CN111705091B - 一种萝卜硫素提取物的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种萝卜硫素提取物的制备方法，先将西兰花种子粉碎，经压榨除油后加水研磨为浆液，然后加入复合酶在30‑80℃、pH5～7且存在酶催化剂条件下酶解30～150min，过滤，滤液用乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩后即得萝卜硫素提取物。该法酶解率高、萝卜硫素收得率高，工艺简便易行，易于实现工业化。
Description
技术领域
本发明涉及植物提取技术领域，具体涉及一种萝卜硫素提取物的制备方法。
背景技术
萝卜硫素是萝卜硫苷(硫代葡萄糖苷的一种)经黑芥子硫酸苷酶酶解或酸水解产生的异硫氰酸盐衍生物，相对分子质量为177.29，分子式为C6H11S2NO，结构式为：
萝卜硫素是迄今为止蔬菜中发现的抗癌活力最强的一类异硫代氰酸盐，是目前公认的防癌抗癌效果最好的天然产物之一，对肝癌、乳腺癌、肺癌、食道癌、前列腺癌和胃癌有明显的阻断作用，是自然界存在的诱导Ⅱ型解毒酶能力最强的诱导物。随着研究的深入，人们发现萝卜硫素不仅可以抑制并杀死癌细胞，还具有抗菌、提高机体抗氧化能力和免疫力等药理作用。另外，从植物中酶解提取出来的萝卜硫素对人体无明显的不良反应，因此，萝卜硫素有开发成抗癌药或保健品的价值，具有广阔的市场前景。
目前从西兰花种子中提取萝卜硫素一般包括脱脂、酶解、提取等步骤，脱脂一般要用到石油醚、正己烷等有机溶剂，脱脂过程会造成酶部分失活，导致萝卜硫素的得率较低；酶解步骤中酶解效率直接影响萝卜硫素的产率，如何提高酶解效率也是本领域亟待解决的问题。
发明内容
为了解决现有技术中的问题，本发明提出了一种工艺过程简单、便于操作、成本较低、不含溶剂残留且萝卜硫素的提取率较高的萝卜硫素提取物的制备方法。
为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案为：包括以下步骤：
1)将西兰花种子粉碎，经压榨除油后加水研磨为浆液；
2)向浆液中加入催化酶和pH缓冲液并搅拌，使混合液的pH为5-7；
3)使浆液在30-80℃的温度下恒温酶解30-150min，得到酶解液；
4)将酶解液进行过滤，得到滤液和滤渣；并对滤渣重复酶解和过滤2～3次，将滤液合并；
5)利用乙酸乙酯对合并后的滤液进行2～3次萃取，得到萃取液；
6)利用旋转蒸发仪对萃取液进行减压浓缩，控制旋转蒸发仪的转速为50-150r/s，蒸馏温度为30-80℃，压力为0.01-0.02Mpa，即得到萝卜硫素提取物。
所述步骤1)中加水研磨为浆液，水的加量为西兰花种子重量的0.5～2倍。
所述步骤2)中催化酶为黑芥子酶、纤维素酶、半纤维素酶和辣根过氧化物酶中的至少一种。
所述步骤2)中混合液中催化酶的浓度为120-180U/L。
所述步骤2)中向浆液中还添加有酶催化剂。
所述酶催化剂为Fe2+离子、Ca2+离子和K+离子中的至少一种，所述酶催化剂的浓度为6-12mmol/L。
所述pH缓冲液为磷酸盐缓冲液和柠檬酸盐缓冲液中的至少一种。
所述步骤3)中浆液在40-50℃的恒温水浴锅中酶解50-70min。
所述步骤6)中优选的旋转蒸发仪的转速为90-110r/s，蒸馏温度为40-50℃。
本发明萝卜硫素的HPLC检测色谱条件为：Hypersil C18色谱柱(4.6mm×250mm,10μm)；流动相为甲醇-水(30:70，体积比)；流速1.0mL·min-1；检测波长254nm；进样量10μL。
与现有技术相比，本发明将西兰花种子粉碎压榨除油后加水研磨为浆液后添加催化酶并调节pH，使混合液的pH为5-7，合适的酸碱环境有利于保持催化酶的活性，并结合合适的酶解温度和时间，使催化酶能够使浆液中的萝卜硫苷充分转化成萝卜硫素，并对酶解过滤后的滤渣再重复进行2～3次酶解和过滤，能够使滤渣中残留的萝卜硫苷进行充分的转化，利用乙酸乙酯对滤液进行2～3次萃取，提高了萝卜硫素的提取率，另外利用乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯易挥发易于减压除去，萃取后由于沸点差异显著易于分离，不含其它的不良气味和溶剂残留，采用本发明的提取方法，工艺过程简单，便于操作，成本较低，且萝卜硫素的提取率较高。
进一步地，浆液中加入催化酶，催化酶为黑芥子酶、纤维素酶、半纤维素酶或辣根过氧化物酶，黑芥子酶能够促进萝卜硫苷的转化，辣根过氧化物酶能使植物细胞的胞间层破坏、细胞分离；纤维素酶能破坏细胞壁，释放出细胞内物质，同时还能降低黏度。本发明中利用纤维素酶或半纤维素酶或辣根过氧化物酶来促进西兰花种子中细胞间的破坏，更促进酶解。
进一步，由于Fe2+、Ca2+、K+对纤维素酶与黑芥子酶均具有一定的激活作用，将酶激活剂与纤维素酶搭配使用，进一步促进了酶解，提高了萝卜硫素的提取率。
黑芥子酶(Myrosinase，EC3.2.1)，又称β-硫代葡萄糖苷酶，是一种普遍存在于十字花科植物中可将硫代葡萄糖苷高效降解的酶类。它性质稳定，在十字花科植物的根、茎、叶、幼苗及种子中普遍存在，分布在特定的黑芥子酶细胞中。在植物细胞内，硫代葡萄糖苷和黑芥子酶是彼此分离的，硫代葡萄糖苷存在于液泡中，而黑芥子酶以黑芥子酶蛋白颗粒的形式存在于黑芥子酶细胞中。当植物组织受到损伤或者病虫侵害时，黑芥子酶被释放出来，与硫代葡萄糖苷直接接触，并使其降解为异硫氰酸醋、硫氰酸根离子、腈类、恶唑烷硫酮等有生物活性的物质。黑芥子酶与萝卜硫苷接触并催化产生具有重要药理学用途的萝卜硫素。
纤维素酶是降解纤维素生成葡萄糖的一组酶的总称，它不是单体酶，而是起协同作用的多组分酶系，是一种复合酶，主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成，还有很高活力的木聚糖酶。作用于纤维素以及从纤维素衍生出来的产物。微生物纤维素酶在转化不溶性纤维素成葡萄糖以及在果蔬汁中破坏细胞壁从而提高果汁得率等方面具有非常重要的意义。纤维素酶能破坏细胞壁，释放出细胞内物质，是一种用于淀粉和酒精工业的酶制剂，能够降低黏度和改进与不同粮食作物的分离。纤维素酶的酶制剂可以有效地改良和消化植物细胞结构为非淀粉碳水化合物。
半纤维素酶是一种能使构成植物细胞膜的多糖类水解的酶类，可促进植物细胞壁的溶解，使更多的植物细胞内溶物溶解出来，并将不易消化的大分子多糖、蛋白质和脂类降解为小分子物质，对西兰花种子的酶解具有促进作用。
辣根过氧化物酶，通常来源于辣根，是临床检验试剂中的常用酶。
酶催化剂可以改变一个无活性酶前体(酶原)，使之成为有活性的酶，或加快某种酶反应的速率产生酶激活作用。多种金属离子，特别是Fe2+离子、Ca2+离子或K+离子等是某些酶的激活剂，它们在酶与底物结合时起桥梁作用，激活酶的催化作用。
本实施例中磷酸盐缓冲液采用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠配成的缓冲溶液，柠檬酸盐缓冲液采用柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。酶解的的pH条件是利用缓冲溶液调节为pH值在5-7之间，以利于催化酶的活性。
经过大量试验验证和产物分析，本发明的优选的催化酶方案为黑芥子酶加纤维素酶、半纤维素酶和辣根过氧化物酶中的一种或多种，酶解的温度优选40-50℃，时间为50-70min；萃取中优选的滤液和乙酸乙酯的体积比为1:1；考虑到萝卜硫素沸点较低且分子较不稳定，优选出旋转蒸发仪的转速为90-110r/s，蒸馏温度为40-50℃，采用优选的工艺参数能够获得更高的提取率。
本发明将西兰花种子粉碎，经压榨除油后加水研磨为浆液后添加催化酶和酶激活剂，浆液中加入催化酶，催化酶为黑芥子酶、纤维素酶、半纤维素酶或辣根过氧化物酶，黑芥子酶能够促进萝卜硫苷的转化，辣根过氧化物酶能使植物细胞的胞间层破坏，细胞分离，从而使皮层脱落，加入到水果破碎物中，不仅能使果汁易于压榨，而且还能提高出汁率。纤维素酶能破坏细胞壁，释放出细胞内物质，是一种用于淀粉和酒精工业的酶制剂，能够降低黏度和改进与不同粮食作物的分离。纤维素酶的酶制剂可以有效地改良和消化植物细胞结构为非淀粉碳水化合物。本发明中利用纤维素酶或半纤维素酶或辣根过氧化物酶来促进西兰花种子中细胞间的破坏，更促进酶解。由于Fe2+、Ca2+、K+对纤维素酶与黑芥子酶均具有一定的激活作用，可以将酶激活剂与纤维素酶搭配使用，以进一步的促进酶解，提高萝卜硫素的提取率。
本发明利用磷酸盐缓冲液和柠檬酸盐缓冲液作为pH缓冲液调节酶解的pH，合适的酸碱环境有利于保持催化酶的活性，并结合合适的酶解温度和时间，使催化酶能够使浆液中的萝卜硫苷充分转化成萝卜硫素，并对酶解过滤后的滤渣再重复进行2～3次酶解和过滤，能够使滤渣中残留的萝卜硫苷进行充分的转化，利用乙酸乙酯对滤液进行2～3次萃取，提高了萝卜硫素的提取率，另外利用乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯易挥发易于减压除去，萃取后由于沸点差异显著易于分离，不含其它的不良气味和溶剂残留。采用本发明的提取方法，工艺过程简单，便于操作，成本较低，且萝卜硫素的提取率较高。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的上述发明内容作进一步的详细描述。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。在不脱离本发明上述技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段，做出各种替换和变更，均应包括在本发明的范围内。
实施例1萝卜硫素提取物的制备
本实施例具体包括以下步骤：
1)取西兰花种子10Kg，粉碎至40目后用液压榨油机进行低温压榨除油(压榨温度50℃，压力40MPa，时间60min)，将油饼加入10Kg水中分散后用研磨机研磨为浆液；
2)向浆液中加入催化酶和pH缓冲液并搅拌，使混合液的pH为6，加入催化酶，所述催化酶为黑芥子酶和纤维素酶的混合酶，二者以活力单位计的用量比为1:1，混合液中催化酶的浓度为120U/L；浆液中还添加有酶催化剂，酶催化剂为Fe2+离子溶液(FeSO4溶液)，酶催化剂的浓度为6mmol/L；pH缓冲液为磷酸盐缓冲液；
3)使浆液在40℃的温度下在恒温水浴锅中恒温酶解50min，得到酶解液；
4)将酶解液进行过滤，得到滤液和滤渣；并对滤渣重复酶解和过滤2～3次，将滤液合并；
5)利用乙酸乙酯对合并后的滤液进行2～3次萃取，得到萃取液；
6)利用旋转蒸发仪对萃取液进行减压浓缩，控制旋转蒸发仪的转速为100r/s，蒸馏温度为45℃，压力为0.01Mpa，即得到萝卜硫素提取物78.8g，萝卜硫素含量2.47％。
实施例2萝卜硫素提取物的制备
本实施例具体包括以下步骤：
1)取西兰花种子20Kg，粉碎至40目后用液压榨油机进行低温压榨除油(压榨温度40℃，压力45MPa，时间60min)，将油饼加入15Kg水中分散后用研磨机研磨为浆液；
2)向浆液中加入催化酶和pH缓冲液并搅拌，使混合液的pH为5，加入催化酶，所述催化酶为黑芥子酶、半纤维素酶和辣根过氧化物酶的混合酶，三者以活力单位计的用量比为1:1:1，混合液中催化酶的浓度为140U/L；浆液中还添加有酶催化剂，酶催化剂为Ca2+离子(CaCl2溶液)，酶催化剂的浓度为8mmol/L；pH缓冲液为柠檬酸盐缓冲液；
3)使浆液在45℃的温度下在恒温水浴锅中恒温酶解45min，得到酶解液；
4)将酶解液进行过滤，得到滤液和滤渣；并对滤渣重复酶解和过滤2～3次，将滤液合并；
5)利用乙酸乙酯对合并后的滤液进行2～3次萃取，得到萃取液；
6)利用旋转蒸发仪对萃取液进行减压浓缩，控制旋转蒸发仪的转速为90r/s，蒸馏温度为40℃，压力为0.02Mpa，即得到萝卜硫素提取物147.2g，萝卜硫素含量2.13％。。
实施例3萝卜硫素提取物的制备
本实施例具体包括以下步骤：
1)取西兰花种子50Kg，粉碎至40目后用液压榨油机进行低温压榨除油(压榨温度50℃，压力50MPa，时间60min)，将油饼加入80Kg水中分散后用研磨机研磨为浆液；
2)向浆液中加入催化酶和pH缓冲液并搅拌，使混合液的pH为7，加入催化酶，所述催化酶为黑芥子酶、纤维素酶、半纤维素酶和辣根过氧化物酶的混合酶，四种酶以活力单位计的用量比为1:1:1:1，混合液中催化酶的浓度为180U/L；浆液中还添加有酶催化剂，酶催化剂为K+离子(KCl溶液)，酶催化剂的浓度为10mmol/L；pH缓冲液为磷酸盐缓冲液；
3)使浆液在50℃的温度下在恒温水浴锅中恒温酶解40min，得到酶解液；
4)将酶解液进行过滤，得到滤液和滤渣；并对滤渣重复酶解和过滤2～3次，将滤液合并；
5)利用乙酸乙酯对合并后的滤液进行2～3次萃取，得到萃取液；
6)利用旋转蒸发仪对萃取液进行减压浓缩，控制旋转蒸发仪的转速为110r/s，蒸馏温度为50℃，压力为0.01-0.02Mpa，即得到萝卜硫素提取物404.5g，萝卜硫素含量2.22％。
实施例4萝卜硫素提取物的制备
本实施例具体包括以下步骤：
1)取西兰花种子100Kg，粉碎至40目后用液压榨油机进行低温压榨除油(压榨温度50℃，压力45MPa，时间60min)，将油饼加入100Kg水中分散后用研磨机研磨为浆液；
2)向浆液中加入催化酶和pH缓冲液并搅拌，使混合液的pH为6.5，加入催化酶，所述催化酶为黑芥子酶、纤维素酶和辣根过氧化物酶的混合酶，三者以活力单位计的用量比为1:1:1，混合液中催化酶的浓度为160U/L；浆液中还添加有酶催化剂，酶催化剂为Ca2+离子(CaCl2溶液)，酶催化剂的浓度为12mmol/L；pH缓冲液为柠檬酸盐缓冲液；
3)使浆液在80℃的温度下在恒温水浴锅中恒温酶解30min，得到酶解液；
4)将酶解液进行过滤，得到滤液和滤渣；并对滤渣重复酶解和过滤2～3次，将滤液合并；
5)利用乙酸乙酯对合并后的滤液进行2～3次萃取，得到萃取液；
6)利用旋转蒸发仪对萃取液进行减压浓缩，控制旋转蒸发仪的转速为150r/s，蒸馏温度为30℃，压力为0.01-0.02Mpa，即得到萝卜硫素提取物794.9g，萝卜硫素含量2.45％。
实施例5萝卜硫素提取物的制备
本实施例具体包括以下步骤：
1)取西兰花种子10Kg，粉碎至40目后用液压榨油机进行低温压榨除油(压榨温度40℃，压力50MPa，时间60min)，将油饼加入5Kg水中分散后用研磨机研磨为浆液；
2)向浆液中加入催化酶和pH缓冲液并搅拌，使混合液的pH为5.5，加入催化酶，所述催化酶为纤维素酶和半纤维素酶的混合酶，二者以活力单位计的用量比为1:1，混合液中催化酶的浓度为130U/L；浆液中还添加有酶催化剂，酶催化剂为Fe2+离子(FeSO4溶液)，酶催化剂的浓度为10mmol/L；pH缓冲液为磷酸盐缓冲液；
3)使浆液在30℃的温度下在恒温水浴锅中恒温酶解150min，得到酶解液；
4)将酶解液进行过滤，得到滤液和滤渣；并对滤渣重复酶解和过滤2～3次，将滤液合并；
5)利用乙酸乙酯对合并后的滤液进行2～3次萃取，得到萃取液；
6)利用旋转蒸发仪对萃取液进行减压浓缩，控制旋转蒸发仪的转速为130r/s，蒸馏温度为60℃，压力为0.01-0.02Mpa，即得到萝卜硫素提取物72.4g，萝卜硫素含量2.31％。
实施例6萝卜硫素提取物的制备
本实施例具体包括以下步骤：
1)取西兰花种子30Kg，粉碎至40目后用液压榨油机进行低温压榨除油(压榨温度45℃，压力45MPa，时间60min)，将油饼加入50Kg水中分散后用研磨机研磨为浆液；
2)向浆液中加入催化酶和pH缓冲液并搅拌，使混合液的pH为5.8，加入催化酶，所述催化酶为黑芥子酶和辣根过氧化物酶的混合酶，二者以活力单位计的用量比为1:1，混合液中催化酶的浓度为150U/L；浆液中还添加有酶催化剂，酶催化剂为K+离子(KCl溶液)，酶催化剂的浓度为10mmol/L；pH缓冲液为柠檬酸盐缓冲液；
3)使浆液在60℃的温度下在恒温水浴锅中恒温酶解50min，得到酶解液；
4)将酶解液进行过滤，得到滤液和滤渣；并对滤渣重复酶解和过滤2～3次，将滤液合并；
5)利用乙酸乙酯对合并后的滤液进行2～3次萃取，得到萃取液；
6)利用旋转蒸发仪对萃取液进行减压浓缩，控制旋转蒸发仪的转速为50，蒸馏温度为70℃，压力为0.01-0.02Mpa，即得到萝卜硫素提取物240.0g，萝卜硫素含量2.36％。
实施例7萝卜硫素提取物的制备
本实施例具体包括以下步骤：
1)取西兰花种子60Kg，粉碎至40目后用液压榨油机进行低温压榨除油(压榨温度50℃，压力50MPa，时间60min)，将油饼加入50Kg水中分散后用研磨机研磨为浆液；
2)向浆液中加入催化酶和pH缓冲液并搅拌，使混合液的pH为7，加入催化酶，所述催化酶为纤维素酶和辣根过氧化物酶的混合酶，二者以活力单位计的用量比为1:1，混合液中催化酶的浓度为170U/L；浆液中还添加有酶催化剂，酶催化剂为Ca2+离子(CaCl2溶液)，酶催化剂的浓度为7mmol/L；pH缓冲液为柠檬酸盐缓冲液；
3)使浆液在70℃的温度下在恒温水浴锅中恒温酶解40min，得到酶解液；
4)将酶解液进行过滤，得到滤液和滤渣；并对滤渣重复酶解和过滤2～3次，将滤液合并；
5)利用乙酸乙酯对合并后的滤液进行2～3次萃取，得到萃取液；
6)利用旋转蒸发仪对萃取液进行减压浓缩，控制旋转蒸发仪的转速为80r/s，蒸馏温度为60℃，压力为0.01-0.02Mpa，即得到萝卜硫素提取物486.5g，萝卜硫素含量2.29％。
实施例8萝卜硫素提取物的制备
本实施例具体包括以下步骤：
1)取西兰花种子100Kg，粉碎至40目后用液压榨油机进行低温压榨除油(压榨温度45℃，压力50MPa，时间60min)，将油饼加入100Kg水中分散后用研磨机研磨为浆液；
2)向浆液中加入催化酶和pH缓冲液并搅拌，使混合液的pH为6.7，加入催化酶，所述催化酶为半纤维素酶和辣根过氧化物酶的混合酶，二者以活力单位计的用量比为1:1，混合液中催化酶的浓度为145U/L；浆液中还添加有酶催化剂，酶催化剂为K+离子(KCl溶液)，酶催化剂的浓度为9mmol/L；pH缓冲液为磷酸盐缓冲液；
3)使浆液在65℃的温度下在恒温水浴锅中恒温酶解120min；
4)将酶解液进行过滤，得到滤液和滤渣；并对滤渣重复酶解和过滤2～3次，将滤液合并；
5)利用乙酸乙酯对合并后的滤液进行2～3次萃取，得到萃取液；
6)利用旋转蒸发仪对萃取液进行减压浓缩，控制旋转蒸发仪的转速为120r/s，蒸馏温度为70℃，压力为0.01-0.02Mpa，即得到萝卜硫素提取物743.5g，萝卜硫素含量2.28％。
实施例9萝卜硫素提取物的制备
本实施例具体包括以下步骤：
1)取西兰花种子10Kg，粉碎至40目后用液压榨油机进行低温压榨除油(压榨温度45℃，压力40MPa，时间60min)，将油饼加入10Kg水中分散后用研磨机研磨为浆液；
2)向浆液中加入催化酶和pH缓冲液并搅拌，使混合液的pH为6.5，加入催化酶，所述催化酶为黑芥子酶，混合液中催化酶的浓度为165U/L；浆液中还添加有酶催化剂，酶催化剂为Ca2+离子(CaCl2溶液)，酶催化剂的浓度为10mmol/L；pH缓冲液为柠檬酸盐缓冲液；
3)使浆液在70℃的温度下在恒温水浴锅中恒温酶解30min，得到酶解液；
4)将酶解液进行过滤，得到滤液和滤渣；并对滤渣重复酶解和过滤2～3次，将滤液合并；
5)利用乙酸乙酯对合并后的滤液进行2～3次萃取，得到萃取液；
6)利用旋转蒸发仪对萃取液进行减压浓缩，控制旋转蒸发仪的转速为150r/s，蒸馏温度为30℃，压力为0.01-0.02Mpa，即得到萝卜硫素提取物51.9g，萝卜硫素含量2.06％。
试验例不加外源性酶的情况下制备萝卜硫素提取物
本试验例具体包括以下步骤：
1)取西兰花种子10Kg，粉碎至40目后用液压榨油机进行低温压榨除油(压榨温度50℃，压力40MPa，时间60min)，将油饼加入10Kg水中分散后用研磨机研磨为浆液；
2)向浆液中加入催化酶和pH缓冲液并搅拌，使混合液的pH为6，浆液中添加酶催化剂，酶催化剂为Fe2+离子溶液(FeSO4溶液)，酶催化剂的浓度为6mmol/L；pH缓冲液为磷酸盐缓冲液；
3)使浆液在40℃的温度下在恒温水浴锅中恒温酶解50min，得到酶解液；
4)将酶解液进行过滤，得到滤液和滤渣；并对滤渣重复酶解和过滤2～3次，将滤液合并；
5)利用乙酸乙酯对合并后的滤液进行2～3次萃取，得到萃取液；
6)利用旋转蒸发仪对萃取液进行减压浓缩，控制旋转蒸发仪的转速为100r/s，蒸馏温度为45℃，压力为0.01Mpa，即得到萝卜硫素提取物36.1g，萝卜硫素含量1.74％。
可以看出，如果不加外源性催化酶，萝卜硫素提取物收得率大大降低，其中萝卜硫素的含量也明显降低，说明外源性酶的加入能大大提高萝卜硫素的收得率。
Claims (1)
1.一种萝卜硫素提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)取西兰花种子10Kg，粉碎至40目后用液压榨油机进行低温压榨除油，压榨温度50℃，压力40MPa，压榨时间60min，将油饼加入10Kg水中分散后用研磨机研磨为浆液；
2)向浆液中加入催化酶和pH缓冲液并搅拌，使混合液的pH为6，加入催化酶，所述催化酶为黑芥子酶和纤维素酶的混合酶，二者以活力单位计的用量比为1:1，混合液中催化酶的浓度为120U/L；浆液中还添加有酶催化剂，酶催化剂为Fe2+离子溶液即FeSO4溶液，酶催化剂的浓度为6mmol/L；pH缓冲液为磷酸盐缓冲液；
3)使浆液在40℃的温度下在恒温水浴锅中恒温酶解50min，得到酶解液；
4)将酶解液进行过滤，得到滤液和滤渣；并对滤渣重复酶解和过滤2～3次，将滤液合并；
5)利用乙酸乙酯对合并后的滤液进行2～3次萃取，得到萃取液；
6)利用旋转蒸发仪对萃取液进行减压浓缩，控制旋转蒸发仪的转速为100r/s，蒸馏温度为45℃，压力为0.01Mpa，即得到萝卜硫素提取物78.8g，萝卜硫素含量2.47％。
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