CN111886015A - 用于同种异体嵌合抗原受体t细胞的给药的方法和组合物 - Google Patents

用于同种异体嵌合抗原受体t细胞的给药的方法和组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN111886015A
CN111886015A CN201880084743.8A CN201880084743A CN111886015A CN 111886015 A CN111886015 A CN 111886015A CN 201880084743 A CN201880084743 A CN 201880084743A CN 111886015 A CN111886015 A CN 111886015A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cells
dose
car
cell
subject
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201880084743.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111886015B (zh
Inventor
C.A.康托
A.齐奈
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Laboratoires Servier SAS
Allogene Therapeutics Inc
Original Assignee
Laboratoires Servier SAS
Allogene Therapeutics Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Laboratoires Servier SAS, Allogene Therapeutics Inc filed Critical Laboratoires Servier SAS
Publication of CN111886015A publication Critical patent/CN111886015A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111886015B publication Critical patent/CN111886015B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
    • A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/664—Amides of phosphorus acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A61K38/1774—Immunoglobulin superfamily (e.g. CD2, CD4, CD8, ICAM molecules, B7 molecules, Fc-receptors, MHC-molecules)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001102—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001102—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A61K39/001111—Immunoglobulin superfamily
    • A61K39/001112—CD19 or B4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
    • A61K39/4631—Chimeric Antigen Receptors [CAR]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
    • A61K39/4643—Vertebrate antigens
    • A61K39/4644—Cancer antigens
    • A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A61K39/464411—Immunoglobulin superfamily
    • A61K39/464412—CD19 or B4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/70517—CD8
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70578—NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2893—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD52
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3061—Blood cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
    • C12N5/0636—T lymphocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/515—Animal cells
    • A61K2039/5158—Antigen-pulsed cells, e.g. T-cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/80—Vaccine for a specifically defined cancer
    • A61K2039/804—Blood cells [leukemia, lymphoma]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
    • A61K2239/10—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the structure of the chimeric antigen receptor [CAR]
    • A61K2239/23—On/off switch
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
    • A61K2239/26—Universal/off- the- shelf cellular immunotherapy; Allogenic cells or means to avoid rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
    • A61K2239/31—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
    • A61K2239/38—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
    • A61K2239/46—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the cancer treated
    • A61K2239/48—Blood cells, e.g. leukemia or lymphoma
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/33—Fusion polypeptide fusions for targeting to specific cell types, e.g. tissue specific targeting, targeting of a bacterial subspecies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2506/00—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells
    • C12N2506/11—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from blood or immune system cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells
    • C12N2510/02—Cells for production

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

本公开内容涉及用于治疗对疾病(诸如癌症)易感或或诊断出疾病(诸如癌症)的人患者的剂量。提供了用于施用嵌合抗原受体(CAR)‑T细胞的方法。还提供了用于用在所述方法中的组合物和制品。

