CN111836808B - 用于预防、减轻或治疗纤维化或非酒精性脂肪性肝炎的新型化合物和包含其作为活性成分的组合物 - Google Patents

用于预防、减轻或治疗纤维化或非酒精性脂肪性肝炎的新型化合物和包含其作为活性成分的组合物 Download PDF

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Abstract

本发明涉及用于预防、减轻或治疗纤维化或非酒精性脂肪性肝炎的新型化合物和包含所述化合物作为活性成分的组合物，更特别地涉及对预防、减轻或治疗纤维化具有优异效果的式1的新型化合物，以及涉及包含该化合物作为活性成分的用于预防、减轻或治疗纤维化或非酒精性脂肪性肝炎的组合物。所述新型化合物通过有效地调节为EMT调节剂的Snail和波形蛋白的表达可以调节EMT(上皮‑间充质转化)的激活，从而可以有效地预防、减轻或治疗纤维化。此外，所述新型化合物具有非常好的药代动力学。另外，本发明的新型化合物可以有效地抑制肝细胞的纤维化，从而也可以有效地减轻或治疗非酒精性脂肪性肝炎。

Description

用于预防、减轻或治疗纤维化或非酒精性脂肪性肝炎的新型化合物和包含其作为活性成分的组合物
技术领域
本发明涉及用于预防、减轻或治疗纤维化或非酒精性脂肪性肝炎的新型化合物和包含该化合物作为活性成分的组合物，更特别地涉及对预防、减轻或治疗纤维化具有优异效果的式1的新型化合物，以及涉及包含该化合物作为活性成分的用于预防、减轻或治疗纤维化或非酒精性脂肪性肝炎的组合物。
背景技术
纤维化是其中在修复或反应过程中在器官或组织中形成过量的纤维结缔组织的疾病。该纤维结缔组织与正常纤维组织的形成相反。当过量的纤维结缔组织在器官或组织中形成时，该组织变硬并且体液的流入减少，使其体内的原有功能无法充分执行。已知纤维化是由损伤、炎症、烧伤、辐射、化学疗法、淋巴水肿等引起的。与纤维化相关的问题因纤维结缔组织形成的位置而异，并且肝、分泌器官、肺等主要由于纤维化而受损。纤维化的典型实例包括特发性肺纤维化(IPF)、骨髓纤维化、肝纤维化和肾纤维化。
当前已知的抗纤维化治疗剂包括吡非尼酮(Pirfenidone)(抗特发性肺纤维化治疗剂)、尼达尼布(Nintedanib)(抗特发性肺纤维化治疗剂)、鲁索替尼(Ruxolitinib)(抗骨髓纤维化治疗剂)等。然而，需要开发对人体更有效、安全且易于配制的新的治疗剂。
因此，为了新的抗纤维化治疗剂，本发明人进行了与纤维化相关的各种研究，并且特别关注上皮-间充质转化(EMT)(以下称为“EMT”)。
EMT是指这样的现象，其中正常上皮细胞被基因重新编程为间充质细胞，该间充质细胞的形态由于中间阶段中的细胞骨架的变化而易于变化，同时正常细胞转化为肿瘤细胞。因此，认为抑制EMT相关的蛋白表达可以抑制肿瘤的转移和增殖，因此许多研究人员进行了与 EMT相关的研究以开发肿瘤治疗剂。已知有几百种EMT调节剂，包括Twist、Snail、Slug、E-钙粘蛋白、波形蛋白、胶原11a1等。
如上所述，关于EMT和EMT调节剂的研究主要针对癌症或肿瘤进行。然而，基于一些现有的研究结果，本发明人已经关注于EMT 和纤维化之间的关系，并且期望如果可以调节EMT，则可以预防和治疗纤维化。
因此，关注于EMT和纤维化之间的关系，本发明人进行了研究以开发能够有效预防、减轻或治疗纤维化的物质，结果发现本说明书中描述的由式1表示的化合物通过有效地调节EMT，对预防、减轻或治疗纤维化表现出优异的效果，并且由于这种效果，非酒精性脂肪性肝炎也可以被有效地减轻或治疗，从而完成了本发明。
发明内容
技术问题
因此，本发明的主要目的是提供对预防、减轻或治疗纤维化具有优异效果的新型化合物。
本发明的另一个目的是提供包含该化合物作为活性成分的用于预防、减轻或治疗纤维化的组合物。
本发明的又一个目的是提供包含该化合物作为活性成分的用于减轻或治疗非酒精性脂肪性肝炎的组合物。
技术方案
根据一个方面，本发明提供由以下式1表示的化合物或其药学上可接受的盐：
式1
Figure BDA0002651900240000031
其中R1为取代或未取代的C1-5直链或支链烷基、C5-6环烷基、含有至少一个选自O和N中的杂原子的C5-6环烷基、取代或未取代的 C6-12芳基、或含有至少一个选自O和N中的杂原子的C5-6杂芳基；R2为氢、乙基、乙酰基、乙酰氧基、羧基、苯甲酰氧基或3,4,5-三羟基苯甲酰氧基；以及R3至R5各自独立地为氢、羟基、甲基、甲氧基、乙酰氧基、羧基或苯甲酰氧基.
根据另一个方面，本发明提供了用于预防或治疗纤维化的药物组合物，所述药物组合物包含所述化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
根据又一方面，本发明提供了用于预防或减轻纤维化的食品组合物，所述食品组合物包含所述化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
根据又一方面，本发明提供了用于治疗非酒精性脂肪性肝炎 (NASH)的药物组合物，所述药物组合物包含所述化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
根据又另一方面，本发明提供了用于减轻非酒精性脂肪性肝炎的食品组合物，所述食品组合物包含所述化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
有益效果
本发明的新型化合物通过有效地调节为EMT调节剂的Snail和波形蛋白的表达可以调节EMT(上皮-间充质转化)的激活，从而可以有效地预防、减轻或治疗纤维化。此外，本发明的新型化合物具有非常好的药代动力学，使其即使在口服施用之后也可以在体内快速吸收，可以在体内表现出稳定的效果，并且可以安全地使用而没有明显的副作用。另外，本发明的新型化合物可以有效地抑制肝细胞的纤维化，从而也可以有效地减轻或治疗非酒精性脂肪性肝炎。
附图说明
图1示出了本发明的化合物。
图2和图3示出了根据本发明的一个实施例合成本发明的化合物的过程。
图4示出了根据本发明的一个实施例在合成本发明的化合物的过程中生产的7-(苄氧基)-5-羟基-2-苯基-4H-色烯-4-酮的LCMS-NMR分析结果。
图5示出了根据本发明的一个实施例在合成本发明的化合物的过程中生产的7-(苄氧基)-5-甲氧基-2-苯基-4H-色烯-4-酮的LCMS-NMR 分析结果。
图6示出了根据本发明的一个实施例在合成本发明的化合物的过程中生产的1-(4-(苄氧基)-2-羟基-6-甲氧基苯基)乙-1-酮的 LCMS-NMR分析结果。
图7示出了根据本发明的一个实施例在合成本发明的化合物的过程中生产的1-(4-(苄氧基)-3,6-二羟基-2-甲氧基苯基)乙-1-酮的 LCMS-NMR分析结果。
图8示出了根据本发明的一个实施例在合成本发明的化合物的过程中生产的1-(4-(苄氧基)-6-羟基-2,3-二甲氧基苯基)乙-1-酮的 LCMS-NMR分析结果。
图9示出了根据本发明的一个实施例在合成本发明的化合物的过程中生产的(E)-1-(4-(苄氧基)-6-羟基-2,3-二甲氧基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮的LCMS-NMR分析结果。
图10示出了根据本发明的一个实施例在合成本发明的化合物的过程中生产的5-(苄氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)-6,7-二甲氧基-4H-色烯-4-酮的LCMS-NMR分析结果。
图11示出了根据本发明的一个实施例在合成本发明的化合物的过程中生产的2-(3,4-二甲氧基苯基)-7-羟基-5,6-二甲氧基-4H-色烯-4- 酮的LCMS-NMR分析结果。
图12示出了根据本发明的一个实施例在合成本发明的化合物的过程中生产的2-(3,4-二甲氧基苯基)-5,7-二羟基-6-甲氧基-4H-色烯-4- 酮的LCMS-NMR分析结果。
图13示出了根据本发明的一个实施例在合成本发明的化合物的过程中生产的7-(2-溴乙氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯基-5-羟基-6-甲氧基 -4H-色烯-4-酮的LCMS-NMR分析结果。
图14示出了根据本发明的一个实施例在合成本发明的化合物的过程中生产的4-(2-((2-(3,4-二甲氧基苯基)-5-羟基-6-甲氧基-4-氧代 -4H-色烯-7-基)氧基)乙基)哌嗪-2-酮(式2的化合物)的LCMS-NMR分析结果。
图15示出了本发明的化合物对ONGHEPA1细胞的纤维化的抑制作用，该ONGHEPA1细胞是源自肝星状细胞(HSC)的间充质干细胞 (MSC)。
图16示出了本发明的化合物对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达的抑制作用，该α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)是ONGHEPA1细胞的纤维化中的EMT(上皮-间充质转化)的代表性标志物。
图17示出了本发明的化合物对分离自肺纤维化患者的患病人肺成纤维细胞(DHLF)的纤维化的抑制作用。
图18示出了本发明的化合物对为人肺腺癌细胞系的A549细胞系的纤维化的抑制作用。
图19示出了本发明的化合物对为A549细胞系中的EMT的代表性标志物的Snail和波形蛋白的表达的抑制作用。
图20示出了评价本发明的化合物对肝微粒体的代谢稳定性的结果。
图21示出了评价口服施用后本发明的化合物的药代动力学的结果。
图22至图24示出了检测本发明的化合物的比较化合物对细胞纤维化的作用的结果。
图25示出了在配制后比较本发明的化合物的药代动力学的结果。
图26是示出通过施用本发明的化合物或对照化合物(吡非尼酮)的纤维化动物模型的体重变化的图。Sham，正常的动物模型；溶媒对照，仅口服施用30％HPCD(羟丙基-β-环糊精)的非化合物治疗的纤维化动物模型；吡非尼酮100mpk PO(30％HPCD)，以100mpk口服施用溶解在30％HPCD中的吡非尼酮的纤维化动物模型；化合物1 10-100 mpk PO，以10-100mpk口服施用溶解在30％HPCD中的本发明的化合物的纤维化动物模型。
图27是示出通过施用本发明的化合物或对照化合物(吡非尼酮)的纤维化动物模型的右肺重量的变化的图。Sham，正常的动物模型；溶媒对照，仅口服施用30％HPCD(羟丙基-β-环糊精)的非化合物治疗的纤维化动物模型；吡非尼酮100mpk PO(30％HPCD)，以100mpk口服施用溶解在30％HPCD中的吡非尼酮的纤维化动物模型；化合物1 10-100mpkPO，以10-100mpk口服施用溶解在30％HPCD中的本发明的化合物的纤维化动物模型。
图28是示出通过施用本发明的化合物或对照化合物(吡非尼酮)的纤维化动物模型的右肺中羟脯氨酸量的变化的图。Sham，正常的动物模型；溶媒对照，仅口服施用30％HPCD(羟丙基-β-环糊精)的非化合物治疗的纤维化动物模型；吡非尼酮100mpk PO(30％HPCD)，以100 mpk口服施用溶解在30％HPCD中的吡非尼酮的纤维化动物模型；化合物1 10-100mpk PO，以10-100mpk口服施用溶解在30％HPCD中的本发明的化合物的纤维化动物模型。
图29是示出通过施用本发明的化合物或对照化合物(吡非尼酮)的纤维化动物模型的右肺中胶原量的变化的图。Sham，正常的动物模型；溶媒对照，仅口服施用30％HPCD(羟丙基-β-环糊精)的非化合物治疗的纤维化动物模型；吡非尼酮100mpk PO(30％HPCD)，以100mpk 口服施用溶解在30％HPCD中的吡非尼酮的纤维化动物模型；化合物 1 10-100mpkPO，以10-100mpk口服施用溶解在30％HPCD中的本发明的化合物的纤维化动物模型。
图30示出了对施用本发明的化合物或对照化合物(吡非尼酮)的纤维化动物模型的左肺组织进行组织病理学胶原形态计量的结果。 Sham，正常的动物模型；溶媒对照，仅口服施用30％HPCD(羟丙基-β- 环糊精)的非化合物治疗的纤维化动物模型；吡非尼酮100mpkPO (30％HPCD)，以100mpk口服施用溶解在30％HPCD中的吡非尼酮的纤维化动物模型；化合物1 10-100mpk PO，以10-100mpk口服施用溶解在30％HPCD中的本发明的化合物的纤维化动物模型。
图31示出了检测存在于施用本发明的化合物或对照化合物(吡非尼酮)的纤维化动物模型的血浆中的化合物的浓度的结果。吡非尼酮 100mpk PO(30％HPCD)，以100mpk口服施用溶解在30％HPCD中的吡非尼酮的纤维化动物模型；化合物1 10-100mpk PO，以10-100 mpk口服施用溶解在30％HPCD中的本发明的化合物的纤维化动物模型。
图32示出了检测存在于施用本发明的化合物或对照化合物(吡非尼酮)的纤维化动物模型的右肺中的化合物的浓度的结果。吡非尼酮 100mpk PO(30％HPCD)，以100mpk口服施用溶解在30％HPCD中的吡非尼酮的纤维化动物模型；化合物1 10-100mpk PO，以10-100 mpk口服施用溶解在30％HPCD中的本发明的化合物的纤维化动物模型。
图33至图38示出了实验动物模型的左肺组织的H&E和天狼猩红染色的结果。Sham，正常的动物模型；溶媒对照，仅口服施用30％ HPCD(羟丙基-β-环糊精)的非化合物治疗的纤维化动物模型；吡非尼酮100mpk PO(30％HPCD)，以100mpk口服施用溶解在30％HPCD 中的吡非尼酮的纤维化动物模型；化合物1 10-100mpk PO，以10-100 mpk口服施用溶解在30％HPCD中的本发明的化合物的纤维化动物模型；*，肺泡空间；黑色箭头，肺泡隔；#，细支气管；白色箭头头部，具有明显纤维化的区域；白色箭头，被炎性细胞侵袭的区域。
图39至图41示出了实验动物模型的肝组织的H&E染色的结果。Sham，正常的动物模型；溶媒对照，仅口服施用30％HPCD(羟丙基-β- 环糊精)的非化合物治疗的纤维化动物模型；吡非尼酮100mpk PO (30％HPCD)，以100mpk口服施用溶解在30％HPCD中的吡非尼酮的纤维化动物模型；化合物1 10-100mpk PO，以10-100mpk口服施用溶解在30％HPCD中的本发明的化合物的纤维化动物模型；CV，中心静脉；黑色箭头，发生坏死的区域。
图42示出了施用本发明的化合物或对照化合物(替米沙坦或OCA) 的非酒精性脂肪性肝炎动物模型的肝组织的H&E染色的结果，以及还示出了肝的形态。溶媒对照，仅口服施用0.5％CMC+1％吐温80水溶液的非化合物治疗的非酒精性脂肪性肝炎动物模型；化合物1 50-100mpk，以50-100mpk口服施用溶解在0.5％CMC+1％吐温80 水溶液中的本发明的化合物的非酒精性脂肪性肝炎动物模型；替米沙坦30mpk，以30mpk口服施用溶解在0.5％CMC+1％吐温80水溶液中的替米沙坦的非酒精性脂肪性肝炎动物模型；OCA 50mpk，以30 mpk口服施用溶解在0.5％CMC+1％吐温80水溶液中的OCA的非酒精性脂肪性肝炎动物模型。
图43示出了基于施用本发明的化合物或对照化合物(替米沙坦或 OCA)的非酒精性脂肪性肝炎动物模型的肝组织中炎症、纤维化、肝细胞肿胀和脂肪积累的程度，通过t检验对NAFLD(非酒精性脂肪肝疾病)活性评分进行统计学处理的结果。溶媒对照，仅口服施用0.5％CMC +1％吐温80水溶液的非化合物治疗的非酒精性脂肪性肝炎动物模型；化合物低-高，以5-100mpk口服施用溶解于0.5％CMC+1％吐温80 水溶液中的本发明的化合物的非酒精性脂肪性肝炎动物模型；替米沙坦，以30mpk口服施用溶解于0.5％CMC+1％吐温80水溶液中的替米沙坦的非酒精性脂肪性肝炎动物模型；OCA，以30mpk口服施用溶解于0.5％CMC+1％吐温80水溶液中的OCA的非酒精性脂肪性肝炎动物模型。
具体实施方式
本发明提供了由以下式1表示的新型化合物或其药学上可接受的盐：
式1
Figure BDA0002651900240000091
其中R1为取代或未取代的C1-5直链或支链烷基、C5-6环烷基、含有至少一个选自O和N中的杂原子的C5-6环烷基、取代或未取代的 C6-12芳基、或者含有至少一个选自O和N中的杂原子的C5-6杂芳基； R2为氢、乙基、乙酰基、乙酰氧基、羧基、苯甲酰氧基或3,4,5-三羟基苯甲酰氧基；以及R3至R5各自独立地为氢、羟基、甲基、甲氧基、乙酰氧基、羧基或苯甲酰氧基。
根据本发明的新型化合物或其药学上可接受的盐可以预防、减轻或治疗纤维化。
根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐通过抑制EMT(上皮 -间充质转化)中涉及的重要因子(例如α-SMA(α-平滑肌肌动蛋白)、 Snail和波形蛋白)的表达可以抑制细胞纤维化。
由于这种作用，根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐可以预防、减轻或治疗纤维化，纤维化是其中器官或组织中的细胞由于任何原因而变成纤维状的疾病。
此外，非酒精性脂肪性肝炎(NASH)也是其中发生肝细胞纤维化的疾病。因此，根据本发明的所述新型化合物或其药学上可接受的盐可以减轻或治疗这种非酒精性脂肪性肝炎。
特别地，根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐可以强烈抑制已经被编程为成为纤维状的细胞的生长和纤维化，并且可以使这些细胞恢复为正常细胞。该作用意味着其中纤维化已经发展的状态可以恢复至正常状态，从而支持根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐可以对纤维化的治疗表现出强的效果。
根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐既不易被肝微粒体降解也不易转化至其他材料，因此可以表现出持久的作用同时在体内保持其原始结构。此外，由于其在通常使用的磷酸盐缓冲液中的溶解度不低，因此对于制剂是有利的。而且，由于其对CYP450的抑制活性低，因此其对人体是安全的。另外，由于其即使在口服施用后也可以在体内迅速吸收，因此其具有非常高的施用容易性。
为了如上所述的纤维化抑制作用、体内稳定性、对人体的安全性等，根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐中的R1优选为甲基、乙基、环戊基、环己基、苯基或苄基。更优选地，R1为甲基。另外，优选地，R2为氢，R4为羟基或甲氧基，以及R3和R5各自独立地为氢、羟基或甲氧基。更优选地，根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐为由以下式2至式5中的任一种表示的化合物或其药学上可接受的盐：
