CN112138732A - 一种简易微流控装置及基于其的磁性海藻酸盐微球及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种简易微流控装置及基于其的磁性海藻酸盐微球及其制备方法和应用,属于微流控装置技术领域,首先使用注射泵通过载流相入口输送液体石蜡等作为油相液体,待油相充满L型通道后,使用另一台注射泵往入口中输送连续相为海藻酸盐以及Fe3O4的混合溶液作为水相,在L型通道中由于载流相对连续相的剪切作用将连续相从层流状态剪切成液滴状,通过控制载流相和连续相的流速比来控制微球粒径大小,最后流出收集在CaCl2溶液中交联形成磁性海藻酸钙微球。
Description
技术领域
本发明属于微流控装置技术领域,涉及一种简易微流控装置及基于其的磁性海藻酸盐微球及其制备方法和应用。
背景技术
微流控技术由于其装置小型化的特点,可以很好的控制液体,并且便于制造大小受控,形貌均一的液滴,可应用到如药物封装,组织工程,食品工业等。海藻酸盐由于其具有廉价、无毒、优秀的生物相容性以及生物可降解性,可以作为一种新型的药物递送系统受到了广泛的关注。
海藻酸盐微球的制备通常采用喷雾干燥法、挤出法和乳化凝胶法。但是在喷雾干燥法中长将藻酸盐溶液与有机试剂混合后热风雾化,干燥中会有样品损失在干燥器内壁上并会产生废气,以及挤出法和乳化凝胶法在是实验过程中要考虑到过多因素,如表面活性剂浓度、交联剂浓度、交联时间和搅拌速度等对粒径形貌和载药量的影响,大大增加了微球合成成本。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术中,海藻酸盐微球制备方法不能对粒径进行控制的缺点,提供一种简易微流控装置及基于其的磁性海藻酸盐微球及其制备方法和应用。
为了达到上述目的,本发明采用以下技术方案予以实现:
一种简易微流控装置,包括一个L型通道,所述L型通道包括垂直相交的竖直段和水平段,所述竖直段的顶部连接有油相入口,所述水平段的末端连接有收集瓶,竖直段与水平段的连接处开设有通孔,通孔中插入针管,所述针管与水平段在同一条直线上,针管的入口端连接有海藻酸钠溶液入口,针管的出口端位于水平段上。
优选地,所述油相入口和竖直段之间通过第一乳胶管与油相入口连接,所述水平段通过第二乳胶管与收集瓶连接;第一乳胶管连接有注射泵。
优选地,所述针管的出口端位于水平段的1/2~3/4处。
一种磁性海藻酸盐微球的制备方法,包括如下步骤:
步骤一,配制载流相溶液和连续相溶液,所述连续相溶液为海藻酸盐、Fe3O4纳米粒子和碳酸钙的混合溶液,所述载流相为液体石蜡溶液;
步骤二,将步骤一配制的载流相溶液充满微流控装置中,将连续相溶液注入针管中,在针头处形成液滴,液滴从L通道中流出至收集瓶中进行交联,之后利用收集瓶中的氯化钙溶液收集交联后的液滴。
优选地,所述氯化钙溶液的质量浓度为3%~5%。
优选地,所述连续相溶液中,海藻酸盐、Fe3O4纳米粒子和碳酸钙的质量比为(20~40):(1~5):(2~4);所述载流相中含有Span 80和乙酸,其中Span 80、乙酸和液体石蜡的体积比为(3~5):0.02:100。
优选地,所述Fe3O4纳米粒子的制备方法包括:
将FeCl3·6H2O、乙酸钠和1,2-丙二醇按照(1~1.5)g:(2~2.5)g:40ml的投料比进行混合,搅拌得到混合溶液,加热反应后依次经过磁分离、清洗,得到Fe3O4纳米粒子。
优选地,所述的加热反应条件是,温度为160~180℃,反应时间为24~30h。
一种磁性海藻酸盐微球,当载流相流速与连续相流速之比为(9~10):1时,磁性海藻酸盐微球的粒径为1000±20μm;当载流相流速与连续相流速之比为(19~20):1时,磁性海藻酸盐微球的粒径为500±12μm;当载流相流速与连续相流速之比为(90~100):1时,磁性海藻酸盐微球的粒径为310±20μm;当载流相流速与连续相流速之比为(13~15):1时,磁性海藻酸盐微球的粒径为220±20μm。
一种磁性海藻酸盐微球作为载药材料在体内靶向给药治疗方面的应用。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
本发明公开了一种简易微流控装置,由简单易得的L型通道和针管组装而成,首先使用通过载流相入口输送油相液体,待油相充满L型通道后,往连续相入口中输入海藻酸钠溶液,在L型通道中由于载流相对连续相的剪切作用将连续相从层流状态剪切成液滴状,通过控制载流相和连续相的流速比来控制微球粒径大小,最后收集交联后形成的磁性海藻酸钙微球。本发明装置可用于稳定、连续、快速高效的制备粒径可调的海藻酸盐微球,并且微流控装置不需要复杂仪器进行刻蚀或加工,仅需要简单组装即可。因此,本发明装置具有低成本、组装便捷、性能稳定等优点,是生成油包水结构的乳液或微球的一种普适性装置,与其他微流控装置相比不需要复杂的装置设计,昂贵原材料以及精密仪器进行刻蚀,装置的组装步骤简单,克服了现有微流控装置组装复杂需要多步操作的难点。
进一步地,在微流控装置通过注射泵提供动力,在通道内油相对水相的切割形成单分散的液滴,并在通道内微球外部预先交联保持形貌,最终通过乳胶管道收集到CaCl2水溶液中,通过与Ca2+交联形成海藻酸钙微球,能够减少在传统方法中遇到的多种复杂参数的调控,可控生成不同大小海藻酸盐微球。
进一步地,针管与通道外部连接处用环氧树脂胶密封固定,第一乳胶管连接注射泵作为油相输送通道,第二乳胶管作为流出通道连接L型通道,最终形成液滴落入烧杯中交联收集。
本发明还公开了一种磁性海藻酸钙微球的制备方法,是基于上述装置完成的,首先将配制好的载流相溶液通过注射泵以1000μL/min的速度注入微流控装置,待装置内充满载流相溶液后,将连续相溶液通过注射泵注以100μL/min注入针管内,由于载流相对连续相的挤压剪切作用下,在针头处形成液滴,并通过调整载流相和连续相的流速比调控液滴大小,液滴从L通道中流出至烧杯交联收集。由于连续相溶液中为海藻酸盐、Fe3O4纳米粒子和碳酸钙,载流相中为液体石蜡、Span 80和乙酸溶液,形成的液滴在载流相中流动时由于乙酸和碳酸钙反应使其产生Ca2+,使液滴外层在通道内预先固化,液滴形貌得以稳定存在,不会由于最终从油相到水相中因CaCl2溶液对海藻酸盐微球的快速凝胶化时导致微球形貌不均一。
本发明公开了一种磁性海藻酸钙微球,是基于上述制备方法得到的,该海藻酸盐微球粒径可调,当载流相流速与连续相流速之比为(9~10):1时,磁性海藻酸盐微球的粒径为1000±20μm;当载流相流速与连续相流速之比为(19~20):1时,磁性海藻酸盐微球的粒径为500±12μm;当载流相流速与连续相流速之比为(90~100):1时,磁性海藻酸盐微球的粒径为310±20μm;当载流相流速与连续相流速之比为(13~15):1时,磁性海藻酸盐微球的粒径为220±20μm。因此,该磁性海藻酸钙微球在磁场存在的情况下可精准控制载药微球在体内对病灶处的精准导向和富集,提高药效,减少对其他正常组织和细胞的损伤,建立靶向给药系统。能够作为载药材料应用于体内靶向给药治疗方面。
附图说明
图1是生成磁性海藻酸钙微球情况示意图;
图2是微流控装置的尺寸示意图,其中,2-1为主视图,2-2为俯视图;
图3磁性海藻酸钙微球尺寸为1000±20μm;
图4磁性海藻酸钙微球尺寸为500±12μm;
图5磁性海藻酸钙微球尺寸为310±20μm;
图6磁性海藻酸钙微球尺寸为220±17μm。
其中,1-油相入口,2-海藻酸钠溶液入口,3-第一乳胶管;4-第二乳胶管,5-液滴,6-油相,7-收集溶液,8-海藻酸盐微球,9-L型通道,10-针管。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明方案,下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分的实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都应当属于本发明保护的范围。
需要说明的是,本发明的说明书和权利要求书及上述附图中的术语是用于区别类似的对象,而不必用于描述特定的顺序或先后次序。应该理解这样使用的数据在适当情况下可以互换,以便这里描述的本发明的实施例能够以除了在这里图示或描述的那些以外的顺序实施。此外,术语“包括”和“具有”以及他们的任何变形,意图在于覆盖不排他的包含,例如,包含了一系列步骤或单元的过程、方法、系统、产品或设备不必限于清楚地列出的那些步骤或单元,而是可包括没有清楚地列出的或对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤或单元。
下面结合附图对本发明做进一步详细描述:
本发明的一种简易微流控装置,包括垂直相交的竖直段和水平段,在水平段与竖直段的相交处设有通孔,通孔中插入针管,针管10与水平段在同一条直线上,针管的出口端位于水平段的1/2~3/4处。结构示意图如图1所示,包括L型通道9、针管10,还包括油相入口1、海藻酸钠溶液入口2、第一乳胶管3和第二乳胶管4,液滴5在L型通道9内生成,收集瓶中,6为油相,7为收集溶液,8为海藻酸盐微球。具体微流控装置搭建流程如下,将针管10插入L型通道9内大约四分之三处,使针管10的出口端处在L型通道9内的中心,如图2所示,针管10与L型通道9外部的连接处用环氧树脂胶密封固定,第一乳胶管3连接注射泵作为油相输送通道,第二乳胶管4作为流出通道连接L型通道9的水平段,最终形成液滴落入烧杯中交联收集。
实施例1
四氧化三铁纳米粒子的制备:称取固体1.7g FeCl3·6H2O和3.0g乙酸钠,加入40mL1,2-丙二醇,95℃下300rpm速度下搅拌溶解30min,随后转入聚四氟乙烯反应釜中,170℃下加热反应24h。反应结束后将产品放置到磁铁上磁分离,倒掉上清液后用超纯水、无水乙醇分别交替清洗3次,离心分离后,得到Fe3O4纳米粒子,将其分散在50mL超纯水中,浓度为9.1mg/ml,于4℃冷藏保存备用。
磁性海藻酸钙微球的制备:连续相溶液的制备,将50mg Fe3O4纳米粒子和0.4g海藻酸钠并添加0.04g碳酸钙于100ml水溶液中,在烧瓶中以300rpm速度下搅拌过夜,使溶液充分溶解混合;载流相溶液为液体石蜡、5%(v/v)Span 80和0.2%(v/v)乙酸溶液,搅拌使其充分混合;收集相溶液为100-500ml的5%(w/v)氯化钙溶液,所有溶液提前配制备用。
实施例2
四氧化三铁纳米粒子的制备:称取固体1.8g FeCl3·6H2O和3.2g乙酸钠,加入40mL1,2-丙二醇,95℃下300rpm速度下搅拌溶解30min,随后转入聚四氟乙烯反应釜中,170℃下加热反应24h。反应结束后将产品放置到磁铁上磁分离,倒掉上清液后用超纯水、无水乙醇分别交替清洗3次,离心分离后,得到Fe3O4纳米粒子,将其分散在50mL超纯水中,浓度为9.8mg/ml,于4℃冷藏保存备用。
磁性海藻酸钙微球的制备:连续相溶液的制备,将30mg Fe3O4纳米粒子和0.3g海藻酸钠并添加0.03g碳酸钙于100ml水溶液中,在烧瓶中以300rpm速度下搅拌过夜,使溶液充分溶解混合;载流相溶液为液体石蜡、3%(v/v)Span 80和0.2%(v/v)乙酸溶液,搅拌使其充分混合;收集相溶液为100-500ml的5%(w/v)氯化钙溶液,所有溶液提前配制备用。
实施例3
四氧化三铁纳米粒子的制备:称取固体1.5g FeCl3·6H2O和3.0g乙酸钠,加入40mL1,2-丙二醇,95℃下300rpm速度下搅拌溶解30min,随后转入聚四氟乙烯反应釜中,170℃下加热反应24h。反应结束后将产品放置到磁铁上磁分离,倒掉上清液后用超纯水、无水乙醇分别交替清洗3次,离心分离后,得到Fe3O4纳米粒子,将其分散在50mL超纯水中,浓度为8.9mg/ml,于4℃冷藏保存备用。
磁性海藻酸钙微球的制备:连续相溶液的制备,将10mg Fe3O4纳米粒子和0.1g海藻酸钠并添加0.01g碳酸钙于100ml水溶液中,在烧瓶中以300rpm速度下搅拌过夜,使溶液充分溶解混合;载流相溶液为液体石蜡、4%(v/v)Span 80和0.2%(v/v)乙酸溶液,搅拌使其充分混合;收集相溶液为100-500ml的5%(w/v)氯化钙溶液,所有溶液提前配制备用。
实施例4
四氧化三铁纳米粒子的制备:称取固体1.8g FeCl3·6H2O和3.4g乙酸钠,加入40mL1,2-丙二醇,95℃下300rpm速度下搅拌溶解30min,随后转入聚四氟乙烯反应釜中,170℃下加热反应24h。反应结束后将产品放置到磁铁上磁分离,倒掉上清液后用超纯水、无水乙醇分别交替清洗3次,离心分离后,得到Fe3O4纳米粒子,将其分散在50mL超纯水中,浓度为9.5mg/ml,于4℃冷藏保存备用。
磁性海藻酸钙微球的制备:连续相溶液的制备,将20mg Fe3O4纳米粒子和0.2g海藻酸钠并添加0.02g碳酸钙于100ml水溶液中,在烧瓶中以300rpm速度下搅拌过夜,使溶液充分溶解混合;载流相溶液为液体石蜡、4%(v/v)Span 80和0.2%(v/v)乙酸溶液,搅拌使其充分混合;收集相溶液为100-500ml的5%(w/v)氯化钙溶液,所有溶液提前配制备用。
首先将载流相溶液通过注射泵注入L型通道9中,使溶液完全充满通道后,使用注射泵将连续相溶液注入针管10内,通过载流相对连续相的挤压剪切力的作用下在通道内的针管出口处生成液滴,并通过调节连续相和载流相的流速比可以进一步调控微球粒径大小。
当载流相流速为1000μL/min,连续相流速为100μL/min时,微球尺寸为1000±20μm,如图3所示。当载流相流速为1000μL/min,连续相流速为50μL/min时,微球尺寸为500±12μm,如图4所示。当载流相流速为1000μL/min,连续相流速为10μL/min时,微球尺寸为310±20μm,如图5所示。当载流相流速为1500μL/min,连续相流速为10μL/min时,微球尺寸为220±17μm,如图6所示。
综上所述,磁性四氧化三铁是一种具有超顺磁性的纳米材料,将其与海藻酸盐结合制备出磁性载药微球,使其在磁场的情况下可精准控制载药微球在体内对病灶处的精准导向和富集,提高药效,减少对其他正常组织和细胞的损伤,建立靶向给药系统。
以上内容仅为说明本发明的技术思想,不能以此限定本发明的保护范围,凡是按照本发明提出的技术思想,在技术方案基础上所做的任何改动,均落入本发明权利要求书的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种简易微流控装置,其特征在于,包括一个L型通道(9),所述L型通道(9)包括垂直相交的竖直段和水平段,所述竖直段的顶部连接有油相入口(1),所述水平段的末端连接有收集瓶,竖直段与水平段的连接处开设有通孔,通孔中插入针管(10),所述针管(10)与水平段在同一条直线上,针管(10)的入口端连接有海藻酸钠溶液入口(2),针管(10)的出口端位于水平段上。
2.根据权利要求1所述的简易微流控装置,其特征在于,所述油相入口(1)和竖直段之间通过第一乳胶管(3)与油相入口(1)连接,所述水平段通过第二乳胶管(4)与收集瓶连接;第一乳胶管(3)连接有注射泵。
3.根据权利要求1所述的简易微流控装置,其特征在于,所述针管(10)的出口端位于水平段的1/2~3/4处。
4.一种磁性海藻酸盐微球的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一,配制载流相溶液和连续相溶液,所述连续相溶液为海藻酸盐、Fe3O4纳米粒子和碳酸钙的混合溶液,所述载流相为液体石蜡溶液;
步骤二,将步骤一配制的载流相溶液充满微流控装置中,将连续相溶液注入针管中,在针头处形成液滴,液滴从L通道中流出至收集瓶中进行交联,之后利用收集瓶中的氯化钙溶液收集交联后的液滴。
5.根据权利要求4所述磁性海藻酸盐微球的制备方法,其特征在于,所述氯化钙溶液的质量浓度为3%~5%。
6.根据权利要求4所述磁性海藻酸盐微球的制备方法,其特征在于,所述连续相溶液中,海藻酸盐、Fe3O4纳米粒子和碳酸钙的质量比为(20~40):(1~5):(2~4);所述载流相中含有Span 80和乙酸,其中Span 80、乙酸和液体石蜡的体积比为(3~5):0.02:100。
7.根据权利要求6所述的磁性海藻酸盐微球的制备方法,其特征在于,所述Fe3O4纳米粒子的制备方法包括:
将FeCl3·6H2O、乙酸钠和1,2-丙二醇按照(1~1.5)g:(2~2.5)g:40ml的投料比进行混合,搅拌得到混合溶液,加热反应后依次经过磁分离、清洗,得到Fe3O4纳米粒子。
8.根据权利要求7所述的磁性海藻酸盐微球的制备方法,其特征在于,所述的加热反应条件是,温度为160~180℃,反应时间为24~30h。
9.一种磁性海藻酸盐微球,其特征在于,当载流相流速与连续相流速之比为(9~10):1时,磁性海藻酸盐微球的粒径为1000±20μm;当载流相流速与连续相流速之比为(19~20):1时,磁性海藻酸盐微球的粒径为500±12μm;当载流相流速与连续相流速之比为(90~100):1时,磁性海藻酸盐微球的粒径为310±20μm;当载流相流速与连续相流速之比为(13~15):1时,磁性海藻酸盐微球的粒径为220±20μm。
10.一种磁性海藻酸盐微球作为载药材料在体内靶向给药治疗方面的应用。
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- 2020-09-27 CN CN202011034210.4A patent/CN112138732A/zh active Pending
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