公知公用的化学试剂和化学用品；本发明中的百分数如没有特殊说明，均为质量百分数；本发明中的溶液若没有特殊说明，均为溶剂为水的水溶液，例如，盐酸溶液即为盐酸水溶液；本发明中的常温、室温一般指15℃到25℃的温度，一般定义为25℃。

下面结合实施例对本发明作进一步描述：

实施例1：该大戟脂活性四环三萜组合物，包含重量百分比为70%至90%的大戟脂活性四环三萜，大戟脂活性四环三萜包括大戟二烯醇和大戟醇，其中，大戟二烯醇含量的重量百分比为35%至40%，大戟醇含量的重量百分比为15%至20%。

实施例2：该大戟脂活性四环三萜组合物，包含重量百分比为70%或90%的大戟脂活性四环三萜，大戟脂活性四环三萜包括大戟二烯醇和大戟醇，其中，大戟二烯醇含量的重量百分比为35%或40%，大戟醇含量的重量百分比为15%或20%。

实施例3：作为上述实施例的优化，按照下述方法制备得到：第一步，将所需量的大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液回流提取1次至3次，合并提取液后回收乙醇并减压浓缩，得到浸膏，其中，每1g大戟脂加入乙醇的体积为5ml至20ml；第二步，将浸膏以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液溶解后，硅胶拌样，然后上硅胶柱吸附，先以石油醚洗脱2个至5个柱体积，再以3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱5个至7个柱体积，收集3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱液后，减压浓缩并真空干燥，得到大戟脂活性四环三萜组合物，其中，硅胶拌样时，硅胶重量为浸膏重量的1倍至2倍，硅胶柱内硅胶填料重量为浸膏重量的6倍至20倍。

本发明以大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物为原料，将原料粉碎后，以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液回流提取，提取液减压浓缩后，用硅胶柱富集纯化，得到白色粉末状的大戟脂活性四环三萜组合物，即大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物经提取和纯化后，得到的大戟脂活性四环三萜组合物中，大戟脂活性四环三萜含量的重量百分比是70%至90%，其中，大戟二烯醇含量的重量百分比在35%至40%之间，大戟醇含量的重量百分比在15%至20%之间，并通过经典的抗炎镇痛实验，即小鼠耳肿胀、热板法和醋酸扭体法来研究活性四环三萜的药理作用，即可用于制备抗炎镇痛药物应用在相关疾病的治疗上。

实施例4：作为上述实施例的优化，第一步中，以体积百分比为75%或95%的乙醇溶液回流提取，每次提取时间为0.5小时至3小时。

实施例5：作为上述实施例的优化，第二步中，硅胶采用100目至200目或200目至300目的孔径；或/和，第二步中，用3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱，流速为0.5个至3个柱体积/小时。

实施例6：该大戟脂活性四环三萜组合物的制备方法，按照下述步骤进行：第一步，将所需量的大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液回流提取1次至3次，合并提取液后回收乙醇并减压浓缩，得到浸膏，其中，每1g大戟脂加入乙醇的体积为5 ml至20ml；第二步，将浸膏以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液溶解后，硅胶拌样，然后上硅胶柱吸附，先以石油醚洗脱2个至5个柱体积，再以3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱5个至7个柱体积，收集3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱液后，减压浓缩并真空干燥，得到大戟脂活性四环三萜组合物，其中，硅胶拌样时，硅胶重量为浸膏重量的1倍至2倍，硅胶柱内硅胶填料重量为浸膏重量的6倍至20倍。

本发明中，大戟脂活性四环三萜组合物的测定：以大戟二烯醇为对照品，以香草醛-浓硫酸法为显色方法，通过紫外分光光度法测定总三萜含量。具体方法为: 精密量取大戟二烯醇对照品溶液和供试品溶液0.5 mL，分别置于5 ml具塞试管，加入新配置的5%香草醛-冰乙酸溶液0.5 mL和浓硫酸1.0 mL，摇匀，70℃水浴30 min，放冷，加入5 mL冰乙酸，摇匀，于550nm处测定吸光度。以大戟二烯醇为对照品，绘制标准曲线，得到回归方程为A=4.1587C + 0.2859，R=0.9996(n=6)，线性范围为0.00016mg/mL至0.16 mg/mL。提取率的计算：总三萜含量（%）=100CV/1000M，C：供试品溶液中目标化合物的浓度（mg/mL），V：供试品溶液体积（mL），M：药材重量（g）。

