CN112180101A - 一种用于检测ace2受体丰度的试剂盒及检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用于检测ACE2受体丰度的试剂盒,试剂盒至少包括载有ACE2抗体的至少一个微孔载体板、酶标二抗溶液和底物显色液,在微孔载体板接触尿液蛋白样本的情况下,尿液蛋白样本中的ACE2与ACE2抗体进行第一次孵育,在第一次孵育的微孔载体板中加入酶标二抗溶液的情况下,酶标二抗与ACE2抗体进行第二次孵育,底物显色液与第二次孵育后的微孔载体板中的酶进行第三反应并催化为有色产物,基于有色产物溶液的颜色深度指数和/或有色产物溶液对指定波长的吸光值确定对应的尿液蛋白样本中ACE2受体丰度。本发明可根据有色产物的呈色深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
Description
技术领域
本发明涉及医疗检测技术领域,尤其涉及一种用于检测ACE2受体丰度的试剂盒及检测方法。
背景技术
新型冠状病毒感染的常规检测方法是通过实时荧光RT-PCR鉴定。任何新型冠状病毒的检测都必须在具备适当条件的实验室由经过相关技术安全培训的人员进行操作。在实验室要确认一个病例为阳性,满足以下条件:同一份标本中新型冠状病毒2个靶标(ORF1ab、N)特异性实时荧光RT-PCR检测结果均为阳性。阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染,需要排除可能产生假阴性的因素,包括:样本质量差,比如口咽等部位的呼吸道样本;样本收集的过早或过晚;没有正确的保存、运输和处理样本;技术本身存在的原因,如病毒变异、PCR抑制等。
ACE2是新冠病毒的受体,然而组织中ACE2的表达与新冠病毒的流行病学特征并不相符,且目前也没有文献表明尿液中的ACE2与新冠易感性有直接必然联系。因此,通过检测尿液中的ACE2来筛查易感人群,对保护易感人群,阻断病毒传播途径,减轻疫情具有重要意义。
现有技术中只能利用ACE2受体丰度来检测新冠病毒。例如,中国专利CN111273016A公开了一种基于S蛋白配体与ACE2受体竞争法层析的冠状病毒快速检测试剂盒,包括量子点标记的ACE2蛋白、量子点标记的兔IgG、重组冠状病毒棘突蛋白S1、羊抗兔IgG的多抗、以及免疫层析试纸条等材料。本发明通过量子点荧光标记和多级偶联放大信号提高检测灵敏度、利用配体与受体结合原理提高检测特异性并避开抗体研发周期,提供一种能够快速检测冠状病毒的试剂盒,通过建立病毒灭活系统保障检测过程中的生物安全性。
例如,中国专利CN111337667A公开了一种快速检测新型冠状病毒检测试剂盒及检测方法,包括装在铝箔袋中的一组检测试纸、阳性对照、检测结果记录卡和说明书,快速检测新型冠状病毒检测试纸由底板、样品区、反应区、封闭用乳胶、显色层和吸水区组成,样品垫和吸水垫分别设置于底板上且位于底板上相对的两侧,样品垫为吸滤纸或玻璃纤维膜,用于承载待检测物;底板上固定有硝酸纤维膜,吸水垫为吸水纸;通过ACE2、CHOP双蛋白,采用“双酶联免疫吸附”来特异性捕捉结合冠状病毒蛋白抗原;再通过试纸反应区中CHOP反应元件与生物素联合,亲和素连接辣根过氧化物酶,经过生物素亲和素系统,通过化学显色,可快速判断检测结果,也可以利用酶标仪精准检测病毒含量。
如上所述,如何用试剂盒来直接地、快速检测ACE2受体丰度,现有技术还无法实现。现有技术依然需要抽血从血液中检测ACE2受体丰度。抽血存在操作速度慢、存在针孔创伤、存在交叉感染风险的缺点。不仅如此,仅通过质谱仪等设备来采集分析ACE2受体丰度数据,速度慢,难以对群众进行快速的ACE2受体丰度检测。
此外,一方面由于对本领域技术人员的理解存在差异;另一方面由于发明人做出本发明时研究了大量文献和专利,但篇幅所限并未详细罗列所有的细节与内容,然而这绝非本发明不具备这些现有技术的特征,相反本发明已经具备现有技术的所有特征,而且申请人保留在背景技术中增加相关现有技术之权利。
