CN112273218A - 一种利用营养盐室内培养复合藻的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，所述培养复合藻的方法包括如下步骤：藻池中进行加水后，通过对加入的水进行消毒、解毒及爆氧处理；在藻池中进行加入生长必需的营养盐及微量元素；向藻池中进行接入浓缩的小环藻和波吉卵囊藻藻种，室温培养11d；向藻池中每隔3d添加一次营养盐和微量元素，9d后，停至通气2d,全部微藻沉降于池底，排出上清液，收集藻泥。该方法的有益效果是：利用调节营养盐的方法，在室内培藻池进行卵囊藻与小环藻共生培养，模拟探索用营养元素控制二者平衡生长的规律，为室外大池南美白对虾养殖水质调控提供一定的科学依据，提供了养殖的数据支撑。

Description

一种利用营养盐室内培养复合藻的方法
技术领域
本发明涉及一种培养复合藻的方法，具体为一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，属于水产养殖应用技术领域。
背景技术
近几年，我国对虾养殖业的快速发展，也引发了一系列环境问题，如水体富营养化、养殖环境失衡、虾病频发等，严重限制了我国养殖业的健康可持续发展。其中令养殖户头疼的情况之一就是虾塘水难肥或者肥起来之后藻类迅速倒掉，尝试了多种方法，例如细菌调节水质解决藻类过旺(需要配合增氧剂，化学药品，容易形成优势菌不利于平衡)、药的效果(杀藻，甲醛高锰酸钾、强氯精，硫酸铜和一些禁药，量很难把握，杀有害藻时有益藻也被杀掉不利于藻类和水体生态平衡)、氨基酸肥水膏(肥水是快，但缺点也很明显，后续肥力不持久，需要经常补充，经常施加会产生大量有机质使水体富营养化坏水，一旦肥力不足，更容易倒藻)，效果都不理想，因此，寻求一种比较高效、生态环保、低成本的方法迫在眉睫。
微藻作为养殖水环境中不可或缺的部分，对维持虾塘生态系统的正常运转，稳定虾塘环境具有十分重要的作用。选用优良藻种并将之应用于池塘水环境调控对于水产养殖产业的健康持续发展具有重要意义。单一藻种在一定程度上能维持藻类的稳定，但在养殖中后期容易倒藻。需要进行引进不同藻种，进行优势互补、相互制约与平衡。因此，针对上述问题提出一种利用营养盐室内培养复合藻的方法。
发明内容
为了解决现有技术的不足，本发明提供一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，所述培养复合藻的方法包括如下步骤：
(1)藻池的消毒处理，藻池中进行加水后，通过对加入的水进行消毒、解毒及爆氧处理；
(2)营养盐及微量元素的添加，在藻池中进行加入生长必需的营养盐及微量元素；
(3)藻种的接入，向藻池中进行接入浓缩的小环藻和波吉卵囊藻藻种，室温培养11d；
(4)营养物质的追加，向藻池中每隔3d添加一次营养盐和微量元素，9d后，停至通气2d,全部微藻沉降于池底，排出上清液，收集藻泥。
进一步地，所述步骤(1)中进行消毒和通气爆氧，在进行通气时水体的流水速度为0.3～0.5m/s，通气30min后停止充气。
进一步地，所述步骤(1)中进行消毒和通气爆氧，每立方米的水体中漂粉精用量为30g，漂粉精中有效含氯量为50％。
进一步地，所述步骤(1)中在进行通气爆氧处理，停气12h后，每立方米海水用硫代硫酸钠15g中和。
进一步地，所述步骤(2)中进行营养盐及微量元素的添加时，每立方米水体施加80g尿素、8g磷酸二氢钾、5～8克硅酸钠、0.2g维生素B12、0.2mg维生素B1和柠檬酸铁0.5～1克。
进一步地，所述步骤(3)中藻种的接入时，接入卵囊藻浓缩液细胞密度为3.0×105cells/mL，小环藻的浓缩液细胞密度为1.5×105cells/mL。
进一步地，所述步骤(3)中藻种的接入时，每立方米中接入卵囊藻浓缩液的用量为10～40L。
进一步地，所述步骤(3)中藻种的接入时，每立方米中接入小环藻浓缩液的用量为10L。
进一步地，所述步骤(3)中藻种的接入后，每隔1d取样于显微镜下观察计数，同时进行记录。
进一步地，所述步骤(4)中营养物质的追加的具体操作为，第一次追加营养物时立方水体添加的下列重量的组分为：尿素20～80g、磷酸二氢钾2～8g及硅酸钠1.25～8g、维生素B120.05～0.2g、维生素B10.05～0.2mg和柠檬酸铁为0.12～1g，第二次和第三次追加营养物时立方水体添加的下列重量的组分均为：尿素10～40g、磷酸二氢钾1～4g及硅酸钠0.6～4g、维生素B120.02～0.1g、维生素B10.02～0.1mg和柠檬酸铁为0.06～0.5g。
本发明的有益效果是：
本发明在单一藻种的基础之上，引入小环藻，结合两种藻类的生长特点，即卵囊藻能更好的吸收氨氮、亚盐，小环藻为虾提供更多氧气和营养，二者优势互补、相互制约与平衡；利用调节营养盐的方法，在室内培藻池进行卵囊藻与小环藻共生培养，模拟探索用营养元素控制二者平衡生长的规律，为室外大池南美白对虾养殖水质调控提供一定的科学依据。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
图1为本发明的方法流程图；
图2为本发明实施例一中每隔3d营养物质的追加量示意图；
图3为本发明实施例一中藻类细胞密度示意图；
图4为本发明实施例二中藻类细胞密度随时间变化示意图；
图5为本发明实施例三中藻类细胞密度随时间变化示意图；
图6为本发明实施例四中藻类细胞密度随时间变化示意图。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明方案，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分的实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
需要说明的是，本发明的说明书和权利要求书及上述附图中的术语“第一”、“第二”等是用于区别类似的对象，而不必用于描述特定的顺序或先后次序。应该理解这样使用的数据在适当情况下可以互换，以便这里描述的本发明的实施例。此外，术语“包括”和“具有”以及他们的任何变形，意图在于覆盖不排他的包含，例如，包含了一系列步骤或单元的过程、方法、系统、产品或设备不必限于清楚地列出的那些步骤或单元，而是可包括没有清楚地列出的或对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤或单元。
在本发明中，术语“上”、“下”、“左”、“右”、“前”、“后”、“顶”、“底”、“内”、“外”、“中”、“竖直”、“水平”、“横向”、“纵向”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系。这些术语主要是为了更好地描述本发明及其实施例，并非用于限定所指示的装置、元件或组成部分必须具有特定方位，或以特定方位进行构造和操作。
并且，上述部分术语除了可以用于表示方位或位置关系以外，还可能用于表示其他含义，例如术语“上”在某些情况下也可能用于表示某种依附关系或连接关系。对于本领域普通技术人员而言，可以根据具体情况理解这些术语在本发明中的具体含义。
此外，术语“安装”、“设置”、“设有”、“连接”、“相连”、“套接”应做广义理解。例如，可以是固定连接，可拆卸连接，或整体式构造；可以是机械连接，或电连接；可以是直接相连，或者是通过中间媒介间接相连，又或者是两个装置、元件或组成部分之间内部的连通。对于本领域普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。
实施例一：
一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，所述培养复合藻的方法包括如下步骤：
(1)对规格2m3室内PVC桶清洁消毒后，加入过滤海水1.5m3，用有效氯为50％的漂粉精45g，对水体进行消毒12h。
(2)再用22.5g硫代硫酸钠中和，充气24h左右，测定无余氯即可使用。
(3)加入120g尿素、12g磷酸二氢钾、10g硅酸钠、0.3g维生素B12、0.3mg维生素B1和柠檬酸铁1g。
(4)分别接入15L卵囊藻和小环藻浓缩液：实验组卵囊藻和小环藻细胞密度为1.3×105cells/mL和小环藻的浓缩液细胞密度为2.6×105cells/mL；对照组卵囊藻细胞密度为1.3×105cells/mL和小环藻细胞密度为1.3×105cells/mL。
(5)以0.7vvm的通气速度通入空气悬浮微藻。
(6)营养物质追加量如图2所示，同时建立对照组。
(7)室温培养至11d后，取样显微镜观察计数卵囊藻和小环藻细胞。
(8)室温培养至11d后卵囊藻和小环藻细胞细胞密度如图3所示。
综上所述，最适营养物质追加量为第3d追加60g尿素、6g磷酸二氢钾、硅酸钠5g、0.15g维生素B12、0.1.5mg维生素B1和柠檬酸铁0.5g；第6d和第9d分别追加30g尿素、3g磷酸二氢钾、硅酸钠2.5g、0.075g维生素B12、0.075mg维生素B1和柠檬酸铁0.25g。
实施例二：
一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，所述培养复合藻的方法包括如下步骤：
(1)对规格2m3室内PVC桶清洁消毒后，加入过滤海水1.5m3，用有效氯为50％的漂粉精45g，对水体进行消毒12h。
(2)再用22.5g硫代硫酸钠中和，充气24h左右，测定无余氯即可使用。
(3)加入120g尿素、12g磷酸二氢钾、10g硅酸钠，0.3g维生素B12、0.3mg维生素B1和柠檬酸铁1g。
(4)分别接入15L卵囊藻和小环藻浓缩液：实验组的卵囊藻和小环藻细胞密度分别为1.3×105cells/mL和1.3×105cells/mL；对照组A卵囊藻细胞密度为1.3×105cells/mL和小环藻细胞密度为1.3×105cells/mL，卵囊藻与小环藻接种比例为1：1。
(5)以0.7vvm的通气速度通入空气悬浮微藻。
(6)第3d追加60g尿素、6g磷酸二氢钾、硅酸钠5g，0.15g维生素B12、0.1.5mg维生素B1和柠檬酸铁0.5g；第6d和第9d分别追加30g尿素、3g磷酸二氢钾、硅酸钠2.5g、0.075g维生素B12、0.075mg维生素B1和柠檬酸铁0.25g。
(7)室温培养至11d。每隔2d取样显微镜观察计数。
(8)细胞生长情况如图4所示。
综上所示，小环藻的生长速度与对照组的相差不多，最高可得到小环藻细胞密度为130.06×103cells/mL；卵囊藻的生长速度明显比对照组低，最低可得到卵囊藻60.09×103cells/mL。当卵囊藻和小环藻的接种比例为1：1时，小环藻生长速度正常，相比之下，卵囊藻生长速度得到抑制。
实施例三：
一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，所述培养复合藻的方法包括如下步骤：
(1)对规格2m3室内PVC桶清洁消毒后，加入过滤海水1.5m3，用有效氯为50％的漂粉精45g，对水体进行消毒12h。
(2)再用22.5g硫代硫酸钠中和，充气24h左右，测定无余氯即可使用。
(3)加入120g尿素、12g磷酸二氢钾、10g硅酸钠、0.3g维生素B12、0.3mg维生素B1和柠檬酸铁1g。
(4)分别接入15L卵囊藻和小环藻浓缩液：实验组卵囊藻和小环藻细胞密度为2.6×105cells/mL和小环藻的浓缩液细胞密度为1.3×105cells/mL；对照组卵囊藻细胞密度为2.6×105cells/mL和小环藻细胞密度为1.3×105cells/mL，卵囊藻和小环藻接种比例为2：1。
(5)以0.7vvm的通气速度通入空气悬浮微藻。
(6)第3d追加60g尿素、6g磷酸二氢钾、硅酸钠5g、0.15g维生素B12、0.1.5mg维生素B1和柠檬酸铁0.5g；第6d和第9d分别追加30g尿素、3g磷酸二氢钾、硅酸钠2.5g、0.075g维生素B12、0.075mg维生素B1和柠檬酸铁0.25g。
(7)室温培养至11d。每隔2d取样显微镜观察计数。
(8)细胞生长情况如图5所示。
综上所述，当卵囊藻和小环藻接种比例为2：1时，实验组的小环藻和卵囊藻的生长速度与对照组的基本一致。
实施例四：
一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，所述培养复合藻的方法包括如下步骤：
(1)对规格2m3室内PVC桶清洁消毒后，加入过滤海水1.5m3，用有效氯为50％的漂粉精45g，对水体进行消毒12h。
(2)再用22.5g硫代硫酸钠中和，充气24h左右，测定无余氯即可使用。
(3)加入120g尿素、12g磷酸二氢钾、10g硅酸钠，0.3g维生素B12、0.3mg维生素B1和柠檬酸铁1g。
(4)分别接入15L卵囊藻和小环藻浓缩液：实验组卵囊藻和小环藻的浓缩液细胞密度分别为4.2×105cells/mL和1.4×105cells/mL；对照组A的卵囊藻的浓缩液细胞密度分别为4.2×105cells/mL,对照组B的小环藻的浓缩液细胞密度为1.4×105cells/mL，卵囊藻和小环藻接种比例为3：1。
(5)以0.7vvm的通气速度通入空气悬浮微藻。
(6)第3d追加60g尿素、6g磷酸二氢钾、硅酸钠5g、0.15g维生素B12、0.1.5mg维生素B1和柠檬酸铁0.5g；第6d和第9d分别追加30g尿素、3g磷酸二氢钾、硅酸钠2.5g、0.075g维生素B12、0.075mg维生素B1和柠檬酸铁0.25g。
(7)室温培养至11d。每隔2d取样显微镜观察计数。
(8)细胞生长情况如图6所示。
综上所述，当卵囊藻和小环藻接种比例为3：1时，实验组的小环藻生长速度明显低于对照组，卵囊藻的生长速度与对照组的基本一致。
本发明的有益效果是：
本发明在单一藻种的基础之上，引入小环藻，结合两种藻类的生长特点，即卵囊藻能更好的吸收氨氮、亚盐，小环藻为虾提供更多氧气和营养，二者优势互补、相互制约与平衡；利用调节营养盐的方法，在室内培藻池进行卵囊藻与小环藻共生培养，模拟探索用营养元素控制二者平衡生长的规律，为室外大池南美白对虾养殖水质调控提供一定的科学依据。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，其特征在于：所述培养复合藻的方法包括如下步骤：
(1)藻池的消毒处理，藻池中进行加水后，通过对加入的水进行消毒、解毒及爆氧处理；
(2)营养盐及微量元素的添加，在藻池中进行加入生长必需的营养盐及微量元素；
(3)藻种的接入，向藻池中进行接入浓缩的小环藻和波吉卵囊藻藻种，室温培养11d；
(4)营养物质的追加，向藻池中每隔3d添加一次营养盐和微量元素，9d后，停至通气2d,全部微藻沉降于池底，排出上清液，收集藻泥。
2.根据权利要求1所述的一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，其特征在于：所述步骤(1)中进行消毒和通气爆氧，在进行通气时水体的流水速度为0.3～0.5m/s，通气30min后停止充气。
3.根据权利要求1所述的一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，其特征在于：所述步骤(1)中进行消毒和通气爆氧，每立方米的水体中漂粉精用量为30g，漂粉精中有效含氯量为50％。
4.根据权利要求1所述的一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，其特征在于：所述步骤(1)中在进行通气爆氧处理，停气12h后，每立方米海水用硫代硫酸钠15g中和。
5.根据权利要求1所述的一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，其特征在于：所述步骤(2)中进行营养盐及微量元素的添加时，每立方米水体施加80g尿素、8g磷酸二氢钾、5～8克硅酸钠、0.2g维生素B12、0.2mg维生素B1和柠檬酸铁0.5～1克。
6.根据权利要求1所述的一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，其特征在于：所述步骤(3)中藻种的接入时，接入卵囊藻浓缩液细胞密度为3.0×105cells/mL，小环藻的浓缩液细胞密度为1.5×105cel ls/mL。
7.根据权利要求1所述的一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，其特征在于：所述步骤(3)中藻种的接入时，每立方米中接入卵囊藻浓缩液的用量为10～40L。
8.根据权利要求1所述的一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，其特征在于：所述步骤(3)中藻种的接入时，每立方米中接入小环藻浓缩液的用量为10L。
9.根据权利要求1所述的一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，其特征在于：所述步骤(3)中藻种的接入后，每隔1d取样于显微镜下观察计数，同时进行记录。
10.根据权利要求1所述的一种利用营养盐室内培养复合藻的方法，其特征在于：所述步骤(4)中营养物质的追加的具体操作为，第一次追加营养物时立方水体添加的下列重量的组分为：尿素20～80g、磷酸二氢钾2～8g及硅酸钠1.25～8g、维生素B120.05～0.2g、维生素B10.05～0.2mg和柠檬酸铁为0.12～1g，第二次和第三次追加营养物时立方水体添加的下列重量的组分均为：尿素10～40g、磷酸二氢钾1～4g及硅酸钠0.6～4g、维生素B120.02～0.1g、维生素B10.02～0.1mg和柠檬酸铁为0.06～0.5g。
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