CN111879684B - 一种基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法 - Google Patents
一种基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111879684B CN111879684B CN202010561716.4A CN202010561716A CN111879684B CN 111879684 B CN111879684 B CN 111879684B CN 202010561716 A CN202010561716 A CN 202010561716A CN 111879684 B CN111879684 B CN 111879684B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- phagocyte
- flow cytometry
- bacteria
- detection method
- function detection
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 53
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 20
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 19
- 230000006870 function Effects 0.000 claims description 20
- ACOJCCLIDPZYJC-UHFFFAOYSA-M thiazole orange Chemical group CC1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1.C1=CC=C2C(C=C3N(C4=CC=CC=C4S3)C)=CC=[N+](C)C2=C1 ACOJCCLIDPZYJC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 15
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims description 14
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 claims description 11
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 3
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 230000003915 cell function Effects 0.000 claims 3
- 239000000337 buffer salt Substances 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 16
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 8
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 7
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 5
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 4
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 4
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N Thiophene Chemical compound C=1C=CSC=1 YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 2
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 210000000865 mononuclear phagocyte system Anatomy 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000167880 Hirundinidae Species 0.000 description 1
- 101710175243 Major antigen Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241001006347 Pseudopoda Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000037125 natural defense Effects 0.000 description 1
- 230000003448 neutrophilic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 210000000680 phagosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 229930192474 thiophene Natural products 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
- G01N15/1434—Optical arrangements
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6402—Atomic fluorescence; Laser induced fluorescence
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法，本发明方法将大肠杆菌菌液与噻唑橙染色液于恒温摇床振荡孵育适当时间，用PBS洗去非特异性黏附，离心，弃上清。最后加入适量PBS重悬，加入到吞噬细胞培养液中，于培养箱中培养适当时间。消化收集吞噬细胞，在流式细胞仪上定量分析荧光群体的细胞分布，从而分析吞噬细胞捕获吞噬细菌的功能。本发明快速、准确、简单易行且成本较低，有利于推广应用。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于流式细胞术评价吞噬细胞吞噬细菌能力的方法。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
吞噬细胞为体内具有吞噬功能的一群细胞，主要包括单核吞噬细胞系统和中性粒细胞。单核吞噬细胞系统包括游离于血液中的单核细胞及进入各种组织后发育而成的巨噬细胞。其中巨噬细胞具有很强的吞噬能力，还是一类主要的抗原递呈细胞，在特异性免疫应答的诱导与调节中起关键作用。中性粒细胞是一类小吞噬细胞，具有非特异性免疫防御作用并参与机体的免疫应答、炎症损伤等。吞噬细胞对体内衰老死亡细胞残片和外来异物有吞噬和消化的功能，是机体天然防御的重要机制之一。吞噬细胞的吞噬作用是微生物学与免疫学中的重要实验，它主要用于观察中性粒细胞、巨噬细胞吞噬外来微生物和其它颗粒的能力，从而反映机体的自然免疫防御功能。当病原体穿透皮肤或粘膜到达体内组织后，吞噬细胞首先从毛细血管中逸出，聚集到病原体所在部位。吞噬细胞首先将异物吸附在细胞表面，随之吸附区的胞膜内陷，伸出伪足包围异物并吞入胞质，形成吞噬泡。细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合，形成吞噬溶酶体，杀死病原体，消化分解异物。因此，检测吞噬细胞吞噬细菌的功能，对于进一步探究吞噬细胞在机体中发挥的作用以及机体免疫水平的高低具有重要的意义。
小鼠作为最常用的实验动物已经广泛应用于食品、化妆品、药品、生物制品、工业产品和医学及生命科学等的安全性、毒性和效力等方面的实验和检验。传统用于评价小鼠吞噬细胞吞噬功能的方法主要为细胞涂片镜检进行人工计数，这种方法费时、工作量大，受人的主观因素影响比较大，观察的数量较少，一般只能计数100个细胞，所以存在一定的误差。
目前，用流式细胞仪来分析评价吞噬细胞吞噬功能越来越受到人们的关注。由于流式细胞仪检测速度可达每秒2000个细胞，共计数10,000个细胞，极大提高了检测的准确性，并为样本数量较多的实验设计提供了一个快速、准确、可行的实验方法。目前有关吞噬细胞吞噬功能的检测报道不多，有报道使用碳酸盐缓冲液制备的荧光素FITC标记的细菌进行吞噬细胞吞噬功能检测，但该方法存在FITC荧光性弱、难以区分检测的缺点，不利于推广使用。
发明内容
基于上述背景技术中记载的内容，本发明目的在于提供一种优化的流式细胞术评价吞噬细胞功能的方法，进一步提高吞噬细胞功能检测准确性。
基于上述技术目的，本发明提供以下技术方案；
本发明第一方面，提供一种基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法，所述方法包括以下步骤：将荧光染料标记的细菌加入吞噬细胞中孵育一段时间后通过流式细胞仪分析荧光分布情况从而评价吞噬细胞的吞噬能力。
在发明人的研究过程中，由于荧光染料与细菌结合后被吞噬细胞吞噬，通过流式细胞术检测吞噬细胞中荧光分布时，染料由于被细胞结构遮挡存在亮度不足及难以区分的缺点。根据发明人的研究结果，当采用噻吩橙作为荧光染料应用于上述检测方法，能够清晰完成的显示吞噬细胞吞噬细菌的状况。
以上一个或多个技术方案的有益效果是：
1.本发明采用噻唑橙对细菌进行荧光标记，有效避免了其他染料荧光性弱、难以区分检测的缺点。
2.本发明采用吞噬细胞吞噬荧光标记大肠杆菌的流式细胞术检测来评估吞噬细胞的功能，可以有效避免传统镜下计数法的操作繁琐和灵敏度低的缺点，可以简便、快速、重复性好的定量检测吞噬细胞对大肠杆菌的吞噬功能。
3.本发明快速、准确、简单易行且成本较低，有利于推广应用。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1为实施例1中所述噻唑橙单参数标记的小鼠巨噬细胞的流式直方图；
其中，图1A为对照组巨噬细胞的直方图；
图1B为吞噬了未标记大肠杆菌的巨噬细胞的直方图；
图1C为吞噬了经过噻唑橙标记的大肠杆菌的巨噬细胞的直方图，图中P2部分代表噻唑橙+的细胞群。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
正如背景技术所介绍的，针对现有技术中流式细胞术用于评价吞噬细胞吞噬能力的技术缺陷，为了解决如上的技术问题，本发明提出了一种优化的基于流式细胞术评价吞噬细胞吞噬能力的方法。
本发明第一方面，提供一种基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法，所述方法包括以下步骤：将荧光染料标记的细菌加入吞噬细胞中孵育一段时间后通过流式细胞仪分析荧光分布情况从而评价吞噬细胞的吞噬能力。
优选的，所述荧光染料为噻唑橙(thiazole orange)。
进一步优选的，所述噻唑橙的浓度为0.5-1mg/mL。
采用流式细胞仪分析时，噻唑橙激发光488nm，发射光530nm。
优选的，所述细菌为浓度为0.8～1.2×108/mL。
优选的，所述荧光染料标记的细菌制备方法如下：将细菌与荧光染料共同孵育一段时间，清洗并离心得到固体部分并采用缓冲盐溶液重悬。
进一步优选的，所述孵育温度为35～39℃。
进一步优选的，所述细菌与荧光染料混合后震荡孵育一段时间。
进一步优选的，所述缓冲盐溶液为PBS。
在上述技术方案的一些具体的实施方式中，所述细菌与荧光染料置于摇床上进行震荡孵育，所述振荡频率为200～240转/分。
进一步优选的，所述孵育时间为50～70分钟。
优选的，所述吞噬细胞与细菌的孵育时间为25～35min。
优选的，所述吞噬细胞与细菌的孵育温度为35～39℃。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本发明的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本发明的技术方案。
实施例1
1.取BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞，计数，取100万细胞，接种于细胞培养板中培养；取BALB/c小鼠骨髓细胞，利用Percoll密度梯度离心法分离出中性粒细胞，计数，取一定数量的细胞。
2.向大肠杆菌菌液中加入100μL噻唑橙染色液，所述噻唑橙染色液浓度为0.5mg/mL，37℃摇床振荡孵育60分钟，洗涤，离心，弃上清；
3.取离心后底部细菌沉淀中加入5mlPBS，流式细胞仪计数分析；
4.向吞噬细胞培养液中加入经噻唑橙染色的大肠杆菌菌液200μL，孵育20min；
5.消化收集吞噬细胞，加入0.1mlPBS，流式细胞仪检测分析，噻唑橙激发光488nm，发射光530nm；
6.收集1万个细胞，采用流式软件分析荧光群体的细胞分布，计算吞噬细胞对大肠杆菌的吞噬率。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法，其特征在于，所述功能检测方法包括以下步骤：将荧光染料标记的细菌加入吞噬细胞中共同孵育一段时间，清洗并离心得到固体部分并采用缓冲盐溶液重悬，通过流式细胞仪分析荧光分布情况从而评价吞噬细胞的吞噬能力；所述荧光染料为噻唑橙；所述噻唑橙的浓度为0.5-1mg/mL。
2.如权利要求1所述基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法，其特征在于，所述细菌为浓度为0.8~1.2×108/mL。
3.如权利要求1所述基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法，其特征在于，所述孵育温度为35~39℃。
4.如权利要求1所述基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法，其特征在于，所述细菌与荧光染料混合后震荡孵育一段时间。
5.如权利要求4所述基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法，其特征在于，所述细菌与荧光染料置于摇床上进行震荡孵育，所述震荡频率为200~240转/min。
