CN111991278A - 一种具有修复皮肤屏障功效的组合物及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有修复皮肤屏障功效的组合物及其制备方法与应用，该组合物，包括以下重量百分比组分：糖脂0.1～3％，磷脂酰肌醇0.1～3％，水解假丝酵母提取物0.1～3％，余量水。本发明组合物通过多种活性成分的有效组合和用量配比，实现了多方面、多途径的协同修复肌肤屏障的功效，组分安全，促进细胞增殖，并且修复功效明显。

Description

一种具有修复皮肤屏障功效的组合物及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及一种具有修复皮肤屏障功效的组合物及其制备方法与应用，属于化妆品技术领域。

背景技术

由于社会生活节奏加快，城市环境污染加剧，应对内外压力导致内分泌失调，年龄增长肌肤变脆弱，不合理使用化妆品等等因素，导致肌肤屏障受损从而变得敏感的人群数量一直在增长，在淘宝参谋中搜索“肌肤修复”可以发现，近两年的搜索次数差不多以每年10％的增长，由此可见，具有修复敏感肌的护肤品具有广阔的市场需求。

目前市面上宣称具有修复功效的护肤产品虽然品类繁多，但是大部分只具有舒缓、止痒、提供滋润保护的功效，只能减轻皮肤当下的过敏、干敏现象，但是治标不治本修复皮肤屏障效果不明显，且作用时间较长，一旦肌肤再次受到上述内外因素导致的刺激，过敏现象又会触发，起不到真正长效修复敏感肌的功效，对于激素脸的修复还是要靠药物治疗。因此，开发一种适合敏感肌使用、能让受损肌肤逐渐恢复正常状态的修复功效组合物具有良好的应用前景。

发明内容

本发明旨在解决现有技术中存在的技术问题，提供一种适合敏感肌使用，逐渐修复受损肌肤屏障功能的组合物。

本发明的另一目的是提供一种上述组合物的制备方法。

本发明的第三个目的是提供一种上述组合物的应用。

本发明为实现上述目的，采用以下技术方案：

一种具有修复皮肤屏障功效的组合物，其特征在于包括以下重量百分比组分：

糖脂能渗入角质层，分子结构上它与神经酰胺Ⅲ结构类似，是拥有双链烷基的两亲性天然成分。但是它比神经酰胺Ⅲ能更迅速地渗透入角质层，只要与水接触就能立刻形成层状液晶结构，修补角质层内已经损伤了的层状液晶结构，改善肌肤的保水力。

本发明中的磷脂酰肌醇的全成分为：氢化卵磷脂、卵磷脂、植物甾醇类和生育酚(维生素E)。

磷脂酰肌醇能使细胞活化，促进表皮细胞透明质酸的合成，提高角质层的含水量，同时提高角质层的过氧化氢酶活性，促进细胞生成抗氧化物质，激活细胞自我修复及生成，使皮肤逐步恢复水润。

水解假丝酵母提取物通过细胞自噬原理，促进皮肤细胞自然地排毒(自噬)过程为肌肤细胞解除毒素，帮助肌肤吞噬，代谢老化及黑色素等有害物质。

一种上述的具有修复皮肤屏障功效的组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

a、将糖脂加入水中，搅拌溶解均匀，得到溶液A；

b、将磷脂酰肌醇加入溶液A中，搅拌溶解均匀，得到溶液B；

c、将溶液A、水解假丝酵母提取物、依次加入溶液B中，搅拌溶解均匀，过滤即可。

其中，步骤a-c中搅拌的转速为200-500r/min，搅拌的时间为5-15min。

本发明所述组合物中各组分可实现协同修复肌肤屏障的效果，具体为：

糖脂，能迅速地渗透入角质层，提供外部来源的类似神经酰胺作用的物质来填补已经损伤或结构有缺失的角质层内的层状液晶结构，即时改善肌肤的保水力，减少肌肤因缺水引起的干敏、红肿、痒感。

磷脂酰肌醇能激活细胞自身生成透明质酸，提高角质层含水量，同时促进细胞生成抗氧化物质，逐步激活细胞自我修复受损角质层，促进角质层细胞生长，逐步激活细胞自身恢复生成结构完整正常的角质层细胞。

水解假丝酵母提取物，能增强自噬系统，促进细胞的排毒过程，改善“有毒”肌肤的肤色。

因此，通过上述组分的有效组合与用量配比，可以从不同方面、不同途径实现协同修复肌肤屏障的效果，因此能比单一组分或单一途径修复效果更好，更持久。

一种上述的具有修复皮肤屏障功效的组合物的应用，其特征在于包含所述组合物的护肤品。

本发明具有修复皮肤屏障功效的组合物的应用，其特征在于所述的护肤品中含有1-20％质量百分比的所述组合物。

本发明应用的一个实施例，所述护肤品包括以下质量百分比组分：

本发明实施例中，保湿剂选自银耳多糖、甘油、透明质酸钠、海藻糖、甜菜碱、乙基己基甘油、1，2-己二醇、1，2-戊二醇、丙二醇或丁二醇中的至少一种。

本发明实施例中，增稠剂选自黄原胶、纤维素、小核菌胶、皱波角叉菜和卡波姆中的至少一种。

本发明实施例中，防腐剂选自尼泊金酯类、苯氧乙醇、氯苯甘醚、 EDTA-2NA、对羟基苯乙酮、辛酰羟肟酸、甘油辛酸酯中的至少一种。

本发明相对于现有技术而言，有益效果如下：

本发明组合物通过多种活性成分的有效组合和用量配比，实现了多方面、多途径的协同修复肌肤屏障的功效。

附图说明

图1-1是实施例4空白组使用前的超声影像图；

图1-2是实施例4空白组使用第7天的超声影像图；

图1-3是实施例4空白组使用第14天的超声影像图；

图1-4是实施例4空白组使用第28天的超声影像图；

图2-1是实施例4样品组使用前的超声图影像像；

图2-2是实施例4样品组使用第7天的超声影像图；

图2-3是实施例4样品组使用第14天的超声影像图；

图2-4是实施例4样品组使用第28天的超声影像图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细介绍。

实施例1：

分别将糖脂、磷脂酰肌醇、水解假丝酵母提取物的水分散液进行稀释做细胞增殖测试，发现在不同浓度下它们分别对细胞的增殖影响各不相同，具体详情如下：

细胞增殖活性评价测试

细胞株：HaCaT细胞(购自上海名劲生物科技有限公司)

密度：5000个/孔

受检样品：糖脂(购自日本东洋纺生物化学事业部)、磷脂酰肌醇(购自日本精化株式会社)、水解假丝酵母提取物(购自广州茗丽生物有限公司)

阳性对照：20％胎牛血清(FBS)

作用时间：48h

检测方法：CCK8法

实验方法：取生长状态良好的HaCaT细胞铺96孔板培养16h后，更换无血清DMEM培养基饥饿处理7h后，弃去旧DMEM培养基，加入含有不同浓度受检样品的DMEM培养基，48h后CCK8法检测OD450 和OD630值，得出受检样品对HaCaT细胞增殖的影响，如表1所示。

表1：不同样品不同浓度下对HaCaT细胞增殖的影响

由表1可以看出，糖脂在浓度为0.01～0.98(μg/ml)时，对HaCaT细胞增殖有一定的促进作用。磷脂酰肌醇在250～1000μg/mL时，它对 HaCaT细胞增殖有促进作用，随着浓度增加，增殖效果增强；水解假丝酵母提取物在0.01～0.06μg/mL时，它对HaCaT细胞增殖也有一定的促进作用。

实施例2：

基于以上测试，尝试将这三个原料按表2比例搭配的组合后再进行不同浓度下对细胞增殖活性评价测试，结果如表3所示。

表2：组合比例明细表

表3：不同组合物不同浓度下对HaCaT细胞增殖的影响

从以上测试得知，两两复配时对细胞增殖的影响与单独时用区别不大，但当这三个组合物一起联用时，细胞的增殖率远远高于单独或者两两复配时的效果。

实施例3：

基于以上测试，按表4配比进行这三个样品的组合优化，具体实施如下。

表4：

上述三组修复功效的组合物的制备方法，包括以下步骤：

a、通过糖脂与水混合，400r/min速度搅拌10分钟，得到溶液A；

b、通过磷脂酰肌醇加入水中混合，400r/min速度搅拌10分钟，得到溶液B；

c、将溶液A、水解假丝酵母提取物依次加入溶液B中，400r/min 速度搅拌10分钟，经200目滤布过滤，即可。

细胞增殖活性评价测试

细胞株：HaCaT细胞(购自上海名劲生物科技有限公司)

密度：5000个/孔

受检样品：对比例1、对比例2、对比例3

阳性对照：20％胎牛血清(购自GIBCO)

作用时间：48h

检测方法：CCK8法

实验方法：取生长状态良好的HaCaT细胞铺96孔板培养16h后，更换无血清DMEM培养基饥饿处理7h后，弃去旧DMEM培养基，加入含有不同浓度受检样品的DMEM培养基，48h后CCK8法检测OD450 和OD630值，得出受检样品对HaCaT细胞增殖的影响，结果如表5 所示。

表5：对比例1、对比例2、对比例3组合物对HaCaT细胞增殖的影响

实验结果表明，受检样品对比例1对HaCaT细胞没有明显的促进增殖作用，说明只是简单复配这三种组合物并不是都有细胞促进增殖作用，组合物之间比例搭配不科学并不具有协同增效的作用，反而会产生细胞毒性，抑制细胞增殖，优选的，对比例3的组合物在0.02～15μg/mL时，HaCaT细胞活率可达到峰值范围，表明对比例3对 HaCaT细胞增殖有显著的促进作用。

伤口愈合划痕试验

细胞株：HaCaT细胞(购自上海名劲生物科技有限公司)

密度：5000个/孔

受检样品：对比例1、对比例2、对比例3

阳性对照：10％胎牛血清(购自GIBCO)

作用时间：24h

计算方法：ImageJ软件计算细胞划痕的面积

取对数生长期的HaCaT细胞铺12孔板，24h待细胞长满底部后，用10μl枪头在底部轻轻划开，模拟人体皮肤损伤；吸弃培养基，用PBS 轻轻冲洗脱落的细胞；将4.5ml无菌PBS加入以上组合物混匀作为母液；按照母液与无血清培养基体积比为0.5％混合加入12孔板中，同时设置空白对照组和阳性对照组；分别在0，24h进行显微镜拍照，然后用ImageJ软件统计划痕面积并计算愈合率，如表6所示。

表6：

组别	空白对照组	对比例1	对比例2	对比例3	阳性对照组
						愈合率	34.05％	43.25％	56.76％	71.34％	99.86％

如表6数据所示，愈合率数据越高表明促进细胞划痕修复的能力越强，实验表明三组受检样品均有促进细胞划痕修复的作用，三组中优选对比例3的愈合率最高。

综上，本发明中的修复功效的组合物通过多种活性成分的有效组合和用量配比，对细胞具有良好的促增殖，伤口愈合修复作用，优选对比例3的组合。

实施例4：

一种具有修复功效的化妆品，按重量百分比包括以下组分：

实施例4的化妆品制备方法，包括以下步骤：

将丁二醇、黄原胶、银耳多糖、羟苯甲酯混合搅匀后加入水中，搅拌加热至85℃后，保温搅拌直至料体混合均匀；降温至45℃，加入剩余组分搅拌20min，得到修复功效的化妆品。

对照组与样品组相比，对照组中不添加修复功效的组合物对比例3，用水替代其所占比例，其他组分和制备方法基本相同。

为进一步测试本发明的组合物的修复功效，将对照组与样品组制得的护肤品进行人体测试，并进行TEWL值以及高频超声影像数据采集来评价试用样品的功效，具体检测方法如下：

选取年龄25～45岁的健康女性志愿者共33人，将200μL±10μL的十二烷基硫酸钠溶液(浓度为1％)注入斑试器小室内，浸润滤纸片，用低致敏胶带贴敷于志愿者左、右前臂曲侧，左右各3个，相邻斑试器小室边缘间距3cm，用手掌轻压使之均匀地贴敷于皮肤上，持续24 小时，去除斑试器后，志愿者在恒温恒湿的测试环境中(20～22℃，相对湿度：40％～60％)静坐30分钟(待压痕消失后)，测量各斑贴区域中心位置的TEWL值，每区区域测量一次，测量结果以单臂3个斑贴区域TEWL值的平均值表示，作为初始值。

记录初始值后，志愿者以样品组涂抹左前臂曲侧，以对照组涂抹右前臂曲侧，每人每天早晚清洁受试部分后，每侧均包含3个斑贴区域，确保样品涂抹侧和对照侧在统计学上达到平衡。使用Dermalab Combo皮肤检测仪(购自丹麦CORTEX TECHNOLOGY公司)采集并记录涂抹样品D0、D7、D14、D28天时的皮肤的TEWL值及超声影像图，每次测量前，用清水清洁受试部位，并用无屑吸水干纸巾吸干。在符合标准的测试环境中静坐30分钟，不能喝水和饮料，前臂暴露，保持放松，避免触碰斑贴区域。空白组的超声影像图如图1-1、1-2、 1-3、1-4所示，样品组的超声影像图如图2-1、2-2、2-3、2-4所示。

由于皮肤的新陈代谢，健康的皮肤也会存在一定程度的水分流失。而皮肤的屏障功能一旦有轻微受损，甚至是肉眼无法观察到的损伤，经皮水分流失就会增加。所以检测TEWL值能体现样品对皮肤的修复功效。TEWL值表示单位时间、单位面积经皮水分流失的量。TEWL 值越低，代表皮肤水分流失率越少，TEWL值下降率越高，样品的修复效果越好。以下表7表示志愿者的TEWL值变化率。

表7：

组别	D7天	D14天	D28天
				对照组下降率	44.3％	52.6％	53.4％
样品组下降率	61.6％	75.8％	85.1％

从表7可以看出，随着时间的推移，对照组及样品组TEWL值均有下降，第7天相比初始值均下降非常明显，考虑到去除斑贴后，皮肤自身也有自我修复的功能，所以两组测试TEWL值下降率相当，但是样品组第14天及28天时比第7天下降明显，而对照组则不明显，下降率提升明显，由此表明，随着使用时间的延长，皮肤的修复效果已显现，保水能力提升了，且在一个皮肤周期循环(28天内)，皮肤结构基本恢复正常的角质层细胞。

从皮肤超声影像图片及数据分析，不同颜色代表了皮肤内不同密度物质的回声的强度：深色代表低密度回声区，浅色代表高密度回声区，颜色的多样性代表了该区域的结构的复杂性，黑暗色区代表了脂肪，水，血液等结构，浅色区域所占面积越大，表明该区域胶原蛋白的密度越大，含量也越高，内部结构越完整，皮肤屏障越紧密。

Claims (10)

1.一种具有修复皮肤屏障功效的组合物，其特征在于包括以下重量百分比组分：

2.根据权利要求1所述的一种具有修复皮肤屏障功效的组合物，其特征在于所述的磷脂酰肌醇的全成分为：氢化卵磷脂、卵磷脂、植物甾醇类和生育酚。

3.一种权利要求1所述的具有修复皮肤屏障功效的组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

a、将糖脂加入水中，搅拌溶解均匀，得到溶液A；

b、将磷脂酰肌醇加入水中，搅拌溶解均匀，得到溶液B；

c、将溶液A、水解假丝酵母提取物依次加入溶液B中，搅拌溶解均匀，过滤即可。

4.根据权利要求3所述的具有修复皮肤屏障功效的组合物的制备方法，其特征在于步骤a-c中搅拌的转速为200-500r/min，所述搅拌的时间为5-15min。

5.一种权利要求1所述的具有修复皮肤屏障功效的组合物的应用，其特征在于包含所述组合物的护肤品。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述的护肤品中含有1-20％质量百分比的所述组合物。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述的护肤品包括以下质量百分比组分：

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于所述保湿剂选自银耳多糖、甘油、透明质酸钠、海藻糖、甜菜碱、乙基己基甘油、1，2-己二醇、1，2-戊二醇、丙二醇或丁二醇中的至少一种。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于所述增稠剂选自黄原胶、纤维素、小核菌胶、皱波角叉菜或卡波姆中的至少一种。

10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于所述防腐剂选自尼泊金酯类、苯氧乙醇、氯苯甘醚、EDTA-2NA、对羟基苯乙酮、辛酰羟肟酸、甘油辛酸酯中的至少一种。

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