Description

用于同种异体嵌合抗原受体T细胞的给药的方法和组合物
相关申请的交叉引用
本申请要求2018年10月24日提交的美国临时申请系列号62/750,215、2018年8月9日提交的美国临时申请系列号62/716,898和2017年10月31日提交的美国临时申请系列号62/579,426的优先权，它们中的每一篇通过引用整体并入本文用于所有目的。
技术领域
本公开内容涉及用于治疗障碍(包括增殖性障碍和免疫障碍)的治疗方案。主题治疗方案包括施用一剂或多剂包含同种异体嵌合抗原受体T细胞的免疫细胞。主题治疗方案可以用于预防和/或治疗包括癌症在内的障碍。
电子提交的文本文件的描述
通过电子方式提交的文本文件的内容通过引用整体并入：序列表的计算机可读形式副本(文件名：ALGN-012-03WO Sequence Listing.txt，记录日期为2018年10月30日，文件大小为39,283字节)。
背景技术
使用表达重组受体的经工程改造的细胞，诸如嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，可采用多种方法进行过继细胞疗法。但是，尚不清楚在人类患者中有效治疗疾病并实现减轻所需的同种异体CAR-T细胞的剂量。本文提供了用于向患者给药和重复给药同种异体CAR-T细胞的方法、组合物和制品。公开的方法降低了毒性风险和/或增加了效力，例如通过增加受试者向所施用的细胞的暴露(例如，通过改善所施用的细胞的扩增和/或持久性)。
发明内容
本公开内容涉及用于治疗障碍(诸如癌症)的治疗方案。更具体地，本公开内容涉及通过施用同种异体CAR-T-细胞来治疗障碍(诸如癌症)的治疗方案。所述方法的特征(包括给药时机和所施用的细胞的数目)提供了多种优点，诸如提高的效力和/或较低的毒性，例如由于受试者向所施用的细胞的暴露增加。
提供了向受试者施用CAR-T细胞的方法，例如为了治疗受试者的疾病和/或障碍。所述方法通常包括施用单剂量或多剂量的此类细胞，和/或向先前已经用先前(例如，第一)剂量的此类细胞治疗的受试者施用后续剂量。还提供了用于这类方法的细胞、组合物和制品。
在某些实施方案中，所述方法包括治疗患有难治性和/或复发性CD19+B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的成年受试者，包括给所述受试者施用至少一剂同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其包含抗-人CD194-1BB/CD3ζCAR(例如UCART19(CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞)，其中所述至少一剂选自约6x105细胞/剂，约6x106细胞/剂，约6-8x107细胞/剂，和约1.8-2.4x108细胞/剂。
在某些实施方案中，所述方法包括治疗患有难治性和/或复发性CD19+B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的儿科受试者，包括给所述受试者施用至少一剂同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其包含抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR(例如UCART19(CD19CAR/RQR8+-TCRαβ-_T-细胞)或UCART19(CD19CAR/R2+_TCRαβ-_T-细胞)或UCART19(CD19CAR/TCRαβ-_T-细胞)，其中所述至少一剂是约2-8x107细胞/剂。
在某些实施方案中，所述方法包括治疗患有难治性和/或复发性非霍奇金淋巴瘤(例如，大B细胞性淋巴瘤或滤泡性淋巴瘤)的受试者，包括给所述受试者施用至少一剂同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其包含抗-人CD194-1BB/CD3ζCAR(CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞)，其中所述至少一剂是约20x106细胞/剂至约360x106细胞/剂，例如约20x106细胞/剂、约40x106细胞/剂、约80x106细胞/剂、约120x106细胞/剂、240x106细胞/剂或约360x106细胞/剂。
在某些实施方案中，所述方法包括(a)给患有疾病的受试者施用第一剂量的同种异体CAR-T细胞；和(b)给所述受试者施用后续剂量的同种异体CAR-T细胞。在其它实施方案中，通过给先前已经施用(a)中的第一剂量的受试者施用在(b)中的一个或多个后续剂量来实现所述方法。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是肿瘤抗原-特异性的CAR-T细胞。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD19-特异性的CAR-T细胞(例如，UCART19(CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞))。在某些实施方案中，所述疾病是肿瘤。在某些实施方案中，它是癌症、恶性肿瘤、肿瘤或其它增生性疾病或障碍，诸如白血病、淋巴瘤，例如，慢性淋巴细胞白血病(CLL)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL(例如，复发性/难治性ALL))、非霍奇金淋巴瘤、急性髓性白血病、弥漫性大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)、多发性骨髓瘤、滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、惰性B细胞淋巴瘤、B细胞恶性肿瘤、结肠癌、肺癌(例如，小细胞和非小细胞肺癌)、肝癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、皮肤癌、黑素瘤、骨癌和脑癌、卵巢癌、上皮癌、肾细胞癌、胰腺腺癌、霍奇金淋巴瘤、宫颈癌、结直肠癌、胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤、尤因肉瘤、髓母细胞瘤、骨肉瘤、滑膜肉瘤、头和颈鳞状细胞癌(HNSCC)和/或间皮瘤。在某些实施方案中，所述疾病是白血病或淋巴瘤。在某些实施方案中，所述疾病是急性成淋巴细胞性白血病。在某些实施方案中，所述疾病是复发性或难治性急性成淋巴细胞性白血病。在某些实施方案中，所述疾病是非霍奇金淋巴瘤(NHL)。在某些实施方案中，所述疾病是复发性或难治性大B细胞性淋巴瘤。在某些实施方案中，所述疾病是复发性或难治性滤泡性淋巴瘤。
在某些实施方案中，所述疾病是急性成淋巴细胞性白血病(ALL)。在某些实施方案中，所述疾病是儿科急性成淋巴细胞性白血病(ALL)。在某些实施方案中，所述疾病是晚期淋巴样恶性肿瘤诸如B-细胞急性成淋巴细胞性白血病(B-ALL)。在某些实施方案中，所述疾病是难治性B-ALL，例如成年人难治性B-ALL。在某些实施方案中，所述疾病是复发性B-ALL，例如成年人复发性B-ALL。在某些实施方案中，所述疾病是髓外疾病，例如与本文所述的一种或多种癌症有关。在某些实施方案中，所述受试者在施用后续剂量时表现出可检测的分子病和/或最小残留疾病。在某些实施方案中，所述受试者在施用后续剂量时表现出所述疾病的一种或多种症状。在某些实施方案中，所述疾病是癌症，并且所述受试者在开始施用后续剂量时表现出复发。在某些实施方案中，所述疾病是白血病或淋巴瘤，并且所述受试者在施用后续剂量时在骨髓中表现出大于5％的胚细胞。
在某些实施方案中，所述疾病是癌症，并且所述受试者表现出形态学疾病。在某些实施方案中，所述疾病是白血病或淋巴瘤，并且所述受试者在施用后续剂量时表现出髓外疾病(即，在骨髓外存在胚细胞)。在某些实施方案中，所述疾病是白血病或淋巴瘤，并且所述受试者在施用后续剂量时在骨髓中表现出大于5％的胚细胞。在其它实施方案中，所述疾病是癌症，并且所述受试者在开始施用后续剂量时没有表现出形态学疾病。在某些实施方案中，所述疾病是白血病或淋巴瘤，并且所述受试者在施用后续剂量时没有在骨髓中表现出大于5％的胚细胞。
在某些实施方案中，所述方法包括(a)给患有疾病的受试者施用第一剂量的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，所述第一剂量含有约1×104细胞、约5×104细胞、约1×105细胞、约5×105细胞、约1×106细胞、约5×106细胞、约6×106细胞、约1×107细胞、约6×107细胞、约1×108、约1.8×108细胞或约4.8×108细胞。在某些实施方案中，所述第一剂量含有约20x106细胞至约360x106细胞，例如约20x106细胞、约40x106细胞、约80x106细胞、约120x106细胞、240x106细胞或约360x106细胞。在某些实施方案中，所述方法进一步包括(b)在一时间点给所述受试者施用后续剂量的CAR-T细胞，所述时间点是开始在(a)中的施用以后至少或超过约5周并且小于约24周。
在某些实施方案中，给患有复发性/难治性ALL的受试者施用各自含有约6×106细胞的第一剂量和后续剂量的同种异体CAR-T细胞，并在开始在(a)中的施用以后约99天施用在(b)中的后续剂量的CAR-T细胞。
在某些实施方案中，所述方法进一步包括施用额外后续和后续剂量，从而施用第一剂量和多个后续剂量，例如，根据关于第一剂量和后续剂量规定的给药量和时机计划。在某些实施方案中，在开始施用后续剂量以后至少或大于5周的时间，施用一个或多个后续剂量中的第一个。在某些实施方案中，第一、第二和后续剂量的施用包括在约5周内施用至少三个剂量。在某些实施方案中，在开始施用第一剂量以后约16周施用后续剂量，并且在开始施用第一剂量以后第17周施用额外后续和后续剂量。在某些实施方案中，在开始施用第一剂量以后第17周和/或第34周施用额外的后续剂量。
在某些方面，施用后续剂量的时间进一步是没有表现出免疫应答(例如，在所述第一(或先前)剂量以后没有表现出对CAR-T特异性的可检测的适应性宿主免疫应答)的时间。
在某些实施方案中，施用第一剂量(初始剂量)(例如，开始施用第一或先前剂量)和开始施用后续剂量(例如，开始施用后续剂量)之间的时间大于约4周，例如，大于约5、6、7、8或9周，例如，大于约20周，例如，在约9至约35周之间，在约14至约28周之间，在15-27周之间，或在16周至约18周之间；和/或在或约15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26或27周。在某些实施方案中，后续剂量的施用(例如，其开始)是在第一或先前剂量的施用(例如，其开始)以后超过约5周且小于约24周。在某些实施方案中，在第一剂量开始以后17周开始后续剂量的施用。在某些实施方案中，第一剂量和后续剂量(例如，其开始)或先前和下一个后续剂量的施用之间的时间大于约5周且小于约24周，诸如在10至24周之间，诸如约17周。在某些实施方案中，第一剂量和后续剂量(例如，其开始)的施用之间的时间是约17周。在某些实施方案中，后续剂量的施用(例如，其开始)是在第一或先前剂量的施用(例如，其开始)以后超过约7天且小于约365天。在某些实施方案中，后续剂量的施用(例如，其开始)是在第一或先前剂量的施用(例如，其开始)以后超过约30天且小于约110天。
在某些实施方案中，所述受试者在施用后续剂量时表现出CAR-T细胞的持续的缺失。在某些实施方案中，所述受试者在施用后续剂量时表现出次优应答。在某些实施方案中，次优应答可以包含以下任意一种或多种：(i)完全应答(CR)，具有血细胞计数不完全恢复的完全应答(CRi)，具有可检测的最小残留疾病(白血病患者)和缺乏细胞遗传应答；(ii)骨髓完全应答；(iii)部分应答；或(iv)稳定应答。
在某些实施方案中，在施用第一剂量以后，第一剂量的施用导致受试者中疾病的一种或多种症状的改善。在某些实施方案中，在施用后续剂量时，受试者已经复发和/或在第一剂量以后经历的最初改善(例如，缓解)以后疾病的一种或多种症状已经增加。
在某些实施方案中，细胞的后续剂量含有足以改善受试者疾病的量的CAR-T细胞。在某些实施方案中，后续剂量的施用导致受试者中疾病的进一步改善。在某些实施方案中，与即将开始施用后续剂量之前相比，后续剂量的施用导致受试者中疾病的改善。在某些实施方案中，后续剂量的施用导致MRD阴性。在某些实施方案中，与具有替代给药方案(其中向受试者施用在第一剂量中的细胞和在单剂量的后续剂量中的细胞)的方法相比，所述方法在更大程度上和/或在更长的时期内改善疾病。所述改善可以包括受试者中、受试者的器官中、受试者的组织中或受试者的体液中疾病的细胞(例如，肿瘤细胞)的总数的减少。所述改善可以包括通过流式细胞计量术或定量PCR进行的分子检测的减少，肿瘤的质量或体积的减小，和/或转移灶的数目和/或程度的减少。在某些实施方案中，所述改善包括受试者存活的改善，例如增加的存活时间，或无事件、无进展或无复发存活。
在某些实施方案中，疾病在第一剂量的施用以后持续和/或第一剂量的施用不足以根除受试者中的疾病。在某些实施方案中，与即将开始施用后续剂量之前相比，所述后续剂量的施用导致受试者中疾病的改善。
在某些实施方案中，第一剂量的施用在受试者中不诱导严重的细胞因子释放综合征(CRS)。根据Lee DW，等人，Blood 2014；124(2)：188-195(其通过引用整体并入本文)描述的改进分级，可以评估细胞因子释放综合征(CRS)的严重程度。在某些实施方案中，第一剂量的施用在受试者中不诱导CRS。在某些实施方案中，基于临床数据，第一剂量的施用在大多数受试者中不诱导严重的CRS。在某些实施方案中，第一剂量的施用不诱导CRS，其涵盖以下方面的组合：(1)持续发烧(至少38摄氏度的发热至少三天)和(2)至少在或约20mg/dL的C反应蛋白(CRP)血清水平，和/或不会诱发CRS，包括需要使用两种或更多种血管加压剂的低血压或需要机械通气的呼吸衰竭。
在某些实施方案中，第一剂量的施用在受试者中不诱导3级或更高的神经中毒。在某些实施方案中，基于临床数据，第一剂量的施用在大多数受试者中不诱导3级或更高的神经中毒。在某些实施方案中，与神经中毒和/或3级或更高的神经中毒的临床风险相关的症状包括意识错乱、谵妄、表达性失语症、迟钝、肌阵挛、嗜睡、改变的精神状态、惊厥、癫痫发作样活动、癫痫发作(任选地通过脑电图[EEG]证实)、升高的β淀粉样蛋白(Aβ)水平、升高的谷氨酸盐水平和升高的氧自由基水平。
在某些实施方案中，在施用第一剂量之前，已经用靶向肿瘤的治疗剂治疗了受试者。在某些方面，在施用第一剂量和/或后续剂量时，受试者是所述治疗剂难治的或无响应性的。在某些实施方案中，在施用第一剂量以后且在所述后续剂量的施用之前，或者在施周第一剂量之前，所述方法进一步包括评估指示CRS的因子的血清水平、疾病的症状、和/或受试者中宿主抗-重组受体(例如，抗-CAR)免疫应答(诸如体液或细胞介导的免疫应答)的指标。在某些这样的实施方案中，所检测的疾病的症状是或包括受试者中、受试者的器官中、受试者的组织中或受试者的体液中疾病细胞的总数，通过流式细胞计量术或定量PCR进行的分子检测，实体瘤的质量或体积，或转移灶的数目或程度。
在某些实施方案中，所述方法包括在施用后续剂量之前评估疾病的症状，并且基于评估的结果，确定要施周给受试者的细胞的后续剂量。在某些实施方案中，如果评估确定受试者患有形态学疾病，则向受试者施用后续剂量，该后续剂量包含与第一剂量中的同种异体CAR-T细胞的数目相同数目的、更少或更多的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，如果评估确定受试者具有最小残留疾病，则向受试者施用后续剂量，该后续剂量含有与第一剂量相比增加数目的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，后续剂量包含与第一剂量中的数目大约相同数目的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，在后续剂量中每千克施用的同种异体CAR-T细胞的数目小于或等于或大约等于在第一剂量中每千克施用的同种异体CAR-T细胞的数目。在其它实施方案中，在后续剂量中施用的同种异体CAR-T细胞的数目大于在第一剂量中施用的同种异体CAR-T细胞的数目。在某些实施方案中，后续剂量包含与第一剂量相比增加的此类细胞数目，例如是第一剂量中的数目的至少2倍、5倍或10倍。在某些实施方案中，在后续剂量中每千克施用的CAR-T细胞的数目是在第一剂量中每千克施用的表达受体的(例如，表达CAR的)细胞的数目的至少2倍或约2倍或3倍或约3倍。
在某些实施方案中，在第一剂量的施用以后和/或在后续剂量的施用以后，第一剂量中的同种异体CAR-T细胞的群体在受试者中扩增。在某些实施方案中，与即将施用前相比，在施用第一剂量和/或后续剂量以后血清C-反应蛋白(CRP)水平的增加证明了所述扩增。在某些实施方案中，通过例如但不限于流式细胞计量术评估的PK来证明所述扩增。在某些实施方案中，与即将施用前相比，在施用第一剂量和/或后续剂量以后，通过qPCR测量的血清中编码CAR的核酸水平的增加证明了所述扩增。在某些实施方案中，所述增加是至少1、2或3倍。
在某些实施方案中，第一剂量的细胞和第二或后续剂量的细胞衍生自同一供体。在某些实施方案中，第一剂量的细胞和第二或后续剂量的细胞衍生自不同的供体。
在某些实施方案中，第一剂量和/或后续剂量不是分次剂量。例如，在某些实施方案中，将第一剂量的细胞在包含第一剂量的细胞的单一药物组合物中施用，和/或将后续剂量的细胞在包含后续剂量的细胞的单一药物组合物中施用。在其它实施方案中，第一剂量和/或后续剂量是分次剂量，例如，其中在不超过三天的阶段中在多个组合物中施用第一剂量的细胞，所述组合物共同包含第一剂量的细胞；和/或后续剂量是分次剂量，其中在不超过三天的阶段中在多个组合物中施用后续剂量的细胞，所述组合物共同包含后续剂量的细胞。
在某些实施方案中，所述方法包括向先前施用过第一剂量的同种异体CAR-T细胞的受试者施用后续剂量的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，在第一剂量开始以后至少或超过约5周并且小于约24周的时间点施用后续剂量的细胞。在某些实施方案中，在后续剂量中施用的同种异体CAR-T细胞的数目与第一剂量相同。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD19-特异性的CAR-T细胞(例如，UCART19)。
在某些实施方案中，在第一剂量中施用的细胞的数目是在约0.5×106细胞至5×108细胞之间，在约0.75×106细胞至8×107细胞之间或在约5×106细胞至7×106细胞之间，包括每个端点。在某些实施方案中，在CD19-特异性的CAR-T细胞的第一剂量中施用的细胞的数目是在约0.5×106细胞至1×109细胞之间，在约1×105细胞至3×108细胞之间或在约6×105细胞至2.4×108细胞之间，包括每个端点。在某些实施方案中，在UCART19细胞的第一剂量中施用的细胞的数目是约6×105细胞、约6×106细胞、约6×107细胞、约8×107细胞、约1.8×108细胞或约2.4×108细胞。在某些实施方案中，在UCART19细胞的第一剂量中施用的细胞的数目是约6×106细胞。
在某些实施方案中，在CD19-特异性的CAR-T细胞的后续剂量中施用的细胞的数目是在约0.5×106细胞至1×109细胞之间，在约1×105细胞至3×108细胞之间或在约6×105细胞至2.4×108细胞之间，包括每个端点。在某些实施方案中，在UCART19细胞的后续剂量中施用的细胞的数目是约6×105细胞、约6×106细胞、约6×107细胞、约8×107细胞、约1.8×108细胞或约2.4×108细胞。在某些实施方案中，在UCART19细胞的后续剂量中施用的细胞的数目是约6×106细胞。在某些实施方案中，在UCART19细胞的第一剂量和后续剂量中施用的细胞的数目是约6×106细胞。
在某些实施方案中，所述方法进一步包括在第一剂量之前和/或在后续剂量施用之前的淋巴细胞耗竭方案。在某些实施方案中，所述淋巴细胞耗竭方案包含环磷酰胺、氟达拉滨和/或其组合。在某些实施方案中，所述淋巴细胞耗竭方案包含环磷酰胺、氟达拉滨、CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)和/或其组合中的一种或多种。在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案的施用包括在施用第一剂量之前施用环磷酰胺和氟达拉滨，以及在施用第一剂量之后施用CD-52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)。在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案的施用包括在施用第一剂量之前且任选地不在后续剂量施用之前施用淋巴细胞耗竭方案。在某些实施方案中，在施用第一剂量之前2至10天之间施用淋巴细胞耗竭方案。在某些实施方案中，在施用第二剂量之前2至10天之间施用淋巴细胞耗竭方案。在某些实施方案中，在施用第一次剂量之前2至10天之间以及在施用第二剂量之前2至14天之间施用淋巴细胞耗竭方案。在某些实施方案中，在1、2、3、4或5天的过程中施用淋巴细胞耗竭方案。
在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案包括施用约90-120mg/m2氟达拉滨至约1500mg/m2环磷酰胺。在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案包括施周约150mg/m2氟达拉滨至约120mg/m2环磷酰胺。
在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案包括施用约30至150mg/m2的剂量的氟达拉滨；约300至4000mg/m2的剂量的环磷酰胺；或约0.3至1mg/kg的剂量的CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的CD52抗体)。在某些实施方案中，以约30至150mg/m2的剂量施用氟达拉滨；以约300至4000mg/m2的剂量施用环磷酰胺；和以约10至约13mg的剂量施用CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的CD52抗体)。在某些实施方案中，以约30mg/m2/天的剂量施用氟达拉滨；以约300mg/m2/天的剂量施用环磷酰胺；或以约10至约13mg/天的剂量施用CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的CD52抗体)。在某些实施方案中，以约30mg/m2/天的剂量施用氟达拉滨；以约300mg/m2/天的剂量施用环磷酰胺；和以约10至约13mg/天的剂量施用CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的CD52抗体)。
在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨和环磷酰胺。在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨、环磷酰胺和抗-CD52药物(例如，具有SEQID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的CD52抗体)。在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案进一步包含施用Mensa(2-巯基乙烷磺酸钠)。在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案进一步包含施用至少一种皮质类固醇。在某些实施方案中，在即将施用抗-CD52抗体(例如，包含SEQID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)之前施周皮质类固醇。在某些实施方案中，所述皮质类固醇是以1-5mg/kg(例如，2mg/kg)的剂量施用的甲泼尼龙。在某些实施方案中，在施用CAR-T细胞之前至少两天施用皮质类固醇。在某些实施方案中，在施用CAR-T细胞之前至少两天不施用皮质类固醇。
在某些实施方案中，患者在淋巴细胞耗竭方案之前接受输注相关反应的前驱给药。所述前驱给药可以包含例如抗组胺剂或对乙酰氨基酚。
在某些实施方案中，同时施用氟达拉滨/环磷酰胺(FC)或氟达拉滨/环磷酰胺/抗-CD52抗体(FCA)的淋巴细胞耗竭方案的组分；在其它实施方案中，依次施用所述组分。在某些实施方案中，所述受试者接受在CAR-T细胞疗法的第一剂量之前的FC方案；和在CAR-T细胞疗法的重复给药之前的FCA方案。在某些实施方案中，所述受试者接受在CAR-T细胞疗法的第一剂量之前的FCA方案；和在CAR-T细胞疗法的重复给药之前的第二FCA方案。在某些实施方案中，所述受试者接受在CAR-T细胞疗法的第一剂量之前的FC方案，和在CAR-T细胞疗法的第一剂量之后的CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)。在某些实施方案中，所述受试者接受在CAR-T细胞疗法的第一剂量之前的FC方案，和在CAR-T细胞疗法的第一剂量之后的CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)；且所述受试者进一步接受在CAR-T细胞疗法的第二/后续剂量之前的FC方案和在CAR-T细胞疗法的第二/后续剂量之后的CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQID NO：10的序列的抗体)。
在某些实施方案中，所述方法进一步包括在施用第一剂量之前和/或在施用第二/后续剂量之前施用药剂以减轻疾病。在某些实施方案中，所述方法包括在第一剂量之前和/或在施用第二/后续剂量之前施用化学治疗剂。在某些实施方案中，所述受试者在第一剂量之前已预先用化学治疗剂治疗。在某些实施方案中，所述化学治疗剂是调理化学疗法或包括调理化学疗法，其在第一剂量和/或后续剂量之前减轻受试者的疾病负担。在某些实施方案中，化学治疗剂的施用包括在施用第一剂量之前和任选地不在施用第二/后续剂量之前施用化学治疗剂。在某些实施方案中，在施用第一剂量之前2至10天之间施用所述化学治疗剂。在某些实施方案中，在施用第二/后续剂量之前2至10天之间施用所述化学治疗剂。在某些实施方案中，在施用第一剂量之前2至10天之间和在施用第二/后续剂量之前2至14天之间施用所述化学治疗剂。
还提供了用于同种异体CAR-T细胞的细胞和组合物以及用于治疗受试者的疾病(诸如肿瘤或癌症)的组合物。还提供了用于同种异体CAR-T细胞的细胞和组合物以及用于制备药物的组合物，所述药物用于治疗先前用同种异体CAR-T细胞治疗的受试者的疾病。在某些实施方案中，用于用途或医学用途的组合物或细胞在先前治疗后4至24周使用。在某些实施方案中，将所使用的组合物或细胞配制成用于施用后续剂量，其量足以减轻先前已经用CAR-T细胞治疗的受试者的疾病负担。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD19-特异性的CAR-T细胞(例如，UCART19)。
在此类医学用途的一些实施方案中，将所述组合物或细胞用于这样的用途：其包括向患有该疾病的受试者施用第一剂量的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，所述第一剂量含有约1×106个总细胞、约6×106个总细胞或约1×107个总细胞。在某些实施方案中，将所述组合物或细胞用于这样的用途：其包括在开始施用第一剂量以后至少或超过约4周且小于约24周的时间点给所述受试者施用后续剂量的同种异体CAR-T细胞。
在某些实施方案中，提供同种异体CAR-T细胞用于在先前用同种异体CAR-T细胞治疗的受试者中治疗疾病的方法。在某些实施方案中，所述细胞在先前治疗后约4至24周之间使用。在某些实施方案中，将所使用的细胞配制成用于施用后续剂量，其量足以减轻先前已经用同种异体CAR-T细胞治疗的受试者的疾病负担。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD19-特异性的CAR-T细胞(例如，UCART19)。
在用于用途或医学用途的任何此类组合物或细胞的一些实施方案中，受试者没有表现出形态学疾病和/或受试者没有在骨髓中表现出大于5％的胚细胞。
在某些实施方案中，将所述组合物或细胞用于用在这样的方法中：其包括向患有该疾病的受试者施用第一剂量的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，所述第一剂量是约6×105细胞、约6×106细胞、约6×107细胞、约8×107细胞、约1.8×108细胞或约2.4×108细胞。在某些实施方案中，将所述细胞用于用在这样的方法中：其包括在开始所述第一剂量的施周以后至少或超过约5周并且小于约24周的时间点给所述受试者施用后续剂量的同种异体CAR-T细胞。
本文还提供了同种异体CAR-T细胞在制备用于治疗受试者的疾病的药物中的用途，所述药物包括被配制和/或包装用于在第一剂量和后续剂量中施用给受试者的细胞。在某些实施方案中，所述治疗包括在第一剂量和后续剂量中将细胞施用受试者，其中第一剂量包括约6×105细胞、约6×106细胞、约6×107细胞、约8×107细胞、约1.8×108细胞或约2.4×108细胞。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD19-特异性的CAR-T细胞(例如，UCART19)。
在某些实施方案中，将使用的细胞配制和/或包装用于在第一剂量和后续剂量中施用给受试者，和/或治疗包括在第一剂量和后续剂量中将细胞施用给受试者。在某些实施方案中，所述第一剂量含有约6×105细胞、约6×106细胞、约6×107细胞、约8×107细胞、约1.8×108细胞或约2.4×108细胞。
在某些实施方案中，所述用途包括：其中第一次和后续施用包括在一个或多个单位剂量中施用细胞，每个单位剂量包含约6×105细胞、约6×106细胞、约6×107细胞、约8×107细胞、约1.8×108细胞或约2.4×108细胞。
在某些实施方案中，所述细胞或用途包括：其中第一次施用包括施用单一单位剂量。在某些实施方案中，所述细胞或用途包括：其中后续施用包括施用两个或更多个单位剂量。在某些实施方案中，所述细胞或用途包括：其中后续施用包括施周单一单位剂量。
在某些实施方案中，提供了细胞用于治疗疾病的用途，其中所述疾病是肿瘤或癌症。在某些实施方案中，所述疾病是淋巴样恶性肿瘤，例如但不限于，急性和慢性白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、骨髓恶性肿瘤(例如，白血病、骨髓增生异常综合征、骨髓增生异常/骨髓增生性肿瘤)或混合谱系恶性肿瘤。在某些实施方案中，提供了用于治疗急性成淋巴细胞性白血病(ALL)的组合物或细胞。在某些实施方案中，所述ALL是复发性/难治性ALL。在某些实施方案中，提供了用于治疗非霍奇金淋巴瘤(诸如复发性或难治性非霍奇金淋巴瘤)的组合物或细胞。在某些实施方案中，将组合物或细胞用于治疗复发性或难治性大B-细胞或滤泡性淋巴瘤。
在某些实施方案中，所述细胞、组合物或用途包括：其中将后续剂量配制成施用与先前剂量中的同种异体CD19-特异性的CAR-T细胞大约相同数目的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，将含有后续剂量的细胞的组合物配制成施用与第一剂量或先前剂量相比更多数目的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，所述细胞、组合物或用途包括：其中将后续剂量配制成施用比先前剂量中的同种异体CD19-特异性的CAR-T细胞更少数目的同种异体CAR-T细胞。
还提供了用于治疗患有疾病(诸如癌症)的患者的药物试剂盒，该试剂盒包含CAR-T细胞和CD52抗体。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD19特异性的CAR-T细胞，诸如UCART19细胞。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞表达SEQ ID NO：1的CAR。在某些实施方案中，所述CD52抗体包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列。在某些实施方案中，所述试剂盒包含含有CAR-T细胞的第一容器和含有CD52抗体的第二容器。在某些实施方案中，所述第一容器和第二容器中的至少一个是柔性的细胞输注袋。在某些实施方案中，所述试剂盒进一步包含标签或包装插页，其包含关于向受试者施用CAR-T细胞和CD52抗体的说明书。
还提供了用于执行所述方法的制品。在某些实施方案中，该制品包括多个容器，例如可密封的容器，每个容器分别包含单位剂量的同种异体CAR-T细胞(用于施用给受试者)、包装材料和/或标签或包装插页。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD19-特异性的CAR-T细胞(例如，UCART19)。
在某些实施方案中，所述单位剂量包含在所述方法中以最低剂量施用的细胞的量，例如第一剂量的大小。在某些实施方案中，所述单位剂量包括约6×105细胞、约6×106细胞、约6×107细胞、约8×107细胞、约1.8×108细胞或约2.4×108细胞。
在某些实施方案中，标签或包装插页包括关于向受试者施用多个单位剂量的说明书，例如，通过在施用第一剂量时施用一定数目的此类单位剂量，例如一个单位剂量，和然后施用包括一个或多个单位剂量的后续剂量。在某些实施方案中，所述说明书指定进行第一次施用，所述第一次施用包括向受试者递送所述单位剂量中的一个，并进行后续施用，所述后续施用包括向受试者施用一个或多个所述单位剂量。在某些实施方案中，它们指定在所述第一次施用后约5至约24周之间的时间进行后续施用。在某些实施方案中，容器是或包括柔性的细胞输注袋。在某些实施方案中，所述方法用于同种异体施用。在某些实施方案中，标签和/或包装材料还包括受试者专有的标识符，其指示细胞源自所述受试者和/或应当专门施用给所述受试者。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD19-特异性的CAR-T细胞(例如，UCART19)。
还提供了一种生产针对目的靶标的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)群体的方法，其包括：(a)从健康供体分离外周血单核细胞(PBMC)；(b)活化所述PBMC中的T-细胞；(c)用慢病毒载体转导所述活化的T-细胞，其中所述慢病毒载体是表达目的CAR的自灭活重组载体；(d)破坏T-细胞子集中的TCRαβ和CD-52基因表达；(e)扩增所述T-细胞群体；和(f)富集TCRαβ-阴性细胞的T-细胞群体；由此产生”现成”同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)群体。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞包含同种异体CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞。
还提供了包含抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其用于用在治疗患有难治性和/或复发性非霍奇金淋巴瘤的受试者的方法中，所述方法包括给所述受试者施用至少一剂CAR-T细胞，其中所述至少一剂是约20x106细胞/剂至约360x106细胞/剂。
还提供了用于用在治疗方法中的嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，所述方法包括：(a)给受试者施用第一剂量的CAR-T细胞，和(b)在一时间点给所述受试者施用后续剂量的CAR-T细胞，所述时间点是开始(a)中的所述施用以后至少或超过约28天且小于约200天。
还提供了用于用在治疗方法中的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，所述方法包括向先前施用过第一剂量的同种异体CAR-T细胞的受试者施用后续剂量的同种异体CAR-T细胞，其中：在第一剂量开始以后至少或超过约5周并且小于约24周的时间点施用后续剂量的细胞。任选地其中，在所述施用时间，所述受试者没有表现出对CAR-T细胞特异性的可检测的适应性宿主免疫应答。
还提供了用于用在治疗方法中的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，所述方法包括给受试者施用后续剂量的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，其中：在所述施用之前，所述受试者已经接受先前剂量的CAR-T细胞，其量足以在所述受试者中表现出临床益处；且在所述施用时间，所述受试者没有表现出对CAR-T细胞特异性的可检测的适应性宿主免疫应答；和/或所述先前剂量和后续剂量之间的时间大于约5周且小于约24周。
还提供了包含抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其用于用在治疗患有难治性和/或复发性CD19+B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的成年受试者的方法中，其中所述方法包括给所述受试者施用至少一剂CAR-T细胞，其中所述至少一剂选自约6x105细胞/剂、6x106细胞/剂、约6-8x107细胞/剂和约1.8-2.4x108细胞/剂。
还提供了包含抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其用于用在治疗患有难治性和/或复发性CD19+B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的儿科受试者的方法中，所述方法包括给所述受试者施用至少一剂包含抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR的CAR-T细胞，其中所述至少一剂是约2-8x107细胞/剂。
还提供了用于治疗先前用CAR-T细胞治疗过的受试者中的疾病的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，其中：所述细胞用于在先前治疗以后约5至24周之间使用；和将所述细胞配制成用于施用后续剂量，其量足以改善先前用CAR-T细胞治疗过的受试者中的疾病。
在某些实施方案中，将本文中公开的治疗方法应用于这样的受试者：其已经用用于耗竭CD52+细胞的抗体(例如包含SEQ ID NO：8和SEQ ID NO：10的抗体)治疗过，或其将用所述抗体治疗作为所述治疗方法的一部分。这些治疗方法可以包括缺乏CD52的CAR-T细胞(例如UCART19)的应用。
还提供了生产针对目的靶标的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)群体的方法，其包括：
(a)从健康供体提供分离的外周血单核细胞(PBMC)；
(b)活化所述PBMC中的T-细胞；
(c)用慢病毒载体转导所述活化的T-细胞，其中所述慢病毒载体是表达目的CAR的自灭活重组载体；
(d)破坏T-细胞子集中的TCRαβ和CD-52基因表达；
(e)扩增所述T-细胞群体；和
(f)富集TCRαβ-阴性细胞的T-细胞群体；
由此产生同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)群体。
附图说明
图1描绘的示例性示意图显示了同种异体CAR-T细胞治疗的多次给药方案的可能步骤。
图2A和图2B描绘了来自两位接受第二次UCART19输注的患者的动力学数据(重复给药研究)。
图3A描绘的示例性示意图显示了同种异体CAR-T细胞治疗的给药方案的步骤。
图3B描绘的示例性示意图显示了同种异体CAR-T细胞治疗的给药方案的步骤。
图4A和图4B描绘了同种异体CAR-T细胞制备的示例性流程图。
图5描绘了示例性的经工程改造的同种异体抗-CD19 CAR T-细胞产物(CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞)。
图6A和图6B描绘了在具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的成年患者中使用同种异体抗-CD19 CAR-T细胞产物(UCART19)的研究设计。
图7A描绘了在具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的成年患者中开始使用同种异体抗-CD19 CAR-T细胞产物(UCART19)以后的研究状态。
图7B描绘了具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的成年患者的UCART19的应答、缓解持续时间和重复给药。
图8A和图8B描绘了在具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的成年患者中的流式细胞计量术PK曲线和UCART19动力学。
图9描绘了在具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的高危儿科患者中使用同种异体抗-CD19 CAR-T细胞产物(UCART19)的研究设计。
图10描绘了在具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的高危儿科患者中开始使用同种异体抗-CD19 CAR-T细胞产物(UCART19)以后的研究状态。
图11描绘了在具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的高危儿科患者中UCART19的应答和减轻(抗白血病活性)的持续时间。
图12描绘了在具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的高危儿科患者中使用UCART19以后的细胞动力学。
图13A、图13B和图13C描绘了在具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的高危儿科患者中使用UCART19以后血液中的嵌合数据。
图14显示了患者#18对重复给药的应答，如在实施例3中所述。
具体实施方式
一般技术
除非另有说明，否则在本发明的公开内容中描述的方法和组合物的实践通常采用分子生物学的常规技术(包括重组技术)、微生物学、细胞生物学、生物化学和免疫学，它们是在本领域的技术范围内。这样的技术在文献中进行了充分解释，例如，MolecularCloning：A Laboratory Manual，第二版(Sambrook等人，1989)Cold Spring HarborPress；Oligonucleotide Synthesis(M.J.Gait，编，1984)；Methods in MolecularBiology，Humana Press；Cell Biology：A Laboratory Notebook(J.E.Cellis，编，1998)Academic Press；Animal Cell Culture(R.I.Freshney，编，1987)；Introduction to Celland Tissue Culture(J.P.Mather和P.E.Roberts，1998)Plenum Press；Cell and TissueCulture：Laboratory Procedures(A.Doyle，J.B.Griffiths，和D.G.Newell，编，1993-1998)J.Wiley and Sons；Methods in Enzymology(Academic Press，Inc.)；Handbook ofExperimental Immunology(D.M.Weir和C.C.Blackwell，编)；Gene Transfer Vectors forMammalian Cells(J.M.Miller和M.P.Calos，编，1987)；Current Protocols in MolecularBiology(F.M.Ausubel等人，编，1987)；PCR：The Polymerase Chain Reaction，(Mullis等人，编，1994)；Current Protocols in Immunology(J.E.Coligan等人，编，1991)；ShortProtocols in Molecular Biology(Wiley and Sons，1999)；Immunobiology(C.A.Janeway和P.Travers，1997)；Antibodies(P.Finch，1997)；Antibodies：a practical approach(D.Catty.，编，IRL Press，1988-1989)；Monoclonal antibodies：a practical approach(P.Shepherd和C.Dean，编，Oxford University Press，2000)；Using antibodies：alaboratory manual(E.Harlow和D.Lane(Cold Spring Harbor Laboratory Press，1999)；The Antibodies(M.Zanetti和J.D.Capra，编，Harwood Academic Publishers，1995)。
定义
本文中使用的“同种异体的”是指，用于治疗患者的细胞或细胞群体不是源自所述患者而是源自供体，而不是源自人白细胞抗原(HLA)相容的供体。
本文中使用的“自体的”是指，用于治疗患者的细胞、细胞系或细胞群体源自所述患者或源自人白细胞抗原(HLA)相容的供体。
本文中使用的“免疫细胞”表示在功能上参与先天性和/或适应性免疫应答的起始和/或执行的造血起源的细胞。
本文中使用的“嵌合抗原受体”或可替换的“CAR”表示这样的分子：其当在免疫效应细胞中时，给细胞提供对靶标的特异性和与所述靶标结合后细胞内信号产生。
本文中使用的术语“给药方案”表示施用给患者的总治疗过程，例如用CAR-T细胞治疗。
本文中使用的“治疗”是用于获得有益的或期望的临床结果的方案。为了本公开内容的目的，有益的或期望的临床结果包括、但不限于以下的一种或多种：减少肿瘤或癌细胞的增殖(或破坏肿瘤或癌细胞)，抑制赘生性细胞的转移，缩小或减小肿瘤的大小，减轻疾病(例如，癌症)，减少由疾病(例如，癌症)引起的症状，增加罹患疾病(例如，癌症)的人们的生活质量，减少治疗疾病(例如，癌症)所需的其它药物的剂量，延迟疾病(例如，癌症)的进展，治愈疾病(例如，癌症)和/或延长患有疾病(例如，癌症)的患者的生存时间。“降低发病率”是指降低严重程度的任何一种(其可以包括降低通常用于该疾病的其它药物和/或疗法的需求和/或量(例如，减少向它的暴露)。
“减轻”或“……的改善”是指与不施用治疗相比一种或多种症状的减轻或改善。“改善”还包括症状的持续时间的缩短或减少。
本文中使用的药物、化合物或药物组合物的“有效剂量”或“有效量”是足以实现任何一种或多种有益或期望结果的量。对于预防性应用，有益的或期望的结果包括消除或降低风险、减轻严重程度或延缓疾病的发作，包括疾病的生化、组织学和/或行为症状、其并发症以及在疾病发展过程中出现的中间病理学表型。可以在一次或多次施用中施用有效剂量。为了本公开内容的目的，药物、CAR-T细胞或药物组合物的有效剂量是足以直接地或间接地完成预防性或治疗性处理的量。如在临床上下文中所理解的，可以与或不与另一种药物、化合物或药物组合物结合达到药物、化合物或药物组合物的有效剂量。因此，在施用一种或多种治疗剂的上下文中，可以考虑“有效剂量”，并且如果与一种或多种其它试剂结合，可能或实际达到期望的结果，则可以认为以有效量施用单一药剂。
“个体”或”受试者”是哺乳动物，例如人。哺乳动物也包括、但不限于耕作动物、运动动物、宠物、灵长类动物、马、狗、猫、小鼠和大鼠。
本文中使用的“难治的”表示对治疗没有应答的疾病(例如，癌症)。在实施方案中，难治性癌症可以在治疗开始之前或当时对治疗有抵抗力。在其它实施方案中，难治性癌症可以在治疗期间变得有抵抗力。难治性癌症在本文中也被称作抗性癌症。
本文中使用的“复发的”表示在改善一段时间以后，例如在先前治疗(例如，癌症治疗)之后，疾病(例如，癌症)的复发或疾病(诸如癌症)的征象和症状。
本文中使用的“最小残留疾病”或“MRD”表示在多种临床情况下检测到的低水平疾病。在某些实施方案中，MRD表示减轻以后在分子上定义的复发。
本文中使用的“载体”是指能够在宿主细胞中递送和表达一个或多个目的基因或序列的构建体。载体的例子包括、但不限于病毒载体、裸露DNA或RNA表达载体、质粒、粘粒或噬菌体载体、与阳离子缩合剂有关的DNA或RNA表达载体、被包囊在脂质体中的DNA或RNA表达载体和某些真核细胞，诸如生产细胞。
本文中使用的“表达控制序列”是指指导核酸转录的核酸序列。表达控制序列可以是启动子，诸如组成型或诱导型启动子，或增强子。表达控制序列可操作地连接至要转录的核酸序列。
“抗体”是一种免疫球蛋白分子，其能够通过位于所述免疫球蛋白分子的可变区中的至少一个抗原识别位点特异性结合靶标，诸如碳水化合物、多核苷酸、脂质、多肽等。本文中使用的术语“抗体”不仅包括完整的多克隆或单克隆抗体，而且包括其任何抗原结合片段(即，“抗原结合部分”)或单链、包含抗体的融合蛋白以及包含抗原识别位点的免疫球蛋白分子的任何其它经修饰的构型，所述抗原识别位点包括、例如但不限于scFv、单结构域抗体(例如，鲨鱼和骆驼科抗体)、大抗体、微体、细胞内抗体、双体、三体、四体、v-NAR和二-scFv(参见，例如，Hollinger和Hudson，2005，Nature Biotechnology 23(9)：1126-1136)。抗体包括任何种类的抗体，诸如IgG、IgA或IgM(或其子类)，且抗体不需要属于任何特定种类。根据其重链恒定区的抗体氨基酸序列，免疫球蛋白可分为不同种类。免疫球蛋白有五种主要种类：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，并且这些中的几种可以进一步分为亚类(同种型)，例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。对应于不同种类的免疫球蛋白的重链恒定区分别称为α、6、ε、γ和μ。不同种类的免疫球蛋白的亚基结构和三维构型是众所周知的。
本文中使用的术语抗体的“抗原结合部分”表示完整抗体的一个或多个片段，其保留特异性地结合给定抗原(例如，在肿瘤抗原处)的能力。抗体的抗原结合功能可以通过完整抗体的片段来执行。在术语抗体的“抗原结合部分”内涵盖的结合片段的例子包括：Fab；Fab’；F(ab’)2；由VH和CH1结构域组成的Fd片段；由抗体的单臂的VL和VH结构域组成的Fv片段；单结构域抗体(dAb)片段(Ward等人，1989，Nature 341：544-546)，和分离的互补性决定区(CDR)。
术语“scFv”表示含有至少一个包含轻链可变区的抗体片段和至少一个包含重链可变区的抗体片段的融合蛋白，其中所述轻链和重链可变区是连续连接的，例如经由合成的接头，例如短的柔性多肽接头，并且能够被表达为单链多肽，并且其中scFv保留了衍生出它的完整抗体的特异性。除非详细说明，否则本文中使用的scFv可以具有任一顺序的VL和VH可变区，例如，相对于多肽的N-端和C-端末端，scFv可以包含VL-接头-VH或可以包含VH-接头-VL。
术语“单克隆抗体”(Mab)表示衍生自单个拷贝或克隆的抗体，包括例如任何真核、原核或噬菌体克隆，而不是其产生方法。在某些实施方案中，本公开内容的单克隆抗体存在于同质或基本上同质的群体中。
“人源化的”抗体表示这样的非人(例如鼠)抗体的形式：它们是嵌合的免疫球蛋白、免疫球蛋白链或其含有源自非人免疫球蛋白的最小序列的片段(例如Fv、Fab、Fab’、F(ab’)2或抗体的其它抗原结合子序列)。通常，人源化抗体是人免疫球蛋白(接受者抗体)，其中来自接受者的互补决定区(CDR)的残基被具有所需特异性、亲和力和能力的来自非人物种(供体抗体)(诸如小鼠、大鼠或兔)的CDR的残基替换。
本文中使用的“人抗体”是指其氨基酸序列与可由人产生的抗体的氨基酸序列对应的抗体和/或已经使用本领域技术人员已知的或本文中公开的制备人抗体的任何技术制备的抗体。人抗体的该定义包括包含至少一个人重链多肽或至少一个人轻链多肽的抗体。一个这样的例子是包含鼠轻链和人重链多肽的抗体。使用本领域已知的各种技术可以产生人抗体。在一个实施方案中，人抗体选自噬菌体文库，其中所述噬菌体文库表达人抗体(Vaughan等人，1996，Nature Biotechnology，14：309-314；Sheets等人，1998，Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)95：6157-6162；Hoogenboom和Winter，1991，J.Mol.Biol.，227：381；Marks等人，1991，J.Mol.Biol.，222：581)。通过免疫接种动物也可以制备人抗体，在所述动物中已经通过转基因引入人免疫球蛋白基因座来替代内源基因座，例如，其中内源性免疫球蛋白基因已经被部分地或完全地灭活的小鼠。该方案描述在美国专利号5,545,807；5,545,806；5,569,825；5,625,126；5,633,425；和5,661,016。可替换地，通过使产生针对靶抗原的抗体的人B淋巴细胞永生化，可以制备人抗体(此类B淋巴细胞可以从受试者中回收或者可以已经在体外被免疫)。参见，例如，Cole等人Monoclonal Antibodies and CancerTherapy，Alan R.Liss，第77页，1985；Boerner等人，1991，J.Immunol.，147(1)：86-95；和美国专利号5,750,373。
抗体的“可变区”表示单独的或组合的抗体轻链的可变区或抗体重链的可变区。如本领域已知的，重链和轻链的可变区各自由通过三个互补性决定区(CDR)连接的四个框架区(FR)组成，所述互补性决定区也被称作高变区，它们有助于形成抗体的抗原结合位点。如果需要主题可变区的变体，特别是具有在CDR区域以外(即在框架区中)的氨基酸残基的置换，则可以如下鉴别适当的氨基酸置换，经常是保守的氨基酸置换：对比主题可变区和含有与主题可变区相同规范类别的CDR1和CDR2序列的其它抗体的可变区(Chothia和Lesk，JMol Biol 196(4)：901-917，1987)。当选择FR以侧接主题CDR时，例如当人源化或优化抗体时，来自含有相同规范类别的CDR1和CDR2序列的抗体的FR是优选的。
可变结构域的“CDR”是根据Kabat、Chothia的定义、Kabat和Chothia的累积、AbM、接触和/或构象定义或本领域众所周知的任何CDR确定方法鉴别出的可变区内的氨基酸残基。
本文中使用的“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”包括当与活性成分组合时允许所述成分保留生物活性并且不与受试者的免疫系统反应的任何材料。例子包括、但不限于任何药用载体诸如磷酸盐缓冲盐水溶液、水、乳剂诸如油/水乳剂和不同类型的润湿剂。用于气雾剂或胃肠外施用的优选稀释剂是磷酸盐缓冲盐水(PBS)或生理盐水(0.9％)。通过众所周知的常规方法配制包含此类载体的组合物(参见，例如，Remington’sPharmaceutical Sciences，第18版，A.Gennaro，编，Mack Publishing Co.，Easton，PA，1990；和Remington，The Science and Practice of Pharmacy第21版Mack Publishing，2005)。
提及“约”，本文中的值或参数包括(且描述)指向该值或参数本身的实施方案。例如，关于“约X”的描述包括“X”的描述。数字范围包括限定所述范围的数字。
应当理解，每当在本文中用措辞“包含”描述实施方案时，也提供了以“由……组成”和/或“基本上由……组成”的方式描述的在其它方面类似的实施方案。
在以马库什(Markush)群组或其它替代分组的方式描述本公开内容的方面或实施方案的情况下，本公开内容不仅包括作为整体列出的整个组，而且还包括该组的每个成员以及主组的所有可能的子组，但主组也没有一个或多个组成员。本公开内容还设想明确排除要求保护的组成员中的任何一个或多个。
范围：在本公开内容中，可以以范围格式来呈现本公开内容的各个方面。应当理解，范围格式的描述仅是为了方便和简洁，而不应被解释为对本公开内容的范围的硬性限制。因此，范围的描述应当视作已经具体地公开了所有可能的子范围以及在该范围内的各个数值。例如，范围的描述诸如从1至6应当视作已经具体地公开了子范围诸如从1至3、从1至4、从1至5、从2至4、从2至6、从3至6等，以及在该范围内的各个数字，例如，1、2、2.7、3、4、5、5.3和6。作为另一个例子，范围诸如95-99％同一性包括具有95％、96％、97％、98％或99％同一性的事物，且包括子范围诸如96-99％、96-98％、96-97％、97-99％、97-98％和98-99％同一性。不管范围的宽度，这均适用。
除非另有定义，否则在本文中使用的所有技术和科学术语具有与本公开内容所属领域的普通技术人员通常所理解相同的含义。在冲突的情况下，以本说明书(包括定义)为准。贯穿本说明书和权利要求书，词语“包含”或变体诸如“包括”或“含有”应理解为暗示包括所述的整数或整数集合，但是不排除任意其它整数或整数集合。除非上下文有其它规定，否则单数术语应包括复数，且复数术语应包括单数。
本文描述了示例性的方法和材料，尽管与本文描述的那些相似或等同的方法和材料也可以用于本文所述的方法和组合物的实践或试验中。所述材料、方法和实施例仅仅是示例性的，且无意成为限制性的。
用CAR-T细胞治疗
本文提供了用于用在细胞疗法中、用于治疗包括各种癌症和肿瘤的疾病的方法、组合物和制品。所述方法包括施用同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，其特异性地结合与疾病相关的抗原并在结合这样的抗原后产生应答，例如针对这样的分子的免疫应答。
所述方法可以用于治疗例如血液学肿瘤(WHO分类，2008)和实体瘤。血液学肿瘤包括例如淋巴样恶性肿瘤(急性和慢性白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤)、骨髓恶性肿瘤(白血病、骨髓增生异常综合征、骨髓增生异常或骨髓增生性肿瘤)和混合谱系恶性肿瘤。实体瘤包括例如表达在治疗中使用的CAR-T细胞所靶向的抗原的实体瘤。
所述方法适合用于治疗成人和儿童人群，包括所有年龄子集，并且可以用作任何治疗线，包括第一线或后续线。
在某些实施方案中，所述疾病是肿瘤。在某些实施方案中，它是癌症、恶性肿瘤、肿瘤或其它增生性疾病或障碍，诸如白血病、淋巴瘤，例如，慢性淋巴细胞白血病(CLL)、ALL(例如，复发性/难治性ALL)、非霍奇金淋巴瘤、急性髓性白血病、弥漫性大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)、多发性骨髓瘤、难治性滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、惰性B细胞淋巴瘤、B细胞恶性肿瘤、结肠癌、肺癌(例如，小细胞和非小细胞肺癌)、肝癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、皮肤癌、黑素瘤、骨癌和脑癌、卵巢癌、上皮癌、肾细胞癌、胰腺腺癌、霍奇金淋巴瘤、宫颈癌、结直肠癌、胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤、尤因肉瘤、髓母细胞瘤、骨肉瘤、滑膜肉瘤、头和颈鳞状细胞癌(HNSCC)和/或间皮瘤。在某些实施方案中，所述疾病是白血病或淋巴瘤。在某些实施方案中，所述疾病是急性成淋巴细胞性白血病。在某些实施方案中，所述疾病是复发性或难治性急性成淋巴细胞性白血病。在某些实施方案中，所述疾病是非霍奇金淋巴瘤(NHL)。
在某些实施方案中，所述疾病是急性成淋巴细胞性白血病(ALL)。在某些实施方案中，所述疾病是儿科急性成淋巴细胞性白血病(ALL)。
在某些实施方案中，所述疾病是晚期淋巴样恶性肿瘤诸如B-细胞急性成淋巴细胞性白血病(B-ALL)。在某些实施方案中，所述疾病是难治性B-ALL，例如成年人难治性B-ALL。在某些实施方案中，所述疾病是复发性B-ALL，例如成年人复发性B-ALL。
在某些实施方案中，所述疾病是非霍奇金淋巴瘤，诸如大B-细胞和/或滤泡性淋巴瘤。大B细胞性淋巴瘤可能是根据2018年WHO淋巴瘤分类修订版使用组织学或细胞学方法诊断的大B细胞性淋巴瘤：弥漫性大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)-未另行指定(NOS)(生发中心B-细胞[GCB]和非-GCB)，DLBCL与任何级别的血管内大B细胞性淋巴瘤的滤泡性淋巴瘤并存，与慢性炎症相关的DLBCL，间变性淋巴瘤激酶阳性的(ALK+)DLBCL，爱泼斯坦-巴尔病毒阳性的(EBV+)DLBCL-NOS，富含T细胞/组织细胞的大B细胞淋巴瘤，具有IRF4/MUM1重排的DLBCL，具有MYC和BCL2和/或BCL6的易位(两重/三重击中)的高级别B细胞淋巴瘤，原发性皮肤DLBCL-leg类型，滤泡性淋巴瘤向DLBCL的转化，原发性纵隔B细胞淋巴瘤(PMBCL)；或滤泡性淋巴瘤。为治疗要考虑的参数包括，例如，所施用的CAR-T的动力学参数、疾病评价(适于目标疾病)和受试者的健康状况。
治疗方法可以包括几个阶段，包括淋巴细胞耗竭(任选地，具有前驱给药)、治疗和任选的再治疗。
淋巴细胞耗竭
在某些实施方案中，在第一剂量和/或后续剂量的CAR-T细胞之前将淋巴细胞耗竭(LD)方案施用给受试者。在某些实施方案中，与第一剂量和/或后续剂量的CAR-T细胞并行地将淋巴细胞耗竭方案施用给受试者。在某些实施方案中，在第一剂量和/或后续剂量的CAR-T细胞之前、过程中和/或之后施用淋巴细胞耗竭方案。
本文描述了和/或本领域已知合适的LD方案。在某些实施方案中，LD在CAR-T输注之前、之后或与其并行地开始。LD施用的剂量和时机可以根据CAR-T的首次或后续剂量进行调整。在某些实施方案中，LD的持续时间是约3至5天。在某些实施方案中，LD的结束与CAR-T施用的开始之间的时间窗是在约2天至约2周之间。在某些实施方案中，在施用一定剂量的CAR-T细胞之前约15至7天开始LD。在某些实施方案中，在施用一定剂量的CAR-T细胞之前约19至5天开始LD。在某些实施方案中，在施用一定剂量的CAR-T细胞之前约3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20天开始LD。在某些实施方案中，LD方案的持续时间为约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14天。在某些实施方案中，在LD结束后约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14天施用一定剂量的CAR-T细胞。
在某些实施方案中，LD方案包括施用一种或多种化疗药物。
在某些实施方案中，LD方案包括施用抗-CD52抗体，诸如识别人分化簇(CD)52抗原的抗体，所述CD52抗原是在大多数淋巴样细胞上表达的细胞表面糖蛋白。本文中使用的CD52单克隆抗体是针对21-28kD细胞表面糖蛋白CD52的抗体。CD52是存在于全部人外周血淋巴细胞和单核细胞/巨噬细胞的至少95％上的丰富分子(每个细胞大约5×105个抗体结合位点)。用于本文所述的方法和组合物中的示例性CD52抗体包括例如阿仑珠单抗。在某些实施方案中，CD52抗体包含如在下面表1中所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3序列。
表1：示例性CD52抗体CDR序列
Figure BDA0002561337770000231
在某些实施方案中，CD52抗体包含含有下面表2所示序列的VH和/或VL。
表2：示例性CD52抗体VH和VL序列
Figure BDA0002561337770000241
Figure BDA0002561337770000251
Figure BDA0002561337770000261
在某些实施方案中，CD52抗体包含VH，其具有SEQ ID NO：8的序列、或与SEQ IDNO：8具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性的序列。在某些实施方案中，CD52抗体包含VL，其具有SEQ ID NO：10的序列、或与SEQ ID NO：10具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性的序列。在某些实施方案中，CD52抗体包含具有SEQ ID NO：8的序列的VH和具有SEQ ID NO：10的序列的VL。在某些实施方案中，CD52抗体包含由SEQ ID NO：9的DNA序列编码的VH和由SEQ ID NO：11的DNA序列编码的VL。
在某些实施方案中，所述抗-CD52抗体是重组人源化的IgG1κ单克隆抗体(mAb)。在某些实施方案中，所述抗-CD52抗体是阿仑珠单抗。阿仑珠单抗是针对21-28kD细胞表面糖蛋白CD52的重组DNA-衍生的人源化的单克隆抗体。参见，例如，Saif等人，PediatrTransplant 2015 Mar；19(2)：211-8。在某些实施方案中，所述抗-CD52抗体包含从阿仑珠单抗的CDR分离或衍生出的一个或多个CDR序列。在某些实施方案中，所述抗-CD52抗体包含SEQ ID NO：8的序列、或与SEQ ID NO：8具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性的序列。在某些实施方案中，所述抗-CD52抗体包含SEQ ID NO：10的序列、或与SEQ ID NO：10具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性的序列。在某些实施方案中，所述抗-CD52抗体包含含有SEQ ID NO：2的序列的HCDR1、含有SEQ ID NO：3的序列的HCDR2、含有SEQ ID NO：4的序列的HCDR3、含有SEQID NO：5的序列的LCDR1、含有SEQ ID NO：6的序列的LCDR1和/或含有SEQ ID NO：7的序列的LCDR3。在某些实施方案中，所述抗-CD52抗体包含含有SEQ ID NO：2的序列的HCDR1、含有SEQ ID NO：3的序列的HCDR2、含有SEQ ID NO：4的序列的HCDR3、含有SEQ ID NO：5的序列的LCDR1、含有SEQ ID NO：6的序列的LCDR1和/或含有SEQ ID NO：7的序列的LCDR3；其中所述抗-CD52抗体包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列、或与SEQ ID NO：8和/或SEQ IDNO：10具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性的序列。
在某些实施方案中，LD包括疗法组合的施用。在某些实施方案中，所述组合包括：氟达拉滨(总剂量范围约90至150mg/m2)和环磷酰胺(总剂量范围约1000至4000mg/m2)，有或没有抗-CD52药物(例如，抗-CD52抗体诸如包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)(总剂量约0.3至约1mg/kg，或约30mg至约40mg、约25至约60mg或约100mg至约120mg的平剂量)。在某些实施方案中，所述组合包括：氟达拉滨(约30mg/m2)和环磷酰胺(总剂量范围约500至600mg/m2)，有或没有抗-CD52药物(例如，CD52抗体)(总剂量约0.3至约1mg/kg，或约30mg至约40mg、约25至约60mg或约100mg至约120mg的平剂量)。在某些实施方案中，所述组合包括：氟达拉滨(约30mg/m2)和环磷酰胺(约300mg/m2)，有或没有抗-CD52药物(例如，CD52抗体)(总剂量约0.3至约1mg/kg，或约30mg至约40mg、约25mg至约60mg或约100mg至约120mg的平剂量)。在某些实施方案中，所述组合包括：氟达拉滨(约90mg/m2)、环磷酰胺(约1500mg/m2)且有或没有抗-CD52药物(例如抗-CD52抗体，约1mg/kg)。在某些实施方案中，所述组合包括：氟达拉滨(约150g/m2)和环磷酰胺(约130mg/kg)，有或没有抗-CD52药物(例如抗-CD52抗体，总剂量约0.3至约1mg/kg，或约30mg至约40mg、约25至约60mg或约100mg至约120mg的平剂量)。在某些实施方案中，所述组合包括：氟达拉滨(约150g/m2)和环磷酰胺(约120mg/kg或约130mg/kg)，有或没有抗-CD52药物(例如抗-CD52抗体)，总剂量约0.3至约1mg/kg，或约30mg至约40mg、约25至约60mg或约100mg至约120mg的平剂量)。在某些实施方案中，所述组合包括：氟达拉滨(约30mg/m2/天)和环磷酰胺(约300mg/m2/天)，有或没有抗-CD52药物(例如抗-CD52抗体，约13mg/天)。在某些实施方案中，所述组合包括：氟达拉滨(约30mg/m2/天)和环磷酰胺(约300mg/m2/天)，有或没有抗-CD52药物(例如抗-CD52抗体，约10mg/天)。在某些实施方案中，在一天的过程中施用这些以上剂量。在某些实施方案中，在多天内施用这些以上剂量。
在某些实施方案中，在第一天施用氟达拉滨和环磷酰胺，并在第二天施用抗-CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)。在某些实施方案中，在施用CAR-T细胞之前在第一天施用氟达拉滨和环磷酰胺，并在第二天施用抗-CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)；其中所述第二天是施用CAR-T细胞的同一天，或所述第二天是在施用CAR-T细胞以后。在某些实施方案中，在第一天施用氟达拉滨和环磷酰胺，在第二天施用CAR-T细胞，并在第二天以后至少约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11或约12周施用抗-CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ IDNO：10的序列的抗体)。在某些实施方案中，在施用CAR-T细胞之前施用氟达拉滨和环磷酰胺，并在施用CAR--T细胞以后至少约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11或约12周施用抗-CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)。
在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨和环磷酰胺(FC)。在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨和抗-CD52抗体(例如，包含SEQ IDNO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)(FA)。在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案包括施用环磷酰胺和抗-CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)(CA)。在某些实施方案中，淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨、环磷酰胺和抗-CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)(FCA)。
基于患者的血液学分析和血液学恢复，可以确定在第一或第二/后续剂量的CAR-T细胞之前的特定淋巴细胞耗竭方案药物的选择和剂量。在重复给药的情况下，第二淋巴细胞耗竭方案可以比第一淋巴细胞耗竭方案大致上更强(例如，基于第一剂量以后淋巴细胞、嗜中性粒细胞的恢复和病毒再激活)。例如，在重复给药时，如果淋巴细胞和嗜中性粒细胞水平是高的，则可以使用强的或侵袭性的淋巴细胞耗竭方案。可替换地，在重复给药时，如果淋巴细胞水平是低的，则可以使用更弱的或更少侵袭性的淋巴细胞耗竭方案。在某些实施方案中，如果在重复给药时胚细胞的数目是高的，则使用强的或侵袭性的淋巴细胞耗竭方案。在某些实施方案中，如果在重复给药时胚细胞的数目是低的，则使用更弱的或更少侵袭性的淋巴细胞耗竭方案。
在某些实施方案中，可以在重复给药时应用增加强度的LD方案(有或没有抗-CD52药物)。在某些实施方案中，例如在重复给药时在3-4级淋巴细胞减少的情况下，可以应用降低强度的LD方案(有或没有抗-CD52药物)。
在某些实施方案中，同时施用氟达拉滨/环磷酰胺(FC)或氟达拉滨/环磷酰胺/抗-CD52抗体(FCA)的淋巴细胞耗竭方案的组分；在其它实施方案中，依次施用所述组分。在某些实施方案中，所述受试者接受在CAR-T细胞疗法的第一剂量之前的FC方案；和在CAR-T细胞疗法的重复给药之前的FCA方案。在某些实施方案中，所述受试者接受在CAR-T细胞疗法的第一剂量之前的FCA方案；和在CAR-T细胞疗法的重复给药之前的第二FCA方案。
在表3A、3B、3C、3D和3E中提供了示例性LD方案。在表3A-3E中，在计划表中指示的时机是以天为单位相对于CAR-T细胞给药(D0)的施用时机。负数指示在施用CAR-T细胞(在D0)之前的天数。
表3A
Figure BDA0002561337770000291
表3B
Figure BDA0002561337770000301
表3C
Figure BDA0002561337770000302
表3D
Figure BDA0002561337770000303
表3E
Figure BDA0002561337770000304
在某些实施方案中，所述LD方案可以进一步包含用Mensa(2-巯基乙磺酸钠)治疗。
前驱给药
在某些实施方案中，所述方法可以包括在淋巴细胞耗竭方案之前输注相关反应的前驱给药。在某些实施方案中，所述方法可以包括在用抗-CD52抗体治疗之前施用的前驱给药。在某些实施方案中，所述前驱给药可以包括用高剂量皮质类固醇治疗。例如，所述前驱给药可以包括用2mg/kg甲泼尼龙治疗。在某些实施方案中，在即将输注抗-CD52抗体之前施用前驱给药。在某些实施方案中，在CAR-T细胞(例如，UCART19)的任何输注之前至少一天或至少两天中断前驱给药。
在某些实施方案中，所述前驱给药可以包括用抗组胺剂、西米替丁、雷尼替丁和对乙酰氨基酚中的一种或多种治疗。可以施用抗组胺剂，例如，在施用抗-CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)之前约1天、约1小时或约0.5小时。可以施用对乙酰氨基酚，例如，在施用抗-CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)之前约1天、约1小时或约0.5小时。
治疗
在某些实施方案中，通过静脉内输注来施用CAR-T细胞。在某些实施方案中，所述静脉内输注历时约1分钟、约3分钟、约5分钟、约10分钟、约30分钟、约1小时、约3小时、约6小时、约12小时或约24小时。
在某些实施方案中，治疗患有难治性和/或复发性CD19+B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的成年受试者的方法包括给所述受试者施用至少一剂包含抗-人CD194-1BB/CD3ζCAR的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其中所述至少一剂选自约6x105细胞/剂、约6x106细胞/剂、约6-8x107细胞/剂和约1.8-2.4x108细胞/剂。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞表达SEQ ID NO：1的CAR。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是UCART19(CD19)CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD-52缺陷的。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD52-缺陷细胞和CD52-阳性细胞的混合物。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞表达安全开关，诸如RQR8。
在某些实施方案中，治疗患有难治性和/或复发性CD19+B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的儿科受试者的方法包括给所述受试者施用至少一剂包含抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其中所述至少一剂是约2-8x107细胞/剂。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞表达SEQ ID NO：1的CAR。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是UCART19(CD19)CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD-52缺陷的。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD52-缺陷细胞和CD52-阳性细胞的混合物。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞表达安全开关，诸如RQR8。
在某些实施方案中，治疗患有非霍奇金淋巴瘤(例如，难治性和/或复发性大B细胞性淋巴瘤或滤泡性淋巴瘤)的受试者的方法包括给所述受试者施用至少一剂同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)(例如，抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR)，其中所述至少一剂是约20x106细胞/剂至约360x106细胞/剂。在某些实施方案中，所述至少一剂选自约20x106细胞/剂、约40x106细胞/剂、约80x106细胞/剂、约120x106细胞/剂、240x106细胞/剂和约360x106细胞/剂。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞表达SEQ ID NO：1的CAR。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是UCART19(CD19)CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD-52缺陷的。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是CD52-缺陷细胞和CD52-阳性细胞的混合物。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞表达安全开关，诸如本文描述的RQR8安全开关。
在某些实施方案中，直到CAR施用以后至少14天或至少28天，CAR表达在受试者中是可检测的。在某些实施方案中，在CAR-T(例如，UCART19)施用以后至少1个月、至少1.3个月、至少1.4个月、至少1.6个月、至少1.8个月、至少2个月、至少2.3个月、至少1.4个月、至少1.6个月、至少1.8个月、至少3个月、至少3.3个月、至少3.4个月、至少3.6个月、至少3.8个月、至少6个月、至少12个月或至少36个月，所述受试者表现出CR(完全应答)或Cri(具有血细胞计数不完全恢复的完全应答)。
使用CAR-T细胞的再治疗方法
本文还提供了用CAR-T细胞再治疗(重复给药)的方法。具体地，所述方法包括给已经接受第一剂量的受试者施用一个或多个后续剂量的细胞，和/或施用第一剂量和一个或多个后续剂量。通常以特定的量并根据特定的时机参数施用剂量。在某些实施方案中，所述方法通常包括施用第一剂量的细胞，从而减少疾病负担，随后是在相对于所述第一剂量的特定时间窗内施用的后续剂量的细胞，或给已经接受了这样的第一剂量的受试者施用后续剂量。在某些实施方案中，然后施用另外的后续剂量，例如在相对于后续剂量相同或相似的时间窗口内。在某些实施方案中，将所施用的细胞的数目和多次剂量的时机设计为改善一种或多种结果，例如降低对受试者的毒性的可能性或程度、改善受试者对施用的细胞的暴露和/或施用的细胞的持久性、和/或改善治疗效果。还提供了含有细胞并且被设计成用于在这样的给药方案以后施用的制品。
在某些实施方案中，要用一个或多个后续剂量的细胞治疗的受试者处于复发中。这意味着，所述患者在初始剂量后的第一时间点处于CR(完全应答)或Cri(具有血细胞计数不完全恢复的完全应答)，但是在第二个更晚的时间点复发。所述复发可以是例如形态学复发，其特征是骨髓中大于或等于5％的胚细胞，与胚细胞在骨髓中的存在有关的髓外疾病的存在，或最小残留疾病(MRD，定义为在骨髓中大于或等于3-10个胚细胞)的存在。
在某些实施方案中，用一个或多个后续剂量的细胞治疗的受试者在施用初始剂量以后表现出次优应答。例如，受试者在施用初始剂量以后约7、约14、约28、约60、约90、约120或约365天可能表现出最小残留疾病(MRD)的存在。
在某些实施方案中，要用一个或多个后续剂量的细胞治疗的受试者在施用初始剂量以后表现出CAR的非持久性。例如，受试者可能在初始剂量(D0，CAR扩增)以后表现出可检测到的CAR，但在D0以后却没有可检测的CAR。在某些实施方案中，即使受试者表现出CAR-T细胞的活性的某些迹象(诸如细胞因子释放综合征)，也会发生可检测的CAR的缺乏。
在某些实施方案中，要用一个或多个后续剂量的细胞治疗的受试者没有表现出CAR-T细胞的实质性扩增。在某些实施方案中，所述受试者在施用初始剂量以后约7、约14、约28、约60、约90、约120或约365天没有可检测的CAR扩增并且无应答。在某些实施方案中，所述受试者在施用初始剂量以后约7、约14、约28、约60、约90、约120或约365天没有可检测的CAR扩增和治疗应答的一些征象(例如，MRD阳性受试者)。在某些实施方案中，所述受试者在施用初始剂量以后约7、约14、约28、约60、约90、约120或约365天没有可检测的CAR扩增和完全应答(例如，MRD阴性受试者)。
在某些实施方案中，所提供的方法包括以与第一剂量的细胞大约相同的数目和因此相似的剂量施用的后续剂量的细胞。如本文证实的，与单剂量相比，后续剂量的细胞的施用可以是有利的。在某些实施方案中，后续剂量的细胞(诸如约6×105细胞、约6×106细胞、约6×107细胞、约8×107细胞、约1.8×108细胞或约2.4×108细胞的剂量)的施用与受试者的总生存期增加有关，特别是在治疗前表现出形态学疾病的受试者中。在某些实施方案中，所述方法包括施用第一剂量的细胞，所述细胞可以在存在疾病相关抗原的情况下扩增并减轻与疾病相关的症状，但是没有可能与更高剂量相关的相同程度的毒性结果。
在某些实施方案中，所述第一剂量通常也足够大以有效减少疾病负担。在某些情况下，如果细胞剂量足以在体内扩增和减轻疾病，则第一剂量足够大以减轻疾病负担。在某些实施方案中，第一剂量的细胞由此减轻或减少疾病负担，例如肿瘤大小，而不影响严重的不希望的结果。在某些情况下，第一剂量是有效减少肿瘤负荷的细胞量，例如通过将疾病从形态学环境减少到最小残留疾病(MRD)和/或临床或完全减轻。在一些方面，第一剂量是低剂量。在一些方面，例如，在相对低的疾病负担的情况下，第一剂量可以更高。
在某些实施方案中，可以使用风险适应的给药方案确定剂量中细胞或CAR-T细胞的适当数目或量或相对数目或量。例如，在一些方面，在输注CAR-T细胞之前，确定受试者的疾病负担，并且基于该疾病负担，选择CAR-T细胞的第一剂量(例如低剂量或高剂量)，其可以最小化毒性并最大化效力，例如基于在上面和在本文其它地方描述的观察结果，其中较高剂量的重组受体表达细胞(例如，表达CAR的细胞，诸如表达CAR的T细胞)可以与毒性结果相关，诸如在具有形态学疾病负担的受试者中，严重的神经中毒，其在具有相对更低的疾病负担的受试者中未必观察到或未在大程度上观察到。例如，观察到治疗前具有高骨髓肿瘤负荷(在某些情况下，其与治疗后更大的CAR T-细胞扩增有关)的受试者具有更高的发生严重神经中毒(其可能需要ICU护理)的风险。
在某些实施方案中，在第一剂量的同种异体CAR-T细胞以后评估受试者的应答。可以在施用第一或先前剂量的同种异体CAR-T细胞以后约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11或约12周进行这种评估。在某些实施方案中，在施用第一剂量的同种异体CAR-T细胞以后约一个月、约两个月或约三个月之间评估受试者的应答。
在某些实施方案中，可以在施用后续剂量的CAR-T细胞之前确认CAR-T靶向的抗原的表达。例如，通过流式细胞计量术可以在血液、其它基质或实体瘤中评估抗原的表达。在某些实施方案中，可以关于受试者没有产生针对先前施用的CAR-T的抗-HLA抗体来评估受试者。在某些实施方案中，可以关于受试者在先前CAR-T给药以后没有产生抗-scFv抗体来评估受试者。在某些实施方案中，可以关于在任何CAR-T疗程(第一或后续疗程)以后不存在任何重大安全性来评估受试者。在某些实施方案中，可以关于与CAR-T给药相关的后续淋巴细胞耗竭的适合性来评估受试者。在某些实施方案中，在CAR-T细胞施用以后供体特异性的抗-HLA、抗-CAR scFv和/或抗-TALEN抗体的不存在指示受试者适合施用后续剂量的CAR-T细胞。
在某些实施方案中，在CAR-T细胞施用后的首次应答评价当天以后CAR-T细胞的持久性的缺失指示受试者适合施用后续剂量的CAR-T细胞。在某些实施方案中，在CAR-T细胞施用后的首次应答评价当天以后可以关于CAR-T细胞持久性的缺失评估受试者。根据在例如给药后约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11或约12周时的疾病，可以进行评估，无论评价的应答如何。动力学评价的参数包括例如应答评价的AUC0时间点、Cmax(转基因CAR-T的峰值扩增)、最后观察到的可计量的转基因的时间以及在任何其它组织或流体中的CAR-T细胞扩增水平。无论CAR-T持续性如何，首次CAR-T给药后的次优应答可能包括以下一种或多种：(a)完全应答(CR)或具有血细胞计数不完全恢复的完全应答(CRi)，具有可检测的最小残留疾病(例如，在白血病患者中)；(b)缺乏细胞遗传应答；(c)骨髓完全应答；(d)部分应答；和/或(e)稳定应答。
在某些实施方案中，可以在施用一定剂量的CAR-T细胞以后首次应答评价当天以后评估受试者的不利事件。可以在例如施用后约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11或约12周进行评估。在某些实施方案中，可以在例如CAR-T施用后的前四周(直到第28天)内进行评估。在表4中总结了示例性不利事件。
表4
Figure BDA0002561337770000351
在某些实施方案中，疾病复发可以表示在首次CAR-T施用后已经达到最佳CR以后的复发。在某些实施方案中，疾病复发可以表示在用CAR-T获得一种或多种CR以后的复发，不管何时发生复发。
后续的CAR-T剂量可以由相同或其它供体(用于CAR-T制造的健康细胞的供体)产生。可以在后续剂量中应用相同的或不同的(更高的或更低的)剂量的CAR-T细胞。
CAR-T细胞可以作为单剂量或作为分次剂量施用。可以将剂量分成在一段时间(例如七天阶段)内的两个或更多个剂量。在某些实施方案中，分次剂量包含在一段时间内的第一次和第二次施用。在某些实施方案中，在第一次和第二次施用中的每一次施用相等数目的细胞。在某些实施方案中，在第一次施用期间施用的细胞少于在第二次施用期间施用的细胞。在某些实施方案中，与第二次施用期间相比，在第一次施用期间施用更大数目的细胞。在某些实施方案中，分次剂量包括在一段时间内的第一次、第二次施用和第三次施用。在某些实施方案中，在第一次、第二次和第三次施用中的每一次施用相等数目的细胞。在某些实施方案中，在第一次施用期间施用的细胞少于在第二次和第三次施用期间施用的细胞。在某些实施方案中，在第一次施用期间施用的细胞数目大于在第二次和第三次施用期间施用的细胞数目。在某些实施方案中，在第二次施用期间施用的细胞少于在第一次和第三次施用期间施用的细胞。在某些实施方案中，在第二次施用期间施用的细胞数目大于在第一次和第三次施用期间施用的细胞数目。在某些实施方案中，在第三次施周期间施用的细胞少于在第一次和第二次施用期间施用的细胞。在某些实施方案中，与第一次和第二次施用期间相比，在第三次施用期间施用更大数目的细胞。
在某些实施方案中，在第一天和第二天施用分次剂量。在某些实施方案中，在第一天施用一半剂量，在第二天施用一半剂量。在某些实施方案中，在第一天施用三分之一的剂量，在第二天施用三分之二的剂量。在某些实施方案中，在第一天施用三分之二的剂量，在第二天施用三分之一的剂量。在某些实施方案中，在彼此的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10天内施用分次剂量的每个部分剂量。在特定的实施方案中，在彼此的7天内施用分次剂量的每个部分剂量。在某些实施方案中，在连续天施用每个部分剂量。
在某些实施方案中，在第一天、第二天和第三天施用分次剂量。在某些实施方案中，在第一天施用三分之一的剂量，在第二天施用三分之一的剂量，并且在第三天施用三分之一的剂量。在某些实施方案中，在彼此的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10天内施用分次剂量的每个部分剂量。在特定的实施方案中，在彼此的7天内施用分次剂量的每个部分剂量。在某些实施方案中，在连续天施用每个部分剂量。
在某些实施方案中，在至少三天中施用分次剂量，例如至少四天、至少五天、至少六天或至少七天。
给药方案
在某些实施方案中，使用平剂量施用同种异体CAR-T细胞。在其它实施方案中，使用剂量带施用同种异体CAR-T细胞。例如，可以使用剂量带来避免宽范围的CAR-T细胞暴露的风险。在某些实施方案中，可以使用重量带。例如，但不限于，可以给＜66kg的受试者施用X剂量，并且给＞66kg的受试者施用约1.33X剂量。在某些实施方案中，可以给＞50kg的受试者施用一个剂量，并且可以给≤50kg的受试者施用不同剂量。
在表5a中提供了第一剂量的UCART19的示例性剂量水平，其用于用在具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的成年患者中。
表5a
Figure BDA0002561337770000371
在表5b中提供了第一剂量的UCART19的示例性剂量水平，其用于用在具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的高危儿科患者中。
表5b
Figure BDA0002561337770000381
在表5c中提供了第一剂量的UCART19的示例性剂型，其用于用在具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的高危儿科患者中。
表5c
Figure BDA0002561337770000382
在表5d中提供了第一剂量的UCART19的示例性剂量，其用于用在具有非霍奇金淋巴瘤，诸如复发性/难治性大B-细胞和/或滤泡性淋巴瘤的成年患者中。
表5d
Figure BDA0002561337770000391
在某些实施方案中，同种异体CAR-T细胞给药方案包括施用在约1x105至5x108细胞之间或在约1x104细胞/kg至约3x106细胞/kg之间的第一剂量的CAR T-细胞。在某些实施方案中，同种异体CAR-T细胞给药方案包括施用约6x106细胞(平剂量)的第一剂量的CAR T-细胞。在某些实施方案中，同种异体CAR-T细胞给药方案包括施用第一剂量的约1x104、约2x104、约3x104、约4x104、约5x104、约6x104、约7x104、约8x104、约9x104、约10x104、约1x105、约2x105、约3x105、约4x105、约5x105、约6x105、约7x105、约8x105、约9x105、约1x106、约2x106、约3x106、约4x106、约5x106、约6x106、约7x106、约8x106、约9x106、约1x107、约2x107、约3x107、约4x107、约5x107、约6x107、约7x107、约8x107、约9x107、约1x108、约2x108、约3x108、约4x108、约5x108、约6x108、约7x108、约8x108或约9x108CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括施用第一剂量的约1x104细胞、约6x106细胞、约7x106细胞(重量分带)或约1.8x108细胞(重量分带)。在某些实施方案中，给药方案包括施用第一剂量的约20x106细胞/剂、约40x106细胞/剂、约80x106细胞/剂、约120x106细胞/剂、240x106细胞/剂或约360x106细胞/剂(重量分带)。在某些实施方案中，当受试者具有小于或等于50kg的重量时，所述剂量选自约20x106细胞/剂、约80x106细胞/剂和约240x106细胞/剂。在某些实施方案中，当受试者具有大于50kg的重量时，所述剂量选自约20x106细胞/剂、约40x106细胞/剂、约120x106细胞/剂和约360x106细胞/剂。
在某些实施方案中，给药方案包括施用后续剂量的约1x104、约2x104、约3x104、约4x104、约5x104、约6x104、约7x104、约8x104、约9x104、约10x104、约1x105、约2x105、约3x105、约4x105、约5x105、约6x105、约7x105、约8x105、约9x105、约1x106、约2x106、约3x106、约4x106、约5x106、约6x106、约7x106、约8x106、约9x106、约1x107、约2x107、约3x107、约4x107、约5x107、约6x107、约7x107、约8x107、约9x107、约1x108、约2x108、约3x108、约4x108、约5x108、约6x108、约7x108、约8x108或约9x108 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括施用后续剂量的约1x104细胞、约6x106细胞、约7x106细胞或约1.8x108细胞。在某些实施方案中，同种异体CAR-T细胞给药方案包括施用后续剂量的约6x106细胞(平剂量)的CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括施用后续剂量的约20x106细胞/剂、约40x106细胞/剂、约80x106细胞/剂、约120x106细胞/剂、240x106细胞/剂或约360x106细胞/剂(重量分带)。在某些实施方案中，当受试者具有小于或等于S0kg的重量时，所述剂量选自约20x106细胞/剂、约80x106细胞/剂和约240x106细胞/剂。在某些实施方案中，当受试者具有大于50kg的重量时，所述剂量选自约20x106细胞/剂、约40x106细胞/剂、约120x106细胞/剂和约360x106细胞/剂。
在某些实施方案中，同种异体CAR-T细胞给药方案包括施用第一剂量的约6x106细胞的CAR T-细胞和后续剂量的约6x106细胞的CAR T-细胞。在某些实施方案中，后续剂量的CAR-T细胞具有与先前剂量的CAR-T细胞大约相同数目的细胞。在某些实施方案中，后续剂量的CAR-T细胞具有比先前剂量的CAR-T细胞更多的细胞。在某些实施方案中，后续剂量的CAR-T细胞具有比先前剂量的CAR-T细胞更少的细胞。
在某些实施方案中，可以在相对于初始或先前剂量的同种异体CAR-T细胞的特定时间窗内施用后续剂量的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，在施用初始或先前剂量的同种异体CAR-T细胞以后约4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23或24周施用后续剂量的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，在施用初始或先前剂量的同种异体CAR-T细胞以后约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23或甚至24个月之间施用后续剂量的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，在施用初始或先前剂量的同种异体CAR-T细胞以后约15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109或110天施用后续剂量的同种异体CAR-T细胞。
在某些实施方案中，在施用第一剂量(初始剂量)(例如，开始施用第一或先前剂量)和开始施用后续剂量(重复给药，例如，开始施用后续剂量)之间的时间大于约4周，例如，大于约5、6、7、8或9周，例如，大于约20周，例如，在约9至约35周之间，在约14至约28周之间，在15至27周之间或在16周至约18周之间；和/或在或约15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26或27周。在某些实施方案中，后续剂量的施用(例如，其开始)是在第一或先前剂量的施用(例如，其开始)以后超过约5周且小于约24周。在某些实施方案中，在第一剂量开始以后17周开始后续剂量的施用。在某些实施方案中，第一剂量和后续剂量(例如，其开始)或先前和下一个后续剂量的施用之间的时间大于约5周且小于约24周，诸如在10至24周之间，诸如约17周。在某些实施方案中，第一剂量和后续剂量(例如，其开始)的施用之间的时间是约17周。
在某些实施方案中，所述受试者在第一次CAR-T输注后28天至9个月接受重复给药。可以采用与第一次CAR-T给药相同的淋巴细胞耗竭方案，或者可以根据患者的状况和宿主免疫系统的恢复程度来调整方案。
在某些实施方案中，如果在施用后续剂量的同种异体CAR-T细胞以后受试者处于疾病复发中，则可以施用另一个后续剂量的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，如果在施用后续剂量的同种异体CAR-T细胞以后受试者处于疾病复发中并且观察到CAR-T的持续性的缺乏，则可以施用另一个后续剂量的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，可以在第一剂量以后施用两个或更多个后续剂量的同种异体CAR-T细胞。用于后续施用的各种方案可以用于延长同种异体CAR-T应答的持久性。例如，可以例如每隔一个月(在CAR-T的第一剂量以后)或每3个月施用后续剂量的CAR-T。可以施用任何数目的后续输注。重复给药的时机可以适应患者的健康状况。在图1中描绘了一个示例性的给药方案。
在某些实施方案中，给药方案包括施用第一剂量的约6x106 CAR-T细胞，随后在施用第一剂量之后约99天施用后续剂量的约6x106 CAR-T细胞。在其它实施方案中，给药方案包括施用第一剂量的约6x106 CAR-T细胞，然后每4周施用维持剂量的约6x106 CAR-T细胞，直到达到分子减轻。在其它实施方案中，给药方案包括施用第一剂量的约6x106 CAR-T细胞，然后每8周施用维持剂量的约6x106 CAR-T细胞，直到达到分子减轻。
在其它实施方案中，给药方案包括施用每两个月剂量的约6x106 CAR-T细胞。在其它实施方案中，给药方案包括施用约6x106 CAR-T细胞的剂量。
但是，取决于从业人员希望达到的药代动力学衰减的模式，其它剂量方案可能是有用的。通过常规技术和测定容易监测该疗法的进展。在优选的实施方案中，第一剂量与第一后续剂量和额外后续剂量在时间上彼此分开至少四周。给药方案可以随时间变化。
通常，对于同种异体CAR-T细胞的施用，初始候选剂量可以为约1.1至约2.3x105细胞/kg CAR-T细胞。为了本公开内容的目的，CAR-T细胞的典型平剂量可能在约1x104至1x105至1x106至1x107、至1x107、至1x108细胞或更多的任何范围内，取决于以上提到的因素。例如，可能使用约0.3x104细胞、约0.5x104细胞、约1x104细胞、约1.5x104细胞、约2x104细胞、约2.5x104细胞、约3x104细胞、约3.5x104细胞、约4x104细胞、约4.5x104细胞、约5x104细胞、约5.5x104细胞、约6x104细胞、约6.5x104细胞、约7x104细胞、约7.5x104细胞、约8x104细胞、约8.5x104细胞、约9x104细胞、约9.5x104细胞、约1x105细胞、约1.5x105细胞、2x105细胞、约2.5x105细胞、约3x105细胞、约3.5x105细胞、约4x105细胞、约4.5x105细胞、约5x105细胞、约5.5x105细胞、约6x105细胞、约6.5x105细胞、约7x105细胞、约7.5x105细胞、约8x105细胞、约8.5x105细胞、约9x105细胞、约9.5x105细胞、约1x106细胞、约1.5x106细胞、2x106细胞、约2.5x106细胞、约3x106细胞、约3.5x106细胞、约4x106细胞、约4.5x106细胞、约5x106细胞、约5.5x106细胞、约6x106细胞、约6.5x106细胞、约7x106细胞、约7.5x106细胞、约8x106细胞、约8.5x106细胞、约9x106细胞、约9.5x106细胞、约1x107细胞、约1.5x107细胞、2x107细胞、约2.5x107细胞、约3x107细胞、约3.5x107细胞、约4x107细胞、约4.5x107细胞、约5x107细胞、约5.5x107细胞、约6x107细胞、约6.5x107细胞、约7x107细胞、约7.5x107细胞、约8x107细胞、约8.5x107细胞、约9x107细胞、约9.5x107细胞、约1x108细胞、约1.5x108细胞、2x108细胞、约2.5x108细胞、约3x108细胞、约3.5x108细胞、约4x108细胞、约4.5x108细胞、约5x108细胞、约5.5x108细胞、约6x108细胞、约6.5x108细胞、约7x108细胞、约7.5x108细胞、约8x108细胞、约8.5x108细胞、约9x108细胞、约9.5x108细胞或约1x109细胞或更多的剂量。对于历时几周或更长时间的后续施用，取决于疾病，持续治疗直至出现期望的症状抑制或直至达到足够的治疗水平，例如，分子减轻。
一个示例性的给药方案包括施用第一剂量的约0.3x104细胞、约0.5x104细胞、约1x104细胞、约1.5x104细胞、约2x104细胞、约2.5x104细胞、约3x104细胞、约3.5x104细胞、约4x104细胞、约4.5x104细胞、约5x104细胞、约5.5x104细胞、约6x104细胞、约6.5x104细胞、约7x104细胞、约7.5x104细胞、约8x104细胞、约8.5x104细胞、约9x104细胞、约9.5x104细胞、约1x105细胞、约1.5x105细胞、2x105细胞、约2.5x105细胞、约3x105细胞、约3.5x105细胞、约4x105细胞、约4.5x105细胞、约5x105细胞、约5.5x105细胞、约6x105细胞、约6.5x105细胞、约7x105细胞、约7.5x105细胞、约8x105细胞、约8.5x105细胞、约9x105细胞、约9.5x105细胞、约1x106细胞、约1.5x106细胞、2x106细胞、约2.5x106细胞、约3x106细胞、约3.5x106细胞、约4x106细胞、约4.5x106细胞、约5x106细胞、约5.5x106细胞、约6x106细胞、约6.5x106细胞、约7x106细胞、约7.5x106细胞、约8x106细胞、约8.5x106细胞、约9x106细胞、约9.5x106细胞、约1x107细胞、约1.5x107细胞、2x107细胞、约2.5x107细胞、约3x107细胞、约3.5x107细胞、约4x107细胞、约4.5x107细胞、约5x107细胞、约5.5x107细胞、约6x107细胞、约6.5x107细胞、约7x107细胞、约7.5x107细胞、约8x107细胞、约8.5x107细胞、约9x107细胞、约9.5x107细胞、约1x108细胞、约1.5x108细胞、约2x108细胞、约2.5x108细胞、约3x108细胞、约3.5x108细胞、约4x108细胞、约4.5x108细胞、约5x108细胞、约5.5x108细胞、约6x108细胞、约6.5x108细胞、约7x108细胞、约7.5x108细胞、约8x108细胞、约8.5x108细胞、约9x108细胞、约9.5x108细胞或约1x109细胞的同种异体CAR-T细胞。在某些实施方案中，每月施用后续剂量。在某些实施方案中，每两个月施用后续剂量。在某些实施方案中，约每三个月施用后续剂量。在某些实施方案中，约每四个月施用后续剂量。在某些实施方案中，约每五个月施用后续剂量。在某些实施方案中，约每六个月施用后续剂量。在某些实施方案中，约每七个月施用后续剂量。在某些实施方案中，约每八个月施用后续剂量。在优选的实施方案中，第一剂量与第一后续剂量和额外后续剂量在时间上彼此隔开至少约四周。在某些实施方案中，每两个月施用后续剂量。
在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D0的第一剂量的约6x106 CAR-T细胞和在约D30至约D110之间的后续剂量的约6x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D0的第一剂量的约1x106 CAR-T细胞和在约D30至约D110之间的后续剂量的约6x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D0的第一剂量的约2x106 CAR-T细胞和在约D30至约D110之间的后续剂量的约6x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D0的第一剂量的约3x106 CAR-T细胞和在约D30至约D110之间的后续剂量的约6x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D0的第一剂量的约4x106 CAR-T细胞和在约D30至约D110之间的后续剂量的约6x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D0的第一剂量的约5x106 CAR-T细胞和在约D30至约D110之间的后续剂量的约6x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D0的第一剂量的约7x106 CAR-T细胞和在约D30至约D110之间的后续剂量的约6x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D0的第一剂量的约8x106 CAR-T细胞和在约D30至约D110之间的后续剂量的约6x106CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D0的第一剂量的约1x106CAR-T细胞和在约D30至约D110之间的后续剂量的约9x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D0的第一剂量的约1x107 CAR-T细胞和在约D30至约D110之间的后续剂量的约6x106 CAR-T细胞。
在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D-7至D-2的淋巴细胞耗竭方案，随后是在D0的第一剂量的约6x106 CAR-T细胞，随后是在D60至D100的任选淋巴细胞耗竭方案，随后是在D63至D104的后续剂量的6x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D-7至D-2的淋巴细胞耗竭方案，随后是在D0的第一剂量的约6x106CAR-T细胞，随后是在D60至D90的任选淋巴细胞耗竭方案，随后是在D63至D104的后续剂量的6x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D-7的淋巴细胞耗竭方案(LD)，随后是在D0的第一剂量的约6x106 CAR-T细胞，随后是在D70的减轻强度(相对于先前LD)的LD，随后是在D99的后续剂量的6x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D-15的淋巴细胞耗竭方案，随后是在D0的第一剂量的约6x106 CAR-T细胞，随后是在D60的淋巴细胞耗竭方案，随后是在D75的后续剂量的6x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D-7至D-2的淋巴细胞耗竭方案，随后是在D0的第一剂量的约6x106 CAR-T细胞，随后是在D60至D90的任选淋巴细胞耗竭方案，随后是在D63至D104的后续剂量的6x106 CAR-T细胞。在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D-7至D-2的淋巴细胞耗竭方案，随后是在D0的第一剂量的约6x106 CAR-T细胞，随后是在D60至D90的任选淋巴细胞耗竭方案，随后是在D63至D104的后续剂量的6x106 CAR-T细胞。
在某些实施方案中，给药方案包括给受试者施用在D-5至D-3的淋巴细胞耗竭方案，随后是第一剂量的约20x106细胞、约40x106细胞、约80x106细胞、约120x106细胞、约240x106细胞或约360x106细胞，随后是任选的后续剂量的CAR-T细胞。在某些实施方案中，所述淋巴细胞耗竭方案包括在约30mg/m2的剂量施用的氟达拉滨；在约300mg/m2的剂量施用的环磷酰胺；和任选地在约10至约13mg的剂量施用的CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)。
但是，取决于从业人员希望达到的药代动力学衰减的模式，其它剂量方案可能是有用的。通过常规技术和测定容易监测该疗法的进展。在某些实施方案中，第一剂量和第一后续剂量和额外后续剂量在时间上彼此隔开至少四周。给药方案可以随时间变化。
同种异体CAR-T细胞和额外药剂
接下来是根据本公开内容使用的示例性CAR-T细胞的描述。
所述方法包括施用特异性地结合疾病相关抗原并导致应答的CAR-T细胞，所述应答是例如与所述抗原结合后针对所述分子的免疫应答。除非特别提及是与特定类型的同种异体CAR-T细胞(例如UCART19细胞)相关的方法，否则任何同种异体CAR-T细胞都可以与本文所述方法一起使用。在某些实施方案中，使用对肿瘤特异性抗原具有特异性的同种异体CAR-T细胞来实践本发明的公开内容的方法和组合物。
在某些实施方案中，使用对CD19特异性的同种异体CAR-T细胞实践本发明的公开内容的方法和组合物。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞表达包含CD19结合结构域的CAR。在某些实施方案中，所述CD19结合结构域包含单链可变片段(scFv)。在某些实施方案中，所述scFv衍生自抗-CD19抗体(例如，4G7抗体)。在某些实施方案中，所述scFv包含分离自或衍生自抗-CD19抗体(例如，4G7抗体)的VH和VL。在某些实施方案中，所述scFv包含分离或衍生自抗-CD19抗体(例如，4G7抗体)的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LDCR2和LCDR3。
在某些实施方案中，所述CAR-T细胞表达包含CD19结合结构域、4-1BB结构域和/或CD3ζ结构域的CAR。
在某些实施方案中，所述CAR-T细胞还表达“安全开关”。安全开关可以包括能够选择转导细胞的表位和使得表达多肽的细胞能够被检测和/或删除的表位。在某些实施方案中，安全开关包括模拟位(mimitope)。示例性的安全开关公开在例如WO 2013/153391(其通过引用整体并入本文)中。在某些实施方案中，所述安全开关结合利妥昔单抗。在某些实施方案中，所述安全开关与CAR一起反式表达(例如作为同一细胞上的单独多肽)。在某些实施方案中，所述安全开关是RQR8。在某些实施方案中，以反式表达含有安全开关的RQR8。RQR8的全长和组分序列显示在下表6中。
表6：RQR8安全开关的组分
Figure BDA0002561337770000461
Figure BDA0002561337770000471
在某些实施方案中，所述安全开关是R2。
在某些实施方案中，所述CAR-T细胞不包含安全开关。
在某些实施方案中，在包含编码CAR的序列的同一载体上提供编码安全开关的序列。在某些实施方案中，在与包含编码CAR的序列的载体不同的载体上提供编码安全开关的序列。
在某些实施方案中，在包含CAR的同一多肽上提供编码安全开关的序列(即，以顺式提供)。在某些实施方案中，在与CAR不同的多肽上提供安全开关(即，以反式提供)。
因此，在某些实施方案中，安全开关与CAR反式表达(例如，作为同一细胞上的单独多肽)。在某些实施方案中，所述安全开关是RQR8。在某些实施方案中，以反式表达含有安全开关的RQR8。
在某些实施方案中，安全开关与CAR顺式表达，并且包含对抗体特异性的模拟位，如在WO 2013/153391中所述。
在某些实施方案中，所述CAR-T细胞进一步包含灭活的CD52基因。在某些实施方案中，CAR-T细胞是CD52-缺陷型。在某些实施方案中，用于施用给患者的CAR-T细胞包含CD52-缺陷细胞和CD52-阳性细胞的混合物。
在某些实施方案中，用于施用给患者的CAR-T细胞的组合物包含具有不同基因型的细胞的混合物。在某些实施方案中，所述组合物包含CAR-T细胞，其中约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或约100％的细胞具有灭活的CD52基因。在某些实施方案中，所述组合物包含CAR-T细胞，其中约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或约100％的细胞具有灭活的TRAC基因。在某些实施方案中，所述组合物包含CAR-T细胞，其中约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或约100％的细胞具有灭活的CD52基因，且进一步其中约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约99％或约100％的细胞具有灭活的TRAC基因。
在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是UCART19 CAR-T细胞。UCART19是同种异体的经工程改造的人T-细胞医学产品，正在开发用于治疗表达CD19的B细胞白血病，包括年轻的成年人、成年人和儿科急性成淋巴细胞性白血病(B-ALL)。公开的与UCART19有关的信息包括：Qasim等人，“Molecular remission of infant B-ALL after infusion of universalTALEN gene-edited CAR T cells”Sci Transl Med 2017年1月25日；9(374)，Gouble等人，“In Vivo Proof of Concept of Activity and Safety of UCART19，an Allogeneic“Off-the-Shelf”Adoptive T-Cell Immunotherapy Against CD19+ B-Cell Leukemias”Blood 2014，124(21)第4689页，和美国专利申请号14/891296(2016年5月2日公开为US20160145337)，它们中的每一篇通过引用整体并入本文。UCART19表达针对人CD19的CAR以及组合了来自CD34和CD20抗原的表位的安全开关RQR8。UCART19包含抗-人CD194-1BB/CD3ζCAR，其由表7中所示的一种或多种肽构成和/或如在美国专利申请公开号2016/0145337(其通过引用整体并入本文)中所述。
表7：UCART19序列
Figure BDA0002561337770000481
Figure BDA0002561337770000491
Figure BDA0002561337770000501
Figure BDA0002561337770000511
Figure BDA0002561337770000521
UCART19还另外经历了TRAC和CD52基因的同时破坏，随后耗尽了剩余的TCRαβ+细胞。UCART19包含源自鼠抗-人CD19 4G7杂交瘤的单链可变片段(scFv)、CD8铰链和跨膜结构域、4-1BB共刺激性结构域和CD3ζ信号传递结构域。UCART19的药用物质(DS)定义为同种异体的遗传修饰的CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞：其(i)含有表达抗-CD19 CAR的整合型自灭活(SIN)重组慢病毒递送载体以将T-细胞重新引导至CD19+肿瘤细胞并消除它们，(ii)表达RQR8安全开关，从而赋予对利妥昔单抗的敏感性，(iii)使用基于mRNA的
Figure BDA0002561337770000522
基因编辑通过破坏TRAC基因成为TCRαβ-阴性的，然后耗尽在制造过程中剩余的TCRαβ+细胞，以及(iv)使用基于mRNA的
Figure BDA0002561337770000523
基因编辑通过破坏CD52基因成为CD52-敲除细胞和CD52-阳性细胞的混合物，以允许将UCART19施用给先前或正在用抗-CD52抗体(例如，包含SEQ IDNO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)治疗的患者。
UCART19制造的示例性流程显示在图4A和图4B中。
本文中使用的UCART19(CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞)表示表达CD19 CAR和RQR8安全开关的UCART19细胞。所述细胞还包含灭活的TRAC基因。任选地，所述细胞包含灭活的CD52基因。
本文中使用的UCART19(CD19CAR/R2+_TCRαβ-_T-细胞)表示表达CD19 CAR和R2安全开关的UCART19细胞。所述细胞还包含灭活的TRAC基因。任选地，所述细胞包含灭活的CD52基因。
本文中使用的UCART19(CD19CAR/TCRαβ-_T-细胞)表示表达CD19 CAR的UCART19细胞。所述细胞还包含灭活的TRAC基因。任选地，所述细胞包含灭活的CD52基因。
在某些实施方案中，所述CAR-T细胞是表达在SEQ ID NO：1中所示的氨基酸序列的同种异体CAR-T细胞。
关于本文所述的所有方法，对CAR-T细胞组合物的提及也包括包含一种或多种额外药剂的组合物。这些组合物可以进一步包含合适的赋形剂，诸如药学上可接受的赋形剂，包括缓冲剂，它们是本领域众所周知的。本文中公开的组合物和方法可以单独使用，或者与其它常规治疗方法联合使用。
可以通过任何合适的途径将CAR-T细胞施用给受试者。本领域技术人员显而易见，本文描述的实施例无意是限制性的，而是可用技术的示例。因此，在某些实施方案中，根据已知方法将CAR-T细胞施周给受试者，诸如静脉内施用，例如，作为推注或通过一段时间内的连续输注、肌肉内、腹膜内、脑脊髓内、透皮、皮下、关节内、舌下、滑膜内、经由吹入法、鞘内、口服、吸入或局部途径。施用可以是全身性的，例如静脉内施用或局部施用。用于液体制剂的商购可得的喷雾器，包括喷射喷雾器和超声喷雾器，可用于施用。可以将液体制剂直接雾化，可以将低压冻干的粉末在重构后雾化。
CAR-T细胞的多种制剂可用于施用。在某些实施方案中，CAR-T细胞和药学上可接受的赋形剂可以处于各种制剂中。药学上可接受的赋形剂是本领域已知的，并且是有助于药理学上有效的物质的施用的相对惰性的物质。例如，赋形剂可以提供形式或稠度，或充当稀释剂。合适的赋形剂包括、但不限于稳定剂、润湿剂和乳化剂、用于改变渗量的盐、包囊剂、缓冲剂和皮肤穿透促进剂。
这些试剂可以与药学上可接受的媒介物诸如盐水、林格氏溶液、右旋糖溶液等组合。特定剂量方案，即剂量、时机和重复，将取决于特定个体和该个体的医疗史。
可接受的载体、赋形剂或稳定剂在所采用的剂量和浓度对接受者是无毒的，并且可以包含缓冲剂诸如磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸；盐诸如氯化钠；抗氧化剂，包括抗坏血酸和甲硫氨酸；防腐剂(诸如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氯化六甲双铵；苯扎氯铵、苄索氯铵；苯酚、丁醇或苯甲醇；对羟基苯甲酸烷基酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间甲酚)；低分子量(小于约10个残基)多肽；蛋白，诸如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水聚合物诸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸诸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖类、二糖类和其它碳水化合物类，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂诸如EDTA；糖类诸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；形成盐的抗衡离子诸如钠；金属络合物(例如，锌-蛋白复合物)；和/或非离子型表面活性剂，诸如TWEENTM、PLURONICSTM或聚乙二醇(PEG)。
药物试剂盒和制品
还提供了用于治疗患有疾病(诸如癌症)的患者的药物试剂盒。在某些实施方案中，所述药物试剂盒包含CAR-T细胞和CD52抗体。在某些实施方案中，所述药物试剂盒包含UCART19细胞和抗体。在某些实施方案中，所述药物试剂盒包含含有CAR-T细胞(例如，UCART19细胞)的第一容器和含有CD52抗体(例如，包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列的抗体)的第二容器。在某些实施方案中，所述CAR-T细胞(例如，UCART19细胞)是CD52缺陷的。在某些实施方案中，所述试剂盒包含多个含有CAR-T细胞的容器，其中在每个容器中的CAR-T细胞的量是相同的或不同的。在某些实施方案中，所述第一容器和/或第二容器是柔性的细胞输注袋。在某些实施方案中，所述第一容器和/或第二容器是管形瓶或管(例如，玻璃或塑料管形瓶或管)。所述药物试剂盒可以进一步包括标签或包装插页，其包含关于向受试者施用CAR-T细胞和CD52抗体的说明书。
还提供了包含多个可密封的容器的制品，每个容器分别包含用于施用给受试者的单位剂量的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，所述单位剂量包含约1 x 106至约5 x 108细胞；包装材料；以及标签或包装插页，其包含关于通过进行第一次施用和后续施用向受试者施用多个所述单位剂量的说明书，所述第一次施用包括向受试者递送所述单位剂量中的一个，并且所述后续施用包括给受试者施用一个或多个所述单位剂量。在某些实施方案中，所述制品规定，要在所述第一次施用以后约30至150天之间的时间进行所述后续施用，任选地在约30天、约60天、约90天或约99天。在某些实施方案中，容器是或包括柔性的细胞输注袋。在某些实施方案中，所述容器是或包括管形瓶或管(例如，玻璃或塑料管形瓶或管)。
本公开内容的编号实施方案
通过参考以下编号的示例性实施方案，可以定义本文描述的公开内容和发明。
1.一种治疗患有难治性和/或复发性非霍奇金淋巴瘤的受试者的方法，所述方法包括给所述受试者施用至少一剂包含抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其中所述至少一剂是约20x106细胞/剂至约360x106细胞/剂。
2.实施方案1的方法，其中所述非霍奇金淋巴瘤是大B细胞性淋巴瘤。
3.实施方案1的方法，其中所述非霍奇金淋巴瘤是滤泡性淋巴瘤。
4.实施方案1至3中的任一个的方法，其中所述至少一剂选自约20x106细胞/剂、约40x106细胞/剂、约80x106细胞/剂、约120x106细胞/剂、约240x106细胞/剂和约360x106细胞/剂。
5.实施方案1至4中的任一个的方法，其中当受试者具有小于或等于50kg的重量时，所述至少一剂选自约20x106细胞/剂、约80x106细胞/剂和约240x106细胞/剂。
6.实施方案1至4中的任一个的方法，其中当受试者具有大于50kg的重量时，所述至少一剂选自约20x106细胞/剂、约40x106细胞/剂、约120x106细胞/剂和约360x106细胞/剂。
7.实施方案1至6中的任一个的方法，其中所述CAR-T细胞是CD52缺陷的。
8.实施方案1至6中的任一个的方法，其中所述CAR-T细胞包含CD52-缺陷型细胞和CD-52阳性细胞的混合物。
9.实施方案1至8中的任一个的方法，其中所述CAR-T细胞包含SEQ ID NO：1的CAR。
10.实施方案1至9中的任一个的方法，其中所述CAR-T细胞包含UCART19(CD19)CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞。
11.实施方案1至9中的任一个的方法，其中所述CAR-T细胞不表达安全开关。
12.实施方案1至11中的任一个的方法，其中直到在施用CAR-T细胞以后至少14天，CAR表达在所述受试者中是可检测的。
13.实施方案1至12中的任一个的方法，其中直到在施用CAR-T细胞以后至少28天，CAR表达在所述受试者中是可检测的。
14.实施方案1至13中的任一个的方法，其中所述受试者在CAR-T施用以后至少1个月表现出CR或Cri状态。
15.实施方案1至14中的任一个的方法，其中所述受试者在CAR-T施用以后至少2个月表现出CR或Cri状态。
16.实施方案1至15中的任一个的方法，其中所述受试者在CAR-T施用以后至少6个月表现出CR或Cri状态。
17.实施方案1至16中的任一个的方法，其中所述受试者在CAR-T施用以后至少12个月表现出CR或Cri状态。
18.实施方案1至17中的任一个的方法，其中在施用至少一剂之前，所述受试者接受第一淋巴细胞耗竭方案。
19.实施方案18的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨和环磷酰胺。
20.实施方案18的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨、环磷酰胺和抗-CD52抗体。
21.实施方案19或20的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案进一步包含施用Mensa(2-巯基乙烷磺酸钠)。
22.实施方案19至21中的任一个的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案进一步包含施用至少一种皮质类固醇。
23.实施方案22的方法，其中在即将施用抗-CD52抗体之前施用所述皮质类固醇。
24.实施方案22或23的方法，其中所述皮质类固醇是甲泼尼龙。
25.实施方案24的方法，其中以2mg/kg的剂量施用所述甲泼尼龙。
26.实施方案1至25中的任一个的方法，其中在淋巴细胞耗竭方案之前所述患者接受输注相关反应的前驱给药。
27.实施方案26的方法，其中所述前驱给药包含至少一种抗组胺剂。
28.实施方案26或27的方法，其中所述前驱给药包含对乙酰氨基酚。
29.实施方案19至28中的任一个的方法，其中以约30mg/m2/天的剂量施用氟达拉滨；以约300mg/m2/天的剂量施用环磷酰胺；或以约10至约13mg/天的剂量施用CD52抗体。
30.实施方案20至28中的任一个的方法，其中以约30mg/m2/天的剂量施用氟达拉滨；以约300mg/m2/天的剂量施用环磷酰胺；和以约10至约13mg/天的剂量施用CD52抗体。
31.实施方案18至30中的任一个的方法，其中在施用至少一剂之前约1至15天之间开始所述第一淋巴细胞耗竭方案。
32.实施方案18至31中的任一个的方法，其中在1、2、3、4或5天的时程中施用所述第一淋巴细胞耗竭方案。
33.实施方案1至32中的任一个的方法，其中所述受试者接受后续剂量的CAR-T细胞。
34.实施方案33的方法，其中所述受试者在施用后续剂量时表现出次优应答。
35.实施方案34的方法，其中所述次优应答包含：
(a)完全应答(CR)，具有血细胞计数不完全恢复的完全应答(CRi)，具有可检测的最小残留疾病(白血病患者)和缺乏细胞遗传应答；
(b)骨髓完全应答；
(c)部分应答；或者
(d)稳定应答。
36.实施方案33-35中的任一个的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量中的细胞数目大约相同数目的细胞。
37.实施方案33-35中的任一个的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量相比增加的数目的细胞。
38.实施方案33-35中的任一个的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量相比减少的数目的细胞。
39.实施方案33-38中的任一个的方法，其中在所述第一剂量以后至少14天、至少28天、至少42天或至少56天施用所述后续剂量。
40.一种用于治疗遭受癌症的患者的药物试剂盒，所述试剂盒包含：
(a)抗-CD19 CAR-T细胞；和
(b)CD52抗体。
41.实施方案40的药物试剂盒，其中所述CAR-T细胞是UCART19细胞。
42.实施方案40或41的药物试剂盒，其中所述CAR-T细胞表达SEQ ID NO：1的CAR。
43.实施方案40至42中的任一个的药物试剂盒，其中所述CD52抗体包含SEQ IDNO：8和/或SEQ ID NO：10的序列。
44.实施方案40至43中的任一个的药物试剂盒，其中所述试剂盒包含含有CAR-T细胞的第一容器和含有CD52抗体的第二容器。
45.实施方案44的药物试剂盒，其中所述第一容器和第二容器中的至少一个是柔性的细胞输注袋。
46.实施方案40至45中的任一个的药物试剂盒，其中所述试剂盒进一步包含标签或包装插页，其包含关于向受试者施用CAR-T细胞和CD52抗体的说明书。
47.一种治疗方法，其包括：
(a)给患有疾病的受试者施用第一剂量的嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，和
(b)在一时间点给所述受试者施用后续剂量的CAR-T细胞，所述时间点是开始(a)中的所述施用以后至少或超过约28天且小于约200天。
48.实施方案47的方法，其中所述CAR-T细胞是同种异体的。
49.实施方案47或48的方法，其中所述第一剂量包含约1x104至约5x108个总细胞。
50.实施方案49的方法，其中所述第一剂量包含约6 x 105个总细胞、约6 x 106个总细胞、约6 x 107个总细胞、约8x107个总细胞、约1.8x108个总细胞、约2.4x108个总细胞或约5x108个总细胞。
51.实施方案47或48的方法，其中所述第一剂量包含1x104至2x107细胞/千克受试者体重。
52.实施方案51的方法，其中所述第一剂量包含约1x104、约1x105、约1x106、约3x106或约9x106细胞/千克受试者体重。
53.实施方案47至52中的任一个的方法，其中在开始(a)中的所述施用以后约28天、约60天或约99天施用所述后续剂量的CAR-T细胞。
54.实施方案53的方法，其中在开始(a)中的所述施用以后约99天施用所述后续剂量的CAR-T细胞。
55.实施方案47至54中的任一个的方法，其中在步骤(a)之后且在步骤(b)之前，给所述受试者施用中间淋巴细胞耗竭方案。
56.实施方案47至55中的任一个的方法，其中所述中间淋巴细胞耗竭方案包括在步骤(b)之前约0至14天之间给所述受试者施用氟达拉滨、环磷酰胺和CD52抗体。
57.实施方案56的方法，其中以约90至150mg/m2的剂量施用氟达拉滨；以约1000至4000mg/m2的剂量施用环磷酰胺；和以约0.3至1mg/kg的剂量施用CD52抗体。
58.实施方案47至57中的任一个的方法，其中给所述受试者施用第一淋巴细胞耗竭方案。
59.实施方案47的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案包括给所述受试者施用氟达拉滨、环磷酰胺和CD52抗体。
60.实施方案59的方法，其中以约90至150mg/m2的剂量施用氟达拉滨；以约1000至4000mg/m2的剂量施用环磷酰胺；和以约0.3至1mg/kg的剂量施用CD52抗体。
61.实施方案58至60中的任一个的方法，其中在步骤(a)之前约15至5天之间开始所述第一淋巴细胞耗竭方案。
62.实施方案58至60中的任一个的方法，其中在步骤(a)之前2至10天之间结束所述第一淋巴细胞耗竭方案。
63.实施方案47至62中的任一个的方法，其中在步骤(a)和步骤(b)之间评估应答。
64.实施方案63的方法，其中在中间淋巴细胞耗竭之前评估应答。
65.实施方案47至64中的任一个的方法，其中所述后续剂量包含约1x105至约5x108个总细胞。
66.实施方案47至65中的任一个的方法，其中所述后续剂量包含约6x106个总细胞。
67.实施方案47至66中的任一个的方法，其中在(a)中的施用导致受试者中疾病的改善，如通过(a)中所述施用以后疾病的一种或多种症状的减轻所指示的。
68.实施方案67的方法，其中在(b)中的施用时，所述受试者已经复发。
69.实施方案47至68中的任一个的方法，其中所述后续剂量的细胞包含足以改善所述受试者的疾病的量的细胞。
70.实施方案47至69中的任一个的方法，其中在(b)中的施用导致受试者中疾病的进一步改善。
71.实施方案47至70中的任一个的方法，其中所述后续剂量的施用导致与即将开始施用后续剂量之前相比受试者中疾病的改善。
72.实施方案47至71中的任一个的方法，其中与包含替代给药方案的方法相比，所述方法导致该疾病的更大程度和/或更长时间阶段的改善，在所述替代给药方案中，向受试者施用单剂量的在(a)中的细胞和在(b)中的细胞。
73.实施方案47至72中的任一个的方法，其中所述疾病在施用所述第一剂量以后持续存在和/或所述第一剂量的施用不足以根除所述受试者中的疾病。
74.实施方案47至73中的任一个的方法，其中所述受试者在(b)中的施用时表现出CAR-T细胞的持续的缺失。
75.实施方案47至74中的任一个的方法，其中所述受试者在(b)中的施用时表现出所述疾病的一种或多种症状。
76.实施方案47至75中的任一个的方法，其中所述受试者在(b)中的施用时表现出次优应答。
77.实施方案76的方法，其中所述次优应答包含：
(a)完全应答(CR)，具有血细胞计数不完全恢复的完全应答(CRi)，具有可检测的最小残留疾病(白血病患者)和缺乏细胞遗传应答；
(b)骨髓完全应答；
(c)部分应答；或者
(d)稳定应答。
78.实施方案47至77中的任一个的方法，其中与包含替代给药方案的方法相比，在(b)中的施用以后第2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14天时在所述受试者中的细胞因子释放综合征(CRS)相关结果不是可检测的或下降了约20％至约99％，在所述替代给药方案中给所述受试者施用(b)中的细胞，而没有施用所述第一剂量。
79.实施方案47至78中的任一个的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量中的细胞数目大约相同数目的细胞。
80.实施方案47至78中的任一个的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量相比增加的数目的细胞。
81.实施方案80的方法，其中所述后续剂量包含比所述第一剂量的细胞数目多至少约5％的细胞。
82.实施方案47至78中的任一个的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量相比减少的数目的细胞。
83.实施方案82的方法，其中所述后续剂量包含比所述第一剂量的细胞数目少至少约5％的细胞。
84.实施方案47至83中的任一个的方法，其中所述疾病是肿瘤或癌症。
85.实施方案84的方法，其中所述癌症是白血病或淋巴瘤。
86.实施方案84的方法，其中所述肿瘤或癌症是急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、HNSCC、非霍奇金淋巴瘤、急性髓性白血病、弥漫性大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)、多发性骨髓瘤、难治性滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、惰性B细胞淋巴瘤、B细胞恶性肿瘤、结肠癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、皮肤癌、黑素瘤、骨癌和脑癌、卵巢癌、上皮癌、肾细胞癌、胰腺腺癌、霍奇金淋巴瘤、宫颈癌、结直肠癌、胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤、尤因肉瘤、髓母细胞瘤、骨肉瘤、滑膜肉瘤或间皮瘤。
87.实施方案86的方法，其中所述ALL是复发性或难治性ALL。
88.一种治疗方法，其包括向先前施用过第一剂量的同种异体CAR-T细胞的受试者施用后续剂量的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，其中：在第一剂量开始以后至少或超过约5周并且小于约24周的时间点施用后续剂量的细胞。
89.一种治疗方法，其包括向受试者施用后续剂量的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，其中：在所述施用之前，所述受试者已经接受先前剂量的CAR-T细胞，其量足以在所述受试者中表现出临床益处；且在所述施用时间，所述受试者没有表现出对CAR-T细胞特异性的可检测的适应性宿主免疫应答；和/或所述先前剂量和后续剂量之间的时间大于约5周且小于约24周。
90.实施方案88的方法，其中在所述后续剂量中施用的细胞的数目与在所述第一剂量中施用的细胞的数目相同。
91.实施方案88的方法，其中在所述后续剂量中施用的细胞的数目大于在所述第一剂量中施用的细胞的数目。
92.包含同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞的组合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗先前用CAR-T细胞治疗过的受试者中的疾病，其中：所述组合物用于在所述先前治疗以后约5至约24周之间使用；和/或将所述组合物配制成用于施用后续剂量，其量足以改善先前用CAR-T细胞治疗过的受试者中的疾病。
93.一种用于治疗先前用CAR-T细胞治疗过的受试者的疾病的包含同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞的组合物，其中：所述细胞用于在先前治疗以后约5至24周之间使用；和将所述细胞配制成用于施用后续剂量，其量足以改善先前用CAR-T细胞治疗过的受试者的疾病。
94.实施方案92的用途或根据实施方案93的用途的组合物，其中所述先前治疗中的CAR-T细胞的剂量在使用所述后续剂量之前改善了所述受试者中的疾病的一种或多种症状。
95.同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞在药物制备中的用途，所述药物用于用在治疗疾病的方法中，所述方法包括：向患有该疾病的受试者施用第一剂量的CAR-T细胞，所述第一剂量包含约1x106至约5x108个总细胞，和在开始(a)中的所述施用以后至少或超过约4周且小于约24周的时间点给所述受试者施用后续剂量的CAR-T细胞。
96.实施方案92、94或95的用途或根据实施方案93的用途的组合物，其中所述疾病是白血病或淋巴瘤。
97.实施方案47至83中的任一个的方法，实施方案92或94至95中的任一个的用途，或根据实施方案93的用途的组合物，其中所述CAR-T细胞是肿瘤抗原-特异性的CAR-T细胞。
98.实施方案47至83中的任一个的方法，实施方案92或94至95中的任一个的用途，或根据实施方案93的用途的组合物，其中所述CAR-T细胞是UCART19细胞。
99.一种制品，其包含：
多个可密封的容器，每个容器分别包含用于施用给受试者的单位剂量的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，所述单位剂量包含约1x106至约5x108细胞；包装材料；和标签或包装插页，其包含关于通过进行第一次施用和后续施用来向所述受试者施用多个所述单位剂量的说明书，所述第一次施用包括向所述受试者递送所述单位剂量中的一个，并且所述后续施用包括向所述受试者施用一个或多个所述单位剂量。
100.实施方案99的制品，其中所述说明书指定在所述第一次施用以后约30至150天之间的时间进行所述后续施用，任选地在约30天、约60天、约90天或约99天。
101.实施方案99或100的制品，其中所述容器是或包含柔性的细胞输注袋。
102.治疗患有难治性和/或复发性CD19+B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的成年受试者的方法，包括给所述受试者施用至少一剂包含抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其中所述至少一剂选自约6x105细胞/剂、6x106细胞/剂、约6-8x107细胞/剂和约1.8-2.4x108细胞/剂。
103.一种治疗患有难治性和/或复发性CD19+B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的儿科受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用至少一剂包含抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其中所述至少一剂是约2-8x107细胞/剂。
104.实施方案102或103的方法，其中所述CAR-T细胞是CD52缺陷的。
105.实施方案102或103的方法，其中所述CAR-T细胞包含CD52-缺陷型细胞和CD-52阳性细胞的混合物。
106.实施方案102至105中的任一个的方法，其中所述CAR-T细胞表达SEQ ID NO：1的CAR。
107.实施方案102至106中的任一个的方法，其中所述CAR-T细胞包含UCART19(CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞)。
108.实施方案102至107中的任一个的方法，其中直到在施用CAR-T细胞以后至少42天，CAR表达在所述受试者中是可检测的。
109.实施方案102至108中的任一个的方法，其中直到在施用CAR-T细胞以后至少56天，CAR表达在所述受试者中是可检测的。
110.实施方案102至109中的任一个的方法，其中所述受试者在UCART19施用以后至少1.3个月表现出CR或Cri状态。
111.实施方案102至110中的任一个的方法，其中所述受试者在UCART19施用以后至少1.8个月表现出CR或Cri状态。
112.实施方案102至111中的任一个的方法，其中所述受试者在UCART19施用以后至少3.6个月表现出CR或Cri状态。
113.实施方案102至112中的任一个的方法，其中所述受试者在UCART19施用以后至少12.4个月表现出CR或Cri状态。
114.实施方案102至113中的任一个的方法，其中在施用至少一剂之前，所述受试者接受第一淋巴细胞耗竭方案。
115.实施方案114的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨和环磷酰胺。
116.实施方案114的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨、环磷酰胺和抗-CD52抗体。
117.实施方案115或116的方法，其中以约30至150mg/m2的剂量施用氟达拉滨；以约300至4000mg/m2的剂量施用环磷酰胺；和以约0.3至1mg/kg的剂量施用CD52抗体。
118.实施方案114至117中的任一个的方法，其中在施用至少一剂之前约1至15天之间开始所述第一淋巴细胞耗竭方案。
119.实施方案114至118中的任一个的方法，其中所述受试者接受后续剂量的CAR-T细胞。
120.实施方案119的方法，其中所述受试者在施用后续剂量时表现出次优应答。
121.实施方案120的方法，其中所述次优应答包含：
(a)完全应答(CR)，具有血细胞计数不完全恢复的完全应答(CRi)，具有可检测的最小残留疾病(白血病患者)和缺乏细胞遗传应答；
(b)骨髓完全应答；
(c)部分应答；或者
(d)稳定应答。
122.实施方案119的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量中的细胞数目大约相同数目的细胞。
123.实施方案119的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量相比增加的数目的细胞。
124.实施方案119的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量相比减少的数目的细胞。
125.一种生产针对目的靶标的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)群体的方法，所述方法包括：
-从健康供体分离外周血单核细胞(PBMC)；
-活化所述PBMC中的T-细胞；
-用慢病毒载体转导经活化的T-细胞，其中所述慢病毒载体是表达目的CAR的自灭活重组载体；
-破坏T-细胞子集中的TCRαβ和CD-52基因表达；
-扩增所述T-细胞群体；和
-富集TCRαβ-阴性细胞的T-细胞群体；
-由此产生同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)群体。
126.实施方案125的方法，其中在步骤(b)以后约3-4天进行步骤(c)。
127.实施方案125或126的方法，其中在步骤(c)以后约2天进行步骤(d)。
128.实施方案125至127中的任一个的方法，其中在步骤(d)以后约10-12天进行步骤(f)。
129.实施方案125至128中的任一个的方法，其中所述CAR-T细胞是CD52缺陷的。
130.实施方案125至129中的任一个的方法，其中所述CAR-T细胞包含CD52-缺陷型细胞和CD-52阳性细胞的混合物。
131.实施方案125至130中的任一个的方法，其中所述CAR-T细胞表达SEQ ID NO：1的CAR。
132.实施方案125至131中的任一个的方法，其中所述CAR-T细胞包含UCART19(CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞)。
133.实施方案125至132中的任一个的方法，其中所述步骤(c)的慢病毒载体进一步表达安全开关。
134.实施方案133的方法，其中所述安全开关是RQR8。
实施例
以下实施例旨在说明本公开内容的方法和材料。对于本领域技术人员而言显而易见的在本领域中通常遇到的所述疾病和参数的适当修改和适应是在本公开内容的精神和范围内。
实施例1：同种异体CAR-T给药方案
本实施例解释了用同种异体CAR-T细胞进行多剂量治疗。
在施用CAR-T细胞之前，对患有疾病的受试者施用淋巴细胞耗竭方案。这样的方案可以包括例如用氟达拉滨(总剂量范围约30至150mg/m2)和环磷酰胺(总剂量范围约300至4000mg/m2)治疗，用抗-CD52药物(例如，CD52抗体，诸如包含SEQ ID NO：8和SEQ ID NO：10的序列的抗体)(总剂量范围约0.3至1mg/kg)治疗。
在D0给受试者施用约1×104至约5×108细胞之间的第一剂量的CAR-T细胞。
在约D24和D62之间，评估对第一剂量的CAR-T细胞的应答。通过对用于CAR-特异性标志物CD4和/或CD8的表面表达的细胞样品进行流式细胞计量术，确定存在于经治疗的受试者的外周血中的CAR-T细胞的数目。阳性MRD和/或持续性丧失提示CAR-T细胞的后续施用。
在CAR-T细胞的后续施用之前，给患有MRD的受试者施用淋巴细胞耗竭方案。这样的方案可以包括例如在有或没有抗-CD52(总剂量范围约0.3至1mg/kg)的情况下用氟达拉滨(总剂量范围约30至150mg/m2)和环磷酰胺(总剂量范围约300至4000mg/m2)治疗。在淋巴细胞耗竭后2到14天之间，给受试者施用约1×104至约1×108细胞之间的剂量的CAR-T细胞。评估对CAR-T细胞的剂量的应答，并确定存在于经治疗的受试者的外周血中的CAR-T细胞的数目。阳性MRD和/或持续性丧失提示CAR-T细胞的后续施用。可以施用多剂量的同种异体CAR-T直到达到MRD阴性。
实施例2：同种异体抗-CD19 CAR-T细胞产物(UCART19)在具有CD19+复发性/难治 性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的成年患者中的应用
进行该研究以解决B-ALL的治疗。B-ALL在约60％的成年患者中是难治的。在复发时，预后非常差(总生存率＜10％)。标准疗法包括联合化学疗法±同种异体SCT。
给受试者施用了靶向CD19+恶性肿瘤的同种异体的、通用的、过继性T细胞疗法。
使用慢病毒转导实现了转基因表达。UCART19包含抗-CD19scFv和包含CD3ζ+4-1BB的细胞内结构域。CAR-T细胞进一步包含以反式表达的RQR8(CD20模拟位)安全开关。使用基于TALEN的技术通过进一步敲除来制备CAR-T细胞。具体而言，敲除TRAC以防止TCR介导的患者HLA抗原的识别。敲除CD52以允许CD52抗体在淋巴细胞耗竭中的应用。在图5中提供了在此使用的示例性UCART19细胞(CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞)。
该研究具有至少3个目的，研究设计概要的示意图呈现在图6A和图6B中(BMA＝骨髓抽吸)。
目的#1：评价不同剂量的UCART19的安全性和耐受性；和确定最大耐受剂量(MTD)。(图3B)。
目的#2：评估抗白血病活性。
目的#3：评价UCART19的扩增和持续性。
图3B显示了研究计划，其具有以下特征：
-剂量递增，标签公开，非对比研究，以评价直到4个剂量水平(DL)的UCART19和确定在患有R/R(复发性/难治性)B-ALL的成年患者中的最大耐受剂量(MTD)。
-剂量递增之后是安全性扩增部分，在MTD或在推荐剂量(RD)施用给患者
-淋巴细胞耗竭(LD)方案开始于UCART19输注前的D-7，并组合了：环磷酰胺1500mg/m2和氟达拉滨90mg/m2，没有CD52抗体(FC)或有CD52抗体1mg/kg(FCA)
-在扩增部分中，可以在2个患者组群(具有FC或FCA的LD)中研究CD52抗体的作用
-在D0，通过缓慢静脉内输注(5分钟)施用作为单个非分次剂量的UCART19
-在输注后28天(D28)进行剂量限制毒性的评价
-在LD之前、在D-1、在D28和D84执行骨髓抽吸/活组织检查
-最小残留疾病(MRD)定义为在骨髓中＜10-4胚细胞，通过流式细胞计量术(FLC)和/或通过qPCR来评估
-在研究结束时(输注以后D84)，将患者转至持续15年的长期随访研究(LTFU)
该研究的关键合格性标准包括：
-年龄≥16岁，至＜70(男性或女性)
-按照国家综合癌症网络指南(国家综合癌症Network guidelines，NCCN，2017)，具有CD19+复发性或难治性(复发性/难治性；R/R)B-ALL的患者
-形态学或MRD+(≥1x10-3，通过流式细胞计量术和/或qPCR)
-其已经耗尽可得到的治疗选择
-没有用研究性基因或细胞疗法产品的先前治疗
-没有临床上怀疑的骨髓外牵涉
-适当的肾、肝、肺和心脏功能
-没有活动性感染
-没有活动性CNS白血病
此处提供的数据是关于12名经治疗的患者，其中六名患者处于第一剂量水平的6x106个总细胞(大约1x105细胞/千克)，六名患者处于第二剂量水平的6至8x107个总细胞(大约1x106细胞/千克)。尚无患者在1.8至2.4x108个总细胞的第三和最终剂量水平治疗。大多数患者接受了三项或更多项的先前治疗，其中三名接受了兰妥莫单抗的先前治疗，七名接受了allo-SCT(同种异体干细胞移植)的先前治疗，这反映了欧洲的临床实践，其中12名患者中的10名被招募。
患者特征呈现在下表8中。
表8
患者特征 全部(N＝12)
按岁计的年龄中位数(范围) 29.50[18-62]
先前治疗系的数目
1或2 4
≥3 8
包括先前的伊珠单抗奥加米星 6
包括先前的兰妥莫单抗 3
在前的allo-SCT 7
在前的allo-SCT以后的复发时间
＜6个月 4
≥6个月 3
中位数(范围) 5.9个月(4.1-11)
在淋巴细胞耗竭之前的骨髓胚细胞
＜5％ 3
5-25％ 3
＞25％ 6
中位数(范围) 34％(0-98)
安全性
所有12名招募的患者在接受由环磷酰胺和氟达拉滨组成的淋巴细胞耗竭化学疗法以后在靶细胞剂量接受UCART19，其中10名患者接受CD52抗体(FCA方案)，两名患者未接受CD52抗体(FC方案)。下表6按等级总结了与UCART19输注有关的不利事件以及与淋巴细胞耗竭方案有关的不利事件。1级代表轻度毒性，2级代表中度毒性，3级代表严重毒性，4级代表威胁生命的毒性。5级毒性代表导致死亡的毒性。
表9
Figure BDA0002561337770000681
1在UCART19输注后第42天以后持续存在的4级嗜中性粒细胞减少症和/或血小板减少症，除非如果＞5％骨髓胚细胞；n：按最差等级具有至少一个事件的患者的数目。
最常见的UCART19有关的不利事件是CRS，在11名患者中报告(两名经历严重CRS病例的患者，一名3级和一名4级)。在6/11的患者中施用了托珠单抗。CRS与血清细胞因子(IL-6、IL-10和IFNγ)增加相关，UCART19在所有患者的血液中扩增。
在4名患者(G1至G3)中发生了病毒再激活(CMV和/或腺病毒)。
三名患者发生了长期血细胞减少症，定义为在UCART19输注后第42天以后持续存在的血细胞减少。
三名患者经历了轻度或1级神经中毒事件。
一名患者经历了1级GvHD皮肤不利事件，其用局部类固醇消退。
报道了两例剂量限制毒性。第一例发生在第一剂量水平，是与UCART19相关的4级CRS，并与5级嗜中性粒细胞减少性败血症相关，后者与淋巴细胞耗竭和UCART19相关。死亡发生在UCART19输注后第15天。第二例为4级长期血细胞减少症，发生在第二剂量水平，据报道与淋巴细胞耗竭和UCART19相关。该患者经历了allo-SCT，并且在allo-SCT后第19天或UCART19输注后第82天，在感染情况下发生了无关的5级肺出血。在其它其它自体抗-CD19CAR T细胞疗法试验中已经报告了5级不利事件，这部分地归因于疾病的晚期和伴随的混杂状况。
还已经报告了两例另外死亡，原因不是UCART19。一名患者死于进行性疾病，一名患者死于allo-SCT相关的并发症。在allo-SCT后在大约20-30％的患者中发生移植相关的死亡。
效力
图7A显示了研究状态。图7B解释了在该试验中UCART19的应答、减轻的持续时间和重复给药(抗白血病活性)。
当患者达到CR时会发生MRD-CR，并且在使用敏感试验诸如聚合酶链式反应或流式细胞计量术时，没有骨髓中的ALL细胞的证据。CR或CRi率是典型的监管标准，但是在患有ALL的儿童和成人中的研究已经证实了最小残留疾病(MRD+)与复发风险之间的强关联。
在12名施用UCART19的患者中，两名无法进行评价(如上面所指出的，一名在第15天死亡，而截至数据收集时，还有一名未达到第28天评价)。10名可评价患者中的八名达到了CR，定义为癌症的任何证据或症状的缺失，或具有不完全血细胞计数恢复的CR(CRi)。七名患者达到了MRD-CR。
那2名具有难治性疾病的患者没有UCART19扩增。
六名患者进行了allo-SCT，包括四名在第一剂量的UCART19以后的患者和两名在第二剂量以后的患者。根据这里收集的数据，四名患者在UCART19输注以后12.4、3.6、1.8和1.3个月保持在MRD-CR(分子减轻)。
从UCART19输注后第7天在血液中检测到CAR T细胞扩增，在第10天至第17天之间达到峰值扩增。一名在第二剂量水平的患者显示出最高峰，该峰与直到数据截止仍在进行中的直到第42天的长持续性有关。在剂量水平二，到数据截止时观察到的最长持续性发生在第56天。
两名接受FC方案的患者未表现出CAR-T细胞扩增的证据。在FCA方案中，10名患者中的两名出现CAR-T细胞扩增的类似缺乏。
图8A和图8B显示了在具有CD19+复发性/难治性B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的成年患者中的流式细胞计量术PK曲线和UCART19动力学。具体地，参考图8A和图8B，关于DL1和DL2的流式细胞计量术的初步数据表明，从D3至D14在血液中可检测到UCART19，并且在D10与D17之间具有增殖峰。一名DL2的患者显示与最长持续性有关的最高峰。在那些具有细胞扩增的患者中，在DL1：1名患者显示直到D42的UCART19持续性；在DL2：2名患者表现出直到D42的持续性和在D56的进行中持续性。初步数据表明，UCART19扩增水平与在D28的应答无关；相反，即使在低UCART19扩增水平的情况下，也观察到在D28的MRD-CR。第一剂量的UCART19以后，在接受FCA LD治疗的10名患者中有2名未观察到扩增，而在接受FC的2名患者中有2名未观察到扩增。
也正在评价CD52抗体在UCART19扩增中的作用。
实施例3：UCART19在具有复发性/难治性CD19阳性的B-ALL的患者中的重复给药
本实施例解释了用UCART19的治疗，其中该治疗包括在第一剂量的UCART19以后施用的后续剂量的UCART19，如在实施例2中所施用的。
来自实施例2中上述研究的两名患者接受了第二剂量的UCART19，并且均达到了MRD--CR。
患者#4：
具有复发性/难治性CD19阳性的B-ALL的23岁男性患者在研究的第0天(D0)接受了单剂量的UCART19(6x106个总细胞，剂量DL1)。在UCART19输注之前的六天期间内施用了淋巴细胞耗竭方案(氟达拉滨122mg/m2；环磷酰胺1230mg/m2；和CD52抗体1mg/kg)。没有观察到主要毒性。该患者在第一剂量(LD加FCA)后第61天复发cD19+疾病；第二剂量(LD加FC)使该患者在第28天达到MRD-。该患者然后在六天的时间段内接受了减轻强度淋巴细胞耗竭方案(氟达拉滨和环磷酰胺，无CD52抗体)。在初始UCART19输注后99天，给患者重新施用相同剂量(6x106个总细胞)的UCART19。
数据显示在图2A的图中。在即将施用后续剂量的UCART19的时间，UCART19在患者中是不可检测的(图2A)。
所述患者在输注第二剂量的UCART19以后第28天达到了MRD阴性。因此，在用第一剂量的UCART19治疗后在分子减轻后的复发以后UCART19的施用有效地实现了MRD阴性。在第二剂量后6周，患者进行了同种异体干细胞移植。
患者#13：
男性患者，31岁，难治性B-ALL诊断。患者接受了UCART19的第一次输注；在组合了氟达拉滨(90mg/m2总剂量)和环磷酰胺(1500mg/m2总剂量)(FC)的淋巴细胞耗竭以后，接受的剂量为8x107个总细胞(剂量水平2)。第1次施用后：未检测到UCART19(＜1细胞/μL，通过流式细胞计量术)。在第28天(UCART19输注后28天)，未观察到抗白血病活性(骨髓中89％的胚细胞)。在UCART19输注后28天内未报告与作用机理相关的毒性。患者退出研究并在同情使用下(英国的“特例”)接受第二次UCART19输注(总剂量8x107个总细胞)(在第一剂量以后48天)。淋巴细胞耗竭组合了氟达拉滨(90mg/m2总剂量)、环磷酰胺(1500mg/m2总剂量)和CD52抗体(1mg/kg总剂量)(FCA)。患者在第10天呈现低水平的UCART19扩增(10细胞/μL)，在第14天以后未检测到UCART19。报告了低级CRS。通过流式细胞计量术和通过qPCR，在第14天和第28天观察到抗白血病活性，具有负的最小残留疾病(MRD阴性)。患者接受了同种异体移植(第二剂量后63天)。他最终于2018年8月15日(移植后112天)复发，检测到低水平的MRD(分子复发)。在第一剂量的UCART19以后9.3个月和第二剂量的UCART19以后7.8个月，患者仍然存活。数据示于图2B.f中。
两名患者随后进行了allo-SCT。
患者#18：
男性患者，22岁，B-ALL诊断。在组合了氟达拉滨(90mg/m2总剂量)、环磷酰胺(1500mg/m2总剂量)和CD52抗体(40mg总剂量)(FCA)的淋巴细胞耗竭以后，患者接受了1.8x108细胞(剂量水平3)的UCART19的第一次输注。没有检测到UCART19，也没有报道与作用机理有关的毒性。在第28天(UCART19输注后28天)，未观察到抗白血病活性(骨髓活组织检查显示15％胚细胞)。患者是难治的，并接受了第二次UCART19输注(在第一剂量以后75天)，其中应用了强化的淋巴细胞耗竭方案氟达拉滨(120mg/m2总剂量)、环磷酰胺(1500mg/m2总剂量)和CD52抗体(1mg/kg总剂量＝65mg)(FCA)。由于修改后的方案允许重复给药，患者仍留在研究中。在第7天观察到UCART19扩增的峰值，在第10天可检测到UCART19(10细胞/μL)，而从第14天起未检测到UCART19。在第二剂量后第28天，患者没有应答和进展。患者#18对重复给药的应答示出在图14中。
该结果证实，同种异体CAR-T的重复给药有效地实现了复发后的MRD阴性。
实施例4：同种异体抗-CD19CAR-T细胞产物(UCART19)在具有CD19+复发性/难治性 B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的高危儿科患者中的应用
B-细胞急性成淋巴细胞性白血病是在儿童中最常见的恶性疾病，占儿童白血病的80％。年龄之间最常见的是2-10岁(峰值为3-4岁)，生存率为约90％。除非高风险(在这种情况下，约10％-30％存活)，否则复发可以发生在10％的儿童中，约40％-50％存活。
在该研究中使用与实施例2中提供的相同的UCART19。
该研究至少具有以下目的：
-评价固定剂量的UCART19的安全性和耐受性。
-评估UCART19在D28、D56、D84和/或在allo-SCT调理方案起始之前诱导分子减轻的能力。
-评估减轻率、减轻的持续时间、达到减轻的时间、疾病特异性的存活、和无进展存活。
-评估经历allo-SCT的患者的比例。
-评价UCART19的表型、运输、扩增和持续性。
该研究的关键合格性标准包括：
-在6个月且＜18岁之间的年龄(男性或女性)
-具有CD19+R/R B-ALL形态学或MRD+(≥1x10-3，通过流式细胞计量术和/或qPCR)的患者
-其已经耗尽可得到的治疗选择
-allo-SCT合格，可得到合适的供体
-没有用研究性基因或细胞疗法产品的先前治疗
-没有活动性感染
-没有活动性CNS白血病
图9显示了研究设计。
淋巴细胞耗竭方案从D-7(在UCART19输注之前的那周)开始，并组合了：环磷酰胺(C)(60mg/kg/天，持续2天)、氟达拉滨(F)(30mg/m2/天，持续5天)，且有/没有CD52抗体(A)(0.2mg/kg/天，持续5天)。在D0，通过历时5分钟的缓慢静脉内输注，以单一非分次剂量施用平剂量的UCART19(2x107个总细胞，相当于1.1至2.3x106细胞/kg)。
在UCART19施用后D28进行安全性评估。在基线、D-1、D14(任选的)、D28、D56、D84或在allo-SCT调理方案起始之前或在退出就诊时(由研究人员决定)，执行BMA。在12个月的随访阶段中，将在同种异体移植后M1、M2、M3、M6和M12进行BMA以评估疾病。对于难治性患者，将任选地根据研究人员的判断进行BMA。
结果
招募了六名患者。所述六名患者已经用相当于1.1至2.3x106细胞/kg的重量带细胞剂量治疗。五名患者已经接受了三项或以上的先前治疗，其中三名已经接受了四项或以上的先前治疗。两名患者已经接受了allo-SCT的先前治疗。患者特征呈现在下表10中。
表10
Figure BDA0002561337770000731
安全性
在由环磷酰胺和氟达拉滨组成的淋巴细胞耗竭化学疗法以后，所有六名招募的患者都接受了在靶细胞剂量的UCART19。五名患者也接受了CD52抗体。下表11按等级总结了与UCART19细胞输注有关的不利事件以及与淋巴细胞耗竭方案和/或UCART19有关的不利事件。[等级1代表轻度毒性，等级2代表中度毒性，等级3代表严重毒性，等级4代表威胁生命的毒性。等级5毒性代表导致死亡的毒性。]
表11
Figure BDA0002561337770000741
1在UCART19输注后第42天以后持续的4级嗜中性粒细胞减少症和/或血小板减少症
与UCART19相关的最常见不利事件是在所有经治疗的患者中的CRS，其中一名患者经历3级CRS。在六名经治疗的患者中有三人发生轻度至中度神经中毒事件。三名患者经历了长期血细胞减少症，据报道与淋巴细胞耗竭有关，在某些情况下可能与UCART19有关。巨细胞病毒(CMV)、腺病毒、BK病毒和变性肺病毒的病毒再活化归因于淋巴细胞耗竭。一名患者经历了短暂的1级皮肤GvHD。两名患者死于allo-SCT以后的疾病复发，一名患者死于allo-SCT以后的并发症。没有治疗相关的死亡。这呈现在表12中。
表12
N＝6
到开始的时间(按天计的中位值和范围) 7(5-9)
持续时间(按天计的中位值和范围) 7.5(4-13)
细胞因子升高(IL-6，IFN-γ，IL-10，CRP) 2
具体治疗 2/6
托珠单抗 2
结果-完全消退的数目 6
效力
图10显示了研究状态。图11解释了应答和减轻的持续时间(抗白血病活性)。
所有患者均完成了28天评价期，并且可以评价抗白血病活性。六名患者中有五人达到了MRD-CR，所有五人均接受了allo-SCT。截至数据截止，两名患者在UCART19输注以后超过13个月有减轻，并且三名患者在allo-SCT后死亡，其中两例是由于疾病复发，一例是由于移植相关并发症。一名患者由于缺乏应答而退出研究并接受了兰妥莫单抗研究外后续治疗。这是唯一接受FC方案的患者。
评估了细胞动力学，并显示在图12中。通过qPCR测量了血液和骨髓中的UCART19载体拷贝数(VCN)。初步数据显示，对于6名患者中的5名，在第7天之前可在血液中检测到UCART19，并在第14天附近观察到增殖峰。一名随后复发的患者未检测到UCART19。对于3/5的患者，UCART19在血液中持续存在直到第28天。对于2/5的患者，在第42天在血液中仍可检测到UCART19。由于通过allo-SCT的调理方案消除了UCART19，因此未测量超过第42天的持续性。
评估了细胞因子动力学。6名患者中的2名具有IL-6和IFNγ升高。在6名患者中有4名未观察到细胞因子升高。所有6名患者均经历了CRS。在患者1中观察到CRS G3，在患者8中观察到CRS G2。初次CRS症状发作的时间在D5至D9之间。
评估了T-细胞供体嵌合性(图13A、图13B、图13C)。从D7至D42在所有患者的血液中可检测到UCART19，但通过T-细胞供体嵌合性的分子标记在一人中可检测到。
实施例5：同种异体抗-CD19 CAR-T细胞产物(UCART19)在具有复发性/难治性大B-细胞和/或滤泡性淋巴瘤的患者中的应用
弥漫性大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)占B-细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)的20％至30％，如果不治愈的话是致命的。原发性纵隔大B细胞性淋巴瘤(PMBCL)和转化的滤泡性淋巴瘤(FL)通常按照DLBCL范例进行治疗。DLBCL包括一组在分子上多样的侵袭性淋巴瘤，它们不仅在染色体改变方面有所不同，而且还可以在信号传递途径活化和临床结果方面有所不同。该疾病本身可能是新发的，也可能是由惰性B-淋巴瘤(例如转化的滤泡性淋巴瘤)的转化所致。在美国，DLBCL的年发病率为6.9/100,000，它是B-NHL的最常见形式。
在所有具有侵袭性B-NHL的患者中，大约一半患有复发性或难治性疾病，估计10％至15％的DLBCL患者患有原发性难治性疾病，在最初的目的应答以后又复发了另外20-30％(Chaganti等人，2016)。在MYC、BCL2和/或BCL6中具有畸变的高等级B-细胞淋巴瘤，包括“双击中”和“三击中”淋巴瘤，与差预后有关，即使在新诊断的环境中(Rosenthal和Younes，2017)。
该研究将是单臂的、标签公开的、多中心1/2期研究，其评价UCART19在具有复发性/难治性大B细胞性淋巴瘤或滤泡性淋巴瘤的成年患者中的安全性、效力、细胞动力学和药效动力学。研究分为剂量递增阶段(阶段1)和剂量扩展阶段(阶段2)。在研究的第1阶段，将使用包含RQR8安全开关的CAR-T细胞(CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞)。在研究的第2阶段，一名或多名患者可能接受不包含RQR8安全开关的CAR-T细胞(CD19CAR/TCRαβ-_T-细胞或CD19CAR/R2+_TCRαβ-_T-细胞)。
纳入研究的标准可能包括以下一项或多项：
1.根据2018年WHO淋巴瘤分类修订版定义的大B细胞性淋巴瘤的组织学或细胞学诊断：弥漫性大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)-未另行指定(NOS)(生发中心B-细胞[GCB]，和非-GCB)，与任何级别的滤泡性淋巴瘤并存的DLBCL，血管内大B细胞性淋巴瘤，与慢性炎症相关的DLBCL，间变性淋巴瘤激酶阳性的(ALK+)DLBCL，爱泼斯坦-巴尔病毒阳性的(EBV+)DLBCL-NOS，富含T细胞/组织细胞的大B细胞淋巴瘤，具有IRF4/MUM1重排的DLBCL，具有MYC和BCL2和/或BCL6的易位(双击中/三击中)的高级别B细胞淋巴瘤，原发性皮肤DLBCL-leg型，滤泡性淋巴瘤向DLBCL的转化，原发性纵隔B细胞淋巴瘤(PMBCL)，和滤泡性淋巴瘤。
2.如下定义的复发性或难治性侵袭性大B细胞性淋巴瘤或滤泡性淋巴瘤：
·原发性难治性疾病，定义为一线疗法的至少4个周期(例如RCHOP的4个周期)以后进行性疾病或稳定疾病的最佳应答，且稳定疾病持续时间不超过从疗法的最后一剂开始6个月
·对于第二线或更高线的治疗而言难治的(定义为稳定疾病或进行性疾病的最佳应答)
·在自体干细胞移植(SCT)以后≤1年内复发
3.患者必须已经接受至少2系以前的疗法，包括蒽环类抗生素和抗-CD20单克隆抗体。
4.男性或女性患者≥18岁
5.0或1的东方协作肿瘤学小组(Eastern Cooperative Oncology Group，ECOG)表现状态
6.在ALLO-501输注以后≥12周的估算预期寿命(根据研究人员的判断)
7.供体-特异性的抗-HLA抗体的缺失。
8.适当的血液功能，包括：
·绝对嗜中性粒细胞计数(ANC)≥1,500/mm3或≥1.5x109/L
·绝对淋巴细胞计数(ALC)≥200/mm3或≥0.2 x 109/L
·血小板计数≥50,000/mm3或≥50 x 109/L
·血红蛋白≥9g/dL
9.适当的肾功能，包括：
·使用机构标准方法计算出的估算肌酸酐清除率≥60mL/min，且不是透析依赖性的。在模棱两可的情况下，可以使用24小时尿液收集试验更准确地估计肌酸酐清除率。
10.适当的肝功能，包括：
·总胆红素≤2.0mg/dL，除非在具有吉尔伯特氏综合征的患者中，其必须具有小于3.0mg/dL的总胆红素。
·天冬氨酸盐和丙氨酸氨基转移酶(AST和ALT)≤3 x ULN，如果肿瘤累及肝脏，则≤5.0 x ULN；
·碱性磷酸酶≤2.5 x ULN(在骨转移的情况下，≤5 x ULN)。
11.室内空气中的正常血氧饱和度水平(SpO2)≥91％。
12.在筛选时左心室射血分数(LVEF)≥45％，且没有血流动力学上显著的心包积液。
13.根据研究人员判断，任何先前治疗对基线严重程度或CTCAE等级≤1的急性影响均消退，但不利事件(AE)并不构成安全风险。
14.乙型肝炎抗原血清阴性；可以通过确认性试验进一步评价阳性的乙型肝炎试验，如果确认性试验为阴性，则可以招募患者。
15.丙型肝炎抗体血清阴性，除非抗原阴性。如果丙型肝炎抗体试验为阳性，则必须通过RT-PCR试验患者抗原的存在，并且为HCV RNA阴性。
16.在筛选时血清妊娠试验(对于有生育能力的女性)为阴性。
17.不具有生育能力的女性患者必须至少满足以下标准之一：
·达到绝经后状态，定义如下：连续至少12个月停止常规月经，无其它病理学或生理学原因；可以通过确认绝经后状态的血清促卵泡激素(FSH)水平来确认该状态。
·已经经历了有记录的子宫切除术和/或两侧卵巢切除术。
·已经在医学上证实了卵巢功能衰竭。
所有其它女性患者(包括具有输卵管结扎的女性患者)被认为具有生育能力。
18.亲笔签名并注明日期的知情同意文件的证据，表明已告知患者该研究的所有相关方面。
19.愿意并能够遵守计划的就诊、治疗计划、实验室试验和其它程序。
1期和2期研究将分为不同的阶段，包括筛选、淋巴细胞耗竭、治疗和随访。一个周期定义为一个淋巴细胞耗竭和一个治疗期的组合。
签署知情同意书后，筛选将开始。将检查患者的合格性标准。筛选期将持续达28天。在筛选期结束时符合所有合格性标准的患者将随后进入淋巴细胞耗竭期。
淋巴细胞耗竭将在第-5天开始，并在第0天的UCART19输注时结束。在用UCART19治疗之前，所有患者将在第-5天、第-4天和第-3天在门诊场合接受氟达拉滨(30mg/m2/天)、环磷酰胺(300mg/m2/天)和CD52抗体(13mg/天)的静脉内淋巴细胞耗竭。将在大约4小时内施用CD52抗体，直到输注完成后2小时内必须严密监测患者。在CD52抗体施用之前，需要包含高剂量皮质类固醇的前驱给药。如果在起始剂量水平观察到CD52抗体相关的剂量限制毒性(DLT)，将评价总计30mg(10mg/天，3天施用)的较低剂量。在淋巴细胞耗竭期结束时，应评估允许UCART19施用的合格性标准以确保患者的安全。
从第0天开始的治疗期将在UCART19输注后第56天结束。患者将在第0天历时大约5分钟接受UCART19静脉内输注。为了密切管理与UCART19相关的毒性，患者将从第0天起住院至少5天，或者直到UCART19相关的非血液学毒性恢复至≤1级为止，或者在允许直接患者住院的那些研究地点在门诊场合接受UCART19。
将实现使用两个不同重量带的UCART19的给药策略，如下表13所示：
表13
Figure BDA0002561337770000791
随访将从第56天持续到第9个月。在随访期间将监测患者，直到首次UCART19输注后第9个月的EOS访视或他们从研究中过早退出。然后在单独的长期随访(LTFU)方案下将患者立即转至15年长期随访。
在细胞动力学和/或疾病评估以后，可以将使用UCART19的任选再治疗施用于患者。使用UCART19的再治疗可以在阶段1中认为安全的最高剂量水平施用，或者在阶段2中在RP2D施用。再治疗可以使用与初始剂量不同的批次和/或供体。每个使用UCART19的再治疗必须与在第56天、第4个月和第6个月的计划肿瘤评估以后的初始剂量间隔至少4周，并且必须在用Flu/Cy或Flu/Cy和CD52抗体进行淋巴细胞耗竭以后。在D14在全血中不可检测UCART19的患者必须用后续淋巴细胞耗竭再治疗，所述后续淋巴细胞耗竭开始于在第1阶段完成DLT观察窗以后或者在第二阶段中的第28天。有资格接受再治疗的患者将从淋巴细胞耗竭(第-5天)开始直到重复给药后2个月(第56天)开始一个新的周期，并遵循与关于最初UCART19输注所述相同的就诊和评估时间表。在最后一次UCART19输注后的治疗期结束后(第56天)，患者将按照研究计划的安排继续进入随访期。第6个月(最初第0天后的6个月)以后不可进行重新治疗。
尽管已经参考各种应用、方法和组合物描述了公开的教导，但是应当理解，在不脱离本文的教导和以下权利要求的情况下可以做出各种改变和修改。提供了前述实施例来更好地举例说明公开的教导，且无意限制本文中呈现的教导的范围。尽管已经以这些示例性实施方案的方式描述了本教导，技术人员会容易地明白，这些示例性实施方案的众多变化和修改是可能的，无需过多实验。所有这样的变化和修改是在本教导的范围内。
在本文中引用的所有参考文献(包括专利、专利申请、论文、教科书等)和其中引用的参考文献，就其尚未被引用的程度而言，特此通过引用整体并入。在一篇或多篇并入的文献和类似材料与本申请(包括、但不限于确定的术语、术语用法、描述的技术等)不同或矛盾的情况下，以本申请为准。
前面的描述和实施例详述了本发明的某些具体实施方案，并描述了发明人预见到的最佳模式。但是，应当明白，不论从文章可以看出多么详细的前述内容，本发明可以以许多方式实践，且本发明应当根据所附权利要求及其任何等同方案来解释。
Figure IDA0002561337820000011
Figure IDA0002561337820000021
Figure IDA0002561337820000031
Figure IDA0002561337820000041
Figure IDA0002561337820000051
Figure IDA0002561337820000061
Figure IDA0002561337820000071
Figure IDA0002561337820000081
Figure IDA0002561337820000091
Figure IDA0002561337820000101
Figure IDA0002561337820000111
Figure IDA0002561337820000121
Figure IDA0002561337820000131
Figure IDA0002561337820000141
Figure IDA0002561337820000151
Figure IDA0002561337820000161
Figure IDA0002561337820000171
Figure IDA0002561337820000181
Figure IDA0002561337820000191
Figure IDA0002561337820000201
Figure IDA0002561337820000211
Figure IDA0002561337820000221
Figure IDA0002561337820000231
Figure IDA0002561337820000241
Figure IDA0002561337820000251
Figure IDA0002561337820000261
Figure IDA0002561337820000271
Figure IDA0002561337820000281
Figure IDA0002561337820000291

