CN111937745A - 一种马铃薯脱毒微型薯生产过程中定植用组培苗的快速扩繁的组培方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种马铃薯脱毒微型薯生产过程中定植用组培苗的快速扩繁的组培方法，1)将MS培养基配方里面的硝酸铵用氯化铵代替，氯化钙用硝酸钙代替；2)用皮棉代替卡拉胶；3)各母液及白糖减少用量10‑30％；4)100℃两分钟以上，直接灌装，240型培养瓶灌装量为20‑25ml；5)扩繁：母苗剪切1‑2个叶片一段，剪切完成后不需要扦插，轻轻打散摇匀；组织培养：组织培养的光照强度为3300Lx。本发明所述方法使扩繁速度提高30％以上，组培时间缩短7天，成本降低35％以上。

Description

一种马铃薯脱毒微型薯生产过程中定植用组培苗的快速扩繁 的组培方法

技术领域

本发明涉及植物的组织培养技术领域，尤其涉及一种马铃薯脱毒微型薯生产过程中定植用组培苗的快速扩繁的组培方

背景技术

硝酸铵是现有培养基的重要成份，由于其存在燃爆危险性，目前已经被禁用，国家禁售硝酸铵后给植物组培带来了一个很大的问题，无法凑齐培养基所需的药品，就无法满足植物所需的营养元素，寻求替代品及替代品的用量就成为当务之急。另外大量生产组培苗，需要大量的培养基，因此，如何快速制作培养基也成为关键。

马铃薯脱毒微型薯生产的季节性很强，直接关系到产量与品质。因此需要在很短的定植适宜期内生产出大量的定植用苗，养兵千日用兵一时。大规模的工厂化生产马铃薯脱毒微型薯的企业都面临着组培苗适宜定植时间短，而组培苗又不能像其他作物那样提前准备好种子，只能提前一个月生产，操作工人又不能随便招来一个人就能上岗操作，必须是熟练工，若常年保持足够数量的工人是企业的巨大负担和成本。

发明内容

有鉴于现有技术的状况，本发明的目的在于，提供一种马铃薯脱毒微型薯生产过程中定植用组培苗的快速扩繁的组培方法。尤其是从培养基的角度来进行技术解决方案。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明的技术方案是，一种马铃薯脱毒微型薯生产过程中定植用组培苗的快速扩繁的组培方法，培养基配方的调整；母液用量减少；培养基制作灌装；接种扩繁；组织培养；

包括以下步骤：

1将MS培养基配方里面的硝酸铵(国家禁售)用氯化铵代替，氯化钙用硝酸钙代替；

2)用皮棉代替卡拉胶；

3)各母液及白糖减少用量10-30％

4)100℃两分钟以上(可不需要熬煮)，直接灌装，240型培养瓶灌装量为20-25ml；

5)扩繁：母苗剪切1-2个叶片一段，剪切完成后不需要扦插，轻轻打散摇匀即可，也不用管茎段的朝向。

组织培养：组织培养的光照强度为3300Lx，前5天光照10±1个小时，后改为16±2个小时；组织培养的温度为：光照期间23±1℃，黑暗期间17±1℃；培养15-20天即可成苗定植。

优选的，步骤1)中所述氯化铵用量为：1300±200毫克/升，硝酸钙用量为：350毫克/升。

优选的，步骤2)中所述240型培养瓶用皮棉0.15±0.05克。

优选的，步骤3)中所述母液用量减少20％±0.05。

优选的，步骤4)中所述240型培养瓶灌装量为20-25ml，减少用量25％。

优选的，步骤5)中所述每瓶接种25个茎段，不需要扦插。

嫩芽形成后采用生长调节素赤霉素100-500mg/1000mL溶液喷洒嫩芽。赤霉素100或500mg/1000mL溶液中配制有5或15wt％的酒精。

本发明的有益效果：本发明所述方法通过调整培养基配方、皮棉代替卡拉胶，快速制作培养基，同时减少接种过程中的扦插环节，提高接种速度，每个工人由原来的每天接种200瓶提高到300瓶以上；加之由于液体培养的营养元素的良好流动性，使得组培苗生长迅速，缩短成苗期，原来需要20-25天，现在只需要15天左右。可实现马铃薯微型薯生产定植用苗的批量快速繁殖，同时节省药品和电能，降低成本33％，产量增加了30％。接种效率提高主要是因为减少一道工序——扦插。培养基制作效率提高是因为不需要熬煮培养基，节省时间。培养时间缩短是因为用皮棉代替卡拉胶后，就相当于是水培了，有卡拉胶就是固体培养。水培的话，营养元素更易于吸收、长的快。总体而言，本发明组培方法其实就是液体培养。现有技术是固体培养，就是用卡拉胶或琼脂等凝胶剂熬煮，耗时很多。但是液体培养有个缺陷，就是不能辨别内生菌污染，所以本方法只能用于定植前的最后一次扩繁。也满足了定植时期大量用苗的需求；带来的另一优点是：工人的工作量的减少，固体培养基每天210瓶，液体培养基每天330瓶。能够降低成本。本发明可以快速满足马铃薯脱毒微型薯生产过程中的季节性定植用苗，较少的接种人员完成大面积的生产用苗。

具体实施方式

本发明提供了一种马铃薯脱毒微型薯生产过程中定植用组培苗的快速扩繁的组培方法，包括以下步骤：

1)培养基配方的调整；2)用皮棉替代卡拉胶；3)母液用量减少；4)培养基制作灌装；5)接种扩繁；6)组织培养。

本发明中所述的供生产的马铃薯脱毒微型薯品种是目前国内主要的流通品种，具体的供试品种：大西洋、荷兰薯、尤金885、中薯五号、226。

本发明首先对培养基配方进行调整，以适应现在的市场供需情况。现在市场是严禁销售硝酸铵(一类危险品)，大批量生产很难买到，所以采用氯化铵代替，但要考虑到氯离子对马铃薯的伤害和马铃薯对氯离子的耐受度，因此将其它元素中的氯化钙改为硝酸钙你，通过多组试验来确定用量。本发明中所述的用皮棉代替卡拉胶，一般来说培养基都是固体的，用卡拉胶、琼脂等做凝胶剂，一是用来象土壤一样固定马铃薯脱毒苗的茎段，二是方便查看微生物污染。而本发明是针对定植阶段的生产用苗，培养基采用液体培养基，皮棉(棉花)只是起到一个托浮茎段的作用，使得茎段不淹没在营养液中，减少玻璃苗的数量。240型培养瓶用皮棉0.15克。

本发明中所述的减少培养基各个母液的用量，是基于固体培养基中营养成分流动性差，不利于吸收，利用率低；液体培养基营养成分流动性好，利用率高，故适当减少，在满足生长所需的情况下降低成本。经过多次试验确定用量为减少20％。

本发明由于用皮棉代替卡拉胶，故培养基制作不需要熬煮，节省大量时间(一锅50升的固体培养基需要熬煮2个小时)。在本发明中，培养基的灌装量比固体减少四分之一，240型培养瓶25ml即可，使得营养液刚刚浸没皮棉。

本发明的接种过程中，剪切好的茎段不需要用镊子一个个地扦插，只要轻轻打散或摇动，均匀的分布在棉花上就可以，也不必管茎段正面是否朝上，极大提高了接种速度。

本发明在茎段组培初期只给予10个小时的光照，就可以满足所需。嫩芽形成后在给予16个小时的光照。光照强度3300lx。

本发明组培的温度，光周期给予23℃，黑暗前给予17℃。

本发明的组培时间为15-20天，可以达到定植的要求。

下面结合实施例对本发明提供的组培方法进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

具体实施方式

本发明提供了一种马铃薯脱毒微型薯生产过程中定植用组培苗的快速扩繁的组培方法，包括以下步骤：

1)培养基配方的调整；2)用皮棉替代卡拉胶；3)母液用量减少；4)培养基制作灌装；5)接种扩繁；6)组织培养。

实施例中

典型的改进MS培养基如下述配方：

Claims (7)

1.一种马铃薯脱毒微型薯生产过程中定植用组培苗的快速扩繁的组培方法，其特征是，包括培养基配方的调整；母液用量减少；培养基制作灌装；接种扩繁；组织培养；

具体以下步骤：

1)将MS培养基配方里面的硝酸铵用氯化铵代替，氯化钙用硝酸钙代替；

2)用皮棉代替卡拉胶；

3)各母液及白糖减少用量10-30％；

4)100℃两分钟以上，直接灌装，240型培养瓶灌装量为20-25ml；

5)扩繁：母苗剪切1-2个叶片一段，剪切完成后不需要扦插，轻轻打散摇匀；

组织培养：组织培养的光照强度为3300Lx，前5天光照10±1个小时，后改为16±2个小时；组织培养的温度为：光照期间23±1℃，黑暗期间17±1℃；培养15-20天即可成苗定植。

2.根据权利要求1所述的组培方法，其特征是，步骤1)中所述氯化铵用量为：1300±200毫克/升，硝酸钙用量为：350毫克/升。

3.根据权利要求1所述的组培方法，其特征是，步骤2)中所述240型培养瓶用皮棉0.15±0.05克。

4.根据权利要求1所述的组培方法，其特征是，步骤3)中所述母液用量减少20％±0.05。

5.根据权利要求1所述的组培方法，其特征是，步骤4)中所述240型培养瓶灌装量为20-25ml，减少用量25％。

6.根据权利要求1所述的组培方法，其特征是，步骤5)中所述每瓶接种25个茎段，不需要扦插。

7.根据权利要求1所述的组培方法，其特征是，嫩芽形成后采用生长调节素赤霉素100-500mg/1000mL溶液喷洒嫩芽。