CN111686094A - 一种脂肪醇类化合物在制备通便药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种脂肪醇类化合物在制备通便药物中的用途。具体而言，本发明涉及式I所示的一种脂肪醇类化合物的用途，用于治疗便秘：

式I中，n＝9‑30。本发明的脂肪醇类化合物具有较强的通便活性，用其作为活性成分与药学上可接受的载体或辅料制备成通便药物或药物组合物。

Description

一种脂肪醇类化合物在制备通便药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种脂肪醇类化合物在制备通便药物中的用途，尤其涉及可从辣木科辣木属植物中分离得到或从市场购买的脂肪醇类化合物在制备通便药物中的用途。

背景技术

随着生活节奏的加快、饮食结构的改变及行为方式的改变，便秘发病率呈逐年上升趋势，已成为困扰现代人健康的主要问题之一，严重影响着人们的生活质量。我国成年人便秘的患病率为3.19％～11.6％，老年人患病率为11.5％(向雪莲，侯晓华，《2013年中国慢性便秘诊治指南》重点解读[J].中国实用外科杂志，2013，33(11):940-942)。便秘是一种常见的慢性胃肠疾病，粪便干硬、排便困难或者每周排便次数少于三次即视为便秘。便秘分为器质性便秘和功能性便秘，器质性便秘是一种病理性便秘，可以由内分泌疾病、消化道疾病和神经系统疾病等原因导致，需要药物维持治疗，具有不可逆性；功能性便秘是无明显器质性病变或继发于代谢病、系统性疾病或因为药物因素而以功能性排便困难为特征的便秘，主要由于肠功能紊乱引起。功能性便秘又可以分为慢传输性便秘和出口梗阻性便秘以及混合型便秘，其中慢传输性便秘相对来说是最普遍的一种症状。造成慢传输型便秘的原因有很多，包括膳食纤维和液体摄入量不足，不良饮食习惯以及缺乏锻炼等因素。治疗便秘药物种类主要有泻药、渗透剂、刺激性泻药及润滑剂，其中常见刺激性泻药包括塞纳、大黄、番泻叶及多磺酸盐等。这些药物作用比较明显，但长期服用会有不良副作用产生，例如损伤肠道黏膜、影响肠道微生态环境、引起电解质紊乱、具有药物依赖性等，不适合长期食用(Kon R,Yamamura M,Matsunaga Y,Kimura H,Minami M,Kato S,Ikarashi N,SugiyamaK.Laxative effect of repeated Daiokanzoto is attributable to decrease inaquaporin-3 expression in the colon[J].Journal of Natural Medicines.2018,72(2):493-502)。目前制药行业对具有通便作用的生物活性物质的研究越来越感兴趣，与相关药品相比，天然源生物活性物质通常不仅在便秘治疗方面具有较好的疗效，而且在预防方面也具有突出的作用，且毒性低和副作用少(赵东亮，李湘洲，张胜，杜仲茶对便秘模型小鼠的通便功能研究[J].食品工业科技，2017，38(23):280-283；程明明，黄苇，西番莲果皮中膳食纤维的降脂保肝及润肠通便功能[J].食品科学，2017，38(11):202-207)。

发明内容

(一)要解决的技术问题

本发明要解决的技术问题是解决现有技术中的化合物对于通便治疗效果不好的问题。

(二)技术方案

为了解决现有技术中存在的上述问题，本发明提供一种脂肪醇类化合物在通便中的用途、用于通便的药物或药物组合物及其制备方法。

(1)式I所示的一种脂肪醇类化合物用于制备通便药物的用途，

式I中，n＝9-30。

(2)根据(1)所述的用途，其中所述脂肪醇类化合物为式II-式Ⅵ所示化合物中的一种或两种：

式II：

式III：

式Ⅳ：

式Ⅴ：

式Ⅵ：

(3)根据(2)所述的用途，其中式Ⅴ所示化合物存在于用溶剂提取辣木属植物而得到的浸膏中并以该浸膏的形式使用；其中所述溶剂为氯仿、90～100体积％的乙醇/水、90～100体积％的甲醇/水、或90-100体积％的丙酮/水，其中所述辣木属植物为辣木。