大戟脂活性四环三萜组合物中大戟二烯醇和大戟醇和含量测定：采用 AgilentZORBAX Eclipse Plus C8 (150 mm×4.6 mm，5 µm)色谱柱，以乙腈-水（90:10，v:v）为流动相，流速：1.0 mL/min；检测波长：210 nm；柱温：30℃；进样量：10 μL。以大戟二烯醇和大戟醇绘制标准曲线为：大戟二烯醇Y=13000.7703X－398.1816(R=0.9996), 线性范围：0.0304mg/mL至1.216mg/mL；大戟醇Y=8534.1929X＋4.0556（R=0.9999）,线性范围：0.01mg/mL至0.4mg/mL。

本发明通过从大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物中提取和纯化得到大戟脂活性四环三萜组合物，其中，大戟脂活性四环三萜含量的重量百分比在25%至30%之间时，大戟二烯醇含量的重量百分比为9%至12%，大戟醇含量的重量百分比为2%至5%；

大戟脂活性四环三萜含量的重量百分比在50%至55%之间时，大戟二烯醇含量的重量百分比为15%至20%，大戟醇含量的重量百分比为4%至8%；

大戟脂活性四环三萜含量的重量百分比在70%至90%之间时，大戟二烯醇含量的重量百分比为35%至40%，大戟醇含量的重量百分比为15%至20%，但并不仅限于此。

实施例7：该大戟脂活性四环三萜组合物在制备治疗或预防关节疼痛的药物中的应用。

实施例8：该大戟脂活性四环三萜组合物在制备治疗或预防白内障的药物中的应用。

实施例9：该大戟脂活性四环三萜组合物的制备方法，按照下述步骤进行：第一步，将10.0 kg大戟脂以50L体积百分比为95%的乙醇溶液回流提取3次，每次回流提取时间为1小时，合并提取液后回收乙醇并减压浓缩，得到浸膏；第二步，将浸膏以体积百分比为95%的乙醇溶液溶解后，用浸膏重量1.2倍的硅胶拌样，然后上100目至200目的硅胶柱吸附，先以石油醚洗脱4个柱体积，再以5%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱6个柱体积，收集5%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱液后，减压浓缩并真空干燥，得到大戟脂活性四环三萜组合物，其中，硅胶柱内硅胶填料重量为浸膏重量的10倍。

实施例9得到的大戟脂活性四环三萜组合物，其得率为20.74%，其中，从大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物中得到的大戟脂活性四环三萜组合物中，大戟脂活性四环三萜含量的重量百分比为80.41%，而大戟脂活性四环三萜中，大戟二烯醇含量的重量百分比为35.98%，大戟醇含量的重量百分比为18.77%。

实施例10：该大戟脂活性四环三萜组合物的制备方法，按照下述步骤进行：第一步，将0.5 kg大戟脂以5L体积百分比为95%的乙醇溶液回流提取3次，每次回流提取时间为1小时，合并提取液后回收乙醇并减压浓缩，得到浸膏；第二步，将浸膏以体积百分比为95%的乙醇溶液溶解后，用浸膏重量1.5倍的硅胶拌样，然后上100目至200目的硅胶柱吸附，先以石油醚洗脱4个柱体积，再以5%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱6个柱体积，收集5%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱液后，减压浓缩并真空干燥，得到大戟脂活性四环三萜组合物，其中，硅胶柱内硅胶填料重量为浸膏重量的10倍。

实施例10得到的大戟脂活性四环三萜组合物，其得率为19.54%，其中，从大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物中得到的大戟脂活性四环三萜组合物中，大戟脂活性四环三萜含量的重量百分比为84.22%，而大戟脂活性四环三萜中，大戟二烯醇含量的重量百分比为36.16%，大戟醇含量的重量百分比为17.41%。

实施例11：该大戟脂活性四环三萜组合物的制备方法，按照下述步骤进行：第一步，将0.25kg大戟脂以5L体积百分比为95%的乙醇溶液回流提取3次，每次回流提取时间为1小时，合并提取液后回收乙醇并减压浓缩，得到浸膏；第二步，将浸膏以体积百分比为95%的乙醇溶液溶解后，用浸膏重量1.5倍的硅胶拌样，然后上200目至300目的硅胶柱吸附，先以石油醚洗脱2个柱体积，再以5%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱7个柱体积，收集5%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱液后，减压浓缩并真空干燥，得到大戟脂活性四环三萜组合物，其中，硅胶柱内硅胶填料重量为浸膏重量的10倍。

