CN112074516A

CN112074516A - Nlrp3调节剂

Info

Publication number: CN112074516A
Application number: CN201980027881.7A
Authority: CN
Inventors: 张泳; A·V·加瓦伊; A·F·唐奈; S·古什; W·R·鲁什; P·西瓦普拉卡萨姆; S·P·塞茨; J·A·马克瓦尔德
Original assignee: IFM Therapeutics Inc
Current assignee: Innate Tumor Immunity Inc
Priority date: 2018-04-25
Filing date: 2019-04-24
Publication date: 2020-12-11
Also published as: TW202014420A; CN112521387A; EP3784670B1; US20210267964A1; IL278173A; MX2020011234A; CO2020013155A2; CN112521387B; AU2019261582A1; EP4353235A2; ZA202007307B; PE20210160A1; JP7351850B2; EP3784670A1; WO2019209896A1; CA3097865A1; KR20210005106A; JP2024001030A; CO2021006672A2; BR112020021539A2

Abstract

本发明提供了式(I)化合物：其中所有变量均如本文所定义。这些化合物是NLRP3调节剂，其可用作用于治疗个体(例如人)的增殖性障碍(例如癌症)的药物。

Description

NLRP3调节剂

技术领域

本公开的特征在于调节(例如，激动或部分激动)NLRP3的化学实体(例如，化合物或该化合物的药学上可接受的盐和/或水合物和/或共晶和/或药物组合)，所述化学实体可用于例如治疗如下的病症、疾病或障碍，其中NLRP3信号传导的增加可以校正先天性免疫活性的缺陷，该先天性免疫活性的缺陷促进个体(例如人)病症、疾病或障碍(例如，具有低T细胞浸润的癌症)的病理和/或症状和/或进展和/或难以治疗的状态。本公开的特征还在于组合物以及使用和制备其的其它方法。

背景技术

核苷酸结合寡聚化结构域样受体(“NLR”)包括检测病原体相关分子模式(“PAMP”)和内源性分子的细胞内受体家族(参见例如Ting,J.P.Y.等人,“The NLR gene family:astandard nomenclature”,Immunity,28(3):285-287,(2008))。

NLRP表示包括Pyrin结构域并且由例如NLRP1、NLRP3、NLRP4、NLRP6、NLRP7和NLRP12的蛋白质构成的NLR亚家族。认为NLRP涉及称为炎性小体(inflammasomes)的多蛋白复合物的形成(参见例如Chaput,C.等人,“NOD-like receptors in lung diseases”,Frontiers in Immunology,4:章节393,(2013))。这些复合物通常包括一种或两种NLR蛋白质、含有CARD结构域的适配子分子凋亡相关的斑点样蛋白(ASC)和前-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1F(参见例如Bauernfeind,F和Hornung,V.“Of inflammasomes and pathogens-sensing of microbes by the inflammasome”,EMBO Molecular Medicine,5(6):814-826,(2013))。

一种此类炎性小体由NLRP3骨架、ASC适配体和前-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1形成(参见例如Hirota,J.A.,等人,“The airway epithelium nucleotide-binding domainand leucine-rich repeat protein 3inflammasome is activated by urbanparticulate matter”,Journal of Allergy and Clinical Immunology,129(4):1116.e6-1125.e6,(2012))，并且认为其表达通过髓细胞和人支气管上皮细胞中的炎性细胞因子和TLR激动剂诱导(Id.)。认为NLRP3炎性小体介导前-IL-1β和前-IL-18至IL-1β和IL-18的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1-依赖型转化。此外，IL-1β和IL-18在多种类型的癌症治疗中具有潜能(参见例如Chen,L-C.等人,EMBO Mol Med.,4(12):1276-1293(2012)和Tse,B.W-C.等人,PLoS One,6(9):e24241(2011))。已显示IL-18在结肠癌动物肿瘤模型中不受对检查点抑制剂的抗性的限制(参见例如Ma,Z.等人,Clin.Cancer Res.Jan 11.(2016)DOI:10.1158/1078-0432.CCR-15-1655)。

概述

本发明涉及式(I)化合物：

其中所有变量如下文所定义。

式(I)化合物的药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体和溶剂化物也在本发明的范围内。

本发明还涉及包含一种或多种本发明化合物的药物组合物。本发明还涉及使用一种或多种本发明化合物治疗癌症的方法。

本发明还提供了用于制备式(I)化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体和溶剂化物的方法和中间体。

本发明化合物可用于疗法中。

本发明化合物可用于制备用于治疗癌症用的药物。

本发明化合物可单独使用，与本发明的其它化合物组合使用，或者与一种或多种其它活性剂组合使用。

本发明的其它特征和优势将从以下详细描述和权利要求显而易见。

详细描述

本发明化合物

在第一方面中，本发明特别提供了式(I)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

独立地选自：

R¹在每次出现时独立地为：

(i)H；

(ii)卤素；

(iii)X-R⁵，其中X为C_1-6亚烷基，并且R⁵为H、OH、氰基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)OR^a、-NR^bR^c或-C(O)NR^bR^k；

(iv)被1至6个F取代的C_1-6烷基；

(v)被0至6个F取代的C_3-6环烷基；

(vi)(C_1-3亚烷基)-芳基，其中芳基被0至3个R^d取代；或

(vii)包含5至6个环原子的(C_1-3亚烷基)-杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代；

R^1a独立地为H、被0至6个F取代的C_1-6烷基或者被0至6个F取代的C_3-6环烷基；

R²在每次出现时独立地为：

(i)H；

(ii)-Y-R⁶；

(iii)-C(O)-Y-R⁶；

其中：

·Y独立地为被0至4个R^e取代的C_1-8亚烷基；并且

·R⁶在每次出现时独立地为：H、OH、CN、OR^a、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k、-SO_1-2R^h、

或包含5至10个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代；

(iv)-(Y¹)_n-Y²-(Y³)_p-R⁷，其中：

·n独立地为0、1或2；

·p独立地为0或1；

·Y¹和Y³各自独立地为被0至2个R^e取代的C_1-3亚烷基；

·Y²独立地为被0至4个R^g取代的C_3-6亚环烷基或者包含3至8个环原子的亚杂环烷基，其中1至2个环原子各自独立地选自N、N(R^f)和O，并且其中亚杂环烷基被0至4个R^g取代，并且

·R⁷为H、OH、-OR^a、-C(O)OR^a、-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，并且其中杂芳基被0至4个R^g取代；

或者

(v)-Z¹-Z²-Z³-R⁸，其中：

·Z¹为被0至6个F取代的C_1-3亚烷基；

·Z²为-N(R^f)-、-O-或-S-；

·Z³为被0至6个F取代的C_2-5亚烷基；并且

·R⁸为OH、OR^a、-C(O)R^a、-C(O)OR^a；-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代；

R³独立地为卤素或-(C_0-3亚烷基)-(5-元杂芳基)，其中杂芳基包含1至4个环碳原子和1至4个各自独立地选自N、N(R^f)、O和S的环杂原子，并且被0至3个R^g取代；条件为当R³为呋喃基时，R²不为C_1-4烷基；

R⁴独立地选自：H、卤素、氰基、OH、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)OH、-C(O)OR^a、-NR^jR^k、-C(O)NR^jR^k、-SO_1-2R^h以及被0至2个R^e取代的C_1-4烷基；

R^a在每次出现时独立地为：

(i)被0至3个R^e取代的C_1-6烷基；

(ii)-(C_0-3亚烷基)-C_3-6环烷基，其中环烷基被0至4个R^g取代；

(iii)包含3至10个环原子的-(C_0-3亚烷基)-杂环基，其中1至3个环原子各自独立地选自N(R^f)、O和S(O)_0-2，其中杂环基被0至4个R^g取代；

(iv)-(C_0-3亚烷基)-(C_6-10芳基)，其中芳基被0至5个R^d取代；或

(v)包含5至10个环原子的-(C_0-3亚烷基)-杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代；

R^b在每次出现时独立地为H或R^a；

R^c在每次出现时独立地选自：H、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^jR^k、-S(O)_1-2R^h、被0至2个R^e取代的C_1-6烷基、-(C_0-3亚烷基)-(被0至4个Rⁿ取代的苯基)和包含5至6个环原子的-(C_0-3亚烷基)-杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个Rⁿ取代；

可选择的是，R^b和R^c与其各自所连接的氮原子一起形成包含3至10个环原子的杂环基，其中1至3个环原子各自独立地选自N(R^f)、O和S，并且其中杂环基被0至4个R^g取代；

R^d在每次出现时独立地选自：卤素、OH、氰基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)(C_1-4烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C_1-4烷基)、-NR^jR^k、-N(R^m)C(O)(C_1-4烷基)、-N(R^m)C(O)O(C_1-4烷基)、-C(O)NR^jR^k、-S(O)_1-2R^h、-S(O)_1-2NR^hR^j、被0至2个R^e取代的C_1-6烷基和-(C_0-3亚烷基)-R^p；

R^e在每次出现时独立地选自：卤素、OH、氰基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)OR^a、-OC(O)R^h、-NR^bR^c和-CONR^bR^k；

R^f在每次出现时独立地选自：H、OH、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、-C(O)(C_1-4烷基)、-C(O)(C_1-4卤代烷基)、-C(O)O(C_1-4烷基)、-C(O)NR^jR^k、-S(O)_1-2R^h和-(C_0-3亚烷基)-苯基；

R^g在每次出现时独立地为氧代或R^d；

R^h在每次出现时独立地选自被0至2个Rⁿ取代的C_1-6烷基、C_1-4卤代烷基和-(C_0-3亚烷基)-R^p；

R^j和R^m在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^k在每次出现时独立地选自H、C_1-4烷基和-(C_0-2亚烷基)-苯基；

Rⁿ在每次出现时独立地选自：卤素、OH、C_1-6烷基、C_1-4卤代烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷氧基、氰基、-C(O)OH、-C(O)O(C_1-4烷基)、-NR^jR^k和-CONR^jR^k；并且

R^p在每次出现时独立地选自：被0至4个C_1-4烷基取代的C_3-6环烷基；包含3至10个环原子的杂环基，其中1至3个环原子各自独立地选自NH、N(C_1-4烷基)、O和S，其中杂环基被0至4个独立选择的C_1-4烷基取代；被0至3个Rⁿ取代的苯基；以及包含5至10个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、NH、N(C_1-4烷基)、O和S，其中杂芳基被0至3个Rⁿ取代。

在一个实施方案中，R^1a独立地为被0至6个F取代的C_1-6烷基或被0至6个F取代的C_3-6环烷基。

在一个实施方案中，R³独立地为卤素或-(C_0-3亚烷基)-(5-元杂芳基)，其中杂芳基包含1至4个环碳原子和1至4个各自独立地选自N、N(R^f)和S的环杂原子，并且被0至3个R^g取代。

在一个实施方案中，R⁶独立地为：OH、OR^a、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代。

在一个实施方案中，R^h独立地选自C_1-6烷基、C_1-4卤代烷基和-(C_0-3亚烷基)-R^p。

在另一方面中，本发明提供了式(I)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

独立地选自：

R¹在每次出现时独立地为：

(i)H；

(ii)卤素；

(iii)X-R⁵，其中X为未分支的C_1-6亚烷基，并且R⁵为H、OH、氰基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)OR^a、-NR^bR^c或-C(O)NR^bR^k；

(iv)(C_1-3亚烷基)-芳基，其中芳基被0至3个R^d取代；或

(v)包含5至6个环原子的(C_1-3亚烷基)-杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代；

R²在每次出现时独立地为：

(i)H；

(ii)-Y-R⁶；

(iii)-C(O)-Y-R⁶；

其中：

·Y独立地为被0至4个R^e取代的C_1-8亚烷基；并且

·R⁶在每次出现时独立地为：OH、OR^a、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代；

(iv)-(Y¹)_n-Y²-(Y³)_p-R⁷，其中：

·n和p各自独立地为0或1；

·Y¹和Y³各自独立地为被0至2个R^e取代的C_1-3亚烷基；

·Y²独立地为被0至4个R^g取代的C_3-6亚环烷基或包含3至8个环原子的亚杂环烷基，其中1至2个环原子各自独立地选自N、N(R^f)和O，并且其中亚杂环烷基被0至4个R^g取代，并且

·R⁷为H、OH、-C(O)OR^a、-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，并且其中杂芳基被0至4个R^g取代；

或

(v)-Z¹-Z²-Z³-R⁸，其中：

·Z¹为被0至6个F取代的C_1-3亚烷基；

·Z²为-N(R^f)-、-O-或-S-；

·Z³为被0至6个F取代的C_2-5亚烷基；并且

R^a在每次出现时独立地为：

(i)被0至2个R^e取代的C_1-6烷基；

(ii)-(C_0-3亚烷基)-C_3-6环烷基，其中环烷基被0至4个R^g取代；

(iii)包含3至10个环原子的-(C_0-3亚烷基)-杂环基，其中1至3个环原子各自独立地选自N(R^f)、O和S，其中杂环基被0至4个R^g取代；

(iv)-(C_0-3亚烷基)-(C_6-10芳基)，其中芳基被0至5个R^d取代；或

R^b在每次出现时独立地为H或R^a；

R^c在每次出现时独立地选自：H、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^jR^k、-S(O)_1-2R^h、被0至2个R^e取代的C_1-6烷基、-(C_0-3亚烷基)-(被0至4个Rⁿ取代的苯基)或包含5至6个环原子的-(C_0-3亚烷基)-杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个Rⁿ取代；

R^f在每次出现时独立地选自：H、OH、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、-C(O)(C_1-4烷基)、-C(O)O(C_1-4烷基)、-C(O)NR^jR^k、-S(O)_1-2R^h和-(C_0-3亚烷基)-苯基；

R^g在每次出现时独立地为氧代或R^d；

R^h在每次出现时独立地选自C_1-6烷基、C_1-4卤代烷基和-(C_0-3亚烷基)-R^p；

R^j和R^m在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^p在每次出现时独立地选自：被0至4个C_1-4烷基取代的C_3-6环烷基；包含3至10个环原子的杂环基，其中1至3个环原子各自独立地选自NH、N(C_1-4烷基)、O和S，其中杂环基被0至4个独立选择的C_1-4烷基取代；被0至3个Rⁿ取代的苯基；和包含5至10个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、NH、N(C_1-4烷基)、O和S，其中杂芳基被0至3个Rⁿ取代。

在第二方面中，在第一方面的范围内，本发明提供了式(I)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R³独立地为-(C_0-3亚烷基)-(5-元杂芳基)，其中杂芳基包括2至4个环碳原子和1至3个各自独立地选自N、N(R^f)和S的环杂原子，并且被0至3个R^g取代；并且

R⁶在每次出现时独立地选自：OH、OR^a、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k、-SO₂(C_1-4烷基)和包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代。

在另一方面中，在第一方面的范围内，本发明提供了式(I)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R³独立地为-(C_0-3亚烷基)-(5-元杂芳基)，其中杂芳基包含2至4个环碳原子和1至3个各自独立地选自N、N(R^f)和S的环杂原子，并且被0至3个R^g取代；并且

R⁶在每次出现时独立地为：OH、OR^a、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代。

在第三方面中，在第一或第二方面的范围内，本发明提供了式(IIa)、式(IIb)、式(IIc)、式(IId)、式(IIe)、式(IIf)、式(IIg)、式(IIh)或式(IIi)的化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，在第一或第二方面的范围内，本发明提供了式(IIa)、式(IIb)、式(IIc)、式(IId)、式(IIe)、式(IIf)、式(IIg-1)或式(IIh)的化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，在第一或第二方面的范围内，本发明提供了式(IIa)、式(IIb)、式(IIc)、式(IId)或式(IIe)的化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在第四方面中，在第一、第二或第三方面的范围内，本发明提供了式(IIa)、式(IIb)、式(IIc)、式(IId)、式(IIe)、式(IIf)、式(IIg)、式(IIh)或式(IIi)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R¹在每次出现时独立地选自H、卤素和C_1-4烷基；

R²在每次出现时独立地选自：H、被0至3个F取代的C_1-4烷基、-Y-R⁶、-(CH₂)_1-3O(CH₂)_2-3OR^a、-(CH₂)_0-2-Y²-R⁷和

Y独立地为被0至3个R^e取代的C_1-6亚烷基；

R³在每次出现时独立地为-(C_0-2亚烷基)-(5-元杂芳基)，其中杂芳基包含2至4个环碳原子和1至3个环杂原子，其各自独立地选自N、N(R^f)和S，其中杂芳基被0至2个R^g取代；条件为当R³为呋喃基时，R²不为C_1-4烷基；

R⁴在每次出现时独立地选自H、卤素和C_1-4烷基；

R⁶独立地选自：OH、CN、OR^a、-C(O)R^a、NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k、-SO₂(C_1-4烷基)、

和包含5至10个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代；

-Y²-R⁷独立地选自被0至2个R^d取代的C_3-6环烷基、

R^a在每次出现时独立地为：

(i)被0至3个R^e取代的C_1-6烷基；

(ii)被0至2个R^g取代的C_3-6环烷基；

(iii)包含4至10个环原子的-(C_0-2亚烷基)-杂环基，其中1至3个环原子各自独立地选自N(R^f)、O和S，其中杂环基被0至3个R^g取代；

(iv)-(C_0-2亚烷基)-(C_6-10芳基)，其中芳基被0至3个R^d取代；或

(v)包含5至10个环原子的-(C_0-2亚烷基)-杂芳基，其中1至3个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代；

R^b在每次出现时独立地为H或R^a；

R^c在每次出现时独立地选自：H、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-C(O)NR^jR^k、-S(O)₂R^h、被0至2个R^e取代的C_1-6烷基、-(C_0-3亚烷基)-(被0至4个Rⁿ取代的苯基)和包含5至6个环原子的-(C_0-3亚烷基)-杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个Rⁿ取代；

可选择的是，R^b和R^c与其各自所连接的氮原子一起形成包含3至10个环原子的杂环基，其中1至3个环原子各自独立地选自N(R^f)、O和S，并且其中杂环基被0至3个R^g取代；

R^d在每次出现时独立地选自：OH、卤素、CN、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)O(C_1-4烷基)、NH₂、N(C_1-4烷基)₂、-CONH₂、-CONH(C_1-4烷基)、-NHC(O)(C_1-4烷基)、-NHC(O)O(C_1-4烷基)、-S(O)₂(C_1-4烷基)、苯甲酰氧基、被0至2个R^e取代的C_1-4烷基、苯基和包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至2个Rⁿ取代；

R^e在每次出现时独立地选自：卤素、OH、CN、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、-CONH₂和-CONH(C_1-4烷基)；

R^f在每次出现时独立地选自H、C_1-4烷基、-C(O)C_1-4烷基和-C(O)(C_1-4卤代烷基)；

R^g在每次出现时独立地为氧代或R^d；

R^h独立地为被0至2个Rⁿ取代的C_1-4烷基、C_3-6环烷基或苯基；

R^j独立地为H或C_1-4烷基；

R^k独立地选自H、C_1-4烷基和苯基；并且

Rⁿ在每次出现时独立地选自：卤素、C_1-4烷基和C_1-4烷氧基。

在一个实施方案中，R^b独立地选自H、C_1-4烷基和-(C_0-2亚烷基)-苯基。

在一个实施方案中，R^e独立地选自：卤素、OH、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基和C_1-4卤代烷氧基。

在一个实施方案中，R^f独立地选自H、C_1-4烷基和-C(O)C_1-4烷基。

在一个实施方案中，R^g独立地为OH或C_1-4烷氧基。

在一个实施方案中，R^h独立地为C_1-4烷基或苯基。

在另一方面中，在第一、第二或第三方面的范围内，本发明提供了式(IIa)、式(IIb)、式(IIc)、式(IId)或式(IIe)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R¹在每次出现时独立地选自H、卤素和C_1-4烷基；

R²在每次出现时独立地选自：H、-(CH₂)_1-3-R⁶、-(CH₂)_1-3O(CH₂)_2-3OR^a和-(CH₂)_1-2-Y²-R⁷；

R³独立地为-(C_0-2亚烷基)-(5-元杂芳基)，其中杂芳基包含2至4个环碳原子和1至3个环杂原子，其各自独立地选自N、N(R^f)和S，其中杂芳基被0至2个R^g取代；

R⁴在每次出现时独立地选自H、卤素和C_1-4烷基；

R⁶在每次出现时独立地选自：OH、OR^a、-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代；

-Y²-R⁷独立地选自

R^a在每次出现时独立地为：

(i)被0至2个R^e取代的C_1-6烷基；

(ii)被0至2个R^g取代的C_3-6环烷基；

(iv)-(C_0-2亚烷基)-(C_6-10芳基)，其中芳基被0至3个R^d取代；或

R^b在每次出现时独立地选自H、C_1-4烷基和-(C_0-2亚烷基)-苯基；

R^d在每次出现时独立地选自：卤素、CN、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)O(C_1-4烷基)、-NHC(O)(C_1-4烷基)、-NHC(O)O(C_1-4烷基)、-S(O)₂(C_1-4烷基)、苯甲酰氧基、被0至2个R^e取代的C_1-4烷基和包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至2个Rⁿ取代；

R^e在每次出现时独立地选自：F、Cl、OH、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基和C_1-4卤代烷氧基；

R^f在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^h独立地为C_1-4烷基或苯基；

R^j独立地为H或C_1-4烷基；

R^k独立地选自H、C_1-4烷基和苯基；并且

Rⁿ在每次出现时独立地选自：F、Cl、C_1-4烷基和C_1-4烷氧基。

在第五方面中，在第一至第四方面中任一者的范围内，本发明提供可式(IIa)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R¹独立地选自H、F和C_1-4烷基；

R²独立地选自：H、被0至3个F取代的C_1-4烷基、-(CH₂)_1-3-R⁶、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)OH、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂OH、-(CH₂)_1-2CH(OCH₃)CH₂OH、-CH(CH₃)(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_1-2CH(OH)CH₂F、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-3O(CH₂)_2-3OR^a、-CH₂CH(CH₃)NHC(O)R^a和-(CH₂)_1-2-Y²-R⁷；

R³独立地为5-元杂芳基，其中杂芳基包含3至4个环碳原子和1至2个环杂原子，其各自独立地选自N、NH和S；条件为当R³为呋喃基时，R²不为C_1-4烷基；

R⁴独立地选自H、卤素和C_1-4烷基；

R⁶独立地选自：OH、OR^a、NR^bR^c、-NR^bC(O)R^a、-C(O)NR^bR^k、-NHC(O)OR^a、-NHC(O)NR^jR^k、-NHS(O)₂R^h、-SO₂(C_1-4烷基)、

和包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代；

-Y²-R⁷独立地选自被0至2个R^d取代的C_3-6环烷基、

R^a在每次出现时独立地选自：被0至2个R^e取代的C_1-4烷基、C_3-6环烷基、

苯基、苄基、

唑基、异

唑基、噻唑基、N-(C_1-4烷基)-吡唑基、吡唑-1-基、N-(C_1-4烷基)-咪唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、N-(C_1-4烷基)-苯并咪唑基、吡唑并[1,5-a]嘧啶基和

其中各环部分被0至3个R^d取代；

R^b在每次出现时独立地为H、C_1-4烷基或被0至2个F取代的苯基；

R^c独立地为C_1-4烷基、-(C_0-3亚烷基)-(被0至3个Rⁿ取代的苯基)或包含5至6个环原子的-(C_0-3亚烷基)-杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个Rⁿ取代；

R^d在每次出现时独立地选自：卤素、CN、-CH₂OH、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)O(C_1-4烷基)、-CONH₂、NH₂、N(C_1-4烷基)₂、-NHC(O)(C_1-4烷基)、-NHC(O)O(C_1-4烷基)、-S(O)₂(C_1-4烷基)、苯甲酰氧基、苯基和包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至2个Rⁿ取代；

R^e在每次出现时独立地选自：卤素、OH、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基和C_1-4卤代烷氧基；

R^f在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^h独立地为C_1-4烷基或苯基；

R^j独立地为H或C_1-4烷基；

R^k独立地选自H、C_1-4烷基和苯基；并且

在另一方面中，在第一至第四方面中任一者的范围内，本发明提供了式(IIa)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R¹独立地选自H、F和C_1-4烷基；

R²独立地选自：H、被0至3个F取代的C_1-4烷基、-(CH₂)_1-3-R⁶、-(CH₂)_1-3O(CH₂)_2-3OR^a和-(CH₂)_1-2-Y²-R⁷；

R³独立地为5-元杂芳基，其中杂芳基包含3至4个环碳原子和1至2个环杂原子，其各自独立地选自N、NH和S；

R⁴独立地选自H、卤素和C_1-4烷基；

R⁶独立地选自：OH、OR^a、NR^bR^c、-NR^bC(O)R^a、-C(O)NHR^k、-NHC(O)OR^a、-NHC(O)NR^jR^k、-NHS(O)₂R^h、-SO₂(C_1-4烷基)、

-Y²-R⁷独立地选自

R^a在每次出现时独立地选自：被0至1个R^e取代的C_1-4烷基、C_3-6环烷基、

苯基、苄基、

唑基、异

其中各环部分被0至3个R^d取代；

R^b在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^d在每次出现时独立地选自：卤素、CN、-CH₂OH、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)O(C_1-4烷基)、-NHC(O)O(C_1-4烷基)、-S(O)₂(C_1-4烷基)、苯甲酰氧基、苯基和包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至2个Rⁿ取代；

R^f在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^h独立地为C_1-4烷基或苯基；

R^j独立地为H或C_1-4烷基；

R^k独立地选自H、C_1-4烷基和苯基；并且

R¹独立地选自H、F和C_1-4烷基；

R²独立地选自：-(CH₂)_1-3-R⁶、-(CH₂)_1-3O(CH₂)_2-3OR^a和-(CH₂)_1-2-Y²-R⁷；

R³独立地为5-元杂芳基，其中杂芳基包含3至4个环碳原子和1至2个环杂原子，其各自独立地选自N、NH、O和S；

R⁴独立地选自H、F和C_1-4烷基；

R⁶独立地选自：OH、OR^a、NR^bR^c、-NR^bC(O)R^a、-C(O)NHR^k、-NHC(O)OR^a、-NHC(O)NR^jR^k、-NHS(O)₂R^h、

-Y²-R⁷独立地选自

R^a在每次出现时独立地选自：被0至1个OH取代的C_1-4烷基、四氢-2H-吡喃基、苯基、苄基、

唑基、异

其中各环部分被0至3个R^d取代；

R^b在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、CN、-CH₂OH、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)O(C_1-4烷基)、-NHC(O)O(C_1-4烷基)、-S(O)₂(C_1-4烷基)、苯甲酰氧基和包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至2个Rⁿ取代；

R^f在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^h独立地为C_1-4烷基或苯基；

R^j独立地为H或C_1-4烷基；

R^k独立地选自H、C_1-4烷基和苯基；并且

在第六方面中，在第一至第五方面中任一者的范围内，本发明提供了式(IIa)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R¹为H；

R³独立地选自

R⁴独立地为H、F或Cl；

R⁶独立地选自：OH、OR^a、NR^bR^c、-NR^bC(O)R^a、-C(O)NR^bR^k、-NHC(O)O(C_1-6烷基)、-NHC(O)OPh、-NHC(O)N(C_1-4烷基)₂、-NHC(O)N(C_1-4烷基)Ph、-NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-SO₂(C_1-4烷基)、

-Y²-R⁷独立地选自：被0至2个R^d取代的C_3-6环烷基、

苯基、苄基、

唑基、异

其中各环部分被0至3个R^d取代；

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、CN、-CH₂OH、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)O(C_1-4烷基)、-CONH₂、NH₂、N(C_1-4烷基)₂、-NHC(O)(C_1-4烷基)、-NHC(O)O(C_1-4烷基)、-S(O)₂(C_1-4烷基)、苯甲酰氧基、苯基和包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至2个Rⁿ取代；

R^f在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^k独立地选自H、C_1-4烷基和苯基；

在另一方面中，在第一至第五方面中任一者的范围内，本发明提供了式(IIa)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R¹为H；

R³独立地选自

R⁴独立地为H、F或Cl；

R⁶独立地选自：OH、OR^a、NR^bR^c、-NR^bC(O)R^a、-C(O)NHR^k、-NHC(O)O(C_1-6烷基)、-NHC(O)N(C_1-4烷基)₂、-NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-SO₂(C_1-4烷基)、

-NH(吡啶基)和包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代；

-Y²-R⁷独立地选自：

苯基、苄基、

唑基、异

其中各环部分被0至3个R^d取代；

R^b在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、CN、-CH₂OH、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)O(C_1-4烷基)、-NHC(O)O(C_1-4烷基)、-S(O)₂(C_1-4烷基)、苯甲酰氧基、苯基和包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至2个Rⁿ取代；

R^f在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^k独立地选自H、C_1-4烷基和苯基；并且

R¹为H；

R²独立地选自-(CH₂)_1-3-R⁶、-(CH₂)_1-3O(CH₂)_2-3OR^a和-(CH₂)_1-2-Y²-R⁷；

R³独立地选自

R⁴为H；

R⁶独立地选自：OH、OR^a、NR^bR^c、-NR^bC(O)R^a、-C(O)NH(C_1-4烷基)、-C(O)NHPh、-NHC(O)O(C_1-6烷基)、-NHC(O)N(C_1-4烷基)₂、-NHS(O)₂(C_1-4烷基)、

-Y²-R⁷独立地选自：

唑基、异

其中各环部分被0至3个R^d取代；

R^b在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^f在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；并且

在第七方面中，在第一至第六方面中任一者的范围内，本发明提供了式(IIa)化合物或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R¹为H；

R²独立地选自：H、被0至3个F取代的C_1-4烷基、-(CH₂)_1-3-R⁶、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)OH、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂OH、-(CH₂)_1-2CH(OCH₃)CH₂OH、-CH(CH₃)(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_1-2CH(OH)CH₂F、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)O(C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)NHC(O)R^a和-(CH₂)_1-2-Y²-R⁷；

R³独立地为

R⁴独立地为H、F或Cl；

R⁶独立地选自：OH、OR^a、N(C_1-4烷基)₂、-NH(C_1-4烷基)、-NH(CH₂)_1-2(被0至1个R^d取代的苯基)、-N(C_1-2烷基)Bn、-NH(吡啶基)、-NR^bC(O)R^a、-NHC(O)O(C_1-6烷基)、-NHC(O)OPh、-NHC(O)N(C_1-4烷基)₂、-NHC(O)CH₂OCH₂CF₃、-NHC(O)N(C_1-4烷基)Ph、-C(O)NH₂、-C(O)NH(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-C(O)N(CH₃)(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-C(O)NH(C_3-6环烷基)、-C(O)NH(被0至1个F取代的苯基)、-C(O)NH(吡啶基)、-NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-SO₂(C_1-4烷基)、

以及选自咪唑基、吡唑基、

唑基、异

唑基、噻唑基、

二唑基和吡啶基的杂芳基，其中杂芳基被0至2个R^d取代；

-Y²-R⁷独立地选自：被0至2个R^d取代的C_3-6环烷基、

苯基、

唑基、异

唑基、噻唑基、N-(C_1-4烷基)-吡唑基、吡唑-1-基、N-(C_1-4烷基)-咪唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、N-(C_1-4烷基)-苯并咪唑基和吡唑并[1,5-a]嘧啶基；其中各环部分被0至3个R^d取代；

R^b独立地为H或C_1-2烷基；

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、CN、-CH₂OH、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、-CONH₂、NH₂、N(C_1-4烷基)₂、-C(O)O(C_1-4烷基)、苯甲酰氧基、苯基和吡啶基；并且

R^e独立地选自F、OH和C_1-4烷氧基。

在另一方面中，在第一至第六方面中任一者的范围内，本发明提供了式(IIa)化合物或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R¹为H；

R²独立地选自：H、被0至3个F取代的C_1-4烷基或-(CH₂)_2-3-R⁶；

R³独立地为

R⁴独立地为H、F或Cl；

R⁶独立地选自：OH、OR^a、N(C_1-4烷基)₂、-NR^bC(O)R^a、-NHC(O)O(C_1-6烷基)、-NHC(O)N(C_1-4烷基)₂、-NHC(O)CH₂OCH₂CF₃、-NHC(O)N(C_1-4烷基)Ph、C(O)NH₂、-C(O)NHPh、-NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-SO₂(C_1-4烷基)、

-NH(吡啶基)以及选自咪唑基、吡唑基、

唑基、异

唑基、噻唑基、

二唑基和吡啶基的杂芳基，其中杂芳基被0至2个R^d取代；

R^a在每次出现时独立地选自：C_1-4烷基、C_3-6环烷基、

苯基、

唑基、异

R^b独立地为H或C_1-2烷基；并且

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、CN、-CH₂OH、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、苯甲酰氧基、苯基和吡啶基。

R¹为H；

R²为-(CH₂)_2-3-R⁶；

R³独立地为

R⁴为H；

R⁶独立地选自：OH、OR^a、N(C_1-4烷基)₂、-NR^bC(O)R^a、-C(O)NHPh、-NHC(O)O(C_1-6烷基)、-NHC(O)N(C_1-4烷基)₂、-NHS(O)₂(C_1-4烷基)、

和被0至2个R^d取代的吡唑-1-基；

R^a在每次出现时独立地选自：C_1-4烷基、四氢-2H-吡喃基、苯基、

唑基、异

R^b独立地为H或C_1-2烷基；并且

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、CN、-CH₂OH、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、苯甲酰氧基和吡啶基。

在第八方面中，本发明提供了式(IIIa-1)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自：H、被0至3个F取代的C_1-4烷基、-(CH₂)_1-2OCHF₂、-(CH₂)₂O(C_1-4烷基)、-(CH₂)₂O(CH₂)₂(C_1-4烷氧基)、-(CH₂)_2-3OH、-(CH₂)_1-3OR^a、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)OH、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂OH、-(CH₂)_1-2CH(OCH₃)CH₂OH、-CH(CH₃)(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_1-2CH(OH)CH₂F、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHC(O)R^a、-CH₂CH(CH₃)NHC(O)R^a、-(CH₂)_2-3NHC(O)CH₂OCH₂CF₃、-(CH₂)_2- ₃N(CH₃)Bn、-(CH₂)_2-3N(CH₃)C(O)Ph、-(CH₂)_2-3NHC(O)O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHC(O)OPh、-(CH₂)₂C(O)NH₂、-(CH₂)_2-3SO₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2CONH(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2CON(CH₃)(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2NH(CH₂)_1-2(被0至1个R^d取代的苯基)、-(CH₂)_2-3NH(吡啶基)、-(CH₂)_1-2C(O)NH(吡啶基)、-(CH₂)_1-2C(O)NH(被0至1个F取代的苯基)、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)NHSO₂(C_1-4烷基)、

和-(CH₂)_1-3-(杂芳基)，其中杂芳基选自咪唑基、吡唑基、

唑基、异

唑基、噻唑基、

二唑基和吡啶基，并且杂芳基被0至2个R^d取代；

R³独立地为

R^a独立地选自：C_3-6环烷基、

苯基、

唑基、噻唑基、N-(C_1-4烷基)-吡唑基、N-(C_1-4烷基)-咪唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和N-(C_1-4烷基)-苯并咪唑基；其中各环部分被0至2个R^d取代；

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、CN、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、C_1-4卤代烷氧基、NH₂、-C(O)O(C_1-4烷基)、苯基和苯甲酰氧基；并且

R^e独立地选自F、OH和C_1-4烷氧基。

在另一方面中，本发明提供了式(IIIa-1)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自：H、被0至3个F取代的C_1-4烷基、-(CH₂)₂O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHC(O)R^a、-(CH₂)_2-3NHC(O)CH₂OCH₂CF₃、-(CH₂)_2-3NHC(O)O(C_1-4烷基)、-(CH₂)₂C(O)NH₂、-(CH₂)_2-3SO₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NH(吡啶基)、-(CH₂)_1-2C(O)NH(被0至1个F取代的苯基)、

和-(CH₂)_1-3(杂芳基)，其中杂芳基选自咪唑基、吡唑基、

唑基、异

唑基、噻唑基、

二唑基和吡啶基，并且杂芳基被0至2个R^d取代；

R³独立地为

R^a独立地选自：C_3-6环烷基、

苯基、

唑基、噻唑基、N-(C_1-4烷基)-吡唑基、N-(C_1-4烷基)-咪唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和N-(C_1-4烷基)-苯并咪唑基；其中各环部分被0至2个R^d取代；并且

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、CN、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基和苯基。

在另一方面中，本发明提供了式(IIIa-1)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

和-(CH₂)_1-3(杂芳基)，其中杂芳基选自咪唑基、吡唑基、

唑基、异

唑基、噻唑基、

二唑基和吡啶基，并且杂芳基被0至2个R^d取代；

R³独立地为

R^a独立地选自：C_3-6环烷基、苯基、

在另一方面中，本发明提供式(IIIa)化合物：

或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自-(CH₂)_2--NHC(O)R^a、

R^a独立地选自：苯基、

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、CN、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基和C_1-4卤代烷基。

在第九方面中，在第八方面的范围内，本发明提供了式(IIIa)化合物：或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地为被0至3个F取代的C_1-4烷基、-(CH₂)_2-4O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHC(O)R^a、-(CH₂)_2-3NHC(O)O(C_1-4烷基)、-(CH₂)₂C(O)NH₂、-(CH₂)_1-2C(O)NH(被0至1个F取代的苯基)、-(CH₂)_1-3(杂芳基)，其中杂芳基选自咪唑基、吡唑基、

唑基、异

唑基、噻唑基、

二唑基和吡啶基，并且杂芳基被0至2个R^d取代；

R^a独立地选自：

唑基、异

唑基、噻唑基、N-甲基-咪唑基、吡啶基和吡嗪基；其中各环部分被0至2个R^d取代；并且

R^d在每次出现时独立地选自F、Cl、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基和苯基。

在另一方面中，在第八方面的范围内，本发明提供了式(IIIa)化合物：或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²为-(CH₂)_2--NHC(O)R^a；

R^a独立地选自：

R^d在每次出现时独立地选自F、Cl和C_1-4烷基。

在第十方面中，在第九方面的范围内，本发明提供了式(IIIa)化合物：或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R^d在每次出现时独立地选自F、Cl、CH₃和OCH₃。

在另一方面中，在第九方面的范围内，本发明提供了式(IIIa)化合物：或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R^d在每次出现时独立地选自F、Cl和CH₃。

在第十一方面中，本发明提供了式(IIIb-1)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自H、被0至3个F取代的C_1-4烷基、-(CH₂)_1-2CH(OH)CH₂F、-(CH₂)_1-2CH(OH)CF₃、-(CH₂)_1-2CH(OH)CH₂CF₃、-(CH₂)_1-2OCHF₂、-(CH₂)_1-3OCF₃、-(CH₂)_1-2OCH₂CF₃、-(CH₂)_2-5OH、-(CH₂)_2-5CN、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)OH、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)CH₂OH、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂OH、-C(CH₃)₂(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂CH₂OH、-CH₂CH(OH)CH₂OH、-CH₂CH(OH)(C_1-4烷基)、-CH(CH₃)(CH₂)_1-2OH、-CH₂CH(C_1-2烷基)(CH₂)_1-2OH、-CH₂CH(C_1-4烷氧基)(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_2-4O(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂O(C_1-4烷基)、-CH(CH₃)(CH₂)_1-2O(C_1-4烷基)、-CH₂CH(OH)(CH₂)_1-2O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)NH₂、-CH₂C(CH₃)₂NH₂、-(CH₂)_2-3NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_1-3C(O)NH₂、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂CONH₂、-(CH₂)_1-2C(O)NH(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2C(O)N(CH₃)(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)(CH₂)_0-1C(O)NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2C(O)N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)C(O)N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_1-2C(O)N(C_1-2烷基)(CH₂)₂O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2- ₃NHC(O)R^a、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)NHC(O)R^a、-CH₂C(CH₃)₂NHC(O)R^a、-(CH₂)_2-3N(CH₃)C(O)R^a、-(CH₂)_2-3S(O)₂(C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)S(O)₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(C_3-6环烷基)、

和-(CH₂)_1-3-(包含5至10个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S)，并且该杂芳基被0至2个R^d取代；

R³独立地为

R⁴独立地为H或F；

R^a独立地为被0至1个R^e取代的C_1-4烷基、被0至2个R^d取代的C_3-6环烷基、

苯基或选自

唑基、异

唑基、噻唑基、吡啶基和吡嗪基的杂芳基，其中所述苯基和杂芳基被0至2个R^d取代；

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、OH、CN、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基、NH₂、N(C_1-4烷基)₂、-NHC(O)(C_1-4烷基)和苯基；

R^e独立地选自F、OH和C_1-4烷氧基；并且

R^f在每次出现时独立地选自：H、C_1-4烷基、-C(O)(C_1-4烷基)和-C(O)(C_1-4卤代烷基)。

在第十二方面中，在第十一方面的范围内，本发明提供了式(IIIb-1)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自H、被0至3个F取代的C_1-4烷基、-(CH₂)_1-2CH(OH)CH₂F、-(CH₂)_1-2CH(OH)CF₃、-(CH₂)_1-2CH(OH)CH₂CF₃、-(CH₂)_1-2OCHF₂、-(CH₂)_1-3OCF₃、-(CH₂)_1-2OCH₂CF₃、-(CH₂)_2-4OH、-(CH₂)_2-4CN、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)OH、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)CH₂OH、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂OH、-C(CH₃)₂(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂CH₂OH、-CH₂CH(OH)CH₂OH、-CH₂CH(OH)(C_1-4烷基)、-CH(CH₃)(CH₂)_1-2OH、-CH₂CH(C_1-2烷基)(CH₂)_1-2OH、-CH₂CH(C_1-4烷氧基)(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_2-4O(被0至1个R^e取代的C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂O(C_1-4烷基)、-CH(CH₃)(CH₂)_1-2O(C_1-4烷基)、-CH₂CH(OH)(CH₂)_1-2O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)NH₂、-CH₂C(CH₃)₂NH₂、-(CH₂)_2-3NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_1-3C(O)NH₂、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂CONH₂、-(CH₂)_1-2C(O)NH(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2C(O)N(CH₃)(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)(CH₂)_0-1C(O)NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2C(O)N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)C(O)N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_1-2C(O)N(C_1-2烷基)(CH₂)₂O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2- ₃NHC(O)R^a、-CH₂CH(CH₃)NHC(O)R^a、-CH₂C(CH₃)₂NHC(O)R^a、-(CH₂)_2-3S(O)₂(C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)S(O)₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(C_3-6环烷基)、

和-(CH₂)_1-2(杂芳基)，其中杂芳基选自咪唑基、吡唑基、

唑基、异

唑基、噻唑基、

二唑基、吡啶基和哒嗪基，并且杂芳基被0至2个R^d取代；

R^a独立地为被0至1个R^e取代的C_1-4烷基、

苯基或选自

唑基、吡啶基和吡嗪基的杂芳基，其中所述苯基和杂芳基被0至2个R^d取代；并且

在第十三方面中，在第十一或第十二方面的范围内，本发明提供了式(IIIb-1)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R³独立地为

在第十四方面中，本发明提供了式(IIIb-2)化合物，

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自H、被0至3个F取代的C_1-4烷基、-(CH₂)_2-4OH、-(CH₂)_2-4CN、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)OH、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂OH、-CH₂CH(OH)CH₂OH、-CH₂CH(OH)(C_1-4烷基)、-CH(CH₃)(CH₂)_1- ₂OH、-CH₂CH(C_1-2烷基)(CH₂)_1-2OH、-CH₂CH(C_1-2烷氧基)(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_2-4O(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-CH₂C(CH₃)₂NH₂、-(CH₂)_1-3C(O)NH₂、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂CONH₂、-(CH₂)_1-2C(O)NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)(CH₂)_0-1C(O)NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2C(O)N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)C(O)N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_1-2C(O)NH(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2C(O)N(CH₃)(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)NHC(O)(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3S(O)₂(C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)S(O)₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(C_3-6环烷基)、

并且

R^e独立地选自F、OH和C_1-4烷氧基。

在第十五方面中，本发明提供了式(IIIb-2)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自H、-CH₂CHF₂、-(CH₂)_2-4OH、-(CH₂)_2-4CN、-CH₂CH(CH₃)OH、-CH₂C(CH₃)₂OH、-CH₂CH(OH)CH₂OH、-CH₂CH(OH)CH₂CH₃、-CH(CH₃)(CH₂)₂OH、-CH₂CH(CH₃)CH₂OH、-CH₂CH(OCH₃)CH₂OH、-(CH₂)₂O(CH₂)₂OH、-(CH₂)₂O(CH₂)₂OCH₃、-CH₂C(CH₃)₂NH₂、-(CH₂)_1-3C(O)NH₂、-CH₂C(CH₃)₂CONH₂、-(CH₂)_1-2C(O)NH(CH₃)、-(CH₂)_1-2C(O)NH(CH₂CH₃)、-(CH₂)_1-2C(O)NH(CH(CH₃)₂)、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)(CH₂)_0-1C(O)NH(CH₃)、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)C(O)NH(CH(CH₃)₂)、-(CH₂)_1-2C(O)N(CH₃)₂、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)C(O)N(CH₃)₂、-CH₂C(O)NH(CH₂CHF₂)、-CH(CH₃)C(O)NH(CH₂CHF₂)、-C(CH₃)₂C(O)NH(CH₂CHF₂)、-(CH₂)_1-2C(O)NH(CH₂)₂OH、-CH(CH₃)C(O)NH(CH₂)_2- ₃OH、-(CH₂)_1-2C(O)NH(C(CH₃)₂CH₂OH)、-(CH₂)_1-2C(O)NH(CH₂)₂OCH₃、-(CH₂)_1-2C(O)N(CH₃)(CH₂)₂OCH₃、-CH₂CH(CH₃)NHC(O)(CH₃)、-(CH₂)_2-3S(O)₂CH₃、-(CH₂)_2-3S(O)₂CH₂CH₃、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂CH₃、-CH₂CH(CH₃)NHS(O)₂CH₃、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(环丙基)、

在另一方面中，本发明提供了式(IIIb)化合物：

或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自H、被0至3个F取代的C_1-4烷基、-(CH₂)_1-2CH(OH)CF₃、-CH₂CH(CH₃)NHC(O)(C_1-4烷基)、-CH₂C(CH₃)₂NHC(O)(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHC(O)R^a、-(CH₂)_2-3NHC(O)CF(CH₃)₂、-(CH₂)_2-3N(CH₃)C(O)R^a、-(CH₂)_2-3OH、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)OH、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂OH、-CH₂CH(OH)CH₂OH、-CH(CH₃)(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_2-4O(C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)NH₂、-CH₂C(CH₃)₂NH₂、-(CH₂)_2-3NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3S(O)₂(C_1-4烷基)、

和-(CH₂)_1-3(杂芳基)，其中杂芳基选自咪唑基、吡唑基、

唑基、异

唑基、噻唑基、

二唑基和吡啶基，并且杂芳基被0至2个R^d取代；

R³独立地为

R^a独立地为C_1-4烷基、C_3-6环烷基、

苯基或选自

唑基、异

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、CN、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基和苯基；并且

R^f在每次出现时独立地选自：H、C_1-4烷基、C(O)(C_1-4烷基)和C(O)(C_1-4卤代烷基)。

在另一方面中，在上述方面的范围内，本发明提供了式(IIIb)化合物或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自H、C_1-4烷基、-(CH₂)_1-2CHF₂、-(CH₂)_1-2CH(OH)CF₃、-CH₂C(CH₃)₂NHC(O)(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHC(O)R^a、-(CH₂)_2-3OH、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)OH、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂OH、-CH₂CH(OH)CH₂OH、-CH(CH₃)(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_2-4O(C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)NH₂、-CH₂C(CH₃)₂NH₂、-(CH₂)_2-3NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3S(O)₂(C_1-4烷基)、

并且

R^a独立地为C_1-4烷基、

苯基或选自

唑基、吡啶基和吡嗪基的杂芳基，其中所述苯基和杂芳基被0至2个R^d取代。

在另一方面中，在上述两个方面中任一者的范围内，本发明提供了式(IIIb)化合物或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R³独立地为

在第十六方面中，本发明提供式(IIIf)化合物：

或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自-(CH₂)₂N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_2--OR^a、-(CH₂)_2--NHC(O)R^a和

R^a独立地选自：被0至2个F取代的C_1-4烷基、

以及选自噻唑基和吡啶基的杂芳基，其中所述杂芳基被0至2个R^d取代；并且

在第十七方面中，本发明提供了式(IIIg-1)化合物：

或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R¹独立地为H、Cl或C_1-4烷基；

R^1a独立地为H或C_1-4烷基；

R²独立地选自-(CH₂)_1-4-OH、-(CH₂)_1-2-OR^a、-(CH₂)_1-2NH₂、-(CH₂)_1-2NH(被0至1个R^e取代的C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_1-2--NHC(O)R^a、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂Ph、

R³独立地为

R^a独立地选自：被0至2个F取代的C_1-4烷基、

以及选自噻唑基、

唑基、N-C_1-4烷基-咪唑基和吡啶基的杂芳基，其中所述杂芳基被0至2个R^d取代；

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、OH、CN、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷基和-NHC(O)(C_1-4烷基)；并且

R^e独立地选自F、OH、C_1-4烷氧基和C_1-4卤代烷基。

在另一方面中，本发明提供了式(IIIg-1)化合物：

或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R^1a为H；

R²独立地选自-(CH₂)_1-4-OH、

并且

R³独立地为

在第十八方面中，本发明提供了式(IIIg)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自-(CH₂)_1-2NH₂、-(CH₂)_1-2N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_1-2NH(被0至1个R^e取代的C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2--NHC(O)R^a；

R^a独立地选自：被0至2个F取代的C_1-4烷基、

R^d在每次出现时独立地选自：F、Cl、CN、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基和C_1-4卤代烷基；并且

R^e独立地选自F、OH、OCH₃、CHF₂和CF₃。

在另一方面中，本发明提供了式(IIIg)化合物：

或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R^a独立地选自：被0至2个F取代的C_1-4烷基、

在第十九方面中，本发明提供了式(IIIh)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自C_1-4烷基、-(CH₂)_1-2CHF₂、-(CH₂)_2-4OH、-CH₂CH(CH₃)(CH₂)_0-2OH、-CH₂CH(OH)CH₂CH₃、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂OH、-(CH₂)₂O(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_2-4O(C_1-4烷基)、-CH₂CH(OH)(CH₂)_1-2O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)₂(吡啶基)、

并且

R³独立地为

在另一方面中，本发明提供了式(IIIh)化合物或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自-(CH₂)_2-4OH、-CH₂CH(CH₃)(CH₂)_0-2OH、-CH₂CH(OH)CH₂CH₃、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂OH和-(CH₂)₂O(CH₂)_1-2OH；并且

R³独立地为

在另一方面中，本发明提供了式(IIIh)化合物：

或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自C_1-4烷基、-(CH₂)_1-2CHF₂、-(CH₂)_2-4OH、-CH₂CH(CH₃)(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)₂O(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_2-4O(C_1-4烷基)、-CH₂CH(OH)(CH₂)₂O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)₂(吡啶基)、

并且

R³独立地为

在第20方面中，本发明提供了式(IIIi)化合物：

或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自：-(CH₂)_2-4OH、-(CH₂)_2-4O(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3N(C_1-4烷基)₂和-(CH₂)_2-3NHC(O)R^a；

R^a独立地为C_3-6环烷基、

苯基或选自

唑基、异

唑基、噻唑基、吡啶基和吡嗪基的杂芳基，其中所述苯基和杂芳基被0至2个R^d取代；并且

在另一方面中，本发明提供了式(IIIi)化合物或其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地为-(CH₂)_2-4OH或-(CH₂)_2-4O(C_1-4烷基)。

在另一方面中，本发明提供了选自所示例实施例化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自实施例1至151的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自实施例1至285的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自实施例1至624的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自以下的化合物

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自以下的化合物

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自以下的化合物

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自以下的化合物

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自以下的化合物

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自以下的化合物

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自以下的化合物

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自以下的化合物

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自以下的化合物

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自以下的化合物

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自以下的化合物

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供了选自任何化合物子清单的化合物或选自上述方面中任一者的范围内的所示例实施例的单一化合物。

在一些实施方案中，本发明提供了式(IIa)化合物：

或其互变异构体或药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本发明提供了式(IIb)化合物：

或其互变异构体或药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本发明提供了式(IIc)化合物：

或其互变异构体或药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本发明提供了式(IId)化合物：

或其互变异构体或药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本发明提供式(IIe)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本发明提供了式(IIf)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本发明提供了式(IIg)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本发明提供了式(IIg-1)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本发明提供了式(IIh)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本发明提供了式(IIi)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，R¹为H或X-R⁵，其中X为未分支的C_1-6亚烷基，并且R⁵为H、OH、氰基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)OR^a、-NR^bR^c或-C(O)NR^bR^k。在其它实施方案中，R¹为H或卤素。在其它实施方案中，R¹为H。在其它实施方案中，R¹为H或X-R⁵，其中X为未分支的C_1-6亚烷基，并且R⁵为H、OH、氰基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)OR^a、-NR^bR^c或-C(O)NR^bR^k。

在其它实施方案中，R¹为(C_1-3亚烷基)-芳基，其中芳基被0至3个R^d取代；或包含5至6个环原子的(C_1-3亚烷基)-杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代。在其它实施方案中，R¹为(C_1-3亚烷基)-芳基，其中芳基被0至3个R^d取代。在其它实施方案中，R¹为包含5至6个环原子的(C_1-3亚烷基)-杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代。在其它实施方案中，R¹为H、卤素或C_1-4烷基。在其它实施方案中，R¹为H、F或C_1-4烷基。

在一些实施方案中，R²为H、-Y-R⁶或-C(O)-Y-R⁶；其中：Y独立地为被0至4个R^e取代的C_1-8亚烷基；并且R⁶在每次出现时独立地为：H、OH、OR^a、-C(O)R^a、-C(O)OR^a、-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代。在其它实施方案中，R²为-Y-R⁶或-C(O)-Y-R⁶。在其它实施方案中，R²为-Y-R⁶。在其它实施方案中，R²为-(Y¹)_n-Y²-(Y³)_p-R⁷，其中：n和p各自独立地为0或1；Y¹和Y³各自独立地为被0至2个R^e取代的C_1-3亚烷基；Y²独立地为被0至4个R^g取代的C_3-6亚环烷基或包含3至8个环原子的亚杂环烷基，其中1至2个环原子各自独立地选自N、N(R^f)和O，并且其中亚杂环烷基被0至4个R^g取代；并且R⁷为H、OH、-C(O)OR^a、-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，并且其中杂芳基被0至4个R^g取代。在其它实施方案中，R²为-Z¹-Z²-Z³-R⁸，其中：Z¹为被0至6个F取代的C_1-3亚烷基；Z²为-N(R^f)-、-O-或-S-；Z³为被0至6个F取代的C_2-5亚烷基；并且R⁸为OH、OR^a、-C(O)R^a、-C(O)OR^a；-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代。

在一些实施方案中，R²为H、-(CH₂)_1-3-R⁶、-(CH₂)_1-3O(CH₂)_2-3OR^a或-(CH₂)_1-2-Y²-R⁷。在其它实施方案中，R²为-(CH₂)_1-3-R⁶、-(CH₂)_1-3O(CH₂)_2-3OR^a或-(CH₂)_1-2-Y²-R⁷。在其它实施方案中，R²为-(CH₂)_2-3-R⁶。在其它实施方案中，R²为-(CH₂)_2--NHC(O)R^a、

在其它实施方案中，R²为-(CH₂)_2--NHC(O)R^a。

在一些实施方案中，R³为-(C_0-3亚烷基)-(5-元杂芳基)，其中杂芳基包含2至4个环碳原子和1至3个各自独立地选自N、N(R^f)、O和S的环杂原子，并且被0至3个R^g取代。在其它实施方案中，R³为-(C_0-2亚烷基)-(5-元杂芳基)，其中杂芳基包含2至4个环碳原子和1至3个环杂原子，其各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至2个R^g取代。在其它实施方案中，R³为5-元杂芳基，其中杂芳基包含3至4个环碳原子和1至2个环杂原子，其各自独立地选自N、NH、O和S。在其它实施方案中，R³为

在其它实施方案中，R³为

在其它实施方案中，R³为

在一些实施方案中，R⁴为H、卤素或C_1-4烷基。在其它实施方案中，R⁴为H、F或C_1-4烷基。

在一些实施方案中，R⁶为OH、OR^a、-NR^bR^c、-C(O)NR^bR^k或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代。在其它实施方案中，R⁶为OH、OR^a、NR^bR^c、-NR^bC(O)R^a、-C(O)NHR^k、-NHC(O)OR^a、-NHC(O)NR^jR^k、-NHS(O)₂R^h、

或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代。在其它实施方案中，R⁶为OH、OR^a、NR^bR^c、-NR^bC(O)R^a、-C(O)NH(C_1-4烷基)、-C(O)NHPh、-NHC(O)O(C_1-6烷基)、-NHC(O)N(C_1-4烷基)₂、-NHS(O)₂(C_1-4烷基)、

或包含5至6个环原子的杂芳基，其中1至4个环原子各自独立地选自N、N(R^f)、O和S，其中杂芳基被0至3个R^d取代。在其它实施方案中，R⁶独立地选自：OH、OR^a、N(C_1-4烷基)₂、-NR^bC(O)R^a、-C(O)NHPh、-NHC(O)O(C_1-6烷基)、-NHC(O)N(C_1-4烷基)₂、-NHS(O)₂(C_1-4烷基)、

和被0至2个R^d取代的吡唑-1-基。在其它实施方案中，R⁶为OH、OR^a、-NR^bR^c或-C(O)NR^bR^k。在其它实施方案中，R⁶为-NR^bR^c或-C(O)NR^bR^k。

本领域技术人员将认识到，本文所描述的一些化学结构可以通过一种或多种其它共振形式展现在文章中；或可以以一种或多种其它互变异构体形式存在，即使在以动力学方式表示时，技术人员认识到，此类互变异构体形式仅表示此类化合物的样品的极小部分。尽管本文未明确地展现此类共振形式或互变异构体，但此类化合物明显地涵盖在本发明范围内。

本发明的其它方面和实施方案

在一个方面中，用于调节(例如，激动、部分激动、拮抗)NLRP3活性的方法的特征在于包括使NLRP3与本文所描述的化学实体(例如，本文概括或具体描述的化合物或其药学上可接受的盐或含有其的组合物)接触。在优选的实施方案中，用于调节NLRP3活性的方法是激动和部分激动。在某些实施方案中，用于调节NLRP3活性的方法是激动。在某些实施方案中用于调节NLRP3活性的方法是部分激动。方法包括体外方法，例如使包含含有NLRP3的一种或多种细胞(例如，THP-1细胞)的样品与化学实体接触。方法还可以包括体内方法；例如给患有如下疾病的个体(例如人)施用化学实体，其中NLRP3信号传导的增加可以校正先天性免疫活性的缺陷，该先天性免疫活性的缺陷促进疾病(例如，癌症；例如顽固性癌症)的病理和/或症状和/或进展。

在一些实施方案中，本发明化合物可用于治疗如下病症、疾病或障碍，其中NLRP3活性的降低(例如，与抑制或损伤的NLRP3信号传导相关的病症、疾病或障碍)促进个体(例如人)的病症、疾病或障碍(例如，癌症)的病理和/或症状和/或进展。

当癌症对癌症治疗没有响应(或具有抗性)时，称其为是顽固性的。顽固性癌症还称为抗性癌症。

在另一方面中，治疗癌症的方法的特征在于包括给需要此类治疗的个体施用有效量的本文所描述的化学实体(例如，本文概括或具体描述的化合物或其药学上可接受的盐或含有其的组合物)。在一些实施方案中，癌症可以是顽固性癌症。

在另一方面中，治疗如下疾病的方法，其中NLRP3信号传导的增加可以校正先天性免疫活性的缺陷，所述先天性免疫活性的缺陷促进该疾病的病理和/或症状和/或进展，其特征在于包括给需要此类治疗的个体施用有效量的本文所描述的化学实体(例如，本文概括或具体描述的化合物或其药学上可接受的盐或含有其的组合物)。

在另一方面中，治疗方法的特征在于包括给患有如下疾病的个体施用有效量的本文所描述的化学实体(例如，本文概括或具体描述的化合物或其药学上可接受的盐或含有其的组合物)，其中NLRP3信号传导的增加可以校正先天性免疫活性的缺陷，所述先天性免疫活性的缺陷促进该疾病的病理和/或症状和/或进展。

在另一方面中，治疗方法的特征在于包括给个体施用本文所描述的化学实体(例如，本文概括或具体描述的化合物或其药学上可接受的盐或含有其的组合物)，其中化学实体以有效地治疗如下疾病的量施用以治疗该疾病，其中NLRP3信号传导的增加可以校正先天性免疫活性的缺陷，所述先天性免疫活性的缺陷促进该疾病的病理和/或症状和/或进展。

实施方案可以包括以下特征中的一个或多个。

化学实体可以与一种或多种另外的癌症疗法组合施用(例如，手术、放射疗法、化学疗法、毒素疗法、免疫疗法、冷冻疗法或基因疗法或其组合)；例如包括施用一种或多种(例如，两种、三种、四种、五种、六种或更多种)另外抗癌剂的癌症疗法。另外抗癌剂(化学治疗剂)的非限制性实例选自烷化剂(例如，顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、氮芥、环磷酰胺、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、异环磷酰胺(ifosfamide)和/或奥沙利铂(oxaliplatin))；抗代谢物(例如，硫唑嘌呤和/或巯基嘌呤)；萜化合物(例如，长春花生物碱(vinca alkaloid)和/或紫杉烷；例如长春新碱(Vincristine)、长春碱(Vinblastine)、长春瑞宾(Vinorelbine)和/或长春地辛(Vindesine)、泰素(Taxol)、紫杉醇(Paclitaxel)和/或多西他赛(Docetaxel))；拓扑异构酶(例如，I型拓扑异构酶和/或2型拓扑异构酶；例如喜树碱(camptothecin)，例如伊立替康(irinotecan)和/或拓扑替康(topotecan)；安吖啶(amsacrine)、依托泊苷(etoposide)、磷酸依托泊苷和/或替尼泊苷(teniposide))；细胞毒性抗生素(例如，放线菌素、蒽环霉素(anthracycline)、多柔比星、柔红霉素、伐柔比星(valrubicin)、伊达比星、表柔比星(epirubicin)、博莱霉素(bleomycin)、普卡霉素(plicamycin)和/或丝裂霉素(mitomycin))；激素(例如，黄体生成素释放激素激动剂；例如亮丙瑞林(leuprolidine)、戈舍瑞林(goserelin)、曲普瑞林(triptorelin)、组胺瑞林(histrelin)、比卡鲁胺(bicalutamide)、氟他胺(flutamide)和/或尼鲁米特)；抗体(例如，阿昔单抗(Abciximab)、阿达木单抗(Adalimumab)、阿仑单抗(Alemtuzumab)、阿利珠单抗(Atlizumab)、巴利昔单抗(Basiliximab)、贝利木单抗(Belimumab)、贝伐珠单抗(Bevacizumab)、本妥昔单抗(Brentuximab vedotin)、康纳单抗(Canakinumab)、西妥昔单抗(Cetuximab)、培舍珠单抗(Certolizumab pegol)、达克珠单抗(Daclizumab)、地舒单抗(Denosumab)、依库珠单抗(Eculizumab)、艾法珠单抗(Efalizumab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、戈利木单抗(Golimumab)、替伊莫单抗(Ibritumomab tiuxetan)、英利昔单抗(Infliximab)、伊匹木单抗(Ipilimumab)、莫罗单抗(Muromonab)-CD3、那他珠单抗(Natalizumab)、奥伐木单抗(Ofatumumab)、奥马珠单抗(Omalizumab)、帕利珠单抗(Palivizumab)、帕尼单抗(Panitumuab)、雷珠单抗(Ranibizumab)、利妥昔单抗(Rituximab)、妥珠单抗(Tocilizumab)、托西莫单抗(Tositumomab)和/或曲妥珠单抗(Trastuzumab))；抗血管生成剂；细胞因子；血栓形成剂；生长抑制剂；抗蠕虫剂；和靶向选自以下的免疫检查点受体的免疫检查点抑制剂：CTLA-4、PD-1、PD-L1、PD-1-PD-L1、PD-1-PD-L2、T细胞免疫球蛋白和粘蛋白3(TIM3或HAVCR2)、半乳凝素9-TIM3、磷脂酰丝氨酸-TIM3、淋巴细胞活化基因3蛋白(LAG3)、II类MHC-LAG3、4-1BB-4-1BB配体、OX40-OX40配体、GITR、GITR配体-GITR、CD27、CD70-CD27、TNFRSF25、TNFRSF25-TL1A、CD40L、CD40-CD40配体、HVEM-LIGHT-LTA、HVEM、HVEM-BTLA、HVEM-CD160、HVEM-LIGHT、HVEM-BTLA-CD160、CD80、CD80-PDL-1、PDL2-CD80、CD244、CD48-CD244、CD244、ICOS、ICOS-ICOS配体、B7-H3、B7-H4、VISTA、TMIGD2、HHLA2-TMIGD2、嗜乳脂蛋白包括BTNL2、Siglec家族、TIGIT和PVR家族成员、KIR、ILT和LIR、NKG2D和NKG2A、MICA和MICB、CD244、CD28、CD86-CD28、CD86-CTLA、CD80-CD28、磷脂酰丝氨酸、TIM3、磷脂酰丝氨酸-TIM3、SIRPA-CD47、VEGF、神经毡蛋白、CD160、CD30和CD155(例如，CTLA-4或PD1或PD-L1)以及其它免疫调节剂，例如白介素-2(IL-2)、吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO)、IL-10、转化生长因子-β(TGFβ)、CD39、CD73腺苷-CD39-CD73和CXCR4-CXCL12。

个体可以患有癌症；例如个体已经历和/或正经历和/或将经历一种或多种癌症疗法。

癌症的非限制性实例包括急性髓性白血病、肾上腺皮质癌、卡波西氏肉瘤(Kaposisarcoma)、淋巴瘤、肛门癌、阑尾癌、畸胎样/横纹肌样肿瘤、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑癌、乳腺癌、支气管肿瘤、类癌肿瘤、心脏肿瘤、宫颈癌、脊索瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性骨髓增生性肿瘤、结肠癌、结肠直肠癌、颅咽管瘤、胆管癌、子宫内膜癌、室管膜瘤、食管癌、成感觉神经细胞瘤(esthesioneuroblastoma)、尤因肉瘤(Ewing sarcoma)、眼癌、输卵管癌、胆囊癌、胃肠道类癌肿瘤、胃肠道基质肿瘤、胚细胞肿瘤、多毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝癌、下咽癌(hypopharngeal cancer)、胰腺癌、肾癌、喉癌、慢性髓性白血病、唇和口腔癌、肺癌、黑素瘤、梅克尔(Merkel)细胞癌、间皮瘤、口腔癌(mouth cancer)、口癌(oralcancer)、骨肉瘤、卵巢癌、阴茎癌、咽癌、前列腺癌、直肠癌、唾液腺癌、皮肤癌、小肠癌、软组织肉瘤、睾丸癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、阴道癌和外阴癌。

在其它实施方案中，哺乳动物已经鉴别为患有癌症或感染性疾病。代表性的感染性疾病包括但不限于不动杆菌感染(Acinobacter infection)、放线菌病(actinomycosis)、非洲昏睡病(African sleeping sickness)、获得性免疫缺陷综合症(acquired immunodeficiency syndrome)、阿米巴病(amebiasis)、边虫病(anaplasmosis)、炭疽病(anthrax)、溶血隐秘杆菌感染(Arcanobacterium haemolyticuminfection)、阿根廷出血热(Argentine hemorrhagic fever)、蛔虫病(ascariasis)、曲霉病(aspergillosis)、星状病毒感染(astrovirus infection)、巴贝虫病(babesiosis)、蜡样芽孢杆菌感染(Bacillus cereus infection)、细菌性肺炎(bacterial pneumonia)、细菌性阴道病(bacterial vaginosis)、拟杆菌感染(Bacteroides infection)、小袋纤毛虫病(balantidiasis)、贝蛔虫感染(Baylisascaris infection)、BK病毒感染、黑色毛结节菌病(black piedra)、人芽囊原虫感染(Blastocystic hominis infection)、芽生菌病(blastomycosis)、玻利维亚出血热(Bolivian hemorrhagic fever)、肉毒中毒(botulism)、巴西出血热(Brazilian hemorrhagic fever)、普鲁斯病(brucellosis)、淋巴腺鼠疫(bubonic plaque)、伯克霍尔德菌感染(Burkholderi infection)、布路里溃疡(Buruli ulcer)、杯状病毒感染(Calicivirus infection)、camptobacteriosis、念珠菌病(candidiasis)、猫抓病(cat-scratch disease)、蜂窝织炎(cellulitis)、查加斯病(Chagas disease)、软下疳(chancroid)、水痘(chickenpox)、屈公热(chikungunya)、衣原体(chlamydia)、肺炎衣原体感染(Chlamydophila pneumoniae infection)、霍乱(cholera)、着色芽生菌病(chromoblastomycosis)、支睾吸虫病(clonorchiasis)、艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection)、球孢子菌病(coccidioidomycosis)、科罗拉多壁虱热(Colorado tick fever)、普通感冒(common cold)、克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease)、克里米亚-冈果(Crimean-Congo)出血热、隐球菌病(crytococcosis)、隐孢子虫病(cryptosporidiosis)、皮肤幼虫移行症(cutaneous larva migrans)、环孢子虫病(cyclosporiasis)、囊尾蚴病(cysticercosis)、巨细病毒感染(cytomegalovirusinfection)、登革热(dengue fever)、链带藻感染(Desmodesmus infection)、deintamoebiasis、白喉(diphtheria)、裂头绦虫病(diphyllobothriasis)、麦地那龙线虫(dracunculiasis)、埃博拉出血热(ebola hemorrhagic fever)、包虫病(echinococcosis)、埃里希体病(ehrlichiosis)、蛲虫病(enterobiasis)、肠球菌(Enterococcus)感染、肠病毒(Enterovirus)感染、流行性斑疹伤寒(epidemic typhus)、红斑感染(erythema infection)、猝发疹(exanthema subitum)、布氏姜片虫病(fasciolopsiasis)、片吸虫病(fasciolosis)、致命性家族失眠症(fatal familialinsomnia)、丝虫病(filariasis)、由肌坏死梭状芽孢杆菌(Clostridium myonecrosis)引起的食物中毒、自由生活阿米巴感染(free-living amebic infection)、梭杆菌感染(Fusobacterium infection)、气性坏疽(gas gangrene)、地丝菌病(geotrichosis)、

综合征、贾第虫病(giardiasis)、鼻疽病(glanders)、腭口线虫病(gnathostomiasis)、淋病(gonorrhea)、腹股沟肉芽肿(granuloma inguinale)、A组链球菌感染(Group A streptococcal infection)、B组链球菌感染(Group B streptococcalinfection)、流感嗜血杆菌感染(Haemophilus influenzae infection)、手足口病(handfoot and mouth disease)、汉坦病毒肺综合征(hantavirus pulmonary syndrome)、Heartland病毒病、幽门螺旋杆菌感染(Heliobacter pylori infection)、溶血性尿毒症综合征(hemolytic-uremic syndrome)、肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renalsyndrome)、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、单纯疱疹(herpessimplex)、组织胞浆菌病(histoplasmosis)、钩虫传染(hookworm infection)、人博卡病毒感染(human bocavirus infection)、人伊氏埃里希体病(human ewingii ehrlichiosis)、人粒细胞边虫病(human granulocyte anaplasmosis)、人偏肺病毒感染(humanmetapneuomovirus infection)、人单核细胞埃里希体病(human monocyticehrlichiosis)、人乳头状瘤病毒感染(human papillomavirus infection)、人副流感病毒感染(human parainfluenza virus infection)、膜壳绦虫病(hymenolepiasis)、EB病毒传染性单核细胞增多症(Epstein-Barr virus infectious mononucleosis)、流感(influenza)、等孢球虫病(isosporiasis)、川崎病(Kawasaki disease)、角膜炎(keratitis)、金氏金氏菌(Kingella kingae)感染、库鲁病(kuru)、拉沙热(lassa fever)、军团菌病(Legionnaires’disease)、庞蒂亚克热(Pontiac fever)、利什曼病(leishmaniasis)、麻风病(leprosy)、钩端螺旋体病(leptospirosis)、李斯特氏菌病(listeriosis)、莱姆病(lyme disease)、淋巴丝虫病(lymphatic filariasis)、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎(lymphocytic choriomeningitis)、疟疾(malaria)、Marburg出血热、麻疹(measles)、中东呼吸综合征(Middle East respiratory syndrome)、类鼻疽(melioidosis)、脑膜炎(meningitis)、脑膜炎球菌病(meningococcal disease)、后殖吸虫病(metagonimiasis)、微孢子虫病(microsporidiosis)、传染性软疣(molluscumcontagiosum)、猴痘(monkeypox)、腮腺炎(mumps)、鼠型斑疹伤寒(murine typhus)、支原体肺炎(mycoplasma pneumonia)、足分枝菌病(mycetoma)、蝇蛆病(myiasis)、新生儿结膜炎(neonatal conjunctivitis)、变异型克雅病(variant Creutzfeldt-Jakob disease)、诺卡菌病(nocardiosis)、盘尾丝虫病(onchocerciasis)、副球孢子菌病(paracoccidioidomycosis)、并殖吸虫病(paragonimiasis)、巴氏杆菌病(pasteurellosis)、头虱病(pediculosis capitis)、体虱病(pediculosis corporis)、阴虱病(pediculosis pubis)、盆腔炎(pelvic inflammatory disease)、百日咳(pertussis)、瘟疫(plague)、肺炎(pneumonia)、脊髓灰质炎(poliomyelitis)、普雷沃菌感染(Prevotella infection)、原发性阿米巴脑膜脑炎(primary amoebicmeningoencephalitis)、进行性多病灶脑白质病(progressive multifocalleukoencephalopathy)、鹦鹉热(psittacosis)、Q热(Q fever)、狂犬病(rabies)、回归热(relapsing fever)、呼吸道合胞病毒感染(respiratory syncytial virus infection)、鼻孢子虫病(rhinosporidiosis)、鼻病毒感染(rhinovirus infection)、立克次氏体感染(rickettsial infection)、立克次氏体痘(rickettsialpox)、裂谷热(Rift ValleyFever)、落基山斑疹热(Rocky Mountain spotted fever)、轮状病毒感染(rotavirusinfection)、风疹(rubella)、沙门氏菌病(salmonellosis)、严重急性呼吸道综合征(severe acute respiratory syndrome)、疥疮(scabies)、血吸虫病(schistosomiasis)、脓毒症(sepsis)、志贺氏菌病(shigellosis)、带状疱疹(shingles)、天花(smallpox)、孢子丝菌病(sporothrichosis)、葡萄球菌食物中毒(staphylococcal food poisoning)、葡萄球菌感染(staphylococcal infection)、葡萄球菌感染(staphylococcal infection)、类圆线虫病(strongyloidiasis)、亚急性硬化性全脑炎(subacute sclerosingpanencephalitis)、梅毒(syphilis)、绦虫病(taeniasis)、破伤风(tetanus)、须癣(tineabarabe)、头癣(tinea capitis)、体癣(tinea corporis)、股癣(tinea cruris)、手癣(tinea manum)、黑癣(tinea nigra)、足癣(tinea pedis)、甲癣(tinea unguium)、花斑癣(tinea versicolor)、弓蛔虫病(toxocariasis)、沙眼(trachoma)、弓形虫病(toxoplasmosis)、旋毛虫病(trichinosis)、滴虫病(trichomoniasis)、鞭虫病(trichuriasis)、肺结核(tuberculosis)、土拉菌病(tularemia)、伤寒热(typhoidfever)、解脲支原体感染(Ureaplasma urealyticum infection)、溪谷热(valley fever)、委内瑞拉出血热(Venezuelan hemorrhagic fever)、病毒性肺炎(viral pneumonia)、西尼罗热(West Nile fever)、白毛结节菌病(white piedra)、假结核耶尔森氏菌(Yersiniapseudotuberculosis)感染、耶尔森菌病(yersiniosis)、黄热病(yellow fever)和接合菌病(zygomycosis)。

可以瘤内施用化学实体。

可以全身(包括但不限于口服、皮下、肌内、静脉内)施用化学实体。

所述方法可以进一步包括鉴别个体。

其它实施方案包括描述于详细描述和/或权利要求中的实施方案。

定义

为便于理解本文所阐述的本公开，下文定义一些其它术语。一般而言，本文所使用的命名法和本文所描述的有机化学、药物化学和药理学中的实验室方法是本领域公知的并且通常用于本领域中。除非另外规定，否则本文所用的所有技术和科学术语一般具有与本公开所属领域的普通技术人员通常所理解相同的含义。

除非本文另外明确说明，否则所涉及的单数形式还可以包括复数形式。例如，不加限定的术语可指一个，或者一个或多个。

除非另有指示，否则假定具有未满足价的任一杂原子具有足以满足该价的氢原子。

出于清楚的目的并且根据本领域中的标准约定，符号

在式和表中用于显示该键为该部分或取代基连至该结构的核心/核的连接点。

另外，出于清楚的目的，在取代基具有不位于两个字母或符号之间的短划线(-)的情况下，此用于指示取代基的连接点。例如，-OCH₃通过氧原子连接。

如本文所使用，术语“NLRP3”意指包括但不限于核酸、聚核苷酸、寡核苷酸、正义和反义多核苷酸链、互补序列、肽、多肽、蛋白质、同源和/或直系同源NLRP3分子、同工型、前体、突变体、变体、衍生物、剪接变体、等位基因、不同物种及其活性片段。

NLRP3的“激动剂”包括例如通过活化、稳定化、改变分布或以其它方式在蛋白质水平直接结合或修饰NLRP3而使得NLRP3活性增加的化合物。

与NLRP3完全激动剂相比在更小程度上激动NLRP3的本文所描述的某些化合物可以在测定中用作拮抗剂以及激动剂。这些化合物拮抗由NLRP3完全激动剂导致的NLRP3的活化，因为其防止NLRP3相互作用的完全作用。然而，所述化合物自身还活化一些NLRP3活性，通常小于NLRP3完全激动剂的对应量。此类化合物可以称作“NLRP3的部分激动剂”。

在一些实施方案中，本文所描述的化合物是NLRP3的激动剂(例如，完全激动剂)。在其它实施方案中，本文所描述的化合物是NLRP3的部分激动剂。

通常，受体以活性(Ra)和非活性(Ri)构象存在。影响受体的某些化合物可以改变Ra与Ri(Ra/Ri)的比。例如，完全激动剂增加Ra/Ri的比并且可以引起“最大”饱和作用。当结合于受体时，部分激动剂产生低于由完全激动剂(例如，内源性激动剂)引发的响应的响应。因此，部分激动剂的Ra/Ri小于完全激动剂的Ra/Ri。然而，部分激动剂的效能可以大于或小于完全激动剂的效能。

如本文所使用，关于制剂、组合物或成分的术语“可接受”意指对所治疗的个体的整体健康不具有持续有害作用。

“API”是指活性药物成分。

如本文所使用，术语“有效量”或“治疗有效量”是指所施用的化学实体(例如，展现作为线粒体解偶剂活性的化合物或其药学上可接受的盐和/或水合物和/或共晶；例如化合物，例如氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和/或水合物和/或共晶；例如化合物，例如氯硝柳胺类似物或其药学上可接受的盐和/或水合物和/或共晶)的足够量，其将在一定程度上缓解所治疗的疾病或病症的症状中的一种或多种。结果包括减轻和/或缓解疾病的病征、症状或病因，或生物系统的任何其它所需改变。例如，用于治疗用途的“有效量”是使疾病症状在临床上显著减轻所需的包含如本文所公开的化合物的组合物的量。可使用例如剂量递增研究的任何适合技术测定任何个别情况下的适当“有效”量。

术语“赋形剂”或“药学上可接受的赋形剂”意指药学上可接受的物质、组合物或介质，例如液体或固体填充剂、稀释剂、载体、溶剂或包囊物质。在一个实施方案中，各组分在以下意义上为“药学上可接受的”：与药物制剂的其它成分相容并且适用于与人和动物的组织或器官接触而无过度毒性、刺激、变态反应、免疫原性或其它问题或并发症，与合理益处/风险比相匹配。参见例如Remington:The Science and Practice of Pharmacy,第22版,Pharmaceutical Press,London,UK(2012)；Handbook of Pharmaceutical Excipients,第6版；Rowe等人编；The Pharmaceutical Press and the American PharmaceuticalAssociation:(2009)；Handbook of Pharmaceutical Additives,第3版；Ash和Ash编；Gower Publishing Company:(2007)；Pharmaceutical Preformulation andFormulation,第2版；Gibson编；CRC Press LLC:Boca Raton,FL,(2009)。

术语“药学上可接受的盐”是指不对其所施用的生物体产生显著刺激并且不消除化合物的生物活性和特性的化合物的制剂。在某些情况下，药学上可接受的盐通过使本文所描述的化合物与例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等的酸反应而获得。在一些情况下，药学上可接受的盐通过使本文所描述的具有酸性基团的化合物与碱反应以形成盐或通过预先确定的其它方法来获得，所述盐例如铵盐；碱金属盐，例如钠盐或钾盐；碱土金属盐，例如钙盐或镁盐；有机碱的盐，例如二环己胺、N-甲基-D-葡糖胺；三(羟基甲基)甲胺；以及与氨基酸例如精氨酸、赖氨酸等的盐。药理学上可接受的盐不受特定限制，只要其可用于药物即可。本文所描述的化合物与碱形成的盐的实例包括以下：其与无机碱例如钠、钾、镁、钙和铝的盐；其与有机碱例如甲胺、乙胺和乙醇胺的盐；其与碱性氨基酸例如赖氨酸和鸟氨酸的盐；以及铵盐。盐可以是酸加成盐，其通过使用以下酸的酸加成盐来特别示例：无机酸，例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸和磷酸；有机酸，例如甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸和乙磺酸；酸性氨基酸，例如天冬氨酸和谷氨酸。

术语“药物组合物”是指本文所描述的化合物与其它化学组分(在本文中通称为“赋形剂”)例如载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、混悬剂和/或增稠剂的混合物。药物组合物有助于给生物体施用化合物。本领域中存在多种施用化合物的技术，其包括但不限于：经直肠、口服、静脉内、气雾剂、非肠道、经眼、经肺和局部施用。

术语“个体”是指动物，包括但不限于灵长类动物(例如人)、猴、牛、猪、绵羊、山羊、马、犬、猫、兔、大鼠或小鼠。术语“个体”和“患者”在本文中关于例如哺乳动物个体(例如人)时可互换使用。

在治疗疾病或障碍的情况下，术语“治疗(treat/treating/treatment)”意指包括缓解或消除障碍、疾病或病症或与该障碍、疾病或病症有关的症状中的一种或多种；或减缓疾病、障碍或病症或者其一种或多种症状的进展、扩散或恶化。“癌症治疗”是指以下作用中的一个或多个：(1)在一定程度上抑制肿瘤生长，包括(i)减缓和(ii)完全的生长阻止；(2)减少肿瘤细胞数目；(3)维持肿瘤尺寸；(4)减小肿瘤尺寸；(5)抑制，包括(i)减少、(ii)减缓或(iii)完全防止肿瘤细胞浸润至周边器官中；(6)抑制，包括(i)减少、(ii)减缓或(iii)完全防止转移；(7)增强抗肿瘤免疫响应，其可以(i)维持肿瘤尺寸，(ii)减小肿瘤尺寸，(iii)减缓肿瘤生长，(iv)减少、减缓或防止侵袭和/或(8)在一定程度上减轻与障碍相关的一种或多种症状的严重性或数目。

术语“卤素”是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)。

术语“烷基”是指含有指定数目的碳原子的可以是直链或支链的烃链。例如，C_1-10表示基团中可以具有1至10个(包括端点)碳原子。非限制性实例包括甲基、乙基、异丙基、叔丁基、正己基。

术语“亚烷基”是指支链或非支链二价烷基(例如，-CH₂-)。

术语“卤代烷基”是指一个或多个氢原子被独立选择的卤素替换的烷基。

术语“烷氧基”是指-O-烷基(例如，-OCH₃)。

术语“卤代烷氧基”是指具有指定数目的碳原子通过氧桥连接的如上文所定义的-O-卤代烷基。例如，“C_1-6卤代烷氧基”旨在包括C₁、C₂、C₃、C₄、C₅和C₆卤代烷氧基。卤代烷氧基的实例包括(但不限于)三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基和五氟乙氧基。

术语“烯基”是指具有一个或多个碳-碳双键的可以是直链或支链的烃链。烯基部分含有指定数目的碳原子。例如，C_2-6指示基团中可以具有2至6个(包括端点)碳原子。

术语“炔基”是指具有一个或多个碳-碳三键的可以是直链或支链的烃链。炔基部分含有指定数目的碳原子。例如，C_2-6指示基团中可以具有2至6个(包括端点)碳原子。

术语“芳族”通常是指包括共振稳定的4n+2个π电子的环状数组的环，其中n是整数(例如1或2)。芳族部分包括芳基和杂芳基。术语“非芳族”描述不属于“芳族”定义的任何部分。

术语“芳基”是指6-碳单环、10-碳双环或14-碳三环芳族环系，其中各环的0、1、2、3或4个原子可以被取代基取代，并且其中包含单环基团的环是芳族的并且其中包含双环或三环基团的稠环中的至少一个是芳族的，例如四氢萘基。芳基的实例还包括苯基、萘基等。

如本文所使用，术语“环烷基”包括具有3至10个碳、优选3至8个碳并且更优选3至6个碳的饱和环烃基团，其中环烷基可以任选被取代。优选的环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基和环辛基。如本文所使用，术语“亚环烷基”是指二价环烷基。

“杂芳基”是指芳族5-8元单环、8-12元双环或11-14元三环环系，其若为单环，则具有1-3个杂原子，若为双环，则具有1-6个杂原子，或若为三环，则具有1-9个杂原子，所述杂原子选自O、N或S(例如，若分别为单环、双环或三环，则碳原子和1-3、1-6或1-9个N、O或S的杂原子)，其中各环的0、1、2、3或4个原子可以被取代基取代，并且其中包含单环基团的环是芳族的并且其中包含双环或三环基团的稠环中至少一个是芳族的(但不一定必须为含有杂原子的环)，例如四氢异喹啉基。杂芳基的实例还包括吡啶基、呋喃基(furyl/furanyl)、咪唑基、苯并咪唑基、嘧啶基、噻吩基(thiophenyl/thienyl)、喹啉基、吲哚基、噻唑基等。

术语“杂环基”是指非芳族5-8元单环、7-12元双环或桥环或者11-14元三环环系，其若为单环，则具有1-3个杂原子，若为双环、螺环或桥环，则具有1-6个杂原子，或若为三环，则具有1-9个杂原子，所述杂原子选自O、N或S(例如，若分别为单环、双环或三环，则碳原子和1-3、1-6或1-9个N、O或S的杂原子)，其中各环的0、1、2或3个原子可以被取代基取代。杂环基的实例包括哌嗪基、吡咯烷基、二

烷基、吗啉基、四氢呋喃基等。术语“亚杂环烷基”是指二价杂环基。

另外，构成本发明实施方案的化合物的原子旨在包括此类原子的所有同位素形式。如本文所使用，同位素包括具有相同原子数、但不同质量数的那些原子。通常的实例(但不限于此)是，氢同位素包括氚和氘，并且碳同位素包括¹³C和¹⁴C。

本发明的一个或多个实施方案的详情阐述于以下所附的图和描述中。本发明的其它特征和优势将自本说明书和附图以及权利要求显而易见。

本公开的特征在于调节(例如，激动或部分激动)NLRP3的化学实体(例如，化合物或该化合物的药学上可接受的盐和/或水合物和/或共晶和/或药物组合)，所述化学实体例如可用于治疗如下病症、疾病或障碍(例如，与不足的免疫响应相关的病症、疾病或障碍)，其中NLRP3信号传导的增加可以校正先天性免疫活性的缺陷，该先天性免疫活性的缺陷促进个体(例如人)的该病症、疾病或障碍(例如，癌症)的病理和/或症状和/或进展。本公开的特征还在于组合物以及使用和制备其的其它方法。

药物组合物和施用

在一些实施方案中，化学实体(例如，调节(例如，激动或部分激动)NLRP3的化合物或其药学上可接受的盐和/或水合物和/或共晶和/或药物组合)作为药物组合物施用，该药物组合物包含所述化学实体和一种或多种药学上可接受的赋形剂以及任选的如本文所描述的一种或多种另外的治疗剂。

在一些实施方案中，药物组合物包含本发明化合物或其盐，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。在某些实施方案中，药物组合物包含本发明化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。在某些实施方案中，药物组合物包含治疗有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。

在一些实施方案中，化学实体可以与一种或多种常规药物赋形剂组合施用。药学上可接受的赋形剂包括但不限于离子交换剂；氧化铝；硬脂酸铝；卵磷脂；自乳化药物递送系统(SEDDS)，例如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯；在药物剂型中使用的表面活性剂，例如Tweens、泊洛沙姆(poloxamer)或其它类似的聚合物递送基质；血清蛋白质，例如人血清白蛋白；缓冲物质，例如磷酸盐、tris、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾；饱和植物性脂肪酸的部分甘油酯混合物；水、盐或电解液，例如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠；锌盐；胶态二氧化硅；三硅酸镁；聚乙烯吡咯烷酮；基于纤维素的物质；聚乙二醇；羧甲基纤维素钠；聚丙烯酸酯；蜡；聚乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物和羊毛脂。环糊精例如α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精，或化学修饰的衍生物例如羟基烷基环糊精，包括2-羟丙基-β-环糊精和3-羟丙基-β-环糊精，或其它溶解的衍生物还可用于增强本文所描述的化合物的递送。可以制备含有范围为0.005％至100％的如本文所描述的化学实体并且其余部分由无毒赋形剂组成的剂型或组合物。预期的组合物可以含有0.001％-100％的本文所提供的化学实体，在一个实施方案中，0.1-95％，在另一个实施方案中75-85％，在另一个实施方案中，20-80％。制备此类剂型的实际方法为本领域技术人员所已知或对于本领域技术人员而言将为显而易见的；例如参见Remington:The Science and Practice of Pharmacy,第22版(Pharmaceutical Press,London,UK.2012)。

施用途径和组合物组分

在一些实施方案中，本文所描述的化学实体或其药物组合物可以通过任何可接受的施用途径施用于有需要的个体。可接受的施用途径包括但不限于口腔内、皮肤、子宫颈内、窦道内(endosinusial)、气管内、经肠、硬膜外、间质、腹部内、动脉内、支气管内、囊内、脑内、脑池内、冠状动脉内、皮内、管内、十二指肠内、硬膜内、表皮内、食道内、胃内、齿龈内、回肠内、淋巴管内、髓内、脑膜内、肌内、卵巢内、腹膜内、前列腺内、肺内、窦内(intrasinal)、脊髓内、滑膜内、睾丸内、鞘内、小管内、瘤内、子宫内、血管内、静脉内、经鼻、鼻胃管、口服、非肠道、经皮、硬膜外(peridural)、经直肠、呼吸道(吸入)、皮下、舌下、粘膜下、局部、经皮、经粘膜、经气管、输尿管、尿道和阴道。在某些实施方案中，优选的施用途径是非肠道(例如，肿瘤内)的。在某些实施方案中，优选的施用途径是全身性的。

组合物可以经配制用于非肠道施用，例如，配制用于通过静脉内、肌内、皮下或甚至腹膜内途径注射。通常，此类组合物可以以可注射剂形式、以液体溶液或混悬液形式制备；还可以制备在注射前在添加液体时适用于制备溶液或混悬液的固体形式；并且制剂还可以乳化。此类制剂的制备将根据本公开为本领域技术人员所已知。

适用于可注射使用的药物形式包括无菌水溶液或分散液；制剂，包括芝麻油、花生油或丙二醇水溶液；以及用于无菌可注射溶液或分散液的临时制备的无菌粉末。在所有情况下，形式必须是无菌的并且必须是流体，达到其可易于注射的程度。其还应当在制备和储存条件下稳定并且必须保存以防例如细菌和真菌的微生物的污染作用。

载体还可以是含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)、其适合混合物和植物油的溶剂或分散介质。例如，可以通过使用包衣例如卵磷脂、通过维持就分散液而言所需粒度以及通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。微生物作用的预防可以通过多种抗细菌剂和抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、酚、山梨酸、硫柳汞等来实现。在多数情况下，将优选包含等渗剂，例如糖或氯化钠。可注射组合物的延长吸收可以通过在组合物中使用延迟吸收剂例如单硬脂酸铝和明胶来实现。

无菌可注射溶液是如下制备：将所需量的活性化合物视需要与上文列举的多种其它成分一起掺入适当溶剂中，随后过滤灭菌。通常，通过将多种灭菌活性成分掺入含有碱性分散介质和来自上文列举的那些的所需其它成分的无菌介质中来制备分散液。在无菌粉末用于制备无菌可注射溶液的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，由其先前无菌过滤溶液产生活性成分加任何另外所需成分的粉末。

肿瘤内注射论述于例如Lammers等人,“Effect of Intratumoral Injection onthe Biodistribution and the Therapeutic Potential of HPMA Copolymer-BasedDrug Delivery Systems”Neoplasia.10:788-795(2006)中。

可作为凝胶、乳膏剂、灌肠剂或经直肠栓剂用于经直肠组合物中的药理学上可接受的赋形剂包括但不限于以下中的任何一种或多种：可可脂甘油酯、合成聚合物例如聚乙烯吡咯烷酮、PEG(如PEG软膏)、甘油、甘油明胶、氢化植物油、泊洛沙姆、多种分子量的聚乙二醇与聚乙二醇凡士林的脂肪酸酯的混合物、无水羊毛脂、鲨鱼肝油、糖精钠、薄荷醇、甜杏仁油、山梨醇、苯甲酸钠、anoxid SBN、香草精油、气雾剂、苯氧基乙醇中的对羟基苯甲酸酯、甲基对氧基苯甲酸钠、丙基对氧基苯甲酸钠、二乙基胺、卡波姆(carbomers)、卡波普(carbopol)、甲基氧基苯甲酸酯、聚乙二醇十六基十八基醚、辛基癸酸椰油酰酯(cocoylcaprylocaprate)、异丙醇、丙二醇、液体石蜡、黄原胶、羧基-偏亚硫酸氢盐、乙二胺四乙酸钠、苯甲酸钠、偏亚硫酸氢钾、葡萄柚籽提取物、甲基磺酰基甲烷(MSM)、乳酸、甘氨酸、维生素例如维生素A和E以及乙酸钾。

在某些实施方案中，可以通过将本文所描述的化学实体与适合的非刺激赋形剂或载体例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡混合来制备栓剂，其在环境温度下是固体但在体温下是液体并且因此在直肠中融化并且释放活性化合物。在其它实施方案中，用于经直肠施用的组合物是灌肠剂形式。

在其它实施方案中，本文所描述的化合物或其药物组合物适用于通过口服施用(例如，固体或液体剂型)局部递送至消化道或胃肠道。

用于口服施用的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，化学实体是与一种或多种药学上可接受的赋形剂例如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或以下混合：a)填充剂或增量剂例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，b)粘合剂例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，c)保湿剂例如甘油，d)崩解剂例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠，e)溶液阻滞剂例如石蜡，f)吸收加速剂例如季铵化合物，g)润湿剂例如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯，h)吸收剂例如高岭土和膨润土，以及i)润滑剂例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠及其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可以包含缓冲剂。还可以使用相似类型的固体组合物作为软填充和硬填充的明胶胶囊中的填充剂，所述胶囊使用赋形剂，例如乳糖(lactose/milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等。

