CN112029821A - 一种血脂测试卡及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种血脂三项测试卡，包括上盖（100）、血脂检测试纸（200）和底座（300）；所述的上盖（100）有一个加样孔（101）；所述的底座（300）设有三个检测孔，分别为对应血脂检测试纸的三个模块的第一检测孔（301a）、第二检测孔（301b）和第三检测孔（301c）；所述的血脂检测试纸的组件从上往下依次包括过滤层（201）、扩散层（202）、滤血层（203）、截留层（204）和反应层（205）；本发明操作便捷、抗干扰能力强的可检测人体血液中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇。

Description

一种血脂测试卡及其应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，具体地说涉及一种血脂测试卡及其应用。
背景技术
血脂是血浆中的中性脂肪（甘油三酯）和类脂（磷脂、糖脂、固醇、类固醇）的总称，广泛存在于人体中。血脂中的主要成分是甘油三酯和胆固醇，其中甘油三酯参与人体内能量代谢，而胆固醇则主要用于合成细胞浆膜、类固醇激素和胆汁酸。
血浆脂类不溶于水或微溶于水，因此脂类均以溶解度较大的脂蛋白复合物形式在血液循环中运输。脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白（Apo），载脂蛋白种类很多，一般分为5-7类。高密度脂蛋白的蛋白质部分apoA1约为75%，apoA2约为20%。低密度脂蛋白把胆固醇从肝脏运送到全身组织，高密度脂蛋白将各组织的胆固醇送回肝脏代谢。在血清中，内源性甘油三酯主要以极低密度脂蛋白的形式运输，外源性甘油三酯主要以乳糜微粒的形式运输。
通过测定血清中的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇的水平，不仅对于高脂血症的诊断及冠心病的危险评估和防治具有重要意义，而且已经应用于其他临床相关疾病的研究。
目前检测血脂的方法有很多，主要有化学法和酶法。其中化学法需要抽提纯化步骤，操作繁琐，目前临床上应用最广泛的是酶法测定，液体酶法测定一般配套大型生化分析仪使用，适合大型医院或检验中心使用，无法满足基层社区医院或家庭检测的应用需求。
目前基础医院或家用。上述检测方法还存在抗干扰能力差的问题，或者结构中三个项目组件没有完全分开，会随着样本的流动而导致三个测试结果相互干扰，或者因样本中含有的大量还原型物质如抗坏血酸等与中间产物过氧化氢发生反应，导致检测结果严重偏低。
发明内容
本发明针对现有技术的上述不足，提供一种操作便捷、抗干扰能力强的可检测人体血液中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇的血脂测试卡及其应用。
本发明的技术解决方案如下：一种血脂三项测试卡，包括上盖、血脂检测试纸和底座；所述的上盖有一个加样孔；所述的底座设有三个检测孔，分别为对应血脂检测试纸的三个模块的第一检测孔、第二检测孔和第三检测孔；所述的血脂检测试纸的组件从上往下依次包括过滤层、扩散层、滤血层、截留层和反应层；所述的滤血层包括第一滤血膜、第二滤血膜、第三滤血膜，其中第三滤血膜经过胆固醇选择性沉淀剂浸泡并干燥处理；所述的截留层包括经过截留处理液浸泡并干燥处理的第一非对称膜、第二非对称膜、第三非对称膜；所述的反应层包括经过反应液浸泡并干燥处理的第一对称膜、第二对称膜、第三对称膜。
所述第一检测孔、第二检测孔和第三检测孔分别对应血脂检测试纸的总胆固醇检测模块、甘油三酯检测模块、高密度脂蛋白胆固醇检测模块。
所述过滤层、扩散层、滤血层、截留层和反应层通过PET双面胶粘贴结合。
