CN111802406A - 枯草芽孢杆菌j-5在防治黄瓜枯萎病中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了枯草芽孢杆菌J‑5在防治黄瓜枯萎病中的应用，所述黄瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌黄瓜专化型引起的。先以所述枯草芽孢杆菌J‑5制备生物菌剂，所述生物菌剂中枯草芽孢杆菌J‑5的含量为100×108cfu/g～120×108cfu/g，然后把所述生物菌剂施入到所述黄瓜枯萎病发病区域的土壤中。利用保藏号为CGMCC No.11750的菌株制得的枯草芽孢杆菌J‑5粉剂对黄瓜枯萎病有良好的抑制作用，能够有效降低黄瓜枯萎病的为害。

Description

枯草芽孢杆菌J-5在防治黄瓜枯萎病中的应用
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及枯草芽孢杆菌J-5在防治黄瓜枯萎病中的应用。
背景技术
黄瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌黄瓜专化型(Fusarium oxysporumf.sp.cucumerinum)病菌引起的一种危害严重的土传真菌性病害，该病菌在土壤、病株残体及未腐熟的农家肥中或附着在种子上越冬，成为翌年初侵染源，可借助雨水、灌溉水等进行远距离传播。黄瓜枯萎病在黄瓜的整个生长阶段(从苗期至成熟期)均能发生，在不利的气候及生长条件下更容易发生，黄瓜枯萎病典型的病症如下：坏死性病变、茎叶枯萎、根系枯萎等。黄瓜枯萎病有植物“癌症”之称，同一地块连作3年，发病率可高达70％，产量损失10％～50％，甚至绝收。
从中国专利“一种枯草芽孢杆菌J-5及其生物菌剂和应用”(CN105907680 B)专利文献可见：枯草芽孢杆菌J-5用于防治黄瓜灰霉病效果均在80％以上。
发明内容
经本专利申请人研究发现：枯草芽孢杆菌J-5对黄瓜枯萎病的病原菌也具有较强的拮抗作用。本发明的目的是提供枯草芽孢杆菌J-5在防治黄瓜枯萎病中的应用。
本发明所述的枯草芽孢杆菌J-5于2015年11月27日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心进行了保藏，保藏号为：CGMCC No.11750。
本发明保护枯草芽孢杆菌J-5在防治黄瓜枯萎病中的应用。
进一步的，所述黄瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌黄瓜专化型引起的。
进一步的，先以所述枯草芽孢杆菌J-5制备成生物菌剂，所述生物菌剂中枯草芽孢杆菌J-5的含量为100×108cfu/g～120×108cfu/g，然后把所述生物菌剂施入到黄瓜枯萎病发病区域的土壤中，主要施用在黄瓜根际周围的土壤中。
进一步的，所述生物菌剂为枯草芽孢杆菌J-5的芽孢菌剂或芽孢与菌体的混合菌剂。
本发明的有益效果为：
枯草芽孢杆菌J-5可以有效防治黄瓜枯萎病，防治效果可以达到58.82％以上，是一种经济、环保、绿色的植物病害防治手段。
附图说明：
图1为实施例2中枯草芽孢杆菌J-5菌株与尖孢镰刀菌黄瓜专化型(病原菌)拮抗试验结果；其中，平板A为接种尖孢镰刀菌黄瓜专化型后，30℃培养6天的生长情况，作为对照(CK)；平板B为同时接种了枯草芽孢杆菌J-5菌株(两点)与尖孢镰刀菌黄瓜专化型(平板中心点)后，30℃培养6天的生长情况。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。黄瓜枯萎病病源菌尖孢镰刀菌黄瓜专化型、枯草芽孢杆菌J-5均来自本专利申请人公司实验室，公众可从中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心获得。
实施例1，枯草芽孢杆菌J-5粉剂的制备
将保藏号为CGMCC No.11750的枯草芽孢杆菌菌株斜面用接种针挑取一环，接种至1只装有50ml牛肉膏液体培养基(1000ml该培养基的配方为：3g牛肉膏、10g蛋白胨、5g NaCl和1000ml蒸馏水，pH7.0～7.2.)的250ml的摇瓶中，重复上述接种过程8次，即把枯草芽孢杆菌菌株接种到8只同样的装有50ml牛肉膏液体培养基的250ml的摇瓶中；于35℃、200r/min条件下摇床振荡培养36小时，得到芽孢浓度8×108～10×108cfu/ml的芽孢悬浮液；将上述培养的400ml培养液转入装有15L PB液体培养基(1000ml该培养基的配方为：牛肉膏5g、蛋白胨10g、NaCl 5g和1000ml自来水，调整PH值至7.2～7.4)的50L发酵罐中，于35℃、180r/min的恒温条件下培养48小时，得到芽孢浓度8×108～10×108cfu/ml的芽孢悬浮液，用离心机5000r/min离心5分钟，获得枯草芽孢杆菌的芽孢及菌体，与硅藻土按1∶1的比例混匀，低温干燥后粉碎，形成有效活菌数为100×108cfu/g～120×108cfu/g的枯草芽孢杆菌J-5粉剂。
实施例2、枯草芽孢杆菌J-5与尖孢镰刀菌黄瓜专化型的对峙培养
1、改良的NB培养基：蛋白胨5g，葡萄糖10g，肉汁浸膏3g，氯化钠5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH＝7.2。
2、培养基平板的制备：将NB培养基配制完成后，进行121℃、30分钟灭菌，放至45℃～50℃，无菌条件下倒入无菌培养皿内，厚度约3mm～5mm，水平放置，凝固后即制成培养基平板。
3、接种方法：无菌条件下用接种针从黄瓜枯萎病菌(尖孢镰刀菌黄瓜专化型)斜面挑取一环，接种于平板的中心点；无菌条件下在平板靠近中心约20mm处的2个点分别接种枯草芽孢杆菌J-5的培养液各一环，30℃培养6天，得到如图1的平板对峙效果。
4、拮抗能力评价方法：
根据抑菌圈(枯草芽孢杆菌J-5中心点到黄瓜枯萎病菌边缘的距离)的大小对枯草芽孢杆菌J-5拮抗黄瓜枯萎病菌的活性进行评估：0mm，无抑制作用；＜2mm，有轻微的抑制作用；2-5mm，中等抑制作用；＞5mm，较强的抑制作用。由图1可见，抑制圈半径为5mm以上，枯草芽孢杆菌J-5对黄瓜枯萎病的病原菌生长具有较强的拮抗作用。
图1为枯草芽孢杆菌J-5与尖孢镰刀菌黄瓜专化型的平板对峙图。
其中A是病原菌单接种图片(CK)；
B是枯草芽孢杆菌J-5对病原菌的平板对峙图。
实施例3、枯草芽孢杆菌J-5在防治黄瓜枯萎病中的应用。
试验地点；河北省昌黎县马坨店乡某农户连续种植黄瓜4年的温室大棚。
试验品种：田娇五号
试验时间：2019年10月5日～2020年1月31日
茬口安排：越冬茬(9月2日育苗，10月5日定植，11月10日开始上市，第二年5月底采收完成)所有试验数据的调查统计工作在2020年1月31日前结束。
试验设计：设以下3个处理，每个处理均3次重复。
处理小区面积20m2，试验总占地180m2。
处理1：将实施例1制得的枯草芽孢杆菌J-5粉剂，按照使用剂量为每亩5Kg拌细土35Kg，在黄瓜秧移栽定植前用打孔器打孔穴施，穴深10厘米，其它栽培管理措施均按照当地温室黄瓜生产技术规范执行。
处理2：施入50％多菌灵可湿性粉剂作为防治药物，按照使用剂量为每亩5.5Kg粉剂拌细土35Kg，在黄瓜秧移栽定植前用打孔器打孔穴施，穴深10厘米，其它栽培管理措施均按照当地温室黄瓜生产技术规范执行。
处理3：空白对照CK，除不穴施枯草芽孢杆菌J-5粉剂或50％多菌灵可湿性粉剂外，其余栽培管理措施均按照昌黎当地温室黄瓜生产技术规范执行。
调查黄瓜枯萎病的发病情况，定植60天后(2019年12月4日)调查1次，采用对角线五点取样法，每个处理随机调查20株，共取样180株调查植株发病率与病情指数。
植株发病率＝(染病株数/调查总株数)×100％
植株病情指数＝[∑(各级病株数×相应级数)/调查总株数×最高级别值]×100％相对防治效果(％)＝(CK区病情指数-处理区病情指数)/CK区病情指数×100黄瓜枯萎病的病级分级标准及调查方法：
黄瓜枯萎病发病的严重度分级标准5级，
具体如下：
0级：0级-植株外表无病症；
1级：枯萎叶面积占全株叶面积的25％以下；
2级：植株轻度萎蔫，茎出现坏死斑，枯萎叶面积占全株叶面积的25％～50％；
3级：植株中度萎蔫，叶片下垂黄化，枯萎叶面积占全株叶面积的50％以上或仅生长点存活；
4级：植株严重萎蔫，倒伏枯死。
防治试验结果见表1，使用枯草芽孢杆菌J-5粉剂可降低黄瓜枯萎病发病率、降低病情指数，防病效果为58.82％，防治效果略低于多菌灵粉剂的防治效果。
表1：
Figure BSA0000212685660000041
由上述表1的结果可以看出，利用保藏号为CGMCC No.11750的菌株制得的枯草芽孢杆菌J-5粉剂对黄瓜枯萎病有良好的抑制作用，能够有效降低黄瓜枯萎病的为害。
以上仅为本发明的较佳实施方式，而非对其保护范围的限制，本领域技术人员在不需要付出创造性劳动的前提下对本发明做出的任何改进，均应认为在本发明的保护范围内。

Claims (4)

1.枯草芽孢杆菌J-5在防治黄瓜枯萎病中的应用，所述枯草芽孢杆菌J-5于2015年11月27日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心进行了保藏，保藏号为：CGMCC No.11750。
2.如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌J-5在防治黄瓜枯萎病中的应用，其特征在于：所述黄瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌黄瓜专化型引起的。
3.如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌J-5在防治黄瓜枯萎病中的应用，其特征在于：先以所述枯草芽孢杆菌J-5制备生物菌剂，所述生物菌剂中枯草芽孢杆菌J-5的含量为100×108cfu/g～120×108cfu/g，然后把所述生物菌剂施入到所述黄瓜枯萎病发病区域的土壤中。
4.根据权利要求3所述的枯草芽孢杆菌J-5在防治黄瓜枯萎病中的应用，其特征在于：所述生物菌剂为枯草芽孢杆菌J-5的芽孢菌剂或芽孢与菌体的混合菌剂。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114456966A (zh) * 2020-12-29 2022-05-10 中国农业大学 用于防治黄瓜枯萎病的芽孢杆菌菌剂及其制备方法和应用
CN114874931A (zh) * 2021-12-22 2022-08-09 河北省科学院生物研究所 一种复合微生物菌剂及其制备方法和应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1952117A (zh) * 2006-04-18 2007-04-25 兰州大学 一株枯草芽孢杆菌菌株及其应用
CN101766189A (zh) * 2008-12-29 2010-07-07 辽宁省农业科学院植物保护研究所 一种能促进黄瓜生长和防治黄瓜枯萎病的植物内生菌剂
CN103374536A (zh) * 2012-04-20 2013-10-30 中国农业大学 一株枯草芽孢杆菌及其在黄瓜枯萎病防治中的应用
CN105907680A (zh) * 2016-05-27 2016-08-31 河北省科学院生物研究所 一种枯草芽孢杆菌j-5及其生物菌剂和应用
CN110079483A (zh) * 2019-05-28 2019-08-02 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 一种枯草芽孢杆菌及其应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1952117A (zh) * 2006-04-18 2007-04-25 兰州大学 一株枯草芽孢杆菌菌株及其应用
CN101766189A (zh) * 2008-12-29 2010-07-07 辽宁省农业科学院植物保护研究所 一种能促进黄瓜生长和防治黄瓜枯萎病的植物内生菌剂
CN103374536A (zh) * 2012-04-20 2013-10-30 中国农业大学 一株枯草芽孢杆菌及其在黄瓜枯萎病防治中的应用
CN105907680A (zh) * 2016-05-27 2016-08-31 河北省科学院生物研究所 一种枯草芽孢杆菌j-5及其生物菌剂和应用
CN110079483A (zh) * 2019-05-28 2019-08-02 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 一种枯草芽孢杆菌及其应用

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114456966A (zh) * 2020-12-29 2022-05-10 中国农业大学 用于防治黄瓜枯萎病的芽孢杆菌菌剂及其制备方法和应用
CN114456966B (zh) * 2020-12-29 2023-08-04 中国农业大学 用于防治黄瓜枯萎病的芽孢杆菌菌剂及其制备方法和应用
CN114874931A (zh) * 2021-12-22 2022-08-09 河北省科学院生物研究所 一种复合微生物菌剂及其制备方法和应用

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