(4)根据(1)-(3)中所述的用途，其中所述脂肪醇类化合物作为活性成分与药学上可接受的载体或辅料制备成药物组合物。

(5)根据(1)-(4)所述的用途，所述治疗疾病为便秘。

(6)根据(1)-(5)中任一项所述的用途，所述的药物组合物选自片剂、胶囊、丸剂。

(7)根据(1)-(5)中任一项所述的用途，所述的药物组合物选自缓释制剂或控释制剂。

(8)根据(1)-(7)中任一项所述的用途，其中所述的药学上可接受的载体或辅料包括口服制剂辅料、胃肠外途径给药或外用给药的辅料，给药途径可以是口服、外用局部给药等；给药剂型可以是液体剂型、固体剂型，液体剂型形式可以是糖浆剂、非水溶液、悬浮液或乳剂，固体剂型形式可以是片剂、锭剂、胶囊、滴丸、丸剂、粒剂、粉剂、霜剂、溶液剂、栓剂等；所用辅料包括：乳糖、碳酸钙、磷酸钙、磷酸钠、淀粉、环糊精、蔗糖、甘露醇、微晶纤维素钠、硫酸钙、水、乙醇、丙醇、甘油、丙二醇、异丙醇、糖浆、蜂蜜、葡萄糖、明胶浆、羧甲基纤维素钠、磷酸钾、干燥淀粉、琼脂粉、碳酸钙、碳酸氢钠、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油、季铵盐、滑石粉、三乙胺硬脂酸镁、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡。

(三)有益效果

本发明的上述技术方案具有如下优点：

1.本发明的式I化合物在复方地芬诺酯致小鼠便秘实验中能显著促进小鼠的小肠运动，提高小肠推进率，同时能够缩短首便时间，排便粒数和质量明显增加，粪便水分含量提高，提示其具有良好的通便活性。

2.本发明的式II-式Ⅳ及式Ⅵ所示化合物可以市场上购买得到，价格便宜，式Ⅴ所示化合物的制备方法中可采用的辣木属植物(尤其是辣木)在国内分布广泛，资源丰富，原料来源简单；而且本发明的式Ⅴ所示化合物在辣木属植物中含量较高，容易得到。

3.本发明的式Ⅴ所示化合物的制备方法中可采用常规柱层析制备方法，化合物制备操作流程简单，所获得的化合物纯度高，随后的工业化生产很容易实现。

4.本发明首次发现式I化合物中的正十二醇、正十六醇、正十八醇、正二十八醇及正三十醇对便秘都具有较好的治疗作用。这些化合物可以作为通便活性成分或先导化合物，有着很好的应用前景。

附图说明

图1是本发明中所述的正二十八醇的活性追踪分离流程图；

图2是本发明中正二十八醇的核磁共振氢谱(¹H NMR)；

图3是本发明中正二十八醇的核磁共振碳谱(¹³C NMR)；

图4是本发明中正二十八醇的DEPT谱。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明中的式I化合物可以是天然存在的化合物，也可以是人工合成的化合物。

本发明中所述通便成分包括由式I所示的化合物中的一种或多种：

式I中，n＝9-30。

本发明所述通便成分，其中式Ⅴ所示化合物存在于用溶剂提取辣木属植物而得到的浸膏中并以该浸膏的形式使用；其中所述溶剂为氯仿、90～100体积％的乙醇/水、90～100体积％的甲醇/水、或90-100体积％的丙酮/水，其中所述辣木属植物为辣木。

本发明的式II-式Ⅳ及式Ⅵ所示化合物可以市场上购买得到，也可以通过人工合成得到。

辣木Moringa oleifera Lam.又名鼓槌树，为辣木科辣木属多年生落叶乔木，原产于印度西北部喜马拉雅山南麓，于20世纪60年代引入我国，目前已经在广东、广西、云南等省份成功种植并逐步实现产业化。辣木作为一种功能性植物，不仅全株可食用，而且具有巨大的药用价值。辣木不同部位能治疗多种疾病，如辣木叶能治疗胃痛、风湿病、腹泻、关节炎等；辣木籽可缓解胃痛、溃疡，帮助消化；辣木根能治疗牙痛、抑郁等；树皮可治疗高血压、糖尿病、痔疮等(Popoola JO,Obembe OO.Local knowledge,use pattern and geographicaldistribution of Moringa oleifera Lam.(Moringaceae)in Nigeria[J].Journal ofEthnopharmacology.2013,150(2):682-691)。辣木叶营养价值丰富，不仅含有维生素、蛋白质、矿物质等多种营养元素，而且含有黄酮类、多酚类、生物碱、有机酸类等多种功能性成分(Gopalakrishnan L,Doriya K,Kumar DS.Moringa oleifera:A review on nutritiveimportance and its medicinal application[J].Food Science and HumanWellness.2016,5(2):49-56；Liu Y,Wang XY,Wei XM,Gao ZT,Han JP.Values,propertiesand utility of different parts of Moringa oleifera:An overview[J].ChineseHerbal Medicines.2018,10(4):371-378)。辣木叶于2012年被我国卫生部门列为新资源食品(王苗苗，赵有为，赵开丽等，响应面法优化辣木叶总黄酮超声波辅助提取工艺[J].热带农业科技，2015，38(4):22-28)。药理研究表明该属植物具有抗氧化、抗炎、抗糖尿病、降脂、抗肿瘤、杀虫、抗菌、保肝、通便等多方面的活性(高启霞，沙子，唐仕欢，李志勇，辣木化学成分及其药理作用研究进展，医药导报，2020，39(3):350-359；贺敏，贺银凤，辣木通便作用研究初探[J].内蒙古医学杂志，2009，41(12):1420-1423)。

本发明发现辣木属植物(如辣木)的溶剂(如95体积％的乙醇/水)提取物具有较好的通便活性，并在生物活性测试指导下对提取物进行化学成分研究，从中获得了通便活性较好的一种脂肪醇类活性成分。

所述的一种脂肪醇类化合物主要来自辣木属植物或市场上购买得到，包括但不限于：正十二醇(1-dodecanol)、正十六醇(1-hexadecanol)、正十八醇(1-octadecanol)、正二十八醇(1-octacosanol)及正三十醇(1-triacontanol)等。

正十二醇(1-dodecanol)的结构式为：

正十六醇(1-hexadecanol)的结构式为：

正十八醇(1-octadecanol)的结构式为：

正二十八醇(1-octacosanol)的结构式为：

正三十醇(1-triacontanol)的结构式为：

本发明所述的式I化合物对复方地芬诺酯导致的小鼠便秘都具有明显的治疗作用。优选地是，所述的式I化合物中的正二十八醇对复方地芬诺酯导致的小鼠便秘具有最好的治疗作用。所述的式I化合物在制备通便药物或药物组合物中的应用，其特征在于，所述通便药物或药物组合物为治疗便秘。

本发明采用目前国内外公认的复方地芬诺酯致小鼠便秘模型，对本发明所述的式I化合物进行通便活性测试。实验结果表明正十二醇、正十六醇、正十八醇、正二十八醇及正三十醇能显著促进小鼠的小肠运动，提高小肠推进率，同时能够缩短首便时间，排便粒数和质量明显增加，粪便水分含量提高，提示正十二醇、正十六醇、正十八醇、正二十八醇及正三十醇具有良好的通便活性，其中正二十八醇的通便作用较强。

本发明还提供上述式Ⅴ化合物的制备方法，该方法包括从辣木属植物(如辣木)中制备所述化合物。优选的是，从辣木属植物辣木的根、茎、叶、果实中制备正二十八醇。优选的是，所述方法具有下述步骤：

(1)将辣木叶晾干粉碎后用溶剂提取，合并提取液；

(2)减压浓缩(1)中的提取液得浸膏；

(3)将(2)中的浸膏混悬于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯以及正丁醇进行萃取，再用旋转蒸发仪蒸去溶剂，分别得石油醚、乙酸乙酯以及正丁醇萃取物；

(4)将(3)中的乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析分离，用氯仿–甲醇(体积比100:1～0:1)梯度洗脱得到7个组分(Fr.1～7)。

(5)将(4)中的Fr.1经硅胶柱色谱，以石油醚–乙酸乙酯(体积比20:1～0:1)洗脱，得到组分Fr.1-1～4。Fr.1-1经硅胶柱色谱，以石油醚–乙酸乙酯(体积比15:1)洗脱，得到二十八醇。

在步骤(1)中，所述的溶剂可用体积百分比为100％的氯仿、或90％～100％的乙醇/水、或90％～100％的甲醇/水、或90％～100％的丙酮/水，溶剂用量为辣木6-10倍重量，回流提取时间为每次2小时，回流提取重复3次，合并滤液即得到辣木属药材提取物溶液。

本发明还提供所述的式I化合物在制备通便药物或药物组合物中的应用：所述的式I化合物作为活性成分与药学上可接受的载体或辅料制备成通便药物或药物组合物。

本发明所述的通便药物或药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可以为肠道、或非肠道，如口服、直肠等；

给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。如液体剂型的溶液性质可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。液体剂型形式可以是糖浆剂、非水溶液、悬浮液或乳剂；固体剂型例如片剂、锭剂、胶囊、滴丸、丸剂、粒剂、粉剂、霜剂、溶液剂、栓剂等。

本发明所述的通便药物或药物组合物可以制成普通制剂，也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。

本发明所述的药学上可接受的载体或辅料包括口服制剂辅料、胃肠外途径给药或外用给药的辅料。所用辅料包括，赋形剂如乳糖、碳酸钙、磷酸钙、磷酸钠；稀释剂与吸收剂如淀粉、环糊精、乳糖、蔗糖、甘露醇、微晶纤维素钠、硫酸钙等；湿润剂与粘合剂如水、乙醇、丙醇、甘油、丙二醇、异丙醇、糖浆、蜂蜜、葡萄糖、明胶浆、羧甲基纤维素钠、磷酸钾等；崩解剂如干燥淀粉、琼脂粉、碳酸钙、碳酸氢钠、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素等；崩解抑制剂如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂如滑石粉、三乙胺硬脂酸镁、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡等。还可以将片剂进一步制备成包衣片，如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片，以延迟其在胃肠道中的崩解和吸收，并由此提供在较长时间内的持续作用。

具体实施例

为了更好的理解本发明，以下通过具体实施例进一步解释或说明本发明内容，但这些例子不应被理解为对本发明保护范围的限制。

实施例1

辣木提取物通便活性测试

材料来源：所属辣木属植物辣木采于云南金平，经云南民族大学民族医药学院杨青松副教授鉴定为Moringa oleifera Lam.。标本保存于云南民族大学民族医药学院标本馆。

辣木提取物的制备：将干燥的辣木全草粉碎，得辣木碎块；然后将辣木的碎块用95体积％乙醇/水回流提取3次，每次2小时得提取液；将辣木提取液分别过滤并用旋转蒸发仪减压浓缩成浸膏备用。

采用复方地芬诺酯致小鼠便秘模型(可参见科技文献：Zhai Xichuan,Lin Dehui,Zhao Yan,Yang Xingbin.Bacterial cellulose relieves diphenoxylate-inducedconstipation in rats[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry.2018，66:4106-4117)测试了辣木不同溶剂提取物的通便活性。具体实验方法如下：

1.1诱导小鼠便秘

取购自成都达硕实验动物有限公司的健康KM小鼠(平均体重20.0±2.0g)。在标准条件下将小鼠圈养在宽敞的笼子中，室温保持在22±2℃，相对湿度为40％～60％，明暗周期为12/12h，所有小鼠均可自由饮用水和啮齿动物食物。根据文献实验方法，诱导小鼠便秘，并稍加改动。小鼠口服给予1mL复方地芬诺酯(5mg/kg·bw)，而正常对照组则给予1mL生理盐水。如果与正常小鼠相比，复方地芬诺酯处理后首次粪便的排便时间明显延长，并且粪便的总重量和数量均明显减少，表明小鼠便秘模型建模成功。

1.2分组及给药

将便秘模型小鼠随机分为五组，正常组、模型组、酚酞组、辣木乙醇提取物的低、高剂量组。正常组的小鼠在实验期间仅给予1mL生理盐水。便秘模型对照组的小鼠服用1mL的复方地芬诺酯(5mg/kg·bw)。辣木乙醇提取物低剂量组的小鼠接受1mL含有复方地芬诺酯(5mg/kg·bw)和辣木乙醇提取物(1000mg/kg·bw)的混合混悬液。辣木乙醇提取物高剂量组的小鼠接受1mL的混合混悬液，其中含有复方地芬诺酯(5mg/kg·bw)和辣木乙醇提取物(2000mg/kg·bw)，酚酞组的小鼠接受1mL的混合混悬液，其中含有复方地芬诺酯(5mg/kg·bw)和酚酞片(400mg/kg·bw)。每天灌胃两次，分别在9:00和18:00进行。实验期间记录所有小鼠的水摄入、食物摄入和体重增加。

1.3促进粪便排泄功能的评估

排便实验如上所述对五组动物(每组n＝6)进行了连续14天的治疗。之后，将30只小鼠禁食过夜，持续16h，第二天早晨，正常组的小鼠被灌胃1mL生理盐水，而其他四组的小鼠灌胃相应的混合液。30分钟后，所有小鼠口服给予1mL印度墨水作为指示剂。将每只小鼠分别放置在带有隔间的金属笼中(笼的底部覆盖有吸水纸)，并允许其自由获取食物和水。记录从开始灌胃印度墨水到每只小鼠首次排出黑色粪便的时间，并记录5h内所有黑色粪便的重量和数量，并检测其含水量。

1.4小鼠小肠推进实验

小肠运动实验排便实验后，再次用1mL印度墨水灌胃所有小鼠。30分钟后，立即处死所有小鼠以获得小肠段(从胃到回盲肠交界处)。从幽门到回盲肠交界处的距离被测量为小肠的整个长度，并且从幽门到印度墨水边界的距离被测量为印度墨水的移动距离。印度墨水推进率的计算公式如下：印度墨水推进率(％)＝印度墨水的移动距离/小肠的全长×100％。

2实验结果

2.1辣木乙醇提取物对小鼠体重的影响

各组小鼠在实验过程中均能正常饮食和活动，其体质量变化如表1。从表中可以看出，各组实验小鼠的体质量均呈增加趋势，各组之间无差异显著性，不具有统计学意义，这表明灌胃辣木乙醇提取物对小鼠的正常生长不会产生不良影响。

表1辣木乙醇提取物对小鼠体重的影响(

n＝6)

2.2辣木乙醇提取物对小鼠饮食、饮水的影响

对小鼠饮食、饮水的影响结果见表2。在实验过程中，各组小鼠均为正常饮食、饮水，与空白组比较，模型组的小鼠饮食减少，饮水增加(P<0.05)，说明小鼠便秘后对小鼠的饮食、饮水均具有一定的影响。与模型组比较，辣木乙醇提取物低、高剂量组均能够增加便秘小鼠的饮食量(P<0.05)，但对饮水并无明显影响。其中，高剂量组对便秘小鼠的饮食量具有良好的促进作用，其饮食量接近酚酞组。

表2辣木乙醇提取物对小鼠饮食、饮水的影响(

n＝6)

注：^#与空白组比较，P<0.05；^*与模型组比较，P<0.05。

2.3辣木乙醇提取物对便秘模型小鼠排便情况的影响

表3为各组小鼠排便情况，结果表明模型组与空白组相比，首次排出黑便的时间增加，并且在5h内排便的粒数减少，粪便的总质量减少，差异具有显著性(P<0.01)，表明建模成功。由实验结果可知，辣木乙醇提取物低、高剂量组均能明显缩短小鼠首次排便时间(P<0.01)，增加小鼠5h内排便粒数及粪便的总质量(P<0.05)，表明辣木乙醇提取物能够对便秘模型小鼠产生促进排便的作用。

表3辣木乙醇提取物对小鼠各排便指标的影响(

n＝6)

注：^##与空白组比较，P<0.01；^*与模型组比较，P<0.05；^**与模型组比较，P<0.01。

2.4辣木乙醇提取物对小肠推进功能的影响

表4为小鼠小肠推进实验结果，可以看出，采用复方地芬诺酯药物构建小鼠便秘模型后，与空白组相比，模型组中小鼠的墨汁推进长度和推进率明显下降，并且差异显著，具有统计学意义(P<0.01)，这表明采用复方地芬诺酯药物灌胃模型组小鼠后，小肠蠕动抑制模型建模成功。由实验结果可知，辣木乙醇提取物不同剂量组的小鼠小肠墨汁推进长度明显增加，说明辣木乙醇提取物各剂量组均能显著加快小肠运动，增强小肠蠕动，提高墨汁推进率，且差异显著，具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。

表4辣木乙醇提取物对小鼠小肠推进率的影响(

n＝6)

注：^##与空白组比较，P<0.01；^*与模型组比较，P<0.05；^**与模型组比较，P<0.01。

表1至表4的实验结果表明，辣木乙醇提取物对小鼠的正常生长发育没有不良影响，且可以对便秘模型小鼠的小肠运动产生明显的促进作用，提高小肠推进率，同时能够缩短首便时间，排便粒数和质量明显增加，粪便水分含量提高，这说明辣木乙醇提取物确实具有增加肠胃蠕动、润肠通便的功能。

实施例2

用辣木叶进一步试验

分别用体积百分比为95％的甲醇/水、90％的乙醇/水和90％的丙酮/水作提取溶剂，重复实施例1。

1实验结果

1.1辣木各溶剂提取物对小鼠体重的影响

各组小鼠在实验过程中均能正常饮食和活动，其体质量变化如表5。从表中可以看出，各组实验小鼠的体质量均呈增加趋势，各组之间无差异显著性，不具有统计学意义，这表明灌胃辣木各溶剂提取物对小鼠的正常生长不会产生不良影响。

表5辣木各溶剂提取物对小鼠体重的影响(

n＝6)

1.2辣木各溶剂提取物对小鼠饮食、饮水的影响

对小鼠饮食、饮水的影响结果见表6。在实验过程中，各组小鼠均为正常饮食、饮水，与空白组比较，模型组的小鼠饮食减少，饮水增加(P<0.05)，说明小鼠便秘后对小鼠的饮食、饮水均具有一定的影响。与模型组比较，辣木各溶剂提取物高剂量组均能够增加便秘小鼠的饮食量(P<0.05)，但对饮水并无明显影响，表明辣木各溶剂提取物高剂量组对便秘小鼠的饮食量具有良好的促进作用。

表6辣木各溶剂提取物对小鼠饮食、饮水的影响(

n＝6)

注：^#与空白组比较，P<0.05；^*与模型组比较，P<0.05。

1.3辣木各溶剂提取物对便秘模型小鼠排便情况的影响

表7为各组小鼠排便情况，结果表明模型组与空白组相比，首次排出黑便的时间增加，并且在5h内排便的粒数减少，粪便的总质量减少，差异具有显著性(P<0.01)，表明建模成功。由实验结果可知，辣木各溶剂提取物低、高剂量组均能明显缩短小鼠首次排便时间(P<0.01)，增加小鼠5h内排便粒数及粪便的总质量(P<0.05)，表明辣木各溶剂提取物能够对便秘模型小鼠产生促进排便的作用。

表7辣木各溶剂提取物对小鼠各排便指标的影响(

n＝6)

注：^##与空白组比较，P<0.01；^*与模型组比较，P<0.05；^**与模型组比较，P<0.01。

1.4辣木各溶剂提取物对小肠推进功能的影响

表8为小鼠小肠推进实验结果，可以看出，采用复方地芬诺酯药物构建小鼠便秘模型后，与空白组相比，模型组中小鼠的墨汁推进长度和推进率明显下降，并且差异显著，具有统计学意义(P<0.01)，这表明采用复方地芬诺酯药物灌胃模型组小鼠后，小肠蠕动抑制模型建模成功。由实验结果可知，辣木各溶剂提取物不同剂量组的小鼠墨汁推进长度均明显增加，表明辣木各溶剂提取物不同剂量组均能显著加快小肠运动，增强小肠蠕动，提高墨汁推进率，且差异显著，具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。

表8辣木各溶剂提取物对小鼠小肠推进率的影响(

n＝6)

注：^##与空白组比较，P<0.01；^**与模型组比较，P<0.05；^**与模型组比较，P<0.01。

表5至表8的实验结果表明，用95％的甲醇/水、90％的乙醇/水和90％的丙酮/水作提取溶剂分别所获得的辣木叶95％甲醇提取物、90％乙醇提取物以及90％丙酮/水的提取物同样对小鼠具有显著的通便作用，因此用不同浓度的乙醇/水、甲醇/水或丙酮/水作提取溶剂同样可以获得辣木叶中通便的活性成分。

实施例3

从辣木叶中分离鉴定通便活性化合物

(1)将30Kg辣木叶晾干粉碎成粒径0.1cm大小的颗粒，得辣木叶粉，将辣木叶粉在室温温度下每次用90L 95％浓度的乙醇提取4次，合并乙醇提取液，备用；

(2)将步骤(1)制得的乙醇提取液经80-120微米滤纸过滤并在50℃的温度下用旋转蒸发仪进行减压浓缩，至比重为1.2时，得浸膏3017g，备用；

(3)将(2)中的3017g浸膏混悬于10L水中，依次用10L石油醚、10L乙酸乙酯以及10L正丁醇进行萃取，每种溶剂萃取5次，再用旋转蒸发仪蒸去溶剂，分别得石油醚萃取物(997g)、乙酸乙酯萃取物(931g)以及正丁醇萃取物(746g)；

(4)将(3)中制得的乙酸乙酯萃取物经100-200目硅胶柱色谱，用体积比100:1、50:1、20:1、10:1、3:1、1:1、0:1的氯仿-甲醇梯度洗脱得到Fr.1-Fr.7共7个组分，Fr.1为208.7g，Fr.2为66.6g，Fr.3为137.4g，Fr.4为55.7g，Fr.5为226.8g，Fr.6为71.3g，Fr.7为69.7g。取Fr.1(208.0g)经200-300目硅胶柱色谱，用体积比100:1、50:1、10:1、1:1的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱得到Fr.1-1～4共4个组分，Fr.1-1为62.7g，Fr.1-2为23.1g，Fr.1-3为89.3g，Fr.1-4为18.0g。Fr.1-1(62.7g)经200-300目硅胶柱色谱，以石油醚-乙酸乙酯(体积比80:1)洗脱，得到正二十八醇(1)(3.3g)。辣木叶中通便活性成分的分离鉴定流程见图1。

