KR20230167386A - 옥사제핀 화합물 및 암 치료에서의 이의 사용 - Google Patents

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KR20230167386A
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루이스 제이. 가자드
사만다 앨리슨 그린
엘리자베스 에이치. 켈리
매튜 레오 랜드리
수샨트 말호트라
벤자민 데이비드 라베츠
마이클 시우
잭 알렉산더 테레트
빈칭 웨이
스티븐 도
윤-싱 쳉
리민 쳉
지안펭 신
밍타오 헤
구오쉥 우
인레이 순
쳉 샤오
아이준 루
율라이 장
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제넨테크, 인크.
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Abstract

암의 치료에 유용한 비환식 옥사제피닐 화합물이 본원에 제공된다.

Description

옥사제핀 화합물 및 암 치료에서의 이의 사용
관련 출원에 대한 상호 참조
본 국제특허출원은 2021년 4월 8일에 출원한 국제특허출원 제PCT/CN2021/085959호의 우선권 이익을 주장하며, 그 전체가 모든 목적을 위해 본원에 원용된다.
KRas 돌연변이를 포함하는 암의 치료에 유용한 비환식 화합물, 상기 화합물의 조성물, 및 KRas 돌연변이를 포함하는 암을 치료하는 방법이 본원에 제공된다.
Ras는 중추 성장 신호전달 경로에 대한 뉴클레오티드-의존적 스위치로서 기능하는 작은 GTP-결합 단백질이다. 세포외 신호에 반응하여, Ras는 구아닌 뉴클레오티드 교환 인자(GEF), 특히 SOS1 단백질에 의해 촉매화되어 GDP-결합된 (RasGDP) 상태로부터 GTP-결합된(RasGTP) 상태로 전환된다. 활성 RasGTP는 Raf, PI3K 및 Ral 구아닌 뉴클레오티드 해리 자극인자를 포함하는 효과인자와의 직접 상호 작용을 통해 다양한 성장 촉진 기능을 매개한다. Ras의 고유한 GTPase 활성은 이후 GTP를 GDP로 가수분해하여 Ras 신호전달을 종료한다. Ras GTPase 활성은 뉴로피브로민 1 종양 억제인자를 포함하는 GTPase-활성화 단백질(GAP)과의 상호 작용에 의해 더욱 가속화될 수 있다.
돌연변이 Ras는 감소된 GTPase 활성을 갖고, 이는 활성화 상태를 연장하여, Ras-의존성 신호전달 및 암세포 생존 또는 성장을 촉진한다. GAP와 상호 작용하거나 GTP를 다시 GDP로 전환하는 능력에 영향을 미치는 Ras의 돌연변이는 단백질의 장기간 활성화를 야기하여 결과적으로 세포에 계속 성장하고 분열하라고 지시하는 장기간 신호를 야기할 것이다. 이들 신호가 세포 성장 및 분열을 일으키기 때문에, 과활성 RAS 신호전달은 궁극적으로 암을 유발할 수 있다. RAS 유전자의 세 가지 주요 이소형(HRas, NRas 또는 KRas) 중 하나의 돌연변이는 인간 종양형성에서 흔한 사건이다. 세 가지 Ras 이소형(K, N 및 H) 중에서, KRas가 가장 빈번하게 돌연변이된다.
가장 흔한 KRas 돌연변이는 P-루프의 잔기 G12와 G13 및 잔기 Q61에서 발견된다. 암에서 Ras의 돌연변이는 나쁜 예후와 관련된다. 마우스에서 발암성 Ras의 불활성화는 종양 수축을 발생시킨다. 따라서, Ras는 매우 중요한 종양학 표적으로 널리 간주된다.
이에 따라, 돌연변이 KRas 매개 암에 대한 치료법이 절실히 필요하다.
당업계의 상기 및 기타 문제에 대한 해결책이 본원에 제공된다.
제1 양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 본원에 제공된다.
다른 양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (II), (IIa), (IIb), (IIc), 또는 (IId)의 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 본원에 제공된다.
다른 양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (III), (IIIa), (IIIb), (IIIc), (IIId)의 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 본원에 제공된다.
다른 양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (IV), (IVa), (IVb), 또는 (IVc)의 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 본원에 제공된다.
다른 양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (V), (Va), (Vb), 또는 (Vc)의 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 본원에 제공된다.
또 다른 양태에서 표 1에 제시된 바와 같은 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 본원에 제공된다.
또 다른 양태에서 본원에 기재된 바와 같은 화합물, 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학적 조성물이 본원에 제공된다.
또 다른 양태에서 KRas 돌연변이를 포함하는 암 치료 방법이 본원에 제공되고, 상기 방법은 이러한 암을 앓는 환자에게, 본원에 기재된 바와 같은 화합물, 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 것을 포함한다.
또 다른 양태에서 KRas 돌연변이 단백질의 활성을 조절하는 방법이 본원에 제공되고, 상기 방법은 돌연변이 단백질을 본원에 기재된 바와 같은 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 반응시키는 것을 포함한다.
또 다른 양태에서 세포 모집단의 증식을 억제하는 방법이 본원에 제공되고, 상기 방법은 세포 모집단을 본원에 기재된 바와 같은 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉시키는 것을 포함한다.
또 다른 양태에서 이를 필요로 하는 개체에게 치료적 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 또는 본원에 기재된 바와 같은 약학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는 종양 전이를 억제하는 방법이 본원에 제공된다.
다른 양태에서, 표지된 KRas 돌연변이 단백질을 제조하는 방법이 본원에 제공되고, 상기 방법은 KRas 돌연변이 단백질을 표지된 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 반응시켜 표지된 Kras 돌연변이 단백질을 발생시키는 단계를 포함한다.
다른 양태에서, 본원에 제시된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 합성하는 공정이 제공된다.
정의
특정 구현예들에서 돌연변이 KRas의 억제제 또는 조절제인 본원에 기재된 바와 같은 옥사제핀 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 및 이의 약학적 조성물이 본원에 개시된다. 특정 예들에서, 이러한 화합물 및 조성물은 본원에 제공된 바와 같은 돌연변이 KRasG12V의 억제제 또는 조절제이다. 특정 예들에서, 이러한 화합물 및 조성물은 본원에 제공된 바와 같은 돌연변이 KRas의 억제제 또는 조절제(즉, 범-KRas 억제제) 이다. 본원에 기재된 화합물 및 조성물은 돌연변이 KRas에 의해 매개되는 질병 및 장애를 치료하는데 유용하다.
본원의 개시가 열거된 구현예를 제공하지만, 본원에 기재된 화합물 및 방법을 이러한 구현예로 제한하려는 의도가 아님을 이해해야 한다. 반대로, 본 발명은 청구범위에 의해 정의된 바와 같이 본 발명의 범위 내에 포함될 수 있는 모든 대안, 변형 및 균등물을 포함하도록 의도된다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 당업자에게 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본원에 언급된 모든 간행물, 특허 출원, 특허 및 기타 참조문헌은 그 전체가 참조로 포함된다. 본 출원에서 사용된 명명법은 달리 명시되지 않는 한 IUPAC 체계 명명법에 기반한다.
다음 정의는 본원에서 자주 사용되는 특정 용어의 이해를 돕기 위해 제공되며 본 발명 내용의 범위를 제한하려는 것은 아니다. 본원에 언급된 모든 참고문헌은 그 전체가 참고문헌으로 포함된다.
용어 "할로겐" 및 "할로"는 상호교환적으로 사용되며, F, Cl, Br 또는 I를 지칭한다. 추가적으로, "할로알킬"과 같은 용어는 모노할로알킬, 폴리할로알킬, 및 퍼할로알킬을 포함하는 것을 의미한다.
용어 "알킬"은 포화 직쇄 또는 분지쇄-사슬 1가 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 일 예에서, 알킬 라디칼은 1개 내지 8개의 탄소 원자(C1-18)이다. 다른 예들에서, 알킬 라디칼은 C1-12, C1-10, C1-8, C1-6, C1-5, C1-4 또는 C1-3이다. 알킬기의 예로는 메틸(Me, -CH3), 에틸(Et, -CH2CH3), 1-프로필(n-Pr, n-프로필, -CH2CH2CH3), 2-프로필(i-Pr, i-프로필, -CH(CH3)2), 1-부틸(n-Bu, n-부틸, -CH2CH2CH2CH3), 2-메틸-1-프로필(i-Bu, i-부틸, -CH2CH(CH3)2), 2-부틸(s-Bu, s-부틸, -CH(CH3)CH2CH3), 2-메틸-2-프로필(t-Bu, t-부틸, -C(CH3)3), 1-펜틸(n-펜틸, -CH2CH2CH2CH2ㄹCH3), 2-펜틸(-CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-펜틸(-CH(CH2CH3)2), 2-메틸-2-부틸(-C(CH3)2CH2CH3), 3-메틸-2-부틸(-CH(CH3)CH(CH3)2), 3-메틸-1-부틸(-CH2CH2CH(CH3)2), 2-메틸-1-부틸(-CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-헥실(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3), 2-헥실(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3), 3-헥실(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3)), 2-메틸-2-펜틸(-C(CH3)2CH2CH2CH3), 3-메틸-2-펜틸(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3), 4-메틸-2-펜틸(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2), 3-메틸-3-펜틸(-C(CH3)(CH2CH3)2), 2-메틸-3-펜틸(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2), 2,3-디메틸-2-부틸(-C(CH3)2CH(CH3)2), 3,3-디메틸-2-부틸(-CH(CH3)C(CH3)3, 1-헵틸 및 1-옥틸을 포함한다.
용어 "옥소"는 =O를 지칭한다.
용어 "알콕시"는 -O-알킬을 지칭한다.
용어 "시아노" 또는 "니트릴"은 -C≡N 또는 -CN을 지칭한다.
용어 "할로알콕시"는 -O-할로알킬을 지칭한다.
용어 "히드록시" 및 "히드록실"은 -OH를 지칭한다.
용어 "알킬리덴"은 화학식 =CR'R"을 갖는 직쇄 또는 분지쇄 1가 탄화수소 라디칼을 지칭하고, 여기서 R' 및 R"은 동일하거나 상이할 수 있다. 한 예에서, 알킬리덴 라디칼은 1 내지 6 개의 탄소(C1-6)이다. 다른 예에서, 알킬리덴 라디칼은 C1-3, C1-2 또는 C1이다. 예시적인 알킬리덴은 메틸리덴(=CH2), 에틸리덴(=CHCH3) 및 프로필리덴(=CH-CH2-CH3)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
용어 "알케닐"은 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합이 있는 직쇄 또는 분지쇄 1가 탄화수소 라디칼을 지칭하고, "시스" 및 "트랜스" 배향, 또는 대안적으로, "E" 및 "Z" 배향을 갖는 라디칼을 포함한다. 일 예에서, 알케닐 라디칼은 2개 내지 18개의 탄소 원자(C2-18)이다. 다른 예들에서, 알케닐 라디칼은 C2-12, C2-10, C2-8, C2-6 또는 C2-3이다. 예로는 에테닐 또는 비닐(-CH=CH2), 프로프-1-에닐(-CH=CHCH3), 프로프-2-에닐(-CH2CH= CH2), 2-메틸프로프-1-에닐, 부트-1-에닐, 부트-2-에닐, 부트-3-에닐, 부타-1,3-디에닐, 2-메틸부타-1,3-디엔, 헥스-1-에닐, 헥스-2-에닐, 헥스-3-에닐, 헥스-4-에닐, 및 헥사-1,3-디에닐을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
용어 "알키닐"은 적어도 하나의 탄소-탄소 삼중 결합이 있는 직쇄 또는 분지쇄 1가 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 일 예에서, 알키닐 라디칼은 2개 내지 18개의 탄소 원자(C2-18)이다. 다른 예들에서, 알키닐 라디칼은 C2-12, C2-10, C2-8, C2-6 또는 C2-3이다. 예로는 에티닐(-C
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CH), 프로프-1-이닐(-CCCH3), 프로프-2-이닐(프로파길, -CH2CCH), 부트-1-이닐, 부트-2-이닐, 및 부트-3-이닐을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
용어 "알킬렌"은 모 알칸의 동일하거나 상이한 두 개의 탄소 원자로부터 두 개의 수소 원자의 제거에 의해 유도된 두 개의 1가 라디칼 중심을 갖는 포화, 분지쇄 또는 직쇄 사슬 탄화수소 기를 지칭한다. 일 예에서, 2가 알킬렌 기는 1개 내지 18개의 탄소 원자(C1-18)이다. 다른 예들에서, 2가 알킬렌 기는 C1-12, C1-10, C1-8, C1-6, C1-5, C1-4 또는 C1-3이다. 예시 알킬렌 기는 메틸렌(-CH2-), 1,1-에틸(-CH(CH3)-), 1,2-에틸(-CH2CH2-), 1,1-프로필(-CH(CH2CH3)-), 2,2-프로필(-C(CH3)2-), 1,2-프로필(-CH(CH3)CH2-), 1,3-프로필(-CH2CH2CH2-), 1,1-디메틸에트-1,2-일(-C(CH3)2CH2-), 1,4-부틸(-CH2CH2CH2CH2-) 등을 포함한다.
용어 "시클로알킬"은 포화 탄화수소 고리 기를 지칭한다. 시클로알킬은 모노-, 비-, 트리시클릭, 스피로 및 가교 포화 고리 시스템을 포함한다. 일 예에서, 시클로알킬 기는 3개 내지 12개의 탄소 원자(C3-12)이다. 다른 예들에서, 시클로알킬은 C3-4, C3-5, C3-7, C3-8, C3-10 또는 C5-10이다. 다른 예들에서, 시클로알킬 기는, 모노사이클로서, C3-4, C3-8, C3-6 또는 C5-6이다. 다른 예에서, 시클로알킬 기는, 비사이클로서, C7-C12이다. 다른 예에서, 시클로알킬 기는, 스피로 시스템으로서, C5-12이다. 모노시클릭 시클로알킬의 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 시클로옥틸, 시클로노닐, 시클로데실, 시클로운데실 및 시클로도데실을 포함한다. 7 내지 12 개의 고리 원자를 갖는 비시클릭 시클로알킬의 예시적인 배열은 [4,4], [4,5], [5,5], [5,6] 또는 [6,6] 고리 시스템을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 예시적인 가교된 비시클릭 시클로알킬은 비시클로[2.2.1]헵탄, 비시클로[2.2.2]옥탄 및 비시클로[3.2.2]노난을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 스피로시클로알킬의 예는 스피로[2.2]펜탄, 스피로[2.3]헥산, 스피로[2.4]헵탄, 스피로[2.5]옥탄 및 스피로[4.5]데칸을 포함한다.
용어 "헤테로시클릭 기", "헤테로시클릭", "헤테로사이클", "헤테로시클릴" 또는 "헤테로시클로"는 상호 교환적으로 사용되며 3개 내지 20개의 고리 원자를 갖는, 임의의 모노-, 비-, 트리시클릭, 스피로 또는 가교, 포화, 부분적 포화 또는 불포화, 비방향족 고리 시스템을 지칭하고, 여기서 고리 원자는 탄소이고, 고리 또는 고리 시스템의 적어도 하나의 원자는 질소, 황 또는 산소로부터 선택된 헤테로원자이다. 환형 시스템의 임의의 고리 원자가 헤테로원자인 경우, 해당 시스템은 분자의 나머지에 대한 고리 시스템의 부착 지점에 관계 없이 헤테로고리이다. 일 예에서, 헤테로시클릴은 3-10개의 고리 원자("일원")를 포함하고 모노사이클, 비사이클, 트리사이클, 스피로 및 가교 고리 시스템을 포함하고, 여기서 고리 원자는 탄소이고, 여기서 고리 또는 고리 시스템의 적어도 하나의 원자는 질소, 황 또는 산소로부터 선택된 헤테로원자이다. 다른 예들에서, 헤테로시클릴은 3-6, 5-9, 4-10 또는 5-10개의 고리 원자를 포함한다. 일 예에서, 헤테로시클릴은 1 내지 4 개의 헤테로원자를 포함한다. 일 예에서, 헤테로시클릴은 1 내지 3 개의 헤테로원자를 포함한다. 다른 예에서, 헤테로시클릴은 질소, 황 또는 산소로부터 선택된 1-2, 1-3 또는 1-4 개의 헤테로원자를 갖는 3- 내지 7-원 모노사이클을 포함한다. 다른 예에서, 헤테로시클릴은 질소, 황 또는 산소로부터 선택된 1-2, 1-3 또는 1-4 개의 헤테로원자를 갖는 4- 내지 6-원 모노사이클을 포함한다. 다른 예에서, 헤테로시클릴은 3-원 모노사이클을 포함한다. 다른 예에서, 헤테로시클릴은 4-원 모노사이클을 포함한다. 다른 예에서, 헤테로시클릴은 5-6 원 모노사이클을 포함한다. 다른 예에서, 헤테로시클릴은 8, 9, 또는 10원 비사이클을 포함한다. 상기 예들에서, 헤테로시클릴 기는 4,5-, 5,5-, 4,6-, 5,6-, 또는 6,6-융합 고리 시스템일 수 있다. 일부 구현예들에서, 헤테로시클로알킬은 적어도 한 개의 질소를 포함한다. 일 예에서, 헤테로시클릴 기는 0 내지 3개의 이중 결합을 포함한다. 임의의 질소 또는 황 헤테로원자는 선택적으로 산화될 수 있고(예를 들어, NO, SO, SO2), 임의의 질소 헤테로원자는 선택적으로 사차화될 수 있다(예를 들어, [NR4]+Cl-, [NR4]+OH-). 예시 헤테로사이클은 옥시라닐, 아지리디닐, 티라닐, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 1,2-디티에타닐, 1,3-디티에타닐, 피롤리디닐, 디히드로-1H-피롤릴, 디히드로푸라닐, 테트라히드로푸라닐, 디히드로티에닐, 테트라히드로티에닐, 이미다졸리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 이소퀴놀리닐, 테트라히드로이소퀴놀리닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 1,1-디옥소-티오모르폴리닐, 디히드로피라닐, 테트라히드로피라닐, 헥사히드로티오피라닐, 헥사히드로피리미디닐, 옥사지나닐, 티아지나닐, 티옥사닐, 호모피페라지닐, 호모피페리디닐, 아제파닐, 옥세파닐, 티에파닐, 옥사제피닐, 옥사제파닐, 디아제파닐, 1,4-디아제파닐, 디아제피닐, 티아제피닐, 티아제파닐, 테트라히드로티오피라닐, 옥사졸리디닐, 티아졸리디닐, 이소티아졸리디닐, 1,1-디옥소이소티아졸리디노닐, 1,1-디옥소이소티아졸릴, 옥사졸리디노닐, 이미다졸리디노닐, 4,5,6,7-테트라히드로[2H]인다졸릴, 테트라히드로벤조이미다졸릴, 4,5,6,7-테트라히드로벤조[d]이미다졸릴, 티아지닐, 옥사지닐, 티아디아지닐, 옥사디아지닐, 디티아지닐, 디옥사지닐, 옥사티아지닐, 티아트리아지닐, 옥사트리아지닐, 디티아디아지닐, 이미다졸리닐, 디히드로피리미딜, 테트라히드로피리미딜, 1-피롤리닐, 2-피롤리닐, 3-피롤리닐, 인돌리닐, 티아피라닐, 2H-피라닐, 4H-피라닐, 디옥사닐, 1,3-디옥솔라닐, 피라졸리닐, 피라졸리디닐, 디티아닐, 디티올라닐, 피리미디노닐, 피리미딘디오닐, 피리미딘-2,4-디오닐, 피페라지노닐, 피페라진디오닐, 피라졸리디닐이미다졸리닐, 3-아자비시클로[3.1.0]헥사닐, 3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵타닐, 6-아자비시클로[3.1.1]헵타닐, 3-아자비시클로[3.1.1]헵타닐, 3-아자비시클로[4.1.0]헵타닐, 아자비시클로[2.2.2]헥사닐, 2-아자비시클로[3.2.1]옥타닐, 8-아자비시클로[3.2.1]옥타닐, 2-아자비시클로[2.2.2]옥타닐, 8-아자비시클로[2.2.2]옥타닐, 7-옥사비시클로[2.2.1]헵탄, 아자스피로[3.5]노나닐, 아자스피로[2.5]옥타닐, 아자스피로[4.5]데카닐, 1-아자스피로[4.5]데칸-2-오닐, 아자스피로[5.5]운데카닐, 테트라히드로인돌릴, 옥타히드로인돌릴, 테트라히드로이소인돌릴, 테트라히드로인다졸릴, 1,1-디옥소헥사히드로티오피라닐이다.
본원에 사용된 "아릴"은 단일 고리(예를 들어, 페닐) 또는 다중 융합된 또는 스피로 고리(예를 들어, 나프틸 또는 안트릴)를 갖는 불포화 방향족 카보시클릭 기를 지칭하며, 융합된 또는 스피로 고리는 방향족일 수 있거나 방향족일 수 없다. 특히 아릴 기는 6 내지 14개의 환형(즉, 고리) 탄소 원자("C6-14 아릴")를 갖는 것이다. 바람직한 아릴 기는 5 내지 6개의 고리 탄소를 갖는 것을 포함한다. 적어도 한 개의 고리가 비방향족인 한 개 초과의 고리를 갖는 아릴 기는 방향족 고리 위치 또는 비방향족 고리 위치에서 또 모 구조에 연결될 수 있다. 한 변형에서, 적어도 하나의 고리가 비-방향족인 하나 초과의 고리를 갖는 아릴기는 방향족 고리 위치에서 모 구조에 연결된다.
용어 "헤테로아릴"은 질소, 산소 및 황으로부터 선택된 1 내지 4 개의 헤테로원자를 포함하는 임의의 모노- 또는 비시클릭 방향족 고리 시스템을 지칭하고, 예시 구현예에서, 적어도 하나의 헤테로원자는 질소이다. 상기 헤테로아릴 고리 중 어느 하나가 아릴 고리에 접합되고, 여기서 아릴 고리 또는 헤테로아릴 고리가 분자의 나머지에 부분에 연결되는 임의의 비시클릭 기가 포함된다. 헤테로아릴기는 단일 고리(예를 들어, 피리딜, 푸릴) 또는 융합된 또는 스피로 고리가 방향족일 수 있거나 방향족일 수 없는 다수의 융합된 또는 스피로 고리(예를 들어, 인돌리지닐, 벤조티에닐)를 가질 수 있다. 일 구현예에서, 헤테로아릴은 하나 이상의 고리 원자가 질소, 황 또는 산소인 5-6원 모노시클릭 방향족 기를 포함한다. 헤테로아릴기의 예로는 티에닐, 푸릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 트리아졸릴, 티아디아졸릴, 옥사디아졸릴, 테트라졸릴, 티아트리아졸릴, 옥사트리아졸릴, 피리딜, 피리미딜, 피라지닐, 피리다지닐, 트리아지닐, 테트라지닐, 테트라졸로[1,5-b]피리다지닐, 이미다졸[1,2-a]피리미디닐 및 푸리닐, 뿐만 아니라 벤조-융합된 유도체, 예를 들어 벤족사졸릴, 벤조푸릴, 벤조티아졸릴, 벤조티아디아졸릴, 벤조트리아졸릴, 벤조이미다졸릴 및 인돌릴을 포함한다.
특정 구현예들에서, 헤테로시클릴기 또는 헤테로아릴기는 헤테로시클릴기 또는 헤테로아릴기의 탄소 원자에서 부착된다. 예로서, 탄소 결합된 헤테로시클릴 기는 피리딘 고리의 위치 2, 3, 4, 5 또는 6, 피리다진 고리의 위치 3, 4, 5 또는 6, 피리미딘 고리의 위치 2, 4, 5 또는 6, 피라진 고리의 위치 2, 3, 5 또는 6, 퓨란, 테트라히드로퓨란, 티오퓨란, 티오펜, 피롤 또는 테트라히드로피롤 고리의 위치 2, 3, 4 또는 5, 옥사졸, 이미다졸 또는 티아졸 고리의 위치 2, 4 또는 5, 이속사졸, 피라졸 또는 이소티아졸 고리의 위치 3, 4 또는 5, 아지리딘 고리의 위치 2 또는 3, 아제티딘 고리의 위치 2, 3 또는 4, 퀴놀린 고리의 위치 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8 또는 이소퀴놀린 고리의 위치 1, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8에서의 결합 배열을 포함한다.
특정 구현예들에서, 헤테로시클릴기 또는 헤테로아릴기는 N-부착된다. 예를 들어, 질소 결합된 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴 기는 아지리딘, 아제티딘, 피롤, 피롤리딘, 2-피롤린, 3-피롤린, 이미다졸, 이미다졸리딘, 2-이미다졸린, 3-이미다졸린, 피라졸, 피라졸린, 2-피라졸린, 3-피라졸린, 피페리딘, 피페라진, 인돌, 인돌린, 1H-인다졸의 위치 1, 이소인돌 또는 이소인돌린의 위치 2, 모르폴린의 위치 4, 및 카르바졸 또는 β-카르볼린의 위치 9에서의 결합 배열을 포함한다.
"접합된"은 본원에 기재된 화합물에서 기존 고리 구조와 하나 이상의 원자(예를 들어, 탄소 또는 질소 원자)를 공유하는 본원에 기재된 임의의 고리 구조를 지칭한다.
용어 "아실"은 화학식 -C(=O)-R로 표시되는 카르보닐 포함 치환기를 지칭하고, 여기서 R은 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로시클릴과 같은 치환기이며, 여기서 알킬, 시클로알킬, 아릴 및 헤테로시클릴은 본원에 정의된 바와 같다. 아실 기는 알카노일(예를 들어, 아세틸), 아로일(예를 들어, 벤조일) 및 헤테로아로일(예를 들어, 피리디노일)을 포함한다.
용어 "할로알킬"은 하나 이상의 수소가 할로겐으로 대체된 알킬 사슬을 지칭한다. 할로알킬의 예는 트리플루오로메틸, 디플루오로메틸 및 플루오로메틸이다. 치환된 할로알킬은 할로겐 이외의 모이어티를 갖는 할로알킬을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이 화학 구조에서의 결합과 교차하는 물결선 ""은 물결 결합이 화학 구조에서 분자의 나머지 또는 분자 단편의 나머지에 연결된 원자의 부착 지점을 나타낸다.
특정 구현예들에서, 2가 기는 특정 결합 배치 없이 일반적으로 기재된다. 일반적인 기재는 달리 명시되지 않는 한 두 결합 배치를 모두 포함함을 의도하는 것으로 이해된다. 예를 들어, R1-R2-R3 기 에서 R2 기가 -CH2C(O)-로 설명되는 경우, 달리 명시되지 않는 한, 해당 기는 R1-CH2C(O)-R3 및 R1-C(O)CH2-R3 둘 모두로서 결합될 수 있는 것으로 이해된다.
용어 "약학적으로 허용가능한"은 동물, 예를 들어 인간에게 적절히 투여시 불리하거나, 알러지성이거나 또는 다른 부적합한 반응을 생성시키지 않는 분자 실체 및 조성물을 지칭한다.
본원에 기재된 화합물은 약학적으로 허용가능한 염과 같은 염의 형태일 수 있다. "약학적으로 허용가능한 염"에는 산 및 염기 부가 염이 모두 포함된다. "약학적으로 허용가능한 산 부가염"은 유리 염기의 생물학적 유효성 및 특성을 유지하고 생물학적으로 또는 달리 바람직하지 않은 것이 아닌, 무기산(예를 들어, 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 탄산, 인산 등) 및 유기산(이는 유기산들의 지방족, 지환족, 방향족, 방향성 지방족, 헤테로고리, 카르복실 및 설폰계, 예를 들어, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 글루콘산, 젖산, 피루브산, 옥살산, 사과산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 구연산, 아스파르트산, 아스코르브산, 글루탐산, 안트라닐산, 벤조산, 계피산, 만델산, 엠본산, 페닐아세트산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 벤젠설폰산, p-톨루엔설폰산, 살리실산 등에서 선택될 수 있음)으로 형성되는 염을 지칭한다.
용어 "약학적으로 허용되는 염기 부가염"은 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망간, 알루미늄 염 등과 같은 무기 염기로부터 유도된 것을 포함한다. 특정 염기 부가 염은 암모늄, 칼륨, 나트륨, 칼슘 및 마그네슘 염이다. 약학적으로 허용되는 유기 비독성 염기로부터 유도된 염은 자연적으로 발생하는 치환된 아민, 환형 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예컨대 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 에탄올아민, 2-디에틸아미노에탄올, 트로메타민, 디시클로헥실아민, 라이신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 하이드라바민, 콜린, 베타인, 에틸렌디아민, 글루코사민, 메틸글루카민, 테오브로민, 퓨린, 피페라진, 피페리딘, N-에틸피페리딘, 폴리아민 수지 등을 포함하는, 1차, 2차 및 3차 아민, 치환된 아민의 염을 포함한다. 특정 유기 무독성 염기는 이소프로필아민, 디에틸아민, 에탄올아민, 트로메타민, 디시클로헥실아민, 콜린 및 카페인을 포함한다.
일부 구현예들에서, 염은 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 트리플루오로아세테이트, 설페이트, 포스페이트, 아세테이트, 푸마레이트, 말레이트, 타르트레이트, 락테이트, 시트레이트, 피루베이트, 석시네이트, 옥살레이트, 메탄설포네이트, p-톨루엔설포네이트, 비설페이트, 벤젠설포네이트, 에탄설포네이트, 말로네이트, 시나포에이트, 아스코르베이트, 올레이트, 니코티네이트, 사카리네이트, 아디페이트, 포르메이트, 글리콜레이트, 팔미테이트, L-락테이트, D-락테이트, 아스파르테이트, 말레이트, L-타르트레이트, D-타르트레이트, 스테아레이트, 푸로에이트(예를 들어, 2-푸로에이트 또는 3-푸로에이트), 나파디실레이트(나프탈렌-1,5-디설포네이트 또는 나프탈렌-1-(설폰산)-5-설포네이트), 에디실레이트(에탄-1,2-디설포네이트 또는 에탄-1-(설폰산)-2-설포네이트), 이소티오네이트(2-히드록시에틸설포네이트), 2-메시틸렌설포네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 2,5-디클로로벤젠설포네이트, D-만델레이트, L-만델레이트, 신나메이트, 벤조에이트, 아디페이트, 에실레이트, 말로네이트, 메시틸레이트(2-메시틸렌설포네이트), 나프실레이트(2-나프탈렌설포네이트), 캄실레이트(캄포르-10-설포네이트, 예를 들어 (1S)-(+)-10-캄포르설폰산 염), 글루타메이트, 글루타레이트, 히푸레이트 (2-(벤조일아미노)아세테이트) 오로테이트, 자일레이트 (p-자일렌-2-설포네이트) 및 파모익 (2,2'-디히드록시-1,1'-디나프틸메탄-3,3'-디카르복실레이트)로부터 선택된다.
“무균” 제제는 무균이거나 또는 모든 살아있는 미생물 및 이들의 포자가 없다.
용어 "입체이성질체"는 동일한 화학적 구성을 갖지만, 공간에서 원자 또는 기의 배열과 관련하여 상이한 화합물을 지칭한다. 입체이성질체는 부분입체이성질체, 거울상이성질체, 회전장애이성질체, 이형태체 등을 포함한다.
용어 "키랄"은 거울상 파트너의 비중첩성 특성을 갖는 분자를 지칭하는 한편, 용어 "아키랄"은 거울상 파트너에 중첩 가능한 분자를 지칭한다.
용어 "부분입체이성질체"는 둘 이상의 카이랄성 중심을 갖고 분자가 서로 거울상이 아닌 입체이성질체를 지칭한다. 부분입체이성질체는 상이한 물리적 특성, 예를 들어 녹는점, 끓는점, 스펙트럼 특성 또는 생물학적 활성을 갖는다. 부분입체이성질체의 혼합물은 HPLC과 같은 크로마토그래피 및 전기영동과 같은 고해상도 분석 절차에서 분리될 수 있다.
용어 "거울상이성질체"는 서로 중첩 불가능한 거울상인 화합물의 두 입체이성질체를 지칭한다.
용어 "회전장애이성질체"는 단일 결합에 대한 회전 방해로 인해 발생하는 두 가지 이형태체를 지칭하고 여기서 회전에 대한 입체 변형 장벽은 각 이형태체의 단리를 허용하도록 충분히 높을 수 있다.
본원에 사용된 입체화학적 정의 및 규약은 일반적으로 하기에 따른다: S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984) McGraw-Hill Book Company, New York; 및 Eliel, E. and Wilen, S., Stereochemistry of Organic Compounds(1994) John Wiley & Sons, Inc., New York. 많은 유기 화합물이 광학 활성 형태로 존재한다. 즉 평면 편광의 평면을 회전시키는 능력을 갖는다. 광학적 활성 화합물을 기재함에 있어서, 접두어 D 및 L, 또는 R 및 S는 이의 키랄 중심(들)에 대한 분자의 절대 배위를 지칭하기 위해 사용된다. 접두사 d 및 l 또는 (+) 및 (-)는 화합물에 의한 평면-편광의 회전 기호를 지정하기 위해 사용되며, (-) 또는 1은 화합물이 좌선성임을 의미한다. (+) 또는 d의 접두사를 갖는 화합물은 우선성이다. 주어진 화학 구조에 대해, 이들 입체이성질체는 서로 거울상임을 제외하고 동일하다. 특정 입체이성질체는 거울상이성질체로도 지칭될 수 있으며, 그러한 이성질체의 혼합물은 흔히 거울상이성질체 혼합물로 불린다. 거울상이성질체의 50:50 혼합물은 라세미 혼합물 또는 라세미체로 지칭되며, 이는 화학 반응 또는 공정에서 입체선택성 또는 입체특이성이 없는 경우에 발생할 수 있다. 용어 "라세미 혼합물 " 및 "라세미체"는 광학 활성이 없는 2개의 거울상이성질체 종의 등몰 혼합물을 지칭한다.
용어 "호변이성질체" 또는 "호변이성질체 형태"는 낮은 에너지 장벽을 통해 상호 변환 가능한 여러 상이한 에너지의 구조 이성질체를 지칭한다. 예를 들어, 양성자 호변이성질체(양성자성 호변이성질체로도 알려짐)는 케토-엔올 및 이민-엔아민 이성질화와 같은 양성자의 이동을 통한 상호 전환을 포함한다. 원자가 호변이성질체는 결합 전자의 일부의 재구성에 의한 상호 전환을 포함한다.
본원에 기재된 특정 화합물은 비용매화 형태뿐만 아니라 수화된 형태를 비롯한 용매화 형태로 존재할 수 있다. "용매화물"은 하나 이상의 용매 분자와 본원에 기재된 화합물의 회합체 또는 복합체를 지칭한다. 용매화물을 형성하는 용매의 예는 물, 이소프로판올, 에탄올, 메탄올, DMSO, 에틸 아세테이트, 아세트산 및 에탄올아민을 포함한다. 본원에 기재된 특정 화합물은 다중 결정질 또는 비정질 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 모든 물리적 형태가 본원에서 고려된다. 용어 "수화물"은 용매 분자가 물인 복합체를 지칭한다.
본원에 기재된 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염은 또한, 하나 이상의 원자가 자연에서 일반적으로 발견되는 원자 질량 또는 질량수와 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 대체된다는 사실을 제외하고, 본원에 인용된 것과 동일한 동위원소 표지된 화합물을 포함한다. 명시된 바와 같은 임의의 특정한 원자 또는 원소의 모든 동위원소 및 이들의 사용이 본원에서 고려된다. 본원에 기재된 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염에 혼입될 수 있는 예시적인 동위원소는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 플루오린, 염소 및 아이오딘의 동위원소, 예컨대 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 32P, 33P, 35S, 18F, 36Cl, 123I 및 125I를 포함한다. 본원에 기재된 특정 동위원소 표지된 화합물 또는 이의 약학적 허용가능한 염(예를 들어, 3H 및 14C로 표지된 것)은 화합물 및/또는 기질 조직 분포 검정에 유용하다. 삼중수소(3H) 및 탄소-14(14C) 동위원소는 제조 및 검출 용이성으로 인해 유용하다. 또한, 중수소(즉 2H)와 같은 더 무거운 동위원소를 사용한 치환은 더 큰 대사 안정성(예를 들어, 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여량 요건)으로 인한 특정한 치료적 이점을 제공할 수 있으므로 일부 상황에서 바람직할 수 있다. 15O, 13N, 11C 및 18F와 같은 양전자 방출 동위원소는 기질 수용체 점유를 조사하기 위한 양전자 방출 단층촬영(PET) 연구에 유용하다. 본원에 기재된 동위원소 표지된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 일반적으로, 비동위원소 표지된 시약을 동위원소 표지된 시약으로 대체함으로써 본원에서 아래의 실시예에 개시된 것과 유사한 절차에 따라 제조될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "아미노-보호기"는 반응이 화합물 상의 다른 작용기에서 수행되는 동안 아미노 기를 차단하거나 보호하기 위해 일반적으로 사용되는 기의 유도체를 지칭한다. 이러한 보호기의 예는 카바메이트, 아미드, 알킬 및 아릴 기 및 이민뿐만 아니라 원하는 아민 기를 재생하기 위해 제거될 수 있는 많은 N-헤테로원자 유도체를 포함한다. 특정 아미노 보호기는 Pmb(p-메톡시벤질), Boc(tert-부틸옥시카르보닐), Fmoc(9-플루오레닐메틸옥시카르보닐) 및 Cbz(카르보벤질옥시)이다. 이러한 기의 추가 예는 T. W. Greene and P. G. M. Wuts, "Protecting Groups in Organic Synthesis, 3rd ed., John Wiley & Sons, Inc., 1999에서 확인된다. 용어 "보호된 아미노"는 상기 아미노-보호기 중 하나로 치환된 아미노 기를 지칭한다.
본원에서 사용된 용어 "카르복시-보호기"는 분자의 나머지를 파괴하지 않고 적절한 지점에서 제거되어 보호되지 않은 카르복시-기를 제공할 수 있는, 분자의 다른 위치에서 후속 반응(들)의 조건에 대해 안정한 기를 지칭한다. 카르복시 보호기의 예는 에스테르 기 및 헤테로시클릴 기를 포함한다. 카르복실산 기의 에스테르 유도체는 반응이 화합물 상의 다른 작용기에서 수행되는 동안 카르복실산 기를 차단하거나 보호하기 위해 사용될 수 있다. 이러한 에스테르 기의 예는 치환된 벤질, 예컨대 4-니트로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질, 펜타메틸벤질, 3,4-메틸렌디옥시벤질, 벤즈히드릴, 4,4'-디메톡시벤즈히드릴, 2,2',4,4'-테트라메톡시벤즈히드릴을 포함하는 치환된 아릴알킬, 알킬 또는 치환된 알킬 에스테르, 예컨대 메틸, 에틸, t-부틸 알릴 또는 t-아밀, 트리페닐메틸 (트리틸), 4-메톡시트리틸, 4,4'-디메톡시트리틸, 4,4',4"-트리메톡시트리틸, 2-페닐프로프-2-일, 티오에스테르, 예컨대 t-부틸 티오에스테르, 실릴 에스테르, 예컨대 트리메틸실릴, t-부틸디메틸실릴 에스테르, 페나실, 2,2,2-트리클로로에틸, 베타-(트리메틸실릴)에틸, 베타-(디(n-부틸)메틸실릴)에틸, p-톨루엔설포닐에틸, 4-니트로벤질설포닐에틸, 알릴, 신나밀, 1-(트리메틸실릴메틸)프로프-1-엔-3-일 및 유사 모이어티를 포함한다. 카르복시-보호기의 또 다른 예는 1,3-옥사졸리닐과 같은 헤테로시클릴 기이다. 이러한 기의 추가 예는 T. W. Greene and P. G. M. Wuts, "Protecting Groups in Organic Synthesis, 3rd ed., John Wiley & Sons, Inc., 1999에서 확인된다. 용어 "보호된 카르복시"는 상기 카르복시-보호기 중 하나로 치환된 카르복시 기를 지칭한다.
본원에 기재된 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하나 이상의 비대칭 탄소 원자를 포함할 수 있다. 따라서, 화합물은 부분입체이성질체, 거울상이성질체 또는 이의 혼합물로 존재할 수 있다. 화합물의 합성은 출발 물질로서 또는 중간체로서 라세미체, 부분입체이성질체 또는 거울상이성질체를 사용할 수 있다. 특정 부분입체이성질체 화합물의 혼합물은 크로마토그래피 또는 결정화 방법에 의해 분리되거나 하나 이상의 특정 부분입체이성질체가 풍부할 수 있다. 유사하게, 거울상이성질체 혼합물은 동일한 기술 또는 당업계에 공지된 기타 기술을 사용하여 분리되거나 거울상이성질적으로 농축될 수 있다. 비대칭 탄소 또는 질소 원자 각각은 R 또는 S 배열일 수 있고 이들 배열 모두 본원에서 고려된다.
임의의 특정 카이랄 원자의 입체화학이 명시되지 않은 본원에 나타난 구조에서, 모든 입체이성질체가 고려되고 포함된다. 특정 배치를 나타내는 실선 쐐기 또는 파선에 의해 입체화학이 특정되는 경우, 해당 입체이성질체가 그렇게 특정되고 정의된다. 달리 명시되지 않는 한, 실선 쐐기 또는 파선이 사용되는 경우, 상대적 입체화학이 의도된다.
"대상체", "개체" 또는 "환자"는 척추동물이고 본원에서 상호 교환적으로 사용된다. 특정 구현예들에서, 척추동물은 포유동물이다. 포유동물은 농장 동물(예컨대 소), 스포츠 동물, 애완 동물(예컨대 기니피그, 고양이, 개, 토끼 및 말), 영장류, 마우스 및 래트를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 특정 구현예들에서, 포유동물은 인간이다. 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 구현예들에서, 환자는 전형적으로 이를 필요로 한다.
"억제하는" 및 "감소시키는"이라는 용어 또는 이들 용어의 변형은 원하는 결과를 달성하기 위한 임의의 측정 가능한 감소 또는 완전한 억제를 포함한다. 예를 들어, 정상과 비교하여 약, 최대 약 또는 최소 약 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 그 이상 또는 그 안에서 유도 가능한 임의의 범위의 하락, 활성 감소가 있을 수 있다.
용어 "치료"는 임상 병리학의 과정에서 치료되는 환자 또는 세포의 자연적인 경과를 변경하도록 설계된 임상적 개입을 지칭한다. 바람직한 치료 효과는 질병 진행의 속도 감소, 질병 상태의 개선 또는 완화, 그리고 차도 또는 개선된 예후를 포함한다. 예를 들어, 암세포의 증식 (또는 파괴) 감소, 질환으로 인한 증상 감소, 질환을 앓고 있는 사람들의 삶의 질 증가, 질환 치료에 필요한 다른 약물의 용량 감소, 및/또는 개체의 생존 연장을 비롯하여 (그러나 이에 제한되는 것은 아님), 본원에 기재된 암과 관련된 하나 이상의 증상이 완화되거나 제거되는 경우, 환자는 성공적으로 "치료된다".
질환의 "진행 지연"이라는 용어는 본원에 기재된 암의 발달을 지연, 방해, 둔화, 지체, 안정화 및/또는 지연시키는 것을 의미한다. 이러한 지연은 암의 이력 및/또는 치료되는 환자에 따라 시간의 길이가 다양할 수 있다. 당업자에게 자명한 바와 같이, 충분하거나 유의한 지연은 사실상 환자에서 암이 발병하거나 재발하지 않는다는 점에서 예방을 포함할 수 있다.
"돌연변이 KRas 매개 질병" 등은 본원에 기재된 바와 같은 돌연변이 KRas 활성의 기능의 결과와 전적으로 또는 부분적으로 관련되거나 그렇지 않으면 상관 관계가 있는, 본원에 제시된 바와 같은 증상을 갖거나 치료를 필요로 하는 본원에 기재된 질병(예를 들어 본원에 기재된 암)을 지칭한다. 이러한 일 구현예에서, 돌연변이 KRas는 KRasG12V이다. 다른 구현예에서, 돌연변이체 KRas는 임의의 G12 돌연변이체(즉, pan-KRas 억제제)이다.
"유효량" 또는 "치료적 유효량"은 적어도, 본원에 기재된 암의 측정 가능한 개선 또는 예방을 달성하기 위해 필요한 최소량이다. 본원의 유효량은 환자의 질병 상태, 연령, 성별 및 체중과 같은 인자 및 환자에서 원하는 반응을 유도하는 제제의 능력에 따라 달라질 수 있다. 유효량은 또한 치료적으로 유익한 효과가 치료의 임의의 독성 또는 유해 효과를 능가하는 양이다. 유익하거나 바람직한 결과는 위험 제거 또는 감소, 중증도 감소, 질병의 발병(질병의 생화학적, 조직학적 및/또는 행동적 증상, 이의 합병증 및 질병의 발달 동안 나타나는 중간 병리학적 표현형 포함) 지연, 질병으로 인한 하나 이상의 증상 감소, 질병으로 고통받는 이들의 삶의 질 향상, 질병 치료에 필요한 다른 약제의 용량 감소, 표적화를 통한 것과 같은 다른 약제의 효과 향상, 질병의 진행 지연 및/또는 생존 연장과 같은 결과를 포함한다. 일부 구현예들에서, 유효량의 약물은 암세포의 수 감소; 종양 크기 감소; 말초 기관으로의 암세포 침윤 억제(즉 둔화 또는 정지); 종양 전이 억제(즉 둔화 또는 정지) ; 종양 성장 억제(즉 둔화 또는 정지); 및/또는 장애와 관련된 하나 이상의 증상 완화의 효과를 가질 수 있다. 유효량은 1 회 이상의 투여로 투여될 수 있다.
"투여 기간" 또는 "주기"는 본원에 기재된 하나 이상의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 추가 치료제(즉 화학요법제)의 투여를 포함하는 기간 및 본원에 기재된 하나 이상의 제제 또는 화합물의 투여를 포함하지 않는 선택적인 기간을 지칭한다. "휴지 기간"은 본원에 기재된 제제 또는 화합물 중 적어도 하나가 투여되지 않는 기간을 지칭한다. 일 구현예에서, 휴지 기간은 본원에 기재된 제제 또는 화합물이 투여되는 기간을 지칭한다. 본원에 제공된 바와 같은 휴지 기간은 일부 예에서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 부재에서 추가 제제의 투여를 포함할 수 있거나 그 반대이다. 이러한 예에서, 휴지 기간 동안 임의의 제제의 투여는 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 투여를 방해하거나 해를 끼치지 않아야 한다.
"투약 요법"은 1 회 이상의 주기를 포함하는 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 투여 기간을 지칭하고, 여기서 각 주기는 상이한 시간 또는 상이한 양의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 투여를 포함할 수 있다.
"QD"는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 1일 1회 투여를 지칭한다,
"BID"는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 1일 2회 투여를 지칭한다,
본원에 사용된 용어 "공동 투여", "병용으로 투여됨" 및 이들의 문법적 등가물은 제제 및/또는 이들의 대사산물 모두가 동시에 대상에 존재하도록 두 가지 이상의 제제를 인간을 포함하는 동물에게 투여하는 것을 포함한다. 공동 투여는 별개의 조성물로 동시 투여, 별개의 조성물로 다른 시간에 투여(즉 순차 투여), 또는 두 제제가 존재하는 조성물로 투여를 포함한다.
"1L 요법"은 치료 경험이 없는 암 환자에게 투여되는 1차 요법을 지칭한다. 마찬가지로, 2L, 3L 등은 환자에게 투여되는 후속 요법을 지칭한다.
"약품 설명서(package insert)"라는 용어는 치료 제품의 사용에 관한 적응증, 사용법, 투여량, 투여, 금기 및/또는 경고에 대한 정보를 포함하는 치료 제품의 상용 패키지에 통상적으로 포함되는 지침서를 지칭하는 데 사용된다.
용어 "길항제" 및 "억제제"는 상호 교환적으로 사용되며, 이들은 KRas의 돌연변이 형태와 같은 단백질의 활성 또는 발현을 억제함으로써 표적 단백질의 생물학적 기능을 억제하는 능력을 갖는 화합물을 지칭한다. 따라서, 용어 "길항제" 및 "억제제"는 표적 단백질의 생물학적 역할의 맥락에서 정의된다. 본원의 바람직한 길항제는 표적과 특이적으로 상호작용(예를 들어, 결합)하지만, 표적 단백질이 구성원인 신호 전달 경로의 다른 구성원과 상호작용함으로써 표적 단백질의 생물학적 활성을 억제하는 화합물이 또한 이 정의 내에 구체적으로 포함된다. 길항제에 의해 억제되는 바람직한 생물학적 활성은 종양의 발생, 성장 또는 확산과 관련된다.
본원에서 사용되는 용어 "작용제"는 표적 단백질의 활성 또는 발현을 억제함으로써 표적 단백질의 생물학적 기능을 개시하거나 향상시키는 능력을 갖는 화합물을 지칭한다. 따라서, 용어 "작용제"는 표적 폴리펩타이드의 생물학적 역할의 맥락에서 정의된다. 본원의 바람직한 작용제는 표적과 특이적으로 상호작용(예를 들어 결합)하지만, 표적 폴리펩티드가 구성원인 신호 전달 경로의 다른 구성원과 상호 작용함으로써 표적 폴리펩티드의 생물학적 활성을 개시하거나 향상시키는 화합물이 또한 이 정의 내에 구체적으로 포함된다.
용어 "암" 및 "암성", "신생물" 및 "종양" 및 관련 용어는 본원에서 상호 교환적으로 사용되고, 일반적으로 조절되지 않은 세포 성장을 특징으로 하는 포유동물에서의 생리학적 조건을 지칭하거나 기술한다. “종양”은 하나 이상의 암성 세포를 포함한다. 암의 예는 암종, 모세포종, 육종, 정상피종, 교모세포종, 흑색종, 백혈병 및 골수성 또는 림프성 악성종양을 포함한다. 이러한 암의 보다 더 특정한 예로는 편평 세포암(예: 상피 편평 세포암) 및 소세포 폐암, 비-소세포 폐암(”NSCLC”), 폐의 선암종 및 폐의 편평 암종을 포함하는 폐암을 포함한다. 기타 암은 피부, 각질극세포종, 소포 암종, 털세포 백혈병, 협강, 인두(구강), 입술, 혀, 입, 침샘, 식도, 후두, 간세포, 위(gastic), 위(stomach), 위장관, 소장, 대장, 췌장, 자궁경부, 난소, 간(liver), 방광, 간암, 유방, 결장, 직장, 결장직장, 비뇨생식기, 담도, 갑상선, 유두, 간(hepatic), 자궁내막, 자궁, 침샘, 콩팥 또는 신장, 전립선, 고환, 외음부, 복막, 항문, 음경, 뼈, 다발성 골수종, B 세포 림프종, 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL), 중추신경계, 뇌, 두경부, 호지킨 및 관련 전이를 포함한다. 신생물성 장애의 다른 예는 진성 적혈구증가증과 같은 골수증식성 장애, 본태성 혈소판증가증, 원발성 골수섬유증과 같은 골수섬유증 및 만성 골수성 백혈병(CML)을 포함한다.
"화학요법제"는 주어진 장애, 예를 들어 암 또는 염증성 장애의 치료에 유용한 제제이다. 화학요법제의 예는 당업계에 잘 알려져 있다. 추가로, 화학요법제는 임의의 화학요법제의 약학적으로 허용가능한 염, 산 또는 유도체, 그뿐만 아니라 이들 중 둘 이상의 조합을 포함한다.
본원에 제공된 일 구현예와 관련하여 논의된 임의의 제한은 본원에 제공된 임의의 다른 구현예에 적용될 수 있음이 구체적으로 고려된다. 또한, 본원에 기재된 임의의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 본원에 기재된 조성물은 본원에 제공된 임의의 방법에서 사용될 수 있고, 본원에 제공된 임의의 방법이 본원에 기재된 임의의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 본원에 기재된 조성물을 생성하거나 이용하기 위해 사용될 수 있다.
본 출원 전체에서, 용어 ”약”은 값이 해당 값을 결정하기 위해 사용되는 장치 또는 방법에 대한 오차의 표준 편차를 포함한다는 것을 나타내도록 사용된다.
화합물
화학식 (I)의 화합물:
(I),
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염으로서,
여기서;
X는 NR13, O, C(Rx)2, C(O), SO, SO2, 또는 S이고;
u는 1 또는 2이고;
각 RX는 독립적으로 수소, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬이거나;
또는 여기서 2개의 Rx는 함께 이들이 결합된 탄소와 함께 시클로프로필을 형성하고;
R1은 R7-치환 또는 비치환 인돌릴, R7-치환 또는 비치환 벤조푸라닐, R7-치환 또는 비치환 나프틸, R7-치환 또는 비치환 인다졸릴, R7-치환 또는 비치환 인데닐, R7-치환 또는 비치환 벤조티아졸릴, R7A-치환 또는 비치환 페닐, 또는 R7A-치환 또는 비치환 피리디닐이고;
각 R7은 독립적으로 수소, 할로겐, CN, CH2OH, -OH, NH2, N(Me)2, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C2-5 알키닐, 비치환 C1-3 할로알킬, 또는 비치환 시클로프로필이고;
각 R7A는 독립적으로 수소, 할로겐, NH2, N(Me)2, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 또는 비치환 시클로프로필이고;
R2는 수소, O-L1-R8, R8A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, 또는 R8B-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이고;
L1은 결합 또는 RL1-치환 또는 비치환 C1-3 알킬렌이고;
RL1은 할로겐 또는 비치환 C1-3 알킬이고;
R8은 N, S 또는 O을 포함하는 R9-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이고;
각 R9는 독립적으로 할로겐, 옥소, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C1-3 알콕시, R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴, 또는 R10-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 R10-치환 또는 비치환 3 또는 4-원 헤테로사이클이거나;
또는 여기서 2개의 R9는 함께 C3-5 시클로알킬 또는 3-5원 헤테로사이클을 형성하고;
R10은 수소 또는 할로겐이고;
각 R8A는 독립적으로 R9A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R9A-치환 또는 비치환 C1-3 알콕시, R9A-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 R9A-치환 또는 비치환 4-6원 헤테로사이클이고;
각 R9A는 독립적으로 할로겐, 옥소, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C1-3 알콕시, 비치환 C1-3 알킬리덴, R9-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 N, S 또는 O를 포함하는 R9-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이고;
R8B는 독립적으로 할로겐, 옥소, -NH2, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C1-3 알콕시, 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이고;
R3 및 R4는 각각 독립적으로 수소, -CN, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 시클로프로필이고;
R5는 R5A-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R5A-치환 또는 비치환 C1-6 할로알킬, R5A-치환 또는 비치환 C3-10 시클로알킬, R5A-치환 또는 비치환 3-10원 헤테로사이클, 또는 R5A-치환 또는 비치환 5-10원 헤테로아릴이고;
각 R5A는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, OR11, SR12, SO2R12, NR13R14, C(O)N(R11)2, C(O)R11, R5B-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R5B-치환 또는 비치환 C1-6 할로알킬, R5B-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R5B-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R5B-치환 또는 비치환 C5-8 아릴, 또는 R5B-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이거나;
또는 여기서 2개의 R5A는 함께 C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로사이클을 형성하고;
각 R5B는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, OR11, NR13R14, SR12, SO2R12, C(O)N(R11)2, C(O)R11, R5C-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R5C-치환 또는 비치환 C1-3 할로알킬, R5C-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R5C-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R5C-치환 또는 비치환 페닐, 또는 R5C-치환 또는 비치환 5-6원 헤테로아릴이거나;
또는 여기서 2개의 R5B는 함께 C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로사이클을 형성하고;
각 R5C는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, C(O)CH3, OH, OCH3, C(O)NH2, CF3, CHF2, CH2F, NR13R14, SCH3, SO2NH2, SO2CH3, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 비치환 3-4원 헤테로사이클이고;
각 R11은 독립적으로 수소, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 비치환 3-4원 헤테로사이클이고;
각 R12는 독립적으로 NH2 또는 비치환 C1-3 알킬이고;
각 R13 및 R14는 독립적으로 수소, C(O)N(R11)2, C(O)R11, R15-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R15-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, 또는 R15-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클이고;
각 R15는 독립적으로 할로겐, CN, C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3, R16-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R16-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R16-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R16-치환 또는 비치환 5-9원 아릴, 또는 R16-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이고;
각 R16는 독립적으로 할로겐, CN, C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3, R17-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R17-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R17-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R17-치환 또는 비치환 5-9원 아릴, 또는 R17-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이고;
각 R17은 독립적으로 할로겐, CN, C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3, 또는 비치환 C1-3 알킬이고;
R6 및 R6A는 독립적으로 수소, 할로겐, NR13R14, 또는 R6B-치환 또는 비치환 C1-6 알킬이며; 그리고
R6B는 할로겐, CN, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, 또는 비치환 C1-3 알킬인, 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 본원에 제공된다.
일 구현예에서, X는 O이다. 다른 구현예에서, X는 C(Rx)2이고, 여기서 Rx는 본원에 기재된 바와 같다. 상기 일 구현예에서, X가 C(Rx)2일 때, Rx는 독립적으로 수소 또는 메틸이다. 상기 다른 구현예에서, X가 C(Rx)2일 때, Rx는 독립적으로 수소 또는 할로겐이다. 상기 다른 구현예에서, X가 C(Rx)2일 때, Rx는 독립적으로 메틸 또는 할로겐이다. 일 구현예에서, X는 NR13, C(O), SO, SO2, 또는 S이다. 일 구현예에서, u는 1이다. 일 구현예에서, X는 O이고 u는 1이다.
일 구현예에서, R1은 R7-치환 또는 비치환 인돌릴, R7-치환 또는 비치환 벤조푸라닐, R7-치환 또는 비치환 나프틸, R7-치환 또는 비치환 인다졸릴, R7-치환 또는 비치환 벤조티아졸릴, R7A-치환 또는 비치환 페닐, 또는 R7A-치환 또는 비치환 피리디닐이다. 일 구현예에서, R1은 R7-치환 또는 비치환 인돌릴, R7-치환 또는 비치환 벤조푸라닐이다. 다른 구현예에서, R1은 R7-치환 또는 비치환 나프틸, R7-치환 또는 비치환 인다졸릴, R7A-치환 또는 비치환 페닐, 또는 R7A-치환 또는 비치환 피리디닐이다. 또 다른 구현예에서, R1은 R7-치환 또는 비치환 나프틸, R7-치환 또는 비치환 인다졸릴, 또는 R7-치환 또는 비치환 벤조티아졸릴이다. 또 다른 구현예에서, R1은 R7-치환 또는 비치환 나프틸 또는 R7-치환 또는 비치환 인다졸릴이다. 다른 구현예에서, R1은 R7-치환 또는 비치환 인데닐이다. 다른 구현예에서, R1은 R7A-치환 또는 비치환 페닐, 또는 R7A-치환 또는 비치환 피리디닐이다. 다른 구현예에서, R1은 R7-치환 또는 비치환 페닐, R7-치환 또는 비치환 인다졸릴, 또는 R7-치환 또는 비치환 피리디닐이다.
상기 일 구현예에서, R1은 R7-치환 또는 비치환 페닐이다. 상기 다른 구현예에서, R1은 R7-치환 또는 비치환 인다졸릴이다. 상기 다른 구현예에서, R1은 R7-치환 또는 비치환 피리디닐이다. 상기 다른 구현예에서, R1은 R7-치환 또는 비치환 인돌릴이다.
바람직한 일 구현예에서, R1은 화학식 (A):
(A)를 가지고,
여기서 X1은 N, CH, 또는 CF이고 R7A는 본원에 기재된 바와 같다. 상기 일 구현예에서, R7A는 수소, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬이다.
상기 일 구현예에서, X1은 N 또는 CF이고 각 R7A는 독립적으로 수소, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬이다. 상기 일 구현예에서, R7A는 독립적으로 수소, Cl, 메틸, 에틸, 또는 CF3이고, 여기서 1개 이하의 R7A는 수소이다. 일 구현예에서, 1개의 R7A는 시클로프로필이다.
상기 일 구현예에서, 화학식 (A1)의 모이어티는 화학식:
(A1)을 가진다.
상기 일 구현예에서, 각 R7A는 독립적으로 수소, Cl, 메틸, 또는 CF3이다. 상기 다른 구현예에서, 각 R7A는 독립적으로 수소, 메틸, 또는 CF3이다.
상기 일 구현예에서, R1은
또는 이다.
상기 다른 구현예에서, R1은
이다.
바람직한 일 구현예에서, R1은
이다.
다른 구현예에서, 화학식 (A)의 모이어티는 화학식:
(A2)를 가지고,
여기서 R7A는 수소, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬이다. 상기 일 구현예에서, 1개 이하의 R7A는 수소이다. 상기 다른 구현예에서, R7A는 수소가 아니다.
상기 일 구현예에서, R1은
이다.
상기 일 구현예에서, R1은
또는 이다.
상기 일 구현예에서, R1은
(B) 또는 (C)이고,
여기서 각 R7은 독립적으로 할로겐, CN, NH2, N(Me)2, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C2-3 알키닐이다.
일 구현예에서, R1은
, , 또는 이다.
다른 구현예에서, R1은
(B1) 또는 (B2)이다.
다른 구현예에서, R1은
, , , , , 또는 이다.
또 다른 구현예에서, R1는:
, , , 또는 이다.
다른 구현예에서, R1은:
, , 또는 이다.
일 구현예에서, R7은 독립적으로 수소, 할로겐, -OH, NH2, N(Me)2, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬이다. 일 구현예에서, R7은 독립적으로 수소, 할로겐, -OH, NH2, N(Me)2, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C2-3 알키닐이다. 일 구현예에서, R7은 독립적으로 수소, 할로겐, -CN, OH, NH2, N(Me)2, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬이다. 다른 구현예에서, R7은 독립적으로 할로겐, NH2, 또는 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬이다. 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 일 구현예에서, R7은 -OH가 아니다.
일 구현예에서, R1은 화학식 (B) 또는 화학식 (C)의 모이어티이고, 여기서 R7은 독립적으로 수소, 할로겐, 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 상기 일 구현예에서, R7은 독립적으로 수소 또는 비치환 C1-3 알킬(예를 들어, 메틸)이다. 상기 다른 구현예에서, R7은 독립적으로 할로겐(예를 들어, F) 또는 비치환 C1-3 알킬(예를 들어, 메틸)이다.
일 구현예에서, R1은 화학식 (B)의 모이어티이고, 여기서 R7은 독립적으로 수소, 할로겐, -OH, NH2, N(Me)2, 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 일 구현예에서, R1은 화학식 (C)의 모이어티이고, 여기서 R7은 독립적으로 수소, 할로겐, NH2, N(Me)2, 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 상기 일 구현예에서, R7은 독립적으로 할로겐 또는 NH2이다.
일 구현예에서, R2는 수소 또는 O-L1-R8이다. 다른 구현예에서, R2는 R8A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬 또는 R8B-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이다. 다른 구현예에서, R2는 R8B-치환 또는 비치환 4-6원 헤테로사이클이다. 또 다른 구현예에서, R2는 O-L1-R8, R8A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, 또는 1개의 질소 헤테로원자를 포함하는 R8B-치환 또는 비치환 4-6원 헤테로사이클이다.
일 구현예에서, R2은 수소이다.
일 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 화학식:
(III),
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 가지고, 여기서 R1, R3, R4, R5, R6, R6A, 및 X는 본원에 기재된 바와 같다.
상기 일 구현예에서, 화학식 (III)의 화합물은 화학식:
(IIIa), (IIIb), (IIIc), 또는 (IIId),
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 가지고, 여기서 R1, R3, R4, R5, R6, R6A, 및 X는 본원에 기재된 바와 같다.
일 구현예에서, R2는 O-L1-R8이다. 일 구현예에서, L1은 결합이다. 일 구현예에서, L1은 비치환 C1-3 알킬렌이다. R2는 O-L1-R8인 바람직한 일 구현예에서, L1은 메틸렌이다. 상기 일 구현예에서, R8은 N, S 또는 O를 포함하는 R9-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이다.
일 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 화학식:
(II),
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 가지고, 여기서 R1, R3, R4, R5, R6, R6A, R8, 및 X는 본원에 기재된 바와 같다.
상기 일 구현예에서, 화학식 (II)의 화합물은 화학식:
(IIa) , (IIb) , (IIc) 또는 (IId),
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 가지고, 여기서 R1, R3, R4, R5, R6, R6A, R8, 및 X는 본원에 기재된 바와 같다.
R2는 O-L1-R8인 일 구현예에서, R8은 N, S, 또는 O를 포함하는 R9-치환 4-10원 헤테로사이클이다. 상기 다른 구현예에서, R8은 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 4-10원 헤테로사이클이다. 상기 다른 구현예에서, R8은 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 4, 5, 6 또는 7원 모노시클릭 헤테로사이클이다. 상기 다른 구현예에서, R8은 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 5 또는 6원 모노시클릭 헤테로사이클이다. 상기 다른 구현예에서, R8은 1개의 O 헤테로원자를 포함하는 5 또는 6원 모노시클릭 헤테로사이클이다. 상가 다른 구현예에서, R8은 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 6, 7, 8 또는 9원 접합 비시클릭 헤테로사이클이다. 상기 다른 구현예에서, R8은 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 7 또는 8원 접합 비시클릭 헤테로사이클이다. 상기 다른 구현예에서, R8은 1개의 N 헤테로원자 및 1개의 O 헤테로원자를 포함하는 7 또는 8원 접합 비시클릭 헤테로사이클이다. 일 구현예에서, R8은 피롤리디닐 또는 테트라히드로푸라닐이다.
상기 구현예들에서, 각 R9는 독립적으로 할로겐, 옥소, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C1-3 알콕시, 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이다. 상기 다른 구현예에서, 각 R9는 독립적으로 할로겐, 옥소, 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이다. 일 구현예에서, 각 R9는 독립적으로 비치환 C1-3 알킬 또는 비치환 C1-3 알콕시이다. 일 구현예에서, 각 R9는 R10-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬 또는 R10-치환 또는 비치환 3 또는 4-원 헤테로사이클이다. 일 구현예에서, 2개의 R9는 함께 R10-치환 또는 비치환 C3-5 시클로알킬을 형성한다. 상기 일 구현예에서, 2개의 R9는 함께 R10-치환 시클로프로필을 형성한다. 상기 일 구현예에서, 2개의 R9는 함께 R10이 할로겐(예를 들어, F 또는 Cl)인 R10-치환 시클로프로필을 형성한다. 일 구현예에서, 2개의 R9가 함께 R10-치환 시클로프로필을 형성하는 경우, 시클로프로필은 R8의 단일 탄소에서 부착된다. 일 구현예에서, 2개의 R9는 함께 R10-치환 시클로프로필을 형성하고, 시클로프로필은 R8의 두 개별 탄소 원자에 부착된다. 상기 다른 구현예에서, 2개의 R9는 함께 1개 이상의 산소 원자를 포함하는 비치환 C3-5 헤테로사이클을 형성한다. 상기 일 구현예에서, 헤테로사이클은 1,3-디옥솔라닐이다.
일 구현예에서, R10은 수소 또는 할로겐이다. 일 구현예에서, R10은 수소이다. 다른 구현예에서, R10는 할로겐이다. 상기 일 구현예에서, R10은 F이다.
일 구현예에서, R2는 O-L1-R8인 경우, R8은
(D)이고,
여기서,
R9는 할로겐, -OCF3, -OCHF2, -OCH2F, R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이거나, 또는 2개의 R9는 함께 R10-치환 또는 비치환 C3-5 시클로알킬을 형성하고;
r은 0-12의 정수이고;
j는 1, 2 또는 3이며; 그리고
k는 1 또는 2이다.
일 구현예에서, R2는 O-L1-R8인 경우, R8은
(D)이고,
여기서,
R9는 할로겐 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이고;
r은 0-12의 정수이고;
j는 1, 2 또는 3이며; 그리고
k는 1 또는 2이다.
상기 일 구현예에서, r은 0, 1, 2, 3 또는 4이다. 상기 다른 구현예에서, r은 0, 1, 2 또는 3이다. 일 구현예에서, R8은
(D1), (D2), 또는 (D3), (D4), (D5)이고,
여기서 R9, R10 및 r은 본원에 기재된 바와 같고, s는 1 또는 2이다.
상기 일 구현예에서, r은 0, 1, 2, 3 또는 4이다. 상기 다른 구현예에서, r은 0, 1, 2 또는 3이다. 일 구현예에서, R8은
(D1), (D2), 또는 (D3)이고,
여기서 R9, R10 및 r은 본원에 기재된 바와 같다.
상기 일 구현예에서, R9는 독립적으로 할로겐 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이고; 각 R10은 독립적으로 수소 또는 할로겐이며; r은 1 또는 2이다.
일 구현예에서, R8은 (D1)이고, 여기서 r은 0이다.
다른 구현예에서, R8은 (D2)이고, 여기서 r은 0이고, 각 R10은 독립적으로 수소 또는 F이다. 상기 일 구현예에서, r은 0이고 각 R10은 수소이다. 상기 다른 구현예에서, r은 0이고 각 R10은 F이다. 상기 다른 구현예에서, r은 0이고, 여기서 하나의 R10은 수소이고 하나의 R10은 F이다. 상기 다른 구현예에서, 각 R10은 독립적으로 수소 또는 F이고, r은 1또는 2이며, R9는 F이다.
다른 구현예에서, R8은 이고, 여기서 r은 0이고 각 R9는 독립적으로 수소 또는 할로겐이다. 상기 일 구현예에서, 각 R9는 F이고 r은 0이다. 상기 일 구현예에서, 각 R9는 F이고 r은 1이다.
R2는 O-L1-R8인 다른 구현예에서, R8은 이다. 상기 일 구현예에서, r은 1이고 R9는 할로겐, 옥소, 또는 비치환 C1 알킬리덴이다. 상기 일 구현예에서, 2개의 R9는 함께 R10-치환 또는 비치환 C3-5 시클로알킬을 형성한다.
일 구현예에서, R8은 이고, 여기서 R10은 할로겐이고 s는 1 또는 2이다. 상기 일 구현예에서, R8은 이다.
R2는 O-L1-R8인 다른 구현예에서, R8은
(E)이고,
여기서
R9는 수소 또는 비치환 C1-3 알킬이며; 그리고
W는 O, SO2 또는 NR12이며; 그리고
R12는 수소, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬이다.
상기 일 구현예에서, W는 O이고 R9는 메틸이다. 상기 다른 구현예에서, W는 NR12이고, 여기서 R12는 비치환 C1-3 할로알킬이고 R9는 수소이다. 상기 다른 구현예에서, W는 SO2이고 R9는 수소이다.
본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 일 구현예에서, R8은 아제티디닐, 옥세타닐, 또는 티에탄디옥사이드이다.
본원에 제공된 추가의 구현예들에서, R8은 화학식:
(G)를 갖는 모이어티이고,
여기서,
R9는 독립적으로 할로겐, 옥소, 또는 비치환 C1-3 알킬이거나;
또는 여기서 2개의 R9는 함께 C3-5 시클로알킬 또는 3-5원 헤테로사이클을 형성하며; 그리고
r은 1 또는 2이다.
상기 일 구현예에서, R8은 화학식 (G)를 갖는 모이어티이고, 여기서 R9 및 r은 본원에 기재된 바와 같다. 상기 일 구현예에서, 2개의 R9는 함께 R10-치환 또는 비치환 시클로프로필 모이어티를 형성한다. 일 구현예에서, 시클로프로필 모이어티는 비치환이다. 다른 구현예에서, 시클로프로필 모이어티는 할로겐(예를 들어, F)으로 치환된다. 상기 일 구현예에서, 2개의 R9는 함께 피롤리디닐에 접합된 R10-치환 또는 비치환 시클로프로필을 형성한다. 상기 다른 구현예에서, 2개의 R9는 함께 피롤리디닐에 대해 스피로인 R10-치환 또는 비치환 시클로프로필 모이어티를 형성한다. 일 구현예에서, R9는 옥소이고 r은 1이다. 상기 다른 구현예에서, R9는 F이고 r은 1 또는 2이다. 일 구현예에서, N-R9, R9는 C1-3 알킬이다. 상기 일 구현예에서, R9은 메틸이다.
다른 구현예에서, R8은 화학식:
또는 을 갖는 모이어티이고,
여기서 R10은 할로겐이고 s는 1 또는 2이다.
다른 구현예에서, R8은 화학식:
(G1)을 갖는 모이어티이고,
여기서 R9 및 r은 본원에 기재된 바와 같다.
다른 구현예에서, R8은 화학식:
(D6)을 갖는 모이어티이고,
여기서 R9 및 r은 본원에 기재된 바와 같다.
또 다른 구현예에서, R8은 R9-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 상기 일 구현예에서, R8은 화학식:
(F)의 모이어티이고,
여기서 각 R9는 독립적으로 비치환 C1-3 알킬 또는 비치환 C1-3 알콕시이다.
다른 구현예에서, R8은 화학식:
을 갖는 모이어티이다.
일 구현예에서, R8은:
, , , , 또는 이다.
일 구현예에서, R8은:
또는 이다.
일 구현예에서, R8은:
, , , 또는 이다.
일 구현예에서, R8은:
, 이다.
다른 구현예에서, R8은:
, , , , , , 또는 이다.
다른 구현예에서, R8은:
, , , , 또는 이다.
다른 구현예에서, R8은:
또는 이다.
또 다른 구현예에서, R8은:
, , 또는 이다.
또 다른 구현예에서, R8은:
, , 이다.
또 다른 구현예에서, R8은:
이다.
또 다른 구현예에서, R8은:
이다.
또 다른 구현예에서, R2는:
(H), (H1), (J), (K), (L), (M), (N), (O) , 또는 (P)이고,
여기서 R9, R10, r, j, 및 k는 본원에 기재된 바와 같다. 일 구현예에서, R9는 할로겐 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이다. 상기 다른 구현예에서, R9는 할로겐, 옥소, R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이고, r은 독립적으로 0, 1 또는 2이다.
일 구현예에서, R2는:
, , 또는 이다.
다른 구현예에서, R2는:
, , , , , , 또는 이다.
다른 구현예에서, R2는:
, , , , 또는 이다.
또 다른 구현예에서, R2는:
또는 이다.
또 다른 구현예에서, R2는:
, , 이다.
또 다른 구현예에서, R2는:
이다.
또 다른 구현예에서, R2는:
이다.
다른 구현예에서, R2는 R8A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬 또는 R8B-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이다. 일 구현예에서, 각 R8A는 독립적으로 R9A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬 또는 R9A-치환 또는 비치환 C1-3 알콕시이다. 일 구현예에서, 각 R8A는 독립적으로 R9A-치환 또는 비치환 알콕시 또는 R9A-치환 또는 비치환 4-6원 헤테로사이클이다. 다른 구현예에서, 각 R8A는 독립적으로 R9A-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 R9A-치환 또는 비치환 4-6원 헤테로사이클이다. 일 구현예에서, R9A는 N을 포함하는 R9-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이다. 다른 구현예에서, R9는 독립적으로 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이다.
일 구현예에서, R2는 R8A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이고, 여기서 R8A는 R9A-치환 또는 비치환 C1-3 알콕시, R9A-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 R9A-치환 또는 비치환 4-6 원 헤테로사이클이다.
일 구현예에서, R9A는 독립적으로 할로겐, 옥소, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C1-3 알콕시, 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이다. 상기 다른 구현예에서, R9A는 독립적으로 할로겐, 옥소, 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이다. 또 다른 구현예에서, R9A는 N, S 또는 O를 포함하는 R9-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이다.
일 구현예에서, R2는 R8A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이고, 여기서 R8A는 R9A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이다.
일 구현예에서, R2는 R8A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이고, 여기서 R8A는 R9A-치환 또는 비치환 C1-3 알콕시이다. 상기 일 구현예에서, R9A는 독립적으로 R9-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 1개의 N 헤테로사이클을 포함하는 R9-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이다. 상기 다른 구현예에서, R9A는 독립적으로 1개의 N 헤테로사이클을 포함하는 R9-치환 또는 비치환 5 또는 6원 모노시클릭 헤테로사이클 또는 1개의 N 헤테로사이클을 포함하는 7 또는 8원 접합 비시클릭 헤테로사이클이다. 상기 구현예들에서, R9는 독립적으로 할로겐, 옥소, 비치환 C1-3 알킬, 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이고, 여기서 R10은 본원에 기재된 바와 같다.
다른 구현예에서, R2는 R8A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이고, 여기서 R8A는 R9A-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬이다. 일 구현예에서, 각 R8B는 독립적으로 할로겐, 옥소, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C1-3 알콕시, 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이다.
일 구현예에서, R2는 R8B-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이다. 상기 일 구현예에서, R8B는 할로겐, 옥소, 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이다. 일 구현예에서, R2는 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 R8B-치환 또는 비치환 4, 5 또는 7원 헤테로사이클이다.
일 구현예에서, R3 및 R4는 각각 독립적으로 수소, -CN, 할로겐, 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 일 구현예에서, R3 및 R4는 각각 독립적으로 수소, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 시클로프로필이다. 일 구현예에서, R3 및 R4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 일 구현예에서, R3 및 R4는 각각 독립적으로 수소 또는 할로겐이다. 일 구현예에서, R3 및 R4 둘 모두는 수소가 아니다. 다른 구현예에서, R3 및 R4 중 하나는 수소이고 다른 하나는 할로겐이다. 상기 일 구현예에서, R3은 수소이고 R4는 할로겐이다. 일 구현예에서, R3은 할로겐이다. 상기 일 구현예에서, R3은 F 또는 Cl이다. 다른 구현예에서, R4는 수소이다. 다른 구현예에서, R4는 할로겐이다. 상기 일 구현예에서, R4는 F 또는 Cl이다.
일 구현예에서, R5는 R5A-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R5A-치환 또는 비치환 C1-6 할로알킬, R5A-치환 또는 비치환 C3-10 시클로알킬, R5A-치환 또는 비치환 3-10원 헤테로사이클, 또는 R5A-치환 또는 비치환 5-10원 헤테로아릴이다.
R5가 R5A-치환 또는 비치환 C3-10 시클로알킬인 경우, 시클로알킬은 모노사이클, 예컨대, 예를 들어, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 또는 시클로헥실일 수 있다. R5가 R5A-치환 또는 비치환 C3-10 시클로알킬인 경우, 시클로알킬은 비사이클, 예컨대, 예를 들어, 3,5-, 3-6, 4,5-, 4-6, 5,5-, 또는 5,6-일 수 있고, 여기서 비시클릭 모이어티의 접합된 고리의 하나 또는 둘 모두는 R5A-치환 또는 비치환 시클로알킬 모이어티를 포함한다.
R5가 R5A-치환 또는 비치환 3-10원 헤테로사이클인 경우, 헤테로사이클은 모노사이클, 예컨대, 예를 들어, 아지리디닐, 옥시라닐, 또는 티라닐일 수 있다. R5가 R5A-치환 또는 비치환 3-10원 헤테로사이클인 경우, 헤테로사이클은 모노사이클, 예컨대, 예를 들어, 아제티디닐, 옥세타닐, 또는 티에타닐일 수 있다. R5가 R5A-치환 또는 비치환 3-10원 헤테로사이클인 경우, 헤테로사이클은 모노사이클, 예컨대, 예를 들어, 피롤리디닐, 테트라히드로푸라닐, 티오페닐, 이미다졸리디닐, 옥사티올리디닐, 티아졸리디닐, 피페리디닐, 옥사닐, 티아닐, 또는 모르폴리노일 수 있다. R5가 R5A-치환 또는 비치환 3-10원 헤테로사이클인 경우, 헤테로사이클은 비사이클, 예컨대, 예를 들어, 3,5-, 3-6, 4,5-, 4-6, 5,5-, 또는 5,6-일 수 있고, 여기서 비시클릭 모이어티의 접합된 고리의 하나 또는 둘 모두는 R5A-치환 또는 비치환 헤테로사이클 모이어티를 포함한다.
R5가 R5A-치환 또는 비치환 5-10원 헤테로아릴인 경우, 헤테로아릴은 모노사이클, 예컨대, 예를 들어, 피롤릴, 이미다졸릴, 푸라닐, 티오페닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 피리디닐, 피라닐, 트리아지닐, 피라졸릴, 피라지닐, 피리도닐, 피리미디닐, 또는 피리다지닐일 수 있다. R5가 R5A-치환 또는 비치환 3-10원 헤테로사이클인 경우, 헤테로사이클은 비사이클, 예컨대, 예를 들어, 3,5-, 3-6, 4,5-, 4-6, 5,5-, 또는 5,6-일 수 있고, 여기서 비시클릭 모이어티의 접합된 고리의 하나 또는 둘 모두는 R5A-치환 또는 비치환 헤테로아릴 모이어티를 포함한다. 상기 일 구현예에서, R5는 피롤로피리디닐 또는 피라졸로피리디닐이다.
다른 구현예에서, R5는 R5A-치환 또는 비치환 C1-6 알킬 또는 R5A-치환 또는 비치환 C1-6 할로알킬이다. 다른 구현예에서, R5는 R5A-치환 또는 비치환 C3-10 시클로알킬, R5A-치환 또는 비치환 3-10원 헤테로사이클, 또는 R5A-치환 또는 비치환 5-10원 헤테로아릴이다.
일 구현예에서, R5는 R5A-치환 또는 비치환 C1-6 알킬이다. 상기 일 구현예에서, R5는 R5A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 일 구현예에서, R5는 R5A-치환 C1-3 알킬이고, 여기서 R5A는 본원에 기재된 바와 같다. R5가 R5A-치환 C1-3 알킬인 경우, R5는 화학식:
(T1), (T2), (T3), 또는 (T4)의 모이어티일 수 있고,
여기서 R5A는 본원에 기재된 바와 같다. R5는 R5A-치환 C1-3 알킬인 경우, R5는 화학식 (T1), (T2), (T3), 또는 (T4)의 모이어티일 수 있고, 여기서 R5A는 할로겐, CF3, CHF2, CH2F, CN, OR11, SR12, SO2R12, NR13R14, C(O)N(R11)2, C(O)R11, R5B-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R5B-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R5B-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, 또는 R5B-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이다. 상기 일 구현예에서, 적어도 하나의 R5A는 R5B-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, 또는 R5B-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이다. 상기 다른 구현예에서, 2개의 R5A는 함께 R5B-치환 또는 비치환 시클로프로필을 형성한다.
R5가 R5A-치환 C1-3 알킬인 경우, R5는 화학식:
(T5) 또는 (T6)의 모이어티일 수 있고,
여기서,
R5A 및 R5B는 본원에 기재된 바와 같고;
고리 A는 적어도 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 3-6원 헤테로사이클 또는 5-9원 헤테로아릴이며; 그리고
s는 0, 1, 2 또는3이다.
R5는 R5A-치환 C1-3 알킬인 경우, R5는 화학식 (T5) 또는 (T6)의 모이어티일 수 있고, 여기서, R5B는 할로겐, 옥소, CN, OH, OCH3, NR13R14, SR12, R5C-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R5C-치환 또는 비치환 C1-3 할로알킬, R5C-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, 또는 R5C-치환 또는 비치환 5-6원 헤테로아릴이다. 다른 구현예에서, R5B는 할로겐, 옥소, CN, OH, OCH3, NR13R14, SR12, 또는 R5C-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 다른 구현예에서, R5B는 옥소, CN, OH, NR13R14, SR12, 또는 R5C-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이다. R5B가 R5C-치환 또는 비치환 C1-3 알킬인 경우, 상기 구현예들에서, R5C는 할로겐, CN, C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NR13R14, SCH3, SO2NH2, SO2CH3, 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 특정 일 구현예에서, R5B는 NR13R14이고, 여기서 R13 및 R14는 본원에 기재된 바와 같다. 상기 일 구현예에서, R13 및 R14 중 적어도 하나는 수소이다. 상기 다른 구현예에서, R13 및 R15 중 적어도 하나는 R15-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R15-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, 또는 R15-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클이다.
일 구현예에서, R5가 R5A-치환 C1-3 알킬인 경우, R5는 화학식 (T5) 또는 (T6)의 모이어티일 수 있고, 여기서 R5B는 NR13R14이고, NR13R14는 NH2이다. 다른 구현예에서, R5가 R5A-치환 C1-3 알킬인 경우, R5는 화학식 (T5) 또는 (T6)의 모이어티일 수 있고, 여기서 R5B는 NR13R14이고 NR13R14는 NHR14이고, 여기서 R14는 R15-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R15-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, 또는 R15-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클이다.
일 구현예에서, 각 R5A는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, OR11, SR12, SO2R12, NR13R14, C(O)N(R11)2, 또는 C(O)R11이다. 일 구현예에서, 각 R5A는 독립적으로 R5B-치환 또는 비치환 C1-6 알킬 또는 R5B-치환 또는 비치환 C1-6 할로알킬이다. 일 구현예에서, 각 R5A는 독립적으로 R5B-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R5B-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R5B-치환 또는 비치환 페닐, 또는 R5B-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이다.
일 구현예에서, 각 R5A는 OR11이고, 여기서 R11은 수소, 메틸, 에틸, CH2F, CHF2, CF3, 시클로프로필, 시클로프로필메틸, 옥세타닐, 또는 옥세타닐메틸이다. 일 구현예에서, 각 R5A는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, OH, OCH3, SH, SO2NH2, NH2, NH(CH3), N(CH3)2, N(CH3)(CH2CH3), C(O)NH2, 또는 C(O)CH3이다.
각 R5A가 독립적으로 R5B-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴인 경우, 헤테로아릴 모이어티는 5, 6, 또는 7원 모노시클릭 헤테로아릴일 수 있다. 상기 일 구현예에서, 헤테로아릴 모이어티는 적어도 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 5, 6, 또는 7원 모이어티이다. 상기 다른 구현예에서, 헤테로아릴 모이어티는 적어도 1개의 O 헤테로원자를 포함하는 5, 6, 또는 7원 모이어티이다. 또 다른 구현예에서, 헤테로아릴 모이어티는 S 헤테로원자를 포함하는 5, 6, 또는 7원 모이어티이다.
각 R5A가 독립적으로 R5B-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴인 경우, 헤테로아릴 모이어티는 7, 8, 또는 9원 비시클릭 헤테로아릴일 수 있다. 상기 일 구현예에서, 헤테로아릴 모이어티는 적어도 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 7, 8, 또는 9원 모이어티이다. 상기 다른 구현예에서, 헤테로아릴 모이어티는 적어도 1개의 O 헤테로원자를 포함하는 7, 8, 또는 9원 모이어티이다. 또 다른 구현예에서, 헤테로아릴 모이어티는 S 헤테로원자를 포함하는 7, 8, 또는 9원 모이어티이다.
일 구현예에서, 각 R5B는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, OH, OCH3, NR13R14, SR12, SO2R12, C(O)N(R11)2, 또는 C(O)R11이다. 일 구현예에서, 각 R5B는 독립적으로 R5C-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 일 구현예에서, 각 R5B는 독립적으로 R5C-치환 또는 비치환 C1-3 할로알킬이다. 일 구현예에서, 각 R5B는 독립적으로 R5C-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬이다. 상기 일 구현예에서, 각 R5B는 독립적으로 시클로프로필 또는 시클로부틸이다. 일 구현예에서, 각 R5B는 독립적으로 R5C-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클이다. 상기 일 구현예에서, 각 R5B는 독립적으로 4, 5, 또는 6원 헤테로사이클이다. 상기 다른 구현예에서, 4, 5, 또는 6원 헤테로사이클은 적어도 1개의 N 헤테로원자를 포함한다. 상기 다른 구현예에서, 4, 5, 또는 6원 헤테로사이클은 적어도 1개의 O 헤테로원자를 포함한다. 일 구현예에서, 각 R5B는 독립적으로 R5C-치환 또는 비치환 페닐이다. 일 구현예에서, 각 R5B는 독립적으로 R5C-치환 또는 비치환 5-6원 헤테로아릴이다.
일 구현예에서, R5C는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NR13R14, SCH3, SO2NH2, 또는 SO2CH3이다. 일 구현예에서, R5B는 R5C-치환 C1-3 알킬이고, 여기서 R5C는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NR13R14, SCH3, SO2NH2, 또는 SO2CH3이다. 다른 구현예에서, R5B는 R5C-치환 C1-3 알킬이고, 여기서 R5C는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NR13R14, SCH3, SO2NH2, SO2CH3 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 상기 다른 구현예에서, R5C는 독립적으로 비치환 C1-3 알킬이다. 일 구현예에서, R5C는 독립적으로 비치환 C3-4 시클로알킬 또는 비치환 3-4원 헤테로사이클이다.
일 구현예에서, R11은 수소 또는 비치환 C1-3 알킬이다. R11은 히드록시일 수 있다. R11은 메틸일 수 있다. R11은 에틸일 수 있다.
일 구현예에서, R12는 NH2, NHCH3, or N(CH3)2, 또는 비치환 C1-3 알킬이다. R12는 NH2 또는 비치환 C1-3 알킬일 수 있다. 상기 일 구현예에서, R12는 NH2이다. 상기 다른 구현예에서, R12은 메틸이다.
일 구현예에서, R13 및 R14는 독립적으로 수소, C(O)R11, R15-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R15-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R15-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, 또는 R15-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로아릴이다.
일 구현예에서, 각 R13 및 R14는 독립적으로 수소, C(O)R11, 또는 R15-치환 또는 비치환 C1-6 알킬이다. 일 구현예에서, 각 R13 및 R14는 독립적으로 R15-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬 또는 R15-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클이다. R13 및 R14는 각각 독립적으로 수소 또는 R15-치환 또는 비치환 C1-6 알킬일 수 있다. 다른 구현예에서, 각각 독립적으로 수소 또는 R15-치환 또는 비치환 C1-3 알킬일 수 있다. 일 구현예에서, R13 및 R14 중 하나는 수소이다. 다른 구현예에서, R13 및 R14 중 하나는 R15-치환 또는 비치환 C1-6 알킬이다.
일 구현예에서, R15는 할로겐, CN, C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, 또는 SO2CH3이다. 일 구현예에서, R15는 CN, C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, 또는 SO2CH3이다. 다른 구현예에서, R15은 R16-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 또 다른 구현예에서, R15는 R16-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R16-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R16-치환 또는 비치환 5-9원 아릴, 또는 R16-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이다. 일 구현예에서, R15는 R16-치환 C1-3 알킬이고, 여기서 각 R16은 독립적이다.
일 구현예에서, 각 R16은 할로겐, CN, C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C3-6 시클로알킬, 비치환 3-6원 헤테로사이클, 비치환 5-9원 아릴, 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이다.
일 구현예에서, 각 R16은 독립적으로 할로겐, CN, C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3이다. 일 구현예에서, 각 R16은 독립적으로 R17-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 일 구현예에서, 각 R16은 독립적으로 R17-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬이다. 일 구현예에서, 각 R16은 독립적으로 R17-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클이다. 일 구현예에서, 각 R16은 독립적으로 R17-치환 또는 비치환 4, 5 또는 6원 헤테로사이클이다. 상기 일 구현예에서, 4, 5, 또는 6원 헤테로사이클은 적어도 1개의 N 헤테로원자를 포함한다. 일 구현예에서, 각 R16은 독립적으로 R17-치환 또는 비치환 페닐이다. 일 구현예에서, 각 R16은 독립적으로 R17-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이다. 일 구현예에서, 각 R16은 독립적으로 R17-치환 또는 비치환 4, 5 또는 6원 헤테로아릴이다. 상기 일 구현예에서, 4, 5, 또는 6원 헤테로아릴은 적어도 1개의 N 또는 O 헤테로원자를 포함한다. 상기 다른 구현예에서, 4, 5, 또는 6원 헤테로아릴은 적어도 1개의 N 헤테로원자를 포함한다. 상기 다른 구현예에서, 4, 5, 또는 6원 헤테로아릴은 적어도 1개의 O 헤테로원자를 포함한다.
일 구현예에서, 각 R17은 독립적으로 할로겐, CN, C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3이다. 다른 구현예에서, 각 R17은 독립적으로 CN, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3, 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 상기 일 구현예에서, 각 R17은 독립적으로 CN, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3, 또는 메틸이다.
일 구현예에서, 고리 A는 3-6원 헤테로사이클이다. 상기 일 구현예에서, 고리 A는 1개 이상의 N 헤테로원자를 포함하는 4, 5, 또는 6원 고리이다. 다른 구현예에서, 고리는 적어도 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 5-9원 헤테로아릴이다. 상기 일 구현예에서, 고리 A는 적어도 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 6원 헤테로아릴이다. 일 구현예에서, 고리 A는 아제티디닐, 티에타닐 1,1-디옥사이드, 이미다졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 트리아졸릴, 피라졸릴, 피라지닐, 피리도닐, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피롤로피리디닐, 또는 피라졸로피리디닐이다. 다른 구현예에서, 고리 A는 이미다졸릴, 이소티아졸릴, 또는 트리아졸릴이다. 다른 구현예에서, A는 피라졸릴, 피리도닐, 피리디닐, 피리미디닐, 또는 피리다지닐이다.
일 구현예에서, R5가 R5A-치환 C1-3 알킬인 경우, R5는 화학식 (T5) 또는 (T6)의 모이어티일 수 있고, 여기서 모이어티는 화학식
, , , , , , , , , 또는 의 모이어티를 포함한다.
일 구현예에서, R5가 R5A-치환 C1-3 알킬인 경우, R5는 화학식 (T5) 또는 (T6)의 모이어티일 수 있고, 여기서 모이어티는 화학식
, , , , , , , , , 또는 의 모이어티를 포함한다.
일 구현예에서, R5가 R5A-치환 C1-3 알킬인 경우, R5는 (T1)의 모이어티일 수 있고, 여기서 R5A는 본원에 기재된 바와 같다. R5가 (T1)의 모이어티인 경우, 일 구현예에서, R5A는 CN, OH, C(O)N(R11)2, C(O)R11, SO2R12, NR13R14, R5B-치환 또는 비치환 아제티디닐, 또는 R5B-치환 또는 비치환 옥세타닐이다. R5가 (T1)의 모이어티인 경우, 일 구현예에서, R5A는 NR13R14이고, 여기서 R13 및 R14는 독립적으로 수소, R15-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R15-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, 또는 R15-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클이다. 일 구현예에서, R13 및 R14 중 하나는 수소이다. 다른 구현예에서, R13 및 R14 중 적어도 하나는 R15-치환 또는 비치환 C1-6 알킬이다. 상기 일 구현예에서, R13 및 R14 중 적어도 하나는 메틸이다. 다른 구현예에서, R13 및 R14 중 적어도 하나는 R15-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이다. R13 및 R14 중 적어도 하나는 R15-치환 또는 비치환 C1-3 알킬인 경우, R15는 C(O)CH3, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, R16-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R16-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R16-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R16-치환 또는 비치환 5-9원 아릴, 또는 R16-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이다.
본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 일 구현예에서, R5는 R5A-치환 또는 비치환 C3-10 시클로알킬이다. 상기 일 구현예에서, R5는 R5A-치환 C4-6 모노시클릭 시클로알킬이다. 상기 다른 구현예에서, R5는 R5A-치환 C7-10 비시클릭 시클로알킬이고, 여기서 고리들 중 적어도 하나는 시클로알킬 모이어티이다. 일 구현예에서, C3-5 시클로알킬은 다른 고리의 탄소에 스피로 결합된다.