实施例11得到的大戟脂活性四环三萜组合物，其得率为21.75%，其中，从大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物中得到的大戟脂活性四环三萜组合物中，大戟脂活性四环三萜含量的重量百分比为79.21%，而大戟脂活性四环三萜中，大戟二烯醇含量的重量百分比为39.96%，大戟醇含量的重量百分比为19.23%。

本发明大戟脂活性四环三萜组合物进行的体内药效学试验：

1 大戟脂四环三萜组合物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响：

取昆明小鼠50只，雌雄各半，体重18 g至22 g，按体质量随机分为5个实验组，分别是模型组、吲哚美辛组（10 mg/kg）、四环三萜组合物低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg)，每组10只。除模型组给予0.5% CMC-Na外，其余各组给予相应剂量的吲哚美辛或大戟脂活性四环三萜组合物，灌胃给药，每天1次，持续4天，灌胃体积20mL/kg。于末次给药后1.5 h，将25 µl二甲苯均匀涂抹于各组小鼠右耳廓前后两面致炎，以左耳作对照。30 min后脱颈椎处死小鼠，用直径6 mm打孔器分别在左右耳对称部位打下圆形耳片，精密称重，计算肿胀度和肿胀抑制率。每组小鼠耳廓肿胀度以每鼠左右耳重量之差的平均值来表示。肿胀抑制率（%）= (模型组肿胀度均值－给药组肿胀度均值)/模型组肿胀度均值×100% 。结果如表1所示；

表1可以看出，与模型组比较，大戟脂活性四环三萜组合物高剂量组60mg/kg和阳性组可显著抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀（P <0.05），耳肿胀抑制率分别为15.92%和24.68%，说明大戟脂四环三萜组合物具有较好的抗炎作用；

2 大戟脂四环三萜组合物对小鼠热板模型痛阈值的影响：

取昆明种小鼠60只，雌性，体重18 g至22 g，先进行实验前筛选，将小鼠置于55 ± 5.0℃热板上，记录小鼠出现舔足反应所需的时间，即为痛阈值。凡是痛阈值小于5 s或者大于30 s及跳跃者均淘汰，筛选出50只合格小鼠。按体质量随机分为5个实验组，分别是模型组、吲哚美辛组（10 mg/kg）、大戟脂活性四环三萜组合物低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg)，每组10只。除模型组给予0.5% CMC-Na外，其余各组给予相应剂量的吲哚美辛或大戟脂活性四环三萜组合物，灌胃给药，每天1次，持续4天，灌胃体积20mL/kg。于末次给药后60 min、120 min测小鼠痛阈值，并记录结果，如表2所示；

从表2可以看出，用药后60 min，大戟脂四环三萜组合物中剂量组和阳性组与模型组比较有统计学意义（P < 0.05），高剂量组和阳性组与模型组比较有极显著性差异（P <0.01），且大戟脂四环三萜组合物高剂量组镇痛药效与阳性药吲哚美辛几乎相同；用药后120 min，大戟脂四环三萜组合物中、高剂量组与模型组比较有统计学意义（P < 0.05），阳性组与模型组比较无显著性差异，说明大戟脂四环三萜组合物对小鼠热板模型具有良好的镇痛作用，其发挥镇痛作用的时间比阳性药吲哚美辛更持久；

3 大戟脂四环三萜组合物对醋酸所致小鼠扭体反应的影响：

取昆明小鼠50只，雌雄各半，按体质量随机分为5个实验组，分别是模型组、吲哚美辛组（10 mg/kg）、大戟脂活性四环三萜组合物低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg)，每组10只。除模型组给予0.5% CMC-Na溶液外，其余各组给予相应剂量的吲哚美辛或大戟脂活性四环三萜组合物，灌胃给药，每天1次，连续4天，灌胃体积20 mL/kg。末次给药1.5 h后腹腔注射0.8%冰醋酸0.2 mL/只，记录小鼠的反应潜伏期( min) 及 15min 内扭体次数，并计算药物对扭体反应的抑制率。抑制率=（模型组平均扭体次数－给药组平均扭体次数）/模型组平均扭体次数×100%。 结果如表3所示；

从表3可以看出，与模型组比较，大戟脂活性四环三萜组合物高剂量组60mg/kg可延长小鼠扭体反应潜伏期，并能显著减少小鼠的扭体反应次数( P<0.05)，说明大戟脂活性四环三萜组合物具有良好的镇痛作用。

因此，本发明大戟脂活性四环三萜组合物药效学研究结果表明，大戟脂活性四环三萜组合物高剂量组对二甲苯诱导的耳肿胀具有明显的抑制作用，并能显著提高小鼠热板模型的痛阈值，对醋酸所致小鼠扭体反应亦具有良好的镇痛作用，可明显延长扭体潜伏期，减少扭体次数，大戟脂活性四环三萜组合物具较好的抗炎镇痛作用。

综上所述，本发明具有成本低、无污染、适合工业化的特点，所得到的大戟脂活性四环三萜组合物具有良好的抗炎镇痛作用，能明显减轻二甲苯致小鼠的耳廓肿胀度，提高热板法所致小鼠疼痛模型的痛瘀值，同时能延长醋酸所致的小鼠扭体潜伏期，显著减少小鼠扭体次数，可用于制备抗炎镇痛药物。

以上技术特征构成了本发明的实施例，其具有较强的适应性和实施效果，可根据实际需要增减非必要的技术特征，来满足不同情况的需求。

Claims (10)

1.一种大戟脂活性四环三萜组合物，其特征在于包含重量百分比为70%至90%的大戟脂活性四环三萜，大戟脂活性四环三萜包括大戟二烯醇和大戟醇，其中，大戟二烯醇含量的重量百分比为35%至40%，大戟醇含量的重量百分比为15%至20%。

2.根据权利要求1所述的大戟脂活性四环三萜组合物，其特征在于按照下述方法制备得到：第一步，将所需量的大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液回流提取1次至3次，合并提取液后回收乙醇并减压浓缩，得到浸膏，其中，每1g大戟脂加入乙醇的体积为5 ml至20ml；第二步，将浸膏以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液溶解后，硅胶拌样，然后上硅胶柱吸附，先以石油醚洗脱2个至5个柱体积，再以3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱5个至7个柱体积，收集3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱液后，减压浓缩并真空干燥，得到大戟脂活性四环三萜组合物，其中，硅胶拌样时，硅胶重量为浸膏重量的1倍至2倍，硅胶柱内硅胶填料重量为浸膏重量的6倍至20倍。

3.根据权利要求1或2所述的大戟脂活性四环三萜组合物，其特征在于第一步中，以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液回流提取1次至3次,每次回流提取时间为0.5小时至3小时。

4.根据权利要求1或2或3所述的大戟脂活性四环三萜组合物，其特征在于第二步中，硅胶采用100目至200目或200目至300目的孔径。

5.根据权利要求1或2或3或4所述的大戟脂活性四环三萜组合物，其特征在于第二步中，用3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱，流速为0.5个至3个柱体积/小时。

6.一种根据权利要求1所述的大戟脂活性四环三萜组合物的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：第一步，将所需量的大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液回流提取1次至3次，合并提取液后回收乙醇并减压浓缩，得到浸膏，其中，每1g大戟脂加入乙醇的体积为5 ml至20ml；第二步，将浸膏以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液溶解后，硅胶拌样，然后上硅胶柱吸附，先以石油醚洗脱2个至5个柱体积，再以3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱5个至7个柱体积，收集3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱液后，减压浓缩并真空干燥，得到大戟脂活性四环三萜组合物，其中，硅胶拌样时，硅胶重量为浸膏重量的1倍至2倍，硅胶柱内硅胶填料重量为浸膏重量的6倍至20倍。

7.根据权利要求6所述的大戟脂活性四环三萜组合物的制备方法，其特征在于第一步中，以体积百分比为75%到95%的乙醇溶液回流提取1次至3次,每次回流提取时间为0.5小时至3小时。

8.根据权利要求6或7所述的大戟脂活性四环三萜组合物的制备方法，其特征在于第二步中，硅胶采用100目至200目或200目至300目的孔径；或/和，第二步中，用3%到6%的乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱，流速为0.5个至3个柱体积/小时。

9.一种根据权利要求1或2或3或4或5所述的大戟脂活性四环三萜组合物在制备治疗或预防关节疼痛的药物中的应用。

10.一种根据权利要求1或2或3或4或5所述的大戟脂活性四环三萜组合物在制备治疗或预防白内障的药物中的应用。