CN111789826A - 一种双靶向定位药物、双靶向定位药物载体及其制备方法和应用 - Google Patents

一种双靶向定位药物、双靶向定位药物载体及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种双靶向定位药物载体，包括纳米粒子以及纳米粒子上修饰的肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列，所述纳米粒子由镧系原料、黑磷量子点和聚乙二醇通过水热反应制成。本发明双靶向定位药物载体具有较强的配位能力，不仅易于与所负载的药物进行配位，而且可提供多个结合位点，负载量大，能够满足现有的关于靶向分子、药物等的多重负载的化疗需求。该纳米粒子还具有光动力、光热效应，确保该双靶向定位药物载体具有光动力治疗效果和光热治疗效果，实现该双靶向定位药物载体应用于肿瘤治疗时的联合治疗效果。本发明还提供了一种双靶向定位药物、双靶向定位药物载体的制备方法和应用。

Description

一种双靶向定位药物、双靶向定位药物载体及其制备方法和 应用
技术领域
本发明涉及纳米抗肿瘤药物技术领域，具体涉及一种双靶向定位药物，本发明还涉及一种双靶向定位药物载体，本发明还涉及该双靶向定位药物载体的制备方法以及该双靶向定位药物载体在制备抗肿瘤药物上的应用。
背景技术
小细胞肺癌(SCLC)是肺癌的一种未分化癌，约占肺癌的20％，其恶性程度较高，生物学行为恶劣，预后较差。它属于神经内分泌肿瘤，具有特殊的生物学行为，生存期短，进展快，常伴有内分泌异常或类癌综合征。与其他类型的肺癌相比，诊断前驱症状期短，一旦确诊而不进行治疗，中位生存期不足3个月，2年生存率小于1％。小细胞肺癌的分期特殊，分为局限期和广泛期，大多数小细胞肺癌患者在确诊时已属于广泛期，局限期所占比例仅为1/3。由于患者较早出现淋巴道转移和血行转移，因此在肺癌的各种类型中，小细胞肺癌的预后最差。
在诸多抗癌药物中，阿霉素(DOX)抗瘤谱较广，对于未分化的小细胞性和非小细胞性肺癌均可产生作用。此外，DOX是一种作用于DNA的药物，能够对DNA发生嵌入作用，这种作用抑制了解开DNA超螺旋的拓扑异构酶II。在拓扑异构酶II为了复制而解开DNA链后，DOX会稳定拓扑异构酶II，防止DNA双股螺旋再结合在一起，从而终止复制过程。但是，真核生物的核膜将细胞核与细胞质分隔开，如果不能保证DOX顺利进入细胞核，那么DOX只能对核膜核仁消失期的细胞起作用，而携带药物进入细胞核并非易事。核膜上有数以千计的核小孔蛋白复合体(Nuclear Protein Complex)，这些核小孔和特定的核输入蛋白(Inportin)彼此结合，形成有“密码”的物质交换体系。人工合成的纳米材料由于缺少特异性结合功能，很难进入细胞核。
已报道的细胞核输药载体有：中国专利公布号CN101066461，2007年，胡富强，杜永忠，袁弘，游剑，细胞核靶向壳寡糖-脂肪酸嫁接物载药胶团的应用，公开了细胞核靶向壳寡糖-脂肪酸嫁接物载药胶团在制备抗肿瘤药物的靶向载体中应用；中国专利公布号CN107496934A，2017年，帅心涛，万文清，韩世松，黄金生，一种细胞核靶向的抗肿瘤纳米药物载体及其制备方法和应用，公开了一种细胞核靶向的抗肿瘤纳米药物载体，所述纳米药物载体由聚合物胶束和通过静电相互作用构建于所述聚合物胶束表面的pH敏感的负电聚合物构成；中国专利公布号CN106619571A，2017年，周绍兵，敬雨亭，熊翔，明阳，郭星，赵静雅，一种提高细胞内吞和细胞核靶向的聚合物纳米载体及其制备方法，公开了一种细胞核靶向聚合物纳米载体，该载体是双亲性嵌段聚合物，疏水端为可生物降解吸收的聚酯类，亲水链段为末端接有促进细胞内吞和核靶向多肽的聚乙二醇，该多肽被一小分子修饰，小分子与多肽连接的酰胺键响应肿瘤弱酸性环境，促进细胞内吞和核靶向药物传递；刘畅，陈宇欣，王江帆，罗萱，黄宇迪，徐瑾蕾，鄢国平，陈思，张先正报道了一种能精准靶向肿瘤细胞核，将药物高效递送至作用靶点的多功能纳米载药体系(高分子学报，2018，06，682-691)；Feldheim小组于2004年从SV-large T病毒中提取细胞核定位信号(NLS)将25nm的纳米金成功地输送至细胞核(J.Am.Chem.Soc.,2003,125(16):4700-4701.)；El-Sayed小组于2007年使用NLS将纳米金选择性地输送进入癌细胞的细胞核(Bioconjugate Chem.,2007,18(5):1490-1497)。在现有报道的这些细胞核靶向载体中，一些载体仅具备细胞核定位功能而无法区分肿瘤细胞和正常细胞，因此会对正常细胞带来损害。另一些载体的荧光容易受到生物背景荧光的干扰，影响观察的分辨率。还有一些载体自身不易被修饰，需要通过复杂的有机反应实现功能化。总之，现有的靶向抗肿瘤药物在靶向性、抗生物背景干扰和修饰难易度上无法达到兼顾，在抗肿瘤应用上受到较大的限制。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种双靶向定位药物载体，本发明还提供了一种双靶向定位药物，本发明还提供了一种双靶向定位药物载体的制备方法，本发明还提供了该双靶向定位药物载体在制备抗肿瘤药物上的应用，用以克服现有抗肿瘤药物优点单一等缺陷，并解决无法兼顾靶向性、抗生物背景干扰和易修饰等问题、。
第一方面，本发明提供了一种双靶向定位药物载体，包括纳米粒子以及纳米粒子上修饰的肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列，所述纳米粒子由镧系原料、黑磷量子点和聚乙二醇通过水热反应制成。
本发明双靶向定位药物载体包括纳米粒子以及纳米粒子上修饰的肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列，其中，纳米粒子由镧系原料、黑磷量子点和聚乙二醇通过水热反应制成，该纳米粒子具有较强的配位能力，不仅易于与所负载的药物进行配位，而且可提供多个结合位点，负载量大，能够满足现有的关于靶向分子、药物等的多重负载的治疗需求。该纳米粒子还具有光动力、光热效应，确保该双靶向定位药物载体具有光动力治疗效果和光热治疗效果，实现该双靶向定位药物载体应用于肿瘤治疗时的联合治疗效果。该纳米粒子还能够稳定悬浮于细胞培养液中，光学性质不受细胞培养液中复杂成分的干扰。该纳米粒子具有较长的荧光寿命，可以使用时间分辨荧光技术消除各种非特异性荧光(背景荧光或干扰荧光)的干扰，提高分辨率。
本发明双靶向定位药物载体还包括肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列，其中，肿瘤细胞靶向分子确保该双靶向定位药物载体能够定位到肿瘤细胞，实现对肿瘤细胞的靶向杀伤；细胞核定位序列确保该双靶向定位药物载体穿透细胞膜后能够定位到肿瘤细胞的细胞核，实现靶向作用于肿瘤细胞的细胞核，具有更高的特异性，肿瘤细胞和细胞核双重定位使药物递送更为精准。
优选的，所述镧系原料为硝酸铕粉末、硝酸铽粉末和硝酸钆粉末中任意两种的组合。在具体的实施方式中，镧系原料可以为硝酸铕粉末与硝酸铽粉末的混合物，也可以是硝酸铕粉末与硝酸钆粉末的混合物，还可以是硝酸铽粉末与硝酸钆粉末的混合物。
优选的，所述聚乙二醇为聚乙二醇400。由此，聚乙二醇400能够与黑磷量子点、镧系原料反应生成生物相容性优异的纳米粒子。。
优选的，所述肿瘤细胞靶向分子为精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)或者叶酸。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)及叶酸均为成熟的肿瘤细胞靶向分子，具有较好的特异性，能够指引该双靶向定位药物载体及其负载的抗肿瘤药物特异性作用于肿瘤细胞。
优选的，所述细胞核定位序列(NLS)为PKKKRKVG。PKKKRKVG序列具有较好的特异性，能够指引该双靶向定位药物载体及其负载的药物特异性作用于细胞核。
第二方面，本发明提供了一种双靶向定位药物，包括本发明第一方面所述的双靶向定位药物载体和所述双靶向定位药物载体负载的抗肿瘤药物。
本发明双靶向定位药物具有本发明第一方面所述的双靶向定位药物载体的所有功能，借助于双靶向定位药物载体的双靶向作用，能够特异性地将该双靶向定位药物载体负载的抗肿瘤药物定位到肿瘤细胞，进一步借助于细胞核定位序列将抗肿瘤药物输送到肿瘤细胞的细胞核，例如干扰肿瘤细胞的核酸复制、翻译、表达等过程，最终达到特异性杀伤肿瘤细胞的目的。
优选的，所述抗肿瘤药物为DOX。阿霉素(DOX)抗瘤谱较广，对于未分化的小细胞性和非小细胞性肺癌均可产生作用。此外，DOX是一种作用于DNA的药物，能够对DNA发生嵌入作用，这种作用抑制了解开DNA超螺旋的拓扑异构酶II。在拓扑异构酶II为了复制而解开DNA链后，DOX会稳定拓扑异构酶II，防止DNA双股螺旋再结合在一起，从而终止复制过程。本发明双靶向定位药物能够将DOX顺利进入细胞核，DOX只能对核膜核仁消失期的细胞起作用，具有干扰肿瘤细胞增殖的效果。
第三方面，本发明还提供了一种双靶向定位药物载体的制备方法，包括以下步骤:
制备纳米粒子：提供镧系原料、黑磷量子点和聚乙二醇并混合，在氩气保护下，将混合物加热至90～110℃后搅拌，直至固体粉末充分溶解形成乳浊液，随后将温度升至320～340℃并搅拌反应20分钟以上，搅拌下冷却至室温，制得纳米粒子；
纳米粒子纯化：向纳米粒子中添加丙酮并充分搅拌，混合体系离心得到沉淀并用丙酮洗涤、干燥，得到纯化的纳米粒子；
制备双靶向定位药物载体：将纯化的纳米粒子分散于水溶液，向水溶液中添加肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列、搅拌，离心制得双靶向定位药物载体。
本发明双靶向定位药物载体的制备方法包括制备纳米粒子、纳米粒子纯化和制备双靶向定位药物载体等步骤。其中，黑磷量子点、镧系原料与聚乙二醇反应生成纳米粒子，纳米粒子进一步与肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列结合制得双靶向定位药物载体。本发明双靶向定位药物载体的制备方法具有制备过程简单，制备的纳米粒子负载兼容性高、负载能力强等优点。
优选的，在制备纳米粒子步骤中，在氩气保护下，将混合物加热至100℃后持续搅拌20分钟；
随后将温度升至330℃并搅拌反应20分钟，搅拌下冷却至室温，制得混合体系。通过两步升温过程，即先将混合物溶解形成乳浊液，随后搅拌乳浊状混合液进一步分散混合体系以制备纳米粒子，确保了镧系原料、黑磷量子点与聚乙二醇充分混合并分散，也使得制备的纳米粒子尺寸合适，纳米光动力、光热效应显著，负载功能完备。
优选的，在纳米粒子纯化步骤中，所述干燥的温度为60℃。该干燥温度能够在确保纳米粒子的兼容性前提下干燥纳米粒子。
优选的，在制备双靶向定位药物载体步骤中，所述纯化的纳米粒子、肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列的质量之比为24:3:4，搅拌时间为1h。由此，设置合适的纳米粒子、肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列的用量配比，能够确保制备的双靶向定位药物载体实现双靶向分子与载体之间的充分结合，实现双靶向功能。
第四方面，本发明还提供了一种双靶向定位药物载体在制备抗肿瘤药物上的应用。
本发明双靶向定位药物载体在制备抗肿瘤药物上的应用，即应用本发明第一方面所述的双靶向定位药物载体制备抗肿瘤药物，以实现制得的抗肿瘤药物的双靶向定位功能和药物负载功能。
本发明的优点将会在下面的说明书中部分阐明，一部分根据说明书是显而易见的，或者可以通过本发明实施例的实施而获知。
附图说明
为更清楚地阐述本发明的内容，下面结合附图与具体实施例来对其进行详细说明。
图1为本发明提供的双靶向定位药物载体的高分辨透射电镜图；
图2为本发明提供的双靶向定位药物载体的细胞毒性测试结果图(每一组数据从左至右分别对应MCF-7、NCI-H446、HCT-116、A549)；
图3为本发明提供的双靶向定位药物载体的肿瘤靶向效果图；
图4为本发明提供的双靶向定位药物的治疗效果图(每一组数据从左至右分别对应对照组、化疗组、光动力组以及光动力+光热+化疗组)。
具体实施方式
以下所述是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。
第一方面，本发明提供了一种双靶向定位药物载体，包括纳米粒子以及纳米粒子上修饰的肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列，所述纳米粒子由镧系原料、黑磷量子点和聚乙二醇通过水热反应制成。
优选的，所述镧系原料为硝酸铕粉末、硝酸铽粉末和硝酸钆粉末中任意两种的组合。在具体的实施方式中，镧系原料可以为硝酸铕粉末与硝酸铽粉末的混合物，也可以是硝酸铕粉末与硝酸钆粉末的混合物，还可以是硝酸铽粉末与硝酸钆粉末的混合物。
优选的，所述聚乙二醇为聚乙二醇400。
优选的，所述肿瘤细胞靶向分子为精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)或者叶酸。
优选的，所述细胞核定位序列(NLS)为PKKKRKVG。
第二方面，本发明提供了一种双靶向定位药物，包括本发明第一方面所述的双靶向定位药物载体和所述双靶向定位药物载体负载的抗肿瘤药物。
优选的，所述抗肿瘤药物为DOX。
第三方面，本发明还提供了一种双靶向定位药物载体的制备方法，包括以下步骤:
制备纳米粒子：提供镧系原料、黑磷量子点和聚乙二醇并混合，在氩气保护下，将混合物加热至90～110℃后搅拌，直至固体粉末充分溶解形成乳浊液，随后将温度升至320～340℃并搅拌反应20分钟以上，搅拌下冷却至室温，制得纳米粒子；
纳米粒子纯化：向纳米粒子中添加丙酮并充分搅拌，混合体系离心得到沉淀并用丙酮洗涤、干燥，得到纯化的纳米粒子；
制备双靶向定位药物载体：将纯化的纳米粒子分散于水溶液，向水溶液中添加肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列、搅拌，离心制得双靶向定位药物载体。
优选的，在制备纳米粒子步骤中，在氩气保护下，将混合物加热至100℃后持续搅拌20分钟。随后将温度升至330℃并搅拌反应20分钟，搅拌下冷却至室温，制得纳米粒子。
优选的，在纳米粒子纯化步骤中，所述干燥的温度为60℃。
优选的，在制备双靶向定位药物载体步骤中，所述纯化的纳米粒子、肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列的质量之比为24:3:4，搅拌时间为1h。
第四方面，本发明还提供了一种双靶向定位药物载体在制备抗肿瘤药物上的应用。
以下通过具体的实施例详细阐述本发明双靶向定位药物载体、双靶向定位药物的制备方法及制得的双靶向定位药物载体、双靶向定位药物。
实施例1：
在三颈烧瓶中分别加入5mL聚乙二醇400、1.5mg的黑磷量子点、0.32mmol硝酸铕粉末和0.32mmol硝酸铽粉末。在氩气保护气氛下，混合物加热至100℃后持续搅拌反应20分钟，固体粉末充分溶解形成乳浊液，随后温度升至330℃并搅拌20分钟，停止加热，反应液搅拌下冷却至室温，制得混合体系。
冷却后，在反应液中加入20mL丙酮溶液充分搅拌，通过离心分离方法将生成的淡黄色沉淀收集，再用丙酮洗涤沉淀三次，最后置于60℃的烘箱中干燥后，即制得纳米粒子。
使用水溶液将上述纳米粒子定容成3mg·mL-1悬浮液，向1毫升悬浮液中依次加入1毫升浓度为0.375mg·mL-1的RGD水溶液以及1毫升浓度为0.5mg·mL-1的细胞核定位序列PKKKRKVG水溶液并充分搅拌1小时，离心分离后使用丙酮离心清洗3次后置于45℃的烘箱中烘干，即为本发明实施例1制备的双靶向定位药物载体(以下简称C:P:EuTb-RGD-NLS)。
将实施例1制备的双靶向定位药物载体通过高分辨透射电镜进行表征，如图1所示，为图1是双靶向定位药物载体C:P:EuTb-RGD-NLS的高分辨透射电镜图。
本发明实施例1制备的双靶向定位药物载体可以直接添加到抗肿瘤药物的水溶液中，通过溶解、双靶向定位药物载体与抗肿瘤药物混合、双靶向定位药物载体负载抗肿瘤药物等过程，实现双靶向定位药物载体负载抗肿瘤药物。
实施例2
在三颈烧瓶中分别加入5mL聚乙二醇400、1.5mg的黑磷量子点、0.32mmol硝酸铕粉末和0.32mmol硝酸铽粉末。在氩气保护气氛下，混合物加热至100℃后持续搅拌反应20分钟，固体粉末充分溶解形成乳浊液，随后温度升至330℃并搅拌20分钟，停止加热，反应液搅拌下冷却至室温，制得混合体系。
冷却后，在反应液中加入20mL丙酮溶液充分搅拌，通过离心分离方法将生成的淡黄色沉淀收集，再用丙酮洗涤沉淀三次，最后置于60℃的烘箱中干燥后，即制得纳米粒子。
使用水溶液将上述纳米粒子定容成3mg·mL-1悬浮液，向1毫升悬浮液中依次加入1毫升浓度为2mg·mL-1的DOX水溶液、1毫升浓度为0.375mg·mL-1的RGD水溶液以及1毫升浓度为0.5mg·mL-1的细胞核定位序列PKKKRKVG水溶液并充分搅拌1小时，离心分离后使用丙酮离心清洗3次后置于45℃的烘箱中烘干，即为本发明实施例2制备的双靶向定位药物(以下简称C:P:EuTb-RGD-NLS-DOX)。
实施例3
实施例3与实施例1的区别仅在于：用硝酸钆粉末替代硝酸铽粉末，同样能够制得双靶向定位药物载体(以下简称C:P:EuGd-RGD-NLS)。由图可知C:P:EuGd-RGD-NLS纳米粒子具有明显的晶格条纹，且粒径在5纳米左右，满足实验需求。
实施例4
在三颈烧瓶中分别加入5mL聚乙二醇400、1.5mg黑磷量子点、0.32mmol硝酸铕粉末和0.32mmol硝酸钆粉末。在氩气保护气氛下，混合物加热至100℃后持续搅拌反应25分钟，固体粉末充分溶解形成乳浊液，随后温度升至330℃搅拌25分钟，停止加热，反应液搅拌下冷却至室温，制得混合体系。
在反应液中加入20mL丙酮溶液充分搅拌，通过离心分离方法将生成的深棕色沉淀收集，再用丙酮洗涤沉淀三次，最后置于60℃的烘箱中干燥后，即制得纳米粒子。
使用水溶液将上述纳米粒子定容成3mg·mL-1悬浮液，向1毫升悬浮液中依次加入1mL浓度为2mg·mL-1的DOX水溶液、1毫升浓度为0.375mg·mL-1的RGD水溶液以及1毫升浓度为0.5mg·mL-1的细胞核定位序列PKKKRKVG水溶液并充分搅拌1小时，离心分离后使用丙酮离心清洗3次后置于45℃的烘箱中烘干，即为本发明实施例3制备的双靶向定位药物(以下简称C:P:EuGd-RGD-NLS-DOX)。
效果实施例：
实施例4制备的双靶向定位药物(以下简称C:P:EuGd-RGD-NLS-DOX)以及实施例3制备的双靶向定位药物载体(以下简称C:P:EuGd-RGD-NLS)靶向作用于肿瘤细胞。
取10万个肺癌细胞与500μL浓度为200μg·mL-1的C:P:EuGd-RGD-NLS-DOX置于观察皿中共培养，一小时后向体系中加入500μL浓度为200μg·mL-1的C:P:EuGd-RGD-NLS-DOX。将样品在PBS(0.01M)中清洗三次以去除游离的C:P:EuGd-RGd-NLS-DOX，重新置于500μL的PBS中，可通过荧光显微镜或激光共聚焦扫描显微镜观察治疗结果。该实施例可取不同时间段的样品进行观察比对。
图2为实施例3中双靶向定位药物载体C:P:EuGd-RGD-NLS纳米粒子采用CellCounting Kit-8试剂盒进行细胞毒性测试的结果，由图2可知纳米粒子与MCF-7(人乳腺癌细胞)、NCI-H446(人小细胞肺癌细胞)、HCT-116(人结肠癌细胞)以及A549(人非小细胞肺癌细胞)分别孵育后，四种细胞系的存活率均在90％以上，即细胞毒性可忽略不计。
图3为实施例3中双靶向定位药物载体C:P:EuGd-RGD-NLS的肿瘤靶向效果图，其中第一列为DAPI细胞染色效果图，第二列为Cy5载药系统显色效果图，第三列为同时进行细胞染色和载药系统显色的效果图。A组为单靶向(RGD:肿瘤细胞靶向)效果图，B组为双靶向(RGD-NLS:肿瘤细胞-细胞核双靶向)效果图，由图可知，B组中载药系统(红色荧光)在MCF-7细胞(蓝色荧光)的周围以及内部的富集程度远高于A组，即：双靶向修饰可明显提高载药系统的靶向效率。
图4为C:P：EuGd-RGD-NLS负载DOX后的治疗效果，由图4可知，对照组(MCF-7细胞与C:EuGd-RGD-NLS共同孵育)、化疗组(MCF-7细胞与C:EuGd-RGD-NLS-DOX共同孵育)、光动力组(MCF-7细胞与C:EuGd-RGD-NLS共同孵育，并辅以680nm的光照进行光动力治疗)以及联合治疗组(光动力+光热+化疗组)(MCF-7细胞与C:EuGd-RGD-NLS-DOX共同孵育，并辅以680nm与808nm的光照进行光动力与光热治疗)的细胞存活率由小到大依次为：联合治疗组、光动力组、化疗组、对照组，即双靶向定位药物C:P:EuGd-RGD-NLS-DOX的光动力-光热-化疗联合治疗效果显著。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种双靶向定位药物载体，其特征在于，包括纳米粒子以及纳米粒子上修饰的肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列，所述纳米粒子由镧系原料、黑磷量子点和聚乙二醇通过水热反应制成。
2.如权利要求1所述的双靶向定位药物载体，其特征在于，所述镧系原料为硝酸铕粉末、硝酸铽粉末和硝酸钆粉末与中任意两种的组合。
3.如权利要求1所述的双靶向定位药物载体，其特征在于，所述聚乙二醇为聚乙二醇400；
所述肿瘤细胞靶向分子为精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸或者叶酸。
4.如权利要求1所述的双靶向定位药物载体，其特征在于，所述细胞核定位序列为PKKKRKVG。
5.一种双靶向定位药物，其特征在于，包括权利要求1-4任一项所述的双靶向定位药物载体和所述双靶向定位药物载体负载的抗肿瘤药物。
6.如权利要求5所述的双靶向定位药物，其特征在于，所述抗肿瘤药物为DOX。
7.一种双靶向定位药物载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:
制备纳米粒子：提供镧系原料、黑磷量子点和聚乙二醇并混合，在氩气保护下，将混合物加热至90～110℃后搅拌，直至固体粉末充分溶解形成乳浊液，随后将温度升至320～340℃并搅拌反应20分钟以上，搅拌下冷却至室温，制得纳米粒子；
纳米粒子纯化：向纳米粒子中添加丙酮并充分搅拌，混合体系离心得到沉淀并用丙酮洗涤、干燥，得到纯化的纳米粒子
制备双靶向定位药物载体：将纯化的纳米粒子分散于水溶液，向水溶液中添加肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列、搅拌，离心制得双靶向定位药物载体。
8.如权利要求7所述的双靶向定位药物载体的制备方法，其特征在于，在制备纳米粒子步骤中，在氩气保护下，将混合物加热至100℃后持续搅拌20分钟；
随后将温度升至330℃并搅拌反应20分钟，搅拌下冷却至室温，制得混合体系；
在制备纳米粒子步骤中，所述干燥的温度为60℃。
9.如权利要求7所述的双靶向定位药物载体的制备方法，其特征在于，在制备双靶向定位药物载体步骤中，所述纳米粒子、肿瘤细胞靶向分子和细胞核定位序列的质量之比为24:3:4，搅拌时间为1h。
10.如权利要求1-4任一项所述的双靶向定位药物载体在制备抗肿瘤药物上的应用。
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