采用上述结构，本发明的反应原理为：血液样本从位于正中间的加样孔加入后，液体迅速下渗并往两边扩散。因过滤层为网布，孔径较大，无法完全将样本扩散至过滤层的所有区域。当血液穿过过滤层到达扩散层时，由于扩散层为薄纸，其孔径更密，在薄纸的纸层析作用下，血液均匀扩散至扩散层的所有区域，从而完成样本的均匀分布。血液从扩散层继续下渗到滤血层，血液中的红细胞被滤血层吸附，其中滤血层中的胆固醇选择性沉淀剂与高密度脂蛋白胆固醇（主要为与apoA结合的胆固醇）以外的其他脂蛋白胆固醇（主要为与apoB结合的胆固醇）发生沉淀反应，使含apoB的胆固醇聚集沉淀并被滤血层阻挡。血液透过滤血层流到下层材料截留层的为不含红细胞的血浆，由于截留层为非对称膜，靠近反应层的孔径较小，随着血浆的下渗，血浆中从滤血层泄露的白细胞、apoB沉淀物等大颗粒被截留阻挡在截留层处，到达反应层处的皆为不含大颗粒物质的血浆成分，血浆中的干扰物质抗坏血酸在抗坏血酸氧化酶的催化下被氧化，生成对氧化反应无干扰的物质。由于扩散层以下的各组分为三个独立模块，且各模块中间有PET双面胶阻挡，所以到达三个检测孔对应的三个反应层的血浆成本也不相同。到达反应层的血浆中含有所有类型的胆固醇，血浆中的胆固醇酯在胆固醇酯酶的催化下生成胆固醇，胆固醇在胆固醇氧化酶催化下生成△4-胆甾烯酮和过氧化氢，过氧化氢、4-氨基安替比林和Trinder’s发色底物在过氧化物酶的催化下反应产生有颜色的化合物；到达反应层的血浆中的甘油三酯在，脂蛋白酯酶的催化下生成甘油，甘油在甘油激酶的催化下生成三磷酸甘油，三磷酸甘油在甘油磷酸氧化酶催化下生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，过氧化氢、4-氨基安替比林和Trinder’s发色底物在过氧化物酶的催化下反应产生有颜色的化合物；到达反应层的血浆中只含有与apoA结合的胆固醇，同样在胆固醇催化酶类催化下生成△4-胆甾烯酮和过氧化氢，过氧化氢、4-氨基安替比林和Trinder’s发色底物在过氧化物酶的催化下反应产生有颜色的化合物。对检测孔位置对应的反应层进行特定波长光线的反射率测试，然后进行拟合计算，最后得到血液中总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇的浓度值。
所述的过滤层为纱网，纱网的网孔密度为100-1000目，其作用为过滤血液样本中大颗粒杂质、保护其余组件免遭机械损坏。
所述的扩散层为经过表面活性剂处理的滤纸，所述滤纸的克重为15-30g/m2；所述的表面活性剂为吐温20，所述吐温20的浓度为0.5g/L~10g/L；所述的扩散层用于将加样孔中加入的血液在表面张力的作用下均匀地分散到扩散层的所有区域。
所述的胆固醇选择性沉淀剂为磷钨酸、硫酸葡聚糖、肝素、聚乙二醇中一种或几种，优选硫酸葡聚糖作为沉淀剂，硫酸葡聚糖的分子量优选1000-50000g/mol，硫酸葡聚糖的浓度优选5-50g/L。所述的滤血层的作用为吸附红细胞、沉淀聚集含有apoB的胆固醇，即除了高密度脂蛋白胆固醇以外的脂蛋白胆固醇。
所述的非对称膜为孔径为0.2μm的上面孔径大、下面孔径小的多孔膜。所述的截留层的作用为截留血液中的细胞、颗粒性物质。
所述的反应层包括经过反应液浸泡并干燥处理的第一对称膜、第二对称膜、第三对称膜，其中第一对称膜用胆固醇反应处理液浸泡并干燥处理、第二对称膜用甘油三酯反应处理液浸泡并干燥处理、第三对称膜用胆固醇反应处理液浸泡并干燥处理；所述的对称膜为孔径为0.4-2μm的两面孔径大小相同的多孔膜。它们的作用为固定反应试剂、为化学反应提供载体、反射检测光到血脂分析仪。
所述的截留处理液包括缓冲液、保护剂；所述的缓冲液为三羟甲基氨基甲烷、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、2-吗啉代乙磺酸、3-(N-吗啉基)丙磺酸中的一种，缓冲液pH值优选pH5.0-8.0，浓度优选20mmol/L~200mmol/L；所述的保护剂为浓度10g/L~100g/L的山梨醇或聚乙烯醇中的一种或几种。
所述的胆固醇反应处理液包括胆固醇催化酶类、过氧化物酶、抗干扰剂、缓冲液、显色剂、保护剂、表面活性；所述的甘油三酯反应处理液包括甘油三酯催化酶类、过氧化物酶、抗干扰剂、缓冲液、显色剂、保护剂、表面活性。
所述的胆固醇催化酶类为胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶，其中胆固醇酯酶的浓度优选100-1000KU/L，胆固醇酯酶的浓度优选20-500KU/L。所述的甘油三酯催化酶类为脂蛋白酯酶、甘油激酶和甘油磷酸氧化酶，其中脂蛋白酯酶的浓度优选100-1000KU/L，甘油激酶的浓度优选100-1000KU/L，甘油磷酸氧化酶的浓度优选100-1000KU/L。所述的过氧化物酶的浓度优选100-1000KU/L。所述的抗干扰剂为抗坏血酸氧化酶，处理液中抗坏血酸氧化酶的浓度为200-1000KU/L；所述的缓冲液为三羟甲基氨基甲烷、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、2吗啉代乙磺酸、3-(N-吗啉基)丙磺酸中的一种，缓冲液pH值优选pH5.0-8.0，浓度优选20mmol/L~200mmol/L；所述的显色剂为4-氨基安替比林和发色底物，所述的发色底物为Trinder’s发色底物中的一种，处理液中4-氨基安替比林的浓度优选2g/L~50g/L，Trinder’s发色底物的浓度优选2g/L~50g/L；所述的保护剂优选蔗糖或海藻糖或聚乙烯醇中的一种或几种，浓度优选10g/L~100g/L；所述的表面活性剂优选吐温20，处理液中吐温20的浓度优选0.5g/L~10g/L。
本发明还提供一种上述血脂测试卡在测定人血液中总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇的应用。
本发明的有益效果是：
1. 本发明的血脂测试卡中，只需将血液样本从位于正中间的加样孔加入后，血液下渗到扩散层后，由于扩散层的纸纤维内有大量的毛细孔，血液样本在表面张力的作用迅速充满纸纤维间隙，将血液均匀分布至扩散层的所有区域，从而实现一次加样并完成样本的均匀分布，提高了操作便捷性和检测均一性。
2. 本发明的血脂测试卡中，三个检测孔分别对应血脂检测试纸的三个模块，即依次为总胆固醇模块、甘油三酯模块、高密度脂蛋白胆固醇模块，因检测总胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇所采用的反应原理相同，特将甘油三酯模块设置在二者中间，避免了二者结果的相互影响。更进一步地，由于扩散层以下的各组分为三个独立模块，且各模块中间有PET双面胶阻挡，从而进一步避免了血液流经三个模块发生反应所产生的物质的相互影响，提高了检测的特异性。
3. 本发明的血脂测试卡中，截留层为非对称膜，靠近反应层的孔径较小，随着血浆的下渗，血浆中从滤血层泄露的白细胞、apoB沉淀物等粒径大于0.2μm的大颗粒被截留阻挡在截留层处，到达反应层处的皆为经过截留层过滤后的血浆成分，因此避免了大颗粒物质对反应层显色均一性的影响。
4. 本发明的血脂测试卡中，反应层中含有抗坏血酸氧化酶，血浆中的干扰物质抗坏血酸在抗坏血酸氧化酶的催化下被氧化，生成对氧化反应无干扰的物质，从而降低了抗坏血酸的干扰。
5.本发明的血脂测试卡适用于测定人血液中总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇的含量。
附图说明
图1为本发明的血脂测试卡外部结构示意图。
图2为本发明的血脂测试卡内部结构示意图。
图3为本发明的血脂检测试纸结构示意图。
图4为本发明血脂测试卡与生化试剂测试结果的相关性图。
具体实施方式
下面用具体实施例对本发明做进一步详细说明，但本发明不仅局限于以下具体实施例。
如附图1和图2所示，为本发明的血脂测试卡，具体的结构包括：上盖100、血脂检测试纸200和底座300；所述的上盖100有一个加样孔101；所述的底座300设有三个检测孔，分别为对应血脂检测试纸的三个模块的第一检测孔301a、第二检测孔301b和第三检测孔301c；所述的血脂检测试纸的组件从上往下依次包括过滤层201、扩散层202、滤血层203、截留层204和反应层205；所述的滤血层203包括第一滤血膜203a、第二滤血膜203b、第三滤血膜203c，其中第三滤血膜203c经过胆固醇选择性沉淀剂浸泡并干燥处理；所述的截留层204包括经过截留处理液浸泡并干燥处理的第一非对称膜204a、第二非对称膜204b、第三非对称膜204c；所述的反应层205包括经过反应液浸泡并干燥处理的第一对称膜205a、第二对称膜205b、第三对称膜205c。
所述第一检测孔301a、第二检测孔301b和第三检测孔301c分别对应血脂检测试纸的总胆固醇检测模块、甘油三酯检测模块、高密度脂蛋白胆固醇检测模块。
所述过滤层201、扩散层202、滤血层203、截留层204和反应层205通过PET双面胶206粘贴结合。
为了表述方便，以下表述中，滤血层203a、203b、203c分别代表第一滤血膜203a、第二滤血膜203b、第三滤血膜203c；截留层204a、204b、204c分别代表第一非对称膜204a、第二非对称膜204b、第三非对称膜204c；反应层205a、205b、205c分别代表第一对称膜205a、第二对称膜205b、第三对称膜205c。
所述的过滤层201的长度等于三个滤血层203a、203b、203c和四个PET双面胶206的长度之和；所述的扩散层202的长度小于过滤层201的长度，但大于三个滤血层203a、203b、203c和中间两个PET双面胶206的长度之和；所述的三个滤血层203a、203b、203c的长度和宽度完全相同；所述的三个截留层204a、204b、204c的长度和宽度完全相同；所述的三个反应层205a、205b、205c的长度和宽度完全相同；所述的每个截留层和反应层的大小完全相同，且每个截留层或反应层的长度大于每个滤血层的长度，并小于一个滤血层和一个PET双面胶的长度之和；所述的四个PET双面胶的长度和宽度完全相同；上述组件的宽度完全相同。
具体地，所述的血脂检测试纸200组装方法为：所述的三个截留层204a、204b、204c和三个反应层205a、205b、205c分别按模块相互重叠在一起，即截留层204a和反应层205a重叠在一起，截留层204b和反应层205b重叠在一起，截留层204c和反应层205c重叠在一起，所述的截留层孔径较小的一面与反应层重叠，所述的重叠后的截留层和反应层通过裁刀裁切成规定尺寸，裁切后截留层和反应膜的两侧因裁切挤压而粘合成三个截留层/反应中间体；所述的三个滤血层203a、203b、203c依次排列，中间和两侧分别通过四个PET双面胶的横切侧面粘贴在一起称为滤血层中间体；所述的截留层/反应层中间体依次排列与上述滤血层/PET双面胶中间体的下侧黏贴在一起，保持三个截留层/反应层中间体之间留有宽度一致的间隙；所述的扩散层202粘贴在上述滤血层/PET双面胶中间体的上侧，保持扩散层202的两端各露出相同宽度的PET双面胶；所述的过滤层201粘贴在扩散层202的上测，通过扩散层202两端裸露的PET双面胶粘贴在滤血层/PET双面胶中间体上，完成组装。
具体地，所述的血脂测试卡的组装方法为：所述的血脂检测试纸200裁切成适合的尺寸，将血脂检测试纸200有过滤层201的一面朝上放置于底座300内血脂检测试纸200固定处，盖上上盖100，完成组装。
实施例1：
本实施例提供了一种血脂测试卡的制备方法，按照下述方法制备而成。
（1）扩散层的制备：
扩散层处理液的制备：量取100mL纯化水，分别加入以下物质并搅拌混合均匀：0.2g 吐温20。
扩散层处理：将茶叶滤纸（上海凯宁纸业：RF17）裁切成100 mm×200mm，放入上述处理液中浸泡5分钟，取出，沥干残余液体，水平放置于烘箱中45℃干燥1小时，取出备用。
（2）HDL滤血层的制备
HDL沉淀剂处理液的制备：量取100mL纯化水，分别加入以下物质并搅拌混合均匀：1.0g硫酸葡聚糖2000。
HDL滤血层处理：将滤血膜（上海杰一生物XQ-Y5）裁切成100mm×200mm，放入上述处理液中浸泡5分钟，取出，沥干残余液体，水平放置于烘箱中45℃干燥1小时，取出备用。
（3）截留层制备：
截留处理液配制：量取100mL纯化水，分别加入以下物质并搅拌混合均匀：0.24g 三羟甲基氨基甲烷、4g山梨醇，用盐酸调节pH值到6.0。
截留层处理：将非对称膜（赛多利斯，聚醚砜PES膜15400）裁切成100 mm×200mm，放入上述处理液中浸泡5分钟，取出，沥干残余液体，水平放置于烘箱中45℃干燥1小时，取出备用。
（4）反应层制备：
胆固醇反应处理液配制：量取100mL纯化水，分别加入以下物质并搅拌混合均匀：0.24g三羟甲基氨基甲烷、0.2g吐温20、3g蔗糖、40KU胆固醇酯酶、10KU胆固醇氧化酶、40KU过氧化物酶、60KU抗坏血酸氧化酶、1.0g 4-氨基安替比林、1.0g N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐，用盐酸调节pH值到7.0。
甘油三酯反应处理液配制：量取100mL纯化水，分别加入以下物质并搅拌混合均匀：0.24g三羟甲基氨基甲烷、0.2g吐温20、3g蔗糖、40KU脂蛋白酯酶、50KU甘油激酶、50KU甘油磷酸氧化酶、40KU过氧化物酶、60KU抗坏血酸氧化酶、1.0g 4-氨基安替比林、1.0g N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐，用盐酸调节pH值到7.0。
反应层处理：将多孔膜（Pall PVDF膜66543）裁切成100 mm×200mm，放入上述处理液中浸泡5分钟，取出，沥干残余液体，水平放置于烘箱中45℃干燥1小时，取出备用。
（5）装配：
将过滤层（上海上筛丝网：高张力丝印网纱SS-PET165/25）裁切成5 mm×200mm；
将截留层204a和反应层205a重叠在一起，截留层204b和反应层205b重叠在一起，截留层204c和反应层205c重叠在一起，截留层孔径较小的一面与反应层重叠，重叠后的截留层和反应层通过裁刀裁切成5 mm×200mm，裁切后截留层和反应膜的两侧因裁切挤压而粘合成三个截留层/反应中间体。
将扩散层、滤血层、截留层、反应层分别裁切成5 mm×200mm。
按照附图3所示的结构：将三个滤血层203a、203b、203c依次排列，中间和两侧分别通过四个PET双面胶的横切侧面粘贴在一起称为滤血层中间体；截留层/反应层中间体依次排列与上述滤血层/PET双面胶中间体的下侧黏贴在一起，保持三个截留层/反应层中间体之间留有宽度一致的间隙；扩散层202粘贴在上述滤血层/PET双面胶中间体的上侧，保持扩散层202的两端各露出相同宽度的PET双面胶；过滤层201粘贴在扩散层202的上测，通过扩散层202两端裸露的PET双面胶粘贴在滤血层/PET双面胶中间体上，完成血脂检测试纸半成品组装。按照附图2所示的结构：将血脂检测试纸半成品裁切成5mm宽的血脂检测试纸200，将血脂检测试纸200有过滤层201的一面朝上放置于底座300内血脂检测试纸200固定处，盖上上盖100，完成组装。
实施例2：
本实施例提供了一种血脂测试卡的制备方法，按照下述方法制备而成。
（1）扩散层的制备：
扩散层处理液的制备：量取100mL纯化水，分别加入以下物质并搅拌混合均匀：0.2g 吐温20。
扩散层处理：将茶叶滤纸（上海凯宁纸业：RF17）裁切成100 mm×200mm，放入上述处理液中浸泡5分钟，取出，沥干残余液体，水平放置于烘箱中45℃干燥1小时，取出备用。
（2）HDL滤血层的制备
HDL沉淀剂处理液的制备：量取100mL纯化水，分别加入以下物质并搅拌混合均匀：1.0g硫酸葡聚糖10000。
HDL滤血层处理：将滤血膜（上海杰一生物XQ-Y5）裁切成100mm×200mm，放入上述处理液中浸泡5分钟，取出，沥干残余液体，水平放置于烘箱中45℃干燥1小时，取出备用。
（3）截留层制备：
截留处理液配制：量取100mL纯化水，分别加入以下物质并搅拌混合均匀：0.44g 4-羟乙基哌嗪乙磺酸、5g聚乙烯醇40，用盐酸调节pH值到6.0。
截留层处理：将非对称膜（赛多利斯，聚醚砜PES膜15400）裁切成100 mm×200mm，放入上述处理液中浸泡5分钟，取出，沥干残余液体，水平放置于烘箱中45℃干燥1小时，取出备用。
（4）反应层制备：
胆固醇反应处理液配制：量取100mL纯化水，分别加入以下物质并搅拌混合均匀：0.44g4-羟乙基哌嗪乙磺酸、0.2g吐温20、3g蔗糖、10KU胆固醇酯酶、10KU胆固醇氧化酶、40KU过氧化物酶、60KU抗坏血酸氧化酶、1.0g 4-氨基安替比林、1.0g N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐，用盐酸调节pH值到7.0。
甘油三酯反应处理液配制：量取100mL纯化水，分别加入以下物质并搅拌混合均匀：0.44g 4-羟乙基哌嗪乙磺酸、0.5g吐温20、5g蔗糖、30KU脂蛋白酯酶、30KU甘油激酶、30KU甘油磷酸氧化酶、20KU过氧化物酶、40KU抗坏血酸氧化酶、1.0g 4-氨基安替比林、1.0gN-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐，用盐酸调节pH值到7.0。
反应层处理：将多孔膜（Pall PVDF膜66543）裁切成100 mm×200mm，放入上述处理液中浸泡5分钟，取出，沥干残余液体，水平放置于烘箱中45℃干燥1小时，取出备用。
（5）装配：
将过滤层（上海上筛丝网：高张力丝印网纱SS-PET165/25）裁切成5 mm×200mm；
将截留层204a和反应层205a重叠在一起，截留层204b和反应层205b重叠在一起，截留层204c和反应层205c重叠在一起，截留层孔径较小的一面与反应层重叠，重叠后的截留层和反应层通过裁刀裁切成5 mm×200mm，裁切后截留层和反应膜的两侧因裁切挤压而粘合成三个截留层/反应中间体。
将扩散层、滤血层、截留层、反应层分别裁切成5 mm×200mm。
按照附图3所示的结构：将三个滤血层203a、203b、203c依次排列，中间和两侧分别通过四个PET双面胶的横切侧面粘贴在一起称为滤血层中间体；截留层/反应层中间体依次排列与上述滤血层/PET双面胶中间体的下侧黏贴在一起，保持三个截留层/反应层中间体之间留有宽度一致的间隙；扩散层202粘贴在上述滤血层/PET双面胶中间体的上侧，保持扩散层202的两端各露出相同宽度的PET双面胶；过滤层201粘贴在扩散层202的上测，通过扩散层202两端裸露的PET双面胶粘贴在滤血层/PET双面胶中间体上，完成血脂检测试纸半成品组装。按照附图2所示的结构：将血脂检测试纸半成品裁切成5mm宽的血脂检测试纸200，将血脂检测试纸200有过滤层201的一面朝上放置于底座300内血脂检测试纸200固定处，盖上上盖100，完成组装。
实施例3：
血脂测试卡的抗干扰性评价。
将不同浓度的抗坏血酸按照1/20的比例添加到血液样本中，得到含系列浓度抗坏血酸的样本，经实施例1和实施例2血脂测试卡检测，结果见表1和表2.
Figure DEST_PATH_IMAGE001
Figure 843929DEST_PATH_IMAGE002
200mg/L的抗坏血酸对本发明血脂测试卡的干扰率在10%以内，显示了良好的抗干扰能力。
实施例4：
血脂测试卡的临床样本相关性评价。
取76份临床样本，分别通过生化试剂和本发明实施例1和实施例2血脂测试卡检测，结果见图4（本发明血脂测试卡与生化试剂测试结果的相关性图），实施例1和实施例2的检测结果与生化试剂的相关系数R2均高于0.985。
通过上述实施例可知，本申请的测试卡可以实现对人体血液中胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇的检测，且抗干扰能力强、准确性好。
以上仅是本发明的特征实施范例，对本发明保护范围不构成任何限制。凡采用同等交换或者等效替换而形成的技术方案，均落在本发明权利保护范围之内。

Claims (10)

1.一种血脂三项测试卡，其特征在于：包括上盖（100）、血脂检测试纸（200）和底座（300）；所述的上盖（100）有一个加样孔（101）；所述的底座（300）设有三个检测孔，分别为对应血脂检测试纸的三个模块的第一检测孔（301a）、第二检测孔（301b）和第三检测孔（301c）；所述的血脂检测试纸的组件从上往下依次包括过滤层（201）、扩散层（202）、滤血层（203）、截留层（204）和反应层（205）；所述的滤血层（203）包括第一滤血膜（203a）、第二滤血膜（203b）、第三滤血膜（203c），其中第三滤血膜（203c）经过胆固醇选择性沉淀剂浸泡并干燥处理；所述的截留层（204）包括经过截留处理液浸泡并干燥处理的第一非对称膜（204a）、第二非对称膜（204b）、第三非对称膜（204c）；所述的反应层（205）包括经过反应液浸泡并干燥处理的第一对称膜（205a）、第二对称膜（205b）、第三对称膜（205c）。
2.根据权利要求1所述的血脂三项测试卡，其特征在于：所述第一检测孔（301a）、第二检测孔（301b）和第三检测孔（301c）分别对应血脂检测试纸的总胆固醇检测模块、甘油三酯检测模块、高密度脂蛋白胆固醇检测模块；所述过滤层（201）、扩散层（202）、滤血层（203）、截留层（204）和反应层（205）通过PET双面胶（206）粘贴结合。
3.根据权利要求1所述的血脂三项测试卡，其特征在于：所述的过滤层（201）为纱网，纱网的网孔密度为100-1000目。
4.根据权利要求1所述的血脂三项测试卡，其特征在于：所述的扩散层（202）为经过表面活性剂处理的滤纸，所述滤纸的克重为15-30g/m2；所述的表面活性剂为吐温20，所述吐温20的浓度为0.5g/L~10g/L。
5.根据权利要求1所述的血脂三项测试卡，其特征在于：所述的胆固醇选择性沉淀剂为磷钨酸、硫酸葡聚糖、肝素、聚乙二醇中一种或几种。
6.根据权利要求1所述的血脂三项测试卡，其特征在于：所述的反应层（205）包括经过反应液浸泡并干燥处理的第一对称膜（205a）、第二对称膜（205b）、第三对称膜（205c），其中第一对称膜（205a）用胆固醇反应处理液浸泡并干燥处理、第二对称膜（205b）用甘油三酯反应处理液浸泡并干燥处理、第三对称膜（205c）用胆固醇反应处理液浸泡并干燥处理；所述的对称膜为孔径为0.4-2μm的两面孔径大小相同的多孔膜。
7.根据权利要求1所述的血脂三项测试卡，其特征在于：所述的截留处理液包括缓冲液、保护剂；所述的缓冲液为三羟甲基氨基甲烷、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、2-吗啉代乙磺酸、3-(N-吗啉基)丙磺酸中的一种，缓冲液pH值pH5.0-8.0，浓度20mmol/L~200mmol/L；所述的保护剂为浓度10g/L~100g/L的山梨醇或聚乙烯醇中的一种或几种。
8.根据权利要求1所述的血脂三项测试卡，其特征在于：所述的胆固醇反应处理液包括胆固醇催化酶类、过氧化物酶、抗干扰剂、缓冲液、显色剂、保护剂、表面活性；所述的甘油三酯反应处理液包括甘油三酯催化酶类、过氧化物酶、抗干扰剂、缓冲液、显色剂、保护剂、表面活性。
9.根据权利要求8所述的血脂三项测试卡，其特征在于：所述的胆固醇催化酶类为胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶，其中胆固醇酯酶的浓度为100-1000KU/L；所述的甘油三酯催化酶类为脂蛋白酯酶、甘油激酶和甘油磷酸氧化酶中的一种或多种；所述的抗干扰剂为抗坏血酸氧化酶，浓度为200-1000KU/L；所述的缓冲液为三羟甲基氨基甲烷、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、2吗啉代乙磺酸、3-(N-吗啉基)丙磺酸中的一种，缓冲液pH值pH5.0-8.0，浓度20mmol/L~200mmol/L；所述的显色剂为4-氨基安替比林和发色底物，所述的发色底物为Trinder’s发色底物中的一种，处理液中4-氨基安替比林的浓度为2g/L~50g/L，Trinder’s发色底物的浓度为2g/L~50g/L；所述的保护剂为蔗糖或海藻糖或聚乙烯醇中的一种或几种，浓度10g/L~100g/L。
10.一种权利要求1-9中任意项所述血脂测试卡的应用，其特征在于，在测定人血液中总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇的应用。
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