CN111803488A - 白术内酯ⅱ在制备抗肾纤维化药物中的应用及抗肾纤维化药物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物领域，本发明提供了白术内酯Ⅱ在制备抗肾纤维化药物中的应用，白术内酯Ⅱ单体作为有效成分可达到有效的抗肾纤维化作用。本发明还提供了一种抗肾纤维化药物，包括白术内酯Ⅱ和药用辅料。本发明研究表明，白术内酯Ⅱ具有良好的治疗肾纤维化的效果。

Description

白术内酯Ⅱ在制备抗肾纤维化药物中的应用及抗肾纤维化 药物

技术领域

本发明涉及药物领域，具体涉及一种白术内酯Ⅱ在制备抗肾纤维化药物中的应用及包含白术内酯Ⅱ的抗肾纤维化药物。

背景技术

肾纤维化是典型的多因素复杂疾病，目前治疗措施主要有利用血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素受体拮抗剂和基因治疗等。现有技术提供的治疗方案拥有抗炎、抗凝和起效快的优点，但只能针对单一病因，无法达到综合治疗的目的。随着人类对疾病本质认识的不断深入和现代医学的发展，现代医药界也逐渐认识到多基因和多环境因素引起的复杂疾病，仅用单一药效的药物难以获得预想的彻底治疗效果，长期使用还会引起较大的毒副作用。中药提取物通过多因素影响病因、综合治疗和调理气血等效果达到治疗作用，这对于肾纤维化这样的慢性多因素复杂疾病可以更合理且有效，将成为肾纤维化治疗药物研究开发的重要方向之一。

白术性温，味苦、甘，入脾、胃经，《医学启源》记载白术“除湿益燥，和中益气，温中，去脾胃中湿，除胃热，强脾胃，进饮食，止渴，安胎”。白术为临床上的常用中药，被历代医家奉为“安脾胃之神品”。白术的主要化学成分为挥发油、内酯类化合物及多糖。其中内酯类成分具有抗炎、抗肿瘤作用，该类成分还具有调节胃肠道功能和促进营养物质吸收的功能。但是针对白术药材中白术内酯在肾保护方面的研究较少。

发明内容

本发明为了解决现有技术中抗肾纤维化药物副作用大和治疗不彻底的问题，提供了一种白术内酯Ⅱ在制备抗肾纤维化药物中的应用，白术内酯Ⅱ的抗肾纤维化作用显著且经过治疗后不易复发。

为了解决上述问题，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了白术内酯Ⅱ在制备抗肾纤维化药物中的应用。

本发明还提供了一种抗肾纤维化药物，包括白术内酯Ⅱ和药用辅料。

优选的，所述抗肾纤维化药物中白术内酯Ⅱ占总质量的1～99％。

优选的，所述药用辅料包括药用载体、稀释剂、佐剂和赋形剂中的一种或多种。

优选的，所述药物的剂型选自颗粒剂、片剂、散剂、胶囊剂、口服液、注射剂、喷雾剂、气雾剂、粉雾剂、乳剂、滴鼻剂、栓剂、丸剂、微球制剂或酊剂。

优选的，所述抗肾纤维化药物采用的白术内酯Ⅱ原料纯度大于90％。

本发明提供了白术内酯Ⅱ在制备抗肾纤维化药物中的应用，还提供了一种抗肾纤维化药物，包括白术内酯Ⅱ和药用辅料。本发明的药理实验显示，白术内酯Ⅱ具有显著的抗肾纤维化功效。

附图说明

图1白术内酯Ⅱ对5/6肾切除大鼠肾组织病理学的影响；

图2白术内酯Ⅱ对大鼠肾组织中α-SMA与CollagenⅠ表达影响；

图3白术内酯Ⅱ对UUO肾纤维化小鼠肾组织病理学的影响；

图4白术内酯Ⅱ对小鼠肾组织中α-SMA与CollagenⅠ表达影响。

具体实施方式

本发明提供了白术内酯Ⅱ在制备抗肾纤维化药物中的应用。白术内酯Ⅱ拓展了单体药物在肾纤维化疾病方面的治疗方案，为抗肾纤维化药物的研发开辟了新途径，尤其是白术内酯Ⅱ可以使患有肾纤维化疾病的小鼠的肌酐酸清除率、尿蛋白含量、血肌酐和尿素氮水平显著降低，起到了治疗肾纤维化的效果。

本发明研究表明，白术内酯Ⅱ对于5/6肾切除模型大鼠进行治疗后，大鼠的体重明显升高；血肌酐、尿素氮、肌酐酸清除率和尿蛋白含量显著下调，说明白术内酯II对肾纤维化疾病具有很好的治疗效果。

本发明还提供了一种抗肾纤维化药物，包括白术内酯Ⅱ和药用辅料。本发明提供的抗肾纤维化药物具有显著的抗肾纤维作用。

在本发明中，所述抗肾纤维化药物中白术内酯Ⅱ的含量优选为1～99％，更优选为50～80％。在本发明中，所述用于抗肾纤维化药物的白术内酯Ⅱ原料纯度大于90％。本发明对所述白术内酯Ⅱ的来源没有特殊要求，采用本领域技术人员所熟知的即可；所述白术内酯Ⅱ具有的结构式如下所示：

本发明对所述本发明对所述白术内酯Ⅱ的来源无特殊限定，采用能够满足上述纯度要求的白术内酯Ⅱ即可。在本发明中，所述药用辅料包括但不限于药用载体、稀释剂、佐剂和赋形剂中的一种或多种。

在本发明中，所述药用载体包括但不限于脂质体、醇质体、聚合物胶束、纳米结构脂质载体、固体脂质纳米载体和介孔二氧化硅纳米粒等。

在本发明中，所述稀释剂、佐剂和赋形剂等药物辅料具体的可以包括药用防腐剂、抗氧化剂、填料、崩解剂、润湿剂、乳化剂、悬浮剂、溶剂、分散介质、涂层、抗菌剂、等渗和吸收延缓剂中的一种或多种。

本发明优选的，所述填充剂包括但不限于微晶纤维素、预胶化淀粉、羟丙纤维素和聚乙二醇中的一种或多种。

在本发明中，所述药物的剂型包括但不限于颗粒剂、片剂、散剂、胶囊剂、口服液、注射剂、喷雾剂、气雾剂、粉雾剂、乳剂、滴鼻剂、栓剂、丸剂、微球制剂或酊剂。

本发明根据药物的剂型不同具体确定选用的药用辅料及其用量和制备方法，对此无特殊限定。

本发明对所述抗肾纤维化药物的制备方式没有特殊要求，采用本领域技术人员所熟知的相应剂型的制备方式即可。

为了进一步说明本发明，下面结合实施例和附图对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

选取体重为190～210g的SD健康雄性大鼠24只(购自上海斯莱克实验动物有限责任公司)，随机分为假手术组，5/6肾切除组和白术内酯Ⅱ治疗组(用生理盐水将白术内酯Ⅱ配置成2mg/kg的白术内酯Ⅱ混悬液)。

制备5/6肾切除大鼠模型：按照标准的二步法制作5/6肾切除的大鼠模型，以10％水合氯醛(400mg/kg)腹腔注射麻醉后，将大鼠俯卧固定于手术台上，局部皮肤剪毛，右侧肋下脊直肌外侧常规消毒，无菌操作下切开右背侧皮肤各层，暴露右肾，结扎肾蒂，按上下两极弧形切右肾组织，用明胶海绵压迫止血，待血止后缝合包扎，切除的右肾组织约占一侧肾脏的2/3。术后1周做第2次手术，同样方法麻醉，切开左背部，暴露左肾，结扎肾蒂，切除左肾。以此方法准备5/6肾切除组和白术内酯Ⅱ治疗组的大鼠模型。

假手术组(8只)仅剪开假手术组大鼠左侧腹部，取出肾脏，然后放回腹腔，缝合内外伤口，不切除肾脏。

所有手术在同一天制备完成。

术后第9周对三组大鼠开始进行灌胃药物治疗，按2mg/kg的剂量给白术内酯Ⅱ治疗组的大鼠进行灌胃给药直到12周末结束，假手术组和模型组给予相应体积生理盐水。实验结束后收集24小时尿液，大鼠麻醉后于颈动脉采血，测定血常规和血清生化指标测定。待检测完尿液和血液数据后，将大鼠处死后摘取肾脏，切去部分肾组织固定于10％中性福尔马林溶液，用于一般病理染色、特殊染色和免疫组化实验。

实施例2

制备UUO致小鼠肾纤维化模型采用左侧输尿管结扎术的方式，单侧输尿管梗阻(UUO)是研究肾纤维化的经典动物实验模型，UUO能直接导致肾小管间质纤维化(TIF)，其特征与人类纤维化特征相似。

选取30只小鼠并随机分为假手术组、小鼠单侧输尿管梗阻模型组(UUO组)和白术内酯Ⅱ组，每组10只。

对模型组和白术内酯Ⅱ组小鼠均实施左侧输尿管结扎术，形成肾纤维化模型。假手术组小鼠不结扎左侧输尿管。

各给药组于造模当日开始给药，假手术组和模型组灌胃等体积生理盐水，试验进行7d。

应用例1

对实施例1中各组大鼠在12周末实验结束后进行体重统计和尿液、血液检测，检测结果如表1。

表1实施例1各组大鼠数据统计

由表1可知，对大鼠进行给予白术内酯Ⅱ治疗后，大鼠的体重明显升高；血肌酐、尿素氮、肌酐酸清除率和尿蛋白含量显著下降，说明白术内酯Ⅱ对肾纤维化疾病具有很好的治疗效果。

应用例2

通过对实施例1中12周末实验结束的大鼠进行生物学形态观察、HE染色和Masson染色观察大鼠残肾组织细胞形态学的改变。与5/6肾切除组相比，使用白术内酯Ⅱ治疗可减轻大鼠肾间质损害及纤维化程度(如图1所示)。

采用免疫组化试验检测显示白术内酯Ⅱ能够降低5/6肾切除大鼠肾组织中的降低α-SMA与CollagenⅠ的表达(如图2所示)。

应用例3

对实施例2中实验结束后的小鼠进行体液检测，检测结果如表2所示。

表2白术内酯Ⅱ对UUO模型药效作用

组别	假手术组	UUO组	白术内酯Ⅱ组
				血肌酐(μmol/L)	11.85±1.61	25.04±8.26**	15.39±2.78##
尿素氮(mmol/L)	5.63±0.68	7.48±1.07**	5.90±0.68#

注：与假手术组比较，*P<0.05,**P<0.01；与UUO组比较，#P<0.05,##P<0.01.。

与假手术组比较，模型组小鼠血肌酐、尿素氮显著升高(P＜0.01)。与UUO组比较，白术内酯Ⅱ组血肌酐和尿素氮水平显著降低(P＜0.05或P＜0.01)。代表白术内酯Ⅱ具有显著的抗肾纤维化的疗效。

应用例4

对实施例2在12周末实验结束后的小鼠进行检测。通过HE病理染色发现，与假手术组比较，UUO组可见肾小管明显扩张、肾小球萎缩还有肾间质水肿症状出现，肾小管上皮细胞明显坏死，间质胶原增生明显，肾间质大量炎性细胞浸润，发生明显的纤维化改变。

与单侧输尿管梗阻组相比较，白术内酯Ⅱ对肾小管间质结构较模型组有所改善，肾小管扩张相对缓解，炎性细胞浸润也有所改善。通过Masson病理染色发现，与假手术组比较，UUO组肾皮质中肾小球和肾小管细胞间隙胶原沉积明显增多，与UUO组比较，白术内酯Ⅱ组胶原纤维沉积不同程度减少(如图3所示)。免疫组化显示白术内酯Ⅱ组能够降低UUO小鼠肾组织中的降低α-SMA与CollagenⅠ的表达(如图4所示)。

由以上实施例可知，白术内酯Ⅱ具有显著的治疗肾纤维化的技术效果。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (6)

1.白术内酯Ⅱ在制备抗肾纤维化药物中的应用。

2.一种抗肾纤维化药物，其特征在于，包括白术内酯Ⅱ和药用辅料。

3.根据权利要求2所述的抗肾纤维化药物，其特征在于，所述抗肾纤维化药物中白术内酯Ⅱ占总质量的1～99％。

4.根据权利要求2或3所述的抗肾纤维化药物，其特征在于，所述药用辅料包括药用载体、稀释剂、佐剂和赋形剂中的一种或多种。

5.根据权利要求4所述的抗肾纤维化药物，其特征在于，所述药物的剂型选自颗粒剂、片剂、散剂、胶囊剂、口服液、注射剂、喷雾剂、气雾剂、粉雾剂、乳剂、滴鼻剂、栓剂、丸剂、微球制剂或酊剂。

6.根据权利要求2或3所述的抗肾纤维化药物，其特征在于，所述抗肾纤维化药物采用的白术内酯Ⅱ原料纯度大于90％。

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