CN112138201A - 一种用于子宫基底膜修复的生物功能敷料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物功能材料技术领域，具体涉及一种用于子宫基底膜修复的生物功能敷料及其制备方法。所述生物功能敷料的制备方法，包括：将SIS冻干膜粉碎，经消化、交联处理后，再与聚电解质复合。本发明将SIS冻干膜进行特定的消化处理后再交联，使得SIS膜具有更好的弹性形变和形态记忆功能；良好的弹性形变使其作为生物支架材料具有显著优势，而良好的形态记忆功能，可通过压缩去除水分后主动吸附聚电解质透明质酸等材料，显著提高聚电解质的负载量，从而提高修复效果；而且，多交联剂可通过后续多次漂洗去除，基本不残留，大大降低细胞毒性，解决了交联后的安全性问题。
Description
技术领域
本发明属于生物功能材料技术领域，具体涉及一种用于子宫基底膜修复的生物功能敷料及其制备方法。
背景技术
子宫内膜是人体最为活跃的器官之一，具有丰富的血液供应，包括功能层和基底层。功能层为胚胎植入的部位，受性激素的影响而呈周期性增殖、分泌和脱落性改变；基底层则在经期后修复内膜创面并形成新的功能层。
子宫内膜损伤主要为内膜基底层的损伤，其主要原因与妊娠期刮宫有关。与正常子宫内膜相比，妊娠期子宫内膜基底层疏松，更容易受到损伤。子宫内膜基底层受损，内膜的局部感染和炎症，会造成上皮和间质细胞再生修复发生障碍，血管形成受阻，致密纤维组织形成，最终导致宫腔仅覆盖少量内膜，甚至无内膜，腺体萎缩，宫腔失去正常形态。
宫腔内膜修复的常用方法有：宫内节育器、球囊、雌孕激素治疗、羊膜移植、透明质酸钠的应用等。宫腔支撑物、防粘连生物材料、应用激素等方法虽然能在一定程度上预防粘连的复发，但无法促进受损的基底层再生。
干细胞替代治疗，即将自体的或异体的干细胞经修饰、处理后，输注于患者子宫特定区域，促进内膜修复和相关细胞增殖从而修复损伤内膜，达到治疗目的。
CN 107050529B公开一种宫腔内置物、制备方法及其应用，其中具体公开了一种具有袋状结构的宫腔内置物，内置物包括经脱细胞处理的动物小肠粘膜下层基质材料，有利于宫腔基底层、粘膜下层、粘膜层等组织的修复，可用于隔离创面、宫腔组织修复和减少瘢痕的形成，从而处理宫腔粘连问题，并解决由此产生的不孕问题。但该方法操作较复杂，支撑构件还需要人工移出，且内置物在宫腔内不是很好固定，取出支撑构件后会存在内置物脱落情况，修复可能达不到理想效果。
CN105903092A公开了子宫置入物及子宫置入物的置入系统，具体公开了包括本体和本体相连接的第一连接部，本体为第一人可降解材料，第一连接部包括第二人体可降解材料，将生物材料压制成片状后进行打孔，再将胶原蛋白、壳聚糖、海藻酸钠浇筑到生物材料上。该方案中置入物在宫腔内一方面起到隔离作用，另一方面其中的具有辅助恢复功能的部分可以帮助内膜恢复。但该系统复杂，同样也是薄膜状材料，还是会发生脱落状况。
CN105999410A公开一种脱细胞组织基质复合材料，其可用于创面修复、皮下填充、及构建组织工程化肌肉等。所述复合材料是由脱细胞组织基质经粉碎、消化后与聚电解质混匀，再冷冻干燥而成。该方法指出，对复合材料进行的选择、控制性交联定型，能够使材料的降解或被人体的分解速度能与被诱导组织血管生长的速度保持一致，才能适用不同组织的再生、血管化。但经实际应用发现所得复合材料并不适用于子宫基底膜的修复。
发明内容
本发明的第一目的是提供一种用于子宫基底膜修复的生物功能敷料的制备方法。
所述生物功能敷料的制备方法，包括：将SIS冻干膜粉碎，经消化、交联处理后，再与聚电解质复合。
本发明将SIS冻干膜进行特定的消化处理后再交联，使得SIS膜具有更好的弹性形变和形态记忆功能；良好的弹性形变使其作为生物支架材料具有显著优势，而良好的形态记忆功能，可通过压缩去除水分后主动吸附聚电解质透明质酸等材料，显著提高聚电解质的负载量，从而提高修复效果；而且，交联剂可通过后续多次漂洗去除，基本不残留，大大降低细胞毒性，解决了交联后的安全性问题。
所述消化使用乙酸和胃蛋白酶。研究表明，采用乙酸与胃蛋白酶联合处理消化SIS，使其更容易粉碎，在室温下更有利于胃蛋白酶酶解，打断SIS中胶原多肽之间的连接键，使其更易在酸性溶液中溶解，从而更有助于与EDC交联。
优选地，所述胃蛋白酶与所述SIS的质量比为1：(50-500)，优选为1：(100-150)。
优选地，消化过程中，所述乙酸的体积浓度为0.1％。
所述粉碎的SIS冻干膜经消化处理后得到凝胶。研究表明，不同浓度的凝胶冻干后形成的海绵性状不同；浓度越高，海绵形态及物理性能也越好，但由于凝胶过于粘稠，流动性差，搅拌及转移操作不方便，且不易完全溶解。故控制所述凝胶的质量浓度为0.25％～1％。
所述交联是通过含30mM～50mM EDC的乙醇混合液实现的。研究表明，在此浓度范围内处理得到的SIS交联膜具有最适宜的吸水率、降解速率及机械性能，满足子宫修复的临床要求。优选地，所述交联的时间为24～36h。
所述交联反应结束后，对交联膜进行清洗。具体清洗可采用本领域常规清洗方式，例如前2次清洗时每隔半小时换一次纯化水，后4次清洗时每一小时换一次纯化水。
所述聚电解质包括透明质酸和天然生物抑菌材料。优选地，所述透明质酸与天然生物抑菌材料的质量比为(2-9)：1，进一步优选为3:1。研究表明，在此质量比例范围内，两种聚电解质产生协同作用，所得复合材料具有更好的修复功能。
所述复合过程为：将内部水分吸干后的SIS交联膜浸渍于含有聚电解质的混合液中，充分吸收至SIS交联膜膨胀后取出；其中所述混合液中，所述透明质酸的质量浓度为66％～90％；所述天然生物抑菌材料的质量浓度为10％～33％。研究表明，通过控制聚电解质的质量浓度比例，可以确保SIS交联膜对其充分吸收。
优选地，所述天然生物抑菌材料选自多糖、多肽或糖肽聚合物中的一种或多种；进一步优选为壳聚糖、羧甲基壳聚糖、聚乳酸、聚赖氨酸、鱼精蛋白、桂皮油或罗汉果油中的一种或多种；更进一步优选为羧甲基壳聚糖。研究表明，羧甲基壳聚糖具有良好的稳定性且抗菌性强，可防止炎症的发生；同时其与透明质酸之间具有更好的适配性。
作为本发明的具体实施方式之一，所述透明质酸与羧甲基壳聚糖的质量比为3：1。
所述SIS冻干膜通过下述方式获得：将SIS(猪小肠粘膜下层)粉末经常规消化、冻干、定型而得到。研究表明，SIS粉末经消化处理后，在保持生物活性的同时，SIS膜的外观良好，表面光滑、质地均一，夹取时不易变形、碎裂，更有利于与EDC交联形成多孔的三维支架结构，有助于提高复合材料的性能。所述冻干采用的冻干曲线为本领域技术人员所掌握的常规冻干曲线。
本发明第二目的是提供采用上述方法制得的生物功能敷料。
本发明的有益效果如下：
(1)本发明所得SIS交联膜具有良好的弹性形变和形态记忆功能，与子宫基底有很好的贴合度，不会让患者存在异物感；
(2)本发明所得SIS交联膜对聚电解质的负载量明显提高，促进创面修复的能力更强，可有效抑制瘢痕生成，同时还具有较强的抗菌性，有效防止炎症反应；
(3)本发明所得SIS交联膜具有最适宜的吸水率、降解速率及机械性能，满足子宫修复的临床要求；
(4)本发明以水溶性零长度交联剂EDC为交联工具，交联剂本身及降解产物均可通过多次漂洗去除不残留。
(5)本发明所得生物功能敷料具有较大的多孔结构，吸水倍率达到40倍之多，具有足够的细胞吸附能力，更有利于细胞的黏附和生长，具有足够的机械强度支持细胞分化、抑制瘢痕增生；
(6)本发明所得生物功能敷料具有生物相容性良好、免疫源性较低、富含生长因子。
附图说明
图1为生物功能敷料的100μm表面扫描电镜图。
图2为生物功能敷料的100μm侧边扫描电镜图。
图3为生物功能敷料的500μm表面扫描电镜图。
图4为未受孕的大鼠子宫图。
图5为动物实验的大鼠子宫修复对照图。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
本发明所述SIS冻干膜可市售购买得到，或采用如下方法制得：
1.1取材
取新鲜的猪小肠组织，且在4～15℃的冷藏箱内，运送至处理间。
1.2清洗
去除小肠的残余脂肪组织，用清水灌洗，去除小肠内食糜；将小肠沿内弯弧线剖开，用纯水清洗3次后浸泡在水中。
1.3消毒
配制消毒液，按照比例放入小肠组织，浸泡1小时，每隔10分钟搅拌一次。
1.4剥离分层
用剥肠机去除清洗后的SIS材料内外各层，并将获得的SIS浸泡在纯化水中；用压舌片刮除SIS材料上的残余组织(注意将先剥层获得的SIS暂存于4℃冰箱，待全部完成剥层后进行下步处理)；
1.5脱细胞
配制PBS溶液(磷酸盐缓冲溶液)，并在使用前置于2～10℃冰箱保温6～48小时，制成低温PBS溶液；
用医用纱布将各组SIS依次包裹并拧干，再将各组SIS分装入2L塑料量杯；加入低温PBS溶液，PBS体积与SIS质量比为2.5～3ml/g(或每组SIS加入1L溶液)，充分搅拌后在2～10℃冰箱中静置10min；
脱细胞溶液配制：用低温PBS溶液溶解胰蛋白酶粉末，制成0.25％胰蛋白酶溶液；将各组SIS依次置入筛网中，沥去溶液，再将SIS倒回原量杯中；加入脱细胞溶液，脱细胞溶液体积与SIS质量比为2.5～3ml/g(或每组SIS加入1L溶液)，充分搅拌后在4℃冰箱中静置6～16小时；
1.6去垢
将各组SIS依次置入筛网中，沥去溶液，再分装入原2L量杯中；加入去垢溶液，去垢溶液体积与SIS质量比为2.5～3ml/g(或每组SIS加入1L溶液)；将所有量杯在室温水浴的摇床上100～150rpm振荡15min；重复以上操作步骤，共4次；
1.7末道清洗
将各组SIS依次置入筛网中，沥去溶液，再分装入玻璃容器中；加入纯化水，纯化水体积与SIS质量比为4～5ml/g(或每组SIS用1.5L纯化水)；将所有玻璃容器放置在室温水浴的摇床上100～150rpm振荡15min；将所有玻璃容器放置在超声波清洗器中320W功率超声10min；重复以上操作步骤，共8次；
1.8冻干
设定好冻干曲线在冷冻干燥机上进行冷冻、干燥。
所述冻干曲线为本领域技术人员所掌握的常规冻干曲线。
实施例1
本实施例提供一种用于子宫基底膜修复的生物功能敷料的制备方法，包括如下步骤：
1.SIS冻干膜的制备
1.1取材
取新鲜的猪小肠组织，且在4～15℃的冷藏箱内，运送至处理间。
1.2清洗
去除小肠的残余脂肪组织，用清水灌洗，去除小肠内食糜；将小肠沿内弯弧线剖开，用纯水清洗3次后浸泡在水中。
1.3消毒
配制消毒液，按照比例放入小肠组织，浸泡1小时，每隔10分钟搅拌一次。
1.4剥离分层
用剥肠机去除清洗后的SIS材料内外各层，并将获得的SIS浸泡在纯化水中；用压舌片刮除SIS材料上的残余组织(注意将先剥层获得的SIS暂存于4℃冰箱，待全部完成剥层后进行下步处理)；
1.5脱细胞
按配方配制PBS溶液，并在使用前置于2～10℃冰箱保温6～48小时，制成低温PBS溶液；用医用纱布将各组SIS依次包裹并拧干，再将各组SIS分装入2L塑料量杯；加入低温PBS溶液，PBS体积与SIS质量比为2.5～3ml/g(或每组SIS加入1L溶液)，充分搅拌后在2～10℃冰箱中静置10min；
脱细胞溶液配制：用低温PBS溶液溶解胰蛋白酶粉末，制成0.25％胰蛋白酶溶液；将各组SIS依次置入筛网中，沥去溶液，再将SIS倒回原量杯中；加入脱细胞溶液，脱细胞溶液体积与SIS质量比为2.5～3ml/g(或每组SIS加入1L溶液)，充分搅拌后在4℃冰箱中静置6～16小时；
1.6去垢
将各组SIS依次置入筛网中，沥去溶液，再分装入原2L量杯中；加入去垢溶液，去垢溶液体积与SIS质量比为2.5～3ml/g(或每组SIS加入1L溶液)；将所有量杯在室温水浴的摇床上100～150rpm振荡15min；重复以上操作步骤，共4次；
1.7末道清洗
将各组SIS依次置入筛网中，沥去溶液，再分装入玻璃容器中；加入纯化水，纯化水体积与SIS质量比为4～5ml/g(或每组SIS用1.5L纯化水)；将所有玻璃容器放置在室温水浴的摇床上100～150rpm振荡15min；将所有玻璃容器放置在超声波清洗器中320W功率超声10min；重复以上操作步骤，共8次；
1.8冻干
设定好冻干曲线在冷冻干燥机上进行冷冻、干燥，得SIS冻干膜。
2.SIS冻干膜的消化、交联
2.1将经过处理、冻干后的SIS冻干膜研磨成粉末，待用；
2.2配制消化液：10ml的体积浓度0.1％乙酸水溶液和0.01g的胃蛋白酶定容至100ml，备用；
2.3配制交联液：50mM的EDC溶于95％乙醇中，现配现用；
2.4取1.0g SIS粉末，加入100ml的消化液进行室温搅拌48h，得到质量浓度为1％的凝胶液，注入到模具中，冻干、定型，得到SIS冻干膜；
2.5取出冻干后的SIS，加入交联液，没过SIS冻干膜，常温下，交联24h，倒出交联液；
2.6清洗：倒入纯化水清洗，前2次每隔半小时换一次纯化水，后4次每一小时换一次纯化水，得到清洗完毕后的SIS交联膜。
3.SIS交联膜与聚电解质材料的复合、成型
3.1将透明质酸、羧甲基壳聚糖按照3:1的质量比进行混合，用纯化水进行溶解、搅拌4h；此时透明质酸钠的浓度为0.75g/100ml，羧甲基壳聚糖的浓度为0.25g/100ml。
3.2 SIS交联膜用吸水纸吸干内部水分，放入混合液中，充分吸收至SIS交联膜膨胀后取出；
3.3将取出后的SIS交联膜进行冻干、包装、灭菌，得到生物功能敷料。
图1为生物功能敷料的100μm表面扫描电镜图。
图2为生物功能敷料的100μm侧边扫描电镜图。
图3为生物功能敷料的500μm表面扫描电镜图。
实施例2
本实施例提供一种用于子宫基底膜修复的生物功能敷料的制备方法，包括如下步骤：
1.SIS冻干膜的制备
参照实施例1中的步骤1.