일 구현예에서, R5는 R5A-치환 또는 비치환 3-10원 헤테로사이클이다. 상기 일 구현예에서, R5는 R5A-치환 3-7원 모노시클릭 헤테로사이클이다. 상기 다른 구현예에서, R5는 R5A-치환 7-10 비시클릭 헤테로사이클이고, 여기서 고리들 중 적어도 하나는 헤테로사이클 모이어티이다. 일 구현예에서, 3-5원 헤테로사이클은 다른 고리의 탄소에 스피로 결합된다.
일 구현예에서, R5는 R5A-치환 또는 비치환 5-10원 헤테로아릴이다. 상기 일 구현예에서, R5는 R5A-치환 5 또는 6원 모노시클릭 헤테로아릴이다. 상기 다른 구현예에서, R5는 R5A-치환 7-10 비시클릭 헤테로아릴이고, 여기서 고리들 중 적어도 하나는 헤테로아릴 모이어티이다.
일 구현예에서, R5는 R5A-치환 또는 비치환 시클로펜타피리디닐, R5A-치환 또는 비치환 피롤로피리디닐, 피라졸로피리디닐, 또는 이미다조피리디닐이다.
일 구현예에서, R6 및 R6A는 독립적으로 수소 또는 R6B-치환 또는 비치환 C1-6 알킬이다. 다른 구현예에서, R6 및 R6A는 독립적으로 수소, NR13R14, 또는 R6B-치환 또는 비치환 C1-6 알킬이다. 또 다른 구현예에서, R6 및 R6A는 독립적으로 수소, 할로겐, 또는 R6B-치환 또는 비치환 C1-6 알킬이다. 일 구현예에서, R6은 R6B-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 일 구현예에서, R6은 R6B-치환 C1-3 알킬이다. 일 구현예에서, R6A는 R6B-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 일 구현예에서, R6A는 R6B-치환 C1-3 알킬이다. 일 구현예에서, R6 및 R6A 중 적어도 하나는 독립적으로 수소이다. 일 구현예에서, R6은 수소이다. 다른 구현예에서, R6 및 R6A 중 적어도 하나는 독립적으로 R6B-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이고, 여기서 R6B는 할로겐, CN, 또는 OH이다. 상기 일 구현예에서, R6 및 R6A 중 하나는 수소이고 다른 하나는 R6B-치환 또는 비치환 C1-3 알킬이다. 상기 일 구현예에서, R6B는 할로겐, CN, 또는 OH이다. 일 구현예에서, R6은 메틸, CH2CN, 또는 CH2OH이고 R6A는 수소이다. 일 구현예에서, R6A는 메틸, CH2CN, 또는 CH2OH이고 R6은 수소이다.
일 구현예에서, R6B는 할로겐, CN, OH, 또는 OCH3이다. 일 구현예에서, R6B는 CF3, CHF2 또는 CH2F이다. 일 구현예에서, R6B는 비치환 C1-3 알킬이다. 일 구현예에서, R6B는 CN이다.
상기 일 구현예에서, R1은 본원에 기재된 바와 같다. 상기 다른 구현예에서, R1은 화학식 (A1), (A2) 또는 (B)의 모이어티이다. 상기 다른 구현예에서, R2는 화학식 (H), (J), (K), (L), (M), (N), (O) 또는 (P)의 모이어티이다.
상기 다른 구현예에서, 화합물은 화학식 (II)의 화합물이다.
일 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 화학식:
(II),
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 가지고, 여기서 R1은 화학식 (A1), (A2), 또는 (B)의 모이어티이고; R8은 화학식 (D1), (D2), (D3), (E), (G), 또는 (G1)의 모이어티이며; 그리고 X는 O이다. 화학식 (II)의 화합물의 다른 구현예에서, R1은 화학식 (A1) 또는 (A2)의 모이어티이고; R8은 화학식 (D1), (D2), (D3), (E), (G), 또는 (G1)의 모이어티이며; 그리고 X는 O이다. 또 다른 구현예에서, R1은 화학식 (B)의 모이어티이고; R8은 화학식 (D1), (D2), (D3), (E), (G), 또는 (G1)의 모이어티이며; 그리고 X는 O이다. 상기 일부 구현예들에서, R5는 (T1), (T2), (T3), (T4), (T5), 또는 (T6)의 모이어티이다.
일 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 화학식:
(III),
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 가지고, 여기서 R1은 화학식 (A1), (A2), 또는 (B)의 모이어티이며; 그리고 X는 O이다. 화학식 (III)의 화합물의 다른 구현예에서, R1은 화학식 (A1) 또는 (A2)의 모이어티이며; 그리고 X는 O이다. 또 다른 구현예에서, R1은 화학식 (B)의 모이어티이며; 그리고 X는 O이다. 상기 일부 구현예들에서, R5는 (T1), (T2), (T3), (T4), (T5), 또는 (T6)의 모이어티이다.
일 구현예에서, 본원에 기재된 화합물의 R8은:
(D), (D6), (G), 또는 (E)이다.
일 구현예에서, 본원에 기재된 화합물의 R8은:
(D1), (D2), 또는 (D3)이다.
다른 구현예에서, 본원에 기재된 화합물의 R8은:
(D6)이다.
일 구현예에서, 본원에 기재된 화합물의 R8은:
또는 이다.
화학식:
(IV), (IVa), (IVb), 또는 (IVc)의 화합물,
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 본원에 추가로 제공되고,
여기서 R1, R3, R4, R5, R5A, R5B, R6, R6A, R8, X, 및 고리 A은 본원에 정의된 바와 같다. 화학식 (II), (IIa), (IIb), (IIc), (IId), (IV), (IVa), (IVb), 또는 (IVc)의 화합물의 일 구현예에서, R8은:
, , , , , , , , , , , , , , 또는 이다.
화학식 (I), (II), (IIa), (IIb), (IIc), (IId), (IV), (IVa), (IVb), 또는 (IVc)의 화합물의 다른 구현예에서, R8은:
, , , 이고,
여기서 R9, W, W1, q, j, 및 k는 본원에 기재된 바와 같다.
화학식 (I), (II), (IIa), (IIb), (IIc), (IId), (IV), (IVa), (IVb), 또는 (IVc)의 화합물의 다른 구현예에서, R8은:
, , 또는 이고,
여기서 R9 및 R10은 본원에 기재된 바와 같다.
화학식 (I), (II), (IIa), (IIb), (IIc), (IId), (IV), (IVa), (IVb), 또는 (IVc)의 화합물의 다른 구현예에서, R8은:
또는 이다.
화학식:
(V), (Va), (Vb), 또는 (Vc)의 화합물,
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 본원에 추가로 제공되고, 여기서 R1, R3, R4, R5, R5A, R5B, R6, R6A, R8, X, 및 고리 A는 본원에 정의된 바와 같다.
일 구현예에서, 화학식 (I), (II), 또는 (III)의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 표 1의 화합물이다.
Ex. No. 구조 Ex. No. 구조
1 98b
2 99a
3 99b
4 100a
5 100b
6 101
7 102a
8 102b
9 102c
10 102d
11 103a
12 103b
13 104a
14 104b
15 105a
16 105b
17 106
18 107
19 108a
20 108b
21 109
22 110a
23 110b
24 111a
25 111b
26 112
27 113a
28 113b
29 114a
30 114b
31 115
32 116
33 117
34 118
35 119
36 120a
37 120b
38 121
39 122a
4040a
40b 		122b
4141a
41b
123a
4242a
42b 		123b
43 124
44 125a
45 125b
46 126
4747a
47b 		127
48 128a
49 128b
50 129a
51 129b
52 130a
5353a
53b 		130b
54 130c
55 130d
56 131
57 132
58 133a
59 133b
60 133c
61 134
62 135
63 136
64 137
65a 138
65b 139
66a 140
66b 141
67 142
68 143
69a 144
69b 145
69c 146
69d 147
70a 148
70b 149
70c 150
70d 151
71 152
72 153
73a 154
73b 155
74a 156
74b 157
75a 158a
75b 158b
76a 159a
76b 159b
77a 160a
77b 160b
77c 161a
78 161b
79 162a
80 162b
81 162c
82a 162d
82b 163a
83a 163b
83b 164a
84a 164b
84b 165a
85 165b
86 166a
87a 166b
87b 167a
88 167b
89 168a
90 168b
91a 169a
91b 169b
92a 170a
92b 170b
93a 171a
93b 171b
93c 172a
93d 172b
94 173a
95a 173b
95b 174a
96 174b
97 175
98a 176
일 구현예에서, 화학식 (I), (II), 또는 (III)의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 표 1의 화합물이다.
Ex. No. 구조 Ex. No. 구조
501 514
502 515
503 516
504 517
505 518
506 519
507 2 520
508 521
509 522
510 523
511 524
512 525525a
525b
525c
525d
513
G12D 화합물
화합물의 합성
본 발명의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 아래에 보이고 설명된 예시적인 합성 반응 도식에 나타난 다양한 방법에 의해 제조될 수 있다. 이들 화합물의 제조에 사용되는 출발 물질 및 시약은 일반적으로 상업적 공급업체, 예컨대, 알드리치 케미칼 캄파니(Aldrich Chemical Co.)로부터 입수가능하거나, 또는 참조 문헌, 예컨대, Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis; Wiley & Sons: New York, vol. 1-21; R. C. LaRock, Comprehensive Organic Transformations, 2nd edition Wiley-VCH, New York 1999; Comprehensive Organic Synthesis, B. Trost and I. Fleming (Eds.) vol. 1-9 Pergamon, Oxford, 1991; Comprehensive Heterocyclic Chemistry, A. R. Katritzky and C. W. Rees (Eds.) Pergamon, Oxford 1984, vol. 1-9; Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, A. R. Katritzky and C. W. Rees (Eds) Pergamon, Oxford 1996, vol. 1-11; and Organic Reactions, Wiley & Sons: New York, 1991, Vol. 1-40에 기재된 절차에 따라 당업자에게 공지된 방법에 의해 제조된다. 본원에 제공된 합성 반응식은 단지 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 합성될 수 있는 일부 방법의 예시일 뿐이며, 이러한 합성 반응 도식에 대한 다양한 변형이 이루어질 수 있고 본원에 포함된 개시내용을 참조하는 당업자에게 제안될 것이다.
본원에 기재된 화합물 합성에 유용한 합성 화학 변환 및 보호기 방법(보호 및 탈보호) 및 필요한 시약 및 중간체는 예를 들어, R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley and Sons (1999); 및 L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) 및 이의 후속판에 기재된 것을 포함한다.
본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 단독으로 또는 적어도 2 개, 예를 들어 5 내지 1,000 개의 화합물, 또는 10 내지 100 개의 화합물을 포함하는 화합물 라이브러리로서 제조될 수 있다. 본원에 기재된 화학식의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 라이브러리는 조합 분할 및 혼합 접근법에 의해 또는 예를 들어 용액상 또는 고체상 화학을 사용하는 다중 병렬 합성에 의해 제조될 수 있다. 따라서 추가 양태에 따르면 본원에 기재된 바와 같은 적어도 2 가지의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 화합물 라이브러리가 본원에 제공된다.
실시예는 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 제조하는 예시적인 방법을 제공한다. 당업자는 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 합성하기 위해 다른 합성 경로가 사용될 수 있음을 이해할 것이다. 특정 출발 물질 및 시약이 실시예에 도시되고 논의되지만, 다양한 유도체 및/또는 반응 조건을 제공하기 위해 다른 출발 물질 및 시약이 대체될 수 있다. 또한, 기재된 방법에 의해 제조된 많은 예시적인 화합물이 통상적인 화학을 사용하여 본 개시내용에 비추어 더욱 변경될 수 있다.
본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 제조에서 중간체의 원격 작용기(예를 들어, 1차 또는 2차 아민)의 보호가 필요할 수 있다. 이러한 보호의 필요성은 원격 작용기의 특성과 제조 방법의 조건에 따라 달라진다. 적합한 아미노-보호기는 아세틸, 트리플루오로아세틸, t-부톡시카르보닐(BOC), 벤질옥시카르보닐(CBz) 및 9-플루오레닐메틸렌옥시카르보닐(Fmoc)을 포함한다. 이러한 보호의 필요성은 쉽게 결정될 수 있다. 보호기 및 이의 용도의 일반적인 설명에 대해서는, T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991을 참조하라.
본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 제조하는 방법에서, 서로 및/또는 출발 물질로부터 반응 생성물을 분리하는 것이 유리할 수 있다. 각 단계 또는 일련의 단계의 원하는 생성물은 당업계에서 통상적인 기술에 의해 원하는 정도의 균일성까지 분리 및/또는 정제된다. 일반적으로 이러한 분리는 다중상 추출, 용매 또는 용매 혼합물로부터의 결정화, 증류, 승화 또는 크로마토그래피를 포함한다. 크로마토그래피는 예를 들어: 역상 및 순상; 크기 배제; 이온 교환; 고압, 중압 및 저압 액체 크로마토그래피 방법 및 장치; 소규모 분석; 모의 이동층(SMB) 및 분취용 박층 또는 후층 크로마토그래피, 그뿐만 아니라 소규모 박층 및 플래시 크로마토그래피의 기술을 비롯한 다수의 방법을 포함할 수 있다.
또 다른 부류의 분리 방법은 원하는 생성물, 미반응 출발 물질, 반응 부산물 등에 결합하거나 그렇지 않으면 분리 가능하게 하도록 선택된 시약으로 혼합물을 처리하는 것을 포함한다. 이러한 시약은 활성탄, 분자체, 이온 교환 매질 등과 같은 흡착제 또는 흡수제를 포함한다. 대안적으로, 시약은 염기성 물질의 경우 산, 산성 물질의 경우 염기, 항체와 같은 결합 시약, 결합 단백질, 크라운 에테르, 액체/액체 이온 추출 시약(LIX) 등과 같은 선택적 킬레이터일 수 있다. 적절한 분리 방법의 선택은 증류 및 승화에서의 끓는점 및 분자량, 크로마토그래피에서 극성 작용기의 존재 또는 부재, 다중상 추출에서 산성 또는 염기성 매질에서의 물질의 안정성 등과 같은 관련된 물질의 특성에 따라 달라진다.
부분입체이성질체 혼합물은 크로마토그래피 및/또는 분별 결정화와 같은 방법에 의해 물리적 화학적 차이를 기준으로 개별 부분입체이성질체로 분리될 수 있다. 거울상이성질체는 거울상이성질체 혼합물을 적절한 광학적으로 활성인 화합물(예를 들어, 카이랄 알코올 또는 모셔 산 클로라이드와 같은 카이랄 보조제)과의 반응에 의해 부분입체이성질체 혼합물로 전환하고, 부분입체이성질체를 분리하고, 개별 부분입체이성질체를 상응하는 순수한 거울상이성질체로 전환(예를 들어 가수분해)하여 분리될 수 있다. 또한, 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 일부는 회전장애이성질체(예를 들어, 치환된 비아릴)일 수 있다. 거울상이성질체는 또한 카이랄 HPLC 컬럼의 사용에 의해 분리될 수 있다.
단일 입체이성질체, 예를 들어, 그 입체이성질체가 실질적으로 없는 거울상이성질체는 광학 활성 분할제를 사용하여 부분입체이성질체를 형성하는 것과 같은 방법을 사용하는 라세미 혼합물의 분할에 의해 얻을 수 있다 (Eliel, E. and Wilen, S. "Stereochemistry of Organic Compounds," John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994; Lochmuller, C. H., (1975) J. Chromatogr., 113(3):283-302). 본원에 기재된 키랄 화합물의 라세미 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 다음을 포함하는 임의의 적합한 방법에 의해 분리 및 단리될 수 있다: (1) 키랄 화합물을 사용한 이온성 부분입체 이성질체 염의 형성 및 분별 결정화 또는 기타 방법에 의한 분리,(2) 키랄 유도체화 시약을 사용한 부분입체 이성질체 화합물의 형성, 부분입체 이성질체의 분리 및 순수한 입체 이성질체로의 전환, 및(3) 키랄 조건에서 직접적으로 실질적으로 순수하거나 풍부한 입체 이성질체의 분리. 하기의 문헌을 참조한다: “Drug Stereochemistry, Analytical Methods and Pharmacology,” Irving W. Wainer, Ed., Marcel Dekker, Inc., New York (1993).
방법 (1) 하에, 부분입체이성질체 염은 브루신, 퀴닌, 에페드린, 스트리크닌, α-메틸-β-페닐에틸아민(암페타민) 등과 같은 거울상이성질체적으로 순수한 카이랄 염기와 카르복실산 및 설폰산과 같은 산성 작용기를 보유하는 비대칭 화합물의 반응에 의해 형성될 수 있다. 부분입체이성질체 염은 분별 결정화 또는 이온 크로마토그래피에 의해 분리되도록 유도될 수 있다. 아미노 화합물의 광학 이성질체의 분리를 위해, 카이랄 카르복실산 또는 설폰산, 예컨대 캄포설폰산, 타르타르산, 만델산 또는 락트산의 첨가가 부분입체이성질체 염의 형성을 야기할 수 있다.
대안적으로, 방법 (2)에 의해, 분할될 기질은 카이랄 화합물의 하나의 거울상이성질체와 반응하여 부분입체이성질체 쌍을 형성한다 (E. and Wilen, S. "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., 1994, p. 322). 부분입체이성질체 화합물은 비대칭 화합물을 거울상이성질체적으로 순수한 카이랄 유도체화 시약, 예컨대 멘틸 유도체와 반응시키고, 이어서 부분입체이성질체를 분리하고 가수분해하여 순수한 또는 농축된 거울상이성질체를 얻어 형성될 수 있다. 광학 순도를 결정하는 방법은 라세미체 혼합물의 염기, 또는 모셔 에스테르, a-메톡시-a(트리플루오로메틸)페닐 아세테이트의 존재 하에 키랄 에스테르, 예컨대 멘틸 에스테르, 예를 들어 (-) 멘틸 클로로포르메이트를 제조하는 것(Jacob III. J. Org. Chem. (1982) 47:4165), 그리고 2개의 회전장애이성질체 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체의 존재에 대한 1H NMR 스펙트럼을 분석하는 것을 포함한다. 회전장애이성질체 화합물의 안정한 부분입체이성질체는 회전장애이성질체 나프틸-이소퀴놀린의 분리 방법에 따라 순상 및 역상 크로마토그래피에 의해 분리 및 단리될 수 있다 (WO 96/15111). 방법 (3)에 의해, 두 거울상이성질체의 라세미 혼합물은 카이랄 고정상을 사용하는 크로마토그래피에 의해 분리될 수 있다 ("Chiral Liquid Chromatography" (1989) W. J. Lough, Ed., Chapman and Hall, New York; Okamoto, J. Chromatogr., (1990) 513:375-378). 농축된 또는 정제된 거울상이성질체는 광학 회전 및 원편광 이색성과 같은 비대칭 탄소 원자를 갖는 다른 카이랄 분자를 구별하기 위해 사용되는 방법에 의해 구별될 수 있다.
본원에 기재된 화학 반응은 본원에 기재된 다른 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제조하기 위해 쉽게 적합화될 수 있다. 예를 들어, 예시되지 않은 본원에 기재된 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염의 합성은 예를 들어 간섭하는 기를 적절하게 보호함으로써, 기재된 것 이외의 당업계에 공지된 다른 적합한 시약을 사용함으로써 또는 반응 조건의 일상적인 수정을 함으로써 당업자에게 명백한 수정에 의해 성공적으로 수행될 수 있다. 대안적으로, 본원에 개시되거나 당업계에 공지된 다른 반응은 본원에 기재된 다른 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제조하기 위한 적용 가능성을 갖는 것으로 인식될 것이다.
약학적 제형
본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학적 조성물이 또한 본원에 제공된다.
본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 약학적 조성물로서 표준 제약 관행에 따라 제형화될 수 있다. 따라서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학적 조성물 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제가 본원에 추가로 제공된다.
전형적인 제형은 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 부형제를 혼합하여 제조된다. 적합한 담체, 희석제 및 부형제는 탄수화물, 왁스, 수용성 및/또는 팽윤성 중합체, 친수성 또는 소수성 물질, 젤라틴, 오일, 용매, 물 등과 같은 물질을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 사용되는 특정 부형제는 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 적용되는 수단 및 목적에 따라 달라질 것이다. 용매는 일반적으로 포유동물에게 투여하기에 안전한 것으로 인식되는(GRAS) 용매를 기반으로 선택된다. 일반적으로, 안전한 용매는 물 및 물에 가용성 또는 혼화성인 기타 비독성 용매와 같은 비독성 수성 용매이다. 적합한 수성 용매는 물, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜(예를 들어 PEG 400, PEG 300) 등 및 이들의 혼합물을 포함한다. 제형은 또한 약물(즉, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적 조성물)의 심미적 외양을 제공하거나 또는 약학적 산물(즉, 의약품)의 제조를 보조하기 위해 하나 이상의 완충액, 안정화제, 계면활성제, 침윤제, 윤활제, 유화제, 현탁제, 보존제, 항산화제, 불투명화 작용제, 활택제, 가공 보조제, 착색제, 감미료, 방향제, 향미제 및 기타 공지된 첨가제를 포함할 수 있다.
제형은 통상적인 용해 및 혼합 절차를 사용하여 제조될 수 있다. 예를 들어, 벌크 원료의약품(즉 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이의 안정화된 형태(예를 들어, 시클로덱스트린 유도체 또는 다른 알려진 복합화제와의 복합체))는 위에 기재된 부형제 중 하나 이상의 존재에서 적합한 용매에 용해된다. 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 전형적으로 약학적 투여 형태로 제형화되어 약물의 용이하게 제어 가능한 투여량을 제공하고 처방된 요법에 대한 환자 순응을 가능하게 한다.
적용을 위한 약학적 조성물(또는 제형)은 약물을 투여하기 위해 사용된 방법에 따라 다양한 방식으로 포장될 수 있다. 일반적으로, 유통 물품은 적절한 형태의 약학적 제제가 담겨 있는 용기를 포함한다. 적합한 용기는 병(플라스틱 및 유리), 사쉐, 앰플, 플라스틱 백, 금속 실린더 등과 같은 재료를 포함한다. 용기는 또한, 패키지의 내용물에 무분별한 접근을 예방하기 위한 변조 방지 조립체를 포함할 수 있다. 또한, 용기에는 용기의 내용물을 설명하는 라벨이 부착된다. 라벨은 또한 적절한 주의사항을 포함할 수 있다.
본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 약학적 제형이 다양한 투여 경로 및 유형을 위해 제조될 수 있다. 예를 들어, 원하는 정도의 순도를 갖는 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 선택적으로 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제와 (Remington's Pharmaceutical Sciences (1980) 16th edition, Osol, A. Ed.) 동결건조된 제형, 분쇄된 분말 또는 수용액의 형태로 혼합될 수 있다. 제형화는 주위 온도에서 적절한 pH에서, 그리고 원하는 정도의 순도에서, 생리학적으로 허용되는 담체, 즉 사용된 투여량 및 농도에서 수용자에게 비독성인 담체와 혼합함으로써 수행될 수 있다. 제형의 pH는 주로 특정 용도 및 화합물의 농도에 의존하지만, 약 3 내지 약 8 범위일 수 있다. 예를 들어, pH 5의 아세테이트 완충액 중 제형이 적합한 구현예일 수 있다.
약학적 조성물은 통상적으로 고체 조성물, 동결건조된 제형 또는 수용액으로서 보관될 수 있다.
본원에 기재된 약학적 조성물은 모범적인 의학적 관행과 일치하는 방식, 즉 양, 농도, 일정, 과정, 비히클 및 투여 방식으로 제형화, 투약 및 투여될 수 있다. 이 맥락에서 고려해야 할 요인은 치료 중인 특정 장애, 치료 중인 특정 포유동물, 개별 환자의 임상 상태, 장애의 원인, 약제 전달 부위, 투여 방법, 투여 일정, 및 의료 종사자에게 공지된 기타 요인을 포함한다. 투여될 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 유효량은 이러한 고려사항에 의해 좌우될 것이며, 과증식성 장애를 개선하거나 치료하는 데 필요한 최소량이다.
일반적인 제시로서, 용량당 비경구로 투여되는 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 초기 약학적 유효량은 약 0.01-100 mg/kg, 즉 일일 약 0.1 내지 20 mg/환자 체중 kg일 것이며, 사용되는 화합물의 전형적인 초기 범위는 0.3 내지 15 mg/kg/일이다. 다른 구현예에서, 본원에 기재된 약학적 조성물은 유효량의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염을 약: 1 mg-10 mg; 10 mg-25 mg; 20 mg-50 mg; 50 mg-75 mg; 70 mg-100 mg;100 mg-150 mg; 100 mg-200 mg; 100 mg-500 mg; 200 mg-500 mg; 250 mg-500 mg; 500 mg-1000 mg; 또는 750 mg-1000 mg의 양으로 포함한다.
약학적으로 허용가능한 부형제는 이용된 투여량 및 농도에서 수용자에 비독성이며, 완충액, 예컨대 포스페이트, 시트레이트, 및 다른 유기산; 아스코르브산 및 메티오닌을 포함하는 항산화제; 보존제(예컨대 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알코올; 알킬 파라벤, 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 주기로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10 잔기 미만) 폴리펩티드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌, 또는 라이신; 모노사카라이드, 디사카라이드, 및 글루코스, 만노스, 또는 덱스트린을 포함하는 다른 탄수화물; 킬레이트제, 예컨대 EDTA; 당류, 예컨대 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨; 염 형성 짝이온, 예컨대 나트륨; 금속 착물(예를 들면, Zn-단백질 복합체); 및/또는 비-이온성 계면활성제, 예컨대 TWEEN™, PLURONICS™ 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)이 포함된다. 활성 약학적 성분은 또한 예를 들어 코아세르베이션 기술 또는 계면 중합에 의해 제조된 마이크로캡슐, 예를 들어 히드록시메틸셀룰로스 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리-(메틸메타크릴레이트) 마이크로캡슐에서, 각각 콜로이드 약물 전달 시스템(예를 들어 리포솜, 알부민 미세구체, 마이크로에멀젼, 나노 입자 및 나노캡슐) 또는 마크로에멀젼에 포획될 수 있다. 상기 기술은 Remington’s Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)에 개시되어 있다.
본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 지속 방출 제제가 제조될 수 있다. 지속 방출 제제의 적합한 예는 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 고체 소수성 고분자의 반투과성 매트릭스를 포함하고, 이 매트릭스는 성형된 제품 형태, 예를 들어, 막 또는 마이크로캡슐로 존재한다. 지속 방출 매트릭스의 예는 폴리에스테르, 하이드로겔(예를 들어 폴리(2-히드록시에틸-메타크릴레이트), 또는 폴리(비닐 알코올)), 폴리락티드(US 3773919), L-글루탐산 및 감마-에틸-L-글루타메이트의 공중합체, 비분해성 에틸렌-비닐 아세테이트, 분해성 락트산-글리콜산 공중합체, 예컨대 LUPRON DEPOT
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(락트산-글리콜산 공중합체 및 류프롤리드 아세테이트로 구성된 주사 가능 미세구체) 및 폴리-D-(-)-3-히드록시부티르산을 포함한다.
제형은 본원에 상세히 설명된 투여 경로에 적합한 것을 포함한다. 제형은 단위 투여 형태로 편리하게 제공될 수 있고 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 기술 및 제제는 일반적으로 Remington's Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Co., Easton, PA)에서 발견된다. 이러한 방법은 활성 성분을 하나 이상의 보조 성분을 구성하는 담체와 회합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로 제형은 활성 성분을 액체 담체 또는 미분 고체 담체 또는 두 가지 모두와 균일하고 친밀하게 결합시킨 다음, 필요한 경우, 생성물을 성형하여 제조된다.
경구 투여에 적합한 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 제형은 각각 소정량의 이러한 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 별개의 단위, 예컨대 환제, 캡슐, 사쉐 또는 정제로 제조될 수 있다. 압축정은 결합제, 윤활제, 불활성 희석제, 보존제, 표면 활성제 또는 분산제와 선택적으로 혼합된 분말 또는 과립과 같은 자유 유동 형태의 활성 성분을 적합한 기계에서 압축함으로써 제조될 수 있다. 성형 정제는 불활성 액체 희석제로 습윤된 분말 활성 성분의 혼합물을 적합한 기계에서 성형하여 제조될 수 있다. 정제는 선택적으로 코팅되거나 스코어링될 수 있고 선택적으로 이로부터 활성 성분의 느리거나 제어된 방출을 제공하도록 제형화된다. 정제, 트로키, 로젠지, 수성 또는 오일 현탁액, 분산성 분말 또는 과립, 에멀젼, 경질 또는 연질 캡슐, 예를 들어 젤라틴 캡슐, 시럽 또는 엘릭서가 경구 사용을 위해 제조될 수 있다. 경구 사용에 의도된 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제형은 약학적 조성물의 제조 방법에 따라 제조될 수 있고 이러한 조성물은 맛좋은 제제를 제공하기 위해 감미제, 향미제, 착색제 및 보존제를 포함하는 하나 이상의 제제를 포함할 수 있다. 정제 제조에 적합한 약학적으로 허용가능한 무독성 부형제와 혼합된 활성 성분을 함유하는 정제가 허용 가능하다. 이들 부형제는 예를 들어 불활성 희석제, 예컨대 탄산칼슘 또는 탄산나트륨, 락토스, 인산칼슘 또는 인산나트륨; 과립화제 및 붕해제, 예컨대 옥수수 전분 또는 알긴산; 결합제, 예컨대 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 및 윤활제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 또는 탈크일 수 있다. 정제는 코팅되지 않을 수 있거나 위장관에서 붕해 및 흡착을 지연시켜 장기간에 걸쳐 지속적인 작용을 제공하기 위해 마이크로캡슐화를 포함하는 공지 기술에 의해 코팅될 수 있다. 예를 들어, 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트와 같은 시간 지연 물질이 단독으로 또는 왁스와 함께 사용될 수 있다.
눈 또는 기타 외부 조직, 예를 들어 입 및 피부의 치료의 경우, 제제는 바람직하게는 예를 들어 0.075 내지 20% w/w의 양으로 활성 성분(들)을 포함하는 국소 연고 또는 크림으로서 도포된다. 연고로 제형화되는 경우, 활성 성분은 파라핀계 또는 수혼화성 연고 기제와 함께 사용될 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 수중유 크림 기제로 크림으로 제형화될 수 있다. 바람직한 경우, 크림 기제의 수성상은 다가 알코올, 즉 둘 이상의 히드록실 기를 갖는 알코올, 예컨대 프로필렌 글리콜, 부탄 1,3-디올, 만니톨, 소르비톨, 글리세롤 및 폴리에틸렌 글리콜(PEG 400 포함) 및 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 국소 제형은 바람직하게는 피부 또는 다른 환부를 통한 활성 성분의 흡수 또는 침투를 향상시키는 화합물을 포함할 수 있다. 이러한 진피 침투 향상제의 예는 디메틸 설폭사이드 및 관련 유사체를 포함한다. 본원에 제공된 조성물의 에멀젼의 유성상은 공지된 방식으로 공지된 성분으로부터 구성될 수 있다. 상은 단순히 유화제를 포함할 수 있지만, 이는 바람직하게는 적어도 하나의 유화제와 지방 또는 오일 또는 지방과 오일 둘 모두와의 혼합물을 포함한다. 바람직하게는, 친수성 유화제는 안정화제로 작용하는 친유성 유화제와 함께 포함된다. 오일 및 지방을 모두 포함하는 것이 또한 바람직하다. 함께, 안정화제(들)가 있거나 없이 유화제(들)는 소위 유화 왁스를 구성하고, 왁스는 오일 및 지방과 함께 소위 유화 연고 기제를 구성하고 이는 크림 제제의 유성 분산상을 형성한다. 본원에 기재된 제형에서 사용하기에 적합한 유화제 및 에멀젼 안정화제는 Tween® 60, Span® 80, 세토스테아릴 알코올, 벤질 알코올, 미리스틸 알코올, 글리세릴 모노-스테아레이트 및 소듐 라우릴 설페이트를 포함한다.
본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 수성 현탁액은 수성 현탁액의 제조에 적합한 부형제와 혼합된 활성 물질을 포함할 수 있다. 이러한 부형제는 현탁제, 예컨대 소듐 카르복시메틸셀룰로스, 크로스카르멜로스, 포비돈, 메틸셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 소듐 알지네이트, 폴리비닐피롤리돈, 트라가칸트 검 및 아카시아 검 및 분산제 또는 습윤제, 예컨대 천연 발생 포스파티드(예를 들어 레시틴), 알킬렌 옥사이드와 지방산의 축합 생성물(예를 들어 폴리옥시에틸렌 스테아레이트), 에틸렌 옥사이드와 장쇄 지방족 알코올의 축합 생성물(예를 들어 헵타데카에틸렌옥시세탄올), 에틸렌 옥사이드와 지방산 및 헥시톨 무수물로부터 유도된 부분 에스테르의 축합 생성물(예를 들어 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트)를 포함한다. 수성 현탁액은 또한 하나 이상의 보존제, 예컨대 에틸 또는 n-프로필 p-히드록시벤조에이트, 하나 이상의 착색제, 하나 이상의 착향제 및 하나 이상의 감미제, 예컨대 수크로스 또는 사카린을 포함할 수 있다.
본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 약학적 조성물은 멸균 주사용 수성 또는 유성 현탁액과 같은 멸균 주사용 제제 형태일 수 있다. 이 현탁액은 위에 언급된 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제를 사용하여 제형화될 수 있다. 멸균 주사용 제제는 또한 무독성의 비경구로 허용되는 희석제 또는 용매 중의 멸균 주사용 용액 또는 현탁액, 예컨대 1,3-부탄디올 중의 용액일 수 있거나 동결건조된 분말로서 제조될 수 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 멸균 고정유가 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로 사용될 수 있다. 이 목적을 위해 합성 모노- 또는 디글리세리드를 포함하여 임의의 무자극 고정유가 사용될 수 있다. 또한, 올레산과 같은 지방산이 마찬가지로 주사제의 제조에서 사용될 수 있다.
단일 투여 형태를 생산하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 치료되는 호스트 및 특정 투여 방식에 따라 변할 것이다. 예를 들어, 인간에 대한 경구 투여에 의도되는 시간 방출 제형은 약 5 내지 약 95%의 총 조성(중량:중량)에서 변할 수 있는 적절하고 편리한 양의 담체 물질과 배합된 약 1 내지 1000 mg의 활성 물질을 포함할 수 있다. 약학적 조성물은 투여를 위해 쉽게 측정 가능한 양을 제공하도록 제조될 수 있다. 예를 들어, 정맥내 주입용으로 의도된 수성 용액은 약 30 mL/시간의 속도로 적합한 부피의 주입이 발생할 수 있도록 용액 밀리리터당 약 3 내지 500 μg의 활성 성분을 포함할 수 있다.
비경구 투여에 적합한 제형은 산화방지제, 완충제, 정균제 및 의도된 수용자의 혈액과 등장성이 되도록 하는 용질을 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 주사 용액; 및 현탁제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다.
눈에 대한 국소 투여에 적합한 제형은 또한 활성 성분이 적합한 담체, 특히 활성 성분용 수성 용매에 용해되거나 현탁된 점안액을 포함한다. 활성 성분은 바람직하게는 약 0.5 내지 20% w/w, 예를 들어 약 0.5 내지 10% w/w, 예를 들어 약 1.5% w/w의 농도로 이러한 제제에 존재한다.
입안의 국소 투여에 적합한 제제는 풍미 기제, 일반적으로 수크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트에 활성 성분을 포함하는 로젠지; 젤라틴 및 글리세린, 또는 수크로스 및 아카시아와 같은 불활성 기제에 활성 성분을 포함하는 패스틸; 및 적합한 액체 담체에 활성 성분을 포함하는 구강세정제를 포함한다.
직장 투여를 위한 제형은 예를 들어 코코아 버터 또는 살리실레이트를 포함하는 적합한 기제가 있는 좌제로 제시될 수 있다.
폐내 또는 비강 투여에 적합한 제제는 예를 들어 0.1 내지 500 마이크론 범위 입자 크기(0.5, 1, 30 마이크론, 35 마이크론 등과 같은 마이크론 증분으로 0.1 내지 500 마이크론 범위의 입자 크기 포함)를 갖고, 이는 폐포낭에 도달하도록 비강 통로를 통한 신속한 흡입에 의해 또는 입을 통한 흡입에 의해 투여된다. 적합한 제제는 활성 성분의 수성 또는 유성 용액을 포함한다. 에어로졸 또는 건조 분말 투여에 적합한 제형은 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있고 아래 기재된 장애의 치료 또는 예방에서 지금까지 사용된 화합물과 같은 다른 치료제와 함께 전달될 수 있다.
질 투여에 적합한 제형은 활성 성분 이외에 적절한 것으로 간주되는 담체를 포함하는 페사리, 탐폰, 크림, 젤, 페이스트 폼 또는 스프레이 제형으로 제공될 수 있다.
제형은 단위 용량 또는 단위 용량 용기, 예를 들어 밀봉 앰플 및 바이알에 포장될 수 있고, 사용 직전에 주사하기 위해 멸균 액체 담체, 예를 들어 물의 첨가만을 필요로 하는 냉동 건조된(동결 건조된) 상태로 보관될 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액은 이전에 기재된 종류의 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조된다. 바람직한 단위 투여 제제는 본원에 전술한 바와 같이 일일 용량 또는 단위 일일 하위 용량, 또는 이의 적절한 분율의 활성 성분을 포함하는 것이다.
일 구현예에서, 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 전구약물로서 제형화된다. 본원에서 사용된 용어 전구약물은 생물학적 조건 하에 가수분해, 산화 또는 절단되어 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 제공할 수 있는 화합물의 유도체를 지칭한다. 본원에 정의된 바와 같은 전구약물은 용해도, 투과성, 흡수, 생체분포, 대사 안정성, 작용 개시 또는 일부 다른 약물유사 특성과 같지만 이에 제한되지 않는 하나 이상의 물리적, 생리학적 또는 약학적 특성을 조절하거나 개선하는 하나 이상의 모이어티를 포함하는 유도체를 포함하고, 본원에 제공된 바와 같은 생물활성 또는 더욱 생물학적 활성 물질로 변환된다. 일 구현예에서, 본원의 전구약물은 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 방출될 때까지 생물학적 활성을 갖지 않는다.
투여 방법
본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 치료될 병태에 적절한 임의의 경로에 의해 투여될 수 있다. 적합한 경로는 경구, 비경구(피하, 근육내, 정맥내, 동맥내, 피내, 경막내 및 경막외 포함), 경피, 직장, 비강, 국소(협측 및 설하 포함), 질, 복강내, 폐내 및 비강내를 포함한다. 국소 면역억제 치료를 위해, 화합물은 관류시키거나 그렇지 않으면 이식편을 이식 전에 억제제와 접촉시키는 것을 포함하는, 병변내 투여에 의해 투여될 수 있다. 바람직한 경로는 예를 들어 수용자의 상태에 따라 변할 수 있음이 이해될 것이다. 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 경구로 투여되는 경우, 이는 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제와 환제, 캡슐제, 정제 등으로서 제제화될 수 있다. 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 비경구적으로 투여되는 경우에, 이는 아래에 상술된 바와 같이 약학적으로 허용가능한 비경구 비히클과 함께 단위 투여 주사 가능 형태로 제형화될 수 있다.
따라서, 한 양태에서 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학적 조성물이 본원에 제공된다. 일 구현예에서, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 대상에게 경구로 또는 비경구로 투여될 수 있는 약학적 조성물로서 투여된다. 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 주사제, 현탁액, 시럽, 크림, 연고, 젤, 스프레이, 용액 및 에멀젼에 적합한 용액에 용해되거나 그렇지 않으면 현탁되는 국소 또는 비경구 사용을 위해 제형화될 수 있다.
경구 투여는 화합물(예를 들어 약학적 조성물로 제형화됨)을 섭취하는 환자 순응성을 촉진하여, 순응성 및 효능을 증가시킬 수 있다. 본원에 기재된 화합물을 포함하는 경구 약학적 조성물은 정제(예를 들어 코팅, 비코팅 및 저작) 및 캡슐(예를 들어 경질 젤라틴 캡슐, 연질 젤라틴 캡슐, 장용 코팅 캡슐 및 지속 방출 캡슐)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 정제는 직접 압축, 습식 과립화 또는 건식 과립화에 의해 제조될 수 있다. 본원에 기재된 화합물을 포함하는 경구 약학적 조성물은 지연 또는 연장 방출을 위해 제형화될 수 있다.
인간 환자를 치료하기 위한 용량은 본원에 기재된 화합물의 약 10 mg 내지 약 1000 mg 범위일 수 있다. 전형적인 용량은 약 100 mg 내지 약 300 mg의 화합물일 수 있다. 용량은 특정 화합물의 흡수, 분포, 대사 및 배설을 포함하는 약동학적 및 약력학적 특성에 따라 1일 1회(QID), 1일 2회(BID) 또는 더 빈번하게 투여될 수 있다. 본원에서 사용된 투여는 복용 빈도를 지칭하며, 예를 들어 본원에 기재된 환자가 복용을 위해 섭취해야 하는 개별 단위의 수가 아니다. 따라서, 일부 구현예들에서, 환자는 둘 이상의 투여 단위(예를 들어 둘 이상의 환제/정제/캡슐)를 QD 섭취할 수 있다. 또한, 독성 인자는 투여량 및 투여 요법에 영향을 줄 수 있다. 경구로 투여되는 경우, 환제, 캡슐 또는 정제는 매일 또는 지정된 기간 동안 덜 빈번하게 섭취될 수 있다. 요법은 치료법의 여러 주기 동안 반복될 수 있다.
치료 및 사용 방법
본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 Ras 억제제로서 유용하다. 일 양태에서, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 KRas 억제제로서 유용하다. 다른 구현예에서, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 KRasG12V 억제제로서 유용하다. 또 다른 구현예에서, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제제(즉, 돌연변이 KRas 단백질의 활성을 억제하는 화합물)로서 유용하다. 일 구현예에서, 본원에 기재된 표 2의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 KRasG12D 억제제로서 유용하다. 이러한 구현예들에서, 이러한 화합물은 이러한 암 또는 질환이 KRasG12D에 의해 매개되는 본원에 기재된 방법에 유용하다.
세포에서 Ras 활성을 억제하기 위해 세포, 예컨대 생체외 세포를 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉시키는 방법이 본원에 제공된다. 다른 구현예에서, 활성은 돌연변이 KRasG12V 활성이다. 다른 구현예에서, 활성은 돌연변이체 KRas 활성(예를 들어 돌연변이체 pan-KRas 활성)이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 하나 초과의 KRas 돌연변이체의 활성의 억제는 pan-KRas 억제로 지칭된다. 이러한 경우에, 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하나 초과의 돌연변이 KRas 단백질의 활성을 억제한다. 특정 예들에서, 이러한 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 야생형(WT) KRas 단백질 활성에 비해 하나 초과의 돌연변이 KRas 단백질을 선택적으로 억제한다. 이러한 일 구현예에서, 본원에 기재되고 본원에 제공된 방법에서 사용되는 pan-KRas 억제제는 하나 초과의 돌연변이 KRas 단백질을 WT KRas 단백질보다 적어도 5x, 8x, 10x, 12x, 15x, 20x, 24x, 27x, 50x, 100x, 500x, 700x, 1000x, 1300x, 1700x, 2000x, 5000x, 또는 그 초과로 억제한다. 일 구현예에서, 이러한 KRas 돌연변이는 SWII 도메인에 있다. 일 구현예에서, 이러한 KRas 돌연변이는 G12, G13, Q61 또는 A146에 상응하는 위치에서 천연 아미노산의 변화에 상응한다. 일부 구현예들에서, 돌연변이는 G12A, G12C, G12D, G12R, G12S, G12V, G13A, G13C, G13D, G13R, G13S, G13V, Q61E, Q61H, Q61K, Q61L, Q61P, Q61R, A146T, A146P, A146V, 또는 A146T에 상응한다.
KRas 돌연변이를 포함하는 암을 치료하는 방법이 본원에 추가로 제공되고, 상기 방법은 이러한 암을 앓는 환자에게, 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 약학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, KRas 돌연변이는 KRasG12V 돌연변이이다. 또 다른 구현예에서, 돌연변이는 공지된 KRas 돌연변이(예를 들어, pan-KRas 억제를 입증하는 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 약학적 조성물로 처리)이다.
일 구현예에서, 방법은 KRasG12V 돌연변이의 부재 또는 존재에 대해 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 투여 전에 환자로부터의 샘플(예를 들어, 본원에 제시된 바와 같은)을 시험하는 것을 추가로 포함한다. 이러한 일 구현예에서, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 약학적 조성물은 환자 샘플이 KRas 돌연변이(예를 들어 이의 존재)에 대해 양성인 것으로 결정된 후 환자에게 투여된다. 일 구현예에서, 상기 방법은 KRas 돌연변이의 부재 또는 존재에 대해 본원에 기재된 이의 약학적으로 허용가능한 염의 화합물을 투여하기 전에 환자로부터의 샘플(예를 들어, 본원에 기재된 바와 같음)을 시험하는 것을 추가로 포함하고, 여기서 환자 샘플이 상기 KRas 돌연변이에 대해 양성인 것으로 결정된 후(예를 들어, 이의 존재) 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 제약상 허용되는 염 또는 제약 조성물을 환자에게 투여한다.
본원에 기재된 암의 치료 방법은 급성 골수성 백혈병,청소년의 암, 소아 부신피질 암종, AIDS 관련 암(예를 들어 림프종 및 카포시 육종), 항문암, 충수암, 성상세포종, 비정형 기형 횡문근양 종양, 기저 세포 암종, 담관암, 방광암, 골암, 뇌간 교종, 뇌종양, 유방암, 기관지 종양, 버킷 림프종, 카르시노이드 종양, 배아 종양, 생식 세포 종양, 원발성 림프종, 자궁경부암, 소아암, 척색종, 심장 종양, 만성 림프구성 백혈병(CLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 골수증식성 장애, 결장암, 결장직장암, 두개인두종, 피부 T-세포 림프종, 간외 담관 제자리 암종(DCIS), 배아 종양, CNS 암, 자궁내막암, 뇌실막종, 식도암, 감각신경모세포종, 유잉 육종, 두개외 생식 세포 종양, 생식선외 생식 세포 종양, 눈암, 뼈의 섬유조직구종, 담낭암, 위암, 위장관 카르시노이드 종양, 위장관 기질 종양(GIST), 생식 세포 종양, 임신성 융모 종양, 털세포 백혈병, 두경부암, 심장암, 간암, 호지킨 림프종, 하인두암, 안내 흑색종, 섬 세포 종양, 췌장 신경내분비 종양, 신장암, 후두암, 구순 및 구강암, 소엽 상피내 암종(LCIS), 폐암, 림프종, 잠복 원발성이 있는 전이성 편평 목암, 정중선 암종, 구강암, 다발성 내분비 신생물 증후군, 다발성 골수종/형질 세포 신생물, 균상 식육종, 골수이형성 증후군, 골수이형성/골수증식성 신생물, 다발성 골수종, 메르켈 세포 암종, 악성 중피종, 뼈의 악성 섬유성 조직구종 및 골육종, 비강 및 부비동암, 비인두암, 신경모세포종, 비호지킨 림프종, 비소세포 폐암(NSCLC), 구강암, 구강인두암, 난소암, 췌장암, 유두종증, 부신경절종, 부갑상선암, 음경암, 인두암, 흉막폐 모세포종, 원발성 중추신경계(CNS) 림프종, 전립선암, 직장암, 이행세포암, 망막모세포종, 횡문근육종, 침샘암, 피부암, 소세포 폐암, 소장암, 연조직 육종, T-세포 림프종, 고환암, 인후암, 흉선종 및 흉선 암종, 갑상선암, 신우 및 요관의 이행세포암, 영양막 종양, 소아의 특이한 암, 요도암, 자궁육종, 질암, 외음부암, 또는 바이러스 유발 암과 같은 암의 치료에 관한 것이다.
일부 구현예들에서, 암은 혈액암, 췌장암, MYH 관련 용종증, 결장직장암 또는 폐암이다. 일 구현예에서, 암은 폐암, 결장직장암, 충수암 또는 췌장암이다. 일 구현예에서, 암은 췌장암, 폐암 또는 결장암이다. 폐암은 선암종, 비소세포 폐암(NSCLC) 또는 소세포 폐암 (SCLC)일 수 있다. 일 구현예에서, 암은 결장직장암이다. 다른 구현예에서, 암은 췌장암이다. 일 구현예에서, 암은 폐 선암종이다.
본원에 제공된 방법은 KRas의 12 위치에 상응하는 KRas 돌연변이(예를 들어, Gly12)의 부재 또는 존재에 대해 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 투여 전에 환자로부터의 샘플을 시험하는 것을 또한 포함할 수 있다. 일 구현예에서, 화합물, 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 약학적 조성물은 환자 샘플이 KRas의 12 위치에 상응하는 KRas 돌연변이(예를 들어, Gly12)의 존재를 나타낸 후 환자에게 투여된다. 일 구현예에서, 환자 샘플이 KRas의 12 위치에 상응하는 KRas 돌연변이(예를 들어, Gly12)를 포함하지 않는 한 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 투여되지 않는다.
본원에 제공된 방법은 KRasG12V 돌연변이의 부재 또는 존재에 대해 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 투여 전에 환자로부터의 샘플을 테스트하는 것을 또한 포함할 수 있다. 일 구현예에서, 화합물, 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 약학적 조성물은 환자 샘플이 KRasG12V 돌연변이의 존재를 나타낸 후 환자에게 투여된다. 일 구현예에서, 환자 샘플이 KRasG12V 돌연변이를 포함하지 않는 한 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 투여되지 않는다.
본원에 제공된 방법은 KRas 돌연변이의 부재 또는 존재에 대해 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 투여 전에 환자로부터의 샘플을 시험하는 것을 추가로 포함할 수 있고, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다. 일 구현예에서, 환자 샘플이 KRas 돌연변이의 존재를 나타낸 후에 화합물, 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 약학적 조성물이 환자에게 투여되며, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다. 일 구현예에서, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 환자 샘플이 KRas 돌연변이를 포함하지 않는 한 투여되지 않으며, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다.
일 구현예에서, 암은 췌장암, 폐암 또는 결장직장암이다. 다른 구현예에서, 췌장암, 폐암 또는 결장직장암은 KRasG12V 돌연변이를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 암은 조직 불문이지만, KRasG12V 돌연변이를 포함한다.
다른 구현예에서, 췌장암, 폐암 또는 결장직장암은 KRas 돌연변이를 포함한다. 그러한 일 구현예에서, 암은 조직 불문이지만, KRas 돌연변이를 포함한다. 그러한 구현예들에서, 암은 pan-KRas 억제를 갖는 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 본원에 기재된 바와 같이 치료될 수 있다.
그러한 폐암을 앓는 환자의 KRasG12V 돌연변이를 포함하는 폐암을 치료하는 방법이 본원에 추가로 제공되고, 상기 방법은 환자에게 유효량의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염(또는 이를 포함하는 약학적 조성물)을 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 폐암은 비소세포 폐 암종(NSCLC)이다. NSCLC은 예를 들어 선암종, 편평세포 폐 암종 또는 거대세포 폐 암종일 수 있다. 다른 구현예에서, 폐암은 소세포 폐 암종이다. 또 다른 구현예에서, 폐암은 선 종양, 카르시노이드 종양 또는 미분화 암종이다. 폐암은 1기 또는 2기 폐암일 수 있다. 일 구현예에서, 폐암은 3기 또는 4기 폐암이다. 본원에 제공된 방법은 1L 요법으로서 화합물의 투여를 포함한다.
추가로, 이러한 폐암을 갖는 환자에서 KRas 돌연변이(예를 들어, 위치 Gly12에 상응함)를 포함하는 폐암을 치료하는 방법이 본원에 제공되며, 상기 방법은 환자에게 유효량의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염(또는 이를 포함하는 약학적 조성물)을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 그의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다. 일 구현예에서, 폐암은 비소세포 폐 암종(NSCLC)이다. NSCLC은 예를 들어 선암종, 편평세포 폐 암종 또는 거대세포 폐 암종일 수 있다. 다른 구현예에서, 폐암은 소세포 폐 암종이다. 또 다른 구현예에서, 폐암은 선 종양, 카르시노이드 종양 또는 미분화 암종이다. 폐암은 1기 또는 2기 폐암일 수 있다. 일 구현예에서, 폐암은 3기 또는 4기 폐암이다. 본원에 제공된 방법은 1L 요법으로서 화합물의 투여를 포함한다.
췌장암을 앓는 환자의 KRasG12V 돌연변이를 포함하는 췌장암을 치료하는 방법이 본원에 추가로 제공되고, 상기 방법은 환자에게 유효량의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 환자는 이전에 방사선 및 하나 이상의 화학요법제로 치료를 받은 적이 있다. 일 구현예에서, 췌장암은 0기, 1기 또는 2기이다. 다른 구현예에서, 췌장암은 3기 또는 4기이다.
추가로, 이러한 췌장암을 갖는 환자에서 KRas 돌연변이(예를 들어, 위치 Gly12에 상응함)를 포함하는 췌장암을 치료하는 방법이 본원에 제공되며, 상기 방법은 환자에게 유효량의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다. 일 구현예에서, 환자는 이전에 방사선 및 하나 이상의 화학요법제로 치료를 받은 적이 있다. 일 구현예에서, 췌장암은 0기, 1기 또는 2기이다. 다른 구현예에서, 췌장암은 3기 또는 4기이다.
결장암을 앓는 환자의 KRasG12V 돌연변이를 포함하는 결장암을 치료하는 방법이 또한 본원에 추가로 제공되고, 상기 방법은 환자에게 유효량의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 결장암은 1기 또는 2기이다. 다른 구현예에서, 결장암은 3기 또는 4기이다.
추가로, 이러한 결장암을 갖는 환자에서 KRas 돌연변이(예를 들어, 위치 Gly12에 상응함)를 포함하는 결장암을 치료하는 방법이 본원에 제공되며, 상기 방법은 환자에게 유효량의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다. 일 구현예에서, 결장암은 1기 또는 2기이다. 다른 구현예에서, 결장암은 3기 또는 4기이다.
KRasG12V 돌연변이를 포함하는 조직 불문 암을 치료하는 방법이 본원에 추가로 제공된다. 이러한 방법의 일 구현예에서, 상기 방법(Ag2)은:
(a) 암으로 진단된 것으로 의심되는 환자로부터 채취한 샘플에서 KRasG12V 돌연변이의 부재 또는 존재를 결정하는 단계; 및
(b) 환자에게 유효량의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함한다.
KRas 돌연변이(예를 들어, 위치 Gly12에 상응함)를 포함하는 조직 불문 암을 치료하는 방법이 본원에 추가로 제공된다. 이러한 방법의 일 구현예에서, 상기 방법(Ag3)은:
(a) 암으로 진단된 것으로 의심되는 환자로부터 채취한 샘플에서 KRas 돌연변이의 부재 또는 존재를 결정하는 단계; 및
(b) 환자에게 유효량의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계로서, 본원에 기재된 화합물 또는 그의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 pan-KRas 억제를 갖는, 단계를 포함한다.
Ag1, Ag2, 및 Ag3의 방법의 일 구현예에서, 환자는 본원에 기재된 암으로 진단된다. Ag1, Ag2, 및 Ag3의 방법의 다른 구현예에서, 샘플은 대상체로부터 채취한 종양 샘플이다. 이러한 일 구현예에서, 샘플은 임의의 요법의 투여 전에 채취된다. 다른 이러한 구현예에서, 샘플은 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 투여 전 및 다른 화학요법제의 투여 후에 채취된다. Ag1, Ag2, 및 Ag3의 방법의 다른 구현예에서, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 본원에 제공된 바와 같이(예를 들어 경구로) 투여된다.
또한 치료적 활성 물질로서 사용하기 위한 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 본원에 제공된다. 이러한 다른 구현예에서, 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 KRasG12V 돌연변이를 포함하는 암의 치료적 치료를 위한 것일 수 있다. 이러한 또 다른 구현예에서, 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 KRas 돌연변이(예를 들어, 위치 Gly12에 상응함)를 포함하는 암의 치료적 치료를 위한 것이며, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다.
KRasG12V 돌연변이를 포함하는 암의 치료적 및/또는 예방적 치료를 위한 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 본원에 추가로 제공된다. KRas 돌연변이(예를 들어, 위치 Gly12에 상응함)를 포함하는 암의 치료적 및/또는 예방적 치료를 위한 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 또한 본원에 추가로 제공되며, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다.
일 구현예에서, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 KRasG12V 돌연변이를 포함하는 암의 치료적 치료를 위한 약제의 제조에 사용된다. 일 구현예에서, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 KRas 돌연변이(예를 들어, 위치 Gly12에 상응함)를 포함하는 암의 치료적 치료를 위한 약제의 제조에 사용되며, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다.
종양 전이를 억제하기 위한 약제의 제조에서 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 사용이 본원에 추가로 제공된다.
종양 전이를 억제하는 방법이 본원에 추가로 제공되고, 상기 방법은 종양을 갖는 환자에게 치료적 유효량의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 억제는 KRasG12V 돌연변이를 포함하는 종양의 억제이다. 일 구현예에서, 억제는 KRas 돌연변이(예를 들어, 위치 Gly12에 상응함)를 포함하는 종양이며, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다. 다른 구현예에서, 본원에 기재된 환자에서의 종양 전이 억제는 종양 크기의 감소를 발생시킨다. 다른 구현예에서, 본원에 기재된 환자에서의 종양 전이 억제는 종양 크기의 안정화(예를 들어 추가 성장 없음)을 발생시킨다. 다른 구현예에서, 본원에 기재된 환자에서의 종양 전이 억제는 암 및/또는 이의 증상의 완화를 발생시킨다.
세포 모집단의 증식을 억제하는 방법이 본원에 추가로 제공되고, 상기 방법은 세포 모집단을 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 세포 모집단은 인간 환자에 있다. 다른 구현예에서, 세포 모집단은 KRasG12V 돌연변이를 포함한다. 다른 구현예에서, 세포 모집단은 KRas 돌연변이(예를 들어, 위치 Gly12에 상응함)를 포함하고, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다.
환자에게 치료적 유효량의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 것을 포함하는, 치료를 필요로 하는 환자의 KRas를 억제하는 방법이 본원에 추가로 제공된다. 일 구현예에서, 억제된 KRas는 KRasG12V이다. 일 구현예에서, 억제된 Kras는 돌연변이 KRas 단백질(예를 들어, 위치 Gly12에 상응함)을 포함하고, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다. 다른 구현예에서, KRas 억제는 감소된 종양 크기를 발생시킨다. 다른 구현예에서, KRas 억제는 암 및/또는 이의 증상의 완화를 발생시킨다.
KRas 돌연변이 단백질의 활성을 조절하는 방법이 본원에 추가로 제공되고, 상기 방법은 돌연변이 단백질을 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 반응시키는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 돌연변이 단백질은 KRasG12V 돌연변이를 포함한다. 일 구현예에서, 돌연변이 단백질은 KRas 돌연변이를 포함하고, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다. 일 구현예에서, KRas의 활성은 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉한 후 감소된다. 다른 구현예에서, KRas 돌연변이 단백질의 활성의 하향조절은 본원에 기재된 환자에서 본원에 기재된 암을 치료한다. 다른 구현예에서, KRas 돌연변이 단백질의 활성의 하향조절은 감소된 종양 크기를 야기한다. 다른 구현예에서, KRas 돌연변이 단백질의 활성의 하향조절은 본원에 기재된 암 및/또는 이의 증상의 완화를 야기한다.
일부 구현예들에서, 본원에 제공된 방법은 세포를 상기 세포에서 KRasG12V의 활성을 억제하기에 충분한 양의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉시켜 세포에서 KRasG12V 활성을 억제하는 것을 포함한다. 일부 구현예들에서, 본원에 제공된 방법은 조직을 상기 조직에서 KRasG12V의 활성을 억제하기에 충분한 양의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉시켜 조직에서 KRasG12V 활성을 억제하는 것을 포함한다. 일부 구현예들에서, 본원에 제공된 방법은 환자를 상기 환자에서 KRasG12V의 활성을 억제하기에 충분한 양의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉시켜 본원에 기재된 환자에서 KRasG12V 활성을 억제하는 것을 포함한다.
일부 구현예들에서, 본원에 제공된 방법은 세포를 상기 세포에서 돌연변이 KRas(예를 들어, Gly12에서의 돌연변이)의 활성을 억제하기에 충분한 양의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉시켜 세포에서 돌연변이 KRas(예를 들어, Gly12에서의 돌연변이) 활성을 억제하는 것을 포함한다. 일부 구현예들에서, 본원에 제공된 방법은 조직을 상기 조직에서 돌연변이 KRas(예를 들어, Gly12에서의 돌연변이)의 활성을 억제하기에 충분한 양의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉시켜 조직에서 돌연변이 KRas(예를 들어, Gly12에서의 돌연변이) 활성을 억제하는 것을 포함한다. 일부 구현예들에서, 본원에 제공된 방법은 환자를 상기 환자에서 돌연변이 KRas(예를 들어, Gly12에서의 돌연변이)의 활성을 억제하기에 충분한 양의 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉시켜 환자에서 돌연변이 KRas(예를 들어, Gly12에서의 돌연변이) 활성을 억제하는 것을 포함한다. 이러한 구현예들에서, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는 것으로 이해된다.
표지된 KRasG12V 돌연변이 단백질을 제조하는 방법이 본원에 추가로 제공되고, 상기 방법은 KRasG12V 돌연변이 단백질을 표지된 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 반응시켜 표지된 KRasG12V 돌연변이 단백질을 생성하는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 표지는 조영제이다. 일 구현예에서, 표지된 KRasG12V는 환자 샘플에서 KRasG12V 돌연변이 단백질의 부재 또는 존재를 검출하기 위해 사용될 수 있고, 이로써 돌연변이 KRas에 의해 매개되는 암의 존재 또는 부재를 검출할 수 있다.
표지된 KRas 돌연변이 단백질(예를 들어, Gly12에서의 돌연변이)을 제조하는 방법이 본원에 추가로 제공되며, 여기서 KRas 돌연변이 단백질을 본원에 기재된 표지된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 반응시키는 것을 포함하며, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염이 pan-KRas 억제를 가져 표지된 KRas 돌연변이체 단백질을 생성시키는 것을 포함한다. 일 구현예에서, 표지는 조영제이다. 일 구현예에서, 표지된 돌연변이 KRas 단백질은 환자 샘플에서 돌연변이 KRas의 부재 또는 존재를 검출하기 위해 사용될 수 있고, 이로써 돌연변이 KRas에 의해 매개되는 암의 존재 또는 부재를 검출할 수 있다.
Ras-매개 세포 신호전달을 억제하는 방법이 본원에 추가로 제공된다. 일 구현예에서, 방법은 세포를 유효량의 하나 이상의 화합물 또는 본원에 개시된 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉시키는 것을 포함한다. Ras-매개 신호 전달의 억제는 당업계에 공지된 다양한 방법에 의해 평가되고 증명될 수 있다. 비제한적 예는 (a) Ras의 GTPase 활성 감소; (b) GTP 결합 친화도의 감소 또는 GDP 결합 친화도의 증가; (c) GTP의 K off 증가 또는 GDP의 K off 감소; (d) Ras 경로에서 하류의 신호 전달 분자의 수준 감소, 예컨대 pMEK 수준의 감소; 및/또는 (e) Raf을 포함하지만 이에 제한되지 않는 하류 신호전달 분자에 대한 Ras 복합체의 결합 감소를 나타내는 것을 포함한다. 키트 및 상업적으로 이용 가능한 검정은 상기 중 하나 이상을 결정하는 데 사용될 수 있다.
KRas 돌연변이는 혈액 악성종양(예를 들어, 혈액, 골수 및/또는 림프절에 영향을 미치는 암)에서도 확인되었다. 따라서, 특정 구현예들은 본원에 기재된 바와 같은 개시된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염(예를 들어 약학적 조성물 형태)을 혈액 악성종양의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것에 관한 것이다. 이러한 악성 종양은 백혈병 및 림프종을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 예를 들어, 현재 개시된 화합물은 급성 림프모구성 백혈병(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 소림프구성 림프종(SLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 급성 단핵구 백혈병(AMoL) 및/또는 다른 백혈병과 같은 질병의 치료에 사용될 수 있다. 다른 구현예들에서, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 호지킨 림프종 또는 비호지킨 림프종의 모든 아형과 같은 림프종의 치료에 유용하다.
종양 또는 암이 본원에 기재된 KRas 돌연변이를 포함하는지 여부 결정은 KRas 단백질을 인코딩하는 뉴클레오티드 서열을 평가하거나, KRas 단백질의 아미노산 서열을 평가하거나, 추정상의 KRas 돌연변이 단백질의 특징을 평가하여 착수될 수 있다. 야생형 인간 KRas의 서열(예를 들어 수탁 번호 NP203524)가 당업계에 공지되어 있다.
KRas 뉴클레오티드 서열에서 돌연변이를 검출하는 방법은 당업자에게 공지되어 있다. 이러한 방법은 중합효소 연쇄 반응-제한 단편 길이 다형성(PCR-RFLP) 검정, 중합효소 연쇄 반응-단일 가닥 형태 다형성(PCR-SSCP) 검정, 실시간 PCR 검정, PCR 시퀀싱, 돌연변이 대립 유전자 특이적 PCR 증폭(MASA) 검정, 직접 시퀀싱, 프라이머 확장 반응, 전기영동, 올리고뉴클레오티드 결찰 검정, 혼성화 검정, TaqMan 검정, SNP 유전형 검정, 고해상도 용융 검정 및 마이크로어레이 분석을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 일부 구현예들에서, 샘플은 실시간 PCR에 의해 본원에 기재된 KRas 돌연변이에 대해 평가된다. 실시간 PCR에서, KRas 돌연변이에 특이적인 형광 프로브가 사용된다. 돌연변이가 존재하는 경우, 프로브가 결합하고 형광이 검출된다. 일부 구현예들에서, KRas 돌연변이는 KRas 유전자에서 특정 영역(예를 들어, 엑손 2 및/또는 엑손 3)의 직접 서열분석 방법을 사용하여 확인된다. 이 기술은 서열분석된 영역에서 가능한 모든 돌연변이를 식별할 것이다.
종양 또는 암이 KRas 돌연변이를 포함하는지 여부를 결정하는 방법은 다양한 샘플을 사용할 수 있다. 일부 구현예들에서, 샘플은 종양 또는 암을 갖는 대상으로부터 채취된다. 일부 구현예들에서, 샘플은 새로운 종양/암 샘플이다. 일부 구현예들에서, 샘플은 동결된 종양/암 샘플이다. 일부 구현예들에서, 샘플은 포르말린 고정 파라핀 포매 샘플이다. 일부 구현예들에서, 샘플은 세포 용해물로 가공된다. 일부 구현예들에서, 샘플은 DNA 또는 RNA로 가공된다.
암 치료를 위한 약제의 제조에서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 사용이 본원에 추가로 제공된다. 일부 구현예들에서, 약제는 경구 투여를 위해 제형화된다. 일부 구현예들에서, 약제는 경구 투여를 위해 제형화된다. 일부 구현예들에서, 암은 KRasG12V 돌연변이를 포함한다. 일부 구현예들에서, 암은 KRas 돌연변이(예를 들어, 위치 Gly12에 상응함)를 포함하고, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다. 일부 구현예들에서, 암은 혈액암, 췌장암, MYH 관련 용종증, 결장직장암 또는 폐암이다. 일 구현예에서, 암은 폐암, 결장직장암 또는 췌장암이다. 일 구현예에서, 암은 결장직장암이다. 다른 구현예에서, 암은 췌장암이다. 일부 구현예들에서, 암은 폐 선암종이다. 일부 구현예들에서, 종양 전이를 억제하기 위한 약제의 제조에서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 사용이다.
암 치료 방법에서 사용하기 위한, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 본원에 추가로 제공된다. 일 구현예에서, 암은 KRasG12V 돌연변이를 포함한다. 일 구현예에서, 암은 KRas 돌연변이(예를 들어, Gly12에서의 돌연변이)를 포함하며, 여기서 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 pan-KRas 억제를 갖는다. 이러한 일 구현예에서, 암은 혈액암, 췌장암, MYH 관련 용종증, 결장직장암 또는 폐암이다. 이러한 일 구현예에서, 암은 폐암, 결장직장암 또는 췌장암이다. 이러한 일 구현예에서, 암은 결장직장암이다. 이러한 일 구현예에서, 암은 췌장암이다. 이러한 일 구현예에서, 암은 폐 선암종이다.
병용 요법
본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 본원에 기재된 질병 또는 장애의 치료를 위해 단독으로 또는 다른 치료제와 조합으로 사용될 수 있다. 약학적 복합 제형 또는 투약 요법의 제2 화합물은 바람직하게는 서로 불리하게 영향을 미치지 않도록 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 대해 상보적인 활성을 갖는다. 병용 요법은 "상승작용"을 제공하고 "상승적", 즉 활성 성분을 함께 사용할 때 달성되는 효과가 화합물을 개별적으로 사용하여 발생하는 효과의 합보다 더 크다는 것이 입증될 수 있다.
병용 요법은 동시적 또는 순차적 요법으로서 투여될 수 있다. 순차적으로 투여될 때, 병용은 2회 그 이상의 투여로 투여될 수 있다. 병용 투여는 별개의 제형 또는 단일 약학적 제형을 사용하는 공동투여, 그리고 어느 순서의 연속 투여를 포함하며, 여기서 바람직하게는 두 가지(또는 모든) 활성제가 생물학적 활성을 동시에 발휘하는 기간이 존재한다.
본원의 병용 요법은 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 투여, 및 적어도 하나의 다른 치료 방법의 사용을 포함한다. 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 및 다른 약학적 활성제(들)의 양 및 상대적인 투여 시기는 원하는 조합된 치료 효과를 달성하기 위해 선택될 것이다.
방법의 다양한 구현예들에서, 추가 치료제는 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 억제제, 포스파티딜이노시톨 키나아제(PI3K) 억제제, 인슐린 유사 성장 인자 수용체(IGF1R) 억제제, 야누스 키나아제(JAK) 억제제, Met 키나아제 억제제, SRC 패밀리 키나아제 억제제, 미토겐-활성화 단백질 키나아제(MEK) 억제제, 세포외 신호 조절 키나아제(ERK) 억제제, 토포이소머라아제 억제제(예컨대 이리노테칸, 또는 예컨대 에토포시드, 또는 예컨대 독소루비신), 탁산(예컨대 파클리탁셀 및 도세탁셀을 포함하는 항미세소관제), 항대사제(예컨대 5-FU 또는 예컨대 젬시타빈), 또는 알킬화제(예컨대 시스플라틴 또는 예컨대 시클로포스파미드), 또는 탁산이다.
일부 구현예들에서, 추가 치료제는 에를로티닙 또는 아파티닙과 같은 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 억제제이다. 일부 구현예들에서 추가 치료제는 제피티닙, 오시머티닙 또는 다코미티닙이다. 일부 구현예들에서 추가 치료제는 세툭시맙(에르비툭스) 또는 파니투무맙(벡티빅스)과 같은 단일클론 항체이다. 일부 구현예들에서 EGFR 억제제는 이중 또는 범-HER 억제제이다. 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 GDC-0077, GDC-0941, MLN1117, BYL719(알펠리십) 또는 KM120(부팔리십)과 같은 포스파티딜이노시톨-3-키나아제(PI3K) 억제제이다. GDC-0941은 2-(1H-인다졸-4-일)-6-(4- 메탄설포닐-피페라진-1-일메틸)-4-모르폴린-4-일-티에노[3,2-d]피리미딘 또는 이의 염(예를 들어, 비스메실레이트 염)을 지칭한다.
또 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 인슐린 유사 성장 인자 수용체(IGF1R) 억제제이다. 예를 들어, 일부 구현예들에서 인슐린 유사 성장 인자 수용체(IGF1R) 억제제는 AEW541이다. 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 IGOSI-906(린시티닙), BMS-754807이고, 또는 다른 구현예들에서 추가 치료제는 AMG-479(가니투맙), CP-751,871(피기투무맙), IMC-A12(식수투무맙), MK-0646(달로투주맙), 또는 R-1507(로바투무맙)과 같은 IGF1R에 특이적인 중화 단일클론 항체이다.
일부 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 야누스 키나아제(JAK) 억제제이다. 일부 구현예들에서, 추가 치료제는 CYT387, GLPG0634, 바리시티닙, 레스타우르티닙, 모멜로티닙, 파크리티닙, 룩솔리티닙 또는 TG101348이다.
일부 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 항-글리피칸 3 항체이다. 일부 구현예들에서, 항-글리피칸 3 항체는 코드리투주맙이다.
일부 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 항체 약물 접합체(ADC)이다. 일부 구현예들에서, ADC는 폴라투주맙 베도틴, RG7986, RG7882, RG6109 또는 RO7172369이다.
일부 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 MDM2 길항제이다. 일부 구현예들에서, MDM2 길항제는 이다사누틀린이다.
일부 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 CD40에 대한 작용 항체이다. 일부 구현예들에서, CD40에 대한 작용 항체는 셀리크렐루맙(RG7876)이다.
일부 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 이중특이적 항체이다. 일부 구현예들에서, 이중특이적 항체는 RG7828(BTCT4465A), RG7802, RG7386(FAP-DR5), RG6160, RG6026, ERY974, 또는 항-HER2/CD3이다.
일부 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 표적화된 면역사이토카인이다. 일부 구현예들에서, 표적화된 면역사이토카인은 RG7813 또는 RG7461이다.
일부 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 콜로니 자극 인자-1 수용체(CSF-1R)를 표적으로 하는 항체이다. 일부 구현예들에서, CSF-1R 항체는 에막투주맙이다.
일부 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 맞춤형 암 백신이다. 일부 구현예들에서, 맞춤형 암 백신은 RG6180이다.
일부 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 BET(브로모도메인 및 가외말단 패밀리) 단백질(BRD2/3/4/T)의 억제제이다. 일부 구현예들에서, BET 억제제는 RG6146이다.
일부 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 TIGIT에 결합하도록 설계된 항체이다. 일부 구현예들에서, 항-TIGIT 항체는 RG6058(MTIG7192A)이다.
일부 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 선택적 에스트로겐 수용체 분해제(SERD)이다. 일부 다른 구현예들에서, SERD는 RG6047(GDC-0927) 또는 RG6171(GDC-9545, 지레데스트란트)이다.
일부 다른 구현예들에서 추가 치료제는 크리조티닙, 티반티닙, AMG337, 카보잔티닙 또는 포레티닙과 같은 MET 키나아제 억제제이다. 다른 구현예들에서 추가 치료제는 오나르투주맙과 같은 MET에 대한 중화 단일클론 항체이다.
더 많은 구현예들에서, 추가 치료제는 SRC 패밀리 비-수용체 티로신 키나아제 억제제이다. 예를 들어, 일부 구현예들에서 추가 치료제는 SRC 패밀리 비-수용체 티로신 키나아제의 서브패밀리의 억제제이다. 이와 관련하여 예시적인 억제제는 다사티닙을 포함한다. 이와 관련하여 다른 예는 포나티닙, 사라카티닙 및 보수티닙을 포함한다.
또 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 미토겐-활성화 단백질 키나아제(MEK) 억제제이다. 이들 구현예들 중 일부에서, 미토겐 활성 단백질 키나아제(MEK) 억제제는 트라메티닙, 셀루메티닙, COTELLIC®(코비메티닙), PD0325901 또는 RO5126766이다. 다른 구현예들에서 MEK 억제제는 트라메티닙으로도 알려진 GSK-1120212이다.
또 다른 구현예들에서, 추가 치료제는 세포외 신호 조절 키나아제(ERK) 억제제이다. 이들 구현예들 중 일부에서, 미토겐 활성 단백질 키나아제(MEK) 억제제는 SCH722984 또는 GDC-0994이다.
다른 구현예들에서 단백질 키나아제 억제제는 타셀리십, 이파타세르팁, GDC-0575, GDC-5573(HM95573), RG6114(GDC-0077), CKI27, 아파티닙, 악시티닙, 아테놀리주맙, 베바시주맙, 보스투티닙, 세툭시맙, 크리조티닙, 다사티닙, 에를로티닙, 포스타마티닙, 제피티닙, 이마티닙, 라파티닙, 렌바티닙, 이브루티닙, 닐로티닙, 파니투무맙, 파조파닙, 페갑타닙, 라니비주맙, 룩솔리티닙, 소라페닙, 수니티닙, SU6656, 트라스투주맙, 노파시티닙, 반데타닙 또는 베무라페닙이다. 더 많은 구현예들에서, 추가 치료제는 토포이소머라아제 억제제이다. 이들 구현예들 중 일부에서, 토포이소머라아제 억제제는 이리노테칸이다. 일부 추가 구현예들에서, 추가 치료제는 탁산이다. 예시적인 탁산은 탁솔 및 도세탁셀을 포함한다.
상기 추가제 이외에도, 다른 화학요법제가 현재 당업계에 공지되어 있고 본원에 기재된 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염과 조합으로 사용될 수 있다. 일부 구현예들에서, 화학요법제는 유사분열 억제제, 알킬화제, 항대사제, 인터칼레이팅 항생제, 성장 인자 억제제, 세포 주기 억제제, 효소, 토포이소머라아제 억제제, 생물학적 반응 조절제, 항호르몬, 혈관신생 억제제 및 항안드로겐으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
비제한적인 예는 화학요법제, 세포독성제 및 비펩티드 소분자, 예컨대 글리벡®(이마트닙 메실레이트), 벨카데®(보르테조밉), 카소덱스(비칼루타미드), 이레사®(제피티닙) 및 아드리아마이신뿐만 아니라 화학요법제의 호스트이다. 화학요법제의 비제한적 예는 티오테파 및 시클로포스파미드(CYTOXAN™)와 같은 알킬화제; 부설판, 임프로설판 및 피포설판과 같은 알킬 설포네이트; 벤조도파, 카르보쿠온, 메투레도파 및 우레도파와 같은 아지리딘; 알트레타민, 트리에틸렌멜라민, 트리에틸렌포스포라미드, 트리에틸렌티오포스파오라미드 및 트리메틸올 멜라민을 포함하는 에틸렌이민 및 메틸 멜라민; 클로람부실, 클로르나파진, 시클로포스파미드, 에스트라무스틴, 이포스파미드, 메클로레타민, 메클로레타민 옥사이드 히드로클로라이드, 멜팔란, 노벰비친, 페네스테린, 프레드니무스틴, 트로포스파미드, 우라실 머스타드와 같은 질소 머스타드; 카르무스틴, 클로로조토신, 포테무스틴, 로무스틴, 니무스틴, 라니무스틴과 같은 니트로소우레아; 아클라시노마이신, 악티노마이신, 아우트라마이신, 아자세린, 블레오마이신, 칵티노마이신, 칼리케아미신, 카라비신, 카르미노마이신, 카르지노필린, Casodex™, 크로모마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-디아조-5-옥소- L-노르류신, 독소루비신, 에피루비신, 에소루비신, 이다루비신, 마르셀로마이신, 미토마이신, 미코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 페플로마이신, 포트피로마이신, 푸로마이신, 쿠엘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 투베르시딘, 우베니멕스, 지노스타틴, 조루비신과 같은 항생제; 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실(5-FU)과 같은 항대사물질; 데놉테린, 메토트렉세이트, 프테롭테린, 트리메트렉세이트와 같은 엽산 유사체; 플루다라빈, 6-메르캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌과 같은 퓨린 유사체; 안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카르모푸르, 시타라빈, 디데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 플록수리딘과 같은 피리미딘 유사체, 칼루스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토락톤과 같은 안드로겐; 아미노글루테티미드, 미토탄, 트릴로스탄과 같은 항부신제; 프롤린산과 같은 엽산 보충제; 아세글라톤; 알도포스파미드 글리코시드; 아미노레불린산; 암사크린; 베스트라부실; 비산트렌; 에다트락세이트; 데포파민; 데메콜신; 디아지쿠온; 엘포미틴; 엘립티늄 아세테이트; 에토글루시드; 갈륨 니트레이트; 히드록시우레아; 렌티난; 로니다민; 미토구아존; 미톡산트론; 모피다몰; 니트라크린; 펜토스타틴; 페나메트; 피라루비신; 포도필린산; 2-에틸히드라지드; 프로카르바진; 폴리사카라이드 K; 라족산; 시조피란; 스피로게르마늄; 테누아존산; 트리아지쿠온; 2,2',2''-트리클로로트리에틸아민; 우레탄; 빈데신; 다카르바진; 만노무스틴; 미토브로니톨; 미토락톨; 피포브로만; 가시토신; 아라비노시드("Ara-C"); 시클로포스파미드; 티오테파; 탁산, 예를 들어 파클리탁셀(TAXOLTM, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.) 및 도세탁셀(TAXOTERETM, Rhone-Poulenc Rorer, Antony, France); 레티노산; 에스페라미신; 카페시타빈; 및 상기 중 임의의 것의 약학적으로 허용가능한 염, 산 또는 유도체를 포함한다. 또한 적합한 화학요법 세포 조정제로서 포함되는 것은, 예를 들어 타목시펜, (놀바덱스™), 랄록시펜, 아로마타제 억제 4(5)-이미다졸, 4-히드록시타목시펜, 트리옥시펜, 케옥시펜, LY 117018, 오나프리스톤 및 토레미펜(파레스톤)을 포함하는 항에스트로겐; 플루타미드, 닐루타미드, 비칼루타미드, 류프롤리드 및 고세렐린과 같은 항안드로겐과 같은 종양에 대한 호르몬 작용을 조절하거나 억제하는 작용을 하는 항호르몬제; 클로람부실; 젬시타빈; 6-티오구아닌; 메르캅토퓨린; 메토트렉세이트; 시스플라틴 및 카르보플라틴과 같은 백금 유사체; 빈블라스틴; 백금; 에토포시드(VP-16); 이포스파미드; 미토마이신 C; 미톡산트론; 빈크리스틴; 비노렐빈; 나벨빈; 노반트론; 테니포시드; 다우노마이신; 아미노프테린; 젤로다®; 이반드로네이트; 캄프토테신n-11 (CPT-11); 토포이소머라아제 억제제 RFS 2000; 및 디플루오로메틸오르니틴(DMFO)이다. 필요한 경우, 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 약학적 조성물은 일반적으로 처방되는 항암제, 예컨대 헤르셉틴®, 아바스틴®, 가지바®, 테센트릭®, 알레센사®, 페르제타®, 벤클렉스타™, 에르비툭스®, 리툭산®, 탁솔®, 아리미덱스®, 탁소테레®, ABVD, 아비신, 아바고보맙, 아크리딘 카르복사미드, 아데카투무맙, 17-N-알릴아미노-17-데메톡시겔다나마이신, 알파라딘, 알보시딥, 3-아미노피리딘-2-카르복스알데히드 티오세미카르바존, 아모나피드, 안트라세네디온, 항-CD22 면역독소, 항신생물제, 항종양형성 약초, 아파지쿠온, 아티프리모드, 아자티오프린, 벨로테칸, 벤다무스틴, BIBW 2992, 비리코다르, 브로스탈리신, 브리오스타틴, 부티오닌 설폭시민, CBV (화학요법), 칼리쿨린, 세포 주기 비특이적 항신생물제, 디클로로아세트산, 디스코데르몰리드, 엘사미트루신, 에노시타빈, 에포틸론, 에리불린, 에베롤리무스, 엑사테칸, 엑시술린드, 페루지놀, 포로데신, 포스페스트롤, ICE 화학 요법, IT-101, 이멕손, 이미퀴모드, 인돌로카르바졸, 이로풀벤, 라니퀴다르, 라로탁셀, 레날리도미드, 루칸톤, 루르토테칸, 마포스파미드, 미토졸로미드, 나폭시딘, 네다플라틴, 올라파립, 오르타탁셀, PAC-1, 포포, 픽산트론, 프로테아솜 억제제, 레베카마이신, 레시퀴모드, 루비테칸, SN-38, 살리노스포라미드 A, 사파시타빈, 스탄포드 V, 스와인소닌, 탈라포르핀, 타리퀴다르, 테가푸르-우라실, 테모다르, 테세탁셀, 트리플라틴 테트라니트레이트, 트리스(2-클로로에틸)아민, 트록사시타빈, 우라무스틴, 바디메잔, 빈플루닌, ZD6126 또는 조수퀴다르와 병용으로 사용될 수 있다.
화합물 및 추가 치료제를 투여하는 정확한 방법은 당업자에게 명백할 것이다. 일부 예시적인 구현예들에서 화합물 및 추가 치료제는 공동 투여된다. 다른 구현예들에서, 화합물 및 추가 치료제는 별도로 투여된다.
일부 구현예들에서, 화합물 및 추가 치료제는 제2 제제와 함께 동시에 또는 별도로 투여된다. 이러한 병용 투여는 동일한 투여 형태 중의 두 제제의 동시 투여, 별도의 투여 형태의 동시 투여 및 별도의 투여를 포함할 수 있다. 즉, 본원에 기재된 화합물 및 임의의 추가 치료제는 동일한 투여 형태로 함께 제형화되고 동시에 투여될 수 있다. 대안적으로, 본원에 기재된 화합물 및 임의의 추가 치료제는 동시에 투여될 수 있고, 여기서 두 제제는 별도의 제형으로 존재한다. 또 다른 대안에서, 화합물은 본원에 기재된 임의의 추가 치료제 직후에 투여될 수 있거나, 그 반대일 수 있다. 별도의 투여 프로토콜의 일부 구현예들에서, 본원에 기재된 화합물 및 임의의 추가 치료제는 몇 분 간격 또는 몇 시간 간격 또는 며칠 간격으로 투여된다.
제조 물품
본원에 제공된 암의 치료에 유용한 물질을 포함하는 제조 물품 또는 "키트"가 또한 본원에 제공된다. 일 구현예에서, 키트는 본원에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 용기를 포함한다. 키트는 용기 상에 또는 용기와 결합된 라벨 또는 패키지 삽입물을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 용기로는, 예를 들어, 병, 바이알, 주사기, 블리스터 팩 등이 포함된다. 상기 용기는 유리 또는 플라스틱과 같은 다양한 재료로 형성될 수 있다. 용기는 병태를 치료하는 데 효과적인 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이의 제형을 수용할 수 있고 멸균 접근 포트를 가질 수 있다 (예를 들어 용기는 피하 주사 바늘로 뚫을 수 있는 마개를 갖는 정맥내 용액 백 또는 바이알일 수 있다). 조성물 중 적어도 하나의 활성제는 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다. 대안적으로 또는 추가적으로, 제조 물품은 주사용 정균수(BWFI), 인산염 완충 식염수, 링거액 또는 덱스트로스 용액과 같은 약학적 희석제가 들어 있는 제2 용기를 추가로 포함할 수 있다. 다른 완충액, 희석제, 필터, 바늘 및 주사기를 포함하는 상업적 및 사용자 관점에서 바람직한 다른 물질들을 더 포함할 수 있다.
다른 구현예에서, 키트는 본원에 기재된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 고체 경구 형태, 예컨대 정제 또는 캡슐의 전달에 적합하다. 이러한 키트는 다수의 단위 투여를 포함할 수 있다. 이러한 키트의 예는 "블리스터 팩"이다. 블리스터 팩은 포장 산업에서 일반적으로 공지되어 있으며 약학적 단위 투여 형태를 포장하는 데 널리 사용된다.
구현예
구현예 1: 화학식 (I)을 갖는 화합물:
(I),
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염으로서,
여기서;
X는 NR13, O, C(Rx)2, C(O), SO, SO2, 또는 S이고;
u는 1 또는 2이고;
각 RX는 독립적으로 수소, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬이거나;
또는 여기서 2개의 Rx는 함께 이들이 결합된 탄소와 함께 시클로프로필을 형성하고;
R1은 R7-치환 또는 비치환 인돌릴, R7-치환 또는 비치환 벤조푸라닐, R7-치환 또는 비치환 나프틸, R7-치환 또는 비치환 인다졸릴, R7-치환 또는 비치환 인데닐, R7-치환 또는 비치환 벤조티아졸릴, R7A-치환 또는 비치환 페닐, 또는 R7A-치환 또는 비치환 피리디닐이고;
각 R7은 독립적으로 수소, 할로겐, CN, CH2OH, -OH, NH2, N(Me)2, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C2-5 알키닐, 비치환 C1-3 할로알킬, 또는 비치환 시클로프로필이고;
각 R7A는 독립적으로 수소, 할로겐, NH2, N(Me)2, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 또는 비치환 시클로프로필이고;
R2는 수소, O-L1-R8, R8A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, 또는 R8B-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이고;
L1은 결합 또는 RL1-치환 또는 비치환 C1-3 알킬렌이고;
RL1은 할로겐 또는 비치환 C1-3 알킬이고;
R8은 N, S, 또는 O을 포함하는 R9-치환 또는 비치환 4-10 원 헤테로사이클이고;
각 R9는 독립적으로 할로겐, 옥소, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C1-3 알콕시, R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴, 또는 R10-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 R10-치환 또는 비치환 3 또는 4-원 헤테로사이클이거나;
또는 여기서 2개의 R9는 함께 C3-5 시클로알킬 또는 3-5원 헤테로사이클을 형성하고;
R10은 수소 또는 할로겐이고;
각 R8A는 독립적으로 R9A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R9A-치환 또는 비치환 C1-3 알콕시, R9A-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 R9A-치환 또는 비치환 4-6 원 헤테로사이클이고;
각 R9A는 독립적으로 할로겐, 옥소, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C1-3 알콕시, 비치환 C1-3 알킬리덴, R9-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 N, S 또는 O를 포함하는 R9-치환 또는 비치환 4-10 원 헤테로사이클이고;
R8B는 독립적으로 할로겐, 옥소, -NH2, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C1-3 알콕시 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이고;
R3 및 R4는 각각 독립적으로 수소, -CN, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 시클로프로필이고;
R5는 R5A-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R5A-치환 또는 비치환 C1-6 할로알킬, R5A-치환 또는 비치환 C3-10 시클로알킬, R5A-치환 또는 비치환 3-10원 헤테로사이클, 또는 R5A-치환 또는 비치환 5-10원 헤테로아릴이고;
각 R5A는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, OR11, SR12, SO2R12, NR13R14, C(O)N(R11)2, C(O)R11, R5B-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R5B-치환 또는 비치환 C1-6 할로알킬, R5B-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R5B-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R5B-치환 또는 비치환 C5-8 아릴, 또는 R5B-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이거나;
또는 여기서 2개의 R5A는 함께 C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로사이클을 형성하고;
각 R5B는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, OR11, NR13R14, SR12, SO2R12, C(O)N(R11)2, C(O)R11, R5C-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R5C-치환 또는 비치환 C1-3 할로알킬, R5C-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R5C-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R5C-치환 또는 비치환 페닐, 또는 R5C-치환 또는 비치환 5-6원 헤테로아릴이거나;
또는 여기서 2개의 R5B는 함께 C3-4 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로사이클을 형성하고;
각 R5C는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, C(O)CH3, C(O)NH2, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NR13R14, SCH3, SO2NH2, SO2CH3, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 비치환 3-4원 헤테로사이클이고;
각 R11은 독립적으로 수소, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 비치환 3-4원 헤테로사이클이고;
각 R12는 독립적으로 NH2 또는 비치환 C1-3 알킬이고;
각 R13 및 R14는 독립적으로 수소, C(O)R11, C(O)N(R11)2, R15-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R15-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, 또는 R15-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클이고;
각 R15는 할로겐, CN, C(O)CH3, C(O)NH2, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3, R16-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R16-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R16-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R16-치환 또는 비치환 5-9원 아릴, 또는 R16-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이고;
각 R16는 독립적으로 할로겐, CN, C(O)CH3, C(O)NH2, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3, R17-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R17-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R17-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R17-치환 또는 비치환 5-9원 아릴, 또는 R17-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이고;
각 R17은 독립적으로 할로겐, CN, C(O)CH3, C(O)NH2, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3, 또는 비치환 C1-3 알킬이고;
R6 및 R6A는 독립적으로 수소, 할로겐, NR13R14, 또는 R6B-치환 또는 비치환 C1-6 알킬이며; 그리고
R6B는 할로겐, CN, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, 또는 비치환 C1-3 알킬인, 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
구현예 2: 구현예 1에 있어서,
R1은 R7A-치환 또는 비치환 페닐, R7-치환 또는 비치환 인다졸릴, 또는 R7A-치환 또는 비치환 피리디닐인, 화합물.
구현예 3: 구현예 1에 있어서,
R1은 R7A-치환 또는 비치환 페닐인, 화합물.
구현예 4: 구현예 1에 있어서,
R1은 R7-치환 또는 비치환 인다졸릴인, 화합물.
구현예 5: 구현예 1에 있어서,
R1은 R7A-치환 또는 비치환 피리디닐인, 화합물.
구현예 6: 구현예 1 내지 구현예 5 중 어느 한 구현예에 있어서,
각 R7A는 독립적으로 할로겐, NH2, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬인, 화합물.
구현예 7: 구현예 1 또는 구현예 2에 있어서,
R1은
이고,
여기서,
X1은 N, CH 또는 CF이며; 그리고
R7A는 수소, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬인, 화합물.
구현예 8: 구현예 1, 구현예 2, 구현예 5 또는 구현예 7 중 어느 한 구현예에 있어서,
R1은
인, 화합물.
구현예 9: 구현예 1, 구현예 2, 구현예 5, 구현예 7 또는 구현예 8 중 어느 한 구현예에 있어서,
R1은
또는 인, 화합물.
구현예 10: 구현예 1 내지 구현예 3, 또는 구현예 7 중 어느 한 구현예에 있어서,
R1은
이고,
여기서 R7A는 수소, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬인, 화합물.
구현예 11: 구현예 1 내지 구현예 4, 구현예 8 또는 구현예 11 중 어느 한 구현예에 있어서,
R1은
인, 화합물.
구현예 12: 구현예 1에 있어서,
R1은
또는 이고,
여기서 각 R7은 독립적으로 할로겐, NH2, N(Me)2, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬인, 화합물.
구현예 13: 구현예 1 내지 구현예 12 중 어느 한 구현예에 있어서,
R2는 O-L1-R8, R8A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, 또는 R8B-치환 또는 비치환 4-6원 헤테로사이클인, 화합물.
구현예 14: 구현예 1 내지 구현예 13 중 어느 한 구현예에 있어서,
R2는 O-L1-R8인, 화합물.
구현예 15: 구현예 13 또는 구현예 14에 있어서,
L1는 비치환 C1-3 알킬렌인, 화합물.
구현예 16: 구현예 13 내지 구현예 15 중 어느 한 구현예에 있어서,
R8은 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 4-10원 헤테로사이클인, 화합물.
구현예 17: 구현예 13 내지 구현예 16 중 어느 한 구현예에 있어서,
R8은
이고,
여기서,
R9는 할로겐 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이고;
r은 0-12의 정수이고;
j는 1, 2 또는 3이며; 그리고
k는 1 또는 2인, 화합물.
구현예 18: 구현예 17에 있어서,
r은 0, 1, 2 또는 3인, 화합물.
구현예 19: 구현예 13 내지 구현예 18 중 어느 한 구현예에 있어서,
R8은
, , 또는 이고,
여기서,
R9는 독립적으로 할로겐 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이고;
각 R10은 독립적으로 수소 또는 할로겐이며; 그리고
r은 1 또는 2인, 화합물.
구현예 20: 구현예 13 내지 구현예 16 중 어느 한 구현예에 있어서,
R8은
이고,
여기서,
R9는 독립적으로 할로겐, 옥소, 또는 비치환 C1-3 알킬이거나;
또는 여기서 2개의 R9는 함께 C3-5 시클로알킬 또는 3-5원 헤테로사이클을 형성하며; 그리고
r은 1 또는 2인, 화합물.
구현예 21: 구현예 13 내지 구현예 16 중 어느 한 구현예에 있어서,
R8은
이고,
여기서
R9는 수소 또는 비치환 C1-3 알킬이고;
W는 O, SO2 또는 NR12이며; 그리고
R12는 수소, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬인, 화합물.
구현예 22: 구현예 13 내지 구현예 16 또는 구현예 21 중 어느 한 구현예에 있어서,
R8은 아제티디닐, 옥세타닐, 또는 티에탄디옥사이드인, 화합물.
구현예 23: 구현예 1 내지 구현예 22 중 어느 한 구현예에 있어서,
R2는
, , , , , 또는 인, 화합물.
구현예 24: 구현예 23에 있어서,
R9는 할로겐 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴인, 화합물.
구현예 25: 구현예 1 내지 구현예 12 중 어느 한 구현예에 있어서,
R2는 수소인, 화합물.
구현예 26: 구현예 1 내지 구현예 25 중 어느 한 구현예에 있어서,
R3은 수소 또는 할로겐인, 화합물.
구현예 27: 구현예 1 내지 구현예 26 중 어느 한 구현예에 있어서,
R4는 할로겐인, 화합물.
구현예 28: 구현예 1 내지 구현예 27 중 어느 한 구현예에 있어서,
R5는 R5A-치환 또는 비치환 C1-6 알킬인, 화합물.
구현예 29: 구현예 1 내지 구현예 28 중 어느 한 구현예에 있어서,
R5는
, , , 또는 인, 화합물.
구현예 30: 구현예 1 내지 구현예 29 중 어느 한 구현예에 있어서,
R5는
또는 이고,
여기서
고리 A는 적어도 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 3-6원 헤테로사이클 또는 5-9원 헤테로아릴이며; 그리고
s는 0, 1, 2 또는3인, 화합물.
구현예 31: 구현예 30에 있어서,
고리 A는 아제티디닐, 티에타닐 1,1-디옥사이드, 이미다졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 트리아졸릴, 피라졸릴, 피라지닐, 피리도닐, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피롤로피리디닐, 또는 피라졸로피리디닐인, 화합물.
구현예 32: 구현예 30 또는 구현예 31에 있어서,
고리 A는 이미다졸릴, 이소티아졸릴, 또는 트리아졸릴인, 화합물.
구현예 33: 구현예 30 또는 구현예 31에 있어서,
고리 A는 피라졸릴, 피리도닐, 피리디닐, 피리미디닐, 또는 피리다지닐인, 화합물.
구현예 34: 구현예 30에 있어서,
화학식:
, , , , , , , , , 또는 을 갖는, 화합물.
구현예 35: 구현예 1 내지 구현예 34 중 어느 한 구현예에 있어서,
2개의 R5A는 함께 C3-4 시클로알킬 또는 3-4원 헤테로사이클을 형성하는, 화합물.
구현예 36: 구현예 1 내지 구현예 29 중 어느 한 구현예에 있어서,
R5는
이고,
여기서
R5A는 CN, OH, COR11, SO2R12, NR13R14, R5B-치환 또는 비치환 아제티디닐, 또는 R5B-치환 또는 비치환 옥세타닐인, 화합물.
구현예 37: 구현예 1 내지 구현예 27 중 어느 한 구현예에 있어서,
R5는 R5A-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴인, 화합물.
구현예 38: 구현예 1에 있어서,
화학식:
(II) 또는 (III)을 갖는 화합물,
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
구현예 39: 구현예 1에 있어서,
화학식:
(IIa), (IIb), (IIc), 또는 (IId)을 갖는 화합물,
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
구현예 40: 구현예 1에 있어서,
화학식:
(IIIa), (IIIb), (IIIc), 또는 (IIId)을 갖는 화합물,
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
구현예 41: 구현예 1에 있어서,
화학식:
(IV), (IVa), (IVb), 또는 (IVc)을 갖는 화합물,
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
구현예 42: 구현예 1에 있어서,
화학식:
(V), (Va), (Vb), 또는 (Vc)을 갖는 화합물,
또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
구현예 43: 구현예 1 내지 구현예 42 중 어느 한 구현예에 있어서,
R8은
, , , 인, 화합물.
구현예 44: 구현예 1 내지 구현예 42 중 어느 한 구현예에 있어서,
R8은
, , 또는 인, 화합물.
구현예 45: 구현예 1 내지 구현예 42 중 어느 한 구현예에 있어서,
R8은
또는 인, 화합물.
구현예 46: 구현예 1 내지 구현예 45 중 어느 한 구현예에 있어서,
X는 O인, 화합물.
구현예 47: 구현예 1 내지 구현예 45 중 어느 한 구현예에 있어서,
X는 C(Rx)2인, 화합물.
구현예 48: 구현예 1 내지 구현예 47 중 어느 한 구현예에 있어서,
R6은 R6A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬인, 화합물.
구현예 49: 구현예 1 내지 구현예 47 중 어느 한 구현예에 있어서,
R6은 R6A-치환 C1-3 알킬인, 화합물.
구현예 50: 구현예 48 또는 구현예 49에 있어서,
R6A는 할로겐, CN, 또는 OH인, 화합물.
구현예 51: 구현예 1 내지 구현예 47 중 어느 한 구현예에 있어서,
R6은 수소인, 화합물.
구현예 52: 표 1의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
구현예 53: 표 2의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
구현예 54: 구현예 1 내지 구현예 53 중 어느 한 구현예의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는, 약학적 조성물.
구현예 55: 암을 치료하는 방법으로서,
유효량의 구현예 1 내지 구현예 53 중 어느 한 구현예의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 구현예 54의 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
구현예 56: 구현예 55에 있어서,
암은 KRas 돌연변이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법.
구현예 57: 구현예 56에 있어서,
KRas 돌연변이는 KRasG12D 돌연변이 또는 KRasG12V 돌연변이에 상응하는, 방법.
구현예 58: 구현예 56에 있어서,
KRasG12D 돌연변이의 부재 또는 존재에 대해 투여 전에 환자로부터의 샘플을 시험하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
구현예 59: 구현예 58에 있어서,
화합물, 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 약학적 조성물은 환자 샘플이 KRasG12D 돌연변이의 존재를 나타낸 후에 환자에게 투여되는, 방법.
구현예 60: 구현예 55 내지 구현예 59 중 어느 한 구현예에 있어서,
암은 조직 불문인, 방법.
구현예 61: 구현예 55 내지 구현예 59 중 어느 한 구현예에 있어서,
암은 췌장암, 폐암 또는 결장직장암인, 방법.
구현예 62: 구현예 61에 있어서,
폐암은 폐 선암종, NSCLC 또는 SCLC인, 방법.
구현예 63: 구현예 61에 있어서,
암은 췌장암인, 방법.
구현예 64: 구현예 61에 있어서,
암은 결장직장암인, 방법.
구현예 65: 구현예 55 내지 구현예 64 중 어느 한 구현예에 있어서,
적어도 하나의 추가 치료제를 투여하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
구현예 66: 구현예 65에 있어서,
추가 치료제는 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 억제제, 포스파티딜이노시톨 키나아제(PI3K) 억제제, 인슐린-유사 성장 인자 수용체(IGF1R) 억제제, 야누스 키나아제(JAK) 억제제, Met 키나아제 억제제, SRC 패밀리 키나아제 억제제, 미토겐-활성화 단백질 키나아제(MEK) 억제제, 세포외-신호-조절 키나아제(ERK) 억제제, 토포이소머라아제 억제제, 탁산, 항대사제, 또는 알킬화제를 포함하는, 방법.
구현예 67: 치료적 활성 물질로서 사용하기 위한, 구현예 1 내지 구현예 53 중 어느 한 구현예에 따른 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
구현예 68: KRas 돌연변이를 포함하는 암의 치료적 치료를 위한, 구현예 1 내지 구현예 53 중 어느 한 구현예에 따른 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 사용.
구현예 69: KRas 돌연변이를 포함하는 암의 치료적 치료를 위한 약제를 제조하기 위한, 구현예 1 내지 구현예 53 중 어느 한 구현예에 따른 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 사용.
구현예 70: 종양 전이 억제를 위한 약제의 제조에서, 구현예 1 내지 구현예 53 중 어느 한 구현예의 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적 염의 사용.
구현예 71: KRas 돌연변이를 포함하는 암의 치료적 및/또는 예방적 치료를 위한, 구현예 1 내지 구현예 53 중 어느 한 구현예에 따른 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적 염.
구현예 72: KRas 돌연변이 단백질의 활성을 조절하는 방법으로서, 돌연변이 단백질을 구현예 1 내지 구현예 53 중 어느 한 구현예의 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 반응시키는 단계를 포함하는, 방법.
구현예 73: 세포 모집단의 증식을 억제하는 방법으로서,
세포 모집단을 구현예 1 내지 구현예 53 중 어느 한 구현예의 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함하는, 방법.
구현예 74: 구현예 73에 있어서,
증식의 억제는 세포 모집단의 세포 생존률의 감소로서 측정되는, 방법.
구현예 75: 표지된 KRas 돌연변이 단백질을 제조하는 방법으로서,
KRas 돌연변이 단백질을 구현예 1 내지 구현예 56 중 어느 한 구현예의 표지된 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 반응시켜, 표지된 KRas 돌연변이 단백질을 발생시키는 단계를 포함하는, 방법.
구현예 76: 치료적 유효량의 구현예 1 내지 구현예 53 중 어느 한 구현예의 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에게, 또는 구현예 54의 약학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 종양 전이를 억제하는, 방법.
구현예 77: 본원에 제시된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물을 합성하기 위한, 공정.
실시예
하기 실시예는 본 발명의 범위 내의 화합물의 제조 및 생물학적 평가를 예시한다. 상기 실시예 및 제제는 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 본 발명을 보다 명확하게 이해하고 실시할 수 있도록 하기 위해 제공된다. 이들은 본 발명의 범위를 제한하는 것이 아니라 단지 예시적이고 대표하는 것으로 간주되어야 한다.
중간체 1A: ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올
단계 1: 에틸 (2S,7aS)-2-히드록시-5-옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 에틸 (8S)-3,6-디옥소-1,2,5,7-테트라히드로피롤리진-8-카르복실레이트(10.00 g, 47.3 mmol)의 용액에 L-셀렉트리드(THF 중 1 M)(23.6 mL, 23.6 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 -78°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 추가의 리튬 L-셀렉트리드(THF 중 1 M)(23.6 mL, 23.6 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을　-78°C에서 40분 동안 교반하였다. 반응물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 켄칭하였다. 용액을 진공하에 농축하여 THF를 제거하였다. 이어서, 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 희석하였다.　여과 후, 고체를 제거하고, 여과액을 수집하고, 감압하에 농축시켰다. 조 생성물을 디클로로메탄/메탄올(97/3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 에틸 (2S,7aS)-2-히드록시-5-옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(4 g,18.759 mmol, 39.6% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 214.1.
단계 2: 에틸 (2R,7aS)-2-플루오로-5-옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트
질소하에서, 디클로로메탄(40 mL) 중 에틸 에틸 (2S,7aS)-2-히드록시-5-옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(4 g, 18.6 mmol)의 용액에 디에틸아미노황 삼불화물(4.2 mL, 37.2 mmol)를 -15°C에서 첨가하였다. 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 에탄올로 켄칭하고, 용매를 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(7/3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 에틸 (2R,7aS)-2-플루오로-5-옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(2.2 g,10.1 mmol, 54.3% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 216.1.
단계 3: ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올
테트라히드로퓨란(100 mL) 중 에틸 (2R,7aS)-2-플루오로-5-옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(10.0 g, 46.2 mmol)의 용액을 수소화 알루미늄 리튬(THF 중 1 M)(138.6 mL, 138.6 mmol)를 0°C에서 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 70°C에서 30분 동안 교반하였다(연장된 반응 시간은 F-제거된 부산물을 발생시킬 것이다). 완료 후, 반응물을 황산나트륨 십수화물로 켄칭하고 테트라히드로퓨란으로 희석하였다. 여과 후, 여과액을 수집하고, 고체를 테트라히드로퓨란으로 3회 세척하였다. 여과액 중의 테트라히드로퓨란을 질소 가스로 불어내어(진공하에서 농축하면 저비점 생성물이 손실됨), ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(5.3 g, 33.1 mmol, 71.6% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 160.1.
중간체 2A: 7-브로모-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
단계 1: 2-아미노-4-브로모-6-플루오로벤조니트릴
i-PrOH(40.0 L) 중 4-브로모-2,6-디플루오로벤조니트릴(4000.0 g, 435.7 mmol)의 용액에 NH3.H2O(20.0 L)를 첨가하고, 고압 탱크 내에서 80°C에서 6시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 20 L가 남을 때까지 증발시켰다. 고체를 여과에 의해 수집하고 건조하여 3625 g(91%)의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M-H]+ = 213.
단계 2: 6-아미노-4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤조니트릴
DMF(2.5 L) 중 2-아미노-4-브로모-6-플루오로벤조니트릴(450.0 g, 2102.8 mmol)의 용액에 0°C에서 NCS(280.7 g, 2102.8 mmol)를 첨가하고, 60°C에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 실온으로 냉각시키고, 25 L의 물에 부었다.　고체를 여과하여 수집하였다.　고체를 3.0 L의 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:5)에 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하여 조 표제 화합물 350 g을 수득하였다. 350 g 조 화합물을 1.5 L의 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:10)에 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고 210 g(40% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M-H]+ = 247.
단계 3: 7-브로모-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
포름산(75.0 mL) 중 6-아미노-4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤조니트릴(15.0 g, 150.5 mmol)의 용액에 25°C에서 H2SO4(7.5 mL)를 첨가하고, 100°C에서 30분 동안 교반하였다. 생성된 용액을 실온으로 냉각시키고, 250 mL의 얼음/물에 부었다. 고체를 여과에 의해 수집하고 건조하여 12.24 g(73%)의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M-H]+ = 277. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 12.55 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.92 (d, J = 2.1 Hz, 1H).
중간체 3A: 7-브로모-2,6-디클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
단계 1: 6-아미노-4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤즈아미드
DMSO(3.0 L) 중 6-아미노-4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤조니트릴(600 g, 2405 mmol)의 용액에 K2CO3(665 g, 4810 mmol)을 첨가하였다.　그런 다음, 15°C에서 H2O2(30%)(1091 g, 9620 mmol)를 적가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, 3 L의 포화 아황산 나트륨 수용액을 첨가하여 반응물을 켄칭하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고 물로 세척하였다.　고체를 건조하여 512 g(79%)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ =267.
단계 2: 7-브로모-2,6-디클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
디옥산(100.0 mL) 중 6-아미노-4-브로모-3-클로로-2-플루오로벤즈아미드(16.5 g, 61.7 mmol)의 용액에 티오포스겐(14.9 g, 129.6 mmol)을 0°C에서 적가한 다음, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 105°C에서 50분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 진공에서 농축시켰다. 고체에 디옥산(40 mL) 및 MTBE(50 mL)를 첨가한 다음, 15분 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하여 9.22 g(47%)의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M-H]+ = 309. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 7.90 (d, J = 1.8 Hz, 1H).
중간체 4A 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
단계 1: 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
N,N-디메틸포름아미드(160 mL) 중 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(20.00 g, 72.1 mmol), 테트라부틸아자늄 요오드화물(2.66 g, 7.2 mmol) 및 세슘 카보네이트(46.97 g, 144.2 mmol)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 2-2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(20.4 mL, 115.3 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 1.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 물(300 mL)로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트(3 × 200 mL)로 추출하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 물(3 x 150 mL)로 다시 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/9)로 용출하는 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-3-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)퀴나졸린-4-온(24.00 g, 58.86 mmol, 81.7% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 407.0 [M+H]+
단계 2: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
질소하에서, 테트라히드로퓨란(80 mL) 중 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-3-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)퀴나졸린-4-온(10.00 g, 24.5 mmol)의 용액에 -78oC에서 이소프로필마그네슘 클로라이드 리튬 클로라이드 착물(테트라히드로퓨란 중 1.3 M)(22.6 mL, 29.4 mmol)을 첨가하고 -78oC에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 염화아연(테트라히드로퓨란 중 2 M)(14.7 mL, 29.4 mmol)을 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 N,N-디메틸포름아미드(20 mL) 중 6-브로모-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(10.93 g, 22.1 mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(2.25 g, 2.4 mmol) 및 트리(2-푸릴)포스핀(1.14 g, 4.9 mmol)의 탈기된 용액에 옮겼다. 이후, 용액을 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축한 다음, 물(100 mL)로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트(3 × 200 mL)로 추출하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 물(3 x 50 mL)로 다시 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/8)로 용출하는 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)퀴나졸린-4-온(7.00 g, 9.4 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 743.3 [M+H]+
단계 3: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라하이드로퓨란(90 mL) 중 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)퀴나졸린-4-온(14.00 g, 18.8 mmol) 및 테트라부틸암모늄 플루오라이드(19.70 g, 75.3 mmol)의 용액을 50°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(300 mL)로 희석하였다. 생성된 용액을 물(10 x 60 mL)으로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/디클로로메탄(1/5)으로 용출하는 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(7.50 g, 9.6 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 613.2 [M+H]+
중간체 5A 6-(8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
단계 1: 5-(2-아미노에톡시)-7-브로모-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(30 mL) 중 2-아미노에탄-1-올(2.20 g, 36.04 mmol) 및 NaH(60% 순도)(2.88 g, 72.08 mmol)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(5.00 g, 18.02 mmol)을 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 1 N 염산을 사용하여 반응 혼합물을 PH = 7~8로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(1:4)로 용출하는 역상 크로마토그래피로 정제하여 5-(2-아미노에톡시)-7-브로모-6-클로로-3H-퀴나졸린-4-온(5.70 g, 17.89 mmol, 99.3% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 318.5 [M+H]+.
단계 2: 9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
아세토니트릴(70 mL) 중 5-(2-아미노에톡시)-7-브로모-6-클로로-3H-퀴나졸린-4-온(5.80 g, 18.21 mmol)의 용액에 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(11.37 g, 21.85 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(8.32 g, 54.62 mmol)을 첨가하고, 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하는 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(2.80 g, 9.31 mmol, 51.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 300.5 [M+H]+.
단계 3: 8-클로로-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
질소하에서, 1,4-디옥산(25 mL) 중 9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(1.0 g, 3.33 mmol) 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 디클로로메탄 착물(271.7 mg, 0.33 mmol), 아세트산 칼륨(65.3 mg, 0.67 mmol) 및 비스(피나콜라토)디보론(2.53 g, 9.98 mmol)의 용액을 100°C에서 1.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 여과 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하여, 다음 단계에서 정제없이 직접 사용하게 될 조 생성물을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 347.6 [M+H]+.
단계 4: 6-(8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 아세토니트릴(25 mL) 및 물(5 mL) 중 8-클로로-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(3.00 g, 조), 불화 칼륨(703.6 mg, 12.12 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(283.4 mg, 0.40 mmol) 및 6-브로모-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(2.00 g, 4.04 mmol)의 용액을 80°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하는 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(1.04 g, 0.81 mmol, 40.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 636.0 [M+H]+.
중간체 6A: (S)-2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
합성 경로
단계 1: (S)-3-아미노-4-히드록시부탄니트릴 염산염
염산(20.0 mL, 1,4-디옥산 중 1 M) 및 디클로로메탄(5.0 mL) 중 tert-부틸 (S)-(1-시아노-3-히드록시프로판-2-일)카바메이트(2.30 g, 11.49 mmol)의 용액을 25°C에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. LC-MS: (ESI, m/z): 101.1 [M+H]+.
단계 2： (S)-3-아미노-4-((7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)부탄니트릴
테트라히드로퓨란(25 mL) 중 (S)-3-아미노-4-히드록시부탄니트릴 염산염(2.5 g, 조)의 용액에 0°C에서 수소화 나트륨(812.5 mg, 20.3 mmol, 60% 순도)을 첨가하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(2.5 g, 4.07 mmol)을 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 생성된 용액을 65°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고 2 N 염산으로 pH를 7~8로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-3-아미노-4-((7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)부탄니트릴(1.4 g, 2.02 mmol, 49.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 693.2 [M+H]+.
단계 3: (S)-2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
아세토니트릴(14.0 mL) 중 (S)-3-아미노-4-((7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)부탄니트릴(1.4 g, 2.02 mmol), 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(1.54 g, 10.10 mmol) 및 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(1.58 g, 3.03 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(1 g, 1.48 mmol, 73.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 675.2 [M+H]+.
중간체 7A: (S)-(디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-일)메탄올
합성 경로
단계 1: 에틸 (S)-5-옥소디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-카르복실레이트
톨루엔(50 mL) 중 에틸 (S)-2,5-디옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(1.00 g, 4.73 mmol), 에틸렌 글리콜(450.1 mg, 7.25 mmol) 및 p-톨루엔설폰산(158.0 mg, 0.92 mmol)의 용액을 110°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 진공하에 농축시키고, 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압하에 농축하여 에틸 (S)-5-옥소디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-카르복실레이트(1.17 g, 4.58 mmol, 96.8% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 256.1 [M+H]+
단계 2: (S)-(디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-일)메탄올
질소하에서, 테트라히드로퓨란(35 mL) 중 에틸 (S)-5-옥소디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-카르복실레이트(700.0 mg, 2.74 mmol)의 용액에 디이소부틸알루미늄 수소화물(8.23 mL, 8.23 mmol, 톨루엔 중 1 M)을 0°C에서 첨가하고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화 암모늄 용액으로 켄칭하고, 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 수성상을 진공하에 농축시켜 (S)-(디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-일)메탄올(180.1 mg, 조 물질)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 200.1 [M+H]+
중간체 8A: 9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
합성 경로
단계 1: 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(50 mL) 중 2-(메틸아미노)에탄올(1.32 g, 17.63 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(1.92 g, 48.09 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-2,6-디클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(5.00 g, 16.03 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 1 N 염산 용액으로 켄칭하였다. 여과 후, 고체를 수집하여 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(8.40 g 조)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 366.0 [M+H]+
단계 2: 9-브로모-2,8-디클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
클로로포름(80 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-5-[2-(메틸아미노)에톡시]-3H-퀴나졸린-4-온(8.30 g, 22.61 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(5.84 g, 45.23 mmol) 및 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(6.89 g, 27.14 mmol)의 혼합물을 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-2,8-디클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(3.74g, 9.64 mmol, 42.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 348.0 [M+H]+
단계 3: 9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 [rac-(2R,8S)-2-플루오로-1,2,3,5,6,7-헥사히드로피롤리진-8-일]메탄올(638.6 mg, 4.0 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(343.8 mg, 8.6 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 9-브로모-2,8-디클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(1.00 g, 2.87 mmol)을 첨가하고 40°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 1 N 염산 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/25)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(1.10 g, 2.19 mmol, 76.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 471.1 [M+H]+
실시예 1: 6-(4-((1H-피라졸-5-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 1-트리틸-1H-피라졸-3-카르발데히드
N,N-디메틸포름아미드(40 mL) 중 1H-피라졸-3-카르발데히드(4.00 g, 41.62 mmol), 트리틸클로라이드(17.41 g, 62.40 mmol) 및 트리에틸아민(17.4 mL, 124.96 mmol)의 용액을 25°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 물로 다시 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/30)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-트리틸피라졸-3-카르발데히드(11.00 g, 32.55 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 339.1 [M+H]+
단계 2: 2-(((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(50 mL) 중 1-트리틸피라졸-3-카르발데히드(6.00 g, 17.70 mmol), 2-아미노에탄올(3.2 mL, 53.20 mmol) 및 아세트산(0.11 g, 1.87 mmol)의 용액을 25°C에서 3시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(2.23 g, 35.53 mmol)을 첨가하고 25℃에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/20)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[(1-트리틸피라졸-3-일)메틸아미노]에탄올(1.20 g, 3.12 mmol)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 384.2 [M+H]+
단계 3: 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-(((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 2-[(1-트리틸피라졸-3-일)메틸아미노]에탄올(1.12 g, 2.9 mmol) 및 수소화 나트륨(292.4 mg, 7.3 mmol)의 용액을 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-2,6-디클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(760.0 mg, 2.4 mmol)을 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 염산(1 N)을 사용하여 반응 혼합물을 pH = 6으로 조정하였다. 용액을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/20)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-(((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
(1.60 g, 2.37 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 674.1 [M+H]+
단계 4: 9-브로모-2,8-디클로로-4-((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
클로로포름(15 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-(((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(1.60 g, 2.37 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(0.90 g, 3.55 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.61 g, 4.75 mmol)의 용액을 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/50)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-3,8-디클로로-13-[(1-트리틸피라졸-3-일)메틸]-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔(700.0 mg, 1.06 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 656.1 [M+H]+
단계 5: 9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(181.6 mg, 1.12 mmol) 및 수소화 나트륨(152.1 mg, 3.81 mmol)의 용액을 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-3,8-디클로로-13-[(1-트리틸피라졸-3-일)메틸]-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔(500.0 mg, 0.81 mmol)을 첨가하고 40°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액을 사용하여 pH = 6으로 조정하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(60 mL)로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/8)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(400.0 mg, 0.51 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 779.3 [M+H]+
단계 6: (8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산
질소하에서 1,4-디옥산(3 mL) 중 9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(380.0 mg, 0.51 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(247.4 mg, 0.92 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(35.6 mg, 0.051 mmol) 및 아세트산 칼륨(95.6 mg, 0.92 mmol)의 용액을 100°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 여과 후, 유기물을 수집하고 진공하에 농축하였다. 조 생성물 (8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산(600.0 mg, 조)을 추가 정제없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 745.3 [M+H]+
단계 7: 6-(8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 아세토니트릴(4 mL) 및 물(1 mL) 중 (8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산(597.4 mg, 조), 6-브로모-4-메틸-5(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(170.4 mg, 0.73 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(46.9 mg, 0.073 mmol) 및 탄산 나트륨(141.6 mg, 1.36 mmol)의 용액을 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 여과 후, 유기상을 수집하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/20)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(250.0 mg, 0.28 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 875.4 [M+H]+
단계 8: 6-(4-((1H-피라졸-5-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(0.5 mL) 및 디클로로메탄(0.5 mL) 중 6-(8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(150.0 mg, 0.171 mmol)을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A:물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B:ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 39 B에서 49 B로, 254/220 nm; RT1:7.6; RT2;) 정제하여 6-(4-((1H-피라졸-5-일)메틸)-8-클로로-2-((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(29.7 mg, 0.059 mmol, 34.5% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 633.3 [M+H]+
실시예 1: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.44 (s, 1H), 6.25 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.27 (d, J = 54.1 Hz, 1H), 5.13 - 4.93 (m, 2H), 4.68 - 4.43 (m, 2H), 4.16 - 3.87 (m, 4H), 3.10 (s, 2H), 3.00 (s, 1H), 2.90 - 2.72 (m, 1H), 2.35 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.19 - 2.09 (m, 1H), 2.06 - 1.92 (m, 2H), 1.91 - 1.64 (m, 3H).
실시예 2: 6-(4-((1H-피라졸-4-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 1-트리틸-1H-피라졸-4-카르발데히드
N,N-디메틸포름아미드(30 mL) 중 1H-피라졸-4-카르발데히드(3.00 g, 31.22 mmol), 트리에틸아민(13 mL, 93.66 mmol) 및 트리틸클로라이드(13.10 g, 46.84 mmol)의 용액을 25°C에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-트리틸-1H-피라졸-4-카르발데히드(2.40 g, 7.07 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 339.4 [M+H]+
단계 2: 2-(((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(1 mL) 중 1-트리틸피라졸-4-카르발데히드(1.50 g, 4.42 mmol), 2-아미노에탄올(0.54 mL, 8.84 mmol) 및 아세트산(0.03 mL, 0.03 mmol)의 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(0.56 g, 8.84 mmol)을 첨가하고 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 용매를 물로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)아미노)에탄-1-올(630.0 mg, 1.64 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 384.4 [M+H]+
단계 3: 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-(((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 2-(((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)아미노)에탄-1-올(991.4 mg, 2.58 mmol) 및 수소화 나트륨(258.5 mg, 6.45 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-2,6-디클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(10.0 mg, 0.03 mmol)을 첨가하고 65°C에서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 1 M 염산으로 켄칭하고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-(((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(550 mg, 0.81 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 674.4 [M+H]+
단계 4: 9-브로모-2,8-디클로로-4-((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
클로로포름(100 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-(((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(1.10 g, 1.53 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(0.57 g, 2.24 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.5 mL, 2.99 mmol)의 용액을 70°C에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-2,8-디클로로-4-((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(300.0 mg, 0.45 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 656.1 [M+H]+
단계 5: 9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
테트라히드로퓨란(4 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(108.9 mg, 0.6 mmol) 및 수소화 나트륨(91.2 mg, 2.3 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-3,8-디클로로-13-[(1-트리틸피라졸-4-일)메틸]-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔(300.0 mg, 0.4 mmol)을 첨가하고 40°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 희석된 염산으로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/50)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(200.0 mg, 0.25 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 779.2 [M+H]+
단계 6: (8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산
질소하에서 1,4-디옥산(3 mL) 중 9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(165.0 mg, 0.23 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(107.4 mg, 0.46 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(15.48mg, 0.02mmol) 및 아세트산 칼륨(0.03 mL, 0.46 mmol)의 용액을 100°C에서 1.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 디클로로메탄(20 mL)으로 희석하였다. 여과 후, 유기물을 수집하고 진공하에 농축하였다. 조 생성물 (8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산(340.0 mg, 조)(갈색 오일)을 추가 정제없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 745.4 [M+H]+
단계 7: 6-(8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 아세토니트릴(4 mL)/물(1 mL) 중 (8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산(315.5 mg, 조), 6-브로모-4-메틸-5(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(90.0 mg, 0.46 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(24.8 mg, 0.04 mmol) 및 탄산 나트륨(74.8 mg, 0.79 mmol)의 용액을 첨가하고 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/20)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-피라졸-4-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(130.0 mg, 0.15 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 875.4 [M+H]+
단계 8: 6-(4-((1H-피라졸-4-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(0.5 mL)/디클로로메탄(0.5 mL) 중 6-(4-((1H-피라졸-4-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(100.0 mg, 0.12 mmol)의 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A:물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B:ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 37 B에서 46 B로, 254/220 nm; RT1:8.17; RT2;) 정제하여 6-(4-((1H-피라졸-4-일)메틸)-8-클로로-2-((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(24.7 mg, 0.04 mmol, 33.3% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 633.3 [M+H]+
실시예 2: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 12.79 (s, 1H), 7.68 (s, 2H), 6.94 (s, 1H), 6.74 (s, 2H), 6.44 (s, 1H), 5.26 (d, J = 53.7 Hz 1H), 4.96 - 4.76 (m, 2H), 4.64 - 4.40 (m, 2H), 4.18 - 3.95 (m, 2H), 3.95 - 3.78 (m, 2H), 3.16 - 2.91 (m, 3H), 2.89 - 2.72 (m, 1H), 2.34 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.20 - 2.08 (m, 1H), 2.08 - 1.90 (m, 2H), 1.90 - 1.62 (m, 3H).
실시예 3: 6-(4-((5-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 6-(4-((5-브로모피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
N,N-디메틸아세트아미드(1 mL) 중 3-브로모-5-(브로모메틸)피리딘(236.6 mg, 0.96 mmol) 및 수소화 나트륨(60% 순도)(25.1 mg, 0.64 mmol)의 용액을 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 6-(8-클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-7-일)-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(200.0 mg, 0.32 mmol)을 첨가하고 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-((5-브로모피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(150.0 mg, 0.18 mmol, 51.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 805.1 [M+H]+
단계 2: 6-(4-((5-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 톨루엔(3 mL) 중 6-(4-((5-브로모피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(150.0 mg, 0.18 mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(17.0 mg, 0.02 mmol), 4,5-비스(디페닐포스피노)-9,9-디메틸크산텐(21.5 mg, 0.04 mmol), 디페닐메탄이민(261.35 mg, 1.44 mmol) 및 탄산 세슘(121.2 mg, 0.36 mmol)의 용액을 16시간 동안 90°C에서 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하고 에틸아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-((5-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(100.0 mg, 0.13 mmol, 73.8% 수율)을 흑색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 742.2 [M+H]+
단계 3: 6-(4-((5-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
6-(4-((5-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(100.0 mg, 0.13 mmol) 및 트리플루오로아세트산(5 mL)의 용액을 50°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B:ACN; 검출기, UV 254 nm. RT:8.5로 정제하여 6-(4-((5-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(20.7 mg, 0.04 mmol, 30.3% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 502.1 [M+H]+
실시예 3: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.43 (s, 1H), 7.83 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.85 (t, J = 2.3 Hz, 1H), 6.77 (s, 2H), 6.46 (s, 1H), 5.30 (brs, 2H), 5.11 - 4.93 (m, 2H), 4.61 (q, J = 3.4 Hz, 2H), 3.95 - 3.86 (m, 2H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H).
실시예 4: (S)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (S)-5-(2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라클로로에틸렌(5 mL) 중 2-[[rac-(1S)-1-(5-아미노-3-피리딜)에틸]아미노]에탄올(133.0 mg, 0.73 mmol) 및 수소화 나트륨(60% 순도)(46.9 mg, 1.94 mmol)의 용액을 0°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(300.0 mg, 0.49 mmol)을 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄으로 켄칭하고, 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-5-(2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(200.0 mg, 0.24 mmol, 48% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 774.3 [M+H]+
단계 2: (S)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(3 mL) 중 (S)-5-(2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(200.0 mg, 0.24 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(66.7 mg, 0.51 mmol) 및 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(85.4 mg, 0.32 mmol)의 용액을 70°C에서 6시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(90.0 mg, 0.11 mmol, 44.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 756.3 [M+H]+
단계 3: (S)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
(S)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(90.0 mg, 0.11 mmol) 및 트리플루오로아세트산(2 mL)의 용액을 25°C에서 24시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 검출기, UV 254 nm. RT:8.32로 정제하여 (S)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(18.1 mg, 0.03 mmol, 29.5% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 516.2 [M+H]+
실시예 4: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.47 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.91 - 7.84 (m, 1H), 7.84 - 7.77 (m, 1H), 7.20 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.60 - 6.50 (m, 1H), 6.45 (s, 1H), 5.30 (s, 2H), 4.67 - 4.35 (m, 2H), 3.80 - 3.41 (m, 2H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 1.59 (dd, J = 7.1, 2.4 Hz, 3H).
실시예 5: (R)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (R)-5-(2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라클로로에틸렌(5 mL) 중 (R)-2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올(133.0 mg, 0.73 mmol) 및 수소화 나트륨(46.9 mg, 1.92 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(300.0 mg, 0.48 mmol)을 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-5-(2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(200.0 mg, 0.23 mmol, 48% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 774.3 [M+H]+
단계 2: (R)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(3 mL) 중 (R)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(250.0 mg, 0.32 mmol), 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(0.14 mL, 0.97 mmol) 및 엔조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(252.0 mg, 0.48 mmol)의 용액을 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(90.0 mg, 0.12 mmol, 37.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 756.3 [M+H]+
단계 3: (R)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
(R)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(90.0 mg, 0.1 mmol) 및 트리플루오로아세트산(2 mL)의 용액을 65°C에서 24시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 검출기, UV 254 nm. RT:8.32로 정제하여 (R)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(18.1 mg, 0.03 mmol, 29.5% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 516.2 [M+H]+
실시예 5: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.51 (s, 1H), 7.99 - 7.92 (m, 1H), 7.67 - 7.60 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.70 - 6.62 (m, 1H), 6.45 (s, 2H), 5.80 (s, 1H), 5.73 (s, 1H), 4.59 - 4.45 (m, 1H), 4.36 - 4.24 (m, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.74 - 3.60 (m, 1H), 2.35 (d, J = 2.5 Hz, 3H), 1.59 - 1.51 (m, 3H).
실시예 6: 6-(8-클로로-4-((5-(메틸아미노)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (5-포르밀피리딘-3-일)카바메이트
질소하에서, 1,4-디옥산(40 mL) 중 5-브로모니코틴알데히드(2000.0 mg, 10.75 mmol), tert-부틸 카바메이트(1.89 g, 16.12 mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐-클로로포름 부가물(1.11 g, 1.08 mmol), 4,5-비스(디페닐포스피노)-9,9-디메틸크산텐(1.24 g, 2.150 mmol) 및 세슘 카보네이트(7.05 g, 21.50 mmol)의 용액을 85°C에서 3 시간 동안 교반하였다. LC-MS는 생성물이 형성되어 SM이 소모되었음을 보여주었다. 종료 후, 용액을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(70/30)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(5-포르밀-3-피리딜)카바메이트(1.88 g, 8.45 mmol, 78.7% 수율)를 무색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 223.1 [M+H]+
단계 2: tert-부틸 (5-포르밀피리딘-3-일)(메틸)카바메이트
N,N-디메틸포름아미드(20 mL) 중 tert-부틸 N-(5-포르밀-3-피리딜)카바메이트(1.88 g, 8.46 mmol), 요오드메탄(1.32 g, 9.31 mmol) 및 세슘 카보네이트(5.54 g, 16.92 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(80/20)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (5-포르밀피리딘-3-일)(메틸)카바메이트(1.19 g, 5.03 mmol, 59.5% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 237.1 [M+H]+
단계 3: tert-부틸 (5-(((2-히드록시에틸)아미노)메틸)피리딘-3-일)(메틸)카바메이트
티타늄(iv)이소프로폭시드(10.0 mL, 5.04 mmol) 및 메틸 알코올(10 mL) 중 tert-부틸 (5-포르밀피리딘-3-일)(메틸)카바메이트(1.19 g, 5.04 mmol), 2-아미노에탄올(0.9 mL, 15.11 mmol) 및 소듐시아노보로하이드라이드(1.19 g, 18.94 mmol)의 용액을 80°C에서 16시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(95/5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 잔류물을 메탄올/물(25/75)로 용출하면서 C18 겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (5-(((2-히드록시에틸)아미노)메틸)피리딘-3-일)(메틸)카바메이트(1.10 g, 3.72 mmol, 73.9% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 282.1 [M+H]+
단계 4: tert-부틸 (5-(((2-((7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)에틸)아미노)메틸)피리딘-3-일)(메틸)카바메이트
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(400.0 mg, 0.65 mmol), tert-부틸 N-[5-[(2-히드록시에틸아미노)메틸]-3-피리딜]-N-메틸-카바메이트(275.3 mg, 0.97 mmol) 및 수소화 나트륨(60%)(78.3 mg, 1.95 mmol)의 용액을 65°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄으로 켄칭하고, 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (5-(((2-((7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)에틸)아미노)메틸)피리딘-3-일)(메틸)카바메이트(280.0 mg, 0.32 mmol, 49.1% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 874.3 [M+H]+
단계 5: tert-부틸 (5-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-3-일)(메틸)카바메이트
아세토니트릴(3 mL) 중 tert-부틸 (5-(((2-((7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)에틸)아미노)메틸)피리딘-3-일)(메틸)카바메이트(280.0 mg, 0.32 mmol), b1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(0.1 mL, 1.28 mmol) 및 엔조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(1.0 mL, 1.44 mmol)의 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하고 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (5-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-3-일)(메틸)카바메이트(230.0 mg, 0.27 mmol, 85.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z)： 856.3 [M+H]+
단계 6: 6-(8-클로로-4-((5-(메틸아미노)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
tert-부틸 (5-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-3-일)(메틸)카바메이트(230.0 mg, 0.27 mmol) 및 트리플루오로아세트산(3 mL)의 용액을 50°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 검출기, UV 254 nm. RT: 6.5로 정제하여 6-(8-클로로-4-((5-(메틸아미노)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(27.8 mg, 0.05 mmol, 13% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 516.1 [M+H]+
실시예 6: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.44 (s, 1H), 7.84 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.89 - 6.81 (m, 1H), 6.78 (s, 2H), 6.46 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 5.14 - 4.98 (m, 2H), 4.71 - 4.55 (m, 2H), 3.97 - 3.88 (m, 2H), 2.67 (d, J = 3.6 Hz, 3H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H).
실시예 7: (R)-6-(8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 에틸 (R)-2,2-디플루오로-5-옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트
디클로로메탄(200 mL) 중 에틸 (R)-2,5-디옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a (5H)-카르복실레이트(20.00 g, 94.6 mmol)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 디에틸아미노황 삼불화물(37.5 mL, 284.0 mmol)을 첨가하고 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 에틸 (R)-2,2-디플루오로-5-옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(15.70 g,67.3 mmol, 71.1% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 234.1 [M+H]+
단계 2: (R)-(2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올
테트라히드로퓨란(8 mL) 중 에틸 (R)-2,2-디플루오로-5-옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(750.0 mg, 3.2 mmol) 및 수소화 알루미늄 리튬(9.5 mL, 9.5 mol, THF 중 1 mol/L)의 용액을 0°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 황산나트륨 십수화물로 켄칭하고 테트라히드로퓨란으로 희석하였다. 여과 후, 여액을 감압하에 농축하여 (R)-(2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a (5H)-일)메탄올(450 mg, 조)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):178.1 [M+H]+
단계 3: (R)-6-(8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 (R)-(2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(99.4 mg, 조) 및 수소화 나트륨(59.8 mg, 1.49 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 6-(8-클로로-2-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(250.0 mg, 0.37 mmol)을 첨가하고 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄으로 켄칭하고, 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 (R)-6-(8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(150.0 mg, 0.18 mmol, 48.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 825.3 [M+H]+
단계 4: (R)-6-(8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 (R)-6-(8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(150.0 mg, 0.18 mmol)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B:ACN; 검출기, UV 254 nm. RT:6.5로 정제하여 (R)-6-(8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(64.1 mg, 0.12 mmol, 60.3% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 535.1 [M+H]+
실시예 7: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 6.93 (s, 1H), 6.74 (d, J = 2.1 Hz, 2H), 6.44 (s, 1H), 4.67 - 4.49 (m, 2H), 4.17 - 3.98 (m, 2H), 3.98 - 3.84 (m, 2H), 3.41 (s, 1H), 3.29 (s, 3H), 3.19 - 3.01 (m, 2H), 2.72 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 2.45 - 2.24 (m, 5H), 2.02 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 1.93 - 1.70 (m, 3H).
실시예 8： 8-클로로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
합성 경로
단계 1: 8-클로로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
질소하에서, 테트라히드로퓨란(2.0 mL) 및 물(0.4 mL) 중 9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(200.0 mg, 0.42 mmol), 6-플루오로-1-메틸-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)인다졸(117.0 mg, 0.42 mmol), 인산 칼륨(179.7 mg, 0.84 mmol) 및 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로팔라듐(II)(31.4 mg, 0.042 mmol)의 용액을 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(25/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 100 mg의 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: XBridge Prep C18 OBD 컬럼, 30*100 mm, 5 um; 이동상 A:물(10 MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B:ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 50 B에서 80 B로, 254/220 nm; RT1:6.53으로 정제하여 8-클로로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(29.1 mg, 0.05 mmol, 12.7% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 541.2 [M+H]+.
실시예 8: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.26 (s, 1H), 7.21 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.02 (dd, J = 9.9, 7.9 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 54.3 Hz, 1H), 4.81 - 4.50 (m, 2H), 4.13 - 3.90 (m, 4H), 3.56 (s, 3H), 3.08 (d, J = 28.7 Hz, 3H), 3.20 - 3.00 (m, 3H), 2.90 - 2.80 (m, 1H), 2.15 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 2.03 (d, J = 11.7 Hz, 2H), 1.91 - 1.68 (m, 3H).
실시예 9: 5-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-3-올
합성 경로
단계 1: 5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메톡시)니코틴알데히드
테트라히드로퓨란(20.0 mL) 중 5-히드록시니코틴알데히드(2.00 g, 16.2 mmol) 및 탄산 세슘(10.6 g, 32.5 mmol)의 용액을 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(2.8 mL, 16.2 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 용매를 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 그런 다음, 유기층을 취합하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메톡시)니코틴알데히드(1.96 g, 7.2 mmol, 44.6% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 254.1 [M+H]+
단계 2: 2-(((5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메톡시)피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(200.0 mL) 중 2-아미노에탄올(0.8 mL, 14.6 mmol) 및 아세트산(0.1 mL, 0.7 mmol)의 용액을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메톡시)니코틴알데히드(1.86 g, 7.3 mmol)을 첨가하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(922.6 mg, 14.6 mmol)을 0℃에서 첨가하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(((5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메톡시)피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올(2.0 g, 6.4 mmol, 88.2% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 299.2 [M+H]+
단계 3: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(((5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메톡시)피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(4.0 mL) 중 2-(((5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메톡시)피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올(400.0 mg, 1.30 mmol) 및 수소화 나트륨(64.3 mg, 2.60 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(410.7 mg, 0.65 mmol)을 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 용매를 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 그런 다음, 유기층을 취합하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(((5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메톡시)피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(464.0 mg, 0.52 mmol, 38.8% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 891.5 [M+H]+
단계 4: 6-(8-클로로-4-((5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메톡시)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(2 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(((5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메톡시)피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(176.0 mg, 0.20 mmol), 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(154.1 mg, 0.30 mmol) 및 1,8-디아자비시클로운데크-7-엔(0.1 mL, 0.57 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/15)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-4-((5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메톡시)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(54.0 mg, 0.061 mmol, 28.9% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 873.4 [M+H]+
단계 5: 5-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-3-올
2,2,2-트리플루오로아세트산(3.0 mL) 중 6-(8-클로로-4-((5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메톡시)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(200.0 mg, 0.22 mmol)의 용액을 50°C에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼, XBridge Prep C18 OBD 컬럼19*15 mm 5 umC-0013; 이동상, A: 물 중 1 mmol TFA, B: ACN 및 NH4Cl%(7분 내 51%~73%); 검출기, UV 254 nm) 정제하여 5-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-3-올(36.8 mg, 0.073 mmol, 32% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 503.0 [M+H]+
실시예 9: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 10.03 - 9.70 (m, 1H), 8.60 - 8.35 (m, 1H), 8.15 - 7.84 (m, 2H), 7.19 (s, 1H), 7.16 - 7.09 (m, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.44 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.08 (s, 2H), 4.79 - 4.48 (m, 2H), 3.94 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 2.40 - 2.30 (m, 3H).
실시예 10: (S)-6-(8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로:
단계 1：에틸 (S)-2,2-디플루오로-5-옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트
질소하에서, 디클로로메탄(150.0 mL) 중 에틸 (S)-2,5-디옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(15.00 g, 71.0 mmol)의 용액을 0°C에서 10동안 교반하였다. 그런 다음, 디에틸아미노황 삼불화물(28.1 mL, 213.0 mmol)을 첨가하고 25°C에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 에탄올로 켄칭하고, 용매를 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 에틸 (S)-2,2-디플루오로-5-옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(7.29 g,31.2 mmol, 44% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 234.2 [M+H]+
단계 2: (S)-(2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올
테트라히드로퓨란(100.0 mL) 중 에틸 (S)-2,2-디플루오로-5-옥소테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(7.2 g, 30.8 mmol)의 용액을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 디이소부틸알루미늄 수소화물(13.10 g, 92.6 mmol, THF 중 1 M)을 첨가하고 70℃에서 30시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 황산 나트륨 십수화물(1.00 g)로 켄칭하였다. 생성된 용액을 여과하고, 여과액을 감압하에 농축하여 (S)-(2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(4.70 g, 조)을 백색 오일 형태로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 178.2 [M+H]+
단계 3：(S)-6-(8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(4.0 mL) 중 (S)-(2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(99.4 mg, 0.55 mmol) 및 수소화 나트륨(74.0 mg, 1.85 mmol, 60% 순도)의 용액을 실온에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 6-(8-클로로-3-플루오로-13-메틸-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-7-일)-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(250.0 mg, 0.35 mmol)을 첨가하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 용매를 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 그런 다음, 유기층을 취합하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-6-(8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(263.0 mg, 0.31 mmol, 88.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 825.3 [M+H]+
단계 4：(S)-6-(8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(4.0 mL) 중 (S)-6-(8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(250.0 mg, 0.30 mmol)의 용액을 50°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 감압하에 농축하여 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40/물 중 0.1% NH4Cl)로 정제하여 (S)-6-(8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(93.0 mg, 0.15 mmol, 52.5% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 585.0 [M+H]+
실시예 10: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 6.80 (s, 1H), 6.62 (d, J = 2.1 Hz, 2H), 6.39 - 6.21 (m, 1H), 4.57 - 4.32 (m, 2H), 4.08 - 3.68 (m, 4H), 3.28 - 3.17 (m, 4H), 3.08 - 2.84 (m, 2H), 2.66 - 2.49 (m, 1H), 2.36 - 2.09 (m, 5H), 1.96 - 1.83 (m, 1H), 1.71 (d, J = 34.1 Hz, 3H).
실시예 11: 6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)시클로프로필)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로:
단계 1: 에틸 1-(2-클로로피리딘-3-일)시클로프로판-1-카르복실레이트
N,N-디메틸포름아미드(25.0 mL) 중 에틸 2-(2-클로로-3-피리딜)아세테이트(1.00 g, 5.02 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(800.0 mg, 20.08 mmol, 60% 순도) 및 1,2-디브로모에탄(1.40 g, 7.48 mmol)을 0°C에서 첨가하였다. 그리고 용액을 0°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 염수로 세척하고, 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(4/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 그 결과, 에틸 1-(2-클로로피리딘-3-일)시클로프로판-1-카르복실레이트(660.0 mg, 2.92 mmol, 58.4% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 226.1 [M+H]+
단계 2: 1-(2-클로로피리딘-3-일)시클로프로판-1-카르복실산
에탄올(15.0 mL) 및 물(10.0 mL) 중 에틸 1-(2-클로로피리딘-3-일)시클로프로판-1-카르복실레이트(660.0 mg, 2.92 mmol) 및 수산화 나트륨(590.0 mg, 14.7 mmol)의 용액을 80°C에서 24시간 동안 교반하였다. 종료 후, 에탄올을 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 에틸아세테이트로 추출하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고, 진공하게 농축하여 1-(2-클로로피리딘-3-일)시클로프로판-1-카르복실산(570.0 mg, 2.87 mmol, 98.6% 수율)을 백색고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 198.0 [M+H]+
단계 3: tert-부틸 (1-(2-클로로피리딘-3-일)시클로프로필)카바메이트
2-메틸-2-프로판올(50.0 mL) 중 1-(2-클로로피리딘-3-일)시클로프로판-1-카르복실산(2.50 g, 12.62 mmol), 트리에틸아민(4.00 g, 39.54 mmol) 및 디페닐포스포릴 아지드(5.00 g, 18.16 mmol)의 혼합물을 85°C에서 16시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(7/3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 그 결과, tert-부틸 (1-(2-클로로피리딘-3-일)시클로프로필)카바메이트(3.00 g, 11.15 mmol, 88.2% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 269.1 [M+H]+
단계 4: tert-부틸 (2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)(1-(2-클로로피리딘-3-일)시클로프로필)카바메이트
N,N-디메틸포름아미드(50.0 mL) 중 tert-부틸 N-[1-(2-클로로-3-피리딜)시클로프로필]카바메이트(3.20 g, 11.90 mmol)의 혼합물에 수소화 나트륨(1.50 g, 37.58 mmol, 60% 순도)을 실온에서 첨가하고 1시간 동안 교반한 다음, (2-브로모에톡시)-tert-부틸디메틸실란(3.8 mL, 17.85 mmol)을 첨가하고 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(80/20)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 그 결과, tert-부틸 (2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)(1-(2-클로로피리딘-3-일)시클로프로필)카바메이트(4.00 g, 9.36 mmol, 78.7% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 427.1 [M+H]+
단계 5: tert-부틸 (2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)(1-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)시클로프로필)카바메이트
톨루엔(8.0 mL) 중 4-메톡시벤질아민(0.3 mL, 2.30 mmol), tert-부틸 N-[2-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시에틸]-n-[1-(2-클로로-3-피리딜)시클로프로필]카바메이트(500.0 mg, 1.15 mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(110.0 mg, 0.1 mmol), 1.1'-비나프틸-2.2'-디페밀 포스핀(150.0 mg, 0.23 mmol) 및 소듐 tert-부톡시드(340.0 mg, 3.51 mmol)의 혼합물을 100°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(4/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 그 결과, tert-부틸 (2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)(1-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)시클로프로필)카바메이트(560.0 mg, 1.06 mmol, 90.6% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 528.3 [M+H]+
단계 6: 2-((1-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)시클로프로필)아미노)에탄-1-올
tert-부틸 (2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)(1-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)시클로프로필)카바메이트(500.0 mg, 1.06 mmol) 및 염산(1,4-디옥산 중 1 M)(6.0 mL)의 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, LC-MS는 생성물이 형성되어 SM이 소모되었음을 보여주었다. 조 생성물(600 mg, 조)을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. LC-MS: (ESI, m/z): 314.2 [M+H]+
단계 7: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-((1-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)시클로프로필)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(4.0 mL) 중 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(300.0 mg, 0.49 mmol), 2-((1-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)시클로프로필)아미노)에탄-1-올(153.37 mg, 0.49 mmol) 및 수소화 나트륨(58.7 mg, 2.45 mmol, 60% 순도)의 용액을 65°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-((1-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)시클로프로필)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(300.0 mg, 0.33 mmol, 51.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 906.4 [M+H]+
단계 8: 6-(8-클로로-4-(1-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)시클로프로필)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(2.0 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-((1-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)시클로프로필)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(400.0 mg, 0.44 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(168.5 mg, 0.66 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(171.1 mg, 1.32 mmol)의 용액을 70°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(2/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-4-(1-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)시클로프로필)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(230.0 mg, 0.26 mmol, 58.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 888.4 [M+H]+
단계 9: 6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)시클로프로필)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(4.0 mL) 중 6-(8-클로로-4-(1-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)시클로프로필)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(220.0 mg, 0.2 mmol)의 용액을 70°C에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)시클로프로필)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(46.3 mg, 0.087 mmol, 35.3% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 528.1 [M+H]+.
실시예 11: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 7.91 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 7.4, 1.9 Hz, 1H), 7.19 (s, 3H), 6.77 (s, 2H), 6.55 (dd, J = 7.4, 4.8 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.61 (dd, J = 32.8, 11.4 Hz, 2H), 4.05 (d, J = 21.5 Hz, 2H), 2.35 (q, J = 2.1 Hz, 3H), 1.56 (s, 2H), 1.40 - 1.20 (m, 2H).
실시예 12: 6-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2(1H)-온
합성 경로:
단계 1：2-(((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)아미노)에탄-1-올
딘-스타크(dean-Stark) 분리기에서, 톨루엔(20.0 mL) 중 에탄올아민(1.3 mL, 21.78 mmol) 및 6-메톡시-2-피리딘카르발데히드(1.7 mL, 14.54 mmol)의 용액을 120°C에서 6시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용매를 진공하에 농축하였다. 이어서, 수소화붕소 나트륨(1.9 g, 52.54 mmol) 및 메틸 알코올(20.0 mL)을 반응 혼합물에 0°C에서 첨가하고 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)아미노)에탄-1-올(1.12 g, 6.12 mmol, 41.6% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 183.2 [M+H]+.
단계 2： 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(5.0 mL) 중 2-(((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)아미노)에탄-1-올(178.3 mg, 0.95 mmol) 및 수소화 나트륨(78.3 mg, 3.2 mmol, 60% 순도)의 용액을 60°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(400.0 mg, 0.65 mmol)을 첨가하고 60°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 희석된 염산으로 켄칭하였다. 용매를 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 그런 다음, 유기층을 취합하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/30)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(430.0 mg, 0.55 mmol, 81.6% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 775.2 [M+H]+.
단계 3: 6-(8-클로로-4-((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(5.0 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(420.0 mg, 0.52 mmol), 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(422.9 mg, 0.81 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(0.2 mL, 1.64 mmol)의 용액을 60°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-4-((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(317.0 mg, 0.41 mmol, 76.5% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 757.2 [M+H]+.
단계 4: 6-(8-클로로-4-((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(4.0 mL) 중 6-(8-클로로-4-((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(300.0 mg, 0.39 mmol)의 용액을 50°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 6-(8-클로로-4-((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(172.0 mg, 0.33 mmol, 84% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 517.1 [M+H]+
단계 5： 6-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2(1H)-온
1,2-디클로로에탄(3.0 mL) 중 6-(8-클로로-4-((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(150.0 mg, 0.29 mmol) 및 삼브롬화 붕소(726.9 mg, 2.92 mmol)의 용액을 80°C에서 10시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40/물 중 0.1%NH4Cl)로 정제하여 6-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2(1H)-온(68.2 mg, 0.13 mmol, 46.3% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 503.1 [M+H]+.
실시예 12: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.62 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.40 - 7.23 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.44 (s, 1H), 6.20 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 6.06 (s, 1H), 4.96 - 4.78 (m, 2H), 4.75 - 4.60 (m, 2H), 4.07 - 3.90 (m, 2H), 2.34 (d, J = 2.4 Hz, 3H).
실시예 13: 3-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판니트릴
합성 경로
단계 1: 3-((2-((7-브로모-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)에틸)아미노)프로판아미드
테트라히드로퓨란(40 mL) 중 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(1.50 g, 5.41 mmol)의 용액을 65°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 수소화 나트륨(0.65 g, 16.22 mmol, 60% 순도) 및 3-(2-히드록시에틸아미노)프로판아미드(1.43 g, 10.82 mmol)를 첨가하고 65°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 염산(1 N)을 사용하여 반응 혼합물을 pH 7~8로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(1/4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((2-((7-브로모-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)에틸)아미노)프로판아미드(1.50 g, 3.85 mmol, 71.2% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 389.6 [M+H]+.
단계 2: 3-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판아미드
아세토니트릴(20 mL) 중 3-((2-((7-브로모-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)에틸)아미노)프로판아미드(1.50 g, 3.85 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(1.7 g, 11.11 mmol)의 용액을 25°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(2.40 g, 4.66 mmol)를 첨가하고 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 종료후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판아미드(980.0 mg, 2.63 mmol, 68.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 371.6 [M+H]+.
단계 3: 3-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판니트릴
질소하에서, 디클로로메탄(15 mL) 중 3-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판아미드(980.0 mg, 2.63 mmol)의 용액에 25°C에서 버지스(Burgess) 시약(1.25 g, 5.27 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 25°C에서 시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판니트릴(900.0 mg, 2.54 mmol, 96.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 353.6 [M+H]+.
단계 4: 3-(8-클로로-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판니트릴
질소하에서 1,4-디옥산(4 mL) 중 3-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판니트릴(600.0 mg, 1.70 mmol), 아세트산 칼륨(333.0 mg, 3.3 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(124.1 mg, 0.17 mmol) 및 비스(피나콜라토)디보론(1292.6 mg, 5.09 mmol)의 용액을 80°C에서 12 시간 동안 첨가하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 반응 혼합물을 석유 에테르로 희석하였다. 여과 후, 조 생성물(800 mg, 조)을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. LC-MS: (ESI, m/z): 400.7 [M+H]+.
단계 5： 3-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판니트릴
질소하에서, 아세토니트릴(10.0 mL) 및 물(2.0 mL) 중 3-(8-클로로-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판니트릴(800 mg, 조), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(2.7 mg, 0.01 mmol), 불화 칼륨(6.8 mg, 0.12 mmol) 및 6-브로모-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(135.0 mg, 0.53 mmol)의 용액을 80°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄 메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B:ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 26 B에서 56 B로; 254 nm; RT1: 9.50으로 정제하여 3-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판엔니트릴(48.9 mg, 0.11 mmol, 20.6% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 449.1 [M+H]+.
실시예 13: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6,ppm) δ 8.47 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.48 - 6.41 (m, 1H), 4.64 (d, J = 12.6, 5.1, 2.6 Hz, 2H), 4.22 - 3.93 (m, 4H), 2.98 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.35 (d, J = 2.1 Hz, 3H)
실시예 14: 6-(8-클로로-4-(2-(옥세탄-3-일)에틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 6-(8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(2 mL) 중 6-(8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(200.0 mg, 0.31 mmol)의 용액을 50°C에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(50%)을 사용한 역상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(80.0 mg, 0.20 mmol, 64.3% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 395.7 [M+H]+.
단계 2： 6-(8-클로로-4-(2-(옥세탄-3-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
N,N-디메틸포름아미드(1 mL) 중 6-(8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(50.0 mg, 0.12 mmol) 및 탄산 세슘(82.3 mg, 0.24 mmol)의 용액을 25°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-(2-요오도에틸)옥세탄(53.5 mg, 0.24 mmol)을 첨가하고 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하고, 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기 조건하에서: 컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A:물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B:ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 23 B에서 53 B로, 254 nm; RT1:6.5으로 정제하여 6-(8-클로로-4-(2-(옥세탄-3-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(26.5 mg, 0.05 mmol, 43.7% 수율)을 수득하였다. (ESI, m/z): 480.1 [M+H]+.
실시예 14: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 8.40 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.48 - 6.43 (m, 1H), 4.69 - 4.53 (m, 4H), 4.32 (d, J = 6.0, 1.6 Hz, 2H), 4.00 - 3.86 (m, 2H), 3.90 - 3.69 (m, 2H), 2.98 (d, J = 8.1, 6.3 Hz, 1H), 2.36 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 2.10 - 1.99 (m, 2H).
실시예 15: 6-(4-(1-(1H-이미다졸-5-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-4-일)에탄-1-온
디클로로메탄(50 mL) 중 1-(1H-이미다졸-4-일)에타논(4.00 g, 36.30 mmol) 및 탄산 세슘(23.60 g, 72.60 mmol)의 용액을 25°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(18.10 g, 108.90 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 12시간 동안 교반하였다. 종료 후, 여과 후, 여액을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-4-일)에탄-1-온(3.60 g, 14.93 mmol, 41.2% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 241.4 [M+H]+.
단계 2: 2-((1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-4-일)에틸)아미노)에탄-1-올
테트라히드로퓨란(30 mL) 중 1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-4-일)에탄-1-온(3.60 g, 14.93 mmol) 및 2-아미노에탄올(1.8 mL, 29.8 mmol) 및 티타늄 이소프로폭시드(5.32 g, 18.76 mmol)의 용액을 70°C에서 12시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 나트륨 보로하이드라이드(0.71 g, 18.76 mmol)를 첨가하고 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-((1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-4-일)에탄-1-온(1.00 g, 3.50 mmol, 56.1% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 286.5 [M+H]+.
단계 3： 7-브로모-6-클로로-5-(2-((1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-4-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(15 mL) 중 2-((1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-4-일)에틸)아미노)에탄-1-올(1.23 g, 4.30 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(345.9 mg, 8.60 mmol, 60% 순도)을 0°C에서 첨가하였다. 그런 다음, 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(600.0 mg, 2.10 mmol)을 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 생성된 용액을 65°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 잔류물을 디클로로메탄으로 용해시키고 염산으로 pH를 7~8로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(1/4)을 사용한 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-6-클로로-5-(2-((1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-4-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(840.0 mg, 1.54 mmol, 71.6% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 542.1 [M+H]+.
단계 4: 9-브로모-8-클로로-4-(1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-5-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
아세토니트릴(10 mL) 중 7-브로모-6-클로로-5-(2-((1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-4-일)에틸)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(820.0 mg, 1.51 mmol)의 용액에 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(689.8 mg, 4.53 mmol) 및 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(942.8 mg, 1.82 mmol)를 25°C에서 첨가하였다. 그런 다음, 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-8-클로로-4-(1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-5-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(520.0 mg, 0.99 mmol, 65.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 524.9 [M+H]+.
단계 5： (8-클로로-4-(1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-5-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산
질소하에서, 1,4-디옥산(3 mL) 중 9-브로모-8-클로로-4-(1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-5-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(300.0 mg, 0.53 mmol), 아세트산 칼륨(112.1 mg, 1.12 mmol), 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 디클로로메탄 착물(46.67 mg, 0.06 mmol) 및 비스(피나콜라토)디보론(435.4 mg, 1.73 mmol)의 용액을 80°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 여과 후, 여과액을 진공하에 농축하여, 다음 단계에서 정제없이 직접 사용하게 될 조 생성물(500 mg 조)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 489.8 [M+H]+.
단계 6： 6-(8-클로로-4-(1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-5-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 아세토니트릴(5 mL) 및 물(1 mL) 중 6-브로모-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(160.0 mg, 0.6 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(44.0 mg, 0.06 mmol), 불화 칼륨(72.9 mg, 1.22 mmol) 및 (8-클로로-4-(1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-5-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산(800.0 mg, 조)의 용액을 80°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-4-(1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-5-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(210.0 mg, 0.33 mmol, 54% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 620.1 [M+H]+.
단계 7： 6-(4-(1-(1H-이미다졸-5-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
디클로로메탄(1 mL) 및 트리플루오로아세트산(1 mL) 중 6-(8-클로로-4-(1-(1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-이미다졸-5-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(200.0 mg, 0.31 mmol)의 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH OBD 컬럼 30*150 mm 5 um, n; 이동상 A: 물(0.1%FA), 이동상 B:ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 6 B에서 19 B로; 254/220 nm; RT1:7.15,10.35로 정제하여 6-(4-(1-(1H-이미다졸-5-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(9.4 mg, 0.01 mmol, 5.9% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 490.1 [M+H]+.
실시예 15:.1H NMR (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 12.06 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.17 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 6.78 (s, 2H), 6.45 (d, 2H), 4.56 - 4.35 (m, 2H), 3.60 (d, 2H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 1.52 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
실시예 16: 2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판-1-올
합성 경로
단계 1: 2-[[2-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시-1-메틸-에틸]아미노]에탄올
디클로로메탄(50 mL) 중 1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-프로판온(4.50 g, 23.89 mmol) 및 황산 나트륨(6.79 g, 47.79 mmol)의 용액을 25°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 2-아미노에탄올(1.46 g, 23.89 mmol)을 첨가하고 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. 그런 다음, 메틸 알코올(0.5 mL) 중 나트륨 보로하이드라이드(0.81 g, 21.39 mmol) 및 잔류물을 25°C에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 염산을 사용하여 반응 혼합물을 PH 7~8로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(5/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[2-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시-1-메틸-에틸]아미노]에탄올(2.9 g, 12.42 mmol, 63.9% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2: 7-브로모-5-(2-((1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판-2-일)아미노)에톡시)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(5.0 mL) 중 2-[[2-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시-1-메틸-에틸]아미노]에탄올(841.2 mg, 3.60 mmol) 및 수소화 나트륨(288.3 mg, 7.20 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(500.0 mg, 1.80 mmol)을 첨가하고 0°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 잔류물을 디클로로메탄으로 용해시키고, 염산을 사용하여 pH를 7~8로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(5:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-5-(2-((1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판-2-일)아미노)에톡시)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(490.0 mg, 0.99 mmol, 55.4% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 490.9 [M+H]+.
단계 3： 9-브로모-4-(1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
아세토니트릴(5.0 mL) 중 7-브로모-5-(2-((1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판-2-일)아미노)에톡시)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(470.0 mg, 0.96 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(437.2 mg, 2.87 mmol)의 용액을 25°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(597.7 mg, 1.15 mmol)를 첨가하고 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-4-(1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(340.0 mg, 0.71 mmol, 75.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 472.9 [M+H]+.
단계 4: 4-(1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판-2-일)-8-클로로-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
질소하에서, 1,4-디옥산(3.0 mL) 중 9-브로모-4-(1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(340.0 mg, 0.72 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(547.7 mg, 2.16 mmol), 아세트산 칼륨(141.1 mg, 1.4 mmol) 및 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(59.4 mg, 0.07 mmol)의 용액을 80°C에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 반응 혼합물을 석유 에테르로 희석하였다. 여과 후, 고체는 다음 단계에서 정제없이 직접 사용하게 될 조 생성물(600 mg, 조)이었다. LC-MS: (ESI, m/z): 520.2 [M+H]+.
단계 5： 6-(4-(1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 아세토니트릴(0.5 mL) 및 물(0.1 mL) 중 4-(1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판-2-일)-8-클로로-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(600.0 mg, 조), 6-브로모-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(250.0 mg, 0.98 mmol), 불화 칼륨(113.9 mg, 1.96 mmol) 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(68.8 mg, 0.1 mmol)의 용액을 80°C에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-(1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(280.0 mg, 0.49 mmol, 50.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 568.1 [M+H]+.
단계 6： 2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판-1올
테트라히드로퓨란(3.0 mL) 중 6-(4-(1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(240.0 mg, 0.43 mmol) 및 테트라부틸암모늄 플루오라이드(0.84 mL, 0.86 mmol)의 용액을 25°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄 메탄올(5/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 23 B에서 53 B로; 254 nm; RT1: 8.5로 정제하여 2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)프로판엔니트릴(56.0 mg, 0.12 mmol, 29.2% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 454.1 [M+H]+.
실시예 16: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 8.37 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.46 - 6.39 (m, 1H), 5.33 - 5.16 (m, 1H), 4.84 (d, J = 5.4, 1.9 Hz, 1H), 4.73 - 4.44 (m, 2H), 3.87 - 3.64 (m, 2H), 3.67 - 3.48 (m, 2H), 2.37 - 2.29 (m, 3H), 1.16 (d, J = 6.8, 1.9 Hz, 3H).
실시예 17: (R)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-(1-에톡시비닐)-5-니트로피리딘
테트라히드로퓨란(500 mL) 중 3-브로모-5-니트로피리딘(25.00 g, 123.16 mmol), 트리부틸(1-에톡시비닐)스탄난(88.96 g, 246.32 mmol) 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(8.65 g, 12.32 mmol)의 용액을 60°C에서 6시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-(1-에톡시비닐)-5-니트로피리딘(130 g, 66.94 mmol, 54.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 195.0 [M+H]+
단계 2: 3-(1-에톡시비닐)-5-니트로피리딘
테트라히드로퓨란(150 mL) 중 3-(1-에톡시비닐)-5-니트로-피리딘(13.70 g, 70.55 mmol) 및 염산(25.72 g, 705.49 mmol)의 용액을 50°C에서 3시간 동안 교반하였다.　종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-(1-에톡시비닐)-5-니트로피리딘(10.00 g, 60.19 mmol, 85.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 167.0 [M+H]+
단계 3: 2-((1-(5-니트로피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(50 ml) 중 2-아미노에탄올(8.7 ml, 144.47 mmol), 1-(5-니트로-3-피리딜)에탄온(20.0 g, 120.39 mmol) 및 아세트산(0.69 ml, 12.04 mmol)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(22.70 g, 361.16 mmol)을 첨가하고 0℃에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:50)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-((1-(5-니트로피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올(12.10 g, 57.28 mmol, 47.6% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 212.1 [M+H]+
단계 4: (R)-2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올 및 (S)-2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올
수소하에서, 에틸 아세테이트(100 mL) 중 2-((1-(5-니트로피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올(7.00 g, 33.14 mmol) 및 중질 증류액(10.00 g, 331.41 mmol)의 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 여과하고, 여과액을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 4.2 g의 조 물질을 수득하였다. 생성물을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: EnantioPak A1-5, 2.12*25 cm, 5 μm; 이동상 A: CO2, 이동상 B: MEOH(0.1% 2 M NH3-MEOH); 유량: 50 mL/분; 구배: 등용매 17% B; 컬럼 온도(℃): 35; 배압(바): 100; 파장: 220 nm; RT1(분): 4.54; RT2(분): 6.02; 샘플 용매: MeOH-----분취용; 주입 용량: 0.4 mL; 실행 수: 150으로 정제하여 (R)-2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올(1.70 g, 9.34 mmol, 28.2% 수율)을 황색 오일로서 및 (S)-2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올(1.50 g, 8.24 mmol, 24.8% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계5: (R)-5-(2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(3.0 mL) 중 (R)-2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올(106.4 mg, 0.58 mmol) 및 수소화 나트륨(58.7 mg, 1.44 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(300.0 mg, 0.58 mmol)을 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 잔류물을 디클로로메탄으로 용해시키고, 1 N 염산을 사용하여 pH를 7~8로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-5-(2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(280.0 mg, 0.36 mmol, 73.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 774.2 [M+H]+.
단계 6： (R)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(3.0 mL) 중 (R)-5-(2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(270.0 mg, 0.35 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(136.0 mg, 1.05 mmol), 및 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(115.4 mg, 0.41 mmol)의 용액을 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(190.0 mg, 0.25 mmol, 72% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 756.2 [M+H]+.
단계 7： (R)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2.0 mL) 중 (R)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(180.0 mg, 0.24 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 잔류물을 디클로로메탄으로 용해시키고, N,N-디이소프로필에틸아민을 사용하여 pH를 7~8로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(1/1)을 갖는 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(0.1% FA), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 기울기: 8분 내 11% B 내지 27% B, 27% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 6.12로 정제하여 (R)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(50.1 mg, 0.09 mmol, 40.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 516.1 [M+H]+.
실시예 17: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.93 - 7.73 (m, 2H), 7.19 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.63 - 6.49 (m, 1H), 6.45 (s, 1H), 5.38 (s, 1H), 4.64 - 4.36 (m, 2H), 3.70 (dt, J = 15.7, 7.7 Hz, 1H), 3.56 - 3.38 (m, 2H), 2.35 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 1.59 (dd, J = 7.1, 2.3 Hz, 3H).
실시예 18: (S)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1： (S)-5-(2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(3.0 mL) 중 (S)-2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올(266.0 mg, 1.45 mmol) 및 수소화 나트륨(97.8 mg, 2.40 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(300.0 mg, 0.59 mmol)을 첨가하고 65°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 잔류물을 디클로로메탄으로 용해시키고, 염산을 사용하여 pH를 7~8로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-5-(2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(310.0 mg, 0.40 mmol, 81.8% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 774.2 [M+H]+.
단계 2： (S)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(3.0 mL) 중 (S)-5-(2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(310.0 mg, 0.4 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(182.8 mg, 1.23 mmol)의 용액을 25°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(250.0 mg, 0.45 mmol)를 첨가하고 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(160.0 mg, 0.21 mmol, 52.8% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 756.2 [M+H]+.
단계 3： (S)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2.0 mL) 중 (S)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(160.0 mg, 0.25 mmol)의 용액을 50°C에서 6시간 동안 교반하였다. 종료 후, 잔류물을 디클로로메탄으로 용해시키고, N,N-디이소프로필에틸아민을 사용하여 pH를 7~8로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 um; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 25 mL/분; 구배: 7분 내 48 B에서 60 B로, 254 nm; RT1:6.57으로 정제하여 (S)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(51.8 mg, 0.10 mmol, 47.5% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 516.2 [M+H]+.
실시예 18: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6,ppm) δ 8.39 (s, 1H), 7.88 - 7.79 (m, 1H), 7.52 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.64 (s, 2H), 6.59 - 6.49 (m, 1H), 6.36 - 6.30 (m, 2H), 5.65 (d, J = 21.6 Hz, 2H), 4.50 - 4.31 (m, 1H), 4.25 - 4.11 (m, 1H), 3.64 - 3.47 (m, 1H), 3.34 - 3.25 (m, 1H), 2.23 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 1.43 (d, J = 6.0 Hz, 3H)
실시예 19: (S)-2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
합성 경로
단계 1: (S)-2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((2-브로모피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
N,N-디메틸포름아미드(3.0 mL) 중 (S)-2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(300.0 mg, 0.44 mmol) 및 수소화 나트륨(35.6 mg, 0.88 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 2-브로모-3-(브로모메틸)피리딘(167.2 mg, 0.33 mmol)을 첨가하고 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 잔류물을 디클로로메탄으로 용해시키고, 염산을 사용하여 pH를 7~8로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(0.1% FA), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 기울기: 10분 내 65% B 내지 83% B, 83% B; 파장: 254 nm; RT1(분): 7.55로 정제하여 (S)-2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((2-브로모피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(170.0 mg, 0.55 mmol, 60% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 845.1 [M+H]+.
단계 2： (S)-2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-4-((2-((디페닐메틸렌)아미노)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
질소하에서, 톨루엔(3 mL) 중 (S)-2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((2-브로모피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(150.0 mg, 0.18 mmol), 디페닐메탄이민(0.04 mL, 0.27 mmol), 1.1'-비나프틸-2.2'-디페밀 포스핀(22.1 mg, 0.04 mmol) 및 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(16.2 mg, 0.02 mmol)의 용액에 나트륨 tert-부톡시드(34.1 mg, 0.35 mmol)를 100°C에서 첨가하였다. 생성된 용액을 100°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-4-((2-((디페닐메틸렌)아미노)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(65.0 mg, 0.15 mmol, 50.1% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 945.4 [M+H]+.
단계 3： (S)-2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
아세트산(0.5 mL), 테트라히드로퓨란(0.5 mL) 및 물(0.1 mL) 중 (S)-2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-4-((2-((디페닐메틸렌)아미노)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(90.0 mg, 0.10 mmol)의 용액을 50°C에서 1.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. 트리플루오로아세트산(0.5 mL) 중의 조 생성물을 50°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄 메탄올(5/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 34% B에서 64% B로, 64% B; 파장: 254 nm; RT1(분): 6.5로 정제하여 (S)-2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(11.1 mg, 0.02 mmol, 21.6% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 541.1 [M+H]+.
실시예 19: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6,ppm) δ 8.16 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 4.9, 1.5 Hz, 1H), 7.39 - 7.28 (m, 1H), 6.96 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 6.58 - 6.47 (m, 1H), 6.43 (s, 1H), 5.97 (s, 2H), 5.11 - 4.87 (m, 2H), 4.58 - 4.44 (m, 1H), 4.33 - 4.15 (m, 2H), 2.96 - 2.82 (m, 1H), 2.81 - 2.67 (m, 1H), 2.34 (d, J = 2.3 Hz, 3H).
실시예 20: 6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-(2,2,2-트리플루오로아세틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(10.0 mL) 중 tert-부틸 피리딘-2-일카바메이트(1.00 g, 5.15 mmol), N,N,N',N'-테트라메틸에틸렌디아민(1.62 g, 13.90 mmol) 용액에 n-부틸리튬(5.12 mL, 12.87 mmol, 헥산 중 2.5 M)을 -50°C에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0°C에서 2시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 2,2,2-트리플루오로-1-모르폴리노에탄-1-온(1.88 g, 10.30 mmol)을 첨가하고 -50°C에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 암모니아 클로라이드 용액으로 켄칭하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (3-(2,2,2-트리플루오로아세틸)피리딘-2-일)카바메이트(660.0 mg, 2.27 mmol, 44.2% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 291.2 [M+H]+.
단계 2： 1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온
디클로로메탄(5 mL) 및 트리플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 (3-(2,2,2-트리플루오로아세틸)피리딘-2-일)카바메이트(600.0 mg, 2.07 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하고, 탄산 나트륨으로 pH 7~8로 조정하고, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(2/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온(390.0 mg, 1.78 mmol, 99.7% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 191.1 [M+H]+.
단계 3：2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에틸)아미노)에탄-1-올
메탄올(20.00 mL) 중 -(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온(2.00 g, 10.52 mmol), 2-아미노에탄-1-올(1.27 g, 21.04 mmol) 및 테트라프로필 티타네이트(8.46 g, 31.56 mmol)의 용액을 80°C에서 16시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(1.32 g, 21.04 mmol)을 첨가하고 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(1/10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에틸)아미노)에탄-1-올(1.00 g, 4.25 mmol, 40.4% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 235.2 [M+H]+.
단계 4： 5-(2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에틸)아미노)에탄-1-올(383.7 mg, 1.63 mmol) 및 수소화 나트륨(97.8 mg, 2.45 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(500.0 mg, 0.82 mmol)을 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 염산을 사용하여 반응 혼합물을 pH 7~8로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-(2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(300.0 mg, 0.36 mmol, 44.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 828.2 [M+H]+.
단계 5： 6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(1.50 mL) 중 5-(2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(120.0 mg, 0.14 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(56.5 mg, 0.43 mmol), 및 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(73.6 mg, 0.29 mmol)의 용액을 70°C에서 48시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(28.0 mg, 0.03 mmol, 23.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 810.2 [M+H]+.
단계 6： 6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(0.5 mL) 중 6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(28.0 mg, 0.03 mmol)의 용액을 25°C에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(12/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 27 mg의 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 um; 이동상 A: 물(10 mmoL/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 25 mL/분; 구배: 7분 내 48 B에서 60 B로, 254 nm; RT1:6.57으로 정제하여 6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)-2,2,2-트리플루오로에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(4.0 mg, 0.007 mmol, 0.5% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 569.9 [M+H]+.
실시예 20: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 8.65 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.10 (dt, J = 5.0, 1.6 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.51 - 7.28 (m, 2H), 6.84 - 6.66 (m, 3H), 6.47 (s, 1H), 5.90 (d, J = 19.1 Hz, 2H), 4.69 - 4.33 (m, 2H), 3.87 - 3.48 (m, 2H), 2.36 (s, 3H).
실시예 21: 6-(8-클로로-4-(6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 2-((6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(20 mL) 중 5,6-디히드로시클로펜타[c]피리딘-7-온(2.0 g, 15.02 mmol), 2-아미노에탄올(2.7 mL, 45.06 mmol) 및 티타늄 테트라이소프로판올레이트(12.8 g, 45.06 mmol)의 용액을 80°C에서 3시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 나트륨 보로하이드라이드(1.1 g, 30.04 mmol)를 첨가하고 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일아미노)에탄올(1.1 g, 6.12 mmol, 40.8% 수율)를 흑색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):179.1 [M+H]+.
단계 2: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-((6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(2 mL) 중 2-(6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일아미노)에탄올(232.6 mg, 1.31 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(156.6 mg, 3.92 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 0°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(400.0 mg, 0.65 mmol)을 첨가하고 65°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 염산을 사용하여 반응 혼합물을 pH = 7로 조정하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-((6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(400.0 mg, 0.50 mmol, 77.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 771.3 [M+H]+.
단계 3: 6-(8-클로로-4-(6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(3 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-((6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(350.0 mg, 0.45 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(0.2 mL, 1.82 mmol)의 용액에 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로포스페이트(307.0 mg, 0.59 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하고, 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 6-(8-클로로-4-(6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(280.0 mg, 0.31 mmol, 70.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):753.2 [M+H]+.
단계 4: 6-(8-클로로-4-(6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(4 mL) 중 6-(8-클로로-4-(6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(150.0 mg, 0.20 mmol)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 혼합물을 진공하에 농축하고, 분취용-HPLC로 하기 조건하에서: (컬럼: YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*250 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 15% B에서 33% B로; 254/220 nm; RT: 10.38분) 정제하여 6-(8-클로로-4-(6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(9.5 mg, 0.017 mmol, 8.9% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):513.2 [M+H]+.
실시예 21: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.50 - 8.42 (m, 3H), 7.37 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.90 - 6.83 (m, 1H), 6.74 (s, 2H), 6.44 (s, 1H), 4.63 - 4.41 (m, 2H), 3.68 - 3.45 (m, 2H), 3.07 - 2.92 (m, 2H), 2.57 - 2.47 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.13 - 1.03 (m, 1H).
실시예 22: 6-(8-클로로-4-(이소티아졸-5-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 2-((이소티아졸-5-일메틸)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(10 mL) 중 이소티아졸-5-카르발데히드(2.00 g, 17.68 mmol), 2-아미노에탄올(2 mL, 35.35 mmol) 및 아세트산(0.1 mL, 1.77 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(2.22 g, 35.35 mmol)을 첨가하고 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물(0.5 mL)로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-((이소티아졸-5-일메틸)아미노)에탄-1-올(870.3 mg, 5.10 mmol, 28.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 159.1 [M+H]+.
단계 2: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-((이소티아졸-5-일메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(4 mL) 중 2-((이소티아졸-5-일메틸)아미노)에탄-1-올(206.4 mg, 1.31 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(156.6 mg, 3.92 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(400.0 mg, 0.65 mmol)을 첨가하고 65°C에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-((이소티아졸-5-일메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(690.0 mg, 0.63 mmol, 96.8% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 751.2 [M+H]+.
단계 3: 6-(8-클로로-4-(이소티아졸-5-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(6 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-((이소티아졸-5-일메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(660.0mg, 0.88mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(0.5 mL, 3.51 mmol)의 용액에 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로포스페이트(594.3 mg, 1.14 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-4-(이소티아졸-5-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(229.0 mg, 0.29 mmol, 33.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):733.2 [M+H]+.
단계 4: 6-(8-클로로-4-(이소티아졸-5-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(0.5 mL) 중 6-(8-클로로-4-(이소티아졸-5-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(279.0 mg, 0.38 mmol)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 메탄올; 유량: 25 mL/분; 구배: 7분 내 60% B에서 85% B로; 254 nm; RT: 5.6분) 정제하여 6-(8-클로로-4-(이소티아졸-5-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(23.7 mg, 0.04 mmol, 12.6% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):493.1 [M+H]+.
실시예 22: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.60 (s, 1H), 8.48 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.78 (s, 2H), 6.46 (s, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.67 - 4.53 (m, 2H), 4.13 - 3.94 (m, 2H), 2.36 (d, J = 1.5 Hz, 3H).
실시예 23: 4-(8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-아민
합성 경로
단계 1: 8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
질소하에서, 1,4-디옥산(6 mL) 중 9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(986.0 mg, 2.09 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란)(2653.7 mg, 10.40 mmol), 아세트산 칼륨(615.3 mg, 6.27 mmol) 및 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(155.0 mg, 0.21 mmol)의 용액을 100°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 혼합물을 여과하고 디클로로메탄으로 세척하였다. 여과액을 감압하에 농축하였다. 조 물질(1.2 g, 조)을 추가의 정제없이 직접 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z):519.2 [M+H]+.
단계 2: 4-(8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-아민
질소하에서, 아세토니트릴(5 mL) 및 물(1 mL) 중 8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(900.0 mg, 조), 4-브로모-1,3-벤조티아졸-2-아민(139.1 mg, 0.61 mmol), 불화 칼륨(70.5 mg, 1.21 mmol) 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(42.7 mg, 0.06 mmol)의 용액을 80°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)을 사용한 분취용 TLC로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 32% B에서 62% B로; 254 nm; RRT1: 6.5분) 정제하여 4-(8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-아민(48.1 mg, 0.085 mmol, 14.1% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 541.2 [M+H]+.
실시예 23: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.70 (dd, J = 6.7, 2.5 Hz, 1H), 7.59 (s, 2H), 7.13 - 7.06 (m, 3H), 5.26 (d, J = 55.1 Hz, 1H), 4.57 (dd, J = 5.8, 2.8 Hz, 2H), 4.05 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 3.93 (dd, J = 9.7, 7.1 Hz, 3H), 3.29 (s, 3H), 3.11 - 3.08 (m, 2H), 3.00 (s, 1H), 2.86 - 2.78 (m, 1H), 2.14 - 1.99 (m, 3H), 1.84 - 1.76 (m, 3H)。
실시예 24: 6-(8-클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 7-브로모-6-클로로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 2-(메틸아미노)에탄올(1.38 g, 18.38 mmol) 및 수소화 나트륨(735.1 mg, 18.3 mmol, 60% 순도)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(1.7 g, 6.13 mmol)을 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 1 M 염산(5 mL)으로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-6-클로로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(2.10 g, 5.49 mmol, 89.7% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 332.1 [M+H]+
단계 2: 9-브로모-8-클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
아세토니트릴(10 mL) 중 7-브로모-6-클로로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(2.10 g, 6.31 mmol) 및 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로포스페이트(4.93 g, 9.47 mmol)의 용액에 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(2.88 g, 18.94 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 50-54/물 중 0.1% FA)로 정제하여 9-브로모-8-클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(1.50 g, 4.61 mmol, 73.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 314.0 [M+H]+
단계 3: 8-클로로-4-메틸-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
질소하에서 1,4-디옥산(8 mL) 중 9-브로모-8-클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(800.0 mg, 2.5 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(1.29 g, 5.09 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(188.6 mg, 0.2 mmol) 및 아세트산 칼륨(498.4 mg, 5.0 mmol)의 혼합물을 100°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 여과하고 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여과액을 감압하에 농축하였다. 조 생성물(1.2 g, 조)을 추가의 정제없이 직접 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 362.1 [M+H]+
단계 4: 6-(8-클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 아세토니트릴(10 mL) 및 물(2 mL) 중 8-클로로-4-메틸-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(2.20 g, 조), 6-브로모-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(620.6 mg, 2.4 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(427.0 mg, 0.6 mmol) 및 불화 칼륨(705.6 mg, 12.1 mmol)의 혼합물을 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 40-45/물 중 0.1% TFA)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 33B에서 63B로; 254 nm; RT: 6.33분) 정제하여 6-(8-클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(77.6 mg, 0.1 mmol, 3.1% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 410.1 [M+H]+
실시예 24: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.43 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.78 (s, 2H), 6.48 - 6.42 (m, 1H), 4.72 - 4.52 (m, 2H), 4.06 - 3.85 (m, 2H), 3.31 (s, 3H), 2.40 - 2.32 (m, 3H).
실시예 25: 5-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)티아졸-4-아민
합성 경로
단계 1: 2-(((4-브로모티아졸-5-일)메틸)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(15 mL) 중 2-아미노에탄올(200 mg, 3.27 mmol)의 혼합물에 아세트산(2.00 g, 33.31 mmol) 및 4-브로모-1,3-티아졸-5-카르발데히드(500 mg, 2.60 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(325 mg, 5.17 mmol)을 실온에서 첨가하고 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(93:7)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(((4-브로모티아졸-5-일)메틸)아미노)에탄-1-올(550 mg, 2.31 mmol, 89.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 236.8 [M+H]+
단계 2: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-(((4-브로모티아졸-5-일)메틸)아미노)에톡시)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 2-(((4-브로모티아졸-5-일)메틸)아미노)에탄-1-올(240 mg, 1.01 mmol), 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(400 mg, 0.65 mmol) 및 수소화 나트륨(80 mg, 2.00 mmol, 60% 순도)의 혼합물을 65°C에서 4시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-(((4-브로모티아졸-5-일)메틸)아미노)에톡시)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(460 mg, 0.55 mmol, 84.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 831.1 [M+H]+.
단계 3: 6-(4-((4-브로모티아졸-5-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(8 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-(((4-브로모티아졸-5-일)메틸)아미노)에톡시)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(460 mg, 0.55 mmol)의 혼합물에 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(258 mg, 1.69 mmol) 및 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로포스페이트(450 mg, 0.86 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-((4-브로모티아졸-5-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(400.0 mg, 0.49 mmol, 88.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 813.1 [M+H]+
단계 4: 6-(8-클로로-4-((4-((디페닐메틸렌)아미노)티아졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
톨루엔(8 mL) 중 6-(4-((4-브로모티아졸-5-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(400 mg, 0.49 mmol), 벤조페논 이민(160 mg, 0.88 mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(50 mg, 0.05 mmol), 1.1'-비나프틸-2.2'-디페밀 포스핀(62 mg, 0.10 mmol) 및 나트륨 tert-부톡시드(100 mg, 1.04 mmol)의 혼합물을 100°C에서 2시간 동안 질소하에서 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-4-((4-((디페닐메틸렌)아미노)티아졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(260.0 mg, 0.28 mmol, 57.9% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 912.3 [M+H]+
단계 5: 5-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)티아졸-4-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 6-(8-클로로-4-((4-((디페닐메틸렌)아미노)티아졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(200 mg, 0.22 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 반응 혼합물을 포화 중탄산 나트륨 용액으로 pH 8로 조정하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 31% B에서 44% B로, 44% B; 파장: 220/254 nm; RT: 7.87분으로 정제하였다. 그 결과로서, 5-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)티아졸-4-아민(22.7 mg, 0.04 mmol, 20.4% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 507.9 [M+H]+.
실시예 25: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.64 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.78 (s, 2H), 6.45 (s, 1H), 5.65 (s, 2H), 5.04 (d, J = 2.1 Hz, 2H), 4.61 - 4.59 (m, 1H), 4.56 - 4.55 (m, 1H), 3.95 - 3.91 (m, 2H), 2.36 - 2.35 (m, 3H).
실시예 26: 5-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리미딘-4-아민
합성 경로
단계 1: 2-(((4-아미노피리미딘-5-일)메틸)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(10 mL) 중 4-아미노피리미딘-5-카르발데히드(1.0 g, 8.12 mmol), 2-아미노에탄올(1.0 g, 16.37 mmol) 및 아세트산(100.0 mg, 1.67 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(1.02 g, 16.23 mmol)을 첨가하고 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(((4-아미노피리미딘-5-일)메틸)아미노)에탄-1-올(350.0 mg, 2.08 mmol, 25.6% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 169.0 [M+H]+
단계 2: 5-(2-(((4-아미노피리미딘-5-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 2-(((4-아미노피리미딘-5-일)메틸)아미노)에탄-1-올(164.0 mg, 0.98 mmol) 및 수소화 나트륨(58.0 mg, 1.45 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 교반하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(300.0 mg, 0.49 mmol)을 0oC에서 첨가하고 65°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하고, 용매를 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-(2-(((4-아미노피리미딘-5-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(220 mg, 0.29 mmol, 59.1% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 761.2 [M+H]+
단계 3: 5-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리미딘-4-아민
클로로포름(3 mL) 중 5-(2-(((4-아미노피리미딘-5-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(130.0 mg, 0.17 mmol), 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(104.0 mg, 0.20 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데칸-7-엔(78.0 mg, 0.51 mmol)의 용액을 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리미딘-4-아민(80.0 mg, 0.11 mmol, 63% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 743.2 [M+H]+
단계 4: 5-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리미딘-4-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 중 5-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리미딘-4-아민(90.0 mg, 0.12 mmol)의 용액을 60°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 26% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 220/254 nm; RT: 9.35분) 정제하여 5-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리미딘-4-아민(29.1 mg, 0.05 mmol, 47.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 503.1 [M+H]+
실시예 26: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.44 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.09 (s, 2H), 6.77 (s, 2H), 6.45 (s, 1H), 4.89 - 4.76 (m, 2H), 4.70 - 4.56 (m, 2H), 3.97 - 3.82 (m, 2H), 2.36 (s, 3H).
실시예 27: 6-(4-(2-(2-아미노피리딘-3-일)프로판-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 에틸 2-(2-클로로피리딘-3-일)-2-메틸프로파노에이트
테트라히드로퓨란(25 mL) 중 에틸 2-(2-클로로-3-피리딜)아세테이트(1.00 g, 5.01 mmol) 및 요오도메탄(1.75 mg, 12.33 mmol)의 혼합물에 리튬비스(트리메틸실릴)아미드(15.0 mL, 15 mmol)를 0oC에서 적가하고, 혼합물을 0oC 내지 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 염수로 세척하고, 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(80:20)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 에틸 2-(2-클로로피리딘-3-일)-2-메틸프로파노에이트(970 mg, 4.26 mmol, 85% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 228.0 [M+H]+.
단계 2: 2-(2-클로로피리딘-3-일)-2-메틸프로판산
에탄올(20 mL) 및 물(10 mL) 중 에틸 2-(2-클로로피리딘-3-일)-2-메틸프로파노에이트(950.0 mg, 4.17 mmol) 및 수산화 나트륨(850.0 mg, 21.25 mmol)의 혼합물을 80°C에서 24시간 동안 교반하였다. 에탄올을 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 수성층을 취합하였다. 1 M HCl을 사용하여 반응 혼합물을 산으로 조정하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 진공에서 농축하였다. 그 결과, 2-(2-클로로피리딘-3-일)-2-메틸프로판산(800 mg, 4.00 mmol, 96% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 199.9 [M+H]+.
단계 3: tert-부틸 (2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)카바메이트
2-메틸-2-프로판올(10 mL) 중 2-(2-클로로피리딘-3-일)-2-메틸프로판산(400.0 mg, 2.00 mmol), 트리에틸아민(600.0 mg, 5.93 mmol) 및 디페닐포스포릴 아지드(830.0 mg, 3.02 mmol)의 혼합물을 85oC에서 48시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(7/3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)카바메이트(430.0 mg, 1.58 mmol, 79.3% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 271.2 [M+H]+.
단계 4: tert-부틸 (2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)(2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)카바메이트
N,N-디메틸포름아미드(10 mL) 중 tert-부틸 (2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)카바메이트(600.0 mg, 2.22 mmol)의 혼합물에 수소화 나트륨(400.0 mg, 10 mmol)을 실온에서 첨가하고 1시간 동안 교반한 다음, (2-브로모에톡시)-tert-부틸디메틸실란(1.05 g, 4.39 mmol)을 첨가하고 16시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(80:20)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)(2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)카바메이트(540 mg, 1.25 mmol, 56.8% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 429.4 [M+H]+.
단계 5: 2-((2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)아미노)에탄-1-올
디옥산(5 mL) 중 4 M HCl의 tert-부틸 (2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)(2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)카바메이트(300.0 mg, 0.70 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 조 생성물(300 mg, 조)을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. LCMS (ESI, m/z): 215.2 [M+H]+.
단계 6: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-((2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(4 mL) 중 2-((2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)아미노)에탄-1-올(350.0 mg, 0.57 mmol) 및 수소화 나트륨(100.0 mg, 2.50 mmol, 60% 순도)의 혼합물을 65°C에서 4시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(350.0 mg, 0.65 mmol)을 첨가하고 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(93/7)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-((2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(130.0 mg, 0.16 mmol, 28.2% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 807.45 [M+H]+
단계 7: 6-(8-클로로-4-(2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(5 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-((2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(170.0 mg, 0.21 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민(0.2 mL, 1.16 mmol) 및 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(100 mg, 0.39 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 70oC에서 2일 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-4-(2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(105.0 mg, 0.13 mmol, 63.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 791.5 [M+H]+
단계 8: 6-(8-클로로-4-(2-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)프로판-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
1,4-디옥산(2 mL) 중 6-(8-클로로-4-(2-(2-클로로피리딘-3-일)프로판-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(50.0 mg, 0.06 mmol), 4-메톡시벤질아민(20.0 mg, 0.15 mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(7.0 mg, 0.01 mmol), 1.1'-비나프틸-2.2'-디페밀 포스핀(8.0 mg, 0.01 mmol) 및 나트륨 tert-부톡시드(20.0 mg, 0.21 mmol)의 혼합물을 100°C에서 1시간 동안 질소하에서 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(2/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-4-(2-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)프로판-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(30.0 mg, 0.03 mmol, 53.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 890.3 [M+H]+
단계 9: 6-(4-(2-(2-아미노피리딘-3-일)프로판-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 6-(8-클로로-4-(2-(2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)프로판-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(30.0 mg, 0.03 mmol)의 혼합물을 50°C에서 24시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep C18 OBD 컬럼 30*100 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 30% B에서 50% B로, 50% B; 파장: 254/220 nm; RT: 9.67분으로 정제하였다. 그 결과, 6-(4-(2-(2-아미노피리딘-3-일)프로판-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(1.6 mg, 0.003 mmol, 9% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 530.0 [M+H]+.
실시예 27: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.22 (s, 1H), 7.80 (dd, J = 4.8, 1.6 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 7.7, 1.7 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.77 (s, 2H), 6.64 (dd, J = 7.6, 4.8 Hz, 1H), 6.46 (s, 1H), 5.76 (s, 2H), 4.73 - 4.48 (m, 2H), 3.97 - 3.65 (m, 2H), 2.36 (q, J = 2.1 Hz, 3H), 1.84 (d, J = 9.0 Hz, 6H).
실시예 28: 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 2-브로모-N-메톡시-N-메틸니코틴아미드
디클로로메탄(150 mL) 중 2-브로모니코틴산(14.0 g, 69.3 mmol), N-메톡시메탄아민(5.5 g, 90.05 mmol), 2-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(28.0 g, 73.64 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(36.39 mL, 208.91 mmol)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(7/3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-N-메톡시-N-메틸니코틴아미드(15.00 g, 61.20 mmol, 88.3% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 245.1 [M+H]+.
단계 2: (2-브로모피리딘-3-일)(시클로프로필)메타논
테트라히드로퓨란(130 mL) 중 2-브로모-N-메톡시-N-메틸니코틴아미드(13.00 g, 53.05 mmol)의 혼합물에 시클로프로필 마그네슘브로마이드(53.0 mL, 106.69 mmol, 2 M)를 첨가하고, 0°C에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(3/7)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (2-브로모피리딘-3-일)(시클로프로필)메타논(6.00 g, 26.54 mmol, 50% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 226.1 [M+H]+.
단계 3: 시클로프로필(2-((디페닐메틸렌)아미노)피리딘-3-일)메타논
1,4-디옥산(60 mL) 중 (2-브로모피리딘-3-일)(시클로프로필)메타논(5.1 g, 22.56 mmol), 벤조페논 이민(5.74 mL, 34.21 mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(2.1 g, 2.29 mmol), 4,5-비스(디페닐포스피노)-9,9-디메틸크산텐(1.32 g, 2.28 mmol) 및 탄산 세슘(22 g, 67.53 mmol)의 혼합물을 100°C에서 2시간 동안 질소하에서 교반하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 시클로프로필(2-((디페닐메틸렌)아미노)피리딘-3-일)메타논(3.00 g, 9.19 mmol, 40.7% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 327.4 [M+H]+.
단계 4: (2-아미노-3-피리딜)-시클로프로필-메타논
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 시클로프로필(2-((디페닐메틸렌)아미노)피리딘-3-일)메탄온(3.00 g, 9.19 mmol)의 혼합물에 아세트산(10 mL) 및 물(1 mL)을 첨가하고, 혼합물을 50°C에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축시키고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 탄산나트륨 용액으로 PH = 7.0으로 조정하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (2-아미노-3-피리딜)-시클로프로필-메타논(1.40 g, 8.63 mmol, 93.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):163.2 [M+H]+.
단계 5: 2-(((2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(6 mL) 중 (2-아미노-3-피리딜)-시클로프로필-메타논(500.0 mg, 3.08 mmol), 2-아미노에탄올(375.0 mg, 6.14 mmol)의 혼합물에 티타늄 테트라이소프로판올레이트(875.0 mg, 3.08 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 80°C에서 3시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(375.0 mg, 5.97 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 80°C에서 3시간 더 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 2-(((2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)아미노)에탄-1-올(200.0 mg, 0.96 mmol, 31.3% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 208.3 [M+H]+.
단계 6: 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필))메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(2 mL) 중 2-(((2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)아미노)에탄-1-올(100.0 mg, 0.48 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(66.8 mg, 1.67 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(200.0 mg, 0.33 mmol)을 첨가하고 70°C에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸))아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(80.0 mg, 0.1 mmol, 30.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 800.3[M+H]+.
단계 7: 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(2 mL) 중 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(80 mg, 0.1 mmol), 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(56.0 mg, 0.11 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데칸-7-엔(0.05 mL, 0.32 mmol)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(70.0 mg, 0.09 mmol, 89.5% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 782.3 [M+H]+.
단계 8: 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(1 mL) 중 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(60.0 mg, 0.08 mmol)의 혼합물을 50°C에서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 33% B에서 63% B로; 파장: 254 nm; RT: 6.5분) 정제하여 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(10.3 mg, 0.019 mmol, 24.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 542.4 [M+H]+.
실시예 28: 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4 ) δ 8.45 (s, 1H), 8.04 (dd, J = 7.7, 1.7 Hz, 1H), 7.95 (dt, J = 5.3, 1.6 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.83 - 6.76 (m, 1H), 6.59 (s, 1H), 5.85 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.66 (td, J = 12.2, 6.4 Hz, 1H), 4.40 (td, J = 11.2, 6.8 Hz, 1H), 4.00 - 3.87 (m, 1H), 3.66 (dd, J = 16.0, 6.6 Hz, 1H), 2.49 - 2.43 (m, 3H), 1.81 - 1.79 (m, 1H), 0.88 - 0.83 (m, 1H), 0.71 - 0.67 (s, 1H), 0.59 - 0.56 (m, 1H), 0.43 - 0.39 (m, 1H).
실시예 29: 6-(8-클로로-4-((5-(메틸티오)피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 2-(((5-(메틸티오)피리딘)-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(6 mL) 중 5-(메틸티오)니코틴알데히드(400.0 mg, 2.61 mmol), 2-아미노에탄-1-올(287.1 mg, 4.7 mmol) 및 아세트산(15.6 mg, 0.26 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(492.2 mg, 7.83 mmol)을 첨가하고 25℃에서 21시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 진공하에 농축시키고, 물/아세토니트릴(7/3)로 용출하는 역상 컬럼 상에서 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(((5-(메틸티오)피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올(380.4 mg, 1.88 mmol, 71.9% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 199.1 [M+H]+
단계 2: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(((5-(메틸티오)피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 2-(((5-(메틸티오)피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올(116.5 mg, 0.59 mmol)의 용액에 수소화나트륨(78.3 mg, 1.96 mmol)을 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(300.0 mg, 0.49 mmol)을 25°C에서 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 1 M 염산으로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(6/4)로 용출하면서 역상 컬럼 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(((5-(메틸티오)피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(250.3 mg, 0.27 mmol, 56.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 791.2 [M+H]+
단계 3: 6-(8-클로로-4-((5-(메틸티오)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(3 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(((5-(메틸티오)피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(230.0 mg, 0.25 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(153.8 mg, 1.01 mmol)의 용액에 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(171.1 mg, 0.33 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(7/3)로 용출하면서 역상 컬럼 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-4-((5-(메틸티오)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(175.5 mg, 0.21 mmol, 83.2% 수율)을 주황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 773.3 [M+H]+
단계 4: 6-(8-클로로-4-((5-(메틸티오)피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL, 64.9 mmol) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL, 5.65 mmol) 중 6-(8-클로로-4-((5-(메틸티오)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(150.0 mg, 0.19 mmol)의 용액을 25ºC에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하고, N,N-디메틸포름아미드로 희석하고, N,N-디이소프로필에틸아민을 사용하여 pH >7로 조정하고, 물/아세토니트릴(7/3)로 용출하는 역상 컬럼 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 22% B에서 52% B로; 파장: 254 nm; RT: 6.5분) 추가 정제하여 6-(8-클로로-4-((5-(메틸티오)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(24.0 mg, 0.04 mmol, 23.2% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 533.2 [M+H]+
실시예 29: 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 8.47 (s, 1H), 8.37 (s, 2H), 7.80 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.59 (s, 1H), 5.26 - 5.15 (m, 2H), 4.67 - 4.65 (m, 2H), 4.05 - 4.03 (m, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.46 (d, J = 1.6 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 533.2 [M+H]+
실시예 30: 6-(4-((1H-이미다졸-5-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 2-(((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)아미노)에탄-1-올
딘-스타크 분리기에서, 톨루엔(200 mL) 중 3-트리틸이미다졸-4-카르발데히드(5.00 g, 14.78 mmol) 및 2-아미노에탄올(902.4 mg, 14.7 mmol)의 용액을 130°C에서 6시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 혼합물을 메틸 알코올(150 mL)에 용해시키고, 수소화붕소 나트륨(1.12 g, 29.55 mmol)을 첨가하고 0°C에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 2-(((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)아미노)에탄-1-올(6.00 g, 14.0 mmol, 95.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 384.2 [M+H]+.
단계 2: 7-브로모-6-클로로-5-(2-(((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 2-(((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)아미노)에탄-1-올(5.53 g, 14.42 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(1.15 g, 28.83 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 0°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(2.00 g, 7.21 mmol)을 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-6-클로로-5-(2-(((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(1.45 g, 1.85 mmol, 25.7% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 640.1 [M+H]+
단계 3: 9-브로모-8-클로로-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
아세토니트릴(10 mL) 중 7-브로모-6-클로로-5-(2-(((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(1.40 g, 2.18 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(996.0 mg, 6.5 mmol)의 용액에 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(1.7 g, 3.28 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/40)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-8-클로로-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(590.0 mg, 0.8 mmol, 39.5% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 622.1 [M+H]+
단계 4: 8-클로로-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
질소하에서, 1,4-디옥산(10 mL) 중 9-브로모-8-클로로-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(560.0 mg, 0.9 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(456.5 mg, 1.8 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(66.6 mg, 0.09 mmol) 및 아세트산 칼륨(176.2 mg, 1.8 mmol)의 혼합물을 80°C에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 혼합물을 여과하고 디클로로메탄으로 세척하였다. 여과액을 감압하에 농축하였다. 조 생성물(1.0 g, 조)을 추가의 정제없이 직접 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 670.3 [M+H]+
단계 5: 6-(8-클로로-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 아세토니트릴(10 mL) 및 물(2 mL) 중 8-클로로-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(1.0 g 조), 6-브로모-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(243.6 mg, 0.9 mmol), 불화 칼륨(277.0 mg, 4.7 mmol) 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(167.6 mg, 0.2 mmol)의 용액을 80°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸아세테이트로 추출하고 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 진공 하에서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(1/15)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(438.0 mg, 0.5 mmol, 24.5% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 718.2 [M+H]+
단계 6: 6-(4-((1H-이미다졸-5-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(6 mL, 0.5 mmol) 중 6-(8-클로로-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(400.0 mg, 0.5 mmol)의 용액을 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 28B에서 58B로; 254 nm; RT: 6.20분) 정제하여 6-(4-((1H-인다졸-5-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(38.5 mg, 0.08 mmol, 14.5% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 476.2 [M+H]+
실시예 30: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 11.9 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.57 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.74 (s, 2H), 6.43 (s, 1H), 5.01 - 4.91 (m, J = 14.7 Hz, 2H), 4.64 - 4.45 (m, 2H), 3.98 - 3.89 (m, 2H), 2.33 (d, J = 2.3 Hz, 3H).
실시예 31: 6-(4-((2-아미노-5-플루오로피리딘)-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: N-(5-플루오로피리딘-2-일)피발아미드
디클로로메탄(100 mL) 중 5-플루오로-2-피리딘아민(10.00 g, 89.20 mmol), 피발로일 클로라이드(13.18 mL, 107.04 mmol) 및 트리에틸아민(27.03 g, 267.59 mmol)의 용액을 25°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 중탄산 나트륨 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(3/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 N-(5-플루오로피리딘-2-일)피발아미드(11.00 g, 56.0 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 197.1 [M+H]+
단계 2: N-(5-플루오로-3-포르밀피리딘-2-일)피발아미드
테트라히드로퓨란(80 mL) 중 N-(5-플루오로피리딘-2-일)피발아미드(11.0 g, 56.0 mmol)의 용액에 tert-부틸 리튬(37 ml, 56.0 mmol, 1.5 M)을 -78°C에서 첨가하고, -78°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, N,N-디메틸포름아미드(4.0 g, 56.0 mmol)를 첨가하고 -78℃에서 2시간 동안 더 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 테트라히드로퓨란을 진공하에 농축하고, 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(2/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 N-(5-플루오로-3-포르밀피리딘-2-일)피발아미드(3.10 g, 13.7 mmol)를 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 225.1 [M+H]+
단계 3: N-(5-플루오로-3-(((2-히드록시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)피발아미드
메탄올 중 N-(5-플루오로-3-포르밀피리딘-2-일)피발아미드(1.00 g, 4.46 mmol), 아세트산(0.11 g, 1.87 mmol) 및 2-아미노에탄올(272.4 mg, 4.4 mmol)의 용액을 25°C에서 6시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 수소화붕소 나트륨(254.2 mg, 6.6 mmol)을 첨가하고 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/25)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 N-(5-플루오로-3-(((2-히드록시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)피발아미드(505.0 mg, 1.7 mmol, 41.6% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 270.2 [M+H]+
단계 4: 2-(((2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올 염화수소
염산 수용액(10 mL, 2 N) 중 N-(5-플루오로-3-(((2-히드록시에틸)아미노)메틸)피리딘-2-일)피발아미드(500.0 mg, 1.6 mmol)의 용액을 100°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/15)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(((2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올 염화수소(320 mg, 1.71 mmol, 91.1% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 186.1 [M+H]+
단계 5: 5-(2-((2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 2-(((2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올 염화수소(271.9 mg, 1.4 mmol)의 용액에 수소화나트륨(46.9 mg, 1.9 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 0°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(300.0 mg, 0.49 mmol)을 첨가하고 65°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 1 N HCl로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-(2-(((2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(160.0 mg, 0.2 mmol, 42.0% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 778.2 [M+H]+
단계 6: 6-(4-((2-아미노-5-플루오로피리딘)-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(5 mL) 중 5-(2-(((2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(140.0 mg, 0.1 mmol), 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로포스페이트(112.3 mg, 0.2 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데칸-7-엔(82.0 mg, 0.5 mmol)의 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(물 중 아세토니트릴 66-70/물 중 0.1% TFA)로 정제하여 6-(4-((2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(50.0 mg, 0.06 mmol, 36.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 760.2 [M+H]+
단계 7: 6-(4-((2-아미노-5-플루오로피리딘)-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 중 6-(4-((2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(50.0 mg, 0.06 mmol)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 31% B에서 61% B로, 61% B; 파장: 254 nm; RT: 6.5분) 정제하여 6-(4-((2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(7.6 mg, 0.01 mmol, 22.1% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 520.2 [M+H]+
실시예 31: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.41 (s, 1H), 7.86 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.30 - 7.23 (m, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.46 (s, 1H), 5.94 (s, 2H), 4.83 (d, J = 2.7 Hz, 2H), 4.81 - 4.63 (m, 2H), 3.94 (s, 2H), 2.37 (d, J = 1.2 Hz, 3H).
실시예 32: (R)-6-(8-클로로-4-(1-(5-((시클로프로필메틸)아미노)피리딘-3-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (R)-5-(2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 2-[[rac-(1R)-1-(5-아미노-3-피리딜)에틸]아미노]에탄올(325.2 mg, 1.7 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(195.7 mg, 4.8 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(1.00 g, 1.63 mmol)을 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 1 N HCl로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-5-(2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(940 mg, 1.0 mmol, 63.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 774.3 [M+H]+.
단계 2: (R)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(10 mL) 중 (R)-5-(2-((1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(920.0 mg, 1.1 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(542.7 mg, 3.5 mmol)의 용액에 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로포스페이트(926.8 mg, 1.7 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 76-80/물 중 0.1% TFA)로 정제하여 (R)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(720.0 mg, 0.8 mmol, 72.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 756.3 [M+H]+
단계 3: (R)-6-(8-클로로-4-(1-(5-((시클로프로필메틸)아미노)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
메틸 알코올(3 mL) 중 (R)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(220.0 mg, 0.2 mmol), 시클로프로판카르복스알데히드(61.1 mg, 0.8 mmol) 및 티타늄 테트라이소프로판올레이트(0.5 mL)의 혼합물을 80°C에서 3시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 수소화붕소 나트륨(22.1 mg, 0.5 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 85-90/물 중 0.1% TFA)로 정제하여 (R)-6-(8-클로로-4-(1-(5-((시클로프로필메틸)아미노)피리딘-3-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(129.0 mg, 0.1 mmol, 49.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 810.3 [M+H]+
단계 4: (R)-6-(8-클로로-4-(1-(5-((시클로프로필메틸)아미노)피리딘-3-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 (R)-6-(8-클로로-4-(1-(5-((시클로프로필메틸)아미노)피리딘-3-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(120.0 mg, 0.1 mmol)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 39% B에서 69% B로; 파장: 254 nm; RT: 6.5분) 정제하여 (R)-6-(8-클로로-4-(1-(5-((시클로프로필메틸)아미노)피리딘-3-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(34.9 mg, 0.05 mmol, 39.4% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 570.0 [M+H]
실시예 32: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 8.37 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.80 - 7.71 (m, 2H), 7.17 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.75 - 4.33 (m, 2H), 3.71 - 3.55 (m, 1H), 3.52 - 3.39 (m, 1H), 3.09 - 2.86 (m, 2H), 2.41 (d, J = 2.5 Hz, 3H), 1.68 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.08 - 0.91 (m, 1H), 0.58 - 0.45 (m, 2H), 0.28 - 0.16 (m, 2H).
실시예 33: (R)-N-(5-(1-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-3-일)아세트아미드
합성 경로
단계 1: (R)-N-(5-(1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-3-일)아세트아미드
디클로로메탄(3 mL) 중 (R)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(214.0 mg, 0.2 mmol)의 용액에 트리에틸아민(85.9 mg, 0.8 mmol) 및 아세틸 클로라이드(24.4 mg, 0.3 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 62-70/물 중 0.1% TFA)로 정제하여 (R)-N-(5-(1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-3-일)아세트아미드(132.0 mg, 0.1 mmol, 56.7% 수율)를 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 798.3 [M+H]+
단계 4: (R)-N-(5-(1-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-3-일)아세트아미드
트리플루오로아세트산(357.1 mg, 3.1 mmol) 중 (R)-N-(5-(1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-3-일)아세트아미드(125.0 mg, 0.1 mmol)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Shield RP18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 34% B에서 50% B로, 50% B; 파장: 220/254 nm; RT: 7.73분) 정제하여 (R)-N-(5-(1-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-3-일)아세트아미드(41.2 mg, 0.07 mmol, 46.3% 수율)를 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 558.0 [M+H]+
실시예 33: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 10.15 - 10.10 (m, 1H), 8.77 - 8.68 (m, 1H), 8.53 - 8.42 (m, 1H), 8.33 - 8.29 (m, 1H), 7.89 (d, J = 17.3 Hz, 1H), 7.21 - 7.17 (m, 1H), 6.76 (d, J = 16.9 Hz, 2H), 6.60 (s, 1H), 6.46 - 6.41 (m, 1H), 4.56 - 4.41 (m, 2H), 3.74 - 3.71 (m, 1H), 3.46 - 3.35 (m, 1H), 2.36 - 2.31 (m, 3H), 2.08 - 1.99 (m, 3H), 1.70 - 1.58 (m, 3H).
실시예 34: (S)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올
톨루엔(200 mL) 중 2-아미노니코틴알데히드(10.00 g, 81.89 mmol) 및 2-아미노에탄올(5.00 g, 81.89 mmol)의 용액을 130°C에서 6시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 혼합물을 메틸 알코올(150 mL)에 용해시키고, 수소화붕소 나트륨(6.19 g, 163.77 mmol)을 첨가하고 0°C에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/20)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올(12.60 g, 74.60 mmol, 91.1% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 168.1 [M+H]+
단계 2: 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-브로모-2,6-디클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(20 mL) 중 2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올(900.0 mg, 5.3 mmol) 및 수소화 나트륨(538.2 mg, 13.4 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-2,6-디클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(1.68 g, 5.38 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 1 N HCl로 켄칭하고, 진공하에 농축시켜 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-브로모-2,6-디클로로퀴나졸린-4(3H)-온(3.00 g 조)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 458.0 [M+H]+
단계 3: 3-((9-브로모-2,8-디클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(30 mL) 중 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-브로모-2,6-디클로로퀴나졸린-4(3H)-온(3.00 g 조), N,N-디이소프로필에틸아민(2.53 g, 19.60 mmol) 및 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(2.66 g, 10.45 mmol)의 혼합물을 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/디클로로메탄(1/5)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((9-브로모-2,8-디클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민(1.70 g, 3.66 mmol, 56% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 440.0 [M+H]+
단계 4: tert-부틸 N-[3-[(7-브로모-3,8-디클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일)메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트
테트라히드로퓨란(20 mL) 중 3-((9-브로모-2,8-디클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민(1.70 g, 3.85 mmol) 및 트리에틸아민(1.56 g, 15.42 mmol)의 용액에 4-디메틸아미노피리딘(47.0 mg, 0.3 mmol) 및 디-tert-부틸 디카보네이트(2.94 g, 13.49 mmol)를 첨가하고 25°C에서 16시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/디클로로메탄(1/10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[3-[(7-브로모-3,8-디클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일)메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(1.40 g, 2.11 mmol, 54.9% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 640.1 [M+H]+
단계 5: tert-부틸 N-tert-부톡시카르보닐-N-[3-[[3,8-디클로로-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]카바메이트
질소하에서, 1,4-디옥산(12 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(7-브로모-3,8-디클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일)메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(950.0 mg, 1.4 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(752.3 mg, 2.9 mmol), 아세트산 칼륨(290.7 mg, 2.9 mmol) 및 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(109.8 mg, 0.1 mmol)의 혼합물을 80°C에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여과액을 감압하에 농축하였다. 조 물질(1.6 g, 조)을 추가의 정제없이 직접 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 688.2 [M+H]+
단계 6: tert-부틸 N-[3-[[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트
질소하에서, 아세토니트릴(10 mL) 및 물(2 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카르보닐-N-[3-[[3,8-디클로로-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]카바메이트(1.60 g 조), 6-브로모-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(460.5 mg, 0.9 mmol), 불화 칼륨(270.0 mg, 4.6 mmol) 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(163.1 mg, 0.2 mmol)의 용액을 50°C에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트/디클로로메탄(1/5)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[3-[[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(1.20 g, 1.10 mmol, 47.6% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 976.3 [M+H]+
단계 7: tert-부틸 (S)-(3-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일)카바메이트
테트라히드로퓨란(1 mL) 중 (S)-(2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(108.8 mg, 0.61 mmol) 및 수소화 나트륨(49.1 mg, 1.2 mmol, 60% 순도)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(120.0 mg, 0.1 mmol)를 첨가하고 60°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 1 N HCl로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/디클로로메탄(1/1)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (S)-(3-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일)카바메이트(101.0 mg, 0.08 mmol, 69.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1017.4 [M+H]+
단계 8: (S)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (S)-(3-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일)카바메이트(95.0 mg, 0.09 mmol)의 용액을 50°C에서 6시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 39% B에서 69% B로, 69% B; 파장: 245 nm; RT: 6.5분) 정제하여 (S)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(20.2 mg, 0.02 mmol, 31.7% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 677.3 [M+H]+
실시예 34: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.89 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.74 (s, 2H), 6.56 - 6.48 (m, 1H), 6.44 (s, 1H), 6.04 (s, 2H), 4.88 - 4.78 (m, 2H), 4.62 - 4.59 (m, 2H), 4.03 - 3.95 (m, 2H), 3.91 - 3.86 (m, 2H), 3.32 - 3.22 (m, 1H), 3.09 - 2.81 (m, 2H), 2.50 - 2.25 (m, 6H), 1.96 - 1.85 (m, 1H), 1.83 - 1.81 (m, 1H), 1.76 - 1.66 (m, 2H).
실시예 35: (S)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-((디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (S)-(3-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일)카바메이트
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 (S)-(디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-일)메탄올(203.9 mg, 1.0 mmol) 및 수소화 나트륨(81.8 mg, 2.0 mmol, 60% 순도)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(200.0 mg, 0.2 mmol)를 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 1 N HCl로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(15/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (S)-(3-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일)카바메이트(159.0 mg, 0.1 mmol, 71% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1039.4 [M+H]+
단계 2: (S)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-((디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 중 tert-부틸 (S)-(3-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일)카바메이트(150.0 mg, 0.1 mmol)의 용액을 50°C에서 6시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 32% B에서 62% B로, 62% B; 파장: 254 nm; RT: 6.5분) 정제하여 (S)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-((디히드로-1H,3H-스피로[피롤리진-2,2'-[1,3]디옥솔란]-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(15.8 mg, 0.02 mmol, 15.6% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 699.1 [M+H]+
실시예 35: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.91 - 7.90 (m, 1H), 7.33 - 7.31 (m, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.74 (s, 2H), 6.56 - 6.52 (m, 1H), 6.45 (s, 1H), 6.04 (s, 2H), 4.92 - 4.80 (m, 2H), 4.66 - 4.60 (m, 2H), 4.12 - 3.95 (m, 2H), 3.83 - 3.68 (m, 6H), 3.02 - 2.98 (m, 2H), 2.74 - 2.71 (m, 2H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.08 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 1.88 (d, J = 13.5 Hz, 3H), 1.69 (s, 2H).
실시예 36: 6-(2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일)카바메이트
테트라히드로퓨란(2 mL) 중 2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일메탄올(28.7 mg, 0.2 mmol) 및 수소화 나트륨(24 mg, 0.6 mmol, 60% 순도)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(205.0 mg, 0.2 mmol)를 첨가하고 60°C에서 6시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 1 N HCl로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/디클로로메탄(4/1)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (3-((2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-3-일)(메틸)카바메이트(110.0 mg, 0.1 mmol, 52.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 954.3 [M+H]+
단계 2: 6-(2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 중 tert-부틸 (3-((2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일)카바메이트(105.0 mg, 0.1 mmol)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep C18 OBD 컬럼 30*100 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 23% B에서 50% B로, 50% B; 파장: 254/220 nm; RT: 9.67분) 정제하여 6-(2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(29.0 mg, 0.04 mmol, 42.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 614.2 [M+H]+
실시예 36: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 - 7.86 (m, 1H), 7.33 - 7.24 (m, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.74 (s, 2H), 6.58 - 6.48 (m, 1H), 6.45 (s, 1H), 6.04 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.71 -4.42 (m, 5H), 3.98 - 3.80 (m, 2H), 3.51 (s, 2H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 1.77 - 1.67 (m, 2H), 1.49 - 1.35 (m, 2H).
실시예 37: 7-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-4-아민
합성 경로
단계 1: 2-((4-브로모-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(10 mL) 중 4-브로모-5,6-디히드로시클로펜타[c]피리딘-7-온(1.00 g, 4.72 mmol) 및 2-아미노에탄올(576.1 mg, 9.4 mmol), 아세트산(28.3 mg, 0.4 mmol)의 용액을 80°C에서 3시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 수소화붕소 나트륨(358.4 mg, 9.4 mmol)을 첨가하고 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하고, 용매를 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-((4-브로모-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)아미노)에탄-1-올(946.0 mg, 3.5 mmol, 74.9% 수율)을 갈색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 257.0 [M+H]+
단계 2: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((4-브로모-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)아미노)에톡시)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(6 mL) 중 2-((4-브로모-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)아미노)에탄-1-올(251.6 mg, 0.9 mmol) 및 수소화 나트륨(97.8 mg, 2.4 mmol, 60% 순도)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(500.0 mg, 0.8 mmol)을 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 1 N HCl로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/6)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((4-브로모-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)아미노)에톡시)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(534.0 mg, 0.5 mmol, 70.8% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 849.2 [M+H]+
단계 3: 6-(4-(4-브로모-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(6 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((4-브로모-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)아미노)에톡시)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(524.0 mg, 0.6 mmol), 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(281.5 mg, 1.8 mmol) 및 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로포스페이트(480.7 mg, 0.9 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/20)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-(4-브로모-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(417.0 mg, 0.4 mmol, 76.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 831.2 [M+H]+
단계 4: 6-(8-클로로-4-(4-((디페닐메틸렌)아미노)-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 1,4-디옥산(5 mL) 중 6-(4-(4-브로모-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(400.0 mg, 0.4 mmol), 벤조페논 이민(261.3 mg, 1.4 mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(43.9 mg, 0.05 mmol), 4,5-비스(디페닐포스피노)-9,9-디메틸크산텐(55.6 mg, 0.1 mmol) 및 탄산 세슘(313.4 mg, 0.9 mmol)의 용액을 90°C에서 16시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(6/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-4-(4-((디페닐메틸렌)아미노)-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(400.0 mg, 0.4 mmol, 88.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 932.3 [M+H]+
단계 5: 7-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-4-아민
트리플루오로아세트산(10 mL) 중 6-(8-클로로-4-(4-((디페닐메틸렌)아미노)-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-7-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(200.0 mg, 0.2 mmol)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 18% B에서 38% B로, 38% B; 파장: 254/220 nm) 정제하여 7-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-6,7-디히드로-5H-시클로펜타[c]피리딘-4-아민(18.0 mg, 0.03 mmol, 15.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 528.1 [M+H]+
실시예 37: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.50 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.72 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.89 - 6.75 (m, 3H), 6.46 (s, 1H), 5.33 (s, 2H), 4.65 - 4.45 (m, 2H), 3.58 - 3.41 (m, 2H), 2.98 - 2.82 (m, 1H), 2.77 - 2.56 (m, 2H), 2.37 (d, J = 2.5 Hz, 3H), 2.10 - 1.94 (m, 1H).
실시예 38: (R)-6-(8-클로로-4-(1-(5-((피리딘-3-일메틸)아미노)피리딘-3-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (R)-6-(8-클로로-4-(1-(5-((피리딘-3-일메틸)아미노)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
메틸 알코올(4 mL) 중 (R)-6-(4-(1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(240.0 mg, 0.32 mmol), 니코틴알데히드(67.9 mg, 0.6 mmol) 및 티타늄 테트라이소프로판올레이트(0.4 mL)의 용액을 80°C에서 3시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 수소화붕소 나트륨(24.1 mg, 0.6 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하고, 용매를 진공하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 70-75/물 중 0.1% TFA)로 정제하여 (R)-6-(8-클로로-4-(1-(5-((피리딘-3-일메틸)아미노)피리딘-3-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(81.0 mg, 0.07 mmol, 23.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 847.3 [M+H]+
단계 2: (R)-6-(8-클로로-4-(1-(5-((피리딘-3-일메틸)아미노)피리딘-3-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 중 (R)-6-(8-클로로-4-(1-(5-((피리딘-3-일메틸)아미노)피리딘-3-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(80.0 mg, 0.09 mmol)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 30% B에서 60% B로; 파장: 254 nm; RT: 6.5분) 정제하여 (R)-6-(8-클로로-4-(1-(5-((피리딘-3-일메틸)아미노)피리딘-3-일)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(26.8 mg, 0.04 mmol, 43.9% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 607.0 [M+H]+
실시예 38: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.56 - 8.49 (m, 1H), 8.43 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.41 - 8.33 (m, 1H), 7.97 - 7.90 (m, 1H), 7.84 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.70 - 7.62 (m, 1H), 7.30 - 7.15 (m, 2H), 6.84 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 6.77 (s, 2H), 6.61 - 6.53 (m, 1H), 6.56 - 6.47 (m, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.57 - 4.45 (m, 1H), 4.41 - 4.15 (m, 3H), 3.71 - 3.57 (m, 1H), 3.34 - 3.32 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 1.60 - 1.53 (m, 3H).
실시예 39: 3-(8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-메틸-4-(트리플루오로메틸)아닐린
합성 경로
단계 1: 3-브로모-4-요오도-5-메틸아닐린
N,N-디메틸포름아미드(50 mL) 중 3-브로모-5-메틸아닐린(10.00 g, 53.74 mmol), N-요오도석신이미드(12.09 g, 53.74 mmol) 및 p-톨루엔설폰산(0.93 g, 5.37 mmol)의 혼합물을 25°C에서 12시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물)로 정제하여 3-브로모-4-요오드-5-메틸아닐린(12.00 g, 38.59 mmol, 71.4% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 311.0 [M+H]+
단계 2: 3-브로모-4-요오도-N,N-비스(4-메톡시벤질)-5-메틸아닐린
N,N-디메틸포름아미드(50 mL) 중 3-브로모-4-요오도-5-메틸아닐린(12.00 g, 38.46 mmol)의 혼합물에 탄산 나트륨(10.19 g, 96.17 mmol), 요오드화 칼륨(3.83 g, 23.08 mmol) 및 4-메톡시벤질클로라이드(13.25 g, 84.62 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 90°C에서 6시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응물을 물로 켄칭하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 생성된 혼합물을 에탄올에 용해시키고, 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 여과하여 3-브로모-4-요오도-N,N-비스(4-메톡시벤질)-5-메틸아닐린(17.4 g, 31.5 mmol, 81.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 552.3 [M+H]+
단계 3: 3-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-5-메틸-4-(트리플루오로메틸)아닐린
N,N-디메틸포름아미드(50 mL) 중 3-브로모-4-요오도-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-5-메틸아닐린(10.00 g, 18.10 mmol)의 혼합물에 요오드화 제일구리(8.62 g, 45.26 mmol) 및 메틸 2,2-디플루오로-2-설포아세테이트(3.13 g, 16.29 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 90°C에서 6시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1/5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-브로모-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-5-메틸-4-(트리플루오로메틸)아닐린(7.40 g, 14.97 mmol, 82.70% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 494.1 [M+H]+
단계 4: 3-브로모-5-메틸-4-(트리플루오로메틸)아닐린
트리플루오로아세트산(20 mL) 중 3-브로모-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-5-메틸-4-(트리플루오로메틸)아닐린(5.00 g, 10.11 mmol)의 혼합물을 50°C에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH = 7로 조정하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물)로 정제하여 3-브로모-5-메틸-4-(트리플루오로메틸)아닐린(452.0 mg, 1.78 mmol, 17.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 254.1 [M+H]+
단계 5: 3-(8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-메틸-4-(트리플루오로메틸)아닐린
질소하에서, 아세토니트릴(15 mL) 및 물(3 mL) 중 (8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산(932.3 mg, 조), 3-브로모-5-메틸-4-(트리플루오로메틸)아닐린(452.0 mg, 1.77 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(249.7 mg, 0.35 mmol) 및 탄산 나트륨(377.1 mg, 3.55 mmol)의 용액을 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: (컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 39% B에서 5% B로, 5% B; 파장: 254/220 nm; RT: 8.75분) 정제하여 3-(8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-메틸-4-(트리플루오로메틸)아닐린(32.3 mg, 0.06 mmol, 3.16%)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 566.25 [M+H]+
실시예 39: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.00 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.23 (s, 1H), 5.37 - 5.20 (d, J = 52.8 Hz, 1H), 4.59 - 4.55 (m, 2H), 4.29 - 4.15 (m, 2H), 3.99 - 3.95 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.25 - 3.17 (m, 3H), 3.05 - 2.99 (m, 1H), 2.40 (d, J = 2.4 Hz, 3H), 2.34 - 2.10 (m, 3H), 1.99 - 1.86 (m, 3H).
실시예 40a: 6-((R)-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로)-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 7-브로모-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
수소화 나트륨(0.20 g, 5.05 mmol, 60 % 순도)의 용액을 0°C로 냉각된 테트라히드로퓨란(5 mL) 중의 2-메틸아미노에탄올(0.15 g, 2.02 mmol)에 첨가하였다. 그런 다음, 7-브로모-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(0.74 g, 1.68 mmol)을 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 실온으로 가온한 후, 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 1 N 염산 용액으로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(0~100%)로 용출하면서 역상으로 정제하여 7-브로모-2,6-디클로로-8-플루오로-5-[2-(메틸아미노)에톡시]-3H-퀴나졸린-4-온(0.41 g, 1.06 mmol, 63.3% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):384.05 [M+H]+.
단계 2: 9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(0.81 g, 3.19 mmol)의 용액을 디클로로메탄(3 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(0.41 g, 1.06 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(2.06 g, 15.97 mmol)에 첨가하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(0~100%)로 용출하면서 역상으로 정제하여 9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(0.15 g, 0.41 mmol, 38.4% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 365.85 [M+H]+.
단계 3: (S)-9-브로모-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-((2-메틸렌-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
수소화 나트륨(0.65 g, 16.35 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 (S)-(2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(0.42 g, 2.72 mmol)에 첨가하였다. 그런 다음, 9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(1.0 g, 2.72 mmol)을 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반하고, 40°C로 가온하였다. 이어서, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 1 N 염산 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(5/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-9-브로모-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-((2-메틸렌-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-다이히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(430.0 mg, 0.89 mmol, 32.6% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 483.0 [M+H]+.
단계 4: (S)-6-(8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-((2-메틸렌-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(3 mL) 및 물(0.60 mL) 중 (S)-9-브로모-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-((2-메틸렌-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(0.20 g, 0.41 mmol), [6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-2-피리딜]보론산(0.54 g, 0.83 mmol), 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 디클로로메탄 착물(0.03 g, 0.04 mmol) 및 인산 칼륨(0.26 g, 1.24 mmol)의 용액을 65°C에서 60분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-6-(8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-((2-메틸렌-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민(0.17 g, 0.23 mmol, 54.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):751.25 [M+H]+.
단계 5: 6-(8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-(((S)-2-메틸렌-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-요오도-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민
아세트산(5 mL) 중 (S)-6-(8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-((2-메틸렌-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민(0.35 g, 0.47 mmol) 및 N-요오도석신이미드(0.10 g, 0.47 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 티오황산나트륨 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴로 용출하면서 역상으로 정제하여 6-(8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-(((S)-2-메틸렌-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-요오도-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민(0.26 g, 0.30 mmol, 63.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 877.2 [M+H]+.
단계 5: 6-(8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-(((S)-2-메틸렌-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, N,N-디메틸포름아미드(5 mL) 중 6-(8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-(((S)-2-메틸렌-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-요오도-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민(250 mg, 0.29 mmol)및 과 구리(54 mg, 0.86 mmol)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 비스[(2,2-디플루오로-2-플루오로설포닐-아세틸)옥시]구리(357 mg, 0.86 mmol)를 첨가하고, 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 용액을 실온으로 가온한 후, 90°C 미만으로 가온하고 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물(0.1% TFA)/아세토니트릴을 사용한 역상으로 정제하여 6-(8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-(((S)-2-메틸렌-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(70.0 mg, 0.09 mmol, 30% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 819.6[M+H]+.
단계 6: 6-((R)-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로)-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(3 mL) 중 6-(8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-(((S)-2-메틸렌-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(65 mg, 0.08 mmol)의 용액을 50°C에서 12시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용 HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 44% B에서 74% B로; 파장: 254 nm; RT1(분): 6.5; 실행 수: 0) 및 키랄-분취용-HPLC(컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SC, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 9분 내 50% B에서 50% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 5.666; RT2(분): 8.112; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 2 mL; 실행 수: 3)로 정제하여 6-((R)-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로)-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(6.5 mg, 0.01 mmol, 14.2% 수율)을 수득하였다. LCMS: (ESI, m/z): 579.15 [M+H]+.
실시예 40a :. 1H NMR (300 MHz, Methanol-d4, ppm) δ 6.59 (s, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.75 - 4.60 (m, 2H), 4.36 - 4.21 (m, 2H), 4.04 - 3.92 (m, 2H), 3.82 - 3.70 (m, 1H), 3.41 (s, 3H), 3.38 (s, 1H), 3.22 - 3.15 (m, 1H), 2.88 - 2.70 (m, 2H), 2.55 - 2.39 (m, 4H), 2.22 - 2.10 (m, 1H), 2.05 - 1.78 (m, 3H).
실시예 41a 및 41b: 6-((R)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 7-브로모-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
수소화 나트륨(0.20 g, 5.05 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 테트라히드로퓨란(5 mL) 중의 2-메틸아미노에탄올(0.15 g, 2.02 mmol)에 첨가하였다. 그런 다음, 7-브로모-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(0.74 g, 1.68 mmol)을 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반하고, 실온으로 가온한 후, 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 1 N 염산 용액으로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(0~100%)로 용출하면서 역상으로 정제하여 7-브로모-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(0.41 g, 1.06 mmol, 63.3% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):384.05 [M+H]+.
단계 2: 9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(0.81 g, 3.19 mmol)의 용액을 클로로포름(3 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(0.41 g, 1.06 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(2.06 g, 15.97 mmol)에 25°C에서 첨가하고 70°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(0~100%)로 용출하면서 역상으로 정제하여 9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(0.15 g, 0.41 mmol, 38.4% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 365.85 [M+H]+.
단계 3: 9-브로모-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
수소화 나트륨(0.26 g, 6.54 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(0.19 g, 1.2 mmol)에 첨가하였다. 그런 다음, 9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(0.40 g, 1.09 mmol)을 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 용액을 실온으로 가온하고 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 1 N 염산 용액으로 희석하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(250.0 mg, 0.51 mmol, 46.8% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 491.05 [M+H]+.
단계 4: 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(3 mL) 및 물(0.6 mL) 중 9-브로모-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(0.30 g, 0.61 mmol), [6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-2-피리딜]보론산(0.80 g, 1.23 mmol), 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 디클로로메탄 착물(0.05 g, 0.06 mmol) 및 인산 칼륨(0.39 g, 1.84 mmol)의 용액을 65°C에서 60분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민(0.30 g, 0.40 mmol, 64.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 757.3 [M+H]+.
단계 5: 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-요오도-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민
아세트산(5.0 mL) 중 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민(0.29 g, 0.38 mmol) 및 N-요오도석신이미드(0.09 g, 0.42 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 티오황산나트륨 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기층을 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-요오도-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민(0.38 g, 0.34 mmol, 89.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 883.35 [M+H]+.
단계 6: 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, N,N-디메틸포름아미드(10 mL) 중 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-요오도-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민(370 mg, 0.34 mmol) 및 구리(639 mg, 10.05 mmol)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 비스[(2,2-디플루오로-2-플루오로설포닐-아세틸)옥시]구리(4.20 g, 10.05 mmol)를 첨가하고, 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 용액을 실온으로 가온한 후, 90°C 미만으로 가온하고 10분 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(280 mg, 0.24 mmol, 70.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 825.4 [M+H]+.
단계 7: 6-((R)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 중 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(270.0 mg, 0.23 mmol)의 용액을 50°C에서 10시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴로 용출하면서 역상으로 및 분취용-HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 36% B에서 58% B로, 58% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.8; 실행 수: 0) 및 키랄_HPLC(컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IE, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 18 mL/분; 구배: 23분 내 50% B에서 50% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 12.096; RT2(분): 17.544; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 1.5 mL; 실행 수: 5)으로 정제하여 6-((R)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(17.8 mg, 0.03 mmol, 13.3% 수율) 및 6-((S)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(21.3 mg, 0.04 mmol, 15.9% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 41a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 6.81 (s, 2H), 6.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 53.6 Hz, 1H), 4.70 - 4.45 (m, 2H), 4.11 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.01 - 3.83 (m, 3H), 3.29 (s, 3H) 3.16 - 3.02 (m, 2H), 3.00 -2.97 (m, 1H), 2.91 - 2.73 (m, 1H), 2.36 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.23 - 2.11 (m, 1H), 2.11 - 1.93 (m, 2H), 1.93 - 1.67 (m, 3H). LCMS (ESI, m/z): 585.30 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IE-3, 4.6*50 mm 3 um; 이동상 A: Hex(0.1%DEA): EtOH=50: 50; 유량: 1 mL/분; 주입 용량: 5 ul ml; 체류 시간: 2.930분(제1 피크).
실시예 41b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 6.81 (s, 2H), 6.47 (s, 1H), 5.28 (d, J = 53.6 Hz, 1H), 4.67 - 4.41 (m, 2H), 4.21 - 3.99 (m, 2H), 3.99 - 3.87 (m, 2H), 3.35 (s, 3H), 3.15 - 3.03 (m, 2H), 3.06 - 2.97 (m, 1H), 2.94 - 2.76 (m, 1H), 2.35 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.20 - 2.12 (m, 1H), 2.12 -1.92 (m, 2H), 1.92 - 1.70 (m, 3H). LCMS (ESI, m/z): 585.30 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IE-3, 4.6*50 mm 3 um; 이동상 A: Hex(0.1%DEA): EtOH=50: 50; 유량: 1 mL/분; 주입 용량: 5 ul mL; 체류 시간: 5.530분(제2 피크).
실시예 42a&42b: (R)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 (S)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 7-브로모-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(200 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(10.00 g, 30.30 mmol), 탄산 세슘(19.90 g, 60.60 mmol) 및 요오드화 테트라부틸암모늄(1.10 g, 3.00 mmol)의 용액에 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(8.10 g, 48.50 mmol)를 0°C에서 5분 동안 첨가하고 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 여과 후, 여액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(10.00 g, 21.73 mmol, 71.7% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 401.2 [M+H-58]+.
단계 2: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
질소하에서, 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)퀴나졸린-4-온(1.00 g, 2.20 mmol)에 -78°C에서 이소프로필마그네슘 클로라이드-리튬 클로라이드 착물(1.60 mL, 2.20 mmol, THF 중의 1.3 M)을 첨가하였다. 반응물을 -78°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 염화 아연(3.20 mL, 6.50 mmol, MeTHF 중 2 M)을 첨가하고 -78°C에서 5분 동안 교반하고 실온에서 20분 동안 교반하였다. 혼합물을 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0.75 g, 0.65 mmol) 및 6-브로모-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(1.10 g, 2.20 mmol)의 혼합물 내로 옮기고, 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 포화 염화암모늄 용액으로 반응을 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 취합한 유기층을 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에서 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(5/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(0.32 g, 0.40 mmol, 18.5% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 795.2 [M+H]+.
단계 3: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
질소하에, 테트라히드로퓨란(40 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(2.40 g, 15.08 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(15.08 mL, 15.08 mmol, THF 중 1 M)를 0°C에서 첨가하였다. 반응물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 테트라히드로퓨란(40 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(4.00 g, 5.03 mmol)의 혼합물 내로 옮기고, -78°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 취합한 유기층을 포화 염화나트륨으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(2.40 g, 2.61 mmol, 52% 수율)을 무색 고체로서 수득하였다. LCMS: (ESI, m/z): 918.45 [M+H]+.
단계 4: 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
질소하에서, 테트라히드로퓨란(5 mL) 중의 2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올(0.54 g, 3.26 mmol)에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(3.26 mL, 3.26 mmol, THF 중의 1 M)를 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 테트라히드로퓨란(20 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(2.30 g, 2.50 mmol)의 혼합물 내로 옮기고, 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 취합한 유기층을 포화 염화나트륨으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(1.20 g, 1.13 mmol, 45% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: (ESI, m/z): 1065.3 [M+H]+.
단계 5: 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
디클로로메탄(20 mL) 및 트리플루오로아세트산(1 mL) 중 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(1.00 g, 0.94 mmol)을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(700.0 mg, 0.75 mmol, 79.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: (ESI, m/z): 935.2 [M+H]+.
단계 6: 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(5 mL) 중 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(0.65 g, 0.69 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(0.23 g, 0.90 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.18 g, 1.40 mmol)의 용액을 70°C에서 5시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(280.0 mg, 0.31 mmol, 43.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: (ESI, m/z): 917.25 [M+H]+.
단계 7: (R)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 (S)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(10 mL) 중 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(280.0 mg, 0.31 mmol)의 용액을 50°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축시키고, N,N-디이소프로필에틸아민을 사용하여 pH > 7로 조정하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴로 용출하면서 역상으로 및 키랄_HPLC(컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SC, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/min; 기울기: 8분 내 50% B에서 50% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 4.94; RT2(분): 6.83; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 1 mL; 실행 수: 3)으로 정제하여 (R)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(46.7 mg, 0.069 mmol, 22.6% 수율) 및 (S)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(43.5 mg, 0.064 mmol, 21% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 42a: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d4, ppm) δ 7.98 - 7.91 (m, 1H), 7.38 - 7.29 (m, 1H), 6.78 - 6.69 (m, 1H), 6.67 (s, 1H), 5.25 (d, J = 53.6 Hz, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.72 - 4.55 (m, 2H), 4.21- 4.09 (m, 2H), 4.04 - 3.92 (m, 2H), 3.30 - 3.10 (m, 3H), 3.09 - 2.90 (m, 1H), 4.46 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.31 - 2.11 (m, 2H), 2.10 - 1.81 (m, 4H); LCMS: (ESI, m/z): 677.1 [M+H]+.
키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IC-3, 4.6*50 mm 3 um; 이동상 A: Hex(0.1%DEA): EtOH=50: 50; 유량: 1 mL/분; 주입 용량: 5 ul mL; 체류 시간: 1.070분(제1 피크).
실시예 42b : 1H NMR (300 MHz, Methanol-d4, ppm) δ 7.90 (dd, J = 5.2, 1.8 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 7.4, 1.8 Hz, 1H), 6.71 - 6.55 (m, 2H), 5.21 (d, J = 53.6 Hz, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.59 (dd, J = 5.1, 2.6 Hz, 2H), 4.10 (d, J = 2.3 Hz, 2H), 3.96 (dd, J = 5.4, 2.7 Hz, 2H), 3.24 - 3.05 (m, 3H), 3.03 - 2.89 (m, 1H), 2.51 - 2.38 (m, 3H), 2.33 - 2.05 (m, 2H), 2.05 - 1.71 (m, 4H). LCMS: (ESI, m/z): 677.1 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IC-3, 4.6*50 mm 3 um; 이동상 A: Hex(0.1%DEA): EtOH=50: 50; 유량: 1 mL/분; 주입 용량: 5 ul mL; 체류 시간: 1.880분(제2 피크).
실시예 43: (S)-2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (S)-(1-시아노-3-히드록시프로판-2-일)카바메이트
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 (2S)-2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-3-시아노-프로판산(1.00 g, 4.67 mmol)의 용액을 -10°C에서 트리에틸아민(0.47 g, 4.67 mmol)으로 처리한 후, 이소부틸 클로로포르메이트(0.67 g, 4.90 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 -10°C에서 4분 동안 교반하고, 거칠게 소결된 유리 깔때기를 통해 여과하였다. 한편, 다른 플라스크에서, 물(5 mL) 중 수소화붕소 나트륨(0.36 g, 9.57 mmol)의 용액을 제조하고, 빙수조에서 냉각시켰다. 여과된 혼합 무수물 용액을 차가운 수소화붕소 나트륨 용액에 적가하고 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 테트라히드로퓨란을 회전 증발기에서 제거하고, 반응물을 염산(1 N) 용액을 사용하여 PH = 3.0으로 조절하고, 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 유기층을 중탄산 나트륨 수용액으로 2회 세척하고 무수 황산 나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 제거하여 tert-부틸 (S)-(1-시아노-3-히드록시프로판-2-일)카바메이트(0.68 g, 3.40 mmol, 72.8% 수율)를 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 201.2 [M+H]+.
단계 2: tert-부틸 (S)-(1-((7-브로모-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)-3-시아노프로판-2-일)카바메이트
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 tert-부틸 (S)-(1-시아노-3-히드록시프로판-2-일)카바메이트(0.72 g, 3.60 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(0.29 g, 7.21 mmol, 60% 순도)을 0°C에서 첨가하였다. 그런 다음, 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(0.50 g, 1.80 mmol)을 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 용액을 65°C로 가열하고 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염산(1 N) 용액으로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(0~100%)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (S)-(1-((7-브로모-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)-3-시아노프로판-2-일)카바메이트(0.70 g, 1.53 mmol, 84.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 357.0 [M+H-100]+.
단계 3: (S)-3-아미노-4-((7-브로모-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)부탄니트릴
트리플루오로아세트산(1 mL) 및 디클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 (S)-(1-((7-브로모-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)-3-시아노프로판-2-일)카바메이트 (0.70 g, 1.53 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 N,N-디이소프로필에틸아민을 사용하여 pH = 7로 조정하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-3-아미노-4-((7-브로모-6-클로로-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-5-일)옥시)부탄니트릴(0.48 mg, 1.34 mmol, 87.8% 수율)을 무색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 357.0 [M+H]+.
단계 4: (S)-2-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
아세토니트릴(5 mL) 중 (3S)-3-아미노-4-[(7-브로모-6-클로로-4-옥소-3H-퀴나졸린-5-일)옥시]부탄니트릴(0.77 g, 2.15 mmol)의 용액에 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(1.31 g, 8.61 mmol) 및 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(1.46 g, 2.80 mmol)를 첨가하고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-2-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(0.53 g, 1.56 mmol, 72.5% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 339.0 [M+H]+.
단계 4: (S)-2-(9-브로모-8-클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
N,N-디메틸포름아미드(5 mL) 중 (S)-2-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(0.40 g, 1.18 mmol), 요오도메탄(0.20 g, 1.42 mmol) 및 탄산 세슘(0.77 g, 2.36 mmol)의 용액을 60°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고 포화 염수로 세척하였다. 그런 다음, 유기층을 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-2-(9-브로모-8-클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(0.18 g, 0.51 mmol, 43.2% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 353.0 [M+H]+.
단계 4: (S)-(8-클로로-5-(시아노메틸)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산
질소하에서, 톨루엔(5 mL) 중 (S)-2-(9-브로모-8-클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(0.15 g, 0.42 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(1.08 g, 4.24 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(0.06 g, 0.08 mmol) 및 아세트산 칼륨(0.08 g, 1.27 mmol)의 혼합물을 100°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 용해시켰다. 여과 후, 여액을 감압하에 농축시켜 700 mg의 조 (S)-(8-클로로-5-(시아노메틸)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산을 갈색 시럽으로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 319.0 [M+H]+.
단계 4: (S)-2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
질소하에서, 아세토니트릴(10 mL) 및 물(2 mL) 중 (S)-(8-클로로-5-(시아노메틸)-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산(0.70 g, 조), 6-브로모-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(0.15 g, 0.57 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(0.06 g, 0.09 mmol) 및 불화 칼륨(0.08 g, 1.32 mmol)의 용액을 80°C에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 역상 크로마토그래피 및 분취용-HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 33 B에서 43 B로, ~분 내 43 B에서 ~B로, ~분 내 ~B에서 ~B로, ~분 내 ~B에서 ~B로, ~분 내 ~B에서 ~B로; 254/220 nm; RT1:7.55; RT2; 주입 용량: ml; 실행 수:;)로 정제하여 (S)-2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(21.8 mg, 0.049 mmol, 11.1% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 449.3 [M+H]+.
실시예 43: 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d, ppm) δ 8.60 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 4.84 (dt, J = 13.3, 3.7 Hz, 1H), 4.45 (dd, J = 48.6, 13.2 Hz, 1H), 4.24 - 4.12 (m, 1H), 3.46 (d, J = 4.4 Hz, 3H), 3.03 - 2.75 (m, 2H), 2.44 (q, J = 2.3 Hz, 3H).
실시예 44: (S)-6-(8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
수소화 나트륨(0.77 g, 19.24 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C로 냉각한 테트라히드로퓨란(10 mL) 중의 2-메틸아미노에탄올(0.58 g, 7.69 mmol)에 첨가하였다. 7-브로모-2,6-디클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(2.00 g, 6.41 mmol)을 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반하고, 실온으로 가온한 후, 65°C로 가열하고 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(0~100%)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(1.10 g, 3.00 mmol, 46.7% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 365.95 [M+H]+.
단계 2: 9-브로모-2,8-디클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(2.29 g, 8.99 mmol)의 용액을 디클로로메탄(20 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-(메틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(1.10 g, 3.00 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(5.80 g, 44.96 mmol)에 실온에서 첨가하고 12시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(0~100%)로 용출하면서 역상으로 정제하여 9-브로모-2,8-디클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(0.45 g, 1.29 mmol, 43% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 348.1 [M+H]+.
단계 3: (S)-9-브로모-8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 (S)-(2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(2.63 g, 17.19 mmol) 및 수소화 나트륨(1.37 g, 34.38 mmol, 60% 순도)의 용액을 40°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 9-브로모-2,8-디클로로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(3.00 g, 8.60 mmol)을 첨가하고 40°C에서 2.5시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-9-브로모-8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(2.12 g, 3.90 mmol, 45.3% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 465.2 [M+H]+.
단계 4: (S)-(8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산
질소하에서, 1,4-디옥산(5 mL) 중 (S)-9-브로모-8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(0.40 g, 0.86 mmol), Pin2B2(0.65 g, 2.58 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(0.14 g, 0.17 mmol) 및 아세트산 칼륨(0.25 g, 2.58 mmol)의 용액을 120°C에서 1시간 동안 환류시켰다. 용매를 진공하에 농축하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 용해시켰다. 여과 후, 여액을 감압하에 농축시켜 1.2 g의 조 (S)-(8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산을 갈색 시럽으로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 431.2 [M+H]+.
단계 4: (S)-6-(8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 1,4-디옥산(10 mL) 및 물(2 mL) 중 (S)-(8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산(1.50 g, 조), 6-브로모-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(0.19 g, 0.76 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(0.08 g, 0.12 mmol) 및 탄산 나트륨(0.12 g, 1.17 mmol)의 용액을 80°C에서 10분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴을 사용한 역상으로 및 분취용-HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 33% B에서 63% B로, 63% B; 파장: 254 nm; RT1(분): 8.98; 실행 수: 0)으로 정제하여 (S)-6-(8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(41.0 mg, 0.072 mmol, 12.2% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 561.2 [M+H]+.
실시예 44: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 6.90 (s, 1H), 6.71 (s, 2H), 6.44 (s, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.76 - 4.40 (m, 2H), 4.11 - 3.86 (m, 4H), 3.65 - 3.51 (m, 1H), 3.31 -3.18 (m, 4H), 3.10 - 2.94 (m, 1H), 2.70 - 2.54 (m, 2H), 2.35 (s, 4H), 2.05 - 1.92 (m, 1H),1.92 - 1.79 (m, 2H),1.79 - 1.59 (m, 1H).
실시예 45: (R)-6-(4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 5-(2-(((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
질소하에, 테트라히드로퓨란(80 mL) 중 2-[[(1R)-1-(5-아미노-3-피리딜)에틸]아미노]에탄올(0.36 g, 1.98 mmol))에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(1.67 mL, 1.67 mmol, THF 중 1 M)를 0°C에서 첨가하였다. 반응물을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 테트라히드로퓨란(80 mL) 중 7-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(1.40 g, 1.52 mmol)의 혼합물 내로 옮기고, 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 취합한 유기층을 포화 염화나트륨으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-(2-(((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(0.55 g, 0.51 mmol, 33.4% 수율)을 무색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1079.35 [M+H]+.
단계 2: 7-((R)-6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-(((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 및 트리플루오로아세트산(5 mL) 중 5-(2-(((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(0.55 g, 0.51 mmol)을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 스트라타(Strata)-X-C로 정제하여 7-((R)-6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-(((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(310 mg, 0.44 mmol, 85.8% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 709.2 [M+H]+.
단계 3: (R)-6-(4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(5 mL) 중 7-((R)-6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-(((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(0.29 g, 0.41 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(0.14 g, 0.53 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.26 g, 2.05 mmol)의 용액을 70°C에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 H2O/아세토니트릴로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피 및 분취용-HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 36% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.67; 실행 수: 0)로 정제하여 (R)-6-(4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(84.2 mg, 0.12 mmol, 17.5% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 691.1 [M+H]+.
실시예 45 : 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 8.00 - 7.75 (m, 2H),7.00 - 6.72 (m, 3H), 6.51 (s, 1H), 6.49 - 6.33 (m, 1H), 5.41 -5.23 (m, 2H), 5.13 (d, J = 53.6 Hz, 1H), 4.60 - 4.28 (m, 2H), 4.18 - 4.03 (m, 1H), 4.02 - 3.92 (m, 1H), 3.80 - 3.63 (m, 1H), 3.59 - 3.42 (m, 1H), 3.20 - 2.95 (m, 3H), 2.90 - 2.70 (m, 1H),2.45- 2.30 (m, 3H), 2.22 - 2.12 (m, 1H), 2.08 - 1.91 (m, 2H), 1.90 - 1.68 (m, 3H), 1.61 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 46: 6-(8-클로로-4-(피리딘-3-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 7-브로모-6-클로로-5-(2-((피리딘-3-일메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
수소화 나트륨(0.46 g, 11.53 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C로 냉각한 테트라히드로퓨란(10 mL) 중의 2-(3-피리딜메틸아미노)에탄올(0.53 g, 3.46 mmol)에 첨가하였다. 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(1.00 g, 2.88 mmol)을 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반하고, 실온으로 가온한 후, 65°C로 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(0~100%)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-6-클로로-5-(2-((피리딘-3-일메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(700 mg, 1.71 mmol, 59.3% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 409.1 [M+H]+.
단계 2: 9-브로모-8-클로로-4-(피리딘-3-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(2.58 g, 4.96 mmol)의 용액을 아세토니트릴(10 mL) 중의 7-브로모-6-클로로-5-(2-((피리딘-3-일메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(1.35 g, 3.3 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(1.51 g, 9.91 mmol)에 실온에서 첨가하고 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(0~100%)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-8-클로로-4-(피리딘-3-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(1.10 g, 2.81 mmol, 85% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 391.1 [M+H]+.
단계 3: (8-클로로-4-(피리딘-3-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산
질소하에서 1,4-디옥산(8 mL) 중 9-브로모-8-클로로-4-(피리딘-3-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(1.10 g, 2.81 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(1.43 g, 5.62 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(0.46 g, 0.56 mmol) 및 아세트산 칼륨(0.83 g, 8.43 mmol)의 용액을 16시간 동안 환류시켰다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 용해시켰다. 여과 후, 여액을 감압하에 농축시켜 1.50 g의 조 (8-클로로-4-(피리딘-3-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산을 갈색 시럽으로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 357.0 [M+H]+.
단계 4: 6-(8-클로로-4-(피리딘-3-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 아세토니트릴(10 mL) 및 물(2 mL) 중 (8-클로로-4-(피리딘-3-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)보론산(1.50 g, 조), 6-브로모-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(0.28 g, 1.11 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(0.12 g, 0.17 mmol) 및 불화 칼륨(0.15 g, 2.57 mmol)의 용액을 80°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(5/1) 및 H2O~아세토니트릴로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피 및 분취용-HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 25% B에서 55% B로, 55% B; 파장: 254 nm; RT1(분): 9.05; 실행 수: 0)로 정제하여 6-(8-클로로-4-(피리딘-3-일메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(102.9 mg, 0.21 mmol, 24.7% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 487.3 [M+H]+.
실시예 46: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ8.61 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.85 - 7.75 (m, 1H),7.43 - 7.30 (m, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.46 (s, 1H), 5.28 - 5.02 (m, 2H), 4.78 - 4.53 (m, 2H), 4.06 - 3.88 (m, 2H), 2.38 - 2.30 (m, 3H).
실시예 47a&47b: 6-((R)-4-((1H-이미다졸-5-일)일메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((1H-이미다졸-5-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 7-브로모-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
수소화 나트륨(0.58 g, 14.55 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C로 냉각한 테트라히드로퓨란(10 mL) 중의 2-(((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)아미노)에탄-1-올(1.02 g, 2.67 mmol)에 첨가하였다. 그런 다음, 7-브로모-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(0.80 g, 2.42 mmol)을 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반하고, 실온으로 가온한 후, 실온으로 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(0.90 g, 1.30 mmol, 53.5% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 692.0 [M+H]+.
단계 2: 9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(0.43 g, 1.69 mmol)의 용액을 클로로포름(5 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(0.90 g, 1.30 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.33 g, 2.60 mmol)에 70°C에서 첨가하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(0.48 g, 0.71 mmol, 54.8% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 674.0 [M+H]+.
단계 3: 9-브로모-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린
질소하에서, 0°C로 냉각한 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(2.22 mL, 2.22 mmol, THF 중 1 M)를 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(0.35 g, 2.22 mmol)에 첨가하였다. 그런 다음, 9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(0.50 g, 0.74 mmol)을 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반하여 실온으로 가온하고 12시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 1 N 염산 용액으로 희석하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 9-브로모-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(380.0 mg, 0.48 mmol, 64.3% 수율)을 무색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 797.2 [M+H]+.
단계 4: 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(3 mL) 및 물(0.6 mL) 중 9-브로모-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(0.63 g, 0.79 mmol), [6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-2-피리딜]보론산(1.03 g, 1.58 mmol), 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 디클로로메탄 착물(0.06 g, 0.08 mmol) 및 인산 칼륨(0.50 g, 2.37 mmol)의 용액을 65°C에서 60분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민(0.60 g, 0.56 mmol, 71.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1065.3 [M+H]+.
단계 5: 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-요오도-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민
아세트산(10 mL) 중 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민(0.59 g, 0.55 mmol) 및 N-요오도석신이미드(0.14 g, 0.61 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 티오황산나트륨 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-요오도-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민(0.45 g, 0.38 mmol, 68.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1191.5 [M+H]+.
단계 6: 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, N,N-디메틸포름아미드(10 mL) 중 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-요오도-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸피리딘-2-아민(430 mg, 0.36 mmol) 및 구리(687.97mg, 10.83mmol)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 비스[(2,2-디플루오로-2-플루오로설포닐-아세틸)옥시]구리(4.52 g, 10.05 mmol)를 첨가하고, 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 용액을 실온으로 가온한 후, 90°C 미만으로 가온하고 10분 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(230.0 mg, 0.15 mmol, 42.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1133.45 [M+H]+.
단계 7: 6-((R)-4-((1H-이미다졸-5-일)일메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((1H-이미다졸-5-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 중 6-(8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-4-((1-트리틸-1H-이미다졸-5-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(290 mg, 0.20 mmol)의 용액을 50°C에서 10시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피, 분취용-HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 27% B에서 57% B로; 파장: 254 nm; RT1(분): 8.5; 실행 수: 0) 및 키랄_HPLC(컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SB, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 19분 내 50% B에서 50% B로; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 4.714; RT2(분): 13.597; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 2 mL; 1)로 정제하여 6-((R)-4-((1H-이미다졸-5-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(10.9 mg, 0.017 mmol, 8.2% 수율) 및 6-((S)-4-((1H-이미다졸-5-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(11.2 mg, 0.017 mmol, 8.4% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 47a: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d4, ppm) δ7.68 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.31 (d, J = 53.6 Hz, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.62 - 4.49 (m, 2H), 4.35 - 4.16 (m, 2H), 3.99 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 3.27 - 3.21 (m, 2H), 3.20 - 3.14 (m, 1H), 3.08 - 2.94 (m, 1H), 2.45 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.40 - 2.01 (m, 3H), 2.01 - 1.78 (m, 3H). LCMS (ESI, m/z): 651.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SB, 4.6*100 mm, 3 μm; 이동상 A: Hex(0.1%DEA): EtOH=50: 50; 유량: 1 mL/분; 주입 용량: 5 ul mL; 체류 시간: 2.140분(제1 피크).
실시예 47b: 1H NMR (300 MHz, Methanol- d4, ppm) δ 7.68 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.31 (d, J = 53.6 Hz, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.59 - 4.50 (m, 2H), 4.33 - 4.18 (m, 2H), 4.04 - 3.96 (m, 2H), 3.30 -3.20 (m, 2H), 3.20 - 3.16 (m, 1H), 3.11 - 2.95 (m, 1H), 2.50 - 2.40 (m, 3H), 2.40 -2.05 (m, 3H), 2.05 - 1.85 (m, 3H). LCMS (ESI, m/z): 651.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SB, 4.6*100 mm, 3 μm; 이동상 A: Hex(0.1%DEA): EtOH=50: 50; 유량: 1 mL/분; 주입 용량: 5 ul mL; 체류 시간: 6.450분(제2 피크).
실시예 48: 6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 5-(2-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
질소하에서, 테트라히드로퓨란(70 mL) 중의 2-[[(1R)-1-(2-아미노-3-피리딜)에틸]아미노]에탄올(0.39 g, 2.12 mmol)에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(THF 중의 1 M)(1.90 mL, 1.90 mmol)를 0°C에서 첨가하고, 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 테트라히드로퓨란(70 mL) 중 7-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(1.50 g, 1.63 mmol)의 혼합물 내로 옮기고 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-(2-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(0.60 g, 0.47 mmol, 28.9% 수율)을 무수 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1079.4 [M+H]+.
단계 2: 7-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸아미노)에톡시)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(5 mL) 중 5-(2-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(0.60 g, 0.47 mmol)을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 스트라타(Strata)-X-C 컬럼으로 정제하여 7-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸아미노)에톡시)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(380.0 mg, 0.46 mmol, 96.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 709.4 [M+H]+.
단계 3: 6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(10 mL) 중 7-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸아미노)에톡시)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(0.38 g, 0.46 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(0.15 g, 0.59 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.59 g, 4.56 mmol)의 용액을 70°C에서 5시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 H2O/아세토니트릴(0~100)로 용출하면서 역상의 플래시 크로마토그래피 및 분취용-HPLC(컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH F-페닐 OBD 컬럼 19*250 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: MeOH-----분취용; 유량: 25 mL/min; 기울기: 8분 내 67% B에서 85% B로, 85% B; 파장: 254 nm; RT1(분): 6.58; 실행 수: 0)로 정제하여 6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로-헥사히드로-1H-피롤리진-7a-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(68.1 mg, 0.099 mmol, 18.4% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 691.25 [M+H]+.
실시예 48: 1H NMR (400 MHz, Methanol-d4, ppm) δ7.94 (s, 1H), 7.75 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.77 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 6.53 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 53.6 Hz, 1H), 5.51 - 5.35 (m, 1H), 5.35 - 5.20(m, 3H), 3.80 - 3.43(m, 2H),3.26 - 3.09(m, 3H), 3.09 -2.90(m, 1H), 2.43 (d, J = 0.4 Hz, 3H), 2.30 - 2.06 (m, 3H), 2.06 - 1.80 (m, 3H), 1.75 -1.55 (m, 3H).
실시예 49: 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 3-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일카바메이트
테트라히드로퓨란(9 mL) 중 ((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메탄올(163.3 mg, 0.92 mmol) 및 수소화 나트륨(73.7 mg, 1.84 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(90.0 mg, 0.09 mmol)를 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 3-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일카바메이트(100.0 mg, 0.09 mmol, 96% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1017.5 [M+H]+.
단계 2: 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(6.5 mL) 중 tert-부틸 3-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일카바메이트(60.0 mg, 0.06 mmol)의 용액을 50°C에서 6시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 역상 크로마토그래피 및 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스셀렉트(Xcelect) CSH F-페닐 OBD 컬럼 19*250 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: MeOH-----분취용; 유량: 25 mL/분; 구배: 8분 내 66% B에서 78% B로, 78% B; 파장: 254 nm; RT1(분): 7.72) 정제하여 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(6.5 mg, 0.01 mmol, 16.6% 수율)을 정제하였다. LCMS (ESI, m/z): 633.3[M+H]+.
실시예 49: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ7.87 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.25 (dd, J = 7.3, 1.8 Hz, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.72 (s, 2H), 6.50 (dd, J = 7.3, 4.9 Hz, 1H), 6.42 (s, 1H), 6.00 (s, 2H), 5.12 (d, J = 56.2 Hz, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.60 (m, 2H), 4.26 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 3.85 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 3.47 - 3.33 (m, 2H), 2.80 (m, 1H), 2.38 - 2.30 (m, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.11 - 1.94 (m, 1H), 1.90 - 1.68 (m, 1H)
실시예 50: (R)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (R)-(3-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일)카바메이트
테트라히드로퓨란(9 mL) 중 (R)-(2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(163.2 mg, 0.92 mmol) 및 수소화 나트륨(73.7 mg, 1.84 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(90.0 mg, 0.09 mmol)를 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (R)-(3-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.09 mmol, 96% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1017.2 [M+H]+.
단계 2: (R)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(3 mL) 중 tert-부틸 (R)-(3-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-일)카바메이트(95.0 mg, 0.09 mmol)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 역상 크로마토그래피 및 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 39% B에서 69% B로, 69% B; 파장: 254 nm; RT1(분): 6.5; 실행 수: 0) 정제하여 (R)-6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-((2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(11.9 mg, 0.018 mmol, 98.9% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 677.3 [M+H]+.
실시예 50: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.88 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 7.4, 1.8 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.72 (s, 2H), 6.51 (dd, J = 7.3, 4.9 Hz, 1H), 6.42 (s, 1H), 6.02 (s, 2H), 4.82 (s, 2H), 4.68 - 4.48 (m, 2H), 4.05 - 3.89 (m, 2H), 3.85 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 3.26 - 3.13 (m, 1H), 3.10 - 2.90 (m, 2H), 2.75 - 2.57 (m, 1H), 2.40 - 2.13 (m, 5H), 1.90 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 1.67 (m, 2H)
실시예 51: 1-(2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2(1H)-온
합성 경로
단계 1: 1-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)피리딘-2(1H)-온
N,N-디메틸포름아미드(40 mL) 중 1H-피리딘-2-온(4.00 g, 42.06 mmol), (2-브로모에톡시)(tert-부틸)디메틸실란(18 mL, 84.12 mmol) 및 수소화 나트륨(5.04 g, 126.18 mmol, 60% 순도)의 용액을 25oC에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 반응 혼합물을 H2O로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 포화 염수로 세척하였다. 그런 다음, 유기층을 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(60/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-[2-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시에틸]피리딘-2-온(1.36 g, 4.15 mmol, 9.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 254.2 [M+H]
단계 2: 1-(2-히드록시에틸)피리딘-2(1H)-온. 염화수소
HCl/1,4-디옥산(40.8 mL) 중 1-[2-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시에틸]피리딘-2-온(1.36 g, 5.37 mmol)의 용액을 25oC에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축시켜 1-(2-히드록시에틸)피리딘-2(1H)-온. 염화수소(1.00 g, 조 물질)를 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 140.2 [M+H]
단계 3: 2-(2-옥소피리딘-1(2H)-일)에틸 메탄설포네이트
디클로로메탄(9 mL) 중 1-(2-히드록시에틸)피리딘-2-온(400.0 mg, 조), 메탄설폰산무수물(651.0 mg, 3.74 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(1.6 mL, 9.20 mmol)의 용액을 25oC에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축시켜 2-(2-옥소-1-피리딜)에틸 메탄설포네이트(400.0 mg, 조)를 수득하였다.
단계 4: 1-(2-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸아미노)에틸)피리딘-2(1H)-온
디클로로메탄(9 mL) 중 2-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시에탄아민(322.9 mg, 1.84 mmol) 및 2-(2-옥소-1-피리딜)에틸 메탄설포네이트(400.0 mg, 조)의 용액을 25oC에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-[2-[2-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시에틸아미노]에틸]피리딘-2-온(170.0 mg, 0.46 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 297.2 [M+H]+.
단계 5: 1-(2-(2-히드록시에틸아미노)피리딘-2(1H)-온. 염화수소
1,4-디옥산(2.6 mL) 중 디메틸 설폭사이드(5 mL) 및 HCl의 1-[2-[2-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시에틸아미노]에틸]피리딘-2-온(270.0 mg, 0.91 mmol)의 용액을 25oC에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축시켜 1-[2-(2-히드록시에틸아미노)에틸]피리딘-2-온. 염화수소(165.9 mg, 조)를 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 183.0[M+H]
단계 6: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(2-(2-옥소피리딘-1(2H)-일)에틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(8 mL) 중 1-[2-(2-히드록시에틸아미노)에틸]피리딘-2-온. 염화수소(165.9 mg, 조) 및 수소화 나트륨(109.2 mg, 2.73 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-6-클로로-5-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(279.0 mg, 0.46 mmol)을 첨가하고 65°C에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 1 N HCl으로 켄칭하고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(2-(2-옥소피리딘-1(2H)-일)에틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(110.0 mg, 0.12 mmol, 26.8% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 775.2[M+H]
단계 7: 1-(2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2(1H)-온
아세토니트릴(3.8 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(2-옥소피리딘-1(2H)-일)에틸아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(115.0 mg, 0.15 mmol), 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(100.3 mg, 0.19 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔(0.07 mL, 0.45 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(60/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-(2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2(1H)-온(100.0 mg, 0.12 mmol, 83.7% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 757.2 [M+H]+
단계 8: 1-(2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2(1H)-온
2,2,2-트리플루오로아세트산(5.6 mL) 중 1-[2-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-8-클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]피리딘-2-온(100.0 mg, 0.13 mmol)의 용액을 50oC에서 6시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 역상 크로마토그래피 및 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 20% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 10.38; 실행 수: 0) 정제하여 1-[2-[7-[6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-8-클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]피리딘-2-온(23.6 mg, 0.05 mmol, 24.1% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 517.2 [M+H]+.
실시예 51: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.28 (s, 1H), 7.57 (dd, J = 6.8, 2.1 Hz, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.73 (s, 2H), 6.43 (s, 1H), 6.30 (d, J = 10.0 Hz ,1H), 6.09 (m, 1H), 4.52 (m, 2H), 4.29 - 4.03 (m, 4H), 3.82 (m, 2H), 2.33 (d, J = 2.3 Hz, 3H)
실시예 52: 6-[13-[(2-아미노-5-클로로-3-피리딜)메틸]-8-클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로 [7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-7-일]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(2 mL) 중 수소화 나트륨(117.5 mg, 2.94 mmol, 60% 순도) 및 2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올(354.8 mg, 1.96 mmol)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(300.0 mg, 0.49 mmol)을 첨가하고 65°C로 가열하였다. 이 후, 혼합 용액을 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(0~100%)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(250.0 mg, 0.28 mmol, 58.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 760.2 [M+H]+.
단계 2: 6-[13-[(2-아미노-3-피리딜)메틸]-8-클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로 [7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-7-일]-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(10 mL) 중 5-(2-(((2-아미노피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(235.9 mg, 1.55 mmol)의 용액을 25oC에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(262.1 mg, 0.50 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-[13-[(2-아미노-3-피리딜)메틸]-8-클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-7-일]-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(50.0 mg, 0.13 mmol, 32.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 742.2 [M+H]+.
단계 3: 6-[13-[(2-아미노-5-클로로-3-피리딜)메틸]-8-클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로 [7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-7-일]-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
N,N-디메틸포름아미드(5 mL) 중 6-[13-[(2-아미노-3-피리딜)메틸]-8-클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-7-일]-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(30.0 mg, 0.04 mmol) 및 N-클로로석신이미드(5.9 mg, 0.04 mmol)의 용액을 50°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 취합하고 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (22.0 mg, 0.039 mmol, 29.8% 수율) 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 776.2 [M+H]+.
단계 4: 6-[13-[(2-아미노-5-클로로-3-피리딜)메틸]-8-클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로 [7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-7-일]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
디클로로메탄(3.0 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(0.6 mL) 중 6-[13-[(2-아미노-5-클로로-3-피리딜)메틸]-8-클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-7-일]-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(22.0 mg, 0.03 mmol)의 용액을 50°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(5/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 물질 7.5 mg을 황색 고체로서 수득하였다.
조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 33 B에서 63 B로, 254 nm; RT1: 6.5로 정제하여 6-[13-[(2-아미노-5-클로로-3-피리딜)메틸]-8-클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-7-일]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(3.1 mg, 0.0057 mmol, 20.2% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 536.3 [M+H]+.
실시예 52: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.42 (s, 1H), 7.89 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.45 (s, 1H), 6.27 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 4.74 - 4.60 (m, 2H), 3.92 (d, J = 4.1 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H).
실시예 53a 및 53b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 7-브로모-6-클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(50 mL) 중 7-브로모-6-클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(5.00 g, 16.92 mmol) 및 탄산 세슘(16.64 g, 50.77 mmol)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(6.0 mL, 33.84 mmol)를 첨가하고, 60°C에서 48시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-브로모-6-클로로-5,8-디플루오로-3-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)퀴나졸린-4-온(5.00 g, 11.76 mmol, 69.5% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 424.9 [M+H]+
단계 2: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
질소하에서 1,4-디옥산(18.0 mL) 및 물(3.6 mL) 중 [6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-2-피리딜]보론산(3.31 g, 8.46 mmol), 7-브로모-6-클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(1.80 g, 4.23 mmol), 트리-tert-부틸포스핀 테트라플루오로보레이트(490.45 mg, 1.69 mmol), 불화 칼륨(491.2 mg, 8.46 mmol) 및 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐-클로로포름 부가물(875.2 mg, 0.85 mmol)의 용액을 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(3/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(1.30 g, 1.87 mmol, 44.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 693.3 [M+H]+
단계 3: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-3-요오도-4-메틸피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
N,N-디메틸포름아미드(6 mL) 및 메틸 알코올(6 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(1.30 g, 1.88 mmol) 및 N-요오도석신이미드(1.27 g, 5.63 mmol)의 용액을 0°C에서 2분 동안 교반하였다. 그런 다음, 트리플루오로아세트산(0.02 g, 0.19 mmol)을 첨가하고 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 아황산나트륨으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(3/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-3-요오도-4-메틸피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(1.2 g, 1.46 mmol, 78.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 819.1 [M+H]+
단계 4: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
질소하에서, N,N-디메틸포름아미드(12.0 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-3-요오도-4-메틸피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(1.20 g, 1.46 mmol)과 구리(0.28 g, 4.39 mmol)의 용액을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 비스[(2,2-디플루오로-2-플루오로설포닐-아세틸)옥시]구리(1.84 g, 4.39 mmol)를 첨가하고, 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 용액을 실온으로 가온한 후, 90°C 미만으로 가온하고 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 여과하고; 여액을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(5/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(1.10 g, 1.44 mmol, 98.6% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 761.2 [M+H]+
단계 5: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(500.0 mg, 0.66 mmol) 및 테트라부틸암모늄플루오라이드(685.7 mg, 2.63 mmol)의 용액을 50°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/디클로로메탄(1/5)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디클로로퀴나졸린-4(3H)-온(270.0 mg, 0.42 mmol, 65.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 631.2 [M+H]+.
단계 6: 5-(2-(((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
수소화 나트륨(85.5 mg, 2.14 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C로 냉각한 테트라히드로퓨란(1.0 mL) 중 (R)-2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올(155.1 mg, 0.86 mmol)에 첨가하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(270.0 mg, 0.43 mmol)을 첨가하고 0°C에서 5분 동안 교반한 다음, 65°C에서 20분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염산으로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(4/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-(2-(((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(200.0 mg, 0.25 mmol, 59% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 792.3 [M+H]+.
단계 7: 6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(3.0 mL) 중 5-(2-(((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(200.0 mg, 0.25 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(162.8 mg, 1.26 mmol)의 용액을 25°C에서 3분 동안 교반하였다. 그런 다음, 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(128.2 mg, 0.50 mmol)를 첨가하고, 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(94/6)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(110.0 mg, 0.14 mmol, 56.3% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 774.2 [M+H]+.
단계 8: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(2.0 mL) 중 6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(100.0 mg, 0.13 mmol)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(4/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 50 mg의 조 물질을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 29% B에서 59% B로; 파장: 254 nm; RT1(분): 6.5로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(14.6 mg, 0.027 mmol, 21.2% 수율) 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(15.2 mg, 0.028 mmol, 22% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 53a: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.57 (s, 1H), 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.70 - 7.56 (m, 1H), 6.83 (s, 2H), 6.72 - 6.61 (m, 1H), 6.49 (s, 1H), 6.37 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.49 - 4.38 (m, 1H), 4.29 - 4.15 (m, 1H), 3.64 (dd, J = 15.6, 7.2 Hz, 1H), 3.39 (dd, J = 15.4, 6.2 Hz, 1H), 2.36 (s, 3H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS (ESI, m/z): 534.1 [M+H]+.
실시예 53b: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 8.57 (s, 1H), 7.96 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 7.5, 1.9 Hz, 1H), 6.83 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.51 - 6.45 (m, 1H), 6.42 - 6.34 (m, 1H), 5.76 (s, 2H), 4.59 - 4.46 (m, 1H), 4.35 - 4.24 (m, 1H), 3.69 (dd, J = 15.5, 6.6 Hz, 1H), 3.40 - 3.33 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS (ESI, m/z): 534.1 [M+H]+.
실시예 54: 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-((3-(디메틸아미노)옥세탄-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 N-[3-[[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-8-클로로-3-[[3-(디메틸아미노)옥세탄-3-일]메톡시]-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트
테트라히드로퓨란(1.5 mL) 중 [3-(디메틸아미노)옥세탄-3-일]메탄올(40.2 mg, 0.30 mmol) 및 수소화 나트륨(20.4 mg, 0.51 mmol, 60% 순도)의 용액을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(100.0 mg, 0.10 mmol)를 첨가하고 60°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염산으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1/20)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[3-[[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-8-클로로-3-[[3-(디메틸아미노)옥세탄-3-일]메톡시]-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(60.0 mg, 0.056 mmol, 54.9% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1071.3 [M+H]+
단계 2: 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-((3-(디메틸아미노)옥세탄-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-8-클로로-3-[[3-(디메틸아미노)옥세탄-3-일]메톡시]-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(60.0 mg, 0.056 mmol)의 용액을 50°C에서 6시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 27% B에서 57% B로; 파장: 254 nm） 정제하여 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-((3-(디메틸아미노)옥세탄-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(19.1 mg, 0.030 mmol, 53.5% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 631.2 [M+H]+
실시예 54: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.95 - 7.79 (m, 1H), 7.39 - 7.22 (m, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.74 (s, 2H), 6.56 - 6.48 (m, 1H), 6.44 (s, 1H), 6.02 (s, 2H), 4.87 - 4.78 (m, 2H), 4.71 - 4.60 (m, 2H), 4.60 - 4.55 (m, 1H), 4.53 - 4.46 (m, 1H), 4.38 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.33 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 3.99 - 3.84 (m, 2H), 2.41 - 2.31 (m, 3H), 2.14 (s, 6H).
실시예 55: 3-(((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)-3-메틸티에탄 1,1-디옥시드
합성 경로
단계 1: 3-(((4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)-3-메틸티에탄 1,1-디옥시드
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 수소화 나트륨(14.7 mg, 0.61 mmol) 및 (3-메틸-1,1-디옥소-티에탄-3-일)메탄올(46.1 mg, 0.31 mmol)의 용액을 0°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]메틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(150.0 mg, 0.15 mmol)를 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄으로 켄칭하고, 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-(((4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)-3-메틸티에탄 1,1-디옥시드(70.0 mg, 0.07 mmol, 51.2% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 890.3 [M+H]+
단계 2: 3-(((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)-3-메틸티에탄 1,1-디옥시드
3-(((4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)-3-메틸티에탄 1,1-디옥시드(70.0 mg, 0.07 mmol) 및 트리플루오로아세트산(2 mL)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-(((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)-3-메틸티에탄 1,1-디옥시드(21.7 mg, 0.03 mmol, 42.5% 수율)를 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 650.2 [M+H]+
실시예 55: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 - 7.86 (m, 1H), 7.37 - 7.28 (m, 1H), 6.99 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.59 - 6.49 (m, 1H), 6.45 (s, 1H), 6.07 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.68 - 4.55 (m, 2H), 4.42 - 4.27 (m, 2H), 4.16 (d, J = 14.3 Hz, 2H), 3.91 (d, J = 14.3 Hz, 4H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 1.41 (s, 3H).
실시예 56: 4-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리다진-3-아민
합성 경로
단계 1: 4-(아미노메틸)피리다진-3-아민
에탄올(20 mL) 중 염산(0.1 mL, 0.2 mmol, 2 N)의 3-아미노피리다진-4-카보니트릴(2.00 g, 16.65 mmol)의 혼합물에 Pd/C(2.00 g, 6.33 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 수소하에 25°C에서 4시간 동안 교반하였다. 여과 후, 유기층을 진공하에 농축하였다. 조 물질을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. 그 결과로서, 4-(아미노메틸)피리다진-3-아민(1.70 g, 조)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 124.1 [M+H]+.
단계 2: 4-(((2-(벤질옥시)에틸)아미노)메틸)피리다진-3-아민
메틸 알코올(8 mL) 중 4-(아미노메틸)피리다진-3-아민(800.0 mg, 조), 벤질옥시아세트알데히드(0.91 mL, 6.46 mmol), 시아노수소화붕소 나트륨(410.0 mg, 6.51 mmol) 및 아세트산(0.07 mL, 1.17 mmol)의 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 그 결과로서, 4-(((2-(벤질옥시)에틸)아미노)메틸)피리다진-3-아민(300.0 mg, 1.16 mmol, 18% 수율)을 적색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 259.1 [M+H]+.
단계 3: 2-(((3-아미노피리다진-4-일)메틸)아미노)에탄-1-올
2,2,2-트리플루오로아세트산(2 mL) 중 4-(((2-(벤질옥시)에틸)아미노)메틸)피리다진-3-아민(200.0 mg, 0.77 mmol)의 혼합물에, 상기 혼합물을 80°C에서 밤새 교반하였다. 종료 후, 유기층을 진공하에 농축하였다. 조 물질을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. 그 결과로서, 2-(((3-아미노피리다진-4-일)메틸)아미노)에탄-1-올(110.0 mg, 조)을 적색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 169.1 [M+H]+.
단계 4: 5-(2-(((3-아미노피리다진-4-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(2 mL) 중 수소화 나트륨(18 mg, 0.75 mmol) 및 2-(((3-아미노피리다진-4-일)메틸)아미노)에탄-1-올(45 mg, 0.27 mmol)의 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(150.0 mg, 0.24 mmol)을 0oC에서 첨가하고, 혼합물을 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 그 결과로서, 5-(2-(((3-아미노피리다진-4-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(100.0 mg, 0.13 mmol, 53.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):761.3 [M+H]+.
단계 5: 4-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리다진-3-아민
아세토니트릴(1 mL) 중 5-(2-(((3-아미노피리다진-4-일)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(100.0 mg, 0.13 mmol), 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(102.0 mg, 0.2 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데칸-7-엔(0.06 mL, 0.39 mmol)의 혼합물을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(3/2)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 그 결과로서, 4-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리다진-3-아민(70.0 mg, 0.09 mmol, 71.7% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 743.2 [M+H]+.
단계 6: 4-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리다진-3-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(1 mL) 중 4-((9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리다진-3-아민(70.0 mg, 0.09 mmol)의 혼합물에, 상기 혼합물을 60°C에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용액을 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 29% B에서 59% B로; 파장: 254 nm; RT1(분): 6.5로 정제하였다. 그 결과로서, 4-((9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리다진-3-아민(12.2 mg, 0.02 mmol, 25.8% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 503.00 [M+H]+.
실시예 56: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.37 (s, 1H), 8.35 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.02 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.76 (s, 2H), 6.45 (s, 1H), 6.38 (s, 2H), 4.80 (s, 2H), 4.76 - 4.69 (dd, J = 7.6, 4.0 Hz, 2H), 3.98 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 2.36 (d, J = 1.5 Hz, 3H).
실시예 57: 6-(4-((2-아미노-4-(디플루오로메틸)피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-브로모-2-클로로-4-(디플루오로메틸)피리딘
질소하에서, 디클로로메탄(50 mL) 중 3-브로모-2-클로로-피리딘-4-카르발데히드(5.00 g, 22.68 mmol)의 용액에 디에틸아미노 트리플루오로황(7.30 g, 45.34 mmol)을 0°C에서 첨가하였다. 생성된 용액을 25oC에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 중탄산나트륨 수용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(4/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-브로모-2-클로로-4-(디플루오로메틸)피리딘(5.00 g, 20.62 mmol, 90.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 243.9 [M+H]+
단계 2: 3-브로모-4-(디플루오로메틸)-N-(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민
디메틸 설폭사이드(5 mL) 중의 3-브로모-2-클로로-4-(디플루오로메틸)피리딘(850.0 mg, 3.51 mmol), 4-메톡시벤질아민(0.92 mL, 7.01 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(1.35 g, 10.52 mmol)의 용액을 100°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 실온으로 냉각하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(30분 이내 5%-95%)로 용출하면서 C18 겔 상의 역크로마토그래피로 정제하여 3-브로모-4-(디플루오로메틸)-N-(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(800.0 mg, 2.33 mmol, 66.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 345.1 [M+H]+
단계 3: 4-(디플루오로메틸)-2-((4-메톡시벤질)아미노)니코티노니트릴
질소하에서, N,N-디메틸포름아미드(25 mL) 중 3-브로모-4-(디플루오로메틸)-N-(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(3.00 g, 8.74 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(1.20 g, 1.04 mmol) 및 시안화 아연(5.10 g, 43.59 mmol)의 용액을 125oC에서 2시간 동안 첨가하였다. 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(4/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 4-(디플루오로메틸)-2-((4-메톡시벤질)아미노)니코티노니트릴(2.00 g, 6.91 mmol, 79.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 290.1 [M+H]+
단계 4: 3-(아미노메틸)-4-(디플루오로메틸)-N-(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 4-(디플루오로메틸)-2-((4-메톡시벤질)아미노)니코티노니트릴(300.0 mg, 1.04 mmol) 및 수소화 알루미늄 리튬(120.0 mg, 3.16 mmol)의 용액을 0°C에서 첨가하고, 0°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물(0.1 ml)로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 15% 수산화나트륨 용액(0.1 ml) 및 물(0.3 ml)로 희석하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물로 용출하면서 역크로마토그래피로 정제하여 3-(아미노메틸)-4-(디플루오로메틸)-N-(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(80.0 mg, 0.27 mmol, 26.3% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 294.1 [M+H]+
단계 5: 3-(((2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)아미노)메틸)-4-(디플루오로메틸)-N-(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민
N,N-디메틸포름아미드(5 mL) 중 3-(아미노메틸)-4-(디플루오로메틸)-N-(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(900.0 mg, 3.07 mmol), (2-브로모에톡시)-tert-부틸디메틸실란(0.97 ml, 4.51 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(1.26 g, 9.75 mmol)의 용액을 90°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-(((2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)아미노)메틸)-4-(디플루오로메틸)-N-(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(350.0 mg, 0.77 mmol, 25.3% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 452.2 [M+H]+
단계 6: 2-(((4-(디플루오로메틸)-2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올
HCl/1,4-디옥산(3 mL, 12 mmol) 중 3-(((2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)아미노)메틸)-4-(디플루오로메틸)-N-(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(300.0 mg, 0.66 mmol)의 용액을 25oC에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. LC-MS: (ESI, m/z): 338.3 [M+H]+
단계 7: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(((4-(디플루오로메틸)-2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(0.5 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(140.0 mg, 0.23 mmol) 및 2-(((4-(디플루오로메틸)-2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)메틸)아미노)에탄-1-올(100.0 mg, 0.30 mmol)의 용액을 실온에서 교반하였다. 그런 다음, 수소화 나트륨(84.0 mg, 1.4 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 0°C에서 첨가하고, 70°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(30분 내 5-95%)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(((4-(디플루오로메틸)-2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(85.0 mg, 0.0914 mmol, 40% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 930.3 [M+H]+
단계 8: 6-(8-클로로-4-((4-(디플루오로메틸)-2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(0.5 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5-(2-(((4-(디플루오로메틸)-2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)메틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(300.0 mg, 0.32 mmol), 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(240.0 mg, 0.46 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데칸-7-엔(150.0 mg, 0.98 mmol)의 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(30분 내 5-95%)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(8-클로로-4-((4-(디플루오로메틸)-2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(200.0 mg, 0.21 mmol, 68% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 912.3 [M+H]+
단계 9: 6-(4-((2-아미노-4-(디플루오로메틸)피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2.0 mL) 중 6-(8-클로로-4-((4-(디플루오로메틸)-2-((4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(100.0 mg, 0.11 mmol)의 용액을 60°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: MeOH-----분취용; 유량: 25 mL/분; 구배: 8분 내 69% B에서 78% B로, 78% B; 파장: 254 nm; RT1(분): 6.68; 실행 수: 0로 정제하여 6-(4-((2-아미노-4-(디플루오로메틸)피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(42.5 mg, 0.07 mmol, 70.3% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 552.2 [M+H]+
실시예 57: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 8.54 (s, 1H), 8.13 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.48 - 7.14 (m, 2H), 6.87 - 6.67 (m, 3H), 6.43 (d, J = 18.0 Hz, 3H), 5.11-5.06 (m, 2H), 4.57-4.46 (m, 2H), 3.68-3.34 (m, 2H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H)
실시예 58: (R)-3-(1-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N5-메틸피리딘-2,5-디아민
합성 경로
단계 1: (R)-6-(4-(1-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(1 mL) 중 (R)-6-(4-(1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(270.0 mg, 0.36 mmol)의 혼합물에 1-브로모-2,5-피롤리딘디온(68.0 mg, 0.38 mmol)을 첨가하고 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 염수로 세척하고, 황산 나트륨 상에서 건조하고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1/4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 그 결과로서, (R)-6-(4-(1-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(260.0 mg, 0.31 mmol, 87.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 834.2 [M+H]+.
단계 4: (R)-3-(1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N5-메틸피리딘-2,5-디아민
1,4-디옥산(5 mL) 중 (R)-6-(4-(1-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(110.0 mg, 0.13 mmol), 탄산 세슘(130.0 mg, 0.4 mmol), 브레트포스 Pd G3(15.0 mg, 0.02 mmol) 및 메탄아민(0.6 mL, 1.2 mmol)의 혼합물을 100°C에서 1시간 동안 질소하에서 교반하였다. 종료 후, 유기층을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(47/3)로 용리하는 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 그 결과로서, (R)-3-(1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N5-메틸피리딘-2,5-디아민(90.0 mg, 0.11 mmol, 87% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):785.3 [M+H]+.
단계 3: (R)-3-(1-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N5-메틸피리딘-2,5-디아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(3 mL) 중 (R)-3-(1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N5-메틸피리딘-2,5-디아민(90.0 mg, 0.11 mmol)의 혼합물을 60°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 혼합물을 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 29% B에서 59% B로; 파장: 254 nm; RT1(분): 6.5로 정제하였다. 그 결과로서, 3-[(1R)-1-[7-[6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-8-클로로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-N5-메틸-피리딘-2,5-디아민(14.6 mg, 0.027 mmol, 23.4% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 545.25 [M+H]+.
실시예 58: 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4 ) δ 8.51 (s, 1H), 7.46 (dd, J = 2.8, 1.7 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.26 - 7.24 (m, 1H), 6.76 - 6.65 (m, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.56 - 4.46 (m, 1H), 4.39 - 4.29 (m, 1H), 3.75 - 3.64 (m, 1H), 3.61 - 3.51 (m, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.44 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 1.63 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 59: (S)-4-(8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)나프탈렌-2-올
합성 경로
단계 1: (S)-4-(8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)나프탈렌-2-올
아세토니트릴(2.15 mL) 및 물(0.54 mL) 중 (S)-9-브로모-8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린(50.0 mg, 0.107 mmol), 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)나프탈렌-2-올(58.0 mg, 0.215 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 디클로라이드(7.5 mg, 0.0107 mmol), 및 탄산 나트륨(45.5 mg, 0.429 mmol)의 용액을 80°C에서 60분 동안 질소하에서 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 DCM에 용해시키고, 여과하여 고체를 제거하고, 진공에서 농축하였다. 조 물질을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50 x 30 mm, 5 μm; 이동상 A: 물 중 0.1% 수산화 암모늄, 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 40% B에서 80% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25ºC로 정제하였다. 그 결과로서, (S)-4-(8-클로로-4-메틸-2-((2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)나프탈렌-2-올(20.5 mg, 36% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 529.1 [M+H]+
실시예 59: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.91 (s, 1H), 7.76 (dd, J = 8.3, 1.1 Hz, 1H), 7.40 (ddd, J = 8.2, 6.3, 1.7 Hz, 1H), 7.31-7.11 (m, 3H), 7.07 (s, 1H), 6.97 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.92-4.86 (m, 2H), 4.72-4.55 (m, 2H), 4.07-3.88 (m, 4H), 3.58-3.50 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 3.21-3.14 (m, 1H), 3.05-2.92 (m, 1H), 2.64-2.50 (m, 2H), 2.38-2.30 (m, 1H), 2.02-1.57 (m, 4H).
실시예 60: 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(649.6 mg, 4.08 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(326.4 mg, 8.16 mmol, 60% 순도)을 0°C에서 첨가하고, 0°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-((9-브로모-2,8-디클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민(900.0 mg, 2.04 mmol)을 첨가하고 25°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(7/3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민(422.1 mg, 0.67 mmol, 33% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 563.1 [M+H]+
단계 2: 3-((8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민
1,4-디옥산(0.9 mL) 중 3-((9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민(50.0 mg, 0.089 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(45.0 mg, 0.177 mmol), 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드(6.5 mg, 0.0089 mmol), 및 아세트산 칼륨(17.4 mg, 0.177 mmol)의 용액을 100°C에서 3.5시간 동안 질소하에서 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 DCM에 용해시키고, 여과하여 고체를 제거하고, 진공에서 농축하여 갈색 오일을 수득하였으며, 이를 정제없이 다음 단계에서 직접 사용하였다(40 mg 조).
단계 3: 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(1.5 mL) 및 물(0.38 mL) 중 (3-((8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민(40.0 mg, 0.065 mmol), 6-브로모-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(38.6 mg, 0.15 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 디클로라이드(5.3 mg, 0.0076 mmol), 및 탄산 나트륨(32.1 mg, 0.303 mmol)의 용액을 80°C에서 60분 동안 질소하에서 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 DCM에 용해시키고, 여과하여 고체를 제거하고, 진공에서 농축하였다. 조 물질을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50 x 30 mm, 5 μm; 이동상 A: 물 중 0.1% 포름산, 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 5% B에서 50% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25ºC로 정제하였다. 그 결과로서, 6-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(7.4 mg, 15% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 659.2 [M+H]+
실시예 60: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.89 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 7.4, 1.8 Hz, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.72 (s, 2H), 6.52 (dd, J = 7.3, 4.9 Hz, 1H), 6.44 (s, 1H), 6.03 (s, 2H), 5.20 (d, J = 53.7 Hz, 1H), 4.89-4.76 (m, 2H), 4.68-4.54 (m, 2H), 4.09-3.76 (m, 4H), 3.07-2.92 (m, 2H), 2.82-2.65 (m, 2H), 2.35 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.13-1.57 (m, 6H).
실시예 61: 4-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)나프탈렌-2-올
합성 경로
단계 1: 4-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)나프탈렌-2-올
아세토니트릴(1.4 mL) 및 물(0.35 mL) 중 3-((9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민(40 mg, 0.071 mmol), 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)나프탈렌-2-올(38 mg, 0.14 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 디클로라이드(5.0 mg, 0.0071 mmol), 및 탄산 나트륨(30 mg, 0.28 mmol)의 용액을 80°C에서 60분 동안 질소하에서 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 DCM에 용해시키고, 여과하여 고체를 제거하고, 진공에서 농축하였다. 조 물질을 SFC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 시너지 폴라(Synergi Polar) RP, 150 x 21.2 mm, 5 μm; 이동상: 메탄올 중 0.1% 수산화 암모늄; 유량: 70 mL/분; 구배: 5분에 걸친 등용매 30%; 파장: 225 nm; 컬럼 온도: 40ºC로 정제하였다. 그 결과로서, 4-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)나프탈렌-2-올(26.0 mg, 58% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 627.1 [M+H]+
실시예 61: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.93 (s, 1H), 7.91 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.84-7.67 (m, 1H), 7.41 (ddd, J = 8.2, 6.5, 1.5 Hz, 1H), 7.31 (dd, J = 7.4, 1.8 Hz, 1H), 7.28-7.16 (m, 3H), 7.11 (s, 1H), 6.99-6.96 (m, 1H), 6.54 (dd, J = 7.3, 4.9 Hz, 1H), 6.04 (s, 2H), 5.19 (d, J = 53.1 Hz, 1H), 5.02-4.76 (m, 2H), 4.76-4.53 (m, 2H), 4.09-3.79 (m, 4H), 3.11-2.69 (m, 4H), 2.14-1.60 (m, 6H).
실시예 62: 3-((8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-9-(나프탈렌-1-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-9-(나프탈렌-1-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(1.4 mL) 및 물(0.35 mL) 중 3-((9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민(40 mg, 0.071 mmol), 4,4,5,5-테트라메틸-2-(나프탈렌-1-일)-1,3,2-디옥사보롤란(36 mg, 0.14 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 디클로라이드(5.0 mg, 0.0071 mmol),및 탄산 나트륨(30 mg, 0.28 mmol)의 용액을 80°C에서 60분 동안 질소하에서 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 DCM에 용해시키고, 여과하여 고체를 제거하고, 진공에서 농축하였다. 조 물질을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50 x 30 mm, 5 μm; 이동상 A: 물 중 0.1% 수산화 암모늄, 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분에 걸쳐 40% B에서 80% B로; 파장: 222 nm; 컬럼 온도: 25ºC로 정제하였다. 그 결과로서, 3-((8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-9-(나프탈렌-1-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민(31.7 mg, 73% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 611.2 [M+H]+
실시예 62: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 8.13-7.96 (m, 2H), 7.91 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 8.3, 7.0 Hz, 1H), 7.55 (ddd, J = 8.2, 6.6, 1.5 Hz, 1H), 7.51-7.38 (m, 3H), 7.31 (dd, J = 7.4, 1.8 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.54 (dd, J = 7.3, 5.0 Hz, 1H), 6.04 (s, 2H), 5.19 (d, J = 54.7 Hz, 1H), 4.99-4.77 (m, 2H), 4.77-4.54 (m, 2H), 4.03-3.78 (m, 4H), 3.10-2.70 (m, 4H), 2.17-1.46 (m, 6H).
실시예 63: 3-((8-클로로-9-(2,3-디히드로-1H-인덴-4-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((8-클로로-9-(2,3-디히드로-1H-인덴-4-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(1.4 mL) 및 물(0.35 mL) 중 3-((9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민(40 mg, 0.071 mmol), 2-(2,3-디히드로-1H-인덴-4-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(34.6 mg, 0.14 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 디클로라이드(5.0 mg, 0.0071 mmol), 및 탄산 나트륨(30 mg, 0.28 mmol)의 용액을 80°C에서 1.5시간 동안 질소하에서 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 DCM에 용해시키고, 여과하여 고체를 제거하고, 진공에서 농축하였다. 조 물질을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50 x 30 mm, 5 μm; 이동상 A: 물 중 0.1% 포름산, 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분에 걸쳐 5% B에서 50% B로; 파장: 235 nm; 컬럼 온도: 25ºC로 정제하였다. 그 결과로서, 3-((8-클로로-9-(2,3-디히드로-1H-인덴-4-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민(40 mg, 94% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 601.2 [M+H]+
실시예 63: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.89 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.33-7.26 (m, 2H), 7.23 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 6.52 (dd, J = 7.3, 4.9 Hz, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.20 (d, J = 52.6 Hz, 1H), 4.93-4.77 (m, 2H), 4.68-4.59 (m, 2H), 4.08-3.78 (m, 4H), 3.11-2.88 (m, 5H), 2.85-2.59 (m, 3H), 2.12-1.59 (m, 8H).
실시예 64: (3-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)페닐)메탄올
합성 경로
단계 1: (3-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)페닐)메탄올
아세토니트릴(1.4 mL) 및 물(0.35 mL) 중 3-((9-브로모-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)메틸)피리딘-2-아민(40 mg, 0.071 mmol), (3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐)메탄올(33 mg, 0.14 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 디클로라이드(5.0 mg, 0.0071 mmol), 및 탄산 나트륨(30 mg, 0.28 mmol)의 용액을 80°C에서 60분 동안 질소하에서 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 DCM에 용해시키고, 여과하여 고체를 제거하고, 진공에서 농축하였다. 조 물질을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50 x 30 mm, 5 μm; 이동상 A: 물 중 0.1% 수산화 암모늄, 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분에 걸쳐 20% B에서 60% B로; 파장: 254 nm; 컬럼 온도: 25ºC로 정제하였다. 그 결과로서, (3-(4-((2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)페닐)메탄올(29.9 mg, 71% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 591.2 [M+H]+
실시예 64: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.89 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.48-7.31 (m, 4H), 7.27 (dd, J = 7.4, 1.8 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.52 (dd, J = 7.3, 4.9 Hz, 1H), 6.03 (s, 2H), 5.30-5.11 (m, 2H), 4.92-4.76 (m, 2H), 4.64 (dd, J = 5.7, 2.8 Hz, 2H), 4.57 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 3.96 (q, J = 10.4 Hz, 2H), 3.91-3.84 (m, 2H), 3.08-2.86 (m, 3H), 2.83-2.73 (m, 1H), 2.06-1.62 (m, 6H).
실시예 65a 및 65b: (R)-8-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민 및 (R)-8-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-1-아민
합성 경로
단계 1: 8-옥소-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린 2-옥사이드
디클로로메탄(500 mL) 중 6,7-디히드로이소퀴놀린-8(5H)-온 염산염(46.80 g, 254.88 mmol) 및 3-클로로퍼옥시벤조산(74.76 g, 433.26 mmol)의 용액을 25°C에서 18시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 혼합물을 포화 아황산나트륨으로 켄칭하고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(1:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 8-옥소-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린 2-옥사이드(19.80 g, 116.52 mmol, 45.7% 수율)을 갈색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 164.1 [M+H]+
단계 2: 1-(벤질아미노)-6,7-디히드로이소퀴놀린-8(5H)-온
트리에틸아민(29.02 g, 286.80 mmol), 4 분자체(8-옥소-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린 2-옥사이드(15.60 g)와 동일한 질량) 및 브로모[트리(1-피롤리디닐)]포스포늄 헥사플루오로포스페이트(57.94 g, 124.26 mmol)를 건조 1,2-디클로로에탄(500 mL) 중 8-옥소-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린 2-옥사이드(15.60 g, 95.58 mmol) 및 벤질아민(25.61 g, 239.04 mmol)의 용액에 순차적으로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25ºC에서 1.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 여과하고, 모액을 포화 염화암모늄 용액으로 희석하고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 취합한 유기상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하고, 석유 에테르/에틸 아세테이트(95:5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-(벤질아미노)-6,7-디히드로이소퀴놀린-8(5H)-온(7.20 g, 28.26 mmol, 29.5% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 253.1 [M+H]+
단계 3: (R)-2-((1-(벤질아미노)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-8-일)아미노)에탄-1-올 및 (S)-2-((1-(벤질아미노)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-8-일)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(80 mL) 중 1-(벤질아미노)-6,7-디히드로이소퀴놀린-8(5H)-온(5.80 g, 22.99 mmol), 2-아미노에탄-1-올(3.51 g, 57.47 mmol) 및 티타늄(IV)이소프로폭시드(20 mL, 67.55 mmol)의 용액을 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(4.33 g, 68.96 mmol)을 첨가하고 80°C에서 67시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(96:4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SB, 7*25 cm, 10 μm; 이동상 A: CO2, 이동상 B: 메탄올(0.1% 2M NH3-MEOH); 유량: 250 mL/분; 구배: 등용매 35% B; 컬럼 온도(℃): 35; 배압(바): 100; 파장: 254 nm; RT1(분): 7.03; RT2(분): 8.08; 샘플 용매: 메탄올-----분취용; 주입 용량: 3 mL; 실행 수: 13으로 추가 정제하여 (R)-2-((1-(벤질아미노)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-8-일)아미노)에탄-1-올(1.30 g, 4.07 mmol, 17.7% 수율) 및 (S)-2-((1-(벤질아미노)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-8-일)아미노)에탄-1-올(1.50 g, 4.89 mmol, 21.3% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 298.2 [M+H]+
단계 4: 5-(2-(((R)-1-(벤질아미노)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-8-일)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 질소하에서, 디메틸 술폭시드(20 mL) 중 (R)-2-((1-(벤질아미노)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-8-일)아미노)에탄-1-올(1.07 g, 3.61 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(9.02 mL, 9.02 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 질소하에서, 반응 혼합물을 디메틸 설폭시드(20 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(2.00 g, 3.01 mmol)의 용액에 25°C에서 첨가하고 25°C에서 1.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화 암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하여 5-(2-(((R)-1-(벤질아미노)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-8-일)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(3.02 g, 2.04 mmol, 67.8% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 942.3 [M+H]+
단계 5: (8R)-N-벤질-8-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(40 mL) 중 5-(2-(((R)-1-(벤질아미노)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-8-일)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(2.90 g, 1.97 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(601.3 mg, 2.36 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(763.2 mg, 5.91 mmol)의 용액을 70°C에서 1.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(7:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (8R)-N-벤질-8-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민(1.10 g, 1.15 mmol, 58.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 924.3 [M+H]+
단계 6: (8R)-N-벤질-8-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민
테트라히드로퓨란(15 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(337.4 mg, 2.12 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(169.5 mg, 4.24 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, (8R)-N-벤질-8-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민(980.0 mg, 1.06 mmol)을 25°C에서 첨가하고 40°C에서 1.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(60:40)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (8R)-N-벤질-8-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민(550.6 mg, 0.50 mmol, 47.1% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1047.4 [M+H]+
단계 7: (R)-8-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민 및 (R)-8-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-1-아민
트리플루오로아세트산(10 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(1 mL) 중 (8R)-N-벤질-8-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민(530.0 mg, 0.48 mmol)의 용액을 5시간 동안 25°C에서 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep C18 OBD 컬럼, 30*100 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 20분 내 20% B에서 50% B로, 50% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 18.6으로 추가 정제하여 (R)-8-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민(75.4 mg, 0.10 mmol, 21.1% 수율) 및 (R)-8-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린-1-아민(44.2 mg, 0.06 mmol, 12.4% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 717.3 [M+H]+
실시예 65a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.82 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.47 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 6.02 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 5.56 - 4.99 (m, 3H), 4.43 - 4.37 (m, 2H), 4.15 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.03 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.64 - 3.57 (m, 1H), 3.40 - 3.34 (m, 1H), 3.16 - 3.04 (m, 2H), 3.00 (s, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 2H), 2.66 - 2.58 (m, 1H), 2.36 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.27 - 2.16 (m, 2H), 2.14 - 1.90 (m, 3H), 1.84 - 1.59 (m, 5H). LC-MS: (ESI, m/z): 717.3 [M+H]+
실시예 65b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.82 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.47 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 6.05 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 5.36 (s, 2H), 5.19 (s, 1H), 4.52 - 4.37 (m, 2H), 4.13 - 4.05 (m, 2H), 3.74 - 3.60 (m, 1H), 3.38 - 3.31 (m, 1H), 3.16 - 3.03 (m, 2H), 3.00 (s, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 2H), 2.67 - 2.60 (m, 1H), 2.36 - 2.32 (m, 3H), 2.21 - 2.09 (m, 2H), 2.08 - 1.96 (m, 3H), 1.93 - 1.59 (m, 5H). LC-MS: (ESI, m/z): 717.3 [M+H]+
실시예 66a 및 66b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8,10-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8,10-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아미늄
합성 경로
단계 1: (R)-5-(2-((1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-브로모-2-클로로-6,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
테트라히드로퓨란(40 mL) 중 (R)-2-((1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올(3.63 g, 8.61 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(1.53 g, 38.28 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 0°C에서 첨가하고, 0°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 7-브로모-2-클로로-5,6,8-트리플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(3.00 g, 9.57 mmol)의 용액에 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(60:40)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-5-(2-((1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-브로모-2-클로로-6,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(8.40 g, 4.93 mmol, 51.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 714.1 [M+H]+
단계 2: (R)-3-(1-(9-브로모-2-클로로-8,10-디플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민
클로로포름(25 mL) 중 (R)-5-(2-((1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-7-브로모-2-클로로-6,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(8.40 g, 4.93 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(1.51 g, 5.92 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(1.91 g, 14.8 mmol)의 용액을 70°C에서 1.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(7:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-3-(1-(9-브로모-2-클로로-8,10-디플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(1.50 g, 1.96 mmol, 39.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 696.1 [M+H]+
단계 3: 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2-클로로-8,10-디플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 (R)-3-(1-(9-브로모-2-클로로-8,10-디플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(600.0 mg, 0.86 mmol)의 용액에 이소프로필마그네슘 클로라이드-리튬 클로라이드 착물(0.79 mL, 1.03 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1.3 M)을 -78°C에서 첨가하고, 반응물을 -78°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 염화 아연(1.29 mL, 2.58 mmol, 2-메틸테트라히드로퓨란 중 2 M)을 -78°C에서 첨가하였다. 반응물을 -78°C에서 5분 동안 교반하고, 25°C에서 20분 동안 교반하였다. 혼합물을 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(120.9 mg, 0.17 mmol) 및 6-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(469.1 mg, 0.95 mmol)의 혼합액 내로 옮기고 50°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(7:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2-클로로-8,10-디플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(410.4 mg, 0.31 mmol, 36% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1032.4 [M+H]+
단계 4: 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8,10-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(91.0 mg, 0.57 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(57.2 mg, 1.43 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2-클로로-8,10-디플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(410.0 mg, 0.31 mmol)을 25°C에서 첨가하고 40°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(93:7)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8,10-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(180.3 mg, 0.15 mmol, 52.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1155.5 [M+H]+
단계 5: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8,10-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8,10-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아미늄
트리플루오로아세트산(3 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.3 mL) 중 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8,10-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(76.0 mg, 0.06 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 36% B에서 61% B로, 61% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.9로 추가 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8,10-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(21.4 mg, 0.03 mmol, 54.6% 수율) 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8,10-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아미늄(21.4 mg, 0.03 mmol, 54.6% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 675.2 [M+H]+
실시예 66a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.96 (dd, J = 4.8, 1.5 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.8, 1.5 Hz, 1H), 6.86 (s, 2H), 6.66 (q, J = 4.8 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 6.31 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.73 (s, 2H), 5.28 (d, J = 54.3 Hz, 1H), 4.48 - 4.18 (m, 2H), 4.15 - 3.98 (m, 2H), 3.73 - 3.57 (m, 1H), 3.46 - 3.41 (m, 1H), 3.17 - 3.03 (m, 2H), 3.00 (s, 1H), 2.91 - 2.74 (m, 1H), 2.36 (d, J = 1.8 Hz, 3H), 2.28 - 2.12 (m, 1H), 2.11 - 1.94 (m, 2H), 1.94 - 1.66 (m, 3H), 1.56 (d, J = 6.6 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 675.2 [M+H]+
실시예 66b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.96 (dd, J = 5.1, 1.8 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.86 (s, 2H), 6.65 (q, J = 5.1 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 6.32 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.82 (s, 2H), 5.28 (d, J = 53.7 Hz, 1H), 4.54 - 4.38 (m, 1H), 4.33 - 4.19 (m, 1H), 4.07 (s, 2H), 3.79 - 3.63 (m, 1H), 3.47 - 3.37 (m, 1H), 3.18 - 3.03 (m, 2H), 3.00 (s, 1H), 2.92 - 2.74 (m, 1H), 2.37 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.23 - 2.12 (m, 1H), 2.11 - 1.93 (m, 2H), 1.92 - 1.70 (m, 3H), 1.57 (d, J = 6.6 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 675.2 [M+H]+
실시예 67: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: ((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메탄올
리튬알루미늄수소화물(97.7 mg, 2.57 mmol)을 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 5-(tert-부틸) 6-메틸 (3S,6S)-1,1-디플루오로-5-아자스피로[2.4]헵탄-5,6-디카르복실레이트(250.0 mg, 0.86 mmol)의 용액에 0°C에서 첨가하고 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하였다. 25°C에서 20분 동안 교반한 후, 혼합물을 여과하였다. 여액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압하에 농축하여 ((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메탄올(158.2 mg, 0.76 mmol, 88.3% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 178.1 [M+H]+
단계 2: tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(2 mL) 중 ((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메탄올(41.3 mg, 0.20 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.24 mL, 0.24 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 질소하에서, 반응 혼합물을 테트라히드로퓨란(2 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(원하는 회전장애이성질체)(80.0 mg, 0.08 mmol)의 용액에 25°C에서 첨가하고, 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1:9)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(70.3 mg, 0.06 mmol, 74.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1049.4 [M+H]+
단계 3: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(3 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.3 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(70.0 mg, 0.05 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 58% B에서 63% B로, 63% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.01로 추가 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(12.6 mg, 0.02 mmol, 32.6% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 709.1 [M+H]+
실시예 67: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.8, 1.5 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.8, 1.5 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.67 (q, J = 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.25 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.52 - 4.21 (m, 4H), 3.63 - 3.58 (m, 1H), 3.43 - 3.35 (m, 1H), 2.92 - 2.76 (m, 2H), 2.57 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 2.37 (s, 6H), 2.27 - 2.16 (m, 1H), 1.85 - 1.67 (m, 1H), 1.60 - 1.47 (m, 4H), 1.49 - 1.32 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 709.1 [M+H]+
실시예 68: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: ((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메탄올
리튬알루미늄수소화물(97.7 mg, 2.57 mmol)을 테트라히드로퓨란(4 mL) 중 5-(tert-부틸) 6-메틸 (3R,6S)-1,1-디플루오로-5-아자스피로[2.4]헵탄-5,6-디카르복실레이트(250.0 mg, 0.86 mmol)의 용액에 0°C에서 첨가하고 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하였다. 25°C에서 20분 동안 교반한 후, 혼합물을 여과하였다. 여액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압하에 농축하여 ((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메탄올(165.2 mg, 0.85 mmol, 98.7% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 178.1 [M+H]+
단계 2: tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(2.5 mL) 중 ((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메탄올(72.4 mg, 0.37 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.45 mL, 0.45 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 질소하에서, 반응 혼합물을 테트라히드로퓨란(2.5 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(원하는 회전장애이성질체)(150.0 mg, 0.15 mmol)의 용액에 25°C에서 첨가하고 25°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄 /에틸 아세테이트(7:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(76.4 mg, 0.06 mmol, 42.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1049.4 [M+H]+
단계 3: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(3 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.3 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(70.0 mg, 0.05 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 36% B에서 61% B로, 61% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.6로 추가 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(17.1 mg, 0.02 mmol, 44.5% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 709.2 [M+H]+
실시예 68: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.90 (dd, J = 4.8, 1.5 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 7.5, 1.2 Hz, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.60 (q, J = 4.9 Hz, 1H), 6.41 (s, 1H), 6.19 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.59 (s, 2H), 4.45 - 4.32 (m, 2H), 4.28 - 4.15 (m, 2H), 3.62 - 3.49 (m, 1H), 3.38 - 3.25 (m, 1H), 2.93 - 2.76 (m, 2H), 2.46 - 2.37 (m, 1H), 2.36 - 2.23 (m, 6H), 2.09 - 1.92 (m, 1H), 1.91 - 1.72 (m, 1H), 1.50 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.45 - 1.30 (m, 2H). LC-MS: (ESI, m/z): 709.2 [M+H]+
실시예 69a & 69b & 69c & 69d: 6-((R)-4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-2,6-디클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 질소하에서, 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(22.54 mL, 22.54 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 디메틸설폭사이드(20 mL) 중 2-((1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올(3.50 g, 8.30 mmol)의 용액에 첨가하고 60°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 디메틸설폭사이드(20 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(5.00 g, 7.51 mmol)을 첨가하고 60°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-2,6-디클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(5.00 g, 4.69 mmol, 62.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1066.3 [M+H]+
단계 2: 6-(4-(1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(10 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-2,6-디클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(1.20 g, 1.12 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(1.44 g, 11.16 mmol) 및 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(360.0 mg, 1.41 mmol)의 용액을 70°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-(1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(4.0 g, 3.81 mmol, 81.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1048.3 [M+H]+
단계 3: 6-(4-(1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(3.81 mL, 3.81 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 ((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올(749.0 mg, 4.76 mmol)의 용액에 첨가하고 25°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 6-(4-(1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(1.00 g, 0.95 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-(1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(600.0 mg, 0.51 mmol, 53.8% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):1169.5 [M+H]+
단계 4: 6-((R)-4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 6-(4-(1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(590.0 mg, 0.50 mmol)의 용액을 25°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 중탄산나트륨 포화 용액을 사용하여 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 35% B에서 49% B로, 49% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.9로 추가 정제하여 부분입체 이성질체를 수득하였다. 부분입체 이성질체(더 빠른 피크)를 분취용-키랄-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SC, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 15 mL/분; 구배: 23분 내 50% B에서 50% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 11.224; RT2(분): 18.727; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 0.8 mL로 분리하여 6-((R)-4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(36.6 mg, 0.05 mmol, 10.1% 수율) 및 6-((S)-4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(34.2 mg, 0.05 mmol, 9.7% 수율)을 수득하였다. 부분입체 이성질체(더 느른 피크)를 분취용-키랄-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SC, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 17분 내 50% B에서 50% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 8.377; RT2(분): 13.471; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 1 mL로 분리하여 6-((R)-4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(28.6 mg, 0.04 mmol, 8.1% 수율) 및 6-((S)-4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(34.2 mg, 0.05 mmol, 9.6% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):689.2 [M+H]+
실시예 69a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.88 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.90 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 6.40 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.31 (s, 2H), 4.60 - 4.44 (m, 1H), 4.43 - 4.29 (m, 2H), 4.15 - 3.98 (m, 1H), 3.75 - 3.63 (m, 1H), 3.63 - 3.56 (m, 1H), 3.54 - 3.48 (m, 2H), 3.48 - 3.38 (m, 2H), 3.21 - 3.11 (m, 1H), 3.04 - 2.90 (m, 1H), 2.89 - 2.78 (m, 2H), 2.37 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.18 - 1.95 (m, 1H), 1.84 - 1.69 (m, 1H), 1.61 (d, J = 6.9 Hz, 4H), 1.42 - 1.22 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 689.2 [M+H]+ 키랄팩 IC-3, 4.6×50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; Hex (0.1% DEA): EtOH=50:50; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 2.426분(더 빠른 피크)
실시예 69b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.88 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.90 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 6.40 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.31 (s, 2H), 4.58 - 4.46 (m, 1H), 4.43 - 4.39 (m, 1H), 4.37 - 4.28 (m, 1H), 4.18 - 4.08 (m, 1H), 3.79 - 3.63 (m, 1H), 3.63 - 3.55 (m, 1H), 3.55 - 3.45 (m, 3H), 3.45 - 3.37 (m, 1H), 3.19 - 3.06 (m, 1H), 3.02 - 2.91 (m, 1H), 2.90 - 2.79 (m, 2H), 2.37 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.07 - 1.96 (m, 1H), 1.83 - 1.67 (m, 1H), 1.61 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.55 - 1.42 (m, 1H), 1.39 - 1.22 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 689.2 [M+H]+ 키랄팩 IC-3, 4.6×50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; Hex (0.1% DEA): EtOH=50:50; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 4.440분(더 느린 피크)
실시예 69c: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.88 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.87 (t, J = 2.3 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 6.40 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.31 (s, 2H), 4.68 - 4.50 (m, 1H), 4.46 - 4.40 (m, 1H), 4.39 - 4.32 (m, 1H), 4.18 - 4.01 (m, 1H), 3.84 - 3.66 (m, 1H), 3.66 - 3.51 (m, 1H), 3.51 - 3.37 (m, 4H), 3.22 - 3.03 (m, 1H), 3.01 - 2.90 (m, 1H), 2.90 - 2.78 (m, 2H), 2.37 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.07 - 1.92 (m, 1H), 1.81 - 1.67 (m, 1H), 1.60 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.53 - 1.38 (m, 1H), 1.36 - 1.21 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 689.2 [M+H]+ 키랄팩 IC-3, 4.6×50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; Hex (0.1% DEA): EtOH=50:50; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 2.188분(더 빠른 피크)
실시예 69d: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.87 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.87 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 6.40 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.31 (s, 2H), 4.67 - 4.49 (m, 1H), 4.47 - 4.31 (m, 2H), 4.15 - 4.03 (m, 1H), 3.79 - 3.69 (m, 1H), 3.63 - 3.55 (m, 1H), 3.54 - 3.40 (m, 2H), 3.39 - 3.36 (m, 2H), 3.17 - 3.04 (m, 1H), 3.03 - 2.92 (m, 1H), 2.90 - 2.75 (m, 2H), 2.37 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.15 - 1.96 (m, 1H), 1.84 - 1.68 (m, 1H), 1.61 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.59 - 1.50 (m, 1H), 1.35 - 1.21 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 689.1 [M+H]+ 키랄팩 IC-3, 4.6×50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; Hex (0.1% DEA): EtOH=50:50; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 4.315분(더 느린 피크)
실시예 70a & 70b & 70c & 70d: 6-((R)-4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 6-(4-(1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(3.05 mL, 3.05 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 (S)-(4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메탄올(580.0 mg, 3.84 mmol)의 용액에 첨가하고 25°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 6-(4-(1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(800.0 mg, 0.76 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-(1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(400.3 mg, 0.34 mmol, 45.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):1163.4 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 6-(4-(1-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(320.0 mg, 0.27 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 중탄산나트륨 포화 용액을 사용하여 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 35% B에서 49% B로, 49% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.9로 추가 정제하여 부분입체 이성질체를 수득하였다. 부분입체 이성질체(더 빠른 피크)를 분취용-키랄-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SC, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 9분 내 30% B에서 30% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 5.223; RT2(분): 7.249; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 0.6 mL로 분리하여 6-((R)-4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(25.0 mg, 0.03 mmol, 12.7% 수율) 및 6-((S)-4-((R)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(23.0 mg, 0.03 mmol, 12.2% 수율)을 수득하였다. 부분입체 이성질체(더 느른 피크)를 분취용-키랄-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SC, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 10분 내 30% B에서 30% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 5.393; RT2(분): 7.934; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 0.7 mL로 분리하여 6-((R)-4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(19.9 mg, 0.03 mmol, 10.3% 수율) 및 6-((S)-4-((S)-1-(5-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(25.9 mg, 0.04 mmol, 13.7% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):683.4 [M+H]+
실시예 70a: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.88 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.90 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 6.85 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 6.41 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.33 (s, 2H), 4.60 - 4.22 (m, 4H), 3.78 - 3.63 (m, 1H), 3.51 - 3.41 (m, 1H), 3.36 - 3.28 (m, 1H), 2.98 - 2.85 (m, 1H), 2.72 - 2.53 (m, 1H), 2.49 - 2.40 (m, 1H), 2.37 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.27 - 2.11 (m, 1H), 1.60 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 683.4 [M+H]+ 키랄팩 IC-3, 4.6×50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=70:30; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 1.306분(더 빠른 피크)
실시예 70b: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.88 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.90 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 6.85 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 6.41 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.33 (s, 2H), 4.64 - 4.28 (m, 4H), 3.77 - 3.62 (m, 1H), 3.51 - 3.42 (m, 1H), 3.38 - 3.29 (m, 1H), 2.99 - 2.81 (m, 1H), 2.74 - 2.55 (m, 1H), 2.48 - 2.40 (m, 1H), 2.39 - 2.29 (m, 6H), 2.27 - 2.10 (m, 1H), 1.61 (d, J = 7.2 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 683.3 [M+H]+ 키랄팩 IC-3, 4.6×50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=70:30; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 2.206분(더 느린 피크)
실시예 70c: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.86 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.86 - 6.80 (m, 3H), 6.48 (s, 1H), 6.43 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.33 (s, 2H), 4.68 - 4.52 (m, 1H), 4.48 - 4.25 (m, 3H), 3.78 - 3.64 (m, 1H), 3.53 - 3.41 (m, 1H), 3.32 - 3.26 (m, 1H), 2.98 - 2.84 (m, 1H), 2.71 - 2.53 (m, 1H), 2.49 - 2.40 (m, 1H), 2.39 - 2.28 (m, 6H), 2.27 - 2.10 (m, 1H), 1.61 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 683.3 [M+H]+ 키랄팩 IC-3, 4.6×50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=70:30; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 1.330분(더 빠른 피크)
실시예 70d: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.87 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.91 - 6.76 (m, 3H), 6.48 (s, 1H), 6.43(q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.33 (s, 2H), 4.62 - 4.50 (m, 1H), 4.49 - 4.26 (m, 3H), 3.82 - 3.68 (m, 1H), 3.58 - 3.40 (m, 1H), 3.33 - 3.29 (m, 1H), 2.99 - 2.88 (m, 1H), 2.73 - 2.57 (m, 1H), 2.48 - 2.39 (m, 1H), 2.37 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.28 - 2.12 (m, 1H), 1.61 (d, J = 7.0 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 683.4 [M+H]+ 키랄팩 IC-3, 4.6×50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=70:30; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 2.286분(더 느린 피크)
실시예 71: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((S)-1-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)에톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (S)-4,4-디플루오로-2-(메톡시(메틸)카바모일)피롤리딘-1-카르복실레이트
N,N-디메틸포름아미드(25 mL) 중 (S)-1-(tert-부톡시카르보닐)-4,4-디플루오로피롤리딘-2-카르복실산(4.00 g, 15.92 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(12.35 g, 95.53 mmol) 및 N,O-디메틸히드록실아민 염산염(4.66 g, 47.76 mmol)의 용액을 25°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 2-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(7.26 g, 19.11 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(7:3)로 용출하면서 역상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (S)-4,4-디플루오로-2-(메톡시(메틸)카바모일)피롤리딘-1-카르복실레이트(3.80 g, 11.10 mmol, 69.7% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 295.1 [M+H]+
단계 2: tert-부틸 (S)-2-아세틸-4,4-디플루오로피롤리딘-1-카르복실레이트
질소하에서, 메틸마그네슘브로마이드(41.62 mL, 41.62 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 테트라히드로퓨란(40 mL) 중 tert-부틸 (S)-4,4-디플루오로-2-(메톡시(메틸)카바모일)피롤리딘-1-카르복실레이트(3.50 g, 11.89 mmol)의 용액에 첨가하고 0°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(1:1)로 용출하면서 역상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (S)-2-아세틸-4,4-디플루오로피롤리딘-1-카르복실레이트(2.10 g, 7.92 mmol, 66.6% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 250.1 [M+H]+
단계 3: (S)-1-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)에탄-1-올
리튬알루미늄수소화물(502.5 mg, 13.24 mmol)을 테트라히드로퓨란(12 mL) 중 tert-부틸 (S)-2-아세틸-4,4-디플루오로피롤리딘-1-카르복실레이트(1.10 g, 4.41 mmol)의 용액에 0°C에서 첨가하고 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하였다. 25°C에서 20분 동안 교반한 후, 혼합물을 여과하였다. 여액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압하에 농축하여 (S)-1-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)에탄-1-올(300.1 mg, 1.62 mmol, 36.6% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 166.1 [M+H]+
단계 4: (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((S)-1-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)에톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 (S)-1-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)에탄-1-올(160.62 mg, 0.97 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(114.4 mg, 2.86 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(600.0 mg, 0.57 mmol)을 25°C에서 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(4:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((S)-1-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(180.2 mg, 0.13 mmol, 22.4% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1177.4 [M+H]+
단계 5: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((S)-1-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)에톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((S)-1-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)에톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(160.0 mg, 0.12 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 38% B에서 63% B로, 63% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.9로 추가 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((S)-1-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)에톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(34.2 mg, 0.05 mmol, 36.1% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 697.2 [M+H]+
실시예 71: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.8, 1.6 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.6, 1.6 Hz, 1H), 6.84 (s, 2H), 6.67 (q, J = 4.8 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.19 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.65 (s, 2H), 5.47 - 5.30 (m, 1H), 4.56 - 4.20 (m, 2H), 3.72 - 3.61 (m, 1H), 3.43 - 3.41 (m, 1H), 3.36 - 3.27 (m, 1H), 3.11 - 3.01 (m, 1H), 2.72 - 2.57 (m, 1H), 2.39 - 2.23 (m, 8H), 1.57 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.30 (d, J = 6.4 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 697.2 [M+H]+
실시예 72: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((2-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)프로판-2-일)옥시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 메틸 (S)-4,4-디플루오로피롤리딘-2-카르복실레이트 염산염
1,4-디옥산(30 mL, 120.00 mmol, 4.0 M) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 (S)-4,4-디플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(4.00 g, 15.08 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하여 메틸 (S)-4,4-디플루오로피롤리딘-2-카르복실레이트 염산염(3.00 g, 13.84 mmol, 91.8% 수율)을 연갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 166.1 [M+H]+
단계 2: 메틸 (S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-카르복실레이트
메틸 알코올(40 mL) 중 메틸 (S)-4,4-디플루오로피롤리딘-2-카르복실레이트 염산염(3.00 g, 13.84 mmol), 수용액 중 포름알데히드(6.74 g, 83.04 mmol, 37% 순도) 및 아세트산(166.2 mg, 2.77 mmol)의 용액을 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(4.35 g, 69.20 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(4:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 (S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-카르복실레이트(2.40 g, 12.46 mmol, 90% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 180.1 [M+H]+
단계 3: (S)-2-(4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)프로판-2-올
질소하에서, THF 중 메틸마그네슘브로마이드(15.63 mL, 15.63 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 메틸 (S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-카르복실레이트(800.0 mg, 4.47 mmol)의 용액에 첨가하고 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-2-(4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)프로판-2-올(400.5 mg, 2.03 mmol, 45.5% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 180.1 [M+H]+
단계 4: (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((2-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)프로판-2-일)옥시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 (S)-2-(4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)프로판-2-올(119.6 mg, 0.67 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(133.5 mg, 3.34 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((2-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)프로판-2-일)옥시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(700.0 mg, 0.67 mmol)을 25°C에서 첨가하고 60°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(93:7)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((2-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)프로판-2-일)옥시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(580.2 mg, 0.37 mmol, 55.4% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1191.5 [M+H]+
단계 5: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((2-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)프로판-2-일)옥시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((2-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)프로판-2-일)옥시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(200.0 mg, 0.17 mmol)의 용액을 50°C에서 6시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 40% B에서 65% B로, 65% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.9로 추가 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((2-((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)프로판-2-일)옥시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(37.6 mg, 0.05 mmol, 31.5% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 711.3 [M+H]+
실시예 72: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 5.1, 1.8 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.66 (q, J = 4.8 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.18 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.71 (s, 2H), 4.50 - 4.39 (m, 1H), 4.37 - 4.22 (m, 1H), 3.77 - 3.48 (m, 2H), 3.44 - 3.39 (m, 1H), 3.35 - 3.26 (m, 1H), 2.87 - 2.65 (m, 1H), 2.51 - 2.32 (m, 7H), 2.28- 2.02 (m, 1H), 1.75 - 1.47 (m, 9H). LC-MS: (ESI, m/z): 711.3 [M+H]+
실시예 73a 및 73b: 3-((R)-1-((R)-9-(3-아미노-2-플루오로-5-메틸-6-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(3-아미노-2-플루오로-5-메틸-6-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-2-플루오로-5-메틸-페닐]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(48 mL) 및 물(12 mL) 중 인산칼륨 삼염기(3.15 g, 14.85 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(0.55 g, 0.74 mmol), tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-(7-브로모-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일)에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(5.00 g, 7.43 mmol) 및 (3-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-플루오로-5-메틸페닐)보론산(3.19 g, 7.80 mmol)의 용액을 80°C에서 1.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축시키고, 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(7:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-2-플루오로-5-메틸-페닐]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(4.30 g, 3.73 mmol, 50.2% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 957.3 [M+H]+
단계 2: tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-2-플루오로-6-요오도-5-메틸-페닐]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트
아세트산(30 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-2-플루오로-5-메틸-페닐]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(4.21 g, 3.64 mmol)의 용액에 N-요오도석신이미드(0.98 g, 4.37 mmol)를 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 아황산나트륨 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축시키고, 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(7:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-2-플루오로-6-요오도-5-메틸-페닐]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(3.30 g, 2.62 mmol, 72% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1083.2 [M+H]+
단계 3: tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-2-플루오로-5-메틸-6-(트리플루오로메틸)-페닐]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트
질소하에서, N,N-디메틸포름아미드(60 mL) 중 요오드화 구리(I)(4.99 g, 26.19 mmol), 메틸 2,2-디플루오로-2-(플루오로설포닐)아세테이트(12.58 g, 65.47 mmol) 및 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-2-플루오로-6-요오도-5-메틸-페닐]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(3.30 g, 2.62 mmol)의 용액을 80°C에서 70분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 물로 세척하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-2-플루오로-5-메틸-6-(트리플루오로메틸)-페닐]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(1.50 g, 1.24 mmol, 47.5% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1025.3 [M+H]+
단계 4: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(3-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-플루오로-5-메틸-6-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
테트라히드로퓨란(20 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(382.5 mg, 2.40 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(96.1 mg, 2.40 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-2-플루오로-5-메틸-6-(트리플루오로메틸)페닐]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(1.45 g, 1.20 mmol)를 25°C에서 첨가하고 40°C에서 1.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 0ºC에서 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(93:7)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(3-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-플루오로-5-메틸-6-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(1.05 g, 0.77 mmol, 64.2% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1048.4 [M+H]+
단계 5: 3-((R)-1-((R)-9-(3-아미노-2-플루오로-5-메틸-6-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(3-아미노-2-플루오로-5-메틸-6-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(10 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(1 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(3-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-플루오로-5-메틸-6-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(1.05 g, 0.77 mmol)의 용액을 25°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 12분 내 45% B 에서 58% B로, 58% B; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 8.38로 정제하여 2개의 부분입체 이성질체를 수득하였다. 더 빠른 피크를 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH 플루오로 페닐, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(0.1% FA), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 5% B에서 35% B로; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 5.4로 추가 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(3-아미노-2-플루오로-5-메틸-6-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민(35.2 mg, 0.05 mmol, 13.5% 수율)을 수득하였다. 더 느린 피크를 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IF, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 10.5분 내 85% B에서 85% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 6.316; 샘플 용매: EtOH--HPLC로 추가 정제하여 3-((R)-1-((S)-9-(3-아미노-2-플루오로-5-메틸-6-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민(62.6 mg, 0.09 mmol, 23.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 708.2 [M+H]+
실시예 73a: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.95 (dd, J = 4.8, 1.2 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.78 (dd, J = 7.2, 5.1 Hz, 1H), 6.51 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.36 (d, J = 53.7 Hz, 1H), 4.46 - 4.32 (m, 1H), 4.38 (d, J = 3.9 Hz, 2H), 4.34 - 4.20 (m, 1H), 3.70 (dd, J = 15.6, 6.6 Hz, 1H), 3.54 - 3.41 (m, 2H), 3.38 - 3.32 (m, 2H), 3.18 - 3.05 (m, 1H), 2.45 - 2.31 (m, 4H), 2.28 - 2.20 (m, 2H), 2.14 - 1.93 (m, 3H), 1.65 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 708.2 [M+H]+
실시예 73b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (d, J = 4.8, 1H), 7.63 (d, J = 6.9Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.66 (dd, J = 7.2, 4.8 Hz, 1H), 6.29 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 6.00 (s, 2H), 5.75 (s, 2H), 5.28 (d, J = 53.7 Hz, 1H), 4.55 - 4.39 (m, 1H), 4.35 - 4.17 (m, 1H), 4.09 (s, 2H), 3.69 (dd, J = 15.9, 7.2 Hz, 1H), 3.42 - 3.33 (m, 1H), 3.15 - 3.03 (m, 2H), 2.99 (s, 1H), 2.85 - 2.78 (m, 1H), 2.38 - 2.33 (m, 3H), 2.21 - 2.09 (m, 1H), 2.08 - 1.94 (m, 2H), 1.85 - 1.77 (m, 3H), 1.57 (d, J = 6.6 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 708.2 [M+H]+
실시예 74a 및 74b: 3-((R)-1-((S)-9-(3-아미노-2-플루오로-6-요오도-5-메틸페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민 및 3-((R)-1-((R)-9-(3-아미노-2-플루오로-6-요오도-5-메틸페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((R)-1-((S)-9-(3-아미노-2-플루오로-6-요오도-5-메틸페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민 및 3-((R)-1-((R)-9-(3-아미노-2-플루오로-6-요오도-5-메틸페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(3-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-플루오로-6-요오도-5-메틸페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민(150.0 mg, 0.15 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 43% B에서 73% B로, 73% B; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 6.58로 정제하여 3-((R)-1-((S)-9-(3-아미노-2-플루오로-6-요오도-5-메틸페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민(20.9 mg, 0.03 mmol, 17.3% 수율) 및 3-((R)-1-((R)-9-(3-아미노-2-플루오로-6-요오도-5-메틸페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민(21.7 mg, 0.03 mmol, 18.1% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 766.1 [M+H]+
실시예 74a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.8, 1.2 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.67 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.33 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.75 (s, 2H), 5.52 - 5.11 (m, 3H), 4.58 - 4.19 (m, 2H), 4.18 - 4.03 (m, 2H), 3.82 - 3.61 (m, 1H), 3.58 - 3.53 (m, 1H), 3.19 - 2.93 (m, 3H), 2.95 - 2.72 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.25 - 1.95 (m, 3H), 1.94 - 1.73 (m, 3H), 1.57 (d, J = 6.6 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 766.1 [M+H]+
실시예 74b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.8 Hz, 1H), 6.32 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.76 (s, 2H), 5.50 - 5.14 (m, 3H), 4.59 - 4.24 (m, 2H), 4.15 - 4.00 (m, 2H), 3.82 - 3.61 (m, 1H), 3.53 - 3.40 (m, 1H), 3.17 - 3.02 (m, 2H), 3.00 (s, 1H), 2.91 - 2.74 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.21 - 2.13 (m, 1H), 2.12 - 1.96 (m, 2H), 1.93 - 1.70 (m, 3H), 1.58 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 766.1 [M+H]+
실시예 75a 및 75b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-3-플루오로-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-3-플루오로-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-3-플루오로-N-(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 (R)-3-(1-(9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(800.0 mg, 1.12 mmol)의 용액에 이소프로필마그네슘 클로라이드-리튬 클로라이드 착물(1.04 mL, 1.35 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1.3 M)을 -78°C에서 첨가하고, 반응물을 -78°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 염화 아연(1.68 mL, 3.36 mmol, 2-메틸테트라히드로퓨란 중 2 M)을 -78°C에서 첨가하였다. 반응물을 -78°C에서 5분 동안 교반하고, 25°C에서 20분 동안 교반하였다. 혼합물을 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(194.42 mg, 0.17 mmol) 및 6-브로모-3-플루오로-N-(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(441.0 mg, 1.12 mmol)의 용액 내로 옮기고 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(7:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-3-플루오로-N-(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(700.0 mg, 0.73 mmol, 65.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 946.3 [M+H]+
단계 2: 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-3-플루오로-N-(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(302.6 mg, 1.90 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(76.1 mg, 3.17 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 0°C에서 첨가하고, 0°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-3-플루오로-N-(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(600.0 mg, 0.63 mmol)의 용액에 0°C에서 첨가하고 25°C에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(75:25)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-3-플루오로-N-(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(500.3 mg, 0.47 mmol, 73.8% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1069.4 [M+H]+
단계 3: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-3-플루오로-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-3-플루오로-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-3-플루오로-N-(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(400.0 mg, 0.37 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 17% B에서 60% B로, 60% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.9로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-3-플루오로-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(60.3 mg, 0.08 mmol, 22.7% 수율) 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-3-플루오로-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(50.3 mg, 0.07 mmol, 19% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 709.2 [M+H]+
실시예 75a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.19 (s, 2H), 6.67 (q, J = 4.9 Hz, 1H), 6.26 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.73 (s, 2H), 5.29 (d, J = 54.0 Hz, 1H), 4.56 - 4.36 (m, 1H), 4.35 - 4.18 (m, 1H), 4.08 (q, J = 10.3 Hz, 2H), 3.75 - 3.55 (m, 1H), 3.46 - 3.34 (m, 1H), 3.24 - 3.02 (m, 2H), 3.06 - 2.97 (m, 1H), 2.92 - 2.70 (m, 1H), 2.44 - 2.25 (m, 3H), 2.23 - 2.09 (m, 1H), 2.07 - 2.01 (m, 2H), 1.93 - 1.66 (m, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 709.2 [M+H]+
실시예 75b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.96 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.5 Hz, 1H), 7.19 (s, 2H), 6.66 (q, J = 4.9 Hz, 1H), 6.28 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.80 (s, 2H), 5.28 (d, J = 54.4 Hz, 1H), 4.55 - 4.42 (m, 1H), 4.36 - 4.21 (m, 1H), 4.07 (s, 2H), 3.76 - 3.59 (m, 1H), 3.44 - 3.34 (m, 1H), 3.18 - 3.01 (m, 2H), 3.00 (s, 1H), 2.87 - 2.71 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.19 - 2.10 (m, 1H), 2.05 - 1.89 (m, 2H), 1.89 - 1.71 (m, 3H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 709.2 [M+H]+
실시예 76a 및 76b: 3-((R)-1-(9-((S)-5-아미노-4-플루오로-3-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민 및 3-((R)-1-(9-((R)-5-아미노-4-플루오로-3-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((1R)-1-(9-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-플루오로-3-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(25 mL) 중 (R)-3-(1-(9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(2.40 g, 3.36 mmol)의 용액에 이소프로필마그네슘 클로라이드-리튬 클로라이드 착물(3.11 mL, 4.04 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1.3 M)을 -78°C에서 첨가하고, 반응물을 -78°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 염화 아연(5.05 mL, 10.09 mmol, 2-메틸테트라히드로퓨란 중 2 M)을 -78°C에서 첨가하였다. 반응물을 -78°C에서 5분 동안 교반하고, 25°C에서 20분 동안 교반하였다. 혼합물을 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0.58 g, 0.50 mmol) 및 5-브로모-2-플루오로-N,N-비스(4-메톡시벤질)-3-메틸-4-(트리플루오로메틸)아닐린(1.72 g, 3.36 mmol)의 용액 내로 옮기고 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(7:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((1R)-1-(9-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-플루오로-3-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(620.4 mg, 0.58 mmol, 17.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1064.3 [M+H]+.
단계 2: 3-((1R)-1-(9-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-플루오로-3-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(277.8 mg, 1.74 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(83.7 mg, 3.49 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 0°C에서 첨가하고, 0°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-플루오로-3-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(620.0 mg, 0.58 mmol)의 용액에 0°C에서 첨가하고 50°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(70:30)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((1R)-1-(9-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-플루오로-3-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(311.4 mg, 0.26 mmol, 45.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1188.5 [M+H]+
단계 3: 3-((R)-1-(9-((S)-5-아미노-4-플루오로-3-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민 및 3-((R)-1-(9-((R)-5-아미노-4-플루오로-3-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(5-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-플루오로-3-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(300.0 mg, 0.25 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 41% B에서 66% B로, 66% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.6; 실행 수: 0로 추가 정제하여 3-((R)-1-(9-((S)-5-아미노-4-플루오로-3-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민(20.4 mg, 0.02 mmol, 11.4% 수율) 및 3-((R)-1-(9-((R)-5-아미노-4-플루오로-3-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민(24.3 mg, 0.03 mmol, 13.6% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 708.2 [M+H]+
실시예 76a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.96 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.65 (q, J = 4.9 Hz, 1H), 6.37 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.27 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 6.01 (s, 2H), 5.74 (s, 2H), 5.27 (d, J = 54.4 Hz, 1H), 4.51 - 4.39 (m, 1H), 4.31 - 4.19 (m, 1H), 4.08 (q, J = 8.5 Hz, 2H), 3.73 - 3.60 (m, 1H), 3.43 - 3.32 (m, 1H), 3.16 - 3.08 (m, 2H), 3.04 - 2.90 (m, 1H), 2.88 - 2.74 (m, 1H), 2.40 - 2.23 (m, 3H), 2.23 - 1.97 (m, 3H), 1.90 - 1.71 (m, 3H), 1.54 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 708.2 [M+H]+
실시예 76b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.65 (q, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.37 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.28 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 6.01 (s, 2H), 5.77 (s, 2H), 5.31 (d, J = 54.1 Hz, 1H), 4.59 - 4.42 (m, 1H), 4.34 - 4.22 (m, 1H), 4.14 (s, 2H), 3.76 - 3.57 (m, 1H), 3.50 - 3.35 (m, 1H), 3.24 - 3.00 (m, 3H), 2.88 (s, 1H), 2.42 - 2.27 (m, 3H), 2.26 - 2.14 (m, 1H), 2.14 - 1.98 (m, 2H), 1.90 - 1.72 (m, 3H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 708.2 [M+H]+
실시예 77a & 77b & 77c & 77d: 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민 및 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민 및 4-((1S)-1-((9R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민
합성 경로
단계 1: (7R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피리다진-4-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 질소하에서, 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(13.5 mL, 13.52 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 디메틸설폭사이드(10 mL) 중 (R)-2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피리다진-4-일)에틸)아미노)에탄-1-올(1.36 g, 2.57 mmol)의 용액에 첨가하고 60°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 디메틸설폭사이드(20 mL) 중 (R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(3.00 g, 1.43 mmol)을 첨가하고 60°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피로 직접 하기의 조건하에서: 컬럼, C18 실리카 겔; 이동상, A: 물, B: 아세토니트릴, B% (15분 내 45%~50%); 검출기, UV 254 nm으로 정제하여 (7R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피리다진-4-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(3.00 g, 3.16 mmol, 70.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 947.3 [M+H]+
단계 2: 4-(1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(30 mL) 중 (7R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피리다진-4-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(2.80 g, 2.95 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(1.90 g, 14.73 mmol) 및 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(1.10 g, 4.42 mmol)의 용액을 70°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(95:5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 4-(1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민(1.90 g, 2.04 mmol, 69.2% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 929.3 [M+H]+
단계 3: 4-(1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민
질소하에서, 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(2.15 mL, 2.15 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 (3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메탄올(263.2 mg, 1.61 mmol)의 용액에 첨가하고 25°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 4-(1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민(500.0 mg, 0.54 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(95:5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 4-(1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민(160.3 mg, 0.15 mmol, 28.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):1056.4 [M+H]+
단계 4: 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민 및 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민 및 4-((1S)-1-((9R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 4-(1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민(150.0 mg, 0.14 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 중탄산나트륨 포화 용액을 사용하여 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 24% B에서 50% B로, 50% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 7.98로 정제하여 2개의 부분입체 이성질체를 수득하였다. 부분입체 이성질체(더 빠른 피크)를 분취용-키랄-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IE, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: IPA--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 26분 내 40% B에서 40% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 18.69; RT2(분): 23.25; 샘플 용매: EtOH--HPLC로 분리하여 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민(3.6 mg, 0.0052 mmol, 3.6% 수율) 및 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민(4.1 mg, 0.0059 mmol, 4.1% 수율)을 수득하였다. 부분입체 이성질체(더 느린 피크)가 4-((1S)-1-((9R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민(3.6 mg, 0.0052 mmol, 3.6% 수율)으로서 제공되었다. LC-MS: (ESI, m/z): 696.2 [M+H]+
실시예 77a: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 8.55 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.42 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.68 - 4.51 (m, 1H), 4.48 - 4.25 (m, 3H), 3.95 - 3.77 (m, 2H), 3.74 - 3.53 (m, 1H), 3.50 - 3.37 (m, 1H), 3.27 - 2.95 (m, 2H), 2.84 - 2.52 (m, 3H), 2.51 - 2.25 (m, 4H), 1.72 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 696.2 [M+H]+ 키랄팩 IE-3, 4.6×50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=60:40; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 3.476분(더 빠른 피크)
실시예 77b: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 8.54 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.42 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.64 - 4.49 (m, 2H), 4.49 - 4.28 (m, 2H), 3.91 - 3.53 (m, 3H), 3.53 - 3.36 (m, 1H), 3.24 - 3.05 (m, 2H), 2.73 - 2.51 (m, 3H), 2.50 - 2.34 (m, 4H), 1.72 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 696.2 [M+H]+ 키랄팩 IE-3, 4.6×50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=60:40; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 4.579분(더 느린 피크)
실시예 77c: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 8.54 (dd, J = 4.9, 2.5 Hz, 1H), 7.55 (dd, J = 4.9, 2.3 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.44 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.64 - 4.36 (m, 4H), 3.94 - 3.79 (m, 1H), 3.80 - 3.66 (m, 1H), 3.66 - 3.51 (m, 1H), 3.49 - 3.36 (m, 1H), 3.27 - 3.09 (m, 2H), 2.78 - 2.49 (m, 3H), 2.50 - 2.24 (m, 4H), 1.72 (d, J = 7.0, 1.3 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 696.2 [M+H]+
실시예 78: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(2 mL) 중 2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에탄-1-올(84.2 mg, 0.52 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(1.29 mL, 1.29 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 질소하에서, 반응 혼합물을 25°C의 테트라히드로퓨란(3 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(400.0 mg, 0.43 mmol)의 용액에 첨가하고, 25°C에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(7:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(250.3 mg, 0.22 mmol, 51.2% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1138.4 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(230.0 mg, 0.20 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) 쉴드(Shield) RP18 OBD 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 34% B에서 50% B로, 50% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 9로 추가 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(13.7 mg, 0.02 mmol, 10.3% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 658.1 [M+H]+
실시예 78: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.8, 1.8 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.5, 1.7 Hz Hz, 1H), 7.03 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.76 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.67 (q, J = 4.8 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.66 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 4.52 - 4.34 (m, 1H), 4.34 - 4.15 (m, 1H), 3.62 (s, 4H), 3.47 - 3.36 (m, 1H), 3.13 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.36 (d, J = 2.4 Hz, 3H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 658.1 [M+H]+
실시예 79: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N 5-메틸피리딘-2,5-디아민
합성 경로
단계 1: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(5 mL) 중 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(300.0 mg, 0.43 mmol)의 용액에 N-브로모숙신이미드(69.5 mg, 0.39 mmol)를 첨가하고 0°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 포화 아황산나트륨 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(1:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(160.0 mg, 0.19 mmol, 45.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 769.1 [M+H]+.
단계 2: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N 5-메틸피리딘-2,5-디아민
질소하에서, 1,4-디옥산(5 mL) 중 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(150.0 mg, 0.19 mmol), 탄산 세슘(126.9 mg, 0.39 mmol) 및 (디메이헵틸)pd(신나밀)cl(22.6 mg, 0.02 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 메틸아민(0.26 mL, 0.97 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)을 첨가하고 90°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 진공하에 농축시키고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(7:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N5-메틸피리딘-2,5-디아민을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 30% B에서 54% B로; 파장: 254/220 nm; RT1: 8분으로 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N 5-메틸피리딘-2,5-디아민(11.0 mg, 0.02 mmol, 7.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 720.2 [M+H]+.
실시예 79: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.42 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 54.5 Hz, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.50 - 4.34 (m, 1H), 4.32 - 4.18 (m, 1H), 4.18 - 3.95 (m, 2H), 3.72 - 3.55 (m, 1H), 3.20 - 3.02 (m, 3H), 3.00 (s, 1H), 2.91 - 2.77 (m, 1H), 2.68 (s, 3H), 2.46 - 2.29 (m, 3H), 2.28 - 2.10 (m, 1H), 2.12 - 1.96 (m, 2H), 1.94 - 1.70 (m, 3H), 1.54 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 720.2 [M+H]+.
실시예 80: 3-((S)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로
단계 1: 7-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((S)-1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 질소하에서, 디메틸 술폭시드(5 mL) 중 (S)-2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에탄-1-올(272.6 mg, 0.90 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(2.25mL, 2.25mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 디메틸 술폭시드(5 mL) 중 (R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(500.0 mg, 0.75 mmol)을 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하여 7-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((S)-1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(1.0 g, 조)을 흑색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):947.3 [M+H]+.
단계 2: 3-((S)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(9 mL) 중 7-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((S)-1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(900.0 mg, 조), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(157.1 mg, 0.62 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(612.8 mg, 4.75 mmol)의 용액을 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((S)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(450.0 mg, 0.38 mmol, 81.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):929.3 [M+H]+.
단계 3: 3-((S)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
질소하에서, 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(1.94 mL, 1.94 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(269.6 mg, 1.69 mmol)의 용액에 첨가하고 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 3-((S)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(450.0 mg, 0.38 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((S)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(140.0 mg, 0.09 mmol, 19.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):1052.4 [M+H]+.
단계 4: 3-((S)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(2 mL) 중 3-((S)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(140.0 mg, 0.09 mmol)의 용액을 50°C에서 36시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하여 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 엑스셀렉트(XSelect) CSH 플루오로 페닐, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 44% B에서 69% B로; 파장: 254/220 nm; RT1: 7.63분으로 정제하여 3-((S)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(19.4 mg, 0.03 mmol, 21.1% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 692.2 [M+H]+.
실시예 80: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm)) δ 7.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.49 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 6.26 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 54.6 Hz, 1H), 4.72 - 4.55 (m, 1H), 4.45 - 4.33 (m, 1H), 4.13 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.02 - 3.83 (m, 2H), 3.72 - 3.57 (m, 1H), 3.21 - 2.93 (m, 3H), 2.90 - 2.72 (m, 1H), 2.37 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.13 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 2.08 - 1.90 (m, 2H), 1.90 - 1.68 (m, 3H), 1.60 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 692.2 [M+H]+.
실시예 81: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
합성 경로
단계 1: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((R)-1-(4-((4-메톡시벤질)아미노)피리미딘-5-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 질소하에서, 디메틸 술폭시드(230 mL) 중 2-[[(1R)-1-[4-[(4-메톡시페닐)메틸아미노]피리미딘-5-일]에틸]아미노]에탄올(11.49 g, 38.02 mmol)의 혼합물에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(103.69 mL, 103.69 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 디메틸 술폭시드(230 mL) 중 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(23.00 g, 34.56 mmol)의 용액 내에 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS (ESI, m/z): 947.3 [M+H]+.
단계 2: 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(350 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((R)-1-(4-((4-메톡시벤질)아미노)피리미딘-5-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(34.00 g, 35.87 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(13.60 g, 53.42 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(23.12 g, 178.89 mmol)의 혼합물을 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 희석하고 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(95:5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(25 g, 18.28 mmol, 51% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 929.3 [M+H]+.
단계 3: 5-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
테트라히드로퓨란(40 mL) 중 [(2R,8S)-2-플루오로-1,2,3,5,6,7-헥사히드로피롤리진-8-일]메탄올(2.05 g, 12.91 mmol)의 혼합물에 수소화 나트륨(688.3 mg, 17.21 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(4.00 g, 4.30 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 1 M 염산으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS (ESI, m/z): 1052.4 [M+H]+.
단계 4: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
트리플루오로아세트산(150 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(15 mL) 중 5-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(5.00 g, 4.75 mmol)의 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 28% B에서 48% B로, 48% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.38로 정제하여 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(494.4mg,0.7144mmol, 15% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):692.2 [M+H]+.
실시예 81: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.37 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 6.80 (s, 4H), 6.46 (s, 1H), 6.15 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.26 (d, J = 54.7 Hz, 1H), 4.47 (dd, J = 12.1, 6.1 Hz, 1H), 4.31 (dd, J = 12.0, 6.6 Hz, 1H), 4.05 (dd, 2H), 3.71 (dd, J = 15.6, 6.8 Hz, 1H), 3.46 (dd, J = 15.4, 6.2 Hz, 1H), 3.18 - 3.02 (m, 2H), 2.98 (s, 1H), 2.90 - 2.73 (m, 1H), 2.35 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.19 - 2.09 (m, 1H), 2.09 - 1.90 (m, 2H), 1.88 - 1.67 (m, 3H), 1.59 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 82a 및 82b: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
합성 경로
단계 1: (R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((R)-1-(4-((4-메톡시벤질)아미노)피리미딘-5-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 질소하에서, 디메틸 술폭시드(11 mL) 중 2-[[(1R)-1-[4-[(4-메톡시페닐)메틸아미노]피리미딘-5-일]에틸]아미노]에탄올(550.0 mg, 1.82 mmol)의 혼합물에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(4.96 mL, 4.96 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 디메틸 술폭시드(11 mL) 중 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(1.10 g, 1.65 mmol)의 용액 내에 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축시켰다. 조 물질을 추가의 정제없이 직접 사용하였다. LCMS (ESI, m/z): 947.3 [M+H]+.
단계 2: 5-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(30 mL) 중 (R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((R)-1-(4-((4-메톡시벤질)아미노)피리미딘-5-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(2.30 g, 2.43 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(920.0 mg, 3.61 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(1.56 g, 12.1 mmol)의 혼합물을 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(63:37)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(1.00 g, 1.07 mmol, 44.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 929.3 [M+H]+.
단계 3: 5-((1R)-1-((9R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 (3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메탄올(526.4 mg, 3.23 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(172.0 mg, 4.30 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 5-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(1.00 g, 1.08 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1056.4 [M+H]+.
단계 4: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
트리플루오로아세트산(20 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(2 mL) 중 5-((1R)-1-((9R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(1.1 g, 조)의 용액을 실온에서 40시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 엑스셀렉트(XSelect) CSH 플루오로 페닐, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(0.1% FA), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 11분 내 5% B에서 13% B로; 254/220 nm; RT1: 9.6분으로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-키랄-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) ID, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: IPA--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 25분 내 20% B에서 20% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 7.996; RT2(분): 17.538; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 0.6 mL; 실행 수: 6으로 추가 정제하여 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(34.6 mg, 0.05 mmol, 4.8% 수율) 및 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(36.3 mg, 005 mmol, 5% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 82a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.39 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 6.81 (s, 4H), 6.48 (s, 1H), 6.18 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.56 - 4.43 (m, 1H), 4.39 - 4.25 (m, 3H), 3.73 (dd, J = 15.2, 7.0 Hz, 1H), 3.61 - 3.44 (m, 2H), 3.27 - 3.04 (m, 3H), 2.88 - 2.58 (m, 1H), 2.48 - 2.20 (m, 6H), 1.61 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 696.1 [M+H]+, Flow : 1.0 mL/분 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 ID-3, 4.6*50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=80:20; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 1.889분(더 빠른 피크)
실시예 82b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.39 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.75 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.17 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.58 - 4.42 (m, 1H), 4.44 - 4.25 (m, 3H), 3.73 (dd, J = 15.8, 6.6 Hz, 1H), 3.60 - 3.43 (m, 2H), 3.27 - 3.02 (m, 3H), 2.73 - 2.54 (m, 1H), 2.48 - 2.23 (m, 6H), 1.62 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 696.1 [M+H]+, Flow : 1.0 mL/분 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 ID-3, 4.6*50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=80:20; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 2.887분(더 느린 피크)
실시예 83a 및 83b: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
합성 경로
단계 1: (S)-(4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메탄올
테트라히드로퓨란(50 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 (S)-4,4-디플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(5.00 g, 18.85 mmol)의 용액에 수소화 알루미늄 리튬(2.15 g, 56.68 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하였다. 고체를 여과하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z):152.1 [M+H]+
단계 2: 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 [(2S)-4,4-디플루오로-1-메틸-피롤리딘-2-일]메탄올(650.0 mg, 4.3 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(215.0 mg, 5.38 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(1.00 g, 1.08 mmol)을 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 그런 다음, 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고, 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z):1044.4 [M+H]+
단계 3: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
트리플루오로아세트산(16 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(1.6 mL) 중 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(1.60 g, 1.53 mmol)의 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 31 % B에서 56% B로, 56 % B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.7로 정제하여 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(60.6 mg, 0.09 mmol, 5.7% 수율) 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(64.8 mg, 0.09 mmol, 5.8% 수율)을 수득하였다.
실시예 83a: LC-MS: (ESI, m/z): 684.2 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.39 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.75 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.15 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.57 - 4.40 (m, 2H), 4.40 - 4.28 (m, 2H), 3.72 (dd, J = 15.8, 6.1 Hz, 1H), 3.55 - 3.35 (m, 2H), 3.07 - 2.88 (m, 1H), 2.78 - 2.54 (m, 2H), 2.43 - 2.31 (m, 6H), 2.30 - 2.10 (m, 1H), 1.61 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 83b: LC-MS: (ESI, m/z): 684.1 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.38 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 6.81 (s, 4H), 6.48 (s, 1H), 6.18 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.63 - 4.50 (m, 1H), 4.46 - 4.29 (m, 3H), 3.79 (dd, J = 15.6, 6.3 Hz, 1H), 3.60 - 3.33 (m, 2H), 3.07 - 2.86 (m, 1H), 2.76 - 2.54 (m, 2H), 2.42 - 2.32 (m, 6H), 2.30 - 2.09 (m, 1H), 1.63 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 84a 및 84b: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
합성 경로
단계 1: 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
테트라히드로퓨란(8 mL) 중 [(2S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일]메탄올(366.9 mg, 2.43 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(87.4 mg, 3.64 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(566.0 mg, 0.61 mmol)을 첨가하고 25°C에서 10시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 희석된 염산으로 켄칭하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1044.3[M+H]+
단계 2: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
트리플루오로아세트산(7 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.7 mL) 중 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(556.0 mg, 0.53 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(90:10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH C18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(0.1% FA), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 8% B에서 27% B로, 27% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 9, RT2(분):10으로 정제하여 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(11.1 mg, 0.02 mmol, 3% 수율) 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(10.5 mg, 0.02 mmol, 2.9% 수율)을 수득하였다.
실시예 84a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.39 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.74 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.16 - 5.75(m, 2H), 4.53 - 4.26 (m, 4H), 3.77 - 3.55 (m, 2H), 3.47 (dd, J = 15.0, 6.2 Hz, 2H), 3.17 - 2.93 (m, 2H), 2.87 - 2.65 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.13 - 1.97 (m, 2H), 1.60 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 684.1 [M+H]+
실시예 84b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.38 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 6.81 (s, 4H), 6.48 (s, 1H), 6.20 - 5.77 (m, 2H), 4.55 (dd, J = 12.3, 6.6 Hz, 1H), 4.44 - 4.25 (m, 3H), 3.78 (dd, J = 15.6, 6.3 Hz, 1H), 3.67 - 3.57 (m, 1H), 3.53 - 3.40 (m, 2H), 3.17 - 2.93 (m, 2H), 2.87 - 2.65 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.13 - 1.96 (m, 2H), 1.62 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 684.1 [M+H]+
실시예 85: 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민
합성 경로
단계 1: (R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((R)-1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피리다진-4-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 질소하에서, 디메틸 술폭시드(10 mL) 중 2-[[(1R)-1-[3-[(4-메톡시페닐)메틸아미노]피리다진-4-일]에틸]아미노]에탄올(500.0 mg, 1.65 mmol)의 혼합물에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(4.51 mL, 4.51 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 디메틸 술폭시드(10 mL) 중 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(1.00 g, 1.50 mmol)의 혼합물 내로 옮기고 60°C에서 15분 동안 교반하였다. 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS (ESI, m/z): 947.3 [M+H]+.
단계 2: 4-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(20 mL) 중 (R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((R)-1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피리다진-4-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(1.40 g, 1.48 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(560.0 mg, 2.20 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(952.0 mg, 7.37 mmol)의 혼합물을 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(95:5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 4-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민(750 mg, 0.80 mmol, 54.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 929.3 [M+H]+.
단계 3: 4-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 [(2S)-4,4-디플루오로-1-메틸-피롤리딘-2-일]메탄올(192.0 mg, 1.27 mmol)의 혼합물에 수소화 나트륨(80.0 mg, 2.0 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(1 mL) 중 4-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민(400.0 mg, 0.43 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 물질을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS (ESI, m/z): 1044.4 [M+H]+.
단계 4: 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.1 mL) 중 4-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민(400.0 mg, 0.38 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축시켰다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 엑스셀렉트(XSelect) CSH C18 OBD 컬럼, 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(0.1% FA), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 8% B에서 34% B로; 254/220 nm; RT1: 9분으로 정제하여 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민(35.7 mg, 0.05 mmol, 13.6% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):684.2 [M+H]+.
실시예 85: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 8.55 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.44 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.63 - 4.40 (m, 4H), 3.87 - 3.80 (m, 1H), 3.65 - 3.58 (m, 1H), 3.48 - 3.34 (m, 1H), 3.23 - 3.03 (m, 1H), 2.96 - 2.70 (m, 1H), 2.68 - 2.58 (m, 4H), 2.46 (s, 3H), 2.45 - 2.24 (m, 1H), 1.72 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 86: 6-((R)-4-((R)-(2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (R)-5-(2-(((R)-(2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온
질소하에서, 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 (R)-2-(((4-아미노피리미딘-5-일)(시클로프로필)메틸)아미노)에탄-1-올(294 mg, 1.42 mmol))에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(1.42 mL, 1.42 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 0°C에서 첨가하였다. 반응물을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 (R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-5,8-디플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(1.00 g, 1.09 mmol)의 혼합물 내로 옮기고 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-5-(2-(((R)-(2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(250 mg, 0.23 mmol, 21.1% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1105.4 [M+H]+.
단계 2: (R)-7-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-(((R)-(2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)아미노)에톡시)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 (R)-5-(2-(((R)-(2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)아미노)에톡시)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-3-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)퀴나졸린-4(3H)-온(250.0 mg, 0.23 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 (R)-7-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-(((R)-(2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)아미노)에톡시)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(160 mg, 0.22 mmol, 96.3% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 735.2 [M+H]+.
단계 3: 6-((R)-4-((R)-(2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
클로로포름(5 mL) 중 (R)-7-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-(((R)-(2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)아미노)에톡시)-6-클로로-8-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(150.0 mg, 0.20 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(150.0 mg, 0.59 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(135.0 mg, 1.04 mmol)의 용액을 70°C에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep C18 OBD 컬럼 30*100 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 34% B에서 62% B로, 62% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 6.32로 정제하여 6-((R)-4-((R)-(2-아미노피리딘-3-일)(시클로프로필)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(47.5 mg, 0.07 mmol, 32.5% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 717.2 [M+H]+.
실시예 86: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.8, 1.8 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.68 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 5.79 (s, 2H), 5.44 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 5.27 (d, J = 54.4 Hz, 1H), 4.66 - 4.47 (m, 1H), 4.38 - 4.24 (m, 1H), 4.16 - 3.94 (m, 2H), 3.94 - 3.79 (m, 1H), 3.64 - 3.48 (m, 1H), 3.15 - 2.91 (m, 3H), 2.91 - 2.72 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.20 - 1.92 (m, 3H), 1.90 - 1.65 (m, 4H), 0.80 - 0.27 (m, 4H).
실시예 87a: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
실시예 87b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 디에틸 (2S,5S)-1-벤질피롤리딘-2,5-디카르복실레이트(trans 혼합물)
테트라히드로퓨란(500 mL) 중 디에틸 (2S,5R)-1-벤질피롤리딘-2,5-디카르복실레이트 염산염(cis 혼합물)(50.0 g, 146.27 mmol)의 혼합물에 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(290 mL, 290 mmol, 1M in tetrahydrofuran)를 넣고 -40°C에서 1시간 동안 교반한 후 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(146 mL, 146 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고 -40°C에서 1시간 더 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(97:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 디에틸 (2S,5S)-1-벤질피롤리딘-2,5-디카르복실레이트(trans 혼합물)(4.0 g, 13.07 mmol, 9% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 306.0.
단계 2: ((2S,5S)-1-벤질피롤리딘-2,5-디일)디메탄올(trans 혼합물)
테트라히드로퓨란(200 mL) 중 디에틸 (2S,5S)-1-벤질피롤리딘-2,5-디카르복실레이트(trans 혼합물)(17.7 g, 57.96 mmol)의 혼합물에 리튬 알루미늄하이드라이드(115 mL, 230 mmol, 테트라히드로퓨란 중 2 M)를 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하였다. 고체를 여과하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(90:10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 ((2S,5S)-1-벤질피롤리딘-2,5-디일)디메탄올(trans 혼합물)(11.3 g, 51.06 mmol, 88.1% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 222.3.
단계 3: ((2S,5S)-피롤리딘-2,5-디일)메탄올(trans 혼합물)
메틸 알코올(60 mL) 중 ((2S,5S)-1-벤질피롤리딘-2,5-디일)디메탄올(trans 혼합물)(4.0 g, 18.08 mmol) 및 팔라듐 탄소(2.0 g, 1.89 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 수소하에서 교반하였다. 고체를 여과하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 132.1.
단계 4: (6S,8aS)-6-(히드록시메틸)테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-4(3H)-온(trans 혼합물)
2-프로판올(3 mL) 중 ((2S,5S)-피롤리딘-2,5-디일)디메탄올(trans 혼합물)(2.50 g, 19.06 mmol)의 혼합물에 칼륨 트리메틸실란올레이트(4.90 g, 38.19 mmol) 및 브로모아세틸 브로마이드(3.81 g, 19.07 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(94:6)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (6S,8aS)-6-(히드록시메틸)테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-4(3H)-온(trans 혼합물)(1.50 g, 8.76 mmol, 46% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):172.0 [M+H]+.
단계 5: ((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올(trans 혼합물)
테트라히드로퓨란(40 mL) 중 (6S,8aS)-6-(히드록시메틸)테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-4(3H)-온(trans 혼합물)(1.30 g, 7.59 mmol) 및 리튬 알루미늄하이드라이드(3.00 g, 79.04 mmol)의 혼합물을 60°C에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 3 ml 물, 3 ml 10% 수산화나트륨 용액 및 9 ml 물로 켄칭하였다. 고체를 여과하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(80:20)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 ((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올(trans 혼합물)(692 mg, 4.40 mmol, 58% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 6: tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(trans 혼합물)
테트라히드로퓨란(7 mL) 중 ((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올(trans 혼합물)(650.0 mg, 4.13 mmol)의 혼합물에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(5 mL, 5.0 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(7 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]카바메이트(원하는 회전장애이성질체)(750.0 mg, 0.83 mmol)를 첨가하고 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(90:10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(trans 혼합물)(620 mg, 0.60 mmol, 73% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
단계 7: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(10 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(1 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(trans 혼합물)(800.0 mg, 0.78 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 27% B에서 54% B로, 54% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 9.18로 정제하였다. 생성물을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) ID, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: IPA--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 22분 내 85% B에서 85% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 14.911; RT2(분): 18.469; 샘플 용매: IPA--HPLC; 주입 용량: 1.2 mL; 실행 수: 2로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(87.7 mg, 0.13 mmol, 16.4% 수율) 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(101.5 mg, 0.15 mmol, 19% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 87a: LCMS (ESI, m/z):689.2 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.70 (s, 2H), 4.50 - 4.37 (m, 2H), 4.27 (dd, J = 11.9, 6.7 Hz, 1H), 4.16 (dd, J = 10.9, 5.8 Hz, 1H), 3.72 - 3.55 (m, 3H), 3.54 - 3.40 (m, 3H), 3.14 (t, J = 10.3 Hz, 1H), 3.04 - 2.78 (m, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.18 - 1.99 (m, 1H), 1.85 - 1.70 (m, 1H), 1.69 - 1.59 (m, 1H), 1.57 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.39 - 1.22 (m, 1H). 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 ID-3, 4.6*50 mm, 3 um; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=85:15; 유량: 1 mL/분; 체류 시간:2.804 (더 빠른 피크).
실시예 87b: LCMS (ESI, m/z):689.3 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.25 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.51 - 4.35 (m, 2H), 4.27 (dd, J = 11.8, 6.7 Hz, 1H), 4.14 (dd, J = 10.9, 5.7 Hz, 1H), 3.74 - 3.56 (m, 3H), 3.56 - 3.39 (m, 3H), 3.14 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 3.05 - 2.77 (m, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.17 - 1.98 (m, 1H), 1.85 - 1.69 (m, 1H), 1.68 - 1.60 (m, 1H), 1.56 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.41 - 1.18 (m, 1H). 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 ID
3, 4.6*50 mm, 3 um. (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=85:15; 유량: 1 mL/분; 체류 시간:3.674 (더 느린 피크).
실시예 88: (R)-6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-브로모-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (R)-6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-브로모-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(700 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(70 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-8-클로로-6-플루오로-3-[[(2R,8S)-2-플루오로-1,2,3,5,6,7-헥사히드로피롤리진-8-일]메톡시]-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]카바메이트(100.0 g, 96.95 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(90:10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(24.6 g, 35.60 mmol, 36.7% 수율)을 수득하였다.
(R)-6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-브로모-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(36.3 mg, 0.05mmol)을 분리하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 660.3[M+H]+
실시예 88: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.85 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.69 - 7.61 (m, 1H), 6.67 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.38 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.20 (d, J = 53.8 Hz, 1H), 4.40 - 4.27 (m, 1H), 4.24 - 4.10 (m, 3H), 3.63 - 3.50 (m, 1H), 3.46 - 3.33 (m, 1H), 3.17 - 3.03 (m, 3H), 2.97 - 2.82 (m, 1H), 2.33 (d, J = 2.1, 3H), 2.30 - 1.99 (m, 3H), 1.96 - 1.72 (m, 3H), 1.55 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 89: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-에톡시테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (2R,7aS)-2-에톡시-7a-((트리틸옥시)메틸)헥사히드로-1H-피롤리진
N,N-디메틸포름아미드(8 mL) 중 (2R,7aS)-7a-((트리틸옥시)메틸)헥사히드로-1H-피롤리진-2-올(800.0 mg, 2 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(400.0 mg, 10 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 요오도에탄(937.0 mg, 6.0 mmol)을 첨가하고 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(80:20)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (2R,7aS)-2-에톡시-7a-((트리틸옥시)메틸)헥사히드로-1H-피롤리진(800 mg,1.76 mmol, 87.8% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 428.2 [M+H]+
단계 2: ((2R,7aS)-2-에톡시테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올
1,4-디옥산(4 mL) 중 (2R,7aS)-2-에톡시-7a-((트리틸옥시)메틸)헥사히드로-1H-피롤리진(790.0 mg, 1.85 mmol) 및 4 M 염산의 용액을 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(90:10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 ((2R,7aS)-2-에톡시테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-yl)메탄올(140 mg, 0.76 mmol, 40.9% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 186.1 [M+H]+
단계 3: tert-부틸 (3-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-에톡시테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)실란카르복실레이트
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 ((2R,7aS)-2-에톡시테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(60.0 mg, 0.3200 mmol)의 혼합물에 수소화 나트륨(12.0 mg, 0.50 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(0.5 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(원하는 회전장애이성질체)(100.0 mg, 0.10 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(92:8)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (3-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-에톡시테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)실란카르복실레이트(77 mg, 0.07 mmol, 66.2% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1157.4 [M+H]+
단계 4: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-에톡시테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-에톡시테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)실란카르복실레이트(70.0 mg, 0.06 mmol)의 용액을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 33% B에서58% B로, 58% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 7.52로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((2R,7aS)-2-에톡시테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(14.2 mg, 0.02 mmol, 32.4% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 717.2[M+H]+
실시예 89: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.68 - 7.59 (m, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.33 - 6.18 (m, 1H), 5.72 (s, 2H), 4.43 (dd, J = 11.9, 6.1 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 11.9, 6.8 Hz, 1H), 4.15 - 3.97 (m, 3H), 3.64 (dd, J = 15.9, 6.9 Hz, 1H), 3.49 - 3.34 (m, 3H), 3.11 (dd, J = 10.5, 4.9 Hz, 1H), 3.00 - 2.88 (m, 1H), 2.81 - 2.69 (m, 1H), 2.63 (dd, J = 10.5, 5.3 Hz, 1H), 2.36 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.18 (dd, J = 13.0, 5.9 Hz, 1H), 1.96 - 1.88 (m, 2H), 1.87 - 1.62 (m, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.08 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
실시예 90: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(8-옥사-2,5-디아자스피로[3.5]노난-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 2-[13-[(1R)-1-[2-[비스(tert-부톡시카르보닐)아미노]-3-피리딜]에틸]-7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-8-클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-3-일]-8-옥사-2,5-디아자스피로[3.5]노난-5-카르복실레이트
질소하에서, 디메틸 설폭사이드(5 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(150.0 mg, 0.15 mmol), tert-부틸 8-옥사-2,5-디아자스피로[3.5]노난-5-카르복실레이트(51.0 mg, 0.22 mmol) 및 탄산 세슘(145.0 mg, 0.45 mmol)의 혼합물을 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 2-[13-[(1R)-1-[2-[비스(tert-부톡시카르보닐)아미노]-3-피리딜]에틸]-7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-8-클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-3-일]-8-옥사-2,5-디아자스피로[3.5]노난-5-카르복실레이트(140 mg, 0.11 mmol, 75.1% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1201.0 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(8-옥사-2,5-디아자스피로[3.5]노난-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 tert-부틸 2-[13-[(1R)-1-[2-[비스(tert-부톡시카르보닐)아미노]-3-피리딜]에틸]-7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-8-클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-3-일]-8-옥사-2,5-디아자스피로[3.5]노난-5-카르복실레이트(140.0 mg, 0.12 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 25 mL/분; 구배: 10분 내 70 % B에서 85 % B로, 85 % B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 5.23으로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(8-옥사-2,5-디아자스피로[3.5]노난-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(14.6 mg, 0.02 mmol, 18.7 % 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 660.3[M+H]+
실시예 90: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.64 (dd, J = 7.4, 4.9 Hz, 1H), 6.47 - 6.40 (m, 1H), 6.26 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.81 (s, 2H), 4.47 - 4.26 (m, 1H), 4.21 - 4.03 (m, 1H), 3.98 - 3.74 (m, 4H), 3.62 - 3.37 (m, 5H), 3.29 - 3.15 (m, 2H), 2.73 - 2.72 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.51 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 91a: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((6S,8aS)-3,3-디플루오로헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
실시예 91b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((6R,8aR)-3,3-디플루오로헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 2-(((2S,5S)-1-벤질-5-(히드록시메틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-2,2-디플루오로아세트산
테트라히드로퓨란(50 mL) 중 [(2S,5S)-1-벤질-5-(히드록시메틸)피롤리딘-2-일]메탄올(3.00 g, 13.56 mmol)의 혼합물에 수소화 나트륨(2.16 g, 54.01 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, (2-클로로-2,2-디플루오로-아세틸)옥시소듐(2.40 g, 15.74 mmol)을 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 1 M 염산으로 켄칭하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(85:15)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(((2S,5S)-1-벤질-5-(히드록시메틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-2,2-디플루오로아세트산(800 mg, 2.54 mmol, 18.7% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 316.1 [M+H]+.
단계 2: 메틸 2-(((2S,5S)-1-벤질-5-(히드록시메틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-2,2-디플루오로아세트산
메틸 알코올(5 mL) 및 디클로로메탄(5 mL) 중 2-(((2S,5S)-1-벤질-5-(히드록시메틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-2,2-디플루오로아세트산(800.0 mg, 2.54 mmol)의 혼합물에 (트리메틸실릴)디아조메탄(4.0 mL, 25.14 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS (ESI, m/z): 330.1 [M+H]+.
단계 3: (6S,8aS)-3,3-디플루오로-6-(히드록시메틸)테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-4(3H)-온
메탄올(10 mL) 중 메틸 2-(((2S,5S)-1-벤질-5-(히드록시메틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-2,2-디플루오로아세테이트(800.0 mg, 2.43 mmol)의 용액에 팔라듐 카본(500.0 mg, 0.47 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 수소하에서 교반하였다. 고체를 여과하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(95:5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (6S,8aS)-3,3-디플루오로-6-(히드록시메틸)테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-4(3H)-온(230 mg, 1.11 mmol, 45.7% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 208.1 [M+H]+.
단계 4: ((6S,8aS)-3,3-디플루오로헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 (6S,8aS)-3,3-디플루오로-6-(히드록시메틸)테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-4(3H)-온(190.0 mg, 0.92 mmol)의 혼합물에 보란 디메틸설파이드 착물(210.0 mg, 2.76 mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 메탄올로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 조 물질을 추가의 정제없이 직접 사용하였다. LCMS (ESI, m/z):194.1 [M+H]+.
단계 5: tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((6S,8aS)-3,3-디플루오로헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(8 mL) 중 ((6S,8aS)-3,3-디플루오로헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올(200.0 mg, 1.04mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(1.2 mL, 1.2 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-8-클로로-6-플루오로-3-[[(6R,8S)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-8-일]메톡시]-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]카바메이트(400.0 mg, 0.40 mmol)를 첨가하고 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(30:70)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((6S,8aS)-3,3-디플루오로헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(220 mg, 0.22 mmol, 54.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):1065.4 [M+H]+.
단계 6: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((6S,8aS)-3,3-디플루오로헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((6R,8aR)-3,3-디플루오로헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((6S,8aS)-3,3-디플루오로헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(200.0 mg, 0.1900 mmol)의 혼합물을 실온에서 5분 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 39% B에서 64% B로, 64% B; 파장: 254/220 nm; RT(분): 8.6으로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 생성물을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IE, 2*25 cm, 5 um; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 17분 내 30% B에서 30% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 12.05; RT2(분): 14.89; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 0.3 mL; 실행 수: 8로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((6S,8aS)-3,3-디플루오로헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(22 mg, 0.03 mmol, 16.2% 수율) 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((6R,8aR)-3,3-디플루오로헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(26.7 mg, 0.04 mmol, 19.6% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 91a: LCMS (ESI, m/z):725.2 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.96 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.85 - 6.70 (m, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.50 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.58 - 4.36 (m, 3H), 4.31 - 4.22 (m, 1H), 4.02 - 3.79 (m, 2H), 3.79 - 3.34 (m, 4H), 3.28 - 3.10 (m, 2H), 2.44 (d, J = 2.5 Hz, 3H), 2.31 - 2.14 (m, 1H), 2.08 - 1.92 (m, 1H), 1.85 - 1.70 (m, 1H), 1.66 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.61 - 1.44 (m, 1H). 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IE-3, 4.6*50 mm, 3 um; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=70:30; 유량: 1 mL/분; 체류 시간:3.022 (더 빠른 피크).
실시예 91b: LCMS (ESI, m/z):725.2 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.95 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.85 - 6.70 (m, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.51 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.55 - 4.36 (m, 3H), 4.36 - 4.21 (m, 1H), 4.04 - 3.79 (m, 2H), 3.79 - 3.34 (m, 5H), 3.29 - 3.12 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.30 - 2.13 (m, 1H), 2.07 - 1.91 (m, 1H), 1.84 - 1.69 (m, 1H), 1.66 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.61 - 1.45 (m, 1H). 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IE
3, 4.6*50 mm, 3 um; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=70:30; 유량: 1 mL/분; 체류 시간:3.961 (더 느린 피크).
실시예 92a: 6-((R)-2-(((1R,5R,7S)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
실시예 92b: 6-((R)-2-(((1R,5R,7R)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-4-(2-(벤질옥시)에톡시)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트
N,N-디메틸포름아미드(300 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-4-히드록시피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(30.0 g, 122.31 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(5.9 g, 147.5 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반한 다음, 요오드화 나트륨(1.83 g, 12.23 mmol) 및 ((2-브로모에톡시)메틸)벤젠(26.3 g, 122.27 mmol)을 혼합물에 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(76:24)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-4-(2-(벤질옥시)에톡시)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(17.10 g,45.06 mmol, 36.8% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 380.2 [M+H]+
단계 2: 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-4-(2-히드록시에톡시)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트
메틸 알코올(170 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-4-(2-(벤질옥시)에톡시)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(17.1 g, 44.8 mmol)의 용액에 활성탄 상의 팔라듐(9.5 g, 89.27 mmol)을 첨가하고 실온에서 수소 대기압 하에 15시간 교반하였다. 종료 후, 고체를 여과하였다. 여과 후, 여액을 감압하에 농축하여 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-4-(2-히드록시에톡시)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(12.8 g, 44.24 mmol, 98.3% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 290.2 [M+H]+
단계 3: 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-4-(2-(토실옥시)에톡시)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트
테트라히드로퓨란(128 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-4-(2-히드록시에톡시)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(13.6 g, 47.01 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(5.6 g, 140 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 4-메틸벤젠설포닐 클로라이드(18.00 g, 94.41 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-4-(2-(토실옥시)에톡시)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(9.4 g,18.86 mmol, 40.1% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):444.2 [M+H]+
단계 4: 2-메틸 (2S,4R)-4-(2-(토실옥시)에톡시)피롤리딘-2-카르복실레이트
2,2,2-트리플루오로아세트산(20 mL) 및 디클로로메탄(20 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-4-(2-(토실옥시)에톡시)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(9.30 g, 20.97 mmol)의 용액을 25°C에서 20분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z):344.1 [M+H]+
단계 5: 메틸 (5R,7S)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-카르복실레이트
N,N-디메틸아세트아미드(15 mL) 중 메틸 (2S,4R)-4-(2-(토실옥시)에톡시)피롤리딘-2-카르복실레이트(6.40 g, 18.64 mmol) 및 탄산 칼륨(15.54 g, 112.63 mmol)의 용액을 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 고체를 여과하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 메틸 (5R,7S)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-카르복실레이트(450 mg, 2.63 mmol, 14.1% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):172.1 [M+H]+
단계 6: ((5R,7S)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-일)메탄올
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 메틸 (5R,7S)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-디카르복실레이트(420.0 mg, 2.45 mmol)의 용액에 수소화 알루미늄 리튬(280.0 mg, 7.37 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하였다. 고체를 여과하였다. 여과 후, 여액을 감압하에 농축하여 ((5R,7S)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-일)메탄올(160 mg, 1.12 mmol, 45.5% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):144.1 [M+H]+
단계 7: tert-부틸 (3-((1R)-1-(2-(((5R,7S)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-일)메톡시)-9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(9 mL) 중 ((5R,7S)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-일)메탄올(260.0 mg, 1.82 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(2.7 mL, 2.7 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 혼합물을 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(원하는 회전장애이성질체)(900.0 mg, 0.89 mmol)를 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(96:4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (3-((1R)-1-(2-(((5R,7S)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-일)메톡시)-9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(500 mg,0.45 mmol, 50.2% 수율)를 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):1015.4 [M+H]+.
단계 8: 6-((R)-2-(((1R,5R,7S)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-2-(((1R,5R,7R)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(4 mL) 및 트리플루오로메탄설폰산(0.4 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(2-(((5R,7S)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-일)메톡시)-9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(480.0 mg, 0.43 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: MeOH--HPLC; 유량: 25 mL/분; 구배: 7분 내 20% B에서 50% B로, 50% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 5.5.로 정제하여 6-((R)-2-(((1R,5R,7S)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(16.9 mg, 0.03 mmol, 5.8% 수율) 및 6-((R)-2-(((1R,5R,7R)-4-옥사-1-아자비시클로[3.2.1]옥탄-7-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(5.8 mg, 0.01 mmol, 2% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 92a: LC-MS: (ESI, m/z): 675.3 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.65 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.46 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.41 (dd, J = 12.0, 6.1 Hz, 1H), 4.35 - 4.16 (m, 3H), 4.02 (dd, J = 10.8, 6.5 Hz, 1H), 3.86 - 3.71 (m, 1H), 3.68 - 3.53 (m, 2H), 3.45 - 3.35 (m, 3H), 3.00 - 2.90 (m, 1H), 2.88 - 2.80 (m, 1H), 2.58 - 2.52 (m, 1H), 2.34 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.27 - 2.15 (m, 1H), 1.72 - 1.58 (m, 1H), 1.55 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 675.3 [M+H]+
실시예 92b: LC-MS: (ESI, m/z): 675.3 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, Methanol- d 6, ppm) δ 7.96 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.80 (dd, J = 7.6, 1.4 Hz, 1H), 6.79 (dd, J = 7.6, 5.1 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 5.95 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.70 (q, J = 5.9 Hz, 1H), 4.54 (dd, J = 11.5, 7.8 Hz, 1H), 4.46 - 4.31 (m, 2H), 4.10 - 3.86 (m, 2H), 3.66 (dd, J = 12.6, 5.3 Hz, 1H), 3.29 - 3.18 (m, 1H), 3.17 - 3.09 (m, 1H), 3.00 - 2.90 (m, 1H), 2.83 (dd, J = 13.3, 3.9 Hz, 1H), 2.51 - 2.38 (m, 4H), 2.00 - 1.87 (m, 1H), 1.77 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.57 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 93a & 93b & 93c & 93d: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((3S,6S,8aS)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((3S,6R,8aR)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘 2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((3R,6S,8aS)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((3R,6R,8aR)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸(5-메틸-메틸)로)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: ((2S,5S)-피롤리딘-2,5-디일)메탄올(trans 혼합물)
메틸 알코올(60 mL) 중 ((2S,5S)-1-벤질피롤리딘-2,5-디일)디메탄올(trans 혼합물)(4.0 g, 18.08 mmol) 및 팔라듐 탄소(2.0 g, 1.89 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 수소하에서 교반하였다. 고체를 여과하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 132.1.
단계 2: (6S,8aS)-6-(히드록시메틸)-3-메틸테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-4(3H)-온(trans 혼합물)
2-프로판올(23 mL) 중 ((2S,5S)-피롤리딘-2,5-디일)디메탄올(trans 혼합물)(2.30 g, 17.53 mmol)의 용액에 칼륨 트리메틸실란올레이트(4.5 g, 35.07 mmol) 및 2-브로모프로파노일 브로마이드(4.2 g, 19.29 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(96:4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (6S,8aS)-6-(히드록시메틸)-3-메틸테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-4(3H)-온(trans 혼합물)(900 mg, 4.86 mmol, 27.7% 수율)를 무색 투명 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 186.1 [M+H]+
단계 3: ((6S,8aS)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올(trans 혼합물)
테트라히드로퓨란(12 mL) 중 (6S,8aS)-6-(히드록시메틸)-3-메틸테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-4(3H)-온(trans 혼합물)(1.2 g, 6.48 mmol)의 용액에 수소화 알루미늄 리튬(1.5 g, 38.87 mmol)을 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하였다. 고체를 여과하였다. 여과 후, 여액을 감압하에 농축하여 ((6S,8aS)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올(trans 혼합물)(900 mg, 5.26 mmol, 81.1% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):172.1 [M+H]+
단계 4: 6-((9R)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(trans 혼합물)
테트라히드로퓨란(12 mL) 중 ((6S,8aS)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올(trans 혼합물)(588.0 mg, 3.43 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(180.0 mg, 4.5 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 6-((R)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(1.20 g, 1.14 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(96:4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-((9R)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(trans 혼합물)(1.02 g, 1.00 mmol, 87.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
단계 5: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((3S,6S,8aS)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((3S,6R,8aR)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘 2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((3R,6S,8aS)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((3R,6R,8aR)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸(5-메틸-메틸)로)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 6-((9R)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(trans 혼합물)(600.0 mg, 0.51 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep C18 OBD 컬럼 30*100 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 17% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.9로 정제하여 2개의 부분입체 이성질체를 수득하였다. 제1 부분입체 이성질체를 분취용-키랄-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IF, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: MtBE(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: MeOH: DCM=1: 1--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 22분 내 5% B에서 5% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 8.885; RT2(분): 11.376; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 0.6 mL; 실행 수: 9로 분리하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((3S,6S,8aS)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(19.6mg, 0.03 mmol, 5.3% 수율) 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((3S,6R,8aR)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(19.8mg, 0.03 mmol, 5.4% 수율)을 수득하였다. 제2 부분입체 이성질체를 분취용-키랄-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IE-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1) (0.1%DEA) EtOH=80: 20; 유량: 1 mL/분; 구배: 0% B에서 0% B로; 주입 용량: 5 ul mL로 분리하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((3R,6S,8aS)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(48 mg, 0.07 mmol, 13.5% 수율) 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((3R,6R,8aR)-3-메틸헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(49.1 mg, 0.07 mmol, 13.7% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 93a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.42 (dd, J = 10.7, 5.0 Hz, 2H), 4.33 - 4.21 (m, 1H), 4.14 (dd, J = 10.8, 6.2 Hz, 1H), 3.68 - 3.48 (m, 4H), 3.42 - 3.33 (m, 1H), 3.15 (t, J = 10.9 Hz, 1H), 3.06 - 2.87 (m, 2H), 2.49 - 2.41 (m, 1H), 2.37 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.17 - 1.96 (m, 1H), 1.88 - 1.62 (m, 2H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.37 - 1.19 (m, 1H), 0.94 (d, J = 6.2 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z):703.2 [M+H]+, 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 ID-3, 4.6*50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=80:20; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 1.716분(더 빠른 피크)
실시예 93b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.26 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.70 (s, 2H), 4.51 - 4.36 (m, 2H), 4.32 - 4.20 (m, 1H), 4.11 (dd, J = 10.8, 6.1 Hz, 1H), 3.74 - 3.44 (m, 4H), 3.44 - 3.36 (m, 1H), 3.16 (t, J = 10.9 Hz, 1H), 3.09 - 2.91 (m, 2H), 2.63 - 2.53 (m, 1H), 2.37 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.18 - 2.01 (m, 1H), 1.88 - 1.71 (m, 1H), 1.71 - 1.60 (m, 1H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.37 - 1.19 (m, 1H), 0.97 (d, J = 6.2 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z):703.2 [M+H]+, 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 ID
3, 4.6*50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=80:20; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 2.023분(더 느린 피크).
실시예 93c: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.65 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.46 (s, 1H), 6.22 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.41 (dd, J = 12.2, 5.8 Hz, 1H), 4.33 - 4.17 (m, 2H), 4.05 (dd, J = 10.8, 6.1 Hz, 1H), 3.73 (d, J = 2.8 Hz, 2H), 3.67 - 3.59 (m, 1H), 3.56 - 3.43 (m, 1H), 3.42 - 3.32 (m, 1H), 3.27 - 3.14 (m, 1H), 2.98 - 2.81 (m, 1H), 2.65 - 2.53 (m, 1H), 2.35 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.29 - 2.04 (m, 2H), 1.88 - 1.70 (m, 1H), 1.68 - 1.42 (m, 5H), 1.03 (d, J = 6.2 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z):703.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄 셀룰로즈-SB, 4.6*100 mm, 3 μm; 254 nm에서 검출; Hex(0.1%DEA):EtOH=75:25; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 7.850분(더 빠른 피크)
실시예 93d: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.65 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.46 (s, 1H), 6.23 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.41 (dd, J = 11.9, 6.1 Hz, 1H), 4.33 - 4.16 (m, 2H), 4.05 (dd, J = 10.8, 6.1 Hz, 1H), 3.74 (d, J = 2.8 Hz, 2H), 3.62 (dd, J = 15.7, 6.8 Hz, 1H), 3.56 - 3.44 (m, 1H), 3.43 - 3.33 (m, 1H), 3.28 - 3.14 (m, 1H), 2.93 - 2.80 (m, 1H), 2.64 - 2.55 (m, 1H), 2.35 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.30 - 2.01 (m, 2H), 1.88 - 1.70 (m, 1H), 1.68 - 1.44 (m, 5H), 1.03 (d, J = 6.2 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z):703.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄 셀룰로즈-SB, 4.6*100 mm, 3 μm; 254 nm에서 검출; Hex(0.1%DEA):EtOH=75:25; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 9.376분(더 느린 피크)
실시예 94: 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 8-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)-3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄
메틸 알코올(12 mL) 중 3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄(1.20 g, 6.00 mmol), 2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)아세트알데히드(3.10 g, 18.1 mmol), 시아노수소화붕소 나트륨(1.1 g, 18.1 mmol) 및 티타늄 테트라이소프로판올레이트(2.4 mL)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(96:4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 88-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)-3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄(1.70 g, 5.98 mmol, 99.1% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 285.2 [M+H]+
단계 2: 2-(3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)에탄-1-올
1,4-디옥산(10 mL) 및 디클로로메탄(10 mL) 중 4 M 염산의 8-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)-3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄(2.3 g, 8.1 mmol)의 용액을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(90:10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)에탄-1-올(450 mg, 2.64 mmol, 32.7% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 171.1 [M+H]+
단계 3: (6R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(2 mL) 중 2-(3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)에탄-1-올(100.0 mg, 0.59 mmol) 및 수소화 나트륨(31.0 mg, 0.78 mmol, 광유 중 60% 분산액)의 용액을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(200.0 mg, 0.19 mmol)을 첨가하고 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(96:4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (6R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(190 mg, 0.16 mmol, 84.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 171.0 [M+H]+
단계 4: 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.2 mL) 중 (6R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(170.0 mg, 0.14 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 23% B에서 48% B로, 48% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 9.6으로 정제하여 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(3-메틸-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(59.1 mg, 0.08 mmol, 58.5% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 702.4 [M+H]+
실시예 94: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.4, 1.8 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.25 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.48 - 4.35 (m, 3H), 4.31 - 4.18 (m, 1H), 3.74 - 3.49 (m, 2H), 3.32 - 3.12 (m, 2H), 2.66 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.49 - 2.41 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.11 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.84 - 1.70 (m, 2H), 1.70 - 1.59 (m, 2H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 95a & 95b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((S)-2-모르폴리노프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((R)-2-모르폴리노프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 2-모르폴리노프로판-1-올
테트라프로필 티타네이트(1.0 mL) 및 메틸 알코올(5.0 mL) 중 몰포린(500 mg, 5.74 mmol) 및 1-히드록시프로판-2-온(850.3 mg, 11.48 mmol)의 혼합물을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 시아노수소화붕소 나트륨(721.3 mg, 11.48 mmol)을 첨가하고 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-모르폴리노프로판-1-올(500.0 mg, 3.44 mmol, 60% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 146.1 [M+H]+.
단계 2: (6R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-모르폴리노프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(4 mL) 중 2-모르폴리노프로판-1-올(276.8 mg, 1.91 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(2.28 mL, 2.28 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 혼합물을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(400.0 mg, 0.38 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(1:5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (6R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-모르폴리노프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(250.0 mg, 0.21 mmol, 56.6% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1157.5 [M+H]+.
단계 3: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((S)-2-모르폴리노프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((R)-2-모르폴리노프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 (6R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-모르폴리노프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(240.0 mg, 0.21 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 27% B에서 52% B로, 52%; 254/220 nm; RT1: 8.9분으로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-키랄-HPLC로 하기의 조건하에서: 키랄팩(CHIRALPAK) IE, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: 디클로로메탄=3: 1(0.5% 2M NH3- 메탄올)--HPLC, 이동상 B: 에탄올--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 22분 내 20% B에서 20% B로; 파장: 220/254 nm; RT1: 16.244분 RT2(분): 19.107; 샘플 용매: EtOH; 주입 용량: 0.3 mL; 실행 수: 9로 추가 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((S)-2-모르폴리노프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(22.8 mg, 0.03 mmol, 16.2% 수율) 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((R)-2-모르폴리노프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(25.9 mg, 0.04 mmol, 18.4% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 95a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.74 - 7.55 (m, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.26 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 5.71 (s, 2H), 4.53 (dd, J = 11.1, 6.3 Hz, 1H), 4.49 - 4.38 (m, 1H), 4.35 - 4.13 (m, 2H), 3.65 (dd, J = 15.5, 6.6 Hz, 1H), 3.57 - 3.45 (m, 4H), 3.45 - 3.33 (m, 1H), 3.03 - 2.88 (m, 1H), 2.60 - 2.53 (m, 4H), 2.37 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.06 (d, J = 6.7 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 677.4 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IE-3, 4.6*50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=70:30; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 2.981분(더 빠른 피크)
실시예 95b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.39 - 6.14 (m, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.60 - 4.37 (m, 2H), 4.34 - 4.08 (m, 2H), 3.65 (dd, J = 15.7, 6.9 Hz, 1H), 3.61 - 3.47 (m, 4H), 3.44 - 3.35 (m, 1H), 3.09 - 2.86 (m, 1H), 2.62 - 2.53 (m, 4H), 2.37 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz,, 3H), 1.08 (d, J = 6.7 Hz, 3H). 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IE-3, 4.6*50 mm, 3 um; 254 nm에서 검출; (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=70:30; 유량: 1 mL/분; 체류 시간: 3.535분(더 느린 피크).
실시예 96: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 [(3R)-모르폴린-3-일]메탄올 염산염(58.58 mg, 0.38 mmol)의 혼합물에 수소화 나트륨(45.76 mg, 1.14 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(3 mL) 중 6-[13-[(1R)-1-[2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-3-피리딜]에틸]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-7-일]-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(200.0 mg, 0.19 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 60°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(95:5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(120 mg, 0.11 mmol, 55.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1129.4 [M+H]+.
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.2 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(130.0 mg, 0.12 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Shield RP18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 29% B에서 49% B로, 49% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(10.8 mg, 0.0166 mmol, 14.5% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 649.1 [M+H]+.
실시예 96: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.51 - 4.34 (m, 1H), 4.28 - 4.12 (m, 3H), 3.81 (dd, J = 10.7, 2.9 Hz, 1H), 3.68 - 3.55 (m, 2H), 3.44 - 3.34 (m, 2H), 3.28 - 3.18 (m, 1H), 3.14 - 3.00 (m, 1H), 2.85 - 2.68 (m, 2H), 2.64 - 2.55 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 97: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 [(3S)-모르폴린-3-일]메탄올 염산염(58.6 mg, 0.38 mmol)의 혼합물에 수소화 나트륨(45.8 mg, 1.14 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(3 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(200.0 mg, 0.19 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 60°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화 암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(95:5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(130 mg, 0.12 mmol, 60.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1129.4 [M+H]+.
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(3 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.3 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(130 mg, 0.12 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Shield RP18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 29% B에서 49% B로, 49% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(15.3 mg, 0.02 mmol, 13.3% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 649.3 [M+H]+.
실시예 97: 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.96 (dd, J = 5.1, 1.6 Hz, 1H), 7.75 (d, 1H), 6.78 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 6.50 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.51 - 4.32 (m, 3H), 4.32 - 4.18 (m, 1H), 3.95 (dd, J = 11.3, 3.1 Hz, 1H), 3.88 - 3.71 (m, 1H), 3.71 - 3.61 (m, 1H), 3.58 - 3.41 (m, 3H), 3.29 - 3.20 (m, 1H), 2.95 - 2.87 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 1.65 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 98a 및 98b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((2R,6R)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((2R,6S)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-2-알릴-4-플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트
테트라히드로퓨란(20 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-4-플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(20.0 g, 80.89 mmol)의 용액에 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(161.77 mL, 161.77 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고 -78°C에서 3분 동안 교반한 다음, 알릴 브로마이드(14 mL, 161.77 mmol)를 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-60/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-2-알릴-4-플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(25 g, 73.96 mmol, 91.4% 수율)를 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 288.2 [M+H]+.
단계 2: 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-2-(3-브로모-2-히드록시프로필)-4-플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트
아세토니트릴(25 mL) 및 물(25 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4S)-2-알릴-4-플루오로-피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(5.00 g, 17.41 mmol)의 용액에 트리플루오로아세트산(198.5 mg, 1.74 mmol) 및 N-브로모석신이미드(6.20 g, 35.83 mmol)를 0°C에서 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 PH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-60/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-2-(3-브로모-2-히드록시프로필)-4-플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(900 mg, 2.34 mmol, 13% 수율)를 적색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 384.1/386.1.
단계 3: 메틸 (2S,4R)-2-(3-브로모-2-히드록시프로필)-4-플루오로피롤리딘-2-카르복실레이트
아세토니트릴(40 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 (2S,4R)-2-(3-브로모-2-히드록시프로필)-4-플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(3.80 g, 9.89 mmol) 및 디옥산(8 mL, 32 mmol) 중 4 M 염산의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 조 물질을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS (ESI, m/z): 284.0 [M+H]+.
단계 4: 메틸 (2R,7aS)-2-플루오로-6-히드록시테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트
아세토니트릴(30 mL) 중 메틸 (2S,4R)-2-(3-브로모-2-히드록시프로필)-4-플루오로피롤리딘-2-카르복실레이트(2.80 g, 9.85 mmol) 및 탄산 칼륨(4.09 g, 29.57 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 고체를 여과하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(90:10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 (2R,7aS)-2-플루오로-6-히드록시테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(827 mg,4.07 mmol, 41.3% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):204.1 [M+H]+.
단계 5: 메틸 (2R)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트
디클로로메탄(10 mL) 중 메틸 (2R,7aS)-2-플루오로-6-히드록시테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(700.0 mg, 3.44 mmol)의 혼합물에 디에틸아미노황 삼불화물(1.66 g, 10.33 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 메탄올로 켄칭하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(97:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 (2R)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(300 mg,1.46 mmol, 42.4% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):206.1 [M+H]+.
단계 6: ((2R)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 메틸 메틸 (2R)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-카르복실레이트(300.0 mg, 1.46 mmol)의 혼합물에 리튬알루미늄 수소화물(150.0 mg, 3.95 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하였다. 고체를 여과하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 조 물질을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS (ESI, m/z):178.1 [M+H]+.
단계 7: (6R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((2R)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 ((2R)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(192.6 mg, 1.09 mmol)의 혼합물에 수소화 나트륨(67.37mg, 1.68 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(2 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(380.0 mg, 0.36 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(96:4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (6R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((2R)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(270 mg, 0.23 mmol, 62.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):1189.45 [M+H]+.
단계 8: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((2R,6R)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((2R,6S)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(3 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.3 mL) 중 (6R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((2R)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(270.0 mg, 0.23 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키네텍스(Kinetex) EVO 분취용 C18, 30*150, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 25 mL/분; 구배: 10분 내 31% B에서 53% B로, 53% B; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 12.08로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((2R,6R)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(27.7 mg, 0.04 mmol, 17.2% 수율) 및 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((2R,6S)-2,6-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(5.3 mg, 0.007 mmol, 3.3% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 98a: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4) δ 7.97 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.80 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.69 - 6.52 (m, 2H), 5.41 (dt, J = 53.3, 3.8 Hz, 2H), 4.48 - 4.39 (m, 3H), 4.30 - 4.28 (m, 1H), 3.83 - 3.61 (m, 1H), 3.58 - 3.39 (m, 3H), 3.12 - 2.83 (m, 2H), 2.78 - 2.52 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.20 - 1.92 (m, 2H), 1.67 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LCMS (ESI, m/z):709.2 [M+H]+.
실시예 98b: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4) δ 7.97 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.86 - 7.69 (m, 1H), 6.78 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.54 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.49 - 5.19 (m, 2H), 4.56 - 4.39 (m, 3H), 4.36 - 4.29 (m, 1H), 3.78 - 3.63 (m, 1H), 3.52 - 3.47 (m, 2H), 3.38 - 3.31 (m, 1H), 3.29 - 3.17 (m, 2H), 2.60 - 2.12 (m, 7H), 1.67 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LCMS (ESI, m/z):709.2 [M+H]+.
실시예 99a 및 99b: 6-((R)-2-(((6S,8S)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-8-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-2-(((6R,8R)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-8-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: ((2S,4S)-아제티딘-2,4-디일)디메탄올 2,2,2-트리플루오로아세트알데히드(trans 혼합물)
디클로로메탄(10 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (2S,4S)-2,4-비스(히드록시메틸)아제티딘-1-카르복실레이트(700.0 mg, 3.22 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS (ESI, m/z): 118.1 [M+H]+.
단계 2: (6S,8S)-8-(히드록시메틸)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-2-온(trans 혼합물)
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 ((2S,4S)-아제티딘-2,4-디일)디메탄올 2,2,2-트리플루오로아세트알데히드(trans 혼합물)(380.0 mg, 3.25 mmol)의 혼합물에 칼륨 트리메틸실란올레이트(1.69 g, 13.17 mmol) 및 2-클로로아세틸 클로라이드(1.09 mg, 9.70 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(95:5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (6S,8S)-8-(히드록시메틸)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-2-온(trans 혼합물)(250 mg, 1.59 mmol, 49% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 158.1 [M+H]+.
단계 3: (6S,8S)-8-((((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-2-온(trans 혼합물)
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 (6S,8S)-8-(히드록시메틸)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-2-온(trans 혼합물)(195 mg, 1.24 mmol)의 혼합물에 수소화 나트륨(130.0 mg, 3.25 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(1 mL) 중 6-[13-[(1R)-1-[2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-3-피리딜]에틸]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-7-일]-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(650.0 mg, 0.62 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(96:4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (6S,8S)-8-((((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-2-온(trans 혼합물)(690 mg, 0.59 mmol, 95.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1169.4 [M+H]+.
단계 4: 6-((R)-2-(((6S,8S)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-8-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(trans 혼합물)
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 (6S,8S)-8-((((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-2-온(trans 혼합물)(680.0 mg, 0.58 mmol)의 혼합물에 디이소부틸알루미늄 하이드라이드(1.74 mL, 1.74 mmol, 톨루엔 중 1 M)를 첨가하고, 혼합물을 -20°C에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하였다. 고체를 여과하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(96:4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-((R)-2-(((6S,8S)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-8-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(trans 혼합물)(210 mg, 0.18 mmol, 31.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):1155.4 [M+H]+.
단계 5: 6-((R)-2-(((6S,8S)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-8-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-2-(((6R,8R)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-8-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 6-((R)-2-(((6S,8S)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-8-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(trans 혼합물)(270.0 mg, 0.23 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH 플루오로 페닐, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 35% B에서 60% B로, 60% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 7.22로 정제하였다. 생성물을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 럭스(Lux) 5 um 셀룰로스-4, 3*25 cm, 5 μm; 이동상 A: CO2, 이동상 B: MEOH(0.1% 2 M NH3-MEOH); 유량: 100 mL/분; 구배: 등용매 55% B; 컬럼 온도(℃): 35; 배압(바): 100; 파장: 220 nm; RT1(분): 6.52; RT2(분): 8.07; 샘플 용매: MEOH(0.1% 2 M NH3-MEOH); 주입 용량: 2.5 mL; 실행 수: 10으로 정제하여 6-((R)-2-(((6S,8S)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-8-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(22.4 mg, 0.03 mmol, 14.2% 수율) 및 6-((R)-2-(((6R,8R)-4-옥사-1-아자비시클로[4.2.0]옥탄-8-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(21.5 mg, 0.03 mmol, 13.6% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 99a: LCMS (ESI, m/z):675.2 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.98 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.80 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.59 - 6.45 (m, 1H), 4.64 - 4.39 (m, 4H), 4.39 - 4.22 (m, 1H), 4.05 - 3.91 (m, 1H), 3.91 - 3.78 (m, 2H), 3.78 - 3.59 (m, 3H), 3.59 - 3.47 (m, 1H), 3.12 - 2.77 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.37 - 2.21 (m, 1H), 1.93 - 1.80 (m, 1H), 1.68 (d, J = 6.9 Hz, 3H). 키랄 HPLC: 컬럼: 럭스 3 um 셀룰로즈-4, 4.6*50 mm, 3 um; MeOH(0.1%DEA); 유량: 4 mL/분; 체류 시간:0.962 (더 빠른 피크).
실시예 99b: LCMS (ESI, m/z):675.2 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.98 (dd, J = 5.0, 1.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.80 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.53 (q, 1H), 4.64 - 4.36 (m, 4H), 4.36 - 4.26 (m, 1H), 4.02 - 3.79 (m, 3H), 3.79 - 3.60 (m, 3H), 3.60 - 3.45 (m, 1H), 3.15 - 2.76 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.39 - 2.23 (m, 1H), 2.00 - 1.81 (m, 1H), 1.68 (d, J = 6.9 Hz, 3H). 키랄 HPLC: 컬럼: 럭스 3 um 셀룰로즈-4, 4.6*50 mm, 3 um; MeOH(0.1%DEA); 유량: 4 mL/분; 체류 시간:1.424 (더 느린 피크).
실시예 100a 및 100b: 4-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-아민 및 4-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (4-브로모벤조[d]티아졸-2-일)카바메이트
디클로로메탄(50 mL) 중 4-브로모-1,3-벤조티아졸-2-아민(4.90 g, 21.39 mmol), 디-tert-부틸 디카보네이트(9.33 g, 42.78 mmol) 및 4-디메틸아미노피리딘(5.22 g, 42.78 mmol)의 혼합물을 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 물로 희석하고 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(3:7)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (4-브로모벤조[d]티아졸-2-일)카바메이트(4.13 g, 12.56 mmol, 58.7% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 328.9[M+H]+
단계 2: (2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)벤조[d]티아졸-4-일)보론산
질소하에서, 1,4-디옥산(10 mL) 중 tert-부틸 (4-브로모벤조[d]티아졸-2-일)카바메이트(1.00 g, 3.04 mmol), 비스(네오펜틸글리콜레이토)디보론(6.86 g, 30.38 mmol), 아세트산 칼륨(894.3 mg, 9.11 mmol) 및 XPhos Pd G2(477.5 mg, 0.61 mmol)의 혼합물을 80°C에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 고체를 여과하고 디클로로메탄으로 세척하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 (2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)벤조[d]티아졸-4-일)보론산(425 mg, 1.44 mmol, 47.6% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 295.1 [M+H]+
단계 3: tert-부틸 (4-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(8 mL) 및 물(1.6 mL) 중 3-[(1R)-1-(7-브로모-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일)에틸]-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]피리딘-2-아민(826.0 mg, 1.16 mmol), (2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)벤조[d]티아졸-4-일)보론산(442.7 mg, 1.51 mmol), 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 디클로로메탄 착물(93.9 mg, 0.12 mmol) 및 인산칼륨 삼염기(737.4 mg, 3.47 mmol)의 혼합물을 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(81:19)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (4-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-일)카바메이트(686 mg, 0.78 mmol, 67.24% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 882.2 [M+H]+
단계 4: tert-부틸 (4-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 [(2R,8S)-2-플루오로-1,2,3,5,6,7-헥사히드로피롤리진-8-일]메탄올(486.9 mg, 3.06 mmol)의 용액에 나트륨 tert-부톡시드(293.9 mg, 3.06 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 (4-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-일)카바메이트(900.0 mg, 1.02 mmol)를 첨가하고 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(91:9)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (4-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-일)카바메이트(328 mg, 32.6 mmol, 32.01% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1005.3 [M+H]+
단계 5: 4-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-아민 및 4-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(2.7 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.27 mL) 중 tert-부틸 (4-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-일)카바메이트(280.0 mg, 0.28 mmol)의 혼합물을 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 37% B에서 62% B로, 62% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.6으로 정제하여 4-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-아민(17.4 mg, 0.03 mmol, 9.1% 수율) 및 4-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)벤조[d]티아졸-2-아민(12.9 mg, 0.02 mmol, 6.5% 수율)을 수득하였다.
실시예 100a：LC-MS: (ESI, m/z): 665.2 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.96 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.81 - 7.63 (m, 2H), 7.25 - 7.11 (m, 2H), 6.78 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.51 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.31 (d, J = 52.9 Hz, 1H), 4.51 - 4.40 (m, 1H), 4.36 - 4.20 (m, 3H), 3.78 - 3.64 (m, 1H), 3.58 - 3.44 (m, 1H), 3.40 - 3.34 (m, 1H), 3.27 - 3.16 (m, 2H), 3.09 - 2.96 (m, 1H), 2.36 - 2.15 (m, 3H), 2.06 - 1.86 (m,3H), 1.68 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 100b: LC-MS: (ESI, m/z): 665.3 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.97 (d, J = 5.1, 1.6 Hz, 1H), 7.81 - 7.65 (m, 2H), 7.26 - 7.13 (m, 2H), 6.78 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.53 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.32 (d, J = 53.7 Hz, 1H), 4.54 - 4.42 (m, 1H), 4.40 - 4.27 (m, 3H), 3.80 - 3.62 (m, 1H), 3.56 - 3.43 (m, 1H), 3.37 - 3.18 (m, 3H), 3.09 - 2.97 (m, 1H), 2.44 - 2.33 (m, 1H), 2.32 - 2.09 (m, 2H), 2.06 - 1.86 (m, 3H), 1.70 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 101: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로
단계 1: 1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에탄-1-온
디메틸 술폭시드(1 L) 중 1-(3-클로로피라진-2-일)에탄-1-온(160.00 g, 1021.90 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(533.98 mL, 3065.7 mmol)의 용액. 그런 다음, 4-메톡시벤질아민(280.37 g, 2043.80 mmol)을 첨가하고 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(0:10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(226.00 g, 852.03 mmol, 83.4% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 258.1 [M+H]+
단계 2: (R)-2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에탄-1-올 및 (S)-2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에탄-1-올
메틸 알코올(500 mL) 중 1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에탄-1-온(80.00 g, 310.93 mmol) 및 티타늄 테트라이소프로판올레이트(176.61 g, 621.87 mmol)의 용액에 2-아미노에탄올(56.3 mL, 932.8 mmol)을 첨가하고 80°C에서 6시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용액을 실온으로 냉각시켰다. 그런 다음, 수소화붕소 나트륨(35.26 g, 932.80 mmol)을 첨가하고 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 및 물로 희석하였다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:15)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(80.00 g, 261.93 mmol, 84.2% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. 생성물을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 럭스(Lux) 5 um 셀룰로스-4, 5*25 cm, 10 μm; 유량: 200 mL/분; 구배: 20분 내 10% B에서 10% B로; 파장: 220 nm로 분리하여 (R)-2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에탄-1-올(32.2 g, 10.66 mmol, 34.0% 수율)(원하는 이성질체) 및 (S)-2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에탄-1-올(35.0 g, 11.59 mmol, 37.2% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 303.2 [M+H]+
단계 3: 7-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((R)-1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 질소하에서, 디메틸 설폭사이드(2 mL) 중 (R)-2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에탄-1-올(136.3 mg, 0.45 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(1.2 mL, 1.2 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용액을 디메틸 설폭사이드(2.0 mL) 중 (R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(200.0 mg, 0.3 mmol)의 용액 내로 옮기고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-2,6-디클로로-8-플루오로-5-[2-[[(1R)-1-[3-[(4-메톡시페닐)메틸아미노]피라진-2-일]에틸]아미노]에톡시]-3H-퀴나졸린-4-온(600.0 mg, 조)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 947.8 [M+H]+
단계 4: 3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(10.0 mL) 중 7-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((R)-1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(800.0 mg, 조) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(447.5 mg, 3.47 mmol)의 용액에 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(330.4 mg, 1.3 mmol)를 첨가하고 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(4:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(388.0 mg, 0.42 mmol, 48.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 929.8 [M+H]+
단계 5: 3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(6.5 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(197.8 mg, 1.24 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(1.6 mL, 1.6 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 25°C에서 0.25시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(330.0 mg, 0.35 mmol)의 용액을 25°C에서 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(360.0 mg, 0.32 mmol, 90.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1052.5 [M+H]+
단계 4: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 및 트리플루오로아세트산(5.0 mL) 중 3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(360.0 mg, 0.34 mmol)의 용액을 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 용액을 진공하에 농축시키고, 디클로로메탄으로 희석하고 포화 탄산나트륨 용액으로 중화시켰다. 그런 다음, 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH C18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 33% B에서 59% B로, 59% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.18로 추가 정제하여 표제 화합물(45.1 mg, 0.06 mmol, 18.9% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 692.2 [M+H]+
실시예 101: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.47 (s, 1H), 6.40 (s, 2H), 6.27 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.27 (d, J = 54.4 Hz, 1H), 4.54 (dd, J = 11.5, 6.9 Hz, 1H), 4.35 (dd, J = 12.1, 6.1 Hz, 1H), 4.03 (s, 2H), 3.86 (dd, J = 15.5, 6.4 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 15.6, 6.6 Hz, 1H), 3.20 - 3.02 (m, 2H), 2.98 (s, 1H), 2.87 - 2.69 (m, 1H), 2.35 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 2.16 - 2.08 (m, 1H), 2.07 - 1.90 (m, 2H), 1.88 - 1.67 (m, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 102a & 102b & 102c & 102d : 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민, 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((6R,8aR)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아미나, 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민, 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
합성 경로:
단계 1: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((R)-1-(4-((4-메톡시벤질)아미노)피리미딘-5-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 질소하에서, 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(16 mL, 16 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 디메틸설폭사이드(35 mL) 중 (R)-2-((1-(4-((4-메톡시벤질)아미노)피리미딘-5-일)에틸)아미노)에탄-1-올(1.50 g, 4.96 mmol)의 용액에 첨가하고 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 디메틸 설폭시드(35 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(3.00 g, 4.51 mmol)의 용액에 첨가하였다. 그런 다음, 생성된 용액을 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하고 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 947.8 [M+H]+
단계 2: 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(300 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((R)-1-(4-((4-메톡시벤질)아미노)피리미딘-5-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(37.0 g, 23.42 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(16.32 mL, 93.69 mmol)의 용액에 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(11.9 g, 46.85 mmol)를 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 유기층을 물 및 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(1:2)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(10.00 g, 10.43 mmol, 44.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 929.8 [M+H]+
단계 3: 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
테트라히드로퓨란(2 mL) 중 ((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올(trans 혼합물)(45.0 mg, 0.29 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.4 mL, 0.4000 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(190.0 mg, 0.20 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(30분 내 5-95%)을 사용한 역상 용출로 정제하여 표제 화합물(90.0 mg, 0.086 mmol, 41.9% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1050.5 [M+H]+
단계 4: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민, 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((6R,8aR)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아미나, 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민, 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
트리플루오로아세트산(3 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.3 mL) 중 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(150.0 mg, 0.1400 mmol)의 용액을 25°C 에서 5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep C18 OBD 컬럼 30*100 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 25% B에서 45% B로, 45% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 10.66으로 정제하여 2개의 생성물을 수득하였다. 제1 생성물을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IG, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 21분 내 70% B에서 70% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 11.369; RT2(분): 17.511; 샘플 용매: ETOH: DCM=1: 1; 주입 용량: 1.6 mL; 실행 수: 5로 분리하여 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(13.9 mg, 0.0201 mmol, 14.1% 수율) 및 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(15.2 mg, 0.0220 mmol, 15.4% 수율)을 수득하였다. 제2 생성물을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IE, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: MtBE(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: MeOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 18분 내 8% B에서 8% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 10.961; RT2(분): 14.613; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 1 mL; 실행 수: 6으로 분리하여 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(20.0 mg, 0.029 mmol, 20.3% 수율) 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(18.7 mg, 0.027 mmol, 19% 수율)을 수득하였다.
실시예 102a: 11H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.38 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 6.98 - 6.60 (m, 4H), 6.48 (s, 1H), 6.14 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.52 - 4.44 (m, 1H), 4.46 - 4.34 (m, 2H), 4.14 - 4.12 (m, 1H), 3.80 - 3.62 (m, 1H), 3.61 - 3.34 (m, 5H), 3.13 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 3.00 - 2.79 (m, 3H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.13 - 2.00 (m, 1H), 1.76 - 1.61 (m, 1H), 1.67 - 1.48 (m, 4H), 1.35 - 1.26 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 690.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep C18 OBD 컬럼 30*100 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 체류 시간: 10.66분(제1 피크).
실시예 102b: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.38 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 6.98 - 6.60 (m, 4H), 6.48 (s, 1H), 6.14 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.52 - 4.44 (m, 1H), 4.46 - 4.34 (m, 2H), 4.14 - 4.12 (m, 1H), 3.80 - 3.62 (m, 1H), 3.61 - 3.34 (m, 5H), 3.13 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 3.00 - 2.79 (m, 3H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.13 - 2.00 (m, 1H), 1.76 - 1.61 (m, 1H), 1.67 - 1.48 (m, 4H), 1.35 - 1.26 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 690.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep C18 OBD 컬럼 30*100 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 체류 시간: 10.66분(제2 피크).
실시예 102c: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.38 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 6.98 - 6.60 (m, 4H), 6.48 (s, 1H), 6.14 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.52 - 4.44 (m, 1H), 4.46 - 4.34 (m, 2H), 4.14 - 4.12 (m, 1H), 3.80 - 3.62 (m, 1H), 3.61 - 3.34 (m, 5H), 3.13 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 3.00 - 2.79 (m, 3H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.13 - 2.00 (m, 1H), 1.76 - 1.61 (m, 1H), 1.67 - 1.48 (m, 4H), 1.35 - 1.26 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 690.2 [M+H]+ 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IE-3, 4.6*50 mm 3 μm; 이동상 A: MtBE(0.1%DEA): MeOH=92: 8; 유량: 1 mL/분(제1 피크).
실시예 102d: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.38 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 6.98 - 6.60 (m, 4H), 6.48 (s, 1H), 6.14 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.52 - 4.44 (m, 1H), 4.46 - 4.34 (m, 2H), 4.14 - 4.12 (m, 1H), 3.80 - 3.62 (m, 1H), 3.61 - 3.34 (m, 5H), 3.13 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 3.00 - 2.79 (m, 3H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.13 - 2.00 (m, 1H), 1.76 - 1.61 (m, 1H), 1.67 - 1.48 (m, 4H), 1.35 - 1.26 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 690.2 [M+H]+ 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IE-3, 4.6*50 mm 3 μm; 이동상 A: MtBE(0.1%DEA): MeOH=92: 8; 유량: 1 mL/분(제2 피크).
실시예 103a 및 103b: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
합성 경로:
단계 1: (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메탄올
아세토니트릴(8 mL) 중 l-프롤리놀(0.2 mL, 1.98 mmol) 및 탄산 칼륨(820.0 mg, 5.93 mmol)의 용액을 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 2,2-디플루오로에틸 트리플루오로메탄설포네이트(508.0 mg, 2.37 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고 물로 세척하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메탄올(847.0 mg, 5.13 mmol, 25.9% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 166.2 [M+H]+
단계 2: 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
테트라히드로퓨란(6 mL) 중 (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일]메탄올(320.0 mg, 1.94 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(129.0 mg, 3.23 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(600.0 mg, 0.65 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고 물로 세척하였다. 유기층을 염수로 세척하고 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축시켜 표제 화합물(669.0 mg, 조)을 갈색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1058.6 [M+H]+
단계 3: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(600.0 mg, 0.57 mmol)의 용액을 25°C에서 6시간 동안 교반하였다. 종료 후, 혼합물을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액에 의해 pH=7로 조정하고, 염수로 세척하였다. 유기상을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공 하에서 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH C18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(0.1% FA), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 6% B에서 36% B로, 36% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8로 정제하여 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(77.6 mg, 0.11 mmol, 19.4% 수율) 및 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(79.5 mg, 0.11 mmol, 19.6% 수율)을 수득하였다.
실시예 103a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.38 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.75 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.31 - 5.84 (m, 2H), 4.46 (dd, J = 11.3, 6.6 Hz, 1H), 4.40 - 4.23 (m, 2H), 4.12 (dd, J = 10.8, 6.9 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 15.4, 6.7 Hz, 1H), 3.56 - 3.38 (m, 1H), 3.37 - 3.19 (m, 1H), 3.17 - 2.95 (m, 2H), 2.93 - 2.69 (m, 1H), 2.47 - 2.37 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.01 - 1.84 (m, 1H), 1.82 - 1.62 (m, 3H), 1.60 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 698.3 [M+H]+
실시예 103b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.37 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 6.81 (s, 4H), 6.48 (s, 1H), 6.34 - 5.82 (m, 2H), 4.55 (dd, J = 12.2, 6.5 Hz, 1H), 4.43 - 4.20 (m, 2H), 4.13 (dd, J = 10.8, 7.0 Hz, 1H), 3.77 (dd, J = 15.2, 6.2 Hz, 1H), 3.45 (dd, J = 16.0, 7.0 Hz, 1H), 3.29 - 3.16 (m, 1H), 3.16 - 2.95 (m, 2H), 2.92 - 2.63 (m, 1H), 2.47 - 2.39 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.02 - 1.82 (m, 1H), 1.82 - 1.68 (m, 2H), 1.61 (d, J = 6.8 Hz, 4H). LC-MS: (ESI, m/z): 698.2 [M+H]+
실시예 104a 및 104b: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로
단계 1: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((R)-1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 질소하에서, 디메틸 술폭시드(12.0 mL) 중 (R)-2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에탄-1-올(654.3 mg, 2.16 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(7.2 mL, 7.2 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 25°C에서 15시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 디메틸 술폭시드(12.0 mL) 중 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(1.20 g, 1.80 mmol)을 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 표제 화합물(1.6 g, 조)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 947.3 [M+H]+
단계 2: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(20.0 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-(((R)-1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(1.60 g, 조) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(872.7 mg, 6.77 mmol)의 용액에 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(644.4 mg, 2.54 mmol)를 첨가하고 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(9:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(248.0 mg, 0.27 mmol, 15.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 929.3 [M+H]+
단계 3: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올(83.9 mg, 0.53 mmol)의 용액에 테트라히드로퓨란(2.0 mL) 중의 수소화 나트륨(42.7 mg, 1.07 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(2.0 mL) 중 N-[(4-메톡시페닐)메틸]-3-[rac-(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]피라진-2-아민(248.0 mg, 0.27 mmol)의 용액을 25°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축시켜 표제 화합물(404.0 mg, 조)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1050.4 [M+H]+
단계 4: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
트리플루오로아세트산(5.0 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(126.0 mg, 0.12 mmol)의 용액을 25°C 에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용액을 진공하에 농축시키고, 에틸 아세테이트로 희석하고 탄산나트륨 용액으로 중화시켰다. 그런 다음, 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH C18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/min; 기울기: 9분 내 33% B에서 59% B로, 59% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.18로 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(8.3 mg, 0.01 mmol, 9.7% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(7.3 mg, 0.01 mmol, 8.9% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다.
실시예 104a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.47 (s, 1H), 6.36 (s, 2H), 6.26 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.54 (dd, J = 12.0, 6.6 Hz, 1H), 4.46 - 4.24 (m, 2H), 4.14 (dd, J = 10.9, 5.5 Hz, 1H), 3.86 (dd, J = 15.7, 6.5 Hz, 1H), 3.71 - 3.34 (m, 5H), 3.12 (t, J = 10.3 Hz, 1H), 3.01 - 2.75 (m, 3H), 2.36 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.17 - 1.95 (m, 1H), 1.85 - 1.67 (m, 1H), 1.65 - 1.46 (m, 4H), 1.42 - 1.18 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 690.2 [M+H]+
실시예 104b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.93 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.46 (d, J = 10.7 Hz, 3H), 6.23 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.71 - 4.54 (m, 1H), 4.50 - 4.11 (m, 3H), 4.10 - 3.85 (m, 2H), 3.83 - 3.41 (m, 5H), 3.21 - 2.75 (m, 3H), 2.36 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.29 - 2.01 (m, 1H),1.99 - 1.72 (m, 2H), 1.59 (d, J = 6.8 Hz, 4H). LC-MS: (ESI, m/z): 690.2 [M+H]+
실시예 105a 및 105b: 3-((R)-1-((S)-8-클로로-10-플루오로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민 및 3-((R)-1-((R)-8-클로로-10-플루오로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 메틸 2-아미노-4-브로모-3,6-디플루오로벤조에이트
에틸 아세테이트(13.5 mL) 및 메틸 알코올(13.5 mL) 중 2-아미노-4-브로모-3,6-디플루오로-벤조산(2.72 g, 10.78 mmol)의 용액에 (트리메틸실릴)디아조메탄(10.8 mL, 21.6 mmol, n-헥산 중 2 mol/L)을 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하여 표제 화합물(2.8 g, 조)을 황색 고체로서 수득하였다. 조 물질을 추가의 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 266.0 [M+H]+
단계 2: 메틸 2-아미노-3,6-디플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트
질소하에서, 1,4-디옥산(72 mL) 중 메틸 2-아미노-4-브로모-3,6-디플루오로-벤조에이트(2.8 g, 조), 비스(피나콜라토)디보론(4.11 g, 16.2 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(787.8 mg, 1.08 mmol) 및 아세트산 칼륨(3.17 g, 32.34 mmol)의 용액을 100°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 실온으로 냉각시키고 여과하였다. 여과 후, 여액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하고, 석유 에테르/에틸 아세테이트(5:1)로 용출하여 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 10 mL 석유 에테르에 용해시키고, 10분 동안 교반하였다. 여과 후, 고체를 수집하여(3회 반복) 2.01 g(59% 수율)의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 314.1 [M+H]+.
단계 3: 메틸 2-아미노-3,6-디플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)벤조에이트
질소하에서, 아세토니트릴(20 mL) 및 물(4 mL) 중 메틸 2-아미노-3,6-디플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트(1.64 g, 5.24 mmol), 7-브로모-6-플루오로-1-메틸-인다졸(1.44 g, 6.3 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(368.2 mg, 0.520 mmol) 및 불화칼륨(913 mg, 15.7 mmol)의 용액을 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하고, 석유 에테르/에틸 아세테이트(2:1)로 용출하여 1.25 g(71% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 336.1 [M+H]+.
단계 4: 메틸 2-아미노-5-클로로-3,6-디플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)벤조에이트
질소하에서, N,N-디메틸포름아미드(12 mL) 중 메틸 2-아미노-3,6-디플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-인다졸-7-일)벤조에이트(1.21 g, 3.60 mmol) 및 N-클로로숙신이미드(574 mg, 4.32 mmol)의 용액을 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 티오황산 나트륨(수성)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(100 mL)로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하고, 석유 에테르/에틸 아세테이트(2:1)로 용출하여 1.1 g(83% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 370.0 [M+H]+.
단계 5: 2-아미노-5-클로로-3,6-디플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)벤조산
테트라히드로퓨란(12 mL) 중 메틸 2-아미노-5-클로로-3,6-디플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-인다졸-7-일)벤조에이트(1.10 g, 3.08 mmol)의 용액에 물(4 mL) 중의 수산화 리튬(212 mg, 9.23 mmol)을 첨가하고 25℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 염산(1 M)을 사용하여 pH 5~6으로 조정하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하여 1.00 g(조)의 표제 화합물을 수득하였다. 조 물질을 추가의 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 356.0 [M+H]+
단계 6: 2-아미노-5-클로로-3,6-디플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)벤즈아미드
N,N-디메틸포름아미드(15 mL) 중 2-아미노-5-클로로-3,6-디플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)벤조산(1.00 g, 조), 염화 암모늄(830.0 mg, 15.4 mmol), 2-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(1.75 g, 4.61 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(2.78 g, 21.53 mmol)의 용액을 25°C에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고 염화 암모늄 수용액으로 세척하였다. 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하고, 디클로로메탄/메탄올(20:1)로 용출하여 950 mg(87% 수율)의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 355.0.
단계 7: 2,6-디클로로-5,8-디플루오로-7-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)퀴나졸린-4(3H)-온
1,4-디옥산(20 mL) 중 2-아미노-5-클로로-3,6-디플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)벤즈아미드(1.01 g, 2.85 mmol)의 용액에 티오포스겐(0.65 mL, 8.55 mmol)을 적가하고 25°C에서 1시간 및 105°C에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하고, 디클로로메탄/메탄올(20:1)로 용출하여 표제 화합물(1.27 g, 조, 76% 순도)을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 399.0 [M+H]+
단계 8: 5-(2-(((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-2,6-디클로로-8-플루오로-7-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)퀴나졸린-4-올
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 테트라히드로퓨란(3 mL) 중 (R)-2-((1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올(91.00 mg, 0.50 mmol, 1.00 당량)의 용액에 수소화 나트륨(120.0 mg, 3.0 mmol, 60% 순도)을 0°C에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용액을 테트라히드로퓨란(3 mL) 중의 2,6-디클로로-5,8-디플루오로-7-(6-플루오로-1-메틸인다졸-7-일)퀴나졸린-4-올(200.41 mg, 0.502 mmol, 1.00 당량) 내로 옮기고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고 디클로로메탄으로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(73.0 mg, 25.94% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 560.1 [M+H]+
단계 9: 3-((1R)-1-(2,8-디클로로-10-플루오로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 디클로로메탄(3 mL) 중 5-(2-(((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-2,6-디클로로-8-플루오로-7-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)퀴나졸린-4-올(90.0 mg, 0.16 mmol), 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(43.1 mg, 0.17 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(415.14 mg, 3.22 mmol)의 용액을 실온에서 6시간 동안 질소 대기하에서 교반하였다. 종료 후, 생성된 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(20:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(80.0 mg, 0.15mmol, 92% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 542.1 [M+H]+
단계 10: tert-부틸 N-tert-부톡시카르보닐-N-[3-[(1R)-1-[3,8-디클로로-6-플루오로-7-(6-플루오로-1-메틸-인다졸-7-일)-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]카바메이트
디클로로메탄(5 mL) 중 3-((1R)-1-(2,8-디클로로-10-플루오로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민(90.0 mg, 0.17 mmol), 트리에틸아민(167.9 mg, 1.66 mmol), 4-디메틸아미노피리딘(12.2 mg, 0.10 mmol) 및 디-tert-부틸 디카보네이트(543.2 mg, 2.49 mmol)의 용액을 실온에서 1일 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 혼합물을 감압하에 농축하였다. 생성된 혼합물을 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(70.0 mg, 0.094 mmol, 56.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 742.6 [M+H]+
단계 11: tert-부틸 (3-((1R)-1-(8-클로로-10-플루오로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(19.3 mg, 0.121 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(12.8 mg, 0.32 mmol, 60% 순도)을 0°C에서 첨가하고, 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용액을 테트라히드로퓨란(2 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카르보닐-N-[3-[(1R)-1-[3,8-디클로로-6-플루오로-7-(6-플루오로-1-메틸-인다졸-7-일)-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]카바메이트(60.0 mg, 0.081 mmol)의 용액 내로 옮기고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 취합한 유기 추출물을 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(36.0 mg, 58.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 765.0 [M+H]+.
단계 12: 3-((R)-1-((S)-8-클로로-10-플루오로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민 및 3-((R)-1-((R)-8-클로로-10-플루오로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민
디클로로메탄(0.75 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(8-클로로-10-플루오로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(36.0 mg, 0.047 mmol, 1.00 당량) 및 트리플루오로아세트산(0.25 mL)의 용액을 10분 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 혼합물을 진공하에 농축하였다. 그런 다음, 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 탄산나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시키고, 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하는 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), B: ACN(7분 내 43%~73%)) 정제하였다. 더 빠른 피크는 2.4 mg(0.0036 moml, 7.7% 수율)의 3-((R)-1-((S)-8-클로로-10-플루오로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민이고, 더 느린 피크는 2.5 mg(0.0037 moml, 7.8% 수율)의 3-((R)-1-((R)-8-클로로-10-플루오로-9-(6-플루오로-1-메틸-1H-인다졸-7-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-아민이다. LC-MS: (ESI, m/z): 665.3 [M+H]+.
실시예 105a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.18 (s, 1H), 8.03 - 7.91 (m, 2H), 7.64 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.22 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.8 Hz, 1H), 6.30 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.72 (s, 2H), 5.28 (d, J = 54.3 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 12.1, 6.0 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 12.1, 6.7 Hz, 1H), 4.10 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 3.73 (dd, J = 15.9, 6.8 Hz, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.43 (dd, J = 15.8, 6.4 Hz, 1H), 3.20 - 3.02 (m, 2H), 2.99 (s, 1H), 2.91 - 2.76 (m, 1H), 2.21 - 2.09 (m, 1H), 2.09 - 1.91 (m, 2H), 1.91 - 1.67 (m, 3H), 1.59 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 105b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.18 (s, 1H), 8.03 - 7.91 (m, 2H), 7.64 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.22 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.8 Hz, 1H), 6.30 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.72 (s, 2H), 5.28 (d, J = 54.3 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 12.1, 6.0 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 12.1, 6.7 Hz, 1H), 4.10 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 3.73 (dd, J = 15.9, 6.8 Hz, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.43 (dd, J = 15.8, 6.4 Hz, 1H), 3.20 - 3.02 (m, 2H), 2.99 (s, 1H), 2.91 - 2.76 (m, 1H), 2.21 - 2.09 (m, 1H), 2.09 - 1.91 (m, 2H), 1.91 - 1.67 (m, 3H), 1.59 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 106: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(8 mL) 중 [(2S,4R)-4-플루오로-1-메틸-피롤리딘-2-일]메탄올(528.0 mg, 3.97 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(4.0 mL, 4.00 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(원하는 회전장애이성질체)(800.0 mg, 0.79 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(8:1)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(560.0 mg, 0.45 mmol, 56.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1005.4 [M+H]+.
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(540.0 mg, 0.54 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 33% B에서 48% B로, 48% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 9.25로 정제하여 표제 화합물(112.2 mg, 0.16 mmol, 30.5% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 665.3 [M+H]+.
실시예 106: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.72 - 6.59 (m, 1H), 6.46 (s, 1H), 6.23 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.68 (s, 2H), 5.18 (d, J = 56.1 Hz, 1H), 4.54 - 4.35 (m, 2H), 4.35 - 4.13 (m, 2H), 3.63 (dd, J = 15.7, 6.9 Hz, 1H), 3.50 - 3.35 (m, 2H), 3.04 - 2.83 (m, 1H), 2.60 - 2.50 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.24 - 1.77 (m, 2H), 1.55 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 107: (S)-6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (R)-6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)메틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 (S)-6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(60 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(6 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(67.0 g, 65.04 mmol)의 용액을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축시키고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 탄산나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 그리고 생성물을 역상으로 하기의 조건하에서: 물(0.1% 중탄산 암모늄) (A)/아세토니트릴 (B) 구배: 30분 내 5% B에서 42% B로 추가 정제하여 (R)-6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(20.4 g, 29.6 mmol, 45.5 % 수율) 및 (S)-6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(3.0 g, 4.34 mmol, 6.67% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z):691.4 [M+H]+.
실시예 107: 1H NMR (400 MHz, Methanol-d4, ppm) 7.95 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.77 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.63 - 6.57 (m, 1H), 6.53 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.37 (d, J = 53.6 Hz, 1H), 4.48 (dd, J = 12.3, 6.5 Hz, 1H), 4.39 - 4.24 (m, 3H), 3.73 (dd, J = 15.8, 7.2 Hz, 1H), 3.55 - 3.44 (m, 1H), 3.44 - 3.33 (m, 2H), 3.28 - 3.20 (m, 1H), 3.15 - 3.01 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.41 - 2.13 (m, 3H), 2.12 - 1.87 (m, 3H), 1.66 (d, J = 6.9 Hz, 3H)
실시예 108a 및 108b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
*?*
합성 경로
단계 1: 6-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, N,N-디메틸포름아미드(18 mL) 중 6-브로모-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(1.80 g, 7.50 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(0.9 g, 22.5 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 0°C에서 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 4-메톡시벤질클로라이드(2.93 g, 18.8 mmol)를 0°C에서 적가하고 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고, 물로 추출하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(5:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(3.50 g, 7.40 mmol, 98.7% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 481.1 [M+H] +.
단계 2: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(15 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-(7-브로모-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일)에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(500.0 mg, 0.74 mmol)의 용액에 이소프로필 마그네슘 클로라이드 리튬 클로라이드(1.15 mL, 1.49 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1.3 M)를 -78°C에서 첨가하고 -78°C에서 60분 동안 교반하였다. 그런 다음, 염화 아연(0.75 mL, 1.5 mmol, 2-MeTHF 중 1.0 M)을 -78°C에서 첨가하고, -78°C에서 5분 동안 교반하고, 40°C에서 30분 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 테트라히드로퓨란(15 mL) 중의 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(250.0 mg, 0.22 mmol), 6-브로모-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(480.0 mg, 0.97 mmol)을 첨가하고 80°C에서 35분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 염화나트륨으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(5:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(200.0 mg, 0.22 mmol, 30.07% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 894.2 [M+H] +.
단계 3: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(99.6 mg, 0.63 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.78 mL, 0.78 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용액을 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]카바메이트(140.0 mg, 0.16 mmol)의 용액으로 옮기고 25°C에서 40분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(80.0 mg, 0.08 mmol, 50.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1017.4 [M+H]+.
단계 4: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(5 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(70.0 mg, 0.07 mmol)의 용액을 60°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 탄산나트륨 용액으로 PH = 7.0으로 조정하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하여 60 mg의 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 41% B에서 62% B로, 62% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 9.22로 정제 및 분리하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(2.5 mg, 0.0037 mmol, 5.3% 수율) 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(4.2 mg, 0.006 mmol, 9.0 % 수율)을 수득하였다.
실시예 108a: 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.95 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 7.6, 1.7 Hz, 1H), 6.78 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.53 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.32 (d, J = 53.2 Hz, 1H), 4.54 - 4.40 (m, 1H), 4.35 - 4.17 (m, 3H), 3.73 (dd, J = 15.9, 7.3, 1.6 Hz, 1H), 3.51 (dd, J = 14.8, 5.8, 1.5 Hz, 1H), 3.28 - 3.19 (m, 2H), 3.08 - 2.98 (m, 1H), 2.45 - 2.30 (m, 1H), 2.28 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 2.26 - 2.11 (m, 2H), 2.07 - 1.83 (m, 3H), 1.66 (d, J = 7.0 Hz, 3H). LCMS (ESI, m/z): 677.2 [M+H]+.
실시예 108b: 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.95 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 7.6, 1.7 Hz, 1H), 6.78 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.53 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.32 (d, J = 53.2 Hz, 1H), 4.54 - 4.40 (m, 1H), 4.35 - 4.17 (m, 3H), 3.73 (dd, J = 15.9, 7.3, 1.6 Hz, 1H), 3.51 (dd, J = 14.8, 5.8, 1.5 Hz, 1H), 3.28 - 3.19 (m, 2H), 3.08 - 2.98 (m, 1H), 2.45 - 2.30 (m, 1H), 2.28 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 2.26 - 2.11 (m, 2H), 2.07 - 1.83 (m, 3H), 1.66 (d, J = 7.0 Hz, 3H). LCMS (ESI, m/z): 677.2 [M+H]+.
실시예 109: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메탄올
아세토니트릴(20 mL) 중 (S)-아제티딘-2-일메탄올 염산염(2.00 g, 22.96 mmol) 및 탄산 칼륨(9.50 g, 68.87 mmol)의 용액. 그런 다음, 2,2-디플루오로에틸 트리플루오로메탄설포네이트(5.41 g, 25.25 mmol)를 첨가하고, 30°C에서 밤새 교반하였다. 종료 후, 용매를 여과하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:20)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메탄올(550.0 mg, 3.2 mmol, 14.3% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 152.1 [M+H]+
단계 2: tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
테트라히드로퓨란(16 mL) 중 (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메탄올(469.2 mg, 3.1 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드[테트라히드로퓨란 중 1.0 M](3.5 mL, 3.5 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(원하는 회전장애이성질체)(783.0 mg, 0.7 mmol)를 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/디클로로메탄(1:6)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(485.0 mg, 0.4 mmol, 58% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1023.4 [M+H]+
단계 3: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(5 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(480.0 mg, 0.4 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 반응 혼합물을 탄산나트륨 수용액으로 pH=8로 조정하였다. 유기층을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 17% B에서 45% B로, 45% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.5로 정제하여 표제 화합물(260.0 mg, 0.3 mmol, 81.1% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 683.3 [M+H]+
실시예 109: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 7.4, 1.7 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.23 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.96 (tdd, J = 56.1, 5.2, 3.3 Hz, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.49 - 4.18 (m, 4H), 3.71 - 3.56 (m, 2H), 3.42 - 3.35 (m, 2H), 3.17 - 2.95 (m, 2H), 2.85 - 2.67 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.13 - 1.99 (m, 2H), 1.56 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
실시예 110a 및 110b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-메톡시-2-메틸프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-메톡시-2-메틸프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로:
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-메톡시-2-메틸프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(0.5 mL) 중 2-메톡시-2-메틸프로판-1-올(37.0 mg, 0.36 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.55 mL, 0.55 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 0°C에서 첨가하고 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(250.0 mg, 0.28 mmol)를 첨가하고 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고 물로 세척하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(2:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(211.0 mg, 0.22 mmol, 78.6% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 976.4 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-메톡시-2-메틸프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-메톡시-2-메틸프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
디클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-메톡시-2-메틸프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(200.0 mg, 0.20 mmol) 및 트리플루오로아세트산(9 mL, 116.82 mmol)의 용액을 55°C에서 16시간 동안 교반하였다. 종료 후, 혼합물을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액에 의해 pH=7로 조정하고, 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH C18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(0.1% FA), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 23% B에서 39% B로, 39% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 7로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-메톡시-2-메틸프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(22.0 mg, 0.035 mmol, 16.9% 수율) 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-메톡시-2-메틸프로폭시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(8.3 mg, 0.013 mmol, 6.4% 수율)을 수득하였다.
실시예 110a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 5.1, 1.6 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.71 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.23 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.05 (s, 2H), 4.45 (dd, J = 11.8, 6.1 Hz, 1H), 4.36 - 4.25 (m, 1H), 4.25 (s, 2H), 3.68 (dd, J = 15.6, 6.8 Hz, 1H), 3.51 - 3.36 (m, 1H), 3.16 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.21 (d, J = 3.6 Hz, 6H). LC-MS: (ESI, m/z): 636.2 [M+H]+
실시예 110b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.65 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.27 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.77 (s, 2H), 4.51 (dd, J = 12.0, 6.5 Hz, 1H), 4.38 - 4.18 (m, 3H), 3.71 (dd, J = 15.5, 6.4 Hz, 1H), 3.44 - 3.35 (m, 1H), 3.16 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.21 (d, J = 3.4 Hz, 6H). LC-MS: (ESI, m/z): 636.2 [M+H]+
실시예 111a 및 111b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: ((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메탄올
질소하에서, 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 에틸 (1R,7a'S)-2,2-디플루오로-5'-옥소디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-카르복실레이트(400.0 mg, 1.54 mmol)의 용액에 수소화 알루미늄 리튬(211.1 mg, 5.55 mmol)을 0°C에서 첨가하고, 65°C에서 40분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하고, 테트라히드로퓨란으로 희석하고 여과하였다. 그런 다음, 필터를 진공하에 농축시켜 조 생성물(300 mg, 조)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 204.1 [M+H] +.
단계 2: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(15 mL) 중 ((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메탄올 (201.3 mg, 0.99 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(1.16 ml, 1.16 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 실온에서 20분 동안 첨가하였다. 그런 다음, 반응 용액을 테트라히드로퓨란(15 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(300.00 mg, 0.33 mmol)의 용액 내에 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(150.0 mg, 0.14 mmol, 38.6% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1075.4 [M+H]+.
단계 3: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(10 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(150.0 mg, 0.14 mmol)의 용액을 50°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 41% B에서 63% B로, 63% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(26.3 mg, 0.035 mmol, 25.3% 수율) 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(12.2 mg, 0.016 mmol, 11.8% 수율)을 수득하였다.
실시예 111a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.25 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.43 (dd, J = 11.9, 6.0 Hz, 1H), 4.32 - 4.07 (m, 3H), 3.64 (dd, J = 15.6, 6.9 Hz, 1H), 3.39 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 3.17 - 2.95 (m, 2H), 2.71 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.58 - 2.52 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.14 - 1.95 (m, 2H), 1.90 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 1.86 - 1.67 (m, 2H), 1.67 - 1.39 (m, 6H). LCMS (ESI, m/z): 735.2 [M+H]+.
실시예 111b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.65 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.28 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.80 (s, 2H), 4.50 (dd, J = 12.2, 6.6 Hz, 1H), 4.38 - 4.28 (m, 1H), 4.27 - 4.07 (m, 2H), 3.70 (dd, J = 15.6, 6.4 Hz, 1H), 3.27 (d, J = 20.9 Hz, 1H), 3.14 - 2.94 (m, 2H), 2.71 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.60 - 2.51 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.12 - 1.94 (m, 2H), 1.89 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 1.86 - 1.69 (m, 2H), 1.68 - 1.35 (m, 6H). LCMS (ESI, m/z): 735.2 [M+H]+.
실시예 112: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(30 mL) 중 (S)-(4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일]메탄올(1.90 g, 12.6 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(1.26 g, 31.5 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용액을 테트라히드로퓨란(100 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(11.00 g, 10.5 mmol)의 용액 내로 옮기고 25°C에서 6시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고 진공하에 농축하여 테트로히드로퓨란을 제거하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:8)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(11.00 g, 9.4 mmol, 90.1% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1163.1 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(80 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(8 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(11.00 g, 9.4 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액으로 PH = 7으로 조정하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 역상 C18 컬럼 상의 플래시 크로마토그래피로 물(0.1% 중탄산 암모늄)(A)/아세토니트릴(B) 구배: 30분 내 5% B에서 42% B로 정제하여 표제 화합물(3.41 g, 4.90 mmol, 52.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 683.1 [M+H]+
실시예 112: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.57 - 4.18 (m, 4H), 3.77 - 3.54 (m, 1H), 3.44 - 3.34 (m, 2H), 3.04 - 2.87 (m, 1H), 2.76 - 2.55 (m, 2H), 2.41 - 2.30 (m, 6H), 2.29 - 1.98 (m, 1H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 113a 및 113b: 1-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)이소퀴놀린-3-아민 및 1-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)이소퀴놀린-3-아민
합성 경로
단계 1: 1-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)이소퀴놀린-3-아민
N,N-디메틸포름아미드(6 mL) 중 1-브로모이소퀴놀린-3-아민(500.0 mg, 2.2 mmol) 및 칼륨 tert-부톡시드(754.5 mg, 6.7 mmol)의 용액을 25°C에서 5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 4-메톡시벤질 클로라이드(0.7 mL, 5.6 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 물로 다시 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/석유 에테르(0:10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(300.0 mg, 0.6 mmol, 28.9% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 463.1 [M+H]+.
단계 2: tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-1-이소퀴놀릴]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-(7-브로모-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일)에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(200.0 mg, 0.3 mmol)의 용액에 이소프로필마그네슘 클로라이드 염화리튬 착물(0.4 mL, 0.5 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1.3 M)을 첨가하고 -78°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 염화 아연(0.3 mL, 0.6 mmol, 테트라히드로퓨란 중 2 M)을 -78°C에서 첨가하고 45°C에서 40분 동안 교반하였다. 그런 다음, 1-브로모-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]이소퀴놀린-3-아민(151.4 mg, 0.3 mmol) 및 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(102.9 mg, 0.1 mmol)을 첨가하고 80°C에서 15분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:8)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(200.0 mg, 0.2 mmol, 76.8% 수율)을 유색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 976.3 [M+H]+
단계 3: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(3-(비스(4-메톡시벤질)아미노)이소퀴놀린-1-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(3 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(108.9 mg, 0.7 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.9 mL, 0.9 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 테트라히드로퓨란(3 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-1-이소퀴놀린]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]카바메이트(200.0 mg, 0.2 mmol)의 혼합물에 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:20)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(100.0 mg, 0.1 mmol, 43.9% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):1098.9 [M+H]+.
단계 4:
1-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)이소퀴놀린-3-아민 및 1-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)이소퀴놀린-3-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.1 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(3-(비스(4-메톡시벤질)아미노)이소퀴놀린-1-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.1 mmol)의 용액을 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하고, 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액으로 PH = 7으로 조정하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 역상 C18 컬럼 상의 플래시 크로마토그래피로 물(0.1% 중탄산 암모늄)(A)/아세토니트릴(B) 구배: 30분 내 5% B에서 60% B로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep C18 OBD 컬럼 30*100 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 35% B에서 55% B로, 55% B; 파장: 254/220) 분리하여 1-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)이소퀴놀린-3-아민(15.7 mg, 0.02 mmol, 23.8% 수율) 및 1-((S)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)이소퀴놀린-3-아민(15.5 mg, 0.02 mmol, 23.5% 수율)을 수득하였다.
실시예 113a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.69 - 7.57 (m, 2H), 7.46 (dd, J = 8.3, 6.6, Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.10 - 7.00 (m, 1H), 6.74 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 6.67 (dd, J = 7.4, 4.9 Hz, 1H), 6.30 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 6.11 (s, 2H), 5.83 (s, 2H), 5.28 (d, J = 54.4 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 12.0, 6.5 Hz, 1H), 4.31 (dd, J = 12.0, 6.5 Hz, 1H), 4.09 (s, 2H), 3.75 (dd, J = 15.6, 6.6 Hz, 1H), 3.53 - 3.37 (m, 1H), 3.24 - 3.00 (m, 2H), 2.99 (s, 1H), 2.88 - 2.69 (m, 1H), 2.26 - 2.11 (m, 1H), 2.10 - 1.90 (m, 2H), 1.90 - 1.70 (m, 3H), 1.60 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 659.4 [M+H]+.
실시예 113b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.69 - 7.57 (m, 2H), 7.46 (dd, J = 8.3, 6.6, Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.10 - 7.00 (m, 1H), 6.74 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 6.67 (dd, J = 7.4, 4.9 Hz, 1H), 6.30 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 6.10 (s, 2H), 5.78 (s, 2H), 5.28 (d, J = 54.3 Hz, 1H), 4.49 (dd, J = 12.0, 6.2 Hz, 1H), 4.30 (dd, J = 11.9, 6.6 Hz, 1H), 4.09 (q, J = 10.4 Hz, 2H), 3.71 (dd, J = 15.7, 6.6 Hz, 1H), 3.43 (dd, J = 15.8, 6.4 Hz, 1H), 3.17 - 3.01 (m, 2H), 2.99 (s, 1H), 2.88 - 2.70 (m, 1H), 2.31 - 2.12 (m, 1H), 2.11 - 1.95 (m, 2H), 1.92 - 1.67 (m, 3H), 1.59 (d, J = 6.8 Hz, 3H).. LC-MS: (ESI, m/z): 659.3 [M+H]+.
실시예 114a 및 114b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 1-(tert-부틸) 2-메틸 2-(2-클로로에틸)-4,4-디플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트
테트라히드로퓨란(30 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 (S)-4,4-디플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(3.00 g, 11.31 mmol)의 용액에 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(33.9 mL, 33.93 mmol, THF 중 1 M)를 적가하고, -78°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 1-클로로-2-요오도에탄(4.30 g, 22.62 mmol)을 적가하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1:9)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-(tert-부틸) 2-메틸 2-(2-클로로에틸)-4,4-디플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(2.00 g, 6.10 mmol, 54% 수율)을 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 328.1 [M+H]+.
단계 2: 메틸 2-(2-클로로에틸)-4,4-디플루오로피롤리딘-2-카르복실레이트
2,2,2-트리플루오로아세트산(10 mL) 및 디클로로메탄(10 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 2-(2-(클로로에틸)-4.4-디플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(2.00 g, 6.10 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축시켜 1.9 g의 조 물질을 흑색 오일로서 수득하였으며, 이를 정제 없이 직접 사용하였다.
단계 3: 메틸 3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-카르복실레이트
아세토니트릴(18 mL) 중 메틸 2-(2-클로로에틸)-4,4-디플루오로-피롤리딘-2-카르복실레이트(621.0 mg, 2.73 mmol) 및 트리에틸아민(1.02 g, 10.92 mmol)의 용액을 85°C에서 48시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(2:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-카르복실레이트(450.0 mg, 2.35 mmol, 86.3% 수율)를 적색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 192.2 [M+H]+.
단계 4: (3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메탄올
테트라히드로퓨란(12 mL) 중 메틸 3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-카르복실레이트(440.0 mg, 2.3 mmol)의 용액에 수소화 알루미늄 리튬(2.7 mL, 6.9 mmol, 테트라히드로퓨란 중 2.5 M)을 적가하고, 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 황산나트륨 십수화물로 켄칭하고 테트라히드로퓨란으로 희석하였다. 그런 다음, 반응 용액을 여과하고, 여액을 N2로 블로잉하여 (3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메탄올(350 mg, 조)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 164.2 [M+H]+.
단계 5: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(6 mL) 중 (3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메탄올(485.7 mg, 2.98 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(3.98 mL, 3.98 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 25°C에서 적가하고, 25°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용액을 테트라히드로퓨란(12 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(900.0 mg, 0.99 mmol)의 용액 내로 옮기고 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(780.0 mg, 0.54 mmol, 41.1 % 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 1035.3 [M+H]+.
단계 6: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 및 1,1,2-트리클로로트리플루오로에탄(5 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(1.00 g, 0.97 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 탄산나트륨 용액으로 PH = 7.0으로 조정하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 분취용-키랄-HPLC로 조건하에서: 컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SB, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 22분 내 50% B에서 50% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 8.841; RT2(분): 15.431; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 0.75 mL; 실행 수: 6dm로 분리하였다. 그 결과로서, 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(42.1 mg, 0.06 mmol, 6.3% 수율) 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(38.0 mg, 0.05 mmol, 5.62% 수율)을 수득하였다.
실시예 114a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.25 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.53 - 4.41 (m, 1H), 4.41 - 4.32 (m, 2H), 4.32 - 4.16 (m, 1H), 3.65 (dd, J = 15.7, 6.7 Hz, 1H), 3.59 - 3.46 (m, 1H), 3.46 - 3.37 (m, 1H), 3.27 - 3.15 (m, 1H), 3.15 - 2.98 (m, 2H), 2.76 - 2.54 (m, 2H), 2.46 - 2.19 (m, 5H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS (ESI, m/z): 695.30 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄 셀룰로스-SB, 4.6*100 mm, 3 μm; 이동상: Hex(0.1%DEA):EtOH=70:30; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 4.160분(제1 피크).
실시예 114b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.5, 1.7 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.25 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.74 (s, 2H), 4.54 - 4.38 (m, 1H), 4.36 (s, 2H), 4.33 - 4.17 (m, 1H), 3.66 (dd, J = 15.6, 6.8 Hz, 1H), 3.60 - 3.46 (m, 1H), 3.46 - 3.39 (m, 1H), 3.22 - 2.98 (m, 3H), 2.79 - 2.54 (m, 2H), 2.44 - 2.23 (m, 5H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS (ESI, m/z): 695.30 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄 셀룰로스-SB, 4.6*100 mm, 3 μm; 이동상: Hex(0.1%DEA):EtOH=70:30; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 5.378분(제2 피크).
실시예 115: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메탄올
아세토니트릴(12.5 mL) 중 l-프롤리놀(0.49 mL, 4.94 mmol), 2,2-디플루오로에틸 트리플루오로메탄술포네이트(1.58 g, 7.41 mmol) 및 탄산 칼륨(2.04 g, 14.83 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 여과하였다. 여액을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(2:3)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메탄올(680.0 mg, 4.11 mmol, 83.3 % 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 166.2 [M+H]
단계 2: tert-부틸 (3-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(1 mL) 중 (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메탄올(49.12 mg, 0.30 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.6 mL, 0.60 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용액을 테트라히드로퓨란(2 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]카바메이트(181.4 mg, 0.2 mmol)의 용액 내로 옮겼다. 반응물을 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축시켜 표제 화합물(90.0 mg, 0.07 mmol, 75.8 % 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1037.5[M+H]+
단계 3: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(0.1 mL) 및 1,1,2-트리클로로트리플루오로에탄(1 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(80.0 mg, 0.07 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 역상 크로마토그래피 및 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 41% B에서 62% B로, 62% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 9.22; 실행 수: 0) 정제하여 표제 화합물(23.9 mg, 0.03 mmol, 48.6 % 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI, m/z): 697.3 [M+H]+.
실시예 115: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.96 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.53 - 6.41 (m, 1H), 6.34 - 6.22 (m, 1H), 6.22 - 5.82 (m, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.52 - 4.31 (m, 2H), 4.30 - 4.18 (m, 1H), 4.13 (dd, J = 10.8, 6.9 Hz, 1H), 3.63 (dd, J = 15.5, 6.8 Hz, 1H), 3.51 - 3.36 (m, 1H), 3.34 - 3.18 (m, 2H), 3.18 - 2.95 (m, 1H), 2.94 - 2.68 (m, 1H), 2.47 - 2.38 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.07 - 1.83 (m, 1H), 1.83 - 1.60 (m, 2H), 1.55 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.23 (s, 1H).
실시예 116: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로:
단계 1: tert-부틸 (3-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(2.8 mL) 중 (S)-(2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(91.0 mg, 0.59 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.79 mL, 0.79 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-(3-((1R)-1-(7-(6-(비스((4-메톡시페닐)메틸)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일)에틸)-2-피리딜)-N-tert-부톡시카보닐-카바메이트(원하는 회전장애이성질체)(200.0 mg, 0.20 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고 물로 세척하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(75.0 mg, 0.073 mmol, 36.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1025.3 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(1 mL, 12.98 mmol) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(75.0 mg, 0.0700 mmol)의 용액을 50°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 혼합물을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액에 의해 pH=7로 조정하고, 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 30% B에서 55% B로, 55% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 9.6로 정제하여 표제 화합물(8.0 mg, 0.012 mmol, 17.5% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 685.4 [M+H]+
실시예 116: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 1 7.95 (dd, J = 5.1, 1.6 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.77 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.52 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.51 - 4.37 (m, 1H), 4.35 - 4.19 (m, 3H), 3.78 - 3.59 (m, 2H), 3.57 - 3.41 (m, 1H), 3.30 - 3.26 (m, 1H), 3.21 - 3.07 (m, 1H), 2.86 - 2.64 (m, 2H), 2.52 - 2.42 (m, 4H), 2.26 - 2.10 (m, 1H), 2.06 - 1.75 (m, 3H), 1.65 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 117: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-(옥세탄-3-일)피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로:
단계 1: (S)-(1-(옥세탄-3-일)피롤리딘-2-일)메탄올
디클로로메탄(20 mL) 중 L-프로리놀(1.00 g, 9.89 mmol) 및 3-옥세타논(1.00 g, 13.88 mmol)의 용액을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드(6.29 g, 29.68 mmol)를 적가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(400.0 mg, 25.7% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 158.1 [M+H]+
단계 2: tert-부틸 (3-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-(옥세탄-3-일)피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
테트라히드로퓨란(2 mL) 중 (S)-(1-(옥세탄-3-일)피롤리딘-2-일)메탄올(47.1 mg, 0.3 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(16.0 mg, 0.4 mmol, 60% 순도)을 적가하고 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용액을 테트라히드로퓨란(3 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(원하는 회전장애이성질체)(100.0 mg, 0.1 mmol)의 용액 내로 옮기고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(90.0 mg, 88.2% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1029.3 [M+H]+
단계 3: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-(옥세탄-3-일)피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-(옥세탄-3-일)피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(80.0 mg, 0.08 mmol)의 용액을 25°C에서 2.6일 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 진공하에 농축하고, 디클로로메탄으로 희석하고, 탄산나트륨 용액, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH 플루오로 페닐, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 33% B에서 58% B로, 58% B; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 7.92) 추가 정제하여 표제 화합물(16.7 mg, 0.024 mmol, 31.2% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 689.3 [M+H]+
실시예 117: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.24 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.67 - 4.47 (m, 4H), 4.42 (dd, J = 12.0, 6.2 Hz, 1H), 4.34 - 4.16 (m, 2H), 4.08 (dd, J = 10.8, 6.5 Hz, 1H), 4.03 - 3.82 (m, 1H), 3.63 (dd, J = 15.6, 6.8 Hz, 1H), 3.42 - 3.35 (m, 1H), 3.03 - 2.83 (m, 2H), 2.43 - 2.32 (m, 4H), 2.00 - 1.82 (m, 1H), 1.81 - 1.61 (m, 3H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 118: (6R)-6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((3-메틸렌-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 1-(tert-부틸) 2-메틸 2-(2-(클로로메틸)알릴)아제티딘-1,2-디카르복실레이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(65 mL) 중 1-tert-부틸 2-메틸 아제티딘-1,2-디카르복실레이트(9.00 g, 41.81 mmol)의 용액에 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(104 mL, 104 mmol, 1 M)를 -50°C에서 첨가하였다. 혼합물을 -50°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-클로로-2-(클로로메틸)프로프-1-엔(20.00 g, 160 mmol)을 첨가하고 -50°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(4:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(1.30 g, 4.27 mmol, 10.2% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 248.1 [M-55+H]+.
단계 2: 메틸 2-(2-(클로로메틸)알릴)아제티딘-2-카르복실레이트
디클로로메탄(20 mL) 및 트리플루오로아세트산(10 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 2-(2-(클로로메틸)알릴)아제티딘-1,2-디카르복실레이트(2.00 g, 6.58 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 204.1 [M+H]+.
단계 3: 메틸 3-메틸렌-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-카르복실레이트
테트라히드로퓨란(100 mL) 중 2-(2-(클로로메틸)알릴)아제티딘-2-카르복실레이트(6.17 g, 30.29 mmol) 및 탄산 칼륨(12.1 g, 87.68 mmol)의 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 생성된 혼합물을 물로 희석하고 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 3-메틸란-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-카르복실레이트(1.50 g, 29.6% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 168.1 [M+H]+.
단계 4: (3-메틸렌-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메탄올
질소하에서, 테트라히드로퓨란(4 mL) 중 메틸 3-메틸렌-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-카르복실레이트(280 mg, 1.67 mmol)의 용액에 수소화 알루미늄 리튬(130 mg, 3.42 mmol)을 0°C에서 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하였다. 고체를 여과하였다. 여과 후, 여액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(4:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (3-메틸렌-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메탄올(80.0 mg, 0.58 mmol, 34.3% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 139.1 [M+H]+
단계 5: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((3-메틸렌-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 (3-메틸렌-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메탄올(55.0 mg, 0.4 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(16.0 mg, 0.67 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-[3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일]에틸]-2-피리딜]-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트(원하는 회전장애이성질체)(150.0 mg, 0.13 mmol)를 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(92:8)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(60.0 mg, 0.06 mmol, 45.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1011.4 [M+H]+
단계 6: (6R)-6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((3-메틸렌-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((3-메틸렌-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(50.0 mg, 0.05 mmol)의 용액을 50°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 잔류물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물 중 0.1% 중탄산 암모늄)로 정제하여 표제 화합물(30.0 mg, 0.04 mmol, 84.1% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 671.3 [M+H]+.
실시예 118: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.74 - 7.58 (m, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.33 - 6.18 (m, 1H), 5.84 - 5.60 (m, 2H), 5.20 (s, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.55 - 4.34 (m, 3H), 4.32 - 4.17 (m, 1H), 3.79 - 3.55 (m, 2H), 3.54 - 3.39 (m, 2H), 3.30 - 3.13 (m, 1H), 3.11 - 2.90 (m, 1H), 2.67 (s, 2H), 2.47 - 2.40 (m, 1H), 2.37 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 2.13 - 1.97 (m, 1H), 1.58 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
실시예 119: 4-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)나프탈렌-2-올
합성 경로
단계 1: 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)나프탈렌-2-올
1,4-디옥산(40.0 mL) 중 4-브로모나프탈렌-2-올(4.00 g, 18.0 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(9.20 g, 36.0 mmol), 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 디클로로메탄 착물(1.50 g, 1.8 mmol) 및 아세트산 칼륨(5.3 g, 54.0 mmol)의 혼합물을 80°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축하고, 물로 희석하고 디클로로메탄으로 추출하였다. 취합한 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(20:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(5.0 g, 17.8 mmol, 98% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다.
단계 2: 3-((R)-1-(9-브로모-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민
질소하에서, 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(1.8 mL, 1.8 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(224.0 mg, 1.4 mmol)의 용액에 실온에서 적가하고, 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 3-[(1R)-1-(7-브로모-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일)에틸]-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]피리딘-2-아민(500.0 mg, 0.7 mmol) 용액에 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(4:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(510.0 mg, 0.61 mmol, 87% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 835.2,[M+H]+
단계 3: 4-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)나프탈렌-2-올
테트라히드로퓨란(8.0 mL) 및 물(2 mL) 중 3-((R)-1-(9-브로모-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N,N-비스(4-메톡시벤질)피리딘-2-아민(300.0 mg, 0.36 mmol), 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)나프탈렌-2-올(146.0 mg, 0.54 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(26.0 mg, 0.04 mmol), 및 인산 칼륨(153.0 mg, 0.72 mmol)의 혼합물을 80°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고 디클로로메탄으로 추출하였다. 취합한 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 후, 진공에서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(160.0 mg, 0.18 mmol, 49% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 900.0 [M+H]+
단계 4: 4-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)나프탈렌-2-올
트리플루오로아세트산(2.0 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.2 mL) 중 4-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)나프탈렌-2-올(140.0 mg, 0.16 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, NaHCO3 포화 수용액으로 염기성화하여 pH를 10으로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 34% B에서 56% B로, 56% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 9.6로 정제하여 표제 화합물(13.0 mg, 0.02 mmol, 12% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 659.2[M+H]+
실시예 119: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.96 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.81-7.69 (m, 2H), 7.43-7.35 (m, 1H), 7.30-7.12 (m, 3H), 7.00 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.79 (dd, J = 7.4, 5.1 Hz, 1H), 6.55 (dd, J = 13.8, 7.0 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 54.0 Hz, 1H), 4.53-4.44 (m, 1H), 4.43-4.17 (m, 3H), 3.80-3.70 (m, 1H), 3.59-3.50 (m, 1H), 3.28-3.13 (m, 3H), 3.05-2.96 (m, 1H), 2.27-2.09 (m, 3H), 2.04-1.87 (m, 3H), 1.69 (d, J = 6.9 Hz, 3H)
실시예 120a 및 120b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((7S,9aS)-헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((7R,9aR)-헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로:
단계 1: tert-부틸 3-(((2S,5S)-1-벤질-5-(히드록시메틸)피롤리딘-2-일)메톡시)프로파노에이트
테트라히드로퓨란(50 mL) 중 ((2S,5S)-1-벤질피롤리딘-2,5-디일)디메탄올(5.00 g, 22.59 mmol, trans 혼합물)의 용액에 수산화 칼륨(250.0 mg, 4.46 mmol)을 첨가하고 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 아세테이트(3.14 mL, 21.46 mmol)를 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물(0.1% 중탄산암모늄)(A)/아세토니트릴(B)(30분 내 5-95%)로 용출하면서 C18 겔 상의 역 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(2.20 g, 6.29 mmol, 27.9% 수율, trans 혼합물)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 350.5 [M+H]+
단계 2: ((2S,5S)-1-벤질-5-((3-(tert-부톡시)-3-옥소프로폭시)메틸)피롤리딘-2-일)메틸 벤조에이트(trans 혼합물)
디클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 3-(((2S,5S)-1-벤질-5-(히드록시메틸)피롤리딘-2-일)메톡시)프로파노에이트(1.80 g, 5.15 mmol, trans 혼합물), N,N-디이소프로필에틸아민(2.0 g, 15.5 mmol) 및 4-(디메틸아미노)피리딘(125.0 mg, 1.02 mmol)의 용액에 벤조일 클로라이드(1.2 mL, 10.32 mmol)를 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(1.50 g, 3.31 mmol, 64.2% 수율, trans 혼합물)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 454.7 [M+H]+
단계 3: 3-(((2S,5S)-5-((벤조일옥시)메틸)-1-벤질피롤리딘-2-일)메톡시)프로판산(trans 혼합물)
1,4-디옥산(8 mL) 중 ((2S,5S)-1-벤질-5-((3-(tert-부톡시)-3-옥소프로폭시)메틸)피롤리딘-2-일)메틸 벤조에이트(650.0 mg, 1.43 mmol, trans 혼합물) 및 염산(6.45 mL, 38.69 mmol, 6 M)의 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. LC-MS는 형성된 생성물을 나타내었다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 398.2 [M+H]+
단계 4: 3-(((2S,5S)-5-((벤조일옥시)메틸)피롤리딘-2-일)메톡시)프로판산(trans 혼합물)
메틸 알코올(10 mL) 중 3-(((2S,5S)-5-((벤조일옥시)메틸)-1-벤질피롤리딘-2-일)메톡시)프로판산(700.0 mg, 1.76 mmol, trans 혼합물) 및 차콜 상의 Pd(0.7 g, ca. 10% Pd)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 여과하였다. 여액을 감압하에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이를 정제없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 308.1 [M+H]+
단계 5: ((7S,9aS)-5-옥소헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메틸 벤조에이트(trans 혼합물)
1,4-디옥산(2 mL) 중 3-(((2S,5S)-5-((벤조일옥시)메틸)피롤리딘-2-일)메톡시)프로판산(700.0 mg, 2.28 mmol, trans 혼합물), 프로필포스폰산 무수물(2.17 g, 6.82 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(980.0 mg, 7.6 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(430.0 mg, 1.49 mmol, 65.3% 수율, trans 혼합물)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 290.1 [M+H]+
단계 6: ((7S,9aS)-5-헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메틸 벤조에이트(trans 혼합물)
테트라히드로퓨란(4 mL) 중 ((7S,9aS)-5-옥소헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메틸 벤조에이트(350.0 mg, 1.21 mmol, trans 혼합물)의 용액에 디이소부틸알루미늄 하이드라이드(3.63 mL, 3.63 mmol, 톨루엔 중 1 M)를 첨가하고, -20°C에서 2시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응물을 황산나트륨 십수화물로 켄칭하고 테트라히드로퓨란으로 희석하였다. 생성된 용액을 여과하고, 여액을 감압하에서 농축하였다. 잔류물을 물(0.1% 중탄산 암모늄)/아세토니트릴(30분 내 5-95%)로 용출하면서 C18 겔 상의 역 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(70.0 mg, 0.25 mmol, 21% 수율, trans 혼합물)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 276.2 [M+H]+
단계 7: ((7S,9aS)-5-헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메탄올(trans 혼합물)
테트라히드로퓨란(2 mL), 물(0.8 mL) 및 메틸 알코올(0.4 mL) 중 ((7S,9aS)-헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메틸 벤조에이트(70.0 mg, 0.25 mmol, trans 혼합물) 및 수산화 리튬(21.0 mg, 0.88 mmol)의 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 HCl/디옥산을 사용하여 PH = 7.0으로 조정하고 진공하에 농축하였다. 그런 다음, 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 여과하고, 여액을 감압하에 농축하였다. 조 생성물을 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 172.2 [M+H]+
단계 8: tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((7S,9aS)-헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(trans 혼합물)
질소하에서, 테트라히드로퓨란(0.5 mL) 중 ((7S,9aS)-헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메탄올(40.0 mg, 0.23 mmol, trans 혼합물)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.3 mL, 0.30 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 0°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, tert-부틸 N-tert-부톡시카르보닐-N-(3-(rac-(1R)-1-(7-(6-(비스((4-메톡시페닐)메틸)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜)-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-13-일)에틸)-2-피리딜)카바메이트(원하는 회전장애이성질체)(100.0 mg, 0.10 mmol)를 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(40.0 mg, 0.038 mmol, 38.7% 수율, trans 혼합물)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1043.5 [M+H]+
단계 9: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((7S,9aS)-헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((7R,9aR)-헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(1.0 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(10.1 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((7S,9aS)-헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(50.0 mg, 0.050 mmol)의 용액을 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 30% B에서 55% B로, 55% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.9; 실행 수: 0 및 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄팩 IE-3, 4.6*50 mm 3 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1)(0.5%IP아민): IPA=60：40; 유량: 1 mL/분; 구배: 0% B에서 0% B로; 주입 용량: 5 ul mL로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((7S,9aS)-헥사히드로-1H,3H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(2.5 mg, 0.0036 mmol, 7.4% 수율) 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((7R,9aR)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사제핀-7-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(1.3 mg, 0.0018 mmol, 3.9% 수율)을 수득하였다.
실시예 120a: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.95 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.77 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.61 - 6.56 (m, 1H), 6.52 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.58 (dd, J = 11.1, 5.5 Hz, 2H), 4.43 (dd, J = 11.5, 5.6 Hz, 2H), 4.27 (dd, J = 12.4, 6.8 Hz, 1H), 3.85 - 3.76 (m, 1H), 3.73 - 3.55 (m, 5H), 3.55 - 3.38 (m, 2H), 3.27 - 3.16 (m, 1H), 2.49 - 2.33 (m, 3H), 2.21 - 2.07 (m, 1H), 2.04 - 1.90 (m, 2H), 1.85 - 1.68 (m, 2H), 1.66 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.59 - 1.49 (d, J = 10.6 Hz, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 703.1 [M+H]+
실시예 120b: 1 H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.96 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.78 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.51 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.64 - 4.37 (m, 4H), 4.28 (dd, J = 12.2, 6.3 Hz, 1H), 3.85 - 3.74 (m, 1H), 3.73 - 3.58 (m, 5H), 3.56 - 3.45 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.21 - 2.09 (m, 1H), 2.06 - 1.91 (m, 2H), 1.87 - 1.70 ( m, 2H), 1.69 - 1.54 (d, J = 6.9 Hz, 5H). LC-MS: (ESI, m/z): 703.1 [M+H]+
실시예 121: (S)-5-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)피롤리딘-2-온
합성 경로:
단계 1: (S)-5-(((9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)피롤리딘-2-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 테트라히드로퓨란(4 mL) 중 (5S)-5-(히드록시메틸)-2-피롤리딘(88.0 mg, 0.7600 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(76.0 mg, 1.9 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 0°C에서 5분 동안 교반하였다. 그런 다음, (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(400.0 mg, 0.38 mmol)을 첨가하고 65°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(150 mg, 0.1330 mmol, 34.8% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1127.6 [M+H]+
단계 2: (S)-5-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)피롤리딘-2-온
트리플루오로아세트산(2 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.2 mL) 중 (S)-5-(((9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)피롤리딘-2-온(100.0 mg, 0.09 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 17% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.9로 정제하여 표제 화합물(35.6 mg, 0.055 mmol, 62% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 647.0 [M+H]+
실시예 121: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.74 - 6.62 (m, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.2 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.50 - 4.36 (m, 1H), 4.36 - 4.18 (m, 3H), 3.94 (s, 1H), 3.66 (dd, J = 15.9, 6.8 Hz, 1H), 3.45 - 3.34 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.32 - 2.02 (m, 3H), 1.97 - 1.81 (m, 1H), 1.57 (d, J = 6.1 Hz, 3H).
실시예 122a 및 122b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1,2-디메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((R)-4,4-디플루오로-1,2-디메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 1-(tert-부틸) 2-메틸 4,4-디플루오로-2-메틸피롤리딘-1,2-디카르복실레이트
질소하에서, 1-tert-부틸 2-메틸 (2S)-4,4-디플루오로피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(5.00 g, 18.85 mmol)의 용액에 테트라히드로퓨란(50 mL) 중 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(28.28 mL, 28.28 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 적가하고 -78°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 요오도메탄(8.05 g, 56.71 mmol)을 적가하고 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축시켜 1-(tert-부틸) 2-메틸 4,4-디플루오로-2-메틸피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(5.00 g, 17.90 mmol, 95% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 280.1 [M+H]+
단계 2: (4,4-디플루오로-1,2-디메틸-피롤리딘-2-일)메탄올
테트라히드로퓨란(10 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 4,4-디플루오로-2-메틸피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(1.00 g, 3.58 mmol)의 용액에 수소화 알루미늄 리튬(250.0 mg, 6.58 mmol)을 0°C에서 첨가하고, 70°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 황산나트륨 십수화물로 켄칭하고 여과하였다. 여과 후, 여액을 감압하에 농축하여 (4,4-디플루오로-1,2-디메틸-피롤리딘-2-일)메탄올(400.0 mg, 2.4 mmol, 67.6% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 165.2 [M+H]+
단계 3: 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((4,4-디플루오로-1,2-디메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(3 mL) 중 (4,4-디플루오로-1,2-디메틸-피롤리딘-2-일)메탄올(150.0 mg, 0.91 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.95 mL, 0.95 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 25°C에서 첨가하고 25°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용액을 테트라히드로퓨란(5.0 mL) 중 6-[13-[(1R)-1-[2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-3-피리딜]에틸]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5,7,9(14)-펜타엔-7-일]-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(500.0 mg, 0.48 mmol)의 용액 내로 옮기고 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(3:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((4,4-디플루오로-1,2-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(500.0 mg, 0.42 mmol, 89.1% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1177.4 [M+H]+
단계 4: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1,2-디메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((R)-4,4-디플루오로-1,2-디메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(5 mL) 중 6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-((4,4-디플루오로-1,2-디메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(500.0 mg, 0.4200 mmol)의 용액을 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 종료 후, 생성물을 분취용-HPLC로 하기 조건하에서(컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH C18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(0.1% FA), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 10% B에서 33% B로, 33% B; 파장: 254/220 nm) 및 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IF, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 9분 내 25% B에서 25% B로; 파장: 220/254 nm)로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((S)-4,4-디플루오로-1,2-디메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(54.7 mg, 0.078 mmol, 18.5% 수율) 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-2-(((R)-4,4-디플루오로-1,2-디메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(53.7 mg, 0.077 mmol, 18.1% 수율)을 수득하였다.
실시예 122a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 5.2, 1.6 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.72 (dd, J = 7.5, 5.2 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.32 - 5.95 (m, 3H), 4.47 (dd, J = 12.1, 6.2 Hz, 1H), 4.39 - 4.20 (m, 3H), 3.71 (dd, J = 15.8, 6.5 Hz, 1H), 3.54 - 3.39 (m, 1H), 3.39 - 3.33 (m, 1H), 3.06 (dd, J = 14.7, 11.2 Hz, 1H), 2.63 - 2.51 (m, 1H), 2.36 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.24 - 2.06 (m, 1H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.14 (s, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 697.15 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IF-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH = 80:20; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 1.249분(제1 피크).
실시예 122b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 5.0, 1.7 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.68 (dd, J = 7.5, 5.0 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.22 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.88 (s, 2H), 4.45 (dd, J = 11.8, 6.1 Hz, 1H), 4.40 - 4.07 (m, 3H), 3.68 (dd, J = 15.6, 6.5 Hz, 1H), 3.53 - 3.36 (m, 1H), 3.31 - 3.16 (m, 1H), 3.15 - 2.92 (m, 1H), 2.50 - 2.40 (m, 1H), 2.36 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.26 - 2.04 (m, 1H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.14 (s, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 697.15 [M+H]+ 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IF-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH = 80:20; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 1.739분(제2 피크).
실시예 123a 및 123b: 1-((6S,8aS)-6-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)에탄-1-온 및 1-((6R,8aR)-6-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)에탄-1-온
합성 경로
단계 1: 1-((6R,8aR)-6-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)에탄-1-온
디클로로메탄(10 mL) 중 (6R,8aR)-6-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진(900.0 mg, 2.0 mmol) 및 트리에틸아민(808.1 mg, 7.9 mmol)의 용액에 아세틸 클로라이드(156.7 mg, 2.0 mmol)를 첨가하고 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:30)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(900.0 mg, 2.0 mmol, 87.4% 수율)을 백색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 313.1 [M+H]+.
단계 2: 1-((6R,8aR)-6-(히드록시메틸)헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)에탄-1-온
테트라히드로퓨란(4 mL) 중 1-((6R,8aR)-6-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)에탄-1-온(400.0 mg, 1.2 mmol) 및 테트라부틸암모늄 플루오라이드(624.0 mg, 1.5 mmol)의 용액을 50°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 잔류물을 역상 C18 컬럼 아세토니트릴/물(0/100) 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-((6R,8aR)-6-(히드록시메틸)헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)에탄-1-온(230.0 mg, 1.2 mmol, 90.6% 수율)을 백색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 199.0 [M+H]+.
단계 3: 1-((6S,8aS)-6-((((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)에탄-1-온
테트라히드로퓨란(6 mL) 중 1-[(6R,8aR)-6-(히드록시메틸)-3,4,6,7,8,8a-헥사히드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]에탄온(204.1 mg, 1.0 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(137.2 mg, 3.4 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(900.0 mg, 0.8 mmol)을 첨가하고 30°C에서 24시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(1.00 g, 0.8 mmol, 96.3% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1210.5 [M+H]+.
단계 4:
1-((6S,8aS)-6-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)에탄-1-온 및 1-((6R,8aR)-6-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)에탄-1-온
트리플루오로아세트산(10 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(1 mL) 중 1-((6S,8aS)-6-((((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)에탄-1-온(700.0 mg, 0.6 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH = 7으로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:5)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 고체를 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep C18 OBD 컬럼 30*100 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 17% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 254/220 nm) 정제하여 50 mg의 생성물을 수득하였다. 생성물을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SC, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: IPA--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 24분 내 20% B에서 20% B로; 파장: 220/254 nm) 분리하여 1-((6S,8aS)-6-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)에탄-1-온(14.1 mg, 0.02 mmol, 3.3% 수율) 및 1-((6R,8aR)-6-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)에탄-1-온(21.0 mg, 0.03 mmol, 5% 수율)을 수득하였다.
실시예 123a: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.96 (dd, J = 5.1, 1.6 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.78 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.50 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 11.1, 6.2 Hz, 1H), 4.48 - 4.32 (m, 2H), 4.34 - 4.06 (m, 2H), 3.88 - 3.59 (m, 3H), 3.59 - 3.34 (m, 2H), 3.29 - 2.95 (m, 3H), 2.95 - 2.56 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.31 - 2.15 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 2.01 (s, 1H), 1.88 - 1.71 (m, 1H), 1.66 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.60 - 1.40 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 730.4 [M+H]+.
키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 ID-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=80:20; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 3.940분(제1 피크).
실시예 123b: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.96 (dd, J = 5.1, 1.6 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.78 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.50 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 11.1, 6.2 Hz, 1H), 4.48 - 4.32 (m, 2H), 4.34 - 4.06 (m, 2H), 3.88 - 3.59 (m, 3H), 3.59 - 3.34 (m, 2H), 3.29 - 2.95 (m, 3H), 2.95 - 2.56 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.31 - 2.15 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 2.01 (s, 1H), 1.88 - 1.71 (m, 1H), 1.66 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.60 - 1.40 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 730.3 [M+H]+.
키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 ID-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=80:20; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 5.359분(제2 피크).
실시예 124: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-4-메틸모르폴린-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로:
단계 1: (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-4-메틸모르폴린-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(4 mL) 중 (R)-(4-(메틸모르폴린-2-일]메탄올(112.5 mg, 0.86 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(46.0 mg, 1.15 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(300.0 mg, 0.29 mmol)을 첨가하고 25°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고 물로 세척하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(112.0 mg, 0.10 mmol, 34.2% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1143.6 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-4-메틸모르폴린-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 및 트리플루오로아세트산(5 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-4-메틸모르폴린-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(112.0 mg, 0.10 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 혼합물을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 포화 중탄산 나트륨 용액으로 pH=7로 조정하였다. 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 물로 세척하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 17% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.6로 정제하여 표제 화합물(40.8 mg, 0.062 mmol, 62.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 663.1 [M+H]+
실시예 124: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (d, J = 5.1, 1.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.25 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.63 (s, 2H), 4.42 (dd, J = 12.1, 6.4 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 4.25 (dd, J = 11.9, 7.3 Hz, 1H), 3.88 - 3.76 (m, 2H), 3.66 - 3.49 (m, 2H), 3.43 - 3.33 (m, 1H), 2.76 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 2.59 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 2.06 - 1.79 (m, 2H), 1.56 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
실시예 125a 및 125b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-2-(메틸설포닐)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-2-(메틸설포닐)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 2-아지도에틸 4-메틸벤젠설포네이트
디클로로메탄(200 mL) 중 2-아지도에탄올(20.00 g, 229.6 mmol), 토실 클로라이드(66.00 g, 345.5 mmol) 및 트리에틸아민(46.00 g, 455.4 mmol)의 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(3:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-아지도에틸 4-메틸벤젠설포네이트(25.00 g, 103.62 mmol, 45.1% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2: 디에틸 (2R,5R)-피롤리딘-2,5-디카르복실레이트
에틸 아세테이트(70 mL) 중 디에틸 (2R,5R)-1-벤질피롤리딘-2,5-디카르복실레이트(20.00 g, 65.4 mmol) 및 차콜 상의 Pd(5 g, ca. 10% Pd) 용액을 30°C에서 5시간 동안 대기압에서 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 여과하였다. 여액을 수집하고 진공하에 농축하였다. 생성물 디에틸 (2R,5R)-피롤리딘-2,5-디카르복실레이트(20.00 g, 조)를 추가 정제없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 216.1 [M+H]+.
단계 3: 디에틸 (2R,5R)-1-(2-아지도에틸)-피롤리딘-2,5-디카르복실레이트
아세토니트릴(30 mL) 중 디에틸 (2R,5R)-피롤리딘-2,5-디카르복실레이트(4.01 g, 18.6 mmol), 탄산 칼륨(5.15 g, 37.3 mmol) 및 2-아지도에틸 4-메틸벤젠설포네이트(3.00 g, 12.4 mmol)의 용액을 80°C에서 48시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 여과하였다. 여액을 수집하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:10)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 디에틸 (2R,5R)-1-(2-아지도에틸)피롤리딘-2,5-디카르복실레이트(1.50 g, 5.2 mmol, 42.4% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 285.1 [M+H]+..
단계 4: 에틸 (6R,8aR)-1-옥소옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-카르복실레이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(4 mL) 중 디에틸 (2R,5R)-1-(2-아지도에틸)-피롤리딘-2,5-디카르복실레이트(400.0 mg, 1.4 mmol), 트리페닐포스핀(369.0 mg, 1.4 mmol) 및 물(0.03 mL, 1.5 mmol)의 용액을 60°C에서 24시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 여과하였다. 여액을 수집하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:30)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (6R,8aR)-1-옥소옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-카르복실레이트(160.0 mg, 0.7 mmol, 53.6% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):213.0 [M+H]+.
단계 5: ((6R,8aR)-옥소옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메탄올
테트라히드로퓨란(2 mL) 중 에틸 (6R,8aR)-1-옥소옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-카르복실레이트(150.0 mg, 0.7 mmol)의 용액에 수소화 알루미늄 리튬(134.2 mg, 3.5 mmol)을 첨가하고, 60°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 테트라히드로퓨란으로 희석하고 여과하였다. 여액을 수집하고 진공하에서 농축하여 표제 화합물(120.0 mg, 조)을 수득하고, 이를 추가 정제없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 157.1[M+H]+.
단계 6: (6R,8aR)-6-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진
디클로로메탄(10 mL) 중 이미다졸(915.0 mg, 13.4 mmol), ((6R,8aR)-옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메탄올(700.0 mg, 4.5 mmol) 및 tert-부틸디메틸클로로실란(1.35 g, 8.9 mmol)의 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축시켜 표제 화합물(1.40 g, 조)을 수득하고, 이를 추가 정제없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 271.1 [M+H]+.
단계 7: (6R,8aR)-6-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)-2-(메틸설포닐)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진
디클로로메탄(5 mL) 중 ((6R,8aR)-6-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진(490.0 mg, 조), 메탄설포닐 클로라이드(124.5 mg, 1.1 mmol) 및 트리에틸아민(329.9 mg, 3.3 mmol)의 용액을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(오전 1:30)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(300.0 mg, 0.9 mmol, 79.1% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 349.0 [M+H]+.
단계 8: ((6R,8aR)-2-(메틸설포닐)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메탄올
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 (6R,8aR)-6-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)-2-(메틸설포닐)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진(260.0 mg, 0.7 mmol) 및 테트라부틸암모늄 플루오라이드(390.0 mg, 1.5 mmol)의 용액을 50°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(30:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(150.0 mg, 0.6 mmol, 85.8% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 235.0 [M+H]+.
단계 9: 6-((R)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-2-(메틸설포닐)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(4 mL) 중 ((6R,8aR)-2-(메틸설포닐)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메탄올(150.1 mg, 0.6 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(68.3 mg, 1.7 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(4 mL) 중의 6-((R)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(448.0 mg, 0.4 mmol)을 첨가하고 30°C에서 24시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(190.0 mg, 0.2 mmol, 35.7% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1246.1 [M+H]+.
단계 10: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-2-(메틸설포닐)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-2-(메틸설포닐)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(0.3 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.03 mL) 중 6-((R)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-2-(메틸설포닐)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(180.0 mg, 0.1 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(85:15)의 역상 C18 컬럼 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Shield RP18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 36% B에서 54% B로, 54% B; 파장: 254/220 nm;) 정제하여 70 mg의 생성물을 수득하였다. 생성물을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) ID, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: IPA--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 26분 내 30% B에서 30% B로; 파장: 220/254 nm) 분리하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-2-(메틸설포닐)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(22.8 mg, 0.03 mmol, 20.6% 수율) 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-2-(메틸설포닐)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(21.4 mg, 0.03 mmol, 19.3% 수율)을 수득하였다.
실시예 125a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 7.4, 1.8 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.71 - 6.57 (m, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.70 (s, 2H), 4.53 - 4.34 (m, 2H), 4.32 - 4.12 (m, 2H), 3.74 - 3.46 (m, 2H), 3.45 - 3.37 (m, 1H), 3.26 - 3.13 (m, 2H), 3.09 - 2.95 (m, 1H), 2.94 - 2.72 (m, 5H), 2.49 - 2.42 (m, 1H), 2.41 - 2.31 (m, 3H), 2.15 - 1.85 (m, 2H), 1.74 - 1.62 (m, 1H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.48 - 1.32 (m, 1H), 1.21 (d, J = 17.6 Hz, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 766.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 ID-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=70:30; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 2.406분(제1 피크).
실시예 125b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.26 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.75 (s, 2H), 4.51 - 4.34 (m, 2H), 4.33 - 4.04 (m, 2H), 3.75 - 3.48 (m, 2H), 3.46 - 3.36 (m, 1H), 3.28 - 3.13 (m, 2H), 3.11 - 2.98 (m, 1H), 2.94 - 2.67 (m, 5H), 2.48 - 2.41 (m, 1H), 2.40 - 2.30 (m, 3H), 2.18 - 1.80 (m, 2H), 1.72 - 1.63 (m, 1H), 1. 57 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.46 - 1.30 (m, 1H), 1.29 - 1.17 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 766.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 ID-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=70:30; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 3.016분(제2 피크).
실시예 126: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(3 mL) 중 1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-올(319.0 mg, 2 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(2.8 mL, 2.8 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 혼합물을 25°C에서 10시간 동안 교반하였다. 그런 다음, (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(700.0 mg, 0.67 mmol)을 첨가하고 60°C에서 4시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 그런 다음, 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(310.0 mg, 0.26 mmol, 39.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1171.5 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(0.3 mL) 및 트리플루오로아세트산(3.0 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(270.0 mg, 0.23 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH 플루오로 페닐, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 46% B에서 71% B로, 71% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 6.52로 정제하여 표제 화합물(74.3 mg, 0.10 mmol, 45.7% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 691.2 [M+H]+
실시예 126: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6,ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.18 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.64 (s, 2H), 5.01 (dt, J = 8.7, 4.5 Hz, 1H), 4.42 - 4.40 (m, 1H), 4.29 - 4.27 (m, 1H), 3.69 - 3.58 (m, 1H), 3.46 - 3.33 (m, 3H), 3.23 (s, 3H), 2.76-2.73 (m, 2H), 2.49 - 2.45 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.25 (q, J = 10.7 Hz, 2H), 1.99 - 1.96 (m, 2H), 1.78 - 1.61 (m, 2H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 127: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로:
단계 1: (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(2 mL) 중 (S)-(1-메틸피롤리딘-2-일)메탄올(62.0 mg, 0.5400 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(38.0 mg, 0.95 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(200.0 mg, 0.1900 mmol)의 용액을 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 0°C에서 켄칭하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(7:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(150 mg, 0.13 mmol, 69.8% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1127.7 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(3.0 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.3 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(150.0 mg, 0.1300 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 11분 내 23% B에서 43% B로, 43% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 10.72로 정제하여 표제 화합물(42.7 mg, 0.066 mmol, 49.6% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 647.1 [M+H]+
실시예 127: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.26 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.45-4.37 (m, 2H), 4.29-4.15 (m, 2H), 3.67 (dd, J = 15.5, 6.8 Hz, 1H), 3.38 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 2.96 (dd, J = 7.4, 3.8 Hz, 1H), 2.67 - 2.55 (m, 1H), 2.37 (s, 6H), 2.19 (q, J = 8.4 Hz, 1H), 1.96-1.93 (m, 1H), 1.71 - 1.63 (m, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 128a 및 128b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a(6H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a(6H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 1-(tert-부틸) 2-메틸 2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(150 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 (S)-피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(20.00 g, 87.3 mmol)의 용액에 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(139 mL, 139.5 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고 -30°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, (2-(클로로메톡시)에틸)트리메틸실란(21.85 g, 130.8 mmol)을 적가하고 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:8)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(30.00 g, 83.4 mmol, 95.7% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 360.2 [M+H]+.
단계 2: 메틸 2-(히드록시메틸)피롤리딘-2-카르복실레이트
트리플루오로아세트산(25 mL) 중 1-(tert-부틸) 2-메틸 2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트(3.00 g, 8.3 mmol)의 용액을 40°C에서 20시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(0.1% 중탄산암모늄)(30%)로 용출하면서 역상으로 정제하여 메틸 2-(히드록시메틸)피롤리딘-2-카르복실레이트(2.00 g, 조)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 160.0 [M+H]+.
단계 3: 메틸 1-(2-브로모아세틸)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-2-카르복실레이트
디클로로메탄(20 mL) 중 메틸 2-(히드록시메틸)피롤리딘-2-카르복실레이트(2.30 g, 14.4 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(5.59 g, 43.3 mmol)의 용액을 40°C에서 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, 2-브로모아세틸 브로마이드(0.9 mL, 10.1 mmol)를 적가하고 0°C에서 3시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(2:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(1.00 g, 3.5 mmol, 24.7% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 280.0 [M+H]+.
단계 4: 메틸 4-옥소테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a(6H)-카르복실레이트
테트라히드로퓨란(8 mL) 중 1-(2-브로모아세틸)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-2-카복실레이트(1.00 g, 3.6 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(285.6 mg, 7.1 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 0°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응물을 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 4-옥소-1,6,7,8-테트라히드로피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a-카르복실레이트(300.0 mg, 1.5 mmol, 42.2% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 200.2 [M+H]+.
단계 5: (테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a(6H)-일)메탄올
테트라히드로퓨란(2 mL) 중 메틸 4-옥소테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a(6H)-카복실레이트(300.0 mg, 1.5 mmol)의 용액에 수소화 알루미늄 리튬(286.1 mg, 7.5 mmol)을 첨가하고, 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 황산나트륨 십수화물로 0°C에서 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 디클로로메탄으로 세척하였다. 여액을 수집하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:5)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(50.0 mg, 0.3 mmol, 21.1% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 158.1 [M+H]+.
단계 6: (6R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a(6H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(2 mL) 중 (테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a(6H)-일)메탄올(48.5 mg, 0.3 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(30.8 mg, 0.7 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용액을 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 (R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(270.0 mg, 0.2 mmol)의 용액 내로 옮기고 25°C에서 6시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:8)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(120.0 mg, 0.1 mmol, 39.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1169.5 [M+H]+.
단계 7:
6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a(6H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및
6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a(6H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.1 mL) 중 (6R)-6-(4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a(6H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(100.0 mg, 0.1 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 0°C에서 pH = 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:10)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 고체를 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 27% B에서 52% B로, 52% B; 파장: 254/220 nm) 정제하여 13 mg의 생성물을 수득하였다. 생성물을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 키랄 ART 아밀로스-SA, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: IPA--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 21분 내 10% B에서 10% B로; 파장: 220/254 nm) 분리하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((R)-테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a(6H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(6.4 mg, 0.009 mmol, 10.8% 수율) 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-테트라히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-8a(6H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(1.0 mg, 0.001 mmol, 1.7% 수율)을 수득하였다.
실시예 128a: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.98 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.67 - 6.46 (m, 2H), 4.90 - 4.83 (s, 1H), 4.51 - 4.35 (m, 2H), 4.34 - 4.20 (m, 1H), 3.93 - 3.76 (m, 2H), 3.74 - 3.61 (m, 1H), 3.61 - 3.42 (m, 3H), 3.28 - 3.16 (m, 2H), 3.11 - 2.94 (m, 1H), 2.86 - 2.68 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.10 - 1.85 (m, 3H), 1.79 - 1.54 (m, 4H). LC-MS: (ESI, m/z): 689.4 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IA-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=90:10; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 2.238분(제1 피크).
실시예 128b: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.98 (dd, J = 5.1, 1.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.67 - 6.46 (m, 2H), 4.90 - 4.83 (s, 1H), 4.51 - 4.35 (m, 2H), 4.34 - 4.20 (m, 1H), 3.93 - 3.76 (m, 2H), 3.74 - 3.61 (m, 1H), 3.61 - 3.42 (m, 3H), 3.28 - 3.16 (m, 2H), 3.11 - 2.94 (m, 1H), 2.86 - 2.68 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.10 - 1.85 (m, 3H), 1.79 - 1.54 (m, 4H). LC-MS: (ESI, m/z): 689.4 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IA-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=90:10; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 3.624분(제2 피크).
실시예 129a 및 129b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (6R,8aR)-6-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진
디클로로메탄(15 mL) 중 (6R,8aR)-6-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진(2.00 g, 4.4 mmol) 및 트리에틸아민(1.35 g, 13.3 mmol)의 용액에 2,2,2-트리플루오로에틸 트리플루오로메탄술포네이트(1.03 g, 4.4 mmol)를 첨가하고 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(오전 1:30)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(500.0 mg, 1.4 mmol, 32% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 353.1 [M+H]+.
단계 2: ((6R,8aR)-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메탄올
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 (6R,8aR)-6-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진(500.0 mg, 1.42 mmol) 및 테트라부틸암모늄 플루오라이드(741.7 mg, 2.8 mmol)의 용액을 50°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:30)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(300.0 mg, 1.3 mmol, 88.8% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 239.0 [M+H]+.
단계 3: 6-((R)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(4 mL) 중 ((6R,8aR)-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메탄올(119.9 mg, 0.5 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(50.3 mg, 1.3 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 6-((R)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(440.0 mg, 0.4 mmol)을 첨가하고 25°C에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(1:8)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(300.0 mg, 0.2 mmol, 57.2% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1250.2 [M+H]+.
단계 4: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.2 mL) 중 6-((R)-4-((R)-1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(150.0 mg, 0.1 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 아세토니트릴/물(60:40)의 역상 C18 컬럼 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 고체를 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 17% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 254/220 nm) 정제하여 80 mg의 생성물을 수득하였다. 생성물을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 17% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 254/220 nm) 분리하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(18.3 mg, 0.02 mmol, 18.3% 수율) 및 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6R,8aR)-2-(2,2,2-트리플루오로에틸)옥타히드로피롤로[1,2-a]피라진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(14.1 mg, 0.02 mmol, 14.1% 수율)을 수득하였다.
실시예 129a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.23 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.54 - 4.32 (m, 2H), 4.26 (dd, J = 12.0, 6.7 Hz, 1H), 4.13 (dd, J = 10.8, 6.0 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 15.5, 6.9 Hz, 1H), 3.56 - 3.43 (m, 1H), 3.43 - 3.35 (m, 1H), 3.11 (q, J = 10.2 Hz, 2H), 3.05 - 2.91 (m, 2H), 2.92 - 2.77 (m, 1H), 2.75 - 2.64 (m, 1H), 2.63 - 2.52 (m, 1H), 2.47 - 2.23 (m, 4H), 2.18 - 1.95 (m, 2H), 1.92 - 1.73 (m, 1H), 1.71 - 1.49 (m, 4H), 1.44 - 1.26 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 770.4 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IF-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH = 90:10; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 2.185분(제1 피크).
실시예 129b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.23 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.54 - 4.32 (m, 2H), 4.26 (dd, J = 12.0, 6.7 Hz, 1H), 4.13 (dd, J = 10.8, 6.0 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 15.5, 6.9 Hz, 1H), 3.56 - 3.43 (m, 1H), 3.43 - 3.35 (m, 1H), 3.11 (q, J = 10.2 Hz, 2H), 3.05 - 2.91 (m, 2H), 2.92 - 2.77 (m, 1H), 2.75 - 2.64 (m, 1H), 2.63 - 2.52 (m, 1H), 2.47 - 2.23 (m, 4H), 2.18 - 1.95 (m, 2H), 1.92 - 1.73 (m, 1H), 1.71 - 1.49 (m, 4H), 1.44 - 1.26 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 770.4 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IF-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH = 90:10; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 3.048분(제2 피크).
실시예 130a & 130b & 130c & 130d: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((S)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((S)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-브로모-5-플루오로-N,N-bis[(4-메톡시페닐)메틸]피리딘-2-아민
N,N-디메틸아세트아미드(80 mL) 중 3-브로모-5-플루오로-피리딘-2-아민(8.00 g, 41.88 mmol) 및 4-메톡시벤질클로라이드(26.3 g, 167.54 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(5.9 g, 146.6 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(25:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(14.3 g, 28.17 mmol, 67.3% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 431.3 [M+H]+
단계 2: 1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에탄-1-온
질소하에서, N,N-디메틸포름아미드(100.0 mL) 중 3-브로모-5-플루오로-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]피리딘-2-아민(13.0 g, 30.14 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(2.1 g, 3.01 mmol) 및 트리부틸(1-에톡시비닐)주석(31.0 mL, 90.42 mmol)의 용액을 80°C에서 2시간 동안 교반하였다. 유기층을 물로 세척하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-[2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-5-플루오로-3-피리딜]에타논(12.5 g, 24.16 mmol, 80.2% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 395.4 [M+H]+
단계 3: 2-[1-[2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-5-플루오로-3-피리딜]에틸아미노]에탄올
메틸 알코올(120 mL) 중 1-[5-플루오로-2-[(4-메톡시페닐)메틸아미노]-3-피리딜]에타논(12.0 g, 30.44 mmol), 2-아미노에탄올(6 mL, 91.33 mmol) 및 티타늄 테트라이소프로판올레이트(17.3 g, 60.89 mmol)의 용액을 80°C에서 2시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응물을 실온으로 냉각하였다. 그리고 수소화붕소 나트륨(4.6 g, 121.77 mmol)을 첨가하고 실온에서 교반하였다. 종료 후, 용액을 물로 희석하였다. 그런 다음, 디클로로메탄 및 규조토를 순서대로 용액에 첨가하였다. 혼합물을 여과하였다. 여액을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(1:4)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(1.80 g, 3.69 mmol, 8.4% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 440.5 [M+H]+
단계 4: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-2,6-디클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 질소하에서, 디메틸 술폭시드(10.0 mL) 중 2-[1-[2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-5-플루오로-3-피리딜]에틸아미노]에탄올(1.80 g, 4.1 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(15.0 mL, 15 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고, 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 디메틸 설폭시드(10.0 mL) 중 7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(2.5 g, 3.76 mmol)을 첨가하고, 60°C에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 표제 화합물(3.9 g, 조)을 적색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1084.3 [M+H]+
단계 5: 6-(4-(1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(40 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-2,6-디클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(4.00 g, 조), N,N-디이소프로필에틸아민(1.90 g, 14.56 mmol) 및 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(1.40 g, 5.46 mmol)의 용액을 70°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(9:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(1.20 g, 1.08 mmol, 29.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1066.3 [M+H]+
단계 6: 6-(4-(1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(5.0 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(365.6 mg, 2.3 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(3.0 mL, 3.0 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 첨가하고 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(5.0 mL) 중 6-(4-(1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(700.0 mg, 0.66 mmol)의 용액을 첨가하고 25°C에서 4시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 표제 화합물(435.0 mg, 0.37 mmol, 55.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1189.5 [M+H]+
단계 7: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((S)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((S)-4-((S)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(3 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.3 mL) 중 6-(4-(1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(400.0 mg, 0.34 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 진공하에 농축하고, 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 탄산나트륨 용액으로 PH=7.0으로 조정하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다.
잔류물을 디클로로메탄/메탄올(6/1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 48% B에서 68% B로, 68% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 7.5로 정제하여 6-((9R)-4-(1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((9S)-4-(1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민을 수득하였다. 6-((9R)-4-(1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SC, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 9분 내 20% B에서 20% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 4.52; RT2(분): 7.15; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 1.5 mL; 실행 수: 7로 분리하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(5.6 mg, 0.01 mmol, 2.3% 수율) 및 6-((R)-4-((S)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(4.2 mg, 0.0075 mmol, 1.7% 수율)을 수득하였다.
6-((9S)-4-(1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민을 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄 ART 셀룰로스-SC, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 10분 내 30% B에서 30% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 4.32; RT2(분): 7.71; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 1.3 mL; 실행 수: 2로 분리하여 6-((S)-4-((R)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(4.0 mg, 0.0073 mmol, 1.6% 수율) 및 6-((S)-4-((S)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(9.9 mg, 0.18 mmol, 4.1% 수율)을 수득하였다.
실시예 130a: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.88 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 9.1, 2.9 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.49 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 54.2 Hz, 1H), 4.45 (dd, J = 12.8, 5.6 Hz, 1H), 4.38 - 4.30 (m, 1H), 4.27 (s, 2H), 3.70 (dd, J = 15.6, 7.1 Hz, 1H), 3.52 (dd, J = 15.8, 5.8 Hz, 1H), 3.27 - 3.12 (m, 2H), 3.11 - 2.92 (m, 1H), 2.44 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 2.41 - 2.31 (m, 1H), 2.29 - 2.09 (m, 3H), 2.06 - 1.82 (m, 3H), 1.66 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 709.2 [M+H]+ 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IC-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH = 70:30; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 1.019분(제1 피크).
실시예 130b: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.88 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 9.1, 2.9 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.49 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 54.2 Hz, 1H), 4.45 (dd, J = 12.8, 5.6 Hz, 1H), 4.37 - 4.19 (m, 3H), 3.70 (dd, J = 15.6, 7.1 Hz, 1H), 3.52 (dd, J = 15.8, 5.8 Hz, 1H), 3.27 - 3.12 (m, 2H), 3.11 - 2.92 (m, 1H), 2.44 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 2.41 - 2.31 (m, 1H), 2.29 - 2.09 (m, 3H), 2.06 - 1.82 (m, 3H), 1.66 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 709.2 [M+H]+
키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IC-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH = 70:30; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 1.581분(제2 피크).
실시예 130c: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.88 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 9.1, 2.9 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.49 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 54.2 Hz, 1H), 4.45 (dd, J = 12.8, 5.6 Hz, 1H), 4.37 - 4.19 (m, 3H), 3.70 (dd, J = 15.6, 7.1 Hz, 1H), 3.52 (dd, J = 15.8, 5.8 Hz, 1H), 3.27 - 3.12 (m, 2H), 3.11 - 2.92 (m, 1H), 2.44 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 2.41 - 2.31 (m, 1H), 2.29 - 2.09 (m, 3H), 2.06 - 1.82 (m, 3H), 1.66 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 709.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 키랄팩 IC-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH = 70:30; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 1.093분(제1 피크).
실시예 130d: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.88 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 9.1, 2.9 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.49 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 54.2 Hz, 1H), 4.45 (dd, J = 12.8, 5.6 Hz, 1H), 4.38 - 4.30 (m, 1H), 4.27 (s, 2H), 3.70 (dd, J = 15.6, 7.1 Hz, 1H), 3.52 (dd, J = 15.8, 5.8 Hz, 1H), 3.27 - 3.12 (m, 2H), 3.11 - 2.92 (m, 1H), 2.44 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 2.41 - 2.31 (m, 1H), 2.29 - 2.09 (m, 3H), 2.06 - 1.82 (m, 3H), 1.66 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 709.2 [M+H]+ . 키랄 HPLC: 키랄팩 IC-3, 4.6*50 mm, 3 um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH = 70:30; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 2.390분(제2 피크).
실시예 131: 6-(4-((R)-1-(2-아미노-5-클로로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로:
단계 1: 6-(4-((R)-1-(2-아미노-5-클로로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
N,N-디메틸포름아미드(2 mL) 중 6-(4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(330.0 mg, 0.4800 mmol) 및 N-클로로숙신이미드(76.0 mg, 0.5700 mmol)의 용액을 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 그런 다음, 유기층을 염수로 세척하고 및 진공하에서 농축하였다. 잔류물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH C18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(0.1% FA), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 20% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8로 정제하여 표제 화합물(23.4 mg, 0.029 mmol, 6.2% 수율)을 수득하였다.
실시예 131: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.21 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 6.01 (s, 2H), 5.28 (d, J = 54.4 Hz, 1H), 4.42 - 4.30 (m, 2H), 4.07 (q, J = 10.3 Hz, 2H), 3.70 (dd, J = 15.6, 6.7 Hz, 1H), 3.52 - 3.37 (m, 2H), 3.15 - 2.95 (m, 3H), 2.83 - 2.81 (m, 1H), 2.36 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.19 - 2.09 (m, 1H), 2.08 - 2.02 (m, 2H), 1.80 - 1.76 (m, 2H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 725.1 [M+H]+
합성 경로
실시예 132: (R)-8-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민
단계 1: 5-(2-(((R)-1-(벤질아미노)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-8-일)아미노)에톡시)-7-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 디메틸 설폭사이드(5 mL) 중 (R)-2-((1-(벤질아미노)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-8-일)아미노)에탄-1-올(223.0 mg, 0.75 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(1.13 mL, 1.13 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 적가하고 15분 동안 교반한 후, (R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(500.0 mg, 0.75 mmol)을 첨가하고 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 물로 희석하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1:2)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(650.0 mg, 91% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 942 [M+H]+.
단계 2: (R)-N-벤질-8-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 1,2-디클로로에탄(3 mL) 중 5-[2-[[(8R)-1-(벤질아미노)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-8-일]아미노]에톡시]-7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-2,6-디클로로-8-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(200.0 mg, 0.21 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(136.0 mg, 1.06 mmol)의 용액에 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(65.0 mg, 0.26 mmol)를 첨가하고 70°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트(1:2)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(120.0 mg, 61% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 924 [M+H]+ .
단계 3: (R)-N-벤질-8-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(2 mL) 중 ((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메탄올(30.0 mg, 0.23 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.16 mL, 0.32 mmol, 테트라히드로퓨란 중 2 M)를 적가하고, 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 용액을 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 (R)-N-benzyl-8-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민(1150 mg, 0.16 mmol)의 용액 내로 옮기고 0°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(90.0 mg, 54% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1021 [M+H]+ .
단계 4: (R)-8-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민
트리플루오로메탄술폰산(0.1 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(1 mL) 중 (R)-N-벤질-8-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린-1-아민(90.0 mg, 0.09 mmol)의 혼합물을 25°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 혼합물을 진공하에 농축하고, 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH 플루오로 페닐, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 33% B에서 58% B로, 58% B; 파장: 220/254 nm) 정제하여 표제 화합물(13.0 mg, 21.4% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 691.2 [M+H]+
실시예 132: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 7.81 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 6.34 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 5.18 (d, J = 55.4 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 4.49 - 4.36 (m, 2H), 3.80 - 3.32 (m, 3H), 3.25 - 3.06 (m, 1H), 2.99 - 2.59 (m, 3H), 2.55 (s, 3H), 2.44 (dd, J = 2.1, 0.9 Hz, 3H), 2.38 - 2.19 (m, 2H), 2.20 - 1.53 (m, 4H).
실시예 133a 및 133b: 4-(1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민 및 4-(1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민
합성 경로
단계 1: 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피리다진-4-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 디메틸 술폭시드(70 mL) 중 (R)-2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피리다진-4-일)에틸)아미노)에탄-1-올(3.01 g, 9.96 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드[테트라히드로퓨란 중 1.0 M](22.9 mL, 22.9 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(5.10 g, 7.66 mmol)을 첨가하고 60°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 수용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 반응 용액을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축시켜 표제 화합물(9.40 g, 조)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 947.3 [M+H]+
단계 2: 4-(1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(100 mL) 중 7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피리다진-4-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(8.40 g, 8.86 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(3.43 g, 26.59 mmol)의 용액에 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(4.05 g, 15.95 mmol)를 첨가하고 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하였다. 유기층을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/디클로로메탄(1:5)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(4.00 g, 4.13 mmol, 46.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 929.3 [M+H]+
단계 3: 4-(1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민
테트라히드로퓨란(26 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(924.6 mg, 5.8 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드[테트라히드로퓨란 중 1.0 M](6.7 mL, 6.7 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 4-(1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민(1.80 g, 1.94 mmol)을 첨가하고 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 염화암모늄 수용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기층을 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/디클로로메탄(3:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(2.50 g, 1.52 mmol, 78.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1052.4 [M+H]+
단계 4: 4-(1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민 및 4-(1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민
트리플루오로메탄술폰산(2 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(20 mL) 중 4-(1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민(2.30 g, 1.40 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다.　종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다.　반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 반응 혼합물을 탄산 나트륨 수용액으로 pH=8로 조정하였다.　유기층을 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 27% B에서 57% B로; 파장: 254 nm; RT1(분): 6.5로 정제하여 4-(1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민(273.8 mg, 0.3 mmol, 28.2% 수율) 및 4-(1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민(255.8 mg, 0.3 mmol, 27.0% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. 벤질성 메틸의 라세미화가 관찰되었고, 이에 따라 부분입체 이성질체를 분취용 SFC로 하기의 조건하에서(컬럼: 키랄팩 IJ 컬럼, 30*150 mm 5 μm; 이동상 A: 이산화탄소, 이동상 B: 메탄올 w/ 0.1% 수산화 암모늄;　등용매: 25%B 9분, 주기 시간: 8부;　유량: 125 mL/분; 압력: 100바; 온도: 40ºC; 파장: 240 nm; RT1(분): 2.7분. 및 RT2(분): 4.6분으로 정제 및 분리하여 4-(1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민 및 4-(1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민(121.5 mg, 0.14 mmol, 12.8% 수율)을 단일의 부분입체 이성질체를 수득하였다.
실시예 133a: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.52 (dd, J = 4.9, 1.3 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 5.0, 2.1 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.27 (s, 2H), 6.10 (q, J = 6.9, 1H), 5.27 (d, J = 54.0 Hz, 1H), 4.50 (dd, J = 12.3, 6.4 Hz, 1H), 4.39 (dd, J = 12.5, 6.7 Hz, 1H), 4.13 - 3.92 (m, 2H), 3.77 (dd, J = 15.6, 6.8 Hz, 1H), 3.52 (dd, J = 15.7, 6.3 Hz, 1H), 3.13 - 2.95 (m, 3H), 2.88 - 2.68 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.17 - 2.05 (m, 1H), 2.05 - 1.90 (m, 2H), 1.88 - 1.68 (m, 3H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 692.2 [M+H]+
실시예 133b: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.52 (dd, J = 4.9, 1.3 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 5.0, 2.1 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.27 (s, 2H), 6.10 (q, J = 6.9, 1H), 5.27 (d, J = 54.0 Hz, 1H), 4.50 (dd, J = 12.3, 6.4 Hz, 1H), 4.39 (dd, J = 12.5, 6.7 Hz, 1H), 4.13 - 3.92 (m, 2H), 3.77 (dd, J = 15.6, 6.8 Hz, 1H), 3.52 (dd, J = 15.7, 6.3 Hz, 1H), 3.13 - 2.95 (m, 3H), 2.88 - 2.68 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.17 - 2.05 (m, 1H), 2.05 - 1.90 (m, 2H), 1.88 - 1.68 (m, 3H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 692.2 [M+H]+
실시예 133c: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.51 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.47 (s, 1H), 6.24 (s, 2H), 6.09 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.36 - 5.16 (m, 1H), 4.54 - 4.33 (m, 2H), 4.11 - 3.92 (m, 2H), 3.81 - 3.69 (m, 1H), 3.56 - 3.47 (m, 1H), 3.14 - 2.95 (m, 3H), 2.85 - 2.76 (m, 1H), 2.39 - 2.30 (m, 3H), 2.14 - 1.92 (m, 3H), 1.86 - 1.67 (m, 3H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 692.2 [M+H]+
LCMS 분석 조건(실시예 134-140의 경우). 이온 모드 양성을 갖는 DAD 및 ELSD 검출기가 장착된 애질런트 LCMS 시스템 상에서 방법 A: 를 사용하여 실험을 실시하였다. 사용된 컬럼은 워터스(Waters) 엑스-브리지(X-Bridge) C18, 50*2.1 mm*5 μm 또는 등가물(이동상: A: 물(0.04% 트리플루오로아세트산); B: 아세토니트릴(0.02% 트리플루오로아세트산)(4.5분 구배법을 사용)이고, 실제 방법은 화합물의 clog P 및 유량: 0.6 mL/분 또는 0.8 mL/분에 따라 달라질 것이다 220 nm에서 검출을 실시하였을 때, 컬럼 온도는 40°C 또는 50°C였다.
실시예 134: 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸피롤리딘-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-((9R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸피롤리딘-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(1-메틸피롤리딘-3-일)메탄올(0.15 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(50.4 mg, 0.050 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다.
단계 2: 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸피롤리딘-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-((9R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸피롤리딘-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(~0.03 mmol)의 용액을 25°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 생성물을 GILSON 281 및 시마쯔(Shimadzu) LCMS 2010A 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스티메이트(Xtimate) C18 컬럼, 25*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 포름산/물(0.225%), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 25 mL/분; 구배: 12.5분 내 30% B에서 70% B로; 파장: 254/220 nm로 정제하여 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸피롤리딘-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(16.1 mg)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 647.3 [M+H]+, RT1(min) 1.794
실시예 134: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (dd, J = 5.0, 1.8 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.68 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.22 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.74 (s, 2H), 4.50 - 4.30 (m, 3H), 4.30 - 4.21 (m, 1H), 3.90 - 3.48 (m, 3H), 3.45 - 3.36 (m, 2H), 3.01 - 2.63 (m, 5H), 2.39 - 2.33 (m, 3H), 2.29 - 2.05 (m, 1H), 2.01 - 1.65 (m, 1H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 647.3 [M+H]+
실시예 135: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
2-(4-메틸피페라진-1-일)에탄-1-올(0.15 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(50.4 mg, 0.050 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다.
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(~0.03 mmol)의 용액을 25°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 생성물을 GILSON 281 및 시마쯔(Shimadzu) LCMS 2010A 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스티메이트(Xtimate) C18 컬럼, 25*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 포름산/물(0.225%), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 25 mL/분; 구배: 12.5분 내 30% B에서 70% B로; 파장: 254/220 nm으로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(14.1 mg)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 676.3 [M+H]+, RT1(min) 1.744
실시예 135: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.53 - 4.38 (m, 3H), 4.29 - 4.21 (m, 1H), 3.69 - 3.60 (m, 1H), 3.42 - 3.33 (m, 2H), 3.12 - 2.71 (m, 6H), 2.67 - 2.52 (m, 3H), 2.44 - 2.09 (m, 6H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 676.3 [M+H]+
실시예 136: 6-((R)-2-(2-(1H-피라졸-1-일)에톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-2-(2-(1H-피라졸-1-일)에톡시)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
2-(1H-피라졸-1-일)에탄-1-올(0.15 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(50.4 mg, 0.050 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다.
단계 2: 6-((R)-2-(2-(1H-피라졸-1-일)에톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-2-(2-(1H-피라졸-1-일)에톡시)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(~0.03 mmol)의 용액을 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 생성물을 GILSON 281 및 시마쯔(Shimadzu) LCMS 2010A 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스티메이트(Xtimate) C18 컬럼, 25*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 포름산/물(0.225%), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 25 mL/분; 구배: 12.5분 내 30% B에서 70% B로; 파장: 254/220 nm으로 정제하여 6-((R)-2-(2-(1H-피라졸-1-일)에톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(6.1 mg)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 644.2 [M+H]+, RT1(분) 1.979
실시예 136: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.01 - 7.95 (m, 1H), 7.82 - 7.67 (m, 2H), 7.48 - 7.43 (m, 1H), 6.77 (d, J = 17.7 Hz, 3H), 6.53 - 6.44 (m, 2H), 6.25 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 6.22 - 6.14 (m, 1H), 4.76 - 4.67 (m, 2H), 4.55 - 4.48 (m, 2H), 4.48 - 4.39 (m, 1H), 4.30 (s, 1H), 3.73 - 3.61 (m, 1H), 3.45 - 3.36 (m, 2H), 2.38 - 2.34 (m, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H).LC-MS: (ESI, m/z): 644.2 [M+H]+
실시예 137: 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸피페리딘-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-((9R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸피페리딘-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(1-메틸피페리딘-3-일)메탄올(0.15 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(50.4 mg, 0.050 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다.
단계 2: 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸피롤리딘-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-((9R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸피페리딘-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(~0.03 mmol)의 용액을 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 생성물을 GILSON 281 및 시마쯔(Shimadzu) LCMS 2010A 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스티메이트(Xtimate) C18 컬럼, 25*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 포름산/물(0.225%), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 25 mL/분; 구배: 12.5분 내 30% B에서 70% B로; 파장: 254/220 nm로 정제하여 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸피페리딘-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(10.4 mg)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 661.3 [M+H]+ , RT1(분) 2.131
실시예 137: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.4, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.22 (q, J = 6.0, 5.3 Hz, 1H), 5.70 (s, 2H), 4.48 - 4.40 (m, 1H), 4.40 - 4.30 (m, 1H), 4.30 - 4.18 (m, 2H), 3.71 - 3.62 (m, 1H), 3.58 - 3.35 (m, 3H), 2.77 (s, 5H), 2.35 (s, 3H), 2.30 - 2.15 (m, 1H), 1.90 - 1.61 (m, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.36 - 1.20 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 661.3 [M+H]+
실시예 138: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-모르폴리노에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-모르폴리노에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
2-모르폴리노에탄-1-올(0.15 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(50.4 mg, 0.050 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물을 황갈색 오일로 수득하였다.
단계 2: 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸피롤리딘-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-모르폴리노에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(~0.03 mmol)의 용액을 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 생성물을 GILSON 281 및 시마쯔(Shimadzu) LCMS 2010A 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스티메이트(Xtimate) C18 컬럼, 25*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 포름산/물(0.225%), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 25 mL/분; 구배: 12.5분 내 30% B에서 70% B로; 파장: 254/220 nm으로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-모르폴리노에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(14.0 mg)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 663.3 [M+H]+, RT1(분) 1.78
실시예 138: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (dd, J = 5.0, 1.8 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.74 - 6.67 (m, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.23 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.84 (s, 2H), 4.62 (s, 2H), 4.49 - 4.38 (m, 1H), 4.32 - 4.22 (m, 1H), 3.83 - 3.58 (m, 5H), 3.44 - 3.34 (m, 2H), 2.94 (d, J = 36.4 Hz, 3H), 2.80 - 2.52 (m, 2H), 2.36 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 1.57 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 663.3 [M+H]+
실시예 139: 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸피롤리딘-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-((9R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸피롤리딘-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
2-(1-메틸피롤리딘-2-일)에탄-1-올(0.15 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(50.4 mg, 0.050 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다.
단계 2: 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸피롤리딘-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-((9R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸피롤리딘-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(~0.03 mmol)의 용액을 25°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 생성물을 GILSON 281 및 시마쯔(Shimadzu) LCMS 2010A 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스티메이트(Xtimate) C18 컬럼, 25*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 포름산/물(0.225%), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 25 mL/분; 구배: 12.5분 내 30% B에서 70% B로; 파장: 254/220 nm으로 정제하여 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸피롤리딘-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(14.5 mg)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 661.3 [M+H]+, RT1(분) 2.138
실시예 139: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 5.0 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.70 (s, 2H), 4.53 - 4.37 (m, 3H), 4.30 - 4.21 (m, 1H), 3.71 - 3.60 (m, 1H), 3.42 - 3.34 (m, 2H), 2.88 - 2.65 (m, 3H), 2.41 - 2.14 (m, 6H), 2.02 - 1.81 (m, 3H), 1.80 - 1.65 (m, 1H), 1.56 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 661.3 [M+H]+
실시예 140: 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-메틸모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-((9R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-메틸모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(4-메틸모르폴린-3-일)메탄올(0.15 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((R)-1-((R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(50.4 mg, 0.050 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다.
단계 2: 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-메틸모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-((9R)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-메틸모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(~0.03 mmol)의 용액을 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축하였다. 생성물을 GILSON 281 및 시마쯔(Shimadzu) LCMS 2010A 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스티메이트(Xtimate) C18 컬럼, 25*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 포름산/물(0.225%), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 25 mL/분; 구배: 12.5분 내 30% B에서 70% B로; 파장: 254/220 nm으로 정제하여 6-((9R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-메틸모르폴린-3-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(14.2 mg)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 663.3[M+H]+, RT1(분) 1.78
실시예 140: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.98 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.68 (dd, J = 7.5, 5.0 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.27 - 6.19 (m, 1H), 5.72 (s, 2H), 4.55 (dd, J = 12.3, 4.0 Hz, 1H), 4.42 (dd, J = 12.2, 4.8 Hz, 2H), 4.27 (dd, J = 11.4, 8.0 Hz, 1H), 3.90 (s, 1H), 3.75 (s, 1H), 3.69 - 3.32 (m, 7H), 2.81 (s, 3H), 2.36 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 1.57 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 663.3[M+H]+
애질런트 10-분 LCMS 방법(실시예 141-157의 경우): ESI를 이온화 소스로 사용하는 Agilent MSD(6140) 질량 분석기와 결합된 Agilent 1290 UHPLC에서 실험을 실시하였다. LC 분리는 0.4 ml/분의 유량으로 페노메넥스(Phenomenex) XB-C18, 1.7 um, 50 × 2.1 mm 컬럼 상에서 실시하였다. MPA(이동상 A)는 0.1% FA가 포함된 물이고 MPB(이동상 B)는 0.1% FA가 포함된 아세토니트릴이었다. 구배는 2% MPB에서 시작하여 7분에 걸쳐 98% MPB에서 종결시키고 1.5분 동안 평형화시킨 후 98% MPB에서 1.5분 동안 유지시켰다. LC 컬럼 온도는 40°C였다. UV 흡광도를 220 nm 및 254 nm에서 수집하고, 질량 스펙 전체 스캔을 모든 실험에 적용하였다.
실시예 141: 6-((R)-2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메탄올(42 mg, 0.37 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(152 mg)을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다. LC-MS: (ESI, m/z): 987.0 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.101 mmol)의 용액을 50°C에서 3시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 애질런트 1290 인피니티(Infinity) II 오토스케일(Autoscale) 분취용 LC/MS로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 수산화 암모늄), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 20% B에서 60% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.61(원치않는 회전장애이성질체 4.08)로 정제하여 6-((R)-2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(22.7mg, 0.035 mmol, 34.7% 수율)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 646.2 [M+H]+.
실시예 141: 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 7.97 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.68 - 6.62 (m, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.25 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.67 (s, 2H), 4.50 (s, 1H), 4.43 (dd, J = 11.9, 5.8 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 11.9, 6.6 Hz, 1H), 3.69 - 3.61 (m, 1H), 3.60 (s, 2H), 3.42 - 3.34 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 1.87 - 1.79 (m, 2H), 1.56 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.52 - 1.46 (m, 2H). LC-MS: (ESI, m/z): 646.2 [M+H]+
실시예 142: 4-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((4-시아노테트라히드로-2H-피란-4-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
4-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴(52 mg, 0.5 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(630.7 mg, 0.57 mmol, 52.3% 수율)을 황갈색 오일로 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1014.9 [M+H]+
단계 2: 4-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((4-시아노테트라히드로-2H-피란-4-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.099 mmol)의 용액을 25°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 인터침 퓨리플래시(Interchim PuriFlash) 4250 HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 수산화 암모늄), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 20% B에서 60% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.69(원치않는 회전장애이성질체 4.14)로 정제하여 4-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴(24.47 mg, 0.036 mmol, 36.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 673.2 [M+H]+
실시예 142: 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.22 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.52 - 4.40 (m, 3H), 4.32 - 4.25 (m, 1H), 3.93 (d, J = 12.2 Hz, 2H), 3.71 - 3.63 (m, 1H), 3.58 - 3.49 (m, 2H), 3.46 - 3.38 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.03 - 1.92 (m, 2H), 1.82 - 1.72 (m, 2H), 1.58 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 673.2 [M+H]+
실시예 143: 6-((R)-2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-1-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-1-일)메톡시)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-1-일)메탄올(51 mg, 0.44 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(150 mg, 0.149 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(129 mg)을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다. LC-MS: (ESI, m/z): 986.9 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-1-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-1-일)메톡시)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.101 mmol)의 용액을 25°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 인터침 퓨리플래시(Interchim PuriFlash) 4250 HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 트리아트(Triart) C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 수산화 암모늄), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 20% B에서 60% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.68(원치않는 회전장애이성질체 4.17)로 정제하여 6-((R)-2-((2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-1-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(21.38 mg, 0.0331 mmol, 32.65% 수율)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 646.1 [M+H]+
실시예 143: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 5.0, 1.8 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.69 (dd, J = 7.5, 5.0 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.26 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.79 (s, 2H), 4.59 (q, J = 12.0 Hz, 2H), 4.46 - 4.38 (m, 1H), 4.30 - 4.22 (m, 1H), 3.70 (s, 2H), 3.68 - 3.59 (m, 1H), 3.41 - 3.34 (m, 1H), 2.94 - 2.89 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 1.84 (p, J = 3.3 Hz, 2H), 1.57 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.50 - 1.40 (m, 2H). LC-MS: (ESI, m/z): 646.1 [M+H]+
실시예 144: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄올(49 mg, 0.37 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg g, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(113 mg)을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다. LC-MS: (ESI, m/z): 1002.0 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.125 mmol)의 용액을 25°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 애질런트 1290 인피니티(Infinity) II 오토스케일(Autoscale) 분취용 LC/MS로 하기의 조건하에서:　컬럼: 트리아트(Triart) C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 수산화 암모늄), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 30% B에서 70% B로; 파장: 254 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.80(원치않는 회전장애이성질체 4.32)으로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(30.65 mg, 0.046 mmol, 37.1% 수율)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 662.2 [M+H]+
실시예 144: 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.96 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.68 - 6.62 (m, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.74 (s, 2H), 4.47 - 4.40 (m, 1H), 4.31 - 4.24 (m, 1H), 4.20 - 4.13 (m, 2H), 3.70 - 3.62 (m, 3H), 3.60 - 3.52 (m, 2H), 3.43 - 3.36 (m, 1H), 2.39 - 2.34 (m, 3H), 1.67 - 1.59 (m, 2H), 1.57 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.36 - 1.30 (m, 2H), 1.10 (s, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 662.2 [M+H]+
실시예 145: (1R,3r)-3-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)시클로부탄-1-올
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2-(((1r,3R)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로부틸)메톡시)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
((1r,3r)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로부틸)메탄올(81 mg, 0.37 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(119 mg)을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다. LC-MS: (ESI, m/z): 1087.95 [M+H]+
단계 2: (1R,3r)-3-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)시클로부탄-1-올
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2-(((1r,3R)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로부틸)메톡시)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.092 mmol)의 용액을 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 인터침 퓨리플래시(Interchim PuriFlash) 4250 HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 트리아트(Triart) C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 수산화 암모늄), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 5% B에서 50% B로; 파장: 260 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.42(원치않는 회전장애이성질체 3.88)로 정제하여 (1R,3r)-3-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)시클로부탄-1-올(14.33 mg, 0.023 mmol, 24.6% 수율)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 634.2[M+H]+
실시예 145: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 5.1, 1.9 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.71 (dd, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.26 - 6.18 (m, 1H), 6.04 (s, 2H), 5.00 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.47 - 4.40 (m, 1H), 4.36 - 4.22 (m, 4H), 3.67 (dd, J = 15.4, 6.3 Hz, 1H), 3.40 (dd, J = 14.2, 6.7 Hz, 1H), 2.39 - 2.33 (m, 3H), 2.18 - 1.89 (m, 5H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 634.2[M+H]+
실시예 146: (1S,3s)-3-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)시클로부탄-1-올
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2-(((1s,3S)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로부틸)메톡시)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
((1s,3s)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로부틸)메탄올메탄올(81 mg, 0.374 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(116 mg)을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다. LC-MS: (ESI, m/z): 1087.95 [M+H]+
단계 2: (1S,3s)-3-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)시클로부탄-1-올
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2-(((1s,3S)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로부틸)메톡시)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.092 mmol)의 용액을 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 인터침 퓨리플래시(Interchim PuriFlash) 4250 HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 수산화 암모늄), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 20% B에서 60% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.42(원치않는 회전장애이성질체 3.90)로 정제하여 (1S,3s)-3-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)시클로부탄-1-올(13.25 mg, 0.021 mmol, 18.2% 수율)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 634.1 [M+H]+
실시예 146: 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6,ppm) δ 7.98 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.76 - 6.69 (m, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.27 - 5.99 (m, 3H), 5.02 (s, 1H), 4.47 - 4.39 (m, 1H), 4.29 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 4.02 - 3.93 (m, 1H), 3.73 - 3.62 (m, 1H), 3.44 - 3.38 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.34 - 2.27 (m, 2H), 2.19 - 2.04 (m, 2H), 1.70 - 1.60 (m, 2H), 1.57 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 634.1 [M+H]+
실시예 147: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((테트라히드로-1H-피롤리딘-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(63 mg, 0.45 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(150 mg, 0.149 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(121 mg)을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다. LC-MS: (ESI, m/z): 1012.95 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((테트라히드로-1H-피롤리딘-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.099 mmol)의 용액을 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 인터침 퓨리플래시(Interchim PuriFlash) 4250 HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 포름산), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 5% B에서 50% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 2.89(원치않는 회전장애이성질체 3.30)로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(24.84 mg, 0.037 mmol, 37.4% 수율)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 673.2[M+H]+
실시예 147: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 8.18 (s, 1H), 7.97 (dd, J = 5.0, 1.8 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.26 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.71 (s, 2H), 4.43 (dd, J = 10.8, 6.4 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 10.5, 7.2 Hz, 1H), 4.15 (s, 2H), 3.68 - 3.61 (m, 1H), 3.42 - 3.32 (m, 2H), 3.09 - 3.02 (m, 2H), 2.73 - 2.64 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.02 - 1.92 (m, 2H), 1.91 - 1.75 (m, 4H), 1.70 - 1.61 (m, 2H), 1.56 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 673.2[M+H]+
실시예 148: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)메탄올(72 mg, 0.37 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg g, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(119 mg)을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다. LC-MS: (ESI, m/z): 1064.90 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.094 mmol)의 용액을 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 인터침 퓨리플래시(Interchim PuriFlash) 4250 HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 트리아트(Triart) C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 포름산), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 20% B에서 60% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.72(원치않는 회전장애이성질체 4.18)로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(33.98 mg, 0.047 mmol, 49.9% 수율)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 725.2 [M+H]+
실시예 148: 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 7.97 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.74 - 6.69 (m, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.22 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 6.09 (s, 2H), 4.48 - 4.40 (m, 1H), 4.34 - 4.26 (m, 1H), 4.25 - 4.19 (m, 2H), 3.72 - 3.65 (m, 1H), 3.63 - 3.56 (m, 2H), 3.46 - 3.39 (m, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.75 - 2.69 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 1.95 - 1.83 (m, 3H), 1.57 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.41 - 1.29 (m, 2H). LC-MS: (ESI, m/z): 725.2 [M+H]+
실시예 149: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-(메톡시메틸)-2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-1-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-(메톡시메틸)-2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-1-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(4-(메톡시메틸)-2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-1-일)메탄올(60 mg, 0.38 mmol)을 디-tert-부틸(3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(107 mg)을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다. LC-MS: (ESI, m/z): 1029.85 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-(메톡시메틸)-2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-1-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-(메톡시메틸)-2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-1-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.097 mmol)의 용액을 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 인터침 퓨리플래시(Interchim PuriFlash) 4250 HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 포름산), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 5% B에서 50% B로; 파장: 210 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.72(원치않는 회전장애이성질체 4.19)로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-(메톡시메틸)-2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-1-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(23.77 mg, 0.034 mmol, 35.5% 수율)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 690.2 [M+H]+
실시예 149: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 7.99 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.85 - 6.73 (m, 3H), 6.59 - 6.39 (m, 2H), 6.23 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.57 (q, J = 12.0 Hz, 2H), 4.49 - 4.41 (m, 1H), 4.36 - 4.29 (m, 1H), 3.74 - 3.65 (m, 1H), 3.63 - 3.58 (m, 4H), 3.44 (dd, J = 15.3, 5.8 Hz, 1H), 3.28 - 3.25 (m, 4H), 2.36 (s, 3H), 1.79 - 1.74 (m, 2H), 1.61 - 1.48 (m, 5H). LC-MS: (ESI, m/z): 690.2 [M+H]+
실시예 150: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메톡시시클로부틸)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메톡시시클로부틸)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
2-(1-메톡시시클로부틸)에탄-1-올(49 mg, 0.38 mmol)을 디-tert-부틸(3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(115 mg)을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다. LC-MS: (ESI, m/z): 1001.95 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메톡시시클로부틸)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메톡시시클로부틸)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.10 mmol)를 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 애질런트 1290 인피니티(Infinity) II 오토스케일(Autoscale) 분취용 LC/MS로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 수산화 암모늄), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 30% B에서 70% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 4.03(원치않는 회전장애이성질체 4.56)으로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메톡시시클로부틸)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(21.0 mg, 0.032 mmol, 31.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 662.2 [M+H]+
실시예 150: 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.97 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.69 - 6.64 (m, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.26 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.46 - 4.32 (m, 3H), 4.28 - 4.21 (m, 1H), 3.66 - 3.58 (m, 1H), 3.39 - 3.32 (m, 1H), 3.10 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.21 - 2.11 (m, 2H), 2.10 - 2.00 (m, 2H), 2.00 - 1.89 (m, 2H), 1.72 - 1.50 (m, 5H).
LC-MS: (ESI, m/z): 662.2 [M+H]+
실시예 151: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-플루오로에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-플루오로에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
2-플루오로에탄-1-올(24 mg, 0.37 mmol)을 디-tert-부틸(3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(105.0 mg)을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다. LC-MS: (ESI, m/z): 936.00 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메톡시시클로부틸)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-플루오로에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.101 mmol)를 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 인터침 퓨리플래시(Interchim PuriFlash) 4250 HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 포름산), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 5% B에서 50% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.57(원치않는 회전장애이성질체 4.05)로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메톡시시클로부틸)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(27.23 mg, 0.043 mmol, 42.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 596.1 [M+H]+
실시예 151: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6,ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 7.6, 2.2 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 5.63 (s, 2H), 4.85 - 4.69 (m, 2H), 4.67 - 4.54 (m, 2H), 4.45 - 4.39 (m, 1H), 4.30 - 4.22 (m, 1H), 3.68 - 3.59 (m, 1H), 3.41 - 3.34 (m, 1H), 2.38 - 2.34 (m, 3H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 596.1 [M+H]+
실시예 152: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄올(44 mg, 0.38 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(109 mg)을 황갈색 오일로 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 987.9 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중의 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.10 mmol)를 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 인터침 퓨리플래시(Interchim PuriFlash) 4250 HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 트리아트(Triart) C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 수산화 암모늄), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 30% B에서 70% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.66(원치않는 회전장애이성질체 4.15)으로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((4-테트라히드로-2H-피란-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(28.33 mg, 0.044 mmol, 43.2% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 648.1 [M+H]+
실시예 152: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6,ppm) δ 7.96 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.24 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.46 - 4.39 (m, 1H), 4.30 - 4.17 (m, 3H), 3.91 - 3.83 (m, 2H), 3.69 - 3.60 (m, 1H), 3.42 - 3.32 (m, 3H), 2.38 - 2.34 (m, 3H), 2.06 - 1.97 (m, 1H), 1.71 - 1.63 (m, 2H), 1.56 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.33 (qd, J = 12.3, 4.6 Hz, 2H). LC-MS: (ESI, m/z): 648.1 [M+H]+
실시예 153: 1-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)시클로프로판-1-카르보니트릴
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((1-시아노시클로프로필)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
1-(히드록시메틸)시클로프로판-1-카보니트릴(37 mg, 0.381 mmol)을 디-tert-부틸(3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(119 mg)을 황갈색 오일로 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 968.9 [M+H]+
단계 2: 1-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)시클로프로판-1-카르보니트릴
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((1-시아노시클로프로필)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.103 mmol)를 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 인터침 퓨리플래시(Interchim PuriFlash) 4250 HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 수산화 암모늄), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 20% B에서 60% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.76(원치않는 회전장애이성질체 4.21)로 정제하여 1-((((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)메틸)시클로프로판-1-카르보니트릴(26.8 mg, 0.043 mmol, 41.3% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 629.1 [M+H]+
실시예 153: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 7.97 (dd, J = 4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.66 - 7.59 (m, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.50 - 6.45 (m, 1H), 6.23 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.61 (s, 2H), 4.47 - 4.32 (m, 3H), 4.26 (dd, J = 11.2, 7.3 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 15.5, 6.9 Hz, 1H), 3.44 - 3.34 (m, 1H), 2.36 (tt, J = 2.1, 1.2 Hz, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.41 - 1.28 (m, 2H), 1.28 - 1.21 (m, 2H). LC-MS: (ESI, m/z): 629.1 [M+H]+
실시예 154: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(플루오로메틸)-2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(플루오로메틸)-2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(1-(플루오로메틸)-2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메탄올(55 mg, 0.38 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(119 mg)을 황갈색 오일로 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1017.95 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(플루오로메틸)-2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중의 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(플루오로메틸)-2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100.0 mg, 0.098 mmol)를 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 애질런트 1290 인피니티(Infinity) II 오토스케일(Autoscale) 분취용 LC/MS로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 수산화 암모늄), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 30% B에서 70% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.73(원치않는 회전장애이성질체 4.20)로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(플루오로메틸)-2-옥사비시클로[2.1.1]헥산-4-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(55.9 mg, 0.0824 mmol, 84.0% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 678.1 [M+H]+
실시예 154: 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.96 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.24 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.70 (s, 2H), 4.67 (s, 3H), 4.57 (s, 1H), 4.46 - 4.40 (m, 1H), 4.30 - 4.22 (m, 1H), 3.72 (s, 2H), 3.69 - 3.60 (m, 1H), 3.43 - 3.36 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 1.91 - 1.81 (m, 2H), 1.66 - 1.50 (m, 5H). LC-MS: (ESI, m/z): 678.1 [M+H]+
실시예 155: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-메톡시-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-메톡시-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
메탄올(12 mg, 0.37 mmol)을 디-tert-부틸(3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(108 mg)을 황갈색 오일로 수득하고, 이를 다음 단계로 옮겼다. LC-MS: (ESI, m/z): 903.95 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-메톡시-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-메톡시-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100 mg, 0.11 mmol)를 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 애질런트 1290 인피니티(Infinity) II 오토스케일(Autoscale) 분취용 LC/MS로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 포름산), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 5% B에서 50% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.41(원치않는 회전장애이성질체 4.91)로 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-메톡시-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(15.47 mg, 0.027 mmol, 24.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 564.1 [M+H]+
실시예 155: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.96 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 7.9, 1.8 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.66 (dd, J = 7.4, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.27 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H), 4.43 (dd, J = 12.3, 6.4 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 12.1, 7.0 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.68 - 3.59 (m, 1H), 3.40 - 3.36 (m, 1H), 2.38 - 2.34 (m, 3H), 1.55 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 564.1 [M+H]+
실시예 156: 2-(((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)에탄-1-올
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에탄-1-올(65 mg, 0.36 mmol)을 디-tert-부틸(3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(125 mg, 0.124 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(129 mg)을 황갈색 오일로 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1047.9 [M+H]+
단계 2: 2-(((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)에탄-1-올
트리플루오로아세트산(2 mL) 중의 tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(100.0 mg, 0.095 mmol)를 55ºC에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 애질런트 1290 인피니티(Infinity) II 오토스케일(Autoscale) 분취용 LC/MS로 하기의 조건하에서:　컬럼: 트리아트(Triart) C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 포름산), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 5% B에서 50% B로; 파장: 254 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.24(원치않는 회전장애이성질체 4.66)로 정제하여 2-(((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-2-일)옥시)에탄-1-올(14.8 mg, 0.025 mmol, 26.1% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 594.1 [M+H]+
실시예 156: 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.97 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.67 (dd, J = 7.6, 4.8 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.27 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.63 (s, 2H), 4.89 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.45 - 4.32 (m, 3H), 4.27 - 4.21 (m, 1H), 3.74 (q, J = 5.3 Hz, 2H), 3.66 - 3.58 (m, 1H), 3.40 - 3.32 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 1.56 (d, J = 6.7 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 594.1 [M+H]+
실시예 157: 6-((R)-2-((2-옥사비시클로[2.2.2]옥탄-4-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: tert-부틸 (3-((1R)-1-(2-((2-옥사비시클로[2.2.2]옥탄-4-일)메톡시)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트
(2-옥사비시클로[2.2.2]옥탄-4-일)메탄올(63 mg, 0.443 mmol)을 디-tert-부틸 (3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)이미노카르복실레이트(150 mg, 0.149 mmol)와 반응시켜 조 표제 화합물(131 mg)을 황갈색 오일로 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1013.9 [M+H]+
단계 2: 6-((R)-2-((2-옥사비시클로[2.2.2]옥탄-4-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로아세트산(2 mL) 중의 tert-부틸 (3-((1R)-1-(2-((2-옥사비시클로[2.2.2]옥탄-4-일)메톡시)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리딘-2-일)카바메이트(100 mg, 0.099 mmol)의 용액을 55°C에서 5시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 생성물을 인터침 퓨리플래시(Interchim PuriFlash) 4250 HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH Prep C18 50*30 mm, 5 μm; 샘플 용매: DMSO; 이동상 A: 물(물 중 0.1% 수산화 암모늄), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 30% B에서 70% B로; 파장: 240 nm; 컬럼 온도: 25°C; 애질런트 10-분 LCMS 방법 체류 시간(분): 3.82(원치않는 회전장애이성질체 4.31)로 정제하여 6-((R)-2-((2-옥사비시클로[2.2.2]옥탄-4-일)메톡시)-4-((R)-1-(2-아미노피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(27.32 mg, 0.041 mmol, 41.1% 수율)을 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 674.2 [M+H]+
실시예 157: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.96 (dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.65 (dd, J = 7.4, 4.9 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.21 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.73 (s, 2H), 4.48 - 4.39 (m, 1H), 4.31 - 4.22 (m, 1H), 4.04 (s, 2H), 3.72 - 3.61 (m, 4H), 3.44 - 3.35 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 1.98 - 1.84 (m, 2H), 1.69 - 1.51 (m, 9H). LC-MS: (ESI, m/z): 674.2 [M+H]+
실시예 158a 및 158b: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로
단계 1: (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메탄올
아세톤(50 mL) 중 l-프롤리놀(4.8 mL, 49.4 mmol), 2,2-디플루오로에틸 트리플루오로메탄술포네이트(12.70 g, 59.3 mmol) 및 탄산 칼륨(20.50 g, 148.3 mmol)의 용액을 25°C에서 8시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 여과하였다. 여액을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:8)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메탄올(6.00 g, 36.3 mmol, 73.5% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 166.1 [M-H]+
단계 2: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
테트라히드로퓨란(4 mL) 중 (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일]메탄올(142.1 mg, 0.8 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(30.9 mg, 1.3 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-N-[(4-메톡시페닐)메틸]피라진-2-아민(400.0 mg, 0.4 mmol)을 첨가하고 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 물로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:8)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(390.0 mg, 0.4 mmol, 85.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
단계 3: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
트리플루오로아세트산(3 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.3 mL) 중 3-[(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-8-클로로-3-[[(2S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일]메톡시]-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]-N-[(4-메톡시페닐)메틸]피라진-2-아민(300.0 mg, 0.28 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH = 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(10:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9.5분 내 46% B에서 65% B로, 65% B; 파장: 254/220 nm) 추가 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(39.6 mg, 0.06 mmol, 19.7% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)피롤리딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(30.6 mg, 0.04 mmol, 15.4% 수율)을 수득하였다.
실시예 158a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 7.96 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 6.39 - 5.85 (m, 4H), 4.53 (dd, J = 12.4, 6.1 Hz, 1H), 4.42 - 4.24 (m, 2H), 4.14 (dd, J = 10.8, 6.7 Hz, 1H), 3.84 (dd, J = 15.3, 6.3 Hz, 1H), 3.66 - 3.52 (m, 1H), 3.41 - 3.22 (m, 1H), 3.15 - 3.06 (m, 1H), 3.05 - 2.98 (m, 1H), 2.95 - 2.71 (m, 1H), 2.48 - 2.41 (m, 4H), 2.00 - 1.85 (m, 1H), 1.80 - 1.62 (m, 3H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS (ESI, m/z): 698.1 [M+H]+.
실시예 158b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6 , ppm) δ 7.95 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.42 (s, 2H), 6.33 - 5.86 (m, 2H), 4.70 - 4.55 (m, 1H), 4.43 - 4.32 (m, 1H), 4.26 (dd, J = 10.8, 5.1 Hz, 1H), 4.15 (dd, J = 10.8, 6.7 Hz, 1H), 3.99 - 3.85 (m, 1H), 3.70 - 3.57 (m, 1H), 3.38 - 3.20 (m, 1H), 3.16 - 2.96 (m, 2H), 2.90 - 2.69 (m, 1H), 2.48 - 2.33 (m, 4H), 2.09 - 1.85 (m, 1H), 1.81 - 1.70 (m, 2H), 1.69 - 1.53 (m, 4H). LCMS (ESI, m/z): 698.1 [M+H]+.
실시예 159a 및 159b: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로:
단계 1: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-올(128.0 mg, 0.80 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(75.0 mg, 1.88 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 0°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(250.0 mg, 0.27 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 염수로 세척하였다. 잔류물을 메틸렌 클로라이드/메탄올(3:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(90.0 mg, 0.085 mmol, 31.8% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1152.5 [M+H]+
단계 2: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
트리플루오로아세트산(1 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.1 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(90.0 mg, 0.09 mmol)의 용액을 25°C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 17% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.9로 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(6.8 mg, 0.0098 mmol, 11.5% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(5.1 mg, 0.0074 mmol, 8.6% 수율)을 수득하였다.
실시예 159a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.36 (s, 2H), 6.22 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.07 - 4.93 (m, 1H), 4.55 (dd, J = 11.9, 6.9 Hz, 1H), 4.39 (dd, J = 11.9, 6.2 Hz, 1H), 3.87 (dd, J = 15.5, 6.2 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 15.6, 6.9 Hz, 1H), 3.43 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.31 - 3.30 (m, 1H), 3.24 (s, 3H), 2.81 - 2.59 (m, 2H), 2.49 - 2.47 (m, 1H), 2.37 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 2.32 - 2.17 (m, 2H), 2.05 - 1.90 (m, 1H), 1.87 - 1.75 (m, 1H), 1.74 - 1.63 (m, 1H), 1.62 - 1.46 (m, 4H). LC-MS: (ESI, m/z): 692.1 [M+H]+
실시예 159b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.36 (s, 2H), 6.22 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.07 - 4.93 (m, 1H), 4.55 (dd, J = 11.9, 6.9 Hz, 1H), 4.39 (dd, J = 11.9, 6.2 Hz, 1H), 3.87 (dd, J = 15.5, 6.2 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 15.6, 6.9 Hz, 1H), 3.43 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.31 - 3.30 (m, 1H), 3.24 (s, 3H), 2.81 - 2.59 (m, 2H), 2.49 - 2.47 (m, 1H), 2.37 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 2.32 - 2.17 (m, 2H), 2.05 - 1.90 (m, 1H), 1.87 - 1.75 (m, 1H), 1.74 - 1.63 (m, 1H), 1.62 - 1.46 (m, 4H). LC-MS: (ESI, m/z): 692.1 [M+H]+
실시예 160a 및 160b: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-5-플루오로-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-5-플루오로-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로:
단계 1: 6-브로모-3-플루오로-N-(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(150 mL) 중 6-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(8.0 g, 16.15 mmol)의 용액에 1-클로로메틸-4-플루오로-1,4-디아조니아비시클로[2.2.2]옥탄비스(테트라플루오로보레이트)(1.14 g, 32.3 mmol)를 첨가하고, 40°C에서 17시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응물을 포화 메타중아황산나트륨 용액으로 켄칭하였다.　반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 물/아세토니트릴(3:2)로 용출하면서 역상 컬럼 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-브로모-3-플루오로-N-(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(750 mg, 1.6405 mmol, 10.2% 수율)을 주황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 393.1 [M+H]+
단계 2: (R)-7-브로모-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 테트라히드로퓨란(15 mL) 중 (R)-2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에탄-1-올(1.44 g, 4.77 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(0.33 g, 13.65 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 용액을 테트라히드로퓨란(15 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(1.5 g, 4.55 mmol)에 첨가하고 0oC에서 2시간 교반하였다.　종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물로 추출하고 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄(1:25)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-7-브로모-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(1.10 g, 1.80 mmol, 39.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 612.2 [M+H]+
단계 3: (R)-3-(1-(9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(15 mL) 중 (R)-7-브로모-2,6-디클로로-8-플루오로-5-(2-((1-(3-((4-메톡시벤질)아미노)피라진-2-일)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온 (1.24 g, 2.03 mmol)의 용액에 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(1.03 g, 4.05 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(1.06 mL, 6.08 mmol)을 첨가하고 70°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/석유 에테르(3:2)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-3-(1-(9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(800.0 mg, 1.35 mmol, 66.5% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 594.2 [M+H]+
단계 4: 3-((1R)-1-(2,8-디클로로-10-플루오로-9-(5-플루오로-6-((4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(3.0 mL) 중 (R)-3-(1-(9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(300.0 mg, 0.5 mmol)의 용액을 -78oC에서 교반하였다. 그런 다음, 이소프로필 마그네슘 클로라이드 리튬 클로라이드(0.51 mL, 0.66 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1.3 M)을 첨가하고, -78°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 염화 아연(0.76 mL, 1.51 mmol, 2-테트라히드로퓨란 중 2 M)을 -78°C에서 첨가하고 25°C에서 30분 동안 교반하였다.　질소하에서, 용액을 테트라히드로퓨란(2 mL) 중 6-브로모-3-플루오로-N-(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(216.0 mg, 0.55 mmol) 및 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(90.0 mg, 0.08 mmol)의 용액에 25°C에서 첨가하였다. 생성된 용액을 80oC에서 1시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응물을 물로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 아세토니트릴/물(6:1)로 용출하면서 C18 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((1R)-1-(2,8-디클로로-10-플루오로-9-(5-플루오로-6-((4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(100.0 mg, 0.12 mmol, 23.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 827.6 [M+H]+
단계 5: 3-((1R)-1-(8-클로로-10-플루오로-9-(5-플루오로-6-((4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
테트라히드로퓨란(1.0 mL) 중 ((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(40.0 mg, 0.2500 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(25.0 mg, 0.63 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-((1R)-1-(2,8-디클로로-10-플루오로-9-(5-플루오로-6-((4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(100.0 mg, 0.1200 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((1R)-1-(8-클로로-10-플루오로-9-(5-플루오로-6-((4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(80.0 mg, 0.08 mmol, 69.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 950.3 [M+H]+
단계 6: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-5-플루오로-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-5-플루오로-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
트리플루오로아세트산(1.0 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.1 mL) 중 3-((1R)-1-(8-chloro-10-fluoro-9-(5-fluoro-6-((4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(60.0 mg, 0.06 mmol)의 용액을 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH 플루오로 페닐, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 44% B에서 64% B로, 64% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 7.35로 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-5-플루오로-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(2.7 mg, 0.004 mmol, 6% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-5-플루오로-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2R,7aS)-2-플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(7.4 mg, 0.01 mmol, 16.5% 수율)을 수득하였다.
실시예 160a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.19 (s, 2H), 6.40 (s, 2H), 6.28 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 54.3 Hz, 1H), 4.55 (dd, J = 12.2, 6.4 Hz, 1H), 4.37 (dd, J = 11.9, 6.3 Hz, 1H), 4.04 (s, 2H), 3.87 (dd, J = 15.8, 6.4 Hz, 1H), 3.63 (dd, J = 15.5, 6.7 Hz, 1H), 3.08 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.98 (s, 1H), 2.82 (dd, J = 15.2, 8.3 Hz, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.16 - 2.08 (m, 1H), 2.06 - 1.92 (m, 2H), 1.89 - 1.68 (m, 3H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 710.2 [M+H]+
실시예 160b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.20 (s, 2H), 6.49 (s, 2H), 6.26 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 54.4 Hz, 1H), 4.63 (dd, J = 11.7, 6.9 Hz, 1H), 4.40 (dd, J = 11.9, 6.1 Hz, 1H), 4.10 - 3.89 (m, 3H), 3.67 (dd, J = 15.6, 7.0 Hz, 1H), 3.15 - 3.03 (m, 2H), 2.98 (s, 1H), 2.87 - 2.76 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.19 - 2.08 (m, 1H), 2.07 - 1.92 (m, 2H), 1.89 - 1.71 (m, 3H), 1.60 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 710.2 [M+H]+
실시예 161a 및 161b: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
합성 경로
단계 1: 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
테트라히드로퓨란(4.0 mL) 중 ((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메탄올(226.0 mg, 0.2500 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(44.0 mg, 0.5 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 25°C에서 15분 동안 교반하였다.　그런 다음, 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(343.0 mg, 0.4 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 염화암모늄 수용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 그런 다음, 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고, 진공하에 농축하여 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(586.0 mg, 0.5 mmol, 조)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1096.4 [M+H]+
단계 3: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
트리플루오로메탄술폰산(1.0 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(10.0 mL) 중 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(586.0 mg, 0.5 mmol)의 용액을 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다.　반응 혼합물을 탄산나트륨 수용액으로 pH=8로 조정하고, 염화나트륨 수용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다.　잔류물을 디클로로메탄/메탄올(11:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH C18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 11% B에서 26% B로, 26% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8로 추가 정제하여 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(20.1 mg, 0.1 mmol, 13.9% 수율) 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(23.6 mg, 0.1 mmol, 11.8% 수율)을 수득하였다.
실시예 161a: 1H NMR (400 MHz, Methanol- d 6, ppm) δ 8.42 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 6.46 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.81 - 4.62 (m, 2H), 4.56 (dd, J = 12.5, 6.3, 1.5 Hz, 1H), 4.46 - 4.34 (m, 1H), 3.95 (dd, J = 12.6, 5.8 Hz, 1H), 3.89 - 3.73 (m, 2H), 3.71 - 3.62 (m, 1H), 3.45 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.25 - 3.11 (m, 1H), 2.55 (dd, J = 14.0, 6.2 Hz, 1H), 2.48 - 2.38 (m, 4H), 2.31 - 2.19 (m, 2H), 2.18 - 2.02 (m, 2H), 1.79 - 1.67 (m, 5H).LC-MS: (ESI, m/z): 736.3 [M+H]+
실시예 161b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.37 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 6.91 (s, 2H), 6.82 (s, 2H), 6.47 (s, 1H), 6.20 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 12.0, 6.7 Hz, 1H), 4.36 (dd, J = 12.0, 6.2 Hz, 1H), 4.26 - 4.04 (m, 2H), 3.79 (dd, J = 15.4, 6.2 Hz, 1H), 3.46 (dd, J = 15.5, 6.9 Hz, 1H), 3.15 - 2.90 (m, 2H), 2.76 - 2.65 (m, 1H), 2.59 - 2.52 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.13 - 1.95 (m, 2H), 1.89 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 1.84 - 1.67 (m, 2H), 1.67 - 1.37 (m, 6H). LC-MS: (ESI, m/z): 736.3 [M+H]+
실시예 162a & 162b & 162c & 162d: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
테트라히드로퓨란(6 mL) 중 (3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메탄올(263.2 mg, 1.6 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(64.5 mg, 2.6 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(500.0 mg, 0.5 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(900.0 mg, 0.8 mmol, 조)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):1056.4 [M+H]+
단계 2: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(1.0 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(10.0 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-((3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(900.0 mg, 0.8 mmol, 조)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다.　잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH = 8로 조정하였다. 용액을 디클로로메틴으로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(11:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다.　생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 38% B에서 55% B로, 55% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.83으로 추가 정제하여 더 빠른 피크(78.0 mg)　및 더 느린 피크(161.5 mg)를 황색 고체로서 수득하였다. 그런 다음, 더 빠른 피크(78.0 mg)를 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) ID, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: IPA--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 22분 내 20% B에서 20% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 14.983; RT2(분): 17.898; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 1.1 mL; 실행 수: 4로 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(10.5 mg, 0.1 mmol, 2.7% 수율) 및 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(17.9 mg, 0.1 mmol, 4.3% 수율)을 수득하였다. 더 느린 피크(161.5 mg)를 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IE, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex: DCM=3: 1(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 15분 내 20% B에서 20% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 17.046; RT2(분): 20.554; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 0.5 mL; 실행 수: 9로 정제하여 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(25.8 mg, 0.1 mmol, 6.2% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-3,3-디플루오로-1-아자비시클로[3.2.0]헵탄-5-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(27.0 mg, 0.1 mmol, 6.5% 수율)을 수득하였다.
실시예 162a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.47 (s, 1H), 6.40 (s, 2H), 6.29 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.55 (dd, J = 12.0, 6.5 Hz, 1H), 4.43 - 4.22 (m, 3H), 3.87 (dd, J = 15.5, 6.5 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 15.7, 6.5 Hz, 1H), 3.59 - 3.47 (m, 1H), 3.21 - 2.97 (m, 4H), 2.47 - 2.20 (m, 6H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 696.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩　ID-34.6*50　mm,3　um, 4.6*50　mm, 3　um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=90:10; 유량: 1.0 mL/분, 체류 시간: 2.846분(제1 피크).
실시예 162b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.47 (s, 1H), 6.40 (s, 2H), 6.29 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.55 (dd, J = 12.0, 6.5 Hz, 1H), 4.43 - 4.22 (m, 3H), 3.87 (dd, J = 15.5, 6.5 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 15.7, 6.5 Hz, 1H), 3.59 - 3.47 (m, 1H), 3.21 - 2.97 (m, 4H), 2.47 - 2.20 (m, 6H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H).LC-MS: (ESI, m/z): 696.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩　ID-34.6*50　mm,3　um, 4.6*50　mm, 3　um; 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):IPA=90:10; 유량: 1.0 mL/분, 체류 시간: 4.641분(제2 피크).
실시예 162c: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.93 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.48 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 6.26 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.71 - 4.58 (m, 1H), 4.46 - 4.16 (m, 3H), 4.07 - 3.85 (m, 1H), 3.78 - 3.62 (m, 1H), 3.59 - 3.44 (m, 1H), 3.29 - 2.98 (m, 3H), 2.78 - 2.54 (m, 2H), 2.45 - 2.20 (m, 5H), 1.60 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 696.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IE-3, 4.6*50　mm, 3 um 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=80:20; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 2.613분(제1 피크).
실시예 162d: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.93 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.45 (d, J = 13.1 Hz, 3H), 6.25 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.62 (dd, J = 11.8, 6.8 Hz, 1H), 4.46 - 4.20 (m, 3H), 3.96 (dd, J = 15.6, 6.2 Hz, 1H), 3.68 (dd, J = 15.7, 7.0 Hz, 1H), 3.58 - 3.41 (m, 1H), 3.26 - 2.98 (m, 3H), 2.77 - 2.57 (m, 1H), 2.47 - 2.17 (m, 6H), 1.60 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 696.2 [M+H]+. 키랄 HPLC: 컬럼: 키랄팩 IE-3, 4.6*50　mm, 3 um 이동상: (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=80:20; 유량: 1.0 mL/분; 체류 시간: 3.346분(제2 피크).
실시예 163a 및 163b: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로
단계 1: ((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메탄올
질소하에서, 테트라히드로퓨란(10.0 mL) 중 에틸 (1R,7a'S)-2,2-디플루오로-5'-옥소디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-카르복실레이트(400.0 mg, 1.5 mmol)의 용액에 수소화 알루미늄 리튬(351.8 mg, 9.2 mmol)을 25°C에서 첨가하고, 60°C에서 30분 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 황산 나트륨 십수화물로 켄칭하고, 테트라히드로퓨란으로 희석하고 여과하였다. 여액을 진공하에 농축시켜 ((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메탄올(392.7 mg, 조)을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):204.1 [M+H]+
단계 2: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
테트라히드로퓨란(4.0 mL) 중 ((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메탄올(262.3 mg, 1.2 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(51.6 mg, 2.1 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 25°C에서 15분 동안 교반하였다.　그런 다음, 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(400.0 mg, 0.40 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 염화암모늄 수용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 그런 다음, 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고, 진공하에 농축하였다.　잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(1:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(434.0 mg, 0.3 mmol, 91.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1096.4 [M+H]+
단계 3: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(1.0 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(10.0 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(200.0 mg, 0.2 mmol)의 용액을 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다.　반응 혼합물을 포화 탄산나트륨 수용액을 사용하여 pH=8로 조정하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다.　잔류물을 디클로로메탄/메탄올(11:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 47% B에서 72% B로, 72% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.28로 추가 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(42.3 mg,0.1 mmol, 13.9% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((1R,7a'S)-2,2-디플루오로디히드로-1'H,3'H-스피로[시클로프로판-1,2'-피롤리진]-7a'(5'H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(35.8 mg,0.1 mmol, 11.8% 수율)을 수득하였다.
실시예 163a: 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.47 (s, 1H), 6.39 (s, 2H), 6.30 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 12.0, 6.6 Hz, 1H), 4.35 (dd, J = 12.0, 6.3 Hz, 1H), 4.25 - 4.07 (m, 2H), 3.85 (dd, J = 15.6, 6.5 Hz, 1H), 3.60 (dd, J = 15.4, 6.6 Hz, 1H), 3.15 - 2.91 (m, 2H), 2.70 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.61 - 2.52 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.12 - 1.92 (m, 2H), 1.91 - 1.67 (m, 3H), 1.66 - 1.36 (m, 6H). LC-MS: (ESI, m/z): 736.3 [M+H]+
실시예 163b: 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6, ppm) δ 7.93 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.48 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 6.28 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.61 (dd, J = 11.8, 6.9 Hz, 1H), 4.47 - 4.31 (m, 1H), 4.21 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.08 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.94 (dd, J = 15.4, 6.2 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 15.5, 7.0 Hz, 1H), 3.16 - 2.92 (m, 2H), 2.70 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.60 - 2.52 (m, 1H), 2.41 - 2.30 (m, 3H), 2.11 - 1.93 (m, 2H), 1.93 - 1.67 (m, 3H), 1.67 - 1.37 (m, 6H). LC-MS: (ESI, m/z): 736.3 [M+H]+
실시예 164a 및 164b: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
합성 경로
단계 1: 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
테트라히드로퓨란(5.0 mL) 중 (S)-(1-메틸피롤리딘-2-일)메탄올(0.1 mL, 0.94mmol)의 용액에 수소화 나트륨(53.8 mg, 1.34 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(250.0 mg, 0.27 mmol)을 첨가하고 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(419.0 mg, 0.28 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1008.4 [M+H]+
단계 2: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
트리플루오로아세트산(20.0 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(1.0 mL) 중 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(419.0 mg, 0.42 mmol)의 용액을 25°C에서 24시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 진공하에 농축하고 에틸 아세테이트로 희석하였다. 용액을 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH=8로 조정하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(4:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH C18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 33% B에서 59% B로, 59% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.18로 추가 정제하여 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(13.9 mg, 0.02 mmol, 5.1% 수율) 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(14.5 mg, 0.02 mmol, 5.4% 수율)을 수득하였다.
실시예 164a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.74 (s, 2H), 6.48 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.24 - 6.06 (m, 1H), 4.53 - 4.42 (m, 1H), 4.42 - 4.25 (m, 2H), 4.24 - 4.11 (m, 1H), 3.77 - 3.63 (m, 1H), 3.57 - 3.41 (m, 1H), 3.02 - 2.88 (m, 1H), 2.66 - 2.55 (m, 1H), 2.37 (d, J = 2.8 Hz, 6H), 2.24 - 2.11 (m, 1H), 2.02 - 1.84 (m, 1H), 1.76 - 1.64 (m, 3H), 1.61 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 648.3 [M+H]+
실시예 164b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.37 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 6.80 (s, 4H), 6.51 - 6.44 (m, 1H), 6.20 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.55 (dd, J = 12.1, 6.6 Hz, 1H), 4.44 - 4.28 (m, 2H), 4.20 (dd, J = 10.7, 6.4 Hz, 1H), 3.77 (dd, J = 15.5, 6.4 Hz, 1H), 3.45 (dd, J = 15.5, 6.8 Hz, 1H), 3.02 - 2.89 (m, 1H), 2.69 - 2.55 (m, 1H), 2.36 (d, J = 2.7 Hz, 6H), 2.18 (q, J = 8.5 Hz, 1H), 2.02 - 1.85 (m, 1H), 1.79 - 1.51 (m, 6H). LC-MS: (ESI, m/z): 648.3 [M+H]+
실시예 165a 및 165b: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
테트라히드로퓨란(5.0 mL) 중 (S)-(2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(173.4 mg, 1.51 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(86.0 mg, 2.15 mmol)을 첨가하고, 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(400.0 mg, 0.43 mmol)을 첨가하고 25°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(600 mg, 조)을 적색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1070.4 [M+H]+
단계 2: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 및 트리플루오로아세트산(5 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(600 mg, 조)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 진공하에 농축하고 에틸 아세테이트로 희석하였다. 용액을 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH=8로 조정하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(9:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH C18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 33% B에서 59% B로, 59% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.18로 추가 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(34.8 mg, 0.05 mmol, 14.3% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(49.1 mg, 0.07 mmol, 20.1% 수율)을 수득하였다.
실시예 165a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.51 - 6.45 (m, 1H), 6.39 (s, 2H), 6.28 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 11.9, 6.5 Hz, 1H), 4.35 (dd, J = 11.8, 6.3 Hz, 1H), 4.19 - 3.99 (m, 2H), 3.85 (dd, J = 15.6, 6.5 Hz, 1H), 3.59 (dd, J = 15.5, 6.6 Hz, 1H), 3.42 - 3.23 (m, 1H), 3.15 - 2.96 (m, 2H), 2.77 - 2.62 (m, 1H), 2.48 - 2.40 (m, 1H), 2.40 - 2.21 (m, 4H), 2.07 - 1.95 (m, 1H), 1.92 - 1.67 (m, 3H), 1.58 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
실시예 165b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.48 (d, J = 4.6 Hz, 3H), 6.27 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.61 (dd, J = 11.8, 6.9 Hz, 1H), 4.46 - 4.29 (m, 1H), 4.19 - 3.84 (m, 3H), 3.63 (dd, J = 15.6, 7.0 Hz, 1H), 3.16 - 2.97 (m, 2H), 2.78 - 2.63 (m, 1H), 2.44 - 2.16 (m, 5H), 2.11 - 1.94 (m, 1H), 1.92 - 1.66 (m, 4H), 1.59 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 710.4 [M+H]+
실시예 166a 및 166b: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
(R)-(2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(304.9 mg, 1.72 mmol)의 용액에 테트라히드로퓨란(6.0 mL) 중 수소화 나트륨(86.0 mg, 2.15 mmol, 60% 순도)를 첨가하고 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(400.0 mg, 0.43 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(600 mg, 조)을 적색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1070.4 [M+H]+
단계 2: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(1 mL) 및 트리플루오로아세트산(10 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(600 mg, 조)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응 용액을 진공하에 농축하고 에틸 아세테이트로 희석하였다. 용액을 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH=8로 조정하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(1:9)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH C18 OBD 컬럼 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 33% B에서 59% B로, 59% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.18로 추가 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(87.7 mg, 0.12 mmol, 37.2% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((R)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(11.2 mg, 0.02 mmol, 4.7% 수율)을 수득하였다.
실시예 166a： 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.47 (s, 1H), 6.35 (s, 2H), 6.28 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 12.0, 6.5 Hz, 1H), 4.35 (dd, J = 11.9, 6.4 Hz, 1H), 4.09 (s, 2H), 3.85 (dd, J = 15.7, 6.4 Hz, 1H), 3.60 (dd, J = 15.6, 6.6 Hz, 1H), 3.43 - 3.34 (m, 1H), 3.16 - 2.95 (m, 2H), 2.78 - 2.64 (m, 1H), 2.44 - 2.22 (m, 5H), 2.05 - 1.95 (m, 1H), 1.92 - 1.67 (m, 3H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 710.4 [M+H]+
실시예 166b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.93 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.46 (d, J = 8.7 Hz, 3H), 6.26 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.69 - 4.52 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 11.8, 6.1 Hz, 1H), 4.19 - 4.00 (m, 2H), 3.94 (dd, J = 16.0, 5.7 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 15.8, 6.8 Hz, 1H), 3.46 - 3.31 (m, 1H), 3.18 - 2.95 (m, 2H), 2.70 (q, J = 8.2 Hz, 1H), 2.46 - 2.22 (m, 5H), 2.06 - 1.94 (m, 1H), 1.93 - 1.67 (m, 3H), 1.59 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 710.4 [M+H]+
실시예 167a 및 167b: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
테트라히드로퓨란(3.0 mL) 중 2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에탄-1-올(101.7 mg, 0.8 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(38.7 mg, 1.6 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 25°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(250.0 mg, 0.2 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 생성된 용액을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 그런 다음, 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(1:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(282.5 mg, 조)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):1019.4 [M+H]+
단계 2: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(1.0 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(10.0 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-methyl-1H-imidazol-2-yl)ethoxy)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(200.0 mg, 0.2 mmol)의 용액을 25°C에서 10분 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고 탄산나트륨 수용액으로 pH=8로 조정하였다.　유기층을 염화나트륨 수용액으로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다.　잔류물을 디클로로메탄/메탄올(11:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼, 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 6.5분 내 38% B에서 45% B로; 파장: 220 nm; RT1(분): 6.6으로 추가 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(15.7 mg, 0.1 mmol, 11.7% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(2-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)에톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(10.5 mg, 0.1 mmol, 8.1% 수율)을 수득하였다.
실시예 167a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 6.76 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.39 - 6.23 (m, 3H), 4.74 - 4.57 (m, 2H), 4.52 (dd, J = 12.3, 6.5 Hz, 1H), 4.35 (dd, J = 12.1, 5.9 Hz, 1H), 3.83 (dd, J = 15.0, 6.7 Hz, 1H), 3.66 - 3.52 (m, 4H), 3.10 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 659.2 [M+H]+
실시예 167b: 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.77 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.41 (s, 2H), 6.28 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.70 - 4.54 (m, 3H), 4.37 (dd, J = 11.9, 6.1 Hz, 1H), 3.91 (dd, J = 15.4, 6.2 Hz, 1H), 3.71 - 3.56 (m, 4H), 3.10 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 659.3 [M+H]+
실시예 168a 및 168b: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((S)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
합성 경로
단계 1: (7R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-2,6-디클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
일반 절차 A.에 기재된 바와 유사하게, 디메틸 술폭시드(20 mL) 중 2-((1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)아미노)에탄-1-올(1.73 g, 3.94 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(테트라히드로퓨란 중 1.0 M)(11.2 mL, 11.2 mmol)를 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 용액을 디메틸 술폭시드(20 mL) 중 (R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,6-디클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(2.50 g, 3.76 mmol)에 첨가하고 60°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하여 (7R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-2,6-디클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(6.00 g, 조)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):1084.3 [M+H]+
단계 2: 6-((9R)-4-(1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
일반 절차 B.에 기재된 바와 유사하게, 클로로포름(60 mL) 중 (7R)-7-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-5-(2-((1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)아미노)에톡시)-2,6-디클로로-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(6.00 g, 조) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(3.8 mL, 22.1 mmol)의 용액을 교반하였다. 그런 다음, 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스피닉 클로라이드(2.81 g, 11.08 mmol)를 첨가하고, 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 그런 다음, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트/디클로로메탄(1:9)으로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-((9R)-4-(1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(2.30 g, 2.09 mmol, 37.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):1066.3 [M+H]+
단계 3: 6-((9R)-4-(1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
테트라히드로퓨란(5 mL) 중 ((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올(176.8 mg, 1.1 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(74.9 mg, 1.8 mmol, 60% 순도)을 첨가하고, 25°C에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 6-((9R)-4-(1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(400.0 mg, 0.3 mmol)을 첨가하고 25°C에서 8시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 6-((9R)-4-(1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(600 mg, 조)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z):1087.5 [M+H]+
단계 4: 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 및 6-((R)-4-((S)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
트리플루오로메탄술폰산(1 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(10 mL) 중 6-((9R)-4-(1-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(600 mg, 조)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 농축하였다.　잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH=8로 조정하였다. 용액을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(11:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2개의 생성물을 수득하였다.　2개의 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 17% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.9로 추가 정제하여 6-((R)-4-((R)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(50.1 mg, 0.07 mmol, 14% 수율) 및 6-((R)-4-((S)-1-(2-아미노-5-플루오로피리딘-3-일)에틸)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(59.0 mg, 0.08 mmol, 16.5% 수율)을 수득하였다.　
실시예 168a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.96 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.21 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.51 - 4.26 (m, 3H), 4.16 (dd, J = 10.9, 5.7 Hz, 1H), 3.78 - 3.35 (m, 6H), 3.14 (t, J = 10.3 Hz, 1H), 3.02 - 2.75 (m, 3H), 2.37 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.15 - 1.96 (m, 1H), 1.84 - 1.67 (m, 1H), 1.67 - 1.50 (m, 4H), 1.39 - 1.18 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z): 707.2 [M+H]+
실시예 168b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.24 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.77 (s, 2H), 4.58 - 4.26 (m, 3H), 4.11 (dd, J = 10.9, 5.4 Hz, 1H), 3.73 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 3.68 - 3.38 (m, 5H), 3.14 (t, J = 10.3 Hz, 1H), 3.04 - 2.78 (m, 3H), 2.37 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.15 - 1.97 (m, 1H), 1.86 - 1.68 (m, 1H), 1.59 (d, J = 6.8 Hz, 4H), 1.37 - 1.20 (m, 1H). LC-MS: (ESI, m/z):707.2 [M+H]+
실시예 169a 및 169b: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
합성 경로
단계 1: 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(4 mL) 중 ((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메탄올(150.3 mg, 1.13 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(75.2 mg, 1.88 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(350.0 mg, 0.38 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. LCMS (ESI, m/z): 1026.4 [M+H]+.
단계 2: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(400.0 mg, 조)의 용액을 25°C에서 16시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 아황산나트륨을 사용하여 PH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10.5분 내 32% B에서 50% B로; 파장: 220 nm; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 6.7; RT2(분): 9.2; 실행 수: 4로 정제하여 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(30.7 mg, 0.045 mmol, 19% 수율) 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(46.3 mg, 0.068 mmol, 28.8% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 169a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.38 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.78 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.16 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.19 (d, J = 56.3 Hz, 1H), 4.56 - 4.18 (m, 4H), 3.71 (dd, J = 15.5, 6.6 Hz, 1H), 3.60 - 3.35 (m, 2H), 3.32 - 3.29 (m, 1H), 3.03 - 2.89 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.43 (d, J = 2.4 Hz, 3H), 2.24 - 2.07 (m, 1H), 2.02 - 1.78 (m, 1H), 1.60 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS (ESI, m/z): 666.2 [M+H]+.
실시예 169b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.38 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 6.86 (s, 2H), 6.82 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.19 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.19 (d, J = 55.9 Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 11.8, 6.6 Hz, 1H), 4.45 - 4.29 (m, 3H), 3.79 (dd, J = 15.5, 6.3 Hz, 1H), 3.55 - 3.37 (m, 2H), 3.01 - 2.84 (m, 1H), 2.43 - 2.41(m, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.37 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.25 - 2.05 (m, 1H), 2.04 - 1.79 (m, 1H), 1.62 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS (ESI, m/z): 666.2 [M+H]+.
실시예 170a 및 170b: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
합성 경로
단계 1: 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(4 mL) 중 [(8S)-6,6-디플루오로-2,3,5,7-테트라히드로-1H-피롤리진-8-일)메탄올(171.5 mg, 0.97 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(64.5 mg, 1.61 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(1 mL) 중 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(300.0 mg, 0.32 mmol)을 첨가하고 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다.　LC-MS: (ESI, m/z):1070.4 [M+H]+
단계 2: 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 5-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리미딘-4-아민(450.0 mg, 0.42 mmol)의 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 PH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(92:8)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서:　컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 17% B에서 42% B로, 42% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.9로 정제하여 5-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(11.1 mg, 0.02 mmol, 3.6% 수율) 및 5-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-2,2-디플루오로테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리미딘-4-아민(14.3 mg, 0.02 mmol, 4.7% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 170a: 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 8.39 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.49 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.57 - 4.43 (m, 1H), 4.39 - 4.23 (m, 3H), 3.82 - 3.70 (m, 1H), 3.60 - 3.50 (m, 1H), 3.50 - 3.36 (m, 1H), 3.23 - 3.06 (m, 2H), 2.91 - 2.80 (m, 1H), 2.68 - 2.53 (m, 1H), 2.43 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.40 - 2.26 (m, 1H), 2.22 - 2.11 (m, 1H), 2.06 - 1.83 (m, 3H), 1.70 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 710.2 [M+H]+.
실시예 170b: 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 8.39 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 6.50 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.54 (dd, J = 12.5, 6.0 Hz, 1H), 4.40 - 4.23 (m, 3H), 3.80 (dd, J = 15.6, 6.7 Hz, 1H), 3.58 - 3.36 (m, 2H), 3.22 - 3.06 (m, 2H), 2.92 - 2.79 (m, 1H), 2.69 - 2.53 (m, 1H), 2.43 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.41 - 2.26 (m, 1H), 2.22 - 2.12 (m, 1H), 2.08 - 1.83 (m, 3H), 1.70 (d, J = 7.0 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 710.2 [M+H]+.
실시예 171a 및 171b: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자비시클로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(2 mL) 중 ((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메탄올(71.5 mg, 0.40 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.67 mL, 0.67 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 질소하에서, 반응 혼합물을 테트라히드로퓨란(5 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(250.0 mg, 0.27 mmol)의 용액에 25°C에서 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(1:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(130.2 mg, 0.11 mmol, 41.1% 수율)을 연주황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 1070.4 [M+H]+
단계 2: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자비시클로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(130.0 mg, 0.11 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 41% B에서 62% B로, 62% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.18로 추가 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(14.7 mg, 0.02 mmol, 18.4% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3S,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자비시클로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(12.0 mg, 0.02 mmol, 14.8% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 710.2 [M+H]+
실시예 171a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.35 (s, 2H), 6.29 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.58 - 4.47 (m, 1H), 4.43 - 4.25 (m, 3H), 3.92 - 3.77 (m, 1H), 3.65 - 3.53 (m, 1H), 2.94 - 2.69 (m, 2H), 2.60 - 2.51 (m, 1H), 2.42 - 2.27 (m, 6H), 2.26 - 2.11 (m, 1H), 1.81 - 1.68 (m, 1H), 1.65 - 1.33 (m, 5H). LC-MS: (ESI, m/z): 710.2 [M+H]+
실시예 171b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.87 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.38 (d, J = 13.2 Hz, 3H), 6.20 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.69 - 4.52 (m, 1H), 4.44 - 4.21 (m, 3H), 3.96 - 3.80 (m, 1H), 3.69 - 3.51 (m, 1H), 2.88 - 2.64 (m, 2H), 2.56 - 2.46 (m, 1H), 2.35 - 2.22 (m, 6H), 2.21 - 2.03 (m, 1H), 1.79 - 1.62 (m, 1H), 1.59 - 1.25 (m, 5H). LC-MS: (ESI, m/z): 710.2 [M+H]+
실시예 172a 및 172b: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자비시클로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(2 mL) 중 ((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메탄올(77.2 mg, 0.44 mmol)의 용액에 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(0.73 mL, 0.73 mmol, 테트라히드로퓨란 중 1 M)를 0°C에서 첨가하고, 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 질소하에서, 반응 혼합물을 테트라히드로퓨란(3 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(270.0 mg, 0.29 mmol)의 용액에 25°C에서 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 진공하에 농축하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/에틸 아세테이트(1:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(180.2 mg, 0.14 mmol, 48.6% 수율)을 연주황색 고체로서 수득하였다.　LC-MS: (ESI, m/z): 1070.4 [M+H]+
단계 2: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자비시클로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
트리플루오로아세트산(6 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.6 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(150.0 mg, 0.14 mmol)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다.　종료 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH >7로 조정하고, 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층을 취합하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(8:1)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(XSelect) CSH C18 OBD 컬럼, 30*150 mm, 5 μm, n; 이동상 A: 물(0.1% FA), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 23% B에서 37% B로, 37% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8, 10으로 추가 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자스피로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(15.0 mg, 0.02 mmol, 14.1% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((3R,6S)-1,1-디플루오로-5-메틸-5-아자비시클로[2.4]헵탄-6-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(29.1 mg, 0.04 mmol, 27.3% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 710.2 [M+H]+
실시예 172a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.96 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 6.37 - 6.18 (m, 3H), 4.57 - 4.19 (m, 4H), 3.90 - 3.76 (m, 1H), 3.63 - 3.49 (m, 1H), 3.04 - 2.81 (m, 2H), 2.46 - 2.39 (m, 1H), 2.39 - 2.31 (m, 6H), 2.10 - 1.95 (m, 1H), 1.93 - 1.79 (m, 1H), 1.59 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.52 - 1.34 (m, 2H). LC-MS: (ESI, m/z): 710.2 [M+H]+
실시예 172b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 6.41 (s, 2H), 6.29 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 4.66 - 4.53 (m, 1H), 4.45 - 4.20 (m, 3H), 3.98 - 3.83 (m, 1H), 3.68 - 3.56 (m, 1H), 3.10 - 2.83 (m, 2H), 2.45 - 2.26 (m, 7H), 2.12 - 1.98 (m, 1H), 1.95 - 1.75 (m, 1H), 1.60 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.53 - 1.32 (m, 2H). LC-MS: (ESI, m/z): 710.2 [M+H]+
실시예 173a 및 173b: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
테트라히드로퓨란(4 mL) 중 N-메틸-l-프롤리놀(61.9 mg, 0.54 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(32.2 mg, 0.81 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(280 mg, 0.25 mmol, 92.1% 수율)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다.　LC-MS: (ESI, m/z):1008.4 [M+H]+
단계 2: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
트리플루오로아세트산(5 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.5 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(280.0 mg, 0.28 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 PH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(93:7)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9.5분 내 40% B에서 60% B로; 파장: 254 nm; RT1(분): 6.2, 8.2(분): ; 실행 수: 2로 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(14.8 mg, 0.02 mmol, 8.1% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((S)-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(17.4 mg, 0.03 mmol, 9.6% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 173a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.43 - 6.22 (m, 3H), 4.53 (dd, J = 12.3, 6.3 Hz, 1H), 4.44 - 4.25 (m, 2H), 4.18 (dd, J = 10.8, 6.3 Hz, 1H), 3.84 (dd, J = 15.7, 6.5 Hz, 1H), 3.58 (dd, J = 15.5, 6.7 Hz, 1H), 3.11 - 2.85 (m, 1H), 2.60 - 2.52 (m, 1H), 2.37 - 2.36 (m, 6H), 2.25 - 2.11 (m, 1H), 2.03 - 1.86 (m, 1H), 1.81 - 1.62 (m, 3H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 648.3 [M+H]+.
실시예 173b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.81 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.41 (s, 2H), 6.29 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.69 - 4.52 (m, 1H), 4.45 - 4.32 (m, 1H), 4.32 - 4.15 (m, 2H), 3.92 (dd, J = 15.7, 6.2 Hz, 1H), 3.63 (dd, J = 15.6, 6.9 Hz, 1H), 3.03 - 2.88 (m, 1H), 2.59 - 2.52 (m, 1H), 2.36 (d, J = 3.6 Hz, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.25 - 2.12 (m, 1H), 2.03 - 1.87 (m, 1H), 1.77 - 1.62 (m, 3H), 1.59 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 648.2 [M+H]+.
실시예 174a 및 174b: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸아제티딘-3-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸아제티딘-3-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
합성 경로
단계 1: 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸아제티딘-3-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민
테트라히드로퓨란(3 mL) 중 3-히드록시-1-메틸아제티딘 염산염(66.5 mg, 0.54 mmol)의 혼합물에 수소화 나트륨(64.5 mg, 1.61 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민 [(4-메톡시페닐)메틸]-3-[rac-(1R)-1-[7-[6-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]-3,8-디클로로-6-플루오로-10-옥사-2,4,13-트리아자트리시클로[7.4.1.05,14]테트라데카-1,3,5(14),6,8-펜타엔-13-일]에틸]피라진-2-아민(250.0 mg, 0.27 mmol)을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 취합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. LC-MS: (ESI, m/z):980.4 [M+H]+
단계 2: 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸아제티딘-3-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸아제티딘-3-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민
　트리플루오로아세트산(3 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(0.3 mL) 중 3-((1R)-1-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸아제티딘-3-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-2-아민(320.0 mg, 0.33 mmol)의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 PH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄/메탄올(92:8)로 용출하면서 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10.5분 내 35% B에서 49% B로; 파장: 254 nm; RT1(분): 6, 8(분): ; 실행 수: 2로 정제하여 3-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸아제티딘-3-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(9.8 mg, 0.02 mmol, 4.7% 수율) 및 3-((R)-1-((S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-((1-메틸아제티딘-3-일)옥시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피라진-2-아민(16.4 mg, 0.03 mmol, 7.7% 수율)을 수득하였다. 표제 화합물의 입체 화학은 임의로 할당되었다.
실시예 174a: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.95 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.46 (s, 1H), 6.32 - 6.19 (m, 3H), 5.22 - 5.06 (m, 1H), 4.49 (dd, J = 11.8, 6.6 Hz, 1H), 4.34 (dd, J = 12.0, 6.1 Hz, 1H), 3.85 - 3.58 (m, 3H), 3.52 (dd, J = 15.8, 6.6 Hz, 1H), 3.08 - 2.90 (m, 2H), 2.35 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 620.1 [M+H]+.
실시예 174b: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 7.94 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 6.46 (s, 1H), 6.34 (s, 2H), 6.26 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.22 - 5.08 (m, 1H), 4.57 (dd, J = 11.9, 6.6 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 12.1, 6.2 Hz, 1H), 3.85 (dd, J = 15.6, 6.3 Hz, 1H), 3.74 - 3.51 (m, 3H), 3.04 - 2.91 (m, 2H), 2.35 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): 620.1 [M+H]+.
실시예 175: 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민
합성 경로
단계 1: 4-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(8 mL) 중 ((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메탄올(405.7 mg, 2.58 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(172.0 mg, 4.30 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 4-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민(800.0 mg, 0.86 mmol)을 첨가하고 0°C에서 2시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. LC-MS: (ESI, m/z): 1050.4 [M+H]+.
단계 2: 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민
트리플루오로메탄술폰산(1 mL) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산(10 mL) 중 4-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피라진-3-아민(840.0 mg, 조)의 용액을 25°C 에서 0.5시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 PH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 엑스브리지(XBridge) 쉴드(Shield) RP18 OBD 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 28% B에서 42% B로; 파장: 254/220 nm; RT1: 10분으로 정제하여 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-2-(((6S,8aS)-헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-6-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민(44.6 mg, 0.06 mmol, 20.1% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 690.4 [M+H]+.
실시예 175: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 8.54 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 4.9, 0.9 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.41 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.65 - 4.48 (m, 1H), 4.48 - 4.21 (m, 3H), 3.92 - 3.71 (m, 3H), 3.71 - 3.52 (m, 3H), 3.40 - 3.34 (m, 1H), 3.16 - 3.05 (m, 2H), 3.05 - 2.91 (m, 1H), 2.46 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 2.30 - 2.11 (m, 1H), 2.00 - 1.83 (m, 1H), 1.83 - 1.74 (m, 1H), 1.71 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.58 - 1.39 (m, 1H).
실시예 176: 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민
합성 경로
단계 1: 4-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(11 mL) 중 (S)-(1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메탄올(536.4 mg, 3.55 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(189.2 mg, 4.73 mmol, 광유 중 60% 분산액)을 첨가하고, 혼합물을 0°C에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 4-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민(1.1 g, 1.18 mmol)을 첨가하고 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 반응물을 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 정제없이 직접 사용할 것이다. LC-MS: (ESI, m/z): 1044.4 [M+H]+.
단계 2: 4-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민
2,2,2-트리플루오로아세트산(20 mL) 및 트리플루오로메탄술폰산(2.0 mL) 중 4-((R)-1-(9-((R)-6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)-N-(4-메톡시벤질)피리다진-3-아민(1.1 g, 조)의 용액을 25°C에서 1시간 동안 교반하였다. 종료 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 아황산나트륨을 사용하여 PH를 7로 조정하였다. 생성된 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시키고, 역상 크로마토그래피(아세토니트릴/물 중 0.1% NH4Cl)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: 아세토니트릴; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 26% B에서 51% B로; 254/220 nm; RT1: 8.88분으로 정제하여 4-((R)-1-((R)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-2-(((S)-1-(2,2-디플루오로에틸)아제티딘-2-일)메톡시)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)피리다진-3-아민(38.5 mg, 0.056 mmol, 13.3% 수율)을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): 684.2 [M+H]+.
실시예 176: 1H NMR (300 MHz, Methanol-d 4, ppm) δ 8.56 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 5.0, 1.0 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.44 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.87 (tdd, J = 56.4, 5.5, 3.2 Hz, 1H), 4.65 - 4.47 (m, 2H), 4.47 - 4.33 (m, 2H), 3.91 - 3.68 (m, 2H), 3.67 - 3.44 (m, 2H), 3.31 - 3.08 (m, 2H), 2.92 - 2.72 (m, 1H), 2.46 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 2.23 - 2.11 (m, 2H), 1.71 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 501: 6-(8-클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
단계 1: 7-브로모-6-클로로-5-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4-올
질소하에서, 테트라히드로퓨란(2 mL) 중 2-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)에탄-1-올(100 mg, 0.760 mmol)의 용액에 0 °C에서 60% NaH(181 mg, 4.55 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4-올(209 mg, 0.750 mmol)을 첨가하였다. 65°C에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산으로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0-100% ACN(0.05% NH4HCO3))으로 정제하여 145 mg(49% 수율)의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 389.
단계 2: 2-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민
질소하에서, 디클로로메탄(2.5 mL) 중 7-브로모-6-클로로-5-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4-올(125 mg, 0.320 mmol), PyBOP(251 mg, 0.480 mol) 및 DIPEA(415 mg, 0.800 mmol)의 용액을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 DCM으로 희석하고 물 및 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔의 플래시 크로마토그래피(구배: 0-30% MeOH/DCM)로 정제하여 113 mg(94% 수율)의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 371.
단계 3: 2-(8-클로로-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민
질소하에서 1,4-디옥산(2 mL) 중 2-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민(90.0 mg, 0.240 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란)(185 mg, 0.730 mmol), Pd(dppf)Cl2(35.0 mg, 0.050 mmol) 및 KOAc(71.0 mg, 0.730 mmol)의 혼합물을 80°C에서 5시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 여액을 EtOAc로 희석하고 물로 추출하였다. 생성물은 유기상이었다. 수성상을 진공하에 농축하여 90 mg(조)의 표제 화합물을 황색 고체로 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 337 (상응하는 보론산 질량). 조 생성물을 추가 정제없이 다음 단계에서 사용하였다.
단계 4：6-(8-클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서 아세토니트릴(1.5 mL) 및 물(0.3 mL) 중 2-(8-클로로-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민(80.0 mg, 0.190 mmol), 6-브로모-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(32.0 mg, 0.130 mmol), Pd(PPh3)4(14.0 mg, 0.0100 mmol) 및 K2CO3(35.0 mg, 0.260 mmol)의 용액을 100°C에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기상을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 Prep-HPLC(XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 um; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 30% B에서 60% B로; 254 nm; RT1: 6.33)로 정제하여 15.4 mg(26% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 467. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , ppm) δ 8.40 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.75 (s, 2H), 6.45 (s, 1H), 4.69 - 4.54 (m, 2H), 4.11 - 3.81 (m, 4H), 2.57 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.36 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 2.23 (s, 6H).
실시예 502: 2-((2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)(메틸)아미노)에탄-1-올
단계 1: tert-부틸 (2-((2-((7-브로모-6-클로로-4-히드록시퀴나졸린-5 일)옥시)에틸)아미노)에틸)(메틸)카바메이트
테트라히드로퓨란(20 mL) 중 tert-부틸 (2-((2-히드록시에틸)아미노)에틸)(메틸)카바메이트(682 mg, 3.13 mmol, 중간체 12)의 용액에 0oC에서 60% NaH(480 mg, 12.5 mmol)를 첨가하였다. 용액을 실온으로 가온하고 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-6-클로로-5-플루오로퀴나졸린-4-올(576 mg, 2.07 mmol)을 실온에서 첨가하고 65°C에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔의 플래시 크로마토그래피(구배: 0%-10% MeOH/DCM)로 정제하여 946 mg(95% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 475.1.
단계 2: tert-부틸 (2-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)(메틸)카바메이트
디클로로메탄(15 mL) 중 tert-부틸 (2-((2-((7-브로모-6-클로로-4-히드록시퀴나졸린-5 일)옥시)에틸)아미노)에틸)(메틸)카바메이트(700 mg, 1.47 mmol), DIPEA(2.85 g, 22.0 mmol) 및 PyBOP(3.06 g, 5.88 mmol)의 용액을 25°C에서 8시간 교반하였다. 생성된 혼합물을 디클로로메탄과 물 사이에 분배하였다. 유기상을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0%-100% MeOH(0.1% NH4HCO3))으로 정제하여 367 mg(54% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 457.1
단계 3: tert-부틸 (2-(8-클로로-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)(메틸)카바메이트
질소하에서 1,4-디옥산(10 mL) 중 tert-부틸 (2-(9-브로모-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)(메틸)카바메이트(347 mg, 0.760 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란)(579 mg, 2.28 mmol), KOAc(148 mg, 1.52 mmol) 및 PdCl2(dppf)(55.3 mg, 0.0700 mmol)의 용액을 100°C에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 석유와 EtOAc의 혼합물(석유 에테르/EtOAc = 10:1)로 처리하였다. 고체를 여과하였다. 여액을 감압하에 농축하여 385 mg의 (조) 표제 화합물을 수득하였다. 조 물질을 추가의 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 505.
단계 4: tert-부틸 (2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)(메틸)카바메이트
질소하에서 아세토니트릴(5 mL) 및 물(1 mL) 중 tert-부틸 (2-(8-클로로-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)(메틸)카바메이트(385 mg, 0.760 mmol), 6-브로모-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(193 mg, 0.760 mmol), KF(88.4 mg, 1.52 mmol) 및 Pd(PPh3)2Cl2(53.6 mg, 0.0800 mmol)의 혼합물을 100°C에서 1.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 주위 온도로 냉각하고 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기상을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0%-100% ACN(0.05% TFA))으로 정제하여 214 mg(50% 수율)의 표제 화합물을 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 553.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, ppm) δ 8.84 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.85 (s, 2H), 6.50 (s, 1H), 4.97 - 4.69 (m, 2H), 4.55 - 4.41 (m, 1H), 4.27 - 3.92 (m, 3H), 3.61 - 3.51 (m, 2H), 2.86 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 1.17 (s, 9H).
단계 5: 6-(8-클로로-4-(2-(메틸아미노)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 염산염
메틸 알코올(5 mL) 중 tert-부틸 (2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)에틸)(메틸)카바메이트(70.0 mg, 0.130 mmol)의 용액에 HCl/디옥산(5 mL, 4 M)을 첨가하였다. 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공하에 농축시켜 59.6 mg (조) 생성물을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 453.3. 조 물질을 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계 6: 6-(8-클로로-4-(2-(메틸아미노)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
아세토니트릴(5 mL) 중 6-(8-클로로-4-(2-(메틸아미노)에틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 염산염(57.3 mg, 0.130 mmol)의 용액에 DIPEA(49.9 mg, 0.390 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, 2-브로모에탄-1-올(31.5 mg, 0.250 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50oC에서 8시간 동안 교반하고 감압하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0%-100% ACN(0.1% NH4HCO3))으로 정제하여 31.0 mg(순수하지 않음)의 표제 화합물을 수득하였고, 이를 분취용-HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm, 5 um; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 17 B에서 47 B로; 254 nm; RT: 9.17.)로 정제하여 14.8 mg(23% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 497.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 8.38 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.73 (s, 2H), 6.44 (s, 1H), 4.71- 4.55 (m, 2H), 4.35 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.05 - 3.83 (m, 4H), 3.45 (dd, J = 11.6, 6.0 Hz, 2H), 2.68 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.50- 2.45 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.28 (s, 3H)
화합물 501-506은 실시예 501에 기재된 것과 유사한 실험 절차(적절하게 치환된 시약 사용)에 따라 제조되었다.
실시예 507 및 508: 2-((5S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-4-(피롤리딘-3-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(2개의 미공지 단일 이성질체)
단계 1: tert-부틸 3-(((S)-1-((7-브로모-6-클로로-4-히드록시퀴나졸린-5-일)옥시)-3-시아노프로판-2-일)아미노)피롤리딘-1-카복실레이트
질소하에서, 테트라히드로퓨란(3 mL) 중 tert-부틸 3-[[(1S)-1-(시아노메틸)-2-히드록시-에틸]아미노]피롤리딘-1-카르복실레이트(139 mg, 0.520 mmol, 중간체 15)의 용액에 60%NaH(31.4 mg, 0.790 mmol)를 0°C에서 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-6-클로로-5-플루오로-퀴나졸린-4-올(72.1 mg, 0.260 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 물로 켄칭하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔의 플래시 크로마토그래피(구배: 0%-10% MeOH/DCM)로 정제하여 130 mg(95.3% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 526.1.
단계 2: tert-부틸 3-((S)-9-브로모-8-클로로-5-(시아노메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(2개의 미공지 단일 이성질체)
1,2-디클로로에탄(4 mL) 중 tert-부틸 3-[[(1S)-1-[(7-브로모-6-클로로-4-히드록시-퀴나졸린-5-일)옥시메틸]-2-시아노-에틸]아미노]피롤리딘-1-카르복실레이트(110 mg, 0.210 mmol) 및 DIPEA(108 mg, 0.840 mmol)의 용액에 실온에서 BOPCl(159 mg, 0.630 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 생성된 용액을 60oC에서 밤새 교반하고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0-100% ACN(0.1% FA))으로 정제하여 65 mg(두 이성질체의 혼합물)의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 혼합물을 키랄-HPLC(컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IG, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 18 mL/min; 기울기: 22분 내 50% B에서 50% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 11.31; RT2(분): 22.07; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 2 mL; 실행 수: 5)로 분리하여 22.1 mg의 더 빠른 피크 및 24.1 mg의 더 느린 피크를 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 508.1.
단계 3: tert-부틸 3-((S)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5-(시아노메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(2개의 미공지 단일 이성질체)
질소하에서, 1,4-디옥산(2 mL) 중 tert-부틸 3-((S)-9-브로모-8-클로로-5-(시아노메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(20.1 mg, 0.040 mmol, 단계 2의 더 빠른 피크), N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-6-(트리부틸스탄닐)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(55.6 mg, 0.080 mmol, 중간체 10), Pd(PPh3)4(9.20 mg, 0.010 mmol), CuI(1.10 mg, 0.010 mmol) 및 LiCl(4.30 mg, 0.100 mmol)의 혼합물을 110°C에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 고체를 여과하였다. 여과액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔의 플래시 크로마토그래피(구배: 0%-40% EtOAc / DCM)로 정제하여 27.1 mg(81.2% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ =844.3.
상기 기재된 방법과 유사하게, 다른 이성질체 22.1 mg을 tert-부틸 3-((S)-9-브로모-8-클로로-5-(시아노메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(단계 2의 더 느린 피크) 및 N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-6-(트리부틸스탄닐)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(중간체 10)으로부터 제조하였다.
단계 4: 2-((5S)-9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-4-(피롤리딘-3-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(2개의 미공지 단일 이성질체)
2,2,2-트리플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 3-((S)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5-(시아노메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(26.9 mg, 0.030 mmol, 단계 3의 더 빠른 피크)의 용액을 50°C에서 5시간 동안 교반하였다. 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용 HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep C18 OBD 컬럼 30*100 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 16% B에서 40% B로 40% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 8.85; 실행 수: 0)로 정제하여 5.90 mg(36.7% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 504.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 , ppm) δ 8.49 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.76 (d, J = 12.1 Hz, 2H), 6.45 (s, 1H), 5.29 - 5.15 (m, 1H), 4.85 - 4.78 (m, 1H), 4.67 - 4.50 (m, 2H), 3.77 - 3.55 (m, 1H), 3.17 - 3.08 (m, 1H), 3.08 - 2.98 (m, 1H), 2.98 - 2.82 (m, 3H), 2.81 - 2.70 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.25 - 1.96 (m, 1H)
2,2,2-트리플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 3-((S)-9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-5-(시아노메틸)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(21.9 mg, 0.030 mmol, 단계 3의 더 느린 피크)의 용액을 50°C에서 5시간 동안 교반하였다. 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용 HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 22% B에서 45% B로, 45% B; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 9.92; 실행 수: 0)로 정제하여 4.40 mg(33.7% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 504.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 , ppm) δ 8.50 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.79 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 6.46 (s, 1H), 5.25 - 5.08 (m, 1H), 4.88 - 4.72 (m, 1H), 4.70 - 4.46 (m, 2H), 3.62 - 3.45 (m, 1H), 3.19 - 3.09 (m, 2H), 3.09 - 2.92 (m, 3H), 2.89 - 2.77 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.25 - 2.07 (m, 1H), 1.92 - 1.76 (m, 1H).
실시예 509: 6-(8-클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
단계 1: 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온
질소하에서, 테트라히드로퓨란(16 mL) 중 2-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)에탄-1-올(235 mg, 1.78 mmol)의 용액에 NaH(214 mg, 5.35 mmol)를 0°C에서 첨가하였다. 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-2,6-디클로로-5-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(552 mg, 1.77 mmol)을 0oC에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 65oC에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 물로 0oC에서 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피(구배: 0%-20% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여 230 mg(30% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 423.
단계 2: 2-(9-브로모-2,8-디클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민
질소하에서, 디클로로메탄(20 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)에톡시)퀴나졸린-4(3H)-온(350 mg, 0.830mmol), PyAOP(861 mg, 1.65 mmol) 및 DBU(376 mg, 2.48 mmol)의 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피(구배: 0%-20% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여 280 mg(84% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 405.
단계 3: 2-(9-브로모-8-클로로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 ((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일) 메탄올(49.5 mg, 0.370 mmol, 중간체 8)의 용액에 60%NaH(20.0 mg, 0.500 mmol)를 0°C에서 첨가하였다. 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 2-(9-브로모-2,8-디클로로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민(100 mg, 0.250 mmol)을 0°C에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 50oC에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산으로 켄칭하고 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피(구배: 0%-20% 메탄올/디클로로메탄)로 정제하여 120 mg(96% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 502.
단계 4: 2-(8-클로로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민
질소하에서 1,4-디옥산(14 mL) 중 2-(9-브로모-8-클로로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민(100 mg, 0.200 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란)(152 mg, 0.600 mmol), Pd(dppf)Cl2(29.0 mg, 0.0400 mmol) 및 KOAc(59.0 mg, 0.600 mmol)의 혼합물을 80°C에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 석유 에테르/에틸 아세테이트(9:1)의 혼합물을 첨가하였다. 고체를 여과하고, 여액을 감압하에서 농축하여 189 mg(조)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 468 (상응하는 보론산 질량 신호). 조 물질을 추가의 정제없이 다음 단계에서 사용하였다.
단계 5: 6-(8-클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 1,2-디메톡시에탄(1 mL) 및 물(0.2 mL) 중 6-브로모-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(4.80 mg, 0.0200 mmol) 및 2-(8-클로로-2-(((2S,4R)-4-플루오로-1-메틸피롤리딘-2-일)메톡시)-9-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민(94.0 mg, 0.180 mmol), Pd(PPh3)4(3.20 mg, 0.00300 mmol) 및 K2CO3(7.50 mg, 0.0500 mmol)의 용액을 100oC에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물과 EtOAc 사이에 분배하였다. 유기상을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0~100% ACN(0.05% NH4HCO3))으로 정제하여 20 mg의 조 생성물을 황색 고체로서 수득하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm, 5 um; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내 38% B에서 68% B로; 254 nm; RT1: 6.07분)로 다시 정제하여 7.1 mg(59% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 598. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 6.91 (s, 1H), 6.72 (s, 2H), 6.43 (s, 1H), 5.18 (d, J = 55.8 Hz, 1H), 4.65-4.49 (m, 2H), 4.40-4.28 (m, 1H), 4.27-4.15 (m, 1H), 4.05-3.90 (m, 3H), 3.91 - 3.79 (m, 1H), 3.50-3.35 (m, 1H), 2.94 - 2.85 (m, 1H), 2.55 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.39 (s, 4H), 2.34 (s, 3H), 2.21 (s, 6H), 2.16 - 2.04 (m, 1H), 1.96 - 1.75 (m, 1H).
화합물 509-512는 실시예 509에 기재된 것과 유사한 실험 절차(적절하게 치환된 시약 사용)에 따라 제조하였다.
실시예 513 및 514: 6-((R)-8-클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-10-플루오로-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로)-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(2개의 회전장애이성질체)
단계 1: 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)에톡시)-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
질소하에서 테트라히드로퓨란(6 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(190 mg, 1.44 mmol)의 용액에 60%NaH(190 mg, 4.77 mmol)를 첨가하고, 용액을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-2,6-디클로로-5,8-디플루오로-3H-퀴나졸린-4-온(524 mg, 1.59 mmol, 중간체 1)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 AcOH로 켄칭하고, 물과 DCM 사이에 분배하였다. 취합한 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0-100% ACN(0.05% NH4HCO3))으로 정제하여 510mg(72% 수율)의 표제 화합물을 갈색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 441.
단계 2: 2-(9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민
디클로로메탄(15 mL) 중 7-브로모-2,6-디클로로-5-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)에톡시)-8-플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(984 mg, 2.23 mmol), DIPEA(4.32 g, 33.3 mmol) 및 BOP-Cl(1.70 g, 6.67 mmol)의 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 진공하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0-100% ACN(0.05% NH4HCO3))으로 정제하여 338 mg(35% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 423.
단계 3: 6-(2,8-디클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(1.5 mL) 중 2-(9-브로모-2,8-디클로로-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민(200 mg, 0.473 mmol)의 용액에 iPrMgCl·LiCl(0.40 mL, THF 중 1.3 M)을 -78oC에서 첨가하고, 반응물을 -78oC에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, ZnCl2(0.28 mL, THF 중 2 M)를 -78oC에서 첨가하였다. 용액을 -78°C에서 15분 동안 교반하고 실온에서 추가로 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 테트라히드로퓨란(1.5 mL) 중 6-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(197 mg, 0.399 mmol, 중간체 10, 단계 1) 및 PdCl2(PPh3)2(29.0 mg, 0.0413 mmol)의 형성된 용액을 첨가하였다. 50oC에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물과 EtOAc 사이에 분배하였다. 유기층을 진공하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0-100% ACN(0.05% NH4HCO3))으로 정제하여 107 mg(29% 수율)의 표제 화합물을 연황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 759.
단계 4: 6-(8-클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-10-플루오로-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, 테트라히드로퓨란(2 mL) 중 (S)-(2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(25.9 mg, 0.169 mmol, 중간체 5)의 용액에 0 °C에서 60% NaH(20.3 mg, 0.510 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 6-(2,8-디클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-10-플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(107 mg, 0.140 mmol)을 첨가하고 반응물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응물을 AcOH로 켄칭하고, 물로 희석하고, DCM으로 3회 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피(DCM 중 0-20% MeOH)로 정제하여 75 mg(60% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 876.
단계 5: 6-((R)-8-클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-10-플루오로-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로)-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
TFA(3 mL) 중 6-(8-클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-10-플루오로-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(75.0 mg, 0.0857 mmol)의 용액을 50°C에서 5시간 동안 교반하였다. 진공하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0-100% ACN(0.05% NH4HCO3))으로 정제한 다음 분취용-HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm, 5 um; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 10분 내 32% B에서 62% B로; 254 nm; RT: 8.90분)로 추가 정제하여 17 mg(59% 수율)의 두 회전장애이성질체 혼합물을 수득하였다. 회전장애이성질체를 분취용 키랄 HPLC(컬럼: 키랄 아트(CHIRAL ART) 셀룰로스-SC, 2×25 cm,5 um; 이동상 A:Hex(10 mmol/L NH3), 이동상 B:EtOH; 유량:18 mL/분; 구배: 14분 내 50% B에서 50% B로; RT1:7.007분; RT2: 9.553분)로 분리하여 5.0 mg의 화합물 513 (더 빠른 피크) 및 3.9 mg의 화합물 514(더 느린 피크)를 수득하였다.
화합물 513: LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 636. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 6.78 (s, 2H), 6.47 (s, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.65-4.45 (m, 2H), 4.12 - 3.80 (m, 6H), 3.65-3.55 (m, 2H), 3.08-2.98 (m, 1 H), 2.70-2.55 (m, 5H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 6H), 2.01 - 1.73 (m, 4H)
화합물 514: LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 636. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, ppm) δ6.77 (s, 2H), 6.46 (s, 1H), 4.87 (s, 2H), 4.60-4.45 (m, 2H), 4.09 - 3.86 (m, 5H), 3.85 - 3.72 (m, 1H), 3.53 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 3.18 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 3.02-2.94 (m, 1H), 2.59 - 2.51 (m, 4H), 2.35 (s, 4H), 2.21 (s, 6H), 1.99-1.90 (m, 1H), 1.90 - 1.70 (m, 2H), 1.70 - 1.60 (m, 1H)
화합물 515-522는 실시예 513 및 514에 기재된 것과 유사한 실험 절차(적절하게 치환된 시약 사용)에 따라 제조되었다.
실시예 523 및 524: 6-((R)-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-8,10-디플루오로-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로)-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(2개의 미공지 단일 회전장애이성질체)
단계 1: 7-브로모-2-클로로-5-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)에톡시)-6,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온
질소하에서, 테트라히드로퓨란(10 mL) 중 2-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)에탄-1-올(338 mg, 2.56 mmol)의 용액에 60%NaH(384 mg, 9.62 mmol)를 0°C에서 첨가하였다. 반응물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-2-클로로-5,6,8-트리플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(1.00 g, 3.19 mmol, 중간체 3)을 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하였따. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0-100% ACN(0.1% NH4HCO3))으로 정제하여 760 mg(58% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 425
단계 2: 2-(9-브로모-2-클로로-8,10-디플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민
디클로로메탄(8 mL) 중 7-브로모-2-클로로-5-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)에톡시)-6,8-디플루오로퀴나졸린-4(3H)-온(760 mg, 1.79 mmol), BOPCl(1.37 g, 5.37 mmol) 및 DIPEA(3.47 g, 26.9 mmol)의 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 진공하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0-100% ACN(0.1% NH4HCO3))으로 정제하여 177 mg(24% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 407.
단계 3: (2-클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-8,10-디플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)염화 아연(II)
질소하에서, 테트라히드로퓨란(1.2 mL) 중 2-(9-브로모-2-클로로-8,10-디플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-4-일)-N,N-디메틸에탄-1-아민(200 mg, 0.480 mmol)의 미리 냉각된(-78°C) 용액에 i-PrMg LiCl(0.4 mL, THF 중 1.3 M)을 첨가하였다. -78°C에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, THF 중 ZnCl2(0.240 mL, THF 중 2 M)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용액을 다음 단계에서 직접 사용하였다.
단계 4: 6-(2-클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-8,10-디플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, THF 중 (2-클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-8,10-디플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)염화 아연(II)(마지막 단계로부터 조), 6-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(243 mg, 0.490 mmol, 중간체 10, 단계 1) 및 PdCl2(PPh3)2(48.8 mg, 0.0800 mmol)의 용액을 50°C에서 밤새 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 물과 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 취합한 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피(구배: 0%-20% MeOH/DCM)로 정제하여 45 mg(12% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 743.
단계 5: 6-(4-(2-(디메틸아미노)에틸)-8,10-플루오로-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민
질소하에서, THF(2 mL) 중 (S)-(2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메탄올(10.8 mg, 0.070 mmol, 중간체 5)의 용액에 0°C에서 60% NaH(7.1 mg, 0.180 mmol)를 첨가하였다. 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 6-(2-클로로-4-(2-(디메틸아미노)에틸)-8,10-디플루오로-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(44.0 mg, 0.0600 mmol)을 첨가하였다. 40°C에서 밤새 교반하였다. 반응물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 미리 채워진 C18 컬럼(용매 구배: 물 중 0~100% ACN(0.1% NH4HCO3))으로 정제하여 41 mg(70% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 861.
단계 6: 6-(4-(2-(디메틸아미노)에틸)-8,10-디플루오로-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로)-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(2개의 미공지 단일 회전장애이성질체)
2,2,2-트리플루오로아세트산(1.5 mL) 중 6-(4-(2-(디메틸아미노)에틸)-8,10-디플루오로-2-(((S)-2-메틸렌테트라히드로-1H-피롤리진-7a(5H)-일)메톡시)-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-9-일)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민(41.0 mg, 0.050 mmol)의 용액을 50°C에서 3시간 동안 교반하였다. 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: 엑스셀렉트(Xselect) CSH OBD 컬럼, 30*150 mm, 5 um; 이동상 A: 물(0.1% FA), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 8분 내 6% B에서 25% B로; 220 nm; RT1: 7.82분으로 정제하여 11 mg(두 회전장애이성질체의 혼합물)의 표제 화합물을 수득하였다. 회전장애이성질체를 키랄-분취용-HPLC로 하기의 조건하에서: 컬럼: (키랄 아트(CHIRAL ART) 셀룰로스-SC, 2*25 cm,5 um; 이동상 A:Hex:DCM=3:1(0.5% 2M NH3-MeOH), 이동상 B:EtOH; 유량: 20 mL/분; 구배: 10분 내 30% B에서 30% B로; 220/254 nm; RT1: 4.5분; RT2: 8.215분;)로 분리하여3.1 mg(10.5% 수율)의 실시예 523 및 2.5 mg(8.10% 수율)의 실시예 524를 수득하였다.
화합물 523: LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 620. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , ppm): δ 6.83 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 4.91 (s, 2H), 4.57 - 4.48 (m, 2H), 4.07 - 3.86 (m, 6H), 3.57 (s, 1H), 3.25 (s,1H), 3.15 (s, 1H), 2.70-2.55 (m, 4H), 2.35 (s, 4H), 2.27 (s, 6H), 1.97-1.92 (m, 1H), 1.90-1.75 (m, 2H), 1.74 - 1.66 (m, 1H).
화합물 524: LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 620. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , ppm): δ 6.83 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.62-4.40 (m, 2H), 4.08 - 3.76 (m, 6H), 3.57 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 3.21 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 3.01 (dt, J = 10.1, 5.4 Hz, 1H), 2.64 - 2.54 (m, 4H), 2.35 (s, 4H), 2.24 (s, 6H), 2.00-1.90 (m, 1H), 1.90 - 1.74 (m, 2H), 1.73-1.65 (m, 1H).
실시예 525: 2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(4개의 미공지 단일 이성질체)
단계 1: 4-((7-브로모-6-클로로-8-플루오로-4-히드록시퀴나졸린-5-일)옥시)-3-(메틸아미노)부탄니트릴
질소하에서, 테트라히드로퓨란(15 mL) 중 4-히드록시-3-(메틸아미노)부탄니트릴(350 mg, 3.07 mmol, 중간체 15)의 용액에 60%NaH(245 mg, 6.15 mmol)를 0°C에서 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 7-브로모-6-클로로-5,8-디플루오로퀴나졸린-4-올(600 mg, 2.03 mmol, 중간체 2)을 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 물로 켄칭하였다. 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피(구배: 0%-10% MeOH/DCM)로 정제하여 430 mg(54.5% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 389.
단계 2: 2-(9-브로모-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
디클로로메탄(25 mL) 중 4-((7-브로모-6-클로로-8-플루오로-4-히드록시퀴나졸린-5-일)옥시)-3-(메틸아미노)부탄니트릴(429 mg, 1.10 mmol) 및 DBU(670 mg, 4.41 mmol)의 용액에 실온에서 PyAOP(1.14 g, 2.19 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피(구배: 0%-60% EtOAc/DCM)로 정제하여 650 mg(95.3% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 371.
단계 3: 2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
질소하에서, 1,4-디옥산(20 mL) 중 2-(9-브로모-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(598 mg, 1.61 mmol), N,N-비스(4-메톡시벤질)-4-메틸-6-(트리부틸스탄닐)피리딘-2-아민(1.59 g, 2.49 mmol, 중간체 9), Pd(PPh3)4(374 mg, 0.320 mmol), CuI(30.8 mg, 0.160 mmol) 및 LiCl(169 mg, 4.05 mmol)의 용액을 110°C에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 고체를 여과하고, 여액을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피(구배: 0%-60% EtOAc/DCM)로 정제하여 598 mg(58.1% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 639.2.
단계 4: 2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-3-요오도-4-메틸피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
아세트산(4 mL) 중 2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(300 mg, 0.470 mmol) 및 NIS(105 mg, 0.470 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 EtOAc로 추출하였다. 취합한 유기층을 수성 Na2S2O3으로 세척하고, 무수 황산 나트륨 상에서 건조하고, 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피(구배: 0%-30% EtOAc/DCM)로 정제하여 220 mg(61.3% 수율)의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 765.1.
단계 5: 2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴
N,N-디메틸포름아미드(5 mL) 중 2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-3-요오도-4-메틸피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(200 mg, 0.260 mmol) 및 Cu(167 mg, 2.62 mmol)의 혼합물에 0°C에서 Cu(O2CF2SO2F)2(1.09 g, 2.61 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 90oC에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 물로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 취합한 유기층을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 상의 플래시 크로마토그래피(구배: 0%-40% EtOAc/DCM)로 정제하여 135 mg(73% 수율)의 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 707.2.
단계 6: 2-(9-(6-아미노-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(4개의 미공지 단일 이성질체)
2,2,2-트리플루오로아세트산(3 mL) 중 2-(9-(6-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-4-메틸-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-8-클로로-10-플루오로-4-메틸-5,6-디히드로-4H-[1,4]옥사제피노[5,6,7-de]퀴나졸린-5-일)아세토니트릴(130 mg, 0.180 mmol)의 용액을 50°C에서 5시간 동안 교반하였다. 진공하에 농축하였다. 잔류물을 분취용 HPLC(컬럼: 엑스브리지(XBridge) Prep C18 OBD 컬럼 30*100 mm, 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 9분 내 22% B에서 45% B로, 45% B; 파장: 254/220 nm; RT1(분): 9.48; 실행 수: 0)로 정제하여 37.0 mg(4개 이성질체의 혼합물)의 표제 화합물을 수득하였다. 혼합물을 키랄-HPLC(컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IE, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex:DCM=3:1(0.1% DEA)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 14분 내 10% B에서 10% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 13.49; RT2(분): 23.50; RT3(분): 29.7; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 0.5 mL; 실행 수: 6)로 분리하여 4.30 mg(5.00% 수율)의 화합물 525a(제3 피크), 5.10 mg(5.90% 수율)의 화합물 525b(제4 피크) 및 16.0 mg(화합물 525c 및 화합물 525d의 혼합물)를 수득하였다. 16 mg의 혼합물을 키랄-HPLC(컬럼: 키랄팩(CHIRALPAK) IG, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex(0.5% 2 M NH3-MeOH)--HPLC, 이동상 B: EtOH--HPLC; 유량: 20 mL/분; 구배: 14분 내 20% B에서 20% B로; 파장: 220/254 nm; RT1(분): 10.031; RT2(분): 11.68; 샘플 용매: EtOH--HPLC; 주입 용량: 0.5 mL; 실행 수: 6)로 재분리하여 4.50 mg(5.20% 수율)의 화합물 525c (제1 피크) 및 4.30 mg(5.00% 수율)의 화합물 525d(제2 피크)를 수득하였다.
화합물 525a: LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 467.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 , ppm) δ 8.57 (s, 1H), 6.87 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 4.80 - 4.71 (m, 1H), 4.58 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 4.47 - 4.38 (m, 1H), 3.39 (s, 3H), 3.25 - 3.16 (m, 1H), 3.12 - 3.02 (m, 1H), 2.38 (s, 3H)
화합물 525b: LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 467.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 , ppm) δ 8.57 (s, 1H), 6.83 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 4.80 - 4.68 (m, 1H), 4.54 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.49 - 4.39 (m, 1H), 3.38 (s, 3H), 3.22 - 3.06 (m, 2H), 2.37 (s, 3H)
화합물 525c: LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 467.1; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 , ppm) δ 8.58 (s, 1H), 6.89 (s, 2H), 6.50 (s, 1H), 4.83 - 4.69 (m, 1H), 4.60 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 4.49 - 4.38 (m, 1H), 3.40 (s, 3H), 3.29 - 3.15 (m, 1H), 3.13 - 3.01 (m, 1H), 2.39 (s, 3H)
화합물 525d: LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+= 467.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 , ppm) δ 8.57 (s, 1H), 6.83 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 4.80 - 4.68 (m, 1H), 4.54 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.49 - 4.39 (m, 1H), 3.38 (s, 3H), 3.22 - 3.06 (m, 2H), 2.37 (s, 3H).
생물학적 검정
KRAS 생화학적 검정 - BODIPY-GDP 교환 TR-FRET. KRAS G12D에서 SOS1-매개 뉴클레오티드 교환의 억제를 평가하여 생화학적 화합물 효능을 평가하였다. 형광 표지된 GDP(BOPIDY-GDP)의 SOS1 촉진 교환을 시간 분해 형광 공명 에너지 전달(TR-FRET)로 모니터링하였다. DMSO에 용해된 화합물을 농축 계열로서 384-웰 백색 검정 플레이트에 분배하였다. 10 μL/웰 검정 완충액(20 mM HEPES, pH 7.5, 50 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 0.01% Tween-20 및 1 mM 디티오트레이톨)에서 제조된 비오틴 태그된 재조합 인간 KRAS(1.5 nM 돌연변이 G12D 또는 야생형) 및 0.15 nM 테르븀 표지된 스트렙타비딘(CisBIO)의 사전형성된 복합체를 첨가하고 10-분 동안 인큐베이션하였다. 검정 완충액 중 5 μL의 3 nM 재조합 인간 SOS1 및 300 nM BOdiPY-GDP의 첨가로 반응을 개시하였다. 60 분 인큐베이션 후, 337 nm에서의 여기 및 490 및 520 nm에서의 방출로 형광을 측정하였다. TR-FRET 비율은 520 nm에서의 형광을 490 nm에서의 형광으로 나누고 10,000을 곱하여 결정되었다. 결과는 대조군 샘플을 기준으로 억제 백분율로 정규화하였다: DMSO(0% 억제) 및 대조군 화합물을 완전히 억제하는 농도(100% 억제)로 하였다. 정규화된 TR-FRET 결과를 화합물 농도에 대해 플롯팅하고, IC50 값을 결정하기 위해 데이터를 4-파라미터 Hill 방정식에 맞췄다.
KRAS 3D-세포 증식 검정. KRAS 야생형 인간 폐 선암종 세포주(PC-9)와 비교하여 동형접합 돌연변이 KRAS G12D 인간 췌장 세포주(AsPC-1 및 SW1990)의 3D 배양에서 증식의 억제를 평가하여 화합물의 세포 효능을 평가하였다. 세포를 50 μL 세포 성장 배지(10% 태아 소 혈청 및 2 mM L-글루타민이 있는 RPMI-1640)에서 384-웰 검정 둥근 바닥, 초저 부착 검정 플레이트에 시딩하였다. 37 °C 및 5% CO2에서 밤새 인큐베이션한 후, DMSO에 용해된 화합물을 희석 계열로서 웰에 150 nL의 총 부피(최종 0.3% DMSO)로 첨가하였다. 세포를 7 일 동안 37 °C 및 5% CO2에서 인큐베이션하였다. 40 μL/웰의 CellTiter-Glo® 3D(Promega)를 첨가하여 세포 증식을 정량화하였다. 상기 시약은 기계적 파괴와 함께 세포 ATP를 방출하여 루시퍼라제-기반 효소/기질 화학발광 검출 시스템에서 활성을 촉진한다. 주위 조건에서 진탕하며 25분 인큐베이션 및 진탕 없이 추가 10분 후, 스페로이드를 파괴하기 위해 위아래로 반복적으로 피펫팅하여 웰의 내용물을 혼합한 다음, 플레이트를 원심분리하여 기포를 제거하였다. 플레이트를 주변 조건에서 추가 15분 동안 인큐베이션하고, 플레이트 판독기(예를 들어 EnVision [PerkinElmer])에서 발광을 판독하였다. 결과는 하기의 대조군 샘플을 기준으로 억제 백분율로 정규화하였다: DMSO(0% 억제) 및 1 uM 스타우로스포린(100% 억제). 정규화된 발광 결과를 화합물 농도에 대해 플롯팅하고, IC50 값을 결정하기 위해 데이터를 4-파라미터 Hill 방정식에 맞췄다.
KRAS G12D 나노BRET 검정. NanoBRET™ 검정(Promega)에서 Raf-RBD/KRAS G12D 상호 작용의 억제를 모니터링하여 세포 표적 결합을 평가하였다. 상기 검정은 NanoLuc® 루시퍼라제에 융합된 Raf-RBD 및 Halotag®와 융합된 독시사이클린 유도성 KRAS G12D로 안정적으로 공동 형질주입된 HCT115 결장암 세포주를 사용한다. 세포를 독시사이클린이 있는 40 μL 배영 배지(10% 태아 소 혈청, 2 mM 글루타민, 2 ng/mL 퓨로마이신 및 4 ng/mL 블라스티시딘이 있는 RPMI-1640)에서 384-웰 백색 조직 배양-처리 검정 플레이트에 시딩하여 37°C, 5% CO2에서 20-24 시간에 걸쳐 KRAS G12D-나노루시퍼라제 발현을 유도한다. 이후 배양 배지를 제거하고 검정 배지(4% 태아 소 혈청을 포함하는 Opti-MEM®) 및 0.1 μM HaloTag618 리간드로 교체하였다. 37°C, 5% CO2에서 후속 4 시간 인큐베이션 동안, HaloTag618 리간드는 Halotag-표지된 KRAS G12D에 결합한다. 이후 DMSO에 용해된 화합물을 희석 계열로서 웰에 160 nL의 총 부피(최종 0.4% DMSO)로 첨가하고, 플레이트를 밤새 37°C, 5% CO2에서 인큐베이션하였다. 최종 단계에서, Opti-MEM 중 10 μL NanoGlo 기질을 각 웰에 첨가하고, EnVision 플레이트 판독기(PerkinElmer)에서 460 nm(루시퍼라제 신호) 및 610 nm(NanoBRET 신호)에서 방출을 판독하였다. Raf-RBD/KRAS G12D 상호 작용은 Raf-RBD 부근의 루시퍼라제 반응의 생성물로부터 KRAS G12D 상의 HaloTag 리간드 수용체로의 생물발광 공명 에너지 전달(BRET)을 야기하고 NanoBRET 신호를 생성한다. KRAS G12D에 대한 화합물의 결합 및 Raf-RBD와의 상호 작용 중단은 이 신호의 감소를 야기한다. 화합물 웰에 대한 루시퍼라제 신호 및 NanoBRET 신호를 DMSO 대조군 웰에 대한 평균 해당 신호로 나누었다. 이후 NanoBRET 비율을 대조군 조정된 NanoBRET 신호를 유사하게 조정된 루시퍼라제 신호로 나누어 계산하였다. 결과는 대조군 샘플을 기준으로 억제 백분율로 정규화하였다: DMSO(0% 억제) 및 대조군 화합물을 완전히 억제하는 농도(100% 억제)로 하였다. 정규화된 NanoBRET 비율을 화합물 농도에 대해 플롯팅하고, IC50 값을 결정하기 위해 데이터를 4-파라미터 Hill 방정식에 맞췄다.
Ex. No KRas(G12V) GDP HTRF (IC50) KRas GDP HTRF (IC50) SW480 Prolif IC50 (G12V) PC9 Prolif IC50 (G12V)
1 0.009 0.046 12 18
2 0.011 0.025 11 7.7
3 0.54 2.9 ND ND
4 1.4 10 ND
5 0.0015 0.0092 1.5 9
6 1.3 6.3 ND ND
7 0.42 2.3 ND ND
8 0.81 3.9 ND ND
9 10 63 ND ND
10 0.3 1.3 ND ND
11 1 14 ND ND
12 8.9 21 ND ND
13 13 36 ND ND
14 21 200 ND ND
15 3.6 31 ND ND
16 6.9 32 ND ND
17 0.0061 0.052 8.7 17
18 0.035 0.2 20 20
19 15 200 5.7 4.5
20 0.069 0.51 7.3 8.7
21 1.6 3.4 ND ND
22 11 43 ND ND
23 0.0051 0.029 5.1 10
24 4.4 30 ND 20
25 0.51 2 ND ND
26 0.053 0.33 9.7 16
27 0.58 1.4 ND ND
28 0.0082 0.11 7.8 17
29 7.4 7.4 ND ND
30 4.7 35 ND ND
31 0.44 2.8 ND ND
32 ND ND ND ND
33 ND ND ND ND
34 0.00087 0.0044 0.82 4
35 0.00039 0.00063 0.78 1.7
36 0.05 0.68 8.2 20
37 0.053 0.27 ND ND
38 ND ND ND ND
39 0.024 0.14 20 20
40 0.00099 0.0046 1.2 2.1
41a 0.0018 0.011 1 3.8
41b 1.2 6.5 ND ND
42a 0.0003 0.00025 0.085 1.3
42b 0.055 0.082 3.4 7
43 2 4.9 ND ND
44 0.0027 0.017 4.1 4.8
45 0.00023 0.00027 0.05 6
46 11 46 ND ND
47a 0.0011 0.0076 20 7.1
47b 0.72 4.3 ND ND
48 0.00004 0.000091 0.0014 1.5
49 0.00057 0.0038 1.1 3.8
50 0.002 0.014 0.93 6.7
51 9.5 12 20 20
52 2.4 9.6 ND ND
53a 0.00037 0.0012 ND ND
53b 0.6 2.9 ND ND
54 0.041 0.31 ND ND
55 0.019 0.13 ND ND
56 0.022 0.16 ND ND
57 0.27 2.0 ND ND
58 0.018 0.034 ND ND
59 0.057 0.27 7.1 5.8
60 0.00042 0.00048 0.23 2.7
61 0.00086 0.0043 0.94 3.1
62 0.012 0.096 4.9 3.4
63 0.0087 0.069 3.3 4
64 0.29 2.7 17 5.4
65a 0.0001 0.00025 0.0026 0.94
66a 0.00005 0.00012 0.0031 2.8
67 0.000170 0.00055 0.0037 2.8
68 0.0001 0.00031 0.011 1.8
69a 0.00011 0.000295 ND ND
70a 0.00049 0.0083 ND ND
71 0.000530 0.00661 ND ND
72 0.012 0.143 ND ND
73a 0.00011 0.00027 0.0026 2.3
74a 0.00009 0.00021 0.006 2.9
75a 0.00005 0.000066 0.0011 0.89
76a 0.00009 0.000102 0.0019 ND
77a 0.00012 0.00033 0.021 20
77b 0.00013 0.00034 0.065 20
78 0.00006 0.000209 ND ND
79 0.00022 0.00034 0.0024 3.1
80 0.0082 0.0236 0.94 1.2
81 0.000067 0.0000659 0.0061 7.8
82a 0.00011 0.000164 0.026 6.8
82b 0.00012 0.000224 0.011 7.2
83a 0.00019 0.000684 0.023 5.9
84a 0.00014 0.000389 0.073 12
85 0.00009 0.000165 ND ND
86 0.00015 0.00044 0.0049 3.7
87a 0.000087 0.000106 0.0025 6.3
87b 0.000089 0.00018 0.028 3.1
88 0.00005 0.00012 0.0015 3
89 0.000075 0.00017 0.0072 2.4
90 0.00022 0.00099 0.39 6.4
91a 0.00029 0.0009 0.0034 20
91b 0.00081 0.0022 0.14 6.4
92a 0.00007 0.0000648 0.037 1.8
92b 0.00031 0.00189 0.7 6
93a 0.00009 0.000201 ND ND
93b 0.00014 0.00035 ND ND
93c 0.00007 0.000145 ND ND
93d 0.00007 0.0000849 0.0011 ND
94 0.00007 0.000175 ND ND
95a 0.00009 0.00083 ND ND
95b 0.00012 0.000484 ND ND
96 0.00008 0.000299 ND ND
97 0.00008 0.000359 ND ND
98a 0.00011 0.000557 ND ND
98b 0.0001 0.000125 ND ND
99a 0.00007 0.000125 ND ND
99b 0.00008 0.0000748 ND ND
100a 0.00003 0.00003 ND ND
100b 0.00073 0.000353 ND ND
101 0.00006 0.0000616 0.0057 0.83
102a 0.000094 0.000115 0.019 2.2
102b 0.00017 0.00049 0.1 8.7
103a ND 0.00113 ND ND
104a 0.00015 0.000447 0.012 ND
104b 0.016 0.0352 ND ND
105a 0.00008 0.00023 0.016 7.1
106 0.00013 0.00014 0.0094 0.97
107 0.09 0.24 0.56 4
108a 0.00006 0.0002 0.002 1.4
109 0.00018 0.000222 0.0028 13
110a 0.00033 0.0014 0.098 11
111a 0.00036 0.00085 0.0018 7.4
112 0.0002 0.00032 0.0018 4.3
113a 0.00009 0.0002 0.0028 7.5
114a 0.00024 0.00039 0.0032 7
114b 0.00022 0.00046 0.003 7.6
115 0.00047 0.0009 0.016 15
116 0.000074 0.0000519 0.0046 1.6
117 0.00008 0.00018 0.012 6.3
118 0.00006 0.00019 0.033 0.73
119 0.00005 0.00014 0.016 3
120a 0.00007 0.0002 0.028 2.5
120b 0.00008 0.0002 0.02 3
121 0.00007 0.000437 1.1 4.9
122a 0.0005 0.00449 0.18 2.9
122b 0.000095 0.000202 0.017 9.4
123a 0.00013 0.00015 0.03 6.5
124 0.0001 0.000204 0.07 2.7
125a 0.00012 0.000218 0.023 3.7
126 0.00034 0.00287 ND ND
127 0.00007 0.0000894 ND ND
128a 0.00009 0.000149 ND ND
128b 0.00019 0.000469 ND ND
129a 0.00031 0.000232 ND ND
129b 0.00032 0.00039 ND ND
130a 0.00006 0.00007 ND ND
131 0.00014 0.000253 ND ND
132 0.00013 0.000273 0.039 3.2
133c 0.00005 0.00015 0.025 7.1
134 0.00008 0.00021 0.59 1.6
135 0.00008 0.00037 0.39 1.5
136 0.00021 0.00083 0.063 8.6
137 0.00007 0.000159 0.14 1.1
138 0.00017 0.00058 0.077 4.9
139 0.00008 0.000205 0.24 0.83
140 0.00017 0.0006 0.051 3.8
141 0.00024 0.00077 0.076 8.1
142 0.00031 0.0011 0.12 7.7
143 0.00025 0.00087 0.094 10
144 0.0014 0.0044 0.52 6
145 0.00056 0.0012 0.45 20
146 0.00061 0.0015 0.51 19
147 0.00006 0.00018 0.044 1.3
148 0.0011 0.0036 0.41 9.6
149 0.00021 0.00078 0.074 16
150 0.0026 0.0082 0.79 8.9
151 0.0011 0.0054 0.7 14
152 0.00075 0.0023 0.18 5.6
153 0.00078 0.0033 0.19 14
154 0.00048 0.0011 0.091 14
155 0.00045 0.0025 0.22 10
156 0.00019 0.00065 0.31 16
157 0.00081 0.0032 0.4 8.2
158a 0.00076 0.00541 ND ND
158b 0.097 0.68 ND ND
159a ND ND ND ND
159b ND ND ND ND
160a ND ND ND ND
160b ND ND ND ND
161b ND ND ND ND
162a ND ND ND ND
162b ND ND ND ND
162c 0.37 0.83 ND ND
162d 0.41 0.896 ND ND
163a ND ND ND ND
163b ND ND ND ND
164a ND ND ND ND
164b ND ND ND ND
165a 0.00069 0.00214 ND ND
165b 0.89 2 ND ND
166a 0.00056 0.00206 ND ND
166b 0.64 1.73 ND ND
167a ND ND ND ND
167b ND ND ND ND
169a ND ND ND ND
169b ND ND ND ND
170a ND ND ND ND
170b ND ND ND ND
171a 0.0007 0.0022 ND ND
171b 0.9 2.09 ND ND
172a ND ND ND ND
172b ND ND ND ND
173a ND ND ND ND
173b ND ND ND ND
174a ND ND ND ND
174b ND ND ND ND
175 0.00008 0.0001 ND ND
176 ND ND ND ND
*ND = 결정되지 않음
화합물의 활성(uM로 보고됨)
화합물 번호 KRas(G12D) GDP HTRF (IC50) KRas(wt) GDP HTRF (IC50) KRAS(G12D) HCT116 나노BRET (IC50) CTG 패널 (G12D) IC50 CTG 패널 Non G12D IC50
501 4.16 109 10 ND ND
502 2.77 71.4 10 9.6455 7.88
503 4.62 94.3 10 ND ND
504 3.46 15.1 10 14.8997 18.5
505 1.73 66.4 10 ND ND
506 2.4 55 10 ND ND
507 0.276 8.65 10 ND ND
508 0.472 8.11 10 ND ND
509 0.164 1.66 9.85 ND ND
510 0.0136 0.24 10 ND ND
511 0.00607 0.0484 8.054 2.2443 2.96
512 0.174 1.11 ND ND ND
513 0.00155 0.0108 2.577 1.0785 2.29
514 0.817 4.12 10 ND ND
515 0.00339 0.02 7.983 ND ND
516 0.0463 1.63 10 ND ND
517 0.00579 0.00478 10 ND ND
518 0.029 0.128 10 ND ND
519 ND ND ND ND ND
520 ND ND ND ND ND
521 ND ND ND ND ND
522 ND ND ND ND ND
523 0.0119 0.088 10 ND 7.7
524 0.48 2.68 10 ND ND
525 ND ND ND ND ND
*ND = 결정되지 않음
화합물의 활성(uM로 보고됨)
본원에서 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 동일한 의미를 갖는다. 사용된 숫자(예를 들어, 양, 온도 등)와 관련하여 정확성을 보장하기 위해 노력했지만 일부 실험적 오차 및 편차가 고려되어야 한다.
본 명세서 및 청구범위 전반에 걸쳐, 용어 "포함하다"는 문맥에서 달리 요구하는 경우를 제외하고는 비배타적인 의미로 사용된다. 본원에 기재된 구현예들은 "구성되는" 및/또는 "본질적으로 구성되는" 구현예를 포함하는 것으로 이해된다.
값의 범위가 제공되는 경우, 문맥이 달리 명시하지 않는 한 하한 단위의 10분의 1까지, 범위의 상한 및 하한 사이의 각각의 중간 값 및 언급된 범위 안의 임의의 다른 언급된 또는 중간 값이 본원에 포함된다. 더 작은 범위에 독립적으로 포함될 수 있는 이러한 작은 범위의 상한 또는 하한은 또한 언급된 범위에서 구체적으로 배제된 한계에 따라 본원에 포함된다. 언급된 범위가 한계 중 하나 또는 둘 모두를 포함하는 경우에, 포함된 한계 중 하나 또는 둘 모두를 제외하는 범위도 본원에 포함된다.
전술한 설명 및 관련 도면에 제시된 교시의 이점을 갖는 본원에 제시된 화합물 및 방법의 많은 수정 및 다른 구현예가 당업자에게 떠오를 것이다. 따라서, 본원에 기재된 화합물 및 방법은 개시된 특정 구현예로 제한되지 않으며 수정 및 다른 구현예가 첨부된 청구범위의 범위 내에 포함되도록 의도됨을 이해해야 한다. 따라서, 본 발명의 범위는 위의 설명을 참조하지 않고 결정되어야 하며, 대신에 하기의 첨부된 청구범위와 그러한 청구범위가 부여된 균등물의 전체 범위를 참조하여 결정되어야 한다. 비록 본원에 특정 용어가 사용되지만, 이들은 제한을 목적으로 하는 것이 아니라 일반적이고 설명적인 의미로만 사용된다.
본원에 언급된 특허, 공개된 출원 및 과학 문헌은 당업자의 지식을 확립하고 각각이 구체적이고 개별적으로 표시된 것과 동일한 정도로 그 전체가 본원에 원용된다.

Claims (77)

  1. 화학식 (I)을 갖는 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염:
    (I),
    여기서,
    X는 NR13, O, C(Rx)2, C(O), SO, SO2, 또는 S이고,
    u는 1 또는 2이고,
    각 RX는 독립적으로 수소, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬이거나,
    또는 여기서 2개의 Rx는 함께 이들이 결합된 탄소와 함께 시클로프로필을 형성하고,
    R1은 R7-치환 또는 비치환 인돌릴, R7-치환 또는 비치환 벤조푸라닐, R7-치환 또는 비치환 나프틸, R7-치환 또는 비치환 인다졸릴, R7-치환 또는 비치환 인데닐, R7-치환 또는 비치환 벤조티아졸릴, R7A-치환 또는 비치환 페닐, 또는 R7A-치환 또는 비치환 피리디닐이고,
    각 R7은 독립적으로 수소, 할로겐, CN, CH2OH, -OH, NH2, N(Me)2, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C2-5 알키닐, 비치환 C1-3 할로알킬, 또는 비치환 시클로프로필이고,
    각 R7A는 독립적으로 수소, 할로겐, NH2, N(Me)2, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 또는 비치환 시클로프로필이고,
    R2는 수소, O-L1-R8, R8A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, 또는 R8B-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이고,
    L1은 결합 또는 RL1-치환 또는 비치환 C1-3 알킬렌이고,
    RL1은 할로겐 또는 비치환 C1-3 알킬이고,
    R8은 N, S 또는 O을 포함하는 R9-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이고,
    각 R9는 독립적으로 할로겐, 옥소, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C1-3 알콕시, R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴, 또는 R10-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 R10-치환 또는 비치환 3 또는 4-원 헤테로사이클이거나,
    또는 여기서 2개의 R9는 함께 C3-5 시클로알킬 또는 3-5원 헤테로사이클을 형성하고,
    R10은 수소 또는 할로겐이고,
    각 R8A는 독립적으로 R9A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R9A-치환 또는 비치환 C1-3 알콕시, R9A-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 R9A-치환 또는 비치환 4-6원 헤테로사이클이고,
    각 R9A는 독립적으로 할로겐, 옥소, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C1-3 알콕시, 비치환 C1-3 알킬리덴, R9-치환 또는 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 N, S 또는 O를 포함하는 R9-치환 또는 비치환 4-10원 헤테로사이클이고,
    R8B는 독립적으로 할로겐, 옥소, -NH2, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C1-3 알콕시, 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이고,
    R3 및 R4는 각각 독립적으로 수소, -CN, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 시클로프로필이고,
    R5는 R5A-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R5A-치환 또는 비치환 C1-6 할로알킬, R5A-치환 또는 비치환 C3-10 시클로알킬, R5A-치환 또는 비치환 3-10원 헤테로사이클, 또는 R5A-치환 또는 비치환 5-10원 헤테로아릴이고,
    각 R5A는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, OR11, SR12, SO2R12, NR13R14, C(O)N(R11)2, C(O)R11, R5B-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R5B-치환 또는 비치환 C1-6 할로알킬, R5B-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R5B-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R5B-치환 또는 비치환 C5-8 아릴, 또는 R5B-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이거나,
    또는 여기서 2개의 R5A는 함께 C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로사이클을 형성하고,
    각 R5B는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, OR11, NR13R14, SR12, SO2R12, C(O)N(R11)2, C(O)R11, R5C-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R5C-치환 또는 비치환 C1-3 할로알킬, R5C-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R5C-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R5C-치환 또는 비치환 페닐, 또는 R5C-치환 또는 비치환 5-6원 헤테로아릴이거나,
    또는 여기서 2개의 R5B는 함께 C3-4 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로사이클을 형성하고,
    각 R5C는 독립적으로 할로겐, 옥소, CN, C(O)CH3, C(O)NH2, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NR13R14, SCH3, SO2NH2, SO2CH3, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 비치환 3-4원 헤테로사이클이고,
    각 R11은 독립적으로 수소, 비치환 C1-3 알킬, 비치환 C1-3 할로알킬, 비치환 C3-4 시클로알킬, 또는 비치환 3-4원 헤테로사이클이고,
    각 R12는 독립적으로 NH2 또는 비치환 C1-3 알킬이고,
    각 R13 및 R14는 독립적으로 수소, C(O)R11, C(O)N(R11)2, R15-치환 또는 비치환 C1-6 알킬, R15-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, 또는 R15-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클이고,
    각 R15는 할로겐, CN, C(O)CH3, C(O)NH2, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3, R16-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R16-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R16-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R16-치환 또는 비치환 5-9원 아릴, 또는 R16-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이고,
    각 R16은 독립적으로 할로겐, CN, C(O)CH3, C(O)NH2, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3, R17-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, R17-치환 또는 비치환 C3-6 시클로알킬, R17-치환 또는 비치환 3-6원 헤테로사이클, R17-치환 또는 비치환 5-9원 아릴, 또는 R17-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴이고,
    각 R17은 독립적으로 할로겐, CN, C(O)CH3, C(O)NH2, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, NH2, NHCH3, N(CH3)2, SO2NH2, SO2CH3, 또는 비치환 C1-3 알킬이고,
    R6 및 R6A는 독립적으로 수소, 할로겐, NR13R14, 또는 R6B-치환 또는 비치환 C1-6 알킬이며,
    R6B는 할로겐, CN, OH, OCH3, CF3, CHF2, CH2F, 또는 비치환 C1-3 알킬이다.
  2. 제1항에 있어서, R1은 R7A-치환 또는 비치환 페닐, R7-치환 또는 비치환 인다졸릴, 또는 R7A-치환 또는 비치환 피리디닐인 화합물.
  3. 제1항에 있어서, R1은 R7A-치환 또는 비치환 페닐인 화합물.
  4. 제1항에 있어서, R1은 R7-치환 또는 비치환 인다졸릴인 화합물.
  5. 제1항에 있어서, R1은 R7A-치환 또는 비치환 피리디닐인 화합물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 각 R7A는 독립적으로 할로겐, NH2, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬인 화합물.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    R1은
    (여기서,
    X1은 N, CH 또는 CF이고,
    R7A는 수소, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬임)인 화합물.
  8. 제1항, 제2항, 제5항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1은 인 화합물.
  9. 제1항, 제2항, 제5항, 제7항 및 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1은 또는 인 화합물.
  10. 제1항 내지 제3항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1은 (여기서, R7A는 수소, 할로겐, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬임)인 화합물.
  11. 제1항 내지 제3항, 제7항 및 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1은 인 화합물.
  12. 제1항에 있어서,
    R1은 또는 (여기서, 각 R7은 독립적으로 할로겐, NH2, N(Me)2, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬임)인 화합물.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 O-L1-R8, R8A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬, 또는 R8B-치환 또는 비치환 4-6원 헤테로사이클인 화합물.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 O-L1-R8인 화합물.
  15. 제13항 또는 제14항에 있어서, L1는 비치환 C1-3 알킬렌인 화합물.
  16. 제13항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, R8은 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 4-10원 헤테로사이클인 화합물.
  17. 제13항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    R8은
    (여기서,
    R9는 할로겐 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이고,
    r은 0-12의 정수이고,
    j는 1, 2 또는 3이며,
    k는 1 또는 2임)인 화합물.
  18. 제17항에 있어서, r은 0, 1, 2 또는 3인 화합물.
  19. 제13항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서,
    R8은 , , 또는
    (여기서,
    R9는 독립적으로 할로겐 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴이고,
    각 R10은 독립적으로 수소 또는 할로겐이며,
    r은 1 또는 2임)인 화합물.
  20. 제13항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    R8은
    (여기서,
    R9는 독립적으로 할로겐, 옥소, 또는 비치환 C1-3 알킬이거나,
    또는 여기서 2개의 R9는 함께 C3-5 시클로알킬 또는 3-5원 헤테로사이클을 형성하며,
    r은 1 또는 2임)인 화합물.
  21. 제13항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    R8은
    (여기서,
    R9는 수소 또는 비치환 C1-3 알킬이고,
    W는 O, SO2 또는 NR12이며,
    R12는 수소, 비치환 C1-3 알킬, 또는 비치환 C1-3 할로알킬임)인 화합물.
  22. 제13항 내지 제16항 및 제21항 중 어느 한 항에 있어서, R8은 아제티디닐, 옥세타닐, 또는 티에탄디옥사이드인 화합물.
  23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서,
    R2는 인 화합물.
  24. 제23항에 있어서, R9는 할로겐 또는 R10-치환 또는 비치환 C1-3 알킬리덴인 화합물.
  25. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 수소인 화합물.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, R3은 수소 또는 할로겐인 화합물.
  27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, R4는 할로겐인 화합물.
  28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, R5는 R5A-치환 또는 비치환 C1-6 알킬인 화합물.
  29. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5는 인 화합물.
  30. 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5는
    (여기서,
    고리 A는 적어도 1개의 N 헤테로원자를 포함하는 3-6원 헤테로사이클 또는 5-9원 헤테로아릴이며,
    s는 0, 1, 2 또는 3임)인 화합물.
  31. 제30항에 있어서, 고리 A는 아제티디닐, 티에타닐 1,1-디옥사이드, 이미다졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 트리아졸릴, 피라졸릴, 피라지닐, 피리도닐, 피리디닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피롤로피리디닐, 또는 피라졸로피리디닐인 화합물.
  32. 제30항 또는 제31항에 있어서, 고리 A는 이미다졸릴, 이소티아졸릴, 또는 트리아졸릴인 화합물.
  33. 제30항 또는 제31항에 있어서, 고리 A는 피라졸릴, 피리도닐, 피리디닐, 피리미디닐, 또는 피리다지닐인 화합물.
  34. 제30항에 있어서, 화학식
    을 갖는 화합물.
  35. 제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 2개의 R5A는 함께 C3-4 시클로알킬 또는 3-4원 헤테로사이클을 형성하는 것인 화합물.
  36. 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5는 (여기서, R5A는 CN, OH, COR11, SO2R12, NR13R14, R5B-치환 또는 비치환 아제티디닐, 또는 R5B-치환 또는 비치환 옥세타닐임)인 화합물.
  37. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, R5는 R5A-치환 또는 비치환 5-9원 헤테로아릴인 화합물.
  38. 제1항에 있어서, 화학식
    을 갖는 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
  39. 제1항에 있어서, 화학식
    을 갖는 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
  40. 제1항에 있어서, 화학식
    을 갖는 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
  41. 제1항에 있어서, 화학식
    을 갖는 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
  42. 제1항에 있어서, 화학식
    을 갖는 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
  43. 제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서,
    R8은 인 화합물.
  44. 제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서,
    R8은 인 화합물.
  45. 제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서,
    R8은 인 화합물.
  46. 제1항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, X는 O인 화합물.
  47. 제1항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, X는 C(Rx)2인 화합물.
  48. 제1항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, R6은 R6A-치환 또는 비치환 C1-3 알킬인 화합물.
  49. 제1항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, R6은 R6A-치환 C1-3 알킬인 화합물.
  50. 제48항 또는 제49항에 있어서, R6A는 할로겐, CN, 또는 OH인 화합물.
  51. 제1항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, R6은 수소인 화합물.
  52. 표 1의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
  53. 표 2의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
  54. 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 및
    하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제
    를 포함하는 약학적 조성물.
  55. 암을 치료하는 방법으로서,
    제1항 내지 제53항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는
    제54항의 약학적 조성물
    의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  56. 제55항에 있어서, 암은 KRas 돌연변이를 포함하는 것을 특징으로 하는 것인 방법.
  57. 제56항에 있어서, KRas 돌연변이는 KRasG12D 돌연변이 또는 KRasG12V 돌연변이에 상응하는 것인 방법.
  58. 제56항에 있어서,
    KRas 돌연변이의 부재 또는 존재에 대해 투여 전에 환자로부터의 샘플을 시험하는 단계
    를 추가로 포함하는 방법.
  59. 제58항에 있어서, 상기 화합물, 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 상기 약학적 조성물은 환자 샘플이 KRas 돌연변이의 존재를 나타낸 후에 환자에게 투여되는 것인 방법.
  60. 제55항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 조직 불문(agnostic)인 방법.
  61. 제55항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 췌장암, 폐암 또는 결장직장암인 방법.
  62. 제61항에 있어서, 폐암은 폐 선암종, NSCLC 또는 SCLC인 방법.
  63. 제61항에 있어서, 암은 췌장암인 방법.
  64. 제61항에 있어서, 암은 결장직장암인 방법.
  65. 제55항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서,
    적어도 하나의 추가 치료제를 투여하는 단계
    를 추가로 포함하는 방법.
  66. 제65항에 있어서, 추가 치료제는 표피 성장 인자 수용체(EGFR) 억제제, 포스파티딜이노시톨 키나아제(PI3K) 억제제, 인슐린-유사 성장 인자 수용체(IGF1R) 억제제, 야누스 키나아제(JAK) 억제제, Met 키나아제 억제제, SRC 패밀리 키나아제 억제제, 미토겐-활성화 단백질 키나아제(MEK) 억제제, 세포외-신호-조절 키나아제(ERK) 억제제, 토포이소머라아제 억제제, 탁산, 항대사제, 또는 알킬화제를 포함하는 것인 방법.
  67. 치료적 활성 물질로서 사용하기 위한, 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염.
  68. KRas 돌연변이를 포함하는 암의 치료적 치료를 위한, 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 사용.
  69. KRas 돌연변이를 포함하는 암의 치료적 치료를 위한 약제를 제조하기 위한, 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염의 사용.
  70. 종양 전이 억제를 위한 약제의 제조에서, 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적 염의 사용.
  71. KRas 돌연변이를 포함하는 암의 치료적 및/또는 예방적 치료를 위한, 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적 염.
  72. KRas 돌연변이 단백질의 활성을 조절하는 방법으로서,
    상기 돌연변이 단백질을 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 반응시키는 단계
    를 포함하는 방법.
  73. 세포 모집단의 증식을 억제하는 방법으로서,
    상기 세포 모집단을 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 접촉시키는 단계
    를 포함하는 방법.
  74. 제73항에 있어서, 증식의 억제는 세포 모집단의 세포 생존률의 감소로서 측정되는 것인 방법.
  75. 표지된 KRas 돌연변이 단백질을 제조하는 방법으로서,
    KRas 돌연변이 단백질을 제1항 내지 제56항 중 어느 한 항의 표지된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염과 반응시켜서 표지된 KRas 돌연변이 단백질을 생성하는 단계
    를 포함하는 방법.
  76. 종양 전이를 억제하는 방법으로서,
    치료적 유효량의 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 입체이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 또는 제54항의 약학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계
    를 포함하는 방법.
  77. 본원에 제시된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물을 합성하기 위한 공정.
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