发明内容
针对现有技术之不足,本发明提供一种用于检测ACE2受体丰度的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒基于尿液蛋白样本检测ACE2受体丰度。
本发明还提供一种用于检测ACE2受体丰度的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒至少包括载有ACE2抗体的至少一个微孔载体板、酶标二抗溶液和底物显色液,其中,在所述微孔载体板接触尿液蛋白样本的情况下,尿液蛋白样本中的ACE2与所述ACE2抗体进行第一次孵育,
在发生所述第一次孵育的微孔载体板中加入酶标二抗溶液的情况下,酶标二抗与所述ACE2抗体进行第二次孵育,所述底物显色液与发生第二次孵育后的微孔载体板中的酶进行催化反应并催化为有色产物,基于有色产物溶液的颜色深度指数和/或有色产物溶液对指定波长的吸光值确定对应的所述尿液蛋白样本中ACE2受体丰度。
优选的,所述试剂盒还包括终止液,在所述催化反应达到指定时间范围时,加入所述终止液终止催化反应以稳定所述有色产物的数量和/或有色产物溶液的颜色深度。
优选的,建立有色产物在指定波长的吸光值与ACE2受体丰度参考范围的关联关系,在所述催化反应终止后,基于检测的有色产物在指定波长的吸光值和与其关联的ACE2受体丰度参考范围确定尿液蛋白样本的ACE2受体丰度。
优选的,所述底物显色液与所述酶标二抗的加入量为等体积。
优选的,所述酶标二抗为辣根过氧化物酶标记的新冠病毒IgG抗体,所述酶标二抗溶液的浓度范围为1:10000~1:100000。
优选的,在所述第一次孵育和/或所述第二次孵育完成后,微孔载体板的微孔通过抗体稀释液清洗至少一次。
本发明提供一种检测ACE2受体丰度的方法,其特征在于,所述方法至少包括:
将尿液蛋白样本加入微孔载体板,基于尿液蛋白样本检测ACE2受体丰度。
本发明还提供了一种检测ACE2受体丰度的方法,其特征在于,所述方法至少包括:
将尿液蛋白样本加入载有ACE2抗体的微孔载体板的至少一个微孔中,尿液蛋白样本中的ACE2与所述ACE2抗体以第一温度进行第一次孵育;
向第一次孵育后的微孔载体板中加入酶标二抗溶液,使酶标二抗与所述ACE2抗体在指定时间内以第二温度进行第二次孵育,
向第二次孵育后的微孔载体板中加入底物显色液,在催化反应中底物催化为有色产物,
基于有色产物溶液的颜色深度指数和/或有色产物溶液对指定波长的吸光值确定对应的所述尿液蛋白样本中ACE2受体丰度。
优选的,所述方法还包括:
在所述第一次孵育完成后,采用抗体稀释液清洗微孔载体板至少一次,和/或
在所述第二次孵育完成后,采用抗体稀释液清洗微孔载体板至少一次。
优选的,所述催化反应在避光的室温环境进行,反应时间为10~15min。
优选的,所述方法还包括:
建立有色产物在指定波长的吸光值与ACE2受体丰度参考范围的关联关系,
在加入终止液后,基于检测的有色产物在指定波长的吸光值和与其关联的ACE2受体丰度参考范围确定尿液蛋白样本的ACE2受体丰度。
本发明提供一种用于检测ACE2受体丰度的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒至少包括载有ACE2抗体的至少一个微孔载体板、酶标二抗溶液和底物显色液,其中,
所述微孔载体板用于接触尿液蛋白样本和/或进行第一次孵育,
所述酶标二抗溶液用于加入第一次孵育后的微孔载体板中,进行第二次孵育,
所述底物显色液用于加入经过第二次孵育后的微孔载体板中。
本发明提供的用于检测ACE2受体丰度的试剂盒和方法至少具有如下有益技术效果:
1、相对于传统的抽取血液作为蛋白样本,本发明提供的方法是基于尿液等体液作为样本来源,具有无创、易获得、可多次采样的优点。
2、本发明的ACE2受体丰度检测盒,获得的检测盒可以对新冠的易感性进行预测,具有更高的准确性和效率。
附图说明
图1是本发明一种优选的ACE2受体丰度的检测方法的流程示意图。
具体实施方式
实施例1
本发明提供一种用于检测ACE2受体丰度的试剂盒,至少包括载有ACE2抗体的至少一个微孔载体板、酶标二抗溶液和底物显色液。
微孔载体板的数量不限,可以是一个,也可以多于一个。微孔载体板可以是可拆卸的拼接条形板,也可以是一体式的板。微孔载体板设置有若干微孔,微孔的内表面载有ACE2抗体。微孔载体板优选聚苯乙烯,也可以是其他具有同等功能的材料。
在微孔载体板接触尿液蛋白样本的情况下,即将尿液蛋白样本加入微孔载体板中的微孔内,尿液蛋白样本中的ACE2与微孔内表面的ACE2抗体进行第一孵化反应,即进行第一次孵育。第一反应物结合在微孔的内表面上。
优选的,在第一孵化孵育完成后,采用抗体稀释液清洗微孔载体板至少一次。优选的,采用抗体稀释液清洗微孔载体板的微孔2~3次。
在发生第一次孵育的微孔载体板中加入酶标二抗溶液的情况下,酶标二抗与ACE2抗体进行第二孵化反应,即进行第二次孵育。第二次孵育的第二反应物结合在微孔的内表面上。此时,微孔载体板上微孔内的酶量与尿液蛋白样本中ACE2的量呈一定的比例。例如:酶量与尿液蛋白样本中ACE2的量的比例为1:2000~1:100000。
优选的,酶标二抗为辣根过氧化物酶标记的新冠病毒IgG抗体。酶标二抗溶液的浓度范围为1:10000~1:100000。
优选的,在第二孵育完成后,采用抗体稀释液清洗微孔载体板至少一次。优选的,采用抗体稀释液清洗微孔载体板的微孔2~3次。
在第二孵育完成后的微孔载体板的微孔中加入能够与酶发生催化反应的底物显色液。底物与酶进行催化反应并被催化为有色产物。有色产物的量与尿液蛋白样本中ACE2的受体丰度量直接相关。有色产物越多,ACE2的受体丰度越高。优选的,催化反应在避光的室温环境进行,反应时间不限,能够使得有色产物充分催化即可。优选的,催化反应的反应时间为10~15min,有利于有色产物的充分催化。
优选的,底物显色液与酶标二抗的加入量为等体积。在反应充分的同时,兼顾微孔板的体积限制。
在完成催化反应后,基于有色产物溶液的颜色深度指数和/或有色产物溶液对指定波长的吸光值确定对应的尿液蛋白样本中ACE2受体丰度。例如,第一,通过有色产物溶液的颜色深度指数确定与颜色深度对应的ACE2受体丰度。第二,通过有色产物溶液对指定波长的吸光值确定对应的尿液蛋白样本中ACE2受体丰度。或者,既观察有色产物溶液的颜色深度、又采集有色产物溶液对指定波长的吸光值,分别得到两个ACE2受体丰度。将两个ACE2受体丰度进行对比或者对照,以避免得到的ACE2受体丰度出现偏差。若两个ACE2受体丰度相差小于误差阈值,则ACE2受体丰度的准确。
优选的,试剂盒还包括终止液。终止液为硫酸溶液。终止液是一种阻止(生化试剂)化学反应继续进行的一种试剂。催化反应由于底物和残留酶标液作用,催化反应还在继续进行中,会影响检测结果数值,就需要加入终止液。在催化反应达到指定时间范围时,加入终止液终止催化反应以稳定有色产物的数量和/或有色产物溶液的颜色深度。加入终止液有利于得到稳定的有色产物溶液的颜色,在检测时减少有色产物的颜色变化ACE2受体丰度值。
优选的,建立有色产物在指定波长的吸光值与ACE2受体丰度参考范围的关联关系。即每一个吸光值存在对应的ACE2受体丰度参考范围。优选的,指定波长为450nm。
在催化反应终止后,基于检测的有色产物在指定波长的吸光值和与其关联的ACE2受体丰度参考范围确定尿液蛋白样本的ACE2受体丰度。
本发明提供的用于检测ACE2受体丰度的试剂盒是基于尿液等体液作为样本来源,具有无创、易获得、可多次采样的优点。获得的试剂盒可以对新冠病毒的易感性进行预测,具有更高的准确性和效率。
实施例2
本发明还提供了一种检测ACE2受体丰度的方法,如图1所示,方法至少包括:
S1:将尿液蛋白样本加入载有ACE2抗体的微孔载体板的至少一个微孔中。尿液蛋白样本中的ACE2与ACE2抗体以第一温度在微孔内表面进行第一次孵育。其中,每个微孔加入100μl的尿液蛋白样本。
第一次孵育的反应时间为0.1~3小时。优选的,第一次孵育的反应时间为0.5~2小时。最佳地,第一次孵育的反应时间为1小时。
第一次孵育的第一温度范围为35~37℃。第一温度范围优选为37℃,在该温度下,第一次孵育的反应效率较高,抗体与抗原的结合状态最佳。
优选的,在第一次孵育完成后,采用抗体稀释液清洗微孔载体板的微孔内表面至少一次。抗体稀释液清洗优选为2~3次,能够减少假阳性。清洗次数不是越多越好,浪费时间也不会获得更好的效果。
S2:向第一次孵育后的微孔载体板中加入酶标二抗溶液,使酶标二抗与ACE2抗体在指定时间内以第二温度进行第二次孵育。
例如,完成第一次孵育后,每个微孔加入稀释的酶标二抗100μl。优选的,酶标二抗为辣根过氧化物酶标记的新冠病毒IgG抗体。酶标二抗溶液的浓度范围为1:10000~1:100000。
优选的,在第二次孵育完成后,采用抗体稀释液清洗微孔载体板至少一次。优选的,采用抗体稀释液清洗微孔载体板的微孔2~3次。
第二温度范围为35~37℃。第二温度范围优选为37℃,在该温度下,第二次孵育的反应效率较高,结合状态最佳。
S3:向第二次孵育后的微孔载体板的每个微孔加入底物显色液,在催化反应中底物催化为有色产物。
例如,每个微孔加入底物显色液50μl,在室温避光反应10~15min,使得底物被酶充分催化为有色产物。
S4:基于有色产物溶液的颜色深度指数和/或有色产物溶液对指定波长的吸光值确定对应的尿液蛋白样本中ACE2受体丰度。优选的,指定波长为450nm。
例如,第一,通过有色产物溶液的颜色深度指数确定与颜色深度对应的ACE2受体丰度。第二,通过有色产物溶液对指定波长的吸光值确定对应的尿液蛋白样本中ACE2受体丰度。或者,既观察有色产物溶液的颜色深度、又采集有色产物溶液对指定波长的吸光值,分别得到两个ACE2受体丰度。将两个ACE2受体丰度进行对比或者对照,以避免得到的ACE2受体丰度出现偏差。若两个ACE2受体丰度相差小于误差阈值,则ACE2受体丰度准确。
优选的,本发明的检测ACE2受体丰度的方法还包括:
建立有色产物在指定波长的吸光值与ACE2受体丰度参考范围的关联关系。在加入终止液后,基于检测的有色产物在指定波长的吸光值和与其关联的ACE2受体丰度参考范围确定尿液蛋白样本的ACE2受体丰度。
例如,向每个微孔加入50μl终止液终止反应。酶标仪检测450nm吸光值与检测盒的ACE2的受体丰度正常参考范围进行比较,即得出检测结果。
通过本发明的ACE2的受体丰度的检测方法,可以实现无创检测,并且容易实现多次采样和措辞实施的优点。不仅如此,本发明通过大量样本的有色产物的颜色深浅程度与ACE2受体丰度的对应关系建立对应表,从而根据颜色深浅程度能够快速判断对应的ACE2受体丰度的参考范围。本发明还能够通过有色产物在指定波长的吸光值与ACE2受体丰度的对应关系建立对应表,从而根据吸光值能够快速判断对应的ACE2受体丰度的参考范围,实现相互校准和参照,更有利于本发明的检测准确性。
本发明中,尿液蛋白样本的制作方法为:
S11:将尿液样本在4℃-常温条件下高速离心一段时间,弃去上清液,保留第一沉淀。
S12:向沉淀中加入适量的重悬缓冲液使沉淀重悬,并向所得的重悬液中加入能打开二硫键的还原剂或氧化剂,在37~80℃温度下加热10~60分钟。
S13:向加热后所得的溶液中添加清洗缓冲液,然后高速离心一段时间,弃去上清,保留第二沉淀,并用检测缓冲液溶解,得到尿液蛋白样本。
上述的尿液蛋白样本制作过程中所涉及的重悬缓冲液为:包括浓度在10~100mM能提供缓冲范围在pH7.0~8.5的任何缓冲盐溶液以及50~500mM的蔗糖、葡聚糖或海藻糖等能提供合适渗透压的物质。
清洗缓冲液:包括浓度在10~100mM能提供缓冲范围在pH6.5~8.0的任何缓冲盐溶液以及50~300mM的盐溶液。
检测缓冲液:包括浓度在10~100mM能提供缓冲范围在pH7.0~8.5的碳酸氢铵或磷酸盐缓冲液。
实施例3
在通过试剂盒检测得到尿液蛋白样本中的ACE2受体丰度后,能够根据ACE2受体丰度与SARS-CoV-2感染风险的关联关系来确定个体的SARS-CoV-2感染风险,以及预测个体的新冠病毒重症风险。
通过对成年人和健康儿童的尿液样本进行检测和ACE2蛋白含量测量。对1925名健康成年人和284名儿童的尿液蛋白质组进行了ACE2受体丰度检测。ACE2在尿液中的浓度与流行病学调查的群体易感性和死亡率结果一致。长期的监测结果显示:个体的尿液ACE2蛋白保持相对稳定,但不同的群体有不同的分布范围。其中,根据年龄的不同,尿液ACE2蛋白质含量表现出显著差异。将检测结果和COVID-19流行病学数据进行结合对比,儿童感染风险较低,成年男性死亡风险率较高。根据对相关人群的检测数据进行分析,可以推导出健康人群的ACE2受体丰度的参考区间(RI,2.5%-97.5%)。ACE2受体丰度高于健康人群的参考区间,新冠病毒易感性风险较高。
例如,大多数儿童的尿液ACE2是低于检测线的,但也有儿童个体其ACE2会超出健康成人的97.5%分布值,预示感染的风险较高。这与流行病学学数据完全一致。
本发明基于ACE2受体丰度与健康状况的对应关系建立风险预估模型,用于对新冠病毒的易感性进行预测,具有更高的准确性和效率。在检测人群中,可以发现39个ACE2水平高于RI的97.5%的人中,存在32人的健康检查报告中存在血压、尿酸、空腹血糖和甘油三酯异常情况。健康状况异常的人,免疫力更低,更容易感染新冠病毒。
通过查询现有体检数据库4982名确诊患者的尿液ACE2结果,存在肺炎、癌症(胃癌、胰腺癌)、肺、直肠、肝脏、肾脏、结肠、前列腺、糖尿病。高血压、心脏病和肾炎、椎间盘突出、胆结石、静脉曲张和膀胱疾病等健康问题的患者的尿液中的ACE2水平普遍较高,高于97.5%。患有这些疾病的人更脆弱,存在更大感染的可能性。因此,对该体检数据库的查询验证了本发明的风险预估模型的正确性。
由于ACE2在成年男性中表达量高,并且ACE2是新冠病毒的受体,结合成年男性死亡风险率较高的特征,通过统计得到ACE2受体丰度与成年男性的死亡风险存在正相关的关联关系。
因此,将样本人群中的死亡风险概率与ACE2的受体丰度分布范围建立关联关系,从而建立重症风险筛查模型。其中,ACE2丰度分布范围能够用于预测新冠病毒重症风险。在ACE2丰度超出健康范围对应的分布区间的情况下,ACE2受体丰度越高,新冠病毒重症风险越高。
优选的,本发明通过单一个体的ACE2丰度的变化能够监测个体的SARS-CoV-2易感性的变化,从而对个体的健康状况发出提醒和预测。
例如,在一项年龄在11到83的80人的健康监测纵向研究中,从每个人收集到的多个尿液样本中,女性的ACE2的RI是0.21到17.36,男性的ACE2的RI是0.05到7.65,个体的ACE2的差异指数小于93.8%。因此,一段时间内的单一个体的ACE2差异可以作为一个合适的生物标准。
不仅如此,该份数据还显示出孕妇的ACE2持续表现出较高的水平,相对于正常状态,孕妇和产妇的尿液ACE2表达量平均高于同龄女性10倍。这些数据表明,孕妇和临产妇女可能更容易感染SARS-CoV-2及相关并发症。因此,本发明同样能够对于孕妇的SARS-CoV-2易感性进行监测。
本发明通过检测尿液中的ACE2受体丰度,能够对SARS-CoV-2感染及其相关并发症的风险进行预测和判定,从而方便对ACE2水平超过97.5%的人进行筛查和密切关注。
需要注意的是,上述具体实施例是示例性的,本领域技术人员可以在本发明公开内容的启发下想出各种解决方案,而这些解决方案也都属于本发明的公开范围并落入本发明的保护范围之内。本领域技术人员应该明白,本发明说明书为说明性而并非构成对权利要求的限制。本发明的保护范围由权利要求及其等同物限定。
Claims (10)
1.一种用于检测ACE2受体丰度的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒基于尿液蛋白样本检测ACE2受体丰度。
2.根据权利要求1所述的用于检测ACE2受体丰度的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒至少包括载有ACE2抗体的至少一个微孔载体板、酶标二抗溶液和底物显色液,其中,
在所述微孔载体板接触尿液蛋白样本的情况下,尿液蛋白样本中的ACE2与所述ACE2抗体进行第一次孵育,
在第一次孵育的微孔载体板中加入酶标二抗溶液的情况下,酶标二抗与所述ACE2抗体进行第二次孵育,
所述底物显色液与第二次孵育后的微孔载体板中的酶进行催化反应并催化为有色产物,
基于有色产物溶液的颜色深度指数和/或有色产物溶液对指定波长的吸光值确定对应的所述尿液蛋白样本中ACE2受体丰度。
3.根据权利要求2所述的用于检测ACE2受体丰度的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括终止液,
在所述催化反应达到指定时间范围时,所述终止液用于终止催化反应以稳定所述有色产物的数量和/或有色产物溶液的颜色深度。
4.根据权利要求3所述的用于检测ACE2受体丰度的试剂盒,其特征在于,建立有色产物在指定波长的吸光值与ACE2受体丰度参考范围的关联关系,
在所述催化反应终止后,基于检测的有色产物在指定波长的吸光值和与其关联的ACE2受体丰度参考范围确定尿液蛋白样本的ACE2受体丰度。
5.根据权利要求4所述的用于检测ACE2受体丰度的试剂盒,其特征在于,在所述第一次孵育和/或所述第二次孵育完成后,微孔载体板的微孔通过抗体稀释液清洗至少一次。
6.一种用于检测ACE2受体丰度的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒至少包括载有ACE2抗体的至少一个微孔载体板、酶标二抗溶液和底物显色液,其中,
所述微孔载体板用于接触尿液蛋白样本和/或进行第一次孵育,
所述酶标二抗溶液用于加入第一次孵育后的微孔载体板中,进行第二次孵育,
所述底物显色液用于加入经过第二次孵育后的微孔载体板中。
7.一种检测ACE2受体丰度的方法,其特征在于,所述方法至少包括:
将尿液蛋白样本加入微孔载体板,
基于尿液蛋白样本检测ACE2受体丰度。
8.根据权利要求7所述的检测ACE2受体丰度的方法,其特征在于,所述方法包括:
将尿液蛋白样本加入载有ACE2抗体的微孔载体板的至少一个微孔中,尿液蛋白样本中的ACE2与所述ACE2抗体以第一温度进行第一次孵育;
向第一次孵育后的微孔载体板中加入酶标二抗溶液,使酶标二抗与所述ACE2抗体在指定时间内以第二温度进行第二次孵育,
向第二次孵育后的微孔载体板中加入底物显色液,在催化反应中底物催化为有色产物,
基于有色产物溶液的颜色深度指数和/或有色产物溶液对指定波长的吸光值确定对应的所述尿液蛋白样本中ACE2受体丰度。
9.根据权利要求8所述的检测ACE2受体丰度的方法,其特征在于,所述方法还包括:
在所述第一次孵育完成后,采用抗体稀释液清洗微孔载体板至少一次,和/或
在所述第二次孵育完成后,采用抗体稀释液清洗微孔载体板至少一次。
10.根据权利要求9所述的检测ACE2受体丰度的方法,其特征在于,所述方法还包括:
建立有色产物在指定波长的吸光值与ACE2受体丰度参考范围的关联关系,
在加入终止液后,基于检测的有色产物在指定波长的吸光值和与其关联的ACE2受体丰度参考范围确定尿液蛋白样本的ACE2受体丰度。
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