CN111728218A - 玛咖提取物在制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中的应用 - Google Patents
玛咖提取物在制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了玛咖提取物在制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中的应用。本申请人发现，玛咖提取物可以调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群，具体包括：增加去卵巢雌激素缺乏动物模型肠道内苏黎世杆菌属、双歧杆菌属、拟杆菌属、粪厌氧棒状菌属、瘤胃球菌属和毛螺旋菌属的丰度；同时使得因雌激素缺乏而大幅增加的致病菌志贺氏菌属的数量恢复正常，从而可以将玛咖提取物用于制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中。
Description
技术领域
本发明涉及中药技术领域，特别涉及玛咖提取物在制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中的应用。
背景技术
肠道微生物菌群(GM)是生存在肠道里的微生物的总称。胃肠道中微生物含量从上到下依次增加，大肠中的微生物数量可以达到百亿个，是人体内细胞数量的1～10倍。GM所含基因数目是人类基因组所含基因数目总和的100倍。GM是人体整个代谢系统的连接者，掌管着人体70％的免疫力，排除80％的毒素，消化吸收95％的营养物质。
根据现有人体肠道高通量测序数据分析，一个正常人体肠道内约包含100～400种不同的微生物，不同人体内的微生物种类可能有很大的区别，目前已知的肠道微生物物种约有1400多种，而通过宏基因组和扩增子测序数据分析，研究人员预测至少还有超过2000余个肠道微生物菌种为目前没有被体外培养过的未知物种。GM根据其与宿主的作用和关系可大致分为四类：1)中性共生菌：是肠道菌群的重要组成，占肠道菌群的绝大多数，维持肠道菌群平衡和肠道内环境稳态；2)益生菌：包括研究证明具有益生功能的共生菌和其他来源的对宿主健康有益的菌，跟宿主形成良好的共生关系，具备多种生理功能，在维持肠道正常生理功能和纠正肠道菌群失调中发挥作用；3)条件致病菌：正常情况下在肠道中以低丰度，稳定存在，如肠道内环境被破坏，会造成大量繁殖，继而加剧肠道菌群失调引发多种疾病；4)致病菌：一般都是外源过路菌种，一旦数量超过正常水平，会引起疾病，如腹泻、食物中毒等。
肠道菌群的功能主要有四方面。1)参与能量代谢，消化与营养合成、吸收；2)训练免疫系统，通过促进抗菌肽、血清素等小分子物质的产生，参与调节免疫系统，维持免疫稳态；3)维持肠道屏障完整性与功能性，肠道菌群本身是生物屏障，产物短链脂肪酸形成化学屏障，促进上皮细胞增生，维持物理屏障完整；4)调节周身器官，通过“脑-肠轴”影响神经系统，通过“肝-肠轴”调节肝功能，通过“肾-肠轴”影响肾脏相关器官的工作等。
肠道微生物的结构会随着年龄的增长而变化，2019年末，我国60岁及以上人口数为2.54亿，占人口总数的18.1％，已经正式迈入老龄化社会。对于老龄女性人口来说，绝经后雌激素缺乏会引起肠道微生物菌群失调，从而带来多种健康风险。
研究表明，女性绝经后肠道菌群失调带来的健康风险主要有以下四种。1)免疫系统功能下降。肠道菌群多样性与较高的雌激素水平，均有助于维持机体免疫系统的稳态。肠道菌群本身参与形成免疫系统三道防线之一的粘膜免疫，肠道菌群失调和多样性下降，还会诱发多种促炎因子，从而损害免疫系统。2)肠道菌群失调通过“脑-肠轴”影响神经系统，从而导致女性绝经后抑郁、易怒、烦躁等精神失常状态。3)骨质疏松发病风险急剧上升。雌激素缺乏的引起肠道菌群失调会导致宿主免疫系统异常，从而引起机体炎症因子的增加。免疫系统失调时，T细胞释放的炎症因子会促进破骨细胞的形成以及延长破骨细胞的存活，从而导致骨量的丢失。例如在类风湿关节炎等自身免疫性疾病中，破骨细胞骨吸收是由活化的T细胞产生的炎性细胞因子驱动的。此外，肠道微生物菌群失调还会给胃肠功能带来负面影响，使老年人体内钙、磷等物质代谢紊乱，造成骨质疏松。4)肠道菌群是肠屏障功能的重要组成部分，菌群失调会导致肠屏障功能受损，更容易引发炎症和代谢紊乱。5)脂肪代谢异常，脂类分为甘油三酯、胆固醇、糖脂等，是成年人维持机体生命活动所需能量的来源。正常成人体内的肠道菌群能发酵膳食纤维产生短链脂肪酸(Short Chain FatAcids，SCFAs)，是人体重要的能量来源，肠道菌群失调会导致脂肪代谢异常，会增加肥胖和“三高”的发生风险。
调节肠道菌群的策略主要有以下五种。1)食用微生态制剂，如益生菌、益生元等。2)饮食调整和生活习惯，饮食清淡为主，儿童远离西方类型饮食，生活上不抽烟、喝酒、熬夜，适量运动。3)使用抗生素可以杀死致病菌，同时也会杀死共生菌和有益菌，长时间滥用抗生素是有害的。4)菌群移植，指将健康人粪便中的功能菌群，移植到患者肠道内，重建新的肠道菌群，实现肠道及肠道外疾病的治疗。5)天然产物与肠道菌群的互作。天然产物被代谢后可以改变胃肠道菌群的组成，已经被许多实验室和临床实验证明。临床实践中，天然产物提取物中极性化合物是广泛使用的，如苷类物质中的三萜皂苷和黄酮苷，但是由于它们较低的亲脂性，这些化合物的生物利用度非常低。肠道菌群调节的生物转化把这些分子转变成极性和亲脂的小分子单元，从而提高生物利用度。
肠道菌群是复杂的，肠道微生物失调带来的健康问题，往往涉及多种微生物靶标的变化，解决这些问题往往需要系统化的手段。“多成分对抗多靶标”经常被提起作为天然产物的治疗原则。已有很多临床实验证明：天然产物代谢后可以改变胃肠道菌群的组成。各种各样的天然产物，包括单一成分，单方植物药和复方植物药，均能改善肠道菌群失调引起的相关疾病，包括代谢性疾病(肥胖、糖尿病、NAFLD)，肠易激综合症(IBS)，慢性肾病等。在这些疾病发展中，天然产物的出现明显改进肠道菌群及其可塑性，二者之间的关系被认为肠道菌群的调节是天然产物口服治疗疾病的一个机制。
利用化学药物会加重对胃肠道的刺激，进一步影响肠道菌群失调，患者的接受度并不高。可食用的益生菌种类有限，而且运输保存都有极其严苛的条件限制，导致消费者食用的益生菌产品功效有限。天然产物具有多成分、多靶点、刺激性小、安全、低成本等特点，同时可以从根本上改善宿主体质和肠道环境，符合预防为主，治疗结合的需求。基于玛咖粉开发相关的功能食品来调节肠道菌群，用于改善绝经绝经后雌激素缺乏人群的健康条件，是一项十分必要的工作。
玛咖(Maca)为十字花科独行菜属植物Lepidium meyenii Walp.的形似萝卜的根茎，原产于海拔3500～4500米的南美安第斯山区，是一种传统的药物和营养补品，玛咖在西方国家有着很高的知名度，近年来被我国列为“新资源食品”。玛咖有缓解更年期综合症；改善性功能，提高生育能力；抗氧化、降血脂、防止动脉硬化；促进新陈代谢，保肝护肝；补血补钙；增强肌肉的运动能力等功效，然而玛咖提取物在调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群上的用途尚没有相关报道。
发明内容
本发明目的是提供玛咖提取物的新用途，即玛咖提取物在制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中的应用。
为了实现上述目的，本发明提供了玛咖提取物在制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中的应用。
进一步地，所述玛咖提取物的制备方法为：将玛咖粉与乙醇提取剂混合，回流提取，获得提取物，将所述提取物浓缩成浸膏，所述浸膏为所述玛咖提取物。
进一步地，所述玛咖粉与所述乙醇提取剂的质量比为1：(5～10)。
进一步地，所述乙醇提取剂为质量分数为60％～90％的乙醇。
进一步地，所述回流提取的温度为55℃～65℃，所述回流提取的时间为2h～3h。
进一步地，所述浓缩采用蒸发浓缩方式，所述蒸发浓缩的温度为40℃～50℃。
进一步地，所述将玛咖粉与乙醇提取剂混合，回流提取，获得提取物包括：
所述将玛咖粉与乙醇提取剂混合，回流提取获得下层液体和第一上清液，后将所述下层液体加入乙醇提取剂，进行二次回流提取，获得第二上清液；
将所述第一上清液和第二上清液混合，后经浓缩获得浸膏，所述浸膏为所述提取物。
进一步地，所述回流提取的次数为1～6次。
进一步地，所述调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群包括：增加去卵巢雌激素缺乏动物模型肠道内苏黎世杆菌属、双歧杆菌属、拟杆菌属、粪厌氧棒状菌属、瘤胃球菌属和毛螺旋菌属的丰度；同时使得因雌激素缺乏而大幅增加的致病菌志贺氏菌属的数量恢复正常。
本发明实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：
本发明提供的玛咖提取物在制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中的应用，为首次发现，本申请人发现，玛咖提取物可以调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群，具体包括：增加去卵巢雌激素缺乏动物模型肠道内苏黎世杆菌属、双歧杆菌属、拟杆菌属、粪厌氧棒状菌属、瘤胃球菌属和毛螺旋菌属的丰度；同时使得因雌激素缺乏而大幅增加的致病菌志贺氏菌属的数量恢复正常，从而可以将玛咖提取物用于制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中。
具体实施方式
下文将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本发明，本发明的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本发明，而非限制本发明。
在整个说明书中，除非另有特别说明，本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此，除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在矛盾，本说明书优先。
除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等，均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
本申请实施例的技术方案为解决上述技术问题，总体思路如下：
根据本发明一种典型的实施方式，提供玛咖提取物在制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中的应用。
本申请人发现，玛咖提取物可以调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群，具体包括：增加去卵巢雌激素缺乏动物模型肠道内苏黎世杆菌属、双歧杆菌属、拟杆菌属、粪厌氧棒状菌属、瘤胃球菌属和毛螺旋菌属的丰度；同时使得因雌激素缺乏而大幅增加的致病菌志贺氏菌属的数量恢复正常，从而可以将玛咖提取物用于制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中。
作为可选的实施方式，所述玛咖提取物的制备方法为：将玛咖粉与乙醇提取剂混合，回流提取，获得提取物，将所述提取物浓缩成浸膏，所述浸膏为所述玛咖提取物。
优选地，所述玛咖粉与所述乙醇提取剂的质量比为1：(3～12)。在该质量比下得到的玛咖提取物可以调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群。
较为优选地，所述玛咖粉与所述乙醇提取剂的质量比为1：(5～10)。所述物料与所述溶剂的质量体积比为1：(5～10)的原因为：该比例下既能提取到足够的有效成分，又能兼顾成本，不至于浪费溶剂和能源；若小于1：10，溶剂过多浪费，还会造成后期蒸发浓缩成本过高，若大于1：5，则可能有效成分提取不完全。
优选地，所述乙醇提取剂为质量分数为60％～90％的乙醇。此浓度范围的乙醇溶剂提取效果最好；若质量分数小于60％，会导致混合物中的有效成分提取不完全，若质量分数大于80％，会提取到更多的杂质，同时还增加了成本。
优选地，所述回流提取的温度为55℃～65℃，所述回流提取的时间为2h～3h。在此条件下能更加完全地将有效成分进行提取，若温度小于55℃，提取时间小于2h则不利于有效成分提取完全；若温度大于65℃，提取时间大于3h，则会导致溶剂蒸发过快，浪费溶剂和能源，不利于节省成本。
优选地，所述浓缩采用蒸发浓缩方式，所述蒸发浓缩的温度为40℃～50℃。这次温度范围内能更好的浓缩成浸膏。
通过上述内容可以看出，本发明发现了玛咖提取物的新用途，玛咖提取物可以显著增加去卵巢雌激素缺乏动物模型肠道内苏黎世杆菌属、双歧杆菌属、拟杆菌属、粪厌氧棒状菌属、瘤胃球菌属、毛螺旋菌属的丰度；同时使得因雌激素缺乏而大幅增加的致病菌志贺氏菌属的数量恢复正常。所述提取物通过影响肠道菌群分布，达到增强免疫功能，保护和完善肠屏障功能，调节情绪状态，改善脂代谢，改善骨代谢等方面的作用，可用于制备调节绝经绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品。
下面将结合实施例及实验数据对本申请提供的一种用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的组合物进行详细说明。
实施例1
取干燥的玛咖块茎，粉碎成粉末于圆底烧瓶，以75％的乙醇为溶剂，按照1：10的料液比加入75％乙醇。60℃水浴回流提取2h，收集上清液，再取等量的的75％乙醇，加入剩余药材，再次水浴回流2h，收集上清，弃去剩余药材残渣。合并两次上清液于旋转蒸发仪中，调节真空度为0.08MPa～0.1MPa，45℃旋转蒸发，直至液体浓缩成浸膏，即得到提取物，用1％吐温80作为溶剂，配成适当浓度的溶液。
实施例2
取干燥的玛咖块茎，粉碎成粉末于圆底烧瓶，以75％的乙醇为溶剂，按照1：7的料液比加入75％乙醇。60℃水浴回流提取2h，收集上清液，再取等量的的75％乙醇，加入剩余药材，再次水浴回流2h，收集上清，弃去剩余药材残渣。合并两次上清液于旋转蒸发仪中，调节真空度为0.08MPa～0.1MPa，45℃旋转蒸发，直至液体浓缩成浸膏，即得到提取物，用1％吐温80作为溶剂，配成适当浓度的溶液。
实施例3
取干燥的玛咖块茎，粉碎成粉末于圆底烧瓶，以75％的乙醇为溶剂，按照1：5的料液比加入75％乙醇。60℃水浴回流提取2h，收集上清液，再取等量的的75％乙醇，加入剩余药材，再次水浴回流2h，收集上清，弃去剩余药材残渣。合并两次上清液于旋转蒸发仪中，调节真空度为0.08MPa～0.1MPa，45℃旋转蒸发，直至液体浓缩成浸膏，即得到提取物，用1％吐温80作为溶剂，配成适当浓度的溶液。
实施例4
该实施例中，将玛咖粉和乙醇提取剂的料液比改为1：3，其余步骤同实施例1。
实施例5
该实施例中，将玛咖粉和乙醇提取剂的料液比改为1：12，其余步骤同实施例1。
试验例各组别对宿主实验动物肠道菌群的影响
选取体重为200±20g雌性SD大鼠为试验对象，饲养于SPF级动物房，室温25±3℃，相对湿度为60％-70％，12h光照、12h黑暗环境。手术切除卵巢后，恢复饲养8周，建立去卵巢雌激素缺乏大鼠模型。模型建立后，大鼠随机分为7组，每组大于8只。1)5组实验组：切除卵巢，实施例1-5的提取物分别给药，每天灌胃玛咖提取物，灌胃剂量为3000mg/kg；2)假手术组：不切除卵巢，灌胃与实验组等体积溶剂；3)阴性对照组，切除卵巢，灌胃与实验组等体积的溶剂；
7组大鼠连续灌胃4周，治疗完成后，刺激大鼠排便，采用灭菌后的离心管收集大鼠新鲜粪便，置于-20℃保存。
提取大鼠粪便中的微生物rDNA原始序列，采用高通量测序法测序，然后进行过滤、双端拼接，得到优化序列，再对优化序列进行聚类，进一步得到各个样品在门纲目科属种分类学水平上的群类结构图、物种聚类热图、属分类学水平进化树和分类学树状图。通过Alpha多样性分析研究单个样品内部的物种多样性，统计了各样品在97％相似度水平下的Ace、Chao1、Shannon及Simpson指数，绘制样品稀释曲线及等级丰度曲线，从而确定实验取样、提取成功。
通过多元统计分析组间差异，得到显著性差异的多种肠道微生物，可判断药物对不同组的大鼠肠道微生物的影响。ANOVA(Analysis of Variance，即：方差分析)又称F检验(Ftest)。主要用于检验多个样本的均值是否相等，从而判断两个或两个以上样本的均值差异显著程度。微生物属水平组间Anova方差分析结果显示：对去卵巢骨质疏松大鼠进行连续4周的灌胃，有多种肠道微生物的丰度发生改变，主要分布在放线菌门、厚壁菌门、疣微菌门和变形菌门。发生显著性变化的菌群种类如表1所示。
表1-实施例中相对于模型组明显增加或减少的肠道菌群的相对丰度
表2-以上肠道菌群在对比例增加或减少情况
注：表中数据为该组样本的平均值±标准差，“*”代表与阴性对照(模型)组有显著性差异(P<0.05)。其中志贺氏菌属是人类细菌性痢疾最常见的病原菌，属于有害菌。
由表1-表2的数据可知：
相较于正常大鼠，去卵巢雌激素缺乏模型组大鼠的双歧杆菌属、苏黎世杆菌属、拟杆菌属、毛螺旋菌属、粪厌氧棒状菌属和瘤胃球菌属的丰度明显降低，去卵巢大鼠肠道内致病菌志贺氏菌属数量显著增多，多种现象表明去卵巢雌激素缺乏大鼠肠道微生物发生了一定程度的失调，表明模型构建成功。
1、改善绝经后情绪失常相关肠道菌群的应用。
5-HT是一种抑制性的神经递质，可以调节情绪、精力、记忆力等多个方面，人体内有60％的5-HT合成受肠道菌群调控。绝经后人群肠道菌群失调可以通过“脑-肠轴”影响情绪，从而发生失眠、抑郁、易怒、烦躁等情绪失调症状。苏黎世杆菌属(Turicibacte)是人体内重要的血清素(5-羟色胺，5-HT)产生菌，研究表明，在5-HT含量丰富的动物肠道中，苏黎世杆菌属的丰度显著增加。
由表1-表2可知，灌胃所述实施例1-5的提取物的大鼠的苏黎世杆菌属的丰度相比于模型组有明显改善；其中实施例1-3的效果较优。
2、改善与肠屏障功能相关肠道菌群的应用。
肠屏障功能是人体免疫第一道防线——粘膜免疫的重要组成部分，微生物屏障是肠屏障功能中最重要的一环，肠道菌群附着在宿主肠道表面黏膜层上，形成了一层由细菌构成的微生物屏障，它通过竞争性黏附等机制抑制病原菌的定植和繁殖。维护肠屏障功能的完整性，对曾倩日根提免疫功能具有重要意义。
(1)毛螺旋菌属(Lachnospira)是一种潜在的有益菌，参与多种碳水化合物的代谢，发酵产物包括甲酸、乙酸、乳酸等，时候细菌为宿主提供能量的主要来源。瘤胃球菌属(Ruminococcu)主要发酵代谢产物为乙酸和甲酸，对胃肠道能量代谢有重要作用，同时还会释放一些多糖。研究表明，以上两种微生物对维持肠屏障功能有积极作用。
由表1-表2可知，灌胃所述实施例1-5的提取物的大鼠，相比于去卵巢雌激素缺乏模型的大鼠，毛螺旋菌属和瘤胃球菌属的丰度显著上升；其中实施例1-3的效果较优。说明本发明提供的提取物可以显著改善与肠屏障功能相关肠道菌群。
(2)志贺氏菌属(Escherichia-Shigella)是人类细菌性痢疾最常见的病原菌。志贺氏菌属丰度增加时，可以粘附于回肠末端和结肠粘膜的上皮细胞上，穿入上皮细胞内生长繁殖，并向邻近细胞扩散，破坏肠屏障功能。由于内毒素的作用，可以引起局部粘膜炎症、坏死和溃疡等症状。当内毒素被吸收入血时，可引起发热、白细胞数增加，少数病例还可引起中毒性休克或弥漫性血管内凝血。
由表1-表2可知，灌胃所述实施例1-5的提取物的大鼠，相比于去卵巢雌激素缺乏模型大鼠，志贺氏菌属的丰度更接近于假手术(CK)组，属于正常水平，其中实施例1-3的效果较优；表明在使用本发明实施例1-5提供的提取物治疗之后，志贺氏菌属的数量回归正常，表明该本发明的提取物可以显著改善卵巢雌激素缺乏大鼠肠屏障功能相关菌群。
(3)双歧杆菌属(Bifidobacterium)是人体内最常见、最重要的益生菌之一，对肠粘膜免疫系统动态平衡的维持具有积极意义。双歧杆菌可以与肠上皮紧密结合，形成菌膜屏障，可以竞争抑制肠道中致病菌(如某些肠道兼性厌氧菌和外来菌等)与肠上皮结合，抑制它们的定植和生长；也可分泌醋酸、乳酸、短链脂肪酸等，降低肠道pH值与氧化还原电势及与致病菌竞争利用营养物质，从而抑制致病菌的生长。
瘤胃球菌属(Ruminococcu)主要发酵代谢产物为乙酸和甲酸，对胃肠道能量代谢有重要作用，同时还会释放一些多糖，对维持肠屏障功能有积极作用。
由表1-表2可知，灌胃所述实施例1-5的提取物的大鼠，相比于模型组，双歧杆菌属(Bifidobacterium)和瘤胃球菌属(Ruminococcu)丰度明显上升；其中实施例1-3的效果较优。说明本发明提供的提取物可以显著改善与肠屏障功能相关肠道菌群。
3、改善脂质代谢和骨代谢的相关肠道菌群的应用。
粪厌氧棒状菌属(Anaerostipes)和拟杆菌属(Bacteroide)可以分解膳食纤维产生短链脂肪酸(Short Chain FatAcids，SCFAs)，是人体内重要的SCFAs产生菌。SCFAs包括丁酸盐、醋酸盐等，对摄入的肽类及蛋白质进行生物转化，是重要的能量及信号分子，可以影响脂蛋白的生成，促进脂质运输，改善脂代谢，从而减轻更年期发生肥胖的风险。
OPG/RANKL/RANK通路是骨代谢的主要信号通路之一，RANKL结合到破骨前体细胞和成熟破骨细胞(OC)表面表达的RANK上，可以促进其分化、活化，并抑制其凋亡，TNFα等炎性因子可以促进RANKL的生成，OPG亦可与RANK结合，是RANKL的竞争性抑制剂。降低RANKL含量，升高OPG/RANKL的比值，可以抑制破骨细胞的生成、分化与活化。SCFAs可以抑制破骨细胞前体细胞的氧化磷酸化过程，减少炎性细胞因子TNFα、IL-6等细胞因子的表达，抑制破骨细胞的生成，促进骨代谢稳态，减少骨流失。
由表1-表2可知，灌胃所述实施例1-5的组合物的大鼠，相比于模型组，粪厌氧棒状菌属(Anaerostipes)和拟杆菌属(Bacteroide)等与脂代谢、骨代谢相关的肠道微生物丰度明显增加，趋向于正常水平，其中实施例1-3的效果较优；表明本发明提供的植物提取物可以改善骨代谢和脂代谢相关的肠道菌群。
实施例4中，对肠道菌群有所改善，但改善效果与实施例1-3相比较差，尤其是苏黎世杆菌属和拟杆菌属的丰度相比起模型组没有显著性差异，调控菌群的全面性不如本发明实施例1-3的效果，可能是因为玛咖粉中的有效物质没有提取完全；
实施例5中，对肠道菌群亦有显著的改善效果，但改善效果与实施例1-3相比较差，尤其是部分菌种(如双歧杆菌)的改善效果不如实施例1-3，可能是提取出了更多的杂质影响了有效物质的发挥，同时提取物过多还会增加物料成本和后期蒸发浓缩的能源成本，经济性也不够理想。
因此，玛咖提取物在制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中的应用时，玛咖提取物优选将玛咖粉与乙醇提取剂以1：(5～10)的质量比混合提取而成，对更年期绝经后人群肠道微生物的改善效果最理想，同时还兼具了成本低的优势。
最后，还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (9)
1.玛咖提取物在制备用于调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群的保健品或食品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述玛咖提取物的制备方法为：将玛咖粉与乙醇提取剂混合，回流提取，获得提取物，将所述提取物浓缩成浸膏，所述浸膏为所述玛咖提取物。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述玛咖粉与所述乙醇提取剂的质量比为1∶(5～10)。
4.根据权利要求2-3任一所述的应用，其特征在于，所述乙醇提取剂为质量分数为60％～90％的乙醇。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述回流提取的温度为55℃～65℃，所述回流提取的时间为2h～3h。
6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述浓缩采用蒸发浓缩方式，所述蒸发浓缩的温度为40℃～50℃。
7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述将玛咖粉与乙醇提取剂混合，回流提取，获得提取物包括：
所述将玛咖粉与乙醇提取剂混合，回流提取获得下层液体和第一上清液，后将所述下层液体加入乙醇提取剂，进行二次回流提取，获得第二上清液；
将所述第一上清液和第二上清液混合，后经浓缩获得浸膏，所述浸膏为所述提取物。
8.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述回流提取的次数为1～6次。
9.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述调节绝经后雌激素缺乏人群肠道菌群包括：增加去卵巢雌激素缺乏动物模型肠道内苏黎世杆菌属、双歧杆菌属、拟杆菌属、粪厌氧棒状菌属、瘤胃球菌属和毛螺旋菌属的丰度；同时使得因雌激素缺乏而大幅增加的致病菌志贺氏菌属的数量恢复正常。
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