6.如权利要求1所述基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法，其特征在于，所述孵育时间为50~70min。
7.如权利要求1所述基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法，其特征在于，所述缓冲盐溶液为PBS。
8.如权利要求1所述基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法，其特征在于，所述吞噬细胞与细菌的孵育时间为25~35min。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010561716.4A CN111879684B (zh) | 2020-06-18 | 2020-06-18 | 一种基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010561716.4A CN111879684B (zh) | 2020-06-18 | 2020-06-18 | 一种基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111879684A CN111879684A (zh) | 2020-11-03 |
| CN111879684B true CN111879684B (zh) | 2021-12-21 |
Family
ID=73157712
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010561716.4A Active CN111879684B (zh) | 2020-06-18 | 2020-06-18 | 一种基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111879684B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113981031A (zh) * | 2021-11-01 | 2022-01-28 | 山西中医药大学 | 一种新型t细胞功能检测方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1836490A2 (en) * | 2004-12-14 | 2007-09-26 | University Of The Witwatersrand Johannesburg | A method for diagnosing and monitoring cellular reservoirs of disease |
| CN101846626A (zh) * | 2010-05-24 | 2010-09-29 | 天津商业大学 | 一种利用流式细胞仪检测腹腔吞噬细胞活性的方法 |
| CN102279147A (zh) * | 2011-03-08 | 2011-12-14 | 山东大学威海分校 | 刺参体腔细胞吞噬活性的流式细胞检测方法 |
| CN105738614A (zh) * | 2016-02-23 | 2016-07-06 | 山东大学 | 一种应用流式细胞仪分析评价小鼠骨髓红细胞生成功能的方法 |
| CN106841011A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-06-13 | 浙江大学 | 流式细胞术快速检测大肠杆菌o157:h7的方法 |
| CN108289928A (zh) * | 2015-08-06 | 2018-07-17 | 哈佛大学校长及研究员协会 | 改进的微生物-结合分子和其用途 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BRPI0720342A2 (pt) * | 2006-10-04 | 2018-09-18 | Janssen Pharmaceutica N.V. | preparado de células apresentadoras de antígenos artificiais e seu uso em terapias celulares. |
| WO2009146495A1 (en) * | 2008-06-03 | 2009-12-10 | Sydney West Area Health Services | Method for predicting engraftment potential |
| CN101665537B (zh) * | 2009-06-29 | 2013-09-18 | 井健 | 细胞凋亡检测试剂及相关试剂盒 |
| EP2764125B1 (en) * | 2011-10-04 | 2018-02-21 | Genera Biosystems Limited | Compositions and methods of detecting respiratory pathogens using nucleic acid probes and subsets of beads |
| CN103954547A (zh) * | 2014-05-07 | 2014-07-30 | 江南大学 | 一种快速检测樟芝无性孢子存活率的方法 |
| CN113698335A (zh) * | 2015-07-04 | 2021-11-26 | 杭州多禧生物科技有限公司 | 细胞结合分子的特异性偶联 |
| CN106442277A (zh) * | 2015-08-13 | 2017-02-22 | 上海交通大学医学院 | 吞噬细胞对细菌的黏附率和吞噬率的检测方法 |
| US11415493B2 (en) * | 2016-03-17 | 2022-08-16 | Perkinelmer Health Sciences B.V. | Detection of cells in a liquid sample |
| US11421194B2 (en) * | 2018-12-06 | 2022-08-23 | The Trustees Of The Stevens Institute Of Technology | Pumpless platform for high-throughput dynamic multicellular culture and chemosensitivity evaluation |
-
2020
- 2020-06-18 CN CN202010561716.4A patent/CN111879684B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1836490A2 (en) * | 2004-12-14 | 2007-09-26 | University Of The Witwatersrand Johannesburg | A method for diagnosing and monitoring cellular reservoirs of disease |
| CN101846626A (zh) * | 2010-05-24 | 2010-09-29 | 天津商业大学 | 一种利用流式细胞仪检测腹腔吞噬细胞活性的方法 |
| CN102279147A (zh) * | 2011-03-08 | 2011-12-14 | 山东大学威海分校 | 刺参体腔细胞吞噬活性的流式细胞检测方法 |
| CN108289928A (zh) * | 2015-08-06 | 2018-07-17 | 哈佛大学校长及研究员协会 | 改进的微生物-结合分子和其用途 |
| CN105738614A (zh) * | 2016-02-23 | 2016-07-06 | 山东大学 | 一种应用流式细胞仪分析评价小鼠骨髓红细胞生成功能的方法 |
| CN106841011A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-06-13 | 浙江大学 | 流式细胞术快速检测大肠杆菌o157:h7的方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| A Far-Red Fluorescent DNA Binder for Interaction Studies of Live Multidrug-Resistant Pathogens and Host Cells;Leon N. Schulte 等;《Angewandte Chemie》;20180704;第130卷(第36期);第11738-11742页 * |
| Assessment of fluorochromes for cellular structure and function studies by flow cytometry;Jean‐Michel Petit 等;《Biology of Cell》;19931231;第78卷(第1-2期);第1-13页 * |
| Weiqiang Jing等.Breast cancer cells promote CD169 macrophage-associated immunosuppression through JAK2-mediated PD-L1 upregulation on macrophages+.《International Immunopharmacology》.2019,第78卷第106012页. * |
| 流式细胞术检测巨噬细胞吞噬功能的方法建立;陈连山 等;《数理医药学杂志》;20070531;第20卷(第5期);第622-624页 * |
| 细菌群体异质性对生长动态过程的影响及其表征;张怀强 等;《中国科学 C辑 生命科学》;20070430;第37卷(第2期);第246-256页 * |
| 陈连山 等.流式细胞术检测巨噬细胞吞噬功能的方法建立.《数理医药学杂志》.2007,第20卷(第5期),第622-624页. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111879684A (zh) | 2020-11-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102203588B (zh) | 利用光谱分离,表征和/或标识微生物的方法 | |
| CN102272585A (zh) | 采用拉曼光谱法分离、表征和/或鉴定微生物的方法 | |
| WO1989010566A1 (en) | Process for forming and using microdroplets | |
| EP2326727A2 (en) | Flow cytometry-based systems and methods for detecting microbes | |
| CN108845129B (zh) | 一种活动性结核类疾病的生物标志物的应用 | |
| US20120021453A1 (en) | Label-free cell sorting using near infrared emission | |
| US20220214347A1 (en) | Combined formulation kit for analyzing phenotype and function of cd1c+denrtic cell subset and use thereof | |
| EP1019546B1 (en) | Methods for measurement of lymphocyte function | |
| Chittur et al. | Shear stress effects on human T cell function | |
| Ingram et al. | Rapid detection of Legionella pneumophila by flow cytometry | |
| CN107904278B (zh) | 检测药物对细胞增殖影响的方法 | |
| CN111879684B (zh) | 一种基于流式细胞术的吞噬细胞功能检测方法 | |
| CN103424294B (zh) | 一种检测猪外周血和脾脏淋巴细胞膜表面分子的样品制备试剂盒及其制备方法 | |
| CN116832062A (zh) | 一种小分子抑制剂药物增强nk细胞抗肿瘤作用的用途及其应用 | |
| JP6182574B2 (ja) | 分光法を使用した微生物の分離、キャラクタリゼーションおよび／または同定方法 | |
| CN111504886A (zh) | 一组分子在制备新冠肺炎辅助诊断试剂或试剂盒中的应用 | |
| CN114686601B (zh) | 一种用于检测中华绒螯蟹血蓝蛋白基因表达的特异性探针及应用 | |
| Thewessen et al. | Comparison of HeLa 229 and McCoy cell cultures for detection of Chlamydia trachomatis in clinical specimens | |
| JP4683604B2 (ja) | 内部精度管理法 | |
| Libertin et al. | Analysis of Pneumocystis carinii cysts with a fluorescence-activated cell sorter | |
| Korangath et al. | Magnet-assisted Flow Cytometry of in vivo Tumors to Quantitate Cell-specific Responses to Magnetic Iron Oxide Nanoparticles | |
| CN204989188U (zh) | 评价机体免疫能力试剂盒 | |
| CN111537733A (zh) | Ccr1在作为copd诊断标志物中的应用 | |
| CN107782656A (zh) | 用于检测nk细胞活性的试剂盒 | |
| CN114410805B (zh) | 一种用于检测中华绒螯蟹酚氧化酶原基因表达的特异性探针及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |