CN111803487B

CN111803487B - 银杏萜内酯在制备预防和/或治疗吉兰-巴雷综合征药物中的用途

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Publication number: CN111803487B
Application number: CN201911167420.8A
Authority: CN
Inventors: 李慧琴; 唐永鑫; 刘科
Original assignee: Chengdu Baiyu Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Chengdu Baiyu Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2019-04-10
Filing date: 2019-11-25
Publication date: 2022-12-02
Anticipated expiration: 2039-11-25
Also published as: CN111803487A

Abstract

本发明涉及医药技术领域，具体公开了一种银杏萜内酯在制备预防和/或治疗吉兰‑巴雷综合征药物中的用途。本发明公开了银杏萜内酯具有一定减轻EAN小鼠病情的作用，并且不同的银杏萜内酯单体化合物组合使用显示出一定的协同增效作用。本发明公开了银杏萜内酯在临床上可用于预防和/或治疗吉兰‑巴雷综合征的症状，且未观察到任何不良反应。本发明所提供的药物原料获取方式普遍，制备成本更低，病患治疗成本低，安全性强。

Description

银杏萜内酯在制备预防和/或治疗吉兰-巴雷综合征药物中的用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及银杏萜内酯在制备预防和/或治疗吉兰-巴雷综合征药物中的用途。

背景技术

吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barré-Strohl syndrome，GBS)是一种免疫介导的主要累及周围神经系统的疾病，目前认为可由多种感染及非感染性因素触发，是目前常见的引起急性四肢瘫痪的常见原因之一。

目前认为，GBS主要是因感染性病原体触发的异常免疫反应，涉及了细胞免疫和体液免疫。细胞免疫：循环的T细胞被未知的抗原激活，这过程是由抗原提呈细胞(APCs)通过主要组织相容性复合物(MHC)、T细胞受体(TCR)和共同刺激信号来实现；这些活化的神经源性T细胞增殖分化为Th1、Th2和Th17以及分泌的免疫炎症因子通过受损的血液神经屏障(BNB)到达周围神经系统；Th1主要分泌TNF-α和IFN-γ激活巨噬细胞；而巨噬细胞分泌NO、MMP和TNF-α，不但能损伤神经髓鞘和BNB，还能促进Th1的增殖；Th2主要分泌IL-4和6，促使B淋巴细胞活化，引起体液免疫；Th17主要分泌IL-17和IL-22，能加剧BNB损伤和周围神经炎。体液免疫：B淋巴细胞通过APCs被未知的抗原活化，转化为浆细胞分泌抗体，活化的B细胞和抗体等通过受损的BNB到达周围神经系统；这些抗体能活化巨噬细胞，并能诱导抗体介导的细胞毒性(ADCC)；还能激活补体系统，形成膜攻击复合物；最终导致神经轴突和髓鞘的损伤。

早在1985年，临床研究就证实了PE(血浆置换)在GBS治疗中的作用，尤其是发病2周内不能行走患者，PE治疗可以加速患者的恢复；1992年，随机试验证实IVIG(静脉内免疫丙种球蛋白)对于GBS治疗有效；1993年，糖皮质激素对于GBS治疗无效，1997年IVIG+PE对于GBS治疗并不优于单纯IVIG；2004年，IVIG+激素对于GBS治疗并不优于单纯IVIG；2016年，新西兰SID-GBS对预后差GBS是否可从再次应用IVIG后获益进行研究，同样在TheInternational Guillain-BarréSyndrome Outcome Study多中心研究中包含此内容，期待结果发布；2017年，补体抑制剂(eculizumab)治疗GBS的小规模临床试验2期多中心的随机临床试验开始，期待研究结果。

目前，针对于GBS有效的免疫治疗公认为PE和IVIG两种，PE可以去除血浆中的大分子颗粒，包括细胞因子、免疫复合物和其他炎症物质，但其可能会致使血压变化、心律失常，使用中心导管和出血以及可能合并败血症；IVIG可使部分患者由急性期恢复，降低死亡率；但同时静脉应用丙种球蛋白亦存在多种副作用，经长期随访发现仍有部分患者遗留有不同程度的神经功能障碍，因此进一步探索GBS治疗新方法仍是神经病学亟待解决的问题。

银杏萜内酯是银杏叶提取物中的药效成分，银杏萜内酯具有抗过敏、抗炎、抗休克、对缺血损伤的保护、对器官移植排斥反应的保护等功能(管孝鞠.银杏内酯药理作用研究进展，1995年第22卷第3期)。徐江平等报道了银杏内酯可降低麻醉犬脑血管阻力,增加脑血流量，但是不影响心率及血压(徐江平等.银杏内酯对犬脑血流量的影响.《中西医结合学报》.2005-01-15)。目前未见银杏萜内酯或银杏提取物用于预防和/或治疗吉兰-巴雷综合征的报道。

发明内容

本发明提供一种银杏萜内酯的新用途，即银杏萜内酯在制备预防和/或治疗吉兰-巴雷综合征药物中的用途。

银杏萜内酯或其药学可接受的盐、酯、水合物、溶剂化物、异构体，或它们的任意晶型、消旋物、代谢物，或它们的混合物在制备预防和/或治疗吉兰-巴雷综合征药物中的用途。如本发明试验例1所示，发明人通过研究银杏萜内酯用药前后EAN(实验性自身免疫性神经炎)模型大鼠神经症状评分探索银杏萜内酯能否治疗吉兰巴雷-综合征，EAN模型是当前医学领域公认理想的吉兰-巴雷综合征的动物模型，在临床神经免疫学的研究中具有重要意义。根据试验1例可知，银杏萜内酯能够显著降低大鼠临床症状评分，显著改善大鼠EAN疫情。

优选地是，所述银杏萜内酯为银杏倍半萜内酯或/和银杏二萜内酯。

优选地是，所述银杏萜内酯为银杏内酯A或银杏内酯B或银杏内酯C或银杏内酯M或银杏内酯J或银杏内酯K或银杏内酯L或银杏内酯N或银杏内酯P或银杏内酯Q或白果内酯中的一种或两种及以上。

优选地是，所述银杏萜内酯为白果内酯∶银杏内酯B＝(35～60)∶(40～65)w/w；或银杏内酯A∶银杏内酯C＝(40～75)∶(25～60)w/w；或银杏内酯M∶银杏内酯K＝(30～60)∶(40～70)w/w；或银杏内酯A∶银杏内酯B∶银杏内酯C＝1∶1∶1(w/w/w)；或银杏内酯A∶银杏内酯B∶银杏内酯C∶白果内酯＝12∶34∶6∶48(w/w/w/w)中的一组。

优选地是，所述银杏萜内酯为银杏内酯A∶银杏内酯B∶银杏内酯C∶白果内酯＝(10～35)∶(20～38)∶(5～14)∶(26～50)w/w/w/w。

优选地是，所述银杏萜内酯选自白果内酯∶银杏内酯B＝50∶50(w/w)；或银杏内酯A∶银杏内酯C＝50∶50(w/w)；或银杏内酯M∶银杏内酯K＝50∶50(w/w)。

发明人研究发现银杏萜内酯单体化合物或多种银杏萜内酯化合物组合使用均可以降低大鼠神经症状评分，改善EAN大鼠疫情。并且，在多种银杏萜内酯化合物组合使用中，发明人还发现在上述比例下，药物组合使用不仅可以治疗EAN大鼠疫情，还能取得超过原本任一银杏萜内酯化合物单用的疗效，取得协同增效的效果。

优选地是，所述吉兰巴雷综合征的疾病亚型为急性炎性脱髓鞘性多发神经病、急性运动轴索性神经病、急性运动感觉轴索性神经病、米勒费雪症候群、急性泛自主神经病及急性感觉神经病。

本发明还提供了一种所述预防和/或治疗吉兰-巴雷综合征的药物，所述药物包含作为活性成分的银杏萜内酯，以及药物可接受的载体，所述银杏萜内酯为白果内酯∶银杏内酯B＝(35～60)∶(40～65)w/w；或银杏内酯A∶银杏内酯C＝(40～75)∶(25～60)w/w；或银杏内酯M∶银杏内酯K＝(30～60)∶(40～70)w/w；或银杏内酯A∶银杏内酯B∶银杏内酯C＝1∶1∶1(w/w/w)；或银杏内酯A∶银杏内酯B∶银杏内酯C∶白果内酯＝12∶34∶6∶48(w/w/w/w)中的一组。

优选地是，所述载体包括填充剂、稀释剂、润滑剂、助流剂、抗粘着剂、分散剂、湿润剂、粘合剂、调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、崩解剂中的一种及以上；所述粘合剂包含阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄芪胶、纤维素、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素、糖浆、淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮中的一种及以上；所述填充剂包含乳糖、糖粉、糊精、淀粉及其衍生物、纤维素及其衍生物、无机钙盐、山梨醇、甘氨酸中的一种及以上；所述润滑剂包含微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉、氢氧化铝、硼酸、氢化植物油、聚乙二醇中的一种及以上；所述崩解剂包含淀粉及其衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素中的一种及以上；所述湿润剂包含十二烷基硫酸钠、水、醇中的一种及以上；所述抗氧剂包含亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、二丁基苯酸中的一种及以上；所述调节剂包含盐酸、枸橼酸、氢氧化钾、枸橼酸钠、缓冲剂中的一种及以上；所述乳化剂包含聚山梨酯-80、没酸山梨坦、普流罗尼克F-68，卵磷酯、豆磷脂中的一种及以上；所述增溶剂包含吐温-80、胆汁、甘油中的一种及以上。

本发明还提供了包含上述药物制剂，所述制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、针剂或粉针剂。

本发明还提供了制备预防和/或治疗吉兰-巴雷综合征药物的方法，包括将有效量的银杏萜内酯及药物载体混合。

本发明还提供了一种预防和/或治疗吉兰-巴雷综合征的方法，包括给予受试者治疗有效量的上述银杏萜内酯。

本发明公开了银杏萜内酯具有减轻EAN小鼠病情的作用，并且不同的银杏萜内酯单体化合物组合使用显示出了协同增效的作用。

本发明所提供的具有治疗吉兰巴雷综合征的银杏萜内酯较丙种球蛋白具有获取更便利的优势，丙种球蛋白由健康人血浆提取，银杏萜内酯是由银杏叶提取纯化，药物来源普遍，制备成本更低，有着广泛的应用前景。

具体实施方式

如本发明所述，术语“预防”指预防疾病发生和/或预防疾病复发。

如本发明所述，术语“吉兰-巴雷综合征”，等同于“格林巴利综合征”，等同于“格雷-巴利综合征”，等同于“格-巴二氏综合征”。

如本发明所述，协同增效作用指两药合用效应大于各组成药物单独作用的效应时，则认定其有协同增效作用。

本发明所述吉兰-巴雷综合征包括如下疾病亚型：急性炎性脱髓鞘性多发神经病(AIDP)、急性运动轴索性神经病(AMAN)、急性运动感觉轴索性神经病(AMSAN)、米勒费雪症候群(MillerFisher，MFS)、急性泛自主神经病、急性感觉神经病(ASN)。

试验例1银杏萜内酯对实验性自身免疫性神经炎(experimental autoimmuneneuritis，EAN)模型大鼠的治疗作用

1.材料与方法

1.1实验动物

Lewis大鼠，200只，SPF级(无特定病原体)，雌性，42-48日龄。购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物生产许可证号：SCXK(京)2016-0011，动物合格证编号：No.11400700299780。

1.2试剂与药品

周围神经髓鞘抗原性肽段P2 53-78，委托上海吉尔生化定制合成。(肽段具体结构：THR GLU SER PRO PHE LYS ASN THR GLU ILE SER PHE LYS LEU GLY GLN GLU PHEGLU GLU THR THR ALA ASP ASN ARG)。弗氏不完全佐剂，Sigma-Aldrich，Lot#SLBQ2284V。Mycobacterium Tuberculosis，H37Ra，热灭活的结核分枝杆菌干粉，BD Difco。

1.3分组与造模

本领域技术人员知晓，药理效应与剂量在一定的范围内才呈现正比关系，即称为剂量-效应关系，本发明申请人前期通过预实验已完成了银杏萜内酯与EAN小鼠模型的剂量-效应关系的相关探索，发现银杏萜内脂的给药总剂量在0～4.5mg/kg范围内，药物效应的强弱随药物剂量呈现连续增强的量的变化，而当银杏萜内脂的给药总剂量在4.5～15mg/kg范围内，药效已达最大效应，强弱不随药物剂量呈现连续性量的变化，具体见表1。因此，本发明试验例1将给药剂量设定在4.5～15mg/kg范围内，可排除药物剂量-量效关系对研究结果的影响。

实验设置20组，每组10只

阴性对照组：生理盐水

模型对照组：生理盐水

银杏内酯A组(GA组)：4.5mg/kg

银杏内酯B组(GB组)：4.5mg/kg

银杏内酯C组(GC组)：4.5mg/kg

银杏内酯J组(GJ组)：4.5mg/kg

银杏内酯M组(GM组)：4.5mg/kg

银杏内酯K组(GK组)：4.5mg/kg

白果内酯组(BB组)：4.5mg/kg

银杏内酯Ⅰ组(GA:GC＝40:60)：8.0mg/kg

银杏内酯Ⅱ组(GA:GC＝75:25)：6.0mg/kg

银杏内酯Ⅲ组(GA:GC＝50:50)：9mg/kg

银杏内酯Ⅳ组(GM:GK＝30:70)：6.4mg/kg

银杏内酯Ⅴ组(GM:GK＝60:40)：7.5mg/kg

银杏内酯Ⅵ组(GM:GK＝50:50)：9mg/kg

银杏内酯Ⅶ组(GB:BB＝40:60)：7.5mg/kg

银杏内酯Ⅷ组(GB:BB＝65:35)：6.9mg/kg

银杏内酯Ⅸ组(GB:BB＝50:50)：9mg/kg

银杏内酯Ⅹ组(GA:GB:GC＝1:1:1)：13.5mg/kg

银杏内酯Ⅺ组(GA:GB:GC:BB＝12:34:6:48)：9.4mg/kg

上述银杏萜内酯单体化合物组合使用的比例均为质量比例。

上述银杏萜内酯单体化合物两两组合使用的质量比例设置原则为：发明人首先通过对两种银杏萜内酯单体化合物进行质量1：1的组合使用试验，探究两药合用效应与各组成药物单独作用的效应差异，当两药合用效应大于各组成药物单独作用的效应时，则两药组合使用具有协同增效的作用。

当两药组合使用具有协同增效的作用时，发明人进一步探究两种银杏萜内酯单体化合物的质量比例以研究两药组合使用时发生协同增效作用的最佳质量比例范围。

发明人还进一步探究了银杏萜内酯单体化合物三种及四种组合使用是否会发生协同增效的作用。

灌胃，每天2次。药物经由辅料(甘油∶乙醇＝6∶4V/V)溶解为5mg/ml后均用灭菌饮水配置为相应浓度。

EAN模型组大鼠两侧后肢足垫皮下注射接种物，200μL/只(每侧各100μL)。每只大鼠的接种物中含有抗原肽段P2 53-78 200μg，弗氏不完全佐剂100μL，H37Ra 2mg，0.9％氯化钠注射液100μL。阴性对照组注射等体积生理盐水。各组动物于免疫后第一天开始给药，共计30天。

1.4神经症状评分及体重变化

以造模当天为第0日，之后为30日的观察期，观察日采用D+数字的方式表示，D1、D2、D3分别表示观察第一日、观察第二日、观察第三日，后续日期以此类推。每两日一次称量大鼠体重，采用并对所有实验动物进行临床症状评分。在动物发病高峰期(D14-D20)所在一周内，每日进行体重称量和临床症状评分。评分标准如下：0分，正常；1分，尾部变软；2分，尾部无法抬起；3分，体位不能自行纠正；4分，共济失调；5分，后肢轻度麻痹；6分，后肢中度麻痹；7分，后肢重度麻痹；8分，四肢轻瘫；9分，四肢重瘫；10分，死亡。

1.5踝关节痛觉测试

在EAN模型动物发病高峰期附近，对EAN模型动物和佐剂对照动物进行踝关节痛觉试验，在大鼠静息状态下，施力使其后足向脚掌方向弯曲(背屈)。每侧重复测5次，每次间隔至少5s。每次背屈时如果大鼠出现嘶叫或明显的缩足动作，计1分，每侧总分0-5分。

1.6数理统计

数据采用平均值±标准差

表示。症状评分和痛觉评分采用非参数检验Mann-Whitney U，对两组间差异进行比较，P<0.05有统计学差异。

2.实验结果

表1银杏萜内酯不同剂量对EAN模型大鼠神经症状的影响(预实验研究-D17)

注：与模型对照组比较，*P<0.05；与同样品低剂量比较，^△P<0.05

表2银杏萜内酯对EAN模型大鼠神经症状的影响

注：与模型对照组比较，*P<0.05

结果如表2所示，与模型组比较，本试验例中各银杏萜内酯单体化合物、单体化合物二者组合联用、单体化合物三者组合联用以及单体化合物四者组合联用，在不同的时间范围内均能降低临床评分，差异具有统计学意义。表明以上各给药组均能改善EAN大鼠临床症状。

表3银杏内酯A与银杏内酯C组合联用的协同增效作用

注：与效果较优的单用组(GA组)比较，#P<0.05

如表3所示，与效果较优的GA组比较，本试验例中银杏内酯Ⅰ组和银杏内酯Ⅱ组在D14-20临床评分更低，银杏内酯Ⅲ组在D12-22临床评分更低，差异具有统计学意义。表明银杏内酯A与银杏内酯C联用具有协同增效作用。

表4银杏内酯M与银杏内酯K组合联用的协同增效作用

注：与效果较优的单用组(GK组)比较，#P<0.05

如表4所示，与效果较优的GK组比较，本试验例中银杏内酯Ⅳ组和银杏内酯Ⅴ组在D16-19临床评分更低，银杏内酯Ⅵ组在D14-20临床评分更低；差异具有统计学意义。表明银杏内酯M与银杏内酯K联用具有协同增效作用。

表5银杏内酯B与白果内酯组合联用的协同增效作用

注：与效果最优单用组(GB组)比较，#P<0.05；

如表5所示，与单体给药中效果最优的GB组比较，本试验例中银杏内酯Ⅶ组、银杏内酯Ⅷ组、银杏内酯Ⅸ组、银杏内酯Ⅹ组和银杏内酯Ⅺ组在第12-第26天范围内不同天次的临床评分更低；表明银杏内酯B与白果内酯联用具有协同增效作用；银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C以及白果内酯联用具有协同增效作用。

表6银杏内酯对EAN模型大鼠疼痛反应的影响

注：与模型对照组比较，*P<0.05；与GA组比较，#P<0.05；与GK组比较，$P<0.05；与GB组比较，&P<0.05

如表6所示，与模型组相比，以上各给药组在第十八天时疼痛评分均显著升高，差异具有统计学意义，表明银杏萜内酯各给药组均能改善EAN大鼠疼痛症状。与GA或GC组比较，本试验例中银杏内酯Ⅰ组、银杏内酯Ⅱ组、银杏内酯Ⅲ组评分均升高，其中银杏内酯Ⅲ组差异有统计学意义，表明银杏内酯Ⅲ组的协同效果最佳。与GM或GK组比较,银杏内酯Ⅳ组、银杏内酯Ⅴ组、银杏内酯Ⅵ组评分均升高，其中银杏内酯Ⅵ组差异有统计学意义，表明银杏内酯Ⅵ组的协同效果最佳。与GB或BB组比较，银杏内酯Ⅶ组、银杏内酯Ⅷ组、银杏内酯Ⅸ组、银杏内酯Ⅹ组、银杏内酯Ⅺ组评分均升高，其中银杏内酯Ⅸ组、银杏内酯Ⅹ组和银杏内酯Ⅺ组差异有统计学意义。其中银杏内酯Ⅷ组的协同效果最佳，银杏内酯Ⅹ组联用具有协同增效作用，银杏内酯Ⅺ组联用具有协同增效作用。

3.结论

综合临床评分和疼痛评分结果显示，银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、银杏内酯J、银杏内酯M、银杏内酯K、白果内酯各单体，以及银杏内酯A与银杏内酯C组合联用、银杏内酯M与银杏内酯K组合联用、银杏内酯B与白果内酯组合联用、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C组合联用以及银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、白果内酯组合联用均能改善EAN大鼠临床评分和疼痛评分，并且各药物联用具有协同增效作用。

试验例2银杏萜内酯对实验性自身免疫性神经炎(experimental autoimmuneneuritis，EAN)模型家兔的治疗作用

1.材料与方法

1.1实验动物

大耳白兔，210只，雌雄各半，2.0-2.4kg。购自四川省实验动物专委会养殖场。

1.2试剂与药品

完全弗氏佐剂，Sigma-Aldrich。牛坐骨神经髓鞘碱性蛋白(P2)，实验用兔免疫球蛋白。PCR引物及内参B-actin(GAPDH)，Trizol试剂，RT-PCR试剂盒(大连宝生物公司)；PCRMarker(美国Prom ega公司)。

1.3分组与造模

实验设置21组，每组8只

阴性对照组：生理盐水

模型对照组：生理盐水

阳性对照组：兔免疫球蛋白，400mg/kg.d腹腔注射，连续5天

银杏内酯组的设置与试验例1相同，即包括银杏内酯A组～K组(GA～GK组)、白果内酯组(BB组)和银杏内酯Ⅰ组～Ⅺ组共计18组，各组所用银杏内酯的单体组成及配比均与试验例1相同，区别仅在于所有银杏内酯组均采用相同的给药剂量，均为4.5mg/kg。

EAN家兔模型建立：取一定量牛坐骨神经髓鞘碱性蛋白加等体积福氏完全佐剂，经试管振荡器摇匀，将两者充分混合后多点注入兔子背部皮下。免疫后的第二天开始每天观察其临床表现，判断其临床过程。以出现下述症状表现为造模成功标准：精神萎糜，活动减少，食欲减退，体重下降，尾部及足爪皮毛不洁，四肢无力，软瘫，以后肢为重，反射和应激机能减低。

1.4坐骨神经组织Th细胞TNF-α、IL-4、IL-10、IL-12mRNA水平

造模第14天后麻醉取家兔坐骨神经组织，经Trizol法提取总RNA。采用RT-PCR法进行检测。(GBS是神经系统自身免疫性疾病,是患者体内自身反应性T细胞对神经髓鞘P2抗原产生细胞免疫应答，形成迟发型变态反应性周围神经脱髓鞘病理损伤。该过程主要由CD4⁺T细胞介导，又称最初的Th细胞，在抗原刺激后可分化为Th1和Th2，Th1细胞因子(以TNF-α和IL-12为代表)主要加强细胞介导的免疫反应,为炎症性细胞因子；而Th2细胞因子(以IL-4和IL-10为代表)主要参与抗体介导的免疫反应,具有免疫下调、抗炎效应。在GBS和EAN的研究中，Th1/Th2的失衡在疾病损伤中发挥了重要作用。)

1.5数理统计

数据采用平均值±标准差

表示。对两组间差异进行比较，P<0.05有统计学差异。

2.实验结果

表7银杏萜内酯对EAN模型家兔Th细胞因子的影响

注：与模型对照组比较，*P<0.05；与银杏内酯A或C组比较，#P<0.05；与银杏内酯J、M或K组比较，&P<0.05；与银杏内酯B或BB组比较，△P<0.05

结果如表7所示，与模型组比较，本试验例中各银杏萜内酯单体化合物、单体化合物二者组合联用、单体化合物三者组合联用以及单体化合物四者组合联用，均能改善Th细胞因子水平，差异具有统计学意义。Th1细胞因子(以TNF-α和IL-12为代表)主要加强细胞介导的免疫反应,为炎症性细胞因子；而Th2细胞因子(以IL-4和IL-10为代表)主要参与抗体介导的免疫反应,具有免疫下调、抗炎效应。表明以上各给药组均能调节或纠正失衡的Th1/Th2细胞因子网络,而且调节内源性细胞因子平衡，从而控制疾病的进程,达到治疗效果。

通过对各组效果比较，再次表明银杏内酯A与银杏内酯C联用具有协同增效作用，银杏内酯M与银杏内酯K联用具有协同增效作用，银杏内酯B与白果内酯联用具有协同增效作用，银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C以及白果内酯联用具有协同增效作用，并且银杏内酯XI组各单体联用效果最佳。

实施例1

活性成分：白果内酯1000g(1份)银杏内酯B 1000g(1份)

制备方法：上述原料，加入单硬脂酸甘油脂1份，聚乙二醇1份、卡拉胶1份、阿拉伯胶1份、羟丙基甲基纤维素1份混匀，加入带水溶装置的滴丸机中，均匀加热并适时搅拌，熔融后滴入与之不相混的冷凝液中，冷凝后，取出滴丸，擦去粘附在表面的冷凝液，低温干燥即得。

实施例2

活性成分：白果内酯1000g(1份) 银杏内酯B 500g(0.5份)

银杏内酯A 250g(0.25份) 银杏内酯C 250g(0.25份)

实施例3

活性成分：白果内酯1000g(1份)

实施例4

活性成分：白果内酯520g(0.52份) 银杏内酯B 760g(0.76份)

银杏内酯A 700g(0.7份) 银杏内酯C 280g(0.28份)

实施例5

活性成分：白果内酯960g(0.96份) 银杏内酯B 680g(0.68份)

银杏内酯A 240g(0.24份) 银杏内酯C 120g(0.12份)

试验例3观察实施例1-实施例3所得银杏萜内酯制剂对GBS患者治疗疗效影响

1.评分标准

1.1MRC评分

采用英国医学研究理事会(MRC)评分标准，评估6个肌群的MRC分总和：包括双侧肩外展肌、屈肘肌、伸腕肌、屈髋肌、伸膝肌、足背屈肌；每组肌群的MRC评分按0～5分，总分评分范围为0分(完全瘫痪)～60分(正常)，肌群等级及分值如下：

0＝无肉眼可见的收缩；

1＝有肉眼可见的收缩但无运动；

2＝能够使肢体运动但不能对抗重力；

3＝能对抗重力且运动幅度基本上充分，但不能对抗阻力；

4＝能够对抗重力和阻力；

5＝正常。

1.2HFGS评分

见表8。

表8HFGS评分标准

2.实验结果

观察10例GBS患者服用实施例1所得的滴丸剂160mg/d 30天，与患者入院时MRC与HFGS评分比较，治疗疗效评价MRC总分升高2～8分、HFGS降低1个等级；未观察到不良反应。

观察9例GBS患者服用实施例2所得的滴丸剂160mg/d 30天，与患者入院时MRC与HFGS评分比较，治疗疗效评价MRC总分升高1～6分、HFGS分数降低1个等级；未观察到不良反应。

观察15例GBS患者服用实施例3所得的滴丸剂160mg/d 30天，与患者入院时MRC与HFGS评分比较，治疗疗效评价MRC总分升高3～7分、HFGS分数降低1个等级；未观察到不良反应。

试验例4观察实施例4-实施例5所得银杏萜内酯制剂对GBS患者治疗疗效影响

采用试验例3相同评分标准，对GBS患者进行疗效观察，结果如下：

观察12例GBS患者服用实施例4所得的滴丸剂160mg/d 30天，与患者入院时MRC与HFGS评分比较，治疗疗效评价MRC总分升高3～8分、HFGS降低1个等级；未观察到不良反应。

观察17例GBS患者服用实施例5所得的滴丸剂160mg/d 30天，与患者入院时MRC与HFGS评分比较，治疗疗效评价MRC总分升高5～12分、HFGS分数降低2个等级；未观察到不良反应。

综上所述，银杏萜内酯在临床上可用于预防和/或治疗吉兰-巴雷综合征的症状。

银杏萜内酯口服制剂服用方便，患者依从性好。

Claims

1.银杏萜内酯在制备治疗吉兰-巴雷综合征药物中的用途，所述银杏萜内酯为银杏内酯 A、银杏内酯 B、银杏内酯C、银杏内酯 M、银杏内酯 J、银杏内酯 K、白果内酯中的一种或两种及以上。

2.根据权利要求 1 所述的用途，其特征在于，所述银杏萜内酯为白果内酯∶银杏内酯B＝(35～60)∶ (40～65)w/w；或银杏内酯 A∶银杏内酯 C＝(40～75)∶(25～60)w/w；或银杏内酯 M∶银杏内酯 K＝(30～60)∶ (40～70)w/w；或银杏内酯 A∶银杏内酯 B∶银杏内酯 C＝1∶ 1∶ 1(w/w/w)；或银杏内酯 A∶银杏内酯B∶银杏内酯 C∶白果内酯＝12∶ 34∶ 6∶ 48(w/w/w/w)中的一组。

3.根据权利要求 1 所述的用途，其特征在于，所述银杏萜内酯为银杏内酯 A∶银杏内酯 B∶银杏内酯 C∶白果内酯＝(10～35)∶ (20～38)∶ (5～14)∶ (26～50)w/w/w/w。

4.根据权利要求 1 所述的用途，其特征在于，所述银杏萜内酯选自白果内酯∶银杏内酯 B＝50∶ 50(w/w)；或银杏内酯 A∶银杏内酯 C＝50∶ 50(w/w)；或银杏内酯 M∶银杏内酯K＝50∶ 50(w/w)。

5.根据权利要求 1-4 任一项所述的用途，其特征在于，所述吉兰巴雷综合征的疾病亚型为急性炎性脱髓鞘性多发神经病、急性运动轴索性神经病、急性运动感觉轴索性神经病、米勒费雪症候群、急性泛自主神经病及急性感觉神经病。

6.根据权利要求 1-4 任一项所述的用途，其特征在于，所述药物包含作为活性成分的银杏萜内酯，以及药物可接受的载体；所述银杏萜内酯为白果内酯∶银杏内酯 B＝(35～60)∶ (40～65)w/w；或银杏内酯 A∶银杏内酯 C＝(40～75)∶ (25～60)w/w；或银杏内酯 M∶银杏内酯 K＝(30～60)∶ (40～70)w/w；或银杏内酯A∶银杏内酯 B∶银杏内酯 C＝1∶ 1∶ 1(w/w/w)；或银杏内酯 A∶银杏内酯 B∶银杏内酯 C∶白果内酯＝12∶ 34∶ 6∶ 48(w/w/w/w)中的一组。

7.根据权利要求 6 所述的用途，其特征在于，所述载体包括填充剂、稀释剂、润滑剂、助流剂、抗粘着剂、分散剂、湿润剂、粘合剂、调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、崩解剂中的一种及以上；所述粘合剂包含阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄芪胶、纤维素、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素、糖浆、淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮中的一种及以上；所述填充剂包含乳糖、糖粉、糊精、淀粉及其衍生物、纤维素及其衍生物、无机钙盐、山梨醇、甘氨酸中的一种及以上；所述润滑剂包含微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉、氢氧化铝、硼酸、氢化植物油、聚乙二醇中的一种及以上；所述崩解剂包含淀粉及其衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素中的一种及以上；所述湿润剂包含十二烷基硫酸钠、水、醇中的一种及以上；所述抗氧剂包含亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、二丁基苯酸中的一种及以上；所述调节剂包含盐酸、枸橼酸、氢氧化钾、枸橼酸钠中的一种及以上；所述乳化剂包含聚山梨酯-80、没酸山梨坦、普流罗尼克 F-68，卵磷酯、豆磷脂中的一种及以上；所述增溶剂包含吐温-80、胆汁、甘油中的一种及以上。