CN111904975A - 一种藻类多糖组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本申请属于免疫调节的技术领域，尤其涉及一种藻类多糖组合物及其制备方法和应用。本申请提供了一种藻类多糖组合物，由螺旋藻多糖、石莼多糖、海带多糖、公牛藻多糖和紫球藻多糖组成。按照质量百分比计算，所述藻类多糖组合物由以下原料组成；22％‑26％的螺旋藻多糖；36％‑40％的石莼多糖；12％‑16％的海带多糖；14％‑16％的公牛藻多糖；6％‑12％的紫球藻多糖。本申请提供了一种藻类多糖组合物及其制备方法，提供了一种无毒无副作用的、质优价廉的可调节免疫的产品。
Description
技术领域
本申请属于免疫调节的技术领域，尤其涉及一种藻类多糖组合物及其制备方法和应用。
背景技术
免疫功能系统与人体其它功能系统(如神经系统、内分泌系统等)相互制约、相互影响，共同维持生命运动中的生理平衡，是机体在长期进化过程中，获得的“识别自身、排斥异己”的重要生理功能，这种功能的调节作用就叫做免疫调节作用。
可见，免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物(病毒、细菌等)，处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。而免疫力低下使得机体的防御能力减弱，从而不能正常发挥保护作用，在此情况下，极易导致细菌、病毒、真菌等感染，因此免疫力低下的表现就是容易生病。
近年来，随着人们生活节奏的加快，人们的生活、工作方式和环境发生了巨大的改变，生活压力逐渐增大，从而使得亚健康状态的人群所占的比例日趋增高。亚健康状态最主要的特征就是免疫功能的失调，例如免疫T细胞、B细胞的比例失衡，以及固有免疫功能减低或者失调等，从而导致人体抗病能力明显下降，通过研究表明，免疫功能失调与慢性炎症、肿瘤、自身免疫性疾病等疾病密切相关，严重增加了疾病的易感性，危害人类健康，同时给家庭和社会发展带来沉重的经济负担。
目前人们使用调节免疫的方法很多，但各有优势又各有不足，所以研究开发一种无毒无副作用的、质优价廉的可调节免疫的产品有其巨大社会价值和经济价值。
发明内容
有鉴于此，本申请提供了一种藻类多糖组合物及其制备方法，提供了一种无毒无副作用的、质优价廉的可调节免疫的产品。
本申请第一方面提供了一种藻类多糖组合物，由螺旋藻多糖、石莼多糖、海带多糖、公牛藻多糖和紫球藻多糖组成。
作为优选，按照质量百分比计算，所述藻类多糖组合物由以下原料组成；
作为优选，所述螺旋藻多糖的制备方法包括：
将螺旋藻生物质与碱液混合反应，然后除去所述螺旋藻生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得螺旋藻多糖。
具体的，所述螺旋藻多糖的制备方法中，所述螺旋藻生物质可以为螺旋藻粉或者螺旋藻泥；所述碱液为浓度为1.6％的氢氧化钠溶液；除去所述螺旋藻生物质的残渣采用离心或者筛绢过滤方法；所述醇沉为通过添加6倍体积的乙醇的沉淀方法；所述干燥为喷雾干燥或者低温冷冻干燥。
作为优选，所述石莼多糖的制备方法包括：
将石莼生物质与水混合加热反应，然后除去所述石莼生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得石莼多糖。
具体的，所述石莼多糖的制备方法中，所述石莼生物质为干石莼或者湿石莼；所述加热反应的温度为80℃，所述加热反应的时间为4小时；除去所述石莼生物质的残渣采用筛绢过滤方法；所述醇沉为添加5倍体积的乙醇的沉淀方法；所述干燥为喷雾干燥或者低温冷冻干燥。
作为优选，所述海带多糖的制备方法包括：
将海带生物质与碱液混合反应，然后除去所述海带生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得海带多糖。
具体的，所述海带多糖的制备方法中，所述海带生物质为干海带或者湿海带；所述碱液为碳酸氢钠溶液浓度为0.5‰-1‰，所述混合反应的温度为90℃，所述混合反应的时间为4小时；除去所述海带生物质的残渣采用筛绢过滤方法；所述醇沉为添加4倍体积的乙醇的沉淀方法；所述干燥为喷雾干燥或者低温冷冻干燥。
作为优选，所述公牛藻多糖的制备方法包括：
将公牛藻生物质与醇溶液混合，得到预处理公牛藻生物质；
将所述预处理公牛藻生物质与碱液混合反应，然后除去所述预处理公牛藻生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得公牛藻多糖。
具体的，所述公牛藻为南极海茸(Durvillaea antarctica)。
具体的，所述公牛藻多糖的制备方法中，所述预处理公牛藻生物质的制备方法为将70％体积分数的乙醇与公牛藻生物质混合浸泡18-24小时；所述碱液为碳酸氢钠溶液浓度为1‰，所述混合反应的温度为95℃，所述混合反应的时间为4小时；所述醇沉为添加5倍体积的70％乙醇的沉淀方法；所述干燥为喷雾干燥或者低温冷冻干燥。
作为优选，所述紫球藻多糖的制备方法包括：
紫球藻与培养基混合培养，然后除去所述紫球藻，得到提取液；将所述提取液进行脱盐处理，得到上清液，将所述上清液依次醇沉和干燥处理，制得紫球藻多糖。
作为优选，所述培养基包括天然海水，NaNO3(1.5g/L)，K2HPO4·3H2O(40mg/L)，NaHCO3(2.0g/L)，CaCl2·2H2O(36mg/L)，FeCl3·6H2O(3.15mg/L)，柠檬酸(6.0mg/L)，EDTANa2·2H2O(4.36mg/L)，H3BO3(2.86mg/L)，MnCl2·4H2O(1.18mg/L)，ZnSO4·7H2O(0.22mg/L)，Na2MoO4·2H2O(0.39mg/L)，Co(NO3)2·6H2O(0.05mg/L)和CuSO4·5H2O(0.08mg/L)。
具体的，所述紫球藻多糖的制备方法中，所述混合培养的条件为培养温度25℃，光照强度250μmol photons/(m2 s)。所述脱盐为利用超滤进行脱盐处理，所述醇沉为添加4倍体积的70％体积分数乙醇的沉淀方法；所述干燥为喷雾干燥或者低温冷冻干燥。
本申请第二方面提供了所述藻类多糖组合物的制备方法，包括以下步骤：
将螺旋藻多糖、石莼多糖、海带多糖、公牛藻多糖和紫球藻多糖混合，制得藻类多糖组合物；
按照质量百分比计算，所述藻类多糖组合物由以下原料组成；
作为优选，所述螺旋藻多糖的制备方法包括：将螺旋藻生物质与碱液混合反应，然后除去所述螺旋藻生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得螺旋藻多糖；
所述石莼多糖的制备方法包括：将石莼生物质与水混合加热反应，然后除去所述石莼生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得石莼多糖；
所述海带多糖的制备方法包括：将海带生物质与碱液混合反应，然后除去所述海带生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得海带多糖；
所述公牛藻多糖的制备方法包括：将公牛藻生物质与醇溶液混合，得到预处理公牛藻生物质；将所述预处理公牛藻生物质与碱液混合反应，然后除去所述预处理公牛藻生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得公牛藻多糖；
所述紫球藻多糖的制备方法包括：紫球藻与培养基混合培养，然后除去所述紫球藻，得到提取液；将所述提取液进行脱盐处理，得到上清液，将所述上清液依次醇沉和干燥处理，制得紫球藻多糖。
本申请第三方面提供了所述藻类多糖组合物或所述的制备方法制得的藻类多糖组合物在增强免疫活性中的应用。
本申请第四方面提供了功能性食品，包括所述藻类多糖组合物或所述的制备方法制得的藻类多糖组合物。
本申请第五方面提供了保健品，包括所述藻类多糖组合物或所述的制备方法制得的藻类多糖组合物。
本申请第六方面提供了免疫调节剂，包括所述藻类多糖组合物或所述的制备方法制得的藻类多糖组合物。
本申请发现大多数单种藻多糖的免疫活性较弱，而通过物理、化学、酶等方式处理，又会使藻多糖的结构发生改变，导致其某些独有的特性消失，如酸处理后导致藻多糖粘度降低。本申请将特定种类的藻多糖进行复配后，不进行任何破坏藻多糖结构的处理，通过这种复配可以协同的显著提高单种藻多糖的免疫活性，具体体现在提高巨噬细胞的吞噬能力、提高巨噬细胞的NO分泌能力、提高巨噬细胞的IL-6的分泌能力、提高巨噬细胞的TNF-alpha的分泌能力。可见，本申请的藻类多糖组合物具有较好的免疫活性，具有开发功能性食品、保健品和药品的潜力。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单的介绍。
图1为本申请实施例提供石莼多糖、海带多糖、公牛藻多糖、螺旋藻多糖、紫球藻多糖和组合多糖对巨噬细胞RAW264.7增殖能力的结果图。
具体实施方式
本申请提供了一种藻类多糖组合物及其制备方法，提供了一种无毒无副作用的、质优价廉的可调节免疫的产品。
下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
其中，本发明提供一种藻类多糖组合物，本申请的藻类多糖组合物由螺旋藻多糖、石莼多糖、海带多糖、公牛藻多糖和紫球藻多糖混合而成，它们的质量百分比分别为螺旋藻多糖22％-26％、石莼多糖36％-40％、海带多糖12％-16％、公牛藻多糖14％-16％、紫球藻多糖6％-12％。
螺旋藻多糖由螺旋藻生物质提取获得，包括以下制备过程：碱性溶液常温提取、除螺旋藻渣、提取液超滤浓缩、醇沉、干燥。螺旋藻生物质可以为螺旋藻粉或者螺旋藻泥；碱性溶液为浓度为1.6％的氢氧化钠溶液；除螺旋藻渣主要通过离心或者筛绢过滤实现；醇沉主要通过添加6倍体积的乙醇实现；干燥可以为喷雾干燥或者低温冷冻干燥。
石莼多糖由石莼生物质提取获得，包括以下制备过程：热水提取、除石莼渣、提取液超滤浓缩、醇沉、干燥。石莼生物质可以为干石莼或者湿石莼；80℃加热提取时间为4小时；除石莼渣主要通过筛绢过滤实现；醇沉主要通过添加5倍体积的乙醇实现；干燥可以为喷雾干燥或者低温冷冻干燥。
海带多糖由海带生物质提取获得，包括以下制备过程：碳酸氢钠溶液提取、除海带渣、超滤浓缩、醇沉、干燥。海带生物质可以为干海带或者湿海带；碳酸氢钠溶液浓度为0.5‰-1‰，提取温度为90℃，提取时间为4小时；除海带渣主要通过筛绢过滤实现；醇沉主要通过添加4倍体积的乙醇实现；干燥可以为喷雾干燥或者低温冷冻干燥。
公牛藻多糖由公牛藻生物质提取获得，包括以下过程：公牛藻生物质预处理、碳酸氢钠溶液提取、除公牛藻渣、超滤浓缩、上清液醇沉、干燥等步骤获得。公牛藻生物质预处理过程为70％的乙醇浸泡18-24小时；碳酸氢钠溶液浓度为1‰，提取温度为95℃，提取时间为4小时；醇沉主要通过添加5倍体积的70％乙醇实现；干燥可以为喷雾干燥或者低温冷冻干燥。
紫球藻多糖来源于紫球藻培养过程中的胞外分泌物。紫球藻培养液离心去除藻细胞后、脱盐、上清液醇沉、干燥。利用下述培养基培养紫球藻，配方如下：天然海水，NaNO3(1.5g/L)，K2HPO4·3H2O(40mg/L)，NaHCO3(2.0g/L)，CaCl2·2H2O(36mg/L)，FeCl3·6H2O(3.15mg/L)，柠檬酸(6.0mg/L)，EDTANa2·2H2O(4.36mg/L)，H3BO3(2.86mg/L)，MnCl2·4H2O(1.18mg/L)，ZnSO4·7H2O(0.22mg/L)，Na2MoO4·2H2O(0.39mg/L)，Co(NO3)2·6H2O(0.05mg/L)和CuSO4·5H2O(0.08mg/L)，培养温度25度，光照强度250μmol photons/(m2 s)。利用超滤进行脱盐处理，醇沉主要通过添加4倍体积的70％乙醇实现；干燥可以为喷雾干燥或者低温冷冻干燥。
以下实施例所用原料或试剂均为市售或自制。
实施例1
本申请实施例提供了石莼多糖的制备方法，包括以下步骤：
将石莼加入适量的水浸泡30分钟，清水冲洗3次。
将干净的石莼与去离子水混合加热煮沸提取6小时，其中石莼：水的质量比为1:10，通过筛绢过滤去除石莼残渣，收集滤液，滤液高速离心去除杂质，得到提取液，将其超滤浓缩至较小体积，得到浓缩液，按浓缩液：无水乙醇的体积比为1:5进行醇沉处理，静置30分钟后收集沉淀，通过真空冷冻干燥得石莼多糖。
实施例2
本申请实施例提供了海带多糖的制备方法，包括以下步骤：
将海带浸泡20分钟，清水冲洗3次。
将干净的海带与碳酸氢钠溶液混合加热提取，其中碳酸氢钠溶液的浓度为1‰，加热提取的条件为90℃提取4小时，海带：碳酸氢钠溶液的质量比为1:15，通过筛绢过滤去除海带残渣，收集滤液，滤液超滤浓缩至较小体积，得到浓缩液，按浓缩液：无水乙醇的体积比为1:4进行醇沉处理，静置30分钟后收集沉淀，通过真空冷冻干燥的海带多糖。
实施例3
本申请实施例提供了公牛藻多糖的制备方法，包括以下步骤：
将公牛藻剪碎用水浸泡20分钟，用70％的酒精脱色24小时。过滤收集藻片，用清水冲洗干净，得到预处理公牛藻。
将预处理公牛藻与碳酸氢钠溶液混合加热提取，碳酸氢钠溶液的浓度为1％，加热提取的条件为95℃提取4小时，预处理公牛藻：碳酸氢钠溶液的质量比为1:20，通过筛绢过滤去除公牛藻残渣，收集滤液，超滤浓缩至较小体积，得到浓缩液，按浓缩液：70％乙醇的体积比为1:5进行醇沉处理，静置30分钟后收集沉淀，沉淀用75％的乙醇冲洗3次，通过真空冷冻干燥的公牛藻多糖。
实施例4
本申请实施例提供了螺旋藻多糖的制备方法，包括以下步骤：
将螺旋藻粉与氢氧化钠溶液混合常温提取，氢氧化钠溶液的浓度为1.6％，常温提取4小时，螺旋藻粉：氢氧化钠溶液的质量比为1:20，高速离心去除螺旋藻残渣，收集滤液，超滤浓缩至较小体积，得到浓缩液，按浓缩液：无水乙醇的体积比为1:6进行醇沉处理，静置30分钟后收集沉淀，用95％乙醇浸泡脱色，脱色后过滤收集沉淀，通过真空冷冻干燥的螺旋藻多糖。
实施例5
本申请实施例提供了紫球藻多糖的制备方法，包括以下步骤：
紫球藻与培养基混合培养，培养温度25℃，培养时间20天，光照强度250μmolphotons/(m2 s)。培养20天后，通过5000转/分钟离心10分钟去除紫球藻细胞，收集上清液，上清液浓缩至较小体积，得到浓缩液，浓缩液加入4倍体积的乙醇，得到絮状物，捞起絮状物利用去离子水复溶，利用透析袋进行脱盐处理，加入4倍体积的乙醇进行醇沉处理，收集絮状物，通过真空冷冻干燥的紫球藻多糖。
培养基的配方如下：天然海水，NaNO3(1.5g/L)，K2HPO4·3H2O(40mg/L)，NaHCO3(2.0g/L)，CaCl2·2H2O(36mg/L)，FeCl3·6H2O(3.15mg/L)，柠檬酸(6.0mg/L)，EDTANa2·2H2O(4.36mg/L)，H3BO3(2.86mg/L)，MnCl2·4H2O(1.18mg/L)，ZnSO4·7H2O(0.22mg/L)，Na2MoO4·2H2O(0.39mg/L)，Co(NO3)2·6H2O(0.05mg/L)和CuSO4·5H2O(0.08mg/L)。
实施例6
本申请实施例提供了实施例1～实施例5制得的石莼多糖、海带多糖、公牛藻多糖、螺旋藻多糖、紫球藻多糖和组合多糖对巨噬细胞RAW264.7增殖能力的影响试验，步骤如下：
分别称取实施例1～实施例5的螺旋藻多糖24mg、石莼多糖37mg、海带多糖14mg、公牛藻多糖15mg、紫球藻多糖10mg充分混合，制得藻类多糖组合物，图1标记为组合多糖。
实施例1～实施例5制得的螺旋藻多糖、石莼多糖、海带多糖、公牛藻多糖、紫球藻多糖和藻类多糖组合物在两种浓度条件下(500μg/mL和250μg/mL)对巨噬细胞RAW264.7增殖能力的影响(与对照相比)，结果如图1所示。藻类多糖组合物在500μg/mL和250μg/mL条件下，均提高了巨噬细胞的增殖能力，在250μg/mL藻类多糖组合物对巨噬细胞的增殖能力分别比螺旋藻多糖、石莼多糖、海带多糖、公牛藻、紫球藻多糖提高了72.5％、64.3％、68.7％、64.3％、68.1％；在500μg/mL藻类多糖组合物对巨噬细胞的增殖能力分别比螺旋藻多糖、石莼多糖、海带多糖、公牛藻、紫球藻多糖提高了14.1％、7.1％、14.8％、24.2％、43.4％。可见，本申请的藻类多糖组合物的具有比单种藻多糖更好的免疫活性。
实施例7
本申请实施例提供了不同的藻类多糖组合物样品的免疫功能试验，具体步骤包括：
1、按照表1和表2的添加量将实施例1～实施例5制得的石莼多糖、海带多糖、公牛藻多糖、螺旋藻多糖、紫球藻多糖充分混合，制得样品1～样品7。
表1
| 编号 | 螺旋藻多糖 | 石莼多糖 | 海带多糖 | 公牛藻多糖 | 紫球藻多糖 |
| 样品1 | 22 mg | 36mg | 16mg | 14mg | 12mg |
| 样品2 | 26mg | 40mg | 12mg | 16mg | 6mg |
| 样品3 | 24mg | 37mg | 14mg | 15mg | 10mg |
表2
| 编号 | 螺旋藻多糖 | 石莼多糖 | 海带多糖 | 公牛藻多糖 | 紫球藻多糖 | 褐藻多糖 |
| 样品4 | 24 mg | 37mg | 14mg | 0mg | 10mg | 15mg |
| 样品5 | 15mg | 50mg | 10mg | 10mg | 15mg | 0mg |
| 样品6 | 34mg | 20mg | 18mg | 24mg | 4mg | 0mg |
| 样品7 | 14mg | 38mg | 14mg | 20mg | 14mg | 0mg |
2、分别称取10mg的样品1～样品7溶于100mL无菌水中，配置成浓度为100μg/mL的溶液，利用0.22μm无菌过滤器进行除菌处理，制得的溶液标记为样品1溶液～样品7溶液，评价巨噬细胞Raw264.7中性红吞噬能力、NO分泌能力、IL-6分泌能力及TNF-alpha分泌能力。
(1)巨噬细胞Raw264.7中性红吞噬试验
将细胞悬液调成0.5×105cells/mL浓度铺到96孔板中，每孔100μL细胞悬液，37℃、50mL/L CO2温育箱培养。待细胞贴壁后，弃上清，分别加入100μg/mL的样品1溶液～样品7溶液，同时设若干细胞对照孔和脂多糖(4μg/mL)的阳性对照孔。37℃、50mL/L CO2温育箱培养24小时后，弃上清，每孔加200μL的0.1％中性红溶液，37℃、50mL/L CO2温育箱培养1小时，将板取出，每孔用PBS洗两次后，每孔加入200μL的细胞裂解液(1％冰乙酸，49％水，50％无水乙醇)，常温24小时后测A540nm值。
(2)巨噬细胞Raw264.7 NO分泌量的检测
将细胞悬液调成0.5×105cells/mL浓度铺到96孔板中，每孔100μL细胞悬液，37℃、50mL/L CO2温育箱培养。待细胞贴壁后，弃上清，分别加入100μg/mL的样品1溶液～样品7溶液，同时设若干细胞对照孔和脂多糖(4μg/mL)的阳性对照孔。37℃、50mL/L CO2温育箱培养24小时后，吸取100μL上清液进行检测。进行三次重复实验。
(3)巨噬细胞Raw264.7培养上清液中IL-6及TNF-alpha的测定
将细胞悬液调成0.5×105cells/mL浓度铺到96孔板中，每孔100μL细胞悬液，37℃、50mL/L CO2温育箱培养。待细胞贴壁后，弃上清，分别加入100μg/mL的样品1溶液～样品7溶液，同时设若干细胞对照孔和脂多糖(4μg/mL)的阳性对照孔。37℃、50mL/L CO2温育箱培养24小时后，吸取100μL上清液进行检测。
从表3可知，样品1～样品3的中性红吞噬指数平均值分别比脂多糖和正常细胞提高11.9％和30.3％，显著高于样品4～样品7；样品1～样品3的NO分泌量平均值分别比脂多糖和正常细胞提高3.90％和4.55％，高于样品4～样品7；样品1～样品3的IL-6分泌量平均值分别比脂多糖和正常细胞提高53.42％和261.30％，显著高于样品4～样品7；样品1～样品3的TNF-alpha分泌量平均值比正常细胞提高129.1％，显著比样品4～样品7高，说明样品1～样品3的藻类多糖组合物具有较好的免疫增强活性。
表3
对比例1
本申请对比例提供了采用不同的制备方法制得的海带多糖、公牛藻多糖和螺旋藻多糖制得的藻类多糖组合物的免疫功能试验，具体步骤包括：
1、制备石莼多糖、海带多糖、公牛藻多糖、螺旋藻多糖和紫球藻多糖。
1.1、石莼多糖的制备方法与实施例1相同；
1.2、海带多糖的制备方法与实施例2相似，区别在于将实施例2中海带多糖的提取溶剂(1‰的碳酸氢钠溶液)替换为去离子水，其余条件与实施例2相同，制备获得海带多糖；
1.3、公牛藻多糖的制备方法与实施例3相似，区别在于将实施例3中公牛藻多糖的提取溶剂(1‰的碳酸氢钠溶液)替换为去离子水，其余条件与实施例3相同，制备获得公牛藻多糖；
1.4、螺旋藻多糖的制备方法与实施例4相似，区别在于将实施例4中螺旋藻多糖的提取溶剂(1.6％的氢氧化钠溶液)替换为去离子水，其余条件与实施例4相同，制备获得螺旋藻多糖；
1.5、紫球藻多糖的制备方法与实施例5相同。
2、分别称取步骤1中的螺旋藻多糖24mg、石莼多糖37mg、海带多糖14mg、公牛藻多糖15mg、紫球藻多糖10mg充分混合，获得对照组合物。称取10mg对照组合物溶于100mL无菌水中，配置成浓度为100μg/mL的对照组合物溶液，利用0.22μm无菌过滤器进行除菌处理，评价巨噬细胞Raw264.7中性红吞噬能力、NO分泌能力、IL-6分泌能力及TNF-alpha分泌能力。结果如表4所示，由表4可知，对照组合物的中性红吞噬能力、NO分泌量、IL-6分泌量、TNF-alpha分泌量及巨噬细胞RAW264.7增殖能力比样品3降低了26.36％、5.95％、44.44％、49.62％、52.63％，说明样品3的藻类多糖组合物具有比对照组合物更好的免疫活性。
表4
通过以上实施例和对比例可知，将石莼多糖、海带多糖、公牛藻多糖、螺旋藻多糖和紫球藻多糖进行特定的复配，制备藻类多糖组合物，该组合物具有优秀的免疫活性，具有开发功能性食品、保健品和药品的潜力。
以上所述仅是本申请的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本申请的保护范围。
Claims (10)
1.一种藻类多糖组合物，其特征在于，由螺旋藻多糖、石莼多糖、海带多糖、公牛藻多糖和紫球藻多糖组成。
2.根据权利要求1所述的藻类多糖组合物，其特征在于，按照质量百分比计算，所述藻类多糖组合物由以下原料组成；
3.根据权利要求1所述的藻类多糖组合物，其特征在于，所述螺旋藻多糖的制备方法包括：
将螺旋藻生物质与碱液混合反应，然后除去所述螺旋藻生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得螺旋藻多糖。
4.根据权利要求1所述的藻类多糖组合物，其特征在于，所述石莼多糖的制备方法包括：
将石莼生物质与水混合加热反应，然后除去所述石莼生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得石莼多糖。
5.根据权利要求1所述的藻类多糖组合物，其特征在于，所述海带多糖的制备方法包括：
将海带生物质与碱液混合反应，然后除去所述海带生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得海带多糖。
6.根据权利要求1所述的藻类多糖组合物，其特征在于，所述公牛藻多糖的制备方法包括：
将公牛藻生物质与醇溶液混合，得到预处理公牛藻生物质；
将所述预处理公牛藻生物质与碱液混合反应，然后除去所述预处理公牛藻生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得公牛藻多糖。
7.根据权利要求1所述的藻类多糖组合物，其特征在于，所述紫球藻多糖的制备方法包括：
紫球藻与培养基混合培养，然后除去所述紫球藻，得到提取液；将所述提取液进行脱盐处理，得到上清液，将所述上清液依次醇沉和干燥处理，制得紫球藻多糖。
8.一种藻类多糖组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将螺旋藻多糖、石莼多糖、海带多糖、公牛藻多糖和紫球藻多糖混合，制得藻类多糖组合物；
按照质量百分比计算，所述藻类多糖组合物由以下原料组成；
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述螺旋藻多糖的制备方法包括：将螺旋藻生物质与碱液混合反应，然后除去所述螺旋藻生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得螺旋藻多糖；
所述石莼多糖的制备方法包括：将石莼生物质与水混合加热反应，然后除去所述石莼生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得石莼多糖；
所述海带多糖的制备方法包括：将海带生物质与碱液混合反应，然后除去所述海带生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得海带多糖；
所述公牛藻多糖的制备方法包括：将公牛藻生物质与醇溶液混合，得到预处理公牛藻生物质；将所述预处理公牛藻生物质与碱液混合反应，然后除去所述预处理公牛藻生物质的残渣，得到提取液；将所述提取液依次超滤浓缩，醇沉和干燥处理，制得公牛藻多糖；
所述紫球藻多糖的制备方法包括：紫球藻与培养基混合培养，然后除去所述紫球藻，得到提取液；将所述提取液进行脱盐处理，得到上清液，将所述上清液依次醇沉和干燥处理，制得紫球藻多糖。
10.权利要求1至7任意一项所述的藻类多糖组合物或权利要求8或9所述的制备方法制得的藻类多糖组合物在增强免疫活性中的应用。
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