CN112022765A - 一种火龙果提取液的制备方法及由其制备得到的火龙果提取液和应用 - Google Patents
一种火龙果提取液的制备方法及由其制备得到的火龙果提取液和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供一种火龙果提取液的制备方法及由其制备得到的火龙果提取液和应用。所述火龙果提取液的制备方法具体包括以下步骤：(1)将火龙果肉与水混合，进行压榨和过滤，并采用离子交换树脂柱进行脱色，得到脱色火龙果压榨液；(2)将步骤(1)得到的部分脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，在厌氧条件下发酵，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，厌氧条件下发酵，得到火龙果发酵液二；(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，得到火龙果提取液。本发明所述方法没有破坏火龙果原有的营养物质，制备得到的火龙果提取液生物活性高。
Description
技术领域
本发明属于水果深加工领域，具体涉及一种火龙果提取液的制备方法及由其制备得到的火龙果提取液和应用。
背景技术
火龙果是仙人掌科三角柱属或蛇鞭柱属植物果实，呈椭圆形，外观为红色或黄色，有绿色圆角三角形的叶状体，白色、红色或黄色果肉，具有黑色种子的水果。火龙果营养丰富、功能独特，它含有一般植物少有的植物性白蛋白以及花青素，丰富的多糖、维生素、水溶性膳食纤维；火龙果中含糖量较高，并具有高折光率的多糖，涂在皮肤上能让肌肤整体提亮，防止皮肤暗淡消沉，并能起到一定的防晒作用；火龙果中的花青素含量较高，是一种效用明显的抗氧化剂，抗氧化、抗自由基、抗衰老、抗辐射的作用，能够增进皮肤的光滑度，美颜肌肤，抑制炎症和过敏；火龙果含有丰富的维生素C，可以消除氧自由基，有很好的美颜美白皮肤防黑斑的效果，更加能提亮肤色，减少皱纹，具有一定的控油效果；火龙果中富含植物性白蛋白，这种有活性的白蛋白会自动与人体内的重金属离子结合，有助于毒素的排除。然而，火龙果皮中有效物质存在不稳定性，如花青素，其加热或高温可加快变色反应，尤其在加热至沸点时易氧化褪色，从而其影响功效。
CN111329050A公开了一种多菌种发酵制备火龙果酵素的方法，包括以下步骤：将火龙果去皮、破碎成丁，置入发酵容器中；加入麦芽糖；加入纯净水；加入酵母菌、醋酸杆菌、植物乳酸杆菌、嗜热链球菌及双歧杆菌组成的混合益生菌，厌氧发酵；于无菌条件下过滤，得到酵素液，该方法虽然获得火龙果酵素粉中SOD较高，但该火龙果酵素中花青素和植物性白蛋白含量较低。
CN108324606A公开了一种火龙果茎提取物及其制备方法与应用，经以下步骤(a)火龙果茎清洗干净去刺切段后，胶体磨粉碎，加入去离子水，然后加入稀释后的果胶酶，搅拌提取；(b)灭酶，冷却，粗过滤，精滤；(c)脱色，冷却，过滤，滤液灭菌防腐，得到本发明提供的火龙果茎提取物，该火龙果茎提取物中各有效成分含量有待提高。
因此，开发一种无有机残留、提取率高、工艺简单的火龙果液提取方法是本领域目前研究的重点。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种火龙果提取液的制备方法及由其制备得到的火龙果提取液和应用。由本发明所述方法全程无添加有机溶剂和化学用品，安全无刺激，没有破坏火龙果原有的营养物质，制备得到的火龙果提取液生物活性高。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种火龙果提取液的制备方法，所述火龙果提取液的制备方法具体包括以下步骤：
(1)将火龙果肉与水混合，进行压榨和过滤，并采用离子交换树脂柱进行脱色，得到脱色火龙果压榨液；
(2)将步骤(1)得到的部分脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，在厌氧条件下发酵，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，厌氧条件下发酵，得到火龙果发酵液二；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，得到火龙果提取液。
在本发明中，所述制备方法中，先采用离子交换树脂柱进行脱色，得到脱色火龙果压榨液，再取部分脱色火龙果压榨液与酵母菌进行厌氧发酵，而另一部分脱色火龙果压榨液与醋酸杆菌和植物乳酸菌混合进行厌氧发酵，最后再将分菌种的发酵得到的发酵液混合再次进行厌氧发酵，得到火龙果提取液。本申请所述制备方法利用微生物代谢来充分提高并释放它们的活性，而分菌种进行发酵可以极大减少对火龙果原有的营养物质的破坏，从而最大程度上保留制备得到的火龙果提取液中超氧化物歧化酶活性及花青素、维生素、植物甾醇、植物多糖、植物性白蛋白的含量，从而有效提高火龙果提取液的保湿、抗氧化、抗衰老、抗辐射的功效。
优选地，步骤(1)中所述火龙果肉为红心火龙果肉。
优选地，步骤(1)中所述火龙果肉与水的质量比为1:(1-3)，例如可以在1:1、1:1.2、1:1.4、1:1.6、1:1.8、1:2、1:2.2、1:2.4、1:2.6、1:2.8、1:3.0等。
优选地，步骤(1)中所述压榨的压力为10-30MPa，例如可以是10MPa、12MPa、14MPa、16MPa、18MPa、20MPa、22MPa、24MPa、26MPa、28MPa、30MPa等，所述压榨的时间为10-30min，例如可以是10min、12min、14min、16min、18min、20min、22min、24min、26min、28min、30min等。
优选地，步骤(1)中所述过滤采用滤布进行，所述滤布的孔径为1-10mm，例如可以是1mm、2mm、3mm、4mm、5mm、6mm、7mm、8mm、9mm、10mm等。
优选地，步骤(1)中所述离子交换树脂柱为阴离子交换树脂；
优选地，所述阴离子交换树脂为强碱性阴离子交换树脂；
优选地，所述强碱性阴离子交换树脂选自201×2型阴离子交换树脂、201×4型阴离子交换树脂、201×7型阴离子交换树脂、201×8型阴离子交换树脂或7170型阴离子交换树脂中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，步骤(1)中所述脱色火龙果压榨液的透光率为80％以上，例如可以是80％、82％、84％、86％、88％、90％、92％、94％、96％、98％等。
优选地，步骤(2)中所述部分脱色火龙果压榨液占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量的40-60％，例如可以是40％、42％、44％、46％、48％、50％、52％、54％、56％、58％、60％等。
优选地，步骤(2)中所述酵母菌的接种量为所述部分脱色火龙果压榨液质量的1-10％，例如可以是1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％等。
优选地，步骤(2)中所述醋酸杆菌的接种量为所述剩余脱色火龙果压榨液质量的0.1-2％，例如可以是0.1％、0.2％、0.4％、0.6％、0.8％、1％、1.2％、1.4％、1.6％、1.8％、2％等。
优选地，步骤(2)中所述植物乳酸菌的接种量为所述剩余脱色火龙果压榨液质量的1-3％，例如可以是1％、1.2％、1.4％、1.6％、1.8％、2％、2.2％、2.4％、2.6％、2.8％、3％等。
优选地，步骤(2)中所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数各自独立地为1×106CFU/mL以上，例如可以是1×106CFU/mL、1.2×106CFU/mL、1.4×106CFU/mL、1.6×106CFU/mL、1.8×106CFU/mL、2×106CFU/mL、2.2×106CFU/mL、2.4×106CFU/mL、2.6×106CFU/mL、2.8×106CFU/mL、3×106CFU/mL等。
优选地，步骤(2)中所述发酵的温度均各自独立地为20-30℃，例如可以是20℃、22℃、24℃、26℃、28℃、30℃等，所述发酵的时间均各自独立地为5-10天，例如可以是5天、6天、7天、8天、9天、10天等。
优选地，步骤(2)中所述发酵的pH均各自独立地为5-6，例如可以是5、5.2、5.4、5.6、5.8、6等。
优选地，步骤(3)中所述发酵的温度为23-26℃，例如可以是23℃、24℃、25℃、26℃等，所述发酵的时间均各自独立地为1-5天，例如可以是1天、2天、3天、4天、5天等。
优选地，步骤(3)中所述发酵的pH为5.4-5.8，例如可以是5.4、5.5、5.6、5.7、5.8等。
优选地，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:(1-3)的比例将火龙果肉与水混合，在10-30MPa下压榨10-30min，采用孔径为1-10mm的滤布进行过滤，并采用离子交换树脂柱进行脱色，得到透光率为80％以上的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量40-60wt％的脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为20-30℃，所述发酵的时间为5-10天，发酵的pH为5-6，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为20-30℃，所述发酵的时间为5-10天，发酵的pH为5-6，得到火龙果发酵液二；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为23-26℃，所述发酵的时间为1-5天，发酵的pH为5.4-5.8，灭菌，得到火龙果提取液。
第二方面，本发明提供一种火龙果提取液，所述火龙果提取液为由如第一方面所述的火龙果提取液的制备方法制备得到。
优选地，所述火龙果提取液中超氧化物歧化酶活性在200-300U/mL，例如可以是200U/mL、220U/mL、240U/mL、260U/mL、280U/mL、300U/mL等。
优选地，所述火龙果提取液中花青素的含量为0.5-1.0mg/mL，例如可以是0.5mg/mL、0.6mg/mL、0.7mg/mL、0.8mg/mL、0.9mg/mL、1.0mg/mL等。
优选地，所述火龙果提取液中维生素C含量为0.2-0.5mg/mL，例如可以是0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL等。
优选地，所述火龙果提取液中植物甾醇的含量为0.2-0.5mg/mL，例如可以是0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL等。
优选地，所述火龙果提取液中植物多糖的含量为5-10mg/mL，例如可以是5mg/mL、6mg/mL、7mg/mL、8mg/mL、9mg/mL、10mg/mL等。
优选地，所述火龙果提取液中植物性白蛋白的含量为10-30mg/mL，例如可以是10mg/mL、12mg/mL、14mg/mL、16mg/mL、18mg/mL、20mg/mL、22mg/mL、24mg/mL、26mg/mL、28mg/mL、30mg/mL等。
第三方面，本发明提供一种如第二方面所述的火龙果提取液在制备化妆品中的应用。
优选地，所述化妆品包括化妆水、保湿水、精华、护肤乳液、润肤膏霜、护肤啫喱、面膜或洗发水。
优选地，所述火龙果提取液的添加量为所述化妆品中质量的0.1-50％，例如可以是0.1％、0.2％、0.5％、0.8％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％、50％等。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明所述火龙果提取液的制备方法全程无添加有机溶剂和化学用品，安全无刺激，不仅没有破坏火龙果原有的营养物质，同时激活了火龙果的最大的生物活性，大大提高了火龙果的提取率和有效成分的溶出率，从而极大保证了制备得到的火龙果提取液各营养物质含量；
(2)本发明所述火龙果提取液对超氧阴离子自由基清除率在75％以上，对羟自由基清除率在75％以上。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
实施例1
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:2的比例将红心火龙果肉与水混合，在20MPa下压榨20min后，采用孔径为5mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经201×2型阴离子交换树脂进行脱色，得到透光率为90％的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量50wt％的脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，酵母菌的接种量为5％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余的50wt％的脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，醋酸杆菌的接种量为0.5％，植物乳酸菌的接种量为2％，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液二；
其中，所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数均为2×106CFU/mL；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为3天，发酵的pH为5.5，灭菌，得到火龙果提取液。
实施例2
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:1的比例将红心火龙果肉与水混合，在10MPa下压榨30min后，采用孔径为7mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经201×4型阴离子交换树脂进行脱色，得到透光率为92％的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量50wt％的脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，酵母菌的接种量为6％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为6，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余的50wt％的脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，醋酸杆菌的接种量为1％，植物乳酸菌的接种量为3％，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为6，得到火龙果发酵液二；
其中，所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数均为1×106CFU/mL；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为3天，发酵的pH为5.6，灭菌，得到火龙果提取液。
实施例3
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:3的比例将红心火龙果肉与水混合，在30MPa下压榨10min后，采用孔径为7mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经201×7型阴离子交换树脂进行脱色，得到透光率为88％的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量50wt％的脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，酵母菌的接种量为3％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余的50wt％的脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，醋酸杆菌的接种量为0.2％，植物乳酸菌的接种量为1％，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5，得到火龙果发酵液二；
其中，所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数均为3×106CFU/mL；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为3天，发酵的pH为5.6，灭菌，得到火龙果提取液。
实施例4
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:2的比例将红心火龙果肉与水混合，在20MPa下压榨20min后，采用孔径为5mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经D941大孔弱碱性丙烯酸系阴离子交换树脂，得到透光率为82％的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量50wt％的脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，酵母菌的接种量为5％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余的50wt％的脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，醋酸杆菌的接种量为0.5％，植物乳酸菌的接种量为2％，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液二；
其中，所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数均为2×106CFU/mL；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为3天，发酵的pH为5.5，灭菌，得到火龙果提取液。
实施例5
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:2的比例将红心火龙果肉与水混合，在20MPa下压榨20min后，采用孔径为5mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经201×2型阴离子交换树脂进行脱色，得到透光率为90％的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量40wt％的脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，酵母菌的接种量为5％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余的60wt％的脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，醋酸杆菌的接种量为0.5％，植物乳酸菌的接种量为2％，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液二；
其中，所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数均为2×106CFU/mL；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为3天，发酵的pH为5.5，灭菌，得到火龙果提取液。
实施例6
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:2的比例将红心火龙果肉与水混合，在20MPa下压榨20min后，采用孔径为5mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经201×2型阴离子交换树脂进行脱色，得到透光率为90％的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量60wt％的脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，酵母菌的接种量为5％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余的40wt％的脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，醋酸杆菌的接种量为0.5％，植物乳酸菌的接种量为2％，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液二；
其中，所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数均为2×106CFU/mL；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为3天，发酵的pH为5.5，灭菌，得到火龙果提取液。
实施例7
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:2的比例将红心火龙果肉与水混合，在20MPa下压榨20min后，采用孔径为5mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经201×2型阴离子交换树脂进行脱色，得到透光率为90％的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量50wt％的脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，酵母菌的接种量为5％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为5天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余的50wt％的脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，醋酸杆菌的接种量为0.5％，植物乳酸菌的接种量为2％，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为5天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液二；
其中，所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数均为2×106CFU/mL；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为5天，发酵的pH为5.5，灭菌，得到火龙果提取液。
实施例8
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，与实施例1的区别仅在于，所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数均为1×105CFU/mL。
实施例9
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，与实施例1的区别仅在于，步骤(2)中所述酵母菌的接种量0.5％。
实施例10
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，与实施例1的区别仅在于，步骤(2)中所述酵母菌的接种量12％。
实施例11
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，与实施例1的区别仅在于，步骤(2)中所述醋酸杆菌的接种量0.05％。
实施例12
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，与实施例1的区别仅在于，步骤(2)中所述醋酸杆菌的接种量3％。
实施例13
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，与实施例1的区别仅在于，步骤(2)中所述植物乳酸菌的接种量0.5％。
实施例14
本实施例提供一种火龙果提取液的制备方法，与实施例1的区别仅在于，步骤(2)中所述植物乳酸菌的接种量4％。
对比例1
本对比例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:2的比例将红心火龙果肉与水混合，在20MPa下压榨20min后，采用孔径为5mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体先经活性炭柱脱色，得到透光率为70％的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量50wt％的脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，酵母菌的接种量为5％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余的50wt％的脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，醋酸杆菌的接种量为0.5％，植物乳酸菌的接种量为2％，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液二；
其中，所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数均为2×106CFU/mL；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为3天，发酵的pH为5.5，灭菌，得到火龙果提取液。
对比例2
本对比例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:2的比例将红心火龙果肉与水混合，在20MPa下压榨20min后，采用孔径为5mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经201×2型阴离子交换树脂进行脱色，得到透光率为90％的脱色火龙果压榨液；
(2)将步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液与酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，所述酵母菌的接种量为5％，醋酸杆菌的接种量为0.5％，植物乳酸菌的接种量为2％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为10天，发酵的pH为5.5，灭菌，得到火龙果提取液。
其中，所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数均为2×106CFU/mL。
对比例3
本对比例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:2的比例将红心火龙果肉与水混合，在20MPa下压榨20min后，采用孔径为5mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经201×2型阴离子交换树脂进行脱色，得到透光率为90％的脱色火龙果压榨液；
(2)将步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液与酵母菌、醋酸杆菌、植物乳酸菌、嗜热链球菌和双歧杆菌混合，所述酵母菌的接种量为5％，醋酸杆菌的接种量为0.5％，植物乳酸菌的接种量为2％，所述嗜热链球菌的接种量为0.5％，所述双歧杆菌的接种量为0.5％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为10天，发酵的pH为5.5，灭菌，得到火龙果提取液。
其中，所述酵母菌、醋酸杆菌、植物乳酸菌、嗜热链球菌和双歧杆菌的活菌数均为2×106CFU/mL。
对比例4
本对比例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:2的比例将红心火龙果肉与水混合，在20MPa下压榨20min后，采用孔径为5mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经201×2型阴离子交换树脂进行脱色，得到透光率为90％的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量50wt％的脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，酵母菌的接种量为5％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余的50wt％的脱色火龙果压榨液和植物乳酸菌混合，植物乳酸菌的接种量为2.5％，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液二；
其中，所述酵母菌和植物乳酸菌的活菌数均为2×106CFU/mL；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为3天，发酵的pH为5.5，灭菌，得到火龙果提取液。
对比例5
本对比例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:2的比例将红心火龙果肉与水混合，在20MPa下压榨20min后，采用孔径为5mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经201×2型阴离子交换树脂进行脱色，得到透光率为90％的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量50wt％的脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，酵母菌的接种量为5％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余的50wt％的脱色火龙果压榨液和醋酸杆菌，醋酸杆菌的接种量为2.5％，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液二；
其中，所述酵母菌和醋酸杆菌的活菌数均为2×106CFU/mL；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为3天，发酵的pH为5.5，灭菌，得到火龙果提取液。
对比例6
本对比例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:2的比例将红心火龙果肉与水混合，在20MPa下压榨20min后，采用孔径为5mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经201×2型阴离子交换树脂进行脱色，得到透光率为90％的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量50wt％的脱色火龙果压榨液、酵母菌和植物乳酸菌混合，酵母菌的接种量为5％，植物乳酸菌的接种量为2％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余的50wt％的脱色火龙果压榨液和醋酸杆菌混合，醋酸杆菌的接种量为0.5％，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液二；
其中，所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数均为2×106CFU/mL；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为3天，发酵的pH为5.5，灭菌，得到火龙果提取液。
对比例7
本对比例提供一种火龙果提取液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:2的比例将红心火龙果肉与水混合，在20MPa下压榨20min后，采用孔径为5mm的滤布进行过滤，将过滤得到的液体经201×2型阴离子交换树脂进行脱色，得到透光率为90％的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量50wt％的脱色火龙果压榨液、酵母菌和醋酸杆菌混合，酵母菌的接种量为5％，醋酸杆菌的接种量为0.5％，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余的50wt％的脱色火龙果压榨液和植物乳酸菌混合，植物乳酸菌的接种量为2％，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为7天，发酵的pH为5.5，得到火龙果发酵液二；
其中，所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数均为2×106CFU/mL；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为25℃，所述发酵的时间为3天，发酵的pH为5.5，灭菌，得到火龙果提取液。
试验例1
火龙果提取液活性成分含量测定
对上述实施例1-14制备得到的火龙果提取液和对比例1-7制备得到的火龙果提取液中各组分含量进行测定，其中，采用邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活性(SOD活性)；采用铁盐催化比色法测定花青素含量；采用碘量法测定维生素C含量；利用Liebermann-Burchard显色法测定植物甾醇含量；利用苯酚硫酸法测定植物多糖含量；利用考马斯亮蓝法测定植物性白蛋白含量；
具体测试结果如表1所示：
表1
由表1测试数据可知，由本发明制备方法制备得到的火龙果提取液中超氧化物歧化酶活性在200-300U/mL，花青素的含量为0.5-1.0mg/mL，维生素C含量为0.2-0.5mg/mL，植物甾醇的含量为0.2-0.5mg/mL，植物多糖的含量为5-10mg/mL，植物性白蛋白的含量为10-30mg/mL。说明本发明所述火龙果提取液的制备方法全程无添加有机溶剂和化学用品，安全无刺激，不仅没有破坏火龙果原有的营养物质，同时激活了火龙果的最大的生物活性，从而极大保证了制备得到的火龙果提取液各营养物质含量。
试验例2
抗自由基测试
对上述实施例1-14制备得到的火龙果提取液和对比例1-7制备得到的火龙果提取液抗自由基能力进行测定，具体测试方法如下所示：
(1)超氧阴离子自由基清除能力评价试验
取0.05mol/LpH＝8.2的Tris-HCl缓冲溶液4.5mL，于25℃水浴锅中预热30min。再加入1mL样品溶液和0.4mL25mol/L的邻苯三酚溶液，混匀后，于25℃水浴中反应5min，加入1mL8mol/L的HCl终止反应。以Tris-HCl缓冲溶液作参比，在299nm处测吸光度值。空白对照组用1mL样品溶液的溶剂来替代样品溶液。
超氧阴离子自由基清除率的计算公式如下所示：
超氧阴离子自由基清除率(％)＝[1-(Ay/Ak)]×100％
其中，Ak为空白对照组的吸光度值，Ay为样品组的吸光度值。
(2)羟自由基清除能力评价试验
在25mL比色皿中依次加入2mmol/LFeSO4 3mL，1mmol/LH2O2 3mL，摇匀，接着加入6mmol/L水杨酸3mL，摇匀，于37℃水浴加热15min后取出，测其吸光度；分别加入一定浓度的样品溶液，摇匀，继续水浴加热15min，取出测其吸光度。
羟自由基清除率的计算公式如下所示：
羟自由基清除率(％)＝[A0-Ax-(A0-Ax0)]/A0×100％。
具体测试结果如表2所示：
表2
由表2测试数据可知，由本发明制备方法制备得到的火龙果提取液具有良好清除自由基作用，对超氧阴离子自由基清除率在75％以上，羟自由基清除率在75％以上，说明本发明所述火龙果提取液的制备方法不仅没有破坏火龙果原有的营养物质，同时激活了火龙果的最大的生物活性，从而极大保证了制备得到的火龙果提取液各营养物质含量，从而提高火龙果提取液的抗自由基能力。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明所述火龙果提取液的制备方法及由其制备得到的火龙果提取液和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (10)
1.一种火龙果提取液的制备方法，其特征在于，所述火龙果提取液的制备方法具体包括以下步骤：
(1)将火龙果肉与水混合，进行压榨和过滤，并采用离子交换树脂柱进行脱色，得到脱色火龙果压榨液；
(2)将步骤(1)得到的部分脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，在厌氧条件下发酵，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，厌氧条件下发酵，得到火龙果发酵液二；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，得到火龙果提取液。
2.根据权利要求1所述的火龙果提取液的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述火龙果肉为红心火龙果肉；
优选地，步骤(1)中所述火龙果肉与水的质量比为1:(1-3)；
优选地，步骤(1)中所述压榨的压力为10-30MPa，所述压榨的时间为5-15min；
优选地，步骤(1)中所述过滤采用滤布进行，所述滤布的孔径为1-10mm。
3.根据权利要求1或2所述的火龙果提取液的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述离子交换树脂柱为阴离子交换树脂；
优选地，所述阴离子交换树脂为强碱性阴离子交换树脂；
优选地，所述强碱性阴离子交换树脂选自201×2型阴离子交换树脂、201×4型阴离子交换树脂、201×7型阴离子交换树脂、201×8型阴离子交换树脂或7170型阴离子交换树脂中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，步骤(1)中所述脱色火龙果压榨液的透光率为80％以上。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的火龙果提取液的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述部分脱色火龙果压榨液占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量的40-60％；
优选地，步骤(2)中所述酵母菌的接种量为所述部分脱色火龙果压榨液质量的1-10％；
优选地，步骤(2)中所述醋酸杆菌的接种量为所述剩余脱色火龙果压榨液质量的0.1-2％；
优选地，步骤(2)中所述植物乳酸菌的接种量为所述剩余脱色火龙果压榨液质量的1-3％；
优选地，步骤(2)中所述酵母菌、醋酸杆菌和植物乳酸菌的活菌数各自独立地为1×106CFU/mL以上。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的火龙果提取液的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述发酵的温度均各自独立地为20-30℃，所述发酵的时间均各自独立地为5-10天；
优选地，步骤(2)中所述发酵的pH均各自独立地为5-6。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的火龙果提取液的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述发酵的温度为23-26℃，所述发酵的时间均各自独立地为1-5天；
优选地，步骤(3)中所述发酵的pH为5.4-5.8。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的火龙果提取液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(1)以质量比为1:(1-3)的比例将火龙果肉与水混合，在10-30MPa下压榨10-30min，采用孔径为1-10mm的滤布进行过滤，并采用离子交换树脂柱进行脱色，得到透光率为80％以上的脱色火龙果压榨液；
(2)取占步骤(1)得到的脱色火龙果压榨液总质量40-60wt％的脱色火龙果压榨液与酵母菌混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为20-30℃，所述发酵的时间为5-10天，发酵的pH为5-6，得到火龙果发酵液一；将步骤(1)得到的剩余脱色火龙果压榨液、醋酸杆菌和植物乳酸菌混合，厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为20-30℃，所述发酵的时间为5-10天，发酵的pH为5-6，得到火龙果发酵液二；
(3)将步骤(2)得到的火龙果发酵液一和火龙果发酵液二混合，在厌氧条件下发酵，所述发酵的温度为23-26℃，所述发酵的时间为1-5天，发酵的pH为5.4-5.8，灭菌，得到火龙果提取液。
8.一种火龙果提取液，其特征在于，所述火龙果提取液为由如权利要求1-7中任一项所述的火龙果提取液的制备方法制备得到。
9.根据权利要求8所述的火龙果提取液，其特征在于，所述火龙果提取液中超氧化物歧化酶活性在200-300U/mL；
优选地，所述火龙果提取液中花青素的含量为0.5-1.0mg/mL；
优选地，所述火龙果提取液中维生素C含量为0.2-0.5mg/mL；
优选地，所述火龙果提取液中植物甾醇的含量为0.2-0.5mg/mL；
优选地，所述火龙果提取液中植物多糖的含量为5-10mg/mL；
优选地，所述火龙果提取液中植物性白蛋白的含量为10-30mg/mL。
10.根据权利要求8或9所述的火龙果提取液在制备化妆品中的应用。
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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