Claims (134)

1.一种治疗患有难治性和/或复发性非霍奇金淋巴瘤的受试者的方法，所述方法包括给所述受试者施用至少一剂包含抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其中所述至少一剂是约20x106细胞/剂至约360x106细胞/剂。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述非霍奇金淋巴瘤是大B细胞性淋巴瘤。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述非霍奇金淋巴瘤是滤泡性淋巴瘤。
4.根据权利要求1至3中的任一项所述的方法，其中所述至少一剂选自约20x106细胞/剂、约40x106细胞/剂、约80x106细胞/剂、约120x106细胞/剂、约240x106细胞/剂和约360x106细胞/剂。
5.根据权利要求1至4中的任一项所述的方法，其中当受试者具有小于或等于50kg的重量时，所述至少一剂选自约20x106细胞/剂、约80x106细胞/剂和约240x106细胞/剂。
6.根据权利要求1至4中的任一项所述的方法，其中当受试者具有大于50kg的重量时，所述至少一剂选自约20x106细胞/剂、约40x106细胞/剂、约120x106细胞/剂和约360x106细胞/剂。
7.根据权利要求1至6中的任一项所述的方法，其中所述CAR-T细胞是CD52缺陷的。
8.根据权利要求1至6中的任一项所述的方法，其中所述CAR-T细胞包含CD52-缺陷型细胞和CD-52阳性细胞的混合物。
9.根据权利要求1至8中的任一项所述的方法，其中所述CAR-T细胞包含SEQ ID NO：1的CAR。
10.根据权利要求1至9中的任一项所述的方法，其中所述CAR-T细胞包含UCART19(CD19)CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞。
11.根据权利要求1至9中的任一项所述的方法，其中所述CAR-T细胞不表达安全开关。
12.根据权利要求1至11中的任一项所述的方法，其中直到在施用CAR-T细胞以后至少14天，CAR表达在所述受试者中是可检测的。
13.根据权利要求1至12中的任一项所述的方法，其中直到在施用CAR-T细胞以后至少28天，CAR表达在所述受试者中是可检测的。
14.根据权利要求1至13中的任一项所述的方法，其中所述受试者在CAR-T施用以后至少1个月表现出CR或Cri状态。
15.根据权利要求1至14中的任一项所述的方法，其中所述受试者在CAR-T施用以后至少2个月表现出CR或Cri状态。
16.根据权利要求1至15中的任一项所述的方法，其中所述受试者在CAR-T施用以后至少6个月表现出CR或Cri状态。
17.根据权利要求1至16中的任一项所述的方法，其中所述受试者在CAR-T施用以后至少12个月表现出CR或Cri状态。
18.根据权利要求1至17中的任一项所述的方法，其中在施用至少一剂之前所述受试者接受第一淋巴细胞耗竭方案。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨和环磷酰胺。
20.根据权利要求18所述的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨、环磷酰胺和抗-CD52抗体。
21.根据权利要求19或20所述的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案进一步包含施用Mensa(2-巯基乙烷磺酸钠)。
22.根据权利要求19至21中的任一项所述的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案进一步包含施用至少一种皮质类固醇。
23.根据权利要求22所述的方法，其中在即将施用抗-CD52抗体之前施用所述皮质类固醇。
24.根据权利要求22或23所述的方法，其中所述皮质类固醇是甲泼尼龙。
25.根据权利要求24所述的方法，其中以2mg/kg的剂量施用所述甲泼尼龙。
26.根据权利要求1至25中的任一项所述的方法，其中在淋巴细胞耗竭方案之前患者接受输注相关反应的前驱给药。
27.根据权利要求26所述的方法，其中所述前驱给药包含至少一种抗组胺剂。
28.根据权利要求26或27所述的方法，其中所述前驱给药包含对乙酰氨基酚。
29.根据权利要求19至28中的任一项所述的方法，其中以约30mg/m2/天的剂量施用氟达拉滨；以约300mg/m2/天的剂量施用环磷酰胺；或以约10至约13mg/天的剂量施用CD52抗体。
30.根据权利要求20至28中的任一项所述的方法，其中以约30mg/m2/天的剂量施用氟达拉滨；以约300mg/m2/天的剂量施用环磷酰胺；和以约10至约13mg/天的剂量施用CD52抗体。
31.根据权利要求18至30中的任一项所述的方法，其中在施用至少一剂之前约1至15天之间开始所述第一淋巴细胞耗竭方案。
32.根据权利要求18至31中的任一项所述的方法，其中在1、2、3、4或5天的时程中施用所述第一淋巴细胞耗竭方案。
33.根据权利要求1至32中的任一项所述的方法，其中所述受试者接受后续剂量的CAR-T细胞。
34.根据权利要求33所述的方法，其中所述受试者在施周后续剂量时表现出次优应答。
35.根据权利要求34所述的方法，其中所述次优应答包含：
(a)完全应答(CR)，具有血细胞计数不完全恢复的完全应答(CRi)，具有可检测的最小残留疾病(白血病患者)和缺乏细胞遗传应答；
(b)骨髓完全应答；
(c)部分应答；或者
(d)稳定应答。
36.根据权利要求33至35中的任一项所述的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量中的细胞数目大约相同数目的细胞。
37.根据权利要求33至35中的任一项所述的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量相比增加的数目的细胞。
38.根据权利要求33至35中的任一项所述的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量相比减少的数目的细胞。
39.根据权利要求33至38中的任一项所述的方法，其中在所述第一剂量以后至少14天、至少28天、至少42天或至少56天施用所述后续剂量。
40.一种用于治疗遭受癌症的患者的药物试剂盒，所述试剂盒包含：
(a)抗-CD19 CAR-T细胞；和
(b)CD52抗体。
41.根据权利要求40所述的药物试剂盒，其中所述CAR-T细胞是UCART19细胞。
42.根据权利要求40或41所述的药物试剂盒，其中所述CAR-T细胞表达SEQ ID NO：1的CAR。
43.根据权利要求40至42中的任一项所述的药物试剂盒，其中所述CD52抗体包含SEQID NO：8和/或SEQ ID NO：10的序列。
44.根据权利要求40至43中的任一项所述的药物试剂盒，其中所述试剂盒包含含有CAR-T细胞的第一容器和含有CD52抗体的第二容器。
45.根据权利要求44所述的药物试剂盒，其中所述第一容器和第二容器中的至少一个是柔性的细胞输注袋。
46.根据权利要求40至45中的任一项所述的药物试剂盒，其中所述试剂盒进一步包含标签或包装插页，所述标签或包装插页包含关于向受试者施用CAR-T细胞和CD52抗体的说明书。
47.一种治疗方法，其包括：
(a)给患有疾病的受试者施用第一剂量的嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，以及
(b)在一时间点给所述受试者施用后续剂量的CAR-T细胞，所述时间点是开始(a)中的所述施用以后至少或超过约28天且小于约200天。
48.根据权利要求47所述的方法，其中所述CAR-T细胞是同种异体的。
49.根据权利要求47或48所述的方法，其中所述第一剂量包含约1x104至约5x108个总细胞。
50.根据权利要求49所述的方法，其中所述第一剂量包含约6x105个总细胞、约6x106个总细胞、约6x107个总细胞、约8x107个总细胞、约1.8x108个总细胞、约2.4x108个总细胞或约5x108个总细胞。
51.根据权利要求47或48所述的方法，其中所述第一剂量包含1x104至2x107细胞/千克受试者体重。
52.根据权利要求51所述的方法，其中所述第一剂量包含约1x104、约1x105、约1x106、约3x106或约9x106细胞/千克受试者体重。
53.根据权利要求47至52中的任一项所述的方法，其中在开始(a)中的所述施用以后约28天、约60天或约99天施用所述后续剂量的CAR-T细胞。
54.根据权利要求53所述的方法，其中在开始(a)中的所述施用以后约99天施用所述后续剂量的CAR-T细胞。
55.根据权利要求47至54中的任一项所述的方法，其中在步骤(a)之后且在步骤(b)之前，给所述受试者施用中间淋巴细胞耗竭方案。
56.根据权利要求47至55中的任一项所述的方法，其中所述中间淋巴细胞耗竭方案包括在步骤(b)之前约0至14天之间给所述受试者施用氟达拉滨、环磷酰胺和CD52抗体。
57.根据权利要求56所述的方法，其中以约90至150mg/m2的剂量施用氟达拉滨；以约1000至4000mg/m2的剂量施用环磷酰胺；和以约0.3至1mg/kg的剂量施用CD52抗体。
58.根据权利要求47至57中的任一项所述的方法，其中给所述受试者施用第一淋巴细胞耗竭方案。
59.根据权利要求47所述的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案包括给所述受试者施用氟达拉滨、环磷酰胺和CD52抗体。
60.根据权利要求59所述的方法，其中以约90至150mg/m2的剂量施用氟达拉滨；以约1000至4000mg/m2的剂量施用环磷酰胺；和以约0.3至1mg/kg的剂量施用CD52抗体。
61.根据权利要求58至60中的任一项所述的方法，其中在步骤(a)之前约15至5天之间开始所述第一淋巴细胞耗竭方案。
62.根据权利要求58至60中的任一项所述的方法，其中在步骤(a)之前2至10天之间结束所述第一淋巴细胞耗竭方案。
63.根据权利要求47至62中的任一项所述的方法，其中在步骤(a)和步骤(b)之间评估应答。
64.根据权利要求63所述的方法，其中在中间淋巴细胞耗竭之前评估应答。
65.根据权利要求47至64中的任一项所述的方法，其中所述后续剂量包含约1x105至约5x108个总细胞。
66.根据权利要求47至65中的任一项所述的方法，其中所述后续剂量包含约6x106个总细胞。
67.根据权利要求47至66中的任一项所述的方法，其中在(a)中的施用导致受试者疾病的改善，如通过(a)中所述施用以后疾病的一种或多种症状的减轻所指示的。
68.根据权利要求67所述的方法，其中在(b)中的施用时，所述受试者已经复发。
69.根据权利要求47至68中的任一项所述的方法，其中所述后续剂量的细胞包含足以改善所述受试者的疾病的量的细胞。
70.根据权利要求47至69中的任一项所述的方法，其中在(b)中的施用导致受试者中疾病的进一步改善。
71.根据权利要求47至70中的任一项所述的方法，其中所述后续剂量的施用导致与即将开始施用后续剂量之前相比受试者的疾病的改善。
72.根据权利要求47至71中的任一项所述的方法，其中与包含替代给药方案的方法相比，所述方法导致该疾病的更大程度和/或更长时间阶段的改善，在所述替代给药方案中，向受试者施用单剂量的在(a)中的细胞和在(b)中的细胞。
73.根据权利要求47至72中的任一项所述的方法，其中所述疾病在施用所述第一剂量以后持续存在和/或所述第一剂量的施用不足以根除所述受试者的疾病。
74.根据权利要求47至73中的任一项所述的方法，其中所述受试者在(b)中的施用时表现出CAR-T细胞的持续的缺失。
75.根据权利要求47至74中的任一项所述的方法，其中所述受试者在(b)中的施用时表现出所述疾病的一种或多种症状。
76.根据权利要求47至75中的任一项所述的方法，其中所述受试者在(b)中的施用时表现出次优应答。
77.根据权利要求76所述的方法，其中所述次优应答包含：
(a)完全应答(CR)，具有血细胞计数不完全恢复的完全应答(CRi)，具有可检测的最小残留疾病(白血病患者)和缺乏细胞遗传应答；
(b)骨髓完全应答；
(c)部分应答；或者
(d)稳定应答。
78.根据权利要求47至77中的任一项所述的方法，其中与包含替代给药方案的方法相比，在(b)中的施用以后第2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14天时在所述受试者中的细胞因子释放综合征(CRS)相关结果不是可检测的或下降了约20％至约99％，在所述替代给药方案中给所述受试者施用(b)中的细胞，而没有施用所述第一剂量。
79.根据权利要求47至78中的任一项所述的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量中的细胞数目大约相同数目的细胞。
80.根据权利要求47至78中的任一项所述的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量相比增加的数目的细胞。
81.根据权利要求80所述的方法，其中所述后续剂量包含比所述第一剂量的细胞数目多至少约5％的细胞。
82.根据权利要求47至78中的任一项所述的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量相比减少的数目的细胞。
83.根据权利要求82所述的方法，其中所述后续剂量包含比所述第一剂量的细胞数目少至少约5％的细胞。
84.根据权利要求47至83中的任一项所述的方法，其中所述疾病是肿瘤或癌症。
85.根据权利要求84所述的方法，其中所述癌症是白血病或淋巴瘤。
86.根据权利要求84所述的方法，其中所述肿瘤或癌症是急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、HNSCC、非霍奇金淋巴瘤、急性髓性白血病、弥漫性大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)、多发性骨髓瘤、难治性滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、惰性B细胞淋巴瘤、B细胞恶性肿瘤、结肠癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、皮肤癌、黑素瘤、骨癌和脑癌、卵巢癌、上皮癌、肾细胞癌、胰腺腺癌、霍奇金淋巴瘤、宫颈癌、结直肠癌、胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤、尤因肉瘤、髓母细胞瘤、骨肉瘤、滑膜肉瘤或间皮瘤。
87.根据权利要求86所述的方法，其中所述ALL是复发性或难治性ALL。
88.一种治疗方法，其包括向先前施用过第一剂量的同种异体CAR-T细胞的受试者施用后续剂量的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，其中：在第一剂量开始以后至少或超过约5周并且小于约24周的时间点施用后续剂量的细胞。
89.一种治疗方法，其包括向受试者施用后续剂量的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，其中：在所述施用之前，所述受试者已经接受先前剂量的CAR-T细胞，其量足以在所述受试者中表现出临床益处；且在所述施用时间，所述受试者没有表现出对CAR-T细胞特异性的可检测的适应性宿主免疫应答；和/或所述先前剂量和后续剂量之间的时间大于约5周且小于约24周。
90.根据权利要求88或权利要求89所述的方法，其中在所述后续剂量中施用的细胞的数目与在所述第一剂量中施用的细胞的数目相同。
91.根据权利要求88或权利要求89所述的方法，其中在所述后续剂量中施用的细胞的数目大于在所述第一剂量中施用的细胞的数目。
92.包含同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞的组合物用于制备治疗先前用CAR-T细胞治疗过的受试者的疾病的药物的用途，其中：所述组合物用于在所述先前治疗以后约5至约24周之间使用；和/或将所述组合物配制成用于施用后续剂量，其量足以改善先前用CAR-T细胞治疗过的受试者中的疾病。
93.一种用于治疗先前用CAR-T细胞治疗过的受试者的疾病的包含同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞的组合物，其中：所述细胞用于在先前治疗以后约5至24周之间使用；和将所述细胞配制成用于施用后续剂量，其量足以改善先前用CAR-T细胞治疗过的受试者的疾病。
94.根据权利要求92所述的用途或根据权利要求93所述的用途的组合物，其中所述先前治疗中的CAR-T细胞的剂量在使用所述后续剂量之前改善了所述受试者的疾病的一种或多种症状。
95.同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞在制备药物中的用途，所述药物用于用在治疗疾病的方法中，所述方法包括：
(a)向患有该疾病的受试者施用第一剂量的CAR-T细胞，所述第一剂量包含约1x106至约5x108个总细胞，和
(b)在开始(a)中的所述施用以后至少或超过约5周且小于约24周的时间点给所述受试者施用后续剂量的CAR-T细胞。
96.根据权利要求92、94或95所述的用途或根据权利要求93所述的用途的组合物，其中所述疾病是白血病或淋巴瘤。
97.根据权利要求47至83中的任一项所述的方法，权利要求92或94至95中的任一项的用途，或根据权利要求93所述的用途的组合物，其中所述CAR-T细胞是肿瘤抗原-特异性的CAR-T细胞。
98.根据权利要求47至83中的任一项所述的方法，权利要求92或94至95中的任一项的用途，或根据权利要求93所述的用途的组合物，其中所述CAR-T细胞是UCART19细胞。
99.一种制品，其包含：
多个可密封的容器，每个容器分别包含用于施用给受试者的单位剂量的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞，所述单位剂量包含约1x106至约5x108个细胞；
包装材料；和
标签或包装插页，其包含关于通过进行第一次施用和后续施用来向所述受试者施用多个所述单位剂量的说明书，所述第一次施用包括向所述受试者递送所述单位剂量中的一个，并且所述后续施用包括向所述受试者施用一个或多个所述单位剂量。
100.根据权利要求99所述的制品，其中所述说明书指定在所述第一次施用以后约30至150天之间的时间进行所述后续施用，任选地在约30天、约60天、约90天或约99天。
101.根据权利要求99或100所述的制品，其中所述容器是或包含柔性的细胞输注袋。
102.一种治疗患有难治性和/或复发性CD19+B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的成年受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用至少一剂包含抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其中所述至少一剂选自约6x105细胞/剂、6x106细胞/剂、约6-8x107细胞/剂和约1.8-2.4x108细胞/剂。
103.一种治疗患有难治性和/或复发性CD19+B-细胞急性成淋巴细胞性白血病的儿科受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用至少一剂包含抗-人CD19 4-1BB/CD3ζCAR的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)，其中所述至少一剂是约2-8x107细胞/剂。
104.根据权利要求102或103所述的方法，其中所述CAR-T细胞是CD52缺陷的。
105.根据权利要求102或103所述的方法，其中所述CAR-T细胞包含CD52-缺陷型细胞和CD-52阳性细胞的混合物。
106.根据权利要求102至105中的任一项所述的方法，其中所述CAR-T细胞表达SEQ IDNO：1的CAR。
107.根据权利要求102至106中的任一项所述的方法，其中所述CAR-T细胞包含UCART19(CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞)。
108.根据权利要求102至107中的任一项所述的方法，其中直到在施用CAR-T细胞以后至少42天，CAR表达在所述受试者中是可检测的。
109.根据权利要求102至108中的任一项所述的方法，其中直到在施用CAR-T细胞以后至少56天，CAR表达在所述受试者中是可检测的。
110.根据权利要求102至109中的任一项所述的方法，其中所述受试者在UCART19施用以后至少1.3个月表现出CR或Cri状态。
111.根据权利要求102至110中的任一项所述的方法，其中所述受试者在UCART19施用以后至少1.8个月表现出CR或Cri状态。
112.根据权利要求102至111中的任一项所述的方法，其中所述受试者在UCART19施用以后至少3.6个月表现出CR或Cri状态。
113.根据权利要求102至112中的任一项所述的方法，其中所述受试者在UCART19施用以后至少12.4个月表现出CR或Cri状态。
114.根据权利要求102至113中的任一项所述的方法，其中在施用至少一剂之前所述受试者接受第一淋巴细胞耗竭方案。
115.根据权利要求114所述的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨和环磷酰胺。
116.根据权利要求114所述的方法，其中所述第一淋巴细胞耗竭方案包括施用氟达拉滨、环磷酰胺和抗-CD52抗体。
117.根据权利要求115或116所述的方法，其中以约30至150mg/m2的剂量施用氟达拉滨；以约300至4000mg/m2的剂量施用环磷酰胺；和以约0.3至1mg/kg的剂量施用CD52抗体。
118.根据权利要求114至117中的任一项所述的方法，其中在施用至少一剂之前约1至15天之间开始所述第一淋巴细胞耗竭方案。
119.根据权利要求114至118中的任一项所述的方法，其中所述受试者接受后续剂量的CAR-T细胞。
120.根据权利要求119所述的方法，其中所述受试者在施用后续剂量时表现出次优应答。
121.根据权利要求120所述的方法，其中所述次优应答包含：
(a)完全应答(CR)，具有血细胞计数不完全恢复的完全应答(CRi)，具有可检测的最小残留疾病(白血病患者)和缺乏细胞遗传应答；
(b)骨髓完全应答；
(c)部分应答；或者
(d)稳定应答。
122.根据权利要求119所述的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量中的细胞数目大约相同数目的细胞。
123.根据权利要求119所述的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量相比增加的数目的细胞。
124.根据权利要求119所述的方法，其中所述后续剂量包含与所述第一剂量相比减少的数目的细胞。
125.一种生产针对目的靶标的同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)群体的方法，所述方法包括：
(a)从健康供体分离外周血单核细胞(PBMC)；
(b)活化所述PBMC中的T-细胞；
(c)用慢病毒载体转导经活化的T-细胞，其中所述慢病毒载体是表达目的CAR的自灭活重组载体；
(d)破坏T-细胞子集中的TCRαβ和CD-52基因表达；
(e)扩增所述T-细胞群体；和
(f)富集TCRαβ-阴性细胞的T-细胞群体；
由此产生同种异体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T细胞)群体。
126.根据权利要求125所述的方法，其中在步骤(b)以后约3-4天进行步骤(c)。
127.根据权利要求125或126所述的方法，其中在步骤(c)以后约2天进行步骤(d)。
128.根据权利要求125至127中的任一项所述的方法，其中在步骤(d)以后约10-12天进行步骤(f)。
129.根据权利要求125至128中的任一项所述的方法，其中所述CAR-T细胞是CD52缺陷的。
130.根据权利要求125至129中的任一项所述的方法，其中所述CAR-T细胞包含CD52-缺陷型细胞和CD-52阳性细胞的混合物。
131.根据权利要求125至130中的任一项所述的方法，其中所述CAR-T细胞表达SEQ IDNO：1的CAR。
132.根据权利要求125至131中的任一项所述的方法，其中所述CAR-T细胞包含UCART19(CD19CAR/RQR8+_TCRαβ-_T-细胞)。
133.根据权利要求125至132中的任一项所述的方法，其中所述步骤(c)的慢病毒载体进一步表达安全开关。
134.根据权利要求133所述的方法，其中所述安全开关是RQR8。
CN201880084743.8A 2017-10-31 2018-10-30 用于同种异体嵌合抗原受体t细胞的给药的方法和组合物 Active CN111886015B (zh)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762579426P 2017-10-31 2017-10-31
US62/579426 2017-10-31
US201862716898P 2018-08-09 2018-08-09
US62/716898 2018-08-09
US201862750215P 2018-10-24 2018-10-24
US62/750215 2018-10-24
PCT/US2018/058288 WO2019089650A1 (en) 2017-10-31 2018-10-30 Methods and compositions for dosing of allogeneic chimeric antigen receptor t cells

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111886015A true CN111886015A (zh) 2020-11-03
CN111886015B CN111886015B (zh) 2024-04-26

Family

ID=64332391

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201880084743.8A Active CN111886015B (zh) 2017-10-31 2018-10-30 用于同种异体嵌合抗原受体t细胞的给药的方法和组合物

Country Status (16)

Country Link
US (2) US20190125799A1 (zh)
EP (1) EP3703710A1 (zh)
JP (2) JP7451410B2 (zh)
KR (1) KR20200094147A (zh)
CN (1) CN111886015B (zh)
AU (1) AU2018360566A1 (zh)
BR (1) BR112020008428A2 (zh)
CA (1) CA3079747A1 (zh)
CO (1) CO2020006443A2 (zh)
IL (1) IL274160A (zh)
MX (1) MX2020004516A (zh)
PE (1) PE20211266A1 (zh)
PH (1) PH12020550598A1 (zh)
SG (1) SG11202003849VA (zh)
TW (1) TW201923072A (zh)
WO (1) WO2019089650A1 (zh)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3962535A1 (en) 2019-04-30 2022-03-09 CRISPR Therapeutics AG Allogeneic cell therapy of b cell malignancies using genetically engineered t cells targeting cd19
EP4069285A1 (en) * 2019-12-06 2022-10-12 Precision BioSciences, Inc. Methods for cancer immunotherapy, using lymphodepletion regimens and cd19, cd20 or bcma allogeneic car t cells
US20230192807A1 (en) * 2020-05-15 2023-06-22 Precision Biosciences, Inc. Methods for immunotherapy
CA3195201A1 (en) * 2020-10-20 2022-04-28 Mark Benton Allogeneic cell therapy of b cell malignancies using genetically engineered t cells targeting cd19
CN117396607A (zh) 2020-12-30 2024-01-12 阿劳诺斯治疗公司 包含多顺反子表达盒的重组载体及其使用方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20140271635A1 (en) * 2013-03-16 2014-09-18 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Treatment of cancer using humanized anti-cd19 chimeric antigen receptor
WO2014184143A1 (en) * 2013-05-13 2014-11-20 Cellectis Cd19 specific chimeric antigen receptor and uses thereof
WO2016019300A1 (en) * 2014-07-31 2016-02-04 Novartis Ag Subset-optimized chimeric antigen receptor-containing t-cells
CN107287164A (zh) * 2017-07-07 2017-10-24 青岛协和华美医学诊断技术有限公司 靶向cd19的嵌合抗原受体t细胞、制备方法及应用

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
KR100272077B1 (ko) 1990-08-29 2000-11-15 젠팜인터내셔날,인코포레이티드 이종 항체를 생산할 수 있는 전이유전자를 가진 인간이외의 동물
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
ATE164395T1 (de) 1990-12-03 1998-04-15 Genentech Inc Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften
GB201206559D0 (en) 2012-04-13 2012-05-30 Ucl Business Plc Polypeptide
IN2014DN10991A (zh) 2012-05-25 2015-09-25 Cellectis
CN106414748B (zh) * 2014-02-14 2021-05-28 得克萨斯州大学系统董事会 嵌合抗原受体及制备方法
CN106117366A (zh) * 2016-06-24 2016-11-16 安徽未名细胞治疗有限公司 一种cd19特异性嵌合抗原受体及其编码基因、应用
CN106544365B (zh) * 2016-10-25 2019-11-22 山东兴瑞生物科技有限公司 一种人抗cd19嵌合抗原受体修饰的cik的制备方法及应用
CN106520806B (zh) * 2016-11-03 2018-06-19 宜明细胞生物科技有限公司 一种重组car基因及其载体、car-t细胞和应用
CN106520837A (zh) * 2016-11-30 2017-03-22 河南省华隆生物技术有限公司 一种重组载体及其应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20140271635A1 (en) * 2013-03-16 2014-09-18 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Treatment of cancer using humanized anti-cd19 chimeric antigen receptor
WO2014184143A1 (en) * 2013-05-13 2014-11-20 Cellectis Cd19 specific chimeric antigen receptor and uses thereof
WO2016019300A1 (en) * 2014-07-31 2016-02-04 Novartis Ag Subset-optimized chimeric antigen receptor-containing t-cells
CN107287164A (zh) * 2017-07-07 2017-10-24 青岛协和华美医学诊断技术有限公司 靶向cd19的嵌合抗原受体t细胞、制备方法及应用

Also Published As

Publication number Publication date
JP2024014911A (ja) 2024-02-01
KR20200094147A (ko) 2020-08-06
MX2020004516A (es) 2020-10-20
SG11202003849VA (en) 2020-05-28
IL274160A (en) 2020-06-30
JP2021501217A (ja) 2021-01-14
EP3703710A1 (en) 2020-09-09
JP7451410B2 (ja) 2024-03-18
RU2020116549A (ru) 2021-12-01
BR112020008428A2 (pt) 2020-12-01
US20240041930A1 (en) 2024-02-08
CN111886015B (zh) 2024-04-26
CA3079747A1 (en) 2019-05-09
PE20211266A1 (es) 2021-07-19
US20190125799A1 (en) 2019-05-02
PH12020550598A1 (en) 2021-02-15
AU2018360566A1 (en) 2020-05-21
CO2020006443A2 (es) 2020-06-09
WO2019089650A1 (en) 2019-05-09
TW201923072A (zh) 2019-06-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20210214457A1 (en) Combination of anti-pd-1 antibodies and bispecific anti-cd20/anti-cd3 antibodies to treat cancer
CN111886015B (zh) 用于同种异体嵌合抗原受体t细胞的给药的方法和组合物
TWI786044B (zh) 藉由投予ｐｄ-１抑制劑治療皮膚癌之方法
KR102515509B1 (ko) 결장직장암을 갖는 환자의 치료에서의 항-pd-1 항체의 용도
CA2599734C (en) Humanized l243 antibodies
US20170174781A1 (en) Bispecific Anti-CD20/Anti-CD3 Antibodies to Treat Acute Lymphoblastic Leukemia
US20220249659A1 (en) Combination of pd-1 inhibitors and lag-3 inhibitors for enhanced efficacy in treating cancer
CN117603360A (zh) 用于治疗癌症的多特异性抗体
CA2744670C (en) A b cell depleting agent for the treatment of atherosclerosis
CN114450028A (zh) Lag-3拮抗剂治疗的定量空间剖析
CN118176214A (zh) 血液癌症的lag-3拮抗剂疗法
KR20240099362A (ko) 혈액암에 대한 lag-3 길항제 요법
CN116615238A (zh) 用于治疗癌症和减轻细胞因子释放综合征的抗体组合
EA042623B1 (ru) Комбинация антител к pd-1 и биспецифических антител к cd20/cd3 для лечения злокачественной опухоли

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant