CN111870612A - 杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途 - Google Patents

杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途 Download PDF

Info

Publication number
CN111870612A
CN111870612A CN202010931745.5A CN202010931745A CN111870612A CN 111870612 A CN111870612 A CN 111870612A CN 202010931745 A CN202010931745 A CN 202010931745A CN 111870612 A CN111870612 A CN 111870612A
Authority
CN
China
Prior art keywords
glycosides
eucommia ulmoides
allergic asthma
pharmaceutical composition
eucommia
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010931745.5A
Other languages
English (en)
Inventor
陈曦
王冰瑶
郝健磊
李阳
张坚
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tianjin University of Traditional Chinese Medicine
Original Assignee
Tianjin University of Traditional Chinese Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tianjin University of Traditional Chinese Medicine filed Critical Tianjin University of Traditional Chinese Medicine
Priority to CN202010931745.5A priority Critical patent/CN111870612A/zh
Publication of CN111870612A publication Critical patent/CN111870612A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明属于生物技术领域，公开了杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途；本发明通过实施例证明杜仲苷调控调节性T细胞的分化，治疗过敏性哮喘，并且杜仲苷由中药杜仲分离纯化而成，无毒副作用，因此杜仲苷可以应用于制备治疗过敏性哮喘的药物组合物。

Description

杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途
技术领域
本发明属于医药技术领域，涉及杜仲苷的新用途，特别涉及杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途。
背景技术
随着近年空气环境污染，以及气候过渡迅速等诱因，导致过敏性哮喘发病率增加。过敏性哮喘的发病机制研究较为完善，通过呼吸道接触的过敏原引起肺部局部过敏反应，从而对肺部进行攻击并导致过敏性哮喘；近年来，在过敏性哮喘治疗领域，治疗的方案以舒张气管或平滑肌进行平喘处理。临时处理，无法对肺部进行有效治疗。调节免疫应答的方式，降低哮喘发病几率以及恢复肺部性状的方式可以有效的治疗过敏性哮喘。
辅助性T细胞是一种T细胞，它的表面有抗原接受器，可以辨识抗原呈献细胞的MHCClass II 分子呈献的抗原片段，其在免疫反应中扮演中间过程的角色：它可以增生扩散来激活其它类型的产生直接免疫反应的免疫细胞。辅助性T细胞包括Th1和Th2，Th1分泌IL-2，IL-3，TNF-α,IN-γ细胞因子，Th2分泌IL-3,IL-4,IL-5,IL-13细胞因子，研究表明Th1/Th2分化平衡失调是导致过敏性哮喘的主要原因之一，在正常状态下，这两者保持平衡，在超敏反应情况发生时，Th2亚群过分表达，会导致体内Th2家族细胞因子过度上调，从而引发IgE表达上升。
杜仲是中药常用药物之一，其味甘，性温，有补益肝肾、强筋壮骨、调理冲任、固经安胎的功效，可治疗肾阳虚引起的腰腿痛或酸软无力，肝气虚引起的胞胎不固，阴囊湿痒等症。在《神农本草经》中被列为上品，其成分杜仲苷在调节免疫应答中具有显著作用，尤其对于其抑制Th2细胞的效果，现有研究中并不多。
发明内容
本发明提供一种杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途，杜仲苷能够抑制Th2细胞分化，实现治疗过敏性哮喘。
本发明所解决的技术问题采用以下技术方案来实现：
一种用于治疗过敏性哮喘的药物组合物，包括杜仲苷；
所述杜仲苷由中药杜仲分离纯化而成；
所述杜仲苷的结构式如下（1）：
Figure 509136DEST_PATH_IMAGE001
（1）；
所述杜仲苷以单体形式提供或者以包含杜仲苷的植物提取物形式提供；
所述药物组合物还包含任选的药学可接受的载体和/或赋形剂；
所述药物组合物配制为散剂、片剂、胶囊剂、丸剂、滴丸剂、注射剂、乳剂、混悬剂或酊剂中的任意一种剂型；
杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途；
所述杜仲苷调控调节性T细胞的分化，治疗过敏性哮喘；
所述杜仲苷增强IL-10表达水平，抑制抑制Th2分化。
本发明的有益效果为：
（1）杜仲苷抑制抑制IL-4的表达水平，从而抑制Th2的分化作用，进而抑制过敏反应；
（2）杜仲苷促进自然调节性T细胞（nTreg）向适应性调节性T细胞（iTreg）转化，并高表达IL-10从而实现抑制Th2分化的作用。
附图说明
图1为加入杜仲苷后，流式细胞仪检测Th2分化作用效果对照图；
图2为加入杜仲苷后，表达IL-10的效果对照图；
图3为加入杜仲苷后，正常组小鼠，造模组小鼠以及治疗组小鼠的肺部切片染色。
具体实施方式
一种用于治疗过敏性哮喘的药物组合物，包括杜仲苷；
所述杜仲苷由中药杜仲分离纯化而成；
所述杜仲苷的结构式如下（1）：
Figure 691856DEST_PATH_IMAGE001
（1）；
所述杜仲苷以单体形式提供或者以包含杜仲苷的植物提取物形式提供；
所述药物组合物还包含任选的药学可接受的载体和/或赋形剂；
所述药物组合物配制为散剂、片剂、胶囊剂、丸剂、滴丸剂、注射剂、乳剂、混悬剂或酊剂中的任意一种剂型；
杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途；
所述杜仲苷调控调节性T细胞的分化，治疗过敏性哮喘；
所述杜仲苷增强IL-10表达水平，抑制抑制Th2分化。
实施例一：细胞水平验证杜仲苷具有抗过敏哮喘的活性
实验材料：8周雄性C57小鼠（购自维通利华公司）、anti-mouse CD3、anti-mouse CD28、anti-mouse IFN-γ 、golgi stop（BD）、IL-2、IL-4（R&D）、PE-anti-mouse CD4、APC-anti-mouse IL-4（BD）、丙二醇甲醚醋酸酯（PMA）、钙离子霉素（ionomycin）、（购自sigma公司）、胎牛血清、1640培养基（Gibco）、杜仲苷（sigma）；
实验内容：
1、脾单细胞悬液制备：处死小鼠，取脾，采用200目滤网破碎组织，收集细胞于1640培养液中，1400 r/min离心弃上清，使用红细胞裂解液去除红细胞，收集裂解后细胞加入10%胎牛血清1640培养液备用；
2、使用anti-mouse CD3（10μg/mL）包板过夜；
3、使用anti-mouse CD28（1μg/mL）和IL-2（2ng/mL）、IL-4（20ng/mL）刺激细胞。细胞培养体系为10%血清的1640培养液。在刺激细胞同时设置对照组和加药组进行对比。培养条件为37℃，5%CO2培养48小时，更换新鲜的10%血清培养液，休息24小时后，使用PMA（50ng/mL）和Ionomycin（1mg/mL）再刺激6小时；
4、收集细胞后PE-anti-mouse CD4胞外标记Th细胞，使用4%多聚甲醛（sigma）固定、打孔细胞，APC-anti-mouse IL-4进行胞内染色。流式细胞仪检测并记录；
实验结果：
IL-4是Th2细胞分化标志细胞因子，在Th细胞向Th2方向分化过程中，会产生IL-4并刺激更多T细胞分化成Th2细胞；并在分化同时分泌IL-5及IL-13等细胞因子，并且诱使B细胞表达IgE，加速过敏反应；因此，阻止Th2细胞分化可以有效阻止过敏反应的应答。在诱导Th2细胞分化过程中加入杜仲苷，流式细胞仪检测对T细胞分化程度的影响。
如图1所示，在加入杜仲苷100nM后，IL-4表达水平明显下降，体现出化合物抑制Th2分化作用，因此，推断化合物具有抑制Th2分化从而抑制过敏反应的效果。体现出化合物具有过敏性哮喘免疫干预治疗的作用。
实施例二：杜仲苷促进应性调节性T细胞（iTreg）分化
实验材料：8周雄性C57小鼠（购自维通利华公司）、anti-mouse CD3、anti-mouse CD28、anti-mouse IFN-γ 、golgi stop（BD）、IL-2、IL-4（R&D）、PE-anti-mouse CD4、APC-anti-mouse IL-4（BD）、丙二醇甲醚醋酸酯（PMA）、钙离子霉素（ionomycin）（购自sigma公司）、胎牛血清、1640培养基（Gibco）、杜仲苷（sigma）；
实验内容：
1、脾单细胞悬液制备：处死小鼠，取脾，采用200目滤网破碎组织，收集细胞于1640培养液中，1400 r/min离心弃上清，使用红细胞裂解液去除红细胞，收集裂解后细胞加入10%胎牛血清1640培养液备用；
2、使用anti-mouse CD3（10μg/mL）包板过夜；
3、使用anti-mouse CD28（1μg/mL）和IL-2（2ng/mL）刺激细胞。细胞培养体系为10%血清的1640培养液。在刺激细胞同时设置对照组和加药组进行对比。培养条件为37℃，5%CO2培养48小时，更换新鲜的10%血清培养液，休息24小时后，使用PMA（50ng/mL）和Ionomycin（1mg/mL）再刺激6小时；
4、收集细胞后PE-anti-mouse CD4胞外标记Th细胞的同时使用FITC-anti-mouse CD25标记，使用4%多聚甲醛（sigma）固定、打孔细胞，APC-anti-mouse IL-10以及PerC-anti-mouse Foxp3进行胞内染色。流式细胞仪检测并记录；
实验结果：
通过实施例1发现杜仲苷在Th2分化过程中具有抑制效果，因此推测杜仲苷具有免疫抑制的作用，针对这一特点，进一步验证杜仲苷对调节性T细胞（Treg）的影响。在没有定向刺激的情况下，杜仲苷对Treg中自然调节性T细胞（n Treg）及适应性调节性T细胞（i Treg）亚群分化的影响，实验过程采用的杜仲苷浓度为100nM；
如图2所示，所述杜仲苷对自然调节性T细胞（n Treg）及适应性调节性T细胞（i Treg）亚群分化的影响。发现杜仲苷会促进自然调节性T细胞（n Treg）向适应性调节性T细胞（iTreg）转化，通过提高表达IL-10水平从而实现抑制Th2分化的作用。
实施例三：动物水平验证杜仲苷具有抗过敏哮喘的活性
实验材料：8周雄性C57小鼠（购自维通利华公司）、OVA、聚乙二醇400、铝佐剂（购自sigma公司）、异氟烷（购自索莱宝）；
试验内容：
30只小鼠进行随机分组，共分为3组，分别为对照组、模型组和治疗组，每组10只，模型组和治疗组均使用OVA和铝佐剂联用致小鼠对OVA产生体内抗体；再使用OVA灌肺刺激后，诱发小鼠过敏性哮喘；使用杜仲苷50g/kg剂量灌胃给药，持续7天，每天都使用等剂量OVA维持哮喘刺激水平，第8天处死小鼠，取肺，进行病理切片检测；
实验结果：
建立小鼠过敏性哮喘的疾病模型，并通过灌胃给药的方式，使用杜仲苷进行治疗，处死小鼠后，取小鼠肺部进行固定，石蜡包埋后，进行石蜡切片制备，将切片进行H&E染色，对比正常小鼠，造模小鼠以及治疗组的病理程度；
结果如图3所示，小鼠经诱导后，过敏性哮喘明显，肺部支气管出现明显气管壁增厚，细胞浸润增多，产生黏液；而经过杜仲苷治疗后，上述情况均得到改善，尤其气管有效扩张，与正常小鼠无明显差异；
综合实施例1至实施例3的实验，说明杜仲苷是通过对调节性T细胞的调控，大量表达调节性T细胞（iTreg）的方式对过敏性哮喘进行治疗。因此，杜仲苷可以通过免疫调控的作用对过敏性哮喘进行治疗。
如本文所用的，“药学上可接受的”表示当以通常用药剂量使用时没有实质的毒性作用，从而可被政府或与其相当的国际组织批准或者已被批准用于动物，更特别地用于人，或者被登录在药典上；
本发明药物组合物中可用的“药学上可接受的载体”可以是药物制剂领域中任何常规的载体，特定载体的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态；用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内；
例如，可以作为药学可接受的载体包括药学领域常规的溶剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、粘合剂、润滑剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂、和抗氧化剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。
在本发明中所述药物组合物还包含任选的药学可接受的载体和/或赋形剂，选自溶剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、粘合剂、润滑剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂和抗氧化剂；
在本发明实施方式中，所述药物组合物配制为散剂、片剂、胶囊剂、丸剂、滴丸剂、注射剂、乳剂、混悬剂或酊剂中的任意一种剂型。
以上对本发明的实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围，凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。

Claims (9)

1.一种用于治疗过敏性哮喘的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物包括杜仲苷。
2.根据权利要求1所述用于治疗过敏性哮喘的药物组合物，其特征在于：所述杜仲苷由中药杜仲分离纯化而成。
3.根据权利要求1所述用于治疗过敏性哮喘的药物组合物，其特征在于：所述杜仲苷的结构式如下（1）：
Figure DEST_PATH_IMAGE002
（1）。
4.根据权利要求2所述用于治疗过敏性哮喘的药物组合物，其特征在于：所述杜仲苷以单体形式提供或者以包含杜仲苷的植物提取物形式提供。
5.根据权利要求2所述用于治疗过敏性哮喘的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物还包含任选的药学可接受的载体和/或赋形剂。
6.根据权利要求2所述用于治疗过敏性哮喘的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物配制为散剂、片剂、胶囊剂、丸剂、滴丸剂、注射剂、乳剂、混悬剂或酊剂中的任意一种剂型。
7.杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述杜仲苷调控调节性T细胞的分化，治疗过敏性哮喘。
9.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述杜仲苷增强IL-10表达水平，抑制抑制Th2分化。
CN202010931745.5A 2020-09-08 2020-09-08 杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途 Pending CN111870612A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010931745.5A CN111870612A (zh) 2020-09-08 2020-09-08 杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010931745.5A CN111870612A (zh) 2020-09-08 2020-09-08 杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111870612A true CN111870612A (zh) 2020-11-03

Family

ID=73199082

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010931745.5A Pending CN111870612A (zh) 2020-09-08 2020-09-08 杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111870612A (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012020945A (ja) * 2010-07-13 2012-02-02 Kobayashi Pharmaceutical Co Ltd 胆汁酸分泌促進剤
CN104490908A (zh) * 2014-11-28 2015-04-08 普正药业股份有限公司 一种源自杜仲的药物组合物及其用途
CN108066353A (zh) * 2018-02-10 2018-05-25 吉林大学 一种对过敏性哮喘有抑制作用的芸香柚皮苷

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012020945A (ja) * 2010-07-13 2012-02-02 Kobayashi Pharmaceutical Co Ltd 胆汁酸分泌促進剤
CN104490908A (zh) * 2014-11-28 2015-04-08 普正药业股份有限公司 一种源自杜仲的药物组合物及其用途
CN108066353A (zh) * 2018-02-10 2018-05-25 吉林大学 一种对过敏性哮喘有抑制作用的芸香柚皮苷

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SHIN N.R. ET AL: "Scrophularia buergeriana attenuates allergic inflammation by reducing NF-κB activation", 《PHYTOMEDICINE》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106163533B (zh) 免疫平衡调节剂
Wu et al. Microbiota regulates the TLR7 signaling pathway against respiratory tract influenza A virus infection
US20230113539A1 (en) Traditional Chinese medicine for dispersing lung qi and detoxicating
US20150265664A1 (en) Traditional chinese medicine combination for regulating immune function and preparation method therefor
TWI495477B (zh) 治療肝炎病毒感染的組合物及方法
US7820175B2 (en) Herbal therapy for the treatment of food allergy
CN103550244B (zh) 一种具有协同增强体液和细胞免疫作用的中药复合多糖及应用
WO2018090983A1 (zh) 改善肠道菌群的皂苷类化合物、制备方法及其应用
CN112007163B (zh) 用于治疗非洲猪瘟的药物组合物及其用途
CN112933104A (zh) 核苷酸的新用途
CN105833267A (zh) 一种副猪嗜血杆菌病灭活疫苗新佐剂的制备方法
CN106474162A (zh) 凝结芽孢杆菌在制备预防或治疗抑郁症制剂中的应用
Noureen et al. Natural Immunity Boosters as Therapeutic Interventions in the Era of the COVID-19 Pandemic
JP3269890B2 (ja) ワクチンの効果増強剤及び効果増強食品
CN107854495A (zh) 凝结芽孢杆菌在制备降低血尿酸制剂中的应用
CN111870612A (zh) 杜仲苷在制备过敏性哮喘免疫治疗药物中的新用途
Liang et al. Gu-Ben-Fang-Xiao attenuates allergic airway inflammation by inhibiting BAFF-mediated B cell activation
TWI359669B (zh)
TWI239244B (en) Method for inhibiting cancer growth, reducing infection and promoting general health with a fermented soy extract
CN111195298B (zh) 一种调节肠道菌群和防治食物过敏的组合物及其制备方法
CN109078055B (zh) 异阿魏酸、含异阿魏酸中药提取物及升麻的用途
CN103710264B (zh) 一种灵芝孢子的破壁辅助添加剂
US20080102140A1 (en) Use of solidago virgaurea in the treatment and prevention of viral infections
CN101185668A (zh) 一种新的防治艾滋病及保肝解毒制剂
KR102568093B1 (ko) 비피도박테리움 롱검을 유효성분으로 포함하는 알레르기 질환의 예방 또는 치료용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20201103