CN111825656A

CN111825656A - 蛋白质精氨酸甲基转移酶5(prmt5)的抑制剂、其药学产品及其方法

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Publication number: CN111825656A
Application number: CN201910297684.9A
Authority: CN
Inventors: 刘浏; 李进; 杨民民
Original assignee: Pharmablock Sciences (nanjing) Inc
Current assignee: Nanjing Maisheng Technology Co ltd
Priority date: 2019-04-15
Filing date: 2019-04-15
Publication date: 2020-10-27
Anticipated expiration: 2039-04-15
Also published as: CN111825656B

Abstract

本发明提供式(I)的PRMT5抑制剂，其中R₁是非氢单价基团；W是直接键或‑NH‑；T、U和V彼此独立地选自C和N；R₂是H或卤素；m是1或2；X是碳、氮或氧；Y是C或N；Z是直接键或碳；R₃是H、非氢单价基团、氧代基、二价螺环形成基团或二价桥形成基团；n是1或2；并且

代表单键或双键。还提供包含PRMT5抑制剂的药物产品及其在治疗增殖性病症例如癌症、代谢病症、血液病症、自身免疫疾病和炎性疾病中的用途。

Description

蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)的抑制剂、其药学产品及其方法

技术领域

本发明总体涉及蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)的抑制剂、其药学产品及其方法。虽然本发明将通过在治疗乳腺癌、肝癌、肺癌、胰腺癌、脑癌以及与淋巴瘤细胞相关联的病症或疾病中施加一类化合物来进行展示、解释和例示，但是应理解，本发明也可包括在治疗与PRMT5相关的其他病症或疾病中施加所述类化合物及其衍生物，所述其他病症或疾病例如前列腺癌、结肠癌、卵巢癌、皮肤癌、睾丸癌、子宫癌、宫颈癌、食道癌、膀胱癌、胃癌、表皮样癌、造血细胞癌、白血病诸如急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞白血病、毛细胞白血病、脊髓发育不良、骨髓增生性病症、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、肥大细胞增多症、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、多发性骨髓瘤(MM)、脊髓发育不良综合征(MDS)、血红蛋白病诸如β地中海贫血和镰状细胞病(SCD)、淋巴瘤、成神经管细胞瘤、直肠腺癌、结肠腺癌、腺样囊性癌、肺腺癌、头颈鳞状细胞癌、肝细胞癌、肾细胞癌、少突神经胶质瘤、卵巢透明细胞癌、卵巢浆液性囊腺癌、黑素瘤等。

背景技术

基因表达的表观遗传调控是蛋白质产生和细胞分化的重要生物决定因素，并且它在许多人类病症和疾病中发挥显著的致病性作用。通常，表观遗传调控涉及遗传物质的可遗传修饰而不改变其核苷酸序列，并且它通过选择性和可逆地修饰控制染色质的转录活性与非活性状态之间的构象转变的DNA和蛋白质(例如，组蛋白)来介导。这些共价修饰可通过酶来控制，其中许多酶与可导致人类疾病的特定遗传改变相关联。例如，蛋白质精氨酸的甲基化由甲基转移酶的蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT)家族催化。这种甲基化是一种常见的翻译后修饰，其调控许多细胞过程，包括基因转录、mRNA剪接、DNA修复、蛋白质细胞定位、细胞命运决定和信号传导。存在三种类型的甲基-精氨酸种类：ωNG单甲基精氨酸(MMA)、ωNG,NG不对称二甲基精氨酸(ADMA)和ωNG,N'G对称二甲基精氨酸(SDMA)。

存在九种在人类基因组中注释的PRMT。这些酶中的大多数是I型酶(PRMT-1、-2、-3、-4、-6、-8)，其能够进行精氨酸的单甲基化和不对称二甲基化，其中S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体。PRMT-5、-7和-9是II型酶，其催化精氨酸的对称二甲基化。每种PRMT种类都具有七个β链甲基转移酶的特征基序，以及PRMT亚家族特有的额外“双E”和“THW”序列基序。

PRMT5是一般性转录阻遏物，其与包括BRG1和hBRM、Blimp1和Snail的多种转录因子和阻遏络合物共同作用。一旦被募集到启动子，此酶就对称地使H3R8和H4R3二甲基化。重要的是，H4R3位点是PRMT1甲基化(ADMA)的主要靶标，并且通常被认为是转录激活标记。因此，H4R3me2s(抑制性；me2s指示SDMA修饰)和H4R3me2a(活性；me2a指示ADMA修饰)标记两者均在体内产生。PRMT5对于H3R8和H4R3的特异性可通过其与COPR5的相互作用而改变，并且这可能在决定PRMT5辅阻遏物状态中发挥重要作用。

染色质修饰酶可在诸如增殖性病症、代谢病症和血液病症的疾病中发挥作用。例如，PRMT在癌症中发挥重要作用。已经在人类癌症中鉴定到PRMT的异常表达，并且PRMT被认为是治疗靶标。例如，前列腺癌中组蛋白修饰的全局分析显示组蛋白H4R3的二甲基化与增加的等级正相关，并且这些变化对于临床结果具有预测性。

已经显示PRMT5水平在一组淋巴样癌细胞系以及套细胞淋巴瘤临床样品中升高。PRMT5与参与各种细胞过程的多种底物相互作用，所述细胞过程包括RNA加工、信号转导和转录调控。PRMT5可直接修饰组蛋白H3和H4，从而引起基因表达的阻遏。PRMT5过表达可通过直接阻遏肿瘤抑制基因来刺激细胞生长并诱导转化。除其在转录和翻译中的致癌功能之外，转录因子MYC还保护适当的前信使RNA剪接作为淋巴瘤形成中的关键步骤。

酶甲基硫代腺苷磷酸化酶(MTAP)的丧失赋予对PRMT5及其结合配偶体WDR77的选择性依赖性。由于其与常常缺失的肿瘤抑制基因CDKN2A接近，MTAP经常丧失。携带MTAP缺失的细胞具有增加的甲基硫代腺苷(MTA，MTAP切割的代谢物)的细胞内浓度。此外，MTA特异性地抑制PRMT5酶活性。与表达同基因MTAP的对应物相比，施用MTA或小分子PRMT5抑制剂显示对无MTAP癌细胞系的细胞活力的优先损害。已揭示，PRMT5在通过常见的“乘客”基因组改变而增强的多种癌症谱系中具有潜在的脆弱性。

PRMT5还在血红蛋白病中发挥作用。从出生开始的人类珠蛋白基因亚型从胎儿到成人的发育转换预示着血红蛋白病、b-地中海贫血和镰状细胞病(SCD)的发作。观察到增加的成人珠蛋白基因表达(在遗传性持续性胎儿血红蛋白综合征[HPFH]突变的情况下)显著改善地中海贫血和SCD的临床严重性促使寻找逆转γ-珠蛋白基因沉默的治疗策略。γ-基因沉默的核心是DNA甲基化，其标记侧接成人骨髓红细胞样细胞中基因转录起始位点的关键CpG双核苷酸。已显示，这些标记由于PRMT5将DNA甲基转移酶DNMT3A募集到γ-启动子而建立。PRMT5介导的组蛋白H4R3甲基化募集DNMT3A，从而在基因沉默中将组蛋白和DNA甲基化联系在一起。PRMT5诱导抑制性组蛋白标记H4R3me2s，其充当DNMT3A直接结合和随后的DNA甲基化的模板。PRMT5结合或其酶活性的丧失导致CpG双核苷酸的去甲基化和基因激活。除H4R3me2s标记和DNA甲基化之外，PRMT5与γ-启动子的结合及其酶活性对于在γ-启动子上组装多蛋白络合物是必需的，其诱导一系列协调的抑制性表观遗传标记。此络合物的破坏导致γ基因表达的再激活。这些观察为开发PRMT5抑制剂作为地中海贫血和SCD的靶向疗法提供基础。

因此，需要开发能够抑制PRMT5活性和治疗各种PRMT5相关病症和疾病的小分子。

发明内容

本发明的一方面提供一种由式(I)表示的化合物，或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、异构体或水合物，呈任何结晶形式或无定形形式。在式(I)中，R₁可以是任何合适的非氢单价基团；W可以是直接键或-NH-；T、U和V彼此独立地选自碳和氮；R₂是氢或卤素；m是1或2；X是碳、氮或氧；Y是碳或氮；Z是直接键或碳；R₃是氢、非氢单价基团、氧代基或羰基(O＝)、二价螺环形成基团或二价桥形成基团；n是1或2；并且

代表单键或双键。

本发明的另一方面提供一种药物组合物，其包含式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、水合物或异构体，呈任何结晶形式或无定形形式；以及药学上可接受的赋形剂。

本发明的又一方面提供一种试剂盒或包装药物，其包括式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、水合物或异构体，呈任何结晶形式或无定形形式；以及其使用说明。

本发明的再一方面提供一种抑制PRMT5酶的方法，其包括：使PRMT5酶与有效量的以下物质接触：式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、水合物或异构体，呈任何结晶形式或无定形形式。

本发明的另一方面提供一种改变基因表达或改变转录的方法，其包括在体外或在受试者中使细胞与有效量的以下物质接触：式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、水合物或异构体，呈任何结晶形式或无定形形式。

本发明的另一方面提供一种治疗由PRMT5介导的或与异常PRMT5活性相关联的病症或疾病的方法的方法，其包括向有需要的受试者施用治疗有效量的以下物质：式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、水合物或异构体，呈任何结晶形式或无定形形式；或其药物组合物。所述病症或疾病可以是增殖性病症诸如癌症，代谢病症诸如糖尿病或肥胖症，或血液病症诸如血红蛋白病，例如镰状细胞贫血病或β-地中海贫血。

结合附图，本发明的以上特征和优点以及其他特征和优点容易从以下对用于实现本发明的最佳模式的具体实施方式显而易见。

附图说明

本发明在附图的各图中以举例而非限制的方式展示，并且附图中的相似参考数字指代相似元件。

图1示出使用根据本发明的示例性实施方案的式(I)的化合物在套细胞淋巴瘤(MCL)Z-138异种移植物功效研究中治疗之后的肿瘤体积变化。

具体实施方式

在以下描述中，出于解释的目的，阐述许多具体细节以便提供对本发明的透彻理解。然而，对于本领域技术人员显而易见的是，在没有这些具体细节或具有其等同布置的情况下可实践本发明。

在本说明书中的各处，本发明化合物的取代基是以组或范围形式公开。特别旨在本发明包括这些组和范围的成员的各个及每一个别子组合。例如，术语“C_1-6烷基”特别旨在包括C₁烷基(甲基)、C₂烷基(乙基)、C₃烷基、C₄烷基、C₅烷基和C₆烷基。在本文公开数值范围的情况下，除非另有说明，否则此范围是连续的，包括范围的最小值和最大值以及这些最小值与最大值之间的每个值。此外，在范围是指整数的情况下，仅包括从此范围的最小值到最大值并且包括最大值的整数。另外，在提供多个范围来描述特征或特性的情况下，可组合这些范围。

本发明提供一种式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物或水合物。

在式(I)中，R₃可以是氧代基或羰基O＝、二价螺环形成基团或二价桥形成基团等。例如，在本发明的示例性化合物中，R₃可以是甲基和氧代基(n＝2)，即4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-1-甲基-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢-1H-苯并[e][1,4]二氮杂-2,5-二酮(44)：

二价螺环形成基团定义为包含可结合到同一环成员原子的两个原子(二价)的基团。例如，R₃是二价螺环形成基团，诸如亚乙基螺环形成基团-CH₂CH₂-，其中两个碳原子彼此可结合到同一环成员原子，诸如C。出于说明的目的，本发明的两种特定化合物包括这种亚乙基螺环形成基团-CH₂CH₂-，即2'-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7'-(哒嗪-4-基氨基)-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-1'-酮(35)；和7'-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2'-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-1'-酮(53)：

二价桥形成基团定义为可结合到两个环成员原子的基团。两个环成员原子可彼此相邻(稠合)，或者在环中彼此不相邻(桥连)。例如，在本发明的化合物中，R₃是二价桥形成基团，诸如亚甲基桥形成基团-CH₂-，其可结合或连接到两个环成员原子，诸如两个碳原子，例如8-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-2,3,4,5-四氢-1H-3,5-桥亚甲基苯并[c]氮杂-1-酮(57)，其中“3,5-桥亚甲基”指示位置3处的C原子与位置5处的C原子之间的二价桥形成基团-CH₂-：

在式(I)中，R₁或R₃可选自任何合适的非氢单价基团。如本文所用，术语“非氢单价基团”可包括但不限于以下8个种类的基团。

种类(1)：卤代基或卤素基团，即-F、-Cl、-Br或-I；-CN、-NO₂、-N₃、-SO₂H、-SO₃H、-OH、-OR、-ONR₂、-NR₂、-NR₃ ⁺X^-、-N(OR)R、-SH、-SR、-SSR、-C(＝O)R、-CO₂H、-CHO、-C(OR)₂、-CO₂R、-OC(＝O)R、-OCO₂R、-C(＝O)NR₂、-OC(＝O)NR₂、-NRC(＝O)R、-NRCO₂R、-NRC(＝O)NR₂、-C(＝NR)R、-C(＝NR)OR、-OC(＝NR)R、-OC(＝NR)OR、-C(＝NR)NR₂、-OC(＝NR)NR₂、-NRC(＝NR)NR₂、-C(＝O)NRSO₂R、-NRSO₂R、-SO₂NR₂、-SO₂R、-SO₂OR、-OSO₂R、-S(＝O)R、-OS(＝O)R、-SiR₃、-OSiR₃、-C(＝S)NR₂、-C(＝O)SR、-C(＝S)SR、-SC(＝S)SR、-SC(＝O)SR、-OC(＝O)SR、-SC(＝O)OR、-SC(＝O)R、-P(＝O)₂R、-OP(＝O)₂R、-P(＝O)R₂、-OP(＝O)R₂、-OP(＝O)(OR)₂、-P(＝O)NR₂、-OP(＝O)₂NR₂、-P(＝O)(NR)₂、-OP(＝O)(NR)₂、-NRP(＝O)(OR)₂、-NRP(＝O)(NR)₂、-PR₂、-PR₃、-OPR₂、-OPR₃、-BR₂、-B(OR)₂、-BR(OR)等。R彼此独立地是任何合适的基团，例如烷基基团。例如，-OR可以是烷氧基或烷基氧基基团，即-O-烷基基团。术语C_1-6烷氧基/烷基氧基是-O-(C_1-6烷基)基团。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如，正丙氧基和异丙氧基)、叔丁氧基等。烷氧基或烷基氧基基团任选地可被1个或多个(例如，1至5个)合适的取代基取代。

种类(2)：烷基基团，即饱和脂族烃，包括直链和支链。在一些实施方案中，烷基基团具有1至20个碳原子、1至10个碳原子、1至6个碳原子或1至4个碳原子。例如，术语“C_1-6烷基”是指1至6个碳原子的直链或支链基团(例如，甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基或正己基)。烷基基团任选地可被一个或多个(例如，1至5个)合适的取代基取代。

种类(3)：烯基基团，即具有至少一个碳-碳双键的脂族烃，包括具有至少一个碳-碳双键的直链和支链。在一些实施方案中，烯基基团具有2至20个碳原子、2至10个碳原子、2至6个碳原子、3至6个碳原子或2至4个碳原子。例如，术语“C_2-6烯基”包括2至6个碳原子的直链或支链不饱和基团(具有至少一个碳-碳双键)，包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基(烯丙基)、异丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基等。烯基基团任选地可被一个或多个(例如，1至5个)合适的取代基取代。烯基基团可以纯E形式、纯Z形式或其任何混合物存在。

种类(4)：炔基基团，即具有至少一个碳-碳三键的脂族烃，包括具有至少一个碳-碳三键的直链和支链。在一些实施方案中，炔基基团具有2至20、2至10、2至6、或3至6个碳原子。例如，“C_2-6炔基”包括具有2至6个碳原子的如上定义的直链或支链烃链炔基基团。炔基基团任选地可被一个或多个(例如，1至5个)合适的取代基取代。

种类(5)：环烷基基团可以是饱和或不饱和、非芳族、单环或多环(诸如双环)烃环(例如，单环，诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基，或双环，包括螺、稠合或桥连系统(诸如双环[1.1.1]戊烷基、双环[2.2.1]庚烷基、双环[3.2.1]辛烷基或双环[5.2.0]壬烷基、十氢化萘基等)。环烷基基团具有3至15个碳原子。在一些实施方案中，环烷基可任选地含有一个、两个或更多个非累积非芳族双键或三键和/或一至三个氧代基。在一些实施方案中，双环烷基基团具有6至14个碳原子。例如，“C_3-14环烷基”包括3至14个成环碳原子的饱和或不饱和、非芳族、单环或多环(诸如双环)烃环(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、双环[1.1.1]戊烷基或环癸基)。环烷基基团任选地可被1个或多个(例如，1至5个)合适的取代基取代。

种类(6)：芳基基团，即具有共轭π电子系统的全碳单环或稠环多环芳族基团。芳基基团在一个或多个环中可具有6至10个碳原子。最常见的是，芳基基团在环中具有6个碳原子。例如，C_6-10芳基是含有6至10个碳原子的芳族基团，例如苯基或萘基。芳基基团任选地可被1个或多个(例如，1至5个)合适的取代基取代。

种类(7)：杂芳基基团，即在至少一个环中具有一个或多个杂原子环成员(成环原子)的单环或稠环多环芳族杂环基团，所述杂原子环成员彼此独立地选自O、S和N。杂芳基基团具有5至14个成环原子，包括1至13个碳原子和1至8个选自O、S和N的杂原子。在一些实施方案中，杂芳基基团具有5至10个成环原子，包括一至四个杂原子。杂芳基基团还可含有一至三个氧代或硫羰(即，＝S)基团。在一些实施方案中，杂芳基基团具有5至8个成环原子，包括一个、两个或三个杂原子。例如，5元杂芳基基团是如上定义的单环杂芳基基团，在单环杂芳基环中具有5个成环原子；6元杂芳基是如上定义的单环杂芳基基团，在单环杂芳基环中具有6个成环原子；5～10元杂芳基是如上定义的单环或双环杂芳基基团，在单环或双环杂芳基环中具有5、6、7、8、9或10个成环原子。杂芳基基团任选地可以被1个或多个(例如，1至5个)合适的取代基取代。单环杂芳基的实例包括具有5个成环原子(包括一至三个杂原子)的那些或具有6个成环原子(包括一个、两个或三个氮杂原子)的那些。稠合双环杂芳基的实例包括两个稠合的5和/或6元单环，包含一至四个杂原子。杂芳基基团的实例包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噻吩基、呋喃基、咪唑基、吡咯基、噁唑基(例如，1,3-噁唑基、1,2-噁唑基)、噻唑基(例如，1,2-噻唑基、1,3-噻唑基)、吡唑基(例如，吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基)、四唑基、三唑基(例如，1,2,3-三唑基，1,2,4-三唑基)、噁二唑基(例如，1,2,3-噁二唑基)、噻二唑基(例如，1,3,4-噻二唑基)、喹啉基、异喹啉基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、1H-咪唑并[4,5-c]吡啶基、咪唑[1,2-a]吡啶基、1H-吡咯并[3,2-c]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡嗪基、咪唑并[2,1-c][1,2,4]三嗪基、咪唑并[1,5-a]吡嗪基、咪唑并[1,2-a]嘧啶基、1H-吲唑基、9H-嘌呤基、咪唑并[1,2-a]嘧啶基、[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶基、[1,2,4]三唑并[4,3-b]哒嗪基、异噁唑并[5,4-c]哒嗪基、异噁唑并[3,4-c]哒嗪基、吡啶酮、嘧啶酮、吡嗪酮、嘧啶二酮、1H-咪唑-2(3H)-酮、1H-吡咯-2,5-二酮、3-氧代-2H-哒嗪基、1H-2-氧代-嘧啶基、1H-2-氧代-吡啶基、2,4(1H,3H)-二氧代-嘧啶基、1H-2-氧代-吡嗪基等。

种类(8)：杂环烷基基团，即单环或多环(包括2个或更多个稠合在一起的环，包括螺、稠合或桥连系统，例如双环系统)、饱和或不饱和的非芳族4至15元环系统，包含1至14个成环碳原子和1至10个成环杂原子，所述成环杂原子彼此独立地选自O、S、N、P和B。杂环烷基基团还可任选地含有一个或多个氧代(即，＝O)或硫羰(即，＝S)基团。例如，4至12元杂环烷基是单环或多环、饱和或不饱和的非芳族4至12元环系统，其包含一个或多个成环杂原子。此类杂环烷基环的实例包括氮杂环丁烷基、四氢呋喃基、咪唑烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、噁唑烷基、噻唑烷基、吡唑烷基、硫代吗啉基、四氢噻嗪基、四氢噻二嗪基、吗啉基、氧杂环丁烷基、四氢二嗪基、噁嗪基、氧杂噻嗪基、奎宁环基、苯并二氢吡喃基、异苯并二氢吡喃基、苯并噁嗪基、2-氧杂螺[3.3]庚基{例如，2-氧杂螺[3.3]庚-6-基}、7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-1-基、7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基、7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-基、2-氮杂双环[2.2.1]庚-3-酮-2-基、3-氮杂双环[3.1.0]己烷基、3-氮杂双环[4.1.0]庚烷基等。杂环烷基环的另外实例包括四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基，四氢吡喃基(例如，四氢-2H-吡喃-4-基)、咪唑烷-1-基、咪唑烷-2-基、咪唑烷-4-基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、哌啶-1-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、哌嗪-1-基、哌嗪-2-基，1,3-噁唑烷-3-基、1,4-氧氮杂环庚烷-1-基、异噻唑烷基、1,3-噻唑烷-3-基、1,2-吡唑烷-2-基、1,2-四氢噻嗪-2-基、1,3-噻嗪-3-基、1,2-四氢二嗪-2-基、1,3-四氢二嗪-1-基、1,4-噁嗪-4-基、噁唑烷酮基、2-氧代-哌啶基(例如，2-氧代-哌啶-1-基)、2-氧代氮杂环庚烷-3-基等。芳族稠合杂环烷基基团的一些实例包括二氢吲哚基、异二氢吲哚基、异吲哚啉-1-酮-3-基、5,7-二氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基、6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-d]嘧啶-6-基、4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶-5-基、5,6-二氢噻吩并[2,3-c]吡啶-7(4H)-酮-5-基、1,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基和3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮-3-基基团。杂环烷基基团任选地被1个或多个(例如，1至5个)合适的取代基取代。杂环烷基基团的实例包括5或6元单环以及9或10元稠合双环。

术语“非氢单价基团”可包括选自以上8类的任何数量的基团的组合。两种基团的组合意指一种基团(G1)被另一种基团(G2)取代以形成新的基团-G1-G2。三种基团的组合意指第一基团(G1)被第二基团(G2)取代，所述第二基团被第三基团(G3)取代，从而形成新的基团-G1-G2-G3。例如，来自种类(2)-(8)的基团可被来自种类(1)的基团取代：(i)卤代烷基基团，诸如氟代烷基，即具有一个或多个卤素取代基诸如F的烷基基团(至全卤代烷基，即烷基基团的每个氢原子被卤素原子替换)。例如，C1-6卤代烷基是具有一个或多个卤素取代基的C1-6烷基(至全卤代烷基，即烷基基团的每个氢原子被卤素原子替换)。C1卤代烷基是具有一个、两个或三个卤素取代基的甲基基团。(ii)羟基烷基或羟烷基，即具有一个或多个(例如，1、2或3个)OH取代基的烷基基团。(iii)氰基烷基，即具有一个或多个(例如，1、2或3个)-CN取代基的烷基基团。来自种类(1)的基团可被来自种类(1)的另一种基团取代，例如卤代烷氧基基团，诸如氟代烷氧基，即-O-卤代烷基基团。C1-6卤代烷氧基是指-O-(C1-6卤代烷基)基团。

术语“非氢单价基团”还可以是选自以上8类的任何基团以及选自以上8类的任何数量的基团的组合，所述基团被一个或多个二价基团取代，即同一原子上的两个原始氢被诸如以下的基团替换：＝O、＝S、＝NNR₂、＝NNRC(＝O)R、＝NNRC(＝O)OR、＝NNRS(＝O)₂R、＝NR、＝NOR等。

在优选的实施方案中，式(I)是式(Ia-1)或式(Id-1)：

在本发明的具体实施方案中，式(I)、(Ia-1)和(Id-1)中的R₁可以是哌啶基、乙酰基哌啶基、含有0-2个杂原子的C₃-C₁₂螺、稠合或桥连双环基团、氮杂螺庚烷基、乙酰基氮杂螺庚烷基、氮杂环丁烷基、乙酰基氮杂环丁烷基、(甲基磺酰基)氮杂环丁烷基、氮杂双环辛烷基、乙酰基氮杂双环辛烷基、氮杂双环己烷基、乙酰基氮杂双环己烷基、环烷基、吡咯烷基、氧代吡咯烷基、烷基氧代吡咯烷基、甲基氧代吡咯烷基、甲基氮杂环丁烷基、吡唑基、烷基吡唑基、烷基-1H-吡唑基、甲基-氧代-二氢吡啶基、甲基-噁二唑基、氧杂环丁烷基、(氧杂环丁烷基)-1H-吡唑基、嘧啶基、哒嗪基、四氢呋喃基、四氢吡喃基或四氢吡喃基-吡唑基。

通常，非氢单价基团的连接点可来自任何合适的位置。例如，哌啶基可以是哌啶-1-基(通过哌啶基的N原子连接)、哌啶-2-基(通过哌啶基的2位置处的C原子连接)、哌啶-3-基(通过哌啶基的3位置处的C原子连接)或哌啶-4-基(通过哌啶基的4位置处的C原子连接)。又例如，吡啶基可以是2-吡啶基(或吡啶-2-基)、3-吡啶基(或吡啶-3-基)或4-吡啶基(或吡啶-4-基)。可指定非氢单价基团的连接点以指示非氢单价基团连接到另一部分的位置。例如，“-C_1-2烷基-(C_3-4环烷基)”意指连接点发生在“C_1-2烷基”部分处。又例如，“(C_3-4环烷基)-C_1-2烷基-”也意指连接点发生在“C_1-2烷基”部分处。当与取代基的键显示与连接环中的两个原子的键交叉时，则此取代基可结合到此环中可取代的任何成环原子(即，一个或多个氢原子)，除非另有说明或根据上下文另有暗示。

在本发明的具体实施方案中，式(I)、(Ia-1)和(Id-1)中的R₁可以是1-乙酰基哌啶-4-基、2-乙酰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基、1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基、8-乙酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基、3-乙酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基、环丁基、1-甲基-5-氧代吡咯烷-3-基、1-(甲基磺酰基)氮杂环丁烷-3-基、1-甲基氮杂环丁烷-3-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基、1-甲基-1H-吡唑-3-基、1-甲基-1H-吡唑-5-基、1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基、5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基、氧杂环丁烷-3-基、1-(氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑-4-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基、哒嗪-4-基、哒嗪-3-基、吡嗪-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢-2H-吡喃-4-基或1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基。

在本发明的示例性实施方案中，式(I)中的R₂是H或F，并且m＝1。

在本发明的其他示例性实施方案中，式(I)中的R₃是H、C1-C6烷基诸如甲基、氧代基或羰基(O＝)、二价C2-C6螺环形成基团诸如亚乙基螺环形成基团或二价C1-C4桥形成基团诸如亚甲基桥形成基团；并且n＝1或2。

表1A列出式(I)化合物的一些代表性实例及其在本说明书中通篇使用的代码。这些化合物可有效地抑制PRMT5的酶活性，如将在实施例部分中更详细地描述的。

表1A

在本发明的优选实施方案中，式(I)中的R₁是1-乙酰基哌啶-4-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基或哒嗪-4-基；W是-NH-；T、U和V全部是碳原子；R₂是H或F；m是1；X是碳原子或氧原子；Y是碳原子；Z是直接键或碳原子；R₃是H；并且

代表单键。表1B列出一些对Z-138、U-251和MIA PaCa2的细胞系有效的化合物，如将在实施例部分中更详细地描述的。

表1B

在本发明更优选的实施方案中，式(I)的化合物包括(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(24a)以及(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(52a)。这些化合物对于三种癌细胞组的增殖抑制筛选是有效的；并且在小鼠、大鼠和狗中显示有希望的药代动力学结果，如将在实施例部分中更详细地描述的。具体地，(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(52a)进一步证明在套细胞淋巴瘤(MCL)Z-138异种移植物功效研究中的有希望的结果，如将在实施例部分中更详细地描述的。

本发明可包括所有药学上可接受的同位素标记的式(I)的化合物或其盐，其中一个或多个原子被原子序数相同、但原子质量或质量数与在自然中占主导地位的原子质量或质量数不同的原子所替换。适合于包含在本发明的化合物中的同位素的实例包括以下的同位素：氢，诸如²H和³H；碳，诸如¹¹C、¹³C和¹⁴C；氯，诸如³⁶Cl；氟，诸如¹⁸F；碘，诸如¹²³I和¹²⁵I；氮，诸如¹³N和¹⁵N；氧，诸如¹⁵O、¹⁷O和¹⁸O；磷，诸如³²P；以及硫，诸如³⁵S。某些同位素标记的式(I)的化合物，例如并入放射性同位素的那些化合物适用于药物和/或底物组织分布研究中。放射性同位素氚(即，³H)和碳-14(即，14C)鉴于其容易并入和检测而特别有用于此目的。被较重的同位素诸如氘(即，²H)取代可提供由较大的代谢稳定性产生的某些治疗优势(例如体内半衰期增加或剂量需求减少)，并且因此在一些情况下可能为优选的。被正电子发射同位素(诸如¹¹C、¹⁸F、¹⁵O和¹³N)取代可有用于检验底物受体占据的正电子发射断层(PET)研究。同位素标记的式(I)的化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术使用适当同位素标记试剂代替先前采用的未标记试剂来制备。

关于异构体，一些式(I)的化合物可包括立体异构体和互变异构体，其中的全部包括在本发明的范围内。式(I)的立体异构体包括式(I)的化合物的顺式和反式异构体、光学异构体诸如R和S对映异构体、非对映异构体、几何异构体、旋转异构体、阻转异构体和构象异构体，包括表现出多于一种类型的异构现象的化合物；及其混合物(诸如外消旋体和非对映体对)。

式(I)的化合物可以药学上可接受的盐的形式存在，诸如其酸加成盐和/或碱盐。合适的酸加成盐由酸形成，其形成无毒盐，例如盐酸盐/氯化物。合适的碱盐由碱形成，其形成无毒盐，例如钙盐和钠盐。还可形成酸和碱的半盐，例如半硫酸盐和半钙盐。

式(I)的化合物或其药学上可接受的盐包括式(I)的化合物或其药学盐的所有形式，包括其水合物、溶剂化物、异构体(例如，旋转立体异构体)、结晶形式和非结晶形式、类质同晶体、多晶型物、代谢物和前药。式(I)的化合物也可以未溶合和溶合形式存在。当溶剂或水紧密结合时，络合物将具有不依赖于湿度的明确确定的化学计量。然而，当溶剂或水微弱结合时(如在通道溶剂合物和吸湿性化合物中)，水/溶剂含量将取决于湿度和干燥条件。

式(I)的化合物可以在完全无定形至完全结晶范围内的固态连续体形式存在。术语“无定形”是指一种状态，在所述状态下材料缺乏分子层面上的长程有序，并且视温度而定，可展现固体或液体的物理性质。通常此类材料不给出独特X-射线衍射图案，并且虽然展现固体性质，但更正式来说，描述为液体。在加热后，发生自表观固体至具有液体性质的材料的变化，所述变化的特征在于状态变化，通常是二级的(“玻璃化转变”)。术语“结晶”是指一种固相，在所述固相下材料具有分子层面上的规则有序内部结构，并且给出具有确定峰的独特X-射线衍射图案。此类材料在充分加热时也将展现液体性质，但自固体至液体的变化的特征在于相变化，通常是一级的(“熔点”)。当经受合适的条件时，本发明的化合物也可以以介晶态(中间相或液晶)存在。介晶态是真正结晶状态与真正液体状态(熔融或溶液)之间的中间体。

本发明还涉及式(I)的化合物的前药。一些式(I)的化合物本身可具有很少或没有药理学活性，但是当施用到身体中或身体上时，它们可例如通过水解裂解转化成具有所需活性的式(I)的化合物。此类衍生物被称为“前药”。根据本发明的前药可例如通过用本领域技术人员已知作为“前体部分”的某些部分替换式(I)的化合物中存在的适当官能团来产生。在一些实施方案中，某些式(I)的化合物本身可充当其他式(I)的化合物的前药。在药物施用后体内形成的式(I)的化合物的代谢物也包括在本发明的范围内。

化合物制备

可用于制备本发明的化合物的原料和中间体可从化学品供应商获得，或者可根据化学领域中描述的方法制备。

本发明的化合物(包括化合物的盐)可使用已知有机合成技术制备且可根据众多可能的合成途径中的任一者来合成。制备本发明化合物的反应可在可易于由有机合成领域技术人员选择的合适溶剂中进行。合适的溶剂可实质上不与原料(反应物)、中间体或产物在进行反应所处的温度(例如，可在溶剂的冷冻温度至溶剂的沸腾温度的范围内的温度)下反应。既定反应可在一种溶剂或一种以上溶剂的混合物中进行。取决于特定反应步骤，适于特定反应步骤的溶剂可由熟练技术人员选择。

制备本发明化合物可涉及各种化学基团的保护和脱保护。保护和脱保护的需要和适当保护基团的选择可易于由本领域的技术人员确定。例如，可水解-CN基团以提供酰胺基团；羧酸可转化为酰胺；羧酸可转化为酯，酯进而可还原为醇，醇进而可进一步改性。又例如，OH基团可转化为更好的离去基团，诸如甲磺酸盐，其进而适合于诸如通过氰化物离子进行的亲核取代。又例如，-S-可被氧化成-S(＝O)-和/或-S(＝O)₂-。再例如，不饱和键诸如C-C双键或C-C三键可通过氢化还原为饱和键。

如果适当和/或需要，官能团(反应性)可在合成方案的过程中保护/去保护。例如，OH基团可被苄基、甲基或乙酰基保护，其可在合成过程的后期脱保护并转化回OH基团。又例如，NH₂基团可被苄氧基羰基(Cbz)或BOC基团保护；转化回NH₂基团可在合成过程的后期通过脱保护进行。

可根据本领域中已知的任何合适方法监测反应。例如，产物形成可通过光谱手段，诸如核磁共振光谱法(例如，¹H或¹³C)、红外光谱法、分光光度测定法(例如，紫外-可见)、质谱；或通过层析方法，诸如高效液相色谱法(HPLC)或薄层色谱法(TLC)监测。

在一些实施方案中，化合物可作为立体异构体，诸如阻转异构体、外消旋体、对映异构体或非对映异构体存在。用于制备/分离单个对映异构体的常规技术包括从合适的光学纯前体手性合成或使用例如手性高效液相色谱法(HPLC)拆分外消旋体。可替代地，外消旋体(或外消旋前体)可与合适的光学活性化合物(例如，乙醇)反应，或在化合物含有酸性或碱性部分的情况下，与酸或碱(诸如酒石酸或1-苯基乙胺)反应。所得的非对映异构体混合物可通过色谱法和/或分级结晶分离，并且非对映异构体中的一者或两者可通过本领域技术人员熟知的手段转化为一种或多种对应的纯对映异构体。手性化合物(及其手性前体)可使用色谱法(通常为HPLC)在具有流动相的不对称树脂上以对映异构体富集形式获得，所述流动相由烃(通常为庚烷或己烷)组成，含有0％至50％2-丙醇(通常为2％至20％)和0％至5％烷基胺(通常为0.1％二乙基胺)。浓缩洗脱液得到富集的混合物。立体异构体聚集体可通过本领域技术人员已知的常规技术来分离。合适的立体选择性技术是本领域普通技术人员熟知的。对于含有烯基或亚烯基基团的式(I)的化合物，几何顺式/反式(或Z/E)异构体是可能的。顺式/反式异构体可通过本领域技术人员熟知的常规技术分离，例如色谱法和分级结晶。

药物组合物和施用

本发明还提供一种药物组合物，其包含治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、异构体或水合物，呈任何结晶形式或无定形形式；药学上可接受的载体或赋形剂，并且任选地包含至少一种另外的药用或药物剂。

药学上可接受的载体或赋形剂可包含任何常规药物载体或赋形剂。合适的药物载体包括惰性稀释剂或填充剂、水以及各种有机溶剂诸如水合物和溶剂。如果需要，药物组合物可含有另外的成分，诸如调味剂、粘合剂、赋形剂等。

如本文所用，术语“治疗有效量”是指施用的化合物(包括其药学上可接受的盐)的量，其将在一定程度上缓解所治疗病症的一种或多种症状。关于PRMT5介导的疾病或病症的治疗，治疗有效量是指具有在一定程度上缓解或消除与PRMT5介导的疾病或病症相关联的一种或多种症状的作用的量。除非另外指示，否则如本文所用的术语“治疗”意指逆转、减轻、抑制这种术语所适用的病症或病状的进展或这种病症或病状的一种或多种症状，或预防所述进展或所述一种或多种症状。术语“治疗”还包括对受试者的辅助和新辅助治疗。

式(I)的化合物(包括其盐)的施用可通过能够将化合物递送到作用位点的任何方法来实现。这些方法包括，例如，肠道途径(例如，口服途径、口腔途径、唇下途径和舌下途径)、口服途径、鼻内途径、吸入途径、十二指肠内途径、肠胃外注射(包括静脉内、皮下、肌肉内、血管内或输注)、鞘内途径、硬膜外途径、脑内途径、脑室内途径、局部和直肠施用。在本发明的一个实施方案中，式(I)的化合物可通过肠胃外注射途径(例如，静脉内注射途径)施用/实现。在本发明的一个实施方案中，式(I)的化合物可通过口服途径施用或实现。

可调整式(I)的化合物的剂量以提供所需的反应。应注意，剂量值可随待减轻的病状的类型和严重程度而变化，并且可包括单一剂量或多个剂量。

试剂盒或包装药物

本发明提供一种试剂盒或包装药物，其包括式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、异构体或水合物，呈任何结晶形式或无定形形式；以及其使用说明。

所述试剂盒(例如，药物包装)可包括所提供的药物组合物或化合物和容器(例如，小瓶、安瓿、瓶、注射器和/或分配器包装或其他合适的容器)。在一些实施方案中，所述试剂盒可任选地还包括第二容器，其包含用于所述药物组合物或化合物的稀释或悬浮的药物赋形剂。在一些实施方案中，药物组合物或化合物提供在两个容器中，并且当需要时，两个容器中的内容物组合以形成一个单位剂型。

应用

本发明提供一种抑制蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)酶的方法，其包括：使PRMT5酶与有效量的以下物质接触：式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、异构体或水合物，呈任何结晶形式或无定形形式。

抑制步骤可在体外或体内实施。“体外”是指在人工环境中(例如像但不限于在试管或培养基中)执行的程序。“体内”是指在活生物体(诸如但不限于人类、小鼠、狗、大鼠或兔)内执行的程序。

如本文所用，术语“IC50”是指抑制剂在抑制生物学或生物化学功能中的半数最大抑制浓度。此定量测量指示需要多少特定抑制剂来抑制一半给定的生物过程(或过程的组分，即酶、细胞、细胞受体或微生物)。换言之，它是物质的半数最大(50％)抑制浓度(IC)(50％IC或IC50)。EC50是指用于在体内获得50％>最大效果所需的血浆浓度。

在一些实施方案中，本发明的方法利用具有约或小于预定值的IC50值的式(I)的PRMT5抑制剂，如在体外测定中所确定的。在一些实施方案中，PRMT5抑制剂以以下IC50值抑制PRMT5：约10nM或更小、20nM或更小、30nM或更小、40nM或更小、50nM或更小、60nM或更小、70nM或更小、80nM或更小、90nM或更小、100nM或更小、150nM或更小、200nM或更小、300nM或更小、400nM或更小、500nM或更小、600nM或更小、700nM或更小、800nM或更小、900nM或更小、1000nM或更小、1500nM或更小、2000nM或更小或2500nM或更小(或以上任何两个数字所限定并包括以上任何两个数字的范围中的数字)。

本发明提供一种改变基因表达或改变转录的方法，其包括在体外或在受试者中使细胞与有效量的以下物质接触：式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、异构体或水合物，呈任何结晶形式或无定形形式。在某些实施方案中，所述细胞在体外培养物中。在某些实施方案中，所述细胞在动物中，例如人类中。在某些实施方案中，所述细胞在有需要的受试者中。

在一些实施方案中，式(I)的化合物可用于体细胞重编程，诸如将体细胞重编程为干细胞。在一些实施方案中，式(I)的化合物可用于生殖细胞发育，并且因此预期可用于生殖技术和再生医学领域。

本发明提供一种治疗PRMT5介导的或与异常PRMT5活性相关联的病症或疾病的方法，其包括向有需要的受试者施用治疗有效量的以下物质：式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、异构体或水合物，呈任何结晶形式或无定形形式；或其药物组合物。

如本文所用，术语“PRMT5介导的病症”意指已知PRMT5在其中发挥作用的任何疾病、病症或其他病理病状。因此，在一些实施方案中，本发明涉及治疗或减轻已知PRMT5在其中发挥作用的一种或多种疾病的严重程度。本发明的方法可用于治疗与PRMT5相关联的疾病病状。直接或间接由PRMT5的异常活性或表达水平导致的任何疾病病状可以是预期的疾病病状。已经报道与PRMT5相关联的不同疾病病状。例如，PRMT5涉及多种人类癌症以及多种血红蛋白病。

所述病症或疾病包括增殖性病症诸如癌症，代谢病症诸如糖尿病或肥胖症，血液病症诸如血红蛋白病，例如镰状细胞贫血病或β-地中海贫血，自身免疫疾病，或炎性疾病。

例如，虽然不受任何特定理论的束缚，但是在脂肪生成中已认识到PRMT5的作用。在用于脂肪形成的多种细胞培养模型中抑制PRMT5表达预防脂肪形成基因激活，而PRMT5的过表达增强脂肪生成基因表达和分化。另外，已显示脂肪生成在糖尿病和肥胖症的病因学和进展中发挥关键作用。因此，在一些实施方案中，通过式(I)的化合物抑制PRMT5可用于治疗糖尿病和/或肥胖症。在一些实施方案中，式(I)的化合物可用于延迟糖尿病的发作、减缓其进展或改善其症状。在一些实施方案中，所述糖尿病为1型糖尿病。在一些实施方案中，所述糖尿病为2型糖尿病。在一些实施方案中，式(I)的化合物可用于延迟肥胖症的发作、减缓其进展或改善其症状。在一些实施方案中，式(I)的化合物可用于帮助受试者减轻体重。在一些实施方案中，式(I)的化合物可与其他化合物、药物或治疗剂(诸如二甲双胍和胰岛素)组合使用，以治疗糖尿病和/或肥胖症。

在一些实施方案中，式(I)的化合物可用于治疗血液病症，例如血红蛋白病，诸如镰状细胞病或β-地中海贫血。例如，虽然不受任何特定理论的束缚，但是PRMT5是γ-珠蛋白基因表达的已知阻遏物，并且成年期增加的胎儿γ-球蛋白(HbF)水平与镰状细胞病和P3-地中海贫血的症状改善相关联。因此，在一些实施方案中：通过化合物式(I)抑制PRMT5可用于治疗血液病症，诸如血红蛋白病，诸如镰状细胞病或β-地中海贫血。在一些实施方案中，式(I)的化合物可用于延迟镰状细胞病的发作、减缓其进展或改善其症状。在一些实施方案中，式(I)的化合物可用于延迟β-地中海贫血的发作、减缓其进展或改善其症状。在一些实施方案中，式(I)的化合物可与其他化合物、药物或治疗剂组合使用，以治疗血红蛋白病，例如镰状细胞病或β-地中海贫血。

在一些实施方案中，式(I)的化合物可用于治疗炎性和自身免疫疾病。据报道，PRMT5通过p65的甲基化激活NFkB信号传导途径。据报道，PRMT5与死亡受体4和死亡受体5相互作用，从而促成TRAIL诱导的抑制剂或kB激酶(IKK)和核因子-kB(NF-kB)的激活。术语“炎性疾病”是指特征在于以下的那些疾病、病症或病状：疼痛现象(由于生成有害物质和神经刺激而产生的痛)、发热(由于血管扩张而产生的灼热)、发红(由于血管扩张和增加的血液流动而产生的皮肤发红)、肿胀(由于体液过量流入或限制性流出而产生的肿瘤)和/或功能丧失。炎症具有多种形式并且包括但不限于急性、粘连性、萎缩性、卡他性、慢性、肝硬化性、弥漫性、弥散性、渗出性、纤维蛋白性、纤维化、局灶性、肉芽肿性、增殖性、肥厚性、间质性、转移性、坏死性、闭塞性、实质性、塑性、增生性、增殖性、假膜性、脓性、硬化性、浆液纤维蛋白性、浆液性、单纯性、特异性、亚急性、化脓性、毒性、创伤性和/或溃疡性炎症。

在优选的实施方案中，式(I)的化合物可用于治疗增殖性病症，诸如癌症或良性肿瘤。例如，虽然不受任何特定理论的束缚，但是已显示PRMT5参与细胞周期蛋白D1失调癌症。增加的PRMT5活性介导与细胞周期蛋白D1依赖性肿瘤生长相关联的关键事件，包括CUL4抑制、CDT1过表达和DNA再复制。此外，在Fbx4(细胞周期蛋白D1E3连接酶)中具有突变的人类癌症表现出核细胞周期蛋白D1积累和增加的PRMT5活性。另外，PRMT5还涉及在G1期中加速细胞周期进程和调节G1的调节剂；例如，PRMT5可上调细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4、CDK6和细胞周期蛋白D1、D2和E1。此外，PRMT5可激活磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/AKT信号传导。

所述病症或疾病包括乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌、卵巢癌、皮肤癌、睾丸癌、子宫癌、宫颈癌、食道癌、膀胱癌、胃癌、肝癌、表皮样癌、脑癌、造血细胞癌、白血病诸如急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞白血病、毛细胞白血病、脊髓发育不良、骨髓增生性病症、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、肥大细胞增多症、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、多发性骨髓瘤(MM)、脊髓发育不良综合征(MDS)、血红蛋白病诸如β地中海贫血和镰状细胞病(SCD)、淋巴瘤、成神经管细胞瘤、直肠腺癌、结肠腺癌、腺样囊性癌、肺腺癌、头颈鳞状细胞癌、肝细胞癌、肾细胞癌、少突神经胶质瘤、卵巢透明细胞癌、卵巢浆液性囊腺癌、黑素瘤或其组合。

所述病症或疾病包括可由细胞系诸如Raji、SU-DHL4和Z138代表的淋巴瘤；或可由细胞系诸如U87MG、U251和T98G代表的胶质瘤。

所述病症或疾病是可由细胞系诸如IMIMPC2、MIA PaCa2、Aspc1、A6L、SKPC1和Panc-1代表的胰腺癌。

所述病症或疾病包括可由细胞系诸如600MPE、AU565、BT-20、BT-474、BT-483、BT-549、Evsa-T、Hs578T、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-453、MDA-MB-468、SkBr3和T-47D代表的乳腺癌；可由细胞系诸如Hep G2、Huh1、Huh7、SNU398、SNU475和MHCC-97H代表的肝癌；或可由细胞系诸如A-549、EBC-1和HCC827代表的肺癌。

可单独或与医学疗法组合施用式(I)的化合物以及包含它们的药物组合物以治疗任何所述疾病。医学疗法包括例如手术和放射疗法(例如γ辐射、中子束放射疗法、电子束放射疗法、质子疗法、近距离放射疗法、系统放射性同位素)。

本发明将通过特定实施例的方式更详细地描述。下列实施例是出于说明目的而提供，且不欲以任何方式限制本发明。本领域的技术人员将易于认识到可进行改变或修改以产生基本上相同结果的多种非关键参数。可单独使用这些实施例中说明的方法或与本领域公知的技术组合制备本发明范围内的另外的化合物。

具体实施方式

以下说明本发明的各种化合物的合成。可单独使用这些实施例中说明的方法或与本领域公知的技术组合制备本发明范围内的另外的化合物。

实施例1：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(1)

步骤1：1-氯-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)丙烷-2-醇

将1,2,3,4-四氢异喹啉(10.00g，75.1mmol，1.0当量)和2-(氯甲基)-环氧乙烷(6.98g，75.5mmol，1.0当量)在异丙醇(100mL)中的混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物浓缩至干燥，并且将获得的残余物通过柱色谱法(200-300目硅胶，石油醚/乙酸乙酯(PE/EA＝1/1)纯化，以得到作为黄色油状物的1-氯-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)丙烷-2-醇(10.00g，59％产率)。¹HNMR(400MHz,氘代氯仿(CDCl₃))δ(ppm)7.13-7.20(m,3H),7.03-7.05(m,1H),4.03-4.09(m,1H),4.85(d,J＝14.8Hz,1H),3.61-3.69(m,3H),2.93-2.99(m,3H),2.67-2.84(m,3H)。

步骤2：7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(I-1)

向氢化钠(NaH)(60％在油中，115mg，2.83mmol，1.2当量)在二甲基甲酰胺(DMF，5mL)中的搅拌悬浮液添加7-溴-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(500mg，2.36mmol，1.0当量)在DMF(5mL)中的溶液，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌1小时。添加1-氯-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)丙烷-2-醇(650mg，2.83mmol，1.2当量)在DMF(5mL)中的溶液，并且将所得的混合物加热至70℃，持续额外3小时。将反应混合物用水和EA处理并且分离有机相。将有机相用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将粗产品通过柱色谱法(200-300目硅胶，PE/EA＝2/1)纯化以得到作为淡黄色油状物的7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(270mg,28％产率)。

步骤3：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(1)

向7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(I-1)(270mg，0.65mmol，1.0当量)和氧杂环丁烷-3-胺(95mg，1.30mmol，2.0当量)在1,4-二噁烷(50mL)中的搅拌溶液添加固体Cs₂CO₃(423mg，1.30mmol，2.0当量)、催化量的4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(XantPhos)和三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd₂(dba)₃)。将所得的混合物在氮环境下加热至回流6小时。将反应混合物用水和EA处理并且分离有机相。将有机相用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将粗产品通过柱色谱法(200-300目硅胶，二氯甲烷/甲醇(DCM/MeOH＝40/1)纯化以得到作为浅黄色固体的2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(1)(150mg，57％产率)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)6.98-7.09(m,6H),6.58(dd,J＝2.1Hz,8.0Hz,1H),6.41(d,J＝6.4Hz,1H),4.81-4.85(m,3H),4.49-4.53(m,1H),4.38(t,J＝5.9Hz,2H),4.01(brs,1H),3.76(dd,J＝3.8Hz,13.5Hz,1H),3.50-3.62(m,4H),3.20(dd,J＝7.6Hz,13.5Hz,1H),2.71-2.79(m,6H),2.47-2.50(m,2H)；LC-MS(m/z):408[M+H]⁺。

实施例2：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(嘧啶-5-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(14)

向7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(I-1)(160mg，0.38mmol，1.0当量)在乙醇(15mLmL)中的搅拌溶液添加嘧啶-5-基硼酸(57mg，0.46mmol，1.2当量)、催化量的二氯双(三苯膦)钯(II)(Pd(PPh₃)₂Cl₂)和K₂CO₃(105mg，0.76mmol，2.0当量)在H₂O(5mLmL)中的溶液，并且将所得的混合物在氮气环境下加热至回流6小时。将反应混合物用水处理并用EA萃取。将有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将粗产品通过柱色谱法(200-300目硅胶，DCM/MeOH＝30/1)纯化以得到作为黄色油状物的2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(嘧啶-5-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(14)(30mg，20％产率)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.20(s,1H),9.13(s,2H),8.20(s,1H),7.88(d,J＝7.6Hz,1H),7.45(d,J＝7.7Hz,1H),7.03-7.07(m,4H),4.88(brs,1H),4.09(brs,1H),3.63-3.87(m,5H),3.25-3.31(m,1H),3.02-3.03(m,2H),2.67-2.79(m,6H)；LC-MS(m/z):415[M+H]⁺。

实施例3：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-4,4-二甲基-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(15)

步骤1：2-(4-溴苯基)-2-甲基丙腈

向NaH(60％在油中，8.98g，224.4mmol，2.2当量)在四氢呋喃(THF，300mLmL)中的搅拌溶液添加2-(4-溴苯基)乙腈(20.00g，102.0mmol，1.0当量)在THF(100mLmL)中的溶液，并且将所得的混合物在环境温度下再搅拌1小时。逐滴添加CH₃I(31.85g，224.4mmol，2.2当量)，并且将获得的混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用冷水淬灭并用EA萃取。将有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将粗产品通过柱色谱法(200-300目硅胶，PE)纯化以得到作为黄色液体的2-(4-溴苯基)-2-甲基丙腈(20.88g，91％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)1.73(s,6H),7.35-7.27(m,2H),7.52-7.54(m,2H)。

步骤2：2-(4-溴苯基)-2-甲基丙烷-1-胺

在冰水浴温度下向2-(4-溴苯基)-2-甲基丙腈(11.88g，53.0mmol，1.0当量)在THF(150mLmL)中的搅拌溶液逐滴添加BH₃在THF(1.0N，159mL，159.0mmol，3.0当量)中的溶液，并且将所得的混合物加热至回流4小时。将反应混合物冷却至环境温度并且浓缩至干燥。将获得的残余物溶解在甲醇中，并且加热至回流，持续额外1小时。将反应混合物再次浓缩至干燥并用水处理。将水相用EA萃取，用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将粗产品2-(4-溴苯基)-2-甲基丙烷-1-胺不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

步骤3：(2-(4-溴苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯

向粗2-(4-溴苯基)-2-甲基丙烷-1-胺在DMF(60mL)中的搅拌溶液添加三乙胺(6.44g，63.6mmol，1.2当量)，接着逐滴添加氯甲酸甲酯(6.01g，63.6mmol，1.2当量)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用水淬灭并过滤以收集沉淀物。将获得的固体进一步通过柱色谱法(200-300目硅胶，PE/EA＝1/1)纯化以得到作为白色固体的(2-(4-溴苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(3.03g，19％产率，经两步)。

步骤4：7-溴-4,4-二甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

将(2-(4-溴苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯(3.03g，10.6mmol，1.0当量)在三氟甲磺酸(TfOH，30mLmL)中的溶液加热至100℃，持续10小时。将反应混合物冷却至环境温度，并且倒入到冷水中。将获得的水相用EA萃取，用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将粗产品通过柱色谱法(200-300目硅胶，PE/EA＝2/1-1/1)纯化以得到作为白色固体的7-溴-4,4-二甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(0.25g，10％产率)。

步骤5：7-溴-4,4-二甲基-2-(环氧乙烷-2-基甲基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

向7-溴-4,4-二甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(150mg，0.59mmol，1.0当量)和2-(氯甲基)-环氧乙烷(82mg，0.88mmol，1.5当量)在DMF(5mL)中的搅拌溶液添加固体Cs₂CO₃(577mg，1.77mmol，3.0当量)，并且将所得的混合物加热至90℃，持续3小时。将反应混合物冷却至环境温度并用水淬灭。将获得的水相用EA萃取，用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将粗产品不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

步骤6：7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-4,4-二甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

向7-溴-4,4-二甲基-2-(环氧乙烷-2-基甲基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮在乙醇(10mL)中的搅拌溶液添加1,2,3,4-四氢异喹啉(236mg，1.77mmol，3.0当量)，并且将所得的混合物加热至回流2小时。将反应混合物浓缩至干燥，并且将粗产品通过柱色谱法(200-300目硅胶，DCM)纯化以得到作为黄色油状物的7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-4,4-二甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(262mg，>100％产率)。

步骤7：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-4,4-二甲基-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(15)

向7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-4,4-二甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(262mg，0.59mmol，1.0当量)和氧杂环丁烷-3-胺(216mg，2.93mmol，5.0当量)在1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液添加固体Cs₂CO₃(577mg，1.77mmol，3.0当量)、催化量的XantPhos和Pd₂(dba)₃。将所得的混合物在氮环境下加热至回流6小时。将反应混合物用水和EA处理并且分离有机相。将有机相用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将粗产品通过柱色谱法(200-300目硅胶，DCM/MeOH＝40/1)纯化以得到作为黄色固体的2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-4,4-二甲基-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(15)(60mg，20％产率)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)6.99-7.11(m,6H),6.64-6.66(m,1H),6.42-6.44(m,1H),4.81-4.84(m,2H),4.71-4.72(m,1H),4.45-4.52(m,1H),4.37-4.40(m,2H),4.02(brs,1H),3.73-3.80(m,1H),3.61(s,2H),3.32-3.41(m,2H),3.15-3.21(m,1H),2.71-2.80(m,4H),2.49-2.51(m,2H),1.20(s,6H)；LC-MS(m/z):436[M+H]⁺。

实施例4：6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(16)

步骤1：3-溴-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-羧酸叔丁酯

向3-溴-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶(5.00g，23.4mmol，1.0当量)和焦碳酸二叔丁酯(Boc2O，6.14g，28.1mmol，1.2当量)在二氯甲烷(50mL)中的搅拌溶液添加三乙胺(2.30g，23.4mmol，1.0当量)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物浓缩至干燥，并且将粗产品通过柱色谱法(200-300目硅胶，PE/EA＝5/1)纯化以得到作为无色油状物的3-溴-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-羧酸叔丁酯(5.50g，75％产率)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)8.48(d,1H),7.57(d,1H),4.59(s,2H),3.75(t,2H),2.96(t,2H),1.50(s,9H)。

步骤2：3-溴-5-氧代-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-羧酸叔丁酯

向RuCl₃(0.40g，1.91mmol，0.15当量)和NaIO₄(12.84g，60.0mmol，4.7当量)在H₂O/EA(80mL/80mL)中的搅拌溶液添加3-溴-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-羧酸叔丁酯(4.00g，12.8mmol，1.0当量)在EA(40mL)中的溶液，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌过夜。将有机相分离，用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将粗产品通过柱色谱法(200-300目硅胶，PE/EA＝5/1)纯化以得到作为白色固体的3-溴-5-氧代-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-羧酸叔丁酯(3.70g，84％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)8.71(d,1H),8.54(d,1H),4.07(t,2H),3.17(t,2H),1.59(s,9H)。

步骤3：3-溴-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮

向3-溴-5-氧代-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-羧酸叔丁酯(4.40g，13.4mmol，1.0当量)在二氯甲烷(60mL)中的溶液添加三氟乙酸(TFA，20mL)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌3小时。将反应混合物浓缩至干燥并用水处理。将所得的水溶液用15％NaOH处理，直至达到pH＝9-10，并且过滤以收集沉淀物。将获得的固体干燥，以得到作为浅黄色固体的3-溴-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(2.60g，86％产率)。

步骤4：3-溴-6-(环氧乙烷-2-基甲基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮

向3-溴-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(1.12g，4.93mmol，1.0当量)在DMF(20mL)中的搅拌溶液添加NaH(60％在油中，0.24g，5.92mmol，1.5当量)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌30min。添加2-(氯甲基)-环氧乙烷(0.68g，7.40mmol，1.5当量)，并且将所得的混合物加热至80℃，持续额外3小时。将反应用水淬灭并用EA萃取。将有机相用水洗涤两次，接着用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将获得的粗3-溴-6-(环氧乙烷-2-基甲基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

步骤5：3-溴-6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(I-2)

向粗3-溴-6-(环氧乙烷-2-基甲基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮在乙醇(25mL)中的溶液添加1,2,3,4-四氢异喹啉(1.97g，14.79mmol，3.0当量)，并且将所得的混合物加热至回流5小时。将反应混合物浓缩至干燥，并且将粗产品通过柱色谱法(200-300目硅胶，DCM/MeOH＝50/1)纯化以得到作为浅黄色油状物的3-溴-6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(1.00g，50％产率，经两步)。

步骤6：6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(16)

将3-溴-6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(I-2)(200mg，0.48mmol，1.0当量)、氧杂环丁烷-3-胺(175mg，2.40mmol，5.0当量)、Cs₂CO₃(469mg，1.44mmol，3.0当量)、催化量的XantPhos和催化量的Pd₂(dba)₃在1,4-二噁烷(20mL)中的混合物在氮气环境下加热至回流5小时。将反应混合物用水和EA处理并且分离有机相。将有机相用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将粗产品通过柱色谱法(200-300目硅胶，DCM/MeOH＝20/1)纯化以得到作为黄色粉末的6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(16)(50mg，25％产率)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.91(d,J＝2.8Hz,1H),7.21(d,J＝2.8Hz,1H),7.03-7.10(m,4H),6.69(d,J＝6.6Hz,1H),4.83-4.87(m,3H),4.55-4.60(m,1H),4.39(t,J＝6.0Hz,1H),4.03(brs,1H),3.60-3.77(m,5H),3.22-3.27(m,1H),2.80-2.92(m,6H),2.49-2.50(m,2H)；LC-MS(m/z):409[M+H]⁺。

实施例5：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3-甲基-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(21)

步骤1：1-溴-4-(2-硝基丙-1-烯-1-基)苯

在冰水浴温度下向4-溴苯甲醛(41.00g，222mmol，1.0当量)、硝基甲烷(66.54g，886mmol，4.0当量)和甲酸(44.96g，977mmol，4.4当量)的搅拌混合物添加2-氨基乙烷-1-醇(42.04g，688mmol，3.1当量)，并且将所得的混合物加热至60℃，持续4小时。将反应混合物汇集到冷水(500mL)中，并且将获得的混合物再搅拌10min。通过过滤收集固体，用水洗涤，并干燥以得到作为黄色固体的1-溴-4-(2-硝基丙-1-烯-1-基)苯(40.82g，76％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)8.02(s,1H),7.60(d,J＝8.3Hz,2H),7.31(d,J＝8.3Hz,2H),2.44(s,3H)。

步骤2：1-(4-溴苯基)丙烷-2-胺

在冰水浴温度下向NaBH₄(10.78g，285mmol，4.6当量)在THF(100mL)中的搅拌悬浮液逐滴添加BH₃/THF(1.0N，345mL，345mmol，5.5当量)的溶液，接着逐滴添加1-溴-4-(2-硝基丙-1-烯-1-基)苯(15.00g，62.0mmol，1.0当量)在THF(100mL)中的溶液，并且将所得的混合物加热至65℃，持续6小时。将反应混合物缓慢添加到冷水并用DCM萃取。将有机相经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将所得的残余物溶解在具有浓HCl(水溶液)的甲醇中，并且将混合物加热回流，持续额外2小时。将反应混合物浓缩至干燥并用水处理。将混合物用1N NaOH处理，直至达到pH＝9-10，并且用DCM萃取。将有机相经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将所得的残余物不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

步骤3：(1-(4-溴苯基)丙烷-2-基)氨基甲酸甲酯

在冰水浴温度下向粗1-(4-溴苯基)丙烷-2-胺(5.60g，26.0mmol，1.0当量)和三乙胺(3.95g，39.0mmol，1.5当量)在DMF(50mL)中的搅拌溶液添加氯甲酸甲酯(3.70g，39.0mmol，1.5当量)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌4小时。将反应混合物汇集到冷水中并用DCM萃取。将有机相经Na₂SO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过通过柱色谱法纯化以得到作为浅黄色固体的(1-(4-溴苯基)丙烷-2-基)氨基甲酸甲酯(3.00g，18％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)7.42(d,J＝8.0Hz,2H),7.06(d,J＝8.0Hz,2H),4.51(brs,1H),3.94(brs,1H),3.65(s,3H),2.63-2.81(m,2H),1.11(d,J＝6.6Hz,3H)。

步骤4：7-溴-3-二甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

将(1-(4-溴苯基)丙烷-2-基)氨基甲酸甲酯(3.00g，11.0mmol，1.0当量)在TfOH(30mL)中的混合物加热至100℃，持续10小时。将反应混合物冷却至环境温度，并且倒入到冷水中。通过过滤收集固体，用叔丁基甲基醚(TBME)洗涤，进行干燥以得到作为浅黄色固体的7-溴-3-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(1.00g，38产率)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.08(s,1H),7.90(s,1H),7.66(d,J＝8.1Hz,1H),7.27(d,J＝8.1Hz,1H),3.66-3.71(m,1H),2.93(dd,J＝4.3,15.8Hz,1H),2.62(dd,J＝10.1,15.8Hz,1H),1.17(d,J＝6.6Hz,3H)。

步骤5：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3-甲基-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(21)

使用与实施例3中针对化合物15的合成方法相似的合成方法，获得作为淡黄色固体的2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3-甲基-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(21)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)6.97-7.08(m,6H),6.58(d,J＝7.8Hz,1H),6.41(d,J＝7.8Hz,1H),4.81-4.84(m,3H),4.50-4.51(m,1H),4.38-4.41(m,2H),3.84-4.13(m,3H),3.56-3.67(m,2H),3.07-3.21(m,2H),2.72-2.79(m,5H),2.47-2.50(m,2H),0.99(t,J＝6.8Hz,3H)；LC-MS(m/z):422[M+H]⁺。

实施例6：(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(24a)和(S)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(24b)

步骤1：7-溴-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

向7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(I-1)(12.00g，29.0mmol，1.0当量)和咪唑(5.92g，35.0mmol，3.0当量)在DMF(120mL)中的搅拌溶液分批添加固体叔丁基(氯)二甲基硅烷(TBSCl，5.23g，35.0mmol，1.2当量)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用冷水稀释并用EA萃取。将有机相用水洗涤两次，接着用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法纯化以得到作为浅黄色油状物的7-溴-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(10.00g，67％产率)。

步骤2：7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

向7-溴-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(1.00g，1.89mmol，1.0当量)在1,4-二噁烷(20mL)中的搅拌溶液添加1-(4-氨基哌啶-1-基)乙烷-1-酮(1.10g，7.74mmol，4.1当量)、固体Cs₂CO₃(1.83g，5.67mmol，3.0当量)、催化Pd₂(dba)₃和XantPhos，并且将所得的混合物在氮气环境下加热至回流3小时。将反应混合物浓缩至干燥，并且将残余物用水/EA处理。将有机相经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH＝20/1-10/1)纯化以得到作为黄色固体的7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(0.51g，46％产率)。

步骤3：(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(24a)和(S)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(24b)

向7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(0.51g，0.86mmol，1.0当量)在MeOH(10mL)中的搅拌溶液添加四丁基氟化铵水合物(TBAF，0.54g，1.73mmol，2.0当量)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物浓缩至干燥，并且将获得的残余物通过柱色谱法纯化以得到7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。将外消旋体经受手性SFC至分离的两种对映异构体24a和24b。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)6.96-7.12(m,6H),6.70(d,J＝6.5Hz,1H),5.57(d,J＝8.1Hz,1H),4.79(brs,1H),4.18-4.21(m,1H),4.01(brs,1H),3.75-3.78(m,2H),3.46-3.62(m,5H),3.15-3.23(m,2H),2.72-2.80(m,7H),2.50(m,2H),1.99(s,3H),1.84-1.93(m,2H),1.29-1.33(m,2H)；LC-MS(m/z):477[M+H]⁺。

制备型分离方法：仪器：水SFC200；柱：DAICEL ChiralPak OD，250×30mm I.D.，5μm；流动相：A为CO2，并且B为甲醇(0.1％NH3H2O)；梯度：B 30％；流速：80mL/min；背压：100巴；柱温：38℃；波长：220nm；循环时间：20min。

实施例7：(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(30a)和(S)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(30b)

步骤1：7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮

在冰水浴温度下向NaH(60％，1.20g，29.9mmol，1.2当量)在DMF(50mL)中的搅拌悬浮液添加7-溴-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(6.00g，25.0mmol，1.0当量)，并且将反应混合物在相同温度下搅拌1小时。添加2-(氯甲基)-环氧乙烷(3.47g，37.0mmol，1.5当量)，并且将获得的混合物加热至90℃，持续额外3小时。将反应混合物倒入冷水中并用EA萃取。将有机相用水洗涤两次，接着用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物溶解在乙醇(100mL)中，并且添加1,2,3,4-四氢异喹啉(5.27g，46.6mmol，2.0当量)。将所得的混合物加热至回流1小时。将反应浓缩至干燥，并且通过柱色谱法纯化以得到作为黄色油状物的7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(4.30g，43％产率)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.74(d,J＝2.4Hz,1H),7.60(dd,J＝2.4Hz,8.6Hz,1H),6.96-7.09(m,5H),4.87(br,1H),4.40(t,J＝4.5Hz,2H),4.02(q,J＝6.9Hz,1H),3.87(dd,J＝3.3Hz,13.5Hz,1H),3.62(m,4H),3.25-3.33(m,3H),2.71-2.80(m,4H),2.47-2.49(m,2H)。

步骤2：(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(30a)和(S)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(30b)

向7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(1.51g，3.5mmol，1.0当量)在1,4-二噁烷(20mL)中的搅拌溶液添加哒嗪-4-胺(1.00g，10.5mmol，3.0当量)、固体Cs₂CO₃(3.42g，10.5mmol，3.0当量)、催化Pd₂(dba)₃和XantPhos，并且将所得的混合物在氮气环境下加热至回流5小时。将反应混合物浓缩至干燥，并且将残余物用水/EA处理。将有机相经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH＝50/1-20/1)纯化以得到作为浅黄色粉末的4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(300mg，20％产率)。将外消旋体经受手性SFC至分离的两种对映异构体30a和30b。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.11(s,1H),8.79(d,J＝2.4Hz,1H),8.64(d,J＝6.1Hz,1H),7.45(d,J＝2.8Hz,1H),7.34(dd,J＝2.8Hz,8.6,1H),7.03-7.11(m,5H),6.97(dd,J＝3.0Hz,6.1,1H),4.87(d,J＝4.9Hz,1H),4.38(t,J＝4.9Hz,1H),4.01-4.06(m,1H),3.89(dd,J＝3.6Hz,13.6,1H),3.64(m,3H),3.34(m,2H),2.71-2.83(m,4H),2.50(m,2H)；LC-MS(m/z):446[M+H]⁺。

制备型分离方法：仪器：水SFC200；柱：DAICEL ChiralPak OD，250×50mm I.D.，10μm；流动相：A为CO₂，并且B为乙醇(0.1％NH₃H₂O)；梯度：B 40％；流速：60mL/min；背压：100巴；柱温：38℃；波长：210nm；循环时间：50min。

实施例8：3-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-6-(氧杂环丁烷-3-基氨基)喹唑啉-4(3H)-酮(3)

化合物(3)使用6-溴-3,4-二氢喹唑啉-4-酮作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.98(s,1H),7.45(d,J＝8.8Hz,1H),7.04-7.12(m,5H),6.92-6.95(m,2H),5.06(d,J＝5.5Hz,1H),4.88-4.91(m,2H),4.59-4.62(m,1H),4.35-4.45(m,3H),4.04-4.06(m,1H),3.55-3.69(m,3H),2.68-2.82(m,4H),2.53-2.55(m,2H)；LC-MS(m/z):407[M+H]⁺。

实施例9：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)异喹啉-1(2H)-酮(4)

化合物4使用7-溴-1,2-二氢异喹啉-1-酮作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.41(d,J＝8.6Hz,1H),7.00-7.12(m,7H),6.79(d,J＝6.2Hz,1H),6.41(d,J＝7.3Hz,1H),4.88-4.91(m,3H),4.59-4.63(m,1H),4.44(t,J＝6.0Hz,1H),4.36(dd,J＝3.2Hz,13.2Hz,1H),4.10(brs,1H),3.53-3.69(m,3H),2.69-2.83(m,4H),2.50-2.52(m,2H)；LC-MS(m/z):406[M+H]⁺。

实施例10：6-氯-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(26)

化合物26使用7-溴-6-氯-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-酮和1-甲基-1H-吡唑-4-胺作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.66(s,1H),7.35(s,1H),7.25(s,2H),7.02-7.09(m,5H),4.79(brs,1H),4.00-4.03(m,1H),3.84(s,3H),3.72-3.76(m,1H),3.54-3.64(m,4H),3.13-3.18(m,1H),2.71-2.82(m,6H),2.45-2.49(m,2H)；LC-MS(m/z):466[M+H]⁺。

实施例11：(R)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(12a)和(S)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(12b)

化合物12a和12b使用7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(I-1)和1-甲基-1H-吡唑-4-胺作为原料，以与实施例7中针对化合物30a和30b的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.60(s,1H),7.53(s,1H),7.26-7.28(m,2H),7.01-7.10(m,5H),6.83-6.86(m,1H),4.81(brs,1H),4.02(brs,1H),3.78(s,3H),3.74-3.77(m,1H),3.52-3.65(m,5H),3.18-3.24(m,2H),2.67-2.81(m,6H),2.50-2.51(m,2H)；LC-MS(m/z):432[M+H]⁺。

实施例12：(R)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(28a)和(S)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(28b)

化合物28a和28b使用7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(I-1)和哒嗪-4-胺作为原料，以与实施例7中针对化合物30a和30b的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.22(s,1H),8.81(d,J＝2.9Hz,1H),8.68(d,J＝6.1Hz,1H),7.70(d,J＝2.2Hz,1H),7.29-7.37(m,2H),7.02-7.10(m,5H),4.83(d,J＝5.0Hz,1H),4.05(m,1H),3.77-3.82(m,1H),3.61-3.72(m,4H),3.24-3.29(m,2H),2.92-2.99(m,2H),2.69-2.80(m,5H)；LC-MS(m/z):430[M+H]⁺。

实施例13：(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(29a)和(S)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(29b)

化合物29a和29b使用1-甲基-1H-吡唑-4-胺作为原料，以与实施例7中针对化合物30a和30b的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.59(s,1H),7.44(s,1H),7.27(s,1H),7.02-7.09(m,4H),6.81-6.90(m,3H),4.84(s,1H),4.20-4.22(m,2H),3.99-4.03(m,1H),3.79-2.87(m,4H),3.62(s,2H),3.51-3.52(m,1H),3.21-3.27(m,2H),2.72-2.80(m,4H),2.55(m,2H)；LC-MS(m/z):448[M+H]⁺。

实施例14：(R)-7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮和(S)-7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮

在以下方法中通过手性SFC分离两种对映异构体，并且通过Mosher法确认每种对映异构体的绝对构型。

分析型分离方法：仪器：水UPLC；柱：Daicel Chiralcel IC，2.1×150mm I.D.，3μm；流动相：A为CO₂，并且B为乙醇(0.1％DEA)；梯度：B 30％；流速：1mL/min；背压：1500psi；柱温：40℃；波长：220nm。

制备型分离方法：仪器：水SFC200；柱：Daicel Chiralcel IC，250×30mm I.D.，5μm；流动相：A为CO₂，并且B为乙醇(0.1％NH₃H₂0)；梯度：B 35％；流速：70mL/min；背压：100巴；柱温：38℃；波长：210nm；循环时间：14min。

实施例15：7-((1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(6)

化合物6使用1-(3-氨基氮杂环丁烷-1-基)乙烷-1-酮作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。LC-MS(m/z):449[M+H]⁺。

实施例16：7-(环丁基氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(7)

化合物7使用环丁胺作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。LC-MS(m/z):407[M+H]⁺。

实施例17：(S)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-(甲基磺酰基)氮杂环丁烷-3-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(8)

化合物8使用1-甲磺酰基氮杂环丁烷-3-胺和(S)-7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.02-7.09(m,6H),6.65(d,J＝6.2Hz,1H),6.37(d,J＝6.8Hz,1H),4.82(brs,1H),4.16-4.26(m,3H),4.03(brs,1H),3.53-3.79(m,7H),3.19-3.25(m,1H),3.03(s,3H),2.72-2.97(m,6H),2.48-2.49(m,2H)；LC-MS(m/z):485[M+H]⁺。

实施例18：(S)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(9)

化合物9使用1-甲基氮杂环丁烷-3-胺和(S)-7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。LC-MS(m/z):421[M+H]⁺。

实施例19：2-((S)-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(((S)-四氢呋喃-3-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(10)

化合物10使用(3S)-草脲胺-3-胺和(S)-7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)6.98-7.10(m,6H),6.68(dd,J＝2.4Hz,8.1Hz,1H),5.89(d,J＝6.3Hz,1H),4.83(brs,1H),3.96-4.02(m,2H),3.57-3.89(m,9H),3.21-3.24(m,1H),2.73-2.80(m,6H),2.48-2.50(m,2H),2.13-2.18(m,1H),1.65-1.74(m,1H)；LC-MS(m/z):422[M+H]⁺。

实施例20：2-((S)-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(((R)-四氢呋喃-3-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(11)

化合物11使用(3R)-草脲胺-3-胺和(S)-7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)6.98-7.10(m,6H),6.68(dd,J＝2.4Hz,8.2Hz,1H),5.89(d,J＝6.4Hz,1H),4.82(brs,1H),3.96-4.02(m,2H),3.49-3.89(m,9H),3.21-3.24(m,1H),2.73-2.80(m,6H),2.48-2.50(m,2H),2.13-2.18(m,1H),1.73-1.74(m,1H)；LC-MS(m/z):422[M+H]⁺。

实施例21：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-(氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(22)

化合物22使用1-(氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑-4-胺作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.80(s,1H),7.65(s,1H),7.47(s,1H),7.31(s,1H),7.04-7.09(m,5H),6.90(s,1H),5.54(brs,1H),4.80-4.91(m,5H),4.03(brs,1H),3.62-3.75(m,5H),3.24-3.33(m,2H),2.72-2.80(m,5H),2.50(brs,2H)；LC-MS(m/z):474[M+H]⁺。

实施例22：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(23)

化合物23使用1-甲基-1H-吡唑-3-胺作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.45(s,1H),7.79(s,1H),7.59(m,2H),7.10(m,5H),5.75(s,1H),4.85(brs,1H),4.05(brs,1H),3.65-3.74(m,8H),3.34(m,1H),2.82(m,6H),2.51(m,2H)；LC-MS(m/z):432[M+H]⁺。

实施例23：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(25)

化合物25使用1-(噁烷-4-基)-1H-吡唑-4-胺作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.69(s,1H),7.54(s,1H),7.33(s,1H),7.28(s,1H),7.02-7.08(m,5H),6.85-6.86(m,1H),4.81(brs,1H),4.34(brs,1H),3.94-4.01(m,3H),3.73-3.76(m,1H),3.45-3.63(m,6H),3.22-3.23(m,1H),2.72-2.79(m,6H),2.49(m,2H),1.95(brs,4H)；LC-MS(m/z):502[M+H]⁺。

实施例24：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(27)

化合物27使用4-氨基-1-甲基-1,2-二氢吡啶-2-酮作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.73(s,1H),7.68(s,1H),7.45(d,J＝7.4Hz,1H),7.06-7.26(m,6H),5.89-5.91(m,1H),5.72(s,1H),4.94(brs,1H),4.09(brs,1H),3.59-3.79(m,5H),3.26-3.29(m,4H),2.79-2.94(m,7H),2.50-2.58(m,1H)；LC-MS(m/z):459[M+H]⁺。

实施例25：6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(18)

化合物18使用噁烷-4-胺作为原料，以与实施例4中针对化合物16的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.59(s,1H),8.16(s,1H),8.01(s,1H),7.35(m,4H),4.85(brs,1H),4.04(brs,2H),3.30-3.76(m,10H),2.72-3.08(m,6H),2.50(brs,2H),1.85(brm,2H),1.36(brs,2H)；LC-MS(m/z):437[M+H]⁺。

实施例26：3-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(19)

化合物19使用1-(4-氨基哌啶-1-基)乙烷-1-酮作为原料，以与实施例4中针对化合物16的方法相似的方法来合成。LC-MS(m/z):478[M+H]⁺。

实施例27：6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(20)

化合物20使用1-甲基-1H-吡唑-4-胺作为原料，以与实施例4中针对化合物16的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.11(d,J＝2.9Hz,1H),7.68(s,1H),7.44(d,J＝2.8Hz,1H),7.32(s,1H),7.01-7.12(m,5H),4.81(d,J＝4.9Hz,1H),3.91-4.01(m,1H),3.77(s,3H),3.63-3.75(m,4H),3.20-3.25(m,1H),3.00-3.02(m,1H),2.90-2.94(m,2H),2.67-2.80(m,4H),2.46-2.50(m,2H)；LC-MS(m/z):433[M+H]⁺。

实施例28：4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(5)

化合物5使用氧杂环丁烷-3-胺作为原料，以与实施例7中针对化合物30a和30b的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.03-7.12(m,4H),6.80(d,J＝8.6Hz,1H),6.64(d,J＝2.8Hz,1H),6.56(dd,J＝2.8Hz,8.6Hz,1H),6.33(d,J＝6.6Hz,1H),4.81-4.84(m,3H),4.46-4.51(m,1H),4.37-4.40(m,2H),4.19-4.22(m,2H),4.00-4.04(m,1H),3.86(dd,J＝3.5Hz,13.6Hz,1H),3.51-3.57(m,2H),3.50-3.51(m,1H),3.22-3.28(m,1H),2.73-2.81(m,4H),2.50(m,2H)；LC-MS(m/z):424[M+H]⁺。

实施例29：(S)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(13)

化合物13使用1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑和(S)-7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮作为原料，以与实施例2中针对化合物14的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.18(s,1H),8.01(s,1H),7.87(s,1H),7.65(dd,J＝1.7Hz,7.8Hz,1H),7.26(d,J＝7.9Hz,1H),5.76(brs,1H),4.86(brs,1H),3.81-3.87(m,4H),3.60-3.72(m,4H),3.23-3.28(m,1H),2.91-2.95(m,2H),2.71-2.81(m,4H),2.50-2.51(m,2H)；LC-MS(m/z):417[M+H]⁺。

实施例30：3-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-6-(哒嗪-4-基氨基)喹唑啉-4(3H)-酮(31)

化合物31使用哒嗪-4-胺作为原料，以与实施例8中针对化合物3的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.48(s,1H),8.90(d,J＝2.4Hz,1H),8.76(d,J＝6.1Hz,1H),8.20(s,1H),7.92(s,1H),7.69(s,2H),7.18(dd,J＝3.0Hz,6.1Hz,1H),7.03-7.12(m,4H),5.11(d,J＝5.5Hz,1H),4.39(dd,J＝3.0Hz,13.4Hz,1H),4.09-4.10(m,1H),3.59-3.71(m,3H),2.67-2.81(m,4H),2.57-2.58(m,2H)；LC-MS(m/z):429[M+H]⁺。

实施例31：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)异喹啉-1(2H)-酮(32)

化合物32使用哒嗪-4-胺作为原料，以与实施例9中针对化合物4的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.48(s,1H),8.90(d,J＝2.4Hz,1H),8.73(d,J＝6.1Hz,1H),8.02(d,J＝2.3Hz,1H),7.68(d,J＝8.6Hz,1H),7.59(dd,J＝2.4Hz,8.5Hz,1H),7.34(d,J＝7.4Hz,1H),7.15(dd,J＝3.0Hz,6.1Hz,1H),7.03-7.12(m,4H),6.58(d,J＝7.4Hz,1H),4.95(d,J＝5.5Hz,1H),4.39(dd,J＝3.0Hz,13.4Hz,1H),4.13(m,1H),3.57-3.70(m,3H),2.73-2.83(m,4H),2.54-2.55(m,2H)；LC-MS(m/z):428[M+H]⁺。

实施例32：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)酞嗪-1(2H)-酮(33)

步骤1：3,6-二溴异苯并呋喃-1(3H)-酮

向6-溴异苯并呋喃-1(3H)-酮(2.00g，9.40mmol，1.0当量)在氯仿(20mL)中的搅拌溶液添加N-溴琥珀酰亚胺(NBS，1.92g，10.8mmol，1.15当量)和2,2′-偶氮双(2-甲基丙腈)(AIBN，154mg，0.94mmol，0.1当量)，并且将所得的混合物加热至60℃，持续2.5小时。将反应混合物用饱和NaHCO₃洗涤，接着用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法(PE/EtOAc＝10/1)纯化以得到作为白色固体的3,6-二溴异苯并呋喃-1(3H)-酮(2.00g，73％产率)。

步骤2：7-溴酞嗪-1(2H)-酮

在冰水浴温度下向3,6-二溴异苯并呋喃-1(3H)-酮(2.00g，6.85mmol，1.0当量)在乙醇(20mL)中的搅拌溶液添加水合肼(85％，1.71g，34.2mmol，5.0当量)，并且将所得的混合物加热至回流2小时。将反应混合物冷却至环境温度并用冷水稀释。通过过滤收集沉淀物以得到作为白色固体的7-溴酞嗪-1(2H)-酮(1.50g，97％产率)。

步骤3：7-溴-2-(环氧乙烷-2-基甲基)酞嗪-1(2H)-酮

向7-溴酞嗪-1(2H)-酮(1.00g，4.44mmol，1.0当量)在DMF(10mL)中的搅拌溶液添加2-(氯甲基)-环氧乙烷(1.24g，13.3mmol，3.0当量)和Cs₂CO₃(4.35g，13.3mmol，3.0当量)，并且将所得的混合物加热至90℃，持续0.5小时。将反应混合物用冷水稀释并用EA萃取。将有机相用水洗涤两次，接着用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将获得的残余物不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

步骤4：7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)酞嗪-1(2H)-酮

向7-溴-2-(环氧乙烷-2-基甲基)酞嗪-1(2H)-酮(1.25g，4.44mmol，1.0当量)在乙醇(20mL)中的搅拌溶液添加1,2,3,4-四氢异喹啉(0.89g，6.66mmol，1.5当量)，并且将所得的混合物加热至回流4小时。将反应混合物浓缩至干燥，并且将残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH＝100/1-50/1)纯化以得到作为浅黄色油状物的7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-酞嗪-1(2H)-酮(1.00g，56％产率)。

步骤5：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)酞嗪-1(2H)-酮(33)

化合物33使用哒嗪-4-胺和7-溴-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)酞嗪-1(2H)-酮作为原料，以与实施例1中针对化合物1的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.74(s,1H),8.98(d,J＝2.7Hz,1H),8.85(d,J＝6.0Hz,1H),8.34(s,1H),7.95(d,J＝2.1Hz,1H),7.90(d,J＝8.6Hz,1H),7.74(dd,J＝2.3Hz,8.6Hz,1H),7.33(dd,J＝3.0Hz,6.1Hz,1H),7.00-7.08(m,4H),4.84(d,J＝5.0Hz,1H),4.12-4.28(m,3H),3.60(m,2H),2.57-2.74(m,6H)；LC-MS(m/z):429[M+H]⁺。

实施例33：2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-4,4-二甲基-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(34)

化合物34使用哒嗪-4-胺作为原料，以与实施例3中针对化合物15的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.24(s,1H),8.82(d,J＝2.4Hz,1H),8.68(d,J＝6.1Hz,1H),7.73(s,1H),7.41(s,2H),7.02-7.11(m,5H),4.76(d,J＝4.0Hz,1H),4.04-4.06(m,1H),3.82(dd,J＝4.2Hz,13.5Hz,1H),3.64(s,2H),3.53(d,J＝12.6Hz,1H),3.42(d,J＝12.6Hz,1H),3.24-3.29(m,1H),2.73-2.81(m,4H),2.55(m,2H),1.28(s,6H)；LC-MS(m/z):458[M+H]⁺。

实施例34：2'-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7'-(哒嗪-4-基氨基)-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-1'-酮(35)

步骤1：(1-(4-溴苯基)环丙基)甲胺

在冰水浴温度下向1-(4-溴苯基)环丙烷-1-甲腈(1.00g，4.50mmol，1.0当量)在甲苯(10mL)中的搅拌溶液添加BH₃在THF(1N，22.5mmol，5.0当量)中的溶液，并且将所得的混合物加热至回流4小时。将反应混合物浓缩至干燥并用甲醇处理。将所得的混合物加热至回流，持续额外0.5小时。将反应混合物浓缩至干燥并用DCM和水处理。将有机相分离，用水洗涤，经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化以得到作为浅黄色油状物的(1-(4-溴苯基)环丙基)甲胺(0.70g，69％产率)。

步骤2：2-((((1-(4-溴苯基)环丙基)甲基)氨基甲酰基)氧基)苯甲酸甲酯

向(1-(4-溴苯基)环丙基)甲胺(0.70g，3.10mmol，1.2当量)在THF(10mL)中的搅拌溶液添加2,2'-(羰基双(氧基))二苯甲酸二甲酯(0.85g，2.58mmol，1.0当量)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌5小时。将反应混合物浓缩至干燥，并且将残余物通过柱色谱法(PE/EA＝5/1-3/1)纯化以得到作为无色油状物的2-((((1-(4-溴苯基)环丙基)甲基)氨基甲酰基)氧基)苯甲酸甲酯(1.00g，96％产率)。

步骤3：7'-溴-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-1'-酮

在冰水浴温度下向2-((((1-(4-溴苯基)环丙基)甲基)氨基甲酰基)氧基)苯甲酸酯(1.00g，2.47mmol，1.0当量)在DCM(20mL)中的搅拌溶液添加TfOH(1.81g，12.4mmol，5.0当量)，并且将所得的混合物再搅拌0.5小时。将反应混合物用水稀释，并用饱和Na₂CO₃处理，直至达到pH＝7-8。将混合物用DCM萃取，经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法(PE/EA＝1/1)纯化以得到作为白色固体的7'-溴-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-1'-酮(285mg，46％产率)。

步骤4：2'-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7'-(哒嗪-4-基氨基)-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-1'-酮(35)

化合物35使用哒嗪-4-胺作为原料，以与实施例3中针对化合物15的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.21(s,1H),8.81(d,J＝2.6Hz,1H),8.68(d,J＝6.1Hz,1H),7.75(d,J＝2.4Hz,1H),7.34(dd,J＝2.4Hz,8.3Hz,1H),7.02-7.11(m,6H),4.79(d,J＝4.5Hz,1H),4.04-4.06(m,1H),3.81(dd,J＝4.1Hz,13.6Hz,1H),3.64(s,2H),3.52(dd,J＝12.8Hz,38.4Hz,2H),3.21-3.27(m,1H),2.73-2.81(m,4H),2.50(m,2H),1.03(d,J＝4.7Hz,4H)；LC-MS(m/z):456[M+H]⁺。

实施例35：(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(嘧啶-5-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(36)

化合物36使用嘧啶-5-胺和(R)-7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮作为原料，以与实施例7中针对化合物30a的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.63(s,1H),8.52(s,1H),8.49(s,2H),7.35(d,J＝2.8Hz,1H),7.26(dd,J＝2.9Hz,8.6Hz,1H),7.03-7.10(m,4H),6.99(d,J＝8.6Hz,1H),4.86(d,J＝5.5Hz,1H),4.34(t,J＝5.0Hz,2H),4.02-4.04(m,1H),3.88(dd,J＝3.5Hz,13.5Hz,1H),3.61-3.63(m,4H),2.67-2.81(m,4H),2.54-2.55(m,2H)；LC-MS(m/z):446[M+H]⁺。

实施例36：(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(37)

化合物37使用嘧啶-4-胺和(R)-7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮作为原料，以与实施例7中针对化合物30a的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.62(s,1H),8.60(s,1H),8.25(d,J＝5.9Hz,1H),7.91(d,J＝2.6Hz,1H),7.75(dd,J＝2.7Hz,8.6Hz,1H),7.04-7.10(m,4H),7.00(d,J＝8.7Hz,1H),6.74(d,J＝5.9Hz,1H),4.88(brs,1H),4.33-4.36(m,2H),4.01-4.06(m,1H),3.85-4.95(m,1H),3.61-3.63(m,4H),2.67-2.81(m,4H),2.54-2.55(m,2H)；LC-MS(m/z):446[M+H]⁺。

实施例37：(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(吡嗪-2-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(38)

化合物38使用吡嗪-2-胺和(R)-7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮作为原料，以与实施例7中针对化合物30a的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.53(s,1H),8.19(dd,J＝1.4Hz,1H),8.10(dd,J＝1.4Hz,2.8Hz,1H),7.96(d,J＝2.8Hz,1H),7.90(d,J＝2.8Hz,1H),7.75(dd,J＝2.8Hz,8.8Hz,1H),7.04-7.11(m,4H),6.99(d,J＝8.7Hz,1H),4.87(d,J＝4.7Hz,1H),4.32(t,J＝5.1Hz,2H),4.01-4.06(m,1H),3.85-4.95(m,1H),3.61-3.63(m,4H),2.67-2.81(m,4H),2.55(m,2H)；LC-MS(m/z):446[M+H]⁺。

实施例38：(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-3-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(39)

化合物39使用哒嗪-3-胺和(R)-7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮作为原料，以与实施例7中针对化合物30a的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.30(s,1H),8.65(dd,J＝1.3Hz,4.4Hz,1H),8.04(d,J＝2.8Hz,1H),7.89(dd,J＝2.8Hz,8.8Hz,1H),7.42(dd,J＝4.4Hz,9.0Hz,1H),7.04-7.10(m,5H),7.00(d,J＝8.7Hz,1H),4.87(d,J＝4.6Hz,1H),4.33(t,J＝5.6Hz,2H),4.04-4.05(m,1H),3.85-4.95(m,1H),3.61-3.63(m,4H),2.67-2.81(m,4H),2.55(m,2H)；LC-MS(m/z):446[M+H]⁺。

实施例39：(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(40)

化合物40使用4-氨基-1-甲基吡啶-2(1H)-酮和(R)-7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮作为原料，以与实施例7中针对化合物30a的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.59(s,1H),7.43(d,J＝7.5Hz,1H),7.40(d,J＝2.8Hz,1H),7.23(dd,J＝2.8Hz,8.6Hz,1H),7.00-7.10(m,5H),5.86(dd,J＝2.6Hz,7.5Hz,1H),5.65(d,J＝2.4Hz,1H),4.86(d,J＝4.6Hz,1H),4.36(t,J＝4.9Hz,2H),4.03-4.08(m,1H),3.87-3.90(m,1H),3.63(m,4H),3.28(s,3H),2.80-2.81(m,4H)；LC-MS(m/z):475[M+H]⁺。

实施例40：(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(41)

化合物41使用1-甲基-1H-吡唑-5-胺和(R)-7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮作为原料，以与实施例7中针对化合物30a的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.97(s,1H),7.34(s,1H),7.05-7.10(m,4H),6.88-6.92(m,2H),5.94(s,1H),4.83(s,1H),4.27(m,2H),4.01-4.04(m,1H),3.84-3.88(m,1H),3.65(s,3H),3.56(m,2H),3.25(m,1H),2.67-2.81(m,4H),2.55(m,2H)；LC-MS(m/z):448[M+H]⁺。

实施例41：(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(42)

化合物42使用5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-胺和(R)-7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮作为原料，以与实施例7中针对化合物30a的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)10.33(s,1H),7.80(d,J＝2.6Hz,1H),7.61(dd,J＝2.7Hz,8.7Hz,1H),7.00-7.10(m,5H),4.88(m,1H),4.32(m,2H),4.02-4.04(m,1H),3.87-3.91(m,1H),3.58-3.65(m,4H),2.74-2.82(m,4H),2.40(s,3H)；LC-MS(m/z):450[M+H]⁺。

实施例42：4-((R)-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-5-氧代吡咯烷-3-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(43)

化合物43使用4-氨基-1-甲基吡咯烷-2-酮和(R)-7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮作为原料，以与实施例7中针对化合物30a的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.05-7.10(m,4H),6.81(d,J＝8.0Hz,1H),6.73(s,1H),6.67(d,J＝8.0Hz,1H),5.96(brs,1H),4.87(brs,1H),4.21(m,2H),4.01(m,2H),3.88(m,1H)；LC-MS(m/z):465[M+H]⁺。

实施例43：4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-1-甲基-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢-1H-苯并[e][1,4]二氮杂-2,5-二酮(44)

步骤1：6-溴-2H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4(1H)-二酮

向2-氨基-5-溴苯甲酸(2.16g，10.0mmol，3.0当量)在THF(20mL)中的搅拌溶液添加三光气(1.04g，3.50mmol，1.05当量)在THF(10mL)中的溶液，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌4小时。将反应混合物用冷水稀释并过滤以收集沉淀物。将获得的固体用DCM洗涤并干燥以得到作为灰白色固体的6-溴-2H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4(1H)-二酮(1.63g，68％产率)。

步骤2：6-溴-1-甲基-2H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4(1H)-二酮

在冰水浴温度下向6-溴-2H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4(1H)-二酮(1.63g，6.73mmol，1.0当量)在DMF(15mL)中的搅拌溶液添加NaH(60％，0.82g，8.07mmol，1.2当量)，并且将所得的混合物再搅拌15min。添加MeI(0.5mL，7.41mmol，1.1当量)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌2小时。将反应混合物用冷水稀释，并且通过过滤收集沉淀物。将获得的固体用水洗涤，接着用混合PE/EtOAc(10/1)洗涤并干燥以得到作为灰白色固体的6-溴-1-甲基-2H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4(1H)-二酮(1.50g，84％产率)。

步骤3：7-溴-1-甲基-3,4-二氢-1H-苯并[e][1,4]二氮杂-2,5-二酮

向6-溴-1-甲基-2H-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4(1H)-二酮(1.50g，5.86mmol，1.0当量)和甘氨酸(0.48g，6.45mmol，1.1当量)在DME(12mL)和水(4mL)的混合溶剂中的搅拌溶液添加TEA(2.4mL，17.6mmol，3.0当量)，并且将所得的混合物加热至60℃，持续4小时。将反应混合物浓缩至干燥并用AcOH(15mL)处理，并且将所得的混合物加热至回流，持续额外4小时。将反应混合物浓缩至干燥，并且将残余物用DCM和水处理。将有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH＝20/1)纯化以得到作为白色固体的7-溴-1-甲基-3,4-二氢-1H-苯并[e][1,4]二氮杂-2,5-二酮(0.64g，41％产率)。

步骤4：4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-1-甲基-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢-1H-苯并[e][1,4]二氮杂-2,5-二酮(44)

化合物44使用哒嗪-4-胺和7-溴-1-甲基-3,4-二氢-1H-苯并[e][1,4]二氮杂-2,5-二酮作为原料，以与实施例7中针对化合物30a的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)8.94(s,1H),8.77(d,J＝6.1Hz,1H),7.74(d,J＝2.6Hz,1H),7.42-7.46(m,2H),7.24(d,J＝8.7Hz,1H),7.01-7.15(m,5H),4.07-4.22(m,3H),3.82-3.85(m,2H),3.63-3.67(m,1H),3.38-3.41(m,4H),2.91-2.96(m,3H),2.75-2.77(m,1H),2.52-2.64(m,2H)；LC-MS(m/z):473[M+H]⁺。

实施例44：4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-1-甲基-7-(哒嗪-4-基氨基)-1,2,3,4-四氢-5H-苯并[e][1,4]二氮杂-5-酮(45)

步骤1：(2-(5-溴-2-氟苯甲酰氨基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯

向5-溴-2-氟苯甲酸(6.37g，29.1mmol，1.0当量)和(2-氨基乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(7.60g，43.7mmol，1.5当量)在DCM(100mL)中的搅拌溶液添加EDCI(11.12g，58.2mmol，2.0当量)，接着添加DIPEA(11.27g，87.2mmol，3.0当量)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌3小时。将反应混合物用水洗涤，接着用0.1N HCl溶液洗涤，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并过滤至干燥。将残余物通过柱色谱法(PE/EtOAc＝3/1)纯化以得到作为灰白色固体的(2-(5-溴-2-氟苯甲酰氨基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(4.20g，38％产率)。

步骤2：5-溴-2-氟-N-(2-(甲基氨基)乙基)苯甲酰胺

在冰水浴温度下向(2-(5-溴-2-氟苯甲酰氨基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(4.25g，11.3mmol，1.0当量)在DCM(40mL)中的搅拌溶液添加TFA(10mL)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌3小时。将反应混合物浓缩至干燥并用DCM和水处理。将混合物用1NNaOH溶液处理，直至达到pH＝7-8。将有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥以得到作为浅黄色油状物的5-溴-2-氟-N-(2-(甲基氨基)乙基)苯甲酰胺(3.00g，97％产率)。

步骤3：7-溴-1-甲基-1,2,3,4-四氢-5H-苯并[e][1,4]二氮杂-5-酮

向5-溴-2-氟-N-(2-(甲基氨基)乙基)苯甲酰胺(1.40g，5.10mmol，1.0当量)在DMSO(30mL)中的搅拌溶液添加固体K₂CO₃(2.11g，15.3mmol，3.0当量)，并且将所得的混合物加热至110℃，持续24小时。将反应用冷水稀释并用EtOAc萃取。将有机相用水洗涤，接着用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH＝100/1)纯化以得到作为黄色油状物的7-溴-1-甲基-1,2,3,4-四氢-5H-苯并[e][1,4]二氮杂-5-酮(270mg，21％产率)。

步骤4：4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-1-甲基-7-(哒嗪-4-基氨基)-1,2,3,4-四氢-5H-苯并[e][1,4]二氮杂-5-酮(45)

化合物45使用哒嗪-4-胺和7-溴-1-甲基-1,2,3,4-四氢-5H-苯并[e][1,4]二氮杂-5-酮作为原料，以与实施例7中针对化合物30a的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.98(s,1H),8.75(d,J＝2.5Hz,1H),8.62(d,J＝6.1Hz,1H),7.25-7.31(m,2H),7.03-7.13(m,4H),6.85-6.96(m,2H),4.83(d,J＝4.4Hz,1H),4.02-4.03(m,1H),3.84(dd,J＝4.0Hz,13.4Hz,1H),3.64(s,2H),3.49-3.52(m,2H),3.26-3.29(m,3H),2.73-2.81(m,7H),2.50(m,2H)；LC-MS(m/z):459[M+H]⁺。

实施例45：4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢吡啶并[3,2-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(47)

步骤1：2-((4-甲氧基苄基)氨基)乙烷-1-醇

向4-甲氧基苯甲醛(93.00g，0.68mol，1.0当量)在甲醇(930mL)中的搅拌溶液添加2-氨基乙烷-1-醇(45.69g，0.75mol，1.1当量)和催化MgSO₄，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌1小时。在冰水浴温度下分批添加固体NaBH₃CN(85.46g，1.36mmol，2.0当量)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物浓缩至干燥，并且将残余物用水处理。将混合物用DCM萃取三次，经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH＝5/1)纯化以得到作为无色油状物的2-((4-甲氧基苄基)氨基)乙烷-1-醇(32.00g，26％产率)。

步骤2：5-溴-2-氟-N-(2-羟乙基)-N-(4-甲氧基苄基)烟酰胺

向5-溴-2-氟烟酸(14.56g，66.2mmol，1.2当量)和2-((4-甲氧基苄基)氨基)乙烷-1-醇(10.00g，55.2mmol，1.0当量)在DCM(200mL)中的搅拌溶液添加EDCI(12.66g，66.2mmol，1.2当量)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌5小时。将反应混合物用水稀释并用DCM萃取。将有机相经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法(PE/EA＝3/1)纯化以得到作为无色油状物的5-溴-2-氟-N-(2-羟乙基)-N-(4-甲氧基苄基)烟酰胺(7.00g，33％产率)。

步骤3：7-溴-4-(4-甲氧基苄基)-3,4-二氢吡啶并[3,2-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮

在冰水浴温度下向5-溴-2-氟-N-(2-羟乙基)-N-(4-甲氧基苄基)烟酰胺(7.00g，18.3mmol，1.0当量)在DMF(40mL)中的搅拌溶液添加NaH(60％，1.46g，36.5mmol，2.0当量)，并且将所得的混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物通过冷水淬灭并用EA萃取。将有机相用水洗涤，经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法(PE/EA＝6/1)纯化以得到作为黄色油状物的7-溴-4-(4-甲氧基苄基)-3,4-二氢吡啶并[3,2-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(2.00g，30％产率)。

步骤4：7-溴-3,4-二氢吡啶并[3,2-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮

在冰水浴温度下向7-溴-4-(4-甲氧基苄基)-3,4-二氢吡啶并[3,2-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(2.00g，5.49mmol，1.0当量)在MeCN(10mL)和(10mL)的混合溶剂中的搅拌溶液添加固体CAN(9.03g，16.5mmol，3.0当量)，并且将所得的混合物再搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaCl稀释并用EA萃取。将有机相用水洗涤，经MgSO₄干燥，并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法(PE/EA＝1/1)纯化以得到作为黄色油状物的7-溴-3,4-二氢吡啶并[3,2-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(300mg，23％产率)。

步骤5：4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢吡啶并[3,2-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(47)

化合物47使用哒嗪-4-胺和7-溴-3,4-二氢吡啶并[3,2-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮作为原料，以与实施例7中针对化合物30a的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.29(s,1H),8.83(d,J＝2.6Hz,1H),8.68(d,J＝6.0Hz,1H),8.33(d,J＝2.9Hz,1H),8.03(d,J＝2.9Hz,1H),6.98-7.11(m,5H),4.92(brs,1H),4.53(t,J＝4.5Hz,2H),4.06(m,1H),3.90(dd,J＝3.5Hz,13.6Hz,1H),3.75-3.77(m,2H),3.63-3.64(m,2H),2.71-2.81(m,4H)；LC-MS(m/z):447[M+H]⁺。

实施例46：4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢吡啶并[4,3-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(48)

化合物48使用2-溴-5-氟异烟酸作为原料，以与实施例45中针对化合物47的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.91(s,1H),9.19(d,J＝2.1Hz,1H),8.82(d,J＝6.0Hz,1H),8.13(s,1H),8.02(dd,J＝2.9Hz,6.1Hz,1H),7.24(s,1H),7.03-7.12(m,4H),4.91(d,J＝4.8Hz,1H),4.40(t,J＝4.9Hz,2H),4.04(m,1H),3.88(dd,J＝3.4Hz,13.5Hz,1H),3.64-3.68(m,4H),3.40(m,1H),2.73-2.82(m,4H),2.50(m,2H)；LC-MS(m/z):447[M+H]⁺。

实施例47：4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(49)

化合物49使用6-氯-3-氟吡啶甲酸作为原料，以与实施例45中针对化合物47的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.96(s,1H),9.31(d,J＝2.4Hz,1H),8.84(d,J＝6.0Hz,1H),8.24(dd,J＝2.8Hz,6.0Hz,1H),7.50(d,J＝8.8Hz,1H),7.04-7.11(m,5H),4.93(d,J＝3.6Hz,1H),4.38(t,J＝4.9Hz,2H),4.07(brs,1H),3.94(dd,J＝3.3Hz,13.6Hz,1H),3.63-3.66(m,4H),3.30-3.35(m,1H),2.75-2.83(m,4H),2.50-2.54(m,2H)；LC-MS(m/z):447[M+H]⁺。

实施例48：4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-8-氟-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(50)

化合物50使用5-溴-2,4-二氟苯甲酸作为原料，以与实施例45中针对化合物47的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)8.94(s,1H),8.75(d,J＝2.8Hz,1H),8.67(d,J＝6.0Hz,1H),7.65(d,J＝9.4Hz,1H),7.02-7.11(m,5H),6.70-6.71(m,1H),4.87(d,J＝4.8Hz,1H),4.45(t,J＝4.7Hz,2H),4.03(m,1H),3.86-3.90(m,1H),3.65-3.75(m,4H),3.31(m,1H),2.79-2.82(m,4H),2.45-2.50(m,2H)；LC-MS(m/z):464[M+H]⁺。

实施例49：4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-9-氟-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(51)

步骤1：9-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮

9-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮使用2,3-二氟苯甲酸作为原料，以与实施例45中的7-溴-3,4-二氢吡啶并[3,2-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮相似的方法来合成。

步骤2：7-溴-9-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮

在冰水浴温度下向7-溴-3,4-二氢吡啶并[3,2-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(350mg，1.93mmol，1.0当量)在浓H₂SO₄(5mL)中的搅拌溶液添加NBS(344mg，1.93mmol，1.0当量)，并且将所得的混合物搅拌3小时。将反应混合物倒入冷水中，并且通过过滤收集沉淀物。将固体用饱和NaHCO₃洗涤并干燥以得到作为灰白色固体的7-溴-9-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(400mg，80％产率)。

步骤3：4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-9-氟-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(51)

化合物51以上述的一般程序合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)9.23(s,1H),8.81(d,J＝2.6Hz,1H),8.70(d,J＝6.0Hz,1H),7.35(dd,J＝2.7Hz,11.6Hz,1H),7.23(s,1H),7.03-7.11(m,5H),4.89(d,J＝4.4Hz,1H),4.44(t,J＝4.9Hz,1H),4.03(brs,1H),3.89(dd,J＝3.5Hz,13.6Hz,1H),3.64-3.68(m,4H),3.31(m,1H),2.73-2.81(m,4H),2.50(m,2H)；LC-MS(m/z):464[M+H]⁺。

实施例50：7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(52)

化合物52使用7-溴-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(实施例7)作为中间体，以与实施例6中针对化合物24a/24b的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.03-7.12(m,4H),6.77-6.79(m,2H),6.68-6.71(m,1H),5.47(d,J＝8.3Hz,1H),4.82(d,J＝4.1Hz,1H),4.18-4.21(m,3H),4.00(m,1H),3.86(dd,J＝3.6Hz,13.6Hz,1H),3.77(d,J＝13.2Hz,1H),3.64(s,2H),3.41-3.53(m,3H),3.17-3.31(m,2H),2.73-2.83(m,5H),2.00(s,3H),1.84-1.89(m,2H),1.27-1.29(m,2H)；LC-MS(m/z):493[M+H]⁺。

化合物52a和化合物52b通过化合物52的手性分离来制备。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.03-7.12(m,4H),6.77-6.79(m,2H),6.68-6.71(m,1H),5.47(d,J＝8.3Hz,1H),4.82(d,J＝4.1Hz,1H),4.18-4.21(m,3H),4.00(m,1H),3.86(dd,J＝3.6Hz,13.6Hz,1H),3.77(d,J＝13.2Hz,1H),3.64(s,2H),3.41-3.53(m,3H),3.17-3.31(m,2H),2.73-2.83(m,5H),2.00(s,3H),1.84-1.89(m,2H),1.27-1.29(m,2H)；LC-MS(m/z):493[M+H]⁺。

实施例51：7'-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2'-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-1'-酮(53)

化合物53使用7'-溴-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-1'-酮(实施例34)作为中间体，以与实施例6中针对化合物24a/24b的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.18(s,1H),7.02-7.11(m,4H),6.71(s,1H),5.58(d,J＝8.3Hz,1H),4.76(d,J＝3.8Hz,1H),4.19(d,J＝13.5Hz,1H),4.03(m,1H),3.75-3.81(m,2H),3.63(s,2H),3.36-3.50(m,3H),3.16-3.21(m,2H),2.72-2.82(m,5H),2.47-2.51(m,2H),2.00(s,3H),1.84-1.89(m,2H),1.28-1.30(m,2H),0.88(s,4H)；LC-MS(m/z):503[M+H]⁺。

化合物53a和化合物53b通过化合物53的手性分离来制备。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.18(s,1H),7.02-7.11(m,4H),6.71(s,1H),5.58(d,J＝8.3Hz,1H),4.76(d,J＝3.8Hz,1H),4.19(d,J＝13.5Hz,1H),4.03(m,1H),3.75-3.81(m,2H),3.63(s,2H),3.36-3.50(m,3H),3.16-3.21(m,2H),2.72-2.82(m,5H),2.47-2.51(m,2H),2.00(s,3H),1.84-1.89(m,2H),1.28-1.30(m,2H),0.88(s,4H)；LC-MS(m/z):503[M+H]⁺。

实施例52：(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-9-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(2a)和(S)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-9-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(2b)

化合物2a和2b以与实施例49中针对化合物51的程序相似的程序来合成，并且通过手性柱色谱法来分离。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.03-7.11(m,4H),6.58-6.65(m,2H),5.79(d,J＝8.2Hz,1H),4.87(s,1H),4.18-4.25(m,3H),4.00(m,1H),3.75-3.88(m,2H),3.43-3.64(m,5H),3.17-3.29(m,2H),2.73-2.82(m,5H),2.50-2.51(m,2H),2.00(s,3H),1.84-1.88(m,2H),1.25-1.28(m,2H)；LC-MS(m/z):511[M+H]⁺。

实施例53：(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-8-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(17a)和(S)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-8-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(17b)

化合物17a和17b以与实施例49中针对化合物51的程序相似的程序来合成，并且通过手性柱色谱法来分离。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.03-7.12(m,4H),6.95(d,J＝10.0Hz,1H),6.79(d,J＝12.2Hz,1H),5.11(d,J＝7.4Hz,1H),4.85(d,J＝4.8Hz,1H),4.26-4.32(m,3H),4.01-4.04(m,1H),3.79-3.90(m,2H),3.50-3.63(m,5H),3.15-3.26(m,2H),2.68-2.81(m,5H),2.48-2.50(m,2H),2.00(s,3H),1.84-1.99(m,2H),1.25-1.28(m,2H)；LC-MS(m/z):511[M+H]⁺。

实施例54：7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-6-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(46)

化合物46使用7-溴-6-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮作为中间体，以与实施例6针对化合物24a/24b的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.04-7.09(m,4H),6.87(t,J＝8.4Hz,1H),6.71(d,J＝8.5Hz,1H),5.07(d,J＝6.7Hz,1H),4.86(brs,1H),4.32(d,J＝12.0Hz,1H),4.16(s,2H),3.99(s,1H),3.82(t,J＝14.3Hz,2H),3.52-3.63(m,5H),3.07-3.31(m,3H),2.67-2.81(m,5H),2.50(m,2H),1.99(s,3H),1.84-1.92(m,2H),1.20-1.40(m,2H)；LC-MS(m/z):511[M+H]⁺。

化合物46a和化合物46b通过化合物46的手性分离来制备。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.04-7.09(m,4H),6.87(t,J＝8.4Hz,1H),6.71(d,J＝8.5Hz,1H),5.07(d,J＝6.7Hz,1H),4.86(brs,1H),4.32(d,J＝12.0Hz,1H),4.16(s,2H),3.99(s,1H),3.82(t,J＝14.3Hz,2H),3.52-3.63(m,5H),3.07-3.31(m,3H),2.67-2.81(m,5H),2.50(m,2H),1.99(s,3H),1.84-1.92(m,2H),1.20-1.40(m,2H)；LC-MS(m/z):511[M+H]⁺。

实施例55：7-((2-乙酰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(54)

化合物54使用(6-氨基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)乙烷-1-酮作为原料，以与实施例6中针对化合物24a/24b的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.03-7.11(m,4H),6.78(d,J＝8.6Hz,1H),6.66(d,J＝2.8Hz,1H),6.57(dd,J＝2.9Hz,8.6Hz,1H),5.81(dd,J＝2.0Hz,6.6Hz,1H),4.82(d,J＝4.7Hz,1H),4.16-4.21(m,3H),4.01-4.04(m,2H),3.85-3.88(m,2H),3.76(s,1H),3.63(m,3H),3.50-3.52(m,2H),3.26-3.30(m,1H),2.80-2.81(m,2H),2.73-2.74(m,2H),2.56-2.60(m,2H),2.50(m,2H),1.95-1.99(m,2H),1.71-1.73(m,3H)；LC-MS(m/z):505[M+H]⁺。

实施例56：7-((8-乙酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(55)

化合物55使用1-(3-氨基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)乙烷-1-酮作为原料，以与实施例6中针对化合物24a/24b的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.03-7.10(m,4H),6.70-6.78(m,3H),5.29(d,J＝9.0Hz,1H),4.83(d,J＝4.8Hz,1H),4.44(m,1H),4.18-4.22(m,3H),4.00-4.04(m,1H),3.84-3.88(m,1H),3.70-3.80(m,1H),3.63(s,2H),3.50-3.52(m,2H),3.26-3.28(m,2H),2.72-2.83(m,4H),2.50(m,2H),1.97-1.99(m,4H),1.78-1.88(m,4H),1.34-1.37(m,2H)；LC-MS(m/z):519[M+H]⁺。

实施例57：7-((3-乙酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(56)

化合物56使用1-(6-氨基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)乙烷-1-酮作为原料，以与实施例6中针对化合物24a/24b的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.13-7.17(m,3H),7.03-7.05(m,2H),6.91(d,J＝8.6Hz,1H),6.77(dd,J＝2.9Hz,8.6Hz,1H),4.35(m,2H),4.11-4.15(m,2H),3.53-3.95(m,10H),2.62-2.99(m,7H),2.23(s,1H),2.05(s,3H)；LC-MS(m/z):491[M+H]⁺。

实施例58：(R)-8-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-2,3,4,5-四氢-1H-3,5-桥亚甲基苯并[c]氮杂-1-酮(57a)和(S)-8-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-2,3,4,5-四氢-1H-3,5-桥亚甲基苯并[c]氮杂-1-酮(57b)

化合物57a和57b使用根据专利WO2013120980中报告的程序制备的8-溴-2,3,4,5-四氢-3,5-桥亚甲基-1H-2-苯并氮杂-1-酮作为原料，以实施例50中针对化合物52a和52b的方法相似的方法来合成。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ(ppm)7.79(d,J＝2.4Hz,1H),7.02-7.10(m,3H),6.95(d,J＝8.1Hz,1H),6.60(dd,J＝2.5Hz,8.1Hz,1H),5.60(d,1H),4.71(d,J＝4.7Hz,1H),4.18-4.22(m,2H),3.94-4.00(m,2H),3.76(m,1H),3.60(s,2H),3.46-3.48(m,1H),3.18-3.28(m,3H),2.70-2.84(m,5H),2.43-2.45(m,2H),2.01(s,3H),1.85-1.93(m,2H),1.53-1.60(m,2H),1.18-1.31(m,4H)；LC-MS(m/z):503[M+H]⁺。

实施例59：PRMT5生物化学抑制测定

在昆虫细胞/杆状病毒表达系统中共表达的与人类重组MEP50复合的人类重组PRMT5购自Reaction Biology(Malvern,PA)。生物素标记的组蛋白H4肽(1-21)底物购自Anaspec(Fremont,CA)。抗H4R3-Me AlphaLISA受体珠和链霉抗生物素蛋白标记的AlphaLISA供体珠从PerkinElmer(Waltham,MA)获得。S-腺苷甲硫氨酸(SAM)、Tween20、二甲基亚砜(DMSO)和Tris缓冲液以可获得的最高纯度水平从Sigma获得。

PRMT5/MEP50AlphaLISA酶抑制测定的一般程序：在即将进行测定之前添加0.01％Tween20和1mM DTT，在由50mM Tris、pH 8.5、5mM MgCl₂、50mM NaCl组成的缓冲液中执行测定。将具有4％DMSO的测定缓冲液中的2.5μL化合物溶液和预孵育30分钟的测定缓冲液中的5μL PRMT5/MRP50络合物/SAM混合物溶液添加到白色低体积384孔微量滴定板中。将此混合物溶液在室温下在轻微振荡下孵育15分钟。通过在测定缓冲液中添加2.5μL生物素-H4(1-21)肽底物溶液来引发甲基转移反应。PRMT5/MEP50、SAM、生物素-H4肽底物和DMSO的最终浓度分别为25nM、10μM、30nM和1％。使反应在黑暗中在轻微振荡下在室温下执行120分钟，之后将来自制造商的在检测缓冲液中的5μL抗H4R3-Me AlphaLISA受体珠添加到反应混合物中，接着孵育60分钟。将在检测缓冲液中的10μL链霉抗生物素蛋白标记的AlphaLISA供体珠添加到混合物中，接着孵育30分钟。最终受体和供体珠浓度为10μg/mL。在来自PerkinElmer(Waltham MA,USA)的Envision多模式板读数器上读取板，其中激发波长为680nm，并且发射波长为615nm。通过使用Prism 7(La Jolla,CA)在S形剂量反应曲线中拟合荧光强度相对于抑制剂浓度来获得抑制剂的IC50值。本文所述的代表性化合物的结果在表2中示出，其中C1代表参考1(EPZ-015666a)；C2代表EPZ-015666b；并且C3代表参考2(EPZ-015938a)。

表2

实施例60：细胞增殖抑制测定：

材料和细胞系：Z-138、U251和MIAPaCa2细胞购自ATCC(American Type CultureCollection,Manassas,VA)和中国科学院(Shanghai,China)。Iscove改良的Dulbecco培养基(IMDM)、Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM)、青霉素-链霉素、热灭活胎牛血清(FBS)和马血清购自ThermoFisher，Waltham，MA，USA。Corning 96孔和384孔细胞培养板购自ThermoFisher，Waltham，MA，USA。Cell-Titer

购自Promega Corporation，Madison，WI，USA。

为了评估合成的化合物对套细胞淋巴瘤Z-138细胞增殖的抑制能力，将指数生长的细胞以100ul/孔在96孔板中在30000个细胞/mL的浓度下接种在具有10％马血清和1％青霉素-链霉素的IMDM培养基中，并且在37℃下在5％CO₂培养箱中孵育过夜。将化合物在DMSO中制备为10点、3倍系列稀释液，以6mM开始。将来自化合物储备板的1μl DMSO溶液添加到99ul细胞培养基(测定中化合物的最终最高浓度为30uM，并且DMSO的最终浓度为0.5％)。将培养基中的100μL化合物溶液添加到Z-138细胞板的每个孔。在添加化合物溶液之后，将测定板在37℃、5％CO₂下孵育4天。使用从中国上海Beyotime Biotehnology获得的细胞计数试剂盒-8(CCK8)测量细胞成活率。将20ul的CCK8试剂添加到Z-138测定板的每个孔，将其在37℃下孵育2小时。用FlexStation 3微板读取器(Molecular Devices,Sunnyvale,CA94089USA)读取450nm处的O.D.。在Prism 7(La Jolla,CA)中使用S形剂量反应模型(可变斜率，四个参数)确定化合物使细胞成活率抑制50％的浓度(IC50值)。

为了评估合成的化合物对成胶质细胞瘤U-251细胞增殖的抑制能力，将指数生长的细胞以20ul/孔在384孔板中在10000个细胞/mL的浓度下接种在具有10％FBS和1％青霉素-链霉素的DMEM细胞培养基中，并且在37℃下在5％CO₂培养箱中孵育过夜。将化合物在DMSO中制备为10点、3倍系列稀释液，以6mM开始。将来自化合物储备板的1μl DMSO溶液添加到99ul细胞培养基(测定中化合物的最终最高浓度为30uM，并且DMSO的最终浓度为0.5％)。将培养基中的20μL化合物溶液添加到U-251细胞板的每个孔。在添加化合物溶液之后，将测定板在37℃、5％CO₂下孵育12天。在此孵育时间段期间，每4天更换具有新溶解的测试化合物的细胞培养基。从细胞板去除旧培养基之后，通过将1ul的化合物DMSO系列溶液添加到199ul的培养基制备具有溶解的测试化合物的40ul培养基，将其以与初始制备相同的安排添加到测定板。在8或12天之后，通过定量细胞培养物中存在的ATP使用来自Promega(Madison,WI,USA)的CellTiter-Glo测定试剂盒测量细胞成活率。将20μL的CellTiter-Glo试剂添加到细胞板的每个孔。在孵育10分钟之后用来自PerkinElmer(Waltham,MA,USA)的Envision多板读取器读取发光。在Prism 7(La Jolla,CA,USA)中使用S形剂量反应模型(可变斜率，四个参数)确定化合物使细胞成活率抑制50％的浓度(IC50值)。

为了评估合成的化合物对胰腺癌MIAPaCa-2细胞增殖的抑制能力，将指数生长的细胞以20ul/孔在384孔板中在2500个细胞/mL的浓度下接种在具有10％FBS、2.5％马血清、1mM丙酮酸钠和1％青霉素-链霉素的DMEM培养基中，并且在37℃下在5％CO₂培养箱中孵育过夜。将化合物在DMSO中制备为10点、3倍系列稀释液，以6mM开始。将来自化合物储备板的1μl DMSO溶液添加到99ul细胞培养基(测定中化合物的最终最高浓度为30uM，并且DMSO的最终浓度为0.5％)。将培养基中的20μL化合物溶液添加到MIAPaCa-2细胞板的每个孔。在添加化合物溶液之后，将测定板在37℃、5％CO₂下孵育12天。在此孵育时间段期间，每4天更换细胞培养基。从细胞板去除旧培养基之后，通过将1ul的化合物DMSO系列溶液添加到199ul的培养基制备具有溶解的测试化合物的40ul培养基，将其以与初始制备相同的安排添加到测定板。在8或12天之后，通过定量细胞培养物中存在的ATP使用来自Promega(Madison,WI,USA)的CellTiter-Glo测定试剂盒测量细胞成活率。将20μL的CellTiter-Glo试剂添加到细胞板的每个孔。在孵育10分钟之后用来自PerkinElmer(Waltham,MA,USA)的Envision多板读取器读取发光。在Prism 7(La Jolla,CA,USA)中使用S形剂量反应模型(可变斜率，四个参数)确定化合物使细胞成活率抑制50％的浓度(IC50值)。本文所述的代表性化合物的结果在表3中示出。

表3

实施例61：针对乳腺癌、肝癌和肺癌细胞系组的细胞增殖抑制活性筛选

评估合成的化合物对于三组癌细胞系(包括5个乳腺癌、6个肝癌和3个肺癌细胞系)的增殖的抑制能力。将指数生长的细胞以20ul/孔在384孔板中在各种细胞密度下接种在选择的培养基中，并且在37℃下在5％CO₂培养箱中孵育过夜。每种个体细胞系的精确细胞培养基和细胞密度在表4中列出。将化合物在DMSO中制备为10点、3倍系列稀释液，以6mM开始。将来自化合物储备板的1μl DMSO溶液添加到99ul细胞培养基(测定中化合物的最终最高浓度为30uM，并且DMSO的最终浓度为0.5％)。将培养基中的20μL化合物溶液添加到接种有细胞的板的每个孔。在添加化合物溶液之后，将测定板在37℃、5％CO₂下分别孵育8和12天。在此孵育时间段期间，每4天更换细胞培养基。从细胞板去除旧培养基之后，通过将1ul的化合物DMSO系列溶液添加到199ul的培养基制备具有溶解的测试化合物的40ul培养基，将其以与初始制备相同的安排添加到测定板。在8或12天之后，通过定量细胞培养物中存在的ATP使用来自Promega(Madison,WI,USA)的CellTiter-Glo测定试剂盒测量细胞成活率。将20μL的CellTiter-Glo试剂添加到细胞板的每个孔。在孵育10分钟之后用来自PerkinElmer(Waltham,MA,USA)的Envision多板读取器读取发光。在Prism 7(La Jolla,CA,USA)中使用S形剂量反应模型(可变斜率，四个参数)确定化合物使细胞成活率抑制50％的浓度(IC50值)。

表4：用于三种癌细胞组的增殖抑制筛选的细胞培养基和细胞密度

本文所述的代表性化合物的结果在以下表5中示出。

表5

实施例62：小鼠、大鼠和狗中的药代动力学研究

将雄性CD-1小鼠(16-24g；6-8周；购自Shanghai SLAC laboratory animalCO.LTD；n＝18，每个时间点3个)用单一剂量的测试化合物通过静脉内尾静脉注射以2mg/kg和通过口服饲喂施用以10mg/kg处理，其中两个剂量均在水中的20％N,N-二甲基乙酰胺中配制。口服施用后动物禁食过夜并在给药之后进食4小时。静脉内施用后动物可自由获取食物和水。所述研究是根据实验动物管理评估和认可协会(国际AAALAC)和美国国立卫生研究院的指南和标准执行的。

在指定的时间点处通过异氟烷麻醉动物，并且通过眼眶后穿刺或心脏穿刺，以用于在以异氟醚吸入麻醉下交错出血到EDTA-2K管中来收集大约110μL的血液样品。首先将血液样品保持在湿冰中并且在采样后15分钟内离心以获得血浆(2000g，4℃，5min)。将血浆样品储存在大约-70℃下，直至分析。对于未稀释的血浆样品，向20μL样品的等分试样添加在ACN中的200μL IS(普奈洛尔，100ng/mL)。将混合物涡旋10min并在5800rpm下离心10min。注射0.5μL上清液的等分试样以用于LC-MS/MS分析。对于10倍稀释的血浆样品，向2μL样品的等分试样添加18μL空白稀释血浆，稀释因子为10。随后的操作与没有稀释的血浆样品相同。通过分析含有普奈洛尔(100ng/mL)作为内部标准和1.0-3,000ng/mL测试化合物的一系列对照血浆等分式样来构建标准校准曲线。用UPLC-MS/MS-33(Triple QuadTM 6500Plus)确定化合物浓度。

将雄性SD大鼠(185-265g；购自Shanghai SLAC laboratory animal CO.LTD；n＝18，每种化合物3个)用单一剂量的测试化合物通过静脉内尾静脉注射以2mg/kg和通过口服饲喂施用以10mg/kg处理，其中两个剂量均在水中的5％DMSO+45％PEG400中配制。口服施用后动物禁食过夜并在给药之后进食4小时。静脉内施用后动物可自由获取食物和水。所述研究是根据实验动物管理评估和认可协会(国际AAALAC)和美国国立卫生研究院的指南和标准执行的。

人工约束动物。通过尾静脉在K2EDTA管中收集大约150μL全血/时间点。将血液样品置于冰上并在2000g下离心5分钟以在15分钟内获得血浆样品。将血浆样品储存在大约-70℃下，直至分析。向20μL样品的等分试样添加在ACN中的200μL IS(双氯芬酸，100ng/mL)。将混合物涡旋10min并在5800rpm下离心10min。注射1μL上清液的等分试样以用于LC-MS/MS分析。对于10x稀释的样品，向2μL样品的等分试样添加18μL空白血浆。样品制备程序与未稀释的样品相同。通过分析含有双氯芬酸(100ng/mL)作为内部标准和1.0-3,000ng/mL测试化合物的一系列对照血浆等分式样来构建标准校准曲线。用UPLC-MS/MS-22(Triple QuadTM6500)确定化合物浓度。

将非幼年雄性比格犬(8-10kg；购自Beijing Marshall Biotechnology Co.LTD；n＝18，每种化合物3个)用单一剂量的测试化合物通过静脉内尾静脉注射以2mg/kg和通过口服饲喂施用以10mg/kg处理，其中两个剂量均在水中的5％DMSO+45％PEG400中配制。口服施用后动物禁食过夜并在给药之后进食4小时。静脉内施用后动物可自由获取食物和水。所述研究是根据实验动物管理评估和认可协会(国际AAALAC)和美国国立卫生研究院的指南和标准执行的。

在指定的时间点处人工约束动物，并且通过头静脉收集大约500μL的每个血液/时间点并置于湿冰上，然后在采样后15分钟内在2000g下离心5min(4℃)。将血浆样品储存在大约-70℃下，直至分析。向20μL样品的等分试样添加在ACN中的200μL IS(双氯芬酸，100ng/mL)。将混合物涡旋10min并在5800rpm下离心10min。注射1μL上清液的等分试样以用于LC-MS/MS分析。对于10x稀释的样品，向2μL样品的等分试样添加18μL空白血浆。样品制备程序与未稀释的样品相同。通过分析含有双氯芬酸(100ng/mL)作为内部标准和3-3,000ng/mL测试化合物的一系列对照血浆等分式样来构建标准校准曲线。用UPLC-MS/MS-22(TripleQuadTM 6500)确定化合物浓度。本文所述的代表性化合物的结果在表6a-6c中示出。

表6a：代表性化合物的小鼠PK参数

表6b：代表性化合物的大鼠PK参数

表6c：代表性化合物的狗PK参数

实施例63：套细胞淋巴瘤(MCL)Z-138异种移植物功效研究

此研究中与动物处理、护理和治疗相关的所有程序均遵循AAALAC的指导根据Shanghai Chempartner的实验动物管理和使用委员会(IACUC)批准的指南来执行。

对于体内功效研究，CB-17雌性SCID小鼠(19-21g；10-12周)购自Shanghai SLAClaboratory animal CO.LTD.。对每只小鼠在右胁腹处皮下接种在0.2mL的基础培养基和基质胶的混合物(RPMI:基质胶，1:1)中的Z-138肿瘤细胞(5×10⁶个细胞/小鼠，50％基质胶)以用于肿瘤发育。当平均肿瘤大小达到121.55mm³时(这在接种之后11天)，治疗开始。使用随机化区组设计将小鼠分成各组。每日两次口服施用测试化合物或媒介物(5％DMSO+45％PEG400+50％H₂O)，持续21天。在整个研究期间，每周测量体重三次。使用卡尺以相同的时间表在两个维度上测量肿瘤大小，并且体积以立方毫米表示。在第21天最后一次给药之后6h对动物实施安乐死，此时收集肿瘤用于分析。本文所述的代表性化合物的结果在图1中示出。图1示出用化合物(52a)处理之后的肿瘤体积变化。

在前面的说明书中，已参考许多具体细节描述本发明的实施方案，所述细节可根据实现方式而变化。因此，应以例示性意义而不是限制性意义来理解本说明书和附图。本发明范围的唯一和排他性指标，以及申请人意图作为本发明范围的内容，是本申请以公布此类权利要求的特定形式公布的权利要求集合的字面和等同范围，包括任何后续修改。

Claims

1.一种由式(I)表示的化合物，或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、水合物或异构体，呈任何结晶形式或无定形形式：

其中R₁是非氢单价基团；W是直接键或-NH-；T、U和V彼此独立地选自碳和氮；R₂是氢或卤素；m是1或2；X是碳、氮或氧；Y是碳或氮；Z是直接键或碳；R₃是氢、非氢单价基团、氧代基或羰基(O＝)、二价螺环形成基团或二价桥形成基团；n是1或2；并且

代表单键或双键。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中式(I)是式(Ia-1)或式(Id-1)：

3.根据权利要求1所述的化合物，其中R₁是哌啶基、乙酰基哌啶基、含有0-2个杂原子的C₃-C₁₂螺、稠合或桥连双环基团、氮杂螺庚烷基、乙酰基氮杂螺庚烷基、氮杂环丁烷基、乙酰基氮杂环丁烷基、(甲基磺酰基)氮杂环丁烷基、氮杂双环辛烷基、乙酰基氮杂双环辛烷基、氮杂双环己烷基、乙酰基氮杂双环己烷基、环烷基、吡咯烷基、氧代吡咯烷基、烷基氧代吡咯烷基、甲基氧代吡咯烷基、甲基氮杂环丁烷基、吡唑基、烷基吡唑基、烷基-1H-吡唑基、甲基-氧代-二氢吡啶基、甲基-噁二唑基、氧杂环丁烷基、(氧杂环丁烷基)-1H-吡唑基、嘧啶基、哒嗪基、四氢呋喃基、四氢吡喃基或四氢吡喃基-吡唑基。

4.根据权利要求1所述的化合物，其中R₁是1-乙酰基哌啶-4-基、2-乙酰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基、1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基、8-乙酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基、3-乙酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基、环丁基、1-甲基-5-氧代吡咯烷-3-基、1-(甲基磺酰基)氮杂环丁烷-3-基、1-甲基氮杂环丁烷-3-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基、1-甲基-1H-吡唑-3-基、1-甲基-1H-吡唑-5-基、1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基、5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基、氧杂环丁烷-3-基、1-(氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑-4-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基、哒嗪-4-基、哒嗪-3-基、吡嗪-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢-2H-吡喃-4-基或1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基。

5.根据权利要求1所述的化合物，其中R₂是H或F，并且m＝1。

6.根据权利要求1所述的化合物，其中R₃是H、C1-C6烷基诸如甲基、氧代基或羰基(O＝)、二价C2-C6螺环形成基团诸如亚乙基螺环形成基团或二价C1-C4桥形成基团诸如亚甲基桥形成基团；并且n＝1或2。

7.根据权利要求1所述的化合物，其是以下化合物中的一种：

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(1)

(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-9-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(2a)

(S)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-9-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(2b)

3-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-6-(氧杂环丁烷-3-基氨基)喹唑啉-4(3H)-酮(3)

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)异喹啉-1(2H)-酮(4)

4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(5)

7-((1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(6)

7-(环丁基氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(7)

(S)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-(甲基磺酰基)氮杂环丁烷-3-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(8)

(S)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(9)

2-((S)-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(((S)-四氢呋喃-3-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(10)

2-((S)-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(((R)-四氢呋喃-3-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(11)

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(12)

(R)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(12a)

(S)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(12b)

(S)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(13)

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(嘧啶-5-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(14)

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-4,4-二甲基-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(15)

6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(16)

(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-8-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(17a)

(S)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-8-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(17b)

6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(18)

3-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(19)

6-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-5(6H)-酮(20)

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3-甲基-7-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(21)

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-(氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(22)

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(23)

7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(24)

(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(24a)

(S)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(24b)

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(25)

6-氯-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(26)，

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(27)

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(28)

(R)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(28a)

(S)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(28b)

4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(29)

(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(29a)

(S)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(29b)

4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(30)

(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(30a)

(S)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(30b)

3-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-6-(哒嗪-4-基氨基)喹唑啉-4(3H)-酮(31)

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)异喹啉-1(2H)-酮(32)

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)酞嗪-1(2H)-酮(33)

2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-4,4-二甲基-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(34)

2'-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7'-(哒嗪-4-基氨基)-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-1'-酮(35)

(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(嘧啶-5-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(36)

(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(37)

(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(吡嗪-2-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(38)

(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-3-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(39)

(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(40)

(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(41)

(R)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(42)

4-((R)-3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-((1-甲基-5-氧代吡咯烷-3-基)氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(43)

4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-1-甲基-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢-1H-苯并[e][1,4]二氮杂-2,5-二酮(44)

4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-1-甲基-7-(哒嗪-4-基氨基)-1,2,3,4-四氢-5H-苯并[e][1,4]二氮杂-5-酮(45)

7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-6-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(46)

(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-6-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(46a)

(S)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-6-氟-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(46b)

4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢吡啶并[3,2-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(47)

4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢吡啶并[4,3-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(48)

4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(49)

4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-8-氟-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(50)

4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-9-氟-7-(哒嗪-4-基氨基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(51)

7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(52)

(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(52a)

(S)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(52b)

7'-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2'-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-1'-酮(53)

(R)-7'-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2'-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-1'-酮(53a)

(S)-7'-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2'-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-1'-酮(53b)

7-((2-乙酰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(54)

7-((8-乙酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(55)

7-((3-乙酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基)氨基)-4-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢苯并[f][1,4]氧杂吖庚因-5(2H)-酮(56)

8-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-2,3,4,5-四氢-1H-3,5-桥亚甲基苯并[c]氮杂-1-酮(57)

(R)-8-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-2,3,4,5-四氢-1H-3,5-桥亚甲基苯并[c]氮杂-1-酮(57a)

或

(S)-8-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-2,3,4,5-四氢-1H-3,5-桥亚甲基苯并[c]氮杂-1-酮(57b)

8.根据权利要求1所述的化合物，其中R₁是1-乙酰基哌啶-4-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基或哒嗪-4-基；W是-NH-；T、U和V全部是碳原子；R₂是H或F；m是1；X是碳原子或氧原子；Y是碳原子；Z是直接键或碳原子；R₃是H；并且

代表单键。

9.根据权利要求1所述的化合物，其是以下化合物中的一种：

和

10.根据权利要求所述1的化合物，其是(R)-7-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-2-(3-(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2-羟丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(24a)

或

11.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、异构体或水合物，呈任何结晶形式或无定形形式；以及药学上可接受的载体或赋形剂。

12.一种试剂盒或包装药物，其包括治疗有效量的根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、异构体或水合物，呈任何结晶形式或无定形形式；以及其使用说明。

13.一种抑制蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)酶的方法，其包括：使所述PRMT5酶与有效量的以下物质接触：权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、异构体或水合物，呈任何结晶形式或无定形形式。

14.一种改变基因表达或改变转录的方法，其包括在体外或在受试者中使细胞与有效量的以下物质接触：权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、异构体或水合物，呈任何结晶形式或无定形形式。

15.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药、络合物、溶剂化物、异构体或水合物，呈任何结晶形式或无定形形式用于制备治疗PRMT5介导的或与异常PRMT5活性相关联的病症或疾病药物中的用途。

16.根据权利要求15所述的用途，其中所述病症或疾病是增殖性病症诸如癌症，代谢病症诸如糖尿病或肥胖症，血液病症诸如血红蛋白病，例如镰状细胞贫血病或β-地中海贫血，自身免疫疾病，或炎性疾病。

17.根据权利要求15所述的用途，其中所述病症或疾病是乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌、卵巢癌、皮肤癌、睾丸癌、子宫癌、宫颈癌、食道癌、膀胱癌、胃癌、肝癌、表皮样癌、脑癌、造血细胞癌、白血病诸如急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞白血病、毛细胞白血病、脊髓发育不良、骨髓增生性病症、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、肥大细胞增多症、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、多发性骨髓瘤(MM)、脊髓发育不良综合征(MDS)、血红蛋白病诸如β地中海贫血和镰状细胞病(SCD)、淋巴瘤、成神经管细胞瘤、直肠腺癌、结肠腺癌、腺样囊性癌、肺腺癌、头颈鳞状细胞癌、肝细胞癌、肾细胞癌、少突神经胶质瘤、卵巢透明细胞癌、卵巢浆液性囊腺癌、黑素瘤或其组合。

18.根据权利要求15所述的用途，其中所述病症或疾病包括可由细胞系诸如Raji、SU-DHL4和Z138代表的淋巴瘤；或可由细胞系诸如U87MG、U251和T98G代表的胶质瘤。

19.根据权利要求15所述的用途，其中所述病症或疾病是可由细胞系诸如IMIMPC2、MIAPaCa2、Aspc1、A6L、SKPC1和Panc-1代表的胰腺癌。

20.根据权利要求15所述的用途，其中所述病症或疾病是可由细胞系诸如600MPE、AU565、BT-20、BT-474、BT-483、BT-549、Evsa-T、Hs578T、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-453、MDA-MB-468、SkBr3和T-47D代表的乳腺癌；可由细胞系诸如Hep G2、Huh1、Huh7、SNU398、SNU475和MHCC-97H代表的肝癌；或可由细胞系诸如A-549、EBC-1和HCC827代表的肺癌。