式2
Figure BDA0002651900240000101
式3
Figure BDA0002651900240000102
式4
Figure BDA0002651900240000103
式5
Figure BDA0002651900240000111
本发明的化合物可以通过以下反应方案1和反应方案2中所示的方法制备：
反应方案1
Figure BDA0002651900240000112
反应方案2
Figure BDA0002651900240000113
其中R1至R5对应于式1的R1至R5。
基于上述效果，本发明提供了用于预防或治疗纤维化的药物组合物，所述药物组合物包含所述化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
在这方面，所述纤维化优选为选自特发性肺纤维化、骨髓纤维化、肝纤维化和肾纤维化中的任一种。
本发明还提供了用于预防或减轻纤维化的食品组合物，所述食品组合物包含所述化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
在这方面，纤维化优选为选自特发性肺纤维化、骨髓纤维化、肝纤维化和肾纤维化中的任一种。
本发明还提供了用于治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的药物组合物，所述药物组合物包含所述化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
本发明还提供了用于减轻非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的食品组合物，所述食品组合物包含所述化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
本发明的药物组合物可以为包含单独的或与药学上可接受的载体组合的根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐的组合物。
据信本发明的药物组合物基于所述组合物的总重量可以以0.0001 重量％至100重量％的量包含根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
据信本发明的药物组合物在临床实践中可以口服或肠胃外施用。对于肠胃外施用，该药物组合物可以通过腹膜内注射、直肠内注射、皮下注射、静脉内注射、肌肉内注射、子宫内硬膜注射、脑血管内注射或胸内注射进行施用，并且可以作为一般药物制剂使用。
本发明的药物组合物可以单独使用或与外科手术、放射疗法、激素疗法、化学疗法和其他采用生物反应调节剂的方法组合使用。
基于组合物中，本发明的药物组合物中包含的所述化合物或其药学上可接受的盐的日剂量可以为约0.0001g至100mg/kg/天，优选为 0.001g至10mg/kg/天，并且可以一天一次或几次施用，其范围根据患者的体重、年龄、性别、健康状况、饮食、施用时间、施用方式、排泄率和疾病的严重性而变化。
对于临床实践中的口服或肠胃外施用，可以通过使用稀释剂或赋形剂(包括通常使用的填充剂、增量剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、表面活性剂等)以各种形式配制药物组合物。
特别地，即使在口服施用后，本发明的化合物也可以在体内迅速吸收。考虑到生物利用度和体内稳定性，本发明的化合物优选使用 NMP(N-甲基-2-吡咯烷酮)、PEG400、SOLUTOL HS和水配制或使用 HPCD(羟丙基-β-环糊精)配制。在这方面，NMP:PEG400:SOLUTOL HS:水的比例优选为5-15:10-30:10-30:40-60(v/v)，更优选为8-12: 15-25:15-25:45-55(v/v)。在使用HPCD配制本发明的化合物的情况下，优选使用将化合物溶解在10％-50％(w/v)HPCD水溶液中的方法。更优选地，使用20％-40％(w/v)HPCD水溶液。
当以预防、减轻或治疗纤维化的目的口服施用如上所述的用 HPCD配制的本发明的化合物时，对于小鼠可以以优选1mg/kg/天至 50mg/kg/天、更优选5mg/kg/天至20mg/kg/天的剂量施用，对于人可以以优选0.08mg/kg/天至4mg/kg/天、更优选0.4mg/kg/天至1.6mg/kg/天的剂量施用。
另外，本发明的化合物也可以使用CMC(羧甲基纤维素)和吐温80 配制，使得CMC的浓度为0.1％至1％(w/v)以及吐温80的浓度为0.1％至2％。当以预防、减轻或治疗非酒精性脂肪性肝炎的目的口服施用如上所述用CMC和吐温80配制的本发明的化合物时，对于大鼠可以以优选1mg/kg/天至70mg/kg/天、更优选5mg/kg/天至60mg/kg/天的剂量施用，对于人可以以优选0.16mg/kg/天至11.4mg/kg/天、更优选0.8 mg/kg/天至9.7mg/kg/天的剂量施用。
除根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐之外，本发明的药物组合物可以包含至少一种显示相同或相似功能的活性成分。
本发明的食品组合物可以为包含单独的或与食物可接受的载体组合的根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐的组合物。在这种情况下，根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐的含量可以基于其在药物组合物中的含量和其剂量根据常规方法适当地控制。据信本发明的食品组合物可以为以下形式：加工的肉制品，鱼肉制品，豆腐， Muk(果冻食品)，粥，面条例如拉面，调味品例如酱油、大豆酱、红辣椒酱、混合大豆酱等，调味汁，甜食(confectionery)，乳制品例如发酵乳、奶酪等，腌制食品例如泡菜、腌制蔬菜等，或饮料例如果汁饮料、蔬菜饮料、豆浆、发酵饮料等。另外，食物可接受的载体也可以为如上所述的药学上可接受的载体。
在下文中，将参考实施例和实验例更详细地描述本发明。然而应当理解，这些实施例和实验例仅出于说明性目的，并不旨在限制本发明的范围。
实施例1：本发明的化合物的合成
1-1：7-(苄氧基)-5-羟基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(前体化合物2)的合成(步骤-1)
该步骤是进行图2所示的步骤-1的步骤，其详细描述如下。
在0℃下向5,7-二羟基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(前体化合物1)(75g； 0.294mol；1当量)在丙酮(700mL)中的经搅拌的悬浮液中滴加碳酸钾 (121.8g；0.442mol；3.0当量)和苄基溴(75.5g；0.442mol；1.5当量)。将反应混合物升温至室温，然后在60℃下加热5小时。通过 TLC(8:2/PE:EtOAc；Rf～0.5)确认反应完成。使混合物冷却至室温并通过过滤除去K2CO3，将滤饼用DCM洗涤几次，直到没有完整的产物。将合并的滤液浓缩至干，并将得到的固体用二乙醚(200mL)制浆，过滤并抽干，得到为黄色固体的7-(苄氧基)-5-羟基-2-苯基-4H-色烯-4- 酮(前体化合物2)(产量：90.0g；88.6％)。
在以下条件下，通过LCMS-NMR分析所获得的7-(苄氧基)-5-羟基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(前体化合物2)，结果示于图4中。
LCMS：质量实测值(Mass found)；(345.0；M+1)。
方法：A-0.1％HCOOH水溶液，B：ACN；流速：1.5mL/分钟； +ve模式。
柱：Zorbax扩展的C18(50×4.6mm，5μm)。
Rt(分钟)：3.46；面积％-97.97。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.83(s,1H),8.10-8.12(m,2H), 7.62-7.65(m,3H),7.51-7.62(m,2H),7.43-7.50(m,2H),7.38-7.41(m, 3H),7.06(s,1H),6.93(s,1H),6.51(d,J＝2.40Hz,1H),5.27(s,2H)。
1-2. 7-(苄氧基)-5-甲氧基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(前体化合物3)的合成(步骤- 2)
该步骤是进行图2所示的步骤-2的步骤，其详细描述如下。
在室温下向7-(苄氧基)-5-羟基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(前体化合物 2)(90g；0.261mol；1当量)在丙酮(900mL)中的经搅拌的悬浮液中添加固体KOH(43.9g；0.784mol；3当量)。将反应混合物升温至60℃并在60℃下滴加硫酸二甲酯(37.1mL；0.392mol；1.5当量)。将反应混合物在60℃下搅拌5h。通过TLC(1:1/PE:EtOAc；Rf～0.2)确定反应完成。使混合物冷却至室温，并用10％HCl水溶液酸化，直到将pH 调节至～2。通过过滤收集所得沉淀物并用水洗涤，抽干12小时，得到为黄色固体的7-(苄氧基)-5-甲氧基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(前体化合物 3)(产量：90g；96％)。
在以下条件下，通过LCMS-NMR分析所获得的7-(苄氧基)-5-甲氧基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(前体化合物3)，结果示于图5中。
LCMS：质量实测值；(359.0；M+1)。
方法：A-0.1％HCOOH的水溶液，B：ACN；流速：1.5mL/分钟； +ve模式；
柱：Zorbax扩展的C18(50×4.6mm，5μm)。
Rt(分钟)：2.94；面积％-97.85。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.04-8.06(m,2H),7.46-7.58(m, 5H),7.38-7.44(m,3H),7.00(d,J＝2.00Hz,1H),6.80(d,J＝1.60Hz, 1H),6.62(d,J＝2.00Hz,1H),5.27(s,2H),3.83(s,3H)。
1-3：1-(4-(苄氧基)-2-羟基-6-甲氧基苯基)乙-1-酮(前体化合物4)的合成(步 骤-3)
该步骤是进行图2所示的步骤-3的步骤，其详细描述如下。
在室温下向7-(苄氧基)-5-甲氧基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(前体化合物3)(90g；0.251mol；1当量)在氢氧化钠水溶液(50％；686mL；8.79 mol；35当量)中的经搅拌的悬浮液中添加吡啶(417.1mL；5.02mol； 20当量)。剧烈搅拌深棕色混合物，并用二甘醇(475mL，5.02mol， 20当量)逐滴处理。将混合物加热至100℃并搅拌2小时。通过TLC (1:1/PE:EtOAc；Rf～0.5)确认反应完成。将混合物冷却至0℃，并用 12N盐酸水溶液将pH调节至1。用乙酸乙酯(2×500mL)萃取水性部分。合并的有机相用饱和碳酸氢钠水溶液、水和盐水溶液洗涤。用硫酸钠干燥，并在减压下除去溶剂。将所得残余物重新溶解在二乙醚(700mL) 中，并通过过滤除去不溶的深色颗粒。真空浓缩滤液，得到为淡黄色固体的1-(4-(苄氧基)-2-羟基-6-甲氧基苯基)乙-1-酮(前体化合物4)(产量：70g；97％)。
在以下条件下，通过LCMS-NMR分析所获得的1-(4-(苄氧基)-2- 羟基-6-甲氧基苯基)乙-1-酮(前体化合物4)，结果示于图6中。
LCMS：质量实测值；(273.0；M+1)。
方法：A-0.1％HCOOH水溶液，B：ACN；流速：1.5mL/分钟； +ve模式。
柱：Zorbax扩展的C18(50×4.6mm，5μm)。
Rt(分钟)：3.15；面积％-93.79.
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.77(s,1H),7.35-7.47(m,5H), 6.18-6.21(d,2H),5.18(s,2H),3.86(s,3H),2.51(s,3H)。
1-4：1-(4-(苄氧基)-3,6-二羟基-2-甲氧基苯基)乙-1-酮(前体化合物5)的合成 (步骤-4)
该步骤是进行图2所示的步骤-4的步骤，其详细描述如下。
向1-(4-(苄氧基)-2-羟基-6-甲氧基苯基)乙-1-酮(前体化合物4)(30 g；0.110mol；1当量)在氢氧化四乙基铵水溶液(35％；632mL；1.43mol；13当量)中的经搅拌的悬浮液中滴加吡啶(69.4mL；0.836mol；7.6当量)。反应混合物变为澄清的深色溶液。在单独的烧瓶中，取过硫酸钾 (50.49g；0.187mol；1.7当量)的水(1L)溶液，并在室温下向该溶液中滴加上述反应混合物，并继续搅拌额外的24小时。通过TLC确认起始材料的消耗后，在0℃下将浓HCl加入至反应混合物中以将pH调节至1-2。使所得的褐色粘性残余物通过过滤，将水性滤液进一步用二乙醚(1×100mL)洗涤。
分离的水层用亚硫酸钠(11.09g；0.0.088mol；0.8当量)、浓 HCl(110mL)和苯(220mL)处理。将该反应混合物加热至95℃持续1小时。通过TLC(8:2/PE:EtOAc；Rf～0.3)确定反应完成。将反应混合物冷却至0℃，并用乙酸乙酯(2×300mL)萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，并在减压下除去溶剂。残余物通过用在石油醚中的乙酸乙酯(10％-12％)作为洗脱剂洗脱的硅胶(60-120目)柱色谱进行纯化，得到为黄色固体的1-(4-(苄氧基)-3,6-二羟基-2-甲氧基苯基) 乙-1-酮(前体化合物5)(产率：10g；31％)。
在以下条件下，通过LCMS-NMR分析所获得的1-(4-(苄氧基)-3,6- 二羟基-2-甲氧基苯基)乙-1-酮(前体化合物5)，结果示于图7中。
LCMS：质量实测值；(289.0；M+1)。
方法：A-0.1％HCOOH水溶液，B：ACN；流速：1.5mL/分钟； +ve模式。
柱：Zorbax扩展的C18(50×4.6mm，5μm)。
Rt(分钟)：2.68；面积％-91.01。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.76(s,1H),8.37(s,1H), 7.41-7.51(m,2H),7.31-7.38(m,3H),6.38(s,1H),5.21(s,2H),3.84(s, 3H),2.51(s,3H)。
1-5：1-(4-(苄氧基)-6-羟基-2,3-二甲氧基苯基)乙-1-酮(前体化合物6)的合成 (步骤-5)
该步骤是进行图2所示的步骤-5的步骤，其详细描述如下。
在室温下向1-(4-(苄氧基)-3,6-二羟基-2-甲氧基苯基)乙-1-酮(前体化合物5)(28g；0.097mol；1当量)在丙酮(300mL)中的经搅拌的悬浮液中添加K2CO3(20g；0.145mol；1.5当量)。将反应混合物升温至60 ℃，然后在60℃下滴加硫酸二甲酯(18.2mL；0.145mol；2当量)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。通过TLC确认反应完成后，将混合物冷却至室温，并通过过滤除去K2CO3，将滤饼用DCM洗涤几次，直到没有产物残留。将合并的滤液浓缩至干，并将所得残余物通过用在石油醚中的乙酸乙酯(8％-10％)作为洗脱剂洗脱的硅胶(60-120目)柱色谱纯化，得到为白色固体的1-(4-(苄氧基)-6-羟基-2,3-二甲氧基苯基)乙-1-酮(前体化合物6)(产量：25g；85％)。
在以下条件下，通过LCMS-NMR分析所获得的1-(4-(苄氧基)-6- 羟基-2,3-二甲氧基苯基)乙-1-酮(前体化合物6)，结果示于图8中。
LCMS：质量实测值；(303.0；M+1)。
方法：A-0.1％HCOOH水溶液，B：ACN；流速：1.5mL/分钟；+ve模式。
柱：Zorbax扩展的C18(50×4.6mm，5μm)。
Rt(分钟)：3.11；面积％-99.85。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.95(s,1H),7.36-7.48(m,5H), 6.45(s,1H),5.20(s,2H),3.96(s,3H),3.92(s,3H),2.51(s,3H)。
1-6：(E)-1-(4-(苄氧基)-6-羟基-2,3-二甲氧基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基) 丙-2-烯-1-酮(前体化合物7)的合成(步骤-6)
该步骤是进行图2所示的步骤-6的步骤，其详细描述如下。
在室温下向1-(4-(苄氧基)-6-羟基-2,3-二甲氧基苯基)乙-1-酮(前体化合物6)(25g；0.082mol；1当量)和3,4-二甲氧基苯甲醛(16.4g；0.099 mol；1.2当量)在乙醇(200mL)中的经搅拌的悬浮液中添加KOH(46g； 0.0.82mol；1当量)的水溶液。将反应混合物在室温下搅拌24小时。 TLC(6:4/PE:EtOAc；Rf～0.4)证实在24小时后70％-75％的产物形成以及未反应的起始材料是完整的。将混合物真空浓缩，并将残余物在硫酸氢钠水溶液和DCM之间分配。分离的有机相用水、盐水溶液洗涤，并用硫酸钠干燥。真空浓缩，并将得到的残余物用二乙醚(100mL) 制浆，过滤并抽干，得到为黄色固体的(E)-1-(4-(苄氧基)-6-羟基-2,3- 二甲氧基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(前体化合物7)(产量：23.0g；39％)。
在以下条件下，通过LCMS-NMR分析所获得的(E)-1-(4-(苄氧基)-6-羟基-2,3-二甲氧基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(前体化合物7)，结果示于图9中。
LCMS：质量实测值；(450.9；M+1).
方法：A-0.1％HCOOH水溶液，B：ACN；流速：1.5mL/分钟； +ve模式。
柱：Zorbax扩展的C18(50×4.6mm，5μm)。
Rt(分钟)：3.34；面积％-98.16.
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.96(s,1H),7.49-7.57(m,3H), 7.49-7.57(m,4H),7.29-7.39(m,2H),7.03(d,J＝8.40Hz,1H),6.47(s, 1H),5.19(s,2H),3.85(s,3H),3.83(s,3H),3.77(s,3H),3.74(s,3H)。
1-7：5-(苄氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)-6,7-二甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化 合物8)的合成(步骤-7)
该步骤是进行图3所示的步骤-7的步骤，其详细描述如下。
在室温下向(E)-1-(4-(苄氧基)-6-羟基-2,3-二甲氧基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(前体化合物7)(21g；0.0466mol；1当量)在异戊醇(300mL)中的经搅拌的悬浮液中添加二氧化硒(21g；0.466mol； 10当量)。将混合物加热至140℃并搅拌7小时。通过TLC(4:6/PE: EtOAc；Rf～0.2)确认反应完成后，将混合物冷却至室温，并通过在硅藻土垫上过滤除去得到的深色颗粒。所述垫用DCM洗涤，滤液在真空下浓缩。将得到的残余物用DCM(500mL)稀释，用NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤。用硫酸钠干燥，并在减压下除去溶剂。残余物通过用在石油醚中的乙酸乙酯(50％-60％)作为洗脱剂洗脱的硅胶(60-120目) 柱色谱纯化，得到为黄色固体的5-(苄氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)-6,7- 二甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化合物8)(产量：16g；76％)。
在以下条件下，通过LCMS-NMR分析所获得的5-(苄氧基)-2-(3,4- 二甲氧基苯基)-6,7-二甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化合物8)，结果示于图10中。
LCMS：质量实测值；(449.0；M+1)。
方法：A-0.1％HCOOH水溶液，B：ACN；流速：1.5mL/分钟； +ve模式。
柱：Zorbax扩展的C18(50×4.6mm，5μm)。
Rt(分钟)：2.83；面积％-98.62。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.54(d,J＝8.40Hz,1H),7.45 (t,J＝7.60Hz,2H),7.37(d,J＝8.40Hz,2H),7.13(d,J＝8.80Hz,2H), 6.82(s,1H),5.30(s,2H),3.89(s,3H),3.85(s,3H),3.82(s,3H),3.77(s, 3H)。
1-8：2-(3,4-二甲氧基苯基)-7-羟基-5,6-二甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化合物 9)的合成(步骤-8)
该步骤是进行图3所示的步骤-8的步骤，其详细描述如下。
向5-(苄氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)-6,7-二甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化合物8)(19g；0.0424mol；1当量)在氯仿(200mL)中的经搅拌的溶液中添加10％Pd/C(3.8g)，并使混合物在气球气氛下于室温氢化 6-7小时。通过TLC确认完成反应后，将催化剂通过硅藻土垫过滤。用在DCM中的20％MeOH洗涤该垫，并将合并的滤液真空浓缩，得到深棕色固体。将固体用乙酸乙酯(80mL)研磨，过滤并抽干，以获得为黄色固体的2-(3,4-二甲氧基苯基)-7-羟基-5,6-二甲氧基-4H-色烯-4- 酮(前体化合物9)(产量：11.0g；72％)。
在以下条件下，通过LCMS-NMR分析所获得的2-(3,4-二甲氧基苯基)-7-羟基-5,6-二甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化合物9)，结果示于图 11中。
LCMS：质量实测值；(359.0；M+1)。
方法：A-0.1％HCOOH水溶液，B：ACN；流速：1.5mL/分钟； +ve模式。
柱：Zorbax扩展的C18(50×4.6mm，5μm)。
Rt(分钟)：2.07；面积％-99.63。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.69(s,1H),7.61(d,J＝8.40 Hz,1H),7.51(s,1H),7.11(d,J＝8.40Hz,1H),6.90(s,1H),6.74(s,1H), 3.87(s,3H),3.84(s,3H),3.80(s,3H),3.77(s,3H)。
1-9：2-(3,4-二甲氧基苯基)-5,7-二羟基-6-甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化合物 10)的合成(步骤-9)
该步骤是进行图3所示的步骤-9的步骤，其详细描述如下。
在室温下向2-(3,4-二甲氧基苯基)-7-羟基-5,6-二甲氧基-4H-色烯 -4-酮(前体化合物9)(11g；0.0307mol；1当量)在乙腈(100mL)中的经搅拌的溶液中分批添加AlCl3(20.3g；0.153mol；5当量)，然后将混合物在90℃下回流2小时。通过TLC确定反应完成，并将溶剂蒸发至干。所得残余物用HCl水溶液(10％；200mL)和氯仿(200mL)处理，回流直到反应混合物澄清。在通过TLC(7:3/PE:EtOAc；Rf～0.4) 确认反应完成之后，将反应混合物冷却至室温并分离有机层。用 DCM(1×100mL)再次萃取水层，并将合并的有机层用水、盐水溶液洗涤。用硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过用DCM作为洗脱剂洗脱的硅胶(60-120目)柱色谱纯化，得到为黄色固体的2-(3,4-二甲氧基苯基)-5,7-二羟基-6-甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化合物10)(产量：7.0g； 66％)。
在以下条件下，通过LCMS-NMR分析所获得的2-(3,4-二甲氧基苯基)-5,7-二羟基-6-甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化合物10)，结果示于图 12中。
LCMS：质量实测值；(344.9；M+1)。
方法：A-0.1％HCOOH水溶液，B：ACN；流速：1.5mL/分钟； +ve模式。
柱：Zorbax扩展的C18(50×4.6mm，5μm)。
Rt(分钟)：2.44；面积％-98.32。
HPLC：97.64％。
流动相：A：0.1％TFA的水溶液，B：ACN；流速：1.0mL/分钟。
柱：Atlatis dC-18(4.6×250)mm；5u；
Rt(分钟)：12.68；面积％-97.64。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.05(s,1H),10.73(s,1H), 7.68-7.71(m,1H),7.58(d,J＝2.04Hz,1H),7.14(d,J＝8.64Hz,1H), 6.99(s,1H),6.65(s,1H),3.89(s,3H),3.86(s,3H),3.76(s,3H)。
13C-NMR(100MHz,DMSO-d6):δ182.6,163.8,157.8,153.1, 152.8,152.5,149.4,131.8,123.4,120.4,112.1,109.9,104.5,103.8,94.8, 60.4,56.3,56.2。
1-10：7-(2-溴乙氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)-5-羟基-6-甲氧基-4H-色烯-4-酮 的合成(前体化合物11)(步骤-10)
该步骤是进行图3所示的步骤-10的步骤，其详细描述如下。
向2-(3,4-二甲氧基苯基)-5,7-二羟基-6-甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化合物10)(10g，29mmol，1当量)和碳酸钾(12.04g，87.1mmol，3.0 当量)在THF(400mL，40体积)中的经搅拌的混合物中添加1,2-二溴乙烷(27.28g，145.2mol，5当量)和TBAI(1.05g，0.0029mol，0.1当量)，并将所得混合物在60℃下回流16小时。通过TLC分析确认反应完成后，在减压下除去THF，得到固体。将粗产物用过量的THF 和甲醇洗涤，以获得为固体的7-(2-溴乙氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)-5- 羟基-6-甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化合物11)(产量：8g；61％)。该产物无需任何进一步纯化用于下一步。
在以下条件下，通过LCMS-NMR分析所获得的7-(2-溴乙氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)-5-羟基-6-甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化合物 11)，结果示于图13中。
LCMS：质量实测值；(451.0；M+1)。
流动相：A：0.1％HCOOH的水溶液，B：ACN；流速：1.5mL/ 分钟；+ve模式。
柱：Atlantis dC18(50×4.6mm，5μm)。
Rt(分钟)：3.14；面积％-80.41。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.91(s,1H),7.73(dd,J＝5.6, 2.0Hz,1H),7.60(d,J＝2.0Hz,1H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),7.06(s, 1H),7.02(s,1H),4.51(t,J＝5.2Hz,2H),3.91(s,3H),3.85(s,3H),3.79 (s,3H)。
1-11：4-(2-((2-(3,4-二甲氧基苯基)-5-羟基-6-甲氧基-4-氧代-4H-色烯-7-基) 氧基)乙基)哌嗪-2-酮(化合物1)的合成(步骤-11)
该步骤是进行图3所示的步骤-11的步骤，其详细描述如下。
使7-(2-溴乙氧基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)-5-羟基-6-甲氧基-4H-色烯-4-酮(前体化合物11)(8g，17.7mmol，1.0当量)和哌嗪-2-酮(5.33g，53.3mmol，3.0当量)在乙腈(80mL)中的溶液在氮气氛下回流12小时。通过TLC确认反应完成后，在减压下除去乙腈。将所得胶状物与DCM 和石油醚一起研磨，得到固体，随后将其用甲醇、DCM和THF洗涤并充分干燥，得到4-(2-((2-(3,4-二甲氧基苯基)-5-羟基-6-甲氧基-4-氧代-4H-色烯-7-基)氧基)乙基)哌嗪-2-酮(化合物1；式2)(产量：3.2g； 41％)。
在以下条件下，通过LCMS-NMR分析所获得的4-(2-((2-(3,4-二甲氧基苯基)-5-羟基-6-甲氧基-4-氧代-4H-色烯-7-基)氧基)乙基)哌嗪-2- 酮(化合物1)，结果示于图14中。
LCMS:质量实测值(471.2；M+1).
流动相：A：0.1％甲酸的水溶液；B：ACN。
柱：Atlantis dC18(50×4.6mm，5μm)。
Rt(分钟)：1.515；面积％-95.488。
HPLC:97.03％.
流动相：A：0.1％TFA的水溶液；B：乙腈。
柱：Atlantis dC18(50×4.6mm，5μm)。
Rt(分钟)：9.74；面积％-97.03。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6):δ12.89(s,1H),7.75(br s.1H), 7.70(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.58(s,1H),7.13(d,J＝8.5Hz,1H),7.02 (d,J＝10.4Hz,2H),4.28(t,J＝5.2Hz,2H),3.89(s,3H),3.86(s,3H), 3.75(s,3H),3.17(br s,2H),3.11(s,2H),2.87(t,J＝5.2Hz,2H),2.73(t, J＝5.2Hz,2H)。
13C-NMR(100MHz,CDCl3):182.4,169.2,163.9,157.5,153.1, 152.9,152.2,149.1,132.7,123.4,119.9,111.0,108.6,106.1,104.1,91.4, 67.1,60.7,57.0,56.0,55.9,55.5,49.4,41.1。
实验例1：检测本发明的化合物抗纤维化的效果
1-1：使用间充质干细胞的效果的实验
为了检测本发明的化合物抗纤维化的效果，首先使用了 ONGHEPA1细胞(KCTC13086BP)，其为源自大鼠肝星状细胞(HSC)并能够无限增殖的间充质干细胞(MSC)。ONGHEPA1细胞的纤维化可以通过用TGF-β(转化生长因子β)或PDGF(血小板衍生生长因子)处理细胞的简单方法来诱导。
将ONGHEPA1细胞接种到培养基中，培养24小时，然后用TGF-β(5ng/ml)处理以诱导细胞纤维化。或者，将细胞用TGF-β和本发明的化合物(50μM，在DMSO中)共同处理并培养24小时。接着，用相差显微镜(200×)检测细胞的纤维化程度，即分化为肌成纤维细胞的程度。
在这方面，详细的实验方法遵循Kim等人的文章(Han-Soo Kim, Jun-Hwan Kim,JiYong Lee,Young-Min Yoon,Ik-Hwan Kim,Ho-Sup Yoon,Byung-Soo Youn.Smallmolecule-mediated reprogramming of epithelial-mesenchymal transition therebyblocking fibrosis。预印本首次于2017年2月16日在线发布；doi:http://dx.doi.org/ 10.1101/106591.)。
结果，如图15所示，用TGF-β处理的对照组分化为拉长的肌成纤维细胞，因此表现出典型的纤维化症状，而用TGF-β加本发明的化合物处理的测试组没有显示出纤维化症状，使其与正常对照组没有差异。
另外，为了检测上述作用是否可归因于抗上皮-间充质转化 (EMT)(以下称为“EMT”)的作用，通过免疫荧光染色和核染色(DAPI染色)检测每个测试组的细胞中的为EMT的代表性标志物的α-SMA(α- 平滑肌肌动蛋白)的表达。
结果，如图16所示，在用TGF-β处理的对照组中α-SMA的表达明显高，而在用TGF-β加本发明的化合物处理的测试组中α-SMA的表达被抑制，使其与正常对照组没有差异。
这些结果支持了本发明的化合物通过影响细胞的EMT而强烈抑制细胞向肌成纤维细胞的分化，因此可以有效地预防或治疗纤维化，特别是肝中发生的纤维化或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
1-2：使用分离自肺纤维化患者的成纤维细胞的效果的实验
将分离自肺纤维化患者的患病人肺成纤维细胞(DHLF)(Lonza， Swiss)接种到培养基中，培养24小时，然后用TGF-β(5ng/ml)处理以诱导纤维化。或者，将成纤维细胞用TGF-β和本发明的化合物(50μM，在DMSO中)共同处理并培养24、48或72小时。接着，用相差显微镜(200×)检测分化为肌成纤维细胞的程度。
结果，如图17所示，未处理组和用TGF-β处理的对照组分化为拉长的肌成纤维细胞，因此表现出典型的纤维化症状，而用TGF-β加本发明的化合物处理的测试组几乎没有或没有表现出纤维化症状，所述细胞的生长也受到抑制。
这些结果支持了本发明的化合物强烈抑制已经被编程为成为纤维状的成纤维细胞的生长和纤维化，并使该成纤维细胞恢复至正常细胞，表明其可以有效地预防或治疗纤维化，特别是诸如发生在肺部的特发性肺纤维化的纤维化。
1-3：使用肺腺癌细胞系的效果的实验
将A549细胞系(其为用作肺EMT相关研究模型的肺腺癌细胞系) 接种到培养基中，培养24小时，然后用TGF-β(5ng/ml)处理。或者，将A549细胞系用TGF-β和本发明的化合物(25μM或50μM，在DMSO 中)共同处理并培养24小时或48小时。接着，用相差显微镜(200×)检测细胞。
结果，如图18所示，用TGF-β处理的对照组分化为肌成纤维细胞，而用TGF-β加本发明的化合物处理的测试组的肌成纤维细胞分化被抑制。
此外，为了检测上述作用是否可归因于抗EMT作用，通过实时 PCR对每个测试组的细胞中为EMT的代表性标志物的Snail和波形蛋白的表达模式进行分析。
结果，如图19所示，在用TGF-β处理的对照组中这些标志物的表达显著增加，而在用TGF-β加本发明的化合物处理的测试组中这些标志物的表达被显著抑制。
这些结果支持了本发明的化合物通过影响细胞的EMT而强烈抑制细胞向肌成纤维细胞的分化，因此可以有效地预防或治疗纤维化，特别是诸如发生在肺部的特发性肺纤维化的纤维化。
实验例2：检测本发明的化合物的药代动力学
2-1：代谢稳定性
将本发明的化合物与大鼠肝微粒体和NADPH一起孵育，然后测量该化合物的消除率，从而确定该化合物的固有清除值(CLint值)。作为对照，使用维拉帕米(verapamil)和阿替洛尔(atenolol)。
结果，显示本发明的化合物在代谢上是稳定的，使其可以与阿替洛尔相当(参见下表1和图20)。
表1
Figure BDA0002651900240000261
2-2：在缓冲液中的溶解度
将本发明的化合物以1mg/ml的浓度添加至磷酸盐缓冲液(pH 7.4) 中并搅拌。16小时之后，通过过滤器过滤样品，并通过HPLC-UV分析上清液，从而确定溶解的化合物的含量。作为对照，使用咖啡因和己烯雌酚(diethyl stilbesterol)。
结果，显示本发明的化合物在缓冲液中的溶解度低于咖啡因的溶解度，但高于己烯雌酚的溶解度(参见下表2)。
表2
化合物名称 溶解度(μg/ml)
咖啡因 972.68
己烯雌酚 4.50
化合物1 9.59 
2-3：是否抑制CYP450
检测本发明的化合物是否抑制CYP3A4、CYP2D6和CYP2C9。作为对照，使用了酮康唑(ketoconazole)、奎尼丁(quinidine)和磺胺苯吡唑(sulfaphenazole)。
结果，显示本发明的化合物对CYP2C9具有轻微的抑制活性，但是该抑制活性低于对照磺胺苯吡唑的抑制活性，并且本发明的化合物对CYP3A4和CYP2D6的抑制活性很小或非常低(参见下表3)。
表3
  3A4-咪达唑仑 3A4-睾酮 2D6 2C9
化合物名称 IC50(μM) IC50(μM) IC50(μM) IC50(μM)
化合物1 >50 49.72 >50 5.54
酮康唑 0.027 0.023 na na
奎尼丁 na na 0.047 na
磺胺苯吡唑 na na na 0.40 
*na：没有活性
2-4：口服施用后的药代动力学
为了检测口服施用后的化合物的药代动力学，使用了大鼠模型。
将雄性SD大鼠(重250g至300g)分成几组，每组由3只大鼠组成，并以200mpk向其口服施用本发明的化合物，然后随时间的流逝测量血浆中存在的化合物的量。对于口服施用，用0.5％CMC和约1％吐温-80[吐温80：0.5％CMC水溶液＝1:99(v/v)]配制化合物并使用。
结果，显示本发明的化合物在口服施用后可以在体内迅速吸收(参见下表4和图21)。
表4
PK参数 化合物1(200mpk，po)
Cmax(ng/ml) 260.8±41.4
Tmax(h) 1±0
AUC(inf)(h*ng/ml) 426.5±67.7
AUC(0-24)(h*ng/ml) 420.1±69.3
AUC_％Extrap(obs) 1.6±0.7
MRT(inf)(h) 1.7±0.2
t1/2(h) 1.5±0.4 
*平均±SD(n＝3只大鼠/组)
比较实验例1：检测比较例抗纤维化的效果
以与上述实验例1-1中所述相同的方式检测以下比较化合物抗纤维化的效果。
结果，如图22至图24所示，与本发明的化合物不同，比较化合物不能通过细胞毒性诱导细胞死亡并且不能阻止细胞纤维化的进展。
Figure BDA0002651900240000281
比较化合物9
Figure BDA0002651900240000282
实验例3：制剂的药代动力学
为了有效地配制本发明的化合物，按照与上述实验例2-实验例4 中所述相同的方法检测口服施用后各种制剂的药代动力学。
结果，如下表5所示，当使用吐温80:0.5％CMC水溶液(1:99v/v) 配制化合物时(配制例2)，化合物的生物利用度低至1.4％，当使用NMP: 乙醇:PEG200:生理盐水(5:10:30:55v/v)配制化合物时(配制例4)，化合物的生物利用度约为3％。另一方面，显示了当使用NMP:PEG400: SOLUTOL HS:水(10:20:20:50v/v)配制化合物时(配制例3)，化合物的生物利用度大大提高至约9％，以及当使用30％HPCD水溶液配制化合物时(配制例5)，化合物的生物利用度也大大提高至约7％。
表5
Figure BDA0002651900240000291
*配制例1-使用100％DMSO作为i.v.溶媒
*配制例2-使用吐温80:0.5％CMC水溶液(1:99v/v)
*配制例3-使用NMP:PEG400:SOLUTOL HS:水(10:20:20:50 v/v)
*配制例4-使用NMP:乙醇:PEG200:生理盐水(5:10:30:55v/v)
*配制例5-使用30％(w/v)HPCD(羟丙基-β-环糊精)水溶液。
另外，如图25所示，与配制例3中的化合物相比，配制例2中的化合物在口服施用后在体内迅速吸收并且在血浆中长时间保留而没有被消除，表明其可以表现出持久的作用。
另外，通过其他方法尝试配制，但是在大多数情况下，存在的问题是化合物没有完全溶解并且溶液变得混浊。由于这个问题，这些方法被排除在额外的药代动力学研究之外。
实验例4：检测本发明的化合物在动物模型中抗纤维化的效果
将5周大的雄性C57BL/6小鼠(重18.2g至20.5g)(KOATECH，韩国)用作实验动物，并分成几组，每组由5只动物组成。
在SPF(无特异病原)、BSL(生物安全级别)2等级设施中，使用由聚砜材质制成的369L×156W×132H(mm)(符合EU,USA,UKGL)规格的饲养箱饲养实验动物。在隔离和适应阶段期间，每个饲养箱中的动物数量为2至3只，在实验阶段期间也为2至3只，并将饲养条件设置为温度22±2℃，相对湿度50.0±15.0％，通风周期为10至20次/ 小时，明暗周期(光周期)为12小时/天(07:00至19:00)，以及照明强度为150至300Lux。
根据Kremer、Laxer和Berkman等人的气管内滴注(IT)方法，通过将博来霉素溶液经由气管直接注入至肺中诱导肺纤维化。具体地，通过吸入70％N2O和30％O2气体和1.5％异氟烷将C57BL/6J小鼠麻醉，切开其前颈的皮肤，暴露其肌肉下的器官，然后使用眼科手术剪刀小心地切开。使用配备有带钝头的19号注射针的1mL注射器，一次将全部50μL博来霉素的蒸馏水溶液经由切开的器官直接注入肺中。注射后立即缝合切开的前颈皮肤，让小鼠从麻醉中恢复，然后将其饲养在普通的饲养笼中。博来霉素的施用使用视觉滴注器(visualinstillobot)进行，博来霉素-HCl 40μg/50μL一次施用，设定12天的肺纤维化的诱导期。
将本发明的化合物溶解在30％HPCD水溶液中后使用(配制例5)，基于其最近的体重算出每一个体的剂量。博来霉素施用后的12天，本发明的化合物每天施用一次(一周5次)，持续2周。作为对照，以相同方式施用吡非尼酮(其为特发性肺纤维化的治疗剂)。
检测在施用本发明的化合物或吡非尼酮后0-15天的体重变化，并将结果示于图26中。
化合物施用后第15天，处死小鼠，然后解剖每只小鼠的右肺，并测量其重量。结果，显示由于通过施用博来霉素诱导肺纤维化，因此右肺的重量增加，并且本发明的化合物显著抑制了右肺重量的这种增加(参见图27)。特别地，应注意的是，与以50mpk或100mpk施用的组中的化合物的抑制作用相比，以10mpk施用的组中的化合物的抑制作用最高，并且也比以100mpk施用吡非尼酮的组中的抑制作用更高。
使用已知方法测量在解剖的右肺中羟脯氨酸(HP)和胶原的量。结果，显示由于通过施用博来霉素诱导肺纤维化，在解剖的右肺中羟脯氨酸(HP)和胶原的量增加，并且本发明的化合物显著抑制了这种增加 (参见图28和图29)。羟脯氨酸的测量结果表明，在以100mpk施用的组中，本发明的化合物的抑制作用最高，并且胶原的测量结果表明，在以100mpk施用的组中，本发明的化合物的抑制作用最高，与右肺重量的测量结果一样。
使用已知方法进行解剖的左肺组织的组织病理学胶原形态计量 (计算通过肺组织样品的天狼猩红染色获得的光学图像中的胶原的面积)。结果，显示由于通过施用博来霉素诱导肺纤维化，观察到胶原的量增加，并且本发明的化合物显著抑制了这种增加(参见下表6和图 30)。
表6
Figure BDA0002651900240000311
NS：不显著
测量每只处死小鼠的血浆和肺中存在的化合物的量(在处死前1小时最后施用每种化合物)。结果，显示在施用吡非尼酮的组中，血浆和肺中化合物的浓度高，而在施用本发明的化合物的组中，化合物的浓度相对非常低(参见图31和32)。这表明与吡非尼酮相比，尽管本发明的化合物以远比吡非尼酮更低的浓度存在于血浆和肺中，但是如上所述，其表现出优异的纤维化抑制作用，支持了本发明的化合物的优越性。如果试图以各种方式配制本发明的化合物，则预期本发明的化合物即使在较低的浓度下也可以有效地治疗纤维化。
通过H&E和天狼猩红染色检测使用已知方法解剖的左肺组织的病理状况。结果，显示由于通过施用博来霉素诱导肺纤维化，肺组织中细胞和蛋白质的密度增加，并且观察到组织纤维化和炎性细胞侵袭，但是本发明的化合物显著抑制了这种纤维化症状(参见图33至图38)。特别地，注意到与以其他浓度施用的组中的抑制作用相比，以10mpk 施用的组中的化合物的抑制作用最高。
为了检测该实验中每种治疗对肝的作用，解剖每只处死小鼠的肝，并通过H&E染色检测肝组织的病理状况。结果，显示由于博来霉素的施用出现了肝毒性症状，例如肝组织侵袭，并且以50mpk和100mpk 施用吡非尼酮的组和施用本发明的化合物的组也显示了由于博莱霉素引起的肝毒性症状，但是，即使其用博来霉素处理，以10mpk施用本发明的化合物的组也表现出与正常肝组织相同的状况(参见图39至 41)。这表明当以10mpk施用本发明的化合物时，其可以表现出对肝毒性的预防、减轻或治疗作用。
实验例5：检测本发明的化合物在动物模型中抗非酒精性脂肪性肝炎的作用
将作为非酒精性脂肪性肝炎动物模型的STAM小鼠((SMC Laboratories,Inc.，日本)用作实验动物。这些动物模型在出生后立即施用链脲佐菌素，并在3周后用高脂饮食饲喂。然后，在小鼠模型中，在6至9周发生非酒精性脂肪性肝炎，并且在9至12周内发生肝纤维化、肝硬化和肝癌。
施用链脲佐菌素后历时6至9周，将本发明的化合物溶解在吐温 80与0.5％CMC水溶液(1:99(v/v)的混合溶液中(配制例2)，将其每天一次口服施用至动物模型(一周五次)。作为对照，以相同方式施用替米沙坦和OCA(奥贝胆酸)(obeticholic acid)。
施用链脲佐菌素后第8周(在3周的化合物的施用后的一个时间点) 处死小鼠，解剖每只小鼠的肝脏，通过肝组织的天狼猩红染色观察到炎性细胞的侵袭，通过天狼猩红染色观察到肝组织的纤维化(参见图 42)。另外，测量观察到的炎症、纤维化、肝细胞肿胀和脂肪积累的程度，进行数据整合，并且通过t检验对NAFLD(非酒精性脂肪肝疾病) 活性评分进行统计学处理。结果，显示在以50mpk施用本发明的化合物的组和以30mpk施用替米沙坦的组中出现统计学意义的抗NASH 作用(参见图43)。
[工业应用性]
本发明的新型化合物可以有效地预防、减轻或治疗纤维化，以及有效地减轻或治疗非酒精性脂肪性肝炎。因此，其可以用作疾病的治疗剂或功能性食品。

Claims (8)

1.由以下式1表示的化合物或其药学上可接受的盐：
式1
Figure FDA0004086663680000011
其中R1为甲基；
R2为氢；
R4为羟基或甲氧基；以及
R3和R5各自独立地为氢、羟基、或甲氧基。
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物由以下式2至式5中的任一个表示：
式2
Figure FDA0004086663680000012
式3
Figure FDA0004086663680000013
式4
Figure FDA0004086663680000014
式5
Figure FDA0004086663680000021
3.用于预防或治疗纤维化的药物组合物，其包含权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其中所述纤维化选自特发性肺纤维化、骨髓纤维化、肝纤维化和肾纤维化中的任一种。
5.用于预防或减轻纤维化的食品组合物，所述食品组合物包含权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
6.根据权利要求5所述的食品组合物，其中所述纤维化选自特发性肺纤维化、骨髓纤维化、肝纤维化和肾纤维化中的任一种。
7.用于治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的药物组合物，其包含权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
8.用于减轻非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的食品组合物，其包含权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102091464B1 (ko) * 2019-08-30 2020-03-20 (주)오스티오뉴로젠 항염증용 조성물
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CN114920755B (zh) * 2022-02-07 2023-11-17 天津中医药大学 具有黄酮母核的化合物及其在制备cdk1抑制剂中的用途

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006004358A1 (en) * 2004-07-03 2006-01-12 Dong-A Pharm. Co., Ltd. Dicoumarol-removed extract of artemisia, preparation and pharmaceutical compositions thereof
CN101518558A (zh) * 2008-02-14 2009-09-02 Gl医药科技公司 含有高含量异泽兰黄素的蒿提取物
CN103917232A (zh) * 2011-09-29 2014-07-09 庆熙大学校产学协力团 异泽兰黄素的新用途

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101135574B1 (ko) 2004-12-31 2012-04-23 한국화학연구원 간섬유화 및 간경화 억제 활성을 나타내는ν-(2,2-이중치환-2η-크로멘-6-일)싸이오우레아 유도체
KR101127158B1 (ko) 2004-12-31 2012-03-20 한국화학연구원 간섬유화 및 간경화 억제 활성을 나타내는ｎ-(2,2-이중치환-2ｈ-크로멘-6-일)-ｎ,ｎ'-이중치환구아니딘 유도체
KR20060121998A (ko) * 2005-05-24 2006-11-30 재단법인서울대학교산학협력재단 유파틸린을 포함하는 유방암 억제용 조성물
KR101627602B1 (ko) 2009-07-29 2016-06-14 한국화학연구원 2-메틸-2ｈ-크로멘-2-카르복사미드 화합물
KR101248295B1 (ko) 2010-04-15 2013-03-27 일동제약주식회사 신규한 크로멘 유도체 화합물, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 조성물
KR20160121998A (ko) * 2015-04-13 2016-10-21 울산과학기술원 이차 전지 및 파우치형 이차 전지
WO2017146309A1 (ko) * 2016-02-22 2017-08-31 (주)오스티오뉴로젠 유파틸린의 상피간엽이행 억제 활성을 이용한 섬유증 예방 및 치료용 약제학적 조성물로서의 새로운 용도

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006004358A1 (en) * 2004-07-03 2006-01-12 Dong-A Pharm. Co., Ltd. Dicoumarol-removed extract of artemisia, preparation and pharmaceutical compositions thereof
CN101518558A (zh) * 2008-02-14 2009-09-02 Gl医药科技公司 含有高含量异泽兰黄素的蒿提取物
CN103917232A (zh) * 2011-09-29 2014-07-09 庆熙大学校产学协力团 异泽兰黄素的新用途

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DHF-18, a new synthetic flavonoid, induced a mitochondrial-mediated apoptosis of hepatocarcinoma cells in vivo and in vitro;Lin-bo Zhang et al.;《European Journal of Pharmacology》;20101118;第651卷(第1-3期);第33-40页 *
In vitro biological evaluation of novel 7-O-dialkylaminoalkyl cytotoxic pectolinarigenin derivatives against a panel of human cancer cell lines;Marco Bonesi et al.;《Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters》;20080912;第18卷(第20期);第5431-5434页 *

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