在一个实施方案中，组合物将采取单位剂型例如丸剂或片剂的形式，并且因此除了本文所提供的化学实体以外，组合物可以含有稀释剂例如乳糖、蔗糖、磷酸二钙等；润滑剂例如硬脂酸镁等；和粘合剂例如淀粉、阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷、明胶、纤维素、纤维素衍生物等。在另一种固体剂型中，粉末、造粒(marume)、溶液或混悬液(例如，在碳酸亚丙酯、植物油、PEG、泊洛沙姆124或三酸甘油酯中)囊封于胶囊(明胶或纤维素基胶囊)中。还涵盖其中本文所提供的一种或多种化学实体或另外活性剂以物理方式分离的单位剂型；例如，具有各药物的颗粒的胶囊(或胶囊形式的片剂)；双层片剂；二室凝胶帽等。还涵盖包肠溶包衣或延迟释放口服剂型。

其它生理学上可接受的化合物包括润湿剂、乳化剂、分散剂或特别适用于防止微生物生长或活动的防腐剂。多种防腐剂已众所周知并且包括例如酚和抗坏血酸。

在某些实施方案中，赋形剂是无菌的并且通常不含不希望的物质。这些组合物可以通过常规、众所周知的灭菌技术来灭菌。对于多种口服剂型赋形剂，例如片剂和胶囊，不需要无菌。USP/NF标准通常是足够的。

在某些实施方案中，固体口服剂型可以进一步包含化学上和/或结构上使组合物易于将化学实体递送至胃或下部GI；例如升结肠和/或横结肠和/或远侧结肠和/或小肠的一种或多种组分。示例性的制剂技术描述于例如Filipski,K.J.等人,Current Topics inMedicinal Chemistry,2013,13,776-802中，将其全部内容并入本文作为参考。

实例包括上部GI靶向技术，例如，Accordion Pill(Intec Pharma)、浮动胶囊和能够粘附至粘膜壁的物质。

其它实例包括下部GI靶向技术。针对靶向肠道中的多个区域，数种肠溶/pH反应性包衣和赋形剂是可用的。基于所需药物释放的GI区域来选择，这些材料通常是经设计以在特定pH范围溶解或腐蚀的聚合物。这些材料还起作用以保护酸不稳定药物免遭胃液或限制暴露，在活性成分可能刺激上部GI的情况下(例如，羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯系列、Coateric(聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯)、醋酞纤维素、羟丙基甲基纤维素乙酸琥珀酸酯(hydroxypropyl methylcellulose acetate succinate)、Eudragit系列(甲基丙烯酸-甲基丙烯酸甲酯共聚物)和Marcoat)。其它技术包括对胃肠道中的局部菌群响应的剂型、控压式结肠递送胶囊和脉冲塞囊(Pulsincap)。

眼部组合物可以包括但不限于以下任一者中的一种或多种：粘胶蛋白(例如，羧甲基纤维素、甘油、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇)；稳定剂(例如，普洛尼克(Pluronic)(三嵌段共聚物)、环糊精)；防腐剂(例如，苯扎氯铵(Benzalkonium chloride)、ETDA、SofZia(硼酸、丙二醇、山梨醇和氯化锌；Alcon Laboratories,Inc.)、Purite(稳定的氧氯复合物；Allergan,Inc.))。

局部组合物可以包括软膏剂和乳膏剂。软膏剂是通常基于石蜡脂或其它石油衍生物的半固体制剂。含有所选择活性剂的乳膏剂通常是粘稠液体或半固体乳液，通常是水包油或油包水的。乳膏剂基质通常是水可洗的，并且含有油相、乳化剂和水相。油相，有时还称作“内”相，通常包含石蜡脂和脂肪醇例如十六醇或十八醇；尽管不必需，但水相的体积通常超过油相，并且通常含有保湿剂。乳膏剂制剂中的乳化剂通常是非离子、阴离子、阳离子或两性表面活性剂。如同其它载体或介质，软膏剂基质应为惰性、稳定、无刺激性并且不敏感的。

在前述实施方案中的任一个中，本文所描述的药物组合物可以包含以下中的一种或多种：脂质、双层间交联多层囊泡、生物可降解聚(D,L-乳酸-共-乙醇酸)[PLGA]基或基于聚酐的纳米颗粒或微米颗粒，以及纳米多孔颗粒负载型脂质双层。

剂量

剂量可以取决于患者需求、所治疗病状的严重性和所采用的特定化合物而不同。针对特定情况的适当剂量可由医学领域的技术人员来确定。每日总剂量可以划分为多份并且全天内数份施用或通过提供连续递送的手段施用。

在一些实施方案中，本文所描述的化合物的施用剂量是约0.001mg/Kg至约500mg/Kg(例如，约0.001mg/Kg至约200mg/Kg；约0.01mg/Kg至约200mg/Kg；约0.01mg/Kg至约150mg/Kg；约0.01mg/Kg至约100mg/Kg；约0.01mg/Kg至约50mg/Kg；约0.01mg/Kg至约10mg/Kg；约0.01mg/Kg至约5mg/Kg；约0.01mg/Kg至约1mg/Kg；约0.01mg/Kg至约0.5mg/Kg；约0.01mg/Kg至约0.1mg/Kg；约0.1mg/Kg至约200mg/Kg；约0.1mg/Kg至约150mg/Kg；约0.1mg/Kg至约100mg/Kg；约0.1mg/Kg至约50mg/Kg；约0.1mg/Kg至约10mg/Kg；约0.1mg/Kg至约5mg/Kg；约0.1mg/Kg至约1mg/Kg；约0.1mg/Kg至约0.5mg/Kg)。

给药方案

前述剂量可以基于每天施用(例如，作为单次剂量或作为两次或更多次的分次剂量)或非每日施用(例如，每隔一天、每两天、每三天、每周一次、每周两次、每两周一次、每月一次)。

在一些实施方案中，本文中所描述的化合物的施用时段是持续1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长时间。在另一个实施方案中，停止施用的时段是持续1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长时间。在一个实施方案中，在一时间段里向个人施用治疗性化合物，随后为一独立的时间段。在另一个实施方案中，在第一时段和第一时段后的第二时段里施用治疗性化合物，其中在第二时段期间施用停止，随后为开始施用治疗性化合物的第三时段，并且接着在第三时段后为停止施用的第四时段。在此实施方案的一方面中，治疗化合物的施用时段后为停止施用的时段，将该过程重复确定的或不确定的时间段。在另一个实施方案中，施用时段是持续1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长时间。在另一个实施方案中，停止施用的时段是持续1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长时间。

治疗方法

在一些实施方案中，提供用于治疗患有如下病症、疾病或障碍(例如，与不足的免疫响应相关的病症、疾病或障碍)的个体的方法，其中NLRP3信号传导的增加可以校正先天性免疫活性的缺陷，该先天性免疫活性的缺陷促进病症、疾病或障碍(例如，癌症)的病理和/或症状和/或进展。

适应证

在本文所描述的任一方法中，个体可以患有癌症。在本文所描述的任一方法的一些实例中，哺乳动物已经鉴别为患有癌症或已经诊断为患有癌症。

癌症的非限制性实例包括：急性髓性白血病、肾上腺皮质癌、卡波西肉瘤、淋巴瘤、肛门癌、阑尾癌、畸胎样/横纹肌样肿瘤、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑癌、乳腺癌、支气管肿瘤、类癌肿瘤、心脏肿瘤、宫颈癌、脊索瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性骨髓增生性肿瘤、结肠癌、结肠直肠癌、颅咽管瘤、胆管癌、子宫内膜癌、室管膜瘤、食管癌、成感觉神经细胞瘤、尤因肉瘤、眼癌、输卵管癌、胆囊癌、胃肠道类癌肿瘤、胃肠道基质肿瘤、胚细胞肿瘤、多毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝癌、下咽癌、胰腺癌、肾癌、喉癌、慢性髓性白血病、唇和口腔癌、肺癌、黑素瘤、梅克尔细胞癌、间皮瘤、口腔癌、口癌、骨肉瘤、卵巢癌、阴茎癌、咽癌、前列腺癌、直肠癌、唾液腺癌、皮肤癌、小肠癌、软组织肉瘤、睾丸癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、阴道癌和外阴癌。

在某些实施方案中，癌症的非限制性实例包括：乳腺癌、结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、胰腺癌和前列腺癌。

将个体诊断为患有癌症或将哺乳动物鉴别为患有癌症的方法是本领域熟知的。例如，医学专业人员(例如，医师、医师助理或技术员)可以通过观测哺乳动物的癌症的一种或多种症状来诊断哺乳动物的癌症。癌症的症状的非限制性实例包括：疲劳、皮肤下感觉到的肿块或变厚区域、体重变化、黄疸、皮肤变黑或发红、不会愈合的疮、现有痣的变化、肠道或膀胱习惯的变化、持久性咳嗽或呼吸困难、吞咽困难、嘶哑、进食后持久性消化不良或不适、不明原因的持久性肌肉或关节痛、不明原因的持久性发热或盗汗以及不明原因的出血或伤痕。将个体诊断为患有癌症或将个体鉴别为患有癌症的方法可以进一步包括进行一项或多项诊断测试(例如，对活体组织切片或血液样品进行一项或多项诊断测试)。

在本文所描述的任一方法的一些实例中，个体可以是患有癌症的个体、诊断为患有癌症的个体或鉴别为患有癌症的已经对针对癌症的先前施用治疗无响应的个体。用于将个体诊断为患有癌症或将哺乳动物鉴别为患有癌症的诊断测试是本领域中已知的。

在一些实施方案中，提供了用于治疗患有如下病症、疾病或障碍的个体的方法，其中NLRP3信号传导的增加可以校正先天性免疫活性的缺陷(例如，与不足的免疫响应相关的病症、疾病或障碍)，该先天性免疫活性的缺陷促进病症、疾病或障碍(例如，癌症)的病理和/或症状和/或进展。

在一些实施方案中，本发明提供了治疗癌症的方法，其中该癌症可以是不诱发最佳先天性免疫系统响应的任何癌症。

先天性免疫系统是指免疫系统的一部分，其由以抗原非特异性方式对针对生物体的威胁如感染或癌症反应并且刺激适应性的抗原特异性免疫系统的细胞组成。通常，对威胁并且长效保护(＝免疫性)的完全移除需要适应性的抗原特异性免疫系统的活性，而该免疫系统取决于先天性免疫系统的刺激。

在一些实施方案中，本发明提供了治疗病例的方法，癌症基于对T细胞检查点抑制的抗性来选择，其独立于癌症类型并且基于未能对先前T细胞检查点抑制剂疗法有响应，或基于通常对T细胞检查点抑制剂疗法具抗性的癌症类型，例如激素受体阳性乳腺癌、微卫星稳定结肠或直肠癌、胰腺癌和前列腺癌。

在某些其它实施方案中，本发明提供了治疗癌症的方法，其包括本发明的NLPR3激动剂，以治疗具有低CD8+T细胞浸润的非炎症的肿瘤，以增强肿瘤免疫原性并且促进炎性响应。例如，基于证实低CD8+T细胞浸润或CD8+T细胞所产生的基因低表达的活体组织切片结果，组合可以用于治疗实体肿瘤。

对T细胞检查点抑制的抗性，是指根据癌症各自的共识响应标准，例如针对大多数实体肿瘤的RECIST1.1，在疗法6个月内治疗中癌症进展或对疗法缺乏响应。

T细胞浸润是指通过肿瘤活体组织切片样本的免疫组织化学得到的T细胞占所有有核细胞的百分比。

CD8+T细胞浸润是指通过肿瘤活体组织切片样本的免疫组织化学得到的CD8+细胞占所有有核细胞的百分比。

除用于定量活体组织切片样本中的CD8+T细胞的免疫组织化学以外，通过CD8+T细胞产生的基因表达如干扰素-γ可以通过使用例如下一代测序来定量mRNA从而测定，并且告知有关CD8+T细胞浸润。多个研究组正在开发通过mRNA定量技术的免疫组织化学得到低和高CD8+T细胞浸润的阈值，并且将贯穿各癌症以及针对特定癌症的CD8+T细胞浸润谱考虑在内。

在本文所描述的任一方法中，个体可以患有感染性疾病。在本文所描述的任一方法的一些实例中，个体已经鉴别为患有感染性疾病，或已经诊断为患有感染性疾病。例如，感染性疾病可以由细菌、病毒、真菌、寄生虫或分支杆菌引起。

感染性疾病的非限制性实例包括：不动杆菌感染(Acinobacter infection)、放线菌病(actinomycosis)、非洲昏睡病(African sleeping sickness)、获得性免疫缺陷综合症(acquired immunodeficiency syndrome)、阿米巴病(amebiasis)、边虫病(anaplasmosis)、炭疽病(anthrax)、溶血隐秘杆菌感染(Arcanobacterium haemolyticuminfection)、阿根廷出血热(Argentine hemorrhagic fever)、蛔虫病(ascariasis)、曲霉病(aspergillosis)、星状病毒感染(astrovirus infection)、巴贝虫病(babesiosis)、蜡样芽孢杆菌感染(Bacillus cereus infection)、细菌性肺炎(bacterial pneumonia)、细菌性阴道病(bacterial vaginosis)、拟杆菌感染(Bacteroides infection)、小袋纤毛虫病(balantidiasis)、贝蛔虫感染(Baylisascaris infection)、BK病毒感染、黑色毛结节菌病(black piedra)、人芽囊原虫感染(Blastocystic hominis infection)、芽生菌病(blastomycosis)、玻利维亚出血热(Bolivian hemorrhagic fever)、肉毒中毒(botulism)、巴西出血热(Brazilian hemorrhagic fever)、普鲁斯病(brucellosis)、淋巴腺鼠疫(bubonic plaque)、伯克霍尔德菌感染(Burkholderi infection)、布路里溃疡(Buruli ulcer)、杯状病毒感染(Calicivirus infection)、camptobacteriosis、念珠菌病(candidiasis)、猫抓病(cat-scratch disease)、蜂窝织炎(cellulitis)、查加斯病(Chagas disease)、软下疳(chancroid)、水痘(chickenpox)、屈公热(chikungunya)、衣原体(chlamydia)、肺炎衣原体感染(Chlamydophila pneumoniae infection)、霍乱(cholera)、着色芽生菌病(chromoblastomycosis)、支睾吸虫病(clonorchiasis)、艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection)、球孢子菌病(coccidioidomycosis)、科罗拉多壁虱热(Colorado tick fever)、普通感冒(common cold)、克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease)、克里米亚-冈果(Crimean-Congo)出血热、隐球菌病(crytococcosis)、隐孢子虫病(cryptosporidiosis)、皮肤幼虫移行症(cutaneous larva migrans)、环孢子虫病(cyclosporiasis)、囊尾蚴病(cysticercosis)、巨细病毒感染(cytomegalovirusinfection)、登革热(dengue fever)、链带藻感染(Desmodesmus infection)、deintamoebiasis、白喉(diphtheria)、裂头绦虫病(diphyllobothriasis)、麦地那龙线虫(dracunculiasis)、埃博拉出血热(ebola hemorrhagic fever)、包虫病(echinococcosis)、埃里希体病(ehrlichiosis)、蛲虫病(enterobiasis)、肠球菌(Enterococcus)感染、肠病毒(Enterovirus)感染、流行性斑疹伤寒(epidemic typhus)、红斑感染(erythema infection)、猝发疹(exanthema subitum)、布氏姜片虫病(fasciolopsiasis)、片吸虫病(fasciolosis)、致命性家族失眠症(fatal familialinsomnia)、丝虫病(filariasis)、由肌坏死梭状芽孢杆菌(Clostridium myonecrosis)引起的食物中毒、自由生活阿米巴感染(free-living amebic infection)、梭杆菌感染(Fusobacterium infection)、气性坏疽(gas gangrene)、地丝菌病(geotrichosis)、

用于将个体诊断为患有感染性疾病或将个体鉴别为患有感染性疾病的方法是本领域熟知的。例如，医学专业人员(例如，医师、医师助理或技术员)可以通过观测个体的感染性疾病的一种或多种症状来诊断个体的感染性疾病。感染性疾病的症状的非限制性实例包括：发热、腹泻、疲劳和肌肉疼痛。将哺乳动物诊断为患有感染性疾病或将个体鉴别为患有感染性疾病的方法可以进一步包括进行一项或多项诊断测试(例如，对活体组织切片或血液样品进行一项或多项诊断测试)。用于将个体诊断为患有感染性疾病或将个体鉴别为患有感染性疾病的诊断测试是本领域已知的。

组合疗法

本发明涵盖单一疗法方案以及组合疗法方案两者。

在一些实施方案中，本文所描述的方法可以进一步包括施用一种或多种另外的疗法(例如，一种或多种另外的治疗剂和/或一种或多种治疗方案)组合施用本文所描述的化合物。

在某些实施方案中，本文所描述的方法可以进一步包括施用一种或多种另外的癌症疗法。

该一种或多种另外的癌症疗法可以包括但不限于手术、放射疗法、化学疗法、毒素疗法、免疫疗法、冷冻疗法、癌症疫苗(例如，HPV疫苗、乙型肝炎疫苗、Oncophage、Provenge)和基因疗法及其组合。免疫疗法包括但不限于过继细胞疗法、干细胞和/或树突状细胞的衍生、输血、灌洗和/或其它治疗，包括但不限于冷冻肿瘤。

在一些实施方案中，该一种或多种另外的癌症疗法是化学疗法，其可以包括施用一种或多种另外化学治疗剂。

在某些实施方案中，另外的癌症疗法包含(化学治疗剂)免疫调节部分，例如，免疫检查点抑制剂。在这些实施方案中的某些中，免疫检查点抑制剂靶向选自以下的免疫检查点受体：CTLA-4、PD-1、PD-L1、PD-1-PD-L1、PD-1-PD-L2、T细胞免疫球蛋白和粘蛋白3(TIM3或HAVCR2)、半乳凝素9-TIM3、磷脂酰丝氨酸-TIM3、淋巴细胞活化基因3蛋白(LAG3)、II类MHC-LAG3、4-1BB-4-1BB配体、OX40-OX40配体、GITR、GITR配体-GITR、CD27、CD70-CD27、TNFRSF25、TNFRSF25-TL1A、CD40L、CD40-CD40配体、HVEM-LIGHT-LTA、HVEM、HVEM-BTLA、HVEM-CD160、HVEM-LIGHT、HVEM-BTLA-CD160、CD80、CD80-PDL-1、PDL2-CD80、CD244、CD48-CD244、CD244、ICOS、ICOS-ICOS配体、B7-H3、B7-H4、VISTA、TMIGD2、HHLA2-TMIGD2、嗜乳脂蛋白包括BTNL2、Siglec家族、TIGIT和PVR家族成员、KIR、ILT和LIR、NKG2D和NKG2A、MICA和MICB、CD244、CD28、CD86-CD28、CD86-CTLA、CD80-CD28、磷脂酰丝氨酸、TIM3、磷脂酰丝氨酸-TIM3、SIRPA-CD47、VEGF、神经毡蛋白、CD160、CD30和CD155(例如，CTLA-4或PD1或PD-L1)以及其它免疫调节剂，例如白介素-2(IL-2)、吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO)、IL-10、转化生长因子-β(TGFβ)、CD39、CD73腺苷-CD39-CD73和CXCR4-CXCL12。参见例如Postow,M.J.Clin.Oncol.33,1(2015)。

在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂靶向选自以下的免疫检查点受体：CTLA-4、PD-1、PD-L1、PD-1-PD-L1和PD-1-PD-L2。

在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂选自：纳武单抗(nivolumab)(也称为“OPDIVO”；先前命名为5C4、BMS-936558、MDX-1106或ONO-4538)、派姆单抗(pembrolizumab)(也称为“KEYTRUDA”、兰利珠单抗(lambrolizumab)和MK-3475。参见WO 2008/156712)、PDR001(Novartis；参见WO 2015/112900)、MEDI-0680(AstraZeneca；AMP-514；参见WO2012/145493)、西米匹单抗(cemiplimab)(REGN-2810)(Regeneron；参见WO 2015/112800)、JS001(TAIZHOU JUNSHI PHARMA；参见Si-Yang Liu等人,J.Hematol.Oncol.10:136(2017))、BGB-A317(Beigene；参见WO 2015/35606和US 2015/0079109)、INCSHR1210(SHR-1210；Jiangsu Hengrui Medicine；参见WO 2015/085847；Si-Yang Liu等人,J.Hematol.Oncol.10:136(2017))、TSR-042(ANB011；Tesaro Biopharmaceutical；参见WO2014/179664)、GLS-010(WBP3055；Wuxi/Harbin Gloria Pharmaceuticals；参见Si-YangLiu等人,J.Hematol.Oncol.10:136(2017))、AM-0001(Armo)、STI-1110(SorrentoTherapeutics；参见WO 2014/194302)、AGEN2034(Agenus；参见WO 2017/040790)、MGD013(Macrogenics)、IBI308(Innovent；参见WO 2017/024465、WO 2017/025016、WO 2017/132825、WO2017/133540)、BMS-936559(先前为12A4或MDX-1105；参见例如美国专利第7,943,743号和第WO 2013/173223号)、MPDL3280A(还称为RG7446、阿特珠单抗(atezolizumab)和TECENTRIQ；US 8,217,149；还参见Herbst等人(2013)J Clin Oncol 31(增刊):3000)、德瓦鲁单抗(durvalumab)(IMFINZI；MEDI-4736；AstraZeneca；参见WO2011/066389)、阿维鲁单抗(avelumab)(Pfizer；MSB-0010718C；BAVENCIO；参见WO 2013/079174)、STI-1014(Sorrento；参见WO2013/181634)、CX-072(Cytomx；参见WO2016/149201)、KN035(3D Med/Alphamab；参见Zhang等人,Cell Discov.7:3(2017年3月)、LY3300054(Eli Lilly Co.；参见例如WO 2017/034916)、CK-301(CheckpointTherapeutics；参见Gorelik等人,AACR:摘要(Abstract)4606(2016年4月))、优瑞路单抗(urelumab)、PF-05082566、MEDI6469、TRX518、瓦里路单抗(varlilumab)、CP-870893、BMS-986016、MGA271、利瑞路单抗(lirilumab)、IPH2201、埃玛图单抗(emactuzumab)、INCB024360、高伦替布(galunisertib)、尤洛库单抗(ulocuplumab)、BKT140、巴维昔单抗(Bavituximab)、CC-90002、贝伐珠单抗(bevacizumab)、MNRP1685A、伊匹木单抗(ipilimumab)(YERVOY；美国专利第6,984,720号)、MK-1308(Merck)、AGEN-1884(AgenusInc.；WO 2016/196237)和曲美木单抗(tremelimumab)(之前为替西木单抗(ticilimumab)、CP-675,206；AstraZeneca；参见例如WO 2000/037504和Ribas,Update Cancer Ther.2(3):133-39(2007))。

在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂选自：纳武单抗、派姆单抗、JS001、BGB-A317、INCSHR1210、TSR-042、GLS-010、STI-1110、MGD013、IBI308、BMS-936559、阿特珠单抗、德瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、STI-1014、CX-072、KN035、LY3300054、CK-301、优瑞路单抗、PF-05082566、MEDI6469、TRX518、瓦里路单抗、BMS-986016、伊匹木单抗、AGEN-1884和曲美木单抗。

在这些实施方案中的某些中，免疫检查点抑制剂选自：优瑞路单抗、PF-05082566、MEDI6469、TRX518、瓦里路单抗、CP-870893、派姆单抗(PD1)、纳武单抗(PD1)、阿特珠单抗(以前称MPDL3280A)(PDL1)、MEDI4736(PD-L1)、阿维鲁单抗(PD-L1)、PDR001(PD1)、BMS-986016、MGA271、利瑞路单抗、IPH2201、埃玛图单抗、INCB024360、高伦替布、尤洛库单抗、BKT140、巴维昔单抗、CC-90002、贝伐珠单抗和MNRP1685A。

在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂选自：纳武单抗、伊匹木单抗、派姆单抗、阿特珠单抗、德瓦鲁单抗和阿维鲁单抗。

在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂选自：纳武单抗和伊匹木单抗。

在某些实施方案中，另外的抗癌剂(化学治疗剂)是STING激动剂。例如，STING激动剂可以包括环二核苷酸，例如cAMP、cGMP和cGAMP，以及包括以下修饰特征中的一种或多种的修饰的环二核苷酸：(2’-O/3’-O连接的、硫代磷酸酯连接的、腺嘌呤和/或鸟嘌呤类似物、2’-OH修饰(例如，-OCH₃或替代物，例如，-F或N₃))。参见例如WO 2014/189805。

在某些实施方案中，另外的化学治疗剂是烷化剂。如此命名烷化剂是由于其能够在存在于包括但不限于癌细胞的细胞中的条件下烷基化许多亲核官能团。在另一个实施方案中，烷化剂包括但不限于顺铂、卡铂、氮芥、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、异环磷酰胺和/或奥沙利铂。在一个实施方案中，烷化剂可以通过与生物学上重要的分子中的氨基、羧基、巯基和磷酸酯基形成共价键而削弱细胞功能来起作用，或其可以通过修饰细胞DNA来工作。在另一个实施方案中，烷化剂是合成物、半合成物或衍生物。

在某些实施方案中，另外的化学治疗剂是抗代谢物。抗代谢物伪装成DNA的结构单元嘌呤或嘧啶，并且通常在(细胞周期的)“S”期的期间防止所述物质掺入DNA中，停止正常发育和分裂。抗代谢物还可以影响RNA合成。在一个实施方案中，抗代谢物包括但不限于硫唑嘌呤和/或巯基嘌呤。在另一个实施方案中，抗代谢物是合成物、半合成物或衍生物。

在某些实施方案中，另外的化学治疗剂是植物生物碱和/或萜类化合物。这些生物碱来源于植物并且通常通过防止微管功能而阻断细胞分裂。在一个实施方案中，植物生物碱和/或萜类化合物是长春花生物碱、鬼臼毒素(podophyllotoxin)和/或紫杉烷。通常，在细胞周期的M期的期间，长春花生物碱通常与微管蛋白上的特异性位点结合，抑制微管蛋白组装成微管。在一个实施方案中，长春花生物碱衍生自(但不限于)长春花(Madagascarperiwinkle)、长春花(Catharanthus roseus)(以前称为Vinca rosea)。在一个实施方案中，长春花生物碱包括但不限于长春新碱、长春碱、长春瑞宾和/或长春地辛。在一个实施方案中，紫杉烷包括但不限于泰素、紫杉醇和/或多西他赛。在另一个实施方案中，植物生物碱或萜类化合物是合成物、半合成物或衍生物。在另一个实施方案中，鬼臼毒素是(但不限于)依托泊苷和/或替尼泊苷。在一个实施方案中，紫杉烷是(但不限于)多西他赛和/或沃塔紫杉醇(ortataxel)。在一个实施方案中，癌症治疗剂是拓扑异构酶。拓扑异构酶是维持DNA的拓扑结构的必需酶。通过扰乱适当的DNA超螺旋化，I型或II型拓扑异构酶的抑制干扰DNA的转录和复制两者。在另一个实施方案中，拓扑异构酶是(但不限于)I型拓扑异构酶抑制剂或II型拓扑异构酶抑制剂。在一个实施方案中，I型拓扑异构酶抑制剂是(但不限于)喜树碱。在另一个实施方案中，喜树碱是(但不限于)依沙替康(exatecan)、伊立替康、勒托替康(lurtotecan)、拓扑替康、BNP 1350、CKD 602、DB 67(AR67)和/或ST 1481。在一个实施方案中，II型拓扑异构酶抑制剂是(但不限于)表鬼臼毒素。在另一个实施方案中，表鬼臼毒素是(但不限于)安吖啶、依托泊苷、磷酸依托泊苷和/或替尼泊苷。在另一个实施方案中，拓扑异构酶是合成物、半合成物或衍生物，包括自然界中发现的那些，例如(但不限于)表鬼臼毒素，其是天然存在于美国鬼臼(American Mayapple)(盾叶鬼臼(Podophyllum peltatum))的根中的物质。

在某些实施方案中，另外的化学治疗剂是芪类化合物(stilbenoid)。在另一个实施方案中，芪类包括但不限于白藜芦醇(Resveratrol)、四羟反式芪(Piceatannol)、赤松素(Pinosylvin)、蝶芪(Pterostilbene)、α-葡萄素(Alpha-Viniferin)、白蔹素A(AmpelopsinA)、白蔹素E、Diptoindonesin C、Diptoindonesin F、ε-葡萄素、Flexuosol A、买麻藤素(Gnetin)H、Hemsleyanol D、霍毕酚(Hopeaphenol)、Trans-Diptoindonesin B、葡萄糖苷(Astringin)、云杉新苷(Piceid)和Diptoindonesin A。在另一个实施方案中，芪类化合物是合成物、半合成物或衍生物。

在某些实施方案中，另外的化学治疗剂是细胞毒性抗生素。在一个实施方案中，细胞毒性抗生素是(但不限于)放线菌素、蒽二酮、蒽环霉素、沙立度胺、二氯乙酸、烟酸、2-脱氧葡萄糖和/或氯苯吩嗪。在一个实施方案中，放线菌素是(但不限于)放线菌素D、杆菌肽、可利斯汀(colistin)(多粘菌素E)和/或多粘菌素B。在另一个实施方案中，蒽二酮是(但不限于)米托蒽醌(mitoxantrone)和/或匹蒽醌(pixantrone)。在另一个实施方案中，蒽环霉素是(但不限于)博莱霉素、多柔比星(阿德力霉素(Adriamycin))、柔红霉素(道诺霉素)、表柔比星、伊达比星、丝裂霉素、普卡霉素和/或伐柔比星。在另一个实施方案中，细胞毒性抗生素是合成物、半合成物或衍生物。

在某些实施方案中，另外的化学治疗剂选自内皮生长抑素、血管生成素、血管生长抑素、趋化因子、血管抑素、血管生长抑素(纤维蛋白溶酶原片段)、基底膜胶原蛋白衍生的抗血管生成因子(肿瘤抑制素、血管能抑制素或抑制蛋白)、抗血管生成抗凝血酶III、信号转导抑制剂、软骨源抑制剂(CDI)、CD59补体片段、纤维结合蛋白片段、gro-β、肝素酶、肝素六醣片段、人绒膜促性腺激素(hCG)、干扰素α/β/γ、干扰素诱导型蛋白质(IP-10)、白介素-12、半光氨酸卷曲区5(纤维蛋白溶酶原片段)、金属蛋白酶抑制剂(TIMP)、2-甲氧雌二醇、胎盘核糖核酸酶抑制剂、纤维蛋白溶酶原活化剂抑制剂、血小板因子-4(PF4)、促乳素16kD片段、增殖蛋白相关蛋白质(PRP)、多种类视黄素、四氢皮质醇-S、血小板反应蛋白-1(TSP-1)、转化生长因子-β(TGF-β)、血管抑制素、血管新生抑制素(钙网蛋白片段)等。

在某些实施方案中，另外的化学治疗剂选自乙酸阿比特龙(abirateroneacetate)、六甲蜜胺(altretamine)、脱水长春花碱(anhydrovinblastine)、奥瑞他汀(auristatin)、贝沙罗汀(bexarotene)、比卡鲁胺(bicalutamide)、BMS 184476、2,3,4,5,6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、博莱霉素、N,N-二甲基-L-缬氨酰基-L-缬氨酰基-N-甲基-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基-1-L-脯氨酸-叔丁基酰胺、恶病质素、西马多丁(cemadotin)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、环磷酰胺、3’,4’-二去氢-4’-脱氧-8’-诺维-长春碱(3’,4’-didehydro-4’-deoxy-8’-norvin-caleukoblastine)、多西紫杉醇(docetaxol)、多西他赛、环磷酰胺、卡铂、卡莫司汀(carmustine)、顺铂、念珠藻环肽(cryptophycin)、环磷酰胺、阿糖胞苷(cytarabine)、达卡巴嗪(dacarbazine)(DTIC)、放线菌素D、柔红霉素、地西他滨、多拉司他汀、多柔比星(亚德利亚霉素)、依托泊苷、5-氟尿嘧啶、非那雄胺(finasteride)、氟他胺(flutamide)、羟基脲(hydroxyurea)和羟基脲紫杉烷(hydroxyureataxanes)、异环磷酰胺、利阿唑(liarozole)、氯尼达明(lonidamine)、洛莫司汀(lomustine)(CCNU)、MDV3100、氮芥(氮芥)、美法仑(melphalan)、羟乙基磺酸米伏布尔(mivobulin isethionate)、根霉素(rhizoxin)、塞尼氟(sertenef)、链佐星(streptozocin)、丝裂霉素、甲氨蝶呤(methotrexate)、紫杉烷、尼鲁米特(nilutamide)、奥那司酮(onapristone)、紫杉醇、泼尼莫司汀(prednimustine)、甲基苄肼(procarbazine)、RPR109881、磷酸斯穆斯汀(stramustine phosphate)、他莫昔芬(tamoxifen)、他索纳明(tasonermin)、泰素、维甲酸(tretinoin)、长春碱、长春新碱、硫酸长春地辛和长春氟宁(vinflunine)。

在某些实施方案中，另外的化学治疗剂是铂、顺铂、卡铂、奥沙利铂、氮芥、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、硫唑嘌呤、巯基嘌呤、长春新碱、长春碱、长春瑞滨、长春地辛、依托泊苷和替尼泊苷、紫杉醇、多西他赛、伊立替康、拓扑替康、安吖啶、依托泊苷、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、5-氟尿嘧啶、甲酰四氢叶酸、甲氨蝶呤、吉西他滨(gemcitabine)、紫杉烷、甲酰四氢叶酸(leucovorin)、丝裂霉素C、喃氟啶-尿嘧啶(tegafur-uracil)、伊达比星、氟达拉滨(fludarabine)、米托蒽醌、异环磷酰胺和多柔比星。另外的活性剂包括mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶标)抑制剂，包括但不限于雷帕霉素、依维莫司(everolimus)、坦罗莫司(temsirolimus)和德佛利姆(deforolimus)。

在其它实施方案中，另外的化学治疗剂可以选自叙述于美国专利7,927,613中的那些治疗剂。

在另一个实施方案中，所述方法可以进一步包括施用以下中的一种或两种：(i)一种或多种抗真菌剂(例如，选自联苯苄唑(bifonazole)、布康唑(butoconazole)、克霉唑(clotrimazole)、益康唑(econazole)、酮康唑(ketoconazole)、卢立康唑(luliconazole)、咪康唑(miconazole)、奥莫康唑(omoconazole)、奥昔康唑(oxiconazole)、舍他康唑(sertaconazole)、硫康唑(sulconazole)、噻康唑(tioconazole)、阿巴康唑(albaconazole)、艾菲康唑(efinaconazole)、氟环唑(epoziconazole)、氟康唑(fluconazole)、艾沙康唑(isavuconazole)、伊曲康唑(itraconazole)、泊沙康唑(posaconazole)、丙环唑(propiconazole)、拉夫康唑(ravusconazole)、特康唑(terconazole)、伏立康唑(voriconazole)、阿巴芬净(abafungin)、阿莫罗芬(amorolfin)、布替萘芬(butenafine)、萘替芬(naftifine)、特比萘芬(terbinafine)、阿尼芬净(anidulafungin)、卡泊芬净(caspofungin)、米卡芬净(micafungin)、苯甲酸、环吡酮、氟胞嘧啶、5-氟胞嘧啶、灰黄霉素(griseofulvin)、卤普罗近(haloprogin)、托萘酯(tolnaflate)、十一碳烯酸和秘鲁香脂(balsam of peru))，和(ii)一种或多种抗生素(例如，选自阿米卡星(amikacin)、庆大霉素(gentamicin)、卡那霉素(kanamycin)、新霉素(neomycin)、奈替米星(netilmicin)、妥布霉素(tobramycin)、巴龙霉素(paromomycin)、链霉素(streptomycin)、大观霉素(spectinomycin)、格尔德霉素(geldanamycin)、除莠霉素(herbimycin)、利福昔明(rifaximin)、氯碳头孢(loracarbef)、厄他培南(ertapenem)、多利培南(doripenem)、亚胺培南(imipenem)、西司他汀(cilastatin)、美罗培南(meropenem)、头孢羟氨苄(cefadroxil)、头孢唑林(cefazolin)、头孢噻吩(cefalotin)、头孢噻吩(cefalothin)、头孢氨苄(cefalexin)、头孢克洛(cefaclor)、头孢孟多(cefamandole)、头孢西丁(cefoxitin)、头孢丙烯(cefprozil)、头孢呋辛(cefuroxime)、头孢克肟(cefixime)、头孢地尼(cefdinir)、头孢托仑(cefditoren)、头孢哌酮(cefoperazone)、头孢噻肟(cefotaxime)、头孢泊肟(cefpodoxime)、头孢他啶(ceftazidime)、头孢布坦(ceftibuten)、头孢唑肟(ceftizoxime)、头孢曲松(ceftriaxone)、头孢吡肟(cefepime)、头孢洛林酯(ceftaroline fosamil)、头孢比罗(ceftobiprole)、替考拉宁(teicoplanin)、万古霉素(vancomycin)、替拉凡星(telavancin)、达巴万星(dalbavancin)、奥利万星(oritavancin)、克林霉素(clindamycin)、林可霉素(lincomycin)、达托霉素(daptomycin)、阿奇霉素(azithromycin)、克拉霉素(clarithromycin)、地红霉素(dirithromycin)、红霉素(erythromycin)、罗红霉素(roxithromycin)、醋竹桃霉素(troleandomycin)、泰利霉素(telithromycin)、螺旋霉素(spiramycin)、氨曲南(aztreonam)、呋喃唑酮(furazolidone)、呋喃妥因(nitrofurantoin)、利奈唑胺(linezolid)、泊斯唑胺(posizolid)、雷德唑胺(radezolid)、特地佐利(torezolid)、阿莫西林(amoxicillin)、氨苄西林(ampicillin)、阿洛西林(azlocillin)、羧苄西林(carbenicillin)、氯唑西林(cloxacillin)、双氯西林(dicloxacillin)、氟氯西林(flucloxacillin)、美洛西林(mezlocillin)、甲氧西林(methicillin)、萘夫西林(nafcillin)、苯唑西林(oxacillin)、青霉素G、青霉素V、哌拉西林(piperacillin)、青霉素G、替莫西林(temocillin)、替卡西林(ticarcillin)、阿莫西林(amoxicillin)、克拉维酸(calvulanate)、氨苄西林(ampicillin)、舒巴克坦(subbactam)、哌拉西林(piperacillin)、他唑巴坦(tazobactam)、替卡西林、克拉维酸盐(clavulanate)、枯草菌素、可利斯汀(colistin)、多粘菌素B、环丙沙星(ciprofloxacin)、依诺沙星(enoxacin)、加替沙星(gatifloxacin)、吉米沙星(gemifloxacin)、左氧氟沙星(levofloxacin)、洛美沙星(lomefloxacin)、莫西沙星(moxifloxacin)、萘啶酸、诺氟沙星(norfloxacin)、氧氟沙星(ofloxacin)、曲伐沙星(trovafloxacin)、格帕沙星(grepafloxacin)、司帕沙星(sparfloxacin)、替马沙星(temafloxacin)、磺胺米隆(mafenide)、磺胺醋酰(sulfacetamide)、磺胺嘧啶(sulfadiazine)、磺胺嘧啶银、磺胺二甲氧嗪、磺胺甲基异

唑、胺苯磺胺、柳氮磺胺吡啶、磺胺异

唑、三甲氧苄二胺嘧啶(trimethoprim)-磺胺甲基异

唑、sulfonamideochrysoidine、地美环素(demeclocycline)、二甲胺四环素(minocycline)、土霉素(oytetracycline)、四环素、氯苯吩嗪、氨苯砜(dapsone)、达普瑞霉素(dapreomycin)、环丝氨酸、乙胺丁醇、乙硫异烟胺、异烟肼、吡嗪酰胺、利福平(rifampicin)、利福布汀(rifabutin)、利福喷丁(rifapentine)、链霉素、胂凡纳明(arsphenamine)、氯霉素(chloramphenicol)、磷霉素(fosfomycin)、梭链孢酸(fusidic acid)、甲硝唑(metronidazole)、莫匹罗星(mupirocin)、平板霉素(platensimycin)、奎奴普丁(quinupristin)、达勒普丁(dalopristin)、甲砜霉素(thiamphenicol)、替加环素(tigecycyline)、替硝唑(tinidazole)、三甲氧苄二胺嘧啶和特巴汀(teixobactin)。

在某些实施方案中，第二治疗剂或方案在与化学实体接触或施用该化学实体之前(例如，约1小时之前，或约6小时之前，或约12小时之前，或约24小时之前，或约48小时之前，或约1周之前，或约1个月之前)施用至个体。

在其它实施方案中，第二治疗剂或方案在约与化学实体接触或施用该化学实体相同的时间施用至个体。例如，第二治疗剂或方案和化学实体以同一剂型同时提供至个体。作为另一个实例，第二治疗剂或方案和化学实体以独立剂型同时提供至个体。

在其它实施方案中，第二治疗剂或方案在与化学实体接触或施用该化学实体后(例如，约1小时后，或约6小时后，或约12小时后，或约24小时后，或约48小时后，或约1周后，或约1个月后)施用至个体。

患者选择

在一些实施方案中，本文所描述的方法进一步包括鉴别需要所述治疗的个体(例如，患者)的步骤(例如，通过切片检查、内视镜检法或本领域中已知的其它常规方法)。在某些实施方案中，NLRP3蛋白质可用作某些癌症类型的生物标记物。

在一些实施方案中，本文所描述的化学实体、方法和组合物可以施用于某些治疗抗性患者群体(例如，对检查点抑制剂具有抗性的患者)。

在一些实施方案中，本发明化合物可以用于疗法中。在某些实施方案中，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐和另外的治疗剂的组合制剂以同时、分开或依次用于疗法中。

在一些实施方案中，本发明化合物或其药学上可接受的盐或含有其的药物组合物可以用作药物。在某些实施方案中，本发明化合物可用于制备用于治疗癌症的药物。在某些实施方案中，本发明化合物可以用于制备用于调节NLRP3活性的药物。在某些实施方案中，调节包括激动NLRP3。

制备方法

如本领域技术人员可以理解的，合成本文通式的化合物的方法对于本领域普通技术人员而言将是显而易见的。例如，本文所描述的化合物可以例如使用本文所描述的一种或多种方法和/或使用描述于例如，US 2015/0056224(将其全部内容并入本文作为参考)中的方法来合成。可用于合成本文所描述的化合物的合成化学转化和保护基方法(保护和脱保护)是本领域已知的，并且包括例如描述于以下中的那些：R.Larock,ComprehensiveOrganic Transformations,VCH Publishers(1989)；T.W.Greene和RGM.Wuts,ProtectiveGroups in Organic Synthesis,第2版,John Wiley and Sons(1991)；L.Fieser和M.Fieser,Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis,John Wiley andSons(1994)；以及L.Paquette编,Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis,John Wiley and Sons(1995)及其后续版本。用于制备本发明化合物的起始物质是已知的、通过已知方法制备或可商购获得。本领域技术人员还将认识到，本文所描述的条件和试剂可以与可选择的本领域认可的等效物互换。例如，在许多反应中，三乙胺可以与其它碱例如非亲核碱(例如，二异丙胺、1,8-二氮杂双环十一-7-烯、2,6-二叔丁基吡啶或四丁基膦腈)互换。

本领域技术人员将认识到可以用于表征本文所描述的化合物的多种分析方法，包括例如¹H NMR、杂核NMR、质谱法、液相色谱和红外光谱法。以上所列是可供本领域技术人员使用的表征方法的亚组并且不是限制性的。

以下缩写具有指定含义：

ACN＝乙腈

AcOH＝乙酸

CDCl₃＝氯仿-d

CD₃OD＝甲醇-d

CH₂Cl₂＝二氯甲烷

CH₃ReO₃＝甲基三氧代铼

Cs₂CO₃＝碳酸铯

CuI＝碘化亚铜(I)

d＝二重峰

DCM＝二氯甲烷

DIEA＝N,N-二乙基异丙胺

DMF＝N,N-二甲基甲酰胺

DMSO＝二甲亚砜

ES＝电喷雾电离

Et₂O＝乙醚

EtOAc＝乙酸乙酯

EtOH＝乙醇

equiv＝当量

g＝克

h或hr＝小时

HCl＝盐酸(通常为溶液)

H₂O＝水

H₂O₂＝过氧化氢

HATU＝1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶

3-氧化物六氟磷酸盐

HPLC＝高效液相色谱

I₂＝碘

K₂CO₃＝碳酸钾

K₂HPO₄＝磷酸氢二钾

KI＝碘化钾

LC/MS＝液相色谱质谱

LiBH₄＝硼氢化锂

m＝多重峰

m/z＝质荷比

M＝摩尔

m-CPBA＝间氯过氧苯甲酸

mg＝毫克

MeOH＝甲醇

MHz＝兆赫兹

mL＝毫升

mmol＝毫摩尔

MTO＝甲基三氧代铼

NaHCO₃＝碳酸氢钠

Na₂CO₃＝碳酸钠

NaOH＝氢氧化钠

Na₂SO₄＝硫酸钠

NEt₃和TEA＝三甲胺

NH₄OH或NH₃H₂O＝氢氧化铵

NH₄HCO₃＝碳酸氢铵

nm＝纳米

PdCl₂(PPh₃)₂＝双(三苯基膦)二氯化钯(II)

Pd(dppf)Cl₂＝1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁

Pd(dppf)Cl₂DCM＝1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯甲烷络合物

Pd(OH)₂＝氢氧化钯

PMB＝对甲氧基苄基

POCl₃＝氧氯化磷

ppm＝百万分之一

Pt＝铂

Pt/C＝铂/碳

rt＝室温

RT＝保留时间

s＝单峰

t＝三重峰

TFA＝三氟乙酸

TLC＝薄层色谱

TosMIC＝甲苯磺酰基甲基异氰化物

TsCl＝对甲苯磺酰氯

℃＝摄氏度

μmol＝微摩尔

本发明化合物可以通过有机合成领域技术人员熟知的多种方式制备。本发明化合物可以使用下文所描述的方法以及有机合成化学技术中已知的合成方法或如本领域技术人员所了解的其变通方法合成。优选方法包括但不限于下文所描述的方法。

本发明化合物可以使用此部分(例如，流程1至11)中所描述的反应和技术来制备。

可以通过流程1中概述的合成顺序来制备化合物10。可以用试剂例如2-氯-2-氧代乙酸乙酯将吲哚1(其中Hal基团为卤素，例如溴)转化为中间体2。在酸(例如乙酸)存在下用适当官能化的肼(NH₂-NH-PG¹)处理中间体2，得到中间体3，其随后可以用氯化试剂例如POCl₃转化为中间体4。向中间体4中添加氨或适当官能化的胺(NH₂-PG²)，得到中间体5。可以用本领域技术人员已知的若干方式实现中间体5的脱保护。例如，当PG¹＝PG²＝PMB时，可以用试剂例如TFA处理中间体5，得到中间体6。通过适合催化剂的作用使中间体6与偶联试剂7偶联，得到中间体8。例如，此步骤可以通过以下方式实现：在催化剂例如Pd(dppf)Cl₂的存在下，用适合的硼酸酯例如3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑处理中间体6，得到中间体8。可选择的是，此步骤可以通过以下方式实现：在铜催化剂例如碘化亚铜(I)以及配体例如N,N’-二甲基乙二胺的存在下，用适合的杂环例如吡唑处理中间体6，得到中间体8。在流程1的最后一步中，可以通过在碱例如碳酸钾的存在下，用适当官能化的烷基化试剂(R²-X)(其中X为离去基团，例如卤素)处理中间体8来制备化合物10。任选地，如果R³含有保护基，则可在此阶段在适合条件下除去该保护基。例如，如果R³-M为1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑，则可以通过用试剂例如TFA进行处理而除去四氢吡喃基。

方案1

可选择的是，可以首先通过烷基化试剂R²-X使中间体6官能化，得到化合物10a，随后在催化剂的作用下用适合的偶联伴侣R³-M转化为化合物10，如方案2中所示。

方案2

中间体8的可选择的合成可以通过如方案3中所描述的两步顺序实现。在第一步骤中，中间体5(如方案1中所制备)可以通过适合催化剂的作用而与适合的偶联试剂R³-M偶联，得到中间体11，其随后可以用酸例如TFA进行脱保护，得到中间体8。

方案3

可以根据方案4中所说明的合成途径制备类似物例如化合物13a和13b。可以使用适合的条件实现保护基自12(如方案1或2中所制备)的除去，得到化合物13a。例如，如果PG＝Boc，则此可以通过用试剂例如TFA进行处理而实现。如果R³含有保护基，则在此步骤中也可以除去该保护基。例如，如果R³含有四氢吡喃保护的吡唑，则用试剂例如TFA进行处理可以除去此基团。化合物13a随后可以通过用适当试剂处理而转化为所需的最终产物。例如，13a可以通过在适合的偶联试剂例如HATU以及碱例如N,N-二异丙基乙胺的存在下，用适当取代的羧酸处理而转化为酰胺。可选择的是，化合物13a可以通过在碱例如N,N-二异丙基乙胺的存在下，用试剂例如2-(溴甲基)苯甲酸甲酯或其适当取代的类似物处理而转化为异吲哚啉酮。可选择的是，化合物13a可以通过在适合的还原剂例如三乙酰氧基硼氢化钠的存在下，用适当取代的醛或酮处理而烷基化。可选择的是，化合物13a可以通过在碱例如三乙胺的存在下，用适当取代的磺酰氯处理而转化为磺酰胺。可选择的是，化合物13a可以通过在碱例如三乙胺的存在下，用适当取代的异氰酸酯或氨甲酰氯处理而转化为脲。可选择的是，化合物13a可以通过在碱例如三乙胺的存在下，用适当取代的氯甲酸酯处理而转化为氨基甲酸酯。

方案4

可以根据方案5中所说明的合成途径制备类似物例如化合物15a和15b。可以使用适合的条件实现保护基自中间体14(如方案1或2中所制备)的除去，得到化合物15a。例如，如果PG＝TBS，则此可以通过用试剂例如TBAF进行处理而实现。化合物15a随后可以通过用适当试剂处理而转化为化合物15b。例如，化合物15a可以通过在适合的试剂例如DIAD和三苯基膦的存在下，用适当取代的酚处理而转化为芳基醚或杂芳基醚。在最后一步中，如果R³含有保护基，则可以使用适合的条件除去该保护基。例如，如果R³含有四氢吡喃保护的吡唑，则用试剂例如TFA进行处理可以除去此基团。

方案5

可以通过方案6中概述的合成顺序来制备化合物22。可以通过在碱例如氢氧化钠的存在下，用适当的卤化试剂例如碘处理喹啉16来制备中间体17。中间体17随后可以在适合的催化剂例如Pd(Ph₃)₄的作用下与适当取代的炔18偶联，得到环化产物19。可以通过如下两步顺序实现至化合物21的进一步加工：首先用适合的氧化剂例如m-CPBA处理中间体19，得到氧化物20，其可以用试剂例如甲苯磺酰氯和胺例如氨而转化为化合物21。通过催化剂的作用使化合物21与适合的偶联伴侣进行交叉偶联反应，得到化合物22。

方案6

可以根据方案7中描述的合成途径制备类似物例如化合物29。在方案7中，在适合的偶联试剂例如HATU的存在下，使中间体23与酸24进行酰胺键形成，得到中间体25。中间体25可以在适合的试剂例如C₂Cl₆和PPh₃的存在下进行环化反应，得到中间体26。可以用如下两步顺序实现至化合物28的进一步加工：首先用适合的氧化剂例如m-CPBA处理中间体26，得到氧化物27，其随后可以通过试剂例如甲苯磺酰氯和胺例如氨而转化为化合物28。通过催化剂的作用使化合物28与适合的偶联伴侣进行交叉偶联反应，得到化合物29。

方案7

可以根据方案8中描述的合成途径制备类似物例如化合物33。在方案8中，中间体25(如方案7中所示制备)可以在碱例如吡啶的存在下，用适合的试剂例如Lawesson试剂转化为中间体30。可以通过如下两步顺序实现至化合物32的进一步加工：首先用适合的氧化剂例如m-CPBA处理化合物30，得到氧化物31，其可以用试剂例如甲苯磺酰氯和胺例如氨而转化为化合物32。通过催化剂的作用使化合物32与适合的偶联伴侣进行交叉偶联反应，得到化合物33。

方案8

可以根据方案9中描述的合成途径制备类似物例如化合物40。在方案9中，可以通过适合的保护基例如PMB对化合物34(根据WO2013/045400制备)进行保护，得到中间体35。中间体35随后可以用氯化试剂例如POCl₃转化为中间体36。向中间体36中添加氨或适当官能化的胺(NH₂-PG²)，得到中间体37。可以以本领域技术人员已知的若干方式实现中间体37的脱保护。例如，当PG¹＝PG²＝PMB时，可以用试剂例如TFA处理化合物5，得到中间体38。可以通过在碱例如碳酸钾的存在下，用适当官能化的烷基化试剂(R²-X)(其中X为离去基团，例如卤素)处理中间体38来制备化合物39。通过适合的催化剂的作用使化合物39与偶联试剂偶联，得到化合物40。任选地，如果R³含有保护基，则可以在此阶段使用适合的条件除去该保护基。例如，如果R³-M为1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑，则可以通过用试剂例如TFA进行处理而除去四氢吡喃基。

方案9

方案10

可以通过方案10中概述的合成顺序来制备化合物52。在方案10中，用取代的胺42(其中R^1b为H、保护基例如PMB，或R^1a)处理喹啉41(其中Hal¹基团为卤素，例如溴)，得到化合物43。用碘化试剂例如NIS处理化合物43，得到化合物44，其可以通过适合的催化剂例如Pd(Ph₃)₂Cl₂和CuI的作用与适当取代的炔45偶联，得到化合物46。可以通过碱例如NaOH的作用实现化合物46的环化，得到化合物47。可以通过用适合的氧化剂例如m-CPBA处理化合物47来实现至化合物48的转化。用试剂例如甲苯磺酰氯和胺例如氨处理化合物48，得到化合物49。通过适合的催化剂的作用使化合物49与偶联试剂50偶联，得到化合物51。例如，此步骤可以通过以下方式实现：在催化剂例如Pd(dppf)Cl₂的存在下，用适合的硼酸酯例如3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑处理化合物49，得到化合物51。可选择的是，此步骤可以通过以下方式实现：在铜催化剂例如碘化亚铜(I)和配体例如N,N’-二甲基乙二胺的存在下，用适合的杂环例如吡唑处理化合物49，得到化合物51。在方案10的最后一步中，可以通过用适合的试剂例如TFA对化合物51进行脱保护而制备化合物52。

方案11

可以通过方案11中概述的合成顺序来制备化合物61。在方案11中，用适当取代的肼(例如(4-甲氧基苄基)肼)处理喹啉53(其中Hal¹基团为卤素，例如氯)，得到化合物54。在适合的溶剂例如甲苯中，用适合的试剂例如PCl₃处理化合物54，得到化合物55。可以通过用适合的氧化剂例如MTO处理化合物55来实现至化合物56的转化。化合物56随后可以通过适合的试剂例如POCl₃而进一步转化为化合物57。用胺例如氨处理化合物57，得到化合物58。可以通过酸例如TFA的作用实现对化合物58的脱保护，得到化合物59。通过适合的催化剂的作用使化合物59与适合的偶联试剂偶联，得到化合物60。例如，此步骤可以通过以下方式实现：在催化剂例如Pd(dppf)Cl₂的存在下，用适合的硼酸酯例如3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑处理化合物59，得到化合物60。可以通过在碱例如碳酸钾的存在下，用适当官能化的烷基化试剂(R²-X)(其中X为离去基团，例如卤素)处理化合物60来制备化合物61。任选地，如果R²或R³含有保护基，则可在此阶段使用适合的条件除去该保护基。例如，如果R³-M为1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑，则可以通过用试剂例如TFA进行处理而除去四氢吡喃基。

实施例

为了进一步说明前述内容，纳入了以下非限制性示例性合成流程。这些实施例在权利要求的范围内的变通实施方案在本领域技术人员的知识范围内，并且视为属于如本文描述和主张的本发明范围内。阅读者将认识到，在提供了本公开内容的情况下，本领域技术人员不需穷尽的实施例即能够制备和使用本发明。

实施例1. 3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]丙-1-醇的制备

步骤1. 2-(6-溴-1H-吲哚-3-基)-2-氧代乙酸乙酯

向150mL圆底烧瓶中放入在Et₂O(30mL)中的6-溴-1H-吲哚(1.15g，5.89mmol，1.00当量)。随后添加2-氯-2-氧代乙酸乙酯(922mg，6.78mmol，1.15当量)和吡啶(3mL)。将所得溶液在室温搅拌过夜。随后通过添加水来猝灭反应。用乙酸乙酯萃取所得溶液并且真空浓缩合并的有机层。将残留物在硅胶柱上纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1:3)洗脱，得到呈固体的2-(6-溴-1H-吲哚-3-基)-2-氧代乙酸乙酯(900mg，60％)。LC-MS m/z 296.1[M+H]⁺。

步骤2. 7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H,4H,5H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-酮

在250mL圆底烧瓶中放入2-(6-溴-1H-吲哚-3-基)-2-氧代乙酸乙酯(1.7g，5.74mmol，1.00当量)和[(4-甲氧基苯基)甲基]肼(1.007g，6.62mmol，1.15当量)在乙醇(25mL)和乙酸(3mL)中的溶液。将所得溶液在80℃搅拌过夜。随后通过添加水来猝灭反应。用乙酸乙酯萃取所得溶液并且合并有机层。溶液经无水硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物用乙酸乙酯/石油醚(4:1)在硅胶柱上纯化，得到呈固体的7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H,4H,5H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-酮(1.5g，68％)。LC-MS m/z 384.1[M+H]⁺。

步骤3. 7-溴-4-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉

在250mL圆底烧瓶中放入7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H,4H,5H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-酮(1.3g，3.38mmol，1.00当量)的二氯甲烷(10mL)溶液。向溶液中添加DMF(0.5mL)和POCl₃(1.031g，6.72mmol，2.00当量)。将所得溶液在25℃搅拌6小时。随后通过添加K₂HPO₄水溶液来猝灭反应。用二氯甲烷萃取所得溶液，并且将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且真空浓缩，得到呈灰白色固体的7-溴-4-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉(1.17g，86％)。LC-MS m/z 402.3[M+H]⁺。

步骤4. 7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H,6H,7H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在50mL密封试管中放入7-溴-4-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉(180mg，0.45mmol，1.00当量)和氨(3mL，5.00当量)的二

烷(3mL)溶液。将所得溶液在80℃搅拌过夜。随后通过添加水来猝灭反应。用二氯甲烷:CH₃OH(5:1)萃取所得溶液，并且真空浓缩合并的有机层。将残留物在硅胶柱上，使用二氯甲烷/甲醇(10:1)纯化，得到呈固体的7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H,6H,7H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(140mg，81％)。LC-MS m/z 383.2[M+H]⁺。

步骤5. 7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在30mL密封试管中放入7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H,6H,7H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(400mg，1.04mmol，1.00当量)的三氟乙酸(5mL)溶液。将所得溶液在80℃搅拌过夜。真空浓缩所得混合物。将残留物在硅胶柱上，使用二氯甲烷/甲醇(12:1)纯化，得到呈灰白色固体的7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(250mg，92％)。LC-MS m/z 263.1[M+H]⁺。

步骤6. 2-[3-(苄基氧基)丙基]-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在100mL密封试管中放入7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(688mg，2.62mmol，1.00当量)的DMF(8mL)溶液。在溶液中添加Cs₂CO₃(1.029g，3.16mmol，1.20当量)和[(3-溴丙氧基)甲基]苯(624.24mg，2.72mmol，1.10当量)。将所得溶液在25℃搅拌过夜。随后通过添加水来猝灭反应。用二氯甲烷:CH₃OH(5:1)萃取所得溶液，并且将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物在硅胶柱上，使用二氯甲烷/甲醇(20:1)纯化，得到呈深红色固体的2-[3-(苄基氧基)丙基]-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(500mg，46％)。LC-MSm/z 411.3[M+H]⁺。

步骤7. 2-[3-(苄基氧基)丙基]-7-(1H-吡唑-3-基)-[1,3]

唑并[5,4-c]喹啉-4-胺

在50mL密封试管中放入2-[3-(苄基氧基)丙基]-7-溴-[1,3]

唑并[5,4-c]喹啉-4-胺(500mg，1.21mmol，1.00当量)、3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(472mg，2.43mmol，2.00当量)和Cs₂CO₃(1.193mg，3.00当量)的二

烷/水(10:1，11mL)溶液。在氮气下在溶液中添加Pd(dppf)Cl₂DCM(199.3mg，0.20当量)。将所得溶液在100℃搅拌过夜。随后通过添加水来猝灭反应。用二氯甲烷:CH₃OH(5:1)萃取所得溶液并且合并有机层。溶液经无水硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物在硅胶柱上，使用二氯甲烷/甲醇(15:1)纯化，得到呈固体的2-[3-(苄基氧基)丙基]-7-(1H-吡唑-3-基)-[1,3]

唑并[5,4-c]喹啉-4-胺(300mg，62％)。LC-MS m/z 399.2[M+H]⁺。

步骤8. 3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]丙-1-醇

在50mL密封试管中放入2-[3-(苄基氧基)丙基]-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(100mg，0.25mmol，1.00当量)的三氟乙酸(5mL)溶液。将所得溶液在70℃搅拌过夜。随后通过添加水来猝灭反应。真空浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱，XBridge Shield RP18 OBD柱，19×250mm，10μm；流动相，水(10mMNH₄HCO₃)和ACN(9分钟内20.0％ACN直至55.0％)；检测器，UV 254/210nm。得到呈白色固体的3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]丙-1-醇(11.6mg，15％)。¹HNMR(400MHz,CD₃OD-d₄)δ8.55(s,1H),7.97-7.92(m,2H),7.68(br s,2H),6.72(s,1H),4.60(t,J＝6.8Hz,2H),3.60(t,J＝6.4Hz,2H),2.26-2.21(m,2H)。LC-MS m/z 309.1[M+H]⁺。

实施例2. 2-(3-苯氧基丙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺的制备

步骤1. 7-溴-2-(3-苯氧基丙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(16.9mg，0.064mmol)的DMF(214μL)室温溶液中添加碳酸铯(25.1mg，0.077mmol)，接着添加(3-溴丙氧基)苯(15.2mg，0.071mmol)。将反应在室温搅拌3小时。将反应用EtOAc(20mL)稀释，用H₂O(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(12g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到7-溴-2-(3-苯氧基丙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(17.1mg，67％)。LC-MS m/z 397/399[M+H]⁺。

步骤2. 2-(3-苯氧基丙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

将7-溴-2-(3-苯氧基丙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(17.1mg，0.043mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(16.7mg，0.086mmol)和碳酸铯(42.1mg，0.129mmol)在二

烷(387μL)和H₂O(43.0μL)的混合物中的室温混合物用N₂吹扫5分钟，随后添加[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(6.3mg，8.6μmol)。将反应密封并且在100℃搅拌21小时。将反应冷却至室温，用EtOAc(20mL)稀释，用H₂O(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。将粗物质溶解于DMF(2mL)中，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在16％B保持0分钟，16-56％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(3-苯氧基丙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(3.6mg，22％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.71-8.66(m,1H),7.92-7.88(m,2H),7.66(s,1H),7.61(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H),7.29-7.23(m,2H),6.94-6.90(m,3H),6.70(d,J＝2.1Hz,1H),6.66-6.42(m,2H),4.62(t,J＝7.0Hz,2H),4.06-4.02(m,2H),2.41(四重峰,J＝6.4Hz,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z385.3[M+H]⁺；RT：1.39分钟。

实施例3和4. 7-(1H-吡唑-3-基)-2-[3-(吡啶-2-基氧基)丙基]-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺和1-{3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]丙基}-1,2-二氢吡啶-2-酮的制备

步骤1. 7-溴-2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，TFA(240mg，0.636mmol)的DMF(2121μL)室温溶液中添加碳酸铯(622mg，1.91mmol)，接着添加(3-溴丙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(162μL，0.700mmol)。将悬浮液在室温搅拌16小时。将反应用EtOAc(50mL)和H₂O(50mL)稀释。分离各层并且用EtOAc(50mL)萃取水层。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(24g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈白色固体的7-溴-2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(214mg，77％)，其与约5％的区域异构体产物混合。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.73(s,1H),7.85(d,J＝8.4Hz,1H),7.58(d,J＝2.0Hz,1H),7.31(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),6.96(br s,2H),4.49(t,J＝7.1Hz,2H),3.63(t,J＝6.0Hz,2H),2.14(四重峰,J＝6.6Hz,2H),0.86(s,9H),0.02(s,6H)；LC-MS m/z 435[M+H]⁺。

步骤2. 2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

将7-溴-2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(214mg，0.491mmol)、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(205mg，0.737mmol)和碳酸铯(480mg，1.474mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加1,4-二

烷(4423μL)和H₂O(491μL)。将所得混合物用N₂吹扫10分钟，随后添加[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(17.98mg，0.025mmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其密封并且在100℃搅拌30分钟。将反应冷却至室温，用EtOAc(50mL)稀释，用H₂O(50mL)和饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(12g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈棕色泡沫状的2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(242mg，97％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.76(s,1H),8.01(d,J＝8.0Hz,1H),7.62(d,J＝1.7Hz,1H),7.58(d,J＝1.7Hz,1H),7.32(dd,J＝8.0,1.7Hz,1H),6.86(br s,2H),6.48(d,J＝1.7Hz,1H),5.30(dd,J＝9.9,2.0Hz,1H),4.51(t,J＝7.1Hz,2H),4.09-4.00(m,1H),3.64(t,J＝6.0Hz,2H),3.62-3.53(m,1H),2.48-2.37(m,1H),2.21-2.12(m,2H),2.00-1.90(m,1H),1.79(br d,J＝12.5Hz,1H),1.63-1.48(m,3H),0.88(s,9H),0.06-0.01(m,6H)；LC-MS m/z 507[M+H]⁺。

步骤3. 3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)丙-1-醇

在2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(182mg，0.359mmol)的THF(1796μL)室温溶液中添加氟化四丁基铵(在THF中的1M溶液)(431μL，0.431mmol)。将反应在室温搅拌1小时。真空浓缩反应。粗物质通过快速色谱(24g硅胶；线性梯度0-100％EtOAc-CH₂Cl₂，随后0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)丙-1-醇(128mg，91％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.78(s,1H),8.01(d,J＝8.0Hz,1H),7.62(d,J＝1.6Hz,1H),7.58(d,J＝1.7Hz,1H),7.32(dd,J＝8.0,1.8Hz,1H),6.90(brs,2H),6.48(d,J＝1.8Hz,1H),5.30(dd,J＝10.0,2.0Hz,1H),4.69(t,J＝5.0Hz,1H),4.52(t,J＝7.1Hz,2H),4.07-4.00(m,1H),3.62-3.54(m,1H),3.45(q,J＝6.0Hz,2H),2.47-2.37(m,1H),2.10(四重峰,J＝6.6Hz,2H),1.94(brs,1H),1.79(br d,J＝12.6Hz,1H),1.64-1.47(m,3H)；LC-MS m/z 393[M+H]⁺。

步骤4. 7-(1H-吡唑-3-基)-2-[3-(吡啶-2-基氧基)丙基]-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺和1-{3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]丙基}-1,2-二氢吡啶-2-酮

在3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)丙-1-醇(40mg，0.102mmol)、吡啶-2(1H)-酮(10.7mg，0.112mmol)和三苯基膦(32.1mg，0.122mmol)的THF(1019μL)0℃溶液中逐滴添加偶氮二甲酸二异丙酯(24.1μL，0.122mmol)。将反应在室温搅拌1小时。真空浓缩反应。

将粗物质溶解于CH₂Cl₂(250μL)中，并且添加TFA(250μL)。将反应在室温搅拌1小时。真空浓缩反应。将粗物质溶解于CH₂Cl₂中并且再次浓缩。将粗物质溶解于DMF(2mL)中，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在3％B保持0分钟，3-43％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到7-(1H-吡唑-3-基)-2-(3-(吡啶-2-基氧基)丙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，TFA(28.5mg，56％)和1-(3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)丙基)吡啶-2(1H)-酮，TFA(11.6mg，23％)。

7-(1H-吡唑-3-基)-2-(3-(吡啶-2-基氧基)丙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，TFA的表征数据：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.03(s,1H),8.86(s,1H),8.15-8.07(m,2H),7.90(br d,J＝7.7Hz,1H),7.87-7.78(m,1H),7.72-7.65(m,1H),6.99-6.92(m,1H),6.79(s,1H),6.75(d,J＝8.3Hz,1H),4.70(t,J＝6.7Hz,2H),4.33(t,J＝6.1Hz,2H),2.49-2.42(m,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 386.3[M+H]⁺；RT：1.18分钟。

1-(3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)丙基)吡啶-2(1H)-酮，TFA的表征数据：.78(br s,1H),6.39(d,J＝9.1Hz,1H),6.24(t,J＝6.2Hz,1H),4.55(br t,J＝6.9Hz,2H),4.01(br t,J＝6.9Hz,2H),2.40-2.32(m,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 386.3[M+H]⁺；RT 1.03分钟。

根据与针对实施例3所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例5至9。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例10. 2-(2-乙氧基乙基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺的制备

步骤1. 7-溴-N,2-双(4-甲氧基苄基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在7-溴-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉(2.428g，6.03mmol)的DMSO(20.10mL)室温溶液中添加(4-甲氧基苯基)甲胺(1.576mL，12.06mmol)，接着添加N,N-二异丙基乙胺(3.15mL，18.09mmol)。将反应在70℃搅拌18小时。将反应冷却至室温，用EtOAc(500mL)稀释，用H₂O(2×250mL)和饱和NaCl水溶液(250mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩，得到棕色油状物。粗物质通过快速色谱(40g硅胶；线性梯度0-100％EtOAc-己烷)纯化，得到呈灰白色泡沫状的7-溴-N,2-双(4-甲氧基苄基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(2.880g，95％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.79(s,1H),7.96(t,J＝6.2Hz,1H),7.85(d,J＝8.3Hz,1H),7.63(d,J＝2.0Hz,1H),7.37(d,J＝8.7Hz,2H),7.32-7.27(m,3H),6.95-6.90(m,2H),6.87-6.82(m,2H),5.58(s,2H),4.66(d,J＝6.0Hz,2H),3.72(s,3H),3.69(s,3H)；LC-MS m/z 503/505[M+H]⁺。

步骤2.N,2-双(4-甲氧基苄基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在吡唑(97mg，1.43mmol)、7-溴-N,2-双(4-甲氧基苄基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(600mg，1.19mmol)、碘化亚铜(I)(11.35mg，0.060mmol)和(1S,2S)-N1,N2-二甲基环己烷-1,2-二胺(33.9mg，0.238mmol)的甲苯(2.5mL)溶液中添加碳酸钾(362mg，2.62mmol)。将反应用N₂吹扫并且在120℃搅拌24小时。随后将反应冷却至室温，用EtOAc稀释，并且通过硅藻土垫过滤。浓缩滤液并且通过快速色谱(40g硅胶；线性梯度0-100％EtOAc-己烷)纯化，得到N,2-双(4-甲氧基苄基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(495mg，85％)。LC-MS m/z 491.4[M+H]⁺。

步骤3. 7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在N,2-双(4-甲氧基苄基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(501mg，1.02mmol)的TFA(3934μL，51.1mmol)溶液中添加苯甲醚(1116μL，10.2mmol)。将反应在80℃搅拌过夜。将反应冷却至室温并且真空浓缩。将粗物质用Et₂O研磨，并且随后过滤，得到7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，TFA盐(350mg，94％)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.81(s,1H),8.39(d,J＝2.3Hz,1H),8.26(d,J＝8.6Hz,1H),8.11(d,J＝1.9Hz,1H),7.92(dd,J＝8.6,1.9Hz,1H),7.83(d,J＝1.2Hz,1H),6.63(d,J＝1.8Hz,1H)；LC-MS m/z 251.1[M+H]⁺。

步骤4. 2-(2-乙氧基乙基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在1-溴-2-乙氧基乙烷(9.17mg，0.060mmol)和7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(15mg，0.060mmol)的DMF(0.3mL)溶液中添加Cs₂CO₃(78mg，0.240mmol)。将反应在室温搅拌12小时，随后过滤。粗产物通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridgeC18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在6％B保持0分钟，6-46％B历时25分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(2-乙氧基乙基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(6.9mg，26％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.70(s,1H),8.49(d,J＝2.0Hz,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝2.0Hz,1H),7.75(s,1H),7.68(dd,J＝8.4,2.1Hz,1H),6.54(s,1H),4.60(t,J＝5.3Hz,2H),3.92(t,J＝5.3Hz,2H),3.48(q,J＝6.9Hz,2H),1.08(t,J＝6.9Hz,3H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 323.2[M+H]⁺；RT：1.03分钟。

根据针对实施例10所描述的合成方法，由适当的起始物质制备实施例11至19。LC/MS方法：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例20. 2-[2-(吗啉-4-基)乙基]-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺的制备

步骤1. 7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

将7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(TFA)(2.988g，7.92mmol)、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(3.31g，11.9mmol)和磷酸三钾(5.05g，23.8mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后与二

烷(33.0mL)和H₂O(6.60mL)混合。将所得悬浮液用N₂吹扫15分钟，随后添加氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]钯(II)(0.312g，0.396mmol)。将反应在100℃搅拌2小时。将反应冷却至室温并且用EtOAc(400mL)和H₂O(400mL)稀释。分离各层并且用EtOAc(2×200mL)萃取水层。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(400mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。将粗物质与CH₂Cl₂(10mL)混合，过滤，并且用CH₂Cl₂(3×10mL)洗涤，得到7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(1.865g，70％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.59-13.20(m,1H),8.82-8.51(m,1H),8.21-8.03(m,1H),7.77-7.65(m,1H),7.58(d,J＝1.7Hz,1H),7.44-7.30(m,1H),6.93(br s,2H),6.49(d,J＝1.3Hz,1H),5.30(dd,J＝10.0,2.0Hz,1H),4.08-4.02(m,1H),3.62-3.55(m,1H),2.47-2.37(m,1H),1.97-1.91(m,1H),1.79(br d,J＝13.1Hz,1H),1.62-1.49(m,3H)；LC-MS m/z 335[M+H]⁺。

步骤2. 2-[2-(吗啉-4-基)乙基]-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(16.3mg，0.049mmol)的DMF(162μL)室温溶液中添加碳酸铯(47.6mg，0.146mmol)，接着添加4-(2-溴乙基)吗啉，氢溴酸盐(14.7mg，0.054mmol)。将悬浮液在室温搅拌16小时。将反应用H₂O(2mL)稀释并且用EtOAc(3×2mL)萃取。浓缩合并的有机层。

将粗物质与CH₂Cl₂(200μL)和TFA(200μL)混合，并且在室温搅拌1.5小时。真空浓缩反应。将粗物质溶解于DMF(2mL)中，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在6％B保持0分钟，6-46％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物(两种观察的区域异构体产物中极性较大的)的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(2-(N-吗啉代乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(10.8mg，59％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.73(s,1H),7.93(d,J＝8.0Hz,1H),7.90(s,1H),7.70(brs,1H),7.64(br d,J＝7.4Hz,1H),6.97-6.80(m,2H),6.73(d,J＝1.9Hz,1H),4.56(t,J＝6.3Hz,2H),3.57-3.53(m,4H),2.88(br t,J＝6.5Hz,2H),2.48-2.43(m,4H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z363.9[M+H]⁺；RT：0.84分钟。

根据与针对实施例20所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例21至28。针对实施例27，将反应在50℃搅拌4小时。对于通过HPLC观察到两个区域异构体峰的反应，产物通常为主峰，并且为在所用HPLC条件下观察的两个峰中极性较大的。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例29.N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基]-N-乙基乙酰胺的制备

步骤1. 7-溴-2-(2-溴乙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在250mL圆底烧瓶中放入7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(2g，7.60mmol，1当量)、DMF(70mL，957.67mmol)、Cs₂CO₃(5.0g，15.20mmol，2当量)和1,2-二溴乙烷(2.1g，11.40mmol，1.5当量)。将所得溶液在室温搅拌5小时并且随后用EtOAc(350mL)稀释。将所得混合物用H₂O(2×100mL)和盐水(2×100mL)洗涤。随后浓缩混合物，并且将残留物用乙酸乙酯/石油醚(0-70％)在硅胶柱上纯化，得到呈固体的7-溴-2-(2-溴乙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(1.5g，53％)。LC-MS m/z[M+H]⁺＝368.9。

步骤2. 7-溴-2-[2-(乙基氨基)乙基]-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在30mL密封试管中放入7-溴-2-(2-溴乙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(500mg，1.35mmol，1当量)、ACN(10mL，0.24mmol)、K₂CO₃(373.5mg，2.70mmol，2当量)、KI(22.4mg，0.14mmol，0.1当量)和乙胺(609.2mg，13.51mmol，10当量)。将所得溶液在65℃搅拌16小时。过滤反应并且真空浓缩滤液。将残留物在硅胶柱上，使用二氯甲烷/甲醇(0-10％)纯化，得到呈固体的7-溴-2-[2-(乙基氨基)乙基]-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(250mg，55％)。LC-MS m/z[M+H]⁺＝334.1。

步骤3.N-(2-[4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)-N-乙基乙酰胺

在用氮气的惰性气氛吹扫并且维持的25mL 3颈圆底烧瓶中放入7-溴-2-[2-(乙基氨基)乙基]-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(250mg，0.75mmol，1当量)、DCM(10mL，157.30mmol)、TEA(227.1mg，2.24mmol，3当量)和Ac₂O(91.6mg，0.90mmol，1.2当量)。将所得溶液在室温搅拌5小时。真空浓缩所得混合物，并且将残留物在硅胶柱上，使用二氯甲烷/甲醇(0-10％)纯化，得到呈固体的N-(2-[4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)-N-乙基乙酰胺(200mg，71％)。LC-MS m/z[M+H]⁺＝376.1。

步骤4.N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基]-N-乙基乙酰胺

在25mL圆底烧瓶中放入在二

烷(5mL，0.06mmol)和H₂O(1.25mL，620.08mmol)中的N-(2-[4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)-N-乙基乙酰胺(200mg，0.53mmol，1当量)、Na₂CO₃(112.7mg，1.06mmol，2当量)、3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(206.3mg，1.06mmol，2当量)、Pd(PPh₃)₄(61.4mg，0.05mmol，0.1当量)。将所得溶液在油浴中在80℃搅拌16小时。浓缩所得混合物，并且将残留物在硅胶柱上，使用二氯甲烷/甲醇(10:1)纯化。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱：XBridge ShieldRP18 OBD柱19×250mm，10μm；流动相A：水(10mM NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流动速率：25mL/分钟；梯度：在7分钟内13％B至40％B；254/210nm；RT：6.55分钟。得到呈白色固体的N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基]-N-乙基乙酰胺(82.6mg，43％)。¹H-NMR：(300MHz,DMSO-d₆,ppm)：δ13.33-12.84(m,1H),8.72(s,1H),7.94-7.64(m,4H),6.80-6.74(m,3H),4.65-4.54(m,2H),3.85-3.73(m,2H),3.34-3.06(m,2H),2.01(s,2H),1.70(s,1H),1.02-0.94(m,3H)。LC方法：柱：Kinetex EVO 3.0mm×50mm，2.6μm颗粒；流动相A：水+0.03％NH₃H₂O；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：10％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.60分钟；流速：1.2mL/分钟。m/z[M+H]⁺＝336.3。LC RT：1.030分钟。

实施例30. 2-(2-{六氢-1H-呋喃并[3,4-c]吡咯-5-基}乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺的制备

步骤1. 7-溴-2-(2-[六氢-1H-呋喃并[3,4-c]吡咯-5-基]乙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在30mL密封试管中放入在ACN(10mg，0.24mmol，0.225当量)中的7-溴-2-(2-溴乙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(400mg，1.08mmol，1当量)、K₂CO₃(298.8mg，2.16mmol，2当量)、KI(17.9mg，0.11mmol，0.1当量)和六氢-1H-呋喃并[3,4-c]吡咯(611.6mg，5.40mmol，5当量)。将所得溶液在65℃搅拌16小时。过滤反应并且真空浓缩滤液。将残留物在硅胶柱上，使用二氯甲烷/甲醇(0-10％)纯化，得到呈固体的7-溴-2-(2-[六氢-1H-呋喃并[3,4-c]吡咯-5-基]乙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(120mg，28％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝402.1。

步骤2. 2-(2-[六氢-1H-呋喃并[3,4-c]吡咯-5-基]乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在30mL密封试管中放入在二

烷(4mL)和H₂O(1mL)中的7-溴-2-(2-[六氢-1H-呋喃并[3,4-c]吡咯-5-基]乙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(120mg，0.30mmol，1当量)、Na₂CO₃(63.2mg，0.60mmol，2当量)、3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(115.8mg，0.60mmol，2当量)、Pd(PPh₃)₄(34.5mg，0.03mmol，0.1当量)。将所得溶液在80℃搅拌16小时。将所得混合物冷却至室温并且浓缩。将残留物在硅胶柱上，使用二氯甲烷/甲醇(0-10％)纯化。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件再次纯化：柱：XBridge Shield RP18OBD柱19×250mm，10μm；流动相A：水(10mM NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流动速率：25mL/分钟；梯度：在7.5分钟内15％B至40％B；210/254nm；RT：6.90分钟。得到呈固体的2-(2-[六氢-1H-呋喃并[3,4-c]吡咯-5-基]乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(27.9mg，24％)。¹H-NMR：(300MHz,DMSO-d₆,ppm)：δ13.28-12.85(m,1H),8.74(s,1H),7.91-7.63(m,4H),6.77-6.74(m,3H),4.56-4.51(m,2H),3.72-3.67(m,2H),3.35-3.31(m,2H),2.95-2.91(m,2H),2.67-2.55(m,4H),2.40-2.36(m,2H)。LC方法：柱：Kinetex EVO 3.0mm×50mm，2.6μm颗粒；流动相A：水+0.03％NH₃H₂O；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：10％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.60分钟；流速：1.2mL/分钟。m/z[M+H]⁺＝390.2。LC RT：1.030分钟。

实施例31.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-5-氟吡啶-2-甲酰胺的制备

步骤1.(2-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯

在7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，TFA(3.00g，7.96mmol)的DMF(22.73mL)室温溶液中添加碳酸铯(7.78g，23.87mmol)，接着添加(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.961g，8.75mmol)。将悬浮液在室温搅拌20小时。将反应用EtOAc(300mL)和H₂O(300mL)稀释。分离各层并且用EtOAc(100mL)萃取水层。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(300mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并且过滤。添加硅藻土，并且真空浓缩混合物。将此物质干燥上样至柱上并且通过快速色谱(具有25g固体负载的80g硅胶柱；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈白色固体的(2-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.06g，64％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.67(s,1H),7.85(d,J＝8.3Hz,1H),7.58(d,J＝2.0Hz,1H),7.30(dd,J＝8.3,2.0Hz,1H),7.05(br t,J＝5.4Hz,1H),6.98(br s,2H),4.45(br t,J＝6.1Hz,2H),3.48(q,J＝6.0Hz,2H),1.33(s,9H)；LC-MS m/z 406/408[M+H]⁺。

步骤2.(2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯

将(2-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.01g，2.49mmol)、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.037g，3.73mmol)和碳酸铯(2.430g，7.46mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加1,4-二

烷(22.37mL)和H₂O(2.486mL)。将所得混合物用N₂吹扫15分钟，随后添加[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(0.091g，0.124mmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其在100℃搅拌30分钟。将反应冷却至室温，用EtOAc(300mL)稀释，用H₂O(150mL)和饱和NaCl水溶液(150mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(80g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈黄色固体的(2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.2g，定量)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.71(s,1H),8.01(d,J＝8.1Hz,1H),7.62(d,J＝1.6Hz,1H),7.57(d,J＝1.7Hz,1H),7.32(dd,J＝8.0,1.8Hz,1H),7.07(br t,J＝5.7Hz,1H),6.89(br s,2H),6.48(d,J＝1.7Hz,1H),5.30(dd,J＝10.0,2.0Hz,1H),4.48(brt,J＝6.1Hz,2H),4.07-4.01(m,1H),3.61-3.54(m,1H),3.50(q,J＝6.0Hz,2H),2.47-2.36(m,1H),1.99-1.90(m,1H),1.79(br d,J＝13.4Hz,1H),1.64-1.48(m,3H),1.35(s,9H)；LC-MS m/z 478[M+H]⁺。

步骤3. 2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA

在(2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.2g，2.5mmol)的CH₂Cl₂(6.17mL)室温溶液中添加TFA(6.17mL)。将反应在室温搅拌2小时。浓缩反应以除去约一半体积，随后将其逐滴添加至Et₂O(75mL)中。通过真空过滤收集所得固体并且用Et₂O(3×10mL)洗涤，得到呈灰白色固体的2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(1.121g，87％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.69-12.94(m,1H),9.85-9.68(m,1H),9.38-9.22(m,1H),9.02(s,1H),8.17-8.13(m,2H),8.09(br s,2H),7.94(d,J＝7.2Hz,1H),7.85(br s,1H),6.80(d,J＝2.1Hz,1H),4.77(t,J＝5.7Hz,2H),3.55-3.49(m,2H)；LC-MS m/z 294[M+H]⁺。

步骤4.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-5-氟吡啶-2-甲酰胺

在2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(40mg，0.077mmol)和5-氟吡啶甲酸(10.8mg，0.077mmol)的DMF(384μL)室温溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(53.5μL，0.307mmol)，接着添加HATU(29.2mg，0.077mmol)。将反应在室温搅拌30分钟。将反应用H₂O(0.2mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在2％B保持0分钟，2-42％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)-5-氟吡啶甲酰胺，2TFA(15.8mg，31％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.06(br t,J＝5.8Hz,1H),8.93(s,1H),8.61(d,J＝2.5Hz,1H),8.12-8.02(m,3H),7.90-7.77(m,3H),6.78(s,1H),4.71(br t,J＝5.9Hz,2H),3.94-3.86(m,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 417.3[M+H]⁺；RT：1.13分钟。

用于制备N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-5-氟吡啶-2-甲酰胺的可选择的方法

在5-氟吡啶甲酸(29.8mg，0.211mmol)的DMF(479μL)室温溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(66.8μL，0.384mmol)，接着添加HATU(72.9mg，0.192mmol)。将此溶液在室温搅拌5分钟，随后将其逐滴添加至2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(100mg，0.192mmol)和N,N-二异丙基乙胺(100μL，0.575mmol)的DMF(479μL)溶液中。将反应在室温搅拌30分钟。将反应用EtOAc(50mL)和H₂O(50mL)稀释。分离各层并且用EtOAc(50mL)萃取水层。合并的有机层用10％LiCl水溶液(2×50mL)和饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。将粗物质溶解于MeOH-CH₂Cl₂中，添加硅藻土，并且真空浓缩混合物。将此物质干燥上样至柱上并且通过快速色谱(具有5g固体负载的24g RediSep Gold硅胶柱；线性梯度0-20％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈白色固体的N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)-5-氟吡啶甲酰胺(33.7mg，42％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.33-12.77(m,1H),9.04(t,J＝5.9Hz,1H),8.69(br s,1H),8.62(d,J＝2.7Hz,1H),8.09(dd,J＝8.7,4.7Hz,1H),7.93-7.84(m,3H),7.82-7.64(m,1H),7.64-7.51(m,1H),6.84-6.76(m,1H),6.74(br s,2H),4.65(t,J＝6.2Hz,2H),3.88(q,J＝6.2Hz,2H)；LC-MS m/z 417[M+H]⁺。

根据与针对实施例31所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例32至101。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例102. 2-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-2,3-二氢-1H-异吲哚-1-酮的制备

在2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(50mg，0.096mmol)的DMF(479μL)室温溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(84μL，0.48mmol)和2-(溴甲基)苯甲酸甲酯(22.0mg，0.096mmol)。将反应在室温搅拌17小时。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在0％B保持0分钟，0-40％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)异吲哚啉-1-酮(6.5mg，16％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.73(s,1H),7.88(br s,1H),7.86(br d,J＝7.7Hz,1H),7.76-7.52(m,5H),7.48-7.43(m,1H),6.72(br s,1H),6.82-6.70(m,2H),4.73(br t,J＝5.8Hz,2H),4.33(s,2H),4.12(br t,J＝5.5Hz,2H)。分析型LC/MS条件，柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 410.0[M+H]⁺；RT：1.11分钟。

实施例103. 2-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-6-氟-2,3-二氢-1H-异吲哚-1-酮的制备

在2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(50mg，0.096mmol)的DMF(479μL)室温溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(84μL，0.48mmol)和2-(溴甲基)-5-氟苯甲酸甲酯(23.7mg，0.096mmol)。将反应在室温搅拌2小时。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在4％B保持0分钟，4-44％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)-6-氟异吲哚啉-1-酮，TFA(16.1mg，30％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.96(s,1H),8.14-8.05(m,1H),8.02(br d,J＝8.3Hz,1H),7.89-7.76(m,2H),7.61(dd,J＝8.3,4.4Hz,1H),7.47-7.33(m,2H),6.77(s,1H),4.81(br t,J＝5.6Hz,2H),4.39(s,2H),4.14(br t,J＝5.5Hz,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridgeC18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 428.3[M+H]⁺；RT：1.35分钟。

实施例104. 2-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-5-氯-2,3-二氢-1H-异吲哚-1-酮的制备

在2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(50mg，0.096mmol)的DMF(479μL)室温溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(84μL，0.479mmol)和2-(溴甲基)-4-氯苯甲酸甲酯(25.3mg，0.096mmol)。将反应在室温搅拌2小时。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在11％B保持0分钟，11-51％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)-5-氯异吲哚啉-1-酮(11.9mg，28％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.77(s,1H),7.93(br s,1H),7.89(br d,J＝8.3Hz,1H),7.77-7.59(m,4H),7.50(br d,J＝8.0Hz,1H),6.74(s,1H),4.74(br t,J＝5.5Hz,2H),4.35(s,2H),4.10(br t,J＝5.4Hz,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 444.1[M+H]⁺；RT：1.37分钟。

实施例105. 2-(2-{[(2-甲基苯基)甲基]氨基}乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺的制备

在2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(35mg，0.067mmol)的DMF(336μL)室温溶液中添加2-甲基苯甲醛(10.1μL，0.087mmol)，接着添加三乙酰氧基硼氢化钠(42.7mg，0.201mmol)。将反应在室温搅拌1小时。将反应用H₂O(100μL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在0％B保持0分钟，0-60％B历时25分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(2-((2-甲基苄基)氨基)乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(17.5mg，40％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.02(s,1H),8.16-8.10(m,2H),7.92(br d,J＝8.3Hz,1H),7.83(br s,1H),7.44(br d,J＝7.2Hz,1H),7.34-7.29(m,1H),7.29-7.24(m,2H),6.80(s,1H),4.91(brt,J＝5.6Hz,2H),4.28(s,2H),3.76-3.69(m,2H),2.36(s,3H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 398.1[M+H]⁺；RT：1.08分钟。

根据与针对实施例105所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例106至112。针对实施例106和108，在添加其它试剂之前在起始物质中添加三乙胺(2.5当量)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例113.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}甲磺酰胺的制备

在2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(35mg，0.067mmol)的DMF(224μL)室温溶液中添加三乙胺(37.4μL，0.269mmol)，接着添加甲磺酰氯(8.1mg，0.070mmol)。将反应在室温搅拌1小时。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridgeC18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在0％B保持0分钟，0-40％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥。物质进一步通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridgeC18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在13％B保持0分钟，13-36％B历时25分钟，随后在100％B保持2分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)甲磺酰胺，TFA(6.1mg，19％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.97(s,1H),8.16-8.09(m,2H),7.90(br d,J＝8.5Hz,1H),7.82(br s,1H),7.33(br t,J＝5.8Hz,1H),6.80(s,1H),4.62(br t,J＝5.6Hz,2H),3.60-3.56(m,2H),2.90(s,3H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 372[M+H]⁺；RT：0.94分钟。

实施例114.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}苯磺酰胺的制备

在2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(51mg，0.098mmol)的DMF(326μL)0℃溶液中逐滴添加三乙胺(54.5μL，0.391mmol)，接着逐滴添加苯磺酰氯(13.1μL，0.103mmol)。将反应在室温搅拌1小时。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在11％B保持0分钟，11-51％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)苯磺酰胺(34.3mg，80％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.59(s,1H),7.92-7.88(m,2H),7.87-7.80(m,1H),7.78-7.74(m,2H),7.71-7.60(m,2H),7.58-7.48(m,3H),6.72(d,J＝2.0Hz,1H),6.68-6.52(m,2H),4.49(t,J＝6.1Hz,2H),3.40(br t,J＝6.1Hz,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 434.3[M+H]⁺；RT：1分钟。

实施例115. 3-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-1-苯基脲的制备

在2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(40mg，0.077mmol)的DMF(384μL)0℃溶液中添加三乙胺(42.8μL，0.307mmol)，接着添加异氰酸苯酯(8.3μL，0.077mmol)。将反应在0℃搅拌1小时。将反应用H₂O(0.2mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridgeC18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在8％B保持0分钟，8-48％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到1-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)-3-苯基脲(16.5mg，52％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.73(s,1H),8.55(s,1H),7.93(br d,J＝8.0Hz,1H),7.89(s,1H),7.72-7.66(m,1H),7.62(br d,J＝8.0Hz,1H),7.37(br d,J＝7.7Hz,2H),7.21(t,J＝8.0Hz,2H),6.89(t,J＝7.3Hz,1H),6.83-6.75(m,2H),6.73(d,J＝1.7Hz,1H),6.33-6.29(m,1H),4.53(br t,J＝5.5Hz,2H),3.72-3.66(m,2H)。柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 413.1[M+H]⁺；RT：1.14分钟。

实施例116. 1-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-3,3-二甲基脲的制备

在2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(40mg，0.077mmol)的DMF(384μL)0℃溶液中添加三乙胺(42.8μL，0.307mmol)，接着添加二甲基氨甲酰氯(7.1μL，0.077mmol)。将反应在0℃搅拌30分钟，随后在室温搅拌1.5小时。将反应用H₂O(0.2mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在1％B保持0分钟，1-41％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到3-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)-1,1-二甲基脲(20.5mg，73％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.64(s,1H),7.94(br d,J＝8.3Hz,1H),7.88(s,1H),7.76-7.54(m,2H),6.73(br s,3H),6.50(br t,J＝5.4Hz,1H),4.47(br t,J＝5.9Hz,2H),3.57-3.52(m,2H),2.75(s,6H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 365.3[M+H]⁺；RT：0.89分钟。

实施例117.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}氨基甲酸苯酯的制备

在2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(40mg，0.077mmol)的DMF(384μL)0℃溶液中添加三乙胺(42.8μL，0.307mmol)，接着添加氯甲酸苯酯(9.6μL，0.077mmol)。将反应在0℃搅拌30分钟。将反应用H₂O(0.2mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridgeC18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在5％B保持0分钟，5-45％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸苯酯，TFA(4.9mg，12％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.95-9.67(m,1H),9.34-9.20(m,1H),9.01(s,1H),8.15(br d,J＝8.5Hz,1H),8.12(br s,1H),7.96(br t,J＝5.9Hz,1H),7.92(br d,J＝8.0Hz,1H),7.82(br s,1H),7.30(br t,J＝7.6Hz,2H),7.19-7.14(m,1H),7.02(br d,J＝7.7Hz,2H),6.80(s,1H),4.64(br t,J＝5.4Hz,2H),3.70-3.65(m,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0-100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1.0mL/分钟；检测：UV，220nm。m/z 414.4[M+H]⁺；RT：1.26分钟。

实施例118.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}氨基甲酸叔丁酯的制备

将(2-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(39mg，0.096mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(37.3mg，0.192mmol)和碳酸铯(94mg，0.29mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加1,4-二

烷(864μL)和H₂O(96μL)。将所得混合物用N₂吹扫10分钟，随后添加1,1’-双(二叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯(6.26mg，9.60μmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其密封并且在100℃搅拌1小时。将反应冷却至室温，用EtOAc(30mL)稀释，并且用H₂O(30mL)洗涤。用EtOAc萃取水层，并且合并的有机层用饱和NaCl水溶液(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。将粗物质溶解于DMF(2mL)中，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在7％B保持0分钟，7-45％B历时25分钟，随后在100％B保持7分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥。物质进一步通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge Phenyl，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在9％B保持0分钟，9-49％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(5.7mg，15％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.66(s,1H),7.97-7.88(m,2H),7.73-7.67(m,1H),7.64(br d,J＝6.6Hz,1H),7.05(br d,J＝4.7Hz,1H),7.02-6.83(m,2H),6.74(s,1H),4.47(br t,J＝5.0Hz,2H),3.53-3.46(m,2H),1.34(s,9H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 394.1[M+H]⁺；RT：1.18分钟。

实施例119.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-N-甲基乙酰胺的制备

步骤1.(2-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯

在7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，TFA(513mg，1.36mmol)的DMF(4534μL)室温溶液中添加碳酸铯(1330mg，4.08mmol)，接着添加(2-氯乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(290mg，1.50mmol)和溴化锂(11.8mg，0.136mmol)。将悬浮液在室温搅拌19小时，随后在50℃搅拌16小时。将反应用EtOAc(100mL)稀释，用10％LiCl水溶液(2×50mL)和饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤。添加硅藻土，并且真空浓缩混合物。将此物质干燥上样至柱上并且通过快速色谱(具有25g固体负载的40g硅胶柱；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈黄色泡沫状的(2-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(321mg，56％)。NMR与约2:1比例的旋转异构体一致。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.70-8.64(m,1H),7.85(br d,J＝8.3Hz,1H),7.58(d,J＝2.0Hz,1H),7.30(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),6.95(br s,2H),4.54(t,J＝5.5Hz,2H),3.70(br d,J＝3.0Hz,2H),2.79-2.71(m,3H),1.29(br s,3H),1.01(s,6H)。LC-MS m/z 420/422[M+H]⁺。

步骤2.(2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯

将(2-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(320mg，0.761mmol)、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(318mg，1.14mmol)和碳酸铯(744mg，2.28mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加1,4-二

烷(6852μL)和H₂O(761μL)。将所得混合物用N₂吹扫10分钟，随后添加[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(27.9mg，0.038mmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其密封并且在100℃搅拌30分钟。将反应冷却至室温，用EtOAc(100mL)稀释，用H₂O(100mL)和饱和NaCl水溶液(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(40g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈黄色泡沫状的(2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(305mg，81％)。NMR与约2:1比例的旋转异构体一致。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.74-8.66(m,1H),8.01(br d,J＝7.9Hz,1H),7.62(d,J＝1.6Hz,1H),7.57(d,J＝1.8Hz,1H),7.31(dd,J＝8.0,1.8Hz,1H),6.85(br s,2H),6.48(s,1H),5.30(dd,J＝9.9,2.0Hz,1H),4.57(br t,J＝5.5Hz,2H),4.08-4.00(m,1H),3.73(br s,2H),3.63-3.53(m,1H),2.77-2.69(m,3H),2.46-2.37(m,1H),2.01-1.89(m,1H),1.79(br d,J＝12.3Hz,1H),1.63-1.48(m,3H),1.32(br s,3H),1.13-1.02(m,6H)。LC-MS m/z 492[M+H]⁺。

步骤3. 2-(2-(甲基氨基)乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在(2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(304mg，0.618mmol)的CH₂Cl₂(1546μL)室温溶液中添加TFA(1546μL)。将反应在室温搅拌2小时。在N₂流下浓缩反应以除去约一半体积，随后将其逐滴添加至Et₂O(20mL)中。通过真空过滤收集所得固体并且用Et₂O(3×2mL)洗涤，得到呈灰白色固体的2-(2-(甲基氨基)乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(272mg，82％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.70-12.93(m,1H),9.84-9.66(m,1H),9.45-9.26(m,1H),9.03(s,1H),8.79-8.65(m,2H),8.19-8.10(m,2H),7.93(br d,J＝8.0Hz,1H),7.85(br s,1H),6.80(d,J＝2.0Hz,1H),4.85(br t,J＝5.6Hz,2H),3.61(br s,2H),2.70(br s,3H)。LC-MS m/z 308[M+H]⁺。

步骤4.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-N-甲基乙酰胺

在2-(2-(甲基氨基)乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(20mg，0.037mmol)的DMF(208μL)室温溶液中添加乙酸(2.136μL，0.037mmol)，接着添加N,N-二异丙基乙胺(26.0μL，0.149mmol)和HATU(14.20mg，0.037mmol)。将反应在室温搅拌1小时。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在0％B保持0分钟，0-40％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)-N-甲基乙酰胺，TFA(14.1mg，80％)。NMR与约2:1比例的旋转异构体一致。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.86(s,1H),8.07-7.99(m,2H),7.80(br dd,J＝8.1,6.6Hz,1H),7.75(br d,J＝1.5Hz,1H),6.74(s,1H),4.70(br t,J＝5.9Hz,0.67H),4.61(br t,J＝6.1Hz,1.33H),3.92-3.86(m,0.67H),3.83(br t,J＝6.1Hz,1.33H),2.87(s,2H),2.79(s,1H),1.96(s,2H),1.91(s,1H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0-100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1.0mL/分钟；检测：UV，220nm。m/z 350.3[M+H]⁺；RT：0.87分钟。

实施例120.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-N-甲基苯甲酰胺的制备

在苯甲酸(12.6mg，0.103mmol)中添加N,N-二异丙基乙胺(在DMF中的0.5M溶液)(0.374mL，0.187mmol)，接着添加HATU(在DMF中的0.4M溶液)(0.233mL，0.093mmol)。将反应在室温搅拌5分钟，随后将其逐滴添加至2-(2-(甲基氨基)乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA溶液(在含0.75M N,N-二异丙基乙胺的DMF中的0.25M溶液)(0.374mL，0.093mmol)中。将澄清的橙色溶液在室温搅拌1小时。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在7％B保持0分钟，7-47％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)-N-甲基苯甲酰胺(30.5mg，79％)。NMR与约2:1比例的旋转异构体一致。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.81(br s,0.67H),8.63-8.54(m,0.33H),7.98-7.85(m,2H),7.72-7.67(m,1H),7.64(br d,J＝7.4Hz,1H),7.46-7.12(m,4H),6.94-6.56(m,4H),4.74-4.68(m,1.33H),4.60-4.54(m,067H),4.01-3.95(m,1.33H),3.82-3.75(m,0.67H),3.02(brs,1H),2.74(br s,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 412.1[M+H]⁺；RT：1.21分钟。

实施例121. 2-{2-[苄基(甲基)氨基]乙基}-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺的制备

在2-(2-(甲基氨基)乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(20mg，0.037mmol)的DMF(187μL)室温溶液中添加苯甲醛(5.0μL，0.049mmol)，接着添加三乙酰氧基硼氢化钠(23.8mg，0.112mmol)。将反应在室温搅拌1小时。将反应用H₂O(100μL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在12％B保持0分钟，12-37％B历时25分钟，随后在100％B保持2分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(2-(苄基(甲基)氨基)乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，TFA(10.0mg，50％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.98(s,1H),8.14(s,1H),8.12(d,J＝8.3Hz,1H),7.93(dd,J＝8.2,1.4Hz,1H),7.81(d,J＝1.9Hz,1H),7.38-7.29(m,5H),6.78(d,J＝2.3Hz,1H),4.91-4.81(m,2H),4.23-3.97(m,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0-100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1.0mL/分钟；检测：UV，220nm。m/z 398[M+H]⁺；RT：1.03分钟。

实施例122. 1-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}吡咯烷-2-酮的制备

步骤1.N-(2-[7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)-4-氯丁酰胺

在100mL 3颈圆底烧瓶中放入2-(2-氨基乙基)-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(900mg，2.94mmol，1当量)、DCM(30mL)、吡啶(697.6mg，8.82mmol，3当量)和4-氯丁酰氯(829.0mg，5.88mmol，2当量)。将所得溶液在室温搅拌16小时。随后通过添加MeOH来猝灭反应。浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10:1)，得到呈淡黄色固体的N-(2-[7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)-4-氯丁酰胺(240mg，21％)。LC-MSm/z[M+H]⁺＝390.1。

步骤2. 1-(2-[4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)吡咯烷-2-酮

在25mL圆底烧瓶中放入在THF(7mL)中的N-(2-[4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)-4-氯丁酰胺(300mg，0.73mmol，1当量)。随后添加t-BuOK(163.9mg，1.46mmol，2当量)。将所得溶液在室温搅拌16小时。通过添加H₂O(20mL)来猝灭反应。用乙酸乙酯(3×20mL)萃取所得溶液。浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10:1)，得到呈淡黄色固体的1-(2-[4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)吡咯烷-2-酮(200mg，73％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝374.1。

步骤3. 1-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基]吡咯烷-2-酮

在用氮气的惰性气氛吹扫并且维持的20mL密封试管中放入在二

烷(5mL)和H₂O(1.25mL)中的1-(2-[4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)吡咯烷-2-酮(200mg，0.53mmol，1当量)、Cs₂CO₃(348.3mg，1.07mmol，2当量)、3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(207.4mg，1.07mmol，2当量)、Pd(dppf)Cl₂(39.1mg，0.05mmol，0.1当量)。将所得溶液在80℃搅拌16小时。将所得混合物冷却至室温并且浓缩。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10:1)。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱，XBridge Shield RP18OBD柱，19×250mm，10μm；流动相，水(10mM NH₄HCO₃)和ACN(7分钟内15％相B直至40％)；检测器，UV。得到呈白色固体的1-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基]吡咯烷-2-酮(35.4mg，18％)。¹H-NMR：(300MHz,DMSO-d₆,ppm)：δ13.32-12.85(m br,1H),8.72(s,1H),7.90-7.52(m,4H),6.86(s,1H),6.76(s,2H),4.58-4.56(m,2H),3.74-3.71(m,2H),3.28-3.25(m,2H),2.18-2.14(m,2H),1.96-1.83(m,2H)。LC方法：柱：Kinetex EVO 3.0mm×50mm，2.6μm颗粒；流动相A：水+0.03％NH₃H₂O；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：10％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.60分钟；流速：1.2mL/分钟。m/z 362.2[M+H]⁺。RT：0.939分钟。

实施例123.N-{3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]丙基}苯甲酰胺的制备

步骤1.(3-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯

在7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，TFA(0.40g，1.06mmol)的DMF(3.54mL)室温溶液中添加碳酸铯(1.037g，3.18mmol)，接着添加(3-溴丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.278g，1.17mmol)。将悬浮液在室温搅拌40小时。将反应用EtOAc(50mL)和H₂O(50mL)稀释。分离各层并且用EtOAc(50mL)萃取水层。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(24g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈白色泡沫状的(3-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(379mg，85％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.74(s,1H),7.83(d,J＝8.3Hz,1H),7.59(d,J＝2.0Hz,1H),7.31(dd,J＝8.3,2.1Hz,1H),7.02-6.92(m,3H),4.43(t,J＝7.0Hz,2H),3.01-2.92(m,2H),2.04(四重峰,J＝6.9Hz,2H),1.37(s,9H)。LC-MS m/z 420/422[M+H]⁺。

步骤2.(3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯

将(3-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(378mg，0.899mmol)、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(375mg，1.35mmol)和碳酸铯(879mg，2.70mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加1,4-二

烷(8094μL)和H₂O(899μL)。将所得混合物用N₂吹扫10分钟，随后添加[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(32.9mg，0.045mmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其在100℃搅拌30分钟。将反应冷却至室温，用EtOAc(200mL)稀释，用H₂O(100mL)和饱和NaCl水溶液(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(40g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈棕色泡沫状的(3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(474mg，定量)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.77(s,1H),7.99(d,J＝8.0Hz,1H),7.62(d,J＝1.7Hz,1H),7.58(d,J＝1.7Hz,1H),7.32(dd,J＝8.0,1.7Hz,1H),6.98(br t,J＝5.4Hz,1H),6.89(s,2H),6.48(d,J＝1.8Hz,1H),5.30(dd,J＝9.9,2.0Hz,1H),4.46(t,J＝6.9Hz,2H),4.04(br d,J＝9.3Hz,1H),3.62-3.53(m,1H),2.97(q,J＝6.5Hz,2H),2.46-2.36(m,1H),2.11-2.01(m,2H),1.99-1.89(m,1H),1.79(br d,J＝12.5Hz,1H),1.64-1.48(m,3H),1.38(s,9H)。LC-MS m/z 492[M+H]⁺。

步骤3. 2-(3-氨基丙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA

在(3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(442mg，0.899mmol)的CH₂Cl₂(2248μL)室温溶液中添加TFA(2248μL)。将反应在室温搅拌2小时。浓缩反应以除去约一半体积，随后将其逐滴添加至Et₂O(50mL)中。通过真空过滤收集所得固体并且用Et₂O(3×2mL)洗涤，得到呈灰白色固体的2-(3-氨基丙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(423mg，88％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.51(br s,1H),9.86-9.70(m,1H),9.29-9.17(m,1H),9.01(s,1H),8.15(br s,1H),8.13(d,J＝8.3Hz,1H),7.92(dd,J＝8.3,1.1Hz,1H),7.83(br d,J＝9.2Hz,4H),6.80(d,J＝2.2Hz,1H),4.63(t,J＝6.7Hz,2H),2.94-2.84(m,2H),2.29-2.19(m,2H)。LC-MS m/z 308[M+H]⁺。

步骤4.N-{3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]丙基}苯甲酰胺

在2-(3-氨基丙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(40mg，0.075mmol)和苯甲酸(9.1mg，0.075mmol)的DMF(374μL)室温溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(52.1μL，0.299mmol)，接着添加HATU(28.4mg，0.075mmol)。将反应在室温搅拌30分钟。将反应用H₂O(0.2mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在7％B保持0分钟，7-47％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)丙基)苯甲酰胺(10.4mg，34％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.76(s,1H),8.58(br t,J＝5.2Hz,1H),7.92(d,J＝8.3Hz,1H),7.90(s,1H),7.83(br d,J＝7.4Hz,2H),7.69(br s,1H),7.64(br d,J＝7.7Hz,1H),7.54-7.49(m,1H),7.47-7.43(m,2H),6.99-6.76(m,2H),6.73(s,1H),4.51(br t,J＝6.7Hz,2H),3.38-3.31(m,2H),2.26-2.17(m,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 412.1[M+H]⁺；RT：1.17分钟。

根据与针对实施例123所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例124至126。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例127.N-{2-[4-氨基-7-(噻吩-2-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}氨基甲酸叔丁酯的制备

将(2-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，0.985mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(噻吩-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(310mg，1.48mmol)和碳酸铯(962mg，2.95mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加1,4-二

烷(8861μL)和H₂O(985μL)。将所得混合物用N₂吹扫10分钟，随后添加[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(36.0mg，0.049mmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其密封并且在100℃搅拌1小时。将反应冷却至室温，用EtOAc(100mL)稀释，用H₂O(100mL)和饱和NaCl水溶液(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(40g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈灰白色固体的(2-(4-氨基-7-(噻吩-2-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(396mg，98％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.66(s,1H),7.92(d,J＝8.1Hz,1H),7.70(d,J＝1.8Hz,1H),7.55(dd,J＝3.6,1.0Hz,1H),7.53(dd,J＝5.1,1.0Hz,1H),7.49(dd,J＝8.1,1.9Hz,1H),7.15(dd,J＝5.0,3.6Hz,1H),7.07(br t,J＝5.7Hz,1H),6.82(br s,2H),4.46(br t,J＝6.1Hz,2H),3.49(q,J＝6.0Hz,2H),1.34(s,9H)；LC-MS m/z 410[M+H]⁺。

实施例128.N-{2-[4-氨基-7-(噻吩-2-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-2-甲基-1,3-

唑-4-甲酰胺的制备

步骤1. 2-(2-氨基乙基)-7-(噻吩-2-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA

在(2-(4-氨基-7-(噻吩-2-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(376mg，0.918mmol)的CH₂Cl₂(2295μL)室温悬浮液中添加TFA(2295μL)，使得混合物变成橙色溶液(注意有气体快速逸出)。将反应在室温搅拌30分钟。浓缩反应以除去约一半体积，随后将其逐滴添加至Et₂O(25mL)中。通过真空过滤收集所得固体并且用Et₂O(3×10mL)洗涤，得到呈灰白色固体的2-(2-氨基乙基)-7-(噻吩-2-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(428.6mg，87％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.95-9.10(m,2H),9.02(s,1H),8.13(d,J＝8.2Hz,1H),8.17-8.05(m,2H),7.93(d,J＝1.3Hz,1H),7.83(br d,J＝8.1Hz,1H),7.65(dd,J＝5.1,1.0Hz,1H),7.63(dd,J＝3.6,1.1Hz,1H),7.21(dd,J＝5.1,3.7Hz,1H),4.76(t,J＝5.7Hz,2H),3.55-3.48(m,2H)；LC-MS m/z 310[M+H]⁺。

步骤2.N-{2-[4-氨基-7-(噻吩-2-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}-2-甲基-1,3-

唑-4-甲酰胺

在2-甲基

唑-4-甲酸(13.0mg，0.092mmol)中添加N,N-二异丙基乙胺(在DMF中的0.5M溶液)(0.335mL，0.167mmol)，接着添加HATU(在DMF中的0.4M溶液)(0.209mL，0.084mmol)。将反应在室温搅拌5分钟，随后将其逐滴添加至2-(2-氨基乙基)-7-(噻吩-2-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA的悬浮液(0.25M在含0.75M N,N-二异丙基乙胺的DMF中)(0.335mL，0.084mmol)中。将反应在室温搅拌2小时。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridgeC18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在16％B保持0分钟，16-56％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(2-(4-氨基-7-(噻吩-2-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)-2-甲基

唑-4-甲酰胺(22.9mg，59％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.74(s,1H),8.49(br t,J＝5.6Hz,1H),8.41(s,1H),7.95(d,J＝8.0Hz,1H),7.74(d,J＝1.4Hz,1H),7.57-7.50(m,3H),7.40-7.24(m,2H),7.15(dd,J＝5.0,3.9Hz,1H),4.61(br t,J＝6.1Hz,2H),3.80(q,J＝5.8Hz,2H),2.42(s,3H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridgeC18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 419[M+H]⁺；RT：1.34分钟。

根据与针对实施例128所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例129至131。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例132.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}苯甲酰胺的制备

步骤1.(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯

将(2-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.498g，1.23mmol)、1H-吡唑(0.125g，1.84mmol)和碳酸钠(0.520g，4.90mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加DMSO(12.26mL)。将所得混合物用N₂吹扫10分钟，随后添加N,N’-二甲基乙二胺(0.396mL，3.68mmol)和碘化亚铜(I)(0.350g，1.84mmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其密封并且在120℃搅拌1小时。将反应冷却至室温。将反应用EtOAc(200mL)稀释，用H₂O(200mL)、1:1的H₂O-NH₄OH水溶液(200mL)和饱和NaCl水溶液(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(80g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(395mg，82％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.66(s,1H),8.55(d,J＝2.2Hz,1H),7.99(d,J＝8.4Hz,1H),7.87(d,J＝2.1Hz,1H),7.75(d,J＝1.5Hz,1H),7.67(dd,J＝8.4,2.3Hz,1H),7.07(br t,J＝5.5Hz,1H),6.89(br s,2H),6.55-6.53(m,1H),4.46(br t,J＝6.0Hz,2H),3.49(q,J＝6.0Hz,2H),1.34(s,9H)；LC-MS m/z 394[M+H]⁺。

步骤2. 2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA

在(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(396mg，1.01mmol)的CH₂Cl₂(2516μL)室温溶液中添加TFA(2516μL)(注意气体逸出)。将反应在室温搅拌30分钟。浓缩反应以除去约一半体积，随后将其逐滴添加至Et₂O(25mL)中。通过真空过滤收集所得固体并且用Et₂O(3×10mL)洗涤，得到呈白色固体的2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(464mg，88％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.94-9.69(m,1H),9.52-9.28(m,1H),9.02(s,1H),8.62(d,J＝2.5Hz,1H),8.27-8.21(m,2H),8.16-8.06(m,3H),8.01-7.97(m,1H),7.85(d,J＝1.4Hz,1H),6.67-6.60(m,1H),4.77(t,J＝5.6Hz,2H),3.51(br d,J＝3.8Hz,2H)；LC-MS m/z 294[M+H]⁺。

步骤3.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}苯甲酰胺

在苯甲酸(11.6mg，0.095mmol)中添加N,N-二异丙基乙胺(在DMF中的0.5M溶液)(0.345mL，0.173mmol)，接着添加HATU(在DMF中的0.4M溶液)(0.216mL，0.086mmol)。将反应在室温搅拌5分钟，随后将其逐滴添加至2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA的悬浮液(0.25M在含0.75M N,N-二异丙基乙胺的DMF中)(0.345mL，0.086mmol)中。将反应在室温搅拌2小时。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在8％B保持0分钟，8-48％B历时25分钟，随后在100％B保持7分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)苯甲酰胺(23.1mg，67％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.72(s,1H),8.70-8.66(m,1H),8.54(br d,J＝1.9Hz,1H),8.01-7.95(m,1H),7.87(br s,1H),7.84-7.78(m,2H),7.74(s,1H),7.68-7.64(m,1H),7.54-7.49(m,1H),7.48-7.42(m,2H),6.89(br s,2H),6.54(br s,1H),4.66-4.60(m,2H),3.85-3.80(m,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 398.1[M+H]⁺；RT：1.24分钟。

实施例133.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基}吡啶-2-甲酰胺的制备

在吡啶甲酸(11.7mg，0.095mmol)中添加N,N-二异丙基乙胺(在DMF中的0.5M溶液)(0.345mL，0.173mmol)，接着添加HATU(在DMF中的0.4M溶液)(0.216mL，0.086mmol)。将反应在室温搅拌5分钟，随后将其逐滴添加至2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA的悬浮液(0.25M在含0.75M N,N-二异丙基乙胺的DMF中)(0.345mL，0.086mmol)中。将反应在室温搅拌2小时。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在8％B保持0分钟，8-48％B历时23分钟，随后在100％B保持6分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)吡啶甲酰胺(11.4mg，33％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.07(br t,J＝6.1Hz,1H),8.71(s,1H),8.61(d,J＝4.7Hz,1H),8.52(d,J＝2.2Hz,1H),8.02-7.94(m,3H),7.85(d,J＝1.9Hz,1H),7.74(s,1H),7.65(dd,J＝8.5,1.9Hz,1H),7.59(br t,J＝5.5Hz,1H),6.86(brs,2H),6.54(s,1H),4.67-4.63(m,2H),3.90(q,J＝5.9Hz,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 399.0[M+H]⁺；RT：0.98分钟。

实施例134.N-[[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸甲酯的制备

步骤1.N-[[(7-溴-4-羟基喹啉-3-基)氨基甲酰基]甲基]氨基甲酸叔丁酯

在500mL圆底烧瓶中放入3-氨基-7-溴喹啉-4-醇(10g，41.83mmol，1当量)、HATU(23.9g，62.74mmol，1.5当量)、2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]乙酸(7.3g，41.83mmol，1当量)、DCM(100mL)、DIEA(16.2g，125.35mmol，3.0当量)。将所得溶液在室温搅拌1小时。将所得溶液用30mL EtOAc洗涤并且过滤。真空浓缩滤液。得到15g呈粉色固体的N-[[(7-溴-4-羟基喹啉-3-基)氨基甲酰基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(90.5％)。

步骤2.N-([7-溴-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯

在500mL圆底烧瓶中放入N-[[(7-溴-4-羟基喹啉-3-基)氨基甲酰基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(20g，50.47mmol，1当量)、THF(250mL)、Lawesson试剂(16.3g，40.38mmol，0.8当量)。将所得溶液在70℃搅拌3小时。随后通过添加200mL NaHCO₃水溶液来猝灭反应。用EtOAc(500mL)萃取混合物。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且真空浓缩。得到9g呈淡黄色固体的N-([7-溴-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯(45.2％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝386.1。

步骤3. 7-溴-2-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)噻唑并[4,5-c]喹啉5-氧化物

在100mL圆底烧瓶中放入N-([7-溴-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.3g，3.30mmol，1当量)、DCM(20mL)、m-CPBA(3.3g，13.19mmol，4当量，70％)。将所得溶液在室温搅拌5小时。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(70:1)。得到1g呈淡黄色固体的7-溴-2-([[(叔丁氧基)羰基]氨基]甲基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-5-

-5-醇盐(73.92％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝412.1。

步骤4.N-[[7-溴-4-(叔丁基氨基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯

在100mL圆底烧瓶中放入7-溴-2-([[(叔丁氧基)羰基]氨基]甲基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-5-

-5-醇盐(700mg，1.71mmol，1当量)、DCM(20mL)、2-甲基丙-2-胺(623.9mg，8.53mmol，5当量)、4-甲基苯-1-磺酸(4-甲基苯)磺酰基酯(1.1g，3.41mmol，2当量)。将所得溶液在室温搅拌1小时。浓缩所得混合物。粗产物通过制备型TLC(PE/EA＝2:1)纯化。得到680mg呈淡黄色固体的N-[[7-溴-4-(叔丁基氨基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(85.6％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝466.2。

步骤5.N-[[4-(叔丁基氨基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯

在用氮气的惰性气氛吹扫并且维持的30mL密封试管中放入N-[[7-溴-4-(叔丁基氨基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(680mg，1.46mmol，1当量)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(567.0mg，2.92mmol，2当量)、Cs₂CO₃(1.4g，4.38mmol，3当量)、二

烷(10mL)、H₂O(1mL)、Pd(dppf)Cl₂(213.8mg，0.29mmol，0.2当量)。将所得溶液在100℃搅拌16小时。用EtOAc萃取所得溶液并且真空浓缩合并的有机层。粗产物通过制备型TLC(PE/EA＝1:2)纯化。得到420mg呈淡黄色固体的N-[[4-(叔丁基氨基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(63.52％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝453.2。

步骤6.N-[[4-(叔丁基氨基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸甲酯

在50mL圆底烧瓶中放入N-[[4-(叔丁基氨基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.33mmol，1当量)的THF(10mL)溶液。添加NaH(26.5mg，0.66mmol，2当量，60％)，接着添加氯甲酸甲酯(62.6mg，0.66mmol，2当量)。将所得溶液在室温搅拌1小时。随后通过添加MeOH来猝灭反应。浓缩所得混合物，并且将其在MeOH中在回流下加热2小时。随后将反应冷却至室温并且通过制备型TLC(EA:PE＝1:2)纯化。得到80mg呈淡黄色固体的N-[[4-(叔丁基氨基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸甲酯(58.80％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝411.1。

步骤7.N-[[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸甲酯

在25mL圆底烧瓶中放入N-[[4-(叔丁基氨基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸甲酯(80mg，0.19mmol，1当量)和TFA(5mL)。将所得溶液在70℃搅拌16小时。真空浓缩所得混合物，并且通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱，XBridge Shield RP18 OBD柱，19×250mm，10μm；流动相，水(10mM NH₄HCO₃)和ACN(7分钟内10％相B直至60％)；检测器，UV 254nm。得到25.9mg呈白色固体的N-[[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸甲酯(37.50％)。LC方法：柱：Kinetex 2.6μm EVO C18 100A 3.0mm×50mm，2.6μm颗粒；流动相A：水-5mM NH₄HCO₃；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：10％B至95％B历时2.1分钟，随后在95％B保持0.7分钟；流速：1.2mL/分钟。LC RT：1.073分钟。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝355.1。1H-NMR：(300MHz,DMSO-d₆,ppm)δ13.45-12.97(m,1H),8.31(s,1H),8.01(s,1H),7.89-7.57(m,3H),7.02-6.93(m,2H),6.84(s,1H),4.67(d,J＝5.9Hz,2H),3.64(s,3H)。

实施例135.N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基)乙基)苯甲酰胺的制备

步骤1.N-[2-[(7-溴-4-羟基喹啉-3-基)氨基甲酰基]乙基]氨基甲酸叔丁酯

将3-氨基-7-溴喹啉-4-醇盐酸盐(25g，90.73mmol，1当量)、3-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]丙酸(20.6g，108.87mmol，1.20当量)、HATU(51.7g，136.10mmol，1.5当量)和DIEA(35.2g，272.20mmol，3当量)的DCM(200mL)溶液在25℃搅拌3小时。用水(200mL)稀释所得混合物。用CH₂Cl₂(2×200mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(1×200mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，并且真空浓缩。将残留物用EtOAc(3×100mL)洗涤，得到呈红色固体的N-[2-[(7-溴-4-羟基喹啉-3-基)氨基甲酰基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(35g，94.02％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝410.1。

步骤2.N-(2-[7-溴-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯

将N-[2-[(7-溴-4-羟基喹啉-3-基)氨基甲酰基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(3.7g，9.02mmol，1当量)和Lawesson试剂(3.6g，8.90mmol，0.99当量)的甲苯(30mL)溶液在100℃搅拌1小时。用水(100mL)稀释所得混合物。用饱和NaHCO₃水溶液将混合物碱化至pH 8。用EtOAc(3×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(1×100mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，并且真空浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EtOAc(5:1)洗脱，得到呈黄色固体的N-(2-[7-溴-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(830mg，22.54％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝408.0。¹H-NMR：¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ9.35(s,1H),8.36(d,J＝2.0Hz,1H),8.05(d,J＝8.7Hz,1H),7.86(m,1H),3.65(t,J＝6.5Hz,2H),3.45(t,J＝6.5Hz,2H),1.42(s,9H)。

步骤3. 7-溴-2-(2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]乙基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-5-

-5-醇盐

将N-(2-[7-溴-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(800mg，1.96mmol，1当量)和m-CPBA(676.2mg，3.92mmol，2当量)的DCM(20mL)溶液在室温搅拌4小时。真空浓缩所得混合物。残留物通过硅胶柱色谱纯化，用CH₂Cl₂/MeOH(50:1)洗脱，得到呈黄色固体的7-溴-2-(2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]乙基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-5-

-5-醇盐(432mg，51.96％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝424.0。

步骤4.N-(2-[4-氨基-7-溴-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯

在7-溴-2-(2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]乙基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-5-

-5-醇盐(2g，4.71mmol，1当量)和NH₄OH(10mL)的DCM(30mL)搅拌溶液中添加TsCl(1.8g，9.44mmol，2.00当量)。将所得混合物在室温搅拌5小时。真空浓缩所得混合物。残留物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EtOAc(1:1)洗脱，得到呈黄色固体的N-(2-[4-氨基-7-溴-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.2g，60.14％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝423.0。H-NMR：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.76-7.74(m,2H),7.39(m,1H),7.17(d,J＝14.8Hz,3H),3.46(m,2H),3.32(m,2H),1.37(s,9H)。

步骤5.N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯

在氮气气氛下在室温，在N-(2-[4-氨基-7-溴-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.1g，2.60mmol，1当量)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.1g，5.67mmol，2.18当量)和Cs₂CO₃(2.5g，7.80mmol，3当量)在二

烷(15mL)和H₂O(1.5mL)中的搅拌溶液中添加Pd(dppf)Cl₂(0.4g，0.52mmol，0.2当量)。将所得混合物在氮气气氛下在90℃搅拌16小时。真空浓缩所得混合物。残留物通过制备型TLC(10:1的CH₂Cl₂/MeOH)纯化，得到呈淡黄色固体的N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(690mg，64.69％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝411.2。

步骤6. 2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-4-胺

在25mL圆底烧瓶中放入N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，0.19mmol，1当量)、DCM(4mL)、在二

烷中的HCl(4mL)。将所得溶液在室温搅拌6小时。浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱，XBridge Shield RP18 OBD柱，5μm，19×150mm；流动相，水(10mM NH₄HCO₃)和ACN(8分钟内20％相B直至45％)；检测器，UV 210/254nm。得到呈淡黄色固体的2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(15mg，24.80％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝311.0。H-NMR：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.04-12.91(m,1H),8.05(s,1H),7.96-7.62(m,3H),6.94-6.82(m,3H),3.29(t,J＝6.6Hz,2H),3.07(t,J＝6.6Hz,2H),1.86(s,2H)。

步骤7.N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基)乙基)苯甲酰胺

在25mL圆底烧瓶中放入2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(80mg，0.26mmol，1当量)、DCM(5mL)、TEA(78.2mg，0.77mmol，3当量)、苯甲酰氯(43.5mg，0.31mmol，1.2当量)。将所得溶液在室温搅拌16小时。浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱，Sunfire Prep C18 OBD柱，10μm，19×250mm；流动相，水(0.05％TFA)和CAN(7分钟内10％相B直至60％)；检测器，UV 210/254nm。得到15.5mg呈淡粉色固体的N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基)乙基)苯甲酰胺2,2,2-三氟乙酸盐(11.38％)。LC方法：柱：Agilent Poroshell HPH-C₁₈ 3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水/5mmol NH₄HCO₃；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：10％B至95％B历时2.1分钟，随后在95％B保持0.6分钟；流速：1.0mL/分钟。LC RT：1.236分钟。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝415.2。¹H-NMR：(400MHz,DMSO-d₆,ppm)δ9.29-9.08(m,1H),8.78(t,J＝5.8Hz,1H),8.26(s,1H),8.09-8.07(m,2H),8.00-7.98(m,3H),7.56-7.45(m,3H),6.87(d,J＝2.4Hz,1H),3.83(t,J＝6.3Hz,2H),3.55(t,J＝6.6Hz,2H)。

根据与针对实施例135所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例136至141。

实施例136.N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基]吡啶-2-甲酰胺

LC方法：柱：Kinetex EVO 3.0mm×50mm，2.6μm颗粒；流动相A：水/5mmol NH₄HCO₃；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：10％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.6分钟；流速：1.2mL/分钟。LC RT：1.207分钟。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝416.0。¹H-NMR：(400MHz,DMSO-d₆,ppm)δ13.42-12.94(m,1H),9.20(t,J＝6.0Hz,1H),8.66(d,J＝5.0Hz,1H),8.10-8.00(m,3H),7.98-7.56(m,4H),6.98-6.81(m,3H),3.91(m,2H),3.51(t,J＝6.9Hz,2H)。

实施例137.N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基]氧杂环丁烷-2-甲酰胺

LC方法：柱：Express C18 2.1mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至100％B历时2分钟，随后在100％B保持0.7分钟；流速：1.0mL/分钟。LC RT：0.829分钟。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝395.1。¹H-NMR：(400MHz,DMSO-d₆,ppm)δ13.34(s,1H),8.39(d,J＝6.2Hz,1H),8.01(s,1H),7.83-7.75(m,3H),6.98-6.82(m,3H),4.92(m,1H),4.65-4.51(m,2H),3.70(m,2H),3.41(t,J＝6.7Hz,2H),2.94-2.85(m,1H),2.45(m,1H)。

实施例138. 2-(3-氨基丙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-4-胺

LC方法：柱：Shim-pack XR-ODS，3.0mm×50mm，2.2μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.7分钟；流速：1.5mL/分钟。LC RT：0.776分钟。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝325.3。¹H NMR：(400MHz,甲醇-d₄,ppm)δ8.01(d,J＝1.6Hz,1H),7.83-7.69(m,3H),6.77(d,J＝2.3Hz,1H),3.26(t,J＝7.5Hz,2H),2.97-2.89(m,2H),2.18-2.11(m,2H)。

实施例139.N-[3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]丙基]乙酰胺

LC方法：柱：Kinetex EVO，3.0mm×50mm，2.6μm颗粒；流动相A：水+10mM NH₄HCO₃；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：10％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.6分钟；流速：1.2mL/分钟。LC RT：1.020分钟。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝366.95。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆,ppm)δ13.45-12.96(m,1H),8.02-7.96(m,2H),7.83-7.79(m,3H),6.98-6.85(m,3H),3.22-3.17(m,4H),2.08-1.95(m,2H),1.83(s,3H)。

实施例140.N-{[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基}-N-乙基乙酰胺

LC方法：柱：Shim-pack XR-ODS，3.0mm×50mm，2.2μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至50％B历时2分钟，50％B至100％B历时0.3分钟，随后在100％B保持0.4分钟；流速：1.2mL/分钟。LC RT：1.679分钟。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]+＝367.1。H-NMR：(CD₃OD,ppm)：δ8.061(s,1H),7.848-7.741(m,3H),6.785(s,1H),5.091-4.990(m,2H),3.654-3.572(m,2H),2.252(s,3H),1.301-1.166(m,3H)。

实施例141. 2-[3-(苄基氧基)丙基]-7-(1H-吡唑-3-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-4-胺

¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.07(br s,1H),7.81(br s,3H),7.37-7.14(m,5H),6.80(br s,1H),4.53(s,2H),3.66(t,J＝6.0Hz,2H),2.37-2.14(m,2H)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]+＝416.1。

实施例142. 3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]丙-1-醇的制备

在25mL圆底烧瓶中放入2-[3-(苄基氧基)丙基]-7-(1H-吡唑-3-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(290mg，0.70mmol，1.00当量)的乙醇(30mL)溶液。在溶液中添加Pd(OH)₂(29mg)。将所得溶液脱气并且用氢气回填。将所得溶液在油浴中在80℃搅拌2小时。通过过滤收集固体。真空浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件(HPLC-10)纯化：柱，XBridge Shield RP18 OBD柱，19×250mm，10μm；流动相，水(10mM NH₄HCO₃)和ACN(8分钟内10.0％ACN直至36.0％)；检测器，254/210nm。得到35.7mg呈白色固体的3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-2-基]丙-1-醇(16％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝326.0。H-NMR：(DMSO-d₆,300MHz,ppm)：δ8.02(s,1H),7.82-7.58(m,3H),6.89-6.83(m,3H),4.65(t,J＝5.1Hz,1H),3.58-3.52(m,2H),3.23(t,J＝5.1Hz,2H),2.05-1.96(m,2H)。

实施例143. 2-[(二甲基氨基)甲基]-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-4-胺的制备

在50mL圆底烧瓶中放入2-(氨基甲基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(50mg，0.17mmol，1当量)、MeOH(5mL)、AcOH(0.1mL)、HCHO(41.1mg，0.51mmol，3.00当量，37％)、NaBH₄(19.1mg，0.51mmol，3.00当量)。将所得溶液在室温搅拌2小时。浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱，XBridge Shield RP18 OBD柱，19×250mm，10μm；流动相，水(10mM NH₄HCO₃)和ACN(8分钟内20％相B直至60％)；检测器，uv254nm。得到10.1mg呈白色固体的2-[(二甲基氨基)甲基]-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(18.45％)。LC方法：柱：Kinetex EVO C18 3.0mm×50mm，2.6μm颗粒；流动相A：水/5mmol NH₄HCO₃；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：10％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.6分钟；流速：1.2mL/分钟。LC RT：0.81分钟。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝325.0。¹H-NMR：(400MHz,DMSO-d₆,ppm)δ12.96(s,1H),8.01(s,1H),7.83-7.57(m,3H),6.98(s,2H),6.84(s,1H),3.94(s,2H),2.37(s,6H)。

实施例144. 2-[3-(二乙基氨基)丙基]-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-4-胺的制备

将2-(3-氨基丙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(70mg，0.22mmol，1当量)、乙醛(14.3mg，0.32mmol，1.5当量)和NaBH₃CN(27.1mg，0.43mmol，2当量)在CH₃COOH(0.5mL)和MeOH(10mL)中的溶液在室温搅拌过夜。减压浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件(柱：XBridge Prep OBD C18柱30×150mm 5μm；流动相A：水(10mM NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流动速率：25mL/分钟；梯度：10分钟内25％B至45％B；254/210nm；RT：8分钟)纯化，得到呈灰白色固体的2-[3-(二乙基氨基)丙基]-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]噻唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(9.8mg，11.94％)。LC方法：柱：Shim-pack XR-ODS3.0mm×50mm，2.2μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时1.7分钟，随后在95％B保持1.0分钟；流速：1.5mL/分钟。LC RT：0.753分钟。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝381.4。¹H-NMR：(300MHz,CD₃OD,ppm)δ8.03(s,1H),7.83(d,J＝8.2Hz,1H),7.77-7.70(m,2H),6.78(d,J＝2.3Hz,1H),3.23(t,J＝7.4Hz,2H),2.67-2.60(m,6H),2.16-2.08(m,2H),1.09-1.05(m,6H)。

实施例145. 2-[(二甲基氨基)甲基]-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-4-胺的制备

步骤1.N-([7-溴-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯

在500mL圆底烧瓶中放入N-[[(7-溴-4-羟基喹啉-3-基)氨基甲酰基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(10g，25.24mmol，1当量)、DCM(250mL)、CCl₃CCl₃(9.0g，37.86mmol，1.50当量)、TEA(10.2g，100.80mmol，3.99当量)、PPh₃(9.9g，37.75mmol，1.50当量)。将所得溶液在室温搅拌1小时。用水(200mL)稀释所得混合物。用3×200mL二氯甲烷萃取所得溶液，并且合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物施加至硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1:4)，得到5g呈粉色固体的N-([7-溴-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯(52.38％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝378.0。

步骤2. 7-溴-2-([[(叔丁氧基)羰基]氨基]甲基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-5-

-5-醇盐

在100mL圆底烧瓶中放入N-([7-溴-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯(4.2g，11.10mmol，1当量)、DCM(50mL)、m-CPBA(9.6g，55.63mmol，5.01当量)。将所得溶液在室温搅拌2小时。真空浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(50:1)。浓缩所得混合物，得到1.8g呈黄色固体的7-溴-2-([[(叔丁氧基)羰基]氨基]甲基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-5-

-5-醇盐(41.12％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝394.0。

步骤3.N-([4-氨基-7-溴-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯

在100mL圆底烧瓶中放入在DCM(5mL)和NH₃H₂O(5mL)中的7-溴-2-([[(叔丁氧基)羰基]氨基]甲基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-5-

-5-醇盐(1.8g，4.57mmol，1当量)。随后添加TsCl(1.8g，9.44mmol，2.07当量)。将所得溶液在室温搅拌1小时。真空浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(50:1)。真空浓缩所得混合物。得到950mg呈橙色固体的N-([4-氨基-7-溴-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯(52.91％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝393.0。

步骤4.N-[[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯

在N₂下在50mL圆底烧瓶中放入在二

烷(5mL)和H₂O(0.5mL)中的N-([4-氨基-7-溴-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯(900mg，2.29mmol，1当量)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(0.9g，4.58mmol，2.00当量)、Cs₂CO₃(2.2g，6.87mmol，3.00当量)和Pd(dppf)Cl₂(334.9mg，0.46mmol，0.20当量)。将所得混合物在氮气气氛下在105℃搅拌过夜。真空浓缩所得混合物。将残留物在硅胶柱上，使用乙酸乙酯/石油醚(1:4)纯化，得到680mg呈棕色固体的N-[[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(78.10％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝381.2。

步骤5. 2-(氨基甲基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-4-胺

在25mL圆底烧瓶中放入在DCM(5mL)和HCl(4N)/二

烷(2mL)中的N-[[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.26mmol，1当量)。将所得溶液在室温搅拌1.5小时。真空浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱，XBridge Shield RP18 OBD柱，5μm，19×150mm；流动相，水(10mM NH₄HCO₃)和ACN(8分钟内15％相B直至33％)；检测器，uv 254nm。得到8.9mg呈黄色固体的2-(氨基甲基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(12.08％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝281.1。H-NMR：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.96(s,1H),8.35(m,4H),6.88(d,J＝34.5Hz,3H),4.16(s,2H),1.24(s,1H)。

步骤6. 2-[(二甲基氨基)甲基]-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-4-胺

在50mL圆底烧瓶中放入在MeOH(2mL)和CH₃COOH(0.2mL)中的2-(氨基甲基)-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(40mg，0.14mmol，1当量)、HCHO(12.9mg，0.43mmol，3.0当量)。随后添加NaBH₃CN(26.9mg，0.43mmol，3.0当量)。将所得溶液在室温搅拌1小时。浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱：XBridge PrepOBD C18柱30×150mm 5μm；流动相A：水(10mM NH₄HCO₃)；流动相B：ACN；流动速率：25mL/分钟；梯度：7.5分钟内5％B至40％B；254/210nm；RT：7.1分钟。得到10mg呈白色固体的2-[(二甲基氨基)甲基]-7-(1H-吡唑-5-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(22.73％)。LC方法：柱：Kinetex EVO C18 3.0mm×50mm，2.6μm颗粒；流动相A：水/5mmol NH₄HCO₃；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：10％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.6分钟；流速：1.2mL/分钟。LC RT：1.039分钟。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝309.1。¹H-NMR：(300MHz,CD₃OD,ppm)δ8.16-7.98(m,2H),7.82(d,J＝37.3Hz,2H),6.81(s,1H),3.98(s,2H),2.48(s,6H)。

实施例146. 2-[3-(苄基氧基)丙基]-7-(1H-吡唑-3-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-4-胺

根据与针对实施例145所描述的合成方法类似的合成方法，使用适当的起始物质制备实施例146。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.02(br s,1H),7.97(d,J＝8.3Hz,1H),7.64(brd,J＝1.5Hz,1H),7.53(s,1H),7.31-7.16(m,5H),6.74(d,J＝1.6Hz,1H),4.51(s,2H),3.66(t,J＝6.0Hz,2H),3.17(t,J＝7.3Hz,2H),2.33-2.18(m,2H)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝400.2。

实施例147. 3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-2-基]丙-1-醇的制备

在100mL圆底烧瓶中放入2-[3-(苄基氧基)丙基]-7-(1H-吡唑-3-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(200mg，0.50mmol，1.00当量)的乙醇(30mL)溶液。在溶液中添加Pd(OH)₂(100mg)。将所得溶液脱气并且用氢气回填。将所得溶液在油浴中在70℃搅拌2天。通过过滤除去固体。真空浓缩溶液。残留物通过制备型HPLC利用以下条件(HPLC-10)纯化：柱，X Bridge Shield RP18 OBD柱，19×250mm，10μm；流动相，水(10mM NH₄HCO₃)和ACN(8分钟内10.0％ACN直至36.0％)；检测器，UV 254/210nm。得到45mg呈白色固体的3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-[1,3]

唑并[4,5-c]喹啉-2-基]丙-1-醇(29％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝310.1。H-NMR：(CD₃OD,300MHz,ppm)：δ8.14-7.96(m,2H),7.85-7.81(m,1H),7.78-7.68(m,1H),6.79(s,1H),3.74(t,J＝6.0Hz,2H),3.17(t,J＝4.5Hz,2H),2.21-2.12(m,2H)。

实施例148. 3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)呋喃并[2,3-c]喹啉-2-基]丙-1-醇的制备

步骤1：7-溴-4-碘喹啉-3-醇

在250mL圆底烧瓶中放入7-溴喹啉-3-醇(2000mg，8.93mmol，1.00当量)在2N NaOH溶液(40mL)中的溶液。在此混合物中逐滴添加碘(4536mg，17.86mmol)在20％碘化钾水溶液(40mL)中的溶液。将所得溶液在25℃搅拌3小时。随后用乙酸将溶液的pH值调节至6-7。通过过滤收集固体并且用15mL H₂O洗涤三次。得到2740mg呈黄色固体的7-溴-4-碘喹啉-3-醇(88％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝350.0。

步骤2. 3-[7-溴呋喃并[2,3-c]喹啉-2-基]丙-1-醇

在用氮气的惰性气氛吹扫并且维持的250mL圆底烧瓶中放入7-溴-4-碘喹啉-3-醇(1575mg，4.50mmol，1.00当量)在CH₃CN(20mL)和TEA(10mL)中的溶液。在溶液中添加戊-4-炔-1-醇(378mg，4.50mmol，1.00当量)、Pd(PPh₃)₄(156mg，0.14mmol，0.03当量)和CuI(27mg，0.14mmol，0.03当量)。将所得溶液在油浴中在70℃搅拌12小时。真空浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1/2)。得到681mg呈黄色固体的3-[7-溴呋喃并[2,3-c]喹啉-2-基]丙-1-醇(49％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝306.2。

步骤3：7-溴-2-(3-羟基丙基)呋喃并[2,3-c]喹啉-5-

-5-醇盐

在用氮气的惰性气氛吹扫并且维持的250mL圆底烧瓶中放入3-[7-溴呋喃并[2,3-c]喹啉-2-基]丙-1-醇(681mg，2.22mmol，1.00当量)的二氯甲烷(20mL)溶液。在溶液中添加m-CPBA(824mg，4.77mmol，2.15当量)。将所得溶液在25℃搅拌2小时。真空浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(25/1)。得到470mg呈黄色固体的7-溴-2-(3-羟基丙基)呋喃并[2,3-c]喹啉-5-

-5-醇盐(66％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝322.2。

步骤4：3-[4-氨基-7-溴呋喃并[2,3-c]喹啉-2-基]丙-1-醇

在250mL圆底烧瓶中放入7-溴-2-(3-羟基丙基)呋喃并[2,3-c]喹啉-5-

-5-醇盐(470mg，1.46mmol，1.00当量)的二氯甲烷(20mL)溶液。在溶液中添加NH₃-H₂O(10mL)和TsCl(416mg，2.18mmol，1.50当量)。将所得溶液在25℃搅拌2小时。真空浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)。得到390mg呈黄色固体的3-[4-氨基-7-溴呋喃并[2,3-c]喹啉-2-基]丙-1-醇(83％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝321.2。

步骤5：3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)呋喃并[2,3-c]喹啉-2-基]丙-1-醇

在用氮气的惰性气氛吹扫并且维持的100mL圆底烧瓶中放入3-[4-氨基-7-溴呋喃并[2,3-c]喹啉-2-基]丙-1-醇(390mg，1.21mmol，1.00当量)的二

烷/水(15/3mL)溶液。在溶液中添加3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(350mg，1.80mmol，1.49当量)、Cs₂CO₃(785mg，2.45mmol，2.01当量)和Pd(dppf)Cl₂.DCM(200mg，0.24mmol，0.20当量)。将所得溶液在油浴中在100℃搅拌12小时。真空浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)。所得粗产物(250mg)通过制备型HPLC利用以下条件(HPLC-10)纯化：柱，XBridge Shield RP18 OBD柱，19×250mm，10μm；流动相，水(10mM NH₄HCO₃)和ACN(9分钟内15.0％ACN直至35.0％)；检测器，UV 254/210nm。得到77mg呈白色固体的3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)呋喃并[2,3-c]喹啉-2-基]丙-1-醇(21％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝309.1。H-NMR(CD₃OD,400MHz,ppm)：δ8.10-8.01(m,2H),7.86-7.64(m,2H),7.10(s,1H),6.77(s,1H),3.69(t,J＝6.4Hz,2H),3.03(t,J＝7.2Hz,2H),2.09-2.02(m,2H)。

实施例149. 2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺的制备

步骤1. 7-溴-2-(4-甲氧基苄基)-2,5-二氢-4H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-酮

在7-溴-2,5-二氢-4H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-酮(256mg，0.969mmol)(根据WO2013/045400制备)的DMF(9694μL)室温悬浮液中添加碳酸钾(402mg，2.91mmol)和1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(158μL，1.163mmol)。将反应在室温搅拌2天。将反应用10％MeOH-EtOAc(200mL)稀释，用H₂O(200mL)和饱和NaCl水溶液(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。不经进一步纯化即使用。LC-MS m/z 384/386[M+H]⁺。似乎存在少量的区域异构体产物，并且其经历接下来三个合成步骤。

步骤2. 7-溴-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉

在7-溴-2-(4-甲氧基苄基)-2,5-二氢-4H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-酮(来自前一反应的粗物质)在CH₂Cl₂(4548μL)和DMF(227μL)中的0℃混合物中逐滴添加磷酰氯(107μL，1.146mmol)。将溶液在室温搅拌17小时。添加另外的POCl₃(53.5μL)并且在室温搅拌1.5小时。添加另外的DMF(0.5mL)并且搅拌3小时。通过缓慢添加至经搅拌的1.5M K₂HPO₄水溶液(100mL)中来猝灭反应。用CH₂Cl₂(2×100mL)萃取混合物。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。将粗物质溶解于CH₂Cl₂和MeOH的混合物中，与硅藻土混合，并且真空浓缩。将此物质干燥上样至柱上并且通过快速色谱(40g硅胶；线性梯度0-100％EtOAc-CH₂Cl₂)再纯化，得到呈灰白色固体的7-溴-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉(108mg，28％)。LC-MS m/z 402/404[M+H]⁺。

步骤3. 7-溴-N,2-双(4-甲氧基苄基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺

在7-溴-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉(108mg，0.268mmol)的DMSO(894μL)室温溶液中添加(4-甲氧基苯基)甲胺(70.1μL，0.536mmol)和N,N-二异丙基乙胺(140μL，0.805mmol)。将反应在80℃搅拌22小时。将反应冷却至室温，用EtOAc(20mL)稀释，用H₂O(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。此物质不经进一步纯化即使用。LC-MS m/z 503/505[M+H]⁺。

步骤4. 7-溴-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，TFA

将7-溴-N,2-双(4-甲氧基苄基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(143mg，0.284mmol)的TFA(568μL)溶液密封，并且在70℃搅拌16小时。将反应冷却至室温并且真空浓缩。自CH₂Cl₂(2×2mL)浓缩粗物质。将粗物质与CH₂Cl₂(0.5mL)混合，过滤，并且用CH₂Cl₂(3×0.5mL)洗涤，得到呈白色固体的7-溴-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，TFA(99mg，92％)。LC-MS m/z 263/265[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.26-12.95(m,1H),9.81-9.57(m,1H),8.95-8.56(m,2H),8.18(d,J＝8.5Hz,1H),7.93(br s,1H),7.80-7.70(m,1H)。

步骤5.(2-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯

在7-溴-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，TFA(98mg，0.26mmol)的DMF(742μL)室温溶液中添加碳酸铯(254mg，0.780mmol)，接着添加(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(64.1mg，0.286mmol)。将悬浮液在室温搅拌3小时。用EtOAc(20mL)和H₂O(20mL)稀释反应。分离各层并且用EtOAc(20mL)萃取水层。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤。添加硅藻土，并且真空浓缩混合物。将此物质干燥上样至柱上并且通过快速色谱(具有5g固体负载的24g硅胶柱；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到(2-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(54.2mg，51％)。产物为自柱洗脱的两种观察的区域异构体峰中的第二个；其为在LC-MS条件下观察的更小极性产物。LC-MS m/z406/408[M+H]⁺；¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.42(s,1H),7.98(d,J＝8.3Hz,1H),7.57(d,J＝2.0Hz,1H),7.29(dd,J＝8.3,2.0Hz,1H),7.16-7.06(m,2H),6.99(br t,J＝5.6Hz,1H),4.43(br t,J＝5.9Hz,2H),3.43(q,J＝5.9Hz,2H),1.33(s,9H)。

步骤6.(2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯

将(2-(4-氨基-7-溴-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(53.2mg，0.131mmol)、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(54.6mg，0.196mmol)和碳酸铯(128mg，0.393mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加1,4-二

烷(1178μL)和H₂O(131μL)。将所得混合物用N₂吹扫15分钟，随后添加[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(4.79mg，6.55μmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其在100℃搅拌30分钟。将反应冷却至室温，用EtOAc(20mL)稀释，用H₂O(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(12g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到(2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。LC-MS m/z478[M+H]⁺。

步骤7. 2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺

在(2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(62.6mg，0.131mmol)的CH₂Cl₂(328μL)室温溶液中添加TFA(328μL)。将反应在室温搅拌1.5小时。浓缩反应以除去约一半体积，随后将其逐滴添加至Et₂O(4mL)中。通过真空过滤收集所得固体并且用Et₂O(3×1mL)洗涤，得到呈白色固体的2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，2TFA(64.3mg，94％)。一部分此物质(10mg)进一步通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在0％B保持0分钟，0-40％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，2TFA(7.1mg)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.24-13.03(m,1H),9.52-8.98(m,1H),8.90(s,1H),8.23(d,J＝8.2Hz,1H),8.09(br s,1H),7.92(br d,J＝5.9Hz,1H),7.88-7.78(m,1H),6.82(d,J＝2.1Hz,1H),4.73(br t,J＝5.6Hz,2H),3.48-3.44(m,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 294.0[M+H]⁺；RT：0.52分钟。

实施例150.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基]乙基}吡啶-2-甲酰胺的制备

在吡啶甲酸(7.06mg，0.057mmol)的DMF(174μL)室温溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(18.17μL，0.104mmol)，接着添加HATU(19.84mg，0.052mmol)。将此混合物在室温搅拌5分钟，随后将其逐滴添加至2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，2TFA(27.2mg，0.052mmol)和N,N-二异丙基乙胺(27.3μL，0.157mmol)的DMF(174μL)溶液中。将反应在室温搅拌30分钟。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在4％B保持0分钟，4-44％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙基)吡啶甲酰胺(14.2mg，68％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.10(t,J＝5.9Hz,1H),8.62(d,J＝4.7Hz,1H),8.46(s,1H),8.08(d,J＝8.1Hz,1H),8.03-7.95(m,2H),7.87(d,J＝1.3Hz,1H),7.71(s,1H),7.64(d,J＝7.8Hz,1H),7.61-7.57(m,1H),7.07-6.84(m,2H),6.75(d,J＝2.1Hz,1H),4.63(t,J＝6.0Hz,2H),3.86(q,J＝5.9Hz,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridgeC18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 399.[M+H]⁺；RT：0.92分钟。

实施例151.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基]乙基}-2-氯-1,3-噻唑-4-甲酰胺的制备

在2-氯噻唑-4-甲酸(9.39mg，0.057mmol)的DMF(130μL)室温溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(18.17μL，0.104mmol)，接着添加HATU(19.84mg，0.052mmol)。将此混合物在室温搅拌5分钟，随后将其逐滴添加至2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，2TFA(27.2mg，0.052mmol)和N,N-二异丙基乙胺(27.3μL，0.157mmol)的DMF(130μL)溶液中。将反应在室温搅拌30分钟。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在7％B保持0分钟，7-47％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙基)-2-氯噻唑-4-甲酰胺(14.7mg，64％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.83(br t,J＝5.5Hz,1H),8.44(s,1H),8.23(s,1H),8.09(d,J＝8.3Hz,1H),7.87(s,1H),7.71(br s,1H),7.63(br d,J＝7.7Hz,1H),6.99-6.88(m,2H),6.76(d,J＝1.9Hz,1H),4.60(br t,J＝5.6Hz,2H),3.82-3.75(m,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 439.0[M+H]⁺；RT：1.16分钟。

实施例152. 2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺的制备

步骤1. 7-溴喹啉-4-胺的合成

将7-溴-4-氯喹啉(6.8g，28.04mmol，1当量)在氨水溶液(20mL)和CH₃CN(50mL)中的溶液在120℃搅拌2天。减压浓缩所得混合物。残留物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EtOAc(5:1)洗脱，得到呈黄色固体的7-溴喹啉-4-胺(1.1g，17.59％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝223.0/225.0。

步骤2. 7-溴-3-碘喹啉-4-胺的合成

将7-溴喹啉-4-胺(1.1g，4.93mmol，1当量)和NIS(1029mg，5.92mmol，1.2当量)的CH₃CN(20mL)溶液在65℃搅拌2小时。减压浓缩所得混合物。残留物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EtOAc(2:1)洗脱，得到呈棕黄色固体的7-溴-3-碘喹啉-4-胺(850mg，49％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝249.9/251.9。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.63(s,1H),8.28(d,J＝9.0Hz,1H),7.96(d,J＝1.7Hz,1H),7.60(dd,J＝9.0,1.7Hz,1H),7.01(s,2H)。

步骤3.N-[4-(4-氨基-7-溴喹啉-3-基)丁-3-炔-1-基]氨基甲酸叔丁酯的合成

将7-溴-3-碘喹啉-4-胺(3g，8.6mmol，1当量)、N-(丁-3-炔-1-基)氨基甲酸叔丁酯(1745mg，10.3mmol，1.2当量)、CuI(163.7mg，0.86mmol，0.1当量)、Pd(PPh₃)₂Cl₂(603.4mg，0.86mmol，0.1当量)和TEA(4349mg，42.9mmol，5当量)的Et₂O(30mL)溶液在氮气气氛下在室温搅拌过夜。减压浓缩所得混合物。残留物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EtOAc(2:1)洗脱，得到呈黄色固体的N-[4-(4-氨基-7-溴喹啉-3-基)丁-3-炔-1-基]氨基甲酸叔丁酯(1.4g，41.7％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝390.1/392.1。

步骤4.N-(2-[7-溴-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成

将N-[4-(4-氨基-7-溴喹啉-3-基)丁-3-炔-1-基]氨基甲酸叔丁酯(1.8g，4.612mmol，1当量)和KOH(5.17g，9.2mmol，2.0当量)的DMF(20mL)溶液在氮气气氛下在40℃搅拌过夜。减压浓缩所得混合物。残留物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EtOAc(1:1)洗脱，得到呈黄色固体的N-(2-[7-溴-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(540mg，30％)。LC-MS(ES,m/z)：[M+H]⁺＝390.1/392.1。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.38(s,1H),9.02(s,1H),8.31(d,J＝8.7Hz,1H),8.18(d,J＝1.7Hz,1H),7.74(dd,J＝8.8,1.8Hz,1H),7.04(t,J＝5.5Hz,1H),6.54(s,1H),3.39-3.35(m,2H),2.96(t,J＝7.2Hz,2H),1.37(s,9H)。

步骤5. 7-溴-2-(2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]乙基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-5-

-5-醇盐的合成

将N-(2-[7-溴-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(360mg，0.922mmol，1当量)和mCPBA(318.3mg，1.85mmol，2当量)的DCM(10mL)溶液在室温搅拌过夜。真空浓缩所得混合物。残留物通过硅胶柱色谱纯化，用CH₂Cl₂/MeOH(20:1)洗脱，得到呈黄色固体的7-溴-2-(2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]乙基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-5-

-5-醇盐(120mg，32％)。LC-MS(ES,m/z)：[M+H]⁺＝406.1/408.1。

步骤6.N-(2-[4-氨基-7-溴-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成

将7-溴-2-(2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]乙基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-5-

-5-醇盐(180mg，0.44mmol，1当量)和TsCl(168.9mg，0.88mmol，2当量)在NH₃H₂O(5mL)和DCM(15mL)中的溶液在室温搅拌2小时。减压浓缩所得混合物。残留物通过硅胶柱色谱纯化，用CH₂Cl₂/MeOH(30:1)洗脱，得到呈黄色固体的N-(2-[4-氨基-7-溴-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(175mg，97.5％)。LC-MS(ES,m/z)：[M+H]⁺＝405.1/407.1。

步骤7.N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯的合成

将N-(2-[4-氨基-7-溴-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(175mg，0.43mmol，1当量)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-4H-吡唑(167.6mg，0.86mmol，2.0当量)、Pd(dppf)Cl₂(63.19mg，0.086mmol，0.2当量)和Cs₂CO₃(422mg，1.295mmol，3当量)在二

烷(10mL)和H₂O(1mL)中的溶液在氮气气氛下在90℃搅拌过夜。减压浓缩所得混合物。残留物通过硅胶柱色谱纯化，用CH₂Cl₂/MeOH(10:1)洗脱，得到呈黄色固体的N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(152mg，89.7％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝393.2。

步骤8. 2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺的合成

将N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(152mg，0.38mmol，1当量)在于1,4-二

烷中的HCl(4N，5mL)中的溶液在室温搅拌2小时。真空浓缩所得混合物，并且随后通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱：XBridgeC18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在0％B保持1分钟，0-40％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝293.0。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.94-8.55(m,1H),8.23(br d,J＝8.2Hz,1H),8.17(br d,J＝0.8Hz,1H),7.97(br d,J＝7.2Hz,1H),7.92-7.81(m,1H),6.94(s,1H),6.84(br s,1H),3.42-3.42(m,1H),3.29-3.19(m,2H),3.14(br d,J＝7.6Hz,2H)。

实施例153. 2-[2-(二甲基氨基)乙基]-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺的制备

将2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(50mg，0.17mmol，1当量)、HCHO(15.4mg，0.51mmol，3当量)和NaBH₃CN(21.5mg，0.34mmol，2当量)在MeOH(10mL)和CH₃COOH(0.5mL)中的溶液在室温搅拌过夜。减压浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件(柱：Sunfire Prep C18 OBD柱，10μm，19×250mm；流动相A：水(0.05％TFA)，流动相B：ACN；流动速率：25mL/分钟；梯度：8分钟内15％B至30％B；254/210nm；Rt：6.37分钟)纯化，得到呈灰白色固体的2-[2-(二甲基氨基)乙基]-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺；双(三氟乙酸)(13.4mg，14.29％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝321.2。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄,ppm)δ8.17(dd,J＝8.5,2.5Hz,1H),8.06(dt,J＝3.7,1.8Hz,1H),7.95(dt,J＝8.3,1.6Hz,1H),7.77(d,J＝2.3Hz,1H),6.92(d,J＝2.5Hz,1H),6.84(d,J＝2.3Hz,1H),3.60(dd,J＝8.9,6.8Hz,2H),3.36(t,J＝7.9Hz,2H),3.01(s,6H)。

实施例154.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基}丙酰胺的制备

将2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(50mg，0.17mmol，1当量)、丙酰氯(19.0mg，0.21mmol，1.2当量)和TEA(34.6mg，0.34mmol，2当量)的DCM(10mL)溶液在室温搅拌过夜。真空浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件(柱：Sunfire Prep C18 OBD柱，10μm，19×250mm；流动相A：水(0.05％TFA)，流动相B：ACN；流动速率：25mL/分钟；梯度：8分钟内15％B至30％B；254/210nm；RT：6.37分钟)纯化，得到呈灰白色固体的3,3,3-三氟丙-1-烯-2-醇N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基]丙酰胺水合物(8.5mg，10.39％)。LC-MS(ES,m/z)：[M+H]⁺＝349.2。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄,ppm)δ8.16(d,J＝8.4Hz,1H),8.04(d,J＝1.5Hz,1H),7.94(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.76(d,J＝2.3Hz,1H),6.83-6.80(m,2H),3.59(t,J＝7.1Hz,2H),3.05(t,J＝7.0Hz,2H),2.20-2.18(m,2H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。

实施例155.N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基]吡啶-2-甲酰胺的制备

将2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(50mg，0.17mmol，1当量)、吡啶-2-甲酸(25.2mg，0.21mmol，1.2当量)、HATU(130mg，0.34mmol，2当量)和DIEA(66.3mg，0.51mmol，3当量)的DCM(10mL)溶液在室温搅拌过夜。真空浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件(柱：Sunfire Prep C18 OBD柱，10μm，19×250mm；流动相A：水(0.05％TFA)，流动相B：ACN；流动速率：25mL/分钟；梯度：8分钟内15％B至40％B；254/210nm；RT：7.5分钟)纯化，得到呈黄色固体的N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基]乙基]吡啶-2-甲酰胺(双(三氟乙酸))(11.1mg，10.4％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝398.2。¹H NMR(300MHz,甲醇-d₄,ppm)δ8.62(s,1H),8.09(t,J＝6.7Hz,2H),7.97-7.89(m,3H),7.77(d,J＝2.2Hz,1H),7.56(s,1H),6.81(s,2H),3.86(t,J＝7.0Hz,2H),3.31(s,4H),3.18(t,J＝6.9Hz,2H)。

实施例156. 2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺的制备

步骤1. 7-溴-3-碘喹啉-4-醇的合成

将7-溴喹啉-4-醇(11g，49.095mmol，1当量)和碘(硫烷基)胺(10.25g，58.9mmol，1.2当量)的CH₃CN(200mL)溶液在65℃搅拌2小时。通过过滤收集沉淀的固体并且用乙腈(3×10mL)洗涤。得到呈黄色固体的7-溴-3-碘喹啉-4-醇(15.7g，91.4％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝349.9。

步骤2. 7-溴-4-氯-3-碘喹啉的合成

将7-溴-3-碘喹啉-4-醇(15.7g，44.8mmol，1当量)和膦酰三氯(20.64g，134.59mmol，3当量)的二

烷(400mL，4721.6mmol，105当量)溶液在100℃搅拌2小时。用水/冰猝灭反应。用饱和NaHCO₃水溶液将混合物中和至pH 8。通过过滤收集沉淀的固体并且用水(3×10mL)洗涤。得到呈黄色固体的7-溴-4-氯-3-碘喹啉(16g，96.8％)。LC-MS(ES,m/z)：[M+H]⁺＝367.8。

步骤3. 7-溴-3-碘-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]喹啉-4-胺的合成

将7-溴-4-氯-3-碘喹啉(16g，43.43mmol，1当量)和1-(4-甲氧基苯基)甲胺(11.9g，86.8mmol，2当量)、Hunig碱(18.67g，130.3mmol，3当量)的DMF(400mL)溶液在80℃搅拌过夜。用EtOAc(3×300mL)萃取所得混合物。合并的有机层用水(3×300mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥。过滤后，减压浓缩滤液。将残留物溶解于EtOAc(50mL)中。通过过滤收集沉淀的固体并且用EtOAc(3×10mL)洗涤。减压浓缩所得混合物。得到呈黄色固体的7-溴-3-碘-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]喹啉-4-胺(7g，34.36％)。LC-MS(ES,m/z)：[M+H]⁺＝468.9。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.75(s,1H),8.21(d,J＝9.1Hz,1H),8.01(d,J＝2.1Hz,1H),7.60(dd,J＝9.1,2.1Hz,1H),7.24(d,J＝8.7Hz,2H),6.85(d,J＝8.7Hz,2H),6.45(t,J＝6.6Hz,1H),4.83(d,J＝6.6Hz,2H),3.70(s,3H)。

步骤4. 7-溴-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-[3-(氧杂环戊烷-2-基)丙-1-炔-1-基]喹啉-4-胺的合成

将7-溴-3-碘-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]喹啉-4-胺(1g，2.1mmol，1当量)、2-(丙-2-炔-1-基)氧杂环戊烷(704mg，6.4mmol，3当量)、CuI(40mg，0.21mmol，0.1当量)、Pd(PPh₃)₂Cl₂(748mg，1.06mmol，0.5当量)和三乙胺(1.08g，10.66mmol，5当量)的乙氧基乙烷(20mL)的溶液在氮气气氛下在室温搅拌过夜。减压浓缩所得混合物。残留物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EtOAc(2:1)洗脱，得到呈黄色固体的7-溴-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-[3-(氧杂环戊烷-2-基)丙-1-炔-1-基]喹啉-4-胺(560mg，58.2％)。LC-MS(ES,m/z)：[M+H]⁺＝451.1。

步骤5. 7-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉的合成

将7-溴-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-[3-(氧杂环戊烷-2-基)丙-1-炔-1-基]喹啉-4-胺(560mg，1.24mmol，1当量)和t-BuOK(278.44mg，2.48mmol，2当量)的1-甲基吡咯烷-2-酮(5mL)溶液在氮气气氛下在65℃搅拌过夜。在0℃用饱和NH₄Cl(水溶液)猝灭反应。残留物通过反相快速色谱利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，在水中的MeOH，10分钟内10％至50％梯度；检测器，UV 254nm。得到呈黄色固体的7-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉(320mg，57.1％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝451.1。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.12(s,1H),8.21(d,J＝2.1Hz,1H),8.09(d,J＝9.1Hz,1H),7.55(dd,J＝9.0,2.1Hz,1H),6.85(s,4H),6.82(s,1H),5.85(s,2H),4.16(q,J＝6.4Hz,1H),3.77(q,J＝6.9Hz,1H),3.62(q,J＝7.4Hz,1H),2.99(dd,J＝5.8,4.0Hz,2H),2.01(ddd,J＝12.1,6.8,4.4Hz,1H),1.85-1.77(m,2H),1.62-1.55(m,1H)。

步骤6. 7-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-5-

-5-醇盐的合成

将7-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉(320mg，0.71mmol，1当量)和mCPBA(349mg，1.42mmol，2当量，70％)的二氯甲烷(10mL)溶液在室温搅拌2小时。减压浓缩所得混合物。残留物通过制备型TLC(30:1的CH₂Cl₂/MeOH)纯化，得到呈黄色固体的7-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-5-

-5-醇盐(200mg，60.4％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝467.1。

步骤7. 7-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺的合成

将7-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-5-

-5-醇盐(200mg，0.428mmol，1当量)和NH₄OH(3.00mL，85.601mmol，180.03当量)的二氯甲烷(9mL)溶液在室温搅拌5分钟。随后在上述混合物中添加TsCl(163.17mg，0.856mmol，2当量)，在室温搅拌2小时。减压浓缩所得混合物。残留物通过制备型TLC(10:1的CH₂Cl₂/MeOH)纯化，得到呈黄色固体的7-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(160mg，80.17％)。LC-MS(ES,m/z)：[M+H]⁺＝466.1。

步骤8. 1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺的合成

将7-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(160mg，0.34mmol，1当量)和3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(133mg，0.68mmol，2当量)、Cs₂CO₃(335mg，1.0mmol，3当量)、Pd(dppf)Cl₂CH₂Cl₂(56mg，0.069mmol，0.2当量)在1,4-二

烷(5mL)、水(0.5mL)中的溶液在氮气气氛下在90℃搅拌3小时。减压浓缩所得混合物。残留物通过制备型TLC(8:1的CH₂Cl₂/MeOH)纯化，得到呈黄色固体的1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(100mg，64.27％)。LC-MS(ES,m/z)：[M+H]⁺＝454.2。

步骤9. 2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺的合成

将1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(40mg，0.088mmol，1当量)和三氟甲烷亚磺酸(0.5mL)的2,2,2-三氟乙醛(2mL)溶液在氮气下在室温搅拌3小时。用饱和Na₂CO₃水溶液将残留物碱化至pH8。减压浓缩所得混合物。粗产物(40mg)通过制备型HPLC利用以下条件(柱：XBridge PrepC18 OBD柱19×150mm 5μm；流动相A：水(10MMOL/L NH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流动速率：25mL/分钟；梯度：7分钟内15％B至35％B；254/210nm；RT：6.37分钟)纯化，得到呈淡黄色固体的2-[(氧杂环戊烷-2-基)甲基]-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(3.7mg，12.58％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝334.2。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.10(s,1H),7.98(s,1H),7.81-7.79(m,1H),7.71(s,1H),6.78(s,1H),6.69(s,1H),4.29-4.22(m,1H),3.95-3.90(m,1H),3.81-3.76(m,1H),3.31-3.30(m,2H),2.18-2.05(m,1H),1.97-1.90(m,3H),1.74-1.66(m,1H),1.28-1.23(m,1H)。

实施例157.N-{2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基}-2-氟-2-甲基丙酰胺的制备

步骤1. 7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-3-

-3-醇盐的合成

在500mL圆底烧瓶中放入在DCM(200mL)中的7-溴-4-氯-3-硝基喹啉(10.64g，37mmol，1当量)和TEA(22.47g，222mmol，6当量)，随后添加[(4-甲氧基苯基)甲基]肼二盐酸盐(12.5g，55.5mmol，1.5当量)。将所得溶液在室温搅拌1天。用3×200mL二氯甲烷萃取所得溶液，并且合并有机层并且浓缩。得到11g呈红色固体的7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-3-

-3-醇盐(77％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]+＝385.2。

步骤2. 7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉的合成

在500mL圆底烧瓶中放入在甲苯(100mL)和CHCl₃(100mL)中的7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-3-

-3-醇盐(11g，28.5mmol，1当量)，随后依次添加HMPA(20mL)和PCl₃(31.07g，228mmol，8当量)。将所得溶液在100℃搅拌1天。浓缩所得混合物。用NaHCO₃将溶液的pH值调节至7-8。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/乙酸乙酯(30:1)。得到5.7g呈棕色固体的7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉(54％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]+＝369.2。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ9.35(s,1H),8.80(d,J＝1.7Hz,1H),8.38(d,J＝8.5Hz,1H),8.07(dd,J＝8.5,1.9Hz,1H),7.42(d,J＝8.6Hz,2H),6.95(d,J＝8.6Hz,2H),5.94(s,2H),5.76(s,1H),3.74(s,3H)。

步骤3. 7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-5-

-5-醇盐的合成

在500mL圆底烧瓶中放入在MeOH(70mL)和H₂O₂(70mL)中的7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉(6.8g，18.4mmol，1当量)，随后添加MTO(2.30g，9.2mmol，0.50当量)。将所得溶液在室温搅拌16小时。浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/乙酸乙酯(15:1)。得到5.7g呈黄色固体的7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-5-

-5-醇盐(80％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]+＝385.2。

步骤4. 7-溴-4-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉的合成

在500mL圆底烧瓶中放入在DCM(100mL)中的7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-5-

-5-醇盐(4.2g，10.9mmol，1当量)和DMF(2mL)，随后添加POCl₃(2.51g，16.354mmol，1.5当量)。将所得溶液在40℃搅拌1过夜。用3×100mL二氯甲烷萃取所得溶液，并且合并有机层并且浓缩。得到4.5g呈棕色粗固体的7-溴-4-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]+＝403.0。

步骤5. 7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-4-胺的合成

在250mL密封试管中放入在二

烷(50mL)和NH₃H₂O(50mL)中的7-溴-4-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉(4.5g，11.148mmol，1当量)。将所得溶液在110℃搅拌过夜。浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/乙酸乙酯(10:1)。浓缩所得混合物。得到2.7g呈棕色固体的7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(63％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]+＝384.2。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.69(d,J＝1.5Hz,1H),7.49(s,2H),7.40(dd,J＝8.4,1.7Hz,1H),7.37(d,J＝8.5Hz,2H),6.95(d,J＝8.6Hz,2H),5.93(s,2H),3.74(s,3H)。

步骤6. 7-溴-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-4-胺的合成

在250mL圆底烧瓶中放入7-溴-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(1.12g，2.9mmol，1当量)和TFA(30mL)。将所得溶液在80℃搅拌16小时。浓缩所得混合物。得到1.3g呈棕色粗固体的7-溴-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-4-胺。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]+＝264.0。

步骤7. 7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-4-胺的合成

在用氮气的惰性气氛吹扫并且维持的100mL圆底烧瓶中放入在二

烷(20mL)和H₂O(4mL)中的7-溴-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(1.3g，4.923mmol，1当量)、Cs₂CO₃(4.81g，14.768mmol，3当量)、1-(氧杂环己烷-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(2.74g，9.845mmol，2.00当量)、Pd(dppf)Cl₂.CH₂Cl₂(804.00mg，0.985mmol，0.2当量)。将所得溶液在90℃搅拌16小时。浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(8:1)。得到1.2g呈深绿色固体的7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(72％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]+＝336.1。

步骤8.N-(2-[4-氨基-7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成

在500mL圆底烧瓶中放入在DMF(30mL)中的7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(1.5g，4.47mmol，1当量)，随后添加N-(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.00g，8.9mmol，2当量)和Cs₂CO₃(4.37g，13.4mmol，3当量)。将所得溶液在室温搅拌16小时。浓缩所得混合物。通过过滤收集固体。得到1.5g呈棕色固体的N-(2-[4-氨基-7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(70％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]+＝479.2。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ8.18(d,J＝8.1Hz,1H),7.71(s,1H),7.61(s,1H),7.43(d,J＝8.1Hz,1H),7.36(s,2H),7.07(t,J＝5.8Hz,1H),6.55(s,1H),5.37-5.26(m,1H),4.79(t,J＝5.4Hz,2H),4.12-3.98(m,1H),3.58(t,J＝7.7Hz,3H),2.49-2.31(m,2H),2.04-1.89(m,1H),1.87-1.74(m,1H),1.69-1.49(m,3H),1.31(s,9H)。

步骤9. 2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-4-胺的合成

在100mL圆底烧瓶中放入在于1,4-二

烷中的HCl(4N，20mL)中的N-(2-[4-氨基-7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.2g，2.508mmol，1当量)。将所得溶液在室温搅拌2小时。浓缩所得混合物。用3×100mL二氯甲烷萃取所得溶液，并且合并水层。得到1.1g呈棕色粗固体的2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-4-胺。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]+＝295.1。

步骤10.N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基]-2-氟-2-甲基丙酰胺的合成

在100mL圆底烧瓶中放入在DCM(4mL)中的2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-4-胺(40mg，0.13mmol，1当量)和2-氟-2-甲基丙酸(14.4mg，0.13mmol，1当量)，随后添加HATU(103.3mg，0.27mmol，2当量)和DIEA(52.6mg，0.4mmol，3当量)。将所得溶液在室温搅拌16小时。浓缩所得混合物。将粗产物溶解于MeOH(4mL)中，添加NaOH(10.8mg，0.27mmol，2当量)。将所得溶液在70℃搅拌2小时。浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10:1)洗脱，得到粗产物。粗产物进一步通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱：XBridge Prep OBD C18柱30×150mm 5μm；流动相A：水(10MMOL/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流动速率：60mL/分钟；梯度：7分钟内8％B至45％B；254/210nm；RT：6.45分钟。得到4mg呈白色固体的N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-[1,2,3]三唑并[4,5-c]喹啉-2-基]乙基]-2-氟-2-甲基丙酰胺(7.70％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]+＝383.4。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.22(d,J＝8.2Hz,1H),8.02(s,1H),7.75(s,2H),6.79(s,1H),5.00-4.94(m,2H),3.91(t,J＝5.7Hz,2H),1.45(d,J＝21.8Hz,6H)。

根据与针对实施例157所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例158至162。分析型LC/MS条件：

A：柱：Ascentis Express C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：乙腈+0.05％三氟乙酸；流动相B：水+0.05％三氟乙酸；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.7分钟；流速：1.5mL/分钟；检测：MS和UV。

B：柱：PoroShell HPH C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：乙腈+5mM碳酸氢铵；流动相B：水+5mM碳酸氢铵；温度：40℃；梯度：5％B至50％B历时3分钟，随后0.2分钟内到达95％B，随后在95％B保持1.0分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

C：柱：PoroShell HPH C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：乙腈+5mM碳酸氢铵；流动相B：水+5mM碳酸氢铵；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.7分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

根据与针对实施例20、实施例31或实施例132所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例163至184。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

根据与针对实施例20、实施例31或实施例132所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例185至193。分析型LC/MS条件：

A：柱：PoroShell HPH C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水+5mM碳酸氢铵；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.6分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

B：柱：Shim-pack XR-ODS，3.0mm×50mm，2.2μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.7分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

C：柱：Kinetex EVO C18，3.0mm×50mm，2.2μm颗粒；流动相A：水+5mM碳酸氢铵；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：10％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.6分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

实施例179和实施例180

由适当的起始物质制备外消旋物质，并且通过制备型手性SFC利用以下条件纯化，得到呈单一未指定异构体形式的实施例179和实施例180：仪器：Waters 100Prep SFC；柱：手性AS，30×250mm，5微米；流动相：65％CO₂/35％IPA+0.1％DEA；流动条件：100mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例179(第一洗脱异构体)RT：3.87分钟。实施例180(第二洗脱异构体)RT：12.58分钟。

分析型手性SFC条件：仪器：Shimadzu Nexera UC SFC；柱：Chiralpak AS，4.6×100mm，5微米；流动相：65％CO₂/35％IPA+0.1％DEA；流动条件：2mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例179(第一洗脱异构体)RT：2.5分钟。实施例180(第二洗脱异构体)RT：5.6分钟。

实施例194. 7-(1H-吡唑-3-基)-2-(2-(吡啶-2-基氨基)乙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺的制备

步骤1. 2-(2-(吡啶-2-基氨基)乙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

将2-(2-氨基乙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(40mg，0.106mmol)和碳酸钠(44.9mg，0.424mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加DMSO(1060μL)。将所得混合物用N₂吹扫10分钟，随后添加2-溴吡啶(11.12μL，0.117mmol)、N,N’-二甲基乙二胺(34.2μL，0.318mmol)和碘化亚铜(I)(30.3mg，0.159mmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其密封并且在120℃搅拌18小时。添加另外的2-溴吡啶(11.12μL，0.117mmol)，并且将反应在120℃搅拌1小时。添加另外的2-溴吡啶(25μL)，并且将反应在120℃搅拌4小时。将反应冷却至室温，用EtOAc(20mL)稀释，用H₂O(20mL)、1:1的H₂O-NH₄OH水溶液(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(12g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到2-(2-(吡啶-2-基氨基)乙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(4.3mg，9％)。LC-MS m/z 455[M+H]⁺。

步骤2. 7-(1H-吡唑-3-基)-2-(2-(吡啶-2-基氨基)乙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在2-(2-(吡啶-2-基氨基)乙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(4.3mg，9.46μmol)的CH₂Cl₂(0.1mL)室温溶液中添加TFA(0.1mL)。将反应在室温搅拌2小时。真空浓缩反应。将粗物质溶解于CH₂Cl₂中并且浓缩。将粗物质溶解于DMF(2mL)中，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在1％B保持2分钟，1-23％B历时25分钟，随后在100％B保持2分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到7-(1H-吡唑-3-基)-2-(2-(吡啶-2-基氨基)乙基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(2.6mg，46％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.96(s,1H),8.13-8.09(m,2H),7.99(br d,J＝6.0Hz,1H),7.90(d,J＝8.5Hz,1H),7.79(s,1H),7.55-7.48(m,1H),6.77(d,J＝2.0Hz,1H),6.67-6.60(m,2H),4.73(t,J＝5.9Hz,2H),3.94(br t,J＝5.8Hz,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 371.1[M+H]⁺；RT：0.92分钟。

实施例195.N-(2-(4-氨基-8-氯-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)-5-氟吡啶甲酰胺的制备

步骤1. 7-溴-8-氯-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺

在7-溴-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，TFA(0.500g，1.326mmol)的CHCl₃(13.26mL)室温悬浮液中添加2-氯-1,3-双(甲氧基羰基)胍(0.333g，1.591mmol)。将反应在室温搅拌2天。将反应用10％MeOH-CH₂Cl₂(200mL)稀释，并且将其用饱和NaHCO₃水溶液(200mL)洗涤。用10％MeOH-CH₂Cl₂(3×100mL)萃取水层。合并的有机层经Na₂SO₄干燥并且过滤。添加硅藻土，并且真空浓缩混合物。将此物质上样至柱上并且通过快速色谱(具有25g固体负载的80g RediSep Gold硅胶柱；线性梯度0-7％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到7-溴-8-氯-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(31mg，8％)。LC-MS m/z 297/299[M+H]⁺。

步骤2.(2-(4-氨基-7-溴-8-氯-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯

在7-溴-8-氯-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺(31mg，0.104mmol)的DMF(417μL)室温溶液中添加碳酸铯(102mg，0.313mmol)，接着添加(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(25.7mg，0.115mmol)。将反应在室温搅拌16小时。添加另外的碳酸铯(51mg，0.16mmol)和(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(11.7mg，0.0522mmol)。将反应在40℃搅拌2小时。用EtOAc(20mL)和H₂O(20mL)稀释反应。分离各层并且用EtOAc(20mL)萃取水层。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤。添加硅藻土，并且真空浓缩混合物。将此物质干燥上样至柱上并且通过快速色谱(具有5g固体负载的12g硅胶柱；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈白色固体的(2-(4-氨基-7-溴-8-氯-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(37mg，81％)。LC-MS m/z[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.73(s,1H),8.21(s,1H),7.73(s,1H),7.10(br s,2H),7.05(br t,J＝5.8Hz,1H),4.45(br t,J＝6.0Hz,2H),3.47(q,J＝5.9Hz,2H),1.33(s,9H)。

步骤3.(2-(4-氨基-8-氯-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯

将(2-(4-氨基-7-溴-8-氯-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(20mg，0.045mmol)、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(15.15mg，0.054mmol)和磷酸三钾(28.9mg，0.136mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加1,4-二

烷(189μL)和H₂O(37.8μL)。将所得混合物用N₂吹扫15分钟，随后添加氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]钯(II)(1.785mg，2.269μmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其密封并且在100℃搅拌1小时。将反应冷却至室温，用EtOAc(20mL)稀释，用H₂O(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(12g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到(2-(4-氨基-8-氯-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(17.3mg，75％)。LC-MS m/z 512[M+H]⁺。

步骤4. 2-(2-氨基乙基)-8-氯-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA

在(2-(4-氨基-8-氯-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(17.3mg，0.034mmol)的CH₂Cl₂(169μL)室温溶液中添加TFA(169μL)。将反应在室温搅拌1.5小时。浓缩反应，以除去约一半体积，随后将其逐滴添加至Et₂O(2mL)中。通过真空过滤收集所得固体并且用Et₂O(3×1mL)洗涤。将固体溶解于CH₂Cl₂-MeOH中并且真空浓缩，得到呈灰白色固体的2-(2-氨基乙基)-8-氯-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(17.2mg，92％)。LC-MS m/z 328[M+H]⁺。

步骤5.N-(2-(4-氨基-8-氯-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)-5-氟吡啶甲酰胺

在5-氟吡啶甲酸(4.80mg，0.034mmol)的DMF(155μL)室温溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(10.78μL，0.062mmol)，接着添加HATU(11.77mg，0.031mmol)。将此混合物在室温搅拌5分钟，随后将其逐滴添加至2-(2-氨基乙基)-8-氯-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺，2TFA(17.2mg，0.031mmol)和N,N-二异丙基乙胺(16.17μL，0.093mmol)的DMF(155μL)溶液中。将反应在室温搅拌15分钟。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在11％B保持0分钟，11-51％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(2-(4-氨基-8-氯-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-2-基)乙基)-5-氟吡啶甲酰胺(4.2mg，29％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.33-12.92(m,1H),9.06(t,J＝6.0Hz,1H),8.79(s,1H),8.61(d,J＝2.6Hz,1H),8.12-8.06(m,2H),7.88(td,J＝8.7,2.8Hz,1H),7.85-7.66(m,2H),7.36-6.96(m,2H),6.72(br s,1H),4.65(br t,J＝6.1Hz,2H),3.88(q,J＝6.1Hz,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 451.0[M+H]⁺；RT：1.15分钟。

根据与针对实施例150和151所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例196至204。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例205. 2-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙基)-6-氟异吲哚啉-1-酮的制备

在2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，2TFA(40mg，0.077mmol)的DMF(384μL)室温溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(66.8μL，0.384mmol)和2-(溴甲基)-5-氟苯甲酸甲酯(18.95mg，0.077mmol)。将反应在室温搅拌1.5小时。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在21％B保持0分钟，21-61％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙基)-6-氟异吲哚啉-1-酮(23.1mg，70％产率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.30-12.70(m,1H),8.43(s,1H),7.96(d,J＝7.9Hz,1H),7.86(s,1H),7.79-7.65(m,1H),7.64-7.56(m,2H),7.46-7.36(m,2H),6.91(br d,J＝0.7Hz,2H),6.75(d,J＝1.5Hz,1H),4.72(br t,J＝5.4Hz,2H),4.31(s,2H),4.07(br t,J＝5.7Hz,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 428[M+H]⁺；RT：1.18分钟。

实施例206.N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙基)甲磺酰胺的制备

在2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，2TFA(40mg，0.077mmol)的DMF(256μL)0℃溶液中添加三乙胺(42.8μL，0.307mmol)和甲磺酰氯(6.23μL，0.081mmol)。将反应在室温搅拌1小时。将反应用H₂O(0.1mL)和DMF稀释(至2mL总体积)，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在8％B保持0分钟，8-48％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到N-(2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙基)甲磺酰胺(18.3mg，64％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.50(s,1H),8.08(d,J＝8.1Hz,1H),7.88(br s,1H),7.82-7.55(m,2H),7.32-7.25(m,1H),6.76(d,J＝1.1Hz,1H),4.50(br t,J＝5.4Hz,2H),3.60-3.52(m,2H),2.85(d,J＝2.4Hz,3H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 372.2[M+H]⁺；RT：0.93分钟。

实施例207和208.2-(2-甲氧基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺和1-(2-甲氧基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺的制备

步骤1. 7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺

将7-溴-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，TFA(0.932g，2.47mmol)、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.031g，3.71mmol)和磷酸三钾(1.574g，7.41mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后与1,4-二

烷(10.30mL)和H₂O(2.059mL)混合。将所得悬浮液用N₂吹扫15分钟，随后添加氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]钯(II)(0.039g，0.049mmol)。将反应在100℃搅拌1小时。将反应冷却至室温并且用EtOAc(10mL)和H₂O(10mL)稀释。过滤此混合物，并且将固体用H₂O(2×2mL)和EtOAc(2×2mL)洗涤，随后真空干燥，得到7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(670mg，81％)。LC-MS m/z 335[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.32(br s,1H),8.19(d,J＝8.2Hz,1H),7.69(s,1H),7.59(d,J＝1.5Hz,1H),7.37(br d,J＝7.7Hz,1H),7.08(br s,2H),6.52(d,J＝1.5Hz,1H),5.31(dd,J＝9.8,1.9Hz,1H),4.07-3.99(m,1H),3.62-3.57(m,1H),2.47-2.36(m,1H),2.00-1.92(m,1H),1.80(br d,J＝12.9Hz,1H),1.64-1.49(m,3H)。

步骤2. 2-(2-甲氧基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺和1-(2-甲氧基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺

在7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(29mg，0.087mmol)的DMF(289μL)室温悬浮液中添加碳酸铯(85mg，0.260mmol)，接着添加2-溴乙基甲基醚(8.97μL，0.095mmol)。将悬浮液在室温搅拌20小时。将反应用H₂O(2mL)稀释并且用EtOAc(3×2mL)萃取。浓缩合并的有机层。

将粗物质与CH₂Cl₂(200μL)和TFA(200μL)混合，并且在室温搅拌2小时。真空浓缩反应。将粗物质溶解于DMF(2mL)中，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在2％B保持0分钟，2-42％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(2-甲氧基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(7.3mg，27％)。也分离另一区域异构体，并且进一步通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在0％B保持0分钟，0-40％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到1-(2-甲氧基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，TFA(3.8mg，9.8％)。

2-(2-甲氧基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(实施例207)的表征数据：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.50(s,1H),8.08(br d,J＝7.6Hz,1H),7.87(br s,1H),7.71(br s,1H),7.64(br d,J＝7.9Hz,1H),7.13-6.95(m,2H),6.75(br s,1H),4.57(br s,2H),3.83-3.79(m,2H),3.25(s,3H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridgeC18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 309.2[M+H]⁺；RT：1.02分钟。

1-(2-甲氧基乙基)-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(实施例208)的表征数据：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.64(s,1H),8.43(d,J＝8.5Hz,1H),8.18(brs,1H),7.97(br d,J＝8.5Hz,1H),7.85(br s,1H),6.86(d,J＝2.2Hz,1H),4.97(t,J＝5.1Hz,2H),3.88(t,J＝5.1Hz,2H),3.18(s,3H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridgeC18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 309.0[M+H]⁺；RT：0.97分钟。

实施例209. 2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙-1-醇的制备

步骤1. 2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺

在7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(80mg，0.239mmol)的DMF(797μL)室温悬浮液中添加碳酸铯(234mg，0.718mmol)，接着添加(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(56.5μL，0.263mmol)。将反应在室温搅拌2小时。用EtOAc(20mL)和H₂O(20mL)稀释反应。用EtOAc(20mL)萃取水层。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(24g RediSepGold硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化。分离第二洗脱的区域异构体，得到2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(58.5mg，50％)。LC-MS m/z 493[M+H]⁺；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)位移8.57(br s,1H),8.18(d,J＝8.1Hz,1H),7.64(s,1H),7.60(d,J＝1.7Hz,1H),7.37(br d,J＝6.9Hz,1H),7.53-7.07(m,2H),6.52(d,J＝1.8Hz,1H),5.32(dd,J＝10.0,2.2Hz,1H),4.54(t,J＝4.8Hz,2H),4.08-4.01(m,3H),3.63-3.56(m,1H),2.48-2.36(m,1H),1.99-1.93(m,1H),1.80(br d,J＝12.5Hz,1H),1.64-1.49(m,3H),0.80-0.74(m,9H),-0.13(s,6H)。

步骤2. 2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙-1-醇

在2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(58mg，0.118mmol)的CH₂Cl₂(294μL)室温悬浮液中添加TFA(294μL)。将所得澄清的橙色溶液在室温搅拌2小时。浓缩反应。将粗物质溶解于CH₂Cl₂(500μL)中并且浓缩。

将此物质溶解于CH₂Cl₂(300μL)和MeOH(300μL)的混合物中，并且添加碳酸钾(81mg，0.589mmol)。将反应在室温搅拌15分钟。将反应用EtOAc(20mL)和饱和NaHCO₃水溶液(20mL)稀释。分离各层并且用5％MeOH-EtOAc(5×10mL)萃取有机层。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。将粗物质溶解于MeOH-CH₂Cl₂中并且添加硅藻土。真空浓缩混合物，将其干燥上样至柱上，并且通过快速色谱(具有5g固体负载的12g RediSep Gold硅胶柱；线性梯度0-60％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈白色固体的2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙-1-醇(23mg，66％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.38-12.79(m,1H),8.49(s,1H),8.07(br d,J＝8.0Hz,1H),7.88(brs,1H),7.83-7.47(m,2H),7.04-6.83(m,2H),6.75(br s,1H),5.04(t,J＝5.3Hz,1H),4.45(t,J＝5.1Hz,2H),3.87(q,J＝5.2Hz,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Acquity UPLC BEH C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B历时1分钟，随后在98％B保持0.50分钟；流速：0.8mL/分钟；检测：MS和UV(254nm)。m/z 295.0[M+H]⁺；RT：0.62分钟。

实施例210.顺-3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)环戊-1-醇的制备

步骤1. 2-(顺-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环戊基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺

在7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(30mg，0.090mmol)、三苯基膦(24.71mg，0.094mmol)和反-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环戊-1-醇(20.39mg，0.094mmol)的DMF(897μL)0℃悬浮液中添加偶氮二甲酸二异丙酯(17.66μL，0.090mmol)。将反应在0℃搅拌5分钟，随后在室温搅拌17小时。添加另外的反-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环戊-1-醇(20.39mg，0.094mmol)、三苯基膦(24.71mg，0.094mmol)和偶氮二甲酸二异丙酯(17.66μL，0.090mmol)，并且在室温搅拌1小时。将反应用EtOAc(20mL)稀释，用H₂O(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(12g RediSep gold硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化。分离第二洗脱的区域异构体，得到2-(顺-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环戊基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(17.6mg，37％)。LC-MS m/z 533[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.60(s,1H),8.16(d,J＝8.0Hz,1H),7.59(dd,J＝8.1,1.5Hz,2H),7.31(dd,J＝8.1,1.6Hz,1H),6.96(br s,2H),6.50(d,J＝1.8Hz,1H),5.30(dd,J＝10.0,2.0Hz,1H),5.00(四重峰,J＝7.7Hz,1H),4.41(四重峰,J＝5.8Hz,1H),4.06-4.01(m,1H),3.63-3.52(m,1H),2.63-2.55(m,1H),2.47-2.37(m,1H),2.26(qd,J＝7.5,3.8Hz,2H),2.09-1.92(m,3H),1.88-1.76(m,2H),1.64-1.49(m,3H),0.86(d,J＝1.0Hz,9H),0.08(s,3H),0.06(s,3H)。

步骤2.顺-3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)环戊-1-醇

在2-(顺-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环戊基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(17mg，0.032mmol)的CH₂Cl₂(160μL)室温溶液中添加TFA(160μL)。将反应在室温搅拌1小时。真空浓缩反应。将粗物质溶解于CH₂Cl₂(300μL)中并且真空浓缩。

将粗物质与CH₂Cl₂(150μL)和MeOH(150μL)混合，并且添加碳酸钾(22mg，0.16mmol)。将悬浮液在室温搅拌15分钟。将反应用1:1的MeOH-CH₂Cl₂(1mL)稀释，过滤，并且用1:1的MeOH-CH₂Cl₂(2×0.5mL)洗涤。真空浓缩滤液，随后将其与DMF(2mL)混合，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在3％B保持0分钟，3-43％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到顺-3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)环戊-1-醇(6.3mg，59％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.63(s,1H),8.07(d,J＝8.3Hz,1H),7.88(s,1H),7.71(br s,1H),7.63(br d,J＝8.5Hz,1H),7.09-6.96(m,2H),6.75(d,J＝1.4Hz,1H),5.04-4.96(m,2H),4.29-4.24(m,1H),2.32-2.23(m,1H),2.22-2.14(m,1H),2.01-1.95(m,1H),1.90-1.78(m,3H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 335.2[M+H]⁺；RT：0.87分钟。

根据与针对实施例207和208、209或210所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的烷基卤化物、甲磺酸盐或醇起始物质制备实施例211至246。烷基化反应的温度范围为室温至90℃，并且在一些情况下，添加另外当量的烷基化试剂。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例238和实施例239

由适当的起始物质制备外消旋物质实施例237，并且通过制备型手性SFC利用以下条件纯化，得到呈单一未指定异构体形式的实施例238和实施例239：仪器：Waters 100PrepSFC；柱：手性AD，30×250mm，5微米；流动相：80％CO₂/20％MeOH+0.1％DEA；流动条件：100mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例238(第一洗脱异构体)RT：25.73分钟。实施例239(第二洗脱异构体)RT：30.37分钟。

分析型手性SFC条件：仪器：Shimadzu Nexera UC SFC；柱：Chiralpak AD，4.6×100mm，5微米；流动相：80％CO₂/20％IPA+0.1％DEA；流动条件：2mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例238(第一洗脱异构体)RT：11.4分钟。实施例239(第二洗脱异构体)RT：13.3分钟。

实施例247. 2-(2-甲氧基乙基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺的制备

将7-溴-2-(2-甲氧基乙基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(33mg，0.103mmol)、1H-吡唑(10.49mg，0.154mmol)和碳酸钠(43.6mg，0.411mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加DMSO(1027μL)。将所得混合物用N₂吹扫10分钟，随后添加N,N’-二甲基乙二胺(33.2μL，0.308mmol)和碘化亚铜(I)(29.4mg，0.154mmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其密封并且在120℃搅拌1小时。将反应冷却至室温，用EtOAc(20mL)稀释，用H₂O(20mL)、1:1的H₂O-NH₄OH水溶液(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。将粗物质溶解于DMF(2mL)中，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在3％B保持0分钟，3-43％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(2-甲氧基乙基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(17.4mg，52％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.52(d,J＝2.2Hz,1H),8.51(s,1H),8.14(d,J＝8.5Hz,1H),7.85(d,J＝2.2Hz,1H),7.76(d,J＝1.1Hz,1H),7.67(dd,J＝8.4,2.1Hz,1H),7.10-7.00(m,2H),6.55(s,1H),4.57(t,J＝5.0Hz,2H),3.81(t,J＝5.0Hz,2H),3.25(s,3H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 308.9[M+H]⁺；RT：1.13分钟。

实施例248.2-(2-甲氧基乙基)-7-(噻吩-2-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺的制备

将7-溴-2-(2-甲氧基乙基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(33mg，0.103mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(噻吩-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(32.4mg，0.154mmol)和磷酸三钾(65.4mg，0.308mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加1,4-二

烷(428μL)和H₂O(86μL)。将所得混合物用N₂吹扫15分钟，随后添加氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]钯(II)(2.021mg，2.57μmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其密封并且在100℃搅拌20分钟。将反应冷却至室温，用EtOAc(20mL)稀释，并且用H₂O(20mL)洗涤。用EtOAc(20mL)萃取水层，并且合并的有机层用饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。将粗物质溶解于DMF(2mL)中，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在14％B保持0分钟，14-54％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS和UV信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(2-甲氧基乙基)-7-(噻吩-2-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(26.9mg，81％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.51(s,1H),8.08(d,J＝8.2Hz,1H),7.69(d,J＝1.5Hz,1H),7.55(d,J＝3.7Hz,1H),7.54-7.50(m,2H),7.15(dd,J＝5.0,3.7Hz,1H),7.21-7.05(m,2H),4.56(t,J＝4.9Hz,2H),3.82-3.79(m,2H),3.24(s,3H)。分析型LC/MS条件：柱：WatersXBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z：325.2[M+H]⁺；RT：1.28分钟。

实施例249和250.2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙-1-醇和2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-1-基)乙-1-醇的制备

步骤1.N,2-双(4-甲氧基苄基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺

将7-溴-N,2-双(4-甲氧基苄基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(102 mg，0.203mmol)、1H-吡唑(20.69 mg，0.304 mmol)和碳酸钠(86 mg，0.810 mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后添加DMSO(2026μL)。将所得混合物用N₂吹扫10分钟，随后添加N,N’-二甲基乙二胺(65.4μL，0.608 mmol)和碘化亚铜(I)(57.9 mg，0.304 mmol)。将混合物用N₂吹扫1分钟，随后将其密封并且在120℃搅拌1小时。将反应冷却至室温，用EtOAc(20 mL)稀释，用H₂O(20mL)、1:1的H₂O-NH₄OH水溶液(20 mL)和饱和NaCl水溶液(20 mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(12 g硅胶；线性梯度0-100％EtOAc-CH₂Cl₂)纯化，得到呈白色固体的N,2-双(4-甲氧基苄基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(83.5mg，84％)。LC-MS m/z 491[M+H]⁺；¹H NMR(400 MHz,DMSO-d₆)δ8.61(d,J＝2.1 Hz,1H),8.47(s,1H),8.13(d,J＝8.5 Hz,1H),7.95(br t,J＝5.3 Hz,1H),7.90(d,J＝2.0 Hz,1H),7.75(d,J＝1.6Hz,1H),7.69(dd,J＝8.5,2.2 Hz,1H),7.35(d,J＝7.8 Hz,4H),6.99-6.94(m,2H),6.91-6.85(m,2H),6.55-6.53(m,1H),5.57(s,2H),4.71(d,J＝5.6 Hz,2H),3.74(s,3H),3.71(s,3H)。

步骤2. 7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，TFA

将N,2-双(4-甲氧基苄基)-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(82.5 mg，0.168mmol)的TFA(336μL)溶液密封并且在70℃搅拌18小时，随后将其冷却至室温并且真空浓缩。自CH₂Cl₂(4×2 mL)浓缩粗物质。通过将粗物质与CH₂Cl₂(1 mL)混合而用CH₂Cl₂研磨，过滤，并且随后用CH₂Cl₂(3×1 mL)洗涤，得到呈灰白色固体的7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，TFA(52.8 mg，86％)。LC-MS m/z 251[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.35-13.08(m,1H),9.78-9.51(m,1H),8.88-8.59(m,3H),8.34(br d,J＝7.4 Hz,1H),8.25(br s,1H),8.13-8.00(m,1H),7.88(br s,1H),6.66(br s,1H)。

步骤3. 2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙-1-醇和2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-1-基)乙-1-醇

在7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，TFA(26mg，0.071mmol)的DMF(238μL)室温悬浮液中添加碳酸铯(69.8mg，0.214mmol)，接着添加2-溴乙-1-醇(5.56μL，0.079mmol)。将悬浮液在室温搅拌18小时，并且在50℃搅拌6小时。将反应用H₂O(2mL)稀释并且用EtOAc(3×2mL)萃取。真空浓缩合并的有机层。将粗物质溶解于DMF(2mL)中，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在0％B保持0分钟，0-40％B历时25分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-1-基)乙-1-醇，TFA(4.1mg，14％)。也分离另一区域异构体，并且进一步通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在0％B保持0分钟，0-40％B历时25分钟，随后在100％B保持5分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙-1-醇，TFA(4mg，13％)。

2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙-1-醇(实施例249)的表征数据：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.80(s,1H),8.57(s,1H),8.22(d,J＝8.5Hz,1H),8.04(s,1H),7.86(br d,J＝9.1Hz,1H),7.82(s,1H),6.60(s,1H),5.16(br d,J＝1.9Hz,1H),4.50(br t,J＝5.0Hz,2H),3.88(br s,2H)。分析型LC/MS条件：柱：WatersXBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m.z 295.1[M+H]⁺；RT：0.81分钟。

2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-1-基)乙-1-醇(实施例250)的表征数据：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.68-8.64(m,1H),8.62(s,1H),8.54(d,J＝9.0Hz,1H),8.22(br s,1H),7.98(dd,J＝8.8,1.3Hz,1H),7.87(d,J＝1.0Hz,1H),6.66(d,J＝1.7Hz,1H),5.19-5.07(m,1H),4.86(br t,J＝5.1Hz,2H),3.93(br t,J＝4.8Hz,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z295.2[M+H[₊；RT：0.97分钟。

实施例251和252.3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)丙-1-醇和3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-1-基)丙-1-醇的制备

在7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺，TFA(26mg，0.071mmol)的DMF(238μL)室温悬浮液中添加碳酸铯(69.8mg，0.214mmol)，接着添加(3-溴丙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(18.19μL，0.079mmol)。将悬浮液在室温搅拌2小时。将反应用H₂O(2mL)稀释并且用EtOAc(3×2mL)萃取。真空浓缩合并的有机层。

将粗物质溶解于CH₂Cl₂(150μL)中，并且添加TFA(150μL)。将反应在室温搅拌1.5小时。真空浓缩反应。自CH₂Cl₂(300μL)浓缩粗物质。

将粗物质与CH₂Cl₂(150μL)和MeOH(150μL)混合，并且添加碳酸钾(49mg，0.36mmol)。将悬浮液在室温搅拌15分钟。将反应用1:1的MeOH-CH₂Cl₂(1mL)稀释并且过滤(吸管过滤器)。真空浓缩滤液，随后将其与DMF(2mL)混合，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+10mM乙酸铵；梯度：在1％B保持0分钟，1-41％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥。各产物进一步通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在0％B保持0分钟，0-20％B历时25分钟，随后在100％B保持5分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)丙-1-醇，TFA(12.2mg，41％)和3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-1-基)丙-1-醇，TFA(4.1mg，14％)。

3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)丙-1-醇(实施例251)的表征数据：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.90-8.88(m,1H),8.61-8.57(m,1H),8.26(d,J＝8.7Hz,1H),8.15-8.12(m,1H),7.95(br d,J＝8.2Hz,1H),7.84(s,1H),6.63(s,1H),4.91-4.75(m,1H),4.54(br t,J＝7.0Hz,2H),3.45(br t,J＝6.0Hz,2H),2.08(四重峰,J＝6.4Hz,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 309.1[M+H]⁺，RT：0.83分钟。

3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-1-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-1-基)丙-1-醇(实施例252)的表征数据：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.68(d,J＝2.4Hz,1H),8.62(s,1H),8.46(d,J＝9.0Hz,1H),8.26(d,J＝1.9Hz,1H),8.04(dd,J＝8.9,1.7Hz,1H),7.88(s,1H),6.66(s,1H),4.85(br t,J＝7.2Hz,2H),3.55-3.51(m,2H),2.10-2.02(m,2H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 309.2[M+H]⁺；RT：0.75分钟。

实施例253.2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基]丙-1-醇的制备

步骤1. 2-[4-氨基-7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基]丙酸乙酯的合成

在25mL圆底烧瓶中放入7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(100mg，0.299mmol，1当量)、Cs₂CO₃(292mg，0.89mmol，3当量)、DMF(5mL)、2-溴丙酸乙酯(64.9mg，0.36mmol，1.2当量)。将所得溶液在65℃搅拌2小时。将残留物溶解于15mL H₂O中。将所得溶液用2×15mL乙酸乙酯萃取并且浓缩。得到100mg呈黄色固体的2-[4-氨基-7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基]丙酸乙酯(77％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝435.5。

步骤2. 2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基]丙酸乙酯的合成

在25mL圆底烧瓶中放入2-[4-氨基-7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基]丙酸乙酯(100mg，0.23mmol，1当量)、DCM(10mL)、在二

烷中的HCl(0.5mL，16.4mmol，71.5当量)。将所得溶液在室温搅拌1小时。浓缩所得混合物。得到60mg呈黄色固体的2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基]丙酸乙酯(74％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝351.4。

步骤3. 2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)丙-1-醇的合成

在25mL圆底烧瓶中放入2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基]丙酸乙酯(60mg，0.171mmol，1当量)、MeOH(10mL)、NaBH₄(16.20mg，0.428mmol，2.5当量)。将所得溶液在0℃搅拌2小时。浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱，Sunfire Prep C18 OBD柱，10μm，19×250mm；流动相，水(0.05％TFA)和ACN(9分钟内15％相B直至25％)；检测器，254/210nm。得到20mg呈白色固体的2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)丙-1-醇(27％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝309.2。¹HNMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.82(s,1H),8.36-8.34(d,J＝8.0Hz,1H),8.02-8.01(m,1H),7.95-7.93(m,1H),7.77-7.76(d,J＝2.4Hz,1H),6.83-6.82(d,J＝2.4Hz,1H),4.87-4.74(m,1H),3.98-3.93(m,2H),1.69-1.68(d,J＝6.8Hz,3H)。

根据与针对实施例150、151、209或253所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例254至285。分析型LC/MS条件：

D：柱：Kinetex XB-C18，2.1mm×30mm，1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至35％B历时1.7分钟，随后历时0.5分钟达到100％，随后在100％B保持0.6分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

E：柱：PoroShell HPH C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水+5mM碳酸氢铵；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：0％B至30％B历时3分钟，随后历时0.2分钟达到95％，随后在95％B保持1.0分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

F：柱：XSelect HSS T3，4.6mm×100mm，3.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：10％B至95％B历时6.0分钟，随后在100％B保持2.0分钟；流速：1.5mL/分钟；检测：UV。

G：柱：Ascentis Express C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时2.0分钟，随后在95％B保持0.7分钟；流速：1.5mL/分钟；检测：MS和UV。

H：柱：Shim-pack XR-ODS，3.0mm×50mm，2.2μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至50％历时3分钟，并且随后历时0.3分钟达到95％B，随后在95％B保持0.4分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

I：柱：Shim-pack XR-ODS，3.0mm×50mm，2.2μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至40％历时3分钟，并且随后历时0.3分钟达到100％B，随后在95％B保持0.4分钟；流速：1.2mL/分钟；检测：MS和UV。

J：柱：PoroShell HPH C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水+5mM碳酸氢铵；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时3.2分钟，随后在95％B保持1.0分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

K：柱：PoroShell HPH C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水+5mM碳酸氢铵；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：5％B至40％B历时3.0分钟，随后历时0.2分钟达到95％B，随后在95％B保持1.0分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

L：柱：PoroShell HPH C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水+5mM碳酸氢铵；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时1.7分钟，随后在95％B保持1.0分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

M：柱：Titan C18，2.1mm×50mm，1.9μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至50％历时2.2分钟，随后历时0.8分钟达到100％B，随后在95％B保持0.8分钟；流速：0.7mL/分钟；检测：MS和UV。

N：柱：Ascentis Express C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至100％B历时2.0分钟，随后在95％B保持0.8分钟；流速：1.5mL/分钟；检测：MS和UV。

O：柱：Kinetex XB-C18，2.1mm×30mm，1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至100％B历时0.8分钟，随后在100％B保持0.5分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

实施例286

步骤1.(2Z)-3-(4-溴-2-硝基苯基)-2-氰基丙-2-烯酸乙酯的制备

在100mL圆底烧瓶中添加4-溴-2-硝基苯甲醛(8g，34.8mmol，1当量)、H₂O(40mL)、2-氰基乙酸乙酯(4.33g，38.2mmol，1.1当量)、吗啉(0.30g，3.4mmol，0.1当量)。将所得溶液在室温搅拌1小时。用50mL H₂O稀释所得溶液。用2×200mL乙酸乙酯萃取所得溶液。用2×200mL盐水洗涤有机层。所得溶液经无水硫酸钠干燥并且浓缩。得到11g呈黄色固体的(2Z)-3-(4-溴-2-硝基苯基)-2-氰基丙-2-烯酸乙酯(97.3％)。

步骤2. 4-(4-溴-2-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲腈的制备

在250mL圆底烧瓶中放入(2Z)-3-(4-溴-2-硝基苯基)-2-氰基丙-2-烯酸乙酯(12g，36.9mmol，1当量)、EtOH(100mL)。接着在30分钟内，在5℃在搅拌下逐滴添加在EtOH中的EtONa(16.7mL，44.7mmol，1.2当量)。在20分钟内，在5℃在搅拌下向其中逐滴添加TosMIC(8.65g，44.3mmol，1.2当量)的DCM(50mL)溶液。将所得溶液在25℃搅拌2小时。用500mL H₂O稀释所得溶液。用浓HCl将溶液的pH值调节至8。用3×500mL DCM萃取所得溶液。用2×500mL盐水洗涤所得混合物。有机层经无水硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物施加至具有乙酸乙酯/石油醚(1:3)的硅胶柱上。得到6.8g呈黄色固体的4-(4-溴-2-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲腈(63.1％)。LC-MS(ES,m/z)：[M+H]⁺＝291.9。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ8.41(d,J＝1.9Hz,1H),8.15(dd,J＝8.3,1.9Hz,1H),7.78(d,J＝8.5Hz,1H),7.74(d,J＝11.9Hz,1H),6.19(d,J＝11.7Hz,1H)。

步骤3.N-[2-[3-(4-溴-2-硝基苯基)-4-氰基-1H-吡咯-1-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯的制备

在50mL圆底烧瓶中放入4-(4-溴-2-硝基苯基)-1H-吡咯-3-甲腈(1.8g，6.2mmol，1当量)、DMF(15mL)、Cs₂CO₃(6.02g，18.5mmol，3当量)、N-(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.07g，9.2mmol，1.5当量)。将所得溶液在80℃搅拌3小时。用100mL H₂O稀释所得溶液。用3×100mL乙酸乙酯萃取所得溶液。用3×100mL盐水洗涤所得混合物。混合物经无水硫酸钠干燥并且浓缩。得到2.1g呈黄色油状物的N-[2-[3-(4-溴-2-硝基苯基)-4-氰基-1H-吡咯-1-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(78.3％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝435.1 ¹H NMR(300MHz,甲醇-d₄)δ8.12(d,J＝2.0Hz,1H),7.86(dd,J＝8.3,2.0Hz,1H),7.52-7.44(m,2H),6.98-6.93(m,1H),4.06(t,J＝6.1Hz,2H),3.39(t,J＝5.9Hz,2H),1.40(s,9H)。

步骤4.N-(2-[4-氨基-7-溴-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

在100mL圆底烧瓶中放入N-[2-[3-(4-溴-2-硝基苯基)-4-氰基-1H-吡咯-1-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.1g，4.8mmol，1当量)、HOAc(20mL)。接着在50℃分批添加Fe(1.35g，24.3mmol，5当量)。将所得溶液在50℃搅拌2小时。用100mL MeOH稀释所得溶液。滤出固体。浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，二氯甲烷/甲醇(15:1)。得到1.8g呈黄色固体的N-(2-[4-氨基-7-溴-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(92.1％)。LC-MS(ES,m/z)：[M+H]⁺＝405.1 ¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ7.76(d,J＝8.2Hz,1H),7.65(s,1H),7.60(s,1H),7.46(d,J＝1.7Hz,1H),7.25-7.17(m,1H),7.17-6.91(m,3H),4.21(t,J＝5.6Hz,2H),3.36(q,J＝5.7Hz,2H),1.35(s,9H)。

步骤5.N-(2-[4-氨基-7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯

在用氮气的惰性气氛吹扫并且维持的50mL圆底烧瓶中放入N-(2-[4-氨基-7-溴-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.8g，4.441mmol，1当量)、1-(氧杂环己烷-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.85g，6.662mmol，1.5当量)、Cs₂CO₃(4.34g，13.324mmol，3当量)、二

烷(20mL)、Pd(dppf)Cl₂.CH₂Cl₂(0.73g，0.888mmol，0.2当量)、H₂O(0.5mL)。将所得溶液在90℃搅拌16小时。浓缩所得混合物。将残留物施加至硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(12:1)。得到1.8g呈黄色固体的N-(2-[4-氨基-7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(85％)。LC-MS(ES,m/z)：[M+H]⁺＝477.2

步骤6. 2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-4-胺

在50mL圆底烧瓶中放入N-(2-[4-氨基-7-[1-(氧杂环己烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.6g，3.357mmol，1当量)、在1,4-二

烷中的HCl(气体)(20mL)。将所得溶液在室温搅拌2小时。浓缩所得混合物。得到1.4g呈黄色固体的2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-4-胺。LC-MS-PH-BMS-L15-001-6：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝293.1。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.13-8.04(m,2H),7.92-7.83(m,2H),7.83-7.86(m,1H),7.80-7.75(d,J＝2.3Hz,1H),6.80(d,J＝2.3Hz,1H),4.65(t,J＝6.3Hz,2H),3.58(t,J＝6.2Hz,2H)。

步骤7.N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基]吡啶-2-甲酰胺的制备

在50mL圆底烧瓶中放入2-(2-氨基乙基)-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-4-胺(150mg，0.282mmol，1当量，55％)、DCM(5mL)、HATU(161mg，0.423mmol，1.50当量)、DIEA(129mg，0.998mmol，3.54当量)、吡啶-2-甲酸(35mg，0.284mmol，1.01当量)。将所得溶液在室温搅拌2小时。浓缩所得混合物。粗产物通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱：XBridge Prep OBD C18柱30×150mm 5μm；流动相A：水(10MMOL/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流动速率：60mL/分钟；梯度：7.5分钟内15％B至27％B；254/210nm；RT：6.87分钟。得到14.9mg呈淡黄色固体的N-[2-[4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-2-基]乙基]吡啶-2-甲酰胺(13.13％)。LC-MS：(ES,m/z)：[M+H]⁺＝398.3 ¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.78-12.74(m,1H),9.25(s,1H),9.09(t,J＝6.0Hz,1H),8.57-8.65(m,2H),8.13(d,J＝1.9Hz,1H),8.05-7.94(m,5H),7.74-7.78(m,2H),7.61-7.74(m,1H),6.76(d,J＝2.3Hz,1H),4.50(t,J＝6.0Hz,2H),3.78-3.96(m,2H)。

实施例287和288

步骤1. 3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)丁酸乙酯

在7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(100mg，0.299mmol)和碳酸铯(292mg，0.897mmol)的DMF(997μL)悬浮液中添加3-溴丁酸乙酯(87mg，0.449mmol)。将悬浮液在70℃搅拌3小时。添加另外的3-溴丁酸乙酯(87mg，0.449mmol)。将反应在70℃搅拌2h，并且随后冷却至室温。将反应用H₂O(20mL)稀释并且用EtOAc(3×20mL)萃取。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(12g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈白色固体的3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)丁酸乙酯(85.8mg，0.191mmol，64.0％产率)。LC-MS m/z 449[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.56(s,1H),8.15(d,J＝8.0Hz,1H),7.59(dd,J＝5.1,1.6Hz,2H),7.31(d,J＝8.2Hz,1H),6.99(s,2H),6.50(d,J＝1.7Hz,1H),5.29(br d,J＝9.7Hz,1H),5.12-5.02(m,1H),4.09-3.95(m,3H),3.58(br t,J＝9.4Hz,1H),3.15-3.06(m,1H),3.05-2.97(m,1H),2.47-2.37(m,1H),1.99-1.92(m,1H),1.83-1.74(m,1H),1.63(d,J＝6.7Hz,3H),1.55(br t,J＝8.6Hz,3H),1.09(t,J＝7.1Hz,3H)。

步骤2. 3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)丁-1-醇

在3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)丁酸乙酯(85mg，0.190mmol)的THF(1895μL)0℃悬浮液中逐滴添加硼氢化锂(在THF中的2M溶液)(284μL，0.569mmol)。将反应在室温搅拌2小时。逐滴添加另外的硼氢化锂(在THF中的2M溶液)(284μL，0.569mmol)。将反应在室温搅拌1.25小时，之后逐滴添加甲醇(46.1μL，1.137mmol)。将反应在室温搅拌3天。将反应用H₂O(20mL)稀释并且用EtOAc(4×20mL)萃取。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。将粗物质溶解于MeOH(630μL)中，并且添加在二

烷中的4M盐酸(47.4μL，0.190mmol)。将反应用MeOH(1.5mL)和CH₂Cl₂(1.5mL)稀释(得到澄清溶液)，并且添加二氧化硅支持的碳酸盐(SiliBond Carbonate，Silicycle，0.51mmol/g)(1.5g，0.765mmol)。将悬浮液在室温搅拌1小时。过滤混合物并且用50％MeOH-CH₂Cl₂(3×6mL)洗涤。向滤液中添加硅藻土(足以填充5g负载柱)。真空浓缩混合物。将此物质干燥上样并且通过快速色谱(具有5g固体负载的12g RediSep Gold硅胶柱；线性梯度0-70％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)丁-1-醇(38mg，55％)。LCMS m/z 323.6[M+H]⁺。

外消旋化合物随后通过制备型手性SFC利用以下条件纯化，得到呈单一未指定异构体形式的实施例287和288：仪器：Berger SFC MGII：柱：ChiralCEL YMC SB，30×250mm，5微米；流动相：85％CO₂/15％MeOH+0.1％NH₄OH；流动条件：85mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例287(第一洗脱异构体)。实施例288(第二洗脱异构体)。

分析型手性SFC条件：仪器：Agilent分析型SFC；柱：YMC SB，4.6×250mm，5微米；流动相：85％CO₂/15％IPA+0.1％NH₄OH；流动条件：2mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例287(第一洗脱异构体)RT：30.9分钟。实施例288(第二洗脱异构体)RT：33.4分钟。

实施例287：LC-MS m/z 323[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.47-12.74(m,1H),8.61(br s,1H),8.11(d,J＝8.1Hz,1H),8.00-6.94(m,5H),6.77(br s,1H),4.88-4.77(m,1H),4.61(br t,J＝4.7Hz,1H),3.43-3.35(m,1H),3.26-3.18(m,1H),2.20-2.10(m,1H),2.04-1.94(m,1H),1.58(br d,J＝6.6Hz,3H)。

实施例288：LC-MS m/z 323[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.41-12.85(m,1H),8.59(br s,1H),8.10(d,J＝8.1Hz,1H),7.99-6.91(m,5H),6.76(br s,1H),4.87-4.77(m,1H),4.61(t,J＝4.9Hz,1H),3.42-3.34(m,1H),3.26-3.18(m,1H),2.20-2.10(m,1H),2.04-1.93(m,1H),1.58(d,J＝6.6Hz,3H)。

实施例289.(2R)-3-[4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基]-2-甲氧基丙-1-醇，HCl的制备

步骤1. 2-((R)-2-甲氧基-3-(三苯甲基氧基)丙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺

在(R)-2-甲氧基-3-(三苯甲基氧基)丙-1-醇(156mg，0.449mmol)的CH₂Cl₂(997μL)0℃溶液中添加三乙胺(125μL，0.897mmol)，接着添加甲磺酰氯(34.7μL，0.449mmol)。将反应在室温搅拌1小时。将反应用H₂O(2mL)稀释并且用CH₂Cl₂(2×2mL)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。

将粗物质溶解于DMF(997μL)中，并且将其添加至7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(100mg，0.299mmol)和碳酸铯(292mg，0.897mmol)的混合物中。将悬浮液在室温搅拌2小时，随后在40℃搅拌3小时，并且随后在室温搅拌过夜。将反应用H₂O(30mL)稀释并且用EtOAc(2×30mL)萃取。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(24gRediSep Gold硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈白色固体的2-((R)-2-甲氧基-3-(三苯甲基氧基)丙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(80mg，40％)。产物为自柱洗脱的两个观察的区域异构体峰中的第二个。LC-MS m/z 665[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.48-8.44(m,1H),8.13-8.08(m,1H),7.61-7.57(m,2H),7.45-7.40(m,6H),7.36-7.29(m,7H),7.28-7.22(m,3H),7.01(s,2H),6.52-6.47(m,1H),5.34-5.28(m,1H),4.68-4.53(m,2H),4.09-4.00(m,1H),3.92-3.84(m,1H),3.63-3.51(m,1H),3.22-3.19(m,3H),3.25-3.15(m,1H),3.05-2.97(m,1H),2.44-2.36(m,1H),1.98-1.91(m,1H),1.84-1.76(m,1H),1.63-1.48(m,3H)。

步骤2.(R)-3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲氧基丙-1-醇，HCl

在2-((R)-2-甲氧基-3-(三苯甲基氧基)丙基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(80mg，0.120mmol)的MeOH(401μL)室温溶液中添加在二

烷中的4M盐酸(90μL，0.361mmol)。将反应在室温搅拌15分钟。将反应添加至Et₂O(6mL)中，并且通过真空过滤收集所得固体并且用Et₂O(3×2mL)洗涤。将固体溶解于1:1的MeCN-H₂O(2mL)中，过滤，在-78℃冷冻并且冻干，得到呈白色固体的(R)-3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲氧基丙-1-醇(HCl)(34mg，75％产率)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.16(s,1H),9.81-9.66(m,1H),8.97(s,1H),8.68-8.53(m,1H),8.20(d,J＝8.2Hz,1H),8.12(d,J＝1.1Hz,1H),7.92(dd,J＝8.2,1.5Hz,1H),7.84(d,J＝2.2Hz,1H),6.82(d,J＝2.3Hz,1H),4.67(dd,J＝14.1,3.5Hz,1H),4.52(dd,J＝14.1,7.7Hz,1H),3.71(td,J＝8.1,5.0Hz,1H),3.53(d,J＝5.1Hz,2H),3.26(s,3H)。分析型LC/MS条件：柱：Acquity UPLC BEH C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B历时1分钟，随后在98％B保持0.50分钟；流速：0.8mL/分钟；检测：MS和UV(254nm)。m/z 339.2[M+H]⁺；RT：0.52分钟。

根据与针对实施例150和151所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例290至实施例302。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。通过手性SFC利用以下条件纯化外消旋物质而制备呈单一未指定异构体形式的实施例300和299：仪器：Waters 100Prep SFC；柱：手性IC，21×250mm，5微米；流动相：60％CO₂/40％MeOH+0.1％DEA；流动条件：60mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例300(第一洗脱异构体)RT：7.50分钟。实施例299(第二洗脱异构体)RT：9.91分钟。分析型手性SFC条件：仪器：Shimadzu Nexera UC SFC；柱：手性AD，4.6×100mm，5微米；流动相：85％CO₂/15％MeOH+0.1％DEA；流动条件：2mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例300(第一洗脱异构体)RT：5.3分钟。实施例299(第二洗脱异构体)RT：6.8分钟。

根据与针对实施例207和实施例208、实施例209、实施例210或实施例210所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的烷基卤化物、甲磺酸盐、甲苯磺酸盐、环氧化物或醇起始物质制备实施例303至实施例406，该起始物质在一些情况下可能含有适当的保护基。烷基化反应的温度范围为室温至90℃，并且在一些情况下，添加另外当量的烷基化试剂。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

通过手性SFC利用以下条件纯化外消旋物质而制备呈单一未指定异构体形式的以下实施例：

实施例315和316：仪器：Waters 100Prep SFC；柱：手性AD，30×250mm，5微米；流动相：75％CO₂/25％MeOH+0.1％DEA；流动条件：100mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例315(第一洗脱异构体)RT：10.61分钟。实施例316(第二洗脱异构体)RT：14.97分钟。分析型手性SFC条件：仪器：Shimadzu Nexera UC SFC；柱：Chiralpak AD，4.6×100mm，5微米；流动相：75％CO₂/25％MeOH+0.1％DEA；流动条件：2mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例315(第一洗脱异构体)RT：5.2分钟。实施例316(第二洗脱异构体)RT：7.0分钟。

实施例318和319：仪器：Waters 100Prep SFC；柱：手性AD，30×250mm，5微米；流动相：65％CO₂/35％MeOH+0.1％DEA；流动条件：100mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例318(第一洗脱异构体)RT：5.47分钟。实施例319(第二洗脱异构体)RT：11.53分钟。分析型手性SFC条件：仪器：Shimadzu Nexera UC SFC；柱：Chiralpak AD，4.6×100mm，5微米；流动相：65％CO₂/35％MeOH+0.1％DEA；流动条件：2mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例318(第一洗脱异构体)RT：2.6分钟。实施例319(第二洗脱异构体)RT：5.2分钟。

实施例324和325：仪器：Berger SFC MGII；柱：CHIRALCEL AS SFC 30×250mm ID，5μm；流动相：78/18CO₂/(MeOH+0.5％DEA)；流动条件：65mL/分钟；检测器波长：270nm。实施例324(第一洗脱异构体)RT：60分钟。实施例325(第二洗脱异构体)RT：65分钟。分析型手性SFC条件：仪器：Agilent分析型SFC；柱：AS柱4.6×250mm ID，5μm；流动相：85/15CO₂/(MeOH+0.5％DEA)；流动条件：2mL/分钟。实施例324(第一洗脱异构体)RT：44.0分钟。实施例325(第二洗脱异构体)RT：48.4分钟。

实施例327和328：仪器：Berger SFC MGII；柱：CHIRALCEL YMC SB SFC 30×250mmID，5μm；流动相：78/18CO₂/(MeOH+0.5％DEA)；流动条件：85mL/分钟；检测器波长：265nm。实施例327(第一洗脱异构体)RT：55分钟。实施例328(第二洗脱异构体)RT：61分钟。分析型手性SFC条件：仪器：Agilent分析型SFC；柱：YMC SB柱4.6×250mm ID，5μm；流动相：80/20CO₂/(MeOH+0.5％DEA)；流动条件：2mL/分钟。实施例327(第一洗脱异构体)RT：22.3分钟。实施例328(第二洗脱异构体)RT：25.5分钟。

实施例337和338：仪器：Waters 100Prep SFC；柱：手性OJ，30×250mm，5微米；流动相：90％CO₂/10％MeOH+0.1％DEA；流动条件：100mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例337(第一洗脱异构体)RT：16.36分钟。实施例338(第二洗脱异构体)RT：26.8分钟。分析型手性SFC条件：仪器：Shimadzu Nexera UC SFC；柱：手性OJ，4.6×100mm，5微米；流动相：90％CO₂/10％MeOH+0.1％DEA；流动条件：2mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例337(第一洗脱异构体)RT：9.9分钟。实施例338(第二洗脱异构体)RT：14.3分钟。

实施例341和342：仪器：Waters 100Prep SFC；柱：手性AD，30×250mm，5微米；流动相：65％CO₂/35％IPA-ACN 50-50+0.1％DEA；流动条件：100mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例341(第一洗脱异构体)RT：17.91分钟。实施例342(第二洗脱异构体)RT：22.64分钟。分析型手性SFC条件：仪器：Shimadzu Nexera UC SFC；柱：手性AD，4.6×100mm，5微米；流动相：65％CO₂/35％IPA-ACN 50-50+0.1％DEA；流动条件：2mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例341(第一洗脱异构体)RT：7.2分钟。实施例342(第二洗脱异构体)RT：8.8分钟。

实施例344和345：仪器：Waters 100Prep SFC；柱：手性OD，30×250mm，5微米；流动相：80％CO₂/20％MeOH+0.1％DEA；流动条件：100mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例344(第一洗脱异构体)RT：23.91分钟。实施例345(第二洗脱异构体)RT：29.15分钟。分析型手性SFC条件：仪器：Shimadzu Nexera UC SFC；柱：手性OD，4.6×100mm，5微米；流动相：80％CO₂/20％MeOH+0.1％DEA；流动条件：2mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例344(第一洗脱异构体)RT：8.0分钟。实施例345(第二洗脱异构体)RT：9.8分钟。

实施例346和347：仪器：Waters 100Prep SFC；柱：手性AD，30×250mm，5微米；流动相：85％CO₂/15％MeOH+0.1％DEA；流动条件：100mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例346(第一洗脱异构体)RT：21.99分钟。实施例347(第二洗脱异构体)RT：26.03分钟。分析型手性SFC条件：仪器：Shimadzu Nexera UC SFC；柱：手性AD，4.6×100mm，5微米；流动相：85％CO₂/15％MeOH+0.1％DEA；流动条件：2mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例346(第一洗脱异构体)RT：10.8分钟。实施例347(第二洗脱异构体)RT：12.9分钟。

实施例376和377：仪器：Waters 100Prep SFC；柱：手性IC，21×250mm，5微米；流动相：75％CO₂/25％MeOH+0.1％DEA；流动条件：60mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例376(第一洗脱异构体)RT：26.43分钟。实施例377(第二洗脱异构体)RT：30.30分钟。分析型手性SFC条件：仪器：Shimadzu Nexera UC SFC；柱：手性IC，4.6×150mm，5微米；流动相：75％CO₂/25％MeOH+0.1％DEA；流动条件：2mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例376(第一洗脱异构体)RT：19.6分钟。实施例377(第二洗脱异构体)RT：21.9分钟。

实施例378和379：仪器：Waters 100Prep SFC；柱：手性OD，30×250mm，5微米；流动相：65％CO₂/35％IPA+0.1％DEA；流动条件：100mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例378(第一洗脱异构体)RT：6.98分钟。实施例379(第二洗脱异构体)RT：10.17分钟。分析型手性SFC条件：仪器：Shimadzu Nexera UC SFC；柱：手性OD，4.6×100mm，5微米；流动相：65％CO₂/35％IPA+0.1％DEA；流动条件：2mL/分钟；检测器波长：220nm。实施例378(第一洗脱异构体)RT：2.4分钟。实施例379(第二洗脱异构体)RT：3.0分钟。

实施例407.2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇，TFA的制备

步骤1. 2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲基丙酸乙酯

在7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(50mg，0.150mmol)的DMF(498μL)室温悬浮液中添加碳酸铯(146mg，0.449mmol)，接着添加2-溴-2-甲基丙酸乙酯(24.14μL，0.164mmol)。将悬浮液在室温搅拌20小时。将反应用EtOAc(20mL)和H₂O(20mL)稀释。分离各层并且用EtOAc(10mL)萃取水层。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(12g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈白色固体的2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲基丙酸乙酯(50.1mg，75％产率)。LC-MS m/z 449[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.79(s,1H),8.14(d,J＝8.1Hz,1H),7.61(d,J＝1.5Hz,1H),7.59(d,J＝1.8Hz,1H),7.32(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H),7.16-6.99(m,2H),6.50(d,J＝1.8Hz,1H),5.29(dd,J＝10.0,2.0Hz,1H),4.13(q,J＝7.1Hz,2H),4.07-3.99(m,1H),3.63-3.54(m,1H),2.49-2.36(m,2H),1.95(s,6H),1.79(br d,J＝12.0Hz,1H),1.62-1.49(m,3H),1.12(t,J＝7.1Hz,3H)。

步骤2. 2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇，TFA

在2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲基丙酸乙酯(50.1mg，0.112mmol)的THF(1005μL)悬浮液中添加MeOH(112μL)，得到澄清的无色溶液。将溶液冷却至0℃，并且逐滴添加硼氢化锂(在THF中的2M溶液)(168μL，0.335mmol)。将反应在0℃搅拌15分钟，随后在室温搅拌1小时。将反应用H₂O(20mL)稀释并且用EtOAc(3×10mL)萃取。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。

将粗物质与CH₂Cl₂(200μL)和TFA(200μL)混合，并且在室温搅拌1小时。真空浓缩反应。将粗物质溶解于CH₂Cl₂(300μL)中并且真空浓缩。将粗物质溶解于DMF(2mL)中，过滤(Acrodisc 0.45μm尼龙针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在0％B保持0分钟，0-30％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇，TFA(30.8mg，63％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.22(br s,1H),9.60-9.42(m,1H),9.03-8.99(m,1H),8.83-8.61(m,1H),8.22(d,J＝8.2Hz,1H),8.06(br s,1H),7.92(br d,J＝7.9Hz,1H),7.83(br s,1H),6.82(d,J＝2.2Hz,1H),5.32(br s,1H),1.64(s,6H)；两个CH质子不可见，可能由于与抑制的水峰重叠。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 323.0[M+H]⁺；RT：0.9分钟。

根据与针对实施例407所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的烷基氯化物或甲磺酸盐起始物质制备实施例408至实施例409。烷基化反应的温度范围为室温至50℃。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例410. 3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-醇，TFA的制备

步骤1. 3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-3-甲基丁酸甲酯

在7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(30mg，0.090mmol)的DMF(299μL)室温悬浮液中添加碳酸铯(88mg，0.269mmol)，接着添加3-甲基丁-2-烯酸甲酯(12.90μL，0.099mmol)。将反应在室温搅拌19小时。将反应在50℃搅拌2小时。添加另外的3-甲基丁-2-烯酸甲酯(25.8μL，0.198mmol)。将反应在50℃搅拌22小时。添加另外的3-甲基丁-2-烯酸甲酯(50μL)。将反应在室温搅拌16小时。添加另外的3-甲基丁-2-烯酸甲酯(50μL)。将反应在室温搅拌4小时。将反应用EtOAc(20mL)和H₂O(20mL)稀释。分离各层并且用EtOAc(10mL)萃取水层。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(12g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈与未反应起始物质的混合物形式的3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-3-甲基丁酸甲酯(20mg)。此物质不经进一步纯化即使用。

步骤2. 3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-醇，TFA

将来自前一步骤的物质悬浮于THF(401μL)中，并且随后添加MeOH(44.6μL)。将混合物冷却至0℃，并且逐滴添加硼氢化锂(在THF中的2M溶液)(66.9μL，0.134mmol)。将反应在室温搅拌5小时。添加另外的LiBH₄(67μL)。将反应在室温搅拌30分钟。添加另外的LiBH₄(134μL)。将反应在室温搅拌18小时。将反应用H₂O(20mL)稀释并且用EtOAc(3×10mL)萃取。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。

将粗物质与CH₂Cl₂(150μL)和TFA(150μL)混合，并且将反应在室温搅拌1小时。真空浓缩反应。将粗物质溶解于CH₂Cl₂(300μL)中并且真空浓缩。

将粗物质与CH₂Cl₂(150μL)和MeOH(150μL)混合，并且添加三乙胺(31.1μL，0.223mmol)。将反应在室温搅拌15分钟。真空浓缩反应。将粗物质溶解于CH₂Cl₂(300μL)中并且真空浓缩。将粗物质溶解于DMF(2mL)中，过滤(Acrodisc 0.45μm尼龙针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在1％B保持0分钟，1-41％B历时20分钟，随后在100％B保持4分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-醇，TFA(10.2mg，50％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.22-13.01(m,1H),9.59-9.35(m,1H),9.04(s,1H),8.91-8.72(m,1H),8.21(d,J＝8.3Hz,1H),8.10(br s,1H),7.92(br d,J＝7.9Hz,1H),7.85(br s,1H),6.82(d,J＝1.9Hz,1H),4.58(br s,1H),3.29(br t,J＝6.8Hz,2H),2.19(t,J＝6.9Hz,2H),1.72(s,6H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 337.2[M+H]⁺；RT：1.1分钟。

实施例411. 2-[(吗啉-4-基)甲基]-7-(1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺的制备

步骤1. 7-溴-N-(4-甲氧基苄基)-3-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙-1-炔-1-基)喹啉-4-胺

在7-溴-3-碘-N-(4-甲氧基苄基)喹啉-4-胺(4.89g，10.42mmol)的DMF(34.7mL)室温悬浮液中添加三乙胺(5.81mL，41.7mmol)。将混合物用N₂吹扫15分钟，随后添加双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.146g，0.208mmol)和碘化亚铜(I)(0.099g，0.521mmol)。将混合物用N₂吹扫2分钟，随后逐滴添加2-(丙-2-炔-1-基氧基)四氢-2H-吡喃(1.753g，12.51mmol)。将反应在室温搅拌19小时。将反应用EtOAc(300mL)稀释，用LiCl水溶液(3×200mL)和饱和NaCl水溶液(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。将粗物质与Et₂O(50mL)混合，并且通过真空过滤收集固体并且用Et₂O(4×10mL)洗涤。真空浓缩滤液，并且通过快速色谱(40g硅胶；线性梯度0-100％EtOAc-己烷)纯化残留物。将来自色谱的产物与来自过滤的固体合并，得到呈黄色固体的7-溴-N-(4-甲氧基苄基)-3-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙-1-炔-1-基)喹啉-4-胺(4.62g，92％)。LC-MS m/z 481/483[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.36-8.30(m,2H),8.00-7.95(m,2H),7.66(dd,J＝9.0,2.1Hz,1H),7.26(d,J＝8.7Hz,2H),6.89-6.84(m,2H),5.09(d,J＝6.7Hz,2H),4.74-4.71(m,1H),4.48-4.42(m,1H),4.39-4.32(m,1H),3.78-3.71(m,1H),3.70(s,3H),3.50-3.41(m,1H),1.76-1.57(m,2H),1.54-1.42(m,4H)。

步骤2. 7-溴-1-(4-甲氧基苄基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉

将7-溴-N-(4-甲氧基苄基)-3-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙-1-炔-1-基)喹啉-4-胺(3.540g，7.35mmol)和叔丁醇钾(1.650g，14.71mmol)在THF(36.8mL)中的混合物在室温搅拌24小时。通过添加至饱和NH₄Cl水溶液(200mL)中来猝灭反应，并且用EtOAc(2×200mL)萃取。合并的有机层用饱和NaCl水溶液(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(80g硅胶；线性梯度0-100％EtOAc-己烷)纯化，得到呈灰白色固体的7-溴-1-(4-甲氧基苄基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉(2.87g，81％)。LC-MS m/z481/483[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.16(s,1H),8.23(d,J＝2.2Hz,1H),8.08(d,J＝9.0Hz,1H),7.57(dd,J＝9.0,2.1Hz,1H),7.00(s,1H),6.90-6.86(m,2H),6.85-6.81(m,2H),5.87(s,2H),4.90(d,J＝12.8Hz,1H),4.73-4.67(m,2H),3.74(ddd,J＝11.2,8.4,2.3Hz,1H),3.66(s,3H),3.50-3.44(m,1H),1.58-1.33(m,5H),1.28-1.19(m,1H)。

步骤3. 7-溴-1-(4-甲氧基苄基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉5-氧化物

在7-溴-1-(4-甲氧基苄基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉(2.87g，5.96mmol)的CH₂Cl₂(29.8mL)室温溶液中分批添加3-氯过氧苯甲酸(<77％)(1.737g，7.75mmol)。将澄清的橙色溶液在室温搅拌2小时。将反应用CH₂Cl₂(200mL)稀释，用10％w/w Na₂S₂O₃水溶液和饱和NaHCO₃水溶液的1:1混合物(2×200mL)洗涤，并且随后用H₂O(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(40g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化。混合的级分通过快速色谱(40g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)再纯化。合并来自两个柱的含有产物的级分，得到呈橙色泡沫状的7-溴-1-(4-甲氧基苄基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉5-氧化物(2.591g，87％)。LC-MS m/z 497/499[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.04(s,1H),8.90(d,J＝2.1Hz,1H),8.12(d,J＝9.1Hz,1H),7.76(dd,J＝9.0,2.2Hz,1H),6.92-6.88(m,3H),6.86-6.82(m,2H),5.85(s,2H),4.88(d,J＝12.8Hz,1H),4.71-4.66(m,2H),3.76-3.69(m,1H),3.66(s,3H),3.50-3.43(m,1H),1.58-1.33(m,5H),1.28-1.20(m,1H)

步骤4. 7-溴-N,1-双(4-甲氧基苄基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺

在7-溴-1-(4-甲氧基苄基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉5-氧化物(2.590g，5.21mmol)的CH₂Cl₂(26.0mL)室温溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(2.72mL，15.62mmol)、4-甲氧基苄基胺(0.816mL，6.25mmol)和PyBroP(2.91g，6.25mmol)。将反应在室温搅拌5小时。将反应用CH₂Cl₂(200mL)稀释，用H₂O(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(80g硅胶；线性梯度0-100％EtOAc-己烷)纯化，得到呈黄色固体的7-溴-N,1-双(4-甲氧基苄基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(2.414g，75％)。LC-MS m/z 616/618[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.80(t,J＝6.0Hz,1H),7.75(d,J＝8.9Hz,1H),7.69(d,J＝2.1Hz,1H),7.37(d,J＝8.7Hz,2H),7.10(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H),7.06(s,1H),6.90-6.86(m,4H),6.85-6.82(m,2H),5.75(s,2H),4.80(d,J＝12.8Hz,1H),4.72(d,J＝6.0Hz,2H),4.67(t,J＝3.4Hz,1H),4.61(d,J＝12.8Hz,1H),3.72(s,3H),3.76-3.70(m,1H),3.67(s,3H),3.49-3.42(m,1H),1.60-1.33(m,5H),1.29-1.21(m,1H)。

步骤5.N,1-双(4-甲氧基苄基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺

将7-溴-N,1-双(4-甲氧基苄基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(2.414g，3.92mmol)、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.416g，5.09mmol)和磷酸三钾(2.493g，11.75mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后将其与1,4-二

烷(16.31mL)和H₂O(3.26mL)混合。将所得混合物用N₂吹扫15分钟，随后添加氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]钯(II)(0.062g，0.078mmol)。将反应在100℃搅拌1小时。将反应冷却至室温，用EtOAc(200mL)稀释，用H₂O(3×200mL)和饱和NaCl水溶液(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(80g硅胶；线性梯度0-100％EtOAc-己烷)纯化，得到呈橙色泡沫状的N,1-双(4-甲氧基苄基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(2.644g，98％)。LC-MS m/z 688[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.91(d,J＝8.6Hz,1H),7.78-7.72(m,2H),7.54(d,J＝1.8Hz,1H),7.40(d,J＝8.7Hz,2H),7.12(dd,J＝8.5,1.9Hz,1H),7.06(s,1H),6.93-6.89(m,2H),6.88-6.81(m,4H),6.47(d,J＝1.8Hz,1H),5.79(s,2H),5.20(br d,J＝9.8Hz,1H),4.83(d,J＝12.5Hz,1H),4.79-4.72(m,1H),4.71-4.66(m,2H),4.66-4.60(m,1H),4.07-3.99(m,1H),3.70(s,3H),3.77-3.69(m,1H),3.66(s,3H),3.55-3.44(m,2H),2.45-2.34(m,1H),1.97-1.89(m,1H),1.74(br d,J＝12.2Hz,1H),1.61-1.34(m,8H),1.30-1.21(m,1H)。

步骤6.(1-(4-甲氧基苄基)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基)甲醇

在N,1-双(4-甲氧基苄基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(500mg，0.727mmol)的MeOH(7269μL)室温悬浮液中添加在1,4-二

烷中的4M盐酸(363μL，1.454mmol)。将混合物超声直至其变成澄清的黄色溶液。将反应在室温搅拌45分钟，变成悬浮液。将反应添加至Et₂O(70mL)中，并且通过真空过滤收集固体并且用Et₂O(2×4mL)洗涤。将固体与20％MeOH-CH₂Cl₂(200mL)和饱和NaHCO₃水溶液(200mL)混合。分离各层，并且有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩，得到呈白色固体的(1-(4-甲氧基苄基)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基)甲醇(361mg，96％)。LC-MS m/z 520[M+H]⁺；¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.26-12.80(m,1H),7.95(d,J＝1.9Hz,1H),7.87-7.82(m,1H),7.75(s,1H),7.70-7.53(m,1H),7.51-7.43(m,1H),7.41-7.32(m,2H),6.97-6.91(m,3H),6.90-6.82(m,4H),6.76-6.67(m,1H),5.79(br s,2H),5.40-5.33(m,1H),4.80-4.71(m,2H),4.63-4.55(m,2H),3.70(s,3H),3.66(s,3H)。

步骤7. 1-(4-甲氧基苄基)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-甲醛

在(1-(4-甲氧基苄基)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基)甲醇(0.361g，0.695mmol)的CH₂Cl₂(19.85mL)室温悬浮液中添加Dess-Martin过碘烷(0.589g，1.390mmol)。将反应在室温搅拌10分钟。通过添加10％Na₂S₂O₃水溶液(10mL)和饱和NaHCO₃水溶液(10mL)的混合物来猝灭反应，并且将其剧烈搅拌30分钟，随后用10％MeOH-CH₂Cl₂(2×20mL)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(40g硅胶；线性梯度0-10％MeOH-CH₂Cl₂)纯化，得到呈黄色固体、与少量不具有4-甲氧基苄基氨基之一的对应物质混合的1-(4-甲氧基苄基)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-甲醛(309mg，86％)，其不经进一步纯化即使用。LC-MS m/z 518[M+H]⁺。

步骤8和9. 2-(吗啉代甲基)-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺，2AcOH

在1-(4-甲氧基苄基)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-甲醛(47.7mg，0.092mmol)的DCE(461μL)室温悬浮液中添加吗啉(11.92μL，0.138mmol)和原甲酸三甲酯(81μL，0.737mmol)。将反应在室温搅拌1小时，随后添加三乙酰氧基硼氢化钠(39.1mg，0.184mmol)。将反应在室温搅拌2小时。添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(20mg，0.094mmol)。将反应在室温搅拌1小时。将反应用饱和NaHCO₃水溶液(4mL)稀释并且用CH₂Cl₂(2×4mL)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。

将粗物质溶解于TFA(415μL)中，并且添加TfOH(46μL)。将反应密封并且在40℃搅拌2.5小时。将反应冷却至室温并且逐滴添加至Et₂O(15mL)中。通过真空过滤收集所得固体。此物质通过制备型HPLC(三次1mL注射)(柱：Waters XBridge 19×100mm；线性梯度10-90％B-A历时10分钟；溶剂A＝5％MeCN-H₂O+10mM NH₄OAc；溶剂B＝95％MeCN-H₂O+10mMNH₄OAc；流动速率：30mL/分钟；检测器波长：220nm)纯化。将含有产物的级分在-78℃冷冻并且冻干，得到呈白色固体的2-(吗啉代甲基)-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺，2AcOH(21.6mg，50％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.05-11.95(m,1H),8.15(d,J＝8.3Hz,1H),7.90(d,J＝1.6Hz,1H),7.68(br s,1H),7.59(br d,J＝8.6Hz,1H),6.73(d,J＝2.0Hz,1H),6.64(s,1H),6.52(s,2H),3.63(s,2H),3.62-3.59(m,4H),2.44(br s,4H),1.88(s,6H)。分析型LC/MS条件：柱：Acquity UPLC BEH C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B历时1分钟，随后在98％B保持0.50分钟；流速：0.8mL/分钟；检测：MS和UV(254nm)。m/z349.2[M+H]⁺；RT：0.45分钟。

根据与针对实施例150、实施例151和实施例411所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例412至实施例422。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridgeC18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例423. 2,3-二甲基-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺的制备

步骤1. 3-溴-N,1-双(4-甲氧基苄基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺

在N,1-双(4-甲氧基苄基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(510mg，0.741mmol)的DMF(4943μL)溶液中添加N-溴琥珀酰亚胺(139mg，0.779mmol)。将反应在室温搅拌30分钟。将混合物用EtOAc(100mL)稀释，用H₂O(2×100mL)和饱和NaCl水溶液(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(24g硅胶；线性梯度0-100％EtOAc-己烷)纯化，得到呈黄色泡沫状的3-溴-N,1-双(4-甲氧基苄基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(506mg，89％)。LC-MS m/z 766/768[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.96(d,J＝8.6Hz,1H),7.78(d,J＝1.8Hz,1H),7.55(d,J＝1.7Hz,1H),7.45-7.41(m,2H),7.18(dd,J＝8.6,1.9Hz,1H),6.98-6.92(m,3H),6.90-6.83(m,4H),6.50(d,J＝1.8Hz,1H),5.87(s,2H),5.20(br d,J＝9.7Hz,1H),4.88(dd,J＝12.8,1.8Hz,1H),4.85-4.79(m,1H),4.79-4.73(m,1H),4.73-4.66(m,2H),4.06-3.99(m,1H),3.79-3.71(m,1H),3.71(s,3H),3.66(s,3H),3.55-3.43(m,2H),2.46-2.34(m,1H),1.97-1.88(m,1H),1.75(br d,J＝12.5Hz,1H),1.62-1.32(m,8H),1.25-1.18(m,1H)。

步骤2.N,1-双(4-甲氧基苄基)-3-甲基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺

将3-溴-N,1-双(4-甲氧基苄基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(268mg，0.350mmol)、甲基硼酸(27.2mg，0.454mmol)和磷酸三钾(223mg，1.049mmol)的混合物抽成真空并且用N₂回填，随后将其与1,4-二

烷(1942μL)和H₂O(388μL)混合。将混合物用N₂吹扫25分钟，随后添加氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]钯(II)(13.75mg，0.017mmol)。将反应密封并且在100℃搅拌30分钟。添加另外的甲基硼酸(27.2mg，0.454mmol)和氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]钯(II)(13.75mg，0.017mmol)。将反应在100℃搅拌30分钟。将反应冷却至室温，用EtOAc(100mL)稀释，用H₂O(100mL)和饱和NaCl水溶液(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。粗物质通过快速色谱(40g RediSep Gold硅胶；线性梯度0-75％EtOAc-CH₂Cl₂)纯化，得到呈黄色泡沫状的N,1-双(4-甲氧基苄基)-3-甲基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(173mg，71％)。LC-MS m/z 702[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.91(d,J＝8.7Hz,1H),7.72(d,J＝1.7Hz,1H),7.54(d,J＝1.8Hz,1H),7.44(d,J＝8.6Hz,2H),7.11(dd,J＝8.5,1.8Hz,1H),6.93-6.87(m,2H),6.87-6.81(m,4H),6.73(t,J＝6.0Hz,1H),6.47(d,J＝1.8Hz,1H),5.79(s,2H),5.19(br d,J＝9.9Hz,1H),4.81-4.60(m,5H),4.06-3.99(m,1H),3.79-3.71(m,1H),3.70(s,3H),3.66(s,3H),3.53-3.44(m,2H),2.60(s,3H),2.45-2.35(m,1H),1.98-1.88(m,1H),1.74(br d,J＝11.9Hz,1H),1.64-1.34(m,8H),1.27-1.20(m,1H)

步骤3.(1-(4-甲氧基苄基)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-3-甲基-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基)甲醇

在N,1-双(4-甲氧基苄基)-3-甲基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(172mg，0.245mmol)的MeOH(2451μL)室温悬浮液中添加在1,4-二

烷中的4M盐酸(123μL，0.490mmol)。将反应在室温搅拌30分钟。将反应添加至Et₂O(20mL)中，并且通过真空过滤收集固体并且用Et₂O(2×3mL)洗涤。将固体与10％MeOH-CH₂Cl₂(100mL)和饱和NaHCO₃水溶液(100mL)混合。分离各层，并且有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩，得到呈白色固体的(1-(4-甲氧基苄基)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-3-甲基-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基)甲醇(104mg，80％)。LC-MS m/z534[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.25-12.80(m,1H),7.95-7.92(m,1H),7.88-7.71(m,1H),7.51-7.31(m,3H),6.94-6.89(m,4H),6.88-6.82(m,3H),6.75-6.68(m,1H),6.58-6.46(m,1H),5.81(br s,2H),5.19-5.12(m,1H),4.82-4.75(m,2H),4.57-4.53(m,2H),3.71(s,3H),3.67(s,3H),2.57(s,3H)。

步骤4. 2,3-二甲基-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺

在(1-(4-甲氧基苄基)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-3-甲基-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-2-基)甲醇(24mg，0.045mmol)的TFA(202μL)室温溶液中添加三乙基硅烷(35.9μL，0.225mmol)和TfOH(22.49μL)。将反应在室温搅拌30分钟。真空浓缩反应。将粗物质溶解于MeOH(300μL)中并且真空浓缩。将粗物质溶解于DMF(2mL)中，过滤(针筒过滤器)，并且通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+乙酸铵；梯度：在2％B保持0分钟，2-42％B历时20分钟，随后在100％B保持0分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥，得到2,3-二甲基-7-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]喹啉-4-胺(5.8mg，47％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.84(br s,1H),8.02(d,J＝8.3Hz,1H),7.91(s,1H),7.69(br s,1H),7.63(br d,J＝8.3Hz,1H),6.73(d,J＝1.7Hz,1H),6.49-6.36(m,2H),2.36(s,3H),2.34(s,3H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 278.2[M+H]⁺；RT：1.12分钟。

根据与针对实施例150、151、209、253或286所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例424至实施例456。分析型LC/MS条件：

A：柱：PoroShell HPH C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水+5mM碳酸氢铵；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.7分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

B：柱：CORTECS C18，2.1mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水+0.09％FA；流动相B：乙腈+0.1％FA；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.6分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

C：柱：Shim-pack XR-ODS，3.0mm×50mm，2.2μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.7分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

D：柱：Kinetex XB-C18，2.1mm×30mm，1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至100％B历时1.2分钟，随后在100％B保持0.6分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

E：柱：Kinetex EVO C18，3.0mm×50mm，2.2μm颗粒；流动相A：水+5mM碳酸氢铵；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：10％B至95％B历时2分钟，随后在95％B保持0.6分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

F：柱：PoroShell HPH C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水+5mM碳酸氢铵；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：5％B至60％B历时3分钟，随后历时0.2分钟达到95％，随后在95％B保持1.0分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

G：柱：Xbridge BEH Shield RP18，2.1mm×50mm，2.5μm颗粒；流动相A：0.1NH₃.H₂O；流动相B：乙腈；温度：40℃；梯度：10％B至50％B历时2.2分钟，随后历时0.6分钟达到95％，随后在95％B保持0.7分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV。

H：柱：Ascentis Express C18，3.0mm×50mm，2.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至95％B历时2.0分钟，随后在95％B保持0.7分钟；流速：1.5mL/分钟；检测：MS和UV。

I：柱：Titan C18，2.1mm×50mm，1.9μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：10％B至95％历时2.0分钟，随后在95％B保持0.65分钟；流速：0.7mL/分钟；检测：MS和UV。

J：柱：Shim-pack XR-ODS，3.0mm×50mm，2.2μm颗粒；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；温度：40℃；梯度：5％B至30％历时2.5分钟，并且随后历时0.7分钟达到95％B，随后在95％B保持1.0分钟；流速：1.2mL/分钟；检测：MS和UV。

实施例457. 7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺的制备

在7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(30mg，0.09mmol)的DCM(150μL)室温悬浮液中添加TFA(150μL)。将反应在室温搅拌2小时。真空浓缩反应。将粗物质溶解于DCM(300μL)中并且浓缩，随后将其溶解于DMF(2mL)中，过滤(Acrodisc0.45μm尼龙针筒过滤器)，并且通过制备型HPLC纯化，得到7-(1H-吡唑-3-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(13.6mg，60.6％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ14.35-13.89(m,1H),13.24-12.82(m,1H),8.37(br s,1H),8.13(d,J＝8.3Hz,1H),8.04-7.94(m,1H),7.86-7.68(m,2H),7.52-7.03(m,2H),6.80(br s,1H)。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridgeC18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。m/z 250.9[M+H]+；RT：0.89分钟。

实施例458. 2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-N,N-二甲基乙酰胺，TFA的制备

在7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(34mg，0.102mmol)、碳酸铯(83mg，0.254mmol)和2-氯-N,N-二甲基乙酰胺(24.72mg，0.203mmol)的DMF(1mL)悬浮液在室温搅拌3小时。将反应用EtOAc(10mL)稀释并且用水洗涤。有机层经硫酸钠干燥并且浓缩。随后用EtOAc(1mL)溶解残留物。添加在二

烷中的4NHCl(0.5mL)。将所得混合物在室温搅拌30分钟并且真空浓缩。粗物质通过制备型LC/MS利用以下条件纯化：柱：XBridge C18，200mm×19mm，5μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；梯度：在0％B保持5分钟，0-28％B历时25分钟，随后在100％B保持0分钟；流动速率：20mL/分钟；柱温度：25℃。通过MS信号触发级分收集。合并含有所需产物的级分并且通过离心蒸发干燥。使用分析型LC/MS测定最终纯度。注射1条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。LCMS M+H：336.26；保留时间：1.04分钟。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.91(s,1H),8.18(m,2H),7.94(brd,J＝7.9Hz,1H),7.88(br s,1H),6.84(s,1H),5.63(s,2H),3.13(s,3H),2.92(s,3H)。

制备2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-N,N-二甲基乙酰胺的可选择的方法

步骤1. 2-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙酸乙酯

将7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(700mg，2.093mmol)、碳酸铯(1705mg，5.23mmol)和2-氯乙酸乙酯(513mg，4.19mmol)的DMF(6mL)悬浮液在室温搅拌3小时，此时LCMS显示完全转化。将反应用水(10mL)猝灭，用5％MeOH/DCM(3×)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，真空浓缩，并且通过快速色谱(0-20％MeOH/DCM，2N NH₃)纯化，得到所需异构体(550mg，62.5％)。LCMS M+＝393.3。

步骤2. 2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙酸

在步骤1的酸在THF/MeOH(1:1，12mL)中的悬浮液中添加NaOH水溶液(2N，2mL)。将混合物在室温搅拌3小时，之后真空浓缩。随后添加HCl的Et₂O溶液(2N，8mL)。将所得悬浮液在室温搅拌30分钟，之后浓缩，并且用NaHCO₃水溶液中和至pH＝6。通过真空过滤收集产物，用Et₂O和水洗涤，并且真空干燥，得到呈白色固体的2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙酸(350mg，85％)。LCMS M+＝309.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)位移9.06-8.68(m,2H),8.28-7.59(m,4H),6.77(s,1H),5.36(s,2H)。

步骤3. 2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-N,N-二甲基乙酰胺

将2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)乙酸(20mg，0.065mmol)、Hunig碱(68.0μL，0.389mmol)的DMF(0.8mL)悬浮液超声2分钟，随后添加二甲胺(97μL，0.195mmol，2M在THF中)和HATU(24.67mg，0.065mmol)的溶液。将混合物在室温搅拌1小时，之后添加另外的HATU(24.67mg，0.065mmol)。将反应在室温搅拌30分钟并且随后真空浓缩。粗产物通过制备型HPLC纯化，得到2-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-N,N-二甲基乙酰胺。LC/MS M+＝336.1。

根据与针对先前实施例所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例459至实施例487。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例488. 3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-N,N,2-三甲基丙酰胺，TFA的制备

步骤1. 3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲基丙酸甲酯的制备

将7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4-胺(0.2g，0.598mmol)和碳酸铯(0.585g，1.794mmol)的DMF(1.994mL)悬浮液简单搅拌(约2分钟)，随后用(R)-3-溴-2-甲基丙酸甲酯(0.178g，0.96mol)处理。随后使反应温至60℃并且搅拌。5小时后，用0.1g另外的碳酸铯和0.1g另外的(R)-3-溴-2-甲基丙酸甲酯处理反应。在60℃继续搅拌过夜，之后将反应倾入水中，并且将pH调节至约6。将所得混合物用EtOAc萃取两次，并且合并的有机萃取物干燥，浓缩，并且通过硅胶色谱(50-100％THF-己烷)纯化，得到呈无色玻璃状的3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲基丙酸甲酯(195mg，0.449mmol，75％产率)。分析型LC/MS条件：柱：Acquity UPLC BEH C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B历时1分钟，随后在98％B保持0.50分钟；流速：0.8mL/分钟；检测：MS和UV(254nm)。RT：0.69分钟。m/z 435.3[M+H]⁺。

步骤2. 3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲基丙酸的制备

将3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲基丙酸甲酯(190mg，0.437mmol)的THF(2.2mL)溶液用氢氧化锂水溶液(2.186mL，2.186mmol)处理，接着用0.6mL MeOH处理。使反应温至60℃并且搅拌3小时。在氮气流下除去大部分有机溶剂，并且将残留物用2mL水稀释并且过滤。用冰HOAc使滤液达至pH约5.5，并且过滤所得沉淀，用水冲洗并且风干，得到呈白色粉末状的3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲基丙酸(135mg，0.321mmol，73.4％产率)。分析型LC/MS条件：柱：Acquity UPLC BEH C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B历时1分钟，随后在98％B保持0.50分钟；流速：0.8mL/分钟；检测：MS和UV(254nm)。RT：0.63分钟。m/z 421.2[M+H]⁺。

步骤3. 3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-N,N,2-三甲基丙酰胺(TFA)的制备

将3-(4-氨基-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-2-甲基丙酸(18mg，0.043mmol)和二甲胺((2M于THF中)，86μL，0.171mmol)的DMF(214μL)溶液用BOP(22.72mg，0.051mmol)处理，并且将所得溶液在室温搅拌1小时。随后将反应用0.8mL 1:1的TFA-DCM处理并且在室温搅拌2小时。真空浓缩反应。通过制备型HPLC纯化粗产物。浓缩适当级分，得到呈无色固体的3-(4-氨基-7-(1H-吡唑-5-基)-2H-吡唑并[4,3-c]喹啉-2-基)-N,N,2-三甲基丙酰胺，TFA(10mg，49％)。分析型LC/MS条件：柱：AcquityUPLC BEH C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B历时1分钟，随后在98％B保持0.50分钟；流速：0.8mL/分钟；检测：MS和UV(254nm)。RT：0.56分钟。m/z 364.1[M+H]⁺。¹H NMR(400MHz,MeOH-d₄)δ8.70(s,1H),8.30(d,J＝8.3Hz,1H),8.01(s,1H),7.95(d,J＝8.2Hz,1H),7.79(d,J＝2.2Hz,1H),6.85(d,J＝2.2Hz,1H),4.63(ABq,J_AB＝13.3Hz,J_AX＝9.4Hz,J_BX＝4.9Hz,Δν＝109Hz,2H),3.77-3.87(m,1H),3.07(s,3H),2.89(s,3H),1.28(d,J＝6.9Hz,3H)。

根据与针对先前实施例所描述的合成方法类似的合成方法，由适当的起始物质制备实施例489至实施例624。分析型LC/MS条件：柱：Waters XBridge C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：5:95的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；流动相B：95:5的乙腈:水+0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％B至100％B历时3分钟，随后在100％B保持0.50分钟；流速：1mL/分钟；检测：MS和UV(220nm)。

实施例489和612的分析型LC/MS条件：柱：Acquity UPLC BEH C18，2.1mm×50mm，1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B历时1分钟，随后在98％B保持0.50分钟；流速：0.8mL/分钟；检测：MS和UV(254nm)。

生物活性评价

测定PMA分化的THP-1细胞中的IL-1β产生

THP-1细胞购自美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection)并且根据供货商的说明书继代培养。在试验之前，将细胞培养在含有10％热灭活的FBS、青霉素(100单位/mL)和链霉素(100μg/mL)的RPMI 1640中，并且在试验设置之前维持在对数期。在试验之前，用PMA(佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯)(10μg/mL)处理THP-1达24小时。试验当天，除去培养基并且用胰蛋白酶处理附着细胞2分钟，接着收集细胞，用PBS(磷酸盐缓冲盐水)洗涤，离心后，以1×10⁶个细胞/mL的浓度再混悬于以RPMI配制的2％热灭活的FBS中，并且将100μL接种在96孔培养板中。将化合物溶解于二甲亚砜(DMSO)中并且添加至培养基中以实现所需浓度(例如，100、30、10、3、1、0.3或0.1μM)。将细胞与化合物一起温育4小时。收集无细胞上清液并且通过ELISA评价IL-1β产生。仅介质的对照与各试验同时操作。最终DMSO浓度是1％。化合物在PMA分化的THP-1细胞中展现剂量相关性地增加IL-1β产生。

PMA分化的THP-1细胞中的IL-1β产生的测定(可选择的方法)

THP-1细胞购自美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection)并且根据供货商的说明书继代培养。在试验之前，将细胞培养在含有10％热灭活的FBS、青霉素(100单位/mL)、链霉素(100μg/mL)、HEPES(10mM)和丙酮酸钠(1mM)的RPMI 1640中，并且在试验设置之前维持在对数期。在试验之前，用PMA(佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯)(20μg/mL)处理THP-1细胞过夜。试验当天，除去培养基并且用胰蛋白酶处理附着细胞2分钟，接着收集细胞，用PBS(磷酸盐缓冲盐水)洗涤，通过离心沉淀，并且在384孔板中以50,000个细胞/孔的浓度再混悬于以RPMI配制的2％热灭活的FBS中。收集无细胞上清液并且通过ELISA评价IL-1β产生。将化合物溶解于二甲亚砜(DMSO)中并且添加至培养基中以实现所需浓度(例如，100、30、10、3、1、0.3或0.1μM)。将细胞与化合物一起温育2小时。仅介质的对照与各试验同时操作。最终DMSO浓度是1％。化合物在PMA分化的THP-1细胞中展现剂量相关性地增加IL-1β产生。

测定IL-1β产生-hTRF方案(第二可选择的方法)

使用ECHO 550声波移液器(Labcyte)将化合物在DMSO中的系列稀释液以100nL/孔添加至小体积384孔板中，以在测定中实现10μM的最终起始浓度。

在37℃在5％CO₂下，使用50ng/mL的最终浓度的佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA)(Sigma，P1585)，将T175烧瓶中密度为1×10⁶个细胞/mL的具有10％FBS的RPMI(Gibco，11875)培养基中的THP-1细胞处理过夜，以用于分化。在用dPBS冲洗孔之后的次日使用0.5％胰蛋白酶收获细胞。在具有2％FBS的RPMI培养基中，以50μL/孔对50,000个细胞制备1×10⁶个细胞/mL的细胞溶液。在Greiner 384孔黑色透明底部的组织培养处理板(781090)中，使用多通道式移液管将细胞接种于化合物稀释液上。在37℃温育箱中在5％CO₂下将所述板温育2小时。

2小时温育之后，在离心机中将细胞板以1200rpm旋转5分钟。使用Felix(CyBio)，将8μL上清液转移至小体积384孔白色proxy板(Perkin Elmer，6008230)。使用人IL1βhTRF试剂盒来分析上清液(CISBIO，62HIL1BPEG)。根据试剂盒说明书制备IL1β标准曲线，并且接着如试剂盒指示，将来自试剂盒的抗体按1:40而非1:20稀释。一旦组合，在整个板中以5μL/孔添加抗体。密封所述板并且在4℃温育过夜。接着在Perkin Elmer EnVision上使用hTRF激光以665/615nm读板。化合物展现剂量相关性地增加IL-1β产生。

测定IL-1β产生-人全血测定

使用ECHO 550声波移液器(Labcyte)将化合物在DMSO中的系列稀释液以100nL/孔添加至小体积384孔板中，以在测定中实现10uM的最终起始浓度。

在潮湿的95％空气/5％CO₂温育箱中在37℃，用1ng/mL的LPS(Invivogen，目录号tlrl-eblps)预处理获自健康供体的人静脉全血4小时。将预刺激的血液添加至化合物板中并且在37℃再温育4小时。根据制造商的说明书使用AlphLISA试剂盒(Cat#AL220)来测定上清液中的IL-1β。化合物展现剂量相关性地增加IL-1β产生。使用预刺激但未处理的血液作为基线来确定EC50。

测定IL-1β产生-小鼠hTRF方案

来源于C57BL/6小鼠的永生化小鼠巨噬细胞获自Ericke Latz，波恩大学(University of Bonn)/马萨诸塞州(MA)的麻省大学沃斯特分校(University ofMassachusetts Worchester)。使用0.05％胰蛋白酶收获细胞并且用PBS洗涤。以25uL以30,000个细胞/孔将细胞接种于补充有2％FBS的DMEM(Gibco，11965)中，并且在37℃在5％CO₂下温育10分钟。以5μL/孔添加LPS-EB(Invivogen，tlr-eblps)至200ng/mL的最终浓度，并且在37℃在5％CO₂下将细胞温育2小时。

使用ECHO 550声波移液器(Labcyte)将化合物在DMSO中的系列稀释液以60nL/孔添加至小体积384孔板中的细胞中，以在测定中实现50uM的最终起始浓度，并且在37℃在5％CO₂下与化合物一起再温育2小时。

2小时温育之后，在离心机中将细胞板以1200rpm离心5分钟。使用Felix(CyBio)，将8uL上清液转移至小体积384孔白色proxy板(Perkin Elmer，6008230)。使用人IL1βhTRF试剂盒来分析上清液(CISBIO，62MIL1BPEH)。根据试剂盒说明书制备IL1β标准曲线(如试剂盒指示，将来自试剂盒的抗体按1:40而非1:20稀释)。一旦组合，在整个板中以5μL/孔添加抗体。密封所述板并且在4℃温育过夜。在Perkin Elmer EnVision上使用hTRF激光以665/615nm读板。接着将数据转化成pg/mL的IL1β。化合物展现剂量相关性地增加IL-1β产生。

体外人TLR7和TLR8结合报道子测定

将共表达TLR7或TLR8基因和NF-kB/AP1-诱导型SEAP(分泌性胚胎碱性磷酸酶；Invivogen,San Diego,CA)报道基因的对数生长的人HEK-Blue细胞添加至384孔板的各个孔(15,000个细胞/20μL/孔)中，并且在37℃、5％CO₂下维持24小时。次日，使用声学液体操作技术将测试化合物或DMSO分布至独立的孔(100nL/孔)，并且随后在37℃、5％CO₂下将细胞温育18小时。在将新鲜制备的Quanti-Blue试剂(通过以下制造商说明书制备；Invivogen,San Diego,CA)添加至HEK-Blue TLR Nf-kB-SEAP细胞反应中后30分钟，使用Envision读板仪器来测定细胞SEAP产生。使用专属数据分析软件确定所有EC₅₀值(半数最大有效浓度)。标准化EC₅₀值＝通过使用来自用50μM参考标准物处理的细胞的参考标准物RLU(相对光单位)值设定100％Ymax来确定的绝对值。

表1包括使用一种或多种上述操作分析的化合物的生物学数据。活性范围的关键：A＝≤1μM；B＝>1μM，≤20μM；C＝>20μM，≤100μM；D＝>100μM。

表1

已描述本发明的多个实施方案。尽管如此，应理解可以在不背离本发明的精神和范围的情况下进行多种修饰。因此，其它实施方案在以下权利要求的范围内。

Claims

1.式(I)化合物：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

独立地选自：

R¹在每次出现时独立地为：

(vi)H；

(vii)卤素；

(viii)X-R⁵，其中X为C_1-6亚烷基，并且R⁵为H、OH、氰基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷氧基、-C(O)OR^a、-NR^bR^c或-C(O)NR^bR^k；

(ix)被1至6个F取代的C_1-6烷基；

(x)被0至6个F取代的C_3-6环烷基；

(vi)(C_1-3亚烷基)-芳基，其中芳基被0至3个R^d取代；或

R^1a独立地为H、被0至6个F取代的C_1-6烷基或被0至6个F取代的C_3-6环烷基；

R²在每次出现时独立地为：

(i)H；

(ii)-Y-R⁶；

(iii)-C(O)-Y-R⁶；

其中：

·Y独立地为被0至4个R^e取代的C_1-8亚烷基；并且

(iv)-(Y¹)_n-Y²-(Y³)_p-R⁷，其中：

·n独立地为0、1或2；

·p独立地为0或1；

·Y¹和Y³各自独立地为被0至2个R^e取代的C_1-3亚烷基；

或

(v)-Z¹-Z²-Z³-R⁸，其中：

·Z¹为被0至6个F取代的C_1-3亚烷基；

·Z²为-N(R^f)-、-O-或-S-；

·Z³为被0至6个F取代的C_2-5亚烷基；并且

R^a在每次出现时独立地为：

(i)被0至3个R^e取代的C_1-6烷基；

(ii)-(C_0-3亚烷基)-C_3-6环烷基，其中环烷基被0至4个R^g取代；

(iv)-(C_0-3亚烷基)-(C_6-10芳基)，其中芳基被0至5个R^d取代；或

R^b在每次出现时独立地为H或R^a；

R^g在每次出现时独立地为氧代或R^d；

R^j和R^m在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

2.根据权利要求1的化合物，其中：

R³独立地为-(C_0-3亚烷基)-(5-元杂芳基)，其中杂芳基包含2至4个环碳原子并且1至3个各自独立地选自N、N(R^f)和S的环杂原子，并且被0至3个R^g取代；并且

3.根据权利要求1或权利要求2的化合物，其中该化合物具有式(IIa)、式(IIb)、式(IIc)、式(IId)、式(IIe)、式(IIf)、式(IIg)、式(IIh)或式(IIi)：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。

4.根据权利要求1-3任一项的化合物，其中：

R¹在每次出现时独立地选自H、卤素和C_1-4烷基；

R²在每次出现时独立地选自：H、被0至3个F取代的C_1-4烷基、-Y-R⁶、-(CH₂)_1-3O(CH₂)_2- ₃OR^a、-(CH₂)_0-2-Y²-R⁷和

Y独立地为被0至3个R^e取代的C_1-6亚烷基；

R⁴在每次出现时独立地选自H、卤素和C_1-4烷基；

-Y²-R⁷独立地选自被0至2个R^d取代的C_3-6环烷基、

R^a在每次出现时独立地为：

(i)被0至3个R^e取代的C_1-6烷基；

(ii)被0至2个R^g取代的C_3-6环烷基；

(iv)-(C_0-2亚烷基)-(C_6-10芳基)，其中芳基被0至3个R^d取代；或

R^b在每次出现时独立地为H或R^a；

R^g在每次出现时独立地为氧代或R^d；

R^h独立地为被0至2个Rⁿ取代的C_1-4烷基、C_3-6环烷基或苯基；

R^j独立地为H或C_1-4烷基；

R^k独立地选自H、C_1-4烷基和苯基；并且

5.根据权利要求1-4任一项的化合物，其中该化合物具有式(IIa)：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R¹独立地选自H、F和C_1-4烷基；

R⁴独立地选自H、卤素和C_1-4烷基；

-Y²-R⁷独立地选自被0至2个R^d取代的C_3-6环烷基、

苯基、苄基、

唑基、异

其中各环部分被0至3个R^d取代；

R^f在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^h独立地为C_1-4烷基或苯基；

R^j独立地为H或C_1-4烷基；

R^k独立地选自H、C_1-4烷基和苯基；并且

6.根据权利要求5的化合物，其中：

R¹为H；

R³独立地选自

R⁴独立地为H、F或Cl；

-Y²-R⁷独立地选自：被0至2个R^d取代的C_3-6环烷基、

苯基、苄基、

唑基、异

其中各环部分被0至3个R^d取代；

R^f在每次出现时独立地为H或C_1-4烷基；

R^k独立地选自H、C_1-4烷基和苯基；

7.根据权利要求5或权利要求6的化合物，其中：

R¹为H；

R³独立地为

R⁴独立地为H、F或Cl；

以及选自咪唑基、吡唑基、

唑基、异

唑基、噻唑基、

二唑基和吡啶基的杂芳基，其中杂芳基被0至2个R^d取代；

-Y²-R⁷独立地选自：被0至2个R^d取代的C_3-6环烷基、

苯基、

唑基、异

R^b独立地为H或C_1-2烷基；

R^e独立地选自F、OH和C_1-4烷氧基。

8.根据权利要求5-7任一项的化合物，其中该化合物具有式(IIIa-1)：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

和-(CH₂)_1-3-(杂芳基)，其中杂芳基选自咪唑基、吡唑基、

唑基、异

唑基、噻唑基、

二唑基和吡啶基，并且杂芳基被0至2个R^d取代；

R³独立地为

R^a独立地选自：C_3-6环烷基、

苯基、

R^e独立地选自F、OH和C_1-4烷氧基。

9.根据权利要求5-7任一项的化合物，其中该化合物具有式(IIIa)：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

唑基、异

唑基、噻唑基、

二唑基和吡啶基，并且杂芳基被0至2个R^d取代；

R^a独立地选自：

唑基、异

10.根据权利要求9的化合物，其中：

R^d在每次出现时独立地选自F、Cl、CH₃和OCH₃。

11.根据权利要求1-4任一项的化合物，其中该化合物具有式(IIIb-1)：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R³独立地为

R⁴独立地为H或F；

苯基或选自

唑基、异

R^e独立地选自F、OH和C_1-4烷氧基；并且

12.根据权利要求11的化合物，其中：

和-(CH₂)_1-2(杂芳基)，其中杂芳基选自咪唑基、吡唑基、

唑基、异

唑基、噻唑基、

二唑基、吡啶基和哒嗪基，并且杂芳基被0至2个R^d取代；

R^a独立地为被0至1个R^e取代的C_1-4烷基、

苯基或选自

13.根据权利要求11或权利要求12的化合物，其中：

R³独立地为

14.根据权利要求11-13任一项的化合物，其中该化合物具有式(IIIb-2)：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R²独立地选自H、被0至3个F取代的C_1-4烷基、-(CH₂)_2-4OH、-(CH₂)_2-4CN、-(CH₂)_1-2CH(CH₃)OH、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂OH、-CH₂CH(OH)CH₂OH、-CH₂CH(OH)(C_1-4烷基)、-CH(CH₃)(CH₂)_1-2OH、-CH₂CH(C_1-2烷基)(CH₂)_1-2OH、-CH₂CH(C_1-2烷氧基)(CH₂)_1-2OH、-(CH₂)_2-4O(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-CH₂C(CH₃)₂NH₂、-(CH₂)_1-3C(O)NH₂、-(CH₂)_1-2C(CH₃)₂CONH₂、-(CH₂)_1-2C(O)NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)(CH₂)_0-1C(O)NH(C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2C(O)N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)C(O)N(C_1-4烷基)₂、-(CH₂)_1-2C(O)NH(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-(CH₂)_1-2C(O)N(CH₃)(被0至2个R^e取代的C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)NHC(O)(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3S(O)₂(C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)S(O)₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-CH₂CH(CH₃)NHS(O)₂(C_1-4烷基)、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(C_3-6环烷基)、

并且

R^e独立地选自F、OH和C_1-4烷氧基。

15.根据权利要求14的化合物，其中：

R²独立地选自H、-CH₂CHF₂、-(CH₂)_2-4OH、-(CH₂)_2-4CN、-CH₂CH(CH₃)OH、-CH₂C(CH₃)₂OH、-CH₂CH(OH)CH₂OH、-CH₂CH(OH)CH₂CH₃、-CH(CH₃)(CH₂)₂OH、-CH₂CH(CH₃)CH₂OH、-CH₂CH(OCH₃)CH₂OH、-(CH₂)₂O(CH₂)₂OH、-(CH₂)₂O(CH₂)₂OCH₃、-CH₂C(CH₃)₂NH₂、-(CH₂)_1-3C(O)NH₂、-CH₂C(CH₃)₂CONH₂、-(CH₂)_1-2C(O)NH(CH₃)、-(CH₂)_1-2C(O)NH(CH₂CH₃)、-(CH₂)_1-2C(O)NH(CH(CH₃)₂)、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)(CH₂)_0-1C(O)NH(CH₃)、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)C(O)NH(CH(CH₃)₂)、-(CH₂)_1-2C(O)N(CH₃)₂、-(CH₂)_0-1CH(CH₃)C(O)N(CH₃)₂、-CH₂C(O)NH(CH₂CHF₂)、-CH(CH₃)C(O)NH(CH₂CHF₂)、-C(CH₃)₂C(O)NH(CH₂CHF₂)、-(CH₂)_1-2C(O)NH(CH₂)₂OH、-CH(CH₃)C(O)NH(CH₂)_2-3OH、-(CH₂)_1-2C(O)NH(C(CH₃)₂CH₂OH)、-(CH₂)_1-2C(O)NH(CH₂)₂OCH₃、-(CH₂)_1-2C(O)N(CH₃)(CH₂)₂OCH₃、-CH₂CH(CH₃)NHC(O)(CH₃)、-(CH₂)_2-3S(O)₂CH₃、-(CH₂)_2-3S(O)₂CH₂CH₃、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂CH₃、-CH₂CH(CH₃)NHS(O)₂CH₃、-(CH₂)_2-3NHS(O)₂(环丙基)、

16.根据权利要求1-4任一项的化合物，其中该化合物具有式(IIIf)：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R^a独立地选自：被0至2个F取代的C_1-4烷基、

17.根据权利要求1-4任一项的化合物，其中该化合物具有式(IIIg-1)：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R¹独立地为H、Cl或C_1-4烷基；

R^1a独立地为H或C_1-4烷基；

R³独立地为

R^a独立地选自：被0至2个F取代的C_1-4烷基、

以及选自噻唑基、

R^e独立地选自F、OH、C_1-4烷氧基和C_1-4卤代烷基。

18.根据权利要求17的化合物，其中该化合物具有式(IIIg)：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R^a独立地选自：被0至2个F取代的C_1-4烷基、

R^e独立地选自F、OH、OCH₃、CHF₂和CF₃。

19.根据权利要求1-4任一项的化合物，其中该化合物具有式(IIIh)：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

并且

R³独立地为

20.根据权利要求1-4任一项的化合物，其中该化合物具有式(IIIi)：

或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：

R^a独立地为C_3-6环烷基、

苯基或选自

唑基、异

21.根据权利要求1的化合物，其中该化合物选自实施例1至624，或其药学上可接受的盐。

22.药物组合物，其包含根据权利要求1至21任一项的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。

23.根据权利要求1至21任一项的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求22的药物组合物，其用作药物。

24.根据权利要求1至21任一项的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求22的药物组合物，其用于治疗癌症。

25.根据权利要求24的用于应用的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物，其中癌症选自急性髓性白血病、肾上腺皮质癌、卡波西氏肉瘤、淋巴瘤、肛门癌、阑尾癌、畸胎样/横纹肌样肿瘤、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑癌、乳腺癌、支气管肿瘤、类癌肿瘤、心脏肿瘤、宫颈癌、脊索瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性骨髓增生性肿瘤、结肠癌、结肠直肠癌、颅咽管瘤、胆管癌、子宫内膜癌、室管膜瘤、食管癌、成感觉神经细胞瘤、尤因肉瘤、眼癌、输卵管癌、胆囊癌、胃肠道类癌肿瘤、胃肠道基质肿瘤、胚细胞肿瘤、多毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝癌、下咽癌、胰腺癌、肾癌、喉癌、慢性髓性白血病、唇和口腔癌、肺癌、黑素瘤、梅克尔细胞癌、间皮瘤、口腔癌、口癌、骨肉瘤、卵巢癌、阴茎癌、咽癌、前列腺癌、直肠癌、唾液腺癌、皮肤癌、小肠癌、软组织肉瘤、睾丸癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、阴道癌和外阴癌。

26.根据权利要求24的用于应用的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物，其中癌症选自乳腺癌、结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、胰腺癌和前列腺癌。

27.根据权利要求24的用于应用的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物，其中癌症选自激素受体阳性乳腺癌、微卫星稳定结肠或直肠癌、胰腺癌和前列腺癌。

28.根据权利要求23至27任一项的用于应用的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物，其中该化合物与一种或多种另外的癌症疗法组合施用。

29.根据权利要求28的用于应用的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物，其中一种或多种另外的癌症疗法包括手术、放射疗法、化学疗法、毒素疗法、免疫疗法、冷冻疗法或基因疗法或其组合。

30.根据权利要求28的用于应用的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物，其中另外的癌症疗法包括一种或多种选自以下的活性剂：纳武单抗、派姆单抗、PDR001、MEDI-0680、西米匹单抗、JS001、BGB-A317、INCSHR1210、TSR-042、GLS-010、AM-0001、STI-1110、AGEN2034、MGD013、IBI308、BMS-936559、阿特珠单抗、德瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、STI-1014、CX-072、LY3300054、CK-301、优瑞路单抗、PF-05082566、MEDI6469、TRX518、瓦里路单抗、CP-870893、BMS-986016、MGA271、利瑞路单抗、IPH2201、埃玛图单抗、INCB024360、高伦替布、尤洛库单抗、BKT140、巴维昔单抗、CC-90002、贝伐珠单抗、MNRP1685A、伊匹木单抗、MK-1308、AGEN-1884和曲美木单抗。

31.根据权利要求28的用于应用的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物，其中另外的癌症疗法包括一种或多种选自以下的活性剂：纳武单抗、伊匹木单抗、派姆单抗、阿特珠单抗、德瓦鲁单抗和阿维鲁单抗。