CN111848598A

CN111848598A - 一种含杂环的化合物、其应用及含其的组合物

Info

Publication number: CN111848598A
Application number: CN202010338739.9A
Authority: CN
Inventors: 傅新元; 卢涔宾; 刘新宇; 陆费成晨; 周轶
Original assignee: Jianaisi Biomedical Co ltd
Current assignee: Jianaisi Biomedical Co ltd
Priority date: 2019-04-26
Filing date: 2020-04-26
Publication date: 2020-10-30

Abstract

本发明公开了一种含杂环的化合物、其应用及含其的组合物。本发明提供了一种如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐。该类化合物的结构新颖，具有较佳的STAT5抑制活性。

Description

一种含杂环的化合物、其应用及含其的组合物

技术领域

本发明涉及一种含杂环的化合物、其应用及含其的组合物。

背景技术

类风湿关节炎是一种以关节滑膜炎症为特征的慢性全身性自身免疫性疾病。其发病率约占总成人的1％。其主要表现为对称性多发性反复发作性关节炎，手足小关节最易受累。早期或急性发病关节多呈红，肿，热，痛和活动障碍；晚期可导致关节破坏，僵直、畸形及功能丧失，并有骨质疏松和骨骼肌萎縮。在整个病程中，可伴有发热，贫血，体重减轻，血管炎和皮下结节等病变，亦可累及全身多个器官，是一种致残率很高的疾病，并显著提高病人的死亡率。现代医学对类风湿关节炎的发病机制尚不完全清楚，目前也没有完全治愈的疗法，在世界范围内对病人造成沉重的健康和财务负担。

过去二十年中，人们对关节炎发病机理有了更深的理解，认为免疫细胞的过度活化以及炎症细胞因子增高导致了在关节和其他部位的病症，在其治疗上取得了一些长足的进步，研发生产了一系列对抗风湿因子的药物，包括甲氨蝶呤、肿瘤坏死因子(TNFα)抗体、白介素(IL)1、白介素-6抗体以及JAK詹纳斯激酶抑制剂。

这些抗风湿药物能在一定程度上控制疾病进展，改善病人生活状态。然而，其持续效果并不理想，而且只对少数病人有效，并伴随着不同严重程度的副作用。例如甲氨蝶呤作为抗癌药物，其本身有显著非特异细胞毒性，对胃肠道和肝肾器官伤害很大，由于药效不足或不良反应太强，大约一半的病人会在开始治疗一年内停药。抗TNFα抗体只针对30-40％病人有效，也伴随着随机感染和癌症风险，并有报道指出会增加患多发性硬化症的可能，而且长期使用后体内产生中和抗体，导致疗效丧失[Ann Rheum Dis.2014Mar；73(3):529-35]。我们急需找到新的疾病发病机制并研发针对性的更优产品。

风湿性关节炎发病机制表现出严重失调的先天和适应性免疫反应，从而导致慢性炎症。辅助型T细胞在关节炎发病起始和发展阶段都起到至关重要的作用。当其功能失调时，T淋巴细胞的持续活化以及不正常增殖，同时导致关节组织的成纤维细胞也相应增生，造成了关节炎的表观病症。JAK-STAT通路在调控T细胞以及其他免疫细胞方面有重要的功能。其中STAT5因子对多种T细胞亚型的发育和成熟都起关键作用。

近期我们团队发现了一种新的辅助T细胞，命名为Th-GM。这种细胞对很多炎症疾病都起推动作用，是炎症发病的新机制。Th-GM细胞的特征是具有白介素7所激活的STAT5信号通路，并导致下游集落刺激因子(GM-CSF)和白介素3的高表达。同时，RNA测序实验发现Th-GM细胞表现出独特的基因表达谱，与已经确立的Th-1和Th-17两类辅助T细胞迥然不同。遗传学实验也证明通过敲除STAT5基因，能够显著降低小鼠多发性硬化症的神经系统炎症，以及关节炎的严重程度(参考文献CN107002037A、PCT/US2018/031217)。由于STAT5对于Th-GM细胞的关键调控作用，也不排除在其他炎症细胞中的作用，我们认为STAT5抑制剂将是非常有前途的治疗关节炎的候选药物。

在此专利中，我们阐明了一系列新型STAT5抑制剂的设计合成以及治疗风湿性关节炎的验证证据。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是现有的STAT5抑制剂的结构较为单一的缺陷，为此，本发明提供了一种含杂环的化合物、其应用及含其的组合物，该类化合物的结构新颖，具有较佳的STAT5抑制活性。

本发明提供了一种如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐；

其中，W为下述任一基团：

(1)

中的

为单键或双键；

当

中的

为单键时，Y¹为C(＝O)、O、NH、N-OH、或、N-R³，R³为CH₂COOH或C₁-C₄烷基，Y²为C(＝N-CO-Ph)、C(＝N-CO-CH₃)、NH、S(＝O)₂、C＝O或C＝S；

当

中的

为双键时，Y¹为N，Y²为C-NH₂、C-NH-CN或C-O-CH₃；

Y³为N或CH；

X¹为N或CR²，X²为N或CR⁴，X³为N或CR⁵，X⁴为N或CR⁶；

R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-R^2-1、-NH-S(＝O)₂-R^2-2、-S(＝O)₂-NR^2-3R^2-4、-C(＝O)-R^2-5、-NH-C(＝O)-R^2-6、或、-C(＝O)-NR^2-7R^2-8；

R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为氢、C₁-C₄烷基、或、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基；

(2)

Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-或NH；

Y⁵为N或C-R⁷，R⁷为卤素；

X⁵为N或CR⁸，X⁶为N或CR⁹，X⁷为N或CR¹⁰，X⁸为N或CR¹¹；

R⁸、R⁹、R¹⁰和R¹¹独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NH₂、或、-C(＝O)-NH₂；

(3)

Y⁶为N-C(＝O)-CH₃、CH₂或NH；

Y⁷为NH、CH₂、C(＝O)、C(＝S)或C(＝N-OH)；

Y⁸为CH₂、CH₂CH₂、CH(CH₃)或C(＝O)；

Y⁹为N或CH；

X⁹为N或CR¹²，X¹⁰为N或CR¹³，X¹¹为N或CR¹⁴，X¹²为N或CR¹⁵；

R¹²、R¹³、R¹⁴和R¹⁵独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NH₂、或、-C(＝O)-NH₂；

(4)

Y¹⁰为NH；

Y¹¹为C(＝O)；

Y¹²为N或CH；

Y¹³为CH₂；

X¹³为N或CR¹⁶，X¹⁴为N或CR¹⁷，X¹⁵为N或CR¹⁸，X¹⁶为N或CR¹⁹；

R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸和R¹⁹独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NH₂、或、-C(＝O)-NH₂；

(5)

Y¹⁴为NH；

Y¹⁵为C(＝O)；

Y¹⁶为N或CH；

X¹⁷为N或CR²⁰，X¹⁸为N或CR²¹，X¹⁹为N或CR²²；

R²⁰、R²¹和R²²独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NH₂、或、-C(＝O)-NH₂；

(6)

Y¹⁷为NH；

X²⁰为N或CR²³，X²¹为N或CR²⁴，X²²为N或CR²⁵，X²³为N或CR²⁶；

R²³、R²⁴、R²⁵和R²⁶独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NH₂、或、-C(＝O)-NH₂；

(7)

Y¹⁸为NH或CH₂；

Y¹⁹为C(＝O)或NH；

Y²⁰为CH₂或C(＝O)；

X²⁴为N或CR²⁷，X²⁵为N或CR²⁸，X²⁶为N或CR²⁹；

R²⁷、R²⁸和R²⁹独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NH₂、或、-C(＝O)-NH₂；

(8)

Y²¹为C(＝O)；

Y²²为NH；

Y²³为CH₂或C(＝O)；

Y²⁴为N-R³⁰，R³⁰为氢或苯基；

(9)

Y²⁵为NH；

Y²⁶为C(＝O)；

Y²⁷为单键、O或NH；

X²⁷为N或CR³¹，X²⁸为N或CR³²，X²⁹为N或CR³³，X³⁰为N或CR³⁴；

R³¹、R³²、R³³和R³⁴独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NH₂、或、-C(＝O)-NH₂；

(10)

Y²⁸为NH；

Y²⁹为C(＝O)；

Y³⁰为CH或N；

(11)

Y³¹为O、NH或N-C(＝O)-CH₃；

Y³²为CH或N；

X³¹为N或CR³⁵，X³²为N或CR³⁶，X³³为N或CR³⁷，X³⁴为N或CR³⁸；

R³⁵、R³⁶、R³⁷和R³⁸独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NH₂、或、-C(＝O)-NH₂；

(12)

Y³³为NH；

Y³⁴为C(＝O)；

Y³⁵为CH或N；

X³⁵为N或CR³⁹，X³⁶为N或CR⁴⁰，X³⁷为N或CR⁴¹，X³⁸为N或CR⁴²；

R³⁹、R⁴⁰、R⁴¹和R⁴²独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NH₂、或、-C(＝O)-NH₂；

(13)

Y³⁶为NH；

Y³⁷为C(＝O)；

Y³⁸为CH或N；

X³⁹为N或CR⁴³，X⁴⁰为N或CR⁴⁴，X⁴¹为N或CR⁴⁵，X⁴²为N或CR⁴⁶；

R⁴³、R⁴⁴、R⁴⁵和R⁴⁶独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NH₂、或、-C(＝O)-NH₂；

(14)

Y³⁹为NH；

Y⁴⁰为C(＝O)；

Y⁴¹为CH或N；

X⁴³为N或CR⁴⁷，X⁴⁴为N或CR⁴⁸，X⁴⁵为N或CR⁴⁹，X⁴⁶为N或CR⁵⁰；

R⁴⁷、R⁴⁸、R⁴⁹和R⁵⁰独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NH₂、或、-C(＝O)-NH₂；

和，(15)

Z为下述任一片段：

(1)

m为1或2，n为1、2或3；

(2)

u为1或2，t为1或2；

(3)

(4)

p为1或2，q为1或2；

(5)

a2为1或2，b2为1或2；

(6)

a3为1或2，b3为1或2；

(7)

(8)-C(＝O)-；

(9)

R¹为C₂-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₂-C₄烷基、-(CH₂)_s-R^1-1、-NH-R^1-2、

s为0、1或2；

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为C₇-C₁₀环烷基、一个或多个R^1-1-3取代的C₃-C₆环烷基、一个或多个R^1-1-6取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”、一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基、萘基、

“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5或10元杂芳基”、吡啶基、

或、一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”；

R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为羧基、羟基、卤素、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”、-N(R^1-1-1-1)(R^1-1-1-2)、或、苯基；

R^1-1-1-1和R^1-1-1-2独立地为氢或C₁-C₄烷基；

R^1-1-7、R^1-1-8、和、R^1-1-9独立地为C₁-C₄烷基；

R^1-1-10独立地为C₁-C₄烷氧基；

R^1-1-11和R^1-1-12独立地为氢或卤素。

在某一方案中，所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐里，所述的如式XII所示的化合物为如式II所示的化合物；

其中，

中的

为单键或双键；

当

中的

为单键时，Y¹为NH、或、N-OH，Y²为C＝O；

当

中的

为双键时，Y¹为N，Y²为C-NH₂、C-NH-CN或C-O-CH₃；

Y³为N；

X¹为CR²，X²为CR⁴，X³为CR⁵，X⁴为CR⁶；

R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、-S(＝O)₂-R^2-1、-NH-S(＝O)₂-R² ^-2、-S(＝O)₂-NR^2-3R^2-4、-C(＝O)-R^2-5、-NH-C(＝O)-R^2-6、或、-C(＝O)-NR^2-7R^2-8；

R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为C₁-C₄烷基、或、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基；

Z为

m为1或2，n为1或2；u为1或2，t为1或2；

R¹为-(CH₂)_s-R^1-1；s为0、1或2；

R^1-1为C₆-C₁₀芳基、一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”、或、一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”；

R^1-1-1和R^1-1-2独立地为C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₃-C₆环烷基、或、苯基。

在某一方案中，所述的如式II所示的化合物或其药学上可接受的盐里，某些基团的定义可如下所述，其余基团的定义如上任一方案所述：

当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为叔丁基。

当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个为2个或3个。

当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的卤素为氟。

当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基。

当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个卤素取代的C₁-C₄烷基为三氟甲基。

当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为C₁-C₄烷氧基时，所述的C₁-C₄烷氧基为甲氧基。

当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为C₃-C₆环烷基时，所述的C₃-C₆环烷基为环丙基。

当R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基或叔丁基。

当R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个为2个或3个。

当R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的卤素为氟。

当R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基。

当R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个卤素取代的C₁-C₄烷基为三氟甲基。

当Z为

时，所述的m为1，n为1。

当Z为

时，所述的m为2，n为2。

当Z为

时，所述的

为

其b端与R¹连接。

当Z为

时，所述的m为1，n为1，所述的

为

其b端与R¹连接。

当Z为

时，所述的m为2，n为2，所述的

为

其b端与R¹连接。

当Z为

时，所述的u为1，t为1。

当Z为时，所述的u为2，t为2。

当Z为

时，所述的

为

其f端与R¹连接；

又可为

其f端与R¹连接。

当Z为

时，所述的

为

其f端与R¹连接，所述的u为1，t为1；

又可为

其f端与R¹连接，所述的u为1，t为1。

当Z为

时，所述的

为

其f端与R¹连接，所述的u为2，t为2；

又可为

其f端与R¹连接，所述的u为2，t为2。

当Z为

时，所述的

为

其d端与R¹连接。

当Z为

时，所述的

为

其w端与R¹连接。

当R^1-1为C₆-C₁₀芳基时，所述的C₆-C₁₀芳基为苯基或萘基。

当R^1-1为一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基时，所述的C₆-C₁₀芳基为苯基或萘基。

当R^1-1为一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基、所述的C₆-C₁₀芳基为苯基时，所述的R^1-1-1与“所述的-(CH₂)_s-或-NH-”可互为邻位、间位或对位，还可互为对位。

当R^1-1为含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基时，所述的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基可为含1个选自N、O和S的5～6元杂芳基、吲哚基、异喹啉基或喹啉基，还可为含1个选自N、O和S的5～6元杂芳基。

所述的含1个选自N、O和S的5～6元杂芳基例如呋喃基、噻吩基或吡啶基。

当R^1-1为一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”时，所述的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基可为含1个选自N、O和S的5～6元杂芳基、吲哚基、异喹啉基或喹啉基，还可为含1个选自N、O和S的5～6元杂芳基。

当R^1-1为一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”、所述的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基为含1个选自N、O和S的5元杂芳基时，所述的R^1-1-2与“所述的-(CH₂)_s-或-NH-”可互为邻位或间位。

当R^1-1为一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”、所述的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基为含1个选自N、O和S的6元杂芳基时，所述的R^1-1-2与“所述的-(CH₂)_s-或-NH-”可互为邻位、间位或对位，还可互为对位。

当R^1-1-1和R^1-1-2独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基。

当R^1-1-1和R^1-1-2独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个为2个或3个。

当R^1-1-1和R^1-1-2独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的卤素为氟。

当R^1-1-1和R^1-1-2独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基或乙基。

当R^1-1-1和R^1-1-2独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个卤素取代的C₁-C₄烷基为三氟甲基。

当R^1-1-1和R^1-1-2独立地为C₃-C₆环烷基时，所述的C₃-C₆环烷基为环丙基。

为

R^1-1为萘基、一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的10元杂芳基”、或、一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”。

R^1-1为萘基。

R^1-1为一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基。

R^1-1为“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的10元杂芳基”、或、一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”。

中的

为单键。

中的

为单键，Y¹为NH、或、N-OH，Y²为C＝O。

中的

为单键，Y¹为NH，Y²为C＝O。

R²、R⁴、R⁵和R⁶中至少一个为卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₂-C₄烯基、C₂-C₄炔基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、-S(＝O)₂-R^2-1、-NH-S(＝O)₂-R^2-2、-S(＝O)₂-NR^2-3R^2-4、-C(＝O)-R^2-5、-NH-C(＝O)-R^2-6、或、-C(＝O)-NR^2-7R^2-8；R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为C₁-C₄烷基、或、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基，余者为氢。

R²、R⁴、R⁵和R⁶中的一个为卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₂-C₄烯基、C₂-C₄炔基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、-S(＝O)₂-R^2-1、-NH-S(＝O)₂-R^2-2、-S(＝O)₂-NR^2-3R^2-4、-C(＝O)-R^2-5、-NH-C(＝O)-R^2-6、或、-C(＝O)-NR^2-7R^2-8；R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为C₁-C₄烷基、或、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基，余者为氢。

R²、R⁴、R⁵和R⁶中的一个为氰基，余者为氢。

X¹为CH，X²为CH；R⁵和R⁶中的一个为卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₂-C₄烯基、C₂-C₄炔基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、-S(＝O)₂-R^2-1、-NH-S(＝O)₂-R^2-2、-S(＝O)₂-NR^2-3R^2-4、-C(＝O)-R^2-5、-NH-C(＝O)-R^2-6、或、-C(＝O)-NR^2-7R^2-8；R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为C₁-C₄烷基、或、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基，另一个为氢。

X¹为CH，X²为CH；R⁵和R⁶中的一个为氰基，另一个为氢。

s为1或2。

在某一方案中，所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐里，所述的如式XII所示的化合物为如式IV所示的化合物；

其中，Y⁴为

Z为

m为1或2，n为1或2；u为1或2，t为1或2；

R¹为-(CH₂)_s-R^1-1；s为0、1或2；

在某一方案中，所述的如式IV所示的化合物或其药学上可接受的盐里，某些基团的定义可如下所述，其余基团的定义如上任一方案所述：

当Z为

时，所述的m为1，n为1。

当Z为

时，所述的m为2，n为2。

当Z为

时，所述的

为

其b端与R¹连接。

当Z为

时，所述的m为1，n为1，所述的

为

其b端与R¹连接。

当Z为

时，所述的m为2，n为2，所述的

为

其b端与R¹连接。

当Z为

时，所述的u为1，t为1。

当Z为

时，所述的u为2，t为2。

当Z为

时，所述的

为

其f端与R¹连接；

又可为

其f端与R¹连接。

当Z为

时，所述的

为

其f端与R¹连接，所述的u为1，t为1；

又可为

其f端与R¹连接，所述的u为1，t为1。

当Z为

时，所述的

为

其f端与R¹连接，所述的u为2，t为2；

又可为

其f端与R¹连接，所述的u为2，t为2。

当Z为

时，所述的

为

其d端与R¹连接。

当Z为

时，所述的

为

其w端与R¹连接。

为

Y⁴为

Y⁴为

Y⁴为

Y⁴为

Y⁴为

s为1或2。

在某一方案中，所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐里，所述的如式XII所示的化合物为如式VI所示的化合物；

其中，R¹为-(CH₂)_s-R^1-1；s为0、1或2；

在某一方案中，所述的如式VI所示的化合物或其药学上可接受的盐里，某些基团的定义可如下所述，其余基团的定义如上任一方案所述：

s为1或2。

在某一方案中，所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐里，某些基团的定义可如下所述，其余基团的定义如上任一方案所述：

W为下述任一基团：

(1)

中的

为单键或双键；

当

中的

当

中的

为双键时，Y¹为N，Y²为C-NH₂或C-NH-CN；

Y³为N或CH；

X¹为N或CR²，X²为N或CR⁴，X³为N或CR⁵，X⁴为N或CR⁶；

R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NR^2-3R^2-4、或、-C(＝O)-NR^2-7R^2-8；

R^2-3、R^2-4、R^2-7和R^2-8独立地为氢；

(2)

Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-或NH；

Y⁵为N或C-R⁷，R⁷为卤素；

X⁵为CR⁸，X⁶为CR⁹，X⁷为CR¹⁰，X⁸为CR¹¹；

R⁸、R⁹、R¹⁰和R¹¹独立地为氢；

(3)

Y⁶为N-C(＝O)-CH₃、CH₂或NH；

Y⁷为NH、CH₂、C(＝O)、C(＝S)或C(＝N-OH)；

Y⁸为CH₂、CH₂CH₂、CH(CH₃)或C(＝O)；

Y⁹为N；

X⁹为CR¹²，X¹⁰为CR¹³，X¹¹为CR¹⁴，X¹²为CR¹⁵；

R¹²、R¹³、R¹⁴和R¹⁵独立地为氢、硝基、或、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基；

(4)

Y¹⁰为NH；

Y¹¹为C(＝O)；

Y¹²为N；

Y¹³为CH₂；

X¹³为CR¹⁶，X¹⁴为CR¹⁷，X¹⁵为CR¹⁸，X¹⁶为CR¹⁹；

R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸和R¹⁹独立地为氢；

(5)

Y¹⁴为NH；

Y¹⁵为C(＝O)；

Y¹⁶为N；

X¹⁷为CR²⁰，X¹⁸为CR²¹，X¹⁹为CR²²；

R²⁰、R²¹和R²²独立地为氢；

(6)

Y¹⁷为NH；

X²⁰为CR²³，X²¹为CR²⁴，X²²为CR²⁵，X²³为CR²⁶；

R²³、R²⁴、R²⁵和R²⁶独立地为氢；

(7)

Y¹⁸为NH或CH₂；

Y¹⁹为C(＝O)或NH；

Y²⁰为CH₂或C(＝O)；

X²⁴为CR²⁷，X²⁵为CR²⁸，X²⁶为CR²⁹；

R²⁷、R²⁸和R²⁹独立地为氢；

(8)

Y²¹为C(＝O)；

Y²²为NH；

Y²³为CH₂或C(＝O)；

Y²⁴为N-R³⁰，R³⁰为氢或苯基；

(9)

Y²⁵为NH；

Y²⁶为C(＝O)；

Y²⁷为单键、O或NH；

X²⁷为CR³¹，X²⁸为CR³²，X²⁹为CR³³，X³⁰为CR³⁴；

R³¹、R³²、R³³和R³⁴独立地为氢；

(10)

Y²⁸为NH；

Y²⁹为C(＝O)；

Y³⁰为N；

(11)

Y³¹为O、NH或N-C(＝O)-CH₃；

Y³²为N；

X³¹为CR³⁵，X³²为CR³⁶，X³³为CR³⁷，X³⁴为CR³⁸；

R³⁵、R³⁶、R³⁷和R³⁸独立地为氢；

(12)

Y³³为NH；

Y³⁴为C(＝O)；

Y³⁵为N；

X³⁵为CR³⁹，X³⁶为CR⁴⁰，X³⁷为CR⁴¹，X³⁸为CR⁴²；

R³⁹、R⁴⁰、R⁴¹和R⁴²独立地为氢；

(13)

Y³⁶为NH；

Y³⁷为C(＝O)；

Y³⁸为N；

X³⁹为CR⁴³，X⁴⁰为CR⁴⁴，X⁴¹为CR⁴⁵，X⁴²为CR⁴⁶；

R⁴³、R⁴⁴、R⁴⁵和R⁴⁶独立地为氢；

(14)

Y³⁹为NH；

Y⁴⁰为C(＝O)；

Y⁴¹为N；

X⁴³为CR⁴⁷，X⁴⁴为CR⁴⁸，X⁴⁵为CR⁴⁹，X⁴⁶为CR⁵⁰；

R⁴⁷、R⁴⁸、R⁴⁹和R⁵⁰独立地为氢；

和，(15)

W为下述任一基团：

(1)

中的

为单键或双键；

当

中的

为单键时，Y¹为NH、N-OH,Y²为C(＝N-CO-Ph)、C(＝N-CO-CH₃)、S(＝O)₂、C＝O或C＝S；

当

中的

为双键时，Y¹为N，Y²为C-NH₂或C-NH-CN；

Y³为N或CH；

X¹为N或CR²，X²为N或CR⁴，X³为N或CR⁵，X⁴为N或CR⁶；

R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为氢、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”、-S(＝O)₂-NR^2-3R^2-4、或、-C(＝O)-NR^2-7R^2-8；

R^2-3、R^2-4、R^2-7和R^2-8独立地为氢；

(2)

Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-或NH；

Y⁵为N或C-R⁷，R⁷为卤素；

X⁵为CR⁸，X⁶为CR⁹，X⁷为CR¹⁰，X⁸为CR¹¹；

R⁸、R⁹、R¹⁰和R¹¹独立地为氢；

(3)

Y⁶为N-C(＝O)-CH₃或NH；

Y⁷为C(＝O)、C(＝S)或C(＝N-OH)；

Y⁸为CH₂、或C(＝O)；

Y⁹为N；

X⁹为CR¹²，X¹⁰为CR¹³，X¹¹为CR¹⁴，X¹²为CR¹⁵；

(4)

Y¹⁰为NH；

Y¹¹为C(＝O)；

Y¹²为N；

Y¹³为CH₂；

X¹³为CR¹⁶，X¹⁴为CR¹⁷，X¹⁵为CR¹⁸，X¹⁶为CR¹⁹；

R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸和R¹⁹独立地为氢；

(5)

Y¹⁴为NH；

Y¹⁵为C(＝O)；

Y¹⁶为N；

X¹⁷为CR²⁰，X¹⁸为CR²¹，X¹⁹为CR²²；

R²⁰、R²¹和R²²独立地为氢；

(7)

Y¹⁸为NH或CH₂；

Y¹⁹为C(＝O)或NH；

Y²⁰为CH₂或C(＝O)；

X²⁴为CR²⁷，X²⁵为CR²⁸，X²⁶为CR²⁹；

R²⁷、R²⁸和R²⁹独立地为氢；

(8)

Y²¹为C(＝O)；

Y²²为NH；

Y²³为CH₂；

Y²⁴为N-R³⁰，R³⁰为苯基；

(9)

Y²⁵为NH；

Y²⁶为C(＝O)；

Y²⁷为单键、O或NH；

X²⁷为CR³¹，X²⁸为CR³²，X²⁹为CR³³，X³⁰为CR³⁴；

R³¹、R³²、R³³和R³⁴独立地为氢；

(11)

Y³¹为O、NH或N-C(＝O)-CH₃；

Y³²为N；

X³¹为CR³⁵，X³²为CR³⁶，X³³为CR³⁷，X³⁴为CR³⁸；

R³⁵、R³⁶、R³⁷和R³⁸独立地为氢；

(12)

Y³³为NH；

Y³⁴为C(＝O)；

Y³⁵为N；

X³⁵为CR³⁹，X³⁶为CR⁴⁰，X³⁷为CR⁴¹，X³⁸为CR⁴²；

R³⁹、R⁴⁰、R⁴¹和R⁴²独立地为氢；

(13)

Y³⁶为NH；

Y³⁷为C(＝O)；

Y³⁸为N；

R⁴³、R⁴⁴、R⁴⁵和R⁴⁶独立地为氢；

和，(14)

Y³⁹为NH；

Y⁴⁰为C(＝O)；

Y⁴¹为N；

R⁴⁷、R⁴⁸、R⁴⁹和R⁵⁰独立地为氢；

R¹为-(CH₂)_s-R^1-1、-NH-R^1-2、

s为0、1或2；

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-3取代的C₃-C₆环烷基、一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基、萘基、

R^1-1-1、R^1-1-2和R^1-1-3独立地为羧基、羟基、卤素、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”、-N(R^1-1-1-1)(R^1-1-1-2)、或、苯基；

R^1-1-1-1和R^1-1-1-2独立地为氢或C₁-C₄烷基；

R^1-1-7、R^1-1-8、和、R^1-1-9独立地为C₁-C₄烷基；

R^1-1-10独立地为C₁-C₄烷氧基；

R^1-1-11和R^1-1-12独立地为氢或卤素。

当W为

时，所述的Z为下述任一片段：

(1)

m为1或2，n为1、2或3；

(2)

u为1或2，t为1或2；

(3)

(4)

p为1或2，q为1或2；

(5)

a2为1或2，b2为1或2；

(6)

a3为1或2，b3为1或2；

(9)

当W为

时，所述的Z为

当W为

时，所述的Z为-C(＝O)-。

W为下述任一基团：

(1)

中的

为单键或双键；

当

中的

当

中的

为双键时，Y¹为N，Y²为C-NH₂或C-NH-CN；

Y³为N或CH；

X¹为N或CR²，X²为N或CR⁴，X³为N或CR⁵，X⁴为N或CR⁶；

R^2-3、R^2-4、R^2-7和R^2-8独立地为氢；

(2)

Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-或NH；

Y⁵为N或C-R⁷，R⁷为卤素；

X⁵为CR⁸，X⁶为CR⁹，X⁷为CR¹⁰，X⁸为CR¹¹；

R⁸、R⁹、R¹⁰和R¹¹独立地为氢；

(3)

Y⁶为N-C(＝O)-CH₃、CH₂或NH；

Y⁷为NH、CH₂、C(＝O)、C(＝S)或C(＝N-OH)；

Y⁸为CH₂、CH₂CH₂、CH(CH₃)或C(＝O)；

Y⁹为N；

X⁹为CR¹²，X¹⁰为CR¹³，X¹¹为CR¹⁴，X¹²为CR¹⁵；

(4)

Y¹⁰为NH；

Y¹¹为C(＝O)；

Y¹²为N；

Y¹³为CH₂；

X¹³为CR¹⁶，X¹⁴为CR¹⁷，X¹⁵为CR¹⁸，X¹⁶为CR¹⁹；

R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸和R¹⁹独立地为氢；

(5)

Y¹⁴为NH；

Y¹⁵为C(＝O)；

Y¹⁶为N；

X¹⁷为CR²⁰，X¹⁸为CR²¹，X¹⁹为CR²²；

R²⁰、R²¹和R²²独立地为氢；

(6)

Y¹⁷为NH；

X²⁰为CR²³，X²¹为CR²⁴，X²²为CR²⁵，X²³为CR²⁶；

R²³、R²⁴、R²⁵和R²⁶独立地为氢；

(7)

Y¹⁸为NH或CH₂；

Y¹⁹为C(＝O)或NH；

Y²⁰为CH₂或C(＝O)；

X²⁴为CR²⁷，X²⁵为CR²⁸，X²⁶为CR²⁹；

R²⁷、R²⁸和R²⁹独立地为氢；

(8)

Y²¹为C(＝O)；

Y²²为NH；

Y²³为CH₂或C(＝O)；

Y²⁴为N-R³⁰，R³⁰为氢或苯基；

(9)

Y²⁵为NH；

Y²⁶为C(＝O)；

Y²⁷为单键、O或NH；

X²⁷为CR³¹，X²⁸为CR³²，X²⁹为CR³³，X³⁰为CR³⁴；

R³¹、R³²、R³³和R³⁴独立地为氢；

(10)

Y²⁸为NH；

Y²⁹为C(＝O)；

Y³⁰为N；

(11)

Y³¹为O、NH或N-C(＝O)-CH₃；

Y³²为N；

X³¹为CR³⁵，X³²为CR³⁶，X³³为CR³⁷，X³⁴为CR³⁸；

R³⁵、R³⁶、R³⁷和R³⁸独立地为氢；

(12)

Y³³为NH；

Y³⁴为C(＝O)；

Y³⁵为N；

X³⁵为CR³⁹，X³⁶为CR⁴⁰，X³⁷为CR⁴¹，X³⁸为CR⁴²；

R³⁹、R⁴⁰、R⁴¹和R⁴²独立地为氢；

(13)

Y³⁶为NH；

Y³⁷为C(＝O)；

Y³⁸为N；

R⁴³、R⁴⁴、R⁴⁵和R⁴⁶独立地为氢；

(14)

Y³⁹为NH；

Y⁴⁰为C(＝O)；

Y⁴¹为N；

R⁴⁷、R⁴⁸、R⁴⁹和R⁵⁰独立地为氢；

和，(15)

Z为下述任一片段：

(1)

m为1或2，n为1、2或3；

(2)

u为1或2，t为1或2；

(3)

(4)

p为1或2，q为1或2；

(5)

a2为1或2，b2为1或2；

(6)

a3为1或2，b3为1或2；

(7)

(8)-C(＝O)-；

(9)

s为0、1或2；

R^1-1-1-1和R^1-1-1-2独立地为氢或C₁-C₄烷基；

R^1-1-7、R^1-1-8、和、R^1-1-9独立地为C₁-C₄烷基；

R^1-1-10独立地为C₁-C₄烷氧基；

R^1-1-11和R^1-1-12独立地为氢或卤素。

W为下述任一基团：

(1)

中的

为单键或双键；

当

中的

当

中的

为双键时，Y¹为N，Y²为C-NH₂或C-NH-CN；

Y³为N或CH；

X¹为N或CR²，X²为N或CR⁴，X³为N或CR⁵，X⁴为N或CR⁶；

R^2-3、R^2-4、R^2-7和R^2-8独立地为氢；

(2)

Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-或NH；

Y⁵为N或C-R⁷，R⁷为卤素；

X⁵为CR⁸，X⁶为CR⁹，X⁷为CR¹⁰，X⁸为CR¹¹；

R⁸、R⁹、R¹⁰和R¹¹独立地为氢；

(3)

Y⁶为N-C(＝O)-CH₃或NH；

Y⁷为C(＝O)、C(＝S)或C(＝N-OH)；

Y⁸为CH₂、或C(＝O)；

Y⁹为N；

X⁹为CR¹²，X¹⁰为CR¹³，X¹¹为CR¹⁴，X¹²为CR¹⁵；

(4)

Y¹⁰为NH；

Y¹¹为C(＝O)；

Y¹²为N；

Y¹³为CH₂；

X¹³为CR¹⁶，X¹⁴为CR¹⁷，X¹⁵为CR¹⁸，X¹⁶为CR¹⁹；

R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸和R¹⁹独立地为氢；

(5)

Y¹⁴为NH；

Y¹⁵为C(＝O)；

Y¹⁶为N；

X¹⁷为CR²⁰，X¹⁸为CR²¹，X¹⁹为CR²²；

R²⁰、R²¹和R²²独立地为氢；

(7)

Y¹⁸为NH或CH₂；

Y¹⁹为C(＝O)或NH；

Y²⁰为CH₂或C(＝O)；

X²⁴为CR²⁷，X²⁵为CR²⁸，X²⁶为CR²⁹；

R²⁷、R²⁸和R²⁹独立地为氢；

(8)

Y²¹为C(＝O)；

Y²²为NH；

Y²³为CH₂；

Y²⁴为N-R³⁰，R³⁰为苯基；

(9)

Y²⁵为NH；

Y²⁶为C(＝O)；

Y²⁷为单键、O或NH；

X²⁷为CR³¹，X²⁸为CR³²，X²⁹为CR³³，X³⁰为CR³⁴；

R³¹、R³²、R³³和R³⁴独立地为氢；

(11)

Y³¹为O、NH或N-C(＝O)-CH₃；

Y³²为N；

X³¹为CR³⁵，X³²为CR³⁶，X³³为CR³⁷，X³⁴为CR³⁸；

R³⁵、R³⁶、R³⁷和R³⁸独立地为氢；

(12)

Y³³为NH；

Y³⁴为C(＝O)；

Y³⁵为N；

X³⁵为CR³⁹，X³⁶为CR⁴⁰，X³⁷为CR⁴¹，X³⁸为CR⁴²；

R³⁹、R⁴⁰、R⁴¹和R⁴²独立地为氢；

(13)

Y³⁶为NH；

Y³⁷为C(＝O)；

Y³⁸为N；

R⁴³、R⁴⁴、R⁴⁵和R⁴⁶独立地为氢；

和，(14)

Y³⁹为NH；

Y⁴⁰为C(＝O)；

Y⁴¹为N；

R⁴⁷、R⁴⁸、R⁴⁹和R⁵⁰独立地为氢；

Z为下述任一片段：

(1)

m为1或2，n为1、2或3；

(2)

u为1或2，t为1或2；

(3)

或

(4)

p为1或2，q为1或2；

(5)

a2为1或2，b2为1或2；

(6)

a3为1或2，b3为1或2；

(7)

(8)-C(＝O)-；

(9)

R¹为-(CH₂)_s-R^1-1、-NH-R^1-2、

s为0、1或2；

R^1-1-1-1和R^1-1-1-2独立地为氢或C₁-C₄烷基；

R^1-1-7、R^1-1-8、和、R^1-1-9独立地为C₁-C₄烷基；

R^1-1-10独立地为C₁-C₄烷氧基；

R^1-1-11和R^1-1-12独立地为氢或卤素。

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-3取代的C₃-C₆环烷基、一个或多个R^1-1-6取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”、一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基、或、一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”；

R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为羧基、羟基、卤素、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”、-N(R^1-1-1-1)(R^1-1-1-2)、或、苯基。

R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为羧基。

R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为羟基。

R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为卤素。

R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为C₁-C₄烷基或一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基。

R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基。

R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为三氟甲基。

R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基。

R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为C₃-C₆环烷基或“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”。

R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为苯基。

R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为-N(R^1-1-1-1)(R^1-1-1-2)。

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为C₇-C₁₀环烷基。

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为萘基。

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5或10元杂芳基”。

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为吡啶基。

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为

W为

W为

Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-或NH；

Y⁵为N或C-R⁷，R⁷为卤素；

X⁵为CR⁸，X⁶为CR⁹，X⁷为CR¹⁰，X⁸为CR¹¹；

R⁸、R⁹、R¹⁰和R¹¹独立地为氢。

W为

W为

Y⁶为N-C(＝O)-CH₃、CH₂或NH；

Y⁷为NH、CH₂、C(＝O)、C(＝S)或C(＝N-OH)；

Y⁸为CH₂、CH₂CH₂、CH(CH₃)或C(＝O)；

Y⁹为N；

X⁹为CR¹²，X¹⁰为CR¹³，X¹¹为CR¹⁴，X¹²为CR¹⁵；

R¹²、R¹³、R¹⁴和R¹⁵独立地为氢、硝基、或、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基。

W为

W为

Y¹⁰为NH；

Y¹¹为C(＝O)；

Y¹²为N；

Y¹³为CH₂；

X¹³为CR¹⁶，X¹⁴为CR¹⁷，X¹⁵为CR¹⁸，X¹⁶为CR¹⁹；

R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸和R¹⁹独立地为氢。

W为

W为

Y¹⁴为NH；

Y¹⁵为C(＝O)；

Y¹⁶为N；

X¹⁷为CR²⁰，X¹⁸为CR²¹，X¹⁹为CR²²；

R²⁰、R²¹和R²²独立地为氢。

W为

W为

Y¹⁷为NH；

X²⁰为CR²³，X²¹为CR²⁴，X²²为CR²⁵，X²³为CR²⁶；

R²³、R²⁴、R²⁵和R²⁶独立地为氢。

W为

W为

Y¹⁸为NH或CH₂；

Y¹⁹为C(＝O)或NH；

Y²⁰为CH₂或C(＝O)；

X²⁴为CR²⁷，X²⁵为CR²⁸，X²⁶为CR²⁹；

R²⁷、R²⁸和R²⁹独立地为氢。

W为

W为

Y²¹为C(＝O)；

Y²²为NH；

Y²³为CH₂或C(＝O)；

Y²⁴为N-R³⁰，R³⁰为氢或苯基。

W为

W为

Y²⁵为NH；

Y²⁶为C(＝O)；

Y²⁷为单键、O或NH；

X²⁷为CR³¹，X²⁸为CR³²，X²⁹为CR³³，X³⁰为CR³⁴；

R³¹、R³²、R³³和R³⁴独立地为氢。

W为

W为

Y²⁸为NH；

Y²⁹为C(＝O)；

Y³⁰为N。

W为

W为

Y³¹为O、NH或N-C(＝O)-CH₃；

Y³²为N；

X³¹为CR³⁵，X³²为CR³⁶，X³³为CR³⁷，X³⁴为CR³⁸；

R³⁵、R³⁶、R³⁷和R³⁸独立地为氢。

W为

W为

Y³³为NH；

Y³⁴为C(＝O)；

Y³⁵为N；

X³⁵为CR³⁹，X³⁶为CR⁴⁰，X³⁷为CR⁴¹，X³⁸为CR⁴²；

R³⁹、R⁴⁰、R⁴¹和R⁴²独立地为氢。

W为

W为

Y³⁶为NH；

Y³⁷为C(＝O)；

Y³⁸为N；

R⁴³、R⁴⁴、R⁴⁵和R⁴⁶独立地为氢。

W为

W为

Y³⁹为NH；

Y⁴⁰为C(＝O)；

Y⁴¹为N；

R⁴⁷、R⁴⁸、R⁴⁹和R⁵⁰独立地为氢。

W为

W为下述任一基团：

(1)

中的

为单键，Y¹为C(＝O)、O、或、N-R³，R³为CH₂COOH或C₁-C₄烷基，Y²为C(＝N-CO-Ph)、C(＝N-CO-CH₃)、NH、S(＝O)₂或C＝S；

Y³为N或CH；

X¹为N或CR²，X²为N或CR⁴，X³为N或CR⁵，X⁴为N或CR⁶；

(2)

Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-或NH；

Y⁵为N或C-R⁷，R⁷为卤素；

X⁵为N或CR⁸，X⁶为N或CR⁹，X⁷为N或CR¹⁰，X⁸为N或CR¹¹；

(3)

Y⁶为N-C(＝O)-CH₃、CH₂或NH；

Y⁷为NH、CH₂、C(＝O)、C(＝S)或C(＝N-OH)；

Y⁸为CH₂、CH₂CH₂、CH(CH₃)或C(＝O)；

Y⁹为N或CH；

(4)

Y¹⁰为NH；

Y¹¹为C(＝O)；

Y¹²为N或CH；

Y¹³为CH₂；

(5)

Y¹⁴为NH；

Y¹⁵为C(＝O)；

Y¹⁶为N或CH；

X¹⁷为N或CR²⁰，X¹⁸为N或CR²¹，X¹⁹为N或CR²²；

(6)

Y¹⁷为NH；

(7)

Y¹⁸为NH或CH₂；

Y¹⁹为C(＝O)或NH；

Y²⁰为CH₂或C(＝O)；

X²⁴为N或CR²⁷，X²⁵为N或CR²⁸，X²⁶为N或CR²⁹；

(8)

Y²¹为C(＝O)；

Y²²为NH；

Y²³为CH₂或C(＝O)；

Y²⁴为N-R³⁰，R³⁰为氢或苯基；

(9)

Y²⁵为NH；

Y²⁶为C(＝O)；

Y²⁷为单键、O或NH；

(10)

Y²⁸为NH；

Y²⁹为C(＝O)；

Y³⁰为CH或N；

(11)

Y³¹为O、NH或N-C(＝O)-CH₃；

Y³²为CH或N；

(12)

Y³³为NH；

Y³⁴为C(＝O)；

Y³⁵为CH或N；

(13)

Y³⁶为NH；

Y³⁷为C(＝O)；

Y³⁸为CH或N；

(14)

Y³⁹为NH；

Y⁴⁰为C(＝O)；

Y⁴¹为CH或N；

和，(15)

Z为下述任一片段：

(1)

m为1或2，n为3；

(3)

(4)

p为1或2，q为1或2；

(5)

a2为1或2，b2为1或2；

(6)

a3为1或2，b3为1或2；

(7)

(8)-C(＝O)-；

(9)

R¹为-NH-R^1-2、

R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为C₇-C₁₀环烷基、一个或多个R^1-1-3取代的C₃-C₆环烷基、一个或多个R^1-1-6取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”、一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基、萘基、

R^1-1-1-1和R^1-1-1-2独立地为氢或C₁-C₄烷基；

R^1-1-7、R^1-1-8、和、R^1-1-9独立地为C₁-C₄烷基；

R^1-1-10独立地为C₁-C₄烷氧基；

R^1-1-11和R^1-1-12独立地为氢或卤素。

R¹为-(CH₂)_s-R^1-1；s为0、1或2；

R^1-1为C₇-C₁₀环烷基、一个或多个R^1-1-3取代的C₃-C₆环烷基、一个或多个R^1-1-6取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”、一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基、

R^1-1-1、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为羧基、羟基、卤素、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”、或、-N(R^1-1-1-1)(R^1-1-1-2)；

R^1-1-1-1和R^1-1-1-2独立地为氢或C₁-C₄烷基；

R^1-1-7、R^1-1-8、和、R^1-1-9独立地为C₁-C₄烷基；

R^1-1-10独立地为C₁-C₄烷氧基；

R^1-1-11和R^1-1-12独立地为氢或卤素。

在某一方案中，所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐里，所述的如式XII所示的化合物如存在旋光异构体，则可以以外消旋体的形式存在。

在某一方案中，所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐中的原子均以其天然丰度的形式存在。

当R³为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基。

当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为卤素时，所述的卤素为氟、氯或溴。

当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基或叔丁基。

当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”时，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”可为吗啉基，又可为吗啉-1-基。

当W为

时，

可为

当Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-时，-CH₂-端可与Y⁵连接。

当W为

时，所述的

可为

当W为

时，所述的

可为

当W为

时，所述的

可为

当W为

时，所述的

可为

当W为

时，所述的

可为

当Z为

时，所述的m为1，n为1。

当Z为

时，所述的m为2，n为2。

当Z为

时，所述的

为

其b端与R¹连接。

当Z为

时，所述的m为1，n为1，所述的

为

其b端与R¹连接。

当Z为

时，所述的m为2，n为2，所述的

为

其b端与R¹连接。

当Z为

时，所述的u为1，t为1。

当Z为

时，所述的u为2，t为2。

当Z为

时，所述的

为

其f端与R¹连接；

又可为

其f端与R¹连接。

当Z为

时，所述的

为

其f端与R¹连接，所述的u为1，t为1；

又可为

其f端与R¹连接，所述的u为1，t为1。

当Z为

时，所述的

为

其f端与R¹连接，所述的u为2，t为2；

又可为

其f端与R¹连接，所述的u为2，t为2。

当Z为

时，所述的羰基端可与R¹连接。

当Z为

时，所述的p为2，q为2。

当Z为

时，所述的

为

其L2端与R¹连接。

当Z为

时，所述的p为2，q为2，所述的

为

其L2端与R¹连接。

当Z为

时，所述的a2为2，b2为2。

当Z为

时，所述的

为

其L6端与R¹连接。

当Z为

时，所述的a2为2，b2为2，所述的

为

其L6端与R¹连接。

当Z为

时，所述的a3为2，b3为2。

当Z为

时，所述的

为

其L8端与R¹连接。

当Z为

时，所述的a3为2，b3为2，所述的

为

其L8端与R¹连接。

当Z为

时，所述的

为

其L4端与R¹连接。

当Z为

时，所述的

为

其d端与R¹连接。

当Z为

时，所述的

为

其w端与R¹连接。

当R¹为C₂-C₄烷基时，所述的C₂-C₄烷基为乙基。

当R¹为多个卤素取代的C₂-C₄烷基时，所述的多个为2个或3个。

当R¹为一个或多个卤素取代的C₂-C₄烷基时，所述的卤素为氟。

当R¹为一个或多个卤素取代的C₂-C₄烷基时，所述的C₂-C₄烷基为乙基。

当R¹为多个卤素取代的C₂-C₄烷基时，所述的多个卤素取代的C₂-C₄烷基为2,2,2-三氟乙基。

当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基时，所述的C₆-C₁₀芳基为苯基或萘基。

当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-1取代的苯基时，所述的R^1-1-1与“所述的-(CH₂)_s-、-NH-、

或羰基”可互为邻位、间位或对位，还可互为对位。

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为4-三氟甲基苯基。

当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-2取代的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基时，所述的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基可为含1个选自N、O和S的5～6元杂芳基、吲哚基、异喹啉基或喹啉基，还可为含1个选自N、O和S的5～6元杂芳基。

所述的含1个选自N、O和S的5～6元杂芳基例如呋喃基、噻吩基或吡啶基，又例如吡啶-2-基、吡啶-3-基或吡啶-4-基。

当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”、所述的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基为含1个选自N、O和S的5元杂芳基时，所述的R^1-1-2与“所述的-(CH₂)_s-、-NH-、

或羰基”可互为邻位或间位。

当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”、所述的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基为含1个N的6元杂芳基时，所述的R^1-1-2与“所述的-(CH₂)_s-、-NH-、

或羰基”可互为邻位、间位或对位，还可互为对位。

当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-2取代的吡啶基时，所述的R¹ ^-1-2与“所述的-(CH₂)_s-、-NH-、

或羰基”可互为邻位、间位或对位，还可互为对位。

当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-3取代的C₃-C₆环烷基时，所述的C₃-C₆环烷基例如环己基。

当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-6取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”时，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”例如哌啶基，又例如哌啶-1-基。

当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为C₇-C₁₀环烷基时，所述的C₇-C₁₀环烷基可为C₇-C₁₀桥环烷基，又可为金刚烷基。

当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为萘基时，所述的萘基可为萘-2-基。

当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为吡啶基时，所述的吡啶基可为吡啶-4-基。

当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5或10元杂芳基”时，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5或10元杂芳基”可为“含1个或2个独立选自N、O和S的10元杂芳基”，又可为喹啉基(例如

)、

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基。

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基或叔丁基。

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个为2个或3个。

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的卤素为氟。

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基或乙基。

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个卤素取代的C₁-C₄烷基为三氟甲基。

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为C₃-C₆环烷基时，所述的C₃-C₆环烷基为环丙基。

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为卤素时，所述的卤素为氟、氯或溴。

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基时，所述的多个为2个或3个。

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基时，所述的卤素为氟。

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基时，所述的C₁-C₄烷氧基为甲氧基或乙氧基。

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基时，所述的多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基为三氟甲氧基。

当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”可为吗啉基，又可为吗啉-1-基。

当R^1-1-1-1和R^1-1-1-2独立地为C₁-C₄烷基，所述的C₁-C₄烷基为甲基或乙基。

当R^1-1-7、R^1-1-8、和、R^1-1-9独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基或乙基。

当R^1-1-10独立地为C₁-C₄烷氧基时，所述的C₁-C₄烷氧基为甲氧基或乙氧基。

当R^1-1-11和R^1-1-12独立地为卤素时，所述的卤素为氟。

为

在某一方案中，所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐里，所述的如式XII所示的化合物为以下任一结构：

本发明还提供了一种药物组合物，其包含物质Y和药用辅料；

所述的物质Y为上述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐。

所述的药物组合物的剂型可以是口服剂型。

在所述的药物组合物中，所述的物质Y可为上述的如式II所示的化合物或其药学上可接受的盐、上述的如式IV所示的化合物或其药学上可接受的盐、或、上述的如式VI所示的化合物或其药学上可接受的盐。

本发明还提供了一种物质Y在制备STAT5抑制剂中的应用；

在所述的应用中，所述的物质Y可为上述的如式II所示的化合物或其药学上可接受的盐、上述的如式IV所示的化合物或其药学上可接受的盐、或、上述的如式VI所示的化合物或其药学上可接受的盐。

本发明还提供了一种物质Y在制备药物中的应用；

所述的物质Y为上述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐；

所述的药物为用于治疗和/或预防与STAT5有关的疾病的药物，或者，用于治疗和/或预防类风湿关节炎的药物。

如无特别说明，本发明所用术语具有如下含义：

术语“多个”是指2个、3个、4个或5个。

术语“药学上可接受的”是指盐、溶剂、辅料等一般无毒、安全，并且适合于患者使用。所述的“患者”优选哺乳动物，更优选为人类。

术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物与相对无毒的、药学上可接受的酸或碱制备得到的盐。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的药学上可接受的碱与这类化合物的中性形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括但不限于：锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、铝盐、镁盐、锌盐、铋盐、铵盐、二乙醇胺盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的药学上可接受的酸与这类化合物的中性形式接触的方式获得酸加成盐。所述的药学上可接受的酸包括无机酸，所述无机酸包括但不限于：盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、碳酸、磷酸、亚磷酸、硫酸等。所述的药学上可接受的酸包括有机酸，所述有机酸包括但不限于：乙酸、丙酸、草酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、水杨酸、酒石酸、甲磺酸、异烟酸、酸式柠檬酸、油酸、单宁酸、泛酸、酒石酸氢、抗坏血酸、龙胆酸、富马酸、葡糖酸、糖酸、甲酸、乙磺酸、双羟萘酸(即4,4’-亚甲基-双(3-羟基-2-萘甲酸))、氨基酸(例如谷氨酸、精氨酸)等。当本发明的化合物中含有相对酸性和相对碱性的官能团时，可以被转换成碱加成盐或酸加成盐。具体可参见Berge et al.,"Pharmaceutical Salts",Journal of Pharmaceutical Science 66:1-19(1977)、或、Handbook of PharmaceuticalSalts:Properties,Selection,and Use(P.Heinrich Stahl and Camille G.Wermuth,ed.,Wiley-VCH,2002)。

术语“化合物”和“药学上可接受的盐”可以以晶型或无定型的形式存在。术语“晶型”是指其中的离子或分子是按照一种确定的方式在三维空间作严格周期性排列，并具有间隔一定距离周期重复出现规律；因上述周期性排列的不同，可存在多种晶型，也即多晶型现象。术语“无定型”是指其中的离子或分子呈现杂乱无章的分布状态，即离子、分子间不具有周期性排列规律。

术语“化合物”和“药学上可接受的盐”如存在立体异构体，则可以以单一的立体异构体或它们的混合物(例如外消旋体)的形式存在。术语“立体异构体”是指顺反异构体或旋光异构体。这些立体异构体可以通过不对称合成方法或手性分离法(包括但不限于薄层色谱、旋转色谱、柱色谱、气相色谱、高压液相色谱等)分离、纯化及富集，还可以通过与其它手性化合物成键(化学结合等)或成盐(物理结合等)等方式进行手性拆分获得。术语“单一的立体异构体”是指本发明化合物的一种立体异构体相对于该化合物的所有立体异构体的质量含量不低于95％。

术语“化合物”和“药学上可接受的盐”如存在互变异构体，则可以以单一的互变异构体或它们的混合物的形式存在，较佳地以较稳定的互变异构体为主的形式存在。

术语“化合物”和“药学上可接受的盐”中的原子可以以其天然丰度或非天然丰度的形式存在。以氢原子为例，其天然丰度的形式是指其中约99.985％为氕、约0.015％为氘；其非天然丰度的形式是指其中约95％为氘。也即，术语“化合物”、“药学上可接受的盐”、“溶剂合物”和“药学上可接受的盐的溶剂合物”中的一个或多个原子可为以非天然丰度的形式存在的原子。

当任意变量(例如R^1-1-1)在化合物的定义中多次出现时，该变量每一位置出现的定义与其余位置出现的定义无关，它们的含义互相独立、互不影响。因此，若某基团被1个、2个或3个R^1-1-1基团取代，也就是说，该基团可能会被最多3个R^1-1-1取代，该位置R^1-1-1的定义与其余位置R^1-1-1的定义是互相独立的。另外，取代基及/或变量的组合只有在该组合产生稳定的化合物时才被允许。

术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。

术语“烷基”是指具有指定的碳原子数的直链或支链烷基。烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基及其类似烷基。

术语“烷氧基”是指基团-O-R^X，其中，R^X为如上文所定义的烷基。

术语“环烷基”是指单价饱和的环状烷基基，优选具有3-7个环碳原子、更优选3-6个碳原子的单价饱和的环状烷基，例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基。环烷基可以为单环，也可以为多环(例如桥环、螺环)。

术语“杂环烷基”是指具有杂原子的饱和的单环基团，优选含有1个、2个或3个独立选自N、O和S的环杂原子的3-7元饱和的单环。杂环烷基的示例为：吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢噻吩基、四氢吡啶基、四氢吡咯基、氮杂环丁烷基、噻唑烷基、唑烷基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、哌嗪基、氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、氧氮杂环庚烷基等。优选的杂环基为吗啉-4-基、哌啶-1-基、吡咯烷-1-基、硫代吗啉-4-基和1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基。

术语“芳基”是指苯基或萘基。

术语“杂芳基”是指含有杂原子的芳香基团，优选含有1个、2个或3个独立选自氮、氧和硫的芳族5-6元单环或9-10元双环，例如呋喃基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噻吩基、异唑基、噁唑基、二唑基、咪唑基、吡咯基、吡唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、苯并咪唑基、吲哚基、吲唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并唑基、苯并异唑基、喹啉基、异喹啉基等。杂芳基中至少一个环具有芳香性。

术语“药用辅料”是指生产药品和调配处方时使用的赋形剂和附加剂，是除活性成分以外，包含在药物制剂中的所有物质。可参见中华人民共和国药典(2015年版)四部、或、Handbook of Pharmaceutical Excipients(Raymond C Rowe,2009Sixth Edition)

术语“治疗”指治疗性疗法。涉及具体病症时，治疗指：(1)缓解疾病或者病症的一种或多种生物学表现，(2)干扰(a)导致或引起病症的生物级联中的一个或多个点或(b)病症的一种或多种生物学表现，(3)改善与病症相关的一种或多种症状、影响或副作用，或者与病症或其治疗相关的一种或多种症状、影响或副作用，或(4)减缓病症或者病症的一种或多种生物学表现发展。

术语“预防”是指获得或发生疾病或障碍的风险降低。

术语“STAT5抑制剂”是指最终能在体内环境特异性抑制STAT5活性的物质。

在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

本发明所用试剂和原料均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：该类化合物的结构新颖，具有较佳的STAT5抑制活性。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。

实施例1.3-(1-丙酰哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P1)

步骤1.1.合成4-(2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温氮气下向4-氧基1-哌啶甲酸叔丁酯(20g,100mmol)和2-氨基酚(11g,100mmol)的CH₂Cl₂(300mL)搅拌溶液，加入NaBH(OAc)₃(32.4g,151mmol)，并室温搅拌14h，加入CH₂Cl₂(1000mL)和饱和NaHCO₃(1500mL)稀释，分层。用CH₂Cl₂(2*500ml)萃取水层，用盐水冲洗合并的有机层，Na₂SO₄干燥，减压除去溶剂。将粗料用CH₂Cl₂(300mL)稀释，加入羰基二咪唑(18g,110mmol)，搅拌16h，用CH₂Cl₂(1L)和1N HCl(1L)稀释，分层。用CH₂Cl₂(2*500ml)萃取水层，用盐水冲洗合并的有机层，Na₂SO₄烘干，减压除去溶剂。经硅胶柱层析(PE:EA＝15:1)纯化得到黄色固(18.4g，收率38％)。MS(ESI)m/z 319.0[M+H]⁺.

步骤1.2.合成3-(哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮

在CH₂Cl₂(24ml)溶液中加入4-(2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(16.0g,50.3mmol)，在0℃下缓慢加入TFA(24ml)。反应混合物被浓缩。用饱和NaHCO₃(200mL)和CH₂Cl₂(1000mL)处理残渣。分离出的有机层用盐水冲洗，在Na₂SO₄上干燥，在减压下除去溶剂，得到所需的(11克，收率:100％)黄色固体。MS(ESI)m/z 218.9[M+H]⁺.

步骤1.3.合成3-(1-丙酰哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P1)

在3-(哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(1.92g,8.8mmol)和DIEA(1.50g,11.6mmol)的DCM(25ml)溶液中，在0℃下滴加丙酰氯(1.05g,11.4mmol)。反应混合物在室温下搅拌2小时，稀释DCM(100mL)，用NH₄Cl水溶液(200mL)洗涤。分离的有机层在Na₂SO₄上干燥，减压浓缩得到粗品，硅胶柱层析(PE:EA:DCM＝4:1:1～1:1:1)纯化得到所需的白色固体(1.1g，收率46％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.30-7.08(m,4H),4.93(d,J＝13.2Hz,1H),4.42-4.36(m,1H),4.10(d,J＝13.6Hz,1H),3.20(t,J＝12.8Hz,1H),2.68(t,J＝12.8Hz,1H),2.43(q,J＝7.6Hz,2H),2.31-2.24(m,2H),2.01-1.95(m,2H),1.22(t,J＝7.6Hz,3H).MS(ESI)m/z 275.0[M+H]⁺.

实施例2.3-(1-(3,3,3-三氟丙酰基)哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P2)

步骤2.1.3-(1-(3,3,3-三氟丙酰基)哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P2)

在DCM(15ml)中加入3-(哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(1.5g,6.88mmol)和K₂CO₃(1.99g,13.8mmol)，在0℃下滴加3,3,3-三氟丙基氯(1.05g,11.4mmol)。反应混合物在室温下搅拌4小时，过滤反应混合物，滤液浓缩。采用硅胶柱层析法(PE:EA:DCM＝1:1:1)对产物进行纯化，得到所需的白色固体(1.75g，收率77％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.23(dd,J＝5.2,1.2Hz,1H),7.21-7.12(m,2H),7.04(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),4.94-4.89(m,1H),4.44-4.37(m,1H),4.01-3.97(m,1H),3.38-3.27(m,3H),2.78-2.70(m,1H),2.37-2.23(m,2H),2.04-1.98(m,2H).MS(ESI)m/z 329.1[M+H]⁺.

实施例3.3-(1-(2-(吡啶-4-基)乙酰基)哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P3)

步骤3.1.合成3-(1-(2-(吡啶-4-基)乙酰基)哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P3)

在3-(哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(1.5g,6.88mmol)和K₂CO₃(2.8g,20.6mmol)的DCM(20ml)溶液，0℃下滴加2-(吡啶-4-基)乙酰氯盐酸盐(2.0g,10.3mmol)。反应混合物在室温下搅拌4小时，过滤反应混合物，滤液浓缩。采用高效液相色谱法(20-95％CH₃CN水溶液)对产物进行纯化，得到了白色固体(1.07g，收率46％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.51(d,J＝6.0Hz,2H),7.35-7.29(m,4H),7.23-7.19(m,1H),7.15-7.11(m,1H),4.57(d,J＝13.2Hz,1H),4.43-4.35(m,1H),4.09(d,J＝14.4Hz,1H),3.85(s,2H),3.23-3.16(m,1H),2.76-2.69(m,1H),2.09-1.98(m,2H),1.86-1.81(m,2H).MS(ESI)m/z 338.0[M+H]⁺.

实施例4.3-(1-(2-苯基乙酰基)哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P4)

步骤4.1.合成3-(1-(2-苯基乙酰基)哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P4)

在DCM(15ml)中加入3-(哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(1.5g,6.88mmol)和三乙胺(2.1g,20.6mmol)，在0℃下滴加2-苯基乙酰氯(1.6g,10.3mmol)。反应混合物在室温下搅拌1h，反应混合物浓缩。采用硅胶柱层析法(PE:EA:DCM＝1:1:1)对产物进行纯化，得到所需的白色固体(1.16g，收率50％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.39-7.35(m,4H),7.29-7.26(m,1H),7.20-7.18(m,1H),7.11-7.09(m,2H),6.79-6.75(m,1H),4.91-4.88(m,1H),4.39-4.30(m,1H),4.08-4.04(m,1H),3.82(s,2H),3.16-3.08(m,1H),2.70-2.63(m,1H),2.18-2.09(m,1H),1.91-1.78(m,1H),1.77-1.73(m,2H).MS(ESI)m/z 337.2[M+H]⁺.

实施例5.4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基)哌啶-1-基)乙基)苯甲酸(P6)

步骤5.1.4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基)哌啶-1-基)乙基)苯甲酸(P6)

在DCM(20ml)中加入3-(哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(1.5g,6.88mmol)，2-(4-(甲氧羰基)苯基)乙酸(1.42g,7.33mmol)和HATU(3.9g,10.2mmol)，在0℃下，加入DIEA(2.67g,20mmol)。反应混合物在室温氮气下搅拌2小时，用DCM(150mL)稀释，用NH₄Cl水溶液(200mL)冲洗。分离的有机层在Na₂SO₄上干燥，减压浓缩得到粗品，硅胶柱层析(MeOH:DCM＝1:20～1:10)纯化得到4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基)哌啶-1-基)乙基)苯甲酸甲酯(2.5g，收率82％)为棕色固体。在THF(80mL)和H₂O(20mL)中加入4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基)-哌啶-1-基)乙基)苯甲酸甲酯(2.0g,5.08mmol)和一水合氢氧化锂(352mg,8.2mmol)。混合物在室温下搅拌16h，去除有机溶剂后，将水层调整为pH 2加2N HCl,EtOAc萃取(3*200ml)。有机层在Na₂SO₄上干燥，减压浓缩得到粗品，经硅胶柱层析(MeOH:DCM＝1:60～1:40)纯化得到所需的棕色固体(1.01g，收率:53％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ12.78(brs,1H),7.92(d,J＝8.0Hz,2H),7.42(d,J＝8.0Hz,2H),7.33(d,J＝7.6Hz,1H),7.18-7.10(m,3H),4.58(d,J＝13.2Hz,1H),4.42-4.36(m,1H),4.10(d,J＝13.6Hz,1H),3.94-3.83(m,2H),3.21-3.15(m,1H),2.75-2.68(m,1H),2.00-1.76(m,4H).MS(ESI)m/z 381.2[M+H]⁺.

实施例6.3-(1-(2-(对甲苯基)乙酰基)哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P7)

步骤6.1.合成3-(1-(2-(对甲苯基)乙酰基)哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P7)

在3-(哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(1.5g,6.88mmol)，2-(对甲苯基)乙酸(1.1g,7.32mmol)和HATU(3.9g,10.2mmol)的DCM(20ml)溶液中，0℃下加入DIEA(2.67g,20mmol)。反应混合物在室温氮气下搅拌2小时，用DCM(150mL)稀释，用NH₄Cl水溶液(200mL)冲洗。分离的有机层在Na₂SO₄上干燥，减压浓缩得到，经硅胶柱层析(MeOH:DCM＝1:25～1:10)纯化得到所需的白色固体(1.2g，收率:50％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.26-7.08(m,7H),6.77-6.75(m,1H),4.90-4.87(m,1H),4.39-4.31(m,1H),4.08-4.04(m,1H),3.77(s,2H),3.15-3.07(m,1H),2.68-2.62(m,1H),2.32(s,3H),2.13-2.07(m,1H),1.93-1.82(m,1H),1.74-1.64(m,2H).MS(ESI)m/z 351.2[M+H]⁺.

实施例7.3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P8)

步骤7.1.合成3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P8)

在DCM(27mL)中加入3-(哌啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(2.0g,9.17mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(2.24g,9.17mmol)和HATU(5.2g,13.8mmol)，在0℃下，加入DIEA(3.56g,27.5mmol)。反应混合物在室温N₂下搅拌1h，用DCM(150mL)稀释，用NH₄Cl水溶液(200mL)冲洗。分离的有机层在Na₂SO₄上干燥，减压浓缩得到粗品，用硅胶柱层析(MeOH:DCM＝1:30)纯化得到所需的白色固体(1.28g，收率40％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.63(d,J＝8.0Hz,2H),7.44(d,J＝7.6Hz,2H),7.23-7.19(m,1H),7.14-7.09(m,2H),6.85-6.83(m,1H),4.88(d,J＝13.2Hz,1H),4.38-4.32(m,1H),4.05(d,J＝14.0Hz,1H),3.86(s,2H),3.22-3.14(m,1H),2.73-2.66(m,1H),2.21-2.17(m,1H),1.99-1.84(m,3H).MS(ESI)m/z405.2[M+H]⁺.

实施例8.3-(2-(4-氟苄基)-4-氧代-4H-喹嗪-8-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P9)

步骤8.1.合成4-甲氧基吡啶甲醛

在甲苯(1.70L)中加入4-甲氧基吡啶甲酸乙酯(94.3g,560mmol)，在-78℃氮气保护下滴加DIBAL-H(408mL，己烷1.0M)。完全混合后，在这个温度下搅拌3小时。采用薄层色谱法对反应过程进行全面监测。在加入氢氧化钠水溶液(2.0M,1.5L)之前，加入甲醇对过量的DIBAL-H进行淬灭，使反应混合物达到室温。用DCM(4×1L)萃取混合物，将混合后的有机层干燥浓缩得到粗品，硅胶柱层析(PE/EA＝5:1)纯化得到所需的黄色凝胶(42.5g，收率:57％)。MS(ESI)m/z 138.1[M+H]⁺.

步骤8.2.合成8-甲氧基-4-氧代-4H-喹嗪-2-羧酸乙酯

在4-甲氧基吡啶醛(685mg,5.0mmol)和丁二酸二乙酯(1.74g,10.0mmol)的混合物中加入叔丁醇钾悬浮液(1.12g,10mmol,25mL叔丁醇)。反应混合物在50℃下搅拌0.5h,加入15％乙酸水溶液(40mL)，EA(2x 30mL)萃取反应混合物。重复61批次。EA层被合并和浓缩。在室温下保存2天，直到环化反应完成。采用硅胶柱层析法(PE:EA＝2:1)对产物进行纯化，得到了理想的黄色固体(11.5g，收率15％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.96(d,J＝8.0Hz,1H),7.48(d,J＝2.4Hz,1H),7.13(d,J＝2.4Hz,1H),7.07(dd,J＝8.0Hz,2.8Hz,1H),6.55(d,J＝2.0Hz,1H),4.34(q,J＝7.2Hz,2H),3.94(s,3H),1.35(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI)m/z248.1[M+H]⁺.

步骤8.3.合成2-(羟甲基)-8-甲氧基-4H-喹嗪-4-酮

在THF(300mL)中加入8-甲氧基-4-氧代-4-H-喹嗪-2-羧酸乙酯(5.0g,20.2mmol)浆体，逐步加入LiBH₄(1.77g,80.4mmol)。反应混合物在室温下搅拌24小时。用15％醋酸水溶液对反应混合物进行淬灭。除去溶剂后，沉淀物经过滤收集并浓缩成所需的化合物(3.3g，收率:79％)，为淡黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.84(d,J＝8.0Hz,1H),7.11(d,J＝2.8Hz,1H),6.85(dd,J＝7.6Hz,2.4Hz,1H),6.58(s,1H),6.13(s,1H),5.39(t,J＝5.6Hz,1H),4.90(d,J＝2.8Hz,2H),3.90(s,3H).MS(ESI)m/z 206.1[M+H]⁺.

步骤8.4.合成甲磺酸(8-甲氧基-4-氧代-4H-喹啉-2-基)甲酯

在DCM(1.0L)中加入2-(羟甲基)-8-甲氧基-4H-喹嗪-4-酮(3.3g,16.0mmol)和Et₃N(9.69g,96.0mmol)，在0℃滴加MsCl(7.36g,64.0mmol)，在0摄氏度搅拌1h。水被添加和DCM层分离,用盐水洗净,Na₂SO₄干燥和浓缩得到粗产品(5.35g),直接用于下步反应.MS(ESI)m/z 284.0[M+H]⁺.

步骤8.5.合成2-(溴甲基)-8-甲氧基-4H-喹嗪-4-酮

在(8-甲氧基-4-氧代-4H-喹嗪-2-基)甲基甲磺酸甲酯(5.35g,16.0mmol)的丙酮(240mL)溶液加入溴化锂(8.35g,96.0mmol)。混合物在氮气35℃下搅拌过夜。丙酮去除后,残渣用EA和水溶解,有机层分离,用盐水洗净,经Na₂SO₄干燥和浓缩得到粗品(3.5g)黄色固体，直接用于下步反应.MS(ESI)m/z 267.9 and 269.9[M+H]⁺.

步骤8.6.合成2-(4-氟苄基)-8-甲氧基-4H-喹嗪-4-酮

将2-(溴甲基)-8-甲氧基-4H-喹嗪-4-酮(3.5g，粗品，<16.0mmol)、(4-氟苯基)硼酸(3.36g,24.0mmol)、Cs₂CO₃(10.4g,32.0mmol)和PdCl₂(PPh₃)₂(1.12g,1.60mmol)加入二氧六环(350mL)中，在100℃下搅拌1小时。反应混合物经EA提取。有机层用盐水洗净,Na₂SO₄干燥和浓缩后,由硅胶柱层析法纯化(DCM:EA＝10:1)得到(2.77g，四步收率:48％)一个淡黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.90(d,J＝8.0Hz,1H),7.15-7.08(m,2H),6.96-6.89(m,2H),6.57(dd,J＝8.4Hz,2.8Hz,1H),6.47(d,J＝2.8Hz,1H),6.19(s,1H),6.16(s,1H),3.81(s,3H),3.81(s,2H).MS(ESI)m/z 284.0[M+H]⁺.

步骤8.7.合成2-(4-氟苄基)-8-羟基-4H-喹嗪-4-酮

在冷却后的2-(4-氟苄)-8-甲氧基-4H-喹嗪-4-酮(2.77g,9.75mmol)的二氯甲烷溶液中加入55ml(55.0mmol)的1N三溴化硼溶液。然后混合物在35℃下搅拌16小时。反应混合物被浓缩；在0℃和20mL乙腈的水溶液中对残渣进行处理。除去乙腈后，过滤收集沉淀物，得到(2.60g，收率99％)黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.25(s,1H),8.86(d,J＝7.6Hz,1H),7.36-7.28(m,2H),7.17-7.08(m,2H),6.83-6.75(m,2H),6.38(d,J＝1.2Hz,1H),5.94(d,J＝1.6Hz,1H),3.83(s,2H).MS(ESI)m/z 270.0[M+H]⁺.

步骤8.8.合成2-(4-氟苄基)-4-氧代-4H-喹喔啉-8-基三氟甲磺酸酯

在DMF(13ml)中加入2-(4-氟苄)-8-羟基-4H-喹嗪-4-酮(2.60g,9.63mmol)溶液中加入Et₃N(1.46g,14.4mmol)和Tf₂NPh(4.13g,11.6mmol)。在氮气保护下，室温下搅拌3小时。将40mL,0℃的水加入反应混合物中，剧烈搅拌。通过过滤收集沉淀物，得到(3.43g，收率:89％)黄色晶体。MS(ESI)m/z 402.0[M+H]⁺.

步骤8.9.合成三甲基(2-((2-硝基苯氧基)甲氧基)乙基)硅烷

SEM-Cl(6.6g,39.6mmol)加入冷却的2-硝基苯酚(5.0g,36.0mmol)和Et₃N(5.4g,54.0mmol)的DCM(50mL)溶液中。反应混合物在室温下搅拌3小时。混合物用水、NH₄Cl水溶液洗涤，Na₂SO₄干燥，浓缩得到粗品。粗品经柱层析得到所需黄色油状产品(5.0g，收率70％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.81(dd,J＝8.0Hz,1.6Hz,1H),7.54-7.46(m,1H),7.35(dd,J＝8.4Hz,0.8Hz,1H),7.10-7.03(m,1H),5.34(s,2H),3.84-3.77(m,2H),0.90-0.93(m,2H),-0.001(s,9H).

步骤8.10.合成2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)苯胺

将三甲基(2-((2-硝基苯氧基)甲氧基)乙基)硅烷(5.0g,18.6mmol)和10％Pd/C(2.5g)在MeOH(50mL)中的混合物在H₂下rt搅拌16小时。反应混合物经硅藻土过滤。浓缩后直接投入下一步反应。MS(ESI)m/z 240.1[M+H]⁺.

步骤8.11.合成2-(4-氟苄基)-8-((2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)苯基)氨基)-4H-喹嗪-4-酮

将2-(4-氟苄基)-4-氧代-4H-喹唑啉-8-基三氟甲磺酸酯(2.46g，6.11mmol)，2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)苯胺(2.20g，9.17mmol)、Cs₂CO₃(3.98g，12.2mmol)、BINAP(380mg，0.611mmol)和Pd₂(dba)₃(279mg，0.305mmol)的二氧六环(88mL)溶液在90℃、N₂下搅拌2小时。通过硅胶柱色谱(PE：EA从3：1至1：1)纯化反应混合物，得到目标产物(2.25g，76％产率)，为黄色固体。MS(ESI)m/z 491.2[M+H]⁺.

步骤8.12.合成2-(4-氟苄基)-8-((2-羟基苯基)氨基)-4H-喹嗪-4-酮

将2-(4-氟苄)-8-((2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲氧基)苯基)氨基)-4H-喹嗪-4-酮(2.25g,4.59mmol)在MeOH(90mL)和THF(90mL)混合溶剂中滴入溶液H₂SO₄(4.60mLcon.H₂SO₄,90mL MeOH))。混合物在室温下搅拌2小时。反应混合物被冰冷的水溶液中和NaHCO₃由EA萃取。EA层浓缩(1.81g,粗品)，直接投入下步反应。MS(ESI)m/z 361.1[M+H]⁺.

步骤8.13.合成3-(2-(4-氟苄基)-4-氧代-4H-喹嗪-8-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(P9)

在冷却的2-(4-氟苄)-8-((2-羟基苯基)氨基)-4H-喹嗪-4-酮(1.81g,5.0mmol)和Cs₂CO₃(3.26g,10.0mmol)的二氧六环(250mL)溶液中缓慢滴入氯甲酸甲酯(0.95g,10.0mmol)。混合物在室温下搅拌了一夜。然后反应混合物在80℃下再搅拌20小时。所得混合物在100℃下搅拌3小时。LCMS监测到原料消耗完全。用EA稀释反应混合物，用水和盐水冲洗。有机层经干燥后的Na₂SO₄浓缩而成。采用硅胶柱层析法(PE/EA,10:1～3:1)对粗品进行纯化，得到了目标化合物(1.20g,收率63％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.99(d,J＝8.0Hz,1H),7.95(d,J＝2.4Hz,1H),7.52-7.46(m,1H),7.46–7.40(m,2H),7.40–7.33(m,2H),7.33–7.24(m,2H),7.20–7.11(m,2H),6.83(s,1H),6.38(d,J＝1.6Hz,1H),3.97(s,2H).MS(ESI)m/z 387.1[M+H]⁺,纯度:99.2％@254nm,99.3％@214nm.

实施例9.1-(1-丙酰哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(X1)

步骤9.1.合成1-(1-丙酰哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(X1)

在DCM(40ml)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮盐酸盐(1.40g,5.52mmol)和吡啶(1.74g,22.1mmol)，在0℃下滴加丙酰氯(1.53g,16.5mmol)。反应混合物在室温下搅拌16h，用水稀释后用DCM萃取。将合并的有机层在Na₂SO₄上干燥，减压浓缩得到粗品，采用高效液相色谱法(20-95％CH₃CN水溶液)纯化得到所需的白色固体(1.18g，收率69％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.84(s,1H),7.25-7.19(m,1H),7.00-6.97(m,3H),4.58(d,J＝13.2Hz,1H),4.45-4.37(m,1H),4.01(d,J＝13.6Hz,1H),3.18-3.07(m,1H),2.67-2.59(m,1H),2.42-2.39(m,2H),2.37-2.20(m,1H),2.18-2.06(m,1H),1.71(t,J＝12.8Hz,2H),1.02(m,J＝7.6Hz,3H).MS(ESI)m/z 274.2[M+H]⁺,纯度:99.6％@254nm,99.9％@214nm.

实施例10.1-(1-(3,3,3-三氟丙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(X2)

步骤10.1.合成1-(1-(3,3,3-三氟丙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(X2)

在DCM(20ml)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮盐酸盐(1.50g,5.90mmol)和DIEA(3.04g,23.6mmol)，在0℃滴加3,3,3-三氟丙基氯(1.30g,8.86mmol)。反应混合物在室温下搅拌2小时，使反应混合物浓缩。采用高效液相色谱法(10-95％CH₃CN水溶液)对产物进行纯化，得到了所需的白色固体(1.21g，收率63％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.85(s,1H),7.24-7.21(m,1H),7.00-6.97(m,3H),4.62-4.53(m,1H),4.49-4.37(m,1H),4.03-3.93(m,1H),3.76-3.68(m,2H),3.25-3.14(m,1H),2.75-2.68(m,1H),2.42-2.28(m,1H),2.21-2.07(m,1H),1.78-1.68(m,2H).MS(ESI)m/z 328.1[M+H]⁺,纯度:94.5％@254nm,99.1％@214nm.

实施例11.1-(1-(2-(吡啶-4-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(X3)

步骤11.1.合成1-(1-(2-(吡啶-4-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(X3)

在DCM(20mL)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮盐酸盐(1.50g,5.90mmol)，2-(吡啶-4-基)乙酸盐酸盐(1.55g,8.90mmol)和HATU(6.76g,17.8mmol)，于0℃下滴加DIEA(3.81g,29.5mmol)。将反应混合物在室温下N₂下搅拌2小时，使反应混合物浓缩。采用高效液相色谱法(10-95％CH₃CN水溶液)对产物进行纯化，得到了所需的白色固体(1.27g，收率:64％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.84(s,1H),8.72-8.35(m,2H),7.31(d,J＝3.6Hz,2H),7.15-7.06(m,1H),7.02-6.89(m,3H),4.57(d,J＝13.2Hz,1H),4.45-4.38(m,1H),4.08(d,J＝13.6Hz,1H),3.91-3.79(m,2H),3.23-3.11(m,1H),2.78-2.64(m,1H),2.19-2.05(m,2H),1.73-1.62(m,2H).MS(ESI)m/z 337.1[M+H]⁺,纯度:99.8％@254m,99.9％@214nm.

实施例12.1-(1-(2-苯基乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(X4)

步骤12.1.合成1-(1-(2-苯基乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(X4)

在DCM(40ml)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮盐酸盐(1.50g,5.90mmol)和吡啶(1.87g,23.6mmol)，在0℃下滴加2-苯基乙酰氯(2.28g,14.8mmol)。反应混合物在室温下搅拌16h，用水稀释后用DCM萃取。合并的有机层在Na₂SO₄上干燥，减压浓缩得到粗品，用高效液相色谱法(10-95％CH₃CN水溶液)纯化得到所需的白色固体(1.46g，收率63％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.82(s,1H),7.38-7.21(m,5H),6.96-6.95(m,4H),4.57(d,J＝13.2Hz,1H),4.45-4.35(m,1H),4.09(d,J＝13.6Hz,1H),3.84-3.74(m,2H),3.19-3.08(m,1H),2.73-2.62(m,1H),2.11-1.88(m,2H),1.72-1.54(m,2H).MS(ESI)m/z 336.1[M+H]⁺,纯度:97.9％@254nm,99.9％@214nm.

实施例13.4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)乙基)苯甲酸(X6)

步骤13.1.4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)乙基)苯甲酸(X6)

在DCM(50mL)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮盐酸盐(2.40g,8.43mmol)，2-(4-(甲氧羰基)苯基)乙酸(1.80g,9.28mmol)和HATU(4.80g,12.6mmol)，在0℃下，加入DIEA(3.26g,25.3mmol)。反应混合物室温N₂下搅拌2h,DCM(200mL)稀释反应混合物，NH₄Cl水溶液(200mL)洗涤反应混合物。分离的有机层在Na₂SO₄上干燥，减压浓缩得到粗品，采用高效液相色谱法(25-95％CH₃CN水溶液)纯化得到4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)苯甲酸甲酯(1.6g，收率37％)为白色固体。在THF(20ml)和H₂O(20ml)中加入4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)苯甲酸甲酯(1.6g,4.07mmol)、LiOH.H₂O(855mg,2.04mmol)。所得混合物在室温下搅拌3h，去除有机溶剂后，加入2N盐酸将水层调整为pH2。沉淀物被收集并干燥，得到理想的(1.15g，收率:75％)白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ12.89(brs,1H),10.83(s,1H),7.93(d,J＝7.2Hz,2H),7.43(d,J＝7.2Hz,2H),6.95(s,4H),4.57(d,J＝12.0Hz,1H),4.50-4.32(m,1H),4.10(d,J＝12.8Hz,1H),3.96-3.82(m,2H),3.25-3.12(m,1H),2.75-2.62(m,1H),2.13-1.88(m,2H),1.80-1.53(m,2H).MS(ESI)m/z 380.0[M+H]⁺,纯度:95.9％@254nm,98.9％@214nm.

实施例14.1-(1-(2-(对甲苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(X7)

步骤14.1.合成1-(1-(2-(对甲苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(X7)

在DCM(20ml)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮盐酸盐(1.50g,5.90mmol)，2-(对甲苯基)乙酸(1.34g,8.90mmol)和HATU(6.76g,17.8mmol)，在0℃滴加DIEA(3.81g,29.5mmol)。反应混合物被浓缩。采用高效液相色谱法(10-95％CH₃CN水溶液)对产物进行纯化，得到了所需的白色固体(1.16g，收率56％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ10.83(s,1H),7.21-7.15(m,4H),6.96-6.90(m,4H),4.57(d,J＝13.2Hz,1H),4.45-4.32(m,1H),4.07(d,J＝14.0Hz,1H),3.82-3.67(m,2H),3.18-3.07(m,1H),2.72-2.62(m,1H),2.27(s,3H),2.08-1.96(m,1H),1.95-1.80(m,1H),1.66(d,J＝10.8Hz,1H),1.57(d,J＝10.8Hz,1H).MS(ESI)m/z 350.2[M+H]⁺,纯度:96.8％@254nm,99.6％@214nm.

实施例15.1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(X8)

步骤15.1.合成1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(X8)

在DCM(50mL)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮盐酸盐(1.50g,5.90mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(1.45g,7.09mmol)和HATU(3.37g,8.87mmol)，在0℃下，加入DIEA(3.81g,29.6mmol)。反应混合物室温N₂下搅拌3h,DCM(100ml)稀释反应混合物，NH₄Cl水溶液(100ml)洗涤。分离的有机层在Na₂SO₄上干燥，减压浓缩得到粗品，用高效液相色谱法(10-50％CH₃CN水溶液)纯化得到所需的白色固体(1.75g，收率74％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ10.84(s,1H),7.71(d,J＝8.0Hz,2H),7.53(d,J＝8.0Hz,2H),7.09-7.03(m,1H),6.98-6.92(m,3H),4.57(d,J＝13.2Hz,1H),4.45-4.32(m,1H),4.13(d,J＝14.0Hz,1H),3.98-3.85(m,2H),3.19(t,J＝12.0Hz,1H),2.71(t,J＝12.0Hz,1H),2.16-2.01(m,2H),1.68(m,t,J＝12.0Hz,2H).MS(ESI)m/z 404.1[M+H]⁺,纯度:92.4％@254nm,99.7％@214nm.

实施例16.2-(4-氟苄基)-8-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-4H-喹嗪-4-酮(X9)

步骤16.1.合成2-(4-氟苄基)-8-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-4H-喹嗪-4-酮(X9)

将2-(4-氟苄)-4-氧代-4H-喹嗪-8-基三氟甲烷磺酸酯(2.54g,6.32mmol)、(2-氨基苯基)氨基甲酸叔丁酯(1.97g,9.48mmol)、Cs₂CO₃(4.12g,9.11mmol)、BINAP(390mg,0.63mmol)、Pd₂(dba)₃(270mg,0.32mmol)在二氧六环(70mL)中，于90℃下，氮气下搅拌2小时。反应混合物用二氧六环(0.02M)稀释，110℃搅拌5小时。最后将反应混合物冷却至rt，滤除溶剂，用EA溶解滤饼，用水冲洗。EA层干燥浓缩得到粗品，EA对粗品进行再结晶，得到所需化合物(1.57g，收率64％)为黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.41(s,1H),8.97(d,J＝8.0Hz,1H),7.89(d,J＝2.4Hz,1H),7.44(dd,J＝8.0,2.4Hz,1H),7.41–7.26(m,3H),7.21–7.00(m,5H),6.79(s,1H),6.33(d,J＝1.2Hz,1H),3.95(s,2H).MS(ESI)m/z 386.1[M+H]⁺,纯度:98.3％@254nm,98.9％@214nm.

实施例17.4-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-001)

步骤17.1.合成4-((2-硝基-3-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-001-1)

将1-氟-2-硝基-3-(三氟甲基)苯(1.50g,6.60mmol)、4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.60g,8.00mmol)、K₂CO₃(1.80g,130mmol)、KI(12mg,0.07mmol)混悬在DMF(12mL)中，120℃搅拌20小时。将反应混合物冷却，倒入60ml水中，用EtOAc(30ml×3)萃取，混合后的有机层用30ml盐水冲洗，在MgSO₄上干燥浓缩。粗品经硅胶柱层析(PE:EtOAc＝5:1～3:1)纯化得到所需化合物(360mg，收率14％)为橙色固体。MS(ESI)Rt＝1.85min,m/z no[M+H]⁺found,纯度:100％@254nm,76.33％@214nm.

步骤17.2.合成4-((2-氨基-3-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-001-2)

将4-((2-硝基-3-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(360mg,0.924mmol)、锌粉(362mg,5.54mmol)和NH₄Cl(494mg,9.23mmol)混悬液在甲醇(5ml)中55℃下搅拌过夜。将反应混合物过滤，滤液浓缩。残渣在水(30ml)和乙酸乙酯(30ml)之间进行了分离。用EtOAc(30ml×3)萃取水层，用盐水(30ml)冲洗合并的有机层，在MgSO₄上干燥，过滤浓缩，得到所需化合物(320mg，收率96％)为棕色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.01(d,J＝8.0Hz,1H),6.85-6.77(m,2H),4.14-3.98(m,2H),3.94(s,2H),3.42-3.32(m,1H),3.14(s,1H),2.98-2.92(m,2H),2.02-1.99(m,2H),1.47(s,9H),1.41-1.35(m,2H).

步骤17.3.合成4-(2-氧代-4-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-001-3)

4-((2-氨基-3-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(260mg,0.723mmol)和NaHCO₃(182mg,2.17mmol)在DCM(10ml)中的悬浮液于冰浴下加入三光气(215mg,0.723mmol)。得到的混合物被搅拌了一夜。将反应混合物倒入50mL的水中，用DCM(30mL×3)萃取，混合后的有机层用盐水(30mL)冲洗，在MgSO₄上干燥，过滤浓缩，得到所需的化合物(210mg，收率75％)为棕色固体。MS(ESI)Rt＝1.66min,m/z 286.0[M+H-Boc]⁺,纯度:34％@254nm,49％@214nm.

步骤17.4.合成1-(哌啶-4-基)-4-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-001-4)

在DCM(4.5mL)中加入4-(2-氧代-4-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(210mg,0.545mmol)，室温下加入TFA(1.5mL)，搅拌过夜。将反应混合物浓缩，残渣溶解在DCM(10ml)中。将Na₂CO₃(sat.，20ml)加入溶液中搅拌15min，用DCM(20ml×3)萃取混合物，将混合后的有机层在MgSO₄上干燥，过滤浓缩，得到所需要的化合物(76mg，收率49％)作为棕色油状物。MS(ESI)Rt＝1.29min,m/z 286.2[M+H]⁺,纯度:41％@254nm,81％@214nm.

步骤17.5.合成4-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-001)

在1-(哌啶-4-基)-4-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(76mg,0.27mmol)、2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(55mg,0.27mmol)、DIEA(105mg,0.810mmol)的DMF(2mL)溶液中在室温下分批加入HATU(156mg,0.410mmol)。所得混合物在室温下搅拌1.5小时。将反应混合物倒入50mL的水中，用EtOAc(25mL 3)萃取，用盐水(25mL)冲洗混合后的有机层，在MgSO₄上干燥，过滤浓缩。粗品经预处理薄层色谱(DCM:MeOH＝15:1)纯化，得到所需化合物(32.6mg，收率26％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.43(s,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,2H),7.28-7.26(m,1H),7.11(t,J＝8.0Hz,1H),6.99(d,J＝8.0Hz,1H),4.91-4.88(m,1H),4.56-4.47(m,1H),4.08-4.05(m,1H),3.87(s,2H),3.24-3.16(m,1H),2.75-2.68(m,1H),2.29-2.18(m,1H),2.06-1.95(m,1H),1.91-1.88(m,1H),1.82-1.79(m,1H).MS(ESI)Rt＝3.942min,m/z 472.2[M+H]⁺,纯度:95.72@254nm,99.61％@214nm.

实施例18.4-甲氧基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-003)

步骤18.1.合成4-((3-甲氧基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-003-1)

向1-氟-3-甲氧基-2-硝基苯(1.00g,5.85mmol)和4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁基酯(1.29g,6.43mmol)的DMSO(20mL)溶液中加入K₂CO₃(1.61g,11.7mmol)。100℃搅拌过夜，冷却后倒入150mL水搅拌10min，用EtOAc(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20毫升)冲洗干净，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的红色固体(1.88g，收率92％)。MS(ESI)Rt＝1.712min,m/z 374.1[M+Na]⁺,纯度:62.4％@214nm.

步骤18.2.合成4-((2-氨基-3-甲氧基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-003-2)

将4-((3-甲氧基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.85g,5.27mmol)加入THF(15ml)和甲醇(15ml)溶液中，加入Pd/C(10％，200mg)。将混合物在50℃氢气气球下搅拌5小时。然后将混合物通过硅藻土过滤。滤液被浓缩成所需的褐色油(1.69g，收率100％)。MS(ESI)Rt＝1.660min,m/z 322.2[M+H]⁺,纯度:68.6％@214nm.

步骤18.3.合成4-(4-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-003-3)

在4-((2-氨基-3-甲氧基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.65g,5.14mmol)的DCM(50ml)溶液中加入NaHCO₃(4.32g,51.4mmol)。混合物冷却到0摄氏度。然后加入760mg,2.57mmol的三光气。混合物在室温下搅拌了一夜。然后将混合物倒入水中(50毫升)，用DCM(2x 50毫升)萃取。用盐水(20mL)冲洗合并的有机层，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用硅胶柱层析法(PE:EA＝3:1～1:1)对残留物进行纯化，得到所需化合物(1.22g，收率69％)为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.75-8.72(m,1H),6.99(t,J＝8.4Hz,1H),6.79(d,J＝8.0Hz,1H),6.63(d,J＝8.0Hz,1H),4.48(t,J＝8.4Hz,1H),4.36-4.24(m,2H),3.92(s,3H),2.89-2.84(m,2H),2.34-2.26(m,2H),1.85-1.82(m,2H),1.50(s,9H).MS(ESI),Rt＝1.543min,m/z 370.2[M+Na]⁺纯度:84.7％@214nm.

步骤18.4.合成4-甲氧基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-003-4)

在DCM(2ml)中加入4-(4-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(200mg,0.58mmol)和TFA(1mL)。混合物在30℃下搅拌1小时。混合物被浓缩了。将残渣用水(2mL)稀释，加入Na₂CO₃水溶液(sat.，5mL)。用DCM:MeOH＝10:1(4×10mL)萃取混合物。合并的有机层用盐水(20毫升)冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的(110毫克，收率:77％)白色固体。MS(ESI)Rt＝1.048min,m/z 248.1[M+H]⁺,纯度:95.5％@214nm.

步骤18.5.合成4-甲氧基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-003)

在2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(100mg,0.490mmol)的DCM(2mL)溶液中加入DMF(1滴)，然后加入SOCl₂(106mg,0.89mmol)。在20℃搅拌30分钟后，将混合物浓缩。残留物溶解在DCM(1毫升)用于下步。将4-甲氧基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(110mg,0.450mmol)与DIEA(287mg,2.23mmol)在DCM(2mL)中室温搅拌10min，滴加之前的溶液。加入后的混合物在室温下搅拌2小时。将混合物倒入水中(10毫升)，用DCM(3×10毫升)萃取。将合并后的有机层用盐水(10ml)冲洗干净，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用高效液相色谱法(Xbridge C18,5um,19x 150mm,20-70％B,A:H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B:CH₃CN,uv＝214nm,F＝15mL/min)对粗品进行纯化，得到所需化合物(110mg，收率57％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.19(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,2H),7.45(d,J＝8.0Hz,2H),6.95(t,J＝8.4Hz,1H),6.63(d,J＝8.4Hz,2H),6.50(d,J＝8.0Hz,2H),4.87(d,J＝13.2Hz,1H),4.54-4.58(m,1H),4.04(d,J＝13.6Hz,1H),3.90(s,3H),3.86(s,2H),3.22-3.15(m,H),2.74-2.67(m,1H),2.28-2.17(m,1H),2.05-1.95(m,1H),1.90-1.87(m,1H),1.80-1.78(m,1H).MS(ESI)Rt＝3.448min,m/z 434.2[M+H]⁺,纯度:99.0％@254nm,99.6％@214nm.

实施例19.5-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-005)

步骤19.1.合成4-((2-硝基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-005-1)

将1-氟-2-硝基-4-(三氟甲基)苯(1.00g,4.80mmol)、4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(961mg,4.80mmol)和K₂CO₃(995mg,7.20mmol)混悬在DMF(10mL)中，在85℃下搅拌2小时。冷却到室温后,反应混合物注入水(50毫升)和用EtOAc(25毫升×3)萃取。合并后的有机层用水洗(25毫升),盐水(25毫升)洗,MgSO₄干燥和浓缩得所需的化合物(1.86g,收率100％)作为一个黄色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.48(d,J＝1.2Hz,1H),8.31(d,J＝7.6Hz,1H),7.61(dd,J＝9.2,2.0Hz,1H),6.97(d,J＝9.2Hz,1H),4.06-4.03(m,2H),3.76-3.67(m,1H),3.09-3.04(m,2H),2.09-2.04(m,2H),1.61-1.54(m,2H),1.48(s,9H).

步骤19.2.合成4-((2-氨基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-005-2)

将4-((2-硝基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.86g,4.78mmol)悬浮于甲醇(15ml)中，在氮气气氛下加入Pd/C(10％，186mg)。得到的混合物在35℃的氢气气氛下搅拌过夜。将反应混合物过滤，滤液浓缩，得到所需的化合物(1.60g，收率93％)为灰色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.08-7.06(m,1H),6.94(d,J＝2.0Hz,1H),6.65(d,J＝8.4Hz,1H),4.06-4.04(m,2H),3.70-3.24(m,4H),3.00-2.94(m,2H),2.06-2.02(m,2H),1.47(s,9H),1.47-1.36(m,2H).

步骤19.3.合成4-(2-氧代-5-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-005-3)

在DCM(25ml)中4-((2-氨基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg,1.39mmol)和NaHCO₃(584mg,6.95mmol)悬浮液中加入三光气(206mg,0.694mmol)。得到的混合物搅拌了2小时。将反应混合物倒入水中(50mL)，用DCM(25mL 3)萃取，混合后的有机层用盐水(25mL)冲洗，在MgSO₄上干燥，浓缩得到所需化合物(530mg，收率99％)为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ9.87(s,1H),7.38(s,1H),7.35(d,J＝8.8Hz,1H),7.20(d,J＝8.4Hz,1H),4.54-4.45(m,1H),4.36-4.33(m,2H),2.92-2.85(m,2H),2.38-2.27(m,2H),1.87-1.84(m,2H),1.52(s,9H).

步骤19.4.合成1-(哌啶-4-基)-5-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-005-4)

在DCM(6mL)中加入4-(2-氧代-5-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(530mg,1.38mmol)，室温下加入TFA(2ml)。得到的混合物被搅拌了一夜。将反应混合物浓缩，残渣溶解在DCM(10mL)中。Na₂CO₃(10mL)被添加到溶液中,搅拌20分钟。混合物DCM(25毫升×3)萃取。合并后的有机层用盐水(25mL)洗净,干MgSO₄和集中给所需的化合物(368毫克,收率93％)作为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.39-7.36(m,3H),4.52-4.42(m,1H),3.34-3.31(m,2H),2.88-2.82(m,2H),2.46-2.35(m,2H),1.89-1.86(m,2H).

步骤19.5.合成5-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-005)

在DMF(2mL)中加入1-(哌啶-4-基)-5-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(70mg,0.25mmol)，2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(60mg,0.29mmol)和DIEA(95mg,0.74mmol)，室温下逐步加入HATU(140mg,0.368mmol)。所得混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物纯化：高效液相色谱法(Xbridge C18 5μm 19*150毫米；B,A:H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B:CH₃CN；紫外:214nm，流速:15ml/min)，得到所需化合物(37.2mg，收率32％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.94(s,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,2H),7.34(s,1H),7.31(d,J＝8.4Hz,1H),6.93(d,J＝8.4Hz,1H),4.93-4.90(m,1H),4.59-4.47(m,1H),4.10-4.06(m,1H),3.88(s,2H),3.22(t,J＝12.8Hz,1H),2.73(t,J＝12.8Hz,1H),2.32-2.21(m,1H),2.09-1.98(m,1H),1.92-1.89(m,1H),1.84-1.81(m,1H).MS(ESI)Rt＝3.296min,m/z472.1[M+H]⁺,纯度:98.62@254nm,99.24％@214nm.

实施例20.2-氧代-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(GEN1-006)

步骤20.1.合成4-((4-氰基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-006-1)

在4-氯-3-硝基苯腈(1.00g,5.50mmol)、4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.1g,5.50mmol)和K₂CO₃(1.14g,8.25mmol)的DMF(20mL)溶液中加入KI(40mg,0.275mmol)。在95℃下搅拌12小时后，将混合物冷却至室温，倒入水中(50毫升)。加入EtOAc(30x2ml)提取所需化合物。合并的有机层用盐水冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的化合物(1.7g，收率90％)作为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.52(d,J＝2.0Hz,1H),8.43(d,J＝7.6Hz,1H),7.60(dd,J＝8.8,1.6Hz,1H),6.94(d,J＝9.2Hz,1H),4.05(d,J＝12.0Hz,2H),3.73-3.70(m,1H),3.07-3.02(m,2H),2.08-2.04(m,2H),1.63-1.60(m,2H),1.55(s,9H).

步骤20.2.合成4-((4-氰基-2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-006-2)

在4-((4-氰基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(560mg,1.60mmol)和NH₄Cl(428mg,8mmol)的MeOH(5mL)溶液中加入锌粉(416mg,6.40mmol)。反应混合物在35℃下搅拌12小时。然后将反应混合物过滤，滤液浓缩得到所需的(482mg，收率94％)红色油状物。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.15(dd,J＝8.4,2.0Hz,2H),6.95(d,J＝1.6Hz,1H),6.60(d,J＝8.0Hz,1H),4.11-4.06(m,3H),3.48(s,1H),3.28(s,2H),2.96(t,J＝11.2Hz,2H),2.05-2.03(m,2H),1.49(s,9H).

步骤20.3.合成4-(5-氰基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-006-3)

在DCM(6ml)中加入4-((4-氰基-2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(482mg,1.50mmol)和NaHCO₃(639mg,1.5mmol)，加入三光气(452mg,1.50mmol)在冰浴下反应。反应混合物在室温下搅拌2小时。然后将混合物倒入水中(10ml)，用DCM(10x2ml)萃取。将合并的有机层用盐水冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的化合物(314毫克，收率60％)为灰色固体。MS(ESI):Rt＝0.32min,m/z 243.0[M+H-Boc]⁺.纯度:90％@254nm,85％@214nm.

步骤20.4.合成2-氧代-1-(哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(GEN1-006-4)

在DCM(2ml)中加入4-(5-氰基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(314mg,0.920mmol)和TFA(1mL)。反应混合物在室温下搅拌12小时。将混合物浓缩得到粗制品。加入水(2ml)，用饱和Na₂CO₃水溶液(5ml)调节pH至9。用DCM(10x 4mL)萃取混合物。将合并的有机层干燥浓缩，得到所需的产品(80毫克，收率36％)为白色固体。MS(ESI)Rt＝0.87min,m/z 243.0,[M+H]⁺.纯度:76％@254nm,81％@214nm.

步骤20.5.合成2-氧代-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(GEN1-006)

在DMF(3mL)中2-氧代-1-(哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(75mg,0.31mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(63mg,0.31mmol)和HATU(175mg,0.46mmol)溶液中加入DIEA(120mg,0.93mmol)。反应混合物在室温下搅拌12小时。用C18柱(CH₃CN:水＝5％～50％)直接纯化，得到所需的(70mg，收率:53％)黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.96(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,2H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),7.36(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.32(d,J＝1.2Hz,1H),6.93(d,J＝8.0Hz,1H),4.93-4.89(m,1H),4.53-4.44(m,1H),4.10-4.06(m,1H),3.87(s,2H),3.20(t,J＝13.6Hz,1H),2.72(t,J＝13.6Hz,1H),2.30-2.19(m,1H),2.09-1.97(m,1H),1.90-1.80(m,2H).MS(ESI),Rt＝3.748min,m/z 429.1[M+H]⁺,纯度:92.24％@254nm,95.70％@214nm.

实施例21.5-甲氧基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-007)

步骤21.1.合成4-((4-甲氧基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-007-1)

在1-氟-4-甲氧基-2-硝基苯(1.00g,5.85mmol)和4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.29g,6.43mmol)的DMSO(15ml)溶液中加入K₂CO₃(1.61g,11.7mmol)。90℃搅拌15小时后，冷却至室温，倒入100mL水中搅拌10min，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。用盐酸水溶液(1M,30mL)和盐水(30mL)冲洗合并的有机层，在Na₂SO₄上干燥，浓缩得到所需化合物(1.98g，收率97％)为红色固体。MS(ESI)Rt＝1.746min,m/z 296.1[M-t-Bu+2H]⁺,纯度:78.6％@214nm.

步骤21.2.合成4-((2-氨基-4-甲氧基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-007-2)

在4-((4-甲氧基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.95g,5.56mmol)的THF(15ml)和甲醇(15ml)溶液中加入Pd/C(10％，200mg)。将混合物在50℃氢气气球下搅拌5小时，通过硅藻土过滤。将滤液浓缩，得到所需的化合物(1.78g，收率:100％)为棕色油状物。MS(ESI)Rt＝1.598min,m/z 322.2[M+H]⁺,纯度:71.4％@214nm.

步骤21.3.合成4-(5-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-007-3)

在4-((2-氨基-4-甲氧基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.75g,5.45mmol)的DCM(50ml)溶液中加入NaHCO₃(4.58g,54.5mmol)。混合物冷却到0摄氏度。分步添加三光气(810mg,2.73mmol)。混合物在室温下搅拌了一夜。将混合物倒入水中(50毫升)，用DCM(3×20毫升)萃取。用盐水(20mL)冲洗合并的有机层，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用硅胶柱层析法(PE:EA＝2:1～1:1)对残留进行纯化，得到所需化合物(1.05g，收率56％)为黄色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ10.21-9.96(m,1H),7.01(d,J＝8.8Hz,1H),6.74(d,J＝2.0Hz,1H),6.62(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),4.50-4.41(m,1H),4.33-4.31(m,2H),3.80(s,3H),2.90-2.85(m,2H),2.35-2.24(m,2H),1.85-1.82(m,2H),1.51(s,9H).MS(ESI)Rt＝1.508min,m/z370.2[M+Na]⁺,纯度:54.9％@214nm.

步骤21.4.合成5-甲氧基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-007-4)

在DCM(2ml)中加入4-(5-甲氧基-2-氧基-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(200mg,0.58mmol)和TFA(1mL)。混合物在30℃下搅拌1小时。混合物被浓缩了。将残渣用水(2mL)稀释，加入Na₂CO₃水溶液(sat.，5mL)。用DCM:MeOH＝10:1(4×20mL)萃取混合物。混合的有机层用盐水(20毫升)冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的黄色固体(120毫克，收率85％)。MS(ESI)Rt＝0.767min,m/z 248.1[M+H]⁺,纯度:95.7％@214nm.

步骤21.5.合成5-甲氧基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-007)

在2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(109mg,0.53mmol)的DCM(2mL)溶液加入DMF(1滴)。加入SOCl₂(116mg,0.97mmol)。在20℃搅拌30分钟后，将混合物浓缩。残留是溶解在DCM(1毫升)和用于下步骤。将5-甲氧基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(120mg,0.490mmol)与DIEA(313mg,2.43mmol)在DCM(2ml)中室温搅拌5min，滴加之前的溶液。加入后的混合物在室温下搅拌2小时。将混合物倒入水中(20毫升)，用DCM(3×10毫升)萃取。将合并后的有机层用盐水(10ml)冲洗干净，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用高效液相色谱法(Xbridge C18,5um,19x 150mm,20-70％B,A:H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B:CH₃CN,uv＝214nm,F＝15mL/min)对残留进行纯化，得到所需化合物(105mg，收率50％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.53(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,2H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),6.73-6.69(m,2H),6.59-6.56(m,1H),4.88(d,J＝13.6Hz,1H),4.52-4.46(m,1H),4.05(d,J＝14.4Hz,1H),3.87(s,2H),3.79(s,3H),3.23-3.17(m,1H),2.75-2.69(m,1H),2.26-2.17(m,1H),2.04-1.95(m,1H),1.90-1.87(m,1H),1.82-1.78(m,1H).MS(ESI)m/z 434.2[M+H]⁺,Rt＝3.553min,纯度:98.6％@254nm,99.6％@214nm.

实施例22.2-氧代-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(GEN1-010)

步骤22.1.合成4-((5-氰基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-010-1)

在3-氟-4-硝基苯腈(1.0g,6.0mmol)、4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.1g,6.0mmol)和K₂CO₃(2.4g,18mmol)的DMF(15mL)混合物中加入KI(50mg,0.3mmol)。所得混合物在95℃下搅拌12小时。将混合物冷却至室温，倒入水中(50mL)，用EtOAc萃取(30×2mL)。合并的有机层用盐水冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的黄色固体(2.0g，收率95％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.27(d,J＝8.8Hz,1H),8.06(d,J＝7.6Hz,1H),7.17(d,J＝1.2Hz,1H),6.87(dd,J＝8.8,1.6Hz,1H),4.11-4.05(m,2H),3.69-3.60(m,1H),3.06(t,J＝11.2Hz,2H),2.08-2.04(m,2H),1.58-1.52(m,2H),1.48(s,9H).

步骤22.2.合成4-((2-氨基-5-氰基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-010-2)

在4-((5-氰基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.1g,3.5mmol)、NH₄Cl(910mg,17.4mmol)的MeOH(15mL)溶液中加入锌粉(905mg,13.9mmol)。反应混合物在35℃下搅拌12小时。反应混合物被过滤，滤液被浓缩成所需的(930毫克，收率93％)红色固体。MS(ESI):Rt＝1.58min,m/z 217.1,[M+H–Boc]⁺.纯度:91％@254nm,86％@214nm

步骤22.3.合成4-(6-氰基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-010-3)

在4-((2-氨基-5-氰基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg,1.58mmol)和NaHCO₃(1.32g,15.8mmol)的DCM(10ml)中于冰浴条件下分批加入三光气(469mg,1.58mmol)。反应混合物在室温下搅拌2小时。将混合物倒入10mL水中，用DCM(10×2mL)萃取。合并的有机层用盐水冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的(480毫克，收率88％)白色固体。MS(ESI):Rt＝1.48min,m/z 243.0,[M+H–Boc]⁺.纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤22.4.2-氧代-3-(哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(GEN1-010-4)

在DCM(4ml)中加入4-(6-氰基-2-氧基-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(480mg,1.40mmol)和TFA(1mL)。反应混合物在室温下搅拌12小时。将混合物浓缩，残渣溶解在水中(2毫升)。水溶液用Na₂CO₃水溶液(sat.，5ml)碱化至pH＝9,DCM(10×4ml)萃取。合并的有机层在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的白色固体(125毫克，收率37％)。MS(ESI):Rt＝0.73min m/z 243.0,[M+H]⁺.纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤22.5.合成2-氧代-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(GEN1-010)

在2-氧代-3-(哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(75mg,0.31mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(63mg,0.31mmol)和HATU(175mg,0.460mmol)的DMF(3mL)溶液中加入DIEA(120mg,0.929mmol)。反应混合物在室温下搅拌12小时。用C18柱(CH₃CN:水＝5％～50％)对混合物进行纯化，得到所需的(80mg，收率60％)白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.44(s,1H),7.73-7.68(m,3H),7.51(d,J＝8.4Hz,2H),7.44(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.11(d,J＝8.0Hz,1H),4.58(d,J＝13.6Hz,1H),4.48-4.42(m,1H),4.11(d,J＝13.2Hz,1H),3.92-3.91(m,2H),3.16(t,J＝12.8Hz,1H),2.72-2.67(m,1H),2.21-2.12(m,2H),1.72(br s,2H).MS(ESI):Rt＝3.55min,m/z 429.2[M+H]⁺,纯度:97.98％@254nm,99.10％@214nm.

实施例23.6-甲氧基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-011)

步骤23.1.合成4-((5-甲氧基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-011-1)

在DMSO(15ml)中加入2-氟-4-甲氧基-1-硝基苯(500mg,2.92mmol)和4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(702mg,3.51mmol)溶液，加入K₂CO₃(807mg,5.85mmol)。在90℃搅拌6小时后，将混合物冷却并倒入水中(100毫升)。搅拌10分钟后过滤。滤饼用水(2×20毫升)清洗，溶解于乙酸乙酯(50毫升)中。用盐酸水溶液(1M,20mL)和盐水(20mL)冲洗有机溶液，在Na₂SO₄上干燥，浓缩得到所需化合物(1.01g，收率98％)为黄色固体。¹H NMR(300MHz,CDCl₃):δ8.34(d,J＝7.2Hz,1H),8.17(d,J＝9.6Hz,1H),6.25(dd,J＝9.6,1.5Hz,1H),6.18(s,1H),4.02-3.98(m,2H),3.87(s,3H),3.66-3.58(m,1H),3.08(t,J＝11.7Hz,2H),2.08-2.04(m,2H),1.55-1.51(m,2H),1.48(s,9H).

步骤23.2.合成4-((2-氨基-5-甲氧基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-011-2)

将Pd/C(10％，200mg)加入4-((5-甲氧基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.00g,2.85mmol)的THF(5mL)和甲醇(15mL)溶液中，。将混合物在50℃氢气气球下搅拌6小时。混合物经硅藻土过滤。滤液浓缩得到所需的化合物(910毫克，收率100％)为棕色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ6.67(d,J＝8.4Hz,1H),6.25(d,J＝2.4Hz,1H),6.18(dd,J＝8.0,2.4Hz,1H),4.02-3.99(m,2H),3.75(s,3H),3.40-3.35(m,1H),2.95-2.92(m,2H),2.05-2.02(m,2H),1.47(s,9H),1.43-1.26(m,4H).

步骤23.3.合成4-(6-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-011-3)

在4-((2-氨基-5-甲氧基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(900mg,2.80mmol)的DCM(50ml)溶液中加入NaHCO₃(2.36g,28.0mmol)。混合物冷却到0摄氏度。然后加入500mg,1.68mmol的三光气。混合物在室温下搅拌了一夜。将混合物倒入水中(50毫升)，用DCM(2x30毫升)萃取。用盐水(20mL)冲洗合并的有机层，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用硅胶柱层析法(PE:EA＝1:1)对残渣进行纯化，得到粗品820mg。用C18柱层析(30～60％CH₃CN水溶液)进一步纯化，得到所需的黄色固体(510mg，收率52％)。MS(ESI)Rt＝1.532min,m/z 370.2[M+H]⁺,纯度:82.8％@214nm.

步骤23.4.合成6-甲氧基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-011-4)

在DCM(2ml)中加入4-(6-甲氧基-2-氧基-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg,1.44mmol)和TFA(1mL)。混合物在室温下搅拌3小时。然后混合物被浓缩。用5毫升水和10毫升Na₂CO₃水溶液稀释残渣。用DCM:MeOH＝10:1(4×20mL)萃取混合物。合并的有机层用盐水(30毫升)冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的(200毫克，收率56％)棕色固体。MS(ESI)Rt＝1.042min,m/z 248.1[M+H]⁺,纯度:96.1％@214nm.

步骤23.5.合成6-甲氧基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-011)

将DMF(2滴)加入2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸的DCM(3mL)溶液中，然后加入SOCl₂(193mg,1.62mmol)。在20℃搅拌30分钟后，将混合物浓缩。浓缩物溶解在DCM(1毫升)直接投入下步。将6-甲氧基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(200mg,0.81mmol)和DIEA(522mg,4.05mmol)在DCM(2mL)中室温搅拌5min，滴加之前的溶液。混合物在室温下搅拌1小时。将混合物倒入水中(20毫升)，用DCM(2x 20毫升)萃取。用盐水(20mL)冲洗合并的有机层，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用高效液相色谱法(Xbridge C18,5um,19x 150mm,20-70％B,A:H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B:CH₃CN,uv＝214nm,F＝15mL/min)对粗品进行纯化，得到所需的白色固体(135mg，收率39％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.46(s,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,2H),7.45(d,J＝8.0Hz,2H),6.97(d,J＝8.8Hz,1H),6.61(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.52(d,J＝2.4Hz,1H),4.90(d,J＝13.6Hz,1H),4.51-4.45(m,1H),4.03(d,J＝14.0Hz,1H),3.87(s,2H),3.81(s,3H),3.19(t,J＝12.0Hz,1H),2.71(t,J＝12.0Hz,1H),2.31-2.26(m 1H),2.04-2.00(m,1H),1.90-1.87(m,1H),1.79-1.72(m,1H).MS(ESI)Rt＝2.995min,m/z 434.2[M+H]⁺,纯度:99.4％@254nm,99.8％@214nm.

实施例24.7-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-013)

步骤24.1.合成4-((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-013-1)

将2-氟-1-硝基-3-(三氟甲基)苯(1.00g,4.80mmol)、4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(961mg,4.80mmol)和K₂CO₃(995mg,7.20mmol)混悬在DMF(10mL)中，在85℃下搅拌2小时。冷却到室温后,反应混合物注入水(50毫升)并用EA提取(25毫升×3)。合并后的有机层是用水洗(25毫升),盐水(25毫升),MgSO₄干燥浓缩得所需的化合物(1.86g,收率100％)为一个黄色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.08(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.78(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),6.96(t,J＝8.0Hz,1H),5.93(d,J＝9.6Hz,1H),4.10-3.93(m,2H),3.46-3.36(m,1H),2.84-2.78(m,2H),1.94-1.91(m,2H),1.45(s,9H),1.39-1.29(m,2H).

步骤24.2.合成4-((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-013-2)

将Pd/C(10％，186mg)在N₂气氛下加入4-((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.86g,4.78mmol)的甲醇(20mL)溶液中。得到的混合物由H₂脱气，并在35℃的氢气气氛下搅拌过夜。对反应混合物进行过滤，滤液浓缩得到所需要的化合物(1.66g，收率97％)为棕色油状物。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ6.97(dd,J＝7.6,1.6Hz,1H),6.92(t,J＝8.0Hz,1H),6.86(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),4.11(br s,2H),3.88(s,2H),3.38-3.24(m,2H),2.73-2.66(m,2H),1.84-1.81(m,2H),1.46(s,9H),1.40-1.31(m,2H).

步骤24.3.合成4-(2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-013-3)

在7℃下DCM(25ml)中的4-((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg,1.39mmol)和NaHCO₃(584mg,6.95mmol)悬浮液中加入三光气(206mg,0.694mmol)。混合物搅拌了2小时。将反应混合物倒入水中(50mL)，用DCM(25mL×3)萃取，混合后的有机层用盐水(25mL)冲洗，在MgSO₄上干燥，浓缩得到所需化合物(510mg，收率95％)为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ10.16(s,1H),7.40(d,J＝8.0Hz,1H),7.30(d,J＝7.6Hz,1H),7.14(t,J＝8.0Hz,1H),4.42-4.25(m,3H),2.82-2.70(m,4H),1.76-1.73(m,2H),1.50(s,9H).

步骤24.4.合成1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-013-4)

在DCM(6ml)中加入4-(2-氧-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(510mg,1.32mmol)，室温下加入TFA(2ml)。混合物在室温下搅拌了一夜。将反应混合物浓缩，残渣溶解在DCM(10ml)中。向溶液中加入Na₂CO₃(sat.，10mL)，搅拌20分钟。混合物过滤，滤饼干燥，得到所需的化合物(340mg，收率67％)为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.41(br s,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,1H),7.31(d,J＝7.2Hz,1H),7.18(t,J＝8.0Hz,1H),4.29-4.18(m,1H),3.43-3.40(m,2H),2.97-2.80(m,4H),1.88-1.85(m,2H).MS(ESI)Rt＝1.50min,m/z 286.3[M+H]⁺,纯度:98％@254nm,100％@214nm.

步骤24.5.合成7-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-013)

在DMF(2mL)中加入1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(70mg,0.25mmol)，2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(60mg,0.29mmol)和DIEA(95mg,0.74mmol)，室温下逐步加入HATU(140mg,0.368mmol)。所得混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物经C18(CH₃CN:water＝5％～50％)纯化得到所需化合物(53.1mg，收率46％)为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.66(s,1H),7.60(d,J＝8.0Hz,2H),7.42-7.40(m,3H),7.28-7.26(m,1H),7.15(t,J＝8.0Hz,1H),4.91-4.88(m,1H),4.47-4.40(m,1H),4.05-4.02(m,1H),3.85(s,2H),3.13-3.06(m,1H),2.82-2.60(m,3H),1.85-1.80(m,2H).MS(ESI)Rt＝3.437min,m/z 472.2[M+H]⁺,纯度:94.12％@254nm,99.57％@214nm.

实施例25.2-氧代-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-甲腈(GEN1-014)

步骤25.1.合成4-((2-氰基-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-014-1)

2-氯-3-硝基苯腈(875mg,4.80mmol)、4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(958mg,4.80mmol)和K₂CO₃(993mg,7.18mmol)，KI(50mg,0.30mmol)加入DMF(15mL)中。得到的混合物在95℃下搅拌12小时。将混合物冷却至室温，倒入水中(50mL)，用EtOAc萃取(30×2mL)。有机层用盐水冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的(1.3g，收率81％)黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.46(d,J＝8.4Hz,1H),8.41(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.75(dd,J＝7.6,2.0Hz,1H),6.78-6.74(m,1H),4.56-4.51(m,1H),4.08-4.05(m,2H),3.04(t,J＝11.6Hz,2H),2.17-2.13(m,2H),1.55-1.51(m,2H),1.47(s,9H).

步骤25.2.合成4-((2-氨基-6-氰基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-014-2)

在4-((2-氰基-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.3g,3.8mmol)和NH₄Cl(0.81g,15mmol)的MeOH(15mL)溶液中中加入Zn粉(0.73g,11mmol)。反应混合物在35℃下搅拌12小时。将反应混合物过滤，滤液浓缩得到所需的(900毫克，收率76％)红色油状物。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ6.98-6.95(m,1H),6.90-6.88(m,2H),4.23-4.00(m,2H),3.84(s,2H),3.43-3.31(m,2H),2.77(t,J＝12.4Hz,2H),1.93-1.90(m,2H),1.46(s,9H),1.43-1.36(m,2H).

步骤25.3.合成4-(7-氰基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-014-3)

在DCM(12ml)中加入4-((2-氨基-6-氰基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(900mg,2.85mmol)和NaHCO₃(2.40g,28.5mmol)，然后在冰浴条件下加入三光气(592mg,2.28mmol)。反应混合物在室温下搅拌2小时。将混合物倒入10mL水中，用DCM(10×2mL)萃取。有机层用盐水冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的黄色固体(680毫克，收率70％)。MS(ESI):Rt＝1.69min,m/z 243.2[M+H–Boc]⁺.纯度:100％@254nm,94％@214nm.

步骤25.4.合成2-氧代-3-(哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-甲腈(GEN1-014-4)

在DCM(10ml)中加入4-(7-氰基-2-氧基-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(680mg,2.09mmol)和TFA(5mL)。反应混合物在室温下搅拌12小时。混合物被浓缩以得到粗品。粗品溶于水(2ml)，用Na₂CO₃水溶液(sat.5mL)碱化至pH＝9。用DCM(10×4mL)萃取。将合并的有机层干燥浓缩，得到所需的(170毫克，收率36％)灰色固体。MS(ESI):Rt＝1.10min,m/z 243.1,[M+H]⁺.纯度:100％@254nm,98％@214nm.

步骤25.5.合成2-氧代-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-甲腈(GEN1-014)

在DMF(3mL)中2-氧代-3-(哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-甲腈(80mg,0.33mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(67mg,0.33mmol)和HATU(190mg,0.50mmol)溶液中加入DIEA(129mg,0.998mmol)。反应混合物在室温下搅拌12小时。用C18柱(CH₃CN:水＝5％～50％)对混合物进行纯化，得到所需化合物(80mg，收率:57％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.79(s,1H),7.59(d,J＝8.0Hz,2H),7.40(d,J＝7.6Hz,2H),7.35(d,J＝7.6Hz,1H),7.29-7.26(m,1H),7.15(t,J＝8.0Hz,1H),4.93(t,J＝14.4Hz,2H),4.05(d,J＝13.6Hz,1H),3.86(s,2H),3.23(t,J＝12.4Hz,1H),2.79-2.69(m,2H),2.69-2.58(m,1H),1.97-1.94(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.71min,m/z 403.2,[M+H]⁺,纯度:96.17％@254nm,93.93％@214nm.

实施例26.7-甲氧基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-015)

步骤26.1.合成4-((2-甲氧基-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-015-1)

向2-氯-1-甲氧基-3-硝基苯(1.50g,7.98mmol)和4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.79g,23.9mmol)的DMSO(25mL)溶液中加入K₂CO₃(3.30g,23.9mmol)。在140℃下搅拌过夜，冷却后倒入150mL的水中搅拌10分钟，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。用盐水(20mL)冲洗合并的有机层，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用硅胶柱层析法(PE:EA＝20:1～10:1)对产物进行纯化，得到所需化合物(788mg，收率28％)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃):δ7.74(d,J＝8.7Hz,1H),7.51(d,J＝8.4Hz,1H),6.95(d,J＝8.1Hz,1H),6.71(t,J＝8.4Hz,1H),4.14-4.08(m,1H),3.99-3.95(m,2H),3.88(s,3H),2.93(t,J＝8.7Hz,2H),1.96-1.93(m,2H),1.46(s,9H),1.43-1.34(m,2H).

步骤26.2.合成4-((2-氨基-6-甲氧基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-015-2)

在甲醇(15ml)中加入4-((2-甲氧基-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.15g,3.28mmol)，Pd/C(10％，100mg)。混合物在40℃氢气气球下搅拌5小时。混合物经硅藻土过滤。滤液浓缩后，用硅胶柱层析法(PE:EA＝10:1～5:1)纯化残渣，得到所需化合物(500mg，收率48％)为黄色油状物。MS(ESI)Rt＝1.536min,m/z 322.2[M+H]⁺,纯度:47.9％@214nm.

步骤26.3.合成4-(7-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-015-3)

将4-((2-氨基-6-甲氧基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg,1.56mmol)与三乙胺(1.57g,15.6mmol)分别置于THF(30mL)中，冷却至0℃。分批添加三光气(463mg,1.56mmol)。混合物在室温下搅拌了一夜。将混合物浓缩，用乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)稀释残留物。加入乙酸乙酯(3×20mL)提取所需化合物。用盐水(20mL)冲洗合并的有机层，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用C18柱层析法(50～70％CH₃CN水溶液)对残留物进行纯化，得到所需化合物(150mg，收率28％)为黄色固体。MS(ESI)Rt＝1.650min,m/z 370.2[M+Na]⁺,纯度:99.1％@214nm.

步骤26.4.合成7-甲氧基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-015-4)

在DCM(4ml)中加入4-(7-甲氧基-2-氧基-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(150mg,0.430mmol)和TFA(2mL)。混合物在室温下搅拌3小时。混合物浓缩后用DCM(10ml)和Na₂CO₃水溶液(sat.，10ml)稀释残渣。用DCM(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水冲洗(20毫升)，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的化合物(80毫克，收率75％)，形成黄色固体。MS(ESI)Rt＝1.101min,m/z 248.1[M+H]⁺,纯度:94.5％@214nm.

步骤26.5.合成7-甲氧基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-015)

在2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(73mg,0.36mmol)的DCM(1mL)溶液中加入DMF(1滴)。加入SOCl₂(96mg,0.81mmol)。在室温下搅拌30分钟后，将混合物浓缩。残留物溶解在DCM(1毫升)用于下步。将7-甲氧基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(80mg,0.32mmol)与DIEA(209mg,1.62mmol)在DCM(4ml)中室温搅拌5min，滴加之前的溶液。混合物在室温下搅拌1小时。将混合物倒入水中(10ml)，用DCM(20ml)萃取。有机层在Na₂SO₄上干燥并浓缩。采用高效液相色谱法(Xbridge C18,5um,19x 150mm,20-70％B,A:H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B:CH₃CN,uv＝214nm,F＝15mL/min)对残留进行纯化，得到所需化合物(50mg，收率36％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.63(br s,1H),7.61(d,J＝8.0Hz,2H),7.45(d,J＝7.6Hz,2H),7.01(t,J＝8.0Hz,1H),6.72(d,J＝8.0Hz,1H),6.63(d,J＝8.0Hz,1H),4.87-4.81(m,2H),4.05(d,J＝14.0Hz,1H),3.84(s,2H),3.74(s,3H),3.18(t,J＝12.4Hz,1H),2.70(td,J＝13.2,2.0Hz,1H),2.47-2.41(m,2H),1.83-1.81(m,2H).MS(ESI)Rt＝3.174min,m/z 434.2[M+H]⁺,纯度:98.9％@254nm,99.7％@214nm.

实施例27.1-(1-(4-(三氟甲基)苯甲酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-017)

步骤27.1.合成1-(1-(4-(三氟甲基)苯甲酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-017)

在DMF(3mL)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(114mg,0.526mmol)，4-(三氟甲基)苯甲酸(100mg,0.562mmol)，HATU(300mg,0.843mmol)，DIEA(217mg,1.69mmol)。反应混合物在室温下搅拌12小时。用C18柱(CH₃CN:水＝5％～50％)直接纯化混合物，得到所需化合物(100mg，收率50％)为灰色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.87(s,1H),7.84(d,J＝8.0Hz,2H),7.70(d,J＝8.0Hz,2H),7.38-7.36(m,1H),7.03-6.98(m,3H),4.70-4.67(m,1H),4.51-4.45(m,1H),3.61-3.59(m,1H),3.28-3.21(m,1H),3.02-2.89(m,1H),2.37-2.27(m,2H),1.83-1.65(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.647min,m/z 390.1[M+H]⁺,纯度:99.21％@254nm,99.95％@214nm.

实施例28.1-(1-(3-(4-(三氟甲基)苯基)丙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-018)

步骤28.1.合成1-(1-(3-(4-(三氟甲基)苯基)丙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-018)

在DMF(3mL)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(100mg,0.460mmol)，3-(4-(三氟甲基)苯基)丙酸(100mg,0.460mmol)和HATU(262mg,0.690mmol)，DIEA(177mg,1.37mmol)。反应混合物在室温下搅拌12小时。用C18柱(CH₃CN:水＝5％～50％)直接纯化混合物，得到所需化合物(100mg，收率50％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.85(s,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,2H),7.52(d,J＝8.0Hz,2H),7.21-7.19(m,1H),6.97-6.96(m,3H),4.58(d,J＝12.8Hz,1H),4.44-4.37(m,1H),4.04(d,J＝12.8Hz,1H),3.13(t,J＝13.2Hz,1H),2.97-2.93(m,2H),2.73-2.71(m,2H),2.70-2.63(m,1H),2.20-2.06(m,2H),1.71-1.68(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.748min,m/z 418.2[M+H]⁺,纯度:98.23％@254nm,99.39％@214nm.

实施例29.1-甲基-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-020)

步骤29.1.合成4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-020-1)

将1-氟-2-硝基苯(3.50g,25.0mmol)、4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.0g,25mmol)、K₂CO₃(5.1g,37mmol)和KI(42mg,0.25mmol)混悬液在DMF(35mL)中，在80℃下搅拌过夜。冷却到室温后,反应混合物注入水(200毫升)和用EtOAc(70毫升×3)提取。合并后的有机层用水洗(70毫升),盐水(70毫升),经MgSO₄干燥浓缩得所需的化合物(7.2g,收率90％)为橙色油状物。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.18(dd,J＝8.8,1.2Hz,1H),8.10(d,J＝7.2Hz,1H),7.45-7.41(m,1H),6.87(d,J＝8.8Hz,1H),6.67-6.63(m,1H),4.09-3.94(m,2H),3.74-3.64(m,1H),3.08-3.03(m,2H),2.08-2.05(m,2H),1.61-1.51(m,2H),1.48(s,9H).

步骤29.2.合成4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-020-2)

将4-叔丁基((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸酯(7.20g,220mmol)溶于甲醇(40mL)中，在氮气气氛下，加入Pd/C(10％，720mg)。得到的混合物经H₂脱气，并在H₂气氛下在35℃下搅拌过夜。将反应混合物过滤，滤液浓缩，得到所需化合物(6.5g，收率100％)为棕色油状物。MS(ESI)Rt＝1.81min,m/z 292.1,纯度:98％@254nm,93％@214nm.

步骤29.3.合成4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-020-3)

将DCM(5ml)中4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg,1.72mmol)和NaHCO₃(1.44g,17.2mmol)悬浮液于冰浴条件下分批加入三光气(510mg,1.72mmol)。室温搅拌过夜后，将反应混合物倒入水中(50mL)，用DCM(30mL×3)萃取，混合后的有机层用盐水(30mL)冲洗，在MgSO₄上干燥后浓缩。粗品经硅胶柱层析(DCM:MeOH＝50:1)纯化得到所需化合物(360mg，收率66％)为粉红色固体。¹HNMR(300MHz,CDCl₃):δ9.50(s,1H),7.19-7.08(m,4H),4.60-4.47(m,1H),4.43-4.23(m,2H),2.96-2.87(m,2H),2.45-2.31(m,2H),1.90-1.86(m,2H),1.55(s,9H).

步骤29.4.合成4-(3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-020-4)

在4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(100mg,0.315mmol)的DMF(2mL)中于冰浴和氮气气氛下加入NaH(60％，矿油中25mg,0.63mmol)。混合物搅拌15min后，在冰浴下滴加CH₃I(50mg,0.35mmol)。然后将得到的混合物在室温下搅拌1.5小时。将反应混合物倒入水中(30ml)，用EtOAc萃取(20ml×3)，将合并的有机层用水(30ml)、盐水(30ml)冲洗干净，在MgSO₄上干燥，浓缩得到所需的化合物(130mg，粗品)为黄色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.13-7.04(m,3H),7.00-6.98(m,1H),4.53-4.44(m,1H),4.38-4.22(m,2H),3.41(s,3H),2.92-2.79(m,2H),2.37-2.26(m,2H),1.82-1.79(m,2H),1.50(s,9H).

步骤29.5.合成1-甲基-3-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-020-5)

在4-(3-甲基-2-氧-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(130mg,0.315mmol)的DCM(3ml)溶液中室温下加入TFA(1ml)。混合物搅拌了一夜。将反应混合物浓缩，残渣溶解于DCM(15ml)中。Na₂CO₃(饱和溶液15毫升)被添加到溶液中，混合搅拌20分钟。混合物提取DCM(15毫升×2)萃取。合并后的有机层MgSO₄干燥浓缩得所需的化合物(70毫克,收率96％,最后两步)为一种白色固体。MS(ESI)Rt＝1.12min,m/z 232.2[M+H]⁺,纯度:98％@254nm,98％@214nm.

步骤29.6.合成1-甲基-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-020)

在DMF(2mL)中加入1-甲基-3-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(70mg,0.30mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(74mg,0.36mmol)和DIEA(117mg,0.909mmol)，室温下加入HATU(173mg,0.455mmol)。所得混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物经C18柱(CH₃CN:water＝5％～45％)直接纯化得到所需化合物(53.3mg，收率42％)为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ7.63(d,J＝8.0Hz,2H),7.45(d,J＝8.0Hz,2H),7.10(t,J＝7.6Hz,1H),7.03(t,J＝7.6Hz,1H),6.99(t,J＝8.0Hz,1H),6.86(t,J＝8.0Hz,1H),4.89-4.86(m,1H),4.59-4.49(m,1H),4.06-4.02(m,1H),3.86(s,2H),3.40(s,3H),3.23-3.16(m,1H),2.75-2.68(m,1H),2.31-2.20(m,1H),2.09-1.98(m,1H),1.88-1.85(m,1H),1.80-1.76(m,1H).MS(ESI)Rt＝3.629min,m/z 418.1[M+H]⁺,纯度:91.32％@254nm,99.57％@214nm.

实施例30.顺式-N-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环己基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(GEN1-021)

步骤30.1.合成顺式-(4-((2-硝基苯基)氨基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(GEN1-021-1)

在1-氟-2-硝基苯(500mg,3.55mmol)和顺式(4-氨基环己基)氨基甲酸叔丁酯(911mg,4.26mmol)的DMF(15ml)溶液中加入K₂CO₃(734mg,5.32mmol)。90℃搅拌2小时后冷却，倒入60ml水中搅拌10分钟后过滤。滤饼用水(2x 10毫升)清洗，然后溶解在乙酸乙酯(50毫升)中。有机溶液在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的化合物(1.15g，收率97％)为橙色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.31-8.29(m,1H),8.19-8.17(m,1H),7.44-7.40(m,1H),6.85(d,J＝8.4Hz,1H),6.65-6.61(m,1H),4.58(br s,1H),3.76(br s,1H),3.63(s,1H),1.86-1.82(m,6H),1.60-1.52(m,2H),1.45(s,9H).

步骤30.2.合成顺式-(4-((2-氨基苯基)氨基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(GEN1-021-2)

将顺式(4-((2-硝基苯基)氨基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(500mg,1.49mmol)溶于甲醇(15mL)中，加入Pd/C(10％，50mg)。将混合物在30℃氢气气球下搅拌5小时。混合物经硅藻土过滤。滤液浓缩后得到所需的化合物(450毫克，收率99％)为棕色油状物。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ6.83-6.79(m,1H),6.74-6.72(m,1H),6.69-6.65(m,2H),4.58(br s,1H),3.65(br s,1H),3.44(s,1H),3.31(br s,2H),1.85-1.72(m,4H),1.67-1.61(m,4H),1.45(s,9H).

步骤30.3.合成顺式(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(GEN1-021-3)

在顺式(4-((2-氨基苯基)氨基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(450mg,1.48mmol)的DCM(50mL)溶液中加入NaHCO₃(1.24g,14.8mmol)。混合物冷却到5摄氏度。分步添加三光气(438mg,1.48mmol)。混合物在室温下搅拌5小时。将混合物倒入水中(50毫升)，用DCM(2×20毫升)萃取。用盐水(20mL)冲洗合并的有机层，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用C18柱层析(40～70％CH₃CN in water)纯化残渣，得到所需化合物(310mg，收率64％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.19(br s,1H),7.11-7.06(m,4H),4.99(d,J＝8.8Hz,1H),4.19(br s,1H),3.93(s,1H),2.43-2.33(m,2H),2.05-2.01(m,2H),1.78-1.68(m,4H),1.50(s,9H).

步骤30.4.合成顺式-1-(4-氨基环己基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-021-4)

在DCM(4ml)中加入顺式(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.91mmol)和TFA(2ml)。混合物在室温下搅拌3小时。混合物被浓缩了。用DCM(10ml)和Na₂CO₃水溶液(sat.，5mL)稀释残渣。用DCM(2×20mL)萃取。混合的有机层用盐水(5毫升)冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的化合物(130毫克，收率62％)黄色固体。MS(ESI)Rt＝1.14min,m/z 232.1[M+H]⁺,纯度:96.5％@214nm.

步骤30.5.合成顺式-N-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环己基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(GEN1-021)

在DCM(1ml)中加入2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(74mg,0.36mmol)的混合物DMF(1滴)。加入SOCl₂(82mg,0.69mmol)。在20℃搅拌20分钟后，将混合物浓缩。残留物溶解在DCM(1毫升)用于下步。将顺-1-(4-氨基环己基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(80mg,0.35mmol)与DIEA(223mg,1.73mmol)在DCM(4mL)中室温搅拌10min，滴加之前的溶液。混合物在室温下搅拌1小时。将混合物倒入水中(20毫升)，用DCM(2x 20毫升)萃取。用盐水(20mL)冲洗合并的有机层，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用高效液相色谱法(Xbridge C18,5um,19x 150mm,30-60％B,A:H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B:CH₃CN,uv＝214nm,F＝15mL/min)对残留物进行纯化，得到所需化合物(30mg，收率:21％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ10.83(s,1H),8.26(d,J＝6.0Hz,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.56(d,J＝8.0Hz,2H),7.33-7.32(m,1H),7.04-6.94(m,3H),4.22-4.16(m,1H),3.91(br s,1H),3.68(s,2H),2.38-2.27(m,2H),1.92-1.89(m,2H),1.68-1.60(m,2H),1.52-1.49(m,2H).MS(ESI)Rt＝3.826min,m/z 418.1[M+H]⁺,纯度:95.6％@254nm,99.3％@214nm.

实施例31.反式-N-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环己基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(GEN1-022)

步骤31.1.合成反式(4-((2-硝基苯基)氨基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(GEN1-022-1)

在1-氟-2-硝基苯(500mg,3.55mmol)和反式(4-氨基环己基)氨基甲酸叔丁酯(911mg,4.26mmol)的DMF(15ml)溶液中加入K₂CO₃(734mg,5.32mmol)。90℃搅拌2小时后冷却，倒入60ml水中搅拌10分钟，过滤。滤饼溶于乙酸乙酯(50mL)中。用盐酸水溶液(0.5M,2x10ml)、盐水(20ml)冲洗有机溶液，在Na₂SO₄上干燥浓缩。用石油醚(10mL)研磨，得到了理想的黄色固体(1.02g，收率86％)MS(ESI)Rt＝1.869min,m/z 336.2[M+H]⁺,纯度:98.4％@214nm.

步骤31.2.合成反式(4-((2-氨基苯基)氨基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(GEN1-022-2)

将反式(4-((2-硝基苯基)氨基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(500mg,1.49mmol)溶于甲醇(15mL)中，加入Pd/C(10％，50mg)。将混合物在30℃氢气气球下搅拌5小时。混合物经硅藻土过滤。滤液浓缩得到所需的化合物(450毫克，收率99％)为棕色固体。MS(ESI)Rt＝1.677min,m/z 306.2[M+H]⁺,纯度:93.5％@214nm.

步骤31.3.合成反式(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(GEN1-022-3)

在反式(4-((2-氨基苯基)氨基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(450mg,1.48mmol)的DCM(50ml)中溶液中加入NaHCO₃(1.24g,14.8mmol)。混合物冷却到5摄氏度。分步添加三光气(438mg,1.48mmol)。混合物在室温下搅拌了一夜。将混合物倒入水中(60mL)，用DCM:CH₃OH＝10:1(3x 30mL)萃取。将合并的有机层用水(20毫升)冲洗干净，在Na₂SO₄上干燥并浓缩。用PE:EA＝1:1(10mL)对残渣进行研磨，得到所需化合物(410mg，收率84％)为粉色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.80(br s,1H),7.32-7.30(m,1H),6.99-6.92(m,3H),6.78(d,J＝7.6Hz,1H),4.14-4.07(m,1H),3.47-3.33(m,1H),2.26-2.16(m,2H),1.99-1.89(m,2H),1.68-1.65(m,2H),1.40(s,9H),1.37-1.30(m,2H).

步骤31.4.合成反式-1-(4-氨基环己基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-022-4)

在DCM(4ml)中加入反式(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(400mg,1.21mmol)和TFA(2ml)。混合物在室温下搅拌3小时。混合物被浓缩了。用DCM(10ml)和Na₂CO₃水溶液(sat.，10ml)稀释残渣。用DCM:CH₃OH＝10:1(3×30mL)萃取混合物，合并有机层浓缩。将残渣溶解于DCM(50mL)中进行过滤。滤液浓缩后得到所需化合物(150毫克，收率54％)为黄色固体。MS(ESI)Rt＝1.051min,m/z 232.1[M+H]⁺,纯度:88.9％@214nm.

步骤31.5.合成反式-N-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环己基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(GEN1-022)

将(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(46mg,0.23mmol)和DMF(1滴)加入DCM(1mL)中。加入SOCl₂(52mg,0.43mmol)。在20℃搅拌20分钟后，将混合物浓缩。残留物溶解在DCM(1毫升)用于下步。将反式1-(4-氨基环己基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(50mg,0.22mmol)与DIEA(140mg,1.08mmol)在DCM(4mL)中室温搅拌10min，滴加之前的溶液。混合物在室温下搅拌3小时。将混合物倒入水中(20mL)，用DCM:CH₃OH＝10:1(2x 20mL)萃取。将混合后的有机层用盐水(20毫升)冲洗并浓缩。采用高效液相色谱法(Xbridge C18,5um,19x 150mm,30-60％B,A:H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B:CH₃CN,uv＝214nm,F＝15mL/min)对残留进行纯化，得到所需化合物(15mg，收率17％)为白色固体。H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.80(s,1H),8.12(d,J＝7.6Hz,1H),7.67(d,J＝8.4Hz,2H),7.59(d,J＝8.0Hz,2H),7.36-7.30(m,1H),6.97-6.95(m,3H),4.22-4.13(m,1H),3.76-3.64(m,1H),3.52(s,2H),2.29-2.19(m,2H),1.95-1.92(m,2H),1.70-1.68(m,2H),1.43-1.33(m,2H).MS(ESI)Rt＝3.376min,m/z 418.1[M+H]⁺,纯度:95.1％@254nm,98.6％@214nm.

实施例32.1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)氮杂环丁烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-023)

步骤32.1.合成3-((2-硝基苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(GEN1-023-1)

将1-氟-2-硝基苯(1.0g,7.1mmol)、3-氨基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(1.3g,7.8mmol)和K₂CO₃(1.9g,14mmol)，KI(40mg,0.28mmol)加入DMF(20mL)。95℃搅拌12小时后，冷却至室温，倒入50mL水，用EtOAc萃取(30×2mL)。将合并的有机层用盐水冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的(2.1g，收率97％)黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.22-8.20(m,2H),7.46(t,J＝7.2Hz,1H),6.76(t,J＝7.2Hz,1H),6.53(d,J＝8.4Hz,1H),4.40-4.33(m,3H),3.90-3.87(m,2H),1.43(s,9H).

步骤32.2.合成3-((2-氨基苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(GEN1-023-2)

在3-((2-硝基苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(1.0g,3.4mmol)和NH₄Cl(890mg,17.1mmol)的MeOH(15mL)溶液中加入Zn粉(890mg,13.7mmol)。反应混合物在35℃下搅拌12小时。反应混合物被过滤，滤液被浓缩成所需的(600毫克，收率67％)红色固体。MS(ESI):Rt＝1.54min,m/z 164.0,[M+H–Boc]⁺.纯度:95％@254nm,98％@214nm.

步骤32.3.合成3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(GEN1-023-3)

在3-((2-氨基苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(600mg,2.30mmol)和NaHCO₃(1.9g,2.3mmol)的DCM(10ml)混合物中，冰浴下添加三光气(541mg,1.80mmol)。反应混合物在室温下搅拌2小时。将混合物倒入10mL水中，用DCM(10×2mL)萃取。合并的有机层用盐水冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的(598毫克，收率91％)红色固体。MS(ESI):Rt＝1.55min,m/z 234.1,[M+2H–t-Bu]⁺.纯度:100％@254nm,88％@214nm.

步骤32.4.合成1-(氮杂环丁-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-023-4)

在DCM(4ml)中加入3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(598mg,2.07mmol)和TFA(1ml)。反应混合物在室温下搅拌12小时。混合物被浓缩以得到粗品。粗品溶于水(2ml)，用Na₂CO₃水溶液(sat.，5ml)碱化至pH＝9。用DCM(10×4mL)萃取。合并的有机层在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的(352毫克，收率90％)白色固体。MS(ESI):Rt＝0.39min,m/z 190.0,[M+H]⁺.纯度:95％@254nm,90％@214nm.

步骤32.5.合成1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-023)

在DMF(1.5mL)中加入1-(氮杂环丁-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(75mg,0.40mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(81mg,0.40mmol)和HATU(227mg,0.597mmol)，DIEA(154mg,1.20mmol)。反应混合物在室温下搅拌12小时。用C18柱(CH₃CN:水＝5％～50％)对混合物进行纯化，得到所需的(30mg，收率20％)白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.83(s,1H),7.62(d,J＝7.6Hz,2H),7.48(d,J＝8.4Hz,2H),7.13-7.08(m,2H),7.01-6.94(m,2H),5.37-5.33(m,1H),4.72-4.69(m,1H),4.60-4.54(m,2H),4.54-4.47(m,1H),3.65(s,2H).MS(ESI):Rt＝3.45min,m/z 376.2[M+H]⁺,纯度:95.48％@254nm,99.19％@214nm.

实施例33.1-(1-(2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-027)

步骤33.1.合成1-(1-(2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-027)

在DMF(2mL)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(60mg,0.28mmol)，2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙酸(64mg,0.31mmol)，DIEA(109mg,0.844mmol)，室温下加入HATU(160mg,0.421mmol)。所得混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物经C18柱(CH₃CN:water＝5％～45％)直接纯化得到所需化合物(65.5mg，收率58％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.85(s,1H),8.66(s,1H),7.97(d,J＝8.0Hz,1H),7.88(d,J＝7.6Hz,1H),7.20-7.18(m,1H),7.01-6.93(m,3H),4.86-4.55(m,1H),4.49-4.41(m,1H),4.19-4.16(m,1H),4.00(dd,J＝22.0,16.0Hz,2H),3.28-3.22(m,1H),2.77-2.71(m,1H),2.34-2.23(m,1H),2.20-2.09(m,1H),1.78-1.71(m,2H).MS(ESI)Rt＝3.236min,m/z 405.2[M+H]⁺,纯度:98.70％@254nm,99.59％@214nm.

实施例34.1-(1-(2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-028)

步骤34.1.合成1-(1-(2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-028)

在DMF(1.5mL)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(60mg,0.28mmol)，2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酸(64mg,0.31mmol)，DIEA(109mg,0.844mmol)，室温下加入HATU(160mg,0.421mmol)。所得混合物在室温下搅拌1小时。反应混合物经C18柱(CH₃CN:水＝5％～45％)直接纯化得到所需化合物(20.4mg，收率18％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.46(s,1H),8.83(s,1H),7.95(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.57(d,J＝8.4Hz,1H),7.11-6.99(m,4H),4.89-4.86(m,1H),4.62-4.53(m,1H),4.34-4.30(m,1H),4.14(d,J＝14.4Hz,1H),4.04(d,J＝14.4Hz,1H),3.29-3.22(m,1H),2.78-2.71(m,1H),2.37-2.25(m,2H),1.92-1.89(m,2H).MS(ESI)Rt＝3.048min,m/z 405.2[M+H]⁺,纯度:98.20％@254nm,99.61％@214nm.

实施例35.1-(1-(2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-029)

步骤35.1.合成1-(1-(2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-029)

在DMF(3mL)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(106mg,0.490mmol)，2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸(100mg,0.490mmol)和HATU(280mg,0.735mmol)，DIEA(190mg,1.47mmol)。反应混合物在室温下搅拌12小时。用C18柱(CH₃CN:水＝5％～50％)直接纯化混合物，得到所需化合物(100mg，收率49％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.58(s,1H),7.59-7.48(m,4H),7.07-7.01(m,3H),6.90-6.88(m,1H),4.90(d,J＝13.2Hz,1H),4.57-4.50(m,1H),4.05(d,J＝14.8Hz,1H),3.87(s,2H),3.24-3.18(m,1H),2.76-2.70(m,1H),2.30-2.26(m,1H),2.05-2.01(m,1H),1.90(d,J＝11.6Hz,1H),1.81(d,J＝11.6Hz,1H).MS(ESI):Rt＝3.573min,m/z 404.2[M+H]⁺,纯度:97.12％@254nm,99.27％@214nm.

实施例36.1-(1-(2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-030)

步骤36.1.合成1-(1-(2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-030)

在DMF(3mL)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(106mg,0.490mmol)，2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酸(100mg,0.490mmol)，HATU(280mg,0.735mmol)，DIEA(190mg,1.47mmol)。反应混合物在室温下搅拌12小时。用C18柱(CH₃CN:水＝5％～50％)对混合物进行纯化，得到所需化合物(100mg，收率49％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.91(s,1H),7.67(d,J＝7.2Hz,1H),7.60-7.56(m,1H),7.46(d,J＝8.0Hz,1H),7.42-7.38(m,1H),7.09-7.05(m,4H),4.91(d,J＝12.8Hz,1H),4.59-4.53(m,1H),4.06-4.02(m,2H),3.92-3.88(m,1H),3.22(t,J＝11.6Hz,1H),2.75(t,J＝11.6Hz,1H),2.37-2.22(m,2H),1.93-1.85(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.546min纯度,m/z 404.2[M+H]⁺,93.25％@254nm,99.04％@214nm.

实施例37.1-(1-(2-(4-(叔丁基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-031)

步骤37.1.合成1-(1-(2-(4-(叔丁基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-031)

在DMF(2mL)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(60mg,0.28mmol)，2-(4-(叔丁基)苯基)乙酸(54mg,0.28mmol)，DIEA(109mg,0.844mmol)，室温下加入HATU(160mg,0.421mmol)。所得混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物经C18柱(CH₃CN:水＝5％～45％)直接纯化得到所需化合物(24mg，收率22％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.95(s,1H),7.40-7.38(m,2H),7.27-7.25(m,2H),7.08-6.99(m,3H),6.90-6.88(m,1H),4.91-4.88(m,1H),4.57-4.48(m,1H),4.09-4.06(m,1H),3.79(s,2H),3.18-3.11(m,1H),2.73-2.65(m,1H),2.30-2.19(m,1H),1.94-1.84(m,2H),1.73-1.69(m,1H),1.29(s,9H).MS(ESI)Rt＝2.519min,m/z 392.2[M+H]⁺,纯度:71.40％@254nm,97.55％@214nm.

实施例38.1-(1-(2-(4-环丙基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-032)

步骤38.1.合成1-(1-(2-(4-环丙基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-032)

1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮盐酸盐(100毫克,0.390mmol)和DIEA(152毫克,1.18mmol)在DMF(1毫升)在室温下搅拌20分钟。溶液直接用于下步。在2-(4-环丙基苯基)乙酸(76mg,0.43mmol)和DIEA(102mg,0.79mmol)的DMF(2mL)溶液中加入HATU(224mg,0.59mmol)。在室温下搅拌20分钟后，加入之前的溶液。混合物在室温下搅拌1小时。然后将混合物倒入15毫升的水中，用乙酸乙酯(2×20毫升)萃取。用盐水(20mL)冲洗合并的有机层，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用高效液相色谱法(Xbridge C18,5um,19x 150mm,30-60％B,A:H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B:CH₃CN,uv＝214nm,F＝15mL/min)对残留物进行纯化，得到所需化合物(50mg，收率34％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.58(s,1H),7.23-7.21(m,2H),7.08-7.00(m,5H),6.83-6.81(m,1H),4.88(d,J＝13.6Hz,1H),4.58-4.48(m,1H),4.05(d,J＝13.6Hz,1H),3.77(s,2H),3.13(t,J＝13.2Hz,1H),2.67(t,J＝13.2Hz,1H),2.25-2.14(m,1H),1.90-1.82(m,3H),1.70-1.67(m,1H),0.95-0.92(m,2H),0.66-0.64(m,2H).MS(ESI)Rt＝3.548min,m/z 376.2[M+H]⁺,纯度:99.1％@254nm,99.6％@214nm.

实施例39.1-(1-(2-([1,1'-联苯]-4-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-033)

步骤39.1.合成1-(1-(2-([1,1'-联苯]-4-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-033)

在2-([1,1'-联苯]-4-基)乙酸(73mg,0.35mmol)的DCM(2mL)溶液中加入DMF(1滴)。加入SOCl₂(75mg,0.63mmol)。40℃搅拌20分钟后，将混合物浓缩。残留溶解在DCM(1毫升)用于下步。将1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮盐酸盐(80mg,0.31mmol)与DIEA(203mg,1.57mmol)在DCM(3ml)中室温搅拌10min，滴加之前的溶液。最后得到的混合物搅拌2小时。将混合物倒入水中(20毫升)，用DCM(2x 20毫升)萃取。用盐水(20mL)冲洗合并的有机层，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用高效液相色谱法(Xbridge C18,5um,19x 150mm,35-65％B,A:H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B:CH₃CN,uv＝214nm,F＝15mL/min)对残留物进行纯化，得到所需化合物(50mg，收率39％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.39(s,1H),7.61-7.59(m,2H),7.57-7.55(m,2H),7.44-7.40(m,4H),7.35-7.32(m,1H),7.07-7.05(m,1H),7.00(t,J＝7.6Hz,1H),6.95-6.91(m,1H),6.88-6.86(m,1H),4.92(d,J＝13.6Hz,1H),4.56-4.50(m,1H),4.11(d,J＝13.2Hz,1H),3.87(s,2H),3.19(t,J＝12.4Hz,1H),2.72(t,J＝12.8Hz,1H),2.31-2.21(m,1H),2.03-1.94(m,1H),1.89-1.86(m,1H),1.77-1.74(m,1H).MS(ESI)Rt＝3.475min,m/z 412.2[M+H]⁺,纯度:98.1％@254nm,98.7％@214nm.

实施例40.1-(1-(2-(4-吗啉代苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-034)

步骤40.1.合成2-(4-吗啉代苯基)乙酸乙酯(GEN1-034-1)

在甲苯(15ml)中的2-(4-溴苯基)乙酸乙酯(1.00g,4.12mmol)、吗啉(430mg,4.94mmol)、Cs₂CO₃(2.68g,8.23mmol)和Xphos(196mg,0.41mmol)的混合物中加入Pd(OAc)₂(92mg,0.41mmol)。在氮气气氛下回流2小时，冷却过滤。滤液浓缩。采用硅胶柱层析法(PE:EA＝10:1～5:1)对残渣进行纯化，得到所需化合物(630mg，收率62％)，为黄色油状物。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.19(d,J＝8.4Hz,2H),6.87(d,J＝8.8Hz,2H),4.13(q,J＝7.2Hz,2H),3.85(t,J＝4.8Hz,4H),3.53(s,2H),3.14(t,J＝4.8Hz,4H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI)Rt＝1.584min,m/z 250.1[M+H]⁺,纯度:69.9％@214nm.

步骤40.2.合成2-(4-吗啉代苯基)乙酸(GEN1-034-2)

在2-(4-吗啉代苯基)乙酸乙酯(300mg,1.20mmol)的甲醇(4ml)溶液中加入，加入氢氧化锂水合物(152mg,3.61mmol)在水中的溶液(2ml)。30℃搅拌2小时后，混合物浓缩。残渣用水(10毫升)稀释。滴加10％HCl水溶液，直到pH＝2-3。用DCM(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20毫升)冲洗干净，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的化合物(180毫克，收率68％)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.19(d,J＝8.8Hz,2H),6.88(d,J＝8.8Hz,2H),3.86(t,J＝4.8Hz,4H),3.57(s,2H),3.14(t,J＝4.8Hz,4H).

步骤40.3.合成1-(1-(2-(4-吗啉代苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-034)

在2-(4-吗啉代苯基)乙酸(96mg,0.43mmol)的DCM(2mL)溶液中加入DMF(1滴)。加入SOCl₂(94mg,0.79mmol)。25℃搅拌30分钟后，将混合物浓缩。残留物溶解在DCM(1毫升)用于下步。将1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮盐酸盐(100mg,0.390mmol)与DIEA(254mg,1.97mmol)在DCM(3ml)中室温搅拌30min，滴加之前的溶液。所得混合物在室温下搅拌3小时。将混合物倒入水中(20毫升)，用DCM(2x 20毫升)萃取。用盐水(20mL)冲洗合并的有机层，在Na₂SO₄上干燥浓缩。采用高效液相色谱法(Xbridge C18,5um,19x 150mm,25-40％B,A:H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B:CH₃CN,uv＝214nm,F＝15mL/min)对残留物进行纯化，得到所需化合物(60mg，收率36％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.27(s,1H),7.24(d,J＝8.4Hz,2H),7.09-6.98(m,3H),6.91(d,J＝8.8Hz,2H),6.86-6.84(m,1H),4.88(d,J＝13.6Hz,1H),4.55-4.49(m,1H),4.07(d,J＝14.0Hz,1H),3.84(t,J＝4.8Hz,4H),3.75(s,2H),3.17-3.11(m,2H),2.71-2.65(m,1H),2.28-2.18(m,1H),1.94-1.84(m,2H),1.73-1.69(m,1H).MS(ESI)Rt＝2.726min,m/z 421.2[M+H]⁺,纯度:97.5％@254nm,99.2％@214nm.

实施例41.1-(4-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-055)

步骤41.1.合成4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-055-1)

在1-氟-2-硝基苯(2.0g,14mmol)、4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.8g,14mmol)、K₂CO₃(3.0g,21mmol)的DMF(30mL)溶液中加入KI(50mg,0.30mmol)。得到的混合物在95℃下搅拌12小时。将混合物冷却至室温，倒入水中(50mL)，用EtOAc萃取(30mL×2)。合并的有机层用盐水冲洗，在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的黄色油(4克，收率87％)。MS(ESI):Rt＝1.75min,m/z 266.1[M+2H-t-Bu]⁺.纯度:93％@254nm,100％@214nm.

步骤41.2.合成N-(2-硝基苯基)哌啶-4-胺(GEN1-055-2)

在4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.0g,12mmol)的DCM(30mL)溶液中加入TFA(15mL)。反应混合物在室温下搅拌12小时。将混合物浓缩，残渣溶解在水中(50毫升)。将水溶液用Na₂CO₃水溶液(饱和溶液，50ml)碱化至pH＝9,DCM萃取(50mL×3)。合并的有机层在Na₂SO₄上干燥，浓缩成所需的黄色固体(2.5g，收率91％)¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.18-8.12(m,2H),7.41(t,J＝8.4Hz,1H),6.88(d,J＝8.4Hz,1H),6.62(t,J＝8.4Hz,1H),3.65-3.63(m,1H),3.18-3.15(m,2H),2.81-2.75(m,2H),2.17(s,1H),2.11-2.08(m,2H),1.58-1.51(m,2H).

步骤41.3.合成1-(4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-055-3)

向N-(2-硝基苯基)哌啶-4-胺(1.0g,4.5mmol)、2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(830mg,4.01mmol)、EDCI(1.1g,5.8mmol)、HOBT(790mg,5.85mmol)的DMF(30mL)溶液中加入DIEA(1.74g,13.5mmol)。反应混合物在室温下搅拌12小时。用C18柱(CH₃CN:水＝5％～50％)对混合物进行纯化，得到所需的产物(1.2g，收率74％)为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.60min,m/z 408.3[M+H]⁺,纯度:97％@254nm,100％@214nm.

步骤41.4.合成1-(4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-055-4)

在1-(4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(1.2g,2.9mmol)的MeOH(10mL)溶液中，在H₂下加入Pd/C(10％，100mg)。反应混合物在室温下搅拌12小时。混合物被过滤，滤液被浓缩成所需的产物(900毫克，收率82％)为灰色固体。MS(ESI):Rt＝1.62min,m/z 378.3[M+H]⁺,纯度:91％@254nm,76％@214nm.

步骤41.5.合成1-(4-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-055)

在1-(4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(100mg,0.265mmol)的甲醇(1mL)和水(0.1mL)的溶液中，加入溴化氰(140mg,1.32mmol)。将混合物在室温下搅拌两小时后，用C18柱(CH₃CN:water＝5％～45％)浓缩纯化，得到所需化合物(60mg，收率55％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.64(d,J＝8.0Hz,2H),7.46-7.42(m,3H),7.15-7.11(m,1H),7.03-7.02(m,2H),4.95-4.92(m,1H),4.54(br s,2H),4.21-4.07(m,2H),3.88(s,2H),3.18(t,J＝12.8Hz,1H),2.70(t,J＝13.6Hz,1H),2.34-2.22(m,1H),2.12-1.85(m,3H).MS(ESI):Rt＝3.46min,m/z 403.2[M+H]⁺,纯度:99.48％@254nm,98.24％@214nm.

实施例42：6-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-009)

步骤1.合成4-((2-硝基-5-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-009-1)

2-氯-1-硝基-4-(三氟甲基)苯(676mg，3.00mmol)，K₂CO₃(828mg，5.99mmol)和4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(630mg，3.15mmol)的混合物在DMF(5mL)中的在90℃下搅拌6小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(50mL×2)萃取。用水(25mL)，盐水(25mL)洗涤合并的有机层，经MgSO₄干燥并浓缩。残留物通过硅胶快速色谱纯化(石油：乙酸乙酯＝10∶1)，得到所需化合物(512mg，收率43％)，为黄色油。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.25(d,J＝8.8Hz,1H),7.95(d,J＝8.0Hz,1H),7.44(s,1H),6.96(dd,J＝8.8,1.2Hz,1H),4.06-3.96(m,1H),3.91-3.88(m,2H),3.32-3.09(m,2H),1.93-1.90(m,2H),1.53-1.44(m,2H),1.41(s,9H).

步骤2.合成4-((2-氨基-5-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-009-2)

将4-((2-硝基-5-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(512mg,1.31mmol)在甲醇(3mL)中悬浮液Pd/C(10％，50mg)在N2气氛下加入。产生的混合物与氢气脱气，并在20摄氏度的氢气气氛下搅拌一夜。将反应混合物过滤，滤液浓缩，得到所需化合物(418mg，产率77％)为灰色固体。MS(ESI):Rt＝1.677min,m/z 304.1[M+H]⁺；纯度:86.28％@254nm

步骤3.4-(2-氧代-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成(GEN1-009-3)

三光气(210mg,0.708mmol)加入4-((2-氨基-5-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(318mg,0.885mmol)和NaHCO₃(743mg,8.85mmol)的DCM溶液(10mL)中于0℃搅拌2小时。将反应混合物倒入水中(50mL)，用DCM(25mL×3)萃取，用盐水(25mL)冲洗混合的有机层，在MgSO₄上晾干，浓缩得到所需化合物(342mg，收率95％)为红油。MS(ESI):Rt＝1.450min,m/z 330.2[M+H]⁺；纯度:81.59％@254nm

步骤4.1-(哌啶-4-基)的合成-6-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮的合成(GEN1-009-4)

将4-(2-氧代-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(342mg,0.887mmol)加入HCl/EA(6M,4ml)中室温搅拌2小时。将反应混合物浓缩成所需的白色固体(256mg，产率64％)。MS(ESI):Rt＝1.287min,m/z 286.1[M+H]⁺；纯度:71.38％@254nm.

步骤5.6-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮的合成(GEN1-009)

在DMF(4ml)中加入2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(146mg,0.717mmol)和DIEA(253mg,1.96mmol)的溶液，在0℃条件下，分别加入HATU(298mg,0.782mmol)。搅拌10min后，加入1-(哌啶-4-基)的合成-6-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(186mg,0.652mmol)。混合物在室温下搅拌4小时。反应混合物通过制备纯化。HPLC(Xbridge C185μm19*150mm；B：40-80％，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；UV：214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(34mg，收率11％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.32(s,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.51-7.49(m,3H),7.34(d,J＝8.4Hz,1H),7.13(d,J＝8.0Hz,1H),4.59-4.47(m,2H),4.4-4.11(m,1H),3.92(s,2H),3.21-3.15(m,1H),2.75-2.68(m,1H),2.22-2.13(m,2H),1.75-1.73(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.047min,m/z 472.1[M+H]⁺；纯度:89.46％@254nm,98.72％@214nm.

实施例43：6-羟基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-012)

步骤1.4-((5-羟基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-012-1)的合成

向化合物3-氟-4-硝基苯酚(1.0g，6.4mmol)和4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.53g，7.64mmol)在DMSO(20mL)中的溶液中添加K₂CO₃(2.20)g，15.9mmol)。将混合物在100℃搅拌过夜。TLC显示剩余80％的起始原料。将混合物在140℃下搅拌过夜。TLC显示剩余40％的起始原料。将反应混合物冷却至室温，并用水(100mL)稀释。加入EtOAc(20mL)并搅拌5分钟。弃去有机层，并用1M HCl酸化水层至pH＝2。将水层用EtOAc(50mL×2)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(石油：乙酸乙酯＝20∶1至10∶1)，得到期望的化合物(800mg，产率35％)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.31(d,J＝7.2Hz,1H),8.13(d,J＝9.6Hz,1H),6.69(s,1H),6.21-6.20(m,1H),6.19-6.16(m,1H),4.02-3.99(m,2H),3.61-3.55(m,1H),3.06(t,J＝10.4Hz,2H),2.07-2.04(m,2H),1.60-1.52(m,2H),1.48(s,9H).

步骤2.4-((5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-012-2)的合成

向4-((5-羟基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，2.37mmol)和TEA(480mg，4.74mmol)的DCM(10mL)溶液中加入在室温下逐滴滴加叔丁基氯氯二甲基硅烷(357mg，2.37mmol)在DCM(2mL)中的溶液。搅拌过夜后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并分离各相。有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化(PE∶EA＝10∶1)，得到所需化合物(500mg，收率47％)，为黄色固体。MS(ESI)Rt＝1.851min,m/z 396.0[M+H-56]⁺；纯度:89.2％@214nm.

步骤3.4-((2-氨基-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-012-3)的合成

将.4-((5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg,1.11mmol)加入到THF(3ml)和MeOH(3ml)溶液中，然后加入Pd/C(10％，150mg)。将混合物在50℃氢气气球下加氢5小时。该混合物经celite过滤并浓缩，得到所需的化合物(460mg，收率91％)，直接用于下一步。MS(ESI)Rt＝1.916min,m/z 422[M+H]⁺；纯度:92％@214nm.

步骤4.4-(6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氧-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成(GEN1-012-4)

向4-[2-氨基-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-苯胺基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(460mg，1.00mmol)和NaHCO₃(843.16mg，10.04mmol)的混合物在室温下分批加入在DCM(50mL)中的三光气(119mg，0.41mmol)。在室温下搅拌1小时后，将反应混合物用水(30mL)稀释，并分离各相。有机相用盐水洗涤，经Na₂SO4干燥并浓缩。将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(PE：EA＝5∶1至1∶1)，得到期望的化合物(450mg，产率92％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.66(s,1H),6.82(d,J＝8.0Hz,1H),6.60(d,J＝1.6Hz,1H),6.47(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),4.38-4.29(m,1H),4.08-4.06(m,2H),2.92-2.84(m,2H),2.16-2.06(m,2H),1.68-1.65(m,2H),1.44(s,9H),0.95(s,9H),0.16(s,6H).MS(ESI),Rt＝1.703min,m/z 392.3[M+H-56]⁺；纯度:91.6％@214nm.

步骤5.6-羟基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-012-5)的合成

将4-(6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氧-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg,0.41mmol)加到MeOH(3ml)与盐酸(1毫升)的混合溶液中。混合物在室温下搅拌2小时。向混合物中加入5％NaOH水溶液，pH＝7-8。将混合物浓缩干燥，得到所需的化合物(140毫克，收率99％)。MS(ESI)Rt＝0.50min,m/z 234.1[M+H]⁺；纯度:90％@214nm,85％@254nm.

步骤6.6-羟基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-012)的合成

6-羟基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(98毫克，0.41毫摩尔)的溶液中，将2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(92毫克，0.45毫摩尔)和DIEA(264毫克，2.04毫摩尔)溶于DMF(5mL)中，向此混合物加入HOBT(83毫克，0.61毫摩尔)和EDCI(117毫克，0.61毫摩尔)然后将混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，并用DCM(5mL×3)萃取。合并的有机相用无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过制备型HPLC[gilson-2，Xbridge C18，5um，19x 150mm，30～60％B，A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN，F＝15mL/min，uv纯化＝214nm]得到期望的化合物(55mg，产率32％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.65(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,2H),7.45(d,J＝7.6Hz,2H),6.84(d,J＝8.4Hz,1H),6.58(d,J＝1.6Hz,1H),6.55(d,J＝2.0Hz,1H),6.31(br s,1H),4.85(d,J＝12.4Hz,1H),4.55-4.47(m,1H),4.02(d,J＝12.4Hz,1H),3.89(s,2H),3.20(t,J＝12.0Hz,1H),2.71(t,J＝12.0Hz,1H),2.28-2.17(m,1H),2.01-1.92(m,1H),1.78-1.74(m,2H).MS(ESI)Rt＝3.202min,m/z 420.2[M+H]⁺；纯度:99.5％@254nm,99.9％@214nm.

实施例44：7-羟基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-016)

步骤1.4-((2-甲氧基-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-016-1)的合成

向2-氯-1-甲氧基-3-硝基苯(3.0g，16mmol)和4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.41g，32.0mmol)的DMF(30mL)溶液中加入K₂CO₃(4.42g，32.0mmol)，然后在120℃下搅拌24小时。冷却至室温后，将所得混合物倒入水(300mL)中，并用EtOAc(150mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(150mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，并通过硅胶柱纯化(PE：EA＝10：1)，得到期望的化合物(1.56g，收率26％)，为红色油。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.74(dd,J＝8.8,1.2Hz,1H),7.50(t,J＝8.0,1H),6.95(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),6.71(t,J＝8.4Hz,1H),4.15-4.06(m,1H),4.02-3.91(m,2H),3.87(s,3H),2.93(t,J＝11.6Hz,2H),1.96-1.92(m,2H),1.46(s,9H),1.41-1.37(m,2H).MS(ESI)Rt＝1.77min,m/z296.2[M+1-56]⁺；纯度:100％@254nm,94％@214nm.

步骤2.4-((2-氨基-6-甲氧基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-016-2)的合成

向4-(2-甲氧基-6-硝基-苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.06g，3.02mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中添加Pd/C(321mg，0.302mmol，10％的纯度)。将混合物在氢气气氛下于室温搅拌1小时。过滤得到的混合物，浓缩滤液，得到期望的化合物(533mg，收率52％)，为黄色油。MS(ESI):Rt＝1.12min,m/z 322.3[M+H]⁺；纯度:91％@254nm,94％@214nm.

步骤3.4-(7-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-016-3)的合成

在0℃下将NaHCO₃(1.39g，16.6mmol)加入到4-(2-氨基-6-甲氧基-苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(533mg，1.66mmol)的DCM(50mL)溶液中。然后分批加入三光气(246mg，0.829mmol)。在0℃下搅拌2小时后，将得到的混合物浓缩并用水(20mL)稀释。然后加入EtOAc(50mL×3)萃取所需化合物。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并通过C18柱纯化(50-70％B；A：H₂O，B：CH₃CN)，得到所需产物(530mg，产率75％)。为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.52min,m/z 348.3[M+H]⁺；纯度:82％@254nm,100％@214nm.

步骤4.7-羟基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-016-4)的合成

将4-(7-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg,0.576mmol)溶于HI(45％溶于水，5ml)，在130℃下搅拌3小时。将混合物冷却至室温，加入DIEA(5mL)。将混合物浓缩，得到化合物(3.06克粗品)为白色固体。MS(ESI):Rt＝0.48min,m/z 234.1[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.7-羟基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-016)的合成

7-羟基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(135mg，粗品)，2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(177mg，0.867mmol)，HATU(440mg，1.16mmol)和DIEA(224mg，1.73mmol)溶在DMF(6mL)中在室温下搅拌16小时。所得混合物通过制备纯化。HPLC(RP-PREP-1 XbridgeC18 5um 19*150mm，20％-65％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；UV：254nm，流速：15mL/min)得到所需产物(110毫克，两步后产率为45％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.75(s,1H),9.87(s,1H),7.69(d,J＝8.0Hz,2H),7.47(d,J＝8.0Hz,2H),6.79(t,J＝8.0Hz,1H),6.51-6.45(m,2H),4.80-4.66(m,1H),4.55(d,J＝13.6Hz,1H),4.09(d,J＝14.0Hz,1H),3.93(d,J＝15.6Hz,1H),3.83(d,J＝15.6Hz,1H),3.12(t,J＝12.4Hz,1H),2.64(t,J＝12.0Hz,1H),2.47-2.35(m,2H),1.67-1.64(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.344min,m/z420.1[M+H]⁺；纯度:94.81％@254nm,99.63％@214nm.

实施例45：N-((1s，3s)-3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环丁基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺

步骤1.((1s，3s)-3-((2-硝基苯基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯的合成(GEN1-024-1)

向((1s，3s)-3-氨基环丁基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，2.68mmol)和1-氟-2-硝基苯(455mg，3.22mmol)的DMF(10mL)溶液加入K₂CO₃(557mg，4.03mmol)。在80℃下搅拌过夜后，将所得混合物冷却至室温并倒入水(25mL)中。加入EtOAc(80mL×4)以萃取所需化合物。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，残余物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝55-75％)，得到期望的化合物(758mg，产率92％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.66min,m/z 252.2[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,16％@214nm.

步骤2.((1s，3s)-3-((2-氨基苯基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(GEN1-024-2)的合成

向((1s，3s)-3-(((2-硝基苯基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(758mg，2.47mmol)的MeOH(30mL)溶液中添加Pd/C(10％，262mg，0.246mmol)。在氢气气氛下于室温搅拌3小时后，将所得混合物过滤。浓缩滤液，得到期望的化合物(666mg，产率97％)，为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.54min,m/z 278.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.((1s，3s)-3-(2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]咪唑-1-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯的合成(GEN1-024-3)

向((1s，3s)-3-(((2-氨基苯基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯和NaHCO₃(2.02g，24.0mmol)在DCM(30mL)的悬浮液中添加三光气(356mg，1.20mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将所得混合物过滤。将滤液浓缩并将残余物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝45-65％)，得到期望的化合物(619mg，85％产率)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.44min,m/z 304.2[M+H-100]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.1-((1s，3s)-3-氨基环丁基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-one(GEN1-024-4)的合成

向((1s，3s)-3-(2-oxo-2,3-dihydro-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(250mg，824umol)加入DCM(5mL)和TFA(1mL)。将得到的混合物在室温搅拌2小时。用Na₂CO₃水溶液将所得混合物碱化至pH＝8-10。然后分离混合物，并浓缩有机层。残余物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝20-40％)，得到所需化合物(140mg，收率84％)，为浅黄色油。MS(ESI):Rt＝0.70min,m/z 204.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.N-((1s，3s)-3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环丁基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺的合成(GEN1-024)

1-((1s，3s)-3-氨基环丁基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-one(140mg，0.689mmol)，EDCI(198mg，1.03mmol)，HOBT(140mg，1.04mmol)和DIEA(267mg，2.07mmol)溶于DMF(2mL)，并加入2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(155mg，0.759mmol)在室温搅拌过夜。然后将混合物通过制备纯化。HPLC(制备5 Xbridge C18 5um 19*150mm，30-70％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；214nm；流速：15mL/min)得到所需化合物(104mg，收率38％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.86(s,1H),8.64(d,J＝7.6Hz,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.50(d,J＝8.0Hz,2H),7.42-7.39(m,1H),7.05-6.97(m,3H),4.57-4.48(m,1H),4.11-4.01(m,1H),3.55(s,2H),2.81-2.73(m,2H),2.63-2.56(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.486min,m/z 390.1[M+H]⁺；纯度:97.40％@254nm,98.82％@214nm.

实施例46：N-((1r，3r)-3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环丁基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺

步骤1.((1r，3r)-3-(((2-硝基苯基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯的合成(GEN1-025-1)

向1-氟-2-硝基苯(273mg，1.93mmol)和叔丁基((1r，3r)-3-氨基环丁基)氨基甲酸酯(300mg，1.61mmol)的DMF(4mL)溶液加入K2 CO3(334mg，2.42mmol)。将混合物在80℃下搅拌16小时。将混合物过滤并将滤液通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝55-75％)，得到期望的化合物(466mg，产率94％)，为黄色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.18(dd,J＝8.8,1.6Hz,1H),8.11(br s,1H),7.42(t,J＝6.8Hz,1H),6.70-6.66(m,1H),6.60(d,J＝8.0Hz,1H),4.79(brs,1H),4.33-4.31(m,1H),4.16-4.09(m,1H),2.45-2.40(m,4H),1.46(s,9H).

步骤2.((1r，3r)-3-((2-氨基苯基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(GEN1-025-2)的合成

向((1r，3r)-3-(((2-硝基苯基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(416mg，1.35mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中添加Pd/C(10％，144mg，0.135mmol)。将混合物在室温在氢气氛下搅拌2小时。将得到的混合物过滤并将滤液浓缩。残余物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝50-70％)，得到期望的化合物(357mg，产率95％)，为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.51min,m/z222.2[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.((1r，3r)-3-(2-oxo-2,3-dihydro-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯的合成(GEN1-025-3)

向(叔丁基)((1r，3r)-3-((2-氨基苯基)氨基)环丁基)氨基甲酸酯(350mg，1.26mmol)和NaHCO₃(1.06g，12.6mmol)在二氯甲烷(25mL)中的悬浮液中加入三光气(187mg，0.630mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将所得混合物过滤。浓缩滤液，残余物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝50-70％)，得到所需化合物(344mg，收率90％)，为灰色固体。MS(ESI):Rt＝1.46min,m/z 248.2[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.合成1-((1R，3R)-3-氨基环丁基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-025-4)

向((1r，3r)-3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(395mg，1.30mmol)的溶液中加入DCM(5mL)与TFA(1mL)。将混合物在室温搅拌2小时。用Na₂CO₃水溶液将所得混合物碱化至pH＝8-10。然后分离混合物，并浓缩有机层。残余物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝15-35％)，得到期望的化合物(179mg，产率61％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝0.31min,m/z 204.1[M+H]⁺；纯度:99％@254nm,76％@214nm.

步骤5.N-((1r，3r)-3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)环丁基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺的合成(GEN1-025)

向1-((1r，3r)-3-氨基环丁基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(100mg，0.492mmol)，HATU(281mg，0.739mmol)和DIEA(191mg，1.48mmol)的DMF(2mL)溶液中加入2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(121毫克，0.593毫摩尔)。加完后，将混合物在室温搅拌16小时。所得混合物通过制备纯化。HPLC(prep-5 Xbridge C18 5um 19*150mm，30％-70％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(68mg，收率34％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.86(s,1H),8.73(d,J＝6.8Hz,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.51(d,J＝8.0Hz,2H),7.32-7.30(m,1H),7.03-6.97(m,3H),5.16-5.07(m,1H),4.37-4.35(m,1H),3.57(s,2H),3.12-3.04(m,2H),2.31-2.24(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.723min,m/z390.2[M+H]⁺；纯度:86.87％@254nm,96.20％@214nm.

实施例47：1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2(3H)-酮

步骤1.4-((2-氨基吡啶-3-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成(GEN1-041-1)

向4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g，5.04mmol)在乙腈(10mL)中的悬浮液中，加入吡啶-2，3-二胺(500mg，4.58mmol)。在室温下搅拌30分钟后，所有固体物质完全溶解。将反应混合物冷却至0℃，并在1分钟内逐滴加入TFA(0.7mL)。将反应混合物再搅拌30分钟，并加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.46g，6.87mmol)。然后将混合物在室温下再搅拌30分钟。将混合物冷却至0℃，并用NaOH水溶液(4M)碱化至pH＝13。将混合物再搅拌30分钟，并用冰水(50mL)稀释。将混合物用DCM(50mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，并用无水Na₂SO₄干燥。浓缩溶液，并将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(DCM(0.1％TEA)：MeOH＝40∶1)，并通过C18(50-70％B；A：H₂O B：CH₃CN)进一步纯化。得到所需化合物(382mg，收率25％)，为浅棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.45min,m/z 293.4[M+H]⁺；纯度:87％@254nm,89％@214nm.

步骤2.4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成(GEN1-041-2)

在冰水浴中向4-((2-氨基吡啶-3-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(367mg，1.26mmol)和TEA(254mg，2.51mmol)的THF(10mL)溶液中缓慢加入三光气(372mg，1.25mmol)。加完后，将混合物在室温搅拌2小时。浓缩所得混合物，并用饱和Na₂CO₃碱化至pH＝8-10。加入DCM(30mL×3)提取所需化合物。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过C18柱纯化(45-65％B；A：H₂O B：CH₃CN)，得到期望的化合物(159mg，收率37％)，为黄色固体。

MS(ESI):Rt＝1.38min,m/z 317.4[M-H]^-；纯度:94％@254nm,100％@214nm.

步骤3.1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2(3H)-一盐酸盐的合成(GEN1-041-3)

4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(159mg，0.499mmol)的HCl/MeOH溶液(4M，5mL)在室温搅拌3小时。浓缩得到所需化合物(173mg，产率67％)，为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝0.30min,m/z 219.3[M+H]⁺；纯度:94％@254nm,100％@214nm.

步骤4.1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2(3H)-酮的合成(GEN1-041)

向1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2(3H)-一盐酸盐(173mg，0.594mmol)，DIEA(384mg，2.97mmol)，的EDCI(171mg，0.892mmol)，HOBT(120mg，0.888mmol)和2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(146mg，0.715mmol)在DMF(2mL)中在室温搅拌过夜。所得混合物通过C18(45-65％B；A：H₂O B：CH₃CN)纯化，得到期望的化合物(70mg，收率29％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ10.18(s,1H),8.05(dd,J＝5.6,1.2Hz,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,2H),7.03(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),6.97-6.93(m,1H),4.89(d,J＝13.6Hz,1H),4.60-4.51(m,1H),4.06(d,J＝13.6Hz,1H),3.87(s,2H),3.24-3.16(m,1H),2.75-2.67(m,1H),2.19-2.08(m,1H),1.93-1.84(m,3H).MS(ESI):Rt＝3.263min,m/z 405.1[M+H]⁺；纯度:96.18％@254nm,98.61％@214nm.

实施例48：1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2(3H)-酮

步骤1.合成4-((3-硝基吡啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-228-1)

向4-氯-3-硝基吡啶(500mg，3.15mmol)和4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(695mg，3.47mmol)的DMF(5mL)溶液中加入TEA(479mg，4.73mmol)。所得混合物室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL X 3)萃取。合并有机层用盐水(30mL)洗涤，再经MgSO₄干燥，过滤并浓缩，得到所需化合物(1.1g，收率98％)为黄色油状物。MS(ESI):Rt＝1.57min,m/z 323.3[M+H]⁺；纯度:91％@254nm,81％@214nm.

步骤2.4-((3-氨基吡啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成(GEN1-042-1)

在4-((3-硝基吡啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(400mg，1.24mmol，合成步骤见GEN1-228-1的最终报告)的MeOH(10mL)溶液中添加Pd/C(10％，132mg)。将混合物在氢气下于室温搅拌2小时。过滤得到的混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(360mg，收率99％)，为灰色固体。MS(ESI):Rt＝1.36min,m/z 293.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成(GEN1-042-2)

向4-((3-氨基吡啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(310mg，1.06mmol)和TEA(215mg，2.12mmol)THF(15mL)的溶液添加三光气(378mg，1.27mmol)。添加后，将混合物在室温搅拌1小时。然后将混合物用饱和NaHCO₃碱化至pH＝7-8。加入DCM(40mL×3)提取所需化合物。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并且通过C18(40-60％B；A：H₂OB：CH₃CN)纯化，得到期望的化合物(243mg，收率72％)为浅色。黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.34min,m/z 319.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2(3H)-一盐酸盐的合成(GEN1-042-3)

4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.471mmol)的HCl/MeOH溶液(2M，10mL)在室温搅拌4小时。将得到的混合物浓缩，得到期望的化合物(119mg，收率100％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝0.29min,m/z 219.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.合成1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2(3H)-酮(GEN1-042)

向1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-2(3H)-一盐酸盐(119mg，0.470mmol)，DIEA(353mg，2.73mmol)，加入中的EDCI(157mg，0.819mmol)和HOBT(111mg，0.821mmol)和2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(123mg，0.603mmol)溶于DMF(3mL)在室温搅拌过夜。然后将混合物通过制备型HPLC(水3 sunfire C18 5um 19*150mm，10-40％B；A：H₂O(0.1％TFA)，B：CH₃CN；214nm；流速：15mL/min)纯化，得到所需化合物(120mg，收率63％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.50(s,1H),8.37(s,1H),8.26(d,J＝6.0Hz,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,2H),7.45(d,J＝8.0Hz,2H),6.83(d,J＝4.8Hz,1H),4.91(d,J＝13.2Hz,1H),4.54-4.46(m,1H),4.07(d,J＝13.2Hz,1H),3.88(s,2H),3.24-3.18(m,1H),2.75-2.69(m,1H),2.27-2.16(m,1H),2.03-1.94(m,1H),1.93-1.90(m,1H),1.85-1.82(m,1H).MS(ESI)Rt＝3.486min,m/z 405.2[M+H]⁺；纯度:98.96％@254nm,98.42％@214nm.

实施例49：3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2(3H)-酮(GEN1-043)

步骤1.4-((4-氨基吡啶-3-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-043-1)的合成

向吡啶3,4-二胺(1.0g，9.2mmol)，4-氧哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.10g，15.6mmol)和乙酸(10.5g，174mmol)的1,2-二氯乙烷(10mL)溶液中加入NaBH(OAc)3(3.69g，17.4mmol)。将所得混合物在室温搅拌3天。浓缩所得混合物，并加入饱和Na₂CO₃(50mL)。混合物用DCM(100mL×5)萃取，合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。粗产物通过硅胶柱纯化(DCM：MeOH＝10∶1)，得到期望的化合物(620mg，产率23％)，为黄色固体。MS(ESI)Rt＝1.32min,m/z 293.3[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.合成3-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2(3H)-酮(GEN1-043-2)

在0℃下向4-((4-氨基吡啶-3-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(450mg，1.54mmol)和TEA(312mg，3.08mmol)的THF(7.50mL)溶液中加入三光气(457mg，1.54mmol)。然后将混合物在室温搅拌1小时。然后加入水(5mL)，并将混合物在55℃下再搅拌15分钟。浓缩所得混合物，并通过C18(5-25％B；A：H₂O，B：CH₃CN)纯化混合物，得到所需化合物(234mg，收率70％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝0.29min,m/z 219.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.合成3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2(3H)-酮(GEN1-043)

3-(4-哌啶基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-酮(100mg，0.458mumol)，2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(113mg加入0.554mmol)，HOBt(99mg，0.73mmol)，DIEA(296mg，2.29mmol)和EDCI(141mg，0.736mmol)溶于DMF(3mL)。将混合物在室温搅拌16小时。所得混合物通过制备纯化。HPLC(prep-5 Xbridge C18 5um 19*150mm，15-55％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；UV：214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(27mg，收率14％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.35-8.31(m,2H),7.63(d,J＝8.0Hz,2H),7.43(d,J＝8.0Hz,2H),7.06(d,J＝5.6Hz,1H),4.95-4.91(m,1H),4.56-4.47(m,1H),4.07(d,J＝12.8Hz,1H),3.88(s,2H),3.24-3.18(m,1H),2.77-2.71(m,1H),2.36-2.25(m,1H),2.17-2.07(m,1H),1.97-1.87(m,2H).MS(ESI)Rt＝3.065min,m/z 405.2[M+H]⁺；纯度:96.88％@254nm,99.31％@214nm.

实施例50：3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2(3H)-酮

步骤1.4-((3-硝基吡啶-2-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-044-1)的合成

向2-氯-3-硝基吡啶(600mg，3.78mmol)和K2 CO3(785mg，5.68mmol)在DMF(6mL)中的悬浮液加入4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(834mg，4.16mmol)。混合物在80℃下搅拌3小时。将所得混合物倒入水(100mL)中，并用EtOAc(100mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，并通过硅胶柱纯化(PE：EA＝4：1)，得到期望的化合物(854mg，60％产率)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.71min,m/z 267.2[M+H-56]⁺；纯度:70％@254nm,65％@214nm.

步骤2 4-((3-氨基吡啶-2-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-044-2)的合成

向4-[((3-硝基-2-吡啶基)氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(920mg，2.85mmol)在MeOH(20mL)中的溶液添加Pd/C(304mg，0.286mmol，纯度为10％)。将混合物在氢气气氛下于室温搅拌2小时。过滤所得混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(807mg，产率97％)，为粉红色固体。MS(ESI):Rt＝1.42min,m/z 293.3[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.4-(2-氧代-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-3(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-044-3)的合成

在冰水浴下向4-[((3-氨基-2-吡啶基)氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(607mg，2.08mmol)和TEA(420mg，4.15mmol)的THF(15mL)溶液加入三光气(924mg，3.11mmol)。将混合物在27℃下搅拌4小时。将得到的混合物浓缩并通过C18柱纯化(60-80％B；A：H₂O，B：CH₃CN)，得到期望的化合物(613mg，收率82％)，为白色固体。

MS(ESI):Rt＝1.84min,m/z 263.2[M+H]⁺；纯度:34％@254nm,100％@214nm.

步骤4.3-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2(3H)-一盐酸盐(GEN1-044-4)的合成

4-(2-氧代-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(314mg，0.986mmol)在浓氯化氢甲醇溶液(6mL)中于室温下搅拌1小时。浓缩所得混合物，得到所需化合物(279mg，产率99％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝0.33min,m/z 219.1[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.合成3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2(3H)-酮(GEN1-044)

向3-(4-哌啶基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-酮盐酸盐(150mg，0.589mmol)，2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(144mg，0.705mmol)，HOBt(127mg，0.940mmol)和DIEA(381mg，2.95mmol)的DMF(4mL)溶液加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(181mg，0.944mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。所得混合物通过制备纯化。HPLC(prep-5Xbridge C18 5um 19*150mm，25％-70％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；UV：214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(82mg，产率33％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.46(s,1H),8.02(d,J＝5.2Hz,1H),7.61(d,J＝8.0Hz,2H),7.43(d,J＝8.0Hz,2H),7.29(s,1H),6.99(dd,J＝8.0,5.2Hz,1H),4.89(d,J＝10.4Hz,1H),4.66-4.58(m,1H),4.04(d,J＝14.0Hz,1H),3.87(s,2H),3.21-3.14(m,1H),2.76-2.54(m,3H),1.88-1.80(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.466min,m/z 405.1[M+H]⁺；纯度:94.80％@254nm,97.26％@214nm.

实施例51：1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)咪唑烷-2-酮

步骤1.4-(((2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

室温下向4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g，5.02mmol)和(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(804mg，5.02mmol)在1,2-二氯乙烷(8mL)中的溶液中添加加入AcOH(1mL)。将混合物在室温搅拌4小时后，添加NaBH3CN(473mg，7.53mmol)。加完后，将混合物在室温搅拌2小时。将混合物用水(20mL)稀释，并用EtOAc(15mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到期望的化合物(1.5g，收率70％)，为无色油。MS(ESI):Rt＝1.35min,m/z 344.4[M+H]⁺；纯度:19％@254nm,68％@214nm.

步骤2.4-(2-氧代咪唑啉-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

向4-(((2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g，1.98mmol，纯度68％)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入钾叔丁醇盐(522mg，4.65mmol)。将混合物在55℃搅拌过夜。然后将混合物浓缩并将油状残余物用水(20mL)稀释。将混合物用EtOAc(15mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，残余物通过C18柱纯化(ACN/水＝20-65％)，得到化合物(520mg，产率97％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.33min,m/z 214.1[M-56+H]⁺,270.2[M+H]⁺；纯度:100％@214nm.

步骤3.1-(哌啶丁-4-基)咪唑啉-2--2-酮2,2,2-三氟乙酸盐的合成

向4-(2-氧代咪唑啉-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，1.11mmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TFA(0.5mL)。将混合物在室温搅拌4小时。然后浓缩混合物，得到所需化合物(300mg，纯度81％，收率86％)，为无色油状物。MS(ESI):Rt＝0.28min,m/z170.0[M+H]⁺；纯度:39％@254nm,81％@214nm.

步骤4.合成1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)咪唑烷-2-酮

向2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(233mg，1.14mmol)和HOBT(194mg，1.44mmol)的DMF(5mL)溶液中加入EDCI(275mg，1.43mmol)。将混合物在室温搅拌5分钟后，加入1-(哌啶丁-4-基)咪唑啉-2--2-酮2,2,2-三氟乙酸酯(300mg，0.953mmol)和DIEA(370mg，2.86mmol)。将混合物在室温搅拌4小时。用水(20mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(15mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(20mL×2)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，残余物通过制备纯化。HPLC[RP-PREP-1 Xbridge C18，5um，19*150mm，15～50％B，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：ACN，流速：16mL/min，UV＝254nm]得到白色固体状的所需化合物(66.2mg，收率19％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.67(d,J＝8.0Hz,2H),7.45(d,J＝8.0Hz,2H),6.26(s,1H),4.47(d,J＝13.2Hz,1H),4.02(d,J＝14.0Hz,1H),3.89-3.80(m,2H),3.75-3.67(m,1H),3.25-3.09(m,4H),3.09-3.03(m,1H),2.61-2.55(m,1H),1.56-1.54(m,2H),1.45-1.35(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.283min,m/z 356.2[M+H]⁺；纯度:81.46％@254nm,98.06％@214nm.

实施例52：1-乙酰氨基-N-(1-(2-(4-(三(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺(GEN1-048)

步骤1.4-(1-氨基环丙烷甲酰胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-048-1)的合成

在冰浴下向1-氨基环丙烷甲酸(600mg，5.93mmol)，4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(990mg，4.94mmol)，HOBt(1.00g，7.41mmol)和DIEA(1.92g，14.8mmol)的DMF(15mL)溶液加入EDCI(1.42g，7.42mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用MgSO₄干燥，过滤并浓缩。粗产物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至50％)，得到所需化合物(190mg，收率13％)，为无色油状物。MS(ESI):Rt＝1.33min,m/z 228.1[M+H-56]⁺；纯度:31％@254nm,93％@214nm.

步骤2.4-(1-乙酰氨基环丙烷羧酰胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-048-2)的合成

在冰浴下向4-[((1-氨基环丙烷羰基)氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(190mg，0.536mmol)和TEA(163mg，1.61mmol)的DCM(5mL)溶液中加入Ac2O(66mg，0.65mmol)后在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用DCM(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到期望的化合物(220mg粗品，收率79％)，为棕色油。MS(ESI)Rt＝1.25min,m/z 270.2[M+H-56]⁺；纯度:No absorption@254nm,63％@214nm.

步骤3.1-乙酰氨基-N-(哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺三氟醋酸盐(GEN1-048-3)的合成

在室温下向4-[((1-乙酰氨基环丙烷羰基氨基)氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(220mg，0.676mmol)在DCM(4mL)中的溶液中添加TFA(1mL)。将得到的混合物在室温搅拌2小时。浓缩反应混合物，得到期望的化合物(220mg粗品)，为棕色油。MS(ESI):Rt＝0.31min,m/z 226.2[M+H]⁺；纯度:No absorption@254nm or 214nm.

步骤4.1-乙酰氨基-N-(1-(2-(4-(三(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺(GEN1-048)的合成

在冰浴下向1-乙酰氨基-N-(4-哌啶基)环丙烷甲酰胺TFA盐(220mg，0.421mmol)，2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(86mg，0.42mmol)，HOBt(85mg，0.63mmol)和DIEA(272mg，2.10mmol)的DMF(2mL)加入EDCI(121mg，0.631mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。所得混合物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至55％)，得到期望的化合物(38.5mg，产率22％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.19(s,1H),7.67(d,J＝8.0Hz,2H),7.45(d,J＝8.4Hz,2H),7.41(d,J＝8.0Hz,1H),4.32-4.29(m,1H),3.97-3.94(m,1H),3.87-3.76(m,3H),3.08(t,J＝11.6Hz,1H),2.65(t,J＝11.6Hz,1H),1.80(s,3H),1.65-1.60(m,2H),1.40-1.29(m,2H),1.24-1.17(m,2H),0.84-0.75(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.046min,m/z412.2[M+H]⁺；纯度:89.16％@254nm,98.72％@214nm.

实施例53：1-苯基-8-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)-1,3,8三氮杂螺[4.5]癸烷-4-酮(GEN1-049)

步骤1.1-苯基-8-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)-1,3,8三氮杂螺[4.5]癸烷-4-酮(GEN1-049)的合成

1-苯基-1,3,8-三氮杂螺[4.5]癸4-酮(50mg，0.22mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(44mg，0.22mmol)和HATU(123mg，0.32mmol)的DMF(1.0mL)混合物中加入DIEA(56mg，0.43mmol)。将得到的混合物在室温搅拌3小时。将反应混合物滴加到水(20mL)中。通过过滤收集沉淀的固体。将粗产物通过Prep-TLC纯化(EA/(PE+EA)＝60％)，得到GEN1-049(50mg，46％收率)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.79(s,1H),7.72(d,J＝8.1Hz,2H),7.55(d,J＝8.0Hz,2H),7.17–7.09(m,2H),6.72(t,J＝7.3Hz,1H),6.51(d,J＝8.2Hz,2H),4.56(s,2H),4.41–4.32(m,1H),4.07–3.94(m,2H),3.83–3.68(m,2H),3.31-3.21(m,1H),2.34–2.20(m,1H),2.18–2.04(m,1H),1.60(t,J＝13.4Hz,2H).MS(ESI):Rt＝1.52min,m/z417.9[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例54：1-(4-(2-thioxo-2,3-dihydro-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮

步骤1.合成1-(4-(2-thioxo-2,3-dihydro-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-050)

1-[4-(2-氨基苯胺基)-1-哌啶基]-2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酮(100mg，0.265mmol)和NaHCO₃(223mg，2.65mmol)溶于DCM(5mL)，并滴加硫光气(35mg，0.30mmol)。将混合物在0℃下搅拌1小时。将得到的混合物浓缩并将残余物通过制备纯化。HPLC(prep-2Xbridge C18 5um 19*150mm，32％-58％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；UV：214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(45毫克，产率39％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ10.14(s,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,2H),7.49(d,J＝8.0Hz,2H),7.22-7.17(m,2H),7.14-7.10(m,1H),7.02(d,J＝8.0Hz,1H),5.49-5.41(m,1H),4.92(d,J＝13.2Hz,1H),4.08(d,J＝14.4Hz,1H),3.90(s,2H),3.33-3.26(m,1H),2.83-2.76(m,1H),2.31-2.21(m,1H),1.97-1.94(m,2H),1.87-1.85(m,1H).MS(ESI):Rt＝3.302min,m/z 420.1[M+H]⁺；纯度:98.73％@254nm,97.00％@214nm.

实施例55：3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)吲哚-2-酮(GEN1-051)

步骤1.3-(1-苄基哌啶-4-亚烷基)吲哚-2-酮(GEN1-051-1)的合成

在冰浴上向吲哚-2-酮(600mg，4.51mmol)和1-苄基哌啶-4-酮(938mg，4.96mmol)的THF(30mL)溶液中滴加四异丙醇钛(2.56g，9.01mmol)的THF(10mL)混合物。在室温下搅拌5小时后，将混合物倒入水(50mL)和EtOAc(20mL)中。将混合物过滤，滤液用EtOAc(30mL×2)萃取，浓缩合并有机相。将残余物用CH₃CN(3mL)研磨，过滤，得到所需化合物(700mg，收率50％)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.24(s,1H),10.61(s,1H),7.64-7.62(m,3H),7.48-7.46(m,3H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),6.95(t,J＝7.6Hz,1H),6.84(d,J＝7.6Hz,1H),4.53(d,J＝15.6Hz,1H),4.35(s,2H),3.51-3.44(m,3H),3.17-2.99(m,3H),2.91-2.85(m,1H).MS(ESI)Rt＝1.61min,m/z 305[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.3-(哌啶丁-4-基)吲哚-2-酮(GEN1-051-2)的合成

3-(1-苄基-4-哌啶基)吲哚-2-酮(200mg，0.637mmol)和Pd/C(10％，100mg)加入到AcOH(0.1mL)和MeOH(5mL)溶液中，并在50℃在H2(50Psi)下搅拌3小时。将混合物过滤并将滤液浓缩。将残余物溶于MeOH(1mL)中，并加入10％NaOH水溶液以调节pH＝8-9。将混合物浓缩并与DCM/MeOH(10/1，30mL)一起研磨并过滤。浓缩滤液，得到期望的化合物(140mg，收率98％)，为黄色油。MS(ESI):Rt＝0.56min,m/z 217.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.合成3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)吲哚-2-酮(GEN1-051)

3-(4-哌啶基)吲哚-2-酮(140mg，0.65mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(132mg，0.65mmol)和DIEA(251mg，1.94mmol)的DMF(3mL)溶液中加入EDCI(186mg，0.97mmol)和HOBT(131mg，0.97mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物倒入水(15mL)中，并用EtOAc(20mL×2)萃取。浓缩合并的有机相。通过制备型HPLC(gilson-2，Xbridge C18，5um，19*150mm，50～80％B，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：ACN，流速：15mL/min，UV纯化残留物＝214nm)得到期望的化合物(105mg，产率40％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.36(d,J＝3.2Hz,1H),7.67(d,J＝8.4Hz,1H),7.60(d,J＝8.4Hz,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,1H),7.39(d,J＝8.0Hz,1H),7.22(d,J＝7.6Hz,0.5H),7.19-7.15(m,1H),7.02(d,J＝7.2Hz,0.5H),6.96-6.89(m,1H),6.81-6.78(m,1H),4.49-4.37(m,1H),4.02-3.92(m,1H),3.87-3.75(m,2H),3.42-3.39(m,1H),3.00-2.92(m,1H),2.52-2.44(m,1H),2.26-2.20(m,1H),1.61-1.54(m,1H),1.41-1.11(m,3H).MS(ESI):Rt＝3.850min,m/z 403.1[M+H]⁺；纯度:99.23％@254nm,99.58％@214nm.

实施例56：4-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮

步骤1.4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-052-1)的合成

在室温和氢气下搅拌4-(2-硝基苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.0g，6.2mmol，合成步骤见其他相应实施例)和Pd/C(100mg，10％纯度)的MeOH(20mL)悬浮液过夜。过滤混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(1.7g，收率75％)，为棕色油。MS(ESI):Rt＝1.58min,m/z 236.1[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,80％@214nm.

步骤2.4-(3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-052-2)的合成

在冰浴下向4-(2-氨基苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.7g，5.8mmol)和NaHCO₃(2.45g，29.2mmol)和DCM(20mL)的混合物中加入2-氯乙酰氯(659mg，5.83mmol)，在室温下搅拌0.5小时后，并将混合物浓缩溶解在CH₃CN(200mL)中。将混合物在80℃搅拌过夜。将混合物冷却并过滤。浓缩滤液，并将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(PE：EA＝1∶1)，得到期望的化合物(850mg，收率44％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.99(s,1H),7.01-6.97(m,1H),6.83-6.76(m,3H),4.28(br s,2H),3.72(s,2H),3.70-3.62(m,1H),2.85-2.79(m,2H),1.82-1.76(m,2H),1.72-1.66(m,2H),1.48(s,9H).MS(ESI):Rt＝0.95min,m/z276.1,[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.合成4-(哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-052-3)

4-(3-氧代-2,4-二氢喹喔啉-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(400mg，1.21mmol)的TFA(1.5mL)溶液在室温下搅拌过夜后，将混合物浓缩。将残余物溶于水(3mL)中，并用Na₂CO₃水溶液(饱和的5mL)碱化至pH＝9。将混合物用DCM(10×4mL)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到期望的(71mg，收率24％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.11min,m/z 232.0[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,94％@214nm.

步骤4.4-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-052)

4-(4-哌啶基)-1,3-二氢喹喔啉-2-酮(71毫克，0.31毫摩尔)，2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(63毫克，0.31毫摩尔)，HATU(176mg，0.463mmol)的DMF(1.5mL)溶液中加入(DIEA(159mg，1.23mmol)。在室温下搅拌3小时后，将混合物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至50％)，得到期望的化合物(30mg，产率22％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.39(s,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.47(d,J＝7.6Hz,2H),6.91-6.86(m,2H),6.80(d,J＝7.2Hz,1H),6.71-6.67(m,2H),4.54-4.51(m,1H),4.09-4.05(m,1H),3.92-3.82(m,3H),3.56-3.47(m,2H),3.22-3.15(m,1H),2.75-2.67(m,1H),1.70-1.50(m,4H).MS(ESI):Rt＝2.78min,m/z 418.2,[M+H]⁺.纯度:95.55％@254nm,97.03％@214nm.

实施例57：1-(4-(2,2-二氧苯并[c][1,2,5]噻二唑-1(3H)-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮

步骤1.合成1-(4-(2,2-二氧苯并[c][1,2,5]噻二唑-1(3H)-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-054)

在1-(4-(((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(130mg，0.25mmol，合成步骤参见GEN1-055)的吡啶(3mL)溶液中加入磺酰胺(48mg，0.50mmol)，在100℃下搅拌2小时。冷却至40℃后，将混合物浓缩。将残余物用水(10mL)稀释，并用EtOAc(20mL×2)萃取。将有机相用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(PE：EA＝1∶1)，得到粗产物(100mg)。通过制备型HPLC[gilson-2，XbridgeC18，5um，19×150mm，40～80％B，A：H₂O(0.1％NH4HCO3)，B：ACN，流速：15mL/min，进一步纯化。UV＝214nm]得到期望的化合物(68mg，产率61％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.26(br s,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.48(d,J＝8.0Hz,2H),6.88-6.82(m,3H),6.79-6.77(m,1H),4.55(d,J＝13.6Hz,1H),4.26-4.22(m,1H),4.11(d,J＝13.2Hz,1H),3.90(s,2H),3.20-3.13(m,1H),2.73-2.66(m,1H),1.98-1.84(m,4H).MS(ESI):Rt＝4.647min,m/z 440.1[M+H]⁺；纯度:86.50％@254nm,97.84％@214nm.

实施例58：1-(4-((2-羟基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮的合成(GEN1-056)

步骤1.1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-酮(GEN1-056-1)的合成

4-哌啶酮盐酸盐(350mg，2.58mmol)，DIEA(1.67g，12.9mmol)，EDCI(742mg，3.87mmol)和HOBT(523mg，3.87mmol)的DMF(3mL)溶液中加入2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(580mg，2.84mmol)，在室温搅拌过夜。将所得混合物倒入水(15mL)中，并用DCM(30mL×3)萃取。浓缩合并有机层，并将残余物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝45-65％)，得到期望的化合物(625mg，产率85％)，为黄色油。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ7.71(d,J＝8.1Hz,2H),7.51(d,J＝8.1Hz,2H),3.97(s,2H),3.86-3.76(m,4H),2.44-2.37(m,4H).

步骤2.1-(4-((2-羟基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮的合成(GEN1-056)

1-(2-(4-(三(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-酮(280mg，0.982mmol)，2-氨基苯酚(107mg，0.982mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(312mg，1.47mmol)的DCM(10mL)悬浮液中加入乙酸(524mg，8.73mmol)。将混合物在室温搅拌24小时。加入饱和NaHCO₃(20mL)。再搅拌10分钟后，将混合物用DCM(30mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na₂SO4干燥并过滤。将滤液浓缩并将残余物通过制备型HPLC纯化(制备型5 Xbridge C18 5um 19*150mm，35-85％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；214nm；流速：15mL/min)得到所需化合物(58mg，产率15％)，为灰色固体。¹H NMR(400M,DMSO-d₆):δ9.18(s,1H),7.67(d,J＝8.4Hz,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,2H),6.67-6.56(m,3H),6.41(td,J＝7.6,2.0Hz,1H),4.30-4.28(m,2H),3.94(d,J＝13.2Hz,1H),3.85(s,2H),3.48-3.46(m,1H),3.17(t,J＝11.6Hz,1H),1.91(d,J＝10.0Hz,2H),1.28-1.19(m,2H).MS(ESI):Rt＝2.947min,m/z 379.2[M+H]⁺；纯度:89.39％@254nm,96.62％@214nm.

实施例59：·N-(2-((1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苯基)乙酰胺的合成

步骤1.N-(2-((1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苯基)乙酰胺的合成(GEN1-057)

在冰水浴下向1-(4-(((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(179mg，0.474mmol，合成步骤请参阅GEN1-的最终报告在中的055-4)的THF(7mL)溶液中加入Ac2O(130mg，1.27mmol)。在室温下搅拌2小时后，将混合物浓缩并加入饱和Na₂CO₃(10mL)。加入DCM(25mL×3)提取所需化合物。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，无水Na₂SO4干燥并浓缩。残余物通过制备纯化。HPLC(prep-2 Xbridge C18 5um 19*150mm，30-55％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；214nm；流速：15mL/min)得到所需化合物(135mg，产率67％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ9.06(s,1H),7.67(d,J＝8.0Hz,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,2H),7.15-7.13(m,1H),7.02-6.98(m,1H),6.73(d,J＝8.0Hz,1H),6.58-6.54(m,1H),4.66(d,J＝7.6Hz,1H),4.24(d,J＝13.6Hz,1H),3.94(d,J＝13.6Hz,1H),3.86(s,2H),3.55-3.53(m,1H),3.22(t,J＝11.6Hz,1H),2.88(t,J＝10.8Hz,1H),2.03(s,3H),1.93-1.90(m,2H),1.30-1.21(m,2H).LCMS(ESI):Rt＝3.654min,m/z 420.2[M+H]⁺；纯度:99.91％@254nm,98.94％@214nm.

实施例60：1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-吲唑-3(2H)-酮(GEN1-058)

步骤1.2-碘苯并肼(GEN1-058-1)的合成

将化合物2-碘代苯甲酸甲酯(3.0g，11mmol)和水合肼水溶液(85％，3.37g，57.2mmol)的甲醇(30mL)溶液回流5小时。将混合物冷却并浓缩。将残余物用水(20mL)研磨，过滤，得到期望的化合物(2.5g，收率83％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ9.50(s,1H),7.88(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),7.45-7.41(m,1H),7.29-7.27(m,1H),7.19-7.14(m,1H),4.45(s,2H).MS(ESI):Rt＝0.83min,m/z 263.0[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.4-(2-(2-碘苯甲酰基)肼基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-058-2)的合成

向化合物2-碘苯甲酰肼(600mg，2.29mmol)和4-氧哌啶-1-甲酸叔丁酯(502mg，2.52mmol)的甲醇(10mL)溶液中添加AcOH(275mg，4.58mmol)。将混合物在室温搅拌1小时后，在冰浴下分批加入NaBH 3CN(288mg，4.58mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。用水(50mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(30mL×2)萃取。将有机相用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化(PE∶EA＝5∶1)，得到所需化合物(700mg，产率69％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.88(d,J＝7.6Hz,1H),7.42-7.37(m,2H),7.16-7.12(m,1H),4.05-4.02(m,2H),3.25-3.20(m,1H),2.88(t,J＝11.6Hz,2H),1.94-1.77(m,4H),1.46(s,9H).

步骤3.4-(3-氧代-2,3-二氢-1H-吲唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-058-3)的合成

向4-[2-(2-碘苯甲酰基)肼基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(700mg，1.57mmol)，CuI(60mg，0.31mmol)和K₂CO₃(435mg，3.14mmol)的混合物中加入DMSO(10mL)，L-脯氨酸(36mg，0.31mmol)。将混合物在室温搅拌1小时。向混合物中加入水(30mL)，并用DCM(10mL×3)萃取。浓缩有机相，并将残余物通过C18柱色谱法纯化(CH₃CN：水＝40％至80％)，得到期望的化合物(350mg，收率70％)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.61(s,1H),7.59(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.50(d,J＝8.4Hz,1H),7.32(t,J＝7.6Hz,1H),6.98(t,J＝7.6Hz,1H),4.61-4.57(m,1H),4.08-4.05(m,2H),2.99-2.87(m,2H),1.84-1.80(m,4H),1.42(s,9H).MS(ESI):Rt＝1.50min,m/z 318.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.合成1-(哌啶-4-基)-1H-吲唑-3(2H)-酮(GEN1-058-4)

向4-(3-氧代-2H-吲唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(350mg，1.10mmol)的甲醇(3mL)溶液中加入浓HCl(1mL 36％纯度)。将混合物在室温搅拌1小时。将混合物浓缩。用水(1mL)稀释残余物，并加入Na₂CO₃水溶液(饱和1mL)。将混合物搅拌1分钟并过滤。干燥固体，得到期望的化合物(200mg，83％收率)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝0.89min,m/z 218.2[M+H]⁺；纯度:100％@214nm.

步骤5.1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-吲唑-3(2H)-酮(GEN1-058)的合成

向1-(4-哌啶基)-2H-吲唑-3-酮(200mg，0.920mmol)，2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(207mg，1.01mmol)和DIEA(357mg，2.76mmol)的DMF(5mL)溶液中加入EDCI(265mg，1.38mmol)和HOBT(187mg，1.38mmol)。将混合物在室温搅拌过夜，用水(20mL)稀释反应混合物，并用DCM(10mL×3)萃取。浓缩合并的有机相，残余物通过制备型HPLC[gilson-2，Xbridge C18，5um，19*150mm，40～80％B，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：ACN，流速：15mL/min，UV＝214nm]得到期望的化合物(150mg，产率40％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.59(s,1H),7.69(d,J＝8.0Hz,2H),7.60(d,J＝8.0Hz,1H),7.50-7.48(m,3H),7.32(t,J＝7.2Hz,1H),6.98(t,J＝7.2Hz,1H),4.69-4.63(m,1H),4.52(d,J＝12.8Hz,1H),4.12(d,J＝13.6Hz,1H),3.90(s,2H),3.24-3.21(m,1H),2.83-2.76(m,1H),1.84-1.78(m,4H).MS(ESI):Rt＝3.224min,m/z 404.2[M+H]⁺；纯度:97.20％@254nm,99.50％@214nm.

实施例61：1-羟基-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-059)

步骤1.苯基苄氧基氨基甲酸酯(GEN1-059-1)的合成

在冰浴下，向O-苄基羟胺盐酸盐(5.0g，31mmol)和吡啶(4.96g，62.7mmol)的CH₃CN(50mL)溶液中滴加碳酰氯苯基酯(4.90g，31.3mmol)。在室温搅拌过夜后，将反应混合物倒入水(150mL)中，并用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经MgSO₄干燥并过滤。浓缩滤液，并将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(PE∶EtOAc＝5∶1)，得到所需化合物(7.5g，收率88％)，为无色油状物。MS(ESI):Rt＝1.52min,m/z 242.2[M-H]^-；纯度:89％@254nm,49％@214nm.

步骤2.1-(苄基氧基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-059-2)的合成

向N-苄氧基氨基甲酸苯酯(1.5g，6.2mmol)和2-碘苯胺(1.42g，6.47mmol)的甲苯(10mL)悬浮液加入TEA(1.87g，18.5mmol)。将所得混合物在110℃下搅拌2小时。冷却至室温后，将反应混合物浓缩并将残余物溶于DMSO(10mL)。向溶液中加入TEA(1.25g，12.4mmol)，CuI(118mg，0.620mmol)和DMEDA(109mg，1.24mmol)。将所得混合物在110℃下搅拌2小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经MgSO₄干燥并过滤。浓缩滤液，并将粗产物通过硅胶上的柱色谱法纯化(PE∶EtOAc＝5∶1至1∶1)，得到期望的化合物(660mg，收率41％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.45min,m/z241.1[M+H]⁺；纯度:78％@254nm,92％@214nm.

步骤3.4-(3-(苄氧基)-2-氧-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-059-3)的合成

在冰浴和N2气氛下，向PPh3(735mg，2.80mmol)的DCM(8mL)溶液中添加DIAD(569mg，2.81mmol)。将混合物搅拌10分钟后，逐滴添加3-苄氧基-1H-苯并咪唑-2-酮(450mg，1.87mmol)和4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(567mg，2.82mmol)的DCM溶液(2mL)，在室温搅拌过夜。然后浓缩混合物，并将粗产物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝50％至70％)，得到所需化合物(120mg，收率14％)，为无色油状物。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.51-7.48(m,2H),7.38-7.37(m,3H),7.09-7.07(m,1H),7.03-6.98(m,2H),6.88-6.86(m,1H),5.24(s,2H),4.49-4.39(m,1H),4.32(br s,2H),2.93-2.76(m,2H),2.36-2.26(m,2H),1.84-1.81(m,2H),1.50(s,9H).

步骤4.合成1-(苄氧基)-3-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮三氟甲酸盐(GEN1-059-4)

向4-(3-苄氧基-2-氧基-苯并咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.236mmol)在DCM(4mL)中的溶液中添加TFA(1mL)。将反应混合物在室温搅拌过夜。浓缩反应混合物，得到期望的化合物(100mg，收率97％)，为无色油状物。MS(ESI):Rt＝1.40min,m/z 324.4[M+H]⁺；纯度:93％@254nm,100％@214nm.

步骤5.合成1-(苄氧基)-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-059-5)

在冰浴下，向1-(苄氧基)-3-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-一(100mg，0.229mmol)，2-[4-(三氟甲基)，加入的苯基]乙酸(56mg，0.27mmol)，HOBT(46mg，0.34mmol)和DIEA(148mg，1.15mmol)的DMF(3mL)混合物中加入EDCI(66mg，0.34mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经MgSO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到所需化合物(120mg，纯度70％，产率72％)，为棕色油。MS(ESI):Rt＝1.71min,m/z 510.5[M+H]⁺；纯度:70％@254nm,31％@214nm.

步骤6.1-羟基-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-059)的合成

向1-苄氧基-3-[1-[2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酰基]-4-哌啶基]苯并咪唑-2-酮(120mg，0.165mmol)在MeOH(5mL)悬浮液加入Pd/C(10％，18mg，0.017mmol)的THF(1mL)。将所得混合物在H2气氛下搅拌过夜。将反应混合物过滤并将滤液浓缩。粗产物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至60％)，得到期望的化合物(36.7mg，收率52％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.00(br s,1H),7.71(d,J＝8.0Hz,2H),7.52(d,J＝8.0Hz,2H),7.16(d,J＝8.0Hz,1H),7.10-6.99(m,3H),4.59-4.56(m,1H),4.51-4.42(m,1H),4.15-4.11(m,1H),3.97-3.88(m,2H),3.23-3.16(m,1H),2.75-2.69(m,1H),2.15-2.05(m,2H),1.74-1.71(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.762min,m/z 420.1[M+H]⁺；纯度:96.11％@254nm,97.72％@214nm.

实施例62：2-(2-氧代-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基乙酸(GEN1-060)

步骤1.1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-060-1)

在冰浴下向3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(200mg，0.921mmol)的悬浮液中，2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(207mg，1.01mmol)，HOBT(187mg，1.38mmol)DIEA(357mg，2.76mmol)和DMF(4mL)的混合物加入EDCI(265mg，1.38mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。所得混合物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至55％)，得到所需化合物(300mg，收率81％)，为褐色固体。MS(ESI)Rt＝1.48min,m/z 404.3[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.2-(2-氧代-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑的叔丁基乙酸-1-基酯(GEN1-060-2)的合成

在冰浴下向1-(1-(2-(4-(三(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-one(140mg，0.347mmol)的DMF(3mL)溶液中加入NaH(21mg，0.53mmol，60％在矿物油中)。将所得混合物在室温搅拌15分钟。然后逐滴加入2-溴乙酸叔丁酯(81mg，0.42mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(30mL)中，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗品通过制备纯化。TLC(EtOAc)，得到期望的化合物(70mg，收率35％)，为棕色油。MS(ESI):Rt＝1.69min,m/z 462[M+H-56]⁺；纯度:19％@254nm,79％@214nm.

步骤3.2-(2-氧代-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基乙酸(GEN1-060)的合成

2-[2-氧代-3-[1-[2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酰基]-4-哌啶基]苯并咪唑-1-基]乙酸叔丁基酯的溶液(70mg，0.14mmol)在HCl/EtOAc(4mL，4M)的溶液中于室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。残余物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至50％)，得到所需化合物(25.1mg，收率40％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.71(d,J＝8.0Hz,2H),7.53(d,J＝8.0Hz,2H),7.11-7.09(m,1H),7.05-6.97(m,3H),4.59-4.56(m,1H),4.51-4.45(m,1H),4.36(s,2H),4.16-4.12(m,1H),3.97-3.87(m,2H),3.24-3.17(m,1H),2.75-2.69(m,1H),2.15-2.05(m,2H),1.73-1.66(m,2H).MS(ESI):Rt＝2.952min,m/z 462.2[M+H]⁺；纯度:89.76％@254nm,99.42％@214nm.

实施例63：N-(1-(1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)氰酰胺(GEN1-061)

步骤1.N-(1-(1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)氰酰胺(GEN1-061)的合成

1-[4-(2-氨基苯胺基)-1-哌啶基]-2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酮(445mg，1.18mmol，合成步骤见GEN1-055)，三乙胺(359mg，3.55mmol)，2-丙醇(10mL)和二苯氧基亚甲基氰酰胺(282mg，1.18mmol)混合回流12小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水(15mL)中，并用DCM(10mL)萃取三次。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到粗产物。粗产物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至45％)，得到所需化合物(150mg，产率29％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ11.96(br s,1H),7.63(d,J＝8.4Hz,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,2H),7.30(d,J＝7.6Hz,1H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.12(t,J＝7.6Hz,1H),7.01(d,J＝7.6Hz,1H),4.90(d,J＝13.2Hz,1H),4.66-4.55(m,1H),4.06(d,J＝13.6Hz,1H),3.92-3.84(m,2H),3.21(t,J＝12.8Hz,1H),2.72(t,J＝12.8Hz,1H),2.37-2.26(m,1H),2.13-2.03(m,1H),1.88(d,J＝11.6Hz,1H),1.79(d,J＝11.6Hz,1H).MS(ESI):Rt＝3.447min,m/z 428.2,[M+H]⁺；纯度:98.64％@254nm,99.84％@214nm.

实施例64：N-(2-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(GEN1-062)

步骤1.(2-(((2-硝基苯基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成(GEN1-062-1)

1-氟-2-硝基苯(500mg，2.39mmol)，(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(479mg，2.39mmol)，K₂CO₃(495mg，3.58mmol)和KI(38mg，0.24mmol)在DMF(10mL)中的于80℃搅拌3小时。冷却至室温后。过滤得到的混合物，滤饼用EA洗涤。将滤液在减压下浓缩。粗产物(1.12g粗产物)不经进一步纯化直接用于下一步。TLC:EA/(PE+EA)＝5％,Rf＝0.2

步骤2.(2-(((2-氨基苯基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成(GEN1-062-2)

在N2气氛下向(2-(((2-硝基苯基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.12g粗品)在MeOH(20mL)中的溶液中添加Pd/C(120mg)。将所得混合物用H2脱气，并在室温在H2气球下搅拌过夜。过滤反应混合物，滤饼用MeOH(50mL×3)洗涤。将滤液在减压下浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用(EA/(PE+EA)＝20％)洗脱，得到GEN1-062-2(800mg，90％收率)，为紫色固体。TLC:EA/(PE+EA)＝20％,Rf＝0.2

步骤3.(2-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成(GEN1-062-3)

在0℃在N2气氛下向(2-(((2-氨基苯基)氨基)乙基氨基甲酸叔丁酯(300mg，1.20mmol)和DIEA(309mg，2.40mmol)在EA(12mL)中的溶液中分批添加三光气(141mg，0.48mmol)在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(10mL X 3)萃取。用水(20mL)，盐水(20mL)洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到浅黄色固体。将粗产物用PE打浆，得到呈白色固体状的GEN1-062-3(324mg，98％收率)。TLC:EA/(PE+EA)＝60％,Rf＝0.3

步骤4.1-(2-氨基乙基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-062-4)的合成

在N2气氛下于0℃向(2-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.54mmol)和H₂O(0.1mL)的混合物中滴加TFA(1.5mL)的DCM(2.0mL)溶液。将所得混合物在N2气氛下于室温搅拌2小时。将得到的混合物在真空下浓缩。得到GEN1-062-4(165mg，粗品)，为白色固体。

TLC:MeOH/(DCM+MeOH)＝5％,Rf＝0.2

步骤5.合成N-(2-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(GEN1-062)

向1-(2-氨基乙基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(96mg，0.54mmol)的溶液中加入2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(加入110mg，0.54mmol)和HATU(380mg，0.81mmol)的DMF(3.0mL)溶液中加入DIEA(348mg，2.70mmol)。将得到的混合物在室温搅拌5小时。将反应混合物滴加到水(80mL)中。通过过滤收集沉淀的固体。将粗产物从THF中重结晶，得到GEN1-062(50mg，25％产率)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.83(s,1H),8.28(t,J＝5.9Hz,1H),7.61(d,J＝8.0Hz,2H),7.36(d,J＝8.0Hz,2H),7.07–6.99(m,1H),6.99–6.92(m,3H),3.83(t,J＝6.1Hz,2H),3.43(s,2H),3.39–3.31(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.43min,m/z363.9[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例65：N-(3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)丙基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺

步骤1.3-(((2-硝基苯基)氨基)丙基)氨基甲酸叔丁酯的合成(GEN1-063-1)

1-氟-2-硝基苯(500mg，2.39mmol)，(3-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯(617mg，2.39mmol)，K₂CO₃(734mg，3.58mmol)和KI(58mg，0.24mmol)的DMF(10mL)溶液在80℃下搅拌3小时。冷却至室温后，将所得混合物过滤，将滤饼用EA洗涤。将滤液在减压下浓缩。粗产物(1.24g粗产物)不经进一步纯化直接用于下一步。TLC:EA/(EA+PE)＝5％,Rf＝0.2

步骤2.3-(((2-氨基苯基)氨基)丙基)氨基甲酸叔丁酯的合成(GEN1-063-2)

在N2气氛下将Pd/C(120mg)加入(3-(((2-硝基苯基)氨基)丙基氨基甲酸叔丁酯(1.24g粗品)的MeOH(30mL)溶液。将所得混合物用H2脱气，并在室温在H2气球下搅拌过夜。过滤反应混合物，滤饼用MeOH(50mL×3)洗涤。将滤液在减压下浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用(EA/(PE+EA)＝25％)洗脱，得到GEN1-063-2(900mg cude，96％收率)，为紫色固体。TLC:EA/(EA+PE)＝30％,Rf＝0.4

步骤3.2-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成(GEN1-063-3)

在N2气氛下于0℃向3-(((2-氨基苯基)氨基)丙基氨基甲酸叔丁酯(900mg，3.39mmol)和DIEA(920mg，7.16mmol)的EA(40mL)溶液中分批加入三光气(420mg，1.43mmol)。将所得混合物在室温在N2气氛下搅拌过夜。将反应混合物倒入水(40mL)中，并用EA(30mL X 3)萃取。将有机层用水(50毫升)，盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到浅黄色固体。粗产物用PE处理，得到GEN1-063-3(923mg，93％收率)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.40min,m/z 192.1[M-100+H]⁺,纯度:82％@254nm,78％@214nm.

步骤4.1-(3-氨基丙基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-063-4)的合成

2-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(200毫克，0.69毫摩尔)和H₂O(0.2mL)混合在DCM(2.0毫升)中，在N2和0℃气氛下加入TFA(2.0毫升)。将所得混合物在N2气氛下于室温搅拌2小时。将得到的混合物在真空下浓缩。粗产物(220mg粗产物)无需进一步纯化即可直接用于下一步。TLC:MeOH/(DCM+MeOH)＝5％,Rf＝0.2

步骤5.合成N-(3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)丙基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(GEN1-063)

DIEA(352mg，2.74mmol)加入到1-(3-氨基丙基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(220mg粗品)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(140mg，0.69mmol)和HATU(392mg，1.03mmol)的DMF(4mL)溶液中。将得到的混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物滴加到水(40mL)中。通过过滤收集沉淀的固体。残余物通过反相柱色谱在以下条件下纯化：柱，C18硅胶；流动相ACN在水中，40分钟内梯度为5％至80％；检测到紫外光波长214nm，得到白色固体GEN1-063(60mg，23％收率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.84(s,1H),8.20(t,J＝5.5Hz,1H),7.66(d,J＝8.0Hz,2H),7.49(d,J＝8.0Hz,2H),7.06–7.00(m,1H),6.99–6.93(m,3H),3.78(t,J＝7.1Hz,2H),3.34(s,2H),3.13–3.03(m,2H),1.82–1.72(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.43min,m/z 378.2[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例66：((2-氧代-2,4,5,6-四氢-1H-咪唑并[4,5,1-ij]喹啉-5-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯

步骤1.3-碘-8-硝基喹啉的合成(GEN1-065-1)

在105℃下将8-硝基喹啉(4.0g，23mmol)和NIS(5.68g，25.3mmol)在乙酸(40mL)中的悬浮液搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温，并倒入水(200mL)中。过滤收集沉淀物，得到所需化合物(6.0g，产率85％)，为土黄色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ9.18(d,J＝2.0Hz,1H),8.66(d,J＝2.0Hz,1H),8.07(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),7.94(dd,J＝8.4,1.2Hz,1H),7.65(t,J＝8.0Hz,1H).

步骤2.8-硝基喹啉-3-腈的合成(GEN1-065-2)

3-碘-8-硝基喹啉(6.5g，22mmol)，CuCN(6.08g，65.0mmol)，Pd2(dba)3(673mg，0.650mmol)和dppf(1.44g，2.60mmol)的悬浮液在二氧六环(50毫升)中的溶液在N2气氛下在105℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩并将残余物通过柱色谱法纯化(DCM∶MeOH＝10∶1)，得到所需化合物，为粗产物。将粗制物用EtOAc(20mL)研制，过滤，得到所需化合物(4.4g，收率97％)，为土黄色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ9.33(d,J＝2.0Hz,1H),9.31(d,J＝2.0Hz,1H),8.51(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),8.40(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.95(t,J＝8.0Hz,1H).

步骤3.8-氨基喹啉-3-腈(GEN1-065-3)的合成

8-硝基喹啉-3-腈(4.4g，21mmol)，锌粉(6.86g，105mmol)和NH₄Cl(11.2g，209mmol)在MeOH(30mL)，THF(30mL)和水(10mL)的悬浮液在50℃下搅拌3小时。过滤反应混合物，并将滤液倒入水(300mL)中，并用EtOAc(100mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过硅胶上的柱色谱法纯化(PE∶EtOAc＝4∶1)，得到期望的化合物(2.3g，收率60％)，为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.39min,m/z 170.0[M+H]⁺；纯度:93％@254nm,100％@214nm.

步骤4.3-(氨基甲基)-1,2,3,4-四氢喹啉-8-胺(GEN1-065-4)的合成

向8-氨基喹啉-3-腈(1.3g，7.7mmol)在乙酸(20mL)中的悬浮液中添加PtO2(103mg，0.386mmol，85％纯度)。将所得混合物在50℃，H2气氛(50psi)下搅拌过夜。将反应混合物过滤并将滤液浓缩。残余物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至10％)，得到所需化合物(1.5g，粗品)，为棕色油。MS(ESI):Rt＝0.29min,m/z 178[M+H]⁺；纯度:95％@254nm,90％@214nm.

步骤5.((8-氨基-1,2,3,4-四氢喹啉-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成(GEN1-065-5)

在冰浴下向3-(氨基甲基)-1,2,3,4-四氢喹啉-8-胺(840mg，4.74mmol)和TEA(1.44g，14.2mmol)在DMF(10mL)的溶液滴加Boc2O(517mg，2.35mmol)。将得到的混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物倒入水(100mL)中，并用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗品通过制备纯化。TLC(DCM∶MeOH＝15∶1)得到期望的化合物(140mg，收率10％)，为无色油状物。MS(ESI):Rt＝1.48min,m/z 278.2[M+H]⁺；纯度:81％@254nm,91％@214nm.

步骤6.合成((2-氧代-2,4,5,6-四氢-1H-咪唑并[4,5,1-ij]喹啉-5-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯(GEN1-065-6)

在冰浴下向((8-氨基-1,2,3,4-四氢喹啉-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.361mmol)和NaHCO₃(303mg，3.61mmol)的DCM(7mL)溶液加入三光气(54mg，0.18mmol)。将得到的混合物在室温搅拌1小时。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用DCM(25mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经MgSO 4干燥，过滤并浓缩，得到期望的化合物(105mg，产率96％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.42min,m/z304.3[M+H]⁺；纯度:76％@254nm,100％@214nm.

步骤7.合成5-(氨基甲基)-5,6-二氢-1H-咪唑并[4,5,1-ij]喹啉-2(4H)-1,2,2,2-三氟乙酸酯(GEN1-065-7)

于室温下向((2-氧代-2,4,5,6-四氢-1H-咪唑并[4,5,1-ij]喹啉-5-基]甲基]甲基)氨基甲酸叔丁酯溶液(110mg，0.363mmol)的二氯甲烷(6mL)溶液加入TFA(2mL)。将所得混合物在室温搅拌过夜。浓缩反应混合物，得到期望的化合物(115mg，收率100％)，为棕色油。MS(ESI):Rt＝0.28min,m/z 204.1[M+H]⁺；纯度:80％@254nm,100％@214nm.

步骤8.合成((2-氧代-2,4,5,6-四氢-1H-咪唑并[4,5,1-ij]喹啉-5-基]甲基)氨基甲酸叔丁酯(GEN1-065)

在冰浴下向5-(氨基甲基)-5,6-二氢-1H-咪唑并[4,5,1-ij]喹啉-2(4H)-1,2,2,2-三氟乙酸酯(110mg，0.347mmol)，2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(71mg，0.35mmol)，HOBt(70mg，0.52mmol)和DIEA(224mg，1.73mmol)的DMF(2mL)混合物中加入EDCI(100mg，0.522mmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(25mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗品通过制备纯化。HPLC(x-Bridge C185μm19*150mm；25-70％B，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：乙腈；UV 214nm；流速：15mL/min)得到所需化合物(82.2mg，产率为61％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.60(s,1H),8.34(t,J＝6.0Hz,1H),7.67(d,J＝8.0Hz,2H),7.50(d,J＝8.0Hz,2H),6.88-6.84(m,1H),6.79-6.75(m,2H),3.89(dd,J＝12.0,4.0Hz,1H),3.58(s,2H),3.30-3.28(m,1H),3.24-3.19(m,1H),3.17-3.10(m,1H),2.81(dd,J＝12.4,4.4Hz,1H),2.58-2.54(m,1H),2.23-2.14(m,1H).MS(ESI):Rt＝3.425min,m/z 390.2[M+H]⁺；纯度:92.92％@254nm,99.65％@214nm.

实施例67：N-((9H-吡啶基[2,3-b]吲哚-3-基)甲基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺

步骤1.6-(1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-基)烟酸甲酯(GEN1-066-1)的合成

将6-氯吡啶-3-羧酸甲酯(10.0g，58.3mmol)和1H-苯并三唑(7.29g，61.2mmol)的混合物在160℃下搅拌1.5小时。将混合物冷却并溶于水(50mL)。加入Na₂CO₃水溶液(饱和的20mL)。将混合物用DCM(100mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物用PE(30mL)研制，过滤，得到所需化合物(12.5g，收率83％)，为灰白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ9.12(s,1H),8.59(d,J＝8.4Hz,1H),8.54(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),8.35(d,J＝8.4Hz,1H),8.21(d,J＝8.4Hz,1H),7.75(t,J＝8.0Hz,1H),7.58(t,J＝7.6Hz,1H),3.94(s,3H).MS(ESI):Rt＝1.378min,m/z 255.1[M+H]⁺；纯度:98.07％@214nm.

步骤2.9H-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-羧酸甲酯(GEN1-066-2)的合成

将PPA(50mL)加热至160℃。然后分批加入6-(苯并三唑-1-基)吡啶-3-羧酸甲酯(8.0g，31mmol)。将混合物在160℃下搅拌30分钟，然后在180℃下搅拌30分钟。将混合物冷却至80℃，并用水(200mL)稀释。然后将混合物冷却至5℃，并用10％NaOH水溶液碱化至pH＝9。将混合物用EtOAc(50mL×2)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到黄色固体。将固体与DCM(5mL)一起研磨，过滤并干燥，得到期望的产物(800mg，收率10％)，为黄色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ12.29(s,1H),9.07(s,1H),9.00(d,J＝1.6Hz,1H),8.33(d,J＝8.0Hz,1H),7.58-7.51(m,2H),7.32-7.28(m,1H),3.93(s,3H).MS(ESI):Rt＝1.270min,m/z 227.2[M+H]⁺；纯度:76％@214nm.

步骤3.(9H-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-基)甲醇(GEN1-066-3)的合成

向9H-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-羧酸甲酯(800mg，3.04mmol)在THF(20mL)中的溶液中分批加入氢化铝锂(231mg，6.08mmol)。将混合物在室温搅拌1小时。小心逐滴加入水(10滴)以淬灭反应。将混合物过滤并将滤液浓缩。将残余物与PE/EA(1/1，5mL)一起研磨，过滤，得到期望的化合物(380mg，产率54％)，为黄色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.69(s,1H),8.44(d,J＝1.2Hz,1H),8.37(d,J＝2.0Hz,1H),8.15(d,J＝8.0Hz,1H),7.50-7.42(m,2H),7.23-7.19(m,1H),5.23(t,J＝5.6Hz,1H),4.66(d,J＝5.6Hz,2H).MS(ESI):Rt＝1.183min,m/z 199.1[M+H]⁺；纯度:84.78％@214nm.

步骤4 3-(氯甲基)-9H-吡啶并[2,3-b]吲哚的合成(GEN1-066-4)

向(9H-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-基)甲醇(50mg，0.25mmol)的甲苯(3mL)和CH2 Cl2(1mL)溶液中加入SOCl2(90mg，0.76mmol))在氮气气氛下。然后将所得混合物在50℃下搅拌18小时。浓缩反应混合物，得到期望的化合物(61mg，收率95％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.342min,m/z 217.1[M+H]⁺；纯度:84.84％@254nm.

步骤5.3-(叠氮甲基)-9H-吡啶并[2,3-b]吲哚的合成(GEN1-066-5)

在N2气氛下于0℃向3-(氯甲基)-9H-吡啶并[2，3-b]吲哚(61mg，0.28mmol)在DMF(2mL)中的溶液中添加NaN3(92mg，1.4mmol)。将得到的混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，并用EtOAc(20mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥并浓缩，得到所需的产物(64毫克，产率98％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.244min,m/z 224.2[M+H]⁺；纯度:96.20％@254nm.

步骤6.Synthesis of(9H-pyrido[2,3-b]indol-3-yl)methanamine(GEN1-066-6)

向3-(叠氮甲基)-9H-吡啶并[2,3-b]吲哚(64mg，0.29mmol)的MeOH(1mL)和THF(1mL)溶液中添加Pd/C(10％，31毫克)在氮气气氛下。所得混合物用H2脱气并在20℃下在氢气氛下搅拌过夜。过滤反应混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(61mg，收率66％)，为无色油状物。MS(ESI):Rt＝0.223min,m/z 198.2[M+H]⁺；纯度:61.12％@254nm.

步骤7.合成N-((9H-吡啶基[2,3-b]吲哚-3-基)甲基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(GEN1-066)

2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(180mg，0.882mmol)，HOBt(155mg，1.15mmol)，EDCI(220mg，1.15mmol)和DIEA(342mg，2.65mmol)的混合在DMF(15mL)中并在氮气气氛下在20℃下搅拌10分钟。然后加入9H-吡啶并[2，3-b]吲哚-3-基甲胺(174mg，0.882mmol)。将反应混合物在20℃下搅拌18小时。反应混合物通过制备纯化。HPLC(Xbridge C185μm19*150mm；B：40-80％，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；UV：214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(33mg，收率10％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.73(s,1H),8.70(t,J＝5.6Hz,1H),8.33-8.29(m,2H),8.06(d,J＝8.0Hz,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.53(d,J＝8.0Hz,2H),7.49-7.42(m,2H),7.20(t,J＝7.2Hz,1H),4.44(d,J＝5.6Hz,2H),3.62(s,2H).MS(ESI):Rt＝3.504min,m/z 384.1[M+H]⁺；纯度:95.94％@254nm,98.51％@214nm.

实施例68：1-(1-((4-(三氟甲基)苄基)磺酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

1.1.合成1-(1-((4-(三氟甲基)苄基)磺酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-068)

向3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(140mg，0.644mmol)和[4-(三氟甲基)苯基]甲磺酰氯(167mg，0.646mmol)的DCM(2mL)溶液中加入TEA(196mg，1.94mmol)。在25℃下搅拌12小时后，将混合物浓缩并将残余物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至50％)，得到期望的化合物(40mg，收率14％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.86(s,1H),7.79(d,J＝8.4Hz,2H),7.70(d,J＝8.4Hz,2H),7.19-7.18(m,1H),7.02-6.95(m,3H),4.63(s,2H),4.36-4.27(m,1H),3.73(d,J＝12.4Hz,2H),2.96(t,J＝11.6Hz,2H),2.34-2.24(m,2H),1.74(d,J＝10.8Hz,2H).MS(ESI):Rt＝3.690min,m/z438.0,[M-H]^-；纯度:97.99％@214nm,84.49％@254nm.

实施例69：1-(1-(2-(4-甲氧基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

1.2.2-(4-甲氧基苯基)乙酸(GEN1-070-1)的合成

向2-(4-羟苯基)乙酸(1.00g，6.57mmol)和NaOH(1.58g，39.4mmol)的水(15mL)溶液滴加硫酸二甲酯(2.07g，16.4mmol)。将所得混合物在45℃下搅拌16小时。将得到的混合物用浓盐酸酸化。HCl至pH＝1-2并过滤。用水(5mL×2)洗涤滤饼，得到期望的化合物(401mg，收率37％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ12.15(br s,1H),7.16(d,J＝8.8Hz,2H),6.86(d,J＝8.4Hz,2H),3.73(s,3H),3.48(s,2H).

步骤2.合成1-(1-(2-(4-甲氧基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-070)

向3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(157mg，0.723mumol)，2-(4-甲氧基苯基)乙酸(100mg，0.602mmol)和DIEA(233mg，1.80mmol)的DMF(1.5mL)溶液中的加入HATU(343mg，0.902mmol)，在室温搅拌16小时。所得混合物通过制备纯化。HPLC(waters-3 sunfire C185um 19*150mm，20％-50％B；A：H₂O(0.1％TFA)，B：CH₃CN；UV：214nm，流速：15mL/min)。然后加入饱和Na₂CO₃以将混合物碱化至pH＝8。将混合物用EtOAc(20mL×3)萃取，并将合并的有机层浓缩，得到所需化合物(111mg，收率50％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ9.23-9.13(m,1H),7.26-7.24(m,2H),7.08-6.99(m,3H),6.91(d,J＝8.8Hz,2H),6.83(d,J＝7.6Hz,1H),4.88(d,J＝13.2Hz,1H),4.56-4.48(m,1H),4.06(d,J＝14Hz,1H),3.78(s,3H),3.76(s,2H),3.18-3.11(m,1H),2.72-2.65(m,1H),2.27-2.16(m,1H),1.96-1.81(m,2H),1.72-1.67(m,1H).MS(ESI):Rt＝3.095min,m/z 366.2[M+H]⁺；纯度:99.31％@254nm,99.64％@214nm.

实施例70：1-(1-(2-(4-羟基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

步骤1.合成1-(1-(2-(4-羟基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-071)

向3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(70mg，0.32mumol)，2-(4-羟苯基)乙酸(59mg，0.39mmol)和DIEA(125mg，0.967)的DMF(2mL)溶液加入HATU(184mg，0.484mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。所得混合物通过制备纯化。HPLC(prep-5 Xbridge C18 5um 19*150mm，10％-60％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；UV：214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(22mg，收率19％)，为白色固体。

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.83(s,1H),9.27(s,1H),7.10(d,J＝8.0Hz,2H),6.98-6.90(m,4H),6.74(d,J＝8.4Hz,2H),4.56(d,J＝12.8Hz,1H),4.44-4.34(m,1H),4.07(d,J＝13.2Hz,1H),3.70(d,J＝14.8Hz,1H),3.60(d,J＝14.4Hz,1H),3.15-3.09(m,1H),2.68-2.62(m,1H),2.05-1.94(m,1H),1.93-1.82(m,1H),1.65(d,J＝12.4Hz,1H),1.56(d,J＝12.4Hz,1H).MS(ESI):Rt＝2.740min,m/z 352.2[M+H]⁺；纯度:88.18％@254nm,98.96％@214nm.

实施例71：1-(1-(2-(4-(1H-四唑-5-基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-072)

步骤1.合成4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)乙基)苄腈(GEN1-072-1)

在冰浴下向3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(150mg，0.690mmol)，2-(4-氰基苯基)乙酸(112mg，0.695mmol)，HOBT(139mg，1.03)，DIEA(269mg，2.08mmol)的DMF(2mL)混合物中加入EDCI(199mg，1.04mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物通过C18柱纯化(CH3CN：水＝5％至50％)，得到期望的化合物(200mg，收率72％)，为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.32min,m/z 361.3[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.合成1-(1-(2-(4-(1H-四唑-5-基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-072)

4-[2-氧代-2-[4-(2-氧代-3H-苯并咪唑-1-基)-1-哌啶基]乙基]苄腈(140mg，0.388mmol)和NaN3(65mg，1.0mmol)在乙酸(60mg，1.0mmol)和正丁醇(5mL)中混合并在125℃下在N2气氛下搅拌过夜。然后将NaN3(65mg，1.0mmol)和乙酸(60mg，1.0mmol)加入到混合物中，并在125℃下搅拌另外12小时。浓缩反应混合物，并通过制备型HPLC(Xbridge C18，5μm 19×150mm；B至5％至25％的B，A：水(0.1％NH4 HCO3)，B：乙腈；UV：214nm；MS：145nm；MS：185nm；M+H+)纯化。流速：15mL)得到期望的化合物(30.5mg，产率19％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.82(s,1H),8.01(d,J＝8.4Hz,2H),7.45(d,J＝8.4Hz,2H),6.99-6.88(m,4H),4.61-4.58(m,1H),4.47-4.36(m,1H),4.15-4.11(m,1H),3.92-3.81(m,2H),3.18(t,J＝12.8Hz,1H),2.70(t,J＝12.4Hz,1H),2.12-1.96(m,2H),1.70-1.62(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.474min,m/z 404.2[M+H]⁺；纯度:98.73％@254nm,98.75％@214nm.

实施例72：1-(1-(2-(萘-2-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-073)

步骤1.合成1-(1-(2-(萘-2-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-073)

向3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(100mg，0.460mmol)，HATU(263mg，0.692mmol)和DIEA(178mg，1.38mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入2-(2-萘基)乙酸(103mg，0.553mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。所得混合物通过制备纯化。HPLC(prep-5Xbridge C18 5um 19*150mm，30％-70％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(30mg，收率17％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.80(s,1H),7.92-7.89(m,3H),7.83(s,1H),7.53-7.46(m,3H),6.94-6.91(m,2H),6.89-6.79(m,2H),4.62(d,J＝13.2Hz,1H),4.44-4.36(m,1H),4.16(d,J＝13.2Hz,1H),4.02(d,J＝15.2Hz,1H),3.92(d,J＝15.2Hz,1H),3.18(t,J＝12.4Hz,1H),2.71(t,J＝12.8Hz,1H),2.11-2.00(m,1H),1.95-1.84(m,1H),1.68(d,J＝10.4Hz,1H),1.57(d,J＝10.4Hz,1H).MS(ESI):Rt＝3.685min,m/z 386.1[M+H]⁺；纯度:95.09％@254nm,97.86％@214nm.

实施例73：1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

步骤1.合成1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-075)

向2-(6-喹啉基)乙酸(187mg，0.999mmol)，3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-one(217mg，0.999mmol)和HATU(494mg，1.30mmol)的DMF(4mL)溶液加入DIEA(387mg，2.99mmol)。在25℃下搅拌6小时后，将混合物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至50％)，得到期望的化合物(100mg，收率25％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.54(s,1H),8.91(s,1H),8.15(t,J＝8.4Hz,2H),7.78(s,1H),7.71(d,J＝8.4Hz,1H),7.44-7.40(m,1H),7.05-6.98(m,2H),6.89(t,J＝7.6Hz,1H),6.76(d,J＝8.0Hz,1H),4.93(d,J＝13.2Hz,1H),4.57-4.46(m,1H),4.13(d,J＝13.6Hz,1H),4.02(s,2H),3.20(t,J＝12.4Hz,1H),2.73(t,J＝14.8Hz,1H),2.33-2.23(m,1H),2.03-1.93(m,1H),1.89(d,J＝12.8Hz,1H),1.78-1.73(m,1H).MS(ESI):Rt＝2.639min,m/z 387.2,[M+H]⁺；纯度:99.84％@214nm,96.55％@254nm.

实施例74：3-[1-[2-(1H-吲哚-5-基)乙酰基]-4-哌啶基]-1H-苯并咪唑-2-酮

步骤1.2-(4-氨基-3-溴苯基)乙酸甲酯的合成

向2-(4-氨基苯基)乙酸甲酯(3.00g，18.2mmol)的乙腈(10mL)溶液逐滴加1-溴吡咯烷-2,5-二酮(3.23g，18.2mmol)的乙腈(10mL)溶液将混合物在室温搅拌过夜。将得到的混合物过滤并将滤液浓缩。残余物通过硅胶柱纯化(石油醚∶EtOAc＝5∶1)，得到所需化合物(4.15g，收率94％)，为浅黄色油。MS(ESI)Rt＝1.43min,m/z 245.0[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.2-(4-氨基-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯基)乙酸甲酯的合成

向2-(4-氨基-3-溴苯基)乙酸甲酯(2.00g，8.19mmol)，乙炔基三甲基硅烷(8.05g，81.9mmol)和DMAP(100mg，0.819mmol)在Et3N(10mL)的溶液中加入Pd(PPh3)2Cl2(575mg，0.819mmol)。将混合物在70℃在氮气下搅拌过夜。将得到的混合物浓缩，并添加水(50mL)。加入DCM(50mL×3)提取所需化合物。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，残余物通过硅胶柱纯化(石油醚∶EtOAc＝20∶1)，得到所需化合物(1.16g，收率54％)，为黄色油。MS(ESI)Rt＝1.71min,m/z 262.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.2-(1H-吲哚-5-基)乙酸甲酯的合成

向2-(4-氨基-3-(((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯基)乙酸甲酯(1.16g，4.44mmol)在DMF(10mL)混合物加入CuI(85mg，0.446mmol)。在氮气下于90℃搅拌24小时。将得到的混合物冷却至室温，并倒入水(30mL)中。加入DCM(50mL×3)提取所需化合物。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物用RP-HPLC纯化(45-65％B；A：H₂O B：CH₃CN)，得到所需化合物(393mg，收率47％)，为黄色油。MS(ESI)Rt＝1.43min,m/z 188.2[M-H]^-；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.2-(1H-吲哚-5-基)乙酸的合成

向2-(1H-吲哚-5-基)乙酸甲酯(393mg，2.08mmol)的THF(6mL)和H₂O(3mL)溶液中加入NaOH(166mg，4.15mmol)。将混合物在50℃搅拌过夜。将所得混合物浓缩，并添加水(15mL)。用HCl水溶液(12M)将混合物酸化至pH＝1，并加入DCM(50mL×3)以萃取所需化合物。合并的有机溶液用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩，得到所需化合物(341mg，产率94％)，为土黄色固体。MS(ESI)Rt＝1.142min,m/z 176.0[M+H]⁺；纯度:100％@214nm.

步骤5.合成3-[1-[2-(1H-吲哚-5-基)乙酰基]-4-哌啶基]-1H-苯并咪唑-2-酮(GEN1-077)

向1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-1酮2,2,2-三氟乙酸盐(254mg，0.767mmol)，EDCI(164mg，0.856mmol)，HOBT(116mg，0.859mmol)和DIEA(369mg，2.86mmol)的DMF(3mL)溶液加入2-(1H-吲哚-5-基)乙酸(100mg，0.571mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。将所得混合物倒入水(20mL)中并过滤。用水(10mL)洗涤沉淀物，并从MeOH中重结晶。然后将沉淀物完全溶解在DMSO中，并逐滴加入热水(2mL)中。将混合物过滤并将残余物干燥，得到期望的化合物(35mg，收率16％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.02(s,1H),10.79(s,1H),7.48(s,1H),7.37(d,J＝8.4Hz,1H),7.31(s,1H),7.05(d,J＝8.0Hz,1H),6.92-6.89(m,2H),6.85-6.81(m,1H),6.75-6.73(m,1H),6.41(s,1H),4.60(d,J＝12.8Hz,1H),4.40-4.34(m,1H),4.15-4.09(m,1H),3.89-3.75(m,2H),3.14-3.08(m,1H),2.66(t,J＝12.0Hz,1H),2.02-1.93(m,1H),1.78-1.70(m,1H),1.65-1.63(m,1H),1.50-1.47(m,1H).MS(ESI)Rt＝3.835min,m/z 375.2[M+H]⁺；纯度:97.76％@254nm,99.07％@214nm.

实施例75：1-(1-(2-(5-(三氟甲基)呋喃-2-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

步骤1.2-(5-(三氟甲基)呋喃-2-基)乙腈(GEN1-078-1)的合成

在冰浴下，向2-(溴甲基)-5-(三氟甲基)呋喃(1.0g，4.4mmol)在CH₃CN(10mL)和水(10mL)中的溶液中添加NaCN(464mg，8.75mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用乙醚(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用MgSO₄干燥，过滤并浓缩，得到期望的化合物(650mg，收率77％)，为棕色液体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ6.78(dd,J＝3.6,1.2Hz,1H),6.47(dd,J＝3.6,0.8Hz,1H),3.83(s,2H).

步骤2.2-(5-(三氟甲基)呋喃-2-基)乙酸(GEN1-078-2)的合成

2-(5-(三氟甲基)呋喃-2-基)乙腈(180mg，1.03mmol)与浓HCl(1.5mL)在100℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(20mL)中，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到期望的化合物(150mg，收率68％)，为棕色液体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ12.40(br s,1H),7.13(dd,J＝3.2,1.2Hz,1H),6.50(d,J＝2.8Hz,1H),3.81(s,2H).

步骤3.合成1-(1-(2-(5-(三氟甲基)呋喃-2-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-078)

在冰浴下向3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(50mg，0.23mmol)的溶液中，2-(5-(三氟甲基)呋喃-2-基)乙酸(50mg，0.26mmol)，HOBt(47mg，0.35mmol)和DIEA(89mg，0.69mmol)DMF(2mL)溶液中加入EDCI(66mg，0.34mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至55％)，得到期望的化合物(22.3mg，收率24％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.80(s,1H),7.10-7.01(m,4H),6.78(d,J＝4.0Hz,1H),6.39(d,J＝3.2Hz,1H),4.90-4.86(m,1H),4.61-4.52(m,1H),4.18-4.14(m,1H),3.94-3.82(m,2H),3.30(t,J＝14.0Hz,1H),2.75(t,J＝12.8Hz,1H),2.39-2.26(m,2H),1.97-1.90(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.485min,m/z 394.2[M+H]⁺；纯度:87.31％@254nm,97.50％@214nm.

实施例76：N-((2-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)甲基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺

步骤1.1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-腈的合成(GEN1-083-1)

5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(3.0g，15mmol)，Zn(CN)2(2.68g，22.8mmol)和Pd(PPh3)4(1.76g，1.52mmol)的DMF(30mL)悬浮液在N2气氛下于95℃搅拌过夜。将反应混合物倒入水(150mL)中，并用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(PE∶EtOAc＝4∶1至1∶2)，得到期望的化合物(2.1g，收率96％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.23min,m/z 143.9[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,84％@214nm.

步骤2.3,3-二溴-2-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲腈(GEN1-083-2)的合成

向1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-腈(2.1g，15mmol)在t-BuOH(15mL)和水(15mL)中的悬浮液中添加Br2(5.86g，36.7mmol)在室温下滴。将所得混合物在室温在黑暗中搅拌2小时。将反应混合物倒入水(200mL)中，并用EtOAc(70mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到所需化合物(4.35g，收率84％)，为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.27min,m/z 316.0[M+H]⁺；纯度:59％@254nm,72％@214nm.

步骤3.2-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲腈(GEN1-083-3)的合成

向3,3-二溴-2-氧代-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲腈(4.35g，13.7mmol)的HOAc(15mL)溶液中分批加入锌粉(4.49g，68.6mmol)。将混合物在室温搅拌1小时。将反应混合物逐渐倒入Na₂CO₃(饱和150mL)中，并用EtOAc(100mL×5)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到期望的化合物(2.1g，收率87％)，为棕色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.56(s,1H),8.55(s,1H),7.96(s,1H),3.63(s,2H).

步骤4.((2-oxo-2,3-dihydro-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-5-yl)methyl)氨基甲酸叔丁酯的合成(GEN1-083-4)

向2-氧代-1,3-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲腈(1.0g，6.3mmol)和Boc2O(1.51g，6.91mmol)的MeOH(60mL)悬浮液中添加Pd/C(10％，669毫克)。将反应混合物在室温在H2气氛下搅拌过夜。将反应混合物过滤并浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(DCM∶MeOH＝40∶1)，得到所需化合物(140mg，收率8％)，为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.24min,m/z 264.2[M+H]⁺；纯度:90％@254nm,84％@214nm.

步骤5.5-(氨基甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2(3H)-1,2,2,2-三氟乙酸酯的合成(GEN1-083-5)

向N-[(2-氧代-1,3-二氢吡咯并[2,3-b]吡啶基-5-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.380mmol)的DCM(6.0mL)溶液中加入TFA(1.2mL)。将得到的混合物在室温搅拌2小时。浓缩反应混合物，得到期望的化合物(120mg粗品，收率90％)，为棕色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.11(s,1H),8.17(br s,3H),8.12(s,1H),7.64(s,1H),4.02-3.98(m,2H),3.60(s,2H).

步骤6.合成N-((2-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)甲基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(GEN1-083)

在冰浴下向5-(氨基甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-2(3H)-1,2,2,2-三氟乙酸酯(105mg，0.379mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(78mg，0.38mmol)，HOBt(77mg，0.57mmol)和DIEA(245mg，1.90mmol)的DMF(3mL)混合物中加入EDCI(110mg，0.574mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至55％)，得到期望的化合物(40.8mg，收率30％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.93(s,1H),8.59(t,J＝5.6Hz,1H),7.93(d,J＝1.6Hz,1H),7.67(d,J＝8.0Hz,2H),7.48(d,J＝8.0Hz,2H),7.41(s,1H),4.20(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,2H),3.52(s,2H).MS(ESI):Rt＝3.047min,m/z 350.1[M+H]⁺；纯度:98.89％@254nm,98.77％@214nm.

实施例77：N-((3-氧代异吲哚-5-基)甲基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺

步骤1.5-氰基-2-甲基苯甲酸甲酯的合成(GEN1-084-1)

在氮气下于140℃下将5-溴-2-甲基-苯甲酸甲酯(2.0g，8.73mmol)，KI(290mg，1.75mmol)和CuCN(981mg，10.48mmol)在DMF(10mL)中搅拌5小时。将混合物冷却至室温并倒入水(30mL)中。加入EtOAc(20mL×2)以萃取所需化合物。合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO4干燥并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化(PE∶EA＝10∶1)，得到所需化合物(1.0g，收率64％)，为黄色固体。¹H NMR(300MHz,CDCl₃):δ8.22(d,J＝1.2Hz,1H),7.67(dd,J＝8.1,1.5Hz,1H),7.38(d,J＝8.1Hz,1H),3.93(s,3H),2.68(s,3H).

步骤2.2-(溴甲基)-5-氰基苯甲酸甲酯的合成(GEN1-084-2)

在80°C下搅拌5-氰基-2-甲基苯甲酸甲酯(650mg，3.71mmol)，NBS(660mg，3.71mmol)和BPO(90mg，0.37mmol)的CCl4(10mL)溶液2个小时。将混合物冷却并过滤。将滤液倒入水(10mL)中，并用PE/EA(5/1，30mL×2)萃取。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到期望的化合物(1.1g，收率82％)，为黄色油状物，其直接用于下一步。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.27(d,J＝1.6Hz,1H),7.77(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.61(d,J＝8.4Hz,1H),4.96(s,2H),3.99(s,3H).

步骤3.3-氧代异吲哚啉-5-腈(GEN1-084-3)的合成

在室温下将化合物2-(溴甲基)-5-氰基苯甲酸甲酯(1.1g，3.03mmol)的NH3/MeOH(饱和的20mL)溶液搅拌1小时，并在70℃搅拌2小时。将混合物冷却并浓缩。用水(5mL)研磨残余物并过滤。将滤饼用PE/EA(5/1，5mL)研磨，并过滤。将滤饼干燥，得到期望的化合物(400mg，产率83％)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.86(s,1H),8.11(s,1H),8.05(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.81(d,J＝7.6Hz,1H),4.49(s,2H).

步骤4.6-氰基-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯的合成(GEN1-084-4)

将3-氧代异吲哚啉-5-腈(400mg，2.53mmol)，Boc2O(828mg，3.79mmol)，TEA(512mg，5.06mmol)和DMAP(31mg)与CHCl3(15mL)的混合物回流5个小时。将混合物浓缩。将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(PE：EA＝1∶1)，得到期望的化合物(500mg，产率73％)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.20(s,1H),7.91(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),4.85(s,2H),1.61(s,9H).MS(ESI)Rt＝1.400min,m/z 203.0[M+H-56]⁺；纯度:94.6％@214nm.

步骤5.6-(氨基甲基)异吲哚啉-1-酮的合成(GEN1-084-5)

6-氰基-1-氧代-异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(150mg，581mmol)和PtO2(30mg)在THF(2mL)和甲醇(2mL)的溶液在50摄氏度下在H2气球下过夜。将混合物冷却并过滤。浓缩滤液，得到6-(氨基甲基)异吲哚啉-1-酮的粗产物(100mg，0.21mmol，收率36％，纯度60％)，为黄色油。MS(ESI)Rt＝0.29,0.34min,m/z 163.0[M+H]⁺；纯度:60％@254nm,60％@214nm.

步骤6.N-((3-氧代异吲哚-5-基)甲基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(GEN1-084)

向6-(氨基甲基)异吲哚啉-1-酮(100mg，0.37mmol，60％纯度)，2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(51mg，0.25mmol)和TEA(106mg，1.05mmol)的DCM(5mL)溶液加入HOBT(42mg，0.31mmol)和EDCI(60mg，0.31mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。用水(10mL)稀释反应混合物，并用DCM(10mL×2)萃取混合物。将合并的有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过C18柱色谱法纯化(在水中30分钟至60％MeCN，历时15分钟)，得到所需化合物(30mg，收率34％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.70(t,J＝5.6Hz,1H),8.52(s,1H),7.68-7.66(m,2H),7.56(s,1H),7.51-7.49(m,3H),7.46-7.44(m,1H),4.37(d,J＝6.0Hz,2H),4.33(s,2H),3.62(s,2H).LCMS(ESI)Rt＝3.413min,m/z 349.1[M+H]⁺；纯度:85.0％@254nm,95.2％@214nm.

实施例78：1-(2-(4-羟基-4-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

步骤1.1-苄基-4-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-醇的合成(GEN1-085-1)

在干冰-丙酮浴(-65℃)和N2气氛下，向1-溴-4-(三氟甲基)苯(1.43g，6.34mmol)的THF(10mL)溶液中滴加1M n-BuLi的己烷(6.3mL，6.3mmol)溶液。。将得到的混合物在-65℃下搅拌1小时。然后将在THF(2mL)中的1-苄基哌啶-4-酮(1.0g，5.3mmol)滴加到该混合物中。将所得混合物在-65℃下搅拌30分钟，然后在0℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至50％)，得到所需化合物(430mg，收率22％)，为无色油状物。MS(ESI):Rt＝1.66min,m/z 336.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,90％@214nm.

步骤2.4-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-醇(GEN1-085-2)的合成

向1-苄基-4-[4-(三氟甲基)苯基]哌啶-4-醇(430mg，1.28mmol)的EtOH(10mL)溶液添加Pd/C(14mg，0.013mmol，10％纯度)。将得到的混合物用H2脱气并在30℃下搅拌过夜。过滤反应混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(300mg，收率83％)，为灰色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.71-7.66(m,4H),5.03(s,1H),2.95-2.89(m,2H),2.75-2.73(m,2H),1.81(td,J＝12.8,4.8Hz,2H),1.51-1.48(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.17min,m/z 246.1[M+H]⁺；纯度:94％@254nm,87％@214nm.

步骤3.2-氯-1-(4-羟基-4-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)乙酮(GEN1-085-3)的合成

在盐冰浴下向4-[4-(三氟甲基)苯基]哌啶-4-醇(100mg，0.408mmol)和TEA(124mg，1.22mmol)的DCM(4mL)溶液中加入2-氯乙酰氯(46mg，0.41mmol)。将得到的混合物在室温搅拌5小时。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用DCM(25mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到期望的化合物(130mg，收率85％)，为棕色油。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.66-7.59(m,4H),4.59-4.53(m,1H),3.84-3.78(m,1H),3.73-3.64(m,1H),3.23-3.14(m,1H),2.68-2.61(m,2H),2.13-2.01(m,3H),1.89-1.79(m,2H).

步骤4.合成1-(2-(4-羟基-4-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-085)

在冰浴下向在1，3-二氢苯并咪唑-2-酮(65mg，0.48mmol)的THF(4mL)溶液中加入NaH(24mg，0.61mmol，60％在矿物油中)。将所得混合物在冰浴下搅拌15分钟。然后在冰浴上滴加2-氯-1-[4-羟基-4-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(130mg，0.404mmol)的THF(1mL)溶液。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(25mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至45％)，得到期望的化合物(43.6mg，收率25％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.84(s,1H),7.73-7.66(m,4H),7.07-6.97(m,4H),5.42(s,1H),4.80(d,J＝16.8Hz,1H),4.69(d,J＝16.8Hz,1H),4.29-4.26(m,1H),3.94-3.90(m,1H),3.55-3.49(m,1H),3.06-2.99(m,1H),2.02(td,J＝12.8,4.4Hz,1H),1.80(td,J＝13.2,4.4Hz,1H),1.65(t,J＝13.6Hz,2H).MS(ESI):Rt＝2.822min,m/z 420.1[M+H]⁺；纯度:94.50％@254nm,98.67％@214nm.

实施例79：6-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)异喹啉-1(2H)-酮

步骤1.6-((二苯亚甲基)氨基)异喹啉-1(2H)-酮的合成(GEN1-086-1)

向6-溴-2H-异喹啉-1-酮(2.8g，13mmol)，二苯基甲亚胺(2.72g，15.0mmol)，BINAP(1.17g，1.87mmol)，Pd2(dba)3(1.29g，1.25mmol)的甲苯(45mL)溶液加入t-BuONa(3.60g，37.5mmol)。将混合物在N2下在105℃下搅拌12小时。然后将混合物冷却至室温并倒入水(100mL)中。加入DCM(40mL×3)提取所需化合物。合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到粗产物。粗产物通过硅胶上的柱色谱法纯化(DCM∶MeOH＝30∶1)，得到期望的化合物(3.0g，收率71％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.55min,m/z 325.3[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.合成6-((二苯基亚甲基)氨基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)异喹啉-1(2H)-酮(GEN1-086-2)

向6-(苯二甲基亚氨基)-2H-异喹啉-1-酮(2.8g，8.6mmol)，1-溴-4-(三氟甲基)苯(3.88g，17.3mmol)，L-脯氨酸(202mg，0.864mmol)，CuI(165mg，0.866mmol)的DMF(40mL)混合物加入Cs2CO₃(5.62g，17.3mmol)。将混合物在95℃和N2气氛下搅拌12小时。冷却至室温后，将混合物倒入水(80mL)中，并用DCM(50mL)萃取三次。浓缩合并的有机层，得到粗产物。粗产物通过硅胶上的柱色谱法纯化(PE∶EtOAc＝5∶1)，得到期望的化合物(1.8g，产率35％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.91min,m/z 469.3[M+H]⁺；纯度:84％@254nm,79％@214nm.

步骤3.合成6-氨基-2-(4-(三氟甲基)苯基)异喹啉-1(2H)-酮(GEN1-086-3)

向6-(苯二甲基亚氨基)-2-[4-(三氟甲基)苯基]异喹啉-1-酮(1.8g，3.8mmol)的THF(15mL)和水(3mL)溶液中加入HCl(1.8mL)。，37％水溶液)。在25℃下搅拌12小时后，将混合物用Na₂CO₃水溶液碱化至pH＝9，并用EtOAc(30mL)萃取3次。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到粗品。将粗产物通过硅胶上的柱色谱法纯化(PE∶EtOAc＝1∶1)，得到所需化合物(1.17g，收率60％)黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.52min,m/z305.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.合成6-((2-硝基苯基)氨基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)异喹啉-1(2H)-酮(GEN1-086-4)

向6-氨基-2-[4-(三氟甲基)苯基]异喹啉-1-酮(700mg，2.30mmol)，1-碘-2-硝基苯(630mg，2.53mmol)，K₂CO₃(636mg，4.60mmol)和Pd2(dba)3(238mg，0.230mmol)的DMF(15mL)混合物中加入BINAP(215mg，0.345mmol)。将混合物在N2下在95℃下搅拌8小时。将混合物冷却至室温并倒入水(25mL)中。加入EtOAc(10mL×3)提取所需化合物。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到粗产物。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(PE：EA＝3∶1)，得到所需化合物(350mg，收率34％)黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.77min,m/z 426.3[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.合成6-((2-氨基苯基)氨基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)异喹啉-1(2H)-酮(GEN1-086-5)

向6-(2-硝基苯胺基)-2-[4-(三氟甲基)苯基]异喹啉-1-酮(350mg，0.823mmol)的MeOH(5mL)溶液中添加Pd/C(10％，50毫克)。将该混合物在H2下在25℃搅拌6小时。过滤混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(200mg，产率61％)。MS(ESI):Rt＝1.64min,m/z 396.3[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤6.合成6-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)异喹啉-1(2H)-酮(GEN1-086)

在冰浴下向6-(2-氨基苯胺基)-2-[4-(三氟甲基)苯基]异喹啉-1-酮(200mg，0.506mmol)和NaHCO₃(425mg，5.06mmol)的DCM(6mL)溶液中加入三光气(120mg，0.404mmol)。在25℃下搅拌6小时后，将混合物倒入水(25mL)中，并用DCM(15mL)萃取3次。合并的有机层通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至50％)，得到期望的(80mg，产率37％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.32(s,1H),8.41(d,J＝8.8Hz,1H),7.99(s,1H),7.93(d,J＝8.4Hz,2H),7.80-7.78(m,3H),7.60(d,J＝7.6Hz,1H),7.20(d,J＝8.0Hz,1H),7.13-7.07(m,3H),6.87(d,J＝7.2Hz,1H).MS(ESI):Rt＝3.013min,m/z422.1[M+H]⁺；纯度:98.59％@254nm,98.91％@214nm.

实施例80：6-(叔-丁基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

步骤1.合成4-((3-(叔丁基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-088-1)

在0℃下向3-叔丁基苯胺(2.00g，13.4mmol)和4-氧哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.94g，14.7mmol)的DCM(50mL)和AcOH(3.22g，53.6mmol)溶液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(5.68g，26.8mmol)。然后将混合物在25℃搅拌过夜。用水(200mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(100mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残留物通过硅胶快速色谱纯化(石油：乙酸乙酯＝10∶1)，得到所需化合物(4.0g，收率87％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.859min,m/z 333.2[M+H]⁺；纯度:96.87％@254nm.

步骤2.N-(5-(叔丁基)-2-硝基苯基)哌啶-4-胺的合成(GEN1-088-2)

在0℃下将4-(3-叔丁基苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g，3.01mmol)和硝酸钾(487mg，4.81mmol)加入玻璃烧瓶中，然后缓慢加入H2SO4(10mL)。然后将混合物在相同温度下搅拌1.5小时。将所得混合物缓慢倒入冰水(100mL)中，并搅拌30分钟。然后将混合物过滤并将滤饼用DCM(100mL)洗涤。滤液用DCM(100mL×4)萃取。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过硅胶柱纯化(DCM∶MeOH＝20∶1)，得到期望的化合物(550mg，产率53％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.46min,m/z 278.2[M+H]⁺；纯度:95％@254nm,81％@214nm.

步骤3.1-(4-((5-(叔丁基)-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮的合成(GEN1-088-3)

向N-(5-叔丁基-2-硝基-苯基)哌啶-4-胺(450mg，1.62mmol)的溶液中，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(397mg，1.95mmol)DIEA(629mg，4.87mmol)的DMF(5mL)溶液加入HATU(925mg，2.43mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将水(20mL)添加到所得混合物中，并添加EtOAc(100mL×3)以萃取所需化合物。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物通过硅胶柱纯化(PE：EA＝1：1)，得到期望的化合物(565mg，产率75％)，为黄色油。MS(ESI):Rt＝1.88min,m/z464.5[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,85％@214nm.

步骤4.1-(4-((2-氨基-5-(叔丁基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮的合成(GEN1-088-4)

向1-(4-((5-(叔丁基)-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(565mg，1.22mmol)在水(2.5mL)和甲醇(10mL)的悬浊液中加入NH₄Cl(978mg，18.3mmol)和锌粉(797mg，12.2mmol)。将混合物在65℃下搅拌2.5小时。然后加入水(25mL)，并将混合物用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水Na₂SO4干燥并蒸发，得到期望的化合物(506mg，产率87％)，为紫色油。MS(ESI)Rt＝1.75min,m/z 434.5[M+H]⁺；纯度:83％@254nm,91％@214nm.

步骤5合成6-(叔-丁基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-088)

在0℃下向1-(4-((2-氨基-5-(叔丁基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(250mg，0.577mmol)和NaHCO₃(484mg，5.77mmol)在DCM(5mL)中的悬浊液缓慢加入三光气(86mg，0.29mmol)。将混合物在0℃下搅拌1.5小时。将所得混合物浓缩至干。将残余物用水(50mL)稀释，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过制备纯化。HPLC(制备5 Xbridge C18 5um 19*150mm，35％-80％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；UV：214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(138mg，产率52％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.69(s,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.51(d,J＝8.0Hz,2H),7.08(s,1H),7.00(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),6.87(d,J＝8.4Hz,1H),4.57(d,J＝12.8Hz,1H),4.46-4.40(m,1H),4.15(d,J＝12.8Hz,1H),3.97-3.87(m,2H),3.21(t,J＝12.4Hz,1H),2.73(t,J＝12.4Hz,1H),2.21-2.14(m,2H),1.72(d,J＝12.0Hz,2H),1.27(s,9H).MS(ESI):Rt＝4.056min,m/z 460.3[M+H]⁺；纯度:78.90％@254nm,99.53％@214nm.

实施例81：6-环丙基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

步骤1.4-环丙基-2-氟-1-硝基苯的合成(GEN1-089-1)

在80℃和N2气氛下4-溴-2-氟-1-硝基苯(3.0g，14mmol)，2-环丙基-4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼烷的混合物(2.52g，15.0mmol)，Pd(dppf)Cl2(1.11g，1.36mmol)和Na₂CO₃(2.89g，27.3mmol)在1,4-二恶烷(20mL)和水(5mL)溶液中搅拌8个小时。冷却至室温后，将混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到粗。粗产物通过硅胶柱色谱纯化(PE∶EA＝10∶1)，得到所需化合物(2.2g，收率80％)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.02(t,J＝11.2Hz,1H),7.00-6.92(m,2H),2.06-1.97(m,1H),1.25-1.18(m,2H),0.90-0.84(m,2H).

步骤2.4-((5-环丙基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-089-2)的合成

向4-环丙基-2-氟-1-硝基苯(1.5g，8.3mmol)和4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.66g，8.28mmol)的DMF(20mL)混合物中加入K2 CO3(2.29g，16.6mmol)。在95℃下搅拌6小时后，将混合物冷却至室温。将混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL)萃取三次。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到所需化合物(2.5g，收率84％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.86min,m/z 306.3,[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.4-((2-氨基-5-环丙基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-089-3)的合成

向4-((5-环丙基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，4.2mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中添加Pd/C(100mg，10％)。将该混合物在H2下在25℃搅拌6小时。过滤混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(900mg，收率60％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.69min,m/z332.1,[M+H]⁺；纯度:92％@254nm,74％@214nm.

步骤4.4-(6-环丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-089-4)的合成

在冰浴下向4-((2-氨基-5-环丙基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(700mg，2.11mmol)和NaHCO₃(1.77g，21.1mmol)在DCM(15mL)的混合物添加的三光气(500mg，1.68mmol)。在室温下搅拌2小时后，将混合物倒入水(30mL)中，并用DCM(15mL)萃取三次。合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到所需化合物(650mg，收率75％)白色固体。MS(ESI):Rt＝1.50min,m/z 356.2,[M-H]^-；纯度:100％@254nm,87％@214nm.

步骤5.合成6-环丙基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-089-5)

向4-(6-环丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(220mg，0.615mmol)的DCM溶液(3mL)加入TFA(1.5mL)。在25℃下搅拌12小时后，将混合物浓缩，用Na₂CO₃水溶液(饱和5mL)碱化至pH＝9，并用EtOAc(10mL)萃取3次。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到所需化合物(150mg，产率78％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.16min,m/z 258.1[M+H]⁺；纯度:82％@254nm,97％@214nm.

步骤6.合成6-环丙基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-089)

向5-环丙基-3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(150mg，0.583mmol)的溶液中，2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(119mg，0.583mmol)和HATU(288mg，0.757mmol)在DMF(2.5mL)的溶液中加入DIEA(226mg，1.75mmol)。在25℃下搅拌6小时后，将混合物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至50％)，得到期望的化合物(70mg，产率27％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.57(br s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,2H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),6.96(d,J＝8.0Hz,1H),6.77-6.74(m,2H),4.92(d,J＝13.2Hz,1H),4.52-4.44(m,1H),4.06(d,J＝13.6Hz,1H),3.92-3.84(m,2H),3.20(t,J＝12.0Hz,1H),2.73(t,J＝12.0Hz,1H),2.39-2.28(m,1H),2.20-2.09(m,1H),1.95-1.82(m,3H),0.99-0.97(m,2H),0.67-0.60(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.773min,m/z 444.2[M+H]⁺；纯度:94.79％@254nm,99.86％@214nm.

实施例82：6-苯基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

步骤1 3-氟-4-硝基-1,1'-联苯的合成(GEN1-090-1)

4-溴-2-氟-1-硝基苯(1.5g，6.8mmol)，苯硼酸(832mg，6.82mmol)，Pd(dppf)Cl2(557mg，0.682mmol)，Na₂CO₃(2.17g，20.5mmol)二氧六环(15mL)和水(3mL)的混合物在N2下在80℃下搅拌8小时。冷却至室温后，将混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到粗。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(PE∶EA＝10∶1)，得到所需化合物(670mg，产率43％)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.16(t,J＝8.4Hz,1H),7.62-7.60(m,2H),7.53-7.47(m,5H).

步骤2.4-((4-硝基-[[1,1'-联苯]-3-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-090-2)的合成

向2-氟-1-硝基-4-苯基苯(650mg，2.99mmol)，4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(600mg，3.00mmol)的DMF(8mL)溶液中加入K2 CO3(828mg，5.99mmol)。将混合物在105℃下搅拌12小时。冷却至室温后，将混合物倒入水(20mL)中，并用EtOAc(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到希望的化合物(1.1克，产率87％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.96min,m/z 342.3,[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,94％@214nm.

步骤3.4-((4-氨基-[[1,1'-联苯]-3-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-090-3)的合成

向4-(2-硝基-5-苯基-苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，2.8mmol)的MeOH(15mL)溶液中添加Pd/C(100mg，10％)。将该混合物在H2下在25℃搅拌6小时。过滤混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(900mg，收率75％)，为粉红色固体。MS(ESI):Rt＝1.43min,m/z 268.2,[M+H-Boc]⁺；纯度:89％@254nm,85％@214nm.

步骤4.4-(2-氧代-6-苯基-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-090-4)的合成

在冰浴下向4-(2-氨基-5-苯基-苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.36mmol)和NaHCO₃(1.14g，13.6mmol)的DCM(10mL)溶液中加入三光气(323mg，1.09mmol)。在25℃下搅拌6小时后，将混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到所需化合物(481毫克，产率75％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.64min,m/z 338.1,[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,83％@214nm.

步骤5.合成6-苯基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-090-5)

向4-(2-氧代-6-苯基-3H-苯并咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(400mg，1.02mmol)在DCM(4mL)中的溶液中添加TFA(2mL)。在25℃下搅拌12小时后，将混合物浓缩。将残余物溶于水(3mL)中，并用Na₂CO₃水溶液(饱和10mL)碱化至pH＝9。将混合物用DCM(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到所需化合物(270mg，产率91％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.27min,m/z 294.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤6.合成6-苯基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-090)

向5-苯基-3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(150mg，0.511mmol)的溶液中，加入2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(105mg，0.514mmol)，HATU(253mg，0.665mmol)的DMF(3mL)溶液加入DIEA(200mg，1.55mmol)。在20℃下搅拌6小时后，将混合物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至45％)，得到期望的化合物(70mg，产率28％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.92(s,1H),7.64(d,J＝10.0Hz,2H),7.60(d,J＝8.4Hz,2H),7.49-7.45(m,4H),7.39(s,1H),7.36-7.32(m,1H),7.26(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.05(d,J＝8.0Hz,1H),4.61-4.46(m,2H),4.12-4.09(m,1H),3.96-3.87(m,2H),3.20(t,J＝10.4Hz,1H),2.76-2.69(m,1H),2.26-2.21(m,2H),1.78-1.70(m,2H).MS(ESI):Rt＝7.627min,m/z 480.1[M+H]⁺；纯度:99.56％@254nm,99.29％@214nm.

实施例83：7-硝基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

步骤1.4-(2，6-二硝基苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成(GEN1-091-1)

向2-氯-1,3-二硝基苯(1.00g，4.94mmol)和K₂CO₃(1.02g，7.41mmol)在DMF(10mL)中的悬浮液中加入4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.09g，5.43mmol)。将混合物在70℃下搅拌3.5小时。用水(100mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(40mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到所需化合物(2.38g，产率92％)，为黄色油。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.13(d,J＝8.4Hz,2H),8.09(d,J＝8.0Hz,1H),6.83(t,J＝8.4Hz,1H),4.03-3.86(m,2H),3.29-3.20(m,1H),2.90-2.82(m,2H),1.94-1.90(m,2H),1.43(s,9H),1.41-1.34(m,2H).

步骤2.4-((2-氨基-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成(GEN1-091-2)

向4-(2,6-二硝基苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0g，2.7mmol)在EtOAc(100mL)中的溶液中添加Pd/C(10％，145mg)。将所得混合物在室温在H2气氛下搅拌2小时。将得到的混合物过滤并将滤液通过硅胶柱纯化(PE：EA＝3∶1)，得到期望的化合物(601mg，收率59％)，为红色油。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.15(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),6.96(d,J＝8.0Hz,1H),6.87(t,J＝8.0Hz,1H),5.29(d,J＝10.4Hz,1H),5.24(s,2H),3.85(d,J＝11.6Hz,2H),3.29-3.26(m,1H),2.70-2.67(m,2H),1.73(d,J＝11.2Hz,1H),1.38(s,9H),1.19-1.16(m,2H).

步骤3.4-(7-硝基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-091-3)的合成

在0℃向4-(2-氨基-6-硝基-苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(489mg，1.45mmol)和NaHCO₃(1.22g，14.5mmol)的DCM(20mL)溶液中滴加加入三光气(216mg，0.728mmol)的DCM(5mL)溶液。加完后，将混合物在0℃下搅拌1.5小时。将得到的混合物倒入水(100mL)中，并用DCM(50mL×3)萃取。将合并的有机物用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到所需化合物(537毫克，产率89％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.60min,m/z 307.2[M+H-56]⁺；纯度:87％@254nm,89％@214nm.

步骤4.合成7-硝基-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-091-4)

向4-(7-硝基-2-氧代-3H-苯并咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(537mg，1.48mmol)在DCM(20mL)中的溶液中添加TFA(4mL)。将混合物在室温搅拌1小时。浓缩所得混合物，并添加NaHCO₃(饱和水溶液，20mL)以调节pH至8。添加EtOAc(100mL×3)以萃取所需化合物。将合并的有机层用硫酸钠干燥并浓缩，得到所需化合物(272毫克，产率70％)，为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.14min,m/z 263.1[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.合成7-硝基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-091)

向4-硝基-3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(100mg，0.381mmol)的溶液中，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(93mg，0.46mmol)和DIEA(148mg，1.15mmol)的DMF(2mL)溶液加入HATU(217mg，0.571mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。将得到的混合物过滤并将滤液通过制备纯化。HPLC(waters-3 Xbridge C18 5um 19*150mm，30％-80％B；A：H₂O(0.1％TFA)，B：CH₃CN；UV：254nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(100mg，收率57％)为浅黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.79(s,1H),7.61-7.58(m,3H),7.40(d,J＝8.0Hz,2H),7.30(d,J＝7.6Hz,1H),7.15(t,J＝8.0Hz,1H),4.87(d,J＝12.8Hz,1H),4.08-4.00(m,2H),3.85(s,2H),3.11-3.05(m,1H),2.77-2.67(m,1H),2.64-2.55(m,2H),1.93(t,J＝8.0Hz,1H).MS(ESI):Rt＝3.816min,m/z449.2[M+H]⁺；纯度:98.41％@254nm,99.80％@214nm.

实施例84：2-氧代-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-磺酰胺

步骤1.苄基(2-氟-3-硝基苯基)亚砜(GEN1-094-1)的合成

向1-溴-2-氟-3-硝基苯(3.0g，14mmol)，苯甲硫醇(2.03g，16.4mmol)，Pd2(dba)3(1.41g，1.36mmol)和DIEA(3.52g，27.3mmol)的二氧六环(50mL)溶液中加入Xantphos(789mg，1.36mmol)中。将混合物在N2下在85℃下搅拌6小时。冷却至室温后，将混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到粗。粗产物通过硅胶柱色谱法(石油：乙酸乙酯＝10∶1)和C18柱色谱法(60-90％CH₃CN的水溶液)纯化，得到期望的产物(3.1g，收率86％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.75min,m/z 262.1[M-H]^-；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.4-((2-(苄硫基)-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-094-2)的合成

向1-苄基硫烷基-2-氟-3-硝基苯(3.1g，12mmol)和4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.83g，14.1mmol)在DMSO(40mL)中的溶液中添加K2 CO3(3.25g，23.6mmol)。将混合物在N2下在85℃下搅拌12小时。冷却至室温后，将混合物倒入水(100mL)中，并用EtOAc(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。通过硅胶柱色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝10∶1)和C18柱色谱法(60-90％CH₃CN的水溶液)纯化粗产物，得到期望的化合物(3.0g，收率57％)，为红色油。MS(ESI):Rt＝1.97min,m/z 388.3[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,纯度:100％@214nm.

步骤3.4-((2-氨基-6-(苄硫基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-094-3)的合成

向4-(2-苄基硫烷基-6-硝基-苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.0g，6.8mmol)在THF(20mL)，MeOH(20mL)和水(20mL)的混合物中加入NH₄Cl(2.17g，40.6mmol)，并分批加入锌粉(2.21g，33.8mmol)。将混合物在40℃搅拌过夜。将混合物过滤并将滤液浓缩。残留物用水稀释并用EA(50mL×3)萃取。将合并的有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5∶1)，得到期望的化合物(800mg，收率29％)，为黄色油。MS(ESI):Rt＝1.878min,m/z 414.2[M+H]⁺；纯度:98％@214nm.

步骤4.4-(7-(苄硫基)-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-094-4)的合成

向4-(2-氨基-6-苄基硫烷基-苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(480mg，1.04mmol)和NaHCO₃(877mg，10.5mmol)在DCM(30mL)中的混合物中添加三光气(124mg，0.420mmol)。在室温下搅拌1小时后，将混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1∶1)，得到所需化合物(390mg，收率81％)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.21(s,1H),7.22-7.21(m,3H),7.19-7.17(m,1H),7.04-6.98(m,4H),5.51-5.46(m,1H),4.20-4.09(m,2H),4.04(s,2H),2.71-2.65(m,2H),2.58-2.48(m,2H),1.48(s,9H),1.45-1.41(m,2H).

步骤5.4-(2-氧代-7-氨磺酰基-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成(GEN1-094-5)

在5℃下向化合物4-(7-苄基硫烷基-2-氧代-3H-苯并咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.43mmol)的THF(4mL)和水(0.4mL)溶液中分批加入1,3-二氯-5,5-二甲基咪唑烷-2,4-二酮(187mg，0.95mmol)。将混合物在5℃下搅拌30分钟后，加入NH3·H₂O(25％水溶液，3mL)。将混合物搅拌5分钟。用水(20mL)稀释反应混合物，并萃取EtOAc(20mL×2)。将合并的有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物与石油醚/乙酸乙酯(5/1，2mL)一起研磨并过滤。收集固体，得到所需化合物(120mg，产率60％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.35min,m/z 397.4[M+H]⁺；纯度:86％@214nm,100％@254nm.

步骤6.2-氧代-3-(哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-磺酰胺的合成(GEN1-094-6)

向4-(2-氧代-7-氨磺酰基-3H-苯并咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(120mg，0.260mmol)的MeOH(2mL)溶液中加入HCl(1毫升)。在40℃下搅拌1小时后，将混合物浓缩。将残余物溶于水(1mL)。逐滴添加NaOH水溶液(10％)以调节pH＝8。然后添加EtOAc(2mL×2)以萃取所需化合物。浓缩合并的有机溶液，得到期望的化合物(180mg，产率96％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝0.49min,m/z 297.2[M+H]⁺；纯度:70％@254nm,80％@214nm.

步骤7.合成2-氧代-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-磺酰胺(GEN1-094)

向2-氧代-3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-4-磺酰胺(180mg，0.245mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(51mg，0.25mmol)，DIEA(97mg，0.75mmol)的DMF(3mL)溶液加入HOBT(50mg，0.37mmol)和EDCI(72mg，0.37mmol)。在室温搅拌2小时后，将混合物倒入水(10mL)中，并用DCM(10mL×3)萃取。浓缩合并的有机相。残余物通过C18柱色谱法纯化[40～80％CH₃CN的水溶液(0.1％TFA)]，得到期望的化合物(50mg，产率41％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.34(s,1H),7.84(s,2H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.52-7.47(m,3H),7.19(d,J＝7.2Hz,1H),7.11(t,J＝8.0Hz,1H),5.31-5.25(m,1H),4.58-4.55(m,1H),4.15-4.12(m,1H),3.96-3.84(m,2H),3.56-3.37(m,1H),3.01(t,J＝12.8Hz,1H),2.58-2.55(m,1H),2.43-2.40(m,1H),1.74-1.72(m,2H).¹⁹F NMR(376MHz,DMSO-d₆):δ-60.79(s,3F).MS(ESI):Rt＝3.316min,m/z483.1[M+H]⁺；纯度:81.97％@254nm,98.80％@214nm.

实施例85：2-氧代-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-羧酰胺的合成(GEN1-095)

步骤1.2-氧代-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-羧酰胺的合成(GEN1-095)

2-氧代-3-[1-[2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酰基]-4-哌啶基]-1H-苯并咪唑-4-腈的混合物(150mg，0.350mmol，合成步骤见GEN1-014)，在乙醇(2mL)，NaOH(21mg，0.53mmol)和过氧化氢(30％，2mL)在55℃搅拌12小时。冷却至室温后，将混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到粗。粗产物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至50％)，得到期望的化合物(75mg，产率46％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.03(s,1H),8.10(s,1H),7.70-7.67(m,3H),7.47(d,J＝8.0Hz,2H),7.01-6.97(m,3H),4.58(d,J＝10.4Hz,1H),4.38-4.32(m,1H),4.17(d,J＝13.2Hz,1H),3.95-3.84(m,2H),2.90(t,J＝13.2Hz,1H),2.43-2.33(m,3H),1.79-1.74(m,2H).MS(ESI):Rt＝2.663min,m/z 447.1,[M+H]⁺；纯度:96.31％@254nm,98.86％@214nm.

实施例86：1-(1-(2-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

步骤1.2-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)乙酸(GEN1-096-1)的合成

在100℃下将2-(1,3-苯并二恶唑-5-基)乙腈(300mg，1.86mmol)和NaOH(224mg，5.60mmol)在水(15mL)中的悬浊液搅拌2小时。用1M HCl将反应混合物酸化至pH＝2，然后用EtOAc(15mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到期望的化合物(320mg，收率91％)，为白色固体。¹HNMR(300MHz,CDCl₃):δ6.78-6.70(m,3H),5.95(s,2H),3.56(s,2H).

步骤2.合成1-(1-(2-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-096)

在冰浴下向2-(1,3-苯并二恶唑-5-基)乙酸(50mg，0.28mmol)，3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-one(57mg，0.26mmol)，HOBT(56mg，0.41mmol)和DIEA(108mg，0.836mmol)的DMF(2mL)的悬浮液中加入EDCI(80mg，0.42mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至50％)，得到期望的化合物(17.9mg，收率17％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.83(s,1H),7.09-7.00(m,3H),6.90-6.86(m,2H),6.80-6.75(m,2H),5.95(s,2H),4.90-4.86(m,1H),4.59-4.48(m,1H),4.07-4.03(m,1H),3.74(s,2H),3.15(t,J＝12.8Hz,1H),2.69(t,J＝14.0Hz,1H),2.31-2.19(m,1H),1.98-1.84(m,2H),1.75-1.71(m,1H).MS(ESI):Rt＝3.140min,m/z 380.1[M+H]⁺；纯度:92.84％@254nm,99.07％@214nm.

实施例87：1-(1-(2-(4-(二甲基氨基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

步骤1.合成1-(1-(2-(4-(二甲基氨基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-097)

向3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(100mg，0.460mmol)，2-(4-(二甲基氨基)苯基)乙酸(99mg，0.55mmol)和DIEA(179mg，1.38mmol)的DMF(1.5mL)溶液中加入HATU(263mg，0.692mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。所得混合物通过制备纯化。HPLC(Waters-Large-prep-2 Xbridge C18 5um 19*150mm，2％-40％B；A：H₂O(0.1％TFA)，B：CH₃CN；UV：214nm，流速：15mL/min)。然后加入饱和的Na₂CO₃以将溶液碱化至pH＝8。将混合物用EtOAc(20mL×3)萃取，并将合并的有机层浓缩，得到所需化合物(64mg，收率36％)为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.82(s,1H),7.12(d,J＝8.8Hz,2H),6.95-6.93(m,4H),6.72(d,J＝8.4Hz,2H),4.57(d,J＝12.4Hz,1H),4.42-4.36(m,1H),4.07(d,J＝13.2Hz,1H),3.70-3.58(m,2H),3.14-3.08(m,1H),2.85(s,6H),2.68-2.62(m,1H),2.05-1.96(m,1H),1.91-1.83(m,1H),1.66(d,J＝11.6Hz,1H),1.55(d,J＝10.8Hz,1H).MS(ESI):Rt＝3.286min,m/z379.2[M+H]⁺；纯度:99.37％@254nm,99.34％@214nm.

实施例88：1-(1-(2-(金刚烷-1-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

步骤1.合成1-(1-(2-(金刚烷-1-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-098)

向2-(1-金刚烷基)乙酸(100mg，0.515mmol)，3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(112mg，0.516mmol)和HATU(255mg，0.671mmol)的DMF(3mL)溶液中加入DIEA(200mg，1.55mmol)。在25℃下搅拌6小时后，将混合物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至50％)，得到期望的化合物(50mg，收率24％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.84(s,1H),7.12-7.03(m,4H),4.96(d,J＝16.0Hz,1H),4.60-4.52(m,1H),4.17(d,J＝15.2Hz,1H),3.20(t,J＝12.8Hz,1H),2.66(t,J＝12.8Hz,1H),2.40-2.18(m,4H),2.00(s,3H),1.92-1.89(m,2H),1.75-1.66(m,12H).MS(ESI):Rt＝4.059min,m/z 394.2,[M+H]⁺；纯度:81.04％@254nm,98.96％@214nm.

实施例89：5-硝基-4-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮

步骤1.4-((2-(2-氯乙酰胺基)-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-101-1)的合成

向4-(2-氨基-6-硝基-苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(596mg，1.77mmol，合成步骤见GEN1-091)和NaHCO₃(744mg，8.86mmol)的DCM(20mL)悬浊液逐滴添加2-氯乙酰氯(200mg，1.77mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将所得混合物浓缩并倒入水(20mL)中。将混合物用DCM(50mL×3)萃取。合并的有机溶液用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过硅胶柱纯化(PE∶EA＝5∶1)，得到期望的化合物(694mg，收率95％)，为红色油。¹HNMR(300MHz,CDCl₃):δ9.24(s,1H),8.62(d,J＝8.1Hz,1H),7.88(dd,J＝8.4,1.2Hz,1H),7.25(t,J＝8.1Hz,1H),5.78-5.54(m,1H),4.34(s,2H),4.17-4.11(m,2H),3.10-3.07(m,1H),2.77-2.69(m,2H),1.88-1.72(m,2H),1.51(s,9H),1.44-1.32(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.64min,m/z 411.4[M-H]^-；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.4-(8-硝基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-101-2)的合成

4-[2-[((2-氯乙酰基)氨基]-6-硝基-苯胺基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(594mg，1.44mmol)，DIEA(558mg，4.32mmol)和KI(在N2气氛下于80℃将72mg，0.43mmol)的乙腈(20mL)溶液搅拌22小时。将得到的混合物浓缩并通过C18柱纯化(50-70％B；A：H₂O，B：CH₃CN)，得到期望的化合物(336mg，收率62％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.53min,m/z375.4[M-H]^-；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.5-硝基-4-(哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮的合成(GEN1-101-3)

4-(8-硝基-3-氧代-2,4-二氢喹喔啉-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(356mg，0.946mmol)和TFA(1.54g，13.5mmol)的DCM溶液(15mL)室温下搅拌3小时。将得到的混合物浓缩并用水(15mL)稀释。然后加入饱和Na₂CO₃水溶液使溶液碱化至pH＝8。将混合物用DCM(50mL×4)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到所需化合物(256毫克，产率98％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.11min,m/z 277.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.5-硝基-4-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-101)

向5-硝基-4-(4-哌啶基)-1,3-二氢喹喔啉-2-一(120mg，0.434mmol)的溶液中，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(106mg，0.519mmol)和DIEA(168mg，1.30mmol)的DMF(3mL)溶液中加入HATU(248mg，0.652mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。所得混合物通过制备纯化。HPLC(prep-2 Xbridge C18 5um 19*150mm，33％-50％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；UV：214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(71mg，收率35％)为浅黄色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.77(s,1H),7.66(d,J＝8.0Hz,2H),7.59(dd,J＝6.8,2.4Hz,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),7.21-7.15(m,2H),4.43(d,J＝12.8Hz,1H),4.00(d,J＝14.0Hz,1H),3.88-3.78(m,2H),3.62(s,2H),3.21-3.14(m,1H),2.92(t,J＝12.4Hz,1H),2.47-2.41(m,1H),1.65-1.62(m,2H),1.56-1.40(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.948min,m/z 463.1[M+H]⁺；纯度:99.39％@254nm,98.84％@214nm.

实施例90：5-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-4,5-二氢-1H-苯并[b][1,4]二氮杂-2(3H)-酮

步骤1.3-((2-硝基苯基)(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)丙酸(GEN1-102-1)的合成

向1-(4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(2.00g，3.98mmol，合成步骤见GEN1-055)的混合物中加入浓的丙烯酸(4mL)和硫酸(2.0克)。在100℃下搅拌3小时后，将混合物冷却至室温并倒入冰水(50mL)中。混合物用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到残余物。残余物通过C18柱色谱法纯化(40-80％ACN的水溶液)，得到期望的化合物(800mg，收率42％)，为黄色油状物。LCMS(ESI)Rt＝1.37min,m/z 480.5[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.合成5-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-4,5-二氢-1H-苯并[b][1,4]二氮杂-2(3H)-酮(GEN1-102)

向化合物3-((2-硝基苯基)(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)丙酸(800mg，1.67mmol)的二氧六环(5mL)，加入锌粉(1.09g，16.7mmol)和H3PO4(1g，85％纯度)。将混合物在70℃下搅拌30分钟，并在100℃下搅拌3小时。将混合物冷却至室温并过滤。滤饼用EtOAc(20mL)洗涤。浓缩合并的滤液，得到残余物。残余物通过C18(在水中50-80％ACN)纯化，并通过制备型HPLC[gilson-2，Xbridge C18，5um，19x 150mm，40-80％B，A：H₂O(0.1％TFA)纯化。)，B：ACN，F＝15mL/min，uv＝214nm]，得到期望的化合物(188mg，产率26％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ9.41(s,1H),7.67(d,J＝8.0Hz,2H),7.45(d,J＝8.0Hz,2H),7.15-7.13(m,1H),7.07-7.03(m,1H),6.96-6.89(m,2H),4.27(d,J＝12.0Hz,1H),3.91(d,J＝14.8Hz,1H),3.84(s,2H),3.52(t,J＝10.4Hz,1H),3.34(t,J＝10.4Hz,2H),3.14(t,J＝13.2Hz,1H),2.78(t,J＝12.8Hz,1H),2.32-2.28(m,2H),1.81-1.73(m,2H),1.56-1.46(m,2H).¹⁹F NMR(376MHz,DMSO-d₆):δ60.80.LCMS(ESI)Rt＝3.396min,m/z432.1[M+H]⁺；纯度:98.7％@254nm,97.3％@214nm.

实施例91：(顺式)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-107)和(反式)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-108)

步骤1.合成2-(4-(三氟甲基)环己叉基)乙酸乙酯(GEN1-107-1)

在冰浴下，向2-二乙氧基磷酰基乙酸乙酯(1.94g，8.67mmol)的THF(40mL)溶液中分批加入NaH(60％的矿物油，433mg，10.8mmol)。将混合物在室温搅拌1小时后，滴加4-(三氟甲基)环己酮(1.2g，7.2mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。用水(50mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(30mL×2)萃取。合并的有机相经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，并将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(石油：乙酸乙酯＝10：1)，得到所需化合物(1.4g，收率82％)为黄色油。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ5.68-5.56(m,1H),4.14(q,J＝7.2Hz,2H),2.97(s,2H),2.29-2.21(m,2H),2.16-2.08(m,3H),2.04-2.00(m,1H),1.60-1.47(m,1H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H).

步骤2.合成2-(4-(三氟甲基)环己基)乙酸乙酯(GEN1-107-2)

将2-[4-(三氟甲基)环己叉基]乙酸乙酯(1.4g，5.9mmol)和Pd/C(10％，300mg)的MeOH(50mL)混合物在H₂气球下于40℃氢化过夜。通过硅藻土过滤该混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(1.3g，产率92％)为无色液体。¹H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.13(q,J＝7.2Hz,2H),2.35-2.19(m,2H),1.96-1.56(m,8H),1.40-1.30(m,1H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H),1.06-0.96(m,1H).

步骤3.合成2-(4-(三氟甲基)环己基)乙酸(GEN1-107-3)

向化合物2-[4-(三氟甲基)环己基]乙酸乙酯(1.30g，5.46mmol)的MeOH(20mL)溶液中加入NaOH(436mg，10.9mmol)的水(10mL)溶液在40℃搅拌2小时。将混合物浓缩。将残余物用水(30mL)稀释，并用EtOAc(20mL)萃取。水层用1N HCl酸化至pH＝2。酸化的水层用EtOAc(30mL×2)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到所需化合物(1.05g，收率92％)为黄色油。¹H NMR(400MHz,CDCl3):δ2.41-2.39(m,0.5H),2.27-2.26(m,1.5H),2.23-2.19(m,0.5H),2.13-2.05(m,0.5H),1.98-1.91(m,3.5H),1.85-1.75(m,1H),1.72-1.69(m,0.5H),1.63-1.58(m,1H),1.41-1.30(m,1.5H),1.09-0.98(m,1.5H).

步骤4.合成1-(1-(2-(4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-107-4)

将化合物3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(300mg，1.38mmol)，2-(4-(三氟甲基)环己基)乙酸(305mg，1.45mmol)和DIEA(535mg，4.14mmol)溶解在DMF(3mL)中，并加入EDCI(397mg，2.07mmol)和HOBT(280mg，2.07mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。用水(50mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机相浓缩，并且将残余物通过C₁₈柱色谱法纯化(乙腈：水＝40～70％)，得到所需化合物(240mg，收率42％)为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.52min,m/z 410.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.合成(顺式)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-107)和(反式)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-108)

1-(1-(2-(4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮的顺式/反式混合物(240mg，0.59)通过制备型手性HPLC[方法：IB柱，CO₂：IPA(0.2％DEA)＝80:20，流速＝0.6mL/min，UV＝230nm]分离得到1-(1-(2-((1S，4S)-4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(45mg，纯度91％)和1-(1-(2-((1R，4R)-4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(80mg，纯度91％)。

两种产物分别通过制备型HPLC[gilson-2，Xbridge C₁₈，5um，19*150mm，40～80％B，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：ACN，流速：15mL/min，UV＝214nm]，得到1-(1-(2-((1S，4S)-4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(28毫克，产率11％)为白色固体和1-(1-(2-((1R，4R)-4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(35毫克，产率14％)为白色固体。

分析数据(1-(2-((1S，4S)-4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.84(s,1H),7.20-7.18(m,1H),6.99-6.97(m,3H),4.59(d,J＝13.2Hz,1H),4.44-4.37(m,1H),4.08(d,J＝13.2Hz,1H),3.15(t,J＝12.4Hz,1H),2.64(t,J＝12.0Hz,1H),2.42-2.40(m,2H),2.29-2.23(m,2H),2.15-2.09(m,2H),1.76-1.68(m,2H),1.64-1.61(m,2H),1.56-1.52(m,6H).MS(ESI):Rt＝3.855min,m/z410.2[M+H]⁺；纯度:97.1％@254nm,97.7％@214nm.

分析数据1-(1-(2-((1R，4R)-4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.84(s,1H),7.20-7.17(m,1H),6.97-6.96(m,3H),4.59(d,J＝12.4Hz,1H),4.45-4.37(m,1H),4.03(d,J＝13.2Hz,1H),3.15(t,J＝12.4Hz,1H),2.64(t,J＝12.0Hz,1H),2.29-2.27(m,2H),2.24-2.06(m,3H),1.88-1.83(m,4H),1.74-1.69(m,3H),1.32-1.22(m,2H),1.10-0.98(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.862min,m/z410.1[M+H]⁺；纯度:98.5％@254nm,98.2％@214nm.

实施例92：N-(4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)乙基)苯基)乙酰胺(GEN1-109)

步骤1.合成1-(1-(2-(4-氨基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-109-1)

将1-(1-(2-(4-硝基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(274mg，720mmol，合成过程看GEN1-093的最终报告)在MeOH(20mL)和THF(20mL)溶液中溶解，加入Pd/C(10％纯度，77mg，0.72mmol)。将得到的混合物在氢气中室温搅拌3小时。将混合物过滤，浓缩并通过C₁₈(40-60％B；A：H₂O B：CH₃CN)纯化，得到所需的化合物(200mg，收率79％)为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.24min,m/z 351.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.合成N-(4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)乙基)苯基)乙酰胺(GEN1-109)

将1-(1-(2-(4-氨基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(80mg，0.23mmol)溶解在THF(6mL)中，冰浴下滴加Ac₂O(35mg，0.34mmol)，在加入后，将混合物在室温下搅拌4小时。将混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC纯化(制备型5 Xbridge C₁₈ 5um19*150mm，10-60％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；214nm，流速：15mL/min)，得到所需化合物(59mg，产率63％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.76(s,1H),7.52(d,J＝8.8Hz,2H),7.33(s,1H),7.27(d,J＝8.0Hz,2H),7.08-7.02(m,3H),6.91-6.85(m,1H),4.88(d,J＝15.2Hz,1H),4.54-4.45(m,1H),4.03(d,J＝13.2Hz,1H),3.78(s,2H),3.16-3.10(m,1H),2.71-2.64(m,1H),2.30-2.19(s,1H),2.16(s,3H),2.00-1.90(m,1H),1.87-1.83(m,1H),1.73-1.69(m,1H).MS(ESI):Rt＝3.134min,m/z 393.2[M+H]⁺；纯度:99.00％@254nm,96.16％@214nm.

实施例93：(N-(4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)乙基)苯基)甲磺酰胺(GEN1-110)

步骤1.合成(N-(4-(2-氧代-2-(4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)乙基)苯基)甲磺酰胺(GEN1-110)

将1-(1-(2-(4-氨基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(100mg，0.285mmol，合成过程看GEN1-109-1的最终报告)和TEA(144mg，1.42mmol)溶解在DCM(5mL)和THF(5mL)中，并且在零摄氏度下分四批加入MsCl(163mg,1.42mmol)。然后将混合物在室温搅拌28小时。将得到的混合物浓缩并将残余物通过制备纯化(制备5 XbridgeC₁₈ 5um 19*150mm，20-60％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(42mg，收率33％)为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.73(s,1H),7.37(s,1H),7.31-7.29(m,2H),7.25-7.23(m,2H),7.09-7.05(m,3H),6.94-6.92(m,1H),4.88(d,J＝12.0Hz,1H),4.50-4.42(m,1H),4.06(d,J＝13.6Hz,1H),3.79(s,2H),3.21-3.15(m,1H),2.93(s,3H),2.73-2.67(m,1H),2.35-2.25(m,1H),2.08-1.98(m,1H),1.87(d,J＝12.8Hz,1H),1.76(d,J＝10.8Hz,1H).MS(ESI):Rt＝2.669min,m/z 429.2[M+H]⁺；纯度:86.53％@254nm,95.14％@214nm.

实施例94：1-(1-(2-(4-(叔丁基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-115)

步骤1.1-(1-(2-(4-(叔丁基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-115)

将化合物1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-1,2,2,2-三氟乙酸酯(100mg，250umol，合成过程看GEN1-013-4的最终报告)、EDCI(72mg，0.36mmol)、HOBT(51mg，0.38mmol)和DIEA(162mg，1.25mmol)溶解在DMF(2mL)中并且加入2-(4-叔丁基苯基)乙酸(58mg，0.30mmol)。加完后，将所得混合物在室温下搅拌16小时。然后将混合物通过制备纯化(制备5 Xbridge C₁₈ 5um 19*150mm，50-95％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(79mg，产率67％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ10.27(s,1H),7.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.35-7.31(m,3H),7.22-7.20(m,2H),7.14(t,J＝8.0Hz,1H),4.90(d,J＝11.6Hz,1H),4.45-4.39(m,1H),4.08(d,J＝14.0Hz,1H),3.82-3.74(m,2H),3.07-3.00(m,1H),2.83-2.58(m,3H),1.80(t,J＝14.4Hz,2H),1.28(s,9H).LCMS(ESI):Rt＝4.026min,m/z 460.2[M+H]⁺；纯度:98.02％@254nm,99.33％@214nm.

实施例95：1-(1-(2-(苯并[d][1,3]二恶酚-5-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-116)

步骤1.4-(((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-116-1)

将2-氟-1-硝基-3-(三氟甲基)苯(500mg，2.39mmol)、4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(479mg，2.39mmol)、K₂CO₃(495mg，3.58mmol)、KI(38mg，0.24mmol)混悬在DMF(12mL)中，80℃搅拌3小时。将反应混合物冷却，倒入25ml水中，用EtOAc(20ml×3)萃取，混合后的有机层用50ml水和50mL盐水冲洗，在Na₂SO₄上干燥浓缩得到黑色油状物质。粗品经硅胶柱层析(PE:EtOAc＝1:45)纯化得到所需化合物(681mg，收率73％)为黄色油状物。TLC:EA/(EA+PE)＝5％,Rf＝0.3

步骤2.4-((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-116-2)

将4-((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(681mg，1.75mmol)和Pd/C(100mg)的MeOH(13mL)混合物在H₂气球下于常温氢化2小时。通过硅藻土过滤该混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(612mg，产率97％)为黑黄色油。TLC:EA/(EA+PE)＝20％,Rf＝0.2

步骤3.4-(2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-116-3)

将DCM(15ml)中4-((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(306mg，0.85mmol)和NaHCO₃(358mg，4.26mmol)悬浮液部分加冰浴下三光气(125mg,0.43mmol)。得到的混合物被搅拌了一夜。将反应混合物倒入20mL的水中，用DCM(10mL×3)萃取，混合后的有机层用盐水(20mL)冲洗，在Na₂SO₄上干燥，过滤浓缩，得到所需的化合物(292mg，收率89％)为白色固体。TLC:EA/(EA+PE)＝80％,Rf＝0.4

步骤4.1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-116-4)

在DCM(5.0mL)中加入4-(2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(290mg,0.75mmol)，冰浴下滴加TFA(1.5mL)，室温搅拌6小时。将反应混合物浓缩，将残余物通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水(0.1％NH₃H₂O)，5％至70％梯度，40分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(193mg，收率90％)为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.19min,m/z 286.1[M+H]⁺,纯度:92％@254nm,97％@214nm.

步骤5.1-(1-(2-(苯并[d][1,3]二恶酚-5-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-116)

将化合物1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(148mg，0.52mmol)、HATU(296mg，0.78mmol)、DIEA(536mg，4.16mmol)溶解在DMF(3mL)中并且加入2-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)乙酸(94mg，0.52mmol)。加完后，将所得混合物在室温下搅拌15小时。将反应混合物滴加到水(50mL)中，过滤得白色固体。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，10％至70％梯度，40分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(25.4mg，收率11％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.45(s,1H),7.36(d,J＝8.0Hz,1H),7.27(d,J＝7.6Hz,1H),7.16(t,J＝7.9Hz,1H),6.87–6.78(m,2H),6.74-6.67(m,1H),5.98(d,J＝1.4Hz,2H),4.58(d,J＝11.1Hz,1H),4.23(s,1H),4.14(d,J＝14.0Hz,1H),3.76–3.59(m,2H),2.97(t,J＝13.2Hz,1H),2.61-2.51(m,1H),2.49–2.38(m,1H),1.73–1.65(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.49min,m/z 448.2[M+H]⁺,纯度:92％@254nm,98％@214nm.

实施例96：1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-117)

步骤1.1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-117)

将化合物1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐(100mg,250umol,合成过程看GEN1-013-4的最终报告)、EDCI(72mg，0.36mmol)、HOBT(51mg,0.38mmol)、DIEA(162mg,1.25mmol)溶解在DMF(2mL)中并且加入2-(6-喹啉基)乙酸(56mg，0.30mmol)。加完后，将所得混合物在室温下搅拌16小时。然后将混合物通过制备纯化(制备5 Xbridge C₁₈ 5um 19*150mm，30-70％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(88mg，产率77％)为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.45(s,1H),8.87(dd,J＝4.4,1.6Hz,1H),8.33(d,J＝7.2Hz,1H),7.97(d,J＝8.4Hz,1H),7.82(s,1H),7.66(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.52(dd,J＝8.4,4.4Hz,1H),7.36(d,J＝8.4Hz,1H),7.28(d,J＝7.2Hz,1H),7.16(t,J＝8.0Hz,1H),4.64(d,J＝10.0Hz,1H),4.29-4.20(m,2H),4.01-3.96(m,2H),3.09-3.02(m,1H),2.61-2.54(m,3H),1.72(s,2H).LCMS(ESI):Rt＝3.694min,m/z 455.1[M+H]⁺；纯度:98.00％@254nm,99.57％@214nm.

实施例97：1-(1-(2-(4-(二甲基氨基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-118)

步骤1.1-(1-(2-(4-(二甲基氨基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-118)

将化合物1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(71mg,0.25mmol)、HATU(140mg,0.37mmol)、DIEA(129mg,1.00mmol)溶解在DMF(1.5mL)中并且加入2-(4-(二甲基氨基)苯基)乙酸(46mg，0.25mmol)。加完后，将所得混合物在室温下搅拌5小时。将反应混合物滴加到水(50mL)中，过滤得白色固体。粗产物通过Prep-TLC纯化(MeOH/(MeOH+DCM)＝60％)得到所需的化合物(21.1mg，收率19％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.45(s,1H),7.36(d,J＝8.2,1H),7.27(d,J＝7.8Hz,1H),7.16(t,J＝7.9Hz,1H),7.06(d,J＝8.6Hz,2H),6.67(d,J＝8.4Hz,2H),4.67–4.54(m,1H),4.29–4.07(m,2H),3.74–3.49(m,2H),2.93(t,J＝13.1Hz,1H),2.86(s,6H),2.56–2.51(m,1H),2.49–2.33(m,2H),1.75–1.59(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.62min,m/z 446.9[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例98：4-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-120)

步骤1.乙基N-(2-硝基苯基)哌啶-4-胺(GEN1-120-1)

将化合物4-(2-硝基苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.930mmol，合成过程看GEN1-055-1的最终报告)溶解在MeOH(5mL)的溶液中，室温下加入浓盐酸(2mL)，并在室温搅拌1小时后，将混合物浓缩。用水(10mL)稀释残余物，并逐滴加入Na₂CO₃的饱和水溶液(20mL)。将混合物用DCM∶MeOH＝10∶1(30mL×2)萃取。合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到所需化合物(200mg，产率97％)为橙色固体。MS(ESI):Rt＝1.20min,m/z 222.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.1-(4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(喹啉-6-基)乙酮(GEN1-120-2)

将N-(2-硝基苯基)哌啶-4-胺(200mg，0.900mmol)，2-(6-喹啉基)乙酸(169mg，0.900mmol)和DIEA(350mg，2.71mmol)溶解在DMF(5mL)中，在5℃下向混合溶液加入EDCI(260mg，1.36mmol)和HOBT(183mg，1.36mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用水(20mL)稀释，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机相经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，残余物通过C₁₈快速色谱法纯化(CH₃CN：水＝50％至80％)，得到所需化合物(340mg，产率96％)为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.50min,m/z 391.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.1-(4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(喹啉-6-基)乙酮(GEN1-120-3)

将1-(4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(喹啉-6-基)乙酮(340mg，0.870mmol)和Pd/C(10％，100mg)的甲醇(10mL)混合物在H₂气球下于70℃氢化3小时。将混合物冷却并通过硅藻土过滤。浓缩滤液，得到所需化合物(300mg，产率76％)为棕色油。MS(ESI):Rt＝1.37min,m/z 361.5[M+H]⁺；纯度:86％@254nm,79％@214nm.

步骤4.2-氯-N-(2-(((1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苯基)乙酰胺(GEN1-120-4)

将1-(4-(((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(喹啉-6-基)乙酮(300mg，0.660mmol)和NaHCO₃(276mg，3.29mmol)溶解在DCM(50mL)中，在0℃下逐滴加入氯乙酰氯(74mg，0.66mmol)的DCM(1mL)溶液。将混合物在0℃下搅拌1小时。用水(20mL)稀释反应混合物，并用DCM(10mL×2)萃取。合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。将滤液浓缩，得到所需化合物(300mg，产率89％)为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.38min,m/z437.4[M+H]⁺；纯度:82％@254nm,85％@214nm.

步骤5.4-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-120)

将2-氯-N-(2-((1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苯基)乙酰胺(300mg，0.580mmol)、NaHCO₃(245mg，2.92mmol)、NaI(18mg，0.12mmol)溶解在乙腈(50mL)中，并在90℃搅拌2小时。将混合物冷却并浓缩。用水(5mL)研磨残余物并过滤。用水(5mL×2)洗涤滤饼并干燥，得到粗产物(200mg)。然后将混合物通过制备纯化[gilson-2，XbridgeC18，5um，19*150mm，20～60％B，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：ACN，流速：15mL/min，UV纯化＝214nm]三遍，得到所需化合物(15mg，收率6％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.36(s,1H),8.86(dd,J＝4.0,2.0Hz,1H),8.33(d,J＝8.4Hz,1H),7.97(d,J＝8.4Hz,1H),7.81(s,1H),7.65(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.51(dd,J＝8.4,4.0Hz,1H),6.90-6.85(m,2H),6.81-6.79(m,1H),6.71-6.67(m,1H),4.57(d,J＝12.8Hz,1H),4.13(d,J＝12.4Hz,1H),4.02-3.92(m,2H),3.87-3.81(m,1H),3.49(dd,J＝32.4,6.8Hz,2H),3.19(t,J＝12.0Hz,1H),2.73(t,J＝12.4Hz,1H),1.71-1.53(m,4H).MS(ESI):Rt＝2.789min,m/z 401.2[M+H]⁺；纯度:91.05％@254nm,93.87％@214nm.

实施例99：4-(1-(2-(4-(二甲基氨基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-121)

步骤1.合成4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-121-1)

向1-氟-2-硝基苯(7.00g，49.61mmol)，K₂CO₃(13.71g，99.22mmol)和KI(823.36mg，4.96mmol)的DMF(50mL)悬浮溶液中加入4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(9.94g，49.61mmol)。所得混合物在80℃下搅拌4小时。用水(300mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(100mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(150mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到所需化合物(14.35g，收率90％)为黄色油状物。

步骤2.合成N-(2-硝基苯基)哌啶-4-胺(GEN1-121-2)

向4-(((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.4g，4.36mmol)的DCM(20mL)溶液中加入TFA(4mL)。将混合物在室温搅拌1小时。将得到的混合物浓缩并重新溶解在DCM(20ml)中。然后将混合物浓缩并经硅胶柱层析(PE：EA＝1：1)纯化得到所需化合物(830mg，收率86％)为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.22min,m/z 222.1[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.合成2-(4-(二甲基氨基)苯基)-1-(4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)乙-1-酮(GEN1-121-3)

向N-(2-硝基苯基)哌啶-4-胺(200mg，0.904mmol)，2-(4-(二甲基氨基)苯基)乙酸(194.4mg，1.085mmol)，HOBT(183.2mg，1.356)，DIEA(233.2mg，1.808mmol)的DMF(5mL)溶液中加入和EDCI(260mg，1.356mmol)。所得混合物在室温搅拌1h。用水(300mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(100mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(150mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到粗产物(310mg)。无需纯化直接用于下一步。

步骤4.合成1-(4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(二甲基氨基)苯基)乙-1-酮(GEN1-121-4)

在室温下向2-(4-(二甲基氨基)苯基)-1-(4-(((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)乙-1-酮(310mg，0.81mmol)的EtOH(20mL)溶液中加入Pd/C(30mg，5％纯度)，所得混合液置换氢气后在氢气氛围下搅拌过夜。过滤混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(240mg，两步收率84％)，为棕色油状物。

步骤5.合成4-(1-(2-(4-(二甲基氨基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-121)

在冰浴下向1-(4-(((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(二甲基氨基)苯基)乙-1-酮(240mg，0.68mmol)，NaHCO₃(286mg,3.4mmol)的DCM(5mL)溶液中加入2-氯乙酰氯(77mg，0.68mmol)。所得混合物在室温搅拌0.5小时。将混合物浓缩并溶解在CH₃CN(10mL)中。将混合物在80℃搅拌过夜。将混合物冷却并过滤。将滤液浓缩得到粗品。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。。得到所需化合物(80mg，收率30％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.37(s,1H),7.06(d,J＝8.6Hz,2H),6.87(d,J＝4.2Hz,2H),6.79(d,J＝7.6Hz,1H),6.74–6.62(m,3H),4.52(d,J＝12.9Hz,1H),4.01(d,J＝13.6Hz,1H),3.83-3.77(m,1H),3.63-3.53(m,2H),3.53–3.36(m,2H),3.14-3.04(m,1H),2.86(s,6H),2.71-2.60(m,1H),1.65(d,J＝12.5Hz,1H),1.61–1.30(m,3H).MS(ESI):Rt＝3.484min,m/z 393.2,[M+H]⁺；纯度:97.9％@254nm,98.66％@214nm.

实施例100：4-(1-(2-(4-(叔丁基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-122)

步骤1.合成4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-122-1)

向N-(2-硝基苯基)哌啶-4-胺(200mg，0.904mmol，合成步骤见GEN1-121-2)，2-(4-(叔丁基)苯基)乙酸(208.6mg，1.085mmol)，HOBT(183.2mg，1.356mmol)，DIEA(233.2mg，1.808mmol)的DMF(5mL)溶液中，加入EDCI(260mg，1.356mmol)。所得混合物在室温搅拌1h。将反应混合物用水(100mL)稀释，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到粗品(350mg)。粗品无需纯化直接用于下一步。

步骤2.合成1-(4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(叔丁基)苯基)乙-1-酮(GEN1-122-2)

向2-(4-(叔丁基)苯基)-1-(4-(((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)乙-1-酮(350mg，0.885mmol)的EtOH(20mL)溶液中加入Pd/C(35mg，5％纯度)。所得混合物置换氢气并在氢气氛围下室温搅拌过夜。过滤混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(284mg，两步收率87.8％)为棕色油状物。MS(ESI):Rt＝1.64min,m/z 366.2,[M+H]⁺；纯度:86.19％@254nm,90.14％@214nm.

步骤3.合成4-(1-(2-(4-(叔丁基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-122)

在冰浴下向1-(4-(((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(叔丁基)苯基)乙-1-酮(284mg，0.777mmol)，NaHCO₃(334mg，3.885mmol)的DCM(5mL)溶液中加入2-氯乙酰氯(88mg，0.777mmol)。所得混合物在室温搅拌0.5小时。将混合物浓缩并溶解在CH₃CN(10mL)中。将混合物在80℃搅拌过夜。将混合物冷却并过滤。将滤液浓缩得到粗品。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(110mg，产率35％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.37(s,1H),7.33(d,J＝4.4Hz，2H),7.17(d,J＝8.2Hz,2H),6.73-6.64(m,2H),6.79(d,J＝7.6Hz,1H),6.69(d,J＝3.8Hz,1H),4.52(d,J＝12.9Hz,1H),4.03(d,J＝13.5Hz,1H),3.888-.377(m,1H),3.76–3.63(m,2H),3.53–3.37(m,2H),3.12(t,J＝12.8Hz,1H),2.67(t,J＝12.3Hz,1H),1.73–1.32(m,4H),1.27(s,9H).MS(ESI):Rt＝1.59min,m/z 406.3,[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例101：3-甲基-4-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-125)

步骤1.合成4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-122-1)

向N-甲基-2-(哌啶-4-基氨基)苯甲酰胺(450mg，1.86mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(456mg，2.23mmol，合成步骤请参见GEN1-121-2)，HOBT(377mg，2.79mmol)和DIEA(480mg，3.72mmol)的DMF(10mL)溶液中加入EDCI(535mg，2.79mmol)。所得混合物在室温搅拌1h。将反应混合物用水(100mL)稀释，并用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(150mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到所需的化合物粗品(1g)为黄色油状物。

步骤2.合成1-(4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(GEN1-125&126-2)

向1-(4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(1g，粗品，1.86mmol)的EtOH(50mL)溶液中加入Pd/C(80mg，5％纯度)。所得混合液置换氢气并在氢气氛围下室温搅拌过夜。将混合物过滤并将滤液浓缩得到粗产物。粗产物经过硅胶柱层析(PE：EA＝1：1)纯化得到所需的化合物(560mg，收率79.7％)为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.54min,m/z 378.1,[M+H]⁺；纯度:95.64％@254nm,100％@214nm.

步骤3.合成3-甲基-4-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-125)

在冰浴下向1-(4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(100mg，0.265mmol)，NaHCO₃(222.6mg，2.65mmol)的DCM(5mL)溶液中加入2-氯丙酰氯(33.64mg，0.265mmol)。所得混合物室温搅拌0.5小时。将混合物浓缩并溶解在CH₃CN(10mL)中。将混合物在80℃搅拌过夜。将混合物冷却并过滤。将滤液浓缩得到粗品。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；40分钟，监测波长：214nm。(50mg，收率43.7％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.32(s,1H),7.74–7.64(m,2H),7.47(t,J＝7.5Hz,2H),7.00–6.87(m,2H),6.84–6.71(m,2H),4.55-4.40(m,1H),4.10-3.97(m,1H),3.96–3.77(m,3H),3.75-3.62(m,1H),3.22-3.04(m,1H),2.77–2.58(m,1H),1.97-1.83(m,1H),1.70–1.41(m,3H),0.94(dd,J＝16.7,6.7Hz,3H).MS(ESI):Rt＝3.825min,m/z 132.2,[M+H]⁺；纯度:96.6％@254nm,96.37％@214nm.

实施例102：1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,4-二氢喹喔啉-2,3-二酮(GEN1-127)

步骤1.合成1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,4-二氢喹喔啉-2,3-二酮(GEN1-127)

在冰浴下向1-(4-(((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(100mg，0.265mmol，合成步骤请参见GEN1-125&126-2)的3N HCl(6mL，18mmol)溶液中加入草酸(133.6mg，0.53mmol)。所得混合物在室温搅拌0.5小时。将混合物浓缩并溶解在CH₃CN(10mL)中。所得混合物在80℃搅拌3h。将混合物冷却并过滤。将滤液浓缩，粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物((15mg，收率13.12％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.03(s,1H),7.75(d,J＝8.0Hz,2H),7.65(s,1H),7.56(d,J＝8.0Hz,2H),7.27-7.18(m,3H),4.81(s,1H),4.60(d,J＝13.0Hz,1H),4.17(d,J＝13.6Hz,1H),3.97(s,2H),3.34-3.24(m,1H),2.83(t,J＝12.7Hz,1H),2.54-2.36(m,2H),1.76(d,J＝12.4Hz,2H).MS(ESI):Rt＝1.42min,m/z 432.1,[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例103：1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙硫基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-128)

步骤1.合成叔丁基(2-((1-(2-(4-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苯基)氨基甲酸酯(GEN1-128-1)

向1-(4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(484mg，1.28mmol，合成步骤见GEN1-125&126-2)，TEA(389mg，3.84mmol)的DCM(10mL)溶液中加入Boc2O(336.1mg，1.54mmol)。所得混合物室温搅拌16小时。用水(50mL)稀释反应混合物，并用DCM(100mL×3)萃取。合并的有机相用NaHCO₃水溶液(50ml×3)和盐水(50mL)洗涤，再用无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到所需化合物(600mg，收率98％)为浅黄色油状物。

步骤2.合成叔丁基(2-((1-(2-(4-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苯基)氨基甲酸酯(GEN1-128-2)

在氮气保护下向(2-((1-(2-(4-(三(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，0.838mmol)的甲苯(10mL)溶液中加入劳森试剂(169.5mg，0.419mmol)。所得混合物在80℃下搅拌4小时。将混合物浓缩并用硅胶柱层析(PE：EA＝3∶1)纯化得到所需的化合物(350mg，收率84.6％)为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.78min,m/z494.1,[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.合成1-(4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙烷-1-硫酮(GEN1-128-3)

向N-(2-硝基苯基)哌啶-4-胺(350mg，0.89mmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加TFA(2mL)。将混合物在室温搅拌0.5小时。将得到的混合物浓缩，得到粗产物。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O(0.1％NH₃H₂O)，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(200mg，收率50.8％)，为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.66min,m/z 394.3,[M+H]⁺；纯度:88.81％@254nm,96.35％@214nm.

步骤4.合成1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙硫基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-128)

向1-(4-(((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙烷-1-硫酮(100mg，0.254mmol)，NaHCO₃(213.4mg，2.54mmol)的DCM(10mL)悬浮液中加入三光气(124mg，0.420mmol)。所得混合物在室温下搅拌1小时。将混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，再经Na₂SO₄干燥并浓缩。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(70mg，收率65.7％)为黄色固体。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.40(s,1H),7.65(d,J＝8.1Hz,2H),7.59(d,J＝8.1Hz,2H),7.10-3.99(m,3H),6.76(d,J＝7.3Hz,1H),5.94-5.86(m,1H),4.67–4.56(m,1H),4.56–4.39(m,2H),4.37-4.28(m,1H),3.38–3.20(m,1H),3.16–3.01(m,1H),2.49-2.35(m,1H),2.05–1.70(m,3H).MS(ESI):Rt＝1.57min,m/z 420.2,[M+H]⁺；纯度:100％@254nm.

实施例104：1-(4-(2-硫代氧-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基乙酮(GEN1-132)

步骤1.4-(2-硫氧杂-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-132-1)

将4-(((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(360mg，1.00mmol，合成过程看GEN1-013-2的最终报告)和NaHCO₃(421mg，5.01mmol)溶解在DCM(10mL)中，在冰浴下逐滴加入硫光气(116mg，1.01mmol)。混合物在冰浴上搅拌1小时后，将反应混合物倒入水(50mL)中，并用DCM(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并浓缩，得到所需化合物(400mg，产率99％)为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.75min,m/z346.3[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-硫酮2,2,2-三氟乙酸酯(GEN1-132-2)

将4-(2-硫代氧杂-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(400mg，0.996mmol)溶解在DCM(5mL)中，并在室温的条件下加入TFA(1mL)。将所得混合物在室温搅拌过夜。浓缩反应混合物，得到所需化合物(400mg，产率85％)为棕色固体。MS(ESI)m/z 302.3[M+H]⁺,Rt:1.34min,纯度:88％@254nm,58％@214nm.

步骤3.1-(4-(2-硫代氧-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基乙酮(GEN1-132)

将1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-硫酮2,2,2-三氟乙酸酯(200mg，0.482mmol)、2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(108mg，0.529mmol)、HOBT(98mg，0.73mmol)和DIEA(311mg，2.41mmol)溶解在DMF(3mL)中，在冰浴下加入EDCI(139mg，0.725mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经MgSO₄干燥并过滤。浓缩滤液，并将粗产物通过C₁₈柱纯化(CH₃CN：水＝5％至60％)，得到所需化合物(29.9mg，收率12％)为浅黄色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.61(d,J＝7.6Hz,2H),7.56(d,J＝7.6Hz,1H),7.44-7.42(m,3H),7.29(t,J＝7.6Hz,1H),4.94-4.91(m,1H),4.81-4.70(m,1H),4.07-4.03(m,1H),3.94-3.85(m,2H),3.62-3.48(m,2H),3.15-3.08(m,1H),2.69-2.62(m,1H),1.81-1.74(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.675min,m/z 488.1[M+H]⁺；纯度:97.92％@254nm,95.01％@214nm.

实施例105：1-(4-(3-硫代氧杂3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-133)

步骤1.4-(3-硫代-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-133-1)

将4-(3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.905mmol，合成过程看GEN1-052-2的最终报告)和Lawesson试剂(220mg，0.544mmol)溶解在甲苯(5mL)中，在110℃下搅拌2小时。浓缩反应混合物，将残余物通过硅胶上的柱色谱法(石油醚:EtOAc＝10:1至5:1)纯化，得到所需的化合物(155毫克，收率52％)为黄色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ9.57(s,1H),7.09-7.04(m,1H),6.83-6.77(m,3H),4.39-4.18(m,2H),4.06(s,2H),3.66-3.57(m,1H),2.84-2.75(m,2H),1.79-1.77(m,2H),1.73-1.66(m,2H),1.48(s,9H).MS(ESI):Rt＝1.66min,m/z 292.3[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.4-(哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-硫酮(GEN1-133-2)

向4-(3-硫代-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(70mg，0.20mmol)在DCM(1.5mL)中的溶液中添加TFA(0.3mL)。将反应混合物在室温搅拌1小时。然后将混合物倒入Na₂CO₃(水溶液，15％，30mL)中，并用DCM(20mL×3)萃取。合并的有机层经MgSO₄干燥，过滤并浓缩，得到所需化合物(46mg，收率92％)为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.11min,m/z248.2[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.1-(4-(3-硫代氧杂3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-133)

在冰浴的条件下向4-(哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-硫酮(46mg，0.185mmol)、HOBT(40mg，0.30mmol)和DIEA(128mg，0.990mmol)的DMF(2mL)溶液中加入EDCI(57mg，0.30mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用MgSO₄干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过C₁₈柱(CH₃CN：水＝5％至60％)，得到所需化合物(14.0mg，收率18％)为黄色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ12.43(s,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.47(d,J＝8.0Hz,2H),7.03-6.96(m,3H),6.74(t,J＝7.2Hz,1H),4.53-4.50(m,1H),4.08-4.05(m,1H),3.92-3.83(m,5H),3.20-3.13(m,1H),2.72-2.66(m,1H),1.69-1.58(m,3H),1.54-1.44(m,1H).MS(ESI):Rt＝4.120min,m/z 434.1[M+H]⁺,纯度:97.96％@254nm,97.36％@214nm.

实施例106：8-(三氟甲基)-4-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-134)

步骤1.4-((2-硝基-3-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-134-1)

将1-氯-2-硝基-3-(三氟甲基)苯(800mg，3.55mmol)、4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.07g，5.32mmol)和DIEA(688mg，5.32mmol)溶于DMSO(7mL)中，在90℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。用水(30mL)，盐水(30mL)洗涤合并的有机层，经MgSO₄干燥并过滤。将滤液浓缩并将粗产物通过硅胶上的柱色谱法(石油醚:EtOAc＝5:1至3:1)纯化，得到所需的化合物(138mg，收率9％)为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.42(t,J＝8.0Hz,1H),7.05-7.03(m,2H),5.79(d,J＝6.8Hz,1H),4.03-4.01(m,2H),3.61-3.52(m,1H),2.99(t,J＝11.2Hz,2H),2.02-2.00(m,2H),1.50-1.41(m,11H).

步骤2.N-(2-硝基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸酯(GEN1-134-2)

向4-((2-硝基-3-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(130mg，0.334mmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TFA(1mL)。将反应混合物在室温搅拌2小时。然后浓缩混合物，得到所需化合物(134mg，收率95％)为棕色油。MS(ESI):Rt＝1.39min,m/z 290.3[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,95％@214nm.

步骤3.1-(4-((2-硝基-3-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-134-3)

在冰浴条件下向N-(2-硝基-3-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸酯(134mg，0.332mmol)、2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(82mg，0.40mmol)、HOBT(69mg，0.51mmol)和DIEA(216mg，1.67mmol)的DMF(3mL)溶液中加入EDCI(96mg，0.50mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并浓缩，得到所需化合物(150mg，产率95％)为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.74min,m/z476.5[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.1-(4-((2-氨基-3-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-134-4)

将1-(4-((2-硝基-3-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(150mg，0.316mmol)加入到Pd/C(10％纯度，34mg)的MeOH(5mL)溶液中。将所得混合物在H₂气氛下搅拌2小时。过滤反应混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(140mg，收率99％)为无色油状物。MS(ESI):Rt＝1.70min,m/z 446.5[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.8-(三氟甲基)-4-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-134)

在冰浴的条件下向1-(4-((2-氨基-3-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(100mg，0.225mmol)、NaHCO₃(38mg，0.45mmol)的DCM(5mL)溶液中加入2-氯乙酰氯(30mg，0.27mmol)。将得到的混合物在冰浴下搅拌1小时。将混合物浓缩，然后溶于CH₃CN(5mL)。然后将KI(4mg，0.02mmol)加入到混合物中，并将混合物在85℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤并将滤液浓缩。将粗产物通过C₁₈柱(CH₃CN：水＝5％至65％)纯化，得到所需化合物(4.3mg，收率4％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ9.62(s,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.47(d,J＝7.6Hz,2H),7.29(d,J＝7.6Hz,1H),7.13-7.05(m,2H),4.54-4.51(m,1H),4.10-4.06(m,1H),3.98-3.82(m,3H),3.62-3.54(m,2H),3.22-3.16(m,1H),2.76-2.70(m,1H),1.72-1.49(m,4H).MS(ESI):Rt＝4.321min,m/z 486.2[M+H]⁺,纯度:91.41％@254nm,98.35％@214nm.

实施例107：7-(三氟甲基)-4-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-135)

步骤1.N-(2-硝基-4-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-胺盐酸盐(GEN1-135-1)

将4-(((2-硝基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.28mmol)溶解在HCl/MeOH(10mL，4M)中，并在室温下搅拌2.5小时。浓缩所得混合物，得到所需化合物(408mg，收率98％)为黄色固体。LCMS(ESI):Rt＝1.46min,m/z 290.3[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.1-(4-((2-硝基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-135-2)

向N-(2-硝基-4-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-胺盐酸盐(408mg，1.25mmol)、DIEA(809mg，6.26mmol)、EDCI(360mg，1.88mmol)、HOBT(254mg，1.88mmol)的DMF(5mL)溶液中加入2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(307mg，1.50mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。然后将混合物通过C₁₈(60-80％B；A：H₂O B：CH₃CN)纯化，得到所需的化合物(506毫克，收率85％)为黄色油状物。LCMS(ESI):Rt＝1.76min,m/z 476.5[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.1-(4-((2-氨基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-135-3)

将1-(4-((2-硝基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(506mg，1.06mmol)加入到Pd/C(10％纯度，113mg)的MeOH(25mL)溶液中。将混合物在氢气气氛下于室温搅拌2小时。过滤所得混合物，浓缩滤液，得到所需的化合物(461mg，收率97％)为灰色固体。LCMS(ESI):Rt＝1.65min,m/z 446.5[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.2-氯-N-(5-(三氟甲基)-2-((1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苯基)乙酰胺(GEN1-135-4)

在冰浴的条件下向1-(4-((2-氨基-4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(461mg，1.04mmol)、NaHCO₃(435mg，5.18mmol)的DCM(10mL)溶液中滴加2-氯乙酰氯(187mg，1.66mmol)。加完后，将混合物在0℃下搅拌半小时。将得到的混合物过滤。然后将滤液浓缩，并且将残余物通过C18纯化(55-75％B；A：H₂O B：CH₃CN)，得到所需化合物(445mg，收率82％)为白色固体。LCMS(ESI):Rt＝1.64min,m/z 522.5[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.7-(三氟甲基)-4-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(GEN1-135)

向2-氯-N-(5-(三氟甲基)-2-((1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苯基)乙酰胺(200mg，383umol)、DIEA(248mg，1.92mmol)的甲苯(12mL)溶液中加入KI(10mg，60.2umol)。将混合物在氮气氛下在105℃下搅拌2天。将得到的混合物浓缩并将残余物进行纯化制备。HPLC(制备5 Xbridge C₁₈ 5um 19*150mm，35-80％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；214nm；流速：15mL/min)得到所需化合物(99mg，收率52％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.63(s,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.47(d,J＝8.0Hz,2H),7.20-7.18(m,1H),7.06(d,J＝2.0Hz,1H),7.03(d,J＝8.8Hz,1H),4.53(d,J＝12.4Hz,1H),4.08(d,J＝12.4Hz,1H),3.99-3.94(m,1H),3.93-3.82(m,2H),3.73-3.63(m,2H),3.22-3.16(m,1H),2.75-2.70(m,1H),1.71-1.52(m,4H).LCMS(ESI):Rt＝9.607min,m/z 486.2[M+H]⁺；纯度:95.39％@254nm,97.55％@214nm.

实施例108：2-(喹啉-6-基)-1-(4-(2-硫代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)乙-1-酮(GEN1-137)

步骤1.合成4-(2-硫代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-137-1)

向4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(360mg，1.235mmol，合成步骤见GEN1-150-1)，NaHCO₃(1.037g，12.35mmol)的DCM(15mL)悬浮液中加入硫光气(170.4mg，1.482mmol)。所得混合物在室温下搅拌1小时。将混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，再经Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗品。粗品通过硅胶柱层析(PE：EA＝3∶1)纯化得到所需的化合物(160mg，收率38.8％)为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.55min,m/z 356.0,[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.合成1-(哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-硫酮(GEN1-137-2)

向4-(2-硫代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(160mg，0.48mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(2mL)。所得混合物在室温搅拌0.5小时。将得到的混合物浓缩得到粗品。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O(0.1％NH₃H₂O)，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(50mg，产率44.6％)为白色固体。MS(ESI):Rt＝0.31min,m/z 234.1,[M+H]⁺；

步骤3.合成2-(喹啉-6-基)-1-(4-(2-硫代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)乙-1-酮(GEN1-137)

向1-(哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-硫酮(42.5mg，0.182mmol)，2-(喹啉-6-基)乙酸(51.1mg，0.273mmol)，HOBT(36.89mg，0.273mmol)和DIEA(47mg，0.364mmol)的DMF(1mL)溶液中加入EDCI(52.33mg，0.273mmol)。所得混合物在室温搅拌1h。用水(30mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，再经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到粗产物。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(38mg，产率51.8％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ10.08(s,1H),8.92(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),8.16(dd,J＝8.8,3.1Hz,2H),7.81(s,1H),7.75(dd,J＝8.7,2.0Hz,1H),7.43(dd,J＝8.3,4.2Hz,1H),7.17–7.08(m,2H),6.97–6.83(m,2H),5.50-5.36(m,1H),4.95(d,J＝13.5Hz,1H),4.16(d,J＝13.9Hz,1H),4.04(s,2H),3.36-3.24(m,1H),2.87-2.75(m,1H),2.32-2.16(m,1H),1.79(s,3H).MS(ESI):Rt＝1.30min,m/z 403.0,[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例109：1-(4-(2-溴-1H-吲哚-3-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-139)

步骤1.4-(1H-吲哚-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(GEN1-139-1)

向4-氧杂环哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0g，5.0mmol)和吲哚(588mg，5.02mmol)的甲醇(20mL)溶液中加入KOH(563mg，10.0mmol)。将混合物在70℃下搅拌5小时。浓缩反应混合物，并将残余物用水(20mL)稀释。浓缩加入HCl以酸化水溶液至pH＝6-7。用EtOAc(20mL×3)萃取水溶液。合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，残余物通过硅胶色谱法纯化(PE∶EtOAc＝10∶1)，得到所需化合物(950mg，收率63％)为黄色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.17(br s,1H),7.88(d,J＝8.0Hz,1H),7.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.24-7.14(m,3H),6.17(s,1H),4.14-4.13(m,2H),3.70-3.67(m,2H),2.62-2.53(m,2H),1.50(s,9H).MS(ESI):Rt＝1.69min,m/z 297.4[M-H]^-；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.4-(1H-吲哚-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-139-2)

将4-(1H-吲哚-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(950mg，3.18mmol)加入到Pd/C(10％，200mg)的四氢呋喃(5mL)和MeOH(5mL)溶液中，在H₂气球下于50℃氢化2小时。将混合物冷却至室温，并通过硅藻土过滤。将滤液浓缩，得到所需化合物(1.0g，收率95％)为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.09(br s,1H),7.63(d,J＝7.6Hz,1H),7.36(d,J＝8.0Hz,1H),7.21-7.17(m,1H),7.12-7.08(m,1H),6.95(d,J＝2.0Hz,1H),4.22(br s,2H),3.01-2.87(m,3H),2.05-2.02(m,2H),1.71-1.62(m,2H),1.49(s,9H).MS(ESI):Rt＝1.75min,m/z 299.4[M-H]^-；纯度:91％@254nm,70％@214nm.

步骤3.4-(2-溴-1H-吲哚-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-139-3)

在零摄氏度的条件下向4-(1H-吲哚-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(160mg，0.480mmol)的DCM(10mL)溶液中分批加入NBS(86mg，0.48mmol)。加完后，将混合物在0℃下搅拌1小时。用水(10mL)稀释反应混合物，并用DCM(10mL×2)萃取。合并的有机相经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，残余物通过硅胶色谱法纯化(PE∶EtOAc＝6∶1)，得到所需化合物(110mg，收率47％)为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.05(s,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),7.29(d,J＝7.6Hz,1H),7.17-7.14(m,1H),7.10-7.06(m,1H),4.34-4.25(m,2H),3.00-2.93(m,1H),2.87-2.80(m,2H),2.19-2.08(m,2H),1.76-1.73(m,2H),1.52(s,9H).

步骤4.2-溴-3-(哌啶-4-基)-1H-吲哚(GEN1-139-4)

在室温的条件下向4-(2-溴-1H-吲哚-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(110mg，0.230mmol)的DCM(3mL)溶液中滴加TFA(800mg)。常温搅拌30分钟后，将反应混合物浓缩并将残余物用水(5mL)稀释。用饱和Na₂CO₃溶液(5mL)碱化水溶液，并用DCM(10mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到所需化合物(80mg粗品，产率100％)为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.28min,m/z279.3[M-H]⁺；纯度:65％@254nm,81％@214nm.

步骤5.1-(4-(2-溴-1H-吲哚-3-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-139)

向2-溴-3-(4-哌啶基)-1H-吲哚(80mg，0.23mmol)、2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(52mg，0.26mmol)、DIEA(150mg,1.16mmol)的DMF(3mL)溶液中加入EDCI(89mg，0.47mmol)和HOBT(63mg，0.47mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。用水(15mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(10mL×2)萃取。合并的有机相用盐水(5mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。将滤液浓缩并将残余物通过制备型HPLC[gilson-2，Xbridge C₁₈，5um，19×150mm，30～70％B，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：ACN，流速：15毫升/分钟，UV＝214nm]纯化，得到所需化合物(25mg，收率23％)为黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.60(s,1H),7.72(d,J＝8.0Hz,2H),7.55(d,J＝8.0Hz,2H),7.37(d,J＝8.0Hz,1H),7.26(d,J＝8.0Hz,1H),7.06(t,J＝8.0Hz,1H),6.94(t,J＝8.0Hz,1H),4.57(d,J＝12.0Hz,1H),4.10(d,J＝14.0Hz,1H),3.99(d,J＝14.8Hz,1H),3.85(d,J＝15.2Hz,1H),3.16(t,J＝11.6Hz,1H),3.05-2.98(m,1H),2.67(t,J＝12.4Hz,1H),1.88-1.71(m,2H),1.65-1.56(m,2H).MS(ESI):Rt＝7.005min,m/z 465.1[M+H]⁺；纯度:96.54％@254nm,98.80％@214nm.

实施例110：1-(1-(2-(喹喔啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-140)

步骤1.2-(喹喔啉-6-基)乙酸钾(GEN1-140-1)

向2-(喹喔啉-6-基)乙酸甲酯(100mg，0.50mmol)的MeOH(2mL)溶液中加入KOH(28mg，0.50mmol)的水(0.2mL)溶液。将所得混合物在室温下搅拌5小时。将得到的混合物浓缩。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步。TLC:MeOH/(DCM+MeOH)＝5％,Rf＝0.6

步骤2.1-(1-(2-(喹喔啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-140)

向2-(喹喔啉-6-基)乙酸钾溶液(102mg粗品)、1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(140mg，0.49mmol)、HATU(280mg，0.74mmol)的DMF(2.5mL)溶液中加入DIEA(125mg，0.98mmol)。将得到的混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物滴加到水(20mL)中。通过过滤收集沉淀的固体。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，10％至70％梯度，40分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(94.3mg，收率42％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.45(s,1H),8.96–8.89(m,2H),8.05(d,J＝8.6Hz,1H),8.01–7.96(m,1H),7.81–7.72(m,1H),7.36(d,J＝8.2,1H),7.30–7.24(m,1H),7.16(t,J＝7.9Hz,1H),4.62(d,J＝12.5Hz,1H),4.35–4.20(m,2H),4.18–3.97(m,2H),3.06(t,J＝13.2Hz,1H),2.67-2.51(m,2H),2.48-2.43(m,1H),1.82–1.61(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.42min,m/z 456.1[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例111：7-(三氟甲基)-1-(1-(1-(4-(三氟甲基)苯基)环丙烷-1-羰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-146)

步骤1.7-(三氟甲基)-1-(1-(1-(4-(三氟甲基)苯基)环丙烷-1-羰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-146)

向1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(37mg，0.13mmol)、1-(4-(三氟甲基)苯基)环丙烷-1-羧酸(46mg，0.13mmol)、HATU(74mg，0.19mmol)的DMF(1.0mL)溶液中加入DIEA(67mg，0.52mmol)。将所得混合物在室温搅拌15小时。将反应混合物滴加到水(30mL)中。通过过滤收集沉淀的固体。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，5％至70％梯度，40分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(10.4mg，收率16％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.46(s,1H),7.67(d,J＝8.2Hz,2H),7.41–7.30(m,3H),7.25(d,J＝7.2Hz,1H),7.14(t,J＝7.9Hz,1H),4.75–4.45(m,1H),4.29–3.92(m,2H),2.96-2.58(m,2H),2.4–2.15(m,2H),1.82–1.50(m,2H),1.48–1.24(m,4H).MS(ESI):Rt＝1.72min,m/z 497.9[M+H]⁺,纯度:91％@254nm,100％@214nm.

实施例112：4-(2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-甲酰胺(GEN1-149)

步骤1.4-(2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-甲酰胺(GEN1-149)

向1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(50mg，0.17mmol)的DCM(8mL)溶液中加入1-异氰酸根-4-(三氟甲基)苯(33mg，0.17mmol)的DCM(2mL)溶液。将所得混合物在室温搅拌15小时。通过过滤收集沉淀的固体，并用DCM和水洗涤。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，20％至80％梯度，50分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(23.2mg，收率28％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.47(s,1H),9.00(s,1H),7.71(d,J＝8.6Hz,2H),7.60(d,J＝8.6Hz,2H),7.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.29(d,J＝7.7Hz,1H),7.17(t,J＝7.9Hz,1H),4.41–4.19(m,3H),2.82(t,J＝13.1Hz,2H),2.70–2.53(m,2H),1.73(d,J＝12.4Hz,2H).MS(ESI):Rt＝1.63min,m/z473.0[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,93％@214nm.

实施例113：(E)-1-(4-(3-(羟基亚氨基)-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙烷-1-酮(GEN1-150)

步骤1.合成4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-150-1)

向4-(2-硝基苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.9g，9.0mmol，合成步骤见GEN1-121-1)的EtOH(30mL)溶液中加入Pd/C(100mg，5％纯度)。所得混合物置换氢气并在氢气氛围下在室温搅拌过夜。过滤混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(2.5g，收率95.3％)为棕色油状物。

步骤2.合成4-(3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-150-2)

在冰浴下向4-(2-氨基苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.456g，5.0mmol)，NaHCO₃(2.10g，25mmol)的DCM(25mL)悬浮液中加入2-氯乙酰氯(565mg，5.0mmol)。所得混合物室温搅拌0.5小时。将混合物浓缩并溶解在CH₃CN(100mL)中。所得混合物在80℃搅拌过夜。将混合物冷却并过滤。浓缩滤液，并将残余物通过硅胶柱层析PE：EA＝1：1)纯化得到所需的化合物(1.26g，收率76％)为白色固体。

步骤3.合成4-(3-硫代-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-150-3)

在氮气保护下向4-(3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸(200mg，0.60mmol)，NaHCO₃(252mg，3.0mmol)的甲苯(10mL)悬浮液中加入劳森试剂(121.3mg，0.30mmol)。所得混合物在80℃下搅拌4小时。将得到的混合物浓缩，并通过硅胶柱层析(PE：EA＝3∶1)纯化得到所需的化合物(200mg，收率95.9％)为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.62min,m/z 371.1,[M+H]⁺；纯度:96.9％@254nm,98.04％@214nm.

步骤4.合成4-(3-硫代-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-150-4)

向4-(3-硫代-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.57mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入TFA(2mL)。所得混合物在室温搅拌1小时。将得到的混合物浓缩并重新溶解在DCM(10ml)中。然后将混合物再次浓缩，得到粗品(200mg)为棕色固体。粗品无需纯化直接用于下一步。MS(ESI):Rt＝1.17min,m/z 248.2,[M+H]⁺；纯度:85.44％@254nm,63.67％@214nm.

步骤5.合成1-(4-(3-硫代-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(GEN1-150-5)

向2-(4-(三氟甲基)4-(3-硫代氧杂3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，粗品，0.57mmol)，苯基)乙酸(139.6mg，0.684mmol)，HOBT(115.5mg，0.855mmol)和DIEA(294.5mg，2.28mmol)，的DMF(5mL)溶液中的加入EDCI(164mg，0.855mmol)。所得混合物在室温搅拌1h。用水(80mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(25mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，再无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液得到粗产物。粗产物通过硅胶柱层析(PE：EA＝2∶1)纯化得到所需的化合物(136mg，产率55％)为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.59min,m/z 434.4,[M+H]+；纯度:96.58％@254nm,96.55％@214nm.

步骤6.合成(E)-1-(4-(3-(羟基亚氨基)-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙烷-1-酮(GEN1-150)

向1-(4-(3-thioxo-3,4-dihydroquinoxalalin-1(2H)-yl)piperidin-1-yl)-2-(4-(trifluoromethyl)phenyl)ethan-1-one(50mg，0.115mmol)，K₂CO₃(31.8mg,0.23mmol)的EtOH(10mL)溶液中加入盐酸羟胺(12mg，0.173mmol)。所得混合物在80℃下搅拌3小时。将混合物倒入水(20mL)中，并用EA(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(20mg，产率32.3％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(s,1H),9.01(s,1H),7.67(d,J＝8.0Hz,2H),7.47(d,J＝8.0Hz,2H),7.02(dd,J＝7.7,1.5Hz,1H),6.84(d,J＝8.0Hz,1H),6.73(td,J＝7.7,1.6Hz,1H),6.65(td,J＝7.5,1.2Hz,1H),4.51(d,J＝12.9Hz,1H),4.07(d,J＝13.6Hz,1H),3.95-3.75(m,3H),3.40(d,J＝2.4Hz,2H),3.17(t,J＝12.2Hz,1H),2.70(t,J＝12.4Hz,1H),1.87–1.34(m,4H).MS(ESI):Rt＝1.46min,m/z 432.8,[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,97.37％@214nm.

实施例114：2-氧代-3-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-腈(GEN1-151)

步骤1.2-氧代-3-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-腈(GEN1-151)

向2-氧代-3-(哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-甲腈2,2,2-三氟乙酸盐(150mg，0.421mmol，合成过程看GEN1-014-4的最终报告)的DMF(3mL)溶液中加入DIEA(435mg，3.37mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟后，加入2-(6-喹啉基)乙酸(79mg，0.42mmol)，EDCI(121mg，0.630mmol)和HOBT(85mg，0.63mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。用水(15mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(10mL×2)萃取。合并的有机相用盐水(5mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。将滤液浓缩并将残余物通过制备型HPLC[gilson-2，XbridgeC₁₈，5μm，19×150mm，30～70％B，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：ACN，流速：15毫升/分钟，UV＝214nm]纯化，得到所需化合物(65mg，收率37％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.43(br s,1H),8.87(dd,J＝4.0,1.6Hz,1H),8.32(d,J＝7.6Hz,1H),7.97(d,J＝8.4Hz,1H),7.81(s,1H),7.66(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.52(dd,J＝8.4,4.0Hz,1H),7.41-7.39(m,1H),7.27(d,J＝6.8Hz,1H),7.13(t,J＝8.0Hz,1H),4.84-4.76(m,1H),4.66(d,J＝12.8Hz,1H),4.24(d,J＝14.0Hz,1H),4.05-3.95(m,2H),3.15-3.09(m,1H),2.67-2.60(m,1H),2.46-2.33(m,2H),1.90-1.87(m,2H).MS(ESI):Rt＝2.915min,m/z 411.9[M+H]⁺；纯度:99.62％@254nm,99.52％@214nm.

实施例115：2-氧代-1-(1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-羧酸的合成(GEN1-153)

步骤1.4-((3-溴-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

向1-溴-3-氟-2-硝基苯(5.00g，22.7mmol)和4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.78g，23.9mmol)在DMF(25mL)中的悬浮液中加入K₂CO₃(4.71g，34.1mmol)。将混合物在70℃搅拌过夜。将混合物冷却至室温后，加入水(100mL)。加入DCM(150mL×3)提取所需化合物。合并的有机层用盐水(150mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，并将残余物通过硅胶柱纯化(石油醚∶EtOAc＝10∶1)，得到所需化合物(8.20g，产率90％)，为黄色固体。MS(ESI)Rt＝1.83min,m/z 398.4[M-H]^-；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.4-((3-氰基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

向4-((3-溴-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.00g，5.00mmol)和氰化锌(1.17g，9.99mmol)与DMF(25mL)的混合物加入Pd(PPh3)4(577mg，499umol)。将混合物在氮气气氛下在80℃搅拌28小时。然后将混合物倒入NaClO溶液(10％，100mL)中。将混合物在室温搅拌30分钟后，加入EtOAc(100mL×3)以萃取所需化合物。合并的有机层用NaClO溶液(10％，100mL)和盐水(100mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，残余物通过硅胶柱纯化(石油醚∶EtOAc＝4∶1)，得到所需化合物(1.45g，收率79％)，为橙色固体。MS(ESI):Rt＝1.66min,m/z 345.4[M-H]^-；纯度:100％@254nm,94％@214nm.

步骤3.4-((2-氨基-3-氰基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

向4-((3-氰基-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(700mg，2.02mmol)在MeOH(24mL)和THF(8mL)中的溶液中添加Pd/C(10％，320毫克)。将混合物在室温在氢气下搅拌6小时。过滤混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(620mg，收率78％)，为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.65min,m/z 315.4[M-H]^-；纯度:82％@254nm,80％@214nm.

步骤4.4-(4-氰基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

在冰浴下向4-(((2-氨基-3-氰基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(620mg，1.96mmol)和NaHCO₃(1.65g，19.6mmol)的DCM(15mL)悬浮液中加入三光气(291mg，0.981mmol)。将混合物在0℃下搅拌1小时。将混合物过滤并将滤液浓缩。残余物通过C18(50-70％B，A：H₂O B：CH₃CN)纯化，得到期望的化合物(352mg，产率52％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.52min,m/z 287.2[M-56+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.2-氧代-1-(哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-腈2,2,2-三氟乙酸酯的合成

向4-(4-氰基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(312mg，0.911mmol)的DCM溶液(6mL)加入TFA(1mL)。将混合物在室温搅拌1.5小时。浓缩所得混合物，得到所需化合物(441mg，粗品)，为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝0.71min,m/z243.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤6.2-氧代-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-腈的合成

向2-氧代-1-(哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-腈2,2,2-三氟乙酸酯(441mg，1.24mmol)，DIEA(800mg，6.19mmol)，EDCI(356mg，1.86mmol)和HOBT(251mg，1.86mmol)的DMF(8mL)混合物加入2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(303mg，1.48mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。将得到的混合物倒入水(30mL)中，并用DCM(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。将滤液浓缩并将残余物通过C18(50-70％B；A：H₂O B：CH₃CN)纯化，得到期望的化合物(429mg，收率81％)，为浅棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.51min,m/z 429.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤7.2-氧代-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-羧酰胺的合成

向2-氧代-1-(1-(2-(4-(三(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-腈(200mg，0.467mmol)，过氧化氢水溶液(30％，2.5mL)和乙醇(2.5mL)的混合液中加入NaOH(28mg，0.700mmol)。将混合物在55℃搅拌过夜。过滤所得混合物，并将残余物用水(3mL)洗涤，干燥，得到期望的化合物(143mg，收率62％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.43min,m/z 447.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,91％@214nm.

步骤8.2-氧代-1-(1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-羧酸的合成(GEN1-153)

向2-氧代-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-羧酰胺(113mg，0.253mmol)与H2SO4水溶液(75％，2mL)的混合物加入NaNO2(26mg，0.38mmol)。将混合物在80℃搅拌1小时。冷却至室温后，将混合物倒入水(20mL)中。将混合物用DCM(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，残余物通过制备纯化。HPLC(prep-9Xbridge C18 5um 19*150mm，30％-55％B；A：H₂O(0.1％TFA)，B：CH₃CN；214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(74mg，收率65％)为灰色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ13.05(br s,1H),10.63(s,1H),7.71(d,J＝8.0Hz,2H),7.53-7.48(m,3H),7.33(d,J＝8.0Hz,1H),7.06(t,J＝8.0Hz,1H),4.60-4.57(m,1H),4.50-4.44(m,1H),4.15-4.11(m,1H),3.97-3.88(m,2H),3.22-3.16(m,1H),2.74-2.69(m,1H),2.16-2.07(m,2H),1.74-1.69(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.308min,m/z 448.1[M+H]⁺；纯度:99.87％@254nm,99.76％@214nm.

实施例116：4-吗啉代-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-154)

步骤1.4-(3-氟-2-硝基苯基)吗啉(GEN1-154-1)

向1-溴-3-氟-2-硝基苯(3.00g，13.6mmol)、Pd(OAc)₂(367mg，1.63mmol)和Xantphos(947mg，1.64mmol)的1,4二氧六环(10mL)溶液中加入Cs₂CO₃(533mg，1.64mmol)。然后加入吗啉(1.66g，19.1mmol)，并将混合物在N₂气氛下110℃加热4小时。冷却至室温后，将混合物倒入水(15mL)中，并用EtOAc(15mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(15mL×2)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(石油醚∶EA＝10∶1)，得到所需化合物(1.20g，收率39％)为黄色油状物。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.43-7.37(m,1H),6.97-6.90(m,2H),3.80-3.78(m,4H),3.04-3.02(m,4H).

步骤2.4-((3-吗啉代-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-154-2)

向4-(3-氟-2-硝基-苯基)吗啉(500mg，2.21mmol)和K₂CO₃(458mg，3.31mmol)的DMF(8mL)溶液中加入4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(531mg，2.65mmol)。将混合物在110℃下搅拌16小时后，然后冷却至室温。将混合物倒入水(20mL)中，并用EtOAc(15mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩，得到所需化合物(240mg，收率27％)为黄色油状物。MS(ESI):Rt＝1.71min,m/z 407.5[M+H]⁺,纯度:56％@254nm,54％@214nm.

步骤3.4-((2-氨基-3-吗啉代苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-154-3)

将4-(3-吗啉代-2-硝基-苯胺基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(240mg，590umol)加入到Pd/C(10％纯度，70mg)的MeOH(8mL)溶液中，在室温条件下氢化1.5小时。然后过滤反应混合物，浓缩并通过C₁₈柱(CAN/水＝30-70％)纯化，得到所需的化合物(242mg，收率98％)为棕色油状物。MS(ESI):Rt＝1.63min,m/z 377.5[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.4-(4-吗啉代-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-154-4)

在零摄氏度的条件下向4-((2-氨基-3-吗啉代苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(242mg，0.643mmol)和NaHCO₃(216mg，2.57mmol)的DCM(5mL)溶液中加入三光气(191mg，0.643mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。然后将混合物倒入水(15mL)中，并用DCM(10ml×3)萃取。合并的有机层用盐水(15mL×2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩，得到白色固体。然后将粗产物通过C₁₈柱进行纯化(CH₃CN：水＝10％-60％)，得到所需化合物(280mg，收率97％)为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.52min,m/z 403.5[M+H]⁺,纯度:89％@254nm,89％@214nm.

步骤5.7-吗啉代-3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(GEN1-154-5)

向4-(4-吗啉代-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.373mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。将混合物搅拌2小时后，浓缩混合物，得到所需化合物(150mg，收率87％)为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.12min,m/z303.4[M+H]⁺；纯度:91％@254nm,92％@214nm.

步骤6.7-吗啉代-3-(4-哌啶基)-1H-苯并咪唑-2-酮(GEN1-154)

向2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(65mg，0.323mmol)和EDCI(91mg，0.486mmol)的DMF(10mL)溶液中加入HOBT(60mg，0.488mmol)。将混合物在室温下搅拌5分钟后，将4-吗啉代-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-1,2,2,2-三氟乙酸酯(150mg，0.324mmol)和DIPEA(125mg，0.97mmol)加入反应液中。将混合物在室温搅拌4小时。用水(15mL)稀释混合物，并用EtOAc(10mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(15mL×2)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过制备纯化HPLC(RP-PREP-1 Xbridge C₁₈ 5um 19*150mm，20％-75％，B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；UV：214nm，流速：15mL/min)得到所需的化合物(29.5mg，收率18％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.87(s,1H),7.70(d,J＝8.4Hz,2H),7.52(d,J＝8.0Hz),6.92-6.88(m,1H),6.76(d,J＝8.0Hz,1H),6.63(d,J＝8.0Hz,1H),4.57(d,J＝12.8Hz,1H),4.44-4.37(m,1H),4.12(d,J＝13.6Hz,1H),3.97-3.87(m,2H),3.76-3.74(m,4H),3.21-3.15(m,1H),2.90-2.88(m,4H),2.73-2.67(m,1H),2.13-2.04(m,2H),1.70-1.64(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.85min,m/z 489.2[M+H]⁺；纯度:98.27％@254nm,98.69％@214nm.

实施例117：1-(1-(2-(4-氯苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-156)

步骤1.1-(1-(2-(4-氯苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-156)

将2-(4-氯苯基)乙酸(51mg，0.30mmol)和HATU(142mg，0.38mmol)的DMF(3mL)混合物在0℃搅拌20分钟。然后将1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-1,2,2,2-三氟乙酸酯(100mg，0.250mmol，合成过程看GEN1-013-4的最终报告)和DIPEA(97mg，0.75mmol)加入反应液中，所得混合物在20℃搅拌2小时。将混合物倒入水(15mL)中，并用EtOAc(10ml×3)萃取。合并的有机层用盐水(10mL×2)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残留物通过制备型HPLC[RP-PREP-1，Xbridge C18，5um，19*150mm，40～75％B，GT＝10，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：ACN，流速：15毫升/分钟，UV＝214nm]纯化，得到所需的化合物(43mg，收率39％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.78(s,1H),7.40(d,J＝8.0Hz,1H),7.32-7.27(m,3H),7.23-7.21(m,2H),7.15(t,J＝8.0Hz,1H),4.89(d,J＝12.8Hz,1H),4.46-4.38(m,1H),4.02(d,J＝14.0Hz,1H),3.77(s,2H),3.10-3.03(m,1H),2.77-2.59(m,3H),1.84-1.77(m,2H).MS(ESI):Rt＝4.094min,m/z 438.1[M+H]⁺；纯度:71.60％@254nm,98.86％@214nm.

实施例118：1-(1-(2-(4-溴苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-157)

步骤1.1-(1-(2-(4-溴苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-157)

将2-(4-溴苯基)乙酸(64mg，0.30mmol)和HATU(143mg，376umol)在DMF(2mL)中的混合物在0℃搅拌40分钟。然后将1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-1,2,2,2-三氟乙酸酯(100mg，0.250mmol，合成过程看GEN1-013-4的最终报告)和DIPEA(97mg，0.75mmol)加入反应液中。将所得混合物在20℃下搅拌2小时。将混合物倒入水(15mL)中，并用EtOAc(15mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(10mL×3)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残留物通过制备型HPLC[water-3，sunfire C₁₈，5um，19*150mm，30～80％B，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：ACN，流速：15mL/min，UV纯化＝214nm]纯化，得到所需化合物(27mg，收率23％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.88(s,1H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),7.40(d,J＝8Hz,1H),7.29-7.26(m,1H),7.17-7.13(m,3H),4.88(d,J＝12.4Hz,1H),4.51-4.39(m,1H),4.02(d,J＝14.8Hz,1H),3.75(s,2H),3.06(t,J＝13.2Hz,1H),2.79-2.58(m,3H),1.82(t,J＝5.6Hz,2H).MS(ESI):Rt＝2.146min,m/z 482.1[M+H]⁺；纯度:92.78％@254nm,99.00％@214nm.

实施例119：1-(1-(2-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)丙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-158)

步骤1.2-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)丙腈的合成

在氮气下和0℃下向2-(4-(三氟甲基)苯基)乙腈(1.00g，5.40mmol)在DMF(10mL)中的溶液中添加60％NaH(519mg，13.0mmol)，然后加入CH3I(1.99g，14.0mmol)。将混合物温热至室温并搅拌4小时。用水(15mL)淬灭混合物，并用EtOAc(15mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，得到所需化合物(1.12g，收率68％)无色油。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.67-7.62(m,4H),1.76(s,6H)

步骤2.2-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)丙酸的合成

将2-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)丙腈(400mg，1.88mmol)和NaOH(10M，1mL)的EtOH(5mL)溶液在100℃下回流过夜。将混合物冷却至室温后，添加EtOAc(15mL)。分离两层，有机溶液用水(10mL×3)萃取。合并的水层用浓盐酸酸化至pH＝2-3。HCl溶液。然后将水层用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL×2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并真空浓缩，得到所需化合物(390mg，产率81％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ12.56(s,1H),7.70(d,J＝8.0Hz,2H),7.58(d,J＝8.0Hz,2H),1.51(s,6H).

步骤3.合成1-(1-(2-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)丙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-158)

向2-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)丙酸(105mg，452umol)和EDCI(108mg，0.565mmol)的DMF(5mL)溶液中加入HOBT(51mg，0.38mmol)。将混合物在室温搅拌5分钟后，将1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-1-酮,2,2,2-三氟乙酸盐(150mg，0.376mmol，合成方法参见GEN1-013-4)，加入DIPEA(49mg，0.38mmol)。将混合物在室温搅拌4小时。用水(15mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(10mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(15mL×2)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过制备纯化。HPLC(prep-3Xbridge C18 5um 19*150mm，30％-80％，GT＝10min，B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；UV：214nm；流速：15mL/min)得到期望的化合物(44.2mg，产率23％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ9.85(s,1H),7.72(d,J＝8.0Hz,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,2H),7.32(d,J＝8.0Hz,1H),7.24(d,J＝8.0Hz,1H),7.15-7.11(m,1H),4.96(br s,1H),4.34-4.28(m,1H),3.48(br s,1H),2.71-2.39(m,4H),1.64-1.60(m,8H).MS(ESI):Rt＝3.480min,m/z 500.2[M+H]⁺；纯度:94.57％@254nm,99.20％@214nm.

实施例120：1-(1-(2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-159)

步骤1.2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)乙酸(GEN1-159-1)

向2-(3,4-二羟基苯基)乙酸(500mg，3.0mmol)和K₂CO₃(1.24g，9.0mmol)的乙二醇(5.0mL)溶液中加入1,2-二溴乙烷(1.13g，6.0mmol)。将所得混合物在N₂气氛下120℃搅拌4.5小时。将反应混合物冷却至室温，并用水(40mL)稀释。加入EtOAc(40mL)并搅拌5分钟。弃去有机层，并用2M HCl酸化水层至pH＜1。用EA(60mL×3)萃取水层。用水(150mL)，盐水(150mL)洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黑色油。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用(EA/(PE+EA)＝60％)洗脱，得到所需的化合物(495mg，收率85％)为黑色油状物。MS(ESI):Rt＝1.01min,m/z 217[M+Na]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.1-(1-(2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-159)

向2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)乙酸(50mg，0.17mmol)、1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(37mg，0.19mmol)和HATU(100mg，0.26mmol)的DMF(1.0mL)溶液中加入DIEA(45mg,0.35mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物滴加到水(10mL)中。通过过滤收集沉淀的固体。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，5％至75％梯度，40分钟；检测，UV214nm)得到所需的化合物(12mg，收率15％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.46(s,1H),7.35(d,J＝7.6Hz,1H),7.27(d,J＝7.7Hz,1H),7.16(t,J＝7.9Hz,1H),6.80–6.72(m,2H),6.71–6.66(m,1H),4.62–4.54(m,1H),4.25-4.19(m,5H),4.17–4.09(m,1H),3.72–3.53(m,2H),2.96(t,J＝13.1Hz,1H),2.57–2.51(m,1H),2.49(s,2H),1.73–1.64(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.52min,m/z 462.4[M+H]⁺,纯度:91％@254nm,100％@214nm.

实施例121：1-(4-(2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)1,2-二酮(GEN1-160)

步骤1.2-氧代-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸钾(GEN1-160-1)

向2-氧代-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸乙酯(100mg，0.4mmol)的MeOH(2.0mL)溶液中加入KOH(24mg，0.4mmol)的水(0.2mL)溶液。将所得混合物在室温搅拌4小时。将得到的混合物浓缩得到所需的化合物(58mg粗品)为白色固体。TLC:MeOH/(MeOH+DCM)＝10％,Rf＝0.2

步骤2.1-(4-(2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)1,2-二酮(GEN1-160)

向1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(50mg，0.17mmol)、2-氧代-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸钾(58mg粗品)、EDCI(50mg，0.26mmol)和HOBT(36mg，0.26mmol)的DMF(1.0mL)溶液中加入DIEA(45mg,0.35mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物滴加到水(20mL)中。通过过滤收集沉淀的固体。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，5％至70％梯度，40分钟；检测，UV214nm)得到所需的化合物(14.5mg，收率17％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.52(s,1H),8.13(d,J＝8.1Hz,2H),8.02(d,J＝8.3Hz,2H),7.37(d,J＝8.0Hz,1H),7.29(d,J＝7.7Hz,1H),7.17(t,J＝7.9Hz,1H),4.60(d,J＝13.3Hz,1H),4.41–4.27(m,1H),3.62(d,J＝13.8Hz,1H),3.23(t,J＝12.7Hz,1H),2.94(t,J＝13.0Hz,1H),2.72–2.55(m,2H),1.88(d,J＝12.8Hz,1H),1.71(d,J＝12.7Hz,1H).MS(ESI):Rt＝1.64min,m/z 486.0[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例122：3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(GEN1-161)

步骤1.3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮

向3-(哌啶-4-基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-一(50mg，0.22mmol)的DMF(3mL)溶液中加入DIEA(1.1mL)。将混合物在室温搅拌10分钟后，加入2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(53mg，0.26mmol)，EDCI(63mg，0.33mmol)和HOBT(44mg，0.33mmol)。。将得到的混合物在室温搅拌4小时。用水(20mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(15mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(15mL×2)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝50-70％)，得到期望的化合物(10.3mg，产率11％)，为白色固体。¹HNMR(400M,CDCl₃):δ7.61(d,J＝8.0Hz,2H),7.41(d,J＝8.0Hz,2H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.03(d,J＝7.6Hz,1H),6.98-6.94(m,1H),6.66-6.61(m,2H),4.82-4.79(m,1H),4.62-4.53(m,1H),4.28-4.16(m,2H),3.98-3.95(m,1H),3.81(s,2H),3.19-3.12(m,1H),2.70-2.64(m,1H),1.79-1.66(m,3H),1.46-1.42(m,1H).MS(ESI):Rt＝3.352min,m/z418.2[M+H]⁺；纯度:99.11％@254nm,98.90％@214nm.

实施例123：1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(GEN1-162)

步骤1.1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-酮(GEN1-162-1)

在冰浴条件下向哌啶-4-酮盐酸盐(500mg，3.69mmol)、2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸(753mg，3.69mmol)、HOBT(747mg，5.53mmol)、DIEA(2.38g,18.4mmol)的DMF(10mL)溶液中加入EDCI(1.06g，5.53mmol)。将所得混合物搅拌过夜。将混合物倒入水(70mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用水(30mL)，盐水(30mL)洗涤，经MgSO₄干燥并浓缩，得到所需化合物(1.05g，收率88％)为黄色油状物。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.61(d,J＝8.0Hz,2H),7.41(d,J＝8.0Hz,2H),3.92(t,J＝6.0Hz,2H),3.87(s,2H),3.76(t,J＝6.0Hz,2H),2.47(t,J＝6.0Hz,2H),2.32(t,J＝6.0Hz,2H).

步骤2.2-氨基苄氨基甲酸苄酯(GEN1-162-2)

在冰浴下向2-(氨基甲基)苯胺(1.0g，8.2mmol)和TEA(1.24g，12.3mmol)的DCM(20mL)的溶液中加入碳酰氯苄酯(1.40g，8.19mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用DCM(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经MgSO₄干燥并浓缩，得到所需化合物(1.35g，收率34％)为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.52min,m/z 257.3[M+H]⁺,纯度:51％@254nm,53％@214nm.

步骤3.氨基甲酸2-(((1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苄基氨基甲酸酯(GEN1-162-3)

向2-氨基苄基氨基甲酸苄酯(200mg，0.780mmol)、1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-酮(223mg，0.782mmol)和两滴HOAc的DCE(5mL)溶液中加入NaBH(OAc)₃(248mg，1.17mmol)。将所得混合物在65℃下搅拌过夜。将反应混合物倒入水(30mL)中，并用DCM(20mL×3)萃取。合并的有机层经MgSO₄干燥并浓缩。将粗产物通过硅胶上的柱色谱法纯化(石油醚：EtOAc＝3∶1至1∶1)，得到所需化合物(140mg，收率31％)为无色油状物。MS(ESI):Rt＝1.72min,m/z 526.6[M+H]⁺,纯度:90％@254nm,67％@214nm.

步骤4.1-(4-((2-(氨基甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-162-4)

向2-((1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苄基氨基甲酸酯(140mg，0.266mmol)的MeOH(4mL)溶液中添加Pd/C(10％纯度，28mg)。将所得混合物在室温氢化2小时。过滤反应混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(57mg，收率50％)为无色油状物。MS(ESI):Rt＝1.55min,m/z 390.5[M-H]^-,纯度:92％@254nm,73％@214nm.

步骤5.1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(GEN1-162)

在冰浴的条件下向1-(4-((2-(氨基甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(57mg，0.15mmol)和NaHCO₃(61mg,0.73mmol)的DCM(4mL)溶液中加入三光气(21mg，0.071mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物过滤并将滤液浓缩。将残余物通过C₁₈柱(CH₃CN：水＝5％至55％)纯化，得到所需化合物(27mg，收率43％)为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.61(d,J＝7.6Hz,2H),7.41(d,J＝8.0Hz,2H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.08(d,J＝7.2Hz,1H),7.00(t,J＝7.2Hz,1H),6.90(d,J＝8.4Hz,1H),4.93(s,1H),4.85-4.82(m,1H),4.28(s,2H),4.24-4.15(m,1H),4.02-3.98(m,1H),3.83(s,2H),3.15-3.08(m,1H),2.70-2.44(m,3H),1.88-1.80(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.996min,m/z418.2[M+H]⁺,纯度:98.59％@254nm,96.85％@214nm.

实施例124：1-(吡啶-2-基)-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)脲(GEN1-163)

步骤1.4-((((苄氧基)羰基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-163-1)

在室温下向4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.00g，15.0mmol)和Na₂CO₃(2.40g，22.6mmol)的THF(30mL)溶液中滴加碳氯化苄酯(2.80g，16.5mmol)。在室温搅拌1小时后，将反应混合物浓缩，并将褐色油状残余物用水(50mL)稀释。用EtOAc(30mL×2)萃取水溶液。将合并的有机相用饱和NaHCO₃水溶液，用无水硫酸钠干燥并浓缩，得到所需化合物(4.9g，收率91％)为白色固体。LCMS(ESI):Rt＝1.63min,m/z 235.2[M+H-Boc]⁺,纯度:28％@254nm,93％@214nm.

步骤2.苄基哌啶-4-基氨基甲酸酯盐酸盐(GEN1-163-2)

在室温下向4-((((苄氧基)羰基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.90g，14.8mmol)的MeOH(40mL)溶液中滴加浓HCl(5mL)。在室温下搅拌过夜后，浓缩该混合物，得到所需的化合物(3.6g，收率86％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.82(br s,1H),8.60(br s,1H),7.52(d,J＝7.2Hz,1H),7.39-7.28(m,5H),5.02(s,2H),3.67-3.54(m,1H),3.23-3.20(m,2H),2.98-2.90(m,2H),1.93-1.88(m,2H),1.64-1.54(m,2H).

步骤3.苄基(1-(2-(4-(三(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸酯(GEN1-163-3)

在室温下，向苄基哌啶-4-基氨基甲酸酯盐酸盐(500mg，1.85mmol)和HOBT(374mg，2.77mmol)的DMF(30mL)溶液中滴加DIEA(1.19g，9.23mmol)。将混合物搅拌20分钟后，将2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(415mg，2.03mmol)分批加入。将所得混合物在室温搅拌过夜。用水(50mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(30mL×2)萃取。将合并的有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩，得到所需化合物(800mg，收率87％)为黄色油状物。LCMS(ESI):Rt＝1.66min,m/z421.4[M+H]⁺；纯度:97％@254nm,84％@214nm.

步骤4.1-(4-氨基哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(GEN1-163-4)

将(1-(2-(4-(三(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸苄酯(500mg，0.999mmol)和Pd/C(10％纯度，53mg)溶解在MeOH(5mL)溶液中。将混合物在室温下氢化过夜。过滤反应混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(380mg，收率78％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.58(d,J＝8.0Hz,2H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),4.52-4.49(m,1H),3.83-3.75(m,3H),3.09-3.02(m,1H),2.93-2.86(m,1H),2.79-2.72(m,1H),1.92-1.75(m,2H),1.30-1.20(m,2H).

步骤5.苯基吡啶-2-基氨基甲酸酯(GEN1-163-5)

在冰浴下，向吡啶-2-胺(500mg，5.31mmol)和吡啶(630mg，7.96mmol)的CH₃CN(10mL)溶液中滴加碳酰氯苯基酯(832mg，5.31mmol)。将所得白色悬浮液在0℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(70mL)中，并用EtOAc(40mL×3)萃取。用水(40mL)，盐水(40mL)洗涤合并的有机层，经MgSO₄干燥并过滤。将滤液浓缩，得到所需的化合物(910mg，收率68％)为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ9.94(s,1H),8.42(d,J＝7.2Hz,1H),8.07(d,J＝8.8Hz,1H),7.75-7.71(m,1H),7.45-7.41(m,2H),7.29-7.22(m,4H),7.04-7.01(m,1H).

步骤6.1-(吡啶-2-基)-3-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)脲(GEN1-163)

将N-(2-吡啶基)氨基甲酸苯酯(100mg，0.467mmol)、1-(4-氨基哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮的溶液(134mg，0.468mmol)、DMAP(58mg，0.47mmol)溶解在CH₃CN(4mL)溶液中。将混合物在50℃下搅拌5小时。将反应混合物浓缩并将残余物通过C₁₈柱纯化(CH₃CN：水＝5％至55％)，得到所需的化合物(148.1mg，收率77％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.55(d,J＝5.6Hz,1H),8.14(d,J＝5.2Hz,1H),8.05-7.78(m,1H),7.60-7.57(m,3H),7.39(d,J＝8.0Hz,2H),6.90-6.87(m,1H),6.73-6.71(m,1H),4.39-4.35(m,1H),4.09-3.97(m,1H),3.86-3.75(m,3H),3.29-3.22(m,1H),3.11-3.04(m,1H),2.05-1.99(m,2H),1.59-1.49(m,1H),1.43-1.34(m,1H).LCMS(ESI):Rt＝3.681min,m/z 407.1[M+H]⁺；纯度:99.52％@254nm,99.03％@214nm.

实施例125：1-(吡啶-2-基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)脲

步骤1.4-(吡啶-2-基氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的合成

向2-溴吡啶(1.18g，7.49mmol)，4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.00g，4.99mmol)，Davephos(393mg，1.00mmol)和NaOtBu(1.44g，15.0mmol)的二氧六环(20mL)中加入Pd 2(dba)3(517mg，0.500mmol)。将混合物在90℃在氮气下搅拌过夜。将得到的混合物浓缩，并添加水(50mL)。然后加入DCM(100mL×3)萃取所需化合物。合并的有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过C18柱纯化(50-70％B；A：H₂O B：CH₃CN)，得到期望的化合物(794mg，收率57％)，为土黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.54min,m/z 278.3[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.N-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺盐酸盐的合成

在室温下将4-(吡啶-2-基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(665mg，2.40mmol)在HCl/MeOH(15mL，4M)中的悬浮液搅拌2小时。浓缩所得混合物，得到所需化合物(638mg，收率90％)，为黄色固体。MS(ESI):Rt＝0.28min,m/z 178.1[M+H]⁺；纯度:85％@254nm,42％@214nm.

步骤3.1-(4-(吡啶-2-基氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮的合成

向N-(哌啶-4-基)吡啶-2-胺盐酸盐(100mg，0.400mmol)，DIEA(310mg，2.40mmol)，EDCI(138mg，0.720mmol)和HOBT(97mg，0.72mmol)的DMF(2mL)溶液中加入2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(122mg，0.598mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。然后将混合物通过C18柱纯化(50-70％B；A：H₂O B：CH₃CN)，得到所需化合物(107mg，收率74％)，为浅棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.54min,m/z 364.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.合成1-(吡啶-2-基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)脲

在干冰丙酮浴中向1-(4-(吡啶-2-基氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(107mg，0.294mmol)和TEA(179mg，1.77mmol)的THF(2mL)溶液中加入三光气(262mg，883umol)。在-65℃下搅拌15分钟后，将混合物温热至室温并搅拌3小时。将混合物浓缩并加入NH 4OH水溶液(2mL，28％纯度)。在室温搅拌过夜后，将混合物浓缩并将残余物通过制备纯化。HPLC(prep-1 Xbridge C18 5um 19*150mm，10-60％B；A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：CH₃CN；254nm；流速：15mL/min)得到所需化合物(70mg，收率58％)为灰色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.44(dd,J＝4.8,1.6Hz,1H),7.80(td,J＝7.6,2.0Hz,1H),7.61(d,J＝8.0Hz,2H),7.38(d,J＝8.0Hz,2H),7.30-7.27(m,1H),7.16(d,J＝7.6Hz,1H),5.80(s,2H),4.41(d,J＝12.8Hz,1H),4.36-4.28(m,1H),3.94(d,J＝14.0Hz,1H),3.82-3.73(m,2H),3.05-2.99(m,1H),2.58-2.50(m,1H),1.75(d,J＝11.2Hz,1H),1.66(d,J＝12.4Hz,1H),1.41-1.31(m,1H),1.29-1.19(m,1H).MS(ESI):Rt＝2.723min,m/z 407.2[M+H]⁺；纯度:99.52％@254nm,99.11％@214nm.

实施例126：4-甲基-5-苯基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑-2(3H)-酮(GEN1-166)

步骤1.4-异氰酸根合哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-166-1)

在冰浴下，向4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，2.50mmol)和DIEA(807mg，6.24mmol)的DCM(7mL)溶液中滴加三光气(296mg，0.997mmol)的DCM(8mL)溶液。将反应混合物在室温搅拌3小时。浓缩反应混合物，得到所需化合物(1.2g粗品)，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤2.2-溴-1-苯基丙烷-1-酮(GEN1-166-2)

在冰浴下向异丙苯酮(5.00g，37.3mmol)的DCM(80mL)溶液中滴加Br₂(5.96g，37.3mmol)。将得到的混合物在室温搅拌3小时。将反应混合物倒入水(100mL)中，并用DCM(50mL×3)萃取。合并的有机层用NaHCO₃水溶液(10％，50mL)，盐水(50mL)洗涤，经MgSO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到所需化合物(7.7g，收率87％)为浅棕色油。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.04-8.02(m,2H),7.61-7.58(m,1H),7.51-7.47(m,2H),5.30(q,J＝6.4Hz,1H),1.91(d,J＝6.4Hz,3H).

步骤3.2-氨基-1-苯基丙-1-酮盐酸盐(GEN1-166-3)

向2-溴-1-苯基丙-1-酮(1.00g，4.70mmol)的CH₃CN(10mL)溶液中加入二甲酰胺钠(535mg，5.63mmol)。将反应混合物在70℃下搅拌过夜。浓缩反应混合物，并将残余物溶于6MHCl(10mL)。在100℃下搅拌1小时后，将反应混合物浓缩。通过在i-PrOH中重结晶来纯化粗产物，得到所需化合物(80mg，收率9％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.58(br s,3H),8.08-8.05(m,2H),7.76-7.72(m,1H),7.62-7.58(m,2H),5.12(q,J＝7.2Hz,1H),1.44(d,J＝7.2Hz,3H).

步骤4.4-甲基-5-苯基-1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑-2(3H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐(GEN1-166-4)

向2-氨基-1-苯基丙-1-酮盐酸盐(80mg，0.43mmol)的丙酮(5mL)悬浮液中，加入4-异氰酸根合哌啶-1-羧酸叔丁酯(117mg，0.518mmol)和TEA(52mg，0.51mmol)。将混合物在室温搅拌2小时后，加入TFA(1mL)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并浓缩，得到所需化合物(160mg，收率91％)为棕色油状物。LCMS(ESI):Rt＝1.25min,m/z 258.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,91％@214nm.

步骤5.4-甲基-5-苯基-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑-2(3H)-酮(GEN1-166)

在冰浴下，向4-甲基-5-苯基-1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑-2(3H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐(160mg，0.431mmol)、2-加入4-(三氟甲基)苯基)乙酸(97mg，0.48mmol)、HOBt(87mg，0.64mmol)和DIEA(167mg，1.29mmol)的DMF(5mL)溶液中加入EDCI(124mg，0.65mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用MgSO₄干燥，过滤并浓缩。粗产物通过C₁₈(CH₃CN：水＝5％至45％)纯化。然后通过制备TLC(EtOAc∶MeOH＝15∶1)得到所需化合物(22.1mg，收率12％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.12(s,1H),7.65(d,J＝8.4Hz,2H),7.47-7.35(m,5H),7.26(d,J＝8.4Hz,2H),4.44-4.41(m,1H),4.01-3.97(m,1H),3.87-3.77(m,2H),3.67-3.58(m,1H),2.90-2.84(m,1H),2.42-2.18(m,3H),1.85(s,3H),1.67-1.55(m,2H).LCMS(ESI):Rt＝3.939min,m/z 444.2[M+H]⁺；纯度:98.54％@254nm,98.86％@214nm.

实施例127：1'-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-2-酮(GEN1-167)

步骤1.螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-2-酮2,2,2-三氟乙酸盐(GEN1-167-1)

在0℃下向2-氧代螺并[吲哚啉-3,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(100mg，0.33mmol)的DCM(5.0mL)溶液中滴加TFA(0.25mL)。将所得混合物在室温下搅拌4小时。将得到的混合物浓缩。得到所需化合物(110mg粗产物)无需进一步纯化即可直接用于下一步。MS(ESI):Rt＝1.67min,m/z 203.0[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.1'-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-2-酮(GEN1-167)

向螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-2-酮2,2,2-三氟乙酸盐(110mg粗品)、2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(81mg，0.40mmol)、EDCI(95mg,0.49mmol)、HOBT(67mg，0.49mmol)的DMF(2.0mL)溶液中加入DIEA(170mg,1.32mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物倒入水(15mL)中，并用EA(16mLX 3)萃取。用水(30mL)，盐水(40mL)洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黄色油。残余物通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，20％至70％梯度，50分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(26.8mg，收率28％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.44(s,1H),7.70(d,J＝8.0Hz,2H),7.50(d,J＝8.0Hz,2H),7.37(d,J＝7.4Hz,1H),7.19(t,J＝7.7,1H),6.95(t,J＝7.6,1H),6.85(d,J＝7.7Hz,1H),3.99–3.84(m,4H),3.83-3.70(m,2H),1.75–1.57(m,4H).MS(ESI):Rt＝1.51min,m/z 388.9[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例128：1-(1-(2-(3,4-二甲氧基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-168)

步骤1.合成1-(1-(2-(3,4-二甲氧基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-168)

向1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(57mg，0.2mmol，合成步骤请参见GEN1-116-4)，2-(3,4-二甲氧基苯基)乙酸(47mg，0.24mmol)，HOBT(40.5mg，0.3mmol)和DIEA(51.6mg，0.4mmol)的DMF(1mL)溶液加入EDCI(57.5mg，0.3mmol)。所得混合物在室温搅拌1h。用水(30mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，再无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液得到粗产物。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(30mg，产率32.3％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.60(s,1H),7.39(d,J＝8.1Hz,1H),7.29(d,J＝7.8Hz,1H),7.14(t,J＝8.0Hz,1H),6.86-6.76(m,3H),4.90(d,J＝13.1Hz,1H),4.46–4.35(m,1H),4.07(d,J＝13.7Hz,1H),3.90(s,3H),3.85(s,3H),3.75(s,2H),3.03(t,J＝13.1Hz,1H),2.84–2.55(m,3H),1.87-1.72(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.47min,m/z 464.2,[M+H]⁺；纯度:100％@254nm.

实施例129：1-(1-(1-(2-(1H-吲哚-3-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-169)

步骤1.合成2-(1H-吲哚-3-基)乙酸(GEN1-218-1)

在室温下向2-(1H-吲哚-3-基)乙酸乙酯(100mg，0.49mmol)的MeOH(5ml)，H₂O(5ml)的悬浮液中加入KOH(41.2mg，0.735mmol)。所得混合物室温搅拌3h。用水(30mL)稀释反应混合物，并用1N HCl将pH调节至4。然后用EtOAc(30mL×3)萃取混合物。合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，再经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液得到所需的化合物(45mg，收率52.4％)为白色固体。MS(ESI):Rt＝0.26min,m/z 176.2,[M+H]⁺；

步骤2.合成1-(1-(1-(2-(1H-吲哚-3-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-169)

向1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(50mg，0.175mmol，合成步骤请参见GEN1-116-4)，2-(1H-吲哚-3-基)乙酸(44.8mg，0.21mmol)，HOBT(35.5mg，0.263mmol)和DIEA(45.2mg，0.35mmol)的DMF(1mL)溶液中加入EDCI(50.4mg，0.263mmol)。所得混合物在室温搅拌1h。用水(30mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，再经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液得到粗产物。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(28.6mg，产率36.9％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.5-11.34(m,1H),10.91(s,1H),7.57(d,J＝7.9Hz,1H),7.41-7.31(m,2H),7.28(d,J＝7.6Hz,1H),7.24-7.20(m,1H),7.19-7.12(m,1H),7.07(t,J＝7.5Hz,1H),6.97(t,J＝7.4Hz,1H),4.70-4.54(m,1H),4.30-4.16(m,2H),3.92–3.70(m,2H),2.98(t,J＝13.0Hz,2H),2.71-2.56(m,1H),2.47-2.31(m,2H),1.74-1.64(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.50min,m/z 443.2,[M+H]⁺；纯度:100％@254nm.

实施例130：(E)-N-(1-(1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-亚丙基)乙酰胺(GEN1-171)

步骤1.4-(((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-171-1)

将2-氟-1-硝基-3-(三氟甲基)苯(3.0g，14mmol)、4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.87g，14mmol)、K₂CO₃(2.97g，21mmol)、KI(238mg，1.4mmol)溶于DMF(60mL)溶液中。将反应混合物在80℃下搅拌16小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水(125mL)中，并用EA(120mL×3)萃取。用水(150mL)，盐水(150mL)洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黑色油。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用(EA/(PE+EA)＝5％)洗脱，得到所需化合物(5.57g，99％收率)为黄色油。TLC:EA/(PE+EA)＝5％,Rf＝0.3

步骤2.N-(2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(GEN1-171-2)

在0℃下向4-(((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，0.51mmol)的DCM(10.0mL)溶液中滴加TFA(1.0mL)。将所得混合物于室温搅拌2小时。将得到的混合物浓缩。得到所需化合物(660mg粗品)无需进一步纯化即可直接用于下一步。TLC:EA/(PE+EA)＝80％,Rf＝0.4

步骤3.1-(4-((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(喹啉-6-基)乙-1-酮(GEN1-171-3)

向N-(2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸盐(660mg粗品)、2-(喹啉-6-基)乙酸(240mg，1.28mmol)、EDCI(370mg，1.93mmol)、HOBT(260mg，1.93mmol)的DMF(10mL)溶液中加入DIEA(664mg，5.15mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物倒入水(20mL)中，并用EA(50mL×3)萃取。用水(90mL)，盐水(90mL)洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黄色油。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用(EA/(PE+EA)＝80％)洗脱，得到所需化合物(528mg，收率89％)为黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.53min,m/z459.0[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,92％@214nm.

步骤4.1-(4-((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(喹啉-6-基)乙-1-酮(GEN1-171-4)

向1-(4-((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(喹啉-6-基)乙-1-酮(514mg，1.12mmol)的甲醇(25mL)溶液中加入Pd/C(60mg)。将所得混合物在室温下氢化4小时。过滤反应混合物，滤饼用MeOH(50mL×3)洗涤。将滤液在减压下浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用(EA/(PE+EA＝60％)洗脱，得到所需化合物(366mg，收率76％)为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.47min,m/z 428.8[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,86％@214nm.

步骤5.1-(4-(2-氨基-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)-2-(喹啉-6-基)乙-1-酮(GEN1-171-5)

向1-(4-((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(喹啉-6-基)乙-1-酮(366mg，0.85mmol)的MeCN(10mL)溶液中加入溴化氰(453mg，4.27mmol)。将所得混合物在室温下搅拌36小时。将反应混合物倒入水(20mL)中，并用EA(30mL X 3)萃取。用水(50mL)，盐水(50mL)洗涤有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到浅黄色固体。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，15％至70％梯度，50分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(100mg，收率26％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.87(d,J＝4.2Hz,1H),8.38–8.28(m,1H),7.97(d,J＝8.7Hz,1H),7.83(d,J＝1.9Hz,1H),7.67(d,J＝8.7Hz,1H),7.52(d,J＝8.3Hz,1H),7.44(d,J＝7.7Hz,1H),7.25(d,J＝7.8Hz,1H),7.12(t,J＝7.8Hz,1H),6.57(s,2H),4.76–4.65(m,1H),4.59–4.46(m,1H),4.32–4.21(m,1H),4.15–3.82(m,2H),3.05(t,J＝13.6Hz,1H),2.67–2.52(m,2H),2.46–2.27(m,1H),1.82–1.65(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.43min,m/z 453.8[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤6.(E)-N-(1-(1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-亚丙基)乙酰胺(GEN1-171)

向1-(4-(2-氨基-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)-2-(喹啉-6-基)乙-1-酮(40mg，0.09mmol)、乙酸(6mg，0.10mmol)、HATU(64mg，0.17mmol)的DMF(0.5mL)溶液中加入DIEA(43mg，0.33mmol)。将得到的混合物在室温搅拌120小时。将反应混合物倒入水(5mL)中，并用EA(8mLX3)萃取。合并的有机层用水(20mL)，盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黑色油。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，15％至65％梯度，50分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(16mg，收率36％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.36(s,1H),8.91–8.84(m,1H),8.33(d,J＝9.2Hz,1H),7.98(d,J＝8.6Hz,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,1H),7.85(s,1H),7.71–7.64(m,2H),7.55–7.50(m,1H),7.38(t,J＝7.9Hz,1H),4.72–4.50(m,2H),4.37–4.25(m,1H),4.10–3.91(m,2H),3.10(t,J＝13.1Hz,1H),2.61(t,J＝12.8Hz,1H),1.88(s,3H),1.86–1.71(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.28min,m/z 496.2[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例131：(E)-N-(1-(1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-亚烷基)苯甲酰胺(GEN1-172)

步骤1.(E)-N-(1-(1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-亚烷基)苯甲酰胺(GEN1-172)

向1-(4-(2-氨基-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-基)-2-(喹啉-6-基)乙-1-酮(60mg，0.13mmol)、苯甲酸(20mg，0.16mmol)、HATU(100mg，0.26mmol)的DMF(1.0mL)溶液中加入DIEA(68mg,0.53mmol)。将得到的混合物在室温搅拌180小时。将反应混合物倒入水(5mL)中，并用EA(8mLX3)萃取。用水(20mL)，盐水(20mL)洗涤有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黑色油。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，15％至65％梯度，50分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(20mg，收率28％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ13.28(s,1H),8.89–8.83(m,1H),8.24(d,J＝8.0Hz,1H),8.16–8.10(m,2H),7.95–7.86(m,2H),7.83(s,1H),7.72–7.67(m,1H),7.65(d,J＝7.9Hz,1H),7.54–7.45(m,2H),7.45–7.34(m,3H),4.75–4.56(m,2H),4.37–4.30(m,1H),4.23–3.95(m,2H),3.28–3.06(m,3H),2.74–2.62(m,1H),1.89–1.81(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.50min,m/z 558.3[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例132：1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)氮杂环庚烷-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-173)

步骤1.合成4-(((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(GEN1-173-1)

向2-氟-1-硝基-3-(三氟甲基)苯(150mg，0.72mmol)，K₂CO₃(199mg,1.44mmol)，KI(12mg，0.072mmol)的DMF(5mL)的悬浮液中加入4-氨基氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(185.2mg，0.864mmol)。所得混合物在80℃搅拌3小时。将反应混合物用水(80mL)稀释，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到所需的化合物(150mg，产率51.6％)为黄色油状物。MS(ESI):Rt＝1.85min,m/z426.4,[M+H]⁺；纯度:60.94％@254nm,38.26％@214nm.

步骤2.合成4-((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(GEN1-173-2)

在室温下向4-(((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.37mmol)的EtOH(20mL)溶液中加入Pd/C(15mg，5％纯度)。所得混合物置换氢气并在氢气氛围下搅拌3小时。将混合物过滤并将滤液浓缩。残余物经硅胶柱层析(PE：EA＝1：1)纯化得到所需的化合物(80mg，收率57.9％)为浅黄色固体。

步骤3.4-(2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(GEN1-173-3)

在室温下向4-(((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(80mg，0.214mmol)，NaHCO₃(90mg，1.07mmol)的DCM(10mL)悬浮液中加入三光气(18.68mg，0.086mmol)。所得混合物室温搅拌1小时。将混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(70mg，收率81.9％)为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.66min,m/z 422.1,[M+H]⁺；纯度:56.18％@254nm,100％@214nm.

步骤4.合成1-(氮杂-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-173-4)

向4-(2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(70mg，0.175mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(2mL)。所得混合物室温搅拌1小时。将得到的混合物浓缩并重新溶解在DCM(20ml)中。然后将混合物再次浓缩，得到所需的化合物粗品(100mg)为棕色固体。不经纯化直接用于下一步。MS(ESI):Rt＝1.27min,m/z300.1,[M+H]⁺；纯度:94％@214nm.

步骤5.合成1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)氮杂环庚烷-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-173)

向1-(氮杂-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(100mg，粗品，0.175mmol)，2-(中的喹啉-6基)乙酸(39.3mg，0.21mmol)，HOBT(35.47mg，0.2625mmol)和DIEA(90.4mg，0.7mmol)的DMF(2mL)溶液中，加入EDCI(50.3mg，0.2625mmol)。所得混合物室温搅拌1h。用水(50mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到粗产物。粗产物无需纯化即可直接用于下一步。粗粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(35mg，收率42.7％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.61(d,J＝33.3Hz,1H),8.90(s,1H),8.30–8.09(m,2H),7.86–7.65(m,2H),7.47–7.32(m,2H),7.23(t,J＝7.9Hz,1H),7.14-7.03(m,1H),4.48–4.30(m,1H),4.06–3.84(m,3H),3.81–3.67(m,1H),3.62–3.52(m,1H),3.50-3.39(m,1H),2.94–2.62(m,2H),2.27-2.13(m,1H),2.08–1.98(m,1H),1.90–1.54(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.42min,m/z 468.9,[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例133：7-(三氟甲基)-1-((1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-174)

步骤1.4-((((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

2-氟-1-硝基-3-(三氟甲基)苯(600mg，2.87mmol)，4-(氨基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(613mg，2.86mmol)和K₂CO₃(595mg，4.31mmol)的DMF(10mL)混合物在85℃下搅拌4小时。用水(15mL)稀释混合物，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩，得到所需化合物(3g，93％收率，在214nm下纯度为36％)，为黄色油。MS(ESI):Rt＝1.88min,m/z 348.3[M-56+H]⁺；纯度:23％@254nm,36％@214nm.

步骤2.4-((((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

4-((((2-2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(3g，2.68mmol，36％纯度)和Pd/C(10％将21mg(21mg)的MeOH(5mL)溶液氢化4小时。然后将反应混合物过滤并将滤液浓缩。粗产物通过C18柱纯化(ACN/水＝40-80％)，得到期望的化合物(700mg，收率70％)，为棕色油。MS(ESI):Rt＝1.85min,m/z 318.3[M-56+H]⁺；纯度:100％@254nm,94％@214nm.

步骤3.4-((2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

在0℃下向4-((((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.803mmol)的DCM(5mL)溶液中添加NaHCO₃(270mg，3.21mmol)。然后加入三光气(238mg，0.802mmol)。将得到的混合物温热至室温并搅拌2小时。将混合物倒入水(15mL)中，并用EtOAc(10mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(15mL×2)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过C18柱纯化(50-70％B；A：H₂O，B：CH₃CN)，得到期望的化合物(220mg，收率62％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.71min,m/z 398.5[M-H]^-；纯度:48％@254nm,100％@214nm.

步骤4.1-(哌啶-4-基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-1-酮2,2,2-三氟乙酸盐的合成

在室温下4-((2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，250umol)溶于二氯甲烷(5mL)和TFA(0.5mL)并搅拌过夜。浓缩混合物，得到期望的化合物(70mg，产率61％)，为无色油。MS(ESI):Rt＝1.28min,m/z 300.3[M+H]⁺；纯度:71％@254nm,100％@214nm.

步骤5.合成7-(三氟甲基)-1-((1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-174)

将化合物2-(6-喹啉基)乙酸(38mg，0.203mmol)和HATU(97mg，0.255mmol)在DMF(5mL)中的混合物在0℃搅拌40分钟。然后加入1-(哌啶丁-4-基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-1-酮2,2,2-三氟乙酸盐(70mg，0.17mmol)和DIEA(66mg 0.51mmol)。在室温搅拌4小时后，将混合物倒入水(15mL)中，并用EtOAc(10mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过制备纯化。HPLC[水3，sunfire C18，5um，19*150mm，30～80％B，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：ACN，流速：15mL/min，UV＝214nm]得到所需的化合物(32.4mg，产率40％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.48(s,1H),8.86(dd,J＝4.0,1.2Hz,1H),8.30(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(d,J＝8.4Hz,1H),7.78(s,1H),7.62(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.51(dd,J＝8.4,4.0Hz,1H),7.34(d,J＝8.0Hz,1H),7.30(d,J＝7.6Hz,1H),7.17(t,J＝8.0Hz,1H),4.38(d,J＝12.4Hz,1H),4.00(d,J＝13.6Hz,1H),3.91(s,2H),3.78(d,J＝7.2Hz,2H),2.93(t,J＝12.4Hz,1H),2.45-2.48(m,1H),2.03-1.96(m,1H),1.49(t,J＝11.8Hz,2H),1.13-1.04(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.137min,m/z 469.2[M+H]⁺；纯度:93.19％@254nm,99.10％@214nm.

实施例134：5-[1-[2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酰基]-4-哌啶基]-1,3-二氢-1,4-苯并二氮杂-2-酮(GEN1-176)

步骤1.3-(哌啶-4-基)-1H-吲哚盐酸盐的合成

4-(1H-吲哚-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(450mg，1.50mmol，合成步骤见GEN1-139-2的最终报告)在HCl/MeOH(6M，10将其在室温下搅拌2小时。浓缩所得混合物，得到所需化合物(350mg，产率99％)，为褐色固体。MS(ESI):Rt＝1.15min,m/z 201.1[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.1-(4-(1H-吲哚-3-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮的合成

3-(哌啶-4-基)-1H-吲哚盐酸盐(462mg，1.95mmol)，DIEA(1.26g，9.76mmol)，EDCI(561mg，2.93mmol)和HOBT(396mg，2.93mmol)的DMF(5mL)溶液中加入2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(478mg，2.34mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。所得混合物通过C18(50-60％B，A：H₂O B：CH₃CN)纯化，得到期望的化合物(480mg，收率64％)，为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.51min,m/z 387.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤3.N-(2-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-羰基)苯基)甲酰胺的合成

向1-(4-(1H-吲哚-3-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(380mg，0.983mmol)在MeOH(10mL)和水(5mL)的悬浮液加入高碘酸钠(631mg，2.95mmol)。将混合物在70℃搅拌过夜。浓缩所得混合物，并添加水(20mL)。加入DCM(30mL×3)提取所需化合物。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，并将残余物纯化C18(50-70％B；A：H₂O B：CH₃CN)，得到期望的化合物(235mg，收率57％)，为黄色油。MS(ESI):Rt＝1.56min,m/z 419.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.1-(4-(2-氨基苯甲酰基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮的合成

N-(2-(1-(2-(4-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-羰基)苯基)甲酰胺(215mg，514umol)的HCl/MeOH(7M，5mL)溶液在室温下搅拌1小时。浓缩所得混合物，然后加入饱和Na₂CO₃溶液(10mL)。将混合物用DCM(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到期望的化合物(143mg，收率71％)，为黄色油。MS(ESI):Rt＝1.59min,m/z 391.4[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.合成5-[1-[2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酰基]-4-哌啶基]-1,3-二氢-1,4-苯并二氮杂-2-酮(GEN1-176)

于冰水浴下向1-(4-(2-氨基苯甲酰基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(143mg，0.366mmol)和TEA(56mg，0.55mmol)在DCM(3mL)中的溶液滴加2-氯乙酰氯(46mg，0.41mmol)。将混合物在室温搅拌2小时，然后蒸发溶剂。加入KI(6mg，36umol)和NH 3/MeOH(9M，3mL)。将混合物在室温下再搅拌2天。将得到的混合物浓缩并将残余物通过制备纯化。HPLC(prep-9 Xbridge C18 5um 19*150mm，30％-50％B；A：H₂O(0.1％NH3.H₂O)，B：CH₃CN；214nm，流速：15mL/min)得到所需化合物(34毫克，产率21％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.35(s,1H),7.73(dd,J＝8.0,0.8Hz,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,2H),7.51-7.47(m,1H),7.43(d,J＝8.4Hz,2H),7.24-7.20(m,1H),7.15(dd,J＝8.0,0.8Hz,1H),4.33(d,J＝12.8Hz,1H),3.97-3.86(m,3H),3.82-3.78(m,2H),3.24-3.18(m,1H),3.13-3.07(m,1H),2.72-2.66(m,1H),1.75-1.64(m,2H),1.39-1.24(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.657min,m/z430.2[M+H]⁺；纯度:98.11％@254nm,99.38％@214nm.

实施例135：8-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)-1,3,8-三氮杂螺[4.5]癸烷-2,4-二酮(GEN1-177)

步骤1.8-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)-1,3,8-三氮杂螺[4.5]癸烷-2,4-二酮(GEN1-177)

向1,3,8-三氮杂螺并[4.5]癸烷-2,4-二酮(100mg，0.59mmol)、2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(133mg，0.65mmol)、EDCI(170mg，0.88mmol)、HOBT(120mg，0.89mmol)的DMF(2.0mL)溶液中加入DIEA(153mg,1.19mmol)。将得到的混合物在室温搅拌8小时。将反应混合物倒入水(15mL)中，并用EA(25mLX3)萃取。用水(60mL)，盐水(60mL)洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黄色油。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，10％至65％梯度，50分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(105mg，收率50％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.75(s,1H),8.58(s,1H),7.67(d,J＝8.1Hz,2H),7.45(d,J＝8.0Hz,2H),4.24–4.13(m,1H),3.96–3.87(m,1H),3.87(s,2H),3.40–3.28(m,1H),3.09–2.97(m,1H),1.78–1.59(m,2H),1.59–1.49(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.37min,m/z 356.0[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例136：1'-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)螺[苯并[d][1,3]恶嗪-4,4'-哌啶]-2(1H)-酮(GEN1-178)

步骤1.螺[苯并[d][1,3]恶嗪-4,4'-哌啶]-2(1H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐(GEN1-178-1)

在零摄氏度下向2-氧代-1,2-二氢螺[苯并[d][1,3]恶嗪-4,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(100mg，0.32mmol)的DCM(1.0mL)溶液中逐滴加入TFA(0.3mL)。将所得混合物在室温搅拌2小时。将得到的混合物浓缩后得到所需的化合物(96mg粗品)，无需进一步纯化即可直接用于下一步。TLC:MeOH/(DCM+MeOH)＝5％,Rf＝0.5

步骤2.1'-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)螺[苯并[d][1,3]恶嗪-4,4'-哌啶]-2(1H)-酮(GEN1-178)

向螺[苯并[d][1,3]恶嗪-4,4'-哌啶]-2(1H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐(96mg粗品)、2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(70mg，0.34mmol)、EDCI(90mg，0.46mmol)、HOBT(64mg，0.46mmol)的DMF(1.5mL)溶液中加入DIEA(160mg,1.24mmol)。将得到的混合物在室温搅拌8小时。将反应混合物倒入水(15mL)中，并用EA(25mLX3)萃取。用水(60mL)，盐水(60mL)洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黄色油。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，15％至75％梯度，50分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(66mg，收率52％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.30(s,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.48(d,J＝7.9Hz,2H),7.29–7.18(m,2H),7.02(t,J＝7.5Hz,1H),6.89(d,J＝7.9Hz,1H),4.51–4.36(m,1H),4.05–3.82(m,3H),3.45–3.35(m,1H),2.99–2.85(m,1H),2.03–1.81(m,4H).MS(ESI):Rt＝1.42min,m/z 405.1[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例137：1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)-1'H-螺[哌啶-4,4'-喹唑啉]-2'(3'H)-酮(GEN1-179)

步骤1.1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)-1'H-螺[哌啶-4,4'-喹唑啉]-2'(3'H)-酮(GEN1-179)

向2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(90mg，0.441mmol)和HOBT(74mg，0.548mmol)的DMF(4mL)溶液中加入EDCI(106mg，0.553mmol)。将混合物在室温搅拌5分钟后，加入1'H-螺[哌啶-4,4'-喹唑啉]-2'(3'H)-酮(80mg，0.368mmol)和DIEA(142mg，1.10mmol)。将得到的混合物在室温搅拌4小时。用水(20mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(15mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(20mL×2)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过制备纯化HPLC[RP-PREP-1Xbridge C18 5um，19*150mm，20～75％B，A：H₂O(0.1％NH₄HCO₃)，B：ACN，流速：16mL/min，UV＝214nm]，得到所需的化合物(65mg，收率43％)为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ9.24(s,1H),7.69(d,J＝8.0Hz,2H),7.49(d,J＝8.0Hz,2H),7.29(s,1H),7.15-7.11(m,2H),6.89-6.85(m,1H),6.80(d,J＝8.4Hz,1H),4.31-4.27(m,1H),3.88-3.84(m,3H),3.60-3.54(m,1H),3.16-3.08(m,1H),1.80-1.65(m,4H).MS(ESI):Rt＝3.707min,m/z 404.2[M+H]⁺；纯度:98.05％@254nm,97.34％@214nm.

实施例138：1-(4-(4-乙酰基-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮的合成(GEN1-243)

步骤1.4-(3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

在冰浴下向4-(3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.603mmol)的溶液中，合成步骤请参阅GEN1-052-2的无水THF(5mL)溶液中滴加硼烷二甲基硫醚络合物(10M的二甲基硫醚溶液，3.0mmol，0.3mL)。将所得混合物在室温搅拌过夜。在冰浴下滴加MeOH(0.5mL)，并将混合物搅拌20分钟。将反应混合物浓缩并将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(石油醚∶EtOAc＝1∶1)，得到所需化合物(150mg，收率67％)，为棕色油。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.20-7.18(d,J＝8.0Hz,1H),7.11(t,J＝8.4Hz,,1H),6.78(d,J＝8.0Hz,1H),6.66-6.62(m,1H),5.51(s,1H),4.33-4.20(m,2H),3.91-3.84(m,1H),3.83-3.76(m,1H),3.44-3.35(m,2H),3.28-3.23(m,1H),2.84-2.76(m,2H),1.85-1.69(m,4H),1.48(s,9H).

步骤2.4-(4-乙酰基-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

在冰浴下向4-(3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.473mmol)和TEA(143mg，1.41mmol)的DCM(5mL)溶液中加入Ac2O(72mg，0.71mmol)。在室温下搅拌2小时后，将所得混合物用DCM(30mL)稀释。有机层用水(20mL)洗涤，经MgSO 4干燥并过滤。浓缩滤液，得到所需化合物(110mg，收率59％)，为棕色油。MS(ESI):Rt＝1.61min,m/z260.0[M+H-100]⁺；纯度:91％@254nm,75％@214nm.

步骤3.1-(4-(哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)乙酮2,2,2-三氟乙酸盐的合成

向4-(4-乙酰基-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(110mg，0.306mmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TFA(1毫升)。在室温下搅拌1.5小时后，将反应混合物浓缩，得到期望的化合物(110mg，收率96％)，为棕色油。MS(ESI):Rt＝1.16min,m/z260.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤4.1-(4-(4-乙酰基-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮的合成(GEN1-243)

冰浴下向2-(4)加入1-(4-(哌啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-1(2H)-基)乙酮2,2,2-三氟乙酸盐(110mg，0.295mmol)，4-(三氟甲基)苯基)乙酸(66mg，0.32mmol)，HOBt(60mg，0.44mmol)和DIEA(114mg，0.882mmol)的DMF(3mL)溶液中加入EDCI(85mg，0.44mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用MgSO₄干燥，过滤并浓缩。粗产物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至50％)，得到期望的化合物(36.2mg，产率27％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.60(d,J＝8.4Hz,2H),7.39(d,J＝8.0Hz,2H),7.08(t,J＝8.0Hz,1H),7.04-6.97(m,1H),6.72(d,J＝8.0Hz,1H),6.66(t,J＝8.0Hz,1H),4.86-4.82(m,1H),4.02-3.97(m,1H),3.89-3.77(m,5H),3.28-3.18(m,2H),3.15-3.08(m,1H),2.69-2.62(m,1H),2.22(s,3H),1.88-1.78(m,2H),1.70-1.60(m,1H),1.51-1.37(m,1H).MS(ESI):Rt＝3.783min,m/z 446.2[M+H]⁺；纯度:99.37％@254nm,99.57％@214nm.

实施例139：8-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(GEN1-265)

步骤1.4-((2-氰基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

2-氟-3-(三氟甲基)苄腈(500mg，2.64mmol)，4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(556mg，2.78mmol)和K₂CO₃(548mg，3.96mmol)在DMF(5mL)中在85℃下搅拌3小时。将混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用MgSO 4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过硅胶上的柱色谱法纯化(石油醚∶EtOAc＝5∶1)，得到所需化合物(450mg，收率35％)，为无色油状物。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ7.65(dd,J＝8.0Hz,3.6Hz,2H),6.87(t,J＝8.0Hz,1H),4.33-4.31(m,1H),4.26-4.16(m,1H),4.13-4.02(m,2H),2.96-2.90(m,2H),2.11-2.08(m,2H),1.47(s,9H),1.45-1.35(m,2H).

步骤2.4-((2-(氨基甲基)-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

向4-(((2-氰基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.271mmol)和氢氧化铵(0.5mL，25％)的MeOH(5mL)溶液中添加雷尼镍(20mg)。将反应混合物在H 2气氛下搅拌2小时。过滤反应混合物，浓缩滤液，得到所需化合物(100mg，收率95％)，为无色油状物。MS(ESI):Rt＝1.66min,m/z 318.3[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,95％@214nm.

步骤3.4-(2-氧代-8-(三氟甲基)-3,4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

在冰浴下向4-((2-(氨基甲基)-6-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(100mg，0.268mmol)和NaHCO₃(112mg，1.33mmol)的DCM(10mL)溶液加入三光气(32mg，0.11mmol)。将反应混合物搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用DCM(30mL×3)萃取。合并的有机层经MgSO 4干燥，过滤并浓缩，得到所需化合物(130mg，收率94％)，为无色油状物。MS(ESI):Rt＝1.64min,m/z 344.3[M+H-56]⁺；纯度:77％@254nm,53％@214nm.

步骤4.1-(哌啶-4-基)-8-(三氟甲基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-1-酮2,2,2-三氟乙酸酯的合成

向4-(2-氧代-8-(三氟甲基)-3,4-二氢喹唑啉-1(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(130mg，0.251mmol)的DCM(3mL)溶液中)加入TFA(0.6mL)。将得到的混合物在室温搅拌2小时。浓缩反应混合物，得到期望的化合物(110mg，产率99％)，为棕色油。

MS(ESI):Rt＝1.34min,m/z 299.9[M+H]⁺；纯度:94％@254nm,85％@214nm.

步骤5.合成8-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(GEN1-265)

冰浴下向1-(哌啶-4-基)-8-(三氟甲基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-1-酮2,2,2-三氟乙酸盐(86mg，0.42mmol)，HOBt(71mg，0.53mmol)和DIEA(136mg，1.05mmol)的DMF(3mL)溶液加入EDCI(101mg，0.527mmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用MgSO 4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至60％)，得到期望的化合物(30.2mg，收率17％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.67-7.65(m,3H),7.52(d,J＝7.2Hz,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),7.36(s,1H),7.28(t,J＝8.0Hz,1H),4.47-4.44(m,1H),4.20-4.12(m,2H),4.06-4.02(m,1H),3.89-3.80(m,2H),3.51-3.41(m,1H),2.95-2.89(m,1H),2.46-2.42(m,1H),2.33-2.22(m,1H),2.19-2.10(m,1H),1.95-1.89(m,2H).MS(ESI):Rt＝10.440min,m/z486.2[M+H]⁺,纯度:98.30％@254nm,95.91％@214nm.

实施例140：7-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(GEN1-266)

步骤1.4-(三氟甲基)-2-((1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苄腈(GEN1-266-1)

将2-氟-4-(三氟甲基)苄腈(150mg，0.79mmol)、1-(4-氨基哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮、K₂CO₃(219mg，1.58mmol)和KI(132mg，0.79mmol)混悬在DMF(3.0mL)中，110℃搅拌5小时。将反应混合物冷却，倒入20ml水中，并用EA(25mL X 3)萃取。有机层用盐水(70mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到浅黄色油。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用(EA/(EA+PE)＝30％)洗脱，得到所需化合物(325mg，88％产率)，为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.73min,m/z 456.2[M+H]⁺,纯度:93％@254nm,92％@214nm.

步骤2.1-(4-((2-(氨基甲基)-5-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(GEN1-266-2)

在零摄氏度下，向4-(三氟甲基)-2-((1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苄腈(325mg，0.71mmol)和Ni(AcO)₂ 4H₂O(355mg，1.42mmol)的MeOH(24mL)和THF(12mL)混合溶液中分批加入NaBH4(108mg,2.85mmol)。将所得混合物在N2气氛下于0℃搅拌0.5小时。将反应混合物倒入NH₄Cl水溶液(50mL)中，并用EA(55mL X 3)萃取。有机层用水(150mL)，盐水(150mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黄色固体(386mg)无需进一步纯化即可直接用于下一步。TLC:EA/(PE+EA)＝50％,Rf＝0.3

步骤3.7-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(GEN1-266)

在零摄氏度下，向1-(4-((2-(氨基甲基)-5-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(386mg粗品)和NaHCO₃(420mg，5.0mmol)的DCM(50mL)溶液中分批加入三光气(147mg，0.50mmol)。将所得混合物在N₂气氛下于室温搅拌5小时。将反应混合物倒入水(100mL)中，并用DCM(100mL X 3)萃取。用水(300mL)，盐水(300mL)洗涤有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到浅黄色固体。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，15％至70％梯度，50分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(20mg，收率6％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:7.67(d,J＝8.0Hz,2H),7.47(d,J＝7.9Hz,2H),7.40(d,J＝7.8Hz,1H),7.33(d,J＝7.8Hz,1H),7.30–7.21(m,2H),4.50(d,J＝12.9Hz,1H),4.19(s,2H),4.17–3.99(m,1H),3.95–3.81(m,2H),3.20(t,J＝12.9Hz,1H),2.73(t,J＝12.7Hz,1H),2.41(t,J＝12.3Hz,2H),1.74(d,J＝12.4Hz,2H).MS(ESI):Rt＝1.61min,m/z 486.1[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例141：1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)氮杂环丁烷-3-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-的合成(GEN1-267)

步骤1.3-((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的合成

向2-氟-1-硝基-3-(三氟甲基)苯(300mg，1.43mmol)和DIEA(371mg，2.87mmol)的DMSO(4mL)溶液中加入3-氨基氮杂环丁烷-1-叔丁酯(494mg，2.87mmol)。在75℃下搅拌4小时后，将混合物倒入水(20mL)中，并用EtOAc(15mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到期望的化合物(500mg，产率96％)，为黄色油。MS(ESI):Rt＝1.73min,m/z 306.1[M-56+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.3-((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的合成

向3-(((2-硝基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.38mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中添加Pd/C(10％，147毫克)。将混合物在H 2气氛(气球)下于室温搅拌1.5小时。然后过滤混合物，浓缩滤液，得到(450mg，收率98％)，为粉红色固体。MS(ESI):Rt＝1.68min,m/z 276.1[M-56+H]⁺；纯度:100％,@254nm,100％,@214nm.

步骤3.3-(2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯的合成

向3-((2-氨基-6-(三氟甲基)苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(450mg，1.36mmol)和三光气(524mg，1.77mmol)的DCM(5mL)溶液中在室温下向其中加入NaHCO₃(456mg，5.43mmol)。将混合物在室温搅拌4小时。然后将混合物倒入水(15mL)中，并用EtOAc(10mL×2)萃取。合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，得到期望的化合物(490mg，产率77％)，为白色固体。.MS(ESI):Rt＝1.61min,m/z 302.1[M-56+H]⁺；纯度:44％,@254nm,76％,@214nm.

步骤4.合成1-(氮杂环丁烷-3-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐

向3-(2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.425mmol)的DCM(5mL)溶液加入TFA(0.5mL)。将混合物在室温搅拌过夜。将混合物真空浓缩，得到所需化合物(150mg，收率89％)，为棕色油。MS(ESI):Rt＝1.16min,m/z 258.1[M+H]⁺；纯度:24％,@254nm,94％,@214nm.

步骤5.1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)氮杂环丁烷-3-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-的合成(GEN1-267)

向2-(喹啉-6-基)乙酸(85mg，0.454mmol)和HOBT(77mg，0.570mmol)的DMF(5mL)溶液中加入EDCI(109mg，0.569mmol)。在室温下搅拌混合物5分钟后，加入1-(氮杂环丁烷-3-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐(150mg，0.380mmol)和DIEA(147mg，1.14mmol)。将混合物在室温搅拌4小时。用水(20mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(15mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过制备纯化。HPLC[RP-PREP-9 Xbridge C18，5um，19*150mm，15～40％B，A：水(0.1％TFA)，B：CAN；流速：16mL/min，UV＝2×14nm]，得到期望的化合物(29.8mg，产率18％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.63(s,1H),8.87(dd,J＝4.0,1.6Hz,1H),8.83(d,J＝9.2Hz,1H),7.97(d,J＝8.8Hz,1H),7.86(d,J＝1.6Hz,1H),7.69(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.52(dd,J＝8.4,4.0Hz,1H),7.36(d,J＝8.0Hz,1H),7.31(d,J＝7.2Hz,1H),7.19(t,J＝8.0Hz,1H),5.19-5.11(m,1H),5.02-4.99(m,1H),4.65(dd,J＝9.6,6.0Hz,1H),4.59(t,J＝8.8Hz,1H),4.20(t,J＝8.8Hz,1H),3.71(s,2H).MS(ESI):Rt＝3.048min,m/z 427.1[M+H]⁺；纯度:97.29％@254nm,97.56％@214nm.

实施例142：7-(三氟甲基)-1-(1-(2-((1R，4R)-4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮和7-(三氟甲基)-1-(1-(2-(((1s，4s)-4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-268和GEN1-269)

步骤1.合成7-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

向1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮,2,2,2-三氟乙酸盐(250mg，0.626mmol，合成方法参见GEN1-013-4)，2-(4-(三氟甲基)环己基)乙酸(145mg，0.690mmol，合成步骤参见GEN1-107-3)，HOBt(127mg，0.940mmol)和DIEA(243mg，1.88mmol)的DMF(5mL)溶液加入EDCI(180mg，0.940mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用MgSO 4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至65％)，得到期望的化合物(150mg，收率50％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.67min,m/z 477.9[M+H]⁺,纯度:100％@214nm.

步骤2.合成7-(三氟甲基)-1-(1-(2-((1R，4R)-4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮和7-(三氟甲基)-1-(1-(2-(((1s，4s)-4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-268和GEN1-269)

7-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)环己基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(150毫克，0.314mmol)通过手性HPLC(OD-H，UV 214nm，Hex/EtOH：95/5)分离得到所需峰1(GEN1-269，37.3mg，收率25％)和所需峰2(GEN1-268，50.8mg，产率34％)均为白色固体。依据核磁数据与文献(J.Am.Chem.Soc.2017,139,7,2577-2580)类似结构报道值进行比对确定化合物的绝对构型。Peak 1(GEN1-268):¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.44(s,1H),7.37(d,J＝8.4Hz,1H),7.28(d,J＝6.8Hz,1H),7.16(t,J＝8.0Hz,1H),4.61-4.59(m,1H),4.30-4.22(m,1H),4.07-4.04(m,1H),3.04-2.98(m,1H),2.62-2.52(m,1H),2.47-2.37(m,2H),2.27-2.25(m,2H),2.23-2.13(m,1H),1.87-1.82(m,4H),1.74-1.67(m,3H),1.31-1.21(m,2H),1.10-0.96(m,2H).MS(ESI):Rt＝4.353min,m/z 478.2[M+H]⁺；纯度:97.40％@254nm,99.61％@214nm.Chiral analysis(Method:Column:Chiralpak OD-H,5um 4.6*250mm；Mobile Phase:hexane:ethanol＝95:5 at 1mL/min；Temp:30℃；Wavelength:214nm),Rt＝13.799min,100％stereopure.

Peak 2(GEN1-269):¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.45(s,1H),7.37(d,J＝8.4Hz,1H),7.28(d,J＝6.8Hz,1H),7.16(t,J＝8.0Hz,1H),4.61-4.59(m,1H),4.30-4.20(m,1H),4.13-4.09(m,1H),3.04-2.98(m,1H),2.62-2.52(m,1H),2.47-2.42(m,2H),2.39-2.38(m,2H),2.34-2.21(m,1H),2.16-2.10(m,1H),1.75-1.48(m,10H).MS(ESI):Rt＝4.336min,m/z478.2[M+H]⁺；纯度:97.23％@254nm,99.47％@214nm.Chiral analysis(Method:Column:Chiralpak OD-H,5um 4.6*250mm；Mobile Phase:hexane:ethanol＝95:5 at 1mL/min；Temp:30℃；Wavelength:214nm),Rt＝16.731min,99.57％stereopure.

实施例143：1-(1-(2-(3-(甲氧基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-270)

步骤1.合成4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-270-1)

在氮气保护下控温0℃向4-((2-氨基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，1.03mmol)和NaHCO₃(866mg，10.3mmol)的DCM(12mL)溶液中分批加入三光气(303mg，1.03mmol)。所得混合物在氮气保护下室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(25mL X 3)萃取。有机层用水(50mL)，盐水(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到所需产物粗品(256mg)为棕色固体。不经纯化直接用于下一步。

步骤2.合成1-(哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-270-2)

向4-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.63mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TFA(2mL)。所得混合物室温搅拌1小时。将得到的混合物浓缩并重新溶解在DCM(20ml)中。然后将混合物再次浓缩，得到所需化合物粗品(200mg)为棕色固体。MS(ESI):Rt＝0.31min,m/z 218.1[M+H]⁺.

步骤3.合成1-(1-(2-(3-(甲氧基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-270)

向1-(哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(100mg，粗品，0.315mmol)，2-(3-甲氧基苯基)乙酸(62.8mg，0.378mmol)，HOBT(63.9mg，0.473mmol)和DIEA(162.7mg，1.26mmol)的DMF(5mL)溶液中加入EDCI(90.7mg，0.473mmol)。所得混合物室温搅拌1h。将反应混合物用水(100mL)稀释，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩得到粗品。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(50mg，两步收率43.4％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.86(s,1H),7.27(t,J＝8.0Hz,1H),7.00–6.91(m,4H),6.91–6.86(m,2H),6.84–6.79(m,1H),4.57(d,J＝13.1Hz,1H),4.48-4.33(m,1H),4.08(d,J＝13.8Hz,1H),3.85–3.67(m,5H),3.14(t,J＝12.4Hz,1H),2.68(t,J＝9.0Hz,1H),2.11-1.82(m,2H),1.73–1.52(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.32min,m/z 366.1[M+H]⁺；纯度:纯度％@254nm,100％@214nm.

实施例144：1-(1-(2-(2-(2-甲氧基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-271)

步骤1.合成1-(1-(2-(2-(2-甲氧基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-271)

向1-(哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(100mg，粗品，0.315mmol，合成步骤见GEN1-270-1)，2-(2-甲氧基苯基)乙酸(62.8mg，0.378mmol)，HOBT(63.9mg，0.473mmol)和DIEA(162.7mg，1.26mmol)的DMF(5mL)溶液中加入EDCI(90.7mg，0.473mmol)。所得混合物室温搅拌1h。将反应混合物用水(100mL)稀释，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液得到粗品。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(50mg，收率43.4％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.85(s,1H),7.28–7.15(m,2H),7.08–7.02(m,1H),7.00–6.89(m,5H),4.55(d,J＝13.1Hz,1H),4.46–4.34(m,1H),4.03(d,J＝13.7Hz,1H),3.80–3.54(m,5H),3.16(t,J＝13.0Hz,1H),2.68(t,J＝12.6Hz,1H),2.15-1.96(m,2H),1.73-1.56(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.39min,m/z366.1[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例145：1-(1-(2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-276)

步骤1.2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)乙酸(GEN1-276-1)

在零摄氏度下，向2-(喹啉-6-基)乙酸(150mg，0.80mmol)和Ni(AcO)₂ 4H₂O(600mg，2.41mmol)的MeOH(4.0mL)和THF(2.0mL)混合溶液中分批加入NaBH₄(183mg，4.81mmol)。将所得混合物在N₂气氛下室温搅拌1小时。将反应混合物倒入NH₄Cl水溶液(20mL)中，并用EA(25mL X 3)萃取。有机层用水(80mL)，盐水(80mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黄色固体(110mg粗产物)不经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)Rt＝0.27min,m/z 192.2[M+H]⁺。

步骤2.1-(1-(2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-276)

在1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(228mg，0.80mmol)，2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)乙酸(110mg粗品)，EDCI(231mg，1.20mmol)和HOBT(162mg，1.20mmol)的DMF(5.0mL)溶液中加入DIEA(414mg，3.21mmol)。将得到的混合物在室温搅拌5小时。将反应混合物倒入水(30mL)中，并用EA(25mL×3)萃取。用水(80mL)，盐水(80mL)洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黄色油。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，10％至75％梯度，55分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(115mg，收率31％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:11.42(s,1H),7.34(d,J＝8.1,1.2Hz,1H),7.29–7.24(m,1H),7.14(t,J＝7.9Hz,1H),6.74–6.66(m,2H),6.35(d,J＝7.9Hz,1H),5.51(s,1H),4.64–4.53(m,1H),4.27–4.16(m,1H),4.15–4.04(m,2H),3.18–3.09(m,2H),2.99–2.87(m,1H),2.72–2.56(m,2H),2.55–2.51(m,1H),2.48–2.40(m,2H),1.83–1.72(m,2H),1.71–1.59(m,2H).MS(ESI)Rt＝1.54min,m/z 459.2[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm。

实施例146：6-苯基-7-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-277)

步骤1.4-((3-氟-6-硝基-2-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

1,3-二氟-4-硝基-2-(三氟甲基)苯(2.0g，8.8mmol)，4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.76g，8.81mmol)和TEA(1.34g，13.2mmol)在DMF(40mL)中在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入水(300mL)中，并用EtOAc(60mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(60mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过硅胶上的柱色谱法纯化(石油醚∶EtOAc＝10∶1至2∶1)，得到期望的化合物(2.49g，收率66％)，为黄色固体。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.27(dd,J＝12.4,7.6Hz,1H),7.05(d,J＝13.6Hz,1H),6.70(t,J＝13.2Hz,1H),4.14-3.93(m,2H),3.49-3.34(m,1H),2.86-2.78(m,2H),1.95-1.91(m,2H),1.45(s,9H),1.42-1.30(m,2H).

步骤2.4-((3-(苄氨基))-6-硝基-2-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

4-((3-氟-6-硝基-2-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.49g，6.11mmol)，苯甲胺(786mg，7.34mmol)和DIEA(1.18g，9.15mmol)在DMF(30mL)中在85℃下搅拌3小时。将反应混合物倒入水(200mL)中，并用EtOAc(50mL×3)萃取。用水(30mL×2)，盐水(30mL)洗涤合并的有机层，用MgSO 4干燥，过滤并浓缩，得到期望的化合物(3.03g，收率95％)，为黄色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ8.13(d,J＝9.6Hz,1H),7.82(d,J＝10.0Hz,1H),7.41-7.30(m,5H),6.23(d,J＝10.0Hz,1H),5.51(s,1H),4.50(d,J＝5.6Hz,2H),4.08-3.91(m,2H),3.41-3.32(m,1H),2.86-2.80(m,2H),1.93-1.90(m,2H),1.45(s,9H),1.42-1.33(m,2H).

步骤3.4-((3,6-二氨基-2-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

向4-(((3-(苄基氨基)-6-硝基-2-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，2.6mmol)在MeOH(15mL)中的溶液中添加Pd/C(137毫克，纯度10％)。在H 2气氛下搅拌过夜后，将反应混合物过滤并将滤液浓缩。粗产物通过硅胶上的柱色谱法纯化(石油醚∶EtOAc＝2∶1至1∶1)，得到所需化合物(971mg，收率88％)，为浅棕色油。MS(ESI):Rt＝1.58min,m/z 319.3[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,87％@214nm.

步骤4.4-(6-氨基-2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

向4-((3,6-二氨基-2-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(971mg，2.26mmol)和NaHCO₃(948mg，11.3mmol)的悬浮液中加入在冰浴下滴加三光气(234mg，0.789mmol)的DCM(5mL)溶液。将所得混合物在15℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用DCM(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用MgSO 4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶上的柱色谱法纯化粗产物(石油醚：EtOAc＝1：1至1：3)，得到期望的化合物(410mg，收率41％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ10.14(s,1H),7.01(d,J＝8.4Hz,1H),6.46(d,J＝8.4Hz,1H),4.36-4.07(m,5H),2.83-2.68(m,4H),1.77-1.65(m,2H),1.49(s,9H).

步骤5.4-(6-碘-2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

亚硝酸异戊酯(241mg，2.06mmol)和CuI(234mg，1.23mmol)在CH₃CN(10mL)的悬浮液在65℃在N 2气氛下搅拌45分钟。加入4-(6-氨基-2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的溶液(410mg，1.02mmol)的CH₃CN(3mL)和DCM(2mL)。将得到的混合物在65℃下搅拌1小时。浓缩反应混合物，并将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(石油醚∶EtOAc＝3∶1至1∶1)，得到期望的化合物(180mg，收率32％)，为棕色固体。MS(ESI):Rt＝1.72min,m/z 456.0[M+H-56]⁺；纯度:92％@254nm,71％@214nm.

步骤6.4-(2-氧代-6-苯基-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成

4-(6-碘-2-氧代-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(110mg，0.215mmol)，苯基硼酸(39mg，0.320mmol)，Pd(dppf)Cl2(36mg，0.044mmol)和Na₂CO₃(69mg，0.65mmol)的二氧六环(4mL)和水(1mL)的混合物在N 2气氛下在75℃下搅拌3小时。将反应混合物倒入水(40mL)中，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用MgSO 4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过硅胶上的柱色谱法纯化(石油醚：EtOAc＝3∶1至1∶1)，得到期望的化合物(78mg，产率61％)，为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.83min,m/z 460.5[M+H-56]⁺；纯度:100％@254nm,78％@214nm.

步骤7.6-苯基-1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐的合成

向4-(2-氧代-6-苯基-7-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(78mg0.13mmol)的DCM(3mL)溶液中加入TFA(0.6mL)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物浓缩，得到呈灰色固体状的所需化合物(62mg，收率84％)。MS(ESI):Rt＝1.43min,m/z 362.3[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,82％@214nm.

步骤8.合成6-苯基-7-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(GEN1-277)

在冰浴下向6-苯基-1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮,2,2,2-三氟乙酸盐(62mg，0.11mmol)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(26mg，0.13mmol)，HOBt(22mg，0.16mmol)和DIEA(41mg，0.32mmol)的DMF(3mL)混合物中加入EDCI(31mg，0.16mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物过滤并将滤液通过C18柱纯化(CH₃CN：水＝5％至60％)，得到期望的化合物(18.3mg，产率31％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.47(s,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.48(d,J＝8.0Hz,2H),7.45-7.36(m,3H),7.34-7.32(m,2H),7.25(d,J＝8.0Hz,1H),7.00(d,J＝8.0Hz,1H),4.61-4.58(m,1H),4.25-4.12(m,2H),3.95-3.86(m,2H),3.07-3.01(m,1H),2.60-2.52(m,3H),1.75-1.73(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.616min,m/z 548.2[M+H]⁺；纯度:98.94％@254nm,98.69％@214nm.

实施例147：1-(1-(2-(4-氯-3-甲氧基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-278)

步骤1.合成(4-氯-3-甲氧基苯基)甲醇(GEN1-278-1)

在0℃下，向4-氯-3-甲氧基苯甲醛(2g，11.72mmol)的EtOH(50ml)溶液中分批加入NaBH₄(532mg，14.06mmol)。然后将所得混合物在室温搅拌3小时。用水(500mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(100mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(150mL)洗涤，再用无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，所得粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(PE：EA＝1∶1)得到所需的化合物(2g，收率98.86％)为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.30min；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤2.合成1-氯-4-(氯甲基)-2-甲氧基苯(GEN1-278-2)

在室温下向(4-氯-3-甲氧基苯基)甲醇(1.8g，10.43mmol)的DCM(50ml)溶液中加入SOCl 2(6.2g，52.15mmol)。然后将所得混合物在40℃下搅拌3小时。TLC没有原料剩余后浓缩反应液，所得粗品通过硅胶柱色谱法纯化(PE:EA＝3:1)得到所需的化合物(950mg，收率47.6％)为黄色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.42(d,J＝8.1Hz,1H),7.24(d,J＝1.9Hz,1H),7.03(dd,J＝8.1,1.9Hz,1H),4.75(s,2H),3.86(s,3H).

步骤3.合成2-(4-氯-3-甲氧基苯基)乙腈(GEN1-278-3)

在室温下向1-氯-4-(氯甲基)-2-甲氧基苯(1g，5.234mmol)，K₂CO₃(832mg，6.02mmol)的ACN(30mL)悬浮液中加入TMS-CN(753mg，7.59mmol)。将所得混合物在60℃下搅拌6h。然后在室温搅拌16h。TLC显示约50％的原料剩余。然后向反应液中补加TMS-CN(374mg，3.77mmol)。再将所得混合物在60℃下再搅拌6小时。将该混合物倒入150mL水中，并用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(60mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(PE：EA从10∶1至4∶1)得到所需化合物(550mg，收率57.86％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.45(d,J＝8.1Hz,1H),7.14(d,J＝2.0Hz,1H),6.95(dd,J＝8.1,2.0Hz,1H),4.04(s,2H),3.86(s,3H).

步骤4.合成2-(4-氯-3-甲氧基苯基)乙酸(GEN1-278-4)

向2-(4-氯-3-甲氧基苯基)乙腈(250mg，1.377mmol)的THF(3.5mL)和H₂O(3.5ml)的混合溶液中加入NaOH(82.6mg，2.065mmol)。所得混合物在80℃下搅拌16小时。然后将混合物冷却至室温。将混合物倒入水(150mL)中，并用EtOAc(50mL×3)萃取。用1N HCl将水层的PH调至4，并用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(60mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩，得到所需化合物(200mg，收率72.4％)为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.30min,m/z199.0[M-H]^-,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.合成1-(1-(2-(4-氯-3-甲氧基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-278)

在室温下向1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(71.25mg，0.25mmol，合成步骤见GEN1-116-4)，2-(4-氯-3-甲氧基苯基)乙酸(50.16mg，0.25mmol)，HOBT(50.67mg，0.375mmol)，EDCI(71.89mg，0.375mmol)的DMF(1mL)溶液中加入DIPEA(96.93mg，0.75mmol)。将所得混合物在室温搅拌1小时。用水(30mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液得到粗品。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(45mg，产率38.47％)为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.49(s,1H),7.41–7.30(m,2H),7.29-7.24(m,1H),7.20-7.11(m,1H),7.02(s,1H),6.83(d,J＝8.1Hz,1H),4.59(d,J＝11.9Hz,1H),4.31-4.18(m,1H),4.13(d,J＝13.8Hz,1H),3.94-3.82(m,3H),3.77(s,2H),3.00(t,J＝13.3Hz,1H),2.65–2.36(m,7H),1.69(t,J＝10.9Hz,2H).MS(ESI):Rt＝1.58min,m/z 468.1[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.100％.

实施例148：N-(2-((1-(2-(吡啶-4-基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基)苯基)乙酰胺(GEN1-213)

步骤1.合成1-(1-(2-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-280)

向1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(100mg，0.34mmol)，2-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯基)乙酸(88mg，0.34mmol)，EDCI(100mg，0.52mmol)，HOBT(72mg，0.52mmol)的DMF(1.0mL)溶液中加入DIEA(90mg，0.70mmol)。得到的混合物在室温搅拌8小时。将反应混合物倒入水(20mL)中，并用EtOAc(25mL×3)萃取。合并有机相用水(70mL)，盐水(70mL)洗涤，再经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黄色油状物。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：10％至75％；50分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(84mg,48％yield)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.49(s,1H),7.62(d,J＝8.3Hz,1H),7.49–7.45(m,1H),7.36(d,J＝8.2Hz,1H),7.34–7.30(m,1H),7.28(d,J＝7.8Hz,1H),7.16(t,J＝7.9Hz,1H),4.66–4.50(m,1H),4.32–4.09(m,2H),3.88(s,2H),3.03(t,J＝13.2Hz,1H),2.64–2.52(m,2H),2.48–2.37(m,1H),1.78–1.63(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.72min,m/z 522.0[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例149：7-氯-1-(1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-281)

步骤1.合成1-(4-((2-氯-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(GEN1-281-1)

向1-氯-2-氟-3-硝基苯(106mg，0.6mmol)，K₂CO₃(165.9mg，1.2mmol)和KI(10mg，0.06mmol)的DMF(5mL)悬浮液中加入1-(4-氨基哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(171.8mg，0.6mmol，合成操作见GEN1-219-4)。所得混合物在80℃下搅拌4小时。将反应混合物用水(80mL)稀释，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液得到粗品。粗品经硅胶柱层析(PE：EA＝3∶1)纯化得到所需的化合物(210mg，收率79.2％)为黄色油。MS(ESI):Rt＝1.72min,m/z 442.3[M+H]⁺；纯度:79.95％@254nm,75.68％@214nm.

步骤2.合成1-(4-((2-氨基-6-氯苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(GEN1-281-2)

向1-(4-((2-氯-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(210mg，0.475mmol)，NH₄Cl(508mg，9.5mmol)的i-PrOH(20mL)溶液中加入Fe(266mg，4.75mmol)。所得混合物室温搅拌3h。将混合物过滤并将滤液浓缩并将残余物通过硅胶上的柱层析(PE：EA＝1：1至100％EA)纯化得到所需的化合物(150mg，收率76.7％)为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.64min,m/z 412.1[M+H]⁺；纯度:73.71％@254nm,68.73％@214nm.

步骤3.合成7-氯-1-(1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-281)

在室温下向1-(4-((2-氨基-6-氯苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(150mg，0.364mmol)，NaHCO₃(153mg,1.82mmol)的DCM(10mL)悬浮液中加入三光气(43.2mg，0.146mmol)。所得混合物室温下搅拌1小时。将混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗品。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％-50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(90mg，收率56.5％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.7-10.6(m,1H),7.67(d,J＝8.1Hz,2H),7.48(d,J＝7.9Hz,2H),7.04–6.90(m,3H),5.10(s,1H),4.63–4.48(m,1H),4.20-4.07(m,1H),4.00-3.78(m,2H),3.11(t,J＝13.3Hz,1H),2.64(t,J＝12.9Hz,1H),2.49-2.26(m,2H),1.89-1.65(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.61min,m/z235.1[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例150：7-甲基-1-(1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-282)

步骤1.合成4-((((苄氧基)羰基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-219-1)

在氮气保护下控温0℃向4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.0g，15.0mmol)和Na₂CO₃(3.18g，30.0mmol)的THF(90mL)悬浮溶液中加入CbzCl(3.2g,18.7mmol)。所得混合物在氮气保护下室温搅拌16小时。将反应混合物倒入冰水(150mL)中，并用EtOAc(200mL X 3)萃取。合并有机层用盐水(500mL)洗涤，再经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到粗品(6.71g)为浅黄色油状物。不经纯化直接用于下一步。TLC:EA/(PE+EA)＝20％,Rf＝0.5.

步骤2.合成苄基哌啶-4-基氨基甲酸酯三氟乙酸盐(GEN1-219-2)

在氮气保护下控温0℃向4-((((苄氧基)羰基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.71g粗品)的DCM(100mL)溶液中滴加TFA(11mL)。所得混合物在氮气保护下室温搅拌4小时。所得的混合物浓缩得到粗品(8.5g)。粗品不经纯化直接用于下一步。MS(ESI):Rt＝0.31min,m/z235.1[M+H]+.

步骤3.合成苄基(1-(2-(4-(三(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸酯(GEN1-219-3)

向苄基哌啶-4-基氨基甲酸酯苄酯三氟乙酸盐(7.7g粗品)，2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(2.75g，13.48mmol)，EDCI(3.9mg，20.31mmol)和HOBT(2.74g，20.30mmol)的DMF(50mL)溶液中加入DIEA(10.45g，81mmol)。所得的混合物在室温搅拌8小时。将反应混合物倒入水(250mL)中，并用EtOAc(250mL×3)萃取。有机相用水(600mL)，盐水(600mL)洗涤，再经Na₂SO₄干燥并浓缩得到黄色油状物。粗品经硅胶柱层析(PE:EtOAc＝3:7)纯化得到所需化合物(4.16g，收率66％)为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.50min,m/z 421.2[M+H]+,纯度:100％@254nm,75％@214nm.

步骤4.合成1-(4-氨基哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(GEN1-219-4)

在氮气保护下向苄基(1-(2-(4-(三(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸酯(2.0g，4.76mmol)的MeOH(140mL)溶液中加入Pd/C(400mg)。所得混合物用H ₂置换，并在H ₂氛围下室温搅拌过夜。过滤反应混合物，滤饼用MeOH(100mL×3)洗涤。将滤液浓缩干，所得粗品用硅胶柱层析(MeOH：DCM＝2:23)纯化得到所需化合物(1.04g，收率76％)为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.14min,m/z287.1[M+H]+,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

步骤5.合成1-(4-((2-甲基-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(GEN1-282-1)

向2-氟-1-甲基-3-硝基苯(93mg，0.6mmol)，K₂CO₃(165.9mg，1.2mmol)和KI(10mg，0.06mmol)在DMF(5mL)的悬浮液中的加入1-(4-氨基哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(171.8mg，0.6mmol，合成步骤参见GEN1-219-4)。所得混合物在80℃下搅拌4小时。将反应混合物用水(80mL)稀释，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。将滤液浓缩并通过硅胶柱层析(PE：EA＝3∶1)纯化得到所需的化合物(170mg，收率67.2％)为黄色油状物。MS(ESI):Rt＝1.71min,m/z 422.3[M+H]⁺；纯度:71.06％@254nm,72.49％@214nm.

步骤6.合成1-(4-((2-氨基-6-甲基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(GEN1-282-2)

向1-(4-((2-甲基-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(170mg，0.40mmol)的EtOH(20mL)溶液中加入Pd/C(20mg，5％纯度)。所得混合物置换氢气并在氢气氛围下搅拌过夜。将混合物过滤，滤液浓缩。残余物经硅胶柱层析(PE：EA＝1：1至100％EA)纯化得到所需化合物(120mg，收率76.6％)为浅黄色固体。MS(ESI):Rt＝1.59min,m/z 392.2[M+H]⁺；纯度:86％@254nm,85.57％@214nm.

步骤7.合成7-甲基-1-(1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-282)

在室温下向1-(4-((2-氨基-6-甲基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(120mg，0.306mmol)，NaHCO₃(129mg,1.53mmol)在DCM(10mL)悬浮液中加入三光气(36.3mg，0.123mmol)。所得混合物室温搅拌1小时。将混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(20mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩。残余物粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(90mg，收率70.5％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),7.68(d,J＝8.1Hz,2H),7.48(d,J＝8.0Hz,2H),6.92–6.71(m,3H),4.61-4.47(m,2H),4.16-4.04(m,1H),3.99-3.81(m,2H),3.19–3.08(m,1H),2.72-2.60(m,1H),2.55(s,3H),2.49-2.28(m,2H),1.84-1.72(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.56min,m/z 418.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例151：7-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(4-(三氟甲基)哌啶-1-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-285)

步骤1.合成1-(1-(2-氯乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-285-1)

在室温下向1-(哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(285mg，1mmol，合成步骤见GEN1-116-4)的THF(20mL)溶液中加入2-氯乙酰氯(135.53mg，1.2mmol)。然后将所得混合物在室温搅拌16小时。将混合物倒入水(80mL)中，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩，得到(350mg)粗产物。粗产物直接用于下一步。MS(ESI):RT＝1.45min,m/z362.0[M+H]+,纯度:73.11％@254nm,56.70％@214nm.

步骤2.合成7-(三氟甲基)-1-(1-(2-(4-(4-(三氟甲基)哌啶-1-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-285)

在室温下向1-(1-(2-氯乙酰基)哌啶-4-基)-7-(三氟甲基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(115mg，0.318mmol)，K₂CO₃(87.9mg，0.636mmol)，KI(5.3mg，0.032mmol)的DMF(1mL)悬浮液中加入4-(三氟甲基)哌啶(58.44mg，0.382mmol)。然后将所得混合物在90℃搅拌3小时。用水(30mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液得到粗品，粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(48mg，两步收率31.55％)为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.48(s,1H),7.39(d,J＝8.0Hz,1H),7.30(d,J＝7.7Hz,1H),7.18(t,J＝7.9Hz,1H),4.56(d,J＝11.9Hz,1H),4.42–4.14(m,2H),3.40(s,1H),3.08–2.89(m,4H),2.80-2.65(m,1H),2.62-2.40(m,2H),2.34–2.20(m,1H),2.05(q,J＝11.4Hz,2H),1.87–1.66(m,4H),1.66–1.37(m,2H).MS(ESI):Rt＝4.16min,m/z 479.2[M+H]⁺；纯度:90.38％@254nm,98.87％@214nm.

实施例152：1-(1-(2-(3-(乙氧基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-287)

步骤1.2-(3-乙氧基苯基)乙酸乙酯(GEN1-287-1)

在零摄氏度下向2-(3-羟苯基)乙酸(500mg，3.29mmol)、EtOH(378mg，6.75mmol)、PPh₃(2.58g，9.85mmol)的THF(10mL)溶液中滴加DIAD(1.99g,9.85mmol)。将所得混合物在N₂气氛下于室温搅拌2小时。将反应混合物倒入水(30mL)中，并用EA(20mL X 3)萃取。用水(50mL)，盐水(50mL)洗涤有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到浅黄色固体。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用(EA/(PE+EA)＝20％)洗脱，得到所需化合物(480mg，收率70％)为浅黄色油。MS(ESI)Rt＝1.61min,m/z 209.2[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,38％@214nm

步骤2.2-(3-乙氧基苯基)乙酸钾(GEN1-287-2)

向2-(3-乙氧基苯基)乙酸乙酯(150mg，0.72mmol)的MeOH(3.0mL)溶液中加入KOH(40mg，0.72mmol)和水(0.3mL)。将所得混合物在室温在N₂气氛下搅拌4小时。将得到的混合物在真空下浓缩。得到所需化合物(104mg粗产物)无需进一步纯化即可直接用于下一步。TLC:MeOH/(MeOH+DCM)＝10％,Rf＝0.2

步骤3.1-(1-(2-(3-(乙氧基苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-287)

向1-(哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(104mg粗品)、2-(3-乙氧基苯基)乙酸钾(230mg粗品)、EDCI(166mg，0.86mmol)、HOBT(117mg，0.87mmol)的DMF(3.0mL)溶液中加入DIEA(298mg，2.31mmol)。将得到的混合物在室温搅拌3小时。将反应混合物倒入水(15mL)中，并用EA(20mLX3)萃取。用水(50mL)，盐水(50mL)洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黄色油。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，10％至75％梯度，50分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(70mg，收率28％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:10.83(s,1H),7.28–7.21(m,1H),7.01–6.91(m,4H),6.90–6.85(m,2H),6.82–6.76(m,1H),4.57(d,J＝13.1Hz,1H),4.47–4.30(m,1H),4.14–4.05(m,1H),4.05–3.96(m,2H),3.83–3.65(m,2H),3.14(t,J＝13.0Hz,1H),2.67(t,J＝12.7Hz,1H),2.10–1.82(m,2H),1.71–1.52(m,2H),1.38–1.29(m,3H).MS(ESI)Rt＝1.41min,m/z380.3[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例153：7-氟-1-(1-(2-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-289)

步骤1.合成4-((2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(GEN1-122-1)

在室温下向1,2-二氟-3-硝基苯(47.73mg，0.3mmol)，K₂CO₃(83mg，0.6mmol)和KI(5mg，0.03mmol)的DMF(2ml)悬浮液中加入1-(4-氨基哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(85.89mg，0.3mmol，合成方法参见GEN1-219-4)。然后将所得混合物在80℃搅拌3小时。通过加入盐水(30mL)淬灭反应混合物。用EtOAc(15mL×3)萃取水相。合并的有机相用盐水(20mL×2)洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥，浓缩得到所需化合物粗品(100mg)。粗产物不经纯化直接用于下一步。MS(ESI):Rt＝1.69min,m/z 426.1[M+H]⁺；纯度:63.13％@254nm,89.05％@214nm.

步骤2.合成1-(4-((2-氨基-6-氟苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(GEN1-289-2)

向1-(4-((2-氟-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮的混合物(100mg，0.235mmol)的EtOH(20ml)溶液中加入Pd/C(5％，10mg)。然后将混合物用氢气置换并在氢气氛围下室温搅拌16小时。然后将反应混合物过滤，将滤液浓缩，得到粗产物。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(PE：EA＝1：1)得到所需产物(80mg，收率86.1％)。MS(ESI):Rt＝1.57min,m/z 396.2[M+H]⁺；纯度:90.02％@254nm.

步骤3.合成7-氟-1-(1-(2-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-289)

在氮气保护下控温0℃向1-(4-(((2-氨基-6-氟苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(80mg，0.202mmol)，NaHCO₃(170mg，2.02mmol)的DCM(2ml)悬浮液中加入三光气(24mg，0.081mmol)。然后将所得混合物在室温搅拌16小时。然后将反应混合物过滤，将滤液浓缩，得到粗产物。粗产物粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(50mg，产率58.74％)为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.12(s,1H),7.72(d,J＝7.9Hz,2H),7.52(d,J＝7.9Hz,2H),7.09–6.97(m,1H),6.93–6.81(m,2H),4.64-4.54(m,2H),4.15(d,J＝13.9Hz,1H),4.00–3.85(m,2H),3.22(t,J＝13.1Hz,1H),2.73(t,J＝12.8Hz,1H),2.02–1.91(m,2H),1.1.82-1.69(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.49min,m/z 422.3[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例154：7-溴-1-(1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-290)

步骤1.合成1-(4-((2-溴-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(GEN1-290-1)

在室温下向1-溴-2-氟-3-硝基苯(66mg，0.3mmol)，K₂CO₃(83mg，0.6mmol)和KI(5mg，0.03mmol)的DMF(2ml)悬浮液中加入1-(4-氨基哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(85.89mg，0.3mmol，合成步骤参见GEN1-219-4)。然后将所得混合物在80℃搅拌3小时。通过加入盐水(30mL)淬灭反应混合物。用EtOAc(15mL×3)萃取水相。合并的有机相用盐水(20ml×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩，得到所需化合物粗品(140mg)。粗产物直接用于下一步。MS(ESI):Rt＝1.72min,m/z 488.0[M+H]⁺；纯度:93.41％@254nm,94.95％@214nm.

步骤2.合成1-(4-((2-氨基-6-溴苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(GEN1-290-2)

向1-(4-((2-溴-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(140mg，0.288mmol)，NH₄Cl(321mg，0.6mmol)的i-PrOH(5ml)和H₂O(1ml)混合液中加入Fe(168mg，3mmol)。将所得混合物在室温搅拌16小时。然后将反应混合物过滤，将滤液浓缩，得到粗产物。粗产物通过硅胶柱色谱纯化(PE：EA＝1：1)得到所需化合物物(70mg，两步收率53.3％)。MS(ESI):Rt＝1.65min,m/z 457.0[M+H]⁺；纯度:77.07％@254nm,66.17％@214nm.

步骤3.合成7-溴-1-(1-(1-(2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-290)

在氮气保护下控温0℃向1-(4-((2-氨基-6-溴苯基)氨基)哌啶-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(70mg，0.145mmol)，NaHCO₃(121.8mg，1.45mmol)的DCM(2ml)悬浮液中加入三光气(17.2mg，0.058mmol)。然后将所得混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物过滤，滤液浓缩，得到粗产物。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(30mg，产率42.89％)为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.08(s,1H),7.70(d,J＝7.9Hz,2H),7.51(d,J＝7.8Hz,2H),7.20(d,J＝8.0Hz,1H),7.05–6.86(m,2H),5.30(s,1H),4.60(d,J＝13.0Hz,1H),4.18(d,J＝13.7Hz,1H),4.04–3.80(m,2H),3.12(t,J＝13.4Hz,1H),2.65(t,J＝13.0Hz,1H),2.52-2.38(m,2H),1.86-1.76(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.68min,m/z 484.2[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例155：7-氯-1-(1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-291)

步骤1.合成4-((2-氯-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-291-1)

在室温下向1-氯-2-氟-3-硝基苯(526.62mg，3mmol)K₂CO₃(828mg，6mmol)和KI(50mg，0.3mmol)的DMF(20ml)悬浮液中加入4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(661mg，3.3mmol)。然后将所得混合物在80℃搅拌3小时。通过加入盐水(100mL)淬灭反应混合物。用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(30mL×2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，浓缩，得到所需化合物粗品(900mg)。粗产物直接用于下一步。MS(ESI):Rt＝1.81min,m/z 378.0[M+Na]⁺；纯度:97.23％@254nm,96.42％@214nm.

步骤2.合成4-((2-氨基-6-氯苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-291-2)

向4-((2-氯-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(900mg，2.53mmol)，NH₄Cl(2.706g，50.6mmol)的i-PrOH(25ml)和水(5ml)的混合溶液中加入Fe(1.417g，25.3mmol)。将所得混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物过滤，滤液浓缩，得到粗产物。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(PE：EA＝1：1)得到所需产物(525mg，两步产率63.68％)。

步骤3.合成4-(7-氯-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-291-3)

在氮气保护下控温0℃向4-((2-氨基-6-氯苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.767mmol)，NaHCO₃(644.3mg，7.67mmol)的DCM(20ml)悬浮液中加入三光气(91mg，0.307mmol)。然后将所得混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物过滤，滤液浓缩，得到粗产物。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(PE：EA＝2∶1)得到所需的化合物(250mg，收率92.64％)为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.62min,m/z 350.0[M-H]^-；纯度:64.8％@254nm,54.01％@214nm.

步骤4.合成7-氯-1-(哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-291-4)

在0℃下向4-(7-氯-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.71mmol)的DCM(20ml)的溶液中加入TFA(4ml)。然后将所得混合物在室温搅拌1h。将反应混合物浓缩，得到(300mg)粗产物。粗产物直接用于下一步。

步骤5.合成7-氯-1-(1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-291)

在室温下向7-氯-1-(哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(100mg，粗品，0.237mmol)，2-(喹啉-6-基)乙酸(53.16mg，0.284mmol)，HOBT(48mg，0.355mmol)，EDCI(68mg，0.355mmol)的DMF(2mL)溶液中加入DIPEA(122.4mg，0.948mmol)。然后将所得混合物在室温搅拌1h。用水(30mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液得到粗品。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(50mg，收率50.12％)为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.23(s,1H),8.92-8.87(m,1H),8.36(d,J＝8.3Hz,1H),7.99(d,J＝8.7Hz,1H),7.85(s,1H),7.75–7.63(m,1H),7.59-7.49(m,1H),7.09–6.89(m,3H),5.13(s,1H),4.63(d,J＝13.2Hz,1H),4.22(d,J＝13.8Hz,1H),4.10-3.95(m,2H),3.17(t,J＝13.3Hz,1H),2.69(t,J＝13.1Hz,1H),2.50-2.34(m,2H),1.90-1.75(m,2H).MS(ESI):Rt＝1.37min,m/z 421.3[M+H]⁺；纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例156：7-甲基-1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-292)

步骤1.合成4-((2-甲基-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-292-1)

在室温下向2-氟-1-甲基-3-硝基苯(465mg，3mmol)，K₂CO₃(828mg，6mmol)和KI(50mg，0.3mmol)的DMF(20ml)悬浮液中加入4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(661mg，3.3mmol)。然后将所得混合物在80℃搅拌3小时。通过加入盐水(100mL)淬灭反应混合物。用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(30mL×2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，浓缩，得到所需化合物(800mg，粗品)。粗产物直接用于下一步。

步骤2.合成4-((2-氨基-6-甲基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-292-2)

向4-((2-甲基-6-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，粗品，2.388mmol)的EtOH(50ml)溶液中加入Pd/C(40mg，5％纯度)。然后将所得混合物用氢气置换并在氢气氛围下室温搅拌16小时。将反应混合物过滤，滤液浓缩，得到粗产物。粗产物通过硅胶柱色谱纯化(PE：EA＝1：1)得到所需化合物(500mg，两步产率68.55％)。

步骤3.合成4-(7-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-292-3)

在氮气保护下控温0℃向4-((2-氨基-6-甲基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.818mmol)，NaHCO₃(687.6mg，8.18mmol)的DCM(10ml)悬浮液中加入光气(97.1mg，0.327mmol)。然后将所得混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物过滤，滤液浓缩，得到粗产物。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(PE：EA＝2∶1)得到所需的化合物(250mg，收率92.2％)为白色固体。MS(ESI):Rt＝1.54min,m/z 330.1[M-H]^-；纯度:97.23％@254nm,96.42％@214nm.

步骤4.合成7-甲基-1-(哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-292-4)

在0℃下向4-(7-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.754mmol)的DCM(20ml)溶液中加入TFA(4ml)。然后将所得混合物在室温搅拌1h。将反应混合物浓缩，得到(300mg)粗产物。粗产物直接用于下一步。

步骤5.合成7-甲基-1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-292)

在室温下向7-甲基-1-(哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(100mg，粗制，0.25mmol)，2-(喹啉-6-基)乙酸(56.46mg，0.30mmol)，HOBT(50.6mg，0.375mmol)，EDCI(71.9mg，0.375mmol)的DMF(2mL)溶液中加入DIPEA(129.2mg，1.0mmol)。然后将所得混合物在室温搅拌1h。用水(30mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液得到粗品。粗品通过反相色谱柱纯化。纯化条件：C18硅胶柱；流动相ACN：H₂O，梯度：5％至50％；45分钟，监测波长：214nm。得到所需化合物(40mg，产率40％)为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.81(s,1H),8.92-8.87(m,1H),8.36(d,J＝8.4Hz,1H),8.00(d,J＝8.7Hz,1H),7.85(s,1H),7.675-7.65(m,1H),7.62–7.48(m,1H),6.98–6.67(m,3H),4.66-4.52(m,2H),4.25-4.14(m,1H),4.11–3.90(m,2H),3.17(t,J＝13.1Hz,1H),2.70(t,J＝12.9Hz,1H),2.57(s,3H),2.2.50-2.30(m,2H),1.87-1.76(m,2H).MS(ESI):Rt＝3.317min,m/z 401.2[M+H]⁺；纯度:93.5％@254nm,96.83％@214nm.

实施例157：6-氯-1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-293)

步骤1.4-((5-氯-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-293-1)

将4-氯-2-氟-1-硝基苯(500mg，2.86mmol)、4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(571mg，2.86mmol)、K₂CO₃(491mg，4.28mmol)、KI(47mg，0.28mmol)混悬在DMF(5.0mL)中，80℃下搅拌3小时。冷却至室温后，过滤得到的混合物，滤饼用EA洗涤。将滤液在减压下浓缩。得到所需化合物(1.27g粗产物)无需进一步纯化即可直接用于下一步。MS(ESI)Rt＝1.83min,m/z354.0[M-H]^-,纯度:97％@254nm,98％@214nm.

步骤2.4-((2-氨基-5-氯苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-293-2)

在零摄氏度下，向4-((5-氯-2-硝基苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.22g，3.44mmol)和Ni(AcO)₂ 4H₂O(1.71g，6.87mmol)的MeOH(24mL)和THF(12mL)的混合溶液中分批加入NaBH₄(522mg，13.7mmol)。将所得混合物在N₂气氛下于0℃搅拌0.5小时。将反应混合物倒入NH₄Cl水溶液(50mL)中，并用EA(65mL X 3)萃取。有机层用水(150mL)，盐水(150mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到所需化合物(990mg粗产物)无需进一步纯化即可直接用于下一步。MS(ESI)Rt＝1.65min,m/z 324.0[M-H]^-,纯度:100％@254nm,97％@214nm.

步骤3.4-(6-氯-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(GEN1-293-3)

在零摄氏度下，向4-(((2-氨基-5-氯苯基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(990mg粗品)和NaHCO₃(2.56g，30.5mmol)的DCM(100mL)溶液中分批加入三光气(895mg,3.04mmol)。将所得混合物在室温N₂气氛下搅拌过夜。将反应混合物倒入水(150mL)中，并用DCM(100mL X 3)萃取。用水(300mL)，盐水(300mL)洗涤有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到浅黄色固体。得到所需的化合物(1.1g粗产物)不经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)Rt＝1.57min,m/z350.0[M-H]^-,纯度:76％@254nm,98％@214nm.

步骤4.6-氯-1-(哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮三氟乙酸盐(GEN1-293-4)

在零摄氏度下，向4-(6-氯-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg粗品)的DCM(30mL)溶液中逐滴加入TFA(3.0mL)。将所得混合物在N₂气氛下于室温搅拌2小时。将得到的混合物在真空下浓缩。得到所需的化合物(388mg粗产物)不经进一步纯化直接用于下一步。TLC:MeOH/(DCM+MeOH)＝5％,Rf＝0.5

步骤5.6-氯-1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-293)

向2,2,2-三氟乙醛化合物与6-氯-1-(哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(388mg粗品)、2-(喹啉-6-基)乙酸(144mg，0.77mmol)、EDCI(1221mg，1.15mmol)、HOBT(156mg，1.15mmol)的DMF(4.0mL)溶液中滴加DIEA(441mg，3.42mmol)。将得到的混合物在室温搅拌4小时。反应混合物倒入水(30mL)中，并用EA(45mL×3)萃取。用水(150mL)，盐水(150mL)洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黄色油。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，15％至75％梯度，50分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(92mg，收率28％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:11.02(s,1H),8.90–8.83(m,1H),8.34(d,J＝8.3Hz,1H),7.99(d,J＝8.6Hz,1H),7.85(s,1H),7.68(d,J＝8.7,1H),7.54–7.48(m,1H),7.28(s,1H),7.02–6.91(m,2H),4.61(d,J＝13.2Hz,1H),4.48–4.35(m,1H),4.16(d,J＝13.6Hz,1H),4.01(s,2H),3.17(t,J＝13.0Hz,1H),2.70(t,J＝12.8Hz,1H),2.24–2.09(m,2H),1.77–1.62(m,2H).MS(ESI)Rt＝1.35min,m/z 421.3[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

实施例158：5-氯-1-(1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-294)

步骤1.5-氯-1-(1-(1-(2-(喹啉-6-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(GEN1-294)

向5-氯-1-(哌啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-醇(150mg，0.60mmol)、2-(喹啉-6-基)乙酸(112mg,0.60mmol)、EDCI(138mg，0.72mmol)、HOBT(97mg，0.72mmol)的DMF(1.5mL)溶液中滴加DIEA(154mg，1.19mmol)。将得到的混合物在室温搅拌3小时。将反应混合物倒入水(10mL)中，并用EA(15mLX3)萃取。用水(40mL)，盐水(40mL)洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到黄色油。将粗品通过反相快速色谱法纯化(C₁₈反向硅胶柱；流动相CH₃CN，水，15％至75％梯度，50分钟；检测，UV 214nm)得到所需的化合物(123mg，收率49％)为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ11.03(s,1H),8.90–8.83(m,1H),8.36(d,J＝8.2Hz,1H),8.00(d,J＝8.6Hz,1H),7.87(d,J＝2.0Hz,1H),7.70(d,J＝8.7,1H),7.57–7.47(m,1H),7.01–6.93(m,2H),6.92–6.83(m,1H),4.60(d,J＝13.1Hz,1H),4.49–4.34(m,1H),4.16(d,J＝13.8Hz,1H),4.10–3.91(m,2H),3.18(t,J＝13.0Hz,1H),2.71(t,J＝12.8Hz,1H),2.13–1.87(m,2H),1.76–1.55(m,2H).MS(ESI)Rt＝1.35min,m/z 421.3[M+H]⁺,纯度:100％@254nm,100％@214nm.

效果实施例1蛋白电泳和印迹实验

实验材料：

标准蛋白电泳和化学发光成像设备(Bio-Rad)；

蛋白裂解液RIPA(联科生物；Cat#WB020)；蛋白印迹转膜PVDF(Millipore；Cat#IPVH00010)；

蛋白抗体STAT5 Y694磷酸化抗体(Cell Signaling Tech.#9351),抗甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)抗体，化学发光显影试剂(Immobilon Millipore)

实验过程：

Jurkat细胞(ATCC美国标准培养物中心，TIB152)以1x10⁶/毫升的密度培养于6孔板，用不添加10％胎牛血清的RPMI培养基，在37度并保持5％二氧化碳的保湿培养箱过夜。第二天，细胞先用不同浓度化合物(二甲亚砜配制的化合物母液按所需浓度稀释在培养基中)预处理1小时，然后加入20ng/毫升的人干扰素β刺激30分钟，充分混匀后静置在37度培养箱环境中。然后将细胞在2000转/分钟的速度下离心收集，用磷酸缓冲液(标准磷酸缓冲生理盐水氯化钠137毫摩尔，氯化钾2.7毫摩尔，磷酸氢钠10毫摩尔，磷酸二氢钾1.8毫摩尔)重悬洗涤一次，接着离心收集细胞。再加入适量体积的RIPA裂解液，充分混匀，静置于冰上1小时，中间颠倒混合数次。然后将细胞裂解产物在12000转/分钟4度低温条件下离心10分钟，将上清转移到另外的试管分装保存在零下20度，直到使用。

等体积的蛋白裂解液与适当的6倍蛋白上样缓冲液(碧云天生化公司P0015F)混合，以95度加热10分钟，充分变性后，蛋白样品加到聚丙烯酰胺凝胶(自制，原料来自索莱宝生物科技公司A1010,30％丙烯酰胺溶液)上，以适当电压进行电泳1小时，直到条带分离充分。按标准程序转膜到聚偏二氟乙烯膜上，并以5％脱脂牛奶封闭1小时，加指定抗体，1:1000稀释在3％牛血清蛋白中，四度过夜孵育。充分漂洗，再二抗孵育，化学发光曝光并进行信号采集。用ImageJ软件对所得化学发光结果进行量化分析，选定同样面积区域，分析每个样品STAT5磷酸化条带和GAPDH条带的灰度值，计算pSTAT5/GAPDH水平的比值，以溶媒处理样品值为100％，其余样品同比例转换为相对数据，即对应于溶媒样品的百分比。对Y694磷酸化STAT5的抑制率(100％-待测化合物组曝光灰度/溶媒对照组曝光灰度)数据见表1。所述的溶媒对照组除用DMSO替代待测化合物DMSO溶液外，其余均同待测化合物组。N1(匹莫齐特)为特异阳性对照。基于pSTAT5条带观察结果的抑制能力数据见表6。

表1对细胞生化水平抑制活性的量化数据表

效果实施例2在小鼠胶原诱导关节炎模型中评估X8化合物的治疗药效

60只雄性DBA/1J小鼠(9-10周龄，H-2q单元型)在标准动物房中适应饲养一周后随机分为5组。除了健康对照组外，其余都进行胶原抗原注射接种，然后接受不同化合物的口服治疗。简要的步骤是牛二型胶原(采购自Chondrex，20021)与等体积弗氏完全佐剂(采购自Sigma，F5881)充分混合，浓度4毫克/毫升，用匀浆器20000转/分钟速度处理5-10分钟。在小鼠尾背面动脉左侧和侧面静脉血管间入针，皮下注射50微升造模剂，在第一次注射后21天，在小鼠尾背面动脉右侧和侧面静脉血管间再注射一针。在第一次造模注射后，开始口服给药，药物以30％PEG300配制，现配现用。具体分组如表2所示，评分标准如表3所示，总分为0-12分之间，不计算接种后足的肿胀情况。测试结果如表4和5所示。

表2动物分组和治疗方案

组别	名称	数量	药品浓度	给药途径和频率
					G1	健康对照	12	无	无
G2	溶媒治疗组	10	无	每天一次
					G3	托法替尼组	12	5毫克/公斤	每天一次
G4	甲氨蝶呤治疗组	10	0.25毫克/公斤	每周一次
					G5	X8治疗组	12	1毫克/公斤	每天一次

表3关节炎临床评分标准

评分	炎症发病程度
		0	正常
1	一个趾头发炎肿胀
		2	超过一个但不是整个足跖发炎肿胀，或者整个足跖轻度肿胀
3	整个足跖发炎肿胀
		4	严重炎症、肿胀或足跖关节僵直。如关节僵直，小鼠无法抓住笼盖栅格。

表4动物体重变化数据

如表4所示，X8治疗对动物体重影响不明显，未见剧烈变化，而甲氨蝶呤组有两次突然降低情况发生。托法替尼组在实验晚期也有一次体重降低。

表5 X8对胶原诱导的小鼠关节炎模型的治疗效果评估数据(数值越大病情越严重)

如表5所示，X8治疗组表现与托法替尼治疗组效果相当，显著降低疾病严重程度，且剂量只有托法替尼的1/5。

效果实施例3 HTRF实验

实验材料：

多功能酶标仪(TECAN；INFINITE F PLEX)；

96孔细胞培养板(Bioyong)，HTRF 384微孔板(HTRF 384 well low volumeplates)(Cisbio；Cat#66PL384025)；

人干扰素β(IFN-β)(GenScript,；Cat#P01574)，STAT5 Y694磷酸化检测试剂盒(STAT5phospho-Y694 kit)(Cisbio；Cat#64AT5PEG)。

实验过程：

Hela细胞(ATCC美国标准培养物中心，CCL-2)以3x10⁴个/孔的密度培养于96孔板，用含5％胎牛血清的DMEM培养基，于37度并保持5％二氧化碳的保湿培养箱过夜。第二天，吸干96孔板中原有的DMEM培养基，并加入等体积的含不同浓度化合物的培养基(二甲基亚砜配制的化合物母液按所需浓度稀释在培养基中)预处理2小时，静置在37度培养箱中。然后加入终浓度为10nM的人干扰素β刺激，轻轻晃动充分混匀后静置于37度培养箱中30分钟。

除去培养基，加入适量体积的PBS清洗一遍后吸干。然后每孔加入40微升1x裂解液室温静置30分钟(1毫升1x裂解液的配制：740微升ddH₂O加入250微升4x裂解液和10微升Blocking reagent充分混匀)。30分钟后，反复吹打细胞至裂解液不粘稠(避免吹出气泡)以达到充分裂解。

取HTRF 384微孔板，每孔加入4微升抗体预混合液(抗体预混液中含有Cryptate和d2两种抗体：这两种抗体分别用detection buffer稀释20倍后等体积混匀制备成抗体预混液)和16微升细胞裂解液，封口膜封闭后室温避光孵育过夜。

孵育过夜后，于多功能酶标仪分别检测665nm和620nm信号。STAT5 Y694磷酸化检测计算公式为：Ratio＝[(signal 665nm)/(signal 620nm)]x10⁴。以二甲基亚砜单独处理组为基线对照(Ratio_base)，以不加化合物的人干扰素β刺激组为STAT5 Y694充分磷酸化激活对照(Ratio_stimulation)，对不同样品STAT5 Y694磷酸化的抑制率进行归一化处理：抑制率＝[1-(Ratio_Experiment–Ratio_base)/(Ratio_stimulation–Ratio_base)]*100。

表6对细胞生化水平抑制活性的量化数据表

^a化合物抑制能力说明：++，10μM时pSTAT5条带完全消失；+，10μM时pSTAT5条带减弱，100μM时pSTAT5条带完全消失；-，100μM时pSTAT5条带减弱；X，100μM时pSTAT5条带不减弱。

^b对照化合物。

Claims

1.一种如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐；

其中，W为下述任一基团：

(1)

中的

为单键或双键；

当

中的

当

中的

为双键时，Y¹为N，Y²为C-NH₂、C-NH-CN或C-O-CH₃；

Y³为N或CH；

X¹为N或CR²，X²为N或CR⁴，X³为N或CR⁵，X⁴为N或CR⁶；

(2)

Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-或NH；

Y⁵为N或C-R⁷，R⁷为卤素；

X⁵为N或CR⁸，X⁶为N或CR⁹，X⁷为N或CR¹⁰，X⁸为N或CR¹¹；

(3)

Y⁶为N-C(＝O)-CH₃、CH₂或NH；

Y⁷为NH、CH₂、C(＝O)、C(＝S)或C(＝N-OH)；

Y⁸为CH₂、CH₂CH₂、CH(CH₃)或C(＝O)；

Y⁹为N或CH；

(4)

Y¹⁰为NH；

Y¹¹为C(＝O)；

Y¹²为N或CH；

Y¹³为CH₂；

(5)

Y¹⁴为NH；

Y¹⁵为C(＝O)；

Y¹⁶为N或CH；

X¹⁷为N或CR²⁰，X¹⁸为N或CR²¹，X¹⁹为N或CR²²；

(6)

Y¹⁷为NH；

(7)

Y¹⁸为NH或CH₂；

Y¹⁹为C(＝O)或NH；

Y²⁰为CH₂或C(＝O)；

X²⁴为N或CR²⁷，X²⁵为N或CR²⁸，X²⁶为N或CR²⁹；

(8)

Y²¹为C(＝O)；

Y²²为NH；

Y²³为CH₂或C(＝O)；

Y²⁴为N-R³⁰，R³⁰为氢或苯基；

(9)

Y²⁵为NH；

Y²⁶为C(＝O)；

Y²⁷为单键、O或NH；

(10)

Y²⁸为NH；

Y²⁹为C(＝O)；

Y³⁰为CH或N；

(11)

Y³¹为O、NH或N-C(＝O)-CH₃；

Y³²为CH或N；

(12)

Y³³为NH；

Y³⁴为C(＝O)；

Y³⁵为CH或N；

(13)

Y³⁶为NH；

Y³⁷为C(＝O)；

Y³⁸为CH或N；

(14)

Y³⁹为NH；

Y⁴⁰为C(＝O)；

Y⁴¹为CH或N；

和，(15)

Z为下述任一片段：

(1)

m为1或2，n为1、2或3；

(2)

u为1或2，t为1或2；

(3)

(4)

p为1或2，q为1或2；

(5)

a2为1或2，b2为1或2；

(6)

a3为1或2，b3为1或2；

(7)

(8)-C(＝O)-；

(9)

s为0、1或2；

R^1-1-1-1和R^1-1-1-2独立地为氢或C₁-C₄烷基；

R^1-1-7、R^1-1-8、和、R^1-1-9独立地为C₁-C₄烷基；

R^1-1-10独立地为C₁-C₄烷氧基；

R^1-1-11和R^1-1-12独立地为氢或卤素。

2.如权利要求1所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的如式XII所示的化合物为如式II所示的化合物；

其中，

中的

为单键或双键；

当

中的

为单键时，Y¹为NH、或、N-OH，Y²为C＝O；

当

中的

为双键时，Y¹为N，Y²为C-NH₂、C-NH-CN或C-O-CH₃；

Y³为N；

X¹为CR²，X²为CR⁴，X³为CR⁵，X⁴为CR⁶；

R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、-S(＝O)₂-R^2-1、-NH-S(＝O)₂-R^2-2、-S(＝O)₂-NR^2-3R^2-4、-C(＝O)-R^2-5、-NH-C(＝O)-R^2-6、或、-C(＝O)-NR^2-7R^2-8；

Z为

m为1或2，n为1或2；u为1或2，t为1或2；

R¹为-(CH₂)_s-R^1-1；s为0、1或2；

3.如权利要求2所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，

中的

为单键；Y¹为NH、或、N-OH，Y²为C＝O；

和/或，R²、R⁴、R⁵和R⁶中至少一个为卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、C₂-C₄烯基、C₂-C₄炔基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、苯基、-S(＝O)₂-R^2-1、-NH-S(＝O)₂-R^2-2、-S(＝O)₂-NR^2-3R^2-4、-C(＝O)-R^2-5、-NH-C(＝O)-R^2-6、或、-C(＝O)-NR^2-7R^2-8；R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为C₁-C₄烷基、或、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基，余者为氢；

和/或，s为1或2；

和/或，R^1-1为萘基、一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的10元杂芳基”、或、一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”。

4.如权利要求1所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的如式XII所示的化合物为如式IV所示的化合物；

其中，Y⁴为

Z为

m为1或2，n为1或2；u为1或2，t为1或2；

R¹为-(CH₂)_s-R^1-1；s为0、1或2；

5.如权利要求1所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的如式XII所示的化合物为如式VI所示的化合物；

其中，R¹为-(CH₂)_s-R^1-1；s为0、1或2；

6.如权利要求1所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，W为下述任一基团：

(1)

中的

为单键或双键；

当

中的

当

中的

为双键时，Y¹为N，Y²为C-NH₂或C-NH-CN；

Y³为N或CH；

X¹为N或CR²，X²为N或CR⁴，X³为N或CR⁵，X⁴为N或CR⁶；

R^2-3、R^2-4、R^2-7和R^2-8独立地为氢；

(2)

Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-或NH；

Y⁵为N或C-R⁷，R⁷为卤素；

X⁵为CR⁸，X⁶为CR⁹，X⁷为CR¹⁰，X⁸为CR¹¹；

R⁸、R⁹、R¹⁰和R¹¹独立地为氢；

(3)

Y⁶为N-C(＝O)-CH₃、CH₂或NH；

Y⁷为NH、CH₂、C(＝O)、C(＝S)或C(＝N-OH)；

Y⁸为CH₂、CH₂CH₂、CH(CH₃)或C(＝O)；

Y⁹为N；

X⁹为CR¹²，X¹⁰为CR¹³，X¹¹为CR¹⁴，X¹²为CR¹⁵；

(4)

Y¹⁰为NH；

Y¹¹为C(＝O)；

Y¹²为N；

Y¹³为CH₂；

X¹³为CR¹⁶，X¹⁴为CR¹⁷，X¹⁵为CR¹⁸，X¹⁶为CR¹⁹；

R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸和R¹⁹独立地为氢；

(5)

Y¹⁴为NH；

Y¹⁵为C(＝O)；

Y¹⁶为N；

X¹⁷为CR²⁰，X¹⁸为CR²¹，X¹⁹为CR²²；

R²⁰、R²¹和R²²独立地为氢；

(6)

Y¹⁷为NH；

X²⁰为CR²³，X²¹为CR²⁴，X²²为CR²⁵，X²³为CR²⁶；

R²³、R²⁴、R²⁵和R²⁶独立地为氢；

(7)

Y¹⁸为NH或CH₂；

Y¹⁹为C(＝O)或NH；

Y²⁰为CH₂或C(＝O)；

X²⁴为CR²⁷，X²⁵为CR²⁸，X²⁶为CR²⁹；

R²⁷、R²⁸和R²⁹独立地为氢；

(8)

Y²¹为C(＝O)；

Y²²为NH；

Y²³为CH₂或C(＝O)；

Y²⁴为N-R³⁰，R³⁰为氢或苯基；

(9)

Y²⁵为NH；

Y²⁶为C(＝O)；

Y²⁷为单键、O或NH；

X²⁷为CR³¹，X²⁸为CR³²，X²⁹为CR³³，X³⁰为CR³⁴；

R³¹、R³²、R³³和R³⁴独立地为氢；

(10)

Y²⁸为NH；

Y²⁹为C(＝O)；

Y³⁰为N；

(11)

Y³¹为O、NH或N-C(＝O)-CH₃；

Y³²为N；

X³¹为CR³⁵，X³²为CR³⁶，X³³为CR³⁷，X³⁴为CR³⁸；

R³⁵、R³⁶、R³⁷和R³⁸独立地为氢；

(12)

Y³³为NH；

Y³⁴为C(＝O)；

Y³⁵为N；

X³⁵为CR³⁹，X³⁶为CR⁴⁰，X³⁷为CR⁴¹，X³⁸为CR⁴²；

R³⁹、R⁴⁰、R⁴¹和R⁴²独立地为氢；

(13)

Y³⁶为NH；

Y³⁷为C(＝O)；

Y³⁸为N；

R⁴³、R⁴⁴、R⁴⁵和R⁴⁶独立地为氢；

(14)

Y³⁹为NH；

Y⁴⁰为C(＝O)；

Y⁴¹为N；

R⁴⁷、R⁴⁸、R⁴⁹和R⁵⁰独立地为氢；

(15)

和/或，R¹为-(CH₂)_s-R^1-1、-NH-R^1-2、

s为0、1或2；R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-3取代的C₃-C₆环烷基、一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基、萘基、

或、一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”；R^1-1-1、R^1-1-2和R^1-1-3独立地为羧基、羟基、卤素、C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基、一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷基、“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”、-N(R^1-1-1-1)(R¹ ^-1-1-2)、或、苯基；R^1-1-1-1和R^1-1-1-2独立地为氢或C₁-C₄烷基；R^1-1-7、R^1-1-8、和、R^1-1-9独立地为C₁-C₄烷基；R^1-1-10独立地为C₁-C₄烷氧基；R^1-1-11和R^1-1-12独立地为氢或卤素。

7.如权利要求1所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，当W为

时，所述的Z为下述任一片段：

(1)

m为1或2，n为1、2或3；

(2)

u为1或2，t为1或2；

(3)

(4)

p为1或2，q为1或2；

(5)

a2为1或2，b2为1或2；

(6)

a3为1或2，b3为1或2；

(9)

或者，当W为

时，所述的Z为

或者，当W为

时，所述的Z为-C(＝O)-。

8.如权利要求1所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的如式XII所示的化合物具有如下任一方案的定义：

方案A：W为下述任一基团：

(1)

中的

为单键或双键；

当

中的

当

中的

为双键时，Y¹为N，Y²为C-NH₂或C-NH-CN；

Y³为N或CH；

X¹为N或CR²，X²为N或CR⁴，X³为N或CR⁵，X⁴为N或CR⁶；

R^2-3、R^2-4、R^2-7和R^2-8独立地为氢；

(2)

Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-或NH；

Y⁵为N或C-R⁷，R⁷为卤素；

X⁵为CR⁸，X⁶为CR⁹，X⁷为CR¹⁰，X⁸为CR¹¹；

R⁸、R⁹、R¹⁰和R¹¹独立地为氢；

(3)

Y⁶为N-C(＝O)-CH₃、CH₂或NH；

Y⁷为NH、CH₂、C(＝O)、C(＝S)或C(＝N-OH)；

Y⁸为CH₂、CH₂CH₂、CH(CH₃)或C(＝O)；

Y⁹为N；

X⁹为CR¹²，X¹⁰为CR¹³，X¹¹为CR¹⁴，X¹²为CR¹⁵；

(4)

Y¹⁰为NH；

Y¹¹为C(＝O)；

Y¹²为N；

Y¹³为CH₂；

X¹³为CR¹⁶，X¹⁴为CR¹⁷，X¹⁵为CR¹⁸，X¹⁶为CR¹⁹；

R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸和R¹⁹独立地为氢；

(5)

Y¹⁴为NH；

Y¹⁵为C(＝O)；

Y¹⁶为N；

X¹⁷为CR²⁰，X¹⁸为CR²¹，X¹⁹为CR²²；

R²⁰、R²¹和R²²独立地为氢；

(6)

Y¹⁷为NH；

X²⁰为CR²³，X²¹为CR²⁴，X²²为CR²⁵，X²³为CR²⁶；

R²³、R²⁴、R²⁵和R²⁶独立地为氢；

(7)

Y¹⁸为NH或CH₂；

Y¹⁹为C(＝O)或NH；

Y²⁰为CH₂或C(＝O)；

X²⁴为CR²⁷，X²⁵为CR²⁸，X²⁶为CR²⁹；

R²⁷、R²⁸和R²⁹独立地为氢；

(8)

Y²¹为C(＝O)；

Y²²为NH；

Y²³为CH₂或C(＝O)；

Y²⁴为N-R³⁰，R³⁰为氢或苯基；

(9)

Y²⁵为NH；

Y²⁶为C(＝O)；

Y²⁷为单键、O或NH；

X²⁷为CR³¹，X²⁸为CR³²，X²⁹为CR³³，X³⁰为CR³⁴；

R³¹、R³²、R³³和R³⁴独立地为氢；

(10)

Y²⁸为NH；

Y²⁹为C(＝O)；

Y³⁰为N；

(11)

Y³¹为O、NH或N-C(＝O)-CH₃；

Y³²为N；

X³¹为CR³⁵，X³²为CR³⁶，X³³为CR³⁷，X³⁴为CR³⁸；

R³⁵、R³⁶、R³⁷和R³⁸独立地为氢；

(12)

Y³³为NH；

Y³⁴为C(＝O)；

Y³⁵为N；

X³⁵为CR³⁹，X³⁶为CR⁴⁰，X³⁷为CR⁴¹，X³⁸为CR⁴²；

R³⁹、R⁴⁰、R⁴¹和R⁴²独立地为氢；

(13)

Y³⁶为NH；

Y³⁷为C(＝O)；

Y³⁸为N；

R⁴³、R⁴⁴、R⁴⁵和R⁴⁶独立地为氢；

(14)

Y³⁹为NH；

Y⁴⁰为C(＝O)；

Y⁴¹为N；

R⁴⁷、R⁴⁸、R⁴⁹和R⁵⁰独立地为氢；

和，(15)

Z为下述任一片段：

(1)

m为1或2，n为1、2或3；

(2)

u为1或2，t为1或2；

(3)

(4)

p为1或2，q为1或2；

(5)

a2为1或2，b2为1或2；

(6)

a3为1或2，b3为1或2；

(7)

(8)-C(＝O)-；

(9)

s为0、1或2；

R^1-1-1-1和R^1-1-1-2独立地为氢或C₁-C₄烷基；

R^1-1-7、R^1-1-8、和、R^1-1-9独立地为C₁-C₄烷基；

R^1-1-10独立地为C₁-C₄烷氧基；

R^1-1-11和R^1-1-12独立地为氢或卤素；

方案B：

W为下述任一基团：

(1)

中的

为单键或双键；

当

中的

当

中的

为双键时，Y¹为N，Y²为C-NH₂或C-NH-CN；

Y³为N或CH；

X¹为N或CR²，X²为N或CR⁴，X³为N或CR⁵，X⁴为N或CR⁶；

R^2-3、R^2-4、R^2-7和R^2-8独立地为氢；

(2)

Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-或NH；

Y⁵为N或C-R⁷，R⁷为卤素；

X⁵为CR⁸，X⁶为CR⁹，X⁷为CR¹⁰，X⁸为CR¹¹；

R⁸、R⁹、R¹⁰和R¹¹独立地为氢；

(3)

Y⁶为N-C(＝O)-CH₃或NH；

Y⁷为C(＝O)、C(＝S)或C(＝N-OH)；

Y⁸为CH₂、或C(＝O)；

Y⁹为N；

X⁹为CR¹²，X¹⁰为CR¹³，X¹¹为CR¹⁴，X¹²为CR¹⁵；

(4)

Y¹⁰为NH；

Y¹¹为C(＝O)；

Y¹²为N；

Y¹³为CH₂；

X¹³为CR¹⁶，X¹⁴为CR¹⁷，X¹⁵为CR¹⁸，X¹⁶为CR¹⁹；

R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸和R¹⁹独立地为氢；

(5)

Y¹⁴为NH；

Y¹⁵为C(＝O)；

Y¹⁶为N；

X¹⁷为CR²⁰，X¹⁸为CR²¹，X¹⁹为CR²²；

R²⁰、R²¹和R²²独立地为氢；

(7)

Y¹⁸为NH或CH₂；

Y¹⁹为C(＝O)或NH；

Y²⁰为CH₂或C(＝O)；

X²⁴为CR²⁷，X²⁵为CR²⁸，X²⁶为CR²⁹；

R²⁷、R²⁸和R²⁹独立地为氢；

(8)

Y²¹为C(＝O)；

Y²²为NH；

Y²³为CH₂；

Y²⁴为N-R³⁰，R³⁰为苯基；

(9)

Y²⁵为NH；

Y²⁶为C(＝O)；

Y²⁷为单键、O或NH；

X²⁷为CR³¹，X²⁸为CR³²，X²⁹为CR³³，X³⁰为CR³⁴；

R³¹、R³²、R³³和R³⁴独立地为氢；

(11)

Y³¹为O、NH或N-C(＝O)-CH₃；

Y³²为N；

X³¹为CR³⁵，X³²为CR³⁶，X³³为CR³⁷，X³⁴为CR³⁸；

R³⁵、R³⁶、R³⁷和R³⁸独立地为氢；

(12)

Y³³为NH；

Y³⁴为C(＝O)；

Y³⁵为N；

X³⁵为CR³⁹，X³⁶为CR⁴⁰，X³⁷为CR⁴¹，X³⁸为CR⁴²；

R³⁹、R⁴⁰、R⁴¹和R⁴²独立地为氢；

(13)

Y³⁶为NH；

Y³⁷为C(＝O)；

Y³⁸为N；

R⁴³、R⁴⁴、R⁴⁵和R⁴⁶独立地为氢；

和，(14)

Y³⁹为NH；

Y⁴⁰为C(＝O)；

Y⁴¹为N；

R⁴⁷、R⁴⁸、R⁴⁹和R⁵⁰独立地为氢；

Z为下述任一片段：

(1)

m为1或2，n为1、2或3；

(2)

u为1或2，t为1或2；

(3)

或

(4)

p为1或2，q为1或2；

(5)

a2为1或2，b2为1或2；

(6)

a3为1或2，b3为1或2；

(7)

(8)-C(＝O)-；

(9)

R¹为-(CH₂)_s-R^1-1、-NH-R^1-2、

s为0、1或2；

R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-3取代的C₃-C₆环烷基、一个或多个R¹ ^-1-1取代的C₆-C₁₀芳基、萘基、

R^1-1-1-1和R^1-1-1-2独立地为氢或C₁-C₄烷基；

R^1-1-7、R^1-1-8、和、R^1-1-9独立地为C₁-C₄烷基；

R^1-1-10独立地为C₁-C₄烷氧基；

R^1-1-11和R^1-1-12独立地为氢或卤素。

9.如权利要求1～8中任一项所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，当R³为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基；

和/或，当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为卤素时，所述的卤素为氟、氯或溴；

和/或，当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基或叔丁基；

和/或，当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个为2个或3个；

和/或，当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的卤素为氟；

和/或，当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基；

和/或，当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为C₁-C₄烷氧基时，所述的C₁-C₄烷氧基为甲氧基；

和/或，当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为C₃-C₆环烷基时，所述的C₃-C₆环烷基为环丙基；

和/或，当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”时，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”为吗啉基；

和/或，当R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基或叔丁基；

和/或，当R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个为2个或3个；

和/或，当R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的卤素为氟；

和/或，当R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基；

和/或，当W为

时，

为

和/或，当Y^4-1为-NH-C(＝O)-CH₂-时，-CH₂-端与Y⁵连接；

和/或，当W为

时，所述的

为

和/或，当W为

时，所述的

为

和/或，当W为

时，所述的

为

和/或，当W为

时，所述的

为

和/或，当W为

时，所述的

为

和/或，当Z为

时，所述的m为1，n为1，或者，所述的m为2，n为2；

和/或，当Z为

时，所述的

为

其b端与R¹连接；

和/或，当Z为

时，所述的羰基端与R¹连接；

和/或，当Z为

时，所述的p为2，q为2；

和/或，当Z为

时，所述的

为

其k端与R¹连接；

和/或，当Z为

时，所述的u为1，t为1，或者，所述的u为2，t为2；

和/或，当Z为

时，所述的

为

其f端与R¹连接；

和/或，当Z为

时，所述的a2为2，b2为2；

和/或，当Z为

时，所述的

为

其L6端与R¹连接；

和/或，当Z为

时，所述的a3为2，b3为2；

和/或，当Z为

时，所述的

为

其L8端与R¹连接；

和/或，当Z为

时，所述的

为

其L4端与R¹连接；

和/或，当Z为

时，所述的

为

其d端与R¹连接；

和/或，当Z为

时，所述的

为

其h端与R¹连接；

和/或，当Z为

时，所述的

为

其w端与R¹连接；

和/或，当R¹为C₂-C₄烷基时，所述的C₂-C₄烷基为乙基；

和/或，当R¹为多个卤素取代的C₂-C₄烷基时，所述的多个为2个或3个；

和/或，当R¹为一个或多个卤素取代的C₂-C₄烷基时，所述的卤素为氟；

和/或，当R¹为一个或多个卤素取代的C₂-C₄烷基时，所述的C₂-C₄烷基为乙基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基时，所述的C₆-C₁₀芳基为苯基或萘基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-2取代的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基时，所述的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基为含1个选自N、O和S的5～6元杂芳基、吲哚基、异喹啉基或喹啉基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-3取代的C₃-C₆环烷基时，所述的C₃-C₆环烷基为环己基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-6取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”时，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”为哌啶基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为C₇-C₁₀环烷基时，所述的C₇-C₁₀环烷基为C₇-C₁₀桥环烷基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为萘基时，所述的萘基为萘-2-基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为吡啶基时，所述的吡啶基为吡啶-4-基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5或10元杂芳基”时，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5或10元杂芳基”为“含1个或2个独立选自N、O和S的10元杂芳基”；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个为2个或3个；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的卤素为氟；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基或乙基；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为C₃-C₆环烷基时，所述的C₃-C₆环烷基为环丙基；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为卤素时，所述的卤素为氟、氯或溴；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基时，所述的多个为2个或3个；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基时，所述的卤素为氟；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基时，所述的C₁-C₄烷氧基为甲氧基或乙氧基；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”为吗啉基；

和/或，当R^1-1-1-1和R^1-1-1-2独立地为C₁-C₄烷基，所述的C₁-C₄烷基为甲基或乙基；

和/或，当R^1-1-7、R^1-1-8、和、R^1-1-9独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基或乙基；

和/或，当R^1-1-10独立地为C₁-C₄烷氧基时，所述的C₁-C₄烷氧基为甲氧基或乙氧基；

和/或，当R^1-1-11和R^1-1-12独立地为卤素时，所述的卤素为氟。

10.如权利要求9所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为叔丁基；

和/或，当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个卤素取代的C₁-C₄烷基为三氟甲基；

和/或，当R²、R⁴、R⁵和R⁶独立地为“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”时，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～7元杂环烷基”为吗啉-1-基；

和/或，当R^2-1、R^2-2、R^2-3、R^2-4、R^2-5、R^2-6、R^2-7和R^2-8独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个卤素取代的C₁-C₄烷基为三氟甲基；

和/或，当Z为

时，所述的

为

其f端与R¹连接；

和/或，当R¹为多个卤素取代的C₂-C₄烷基时，所述的多个卤素取代的C₂-C₄烷基为2,2,2-三氟乙基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-1取代的苯基时，所述的R^1-1-1与“所述的-(CH₂)_s-、-NH-、

或羰基”互为邻位、间位或对位；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-2取代的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基时，所述的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基为呋喃基、噻吩基或吡啶基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”、所述的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基为含1个选自N、O和S的5元杂芳基时，所述的R^1-1-2与“所述的-(CH₂)_s-、-NH-、

或羰基”互为邻位或间位；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-2取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基”、所述的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基为含1个N的6元杂芳基时，所述的R^1-1-2与“所述的-(CH₂)_s-、-NH-、

或羰基”互为邻位、间位或对位；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-6取代的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”时，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”为哌啶-1-基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为C₇-C₁₀环烷基时，所述的C₇-C₁₀环烷基为金刚烷基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5或10元杂芳基”时，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5或10元杂芳基”为喹啉基、

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为C₁-C₄烷基时，所述的C₁-C₄烷基为甲基或叔丁基；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷基时，所述的多个卤素取代的C₁-C₄烷基为三氟甲基；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基时，所述的多个卤素取代的C₁-C₄烷氧基为三氟甲氧基；

和/或，当R^1-1-1、R^1-1-2、R^1-1-3、和、R^1-1-6独立地为“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～6元杂环烷基”为吗啉-1-基。

11.如权利要求10所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基时，所述的一个或多个R^1-1-1取代的C₆-C₁₀芳基为4-三氟甲基苯基；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为一个或多个R^1-1-2取代的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基时，所述的含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5～10元杂芳基为吡啶-2-基、吡啶-3-基或吡啶-4-基；

或羰基”互为对位；

和/或，当R^1-1、R^1-2、R^1-3、R^1-4和R^1-5独立地为“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5或10元杂芳基”时，所述的“含1个、2个或3个独立选自N、O和S的5或10元杂芳基”为

12.如权利要求11所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，

为

13.如权利要求1所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的如式XII所示的化合物为以下任一结构：

14.一种药物组合物，其包含物质Y和药用辅料；

所述的物质Y为如权利要求1～13中任一项所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐。

15.一种物质Y在制备STAT5抑制剂或药物中的应用；

所述的物质Y为如权利要求1～13中任一项所述的如式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐；