CN112294668A

CN112294668A - 透明质酸注射液

Info

Publication number: CN112294668A
Application number: CN202010612202.7A
Authority: CN
Inventors: 吴黎明
Original assignee: Xi'an Bohe Medical Technology Co ltd
Current assignee: Xi'an Bohe Medical Technology Co ltd
Priority date: 2020-06-30
Filing date: 2020-06-30
Publication date: 2021-02-02
Anticipated expiration: 2040-06-30
Also published as: CN112294668B

Abstract

本发明提供一种透明质酸注射液，其中，所述透明质酸注射液包含透明质酸或透明质酸钠、氨基酸、丙二醇、维生素和矿物质。本发明透明质酸注射液通过填充及促进体内自身胶原蛋白的再生和重建，从而达到改善干燥、细纹、老化的皮肤问题。

Description

透明质酸注射液

技术领域

本发明属于医学美容领域，具体涉及一种透明质酸注射液。

背景技术

皮肤是人体最大的一个器官，其衰老是一个非常复杂的过程，衰老会导致皮肤结构改变、功能改变、组织损失、形成皱纹、皮肤干燥、粗糙发黄、色素沉着、弹性降低。针对皮肤年轻化，近年来美容注射填充技术迅速发展，可供选择的方法很多，包括外科手术、光电治疗、肉毒素、胶原蛋白注射填充剂、透明质酸注射填充剂。但是外科手术由于创伤大、术后恢复时间长很难作为消费者皮肤年轻态的首选；光电治疗由于其周期疗程长，对设备及操作人员技术要求高，可能出现瘢痕、色素沉着等并发症也限制了其广泛应用；肉毒素注射可以有效抚平动态皱纹，但对于静态皱纹无效；临床上常用的胶原蛋白注射填充剂包括人源胶原蛋白和非人源胶原蛋白，前者是取患者自体组织经培养、处理后，制备成注射填充剂，其优点在于自体来源无免疫风险，但费时费力，价格昂贵；非人源胶原蛋白主要为牛胶原，经过去抗原处理后仍有一定的免疫风险，注射前需经过皮试确定是否过敏，且该过敏反应的发生周期相对较长，大约在4个月到2年左右，不确定因素较多。由此可知，直接注射胶原蛋白填充剂并不是最优解决方案。

随着时间的推移，人体皮肤内部也会发生改变，例如胞外基质的减少和胶原蛋白的降解等，造成皮肤皱纹和松弛。要从根源上解决皮肤皱纹、松弛等问题，最直接有效的方法就是补充胞外基质和胶原蛋白。与直接补充胶原蛋白相比，采用皮下注射透明质酸以达到补充胞外基质、促进胶原蛋白合成的目的是常规手段。透明质酸注射液具有成本较低，不会引起免疫反应，单次注射维持时间长的优势。

目前在现有的透明质酸注射液研制中，一些尝试过的解决方案尝试了用于水光注射的透明质酸钠凝胶，所述凝胶包括以下重量份组分：10-30份的透明质酸钠、0.5-3份的甘油、0.5-1.5份的甘露醇、1-9份的pH调节剂和25-45份的等渗调节剂。该方案在补充透明质酸的同时通过添加甘露醇预防水肿，但未添加能够促进胶原蛋白合成的组分，只能单纯起到补充皮肤水分的作用，不能满足该行业的需要。

因此，需要一种透明质酸注射液，通过填充及促进体内自身胶原蛋白的再生和重建，从而达到改善干燥、细纹、老化的皮肤问题。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种透明质酸注射液。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：

第一方面，本发明提供一种透明质酸注射液，其中，所述注射液包含透明质酸或透明质酸钠、氨基酸、丙二醇、维生素和矿物质。

在优选的实施方式中，所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、精氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸、缬氨酸、赖氨酸和谷氨酸中的一种或多种。

在优选的实施方式中，所述维生素选自维生素B和维生素C中的一种或多种。

在优选的实施方式中，所述矿物质选自依地酸钙二钠或氯化钙。

在优选的实施方式中，所述透明质酸或透明质酸钠的质量百分比为0.1-1.5%；例如，所述透明质酸或透明质酸钠的质量百分比可以为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%或1.5%。

在优选的实施方式中，所述氨基酸的质量百分比为0.01-2%；例如，所述氨基酸的质量百分比可以为0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%、0.07%、0.08%、0.09%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%或2%。

在优选的实施方式中，所述丙二醇的质量百分比为0.1-5%；例如，所述丙二醇的质量百分比可以为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.5%、1.6%、1.7%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.5%、2.7%、2.8%、3%、3.2%、3.5%、3.7%、3.8%、4%、4.1%、4.3%、4.5%、4.6%、4.7%、4.9%或5%。

在优选的实施方式中，所述维生素的质量百分比为0.01-5%；例如，所述维生素的质量百分比可以为0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%、0.07%、0.08%、0.09%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.5%、2.6%、2.8%、3%、3.2%、3.5%、3.7%、3.8%、4%、4.1%、4.3%、4.5%、4.7%、4.9%或5%。

在优选的实施方式中，所述矿物质的质量百分比为0.01-0.5%；例如，所述矿物质的质量百分比可以为0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%、0.07%、0.08%、0.09%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%或0.5%。

在优选的实施方式中，所述透明质酸或透明质酸钠与所述维生素的质量比为(1.5-10):1；例如，所述透明质酸或透明质酸钠与所述维生素的质量比可以为1.5:1、1.6:1、1.8:1、2:1、2.2:1、2.5:1、2.6:1、2.8:1、3:1、3.2:1、3.5:1、3.7:1、3.8:1、4:1、4.3:1、4.5:1、4.6:1、5:1、5.2:1、5.5:1、5.7:1、6:1、6.2:1、6.5:1、6.7:1、6.8:1、7:1、7.2:1、7.5:1、8:1、8.2:1、8.5:1、8.8:1、9:1、9.2:1、9.5:1、9.7:1或10:1。

在优选的实施方式中，所述透明质酸或透明质酸钠与所述丙二醇的质量比为(0.1-0.5):1；例如，所述透明质酸或透明质酸钠与所述丙二醇的质量比可以为0.1:1、0.15:1、0.2:1、0.25：1、0.3:1、0.35:1、0.4:1、0.45:1或0.5:1。

第二方面，本发明提供一种透明质酸注射液，其中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸或透明质酸钠0.1-1.5%、氨基酸0.01-2%、丙二醇0.1-5%、维生素0.01-5%和矿物质0.01-0.5%。

在优选的实施方式中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸或透明质酸钠0.5-1.5%、氨基酸0.05-2%、丙二醇2-5%、维生素0.2-5%和矿物质0.01-0.5%；

在更优选的实施方式中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸或透明质酸钠0.7%、氨基酸0.05%、丙二醇2%、维生素0.2%和矿物质0.01%；

在最优选的实施方式中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸或透明质酸钠0.7%、脯氨酸0.02%、甘氨酸0.01%、丙氨酸0.01%、精氨酸0.01%、丙二醇2%、维生素B3 0.2%和氯化钙0.01%。

第三方面，提供透明质酸注射液的制备方法，所述方法包含以下步骤：

S1.将透明质酸或透明质酸钠、丙二醇加入水中，待完全溶解，得到混合液A；

S2.将氨基酸、维生素、矿物质加入水中，待完全溶解，得到溶液B；

S3.溶液B经0.22μm滤膜过滤后，加入溶液A中，待完全溶解混匀，得到混合液C；

S4.将混合液C装于预灌封注射器内，经过121℃湿热灭菌8min，冷却至常温，即得所述透明质酸注射液。

第四方面，提供一种美容产品，所述美容产品包含本发明所述的注射液。

第五方面，提供一种透明质酸注射液，其中，所述注射液包含透明质酸或透明质酸钠、氨基酸、甘露醇和矿物质。

第六方面，提供本发明所述的注射液在制备皱纹填充剂中的用途。

第七方面，提供本发明所述的注射液在制备眼部皱纹填充剂中的用途。

第八方面，提供一种药物组合物，所述药物组合物包含安全有效量的如本发明所述的透明质酸注射液。

在本发明中，安全有效量是指一定量的化合物或组合物，所述量足以显著诱发积极的有益效果，优选积极的皮肤组织外观或感觉有益效果，以独立或组合的形式包括本文所公开的有益效果，但所述量又足够低以避免严重的副作用，即在技术人员合理判断的范围内提供合理的效险比。

注射液

就本发明而言，透明质酸注射液应理解为是指溶液形式的组合物，其具有令人满意的可注射性（或注射性，即由于通过针头进入注射器的流动或多或少令人满意而易于注射），特别是能够通过具有内径约等于300μm的针头的注射器注射。为了本申请的目的，从流变学角度考虑，本发明注射液优选具有小于或等于10000Pa.s的粘度。

流变测量在RSO（BROOKFIELD Industries）流变仪25℃下，剪切速率为3.14~3001/S，50-1#转子的条件下进行检测。

最大粘度测量在剪切速率为3.14~300 1/S，将约1mL的样品滴加在椎板上。

根据YY0308-2004文件规定，注射液渗透压摩尔浓度应为270-350mOsmol/L，而低渗溶液（渗透压低于150mOsmol/L）可能引起注射部位溶血和疼痛。高渗溶液（渗透压高于600mOsmol/L）可能引起引起红细胞的萎缩和显著的疼痛；

根据本发明的方法制备的透明质酸注射液可以装在注射器中，以能够被注射到组织中。

因此，另一方面，提供一种注射器，所述注射器含有如上所述的根据本发明的方法制备的透明质酸注射液。这种注射器特别旨在用于填充皱纹或细纹。

在优选的实施方式中，可以在填充注射器之前进行脱气以消除任何可能的气泡。

用途

在优选的实施方案中，本发明提供的透明质酸注射液旨在用于修复或重建组织。

特别地，根据本发明的透明质酸注射液可用于形成或替代生物组织，例如作为植入物；或填充生物组织，例如注射入骨软骨或关节；或用于填充机体或面部的空腔，例如皱纹或细纹；或用于创建或增加人体或面部的体积；或用于皮肤愈合。

本发明还涉及根据本发明的透明质酸注射液用于治疗或对抗皮肤衰老的美容用途。

相对于现有技术，本发明的有益效果在于：

本发明透明质酸注射液中使用的维生素B和维生素C，它们是胶原蛋白形成过程中的关键酶和辅助因子，有助于皮肤自身形成胶原蛋白。本发明人意外的发现将维生素的质量百分比调整为0.01-5%范围时，能够更好的促进皮肤自身胶原蛋白的形成。

本发明透明质酸注射液中使用的矿物质，特别是氯化钙，作为渗透压调节剂，具有调节表皮细胞增值和分化的作用，成纤维细胞内钙离子浓度升高，可促进成纤维细胞增殖，有利于皮肤自身胶原生成。本发明人意外的发现将矿物质的质量百分比调整为0.01-0.5%范围时，能够更好的促进成纤维细胞增殖，更好的促进皮肤自身胶原的生成。

本发明透明质酸注射液中使用的丙二醇性质基本与甘油相同，但粘度较小，丙二醇有甘油的优点，毒性和刺激均较小，溶解性好，可溶解很多药物，丙二醇与水的混合液，能延缓某些药物的水解，增加制剂产品的稳定性，作为注射剂溶剂，有速效或延效作用，在皮下注射十分安全。本发明人意外的发现将丙二醇的质量百分比调整为0.1-5%范围时，能够将透明质酸注射液渗透压调节至最佳水平，从而减少注射时可能引起注射部位溶血和疼痛问题。

本发明透明质酸注射液中使用的透明质酸具有极强的保水性能，存在于包括皮肤在内的大多数软结缔组织中。常用的透明质酸有交联和非交联两种形式，交联透明质酸降解周期较长，注射后维持的时间也比较长，适用于面部、额部等部位的填充塑型；非交联透明质酸质地较软，适用于眼部皮肤等表皮较薄部位的皱纹填充。

氨基酸是蛋白质的结构单元，脯氨酸、甘氨酸和丙氨酸在胶原蛋白中含量最为丰富，补充这些氨基酸能为胶原蛋白的合成提供原料；亮氨酸、缬氨酸和异亮氨酸均是支链氨基酸，支链氨基酸的协同作用，能够保护肌肉组织，提供能量，加速骨骼、皮肤和肌肉组织的愈合；精氨酸为pH值调节剂；蛋氨酸、赖氨酸、谷氨酸可以增加胶原蛋白含量，使皮肤呈现年轻化的改变，达到一定的延缓皮肤衰老的作用。本发明制备的非交联透明质酸注射液能够补充皮肤外基质中透明质酸和提高自身胶原蛋白的合成能力，使皱纹恢复光滑和弹性；同时本发明透明质酸注射液进一步降低了其细胞毒性级别，进一步提高了安全性。

本发明通过将透明质酸或透明质酸钠、氨基酸、丙二醇、维生素和矿物质应用于透明质酸注射液中，五种物质产生协同护肤作用，通过筛选透明质酸注射液中组分的种类及调整透明质酸注射液中组分的质量百分比，本发明透明质酸注射液能够很好的减少皱纹，并具有很好的保湿性和稳定性。

具体实施方式

下文将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本发明，本发明的优点和各种效果将由此更加清楚的呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本发明，而非限制本发明。

以下通过实施例更详细地说明本发明，但本发明不限于这些实施例。

实施例1

本实施例提供一种透明质酸注射液，其中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸0.1%、氨基酸2%、丙二醇0.1%、维生素0.01%和矿物质0.01%。

实施例2

本实施例提供一种透明质酸注射液，其中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸钠1.5%、氨基酸0.01%、丙二醇5%、维生素5%和矿物质0.5%。

实施例3

本实施例提供一种透明质酸注射液，其中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸钠0.7%、脯氨酸0.02%、甘氨酸0.01%、丙氨酸0.01%、精氨酸0.01%、丙二醇2%、维生素B30.2%和氯化钙0.01%。

实施例4

本实施例提供一种用于眼部的透明质酸注射液，其中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸钠0.7%、脯氨酸0.02%、甘氨酸0.01%、丙氨酸0.01%、精氨酸0.01%、丙二醇2%、维生素B3 0.2%和氯化钙0.01%。

实施例5

本实施例提供一种透明质酸注射液，其中，所述注射液包含透明质酸或透明质酸钠、氨基酸、丙二醇、维生素和矿物质。

实施例6

本实施例提供一种美容产品，所述产品包含实施例3所述的注射液。

实施例7

提供实施例3所述的注射液在美容医学中的用途。

实施例8

提供实施例3所述的注射液在再生医学中的用途。

实施例9

提供实施例3所述的注射液在在用于填充皱纹和细纹中的美容用途。

实施例10

提供实施例3所述的注射液在在用于眼部填充皱纹和细纹中的美容用途。

实施例11

提供实施例3透明质酸注射液的制备方法，所述方法包含以下步骤：

S1.将透明质酸钠0.7%、丙二醇2%加入水中，待完全溶解，得到混合液A；

S2.将脯氨酸0.02%、甘氨酸0.01%、丙氨酸0.01%、精氨酸0.01%、维生素B3 0.2%、0.01%加入水中，待完全溶解，得到溶液B；

实施例12

本实施例提供一种透明质酸注射液，其中，所述注射液包含透明质酸或透明质酸钠、氨基酸、甘露醇和矿物质。

实施例13

本实施例提供一种透明质酸注射液，包括以质量百分比计的如下组分：透明质酸0.8%、脯氨酸0.1%、甘氨酸0.05%、亮氨酸0.05%、缬氨酸0.05%、甘露醇1%、依地酸钙二钠0.1%。

对比例1

为了进一步说明本发明的有益效果，提供对比例1，和实施例3相比，该对比例1的区别在于：将本发明的透明质酸钠替换为透明质酸锌。

对比例1提供一种透明质酸注射液，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸锌0.7%、脯氨酸0.02%、甘氨酸0.01%、丙氨酸0.01%、精氨酸0.01%、丙二醇2%、维生素B3 0.2%和氯化钙0.01%。

对比例2

为了进一步说明本发明的有益效果，提供对比例2，和实施例3相比，该对比例2的区别在于：将本发明维生素B3的质量百分比调整为0.008%。

对比例2提供一种透明质酸注射液，其中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸钠0.7%、脯氨酸0.02%、甘氨酸0.01%、丙氨酸0.01%、精氨酸0.01%、丙二醇2%、维生素B30.008%和氯化钙0.01%。

对比例3

为了进一步说明本发明的有益效果，提供对比例3，和实施例3相比，该对比例3的区别在于：将本发明维生素B3的质量百分比调整为6%。

对比例3提供一种透明质酸注射液，其中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸钠0.7%、脯氨酸0.02%、甘氨酸0.01%、丙氨酸0.01%、精氨酸0.01%、丙二醇2%、维生素B36%和氯化钙0.01%。

对比例4

为了进一步说明本发明的有益效果，提供对比例4，和实施例3相比，该对比例4的区别在于：不添加甘氨酸。

对比例4提供一种透明质酸注射液，其中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸钠0.7%、脯氨酸0.02%、丙氨酸0.01%、精氨酸0.01%、丙二醇2%、维生素B3 0.2%和氯化钙0.01%。

实验1：安全性检测（细胞毒性检测）

受试样品：实施例1-4制备得到的样品

实验方法：

细胞毒性检测参考《GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验》和《GB/T16886.12-2017 医疗器械生物学评价第12部分：样品制备与参照材料》文件，采用MTT法和细胞形态观察法评价样品的细胞毒性。毒性评价标准按照表1，将细胞相对增值率转化为0~5级反应来评定样品的毒性程度，其中阳性对照、阴性对照为上述国家标准中规定的对照材料，阳性对照为4%二甲基亚砜（DMSO），阴性对照选用10%新生牛血清与高糖DMEM培养培养基。

细胞毒性评价中，细胞相对增殖率越高、反应分级级别越低，说明毒性越低，当反应分级大于2级时被认为有细胞毒性作用。

表1. 细胞毒性反应分级标准

细胞相对增值率（RGR）	反应分级	毒性程度
			≥100	0级	无
75-99	1级	轻微
			50-74	2级	轻度
25-49	3级	中度
			1-24	4级	重度
0	5级	极重

表2. 样品细胞毒性检测结果

组别	细胞相对增值率	细胞毒性反应分级
			阴性对照组	100%	无
阳性对照组	8.88%	4级
			实施例1	85.06%	1级
实施例2	85.72%	1级
			实施例3	96.31%	1级
实施例4	97.94%	1级

同样的，为了进一步说明本发明的有益效果，提供以下对比例：

提供对比例1.1，和实施例3相比，该对比例1.1的区别在于：将本发明的丙二醇替换为甘油；结合本发明的制备方法制备成透明质酸注射液，按照实验1的测试方法进行测试。观察对比例1.1制备的透明质酸注射液的安全性，结果同上述对比例1中类似。

提供对比例2.1，和实施例3相比，该对比例2.1的区别在于：将本发明的丙二醇的质量百分比替换为0.05%；结合本发明的制备方法制备成透明质酸注射液，按照实验1的测试方法进行测试。观察对比例2.1制备的透明质酸注射液的安全性，结果同上述对比例2中类似。

提供对比例3.1，和实施例3相比，该对比例3.1的区别在于：将本发明的丙二醇的质量百分比替换为6%；结合本发明的制备方法制备成透明质酸注射液，按照实验1的测试方法进行测试。观察对比例3.1制备的透明质酸注射液的安全性，结果同上述对比例3中类似。

提供对比例4.1，和实施例3相比，该对比例4.1的区别在于：不添加丙二醇；

提供对比例4.2，和实施例3相比，该对比例4.2的区别在于：不添加维生素B3；

结合本发明的制备方法制备成透明质酸注射液，按照实验1的测试方法进行测试。观察对比例4.1、对比例4.2制备的透明质酸注射液的安全性。结果同上述对比例4中类似。

由细胞毒性检测结果可知，本发明实施例1至实施例4所制备的透明质酸注射液的细胞毒性反应分级均为1级，说明实施例1至实施例4制备的透明质酸注射液无细胞毒性作用，使用安全可靠。其中，实施例4的细胞相对增值率最佳。

实验2：胶原蛋白I含量测定

受试样品：实施例1-4、实施例13、对比例1-4制备得到的样品

实验方法：

胶原蛋白测定使用人源成纤维细胞作为培养对象，实施例1-4、实施例13、对比例1-4制备的透明质酸注射液作为测试对象，50ng/mL TGFβ作为阳性对照，培养24h，取上清培养液，测定胶原蛋白I含量。

检测方法为酶联免疫吸附法（ELISA）及免疫荧光法（IF）法。

测试结果如表3所示。

表3. 胶原蛋白I含量测定

组别	胶原蛋白I含量平均浓度（ng/mL）	胶原蛋白I相对IOD平均值
			阴性对照组	2.14	1
阳性对照组	3.69	3.81
			实施例1	2.99	1.60
实施例2	3.07	1.50
			实施例3	3.80	1.68
实施例4	4.19	2.16
			实施例13	2.75	1.50
对比例1	2.40	1.45
			对比例2	2.45	1.32
对比例3	2.45	1.25
			对比例4	2.25	1.15

提供对比例1.1，和实施例3相比，该对比例1.1的区别在于：将本发明的丙二醇替换为甘油；结合本发明的制备方法制备成透明质酸注射液，按照实验2的测定方法进行测定。观察对比例1.1制备的透明质酸注射液的安全性，结果同上述对比例1中类似。

提供对比例2.1，和实施例3相比，该对比例2.1的区别在于：将本发明的丙二醇的质量百分比替换为0.05%；结合本发明的制备方法制备成透明质酸注射液，按照实验2的测定方法进行测定。观察对比例2.1制备的透明质酸注射液的安全性，结果同上述对比例2中类似。

提供对比例3.1，和实施例3相比，该对比例3.1的区别在于：将本发明的丙二醇的质量百分比替换为6%；结合本发明的制备方法制备成透明质酸注射液，按照实验2的测定方法进行测定。观察对比例3.1制备的透明质酸注射液的安全性，结果同上述对比例3中类似。

结合本发明的制备方法制备成透明质酸注射液，按照实验2的测定方法进行测定。观察对比例4.1、对比例4.2制备的透明质酸注射液安全性。结果同上述对比例4中类似。

由表3可以看出：在促进胶原蛋白I含量生成方面，本发明透明质酸注射液能够有效提高胶原蛋白I的含量，胶原蛋白I含量可达3ng/mL；通过进一步优化透明质酸注射液的配方体系，本发明透明质酸注射液可提高胶原蛋白I含量至4.19ng/mL。比较可知，本发明透明质酸注射液在促进胶原蛋白I含量生成方面的效果远大于未使用本发明配方体系的透明质酸注射液。

实验3：稳定性测试

受试样品：实施例1-4、实施例13、对比例1-4制备得到的样品

实验方法：

将各受试样品分别在-18℃、室温、45℃和-18-45℃交替四个测试条件下测试15d（天）、30d（天）、40d（天），观察各受试样品有无明显变化，无变化为合格，有变化为不合格，测试结果如下表4所示。

表4. 稳定性测试结果

提供对比例1.1，和实施例3相比，该对比例1.1的区别在于：将本发明的丙二醇替换为甘油；结合本发明的制备方法制备成透明质酸注射液，按照实验3的测试方法进行测试。观察对比例1.1制备的透明质酸注射液的安全性，结果同上述对比例1中类似。

提供对比例2.1，和实施例3相比，该对比例2.1的区别在于：将本发明的丙二醇的质量百分比替换为0.05%；结合本发明的制备方法制备成透明质酸注射液，按照实验3的测试方法进行测试。观察对比例2.1制备的透明质酸注射液的安全性，结果同上述对比例2中类似。

提供对比例3.1，和实施例3相比，该对比例3.1的区别在于：将本发明的丙二醇的质量百分比替换为6%；结合本发明的制备方法制备成透明质酸注射液，按照实验3的测试方法进行测试。观察对比例3.1制备的透明质酸注射液的安全性，结果同上述对比例3中类似。

结合本发明的制备方法制备成透明质酸注射液，按照实验3的测试方法进行测试。观察对比例对比例4.1、对比例4.2制备的透明质酸注射液的安全性。结果同上述对比例4中类似。

由以上结果可知：

本发明透明质酸注射液分别在-18℃、室温、45℃和-18-45℃交替四个测试条件下测试15d（天）、30d（天）、40d（天）后，其均无明显变化，测试结果均为合格，即本发明透明质酸注射液具有很好的耐寒性和耐热性，同时能够满足在温度极端变化条件下的使用要求。而未使用本发明配方体系的透明质酸注射液，其在长时间保存条件下的耐寒性较差，同时无法满足温度极端变化条件下的使用要求。

应该理解到披露的本发明不仅仅限于描述的特定的方法、方案和物质，因为这些均可变化。还应理解这里所用的术语仅仅是为了描述特定的实施方式方案的目的，而不是意欲限制本发明的范围，本发明的范围仅受限于所附的权利要求。

本领域的技术人员还将认识到，或者能够确认使用不超过常规实验，在本文中所述的本发明的具体的实施方案的许多等价物。这些等价物也包含在所附的权利要求中。

Claims

1.透明质酸注射液，其中，所述注射液包含透明质酸或透明质酸钠、氨基酸、丙二醇、维生素和矿物质。

2.根据权利要求1所述的注射液，其中，所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、精氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸、缬氨酸、赖氨酸和谷氨酸中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的注射液，其中，所述维生素选自维生素B和维生素C中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的注射液，其中，所述矿物质选自依地酸钙二钠或氯化钙。

5.根据权利要求1所述的注射液，其中，

所述透明质酸或透明质酸钠的质量百分比为0.1-1.5%；

所述氨基酸的质量百分比为0.01-2%；

所述丙二醇的质量百分比为0.1-5%；

所述维生素的质量百分比为0.01-5%；

所述矿物质的质量百分比为0.01-0.5%。

6.根据权利要求1所述的注射液，其中，

所述透明质酸或透明质酸钠与所述维生素的质量比为1.5-10:1；

所述透明质酸或透明质酸钠与所述丙二醇的质量比为0.1-0.5:1。

7.透明质酸注射液，其中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸或透明质酸钠0.1-1.5%、氨基酸0.01-2%、丙二醇0.1-5%、维生素0.01-5%和矿物质0.01-0.5%。

8.根据权利要求7所述的注射液，其中，按照质量百分比，所述注射液包含：透明质酸或透明质酸钠0.5-1.5%、氨基酸0.05-2%、丙二醇2-5%、维生素0.2-5%和矿物质0.01-0.5%。

9.透明质酸注射液，其中，所述注射液包含透明质酸或透明质酸钠、氨基酸、甘露醇和矿物质。

10.权利要求1-8任一项所述的注射液在制备皱纹填充剂中的用途。