2.SIS冻干膜的消化、交联
2.1将经过处理、冻干后的SIS冻干膜研磨成粉末，待用；
2.2配制消化液：10ml的0.1％乙酸和0.01g胃蛋白酶定容至100ml，备用；
2.3配制交联液：30mM的EDC溶液于95％乙醇中，现配现用；
2.4取1.0g SIS粉末，加入100ml的消化液进行室温搅拌48h，得到质量浓度为1％的凝胶液，注入到模具中，冻干、定型，得到SIS冻干膜；
2.5取出冻干后的SIS，加入交联液，没过SIS冻干膜，常温下，交联24h，倒出交联液；
2.6清洗：倒入纯化水清洗，前2次每隔半小时换一次纯化水，后4次每一小时换一次纯化水，得到清洗完毕后的SIS交联膜。
3.SIS交联膜与聚电解质材料的复合、成型
3.1将透明质酸、羧甲基壳聚糖按照3:1的质量比进行混合，用纯化水进行溶解、搅拌4h，此时透明质酸的浓度为0.75g/100ml，羧甲基壳聚糖的浓度为0.25g/100ml；
3.2 SIS交联膜用吸水纸吸干内部水分，放入混合液中，充分吸收至SIS交联膜膨胀至原有形态后取出；
3.3将取出后的SIS交联膜进行冻干、包装、灭菌，得到生物功能敷料。
实施例3
本实施例提供一种用于子宫基底膜修复的生物功能敷料的制备方法，包括如下步骤：
1.SIS冻干膜的制备
参照实施例1中的步骤1。
2.SIS冻干膜的消化、交联
2.1将经过处理、冻干后的SIS膜研磨成粉末，待用；
2.2配制消化液：10ml的0.1％乙酸和0.0025g胃蛋白酶定容至100ml，备用；
2.3配制交联液：30mM的EDC溶液于95％乙醇中，现配现用；
2.4取0.25g SIS粉末，加入100ml的消化液进行室温搅拌48h，得到质量浓度为0.25％的凝胶液，注入到模具中，冻干、定型，得到SIS冻干膜；
2.5取出冻干后的SIS，加入交联液，没过SIS冻干膜，常温下，交联24h，倒出交联液；
2.6清洗：倒入纯化水清洗，前2次每隔半小时换一次纯化水，后4次每一小时换一次纯化水，得到清洗完毕后的SIS交联膜。
3.SIS交联膜与聚电解质材料的复合、成型
3.1将透明质酸、羧甲基壳聚糖按照3:1的质量比进行混合，用纯化水进行溶解、搅拌4h，此时透明质酸的浓度为0.75g/100ml，羧甲基壳聚糖的浓度为0.25g/100ml；
3.2 SIS交联膜用吸水纸吸干内部水分，放入混合液中，充分吸收至SIS交联膜膨胀至原有形态后取出；
3.3将取出后的SIS交联膜进行冻干、包装、灭菌，得到生物功能敷料。
对比例1
提供一种复合生物功能敷料，采用与实施例1相同的制备方法，区别仅在于处理工序不同；具体为：粉碎后的SIS冻干膜经过消化、与聚电解质复合、再交联处理。
对比例2
提供一种复合生物功能敷料，采用与实施例1相同的制备方法，区别仅在于交联液的配制，具体为交联液选择了EDC与NHS混合液。
实验例
1、【细胞毒实验】
实验方法：取表面积3cm2/ml的样品，37℃、24小时，浸提。
参照《GB/T 16886.5-2017医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒试验》进行细胞毒试验。检测结果见下表1。
表1
实验结论：阴性对照组为0级细胞毒性(相对增殖率≥100％)，阳性对照组为4级细胞毒性(相对增殖率在0～29％之间)，所以实验成立。在此基础上判定实施例1所得生物功能敷料为1级细胞毒性。同样地，实施例2和实施例3也具有与实施例1相当的1级细胞毒性。
2、【吸水性实验】
实验方法：将称重W1的1cm×1cm样品分别放在20ml生理盐水中，在37℃放置2小时，然后取出用滤纸吸干表面的水分后称重(W2)，按照公式(1)计算吸水倍率。
吸水倍率＝(W2-W1)/W1……………………………………(1)
敷料的吸水率检测结果，见表2。
表2
实验结论：本发明实施例1-3所得生物敷料具有超强的吸水性能，且吸水后有很好的弹性性能，吸水过程中有良好的形态记忆功能，在子宫基底膜修复过程中，不同阶段不同创面，可以随时在体内进行调整，使之与创面拥有一个完美的贴合度，多孔的结构相当于支架材料，隔离创面、防止粘连同时能为细胞的生长和繁殖起到连接作用。
而对比例1所得生物敷料遇水降解速率过快，吸水率相当于0。
对比例2所得生物敷料的吸水性能相对较差，且吸水后弹性低，用于子宫基底膜修复时，与创面贴合度差。
3、【体外性能降解实验】
实验方法：将敷料裁剪成1cm×1cm的小块，放入装有50mlPBS的锥形瓶中，然后将装有试样的锥形瓶置于恒温摇床中，110rpm、37℃放置10周，每隔1周取出称重，同时换PBS溶液，取出后的敷料用纯化水浸洗多次后干燥，计算海绵的重量损失率。
功能敷料的体外降解检测结果，见表3。
表3
实验结论：实施例1-3所得生物敷料的重量损失率增加平缓，材料的稳定性较好，不会立即降解，满足子宫修复周期。
而对比例1所得生物敷料会立即降解，对比例2所得生物敷料与实施例1-3相当。
4、【动物实验】
采用大鼠模型对子宫修复的效果进行评判
实验方法：
动物模型的建立：
子宫内膜损伤：试验大鼠麻醉后，大鼠下腹部中线切开皮肤3厘米进行手术操作；暴露双侧子宫，在双侧子宫下部结合处使用无损伤组织镊头部对子宫上三分之一进行刮擦，刮出子宫内膜中层。观察子宫变薄后停止操作。然后将附有脂多糖的丝线的一端置于子宫腔内，另一端通过肌层固定在皮肤上；术后48h移除缝线。手术后每天每只大鼠注射10万单位青霉素，共3天。
实验步骤：
材料移植：进行损伤手术后1周进行移植手术。将产品剪成2×1cm的大小，在生理盐水中浸泡10分钟。麻醉大鼠，从前一次手术入路进行试验。通过克氏针把产品送到右侧子宫损伤位置。左侧对照侧不进行修复处理。
合笼饲养观察受孕情况：在材料移植到子宫后30天进行大鼠合笼饲养，合笼饲养后每天观察动物受精情况，如受精则把雌性动物单独饲养，在受精后15天对动物进行安乐死，解剖动物观察受孕情况。
术后观察：
动物状况观察：
观察并记录所有实验动物的外观体征、行为活动、体温、腺体分泌、局部刺激性、呼吸、排泄物性状、饮食情况、体重、中毒反应和死亡情况等并做好相应记录。同时应观察是否有并发症存在并完整记录，目前根据已上市产品发现可能会有的不良反应有过敏，感染，血肿，凝血障碍，伤口愈合时间延长，伤口裂开，粘连形成等，发现伤病动物及时隔离治疗，发现死亡或濒死动物及时进行解剖检查并尽量采血检查。
评价及判定标准：
①受孕情况观察
术后通过肉眼观察受孕胚胎数量，评价修复情况。
实验结论
试验结果显示，试验侧子宫修复后与对照侧子宫比较，在动物受孕率方面有明显差异，试验侧优于对照侧。
图4为未受孕的大鼠子宫图。
图5为动物实验的大鼠子宫修复对照图。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种生物功能敷料的制备方法，其特征在于，将SIS冻干膜粉碎，经消化、交联处理后，再与聚电解质复合。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述消化使用乙酸和胃蛋白酶。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述胃蛋白酶与所述SIS的质量比为1：(50-500)，优选为1：(100-150)。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述消化处理后得到凝胶；所述凝胶的质量浓度为0.25％～1％。
5.根据权利要求1-4任一所述的制备方法，其特征在于，所述交联是通过含30mM～50mMEDC的乙醇混合液实现的。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述交联的时间为24～36h。
7.根据权利要求1-6任一所述的制备方法，其特征在于，所述聚电解质包括透明质酸和天然生物抑菌材料；
优选地，所述透明质酸与天然生物抑菌材料的质量比为(2-9)：1，优选为3:1。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述复合过程为：将内部水分吸干后的SIS交联膜浸渍于含有聚电解质的混合液中，充分吸收至SIS交联膜膨胀后取出；其中所述混合液中，所述透明质酸的质量浓度为66％～90％；所述天然生物抑菌材料的质量浓度为10％～33％。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述天然生物抑菌材料选自多糖、多肽或糖肽聚合物中的一种或多种；
优选为壳聚糖、羧甲基壳聚糖、聚乳酸、聚赖氨酸、鱼精蛋白、桂皮油或罗汉果油中的一种或多种；
进一步优选为羧甲基壳聚糖。
10.权利要求1-9任一所述制备方法得到的生物功能敷料。
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