本发明的化合物的化学结构用核磁共振谱(¹H NMR,¹³C NMR,DEPT)、ESI-MS(阴离子模式)及IR等波谱图鉴定。根据分析化合物1的波谱数据，并参考相关文献(葛利，蓝柳凤，暴惠宾，杨克迪，山蓝化学成分的初步研究，广西植物，2014，34(2):155-159；邱鹰昆，田芳，窦德强，康廷国，董锋，亚贡叶的化学成分研究，中草药，2008，39(10):1446-1448.)，鉴定为正二十八醇(1-octacosanol)。

化合物1的理化数据：化合物(正二十八醇)为白色无定型粉末(氯仿)，熔点为79～80℃，EI-MS(m/z):410[M]⁺(4)，分子式C₂₈H₅₈O。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δH:3.65(2H,t,J＝6.8Hz,H-1),1.55(2H,m,H-2),1.25(50H,brs,H-3-27),0.88(3H,t,J＝6.4Hz,H-28)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δC:63.3(C-1),33.0(C-2),32.1(C-26),29.5～29.9(C-4～25),25.9(C-3),22.8(C-27),14.3(C-28).

实施例4

所述式I化合物的通便活性测试

采用复方地芬诺酯致小鼠便秘模型测试正十二醇、正十六醇、正十八醇、正二十八醇及正三十醇的通便活性。其中正十二醇、正十六醇、正十八醇及正三十醇购于上海迈瑞尔化学技术有限公司。具体实验方法如下：

1.1诱导小鼠便秘

建模方法与实施例1相同。

1.2分组及给药

将便秘模型小鼠随机分为十三组，分别为正常组、模型组、酚酞组、正十二醇、正十六醇、正十八醇、正二十八醇及正三十醇的低、高剂量组。正常组的小鼠在实验期间仅给予1mL生理盐水。便秘模型对照组的小鼠服用1mL的复方地芬诺酯(5mg/kg·bw)。正十二醇、正十六醇、正十八醇、正二十八醇及正三十醇的低剂量组的小鼠分别接受1mL含有复方地芬诺酯(5mg/kg·bw)和样品(100mg/kg·bw)的混合混悬液。正十二醇、正十六醇、正十八醇、正二十八醇及正三十醇的高剂量组的小鼠接受1mL的混合混悬液，其中含有复方地芬诺酯(5mg/kg·bw)和样品(400mg/kg·bw)，酚酞组的小鼠接受1mL的混合混悬液，其中含有复方地芬诺酯(5mg/kg·bw)和酚酞片(400mg/kg·bw)。每天灌胃两次，分别在9:00和18:00进行。实验期间记录所有小鼠的水摄入、食物摄入和体重增加。

1.3促进粪便排泄功能的评估

排便实验如上所述对十三组动物(每组n＝6)进行了连续14天的治疗。之后，将所有小鼠禁食过夜，持续16h，第二天早晨，正常组的小鼠被灌胃1mL生理盐水，而其他十二组的小鼠灌胃相应的混合液。30分钟后，所有小鼠口服给予1mL印度墨水作为指示剂。将每只小鼠分别放置在带有隔间的金属笼中(笼的底部覆盖有吸水纸)，并允许其自由获取食物和水。记录从开始灌胃印度墨水到每只小鼠首次排出黑色粪便的时间，并记录5h内所有黑色粪便的重量和数量，并检测其含水量。

1.4小鼠小肠推进实验

小肠运动实验排便实验后，再次用1mL印度墨水灌胃所有小鼠。30分钟后，立即处死所有小鼠以获得小肠段(从胃到回盲肠交界处)。从幽门到回盲肠交界处的距离被测量为小肠的整个长度，并且从幽门到印度墨水边界的距离被测量为印度墨水的移动距离。印度墨水推进率的计算公式如下：印度墨水推进率(％)＝印度墨水的移动距离/小肠的全长×100％。

2实验结果

2.1式I化合物对小鼠体重的影响

各组小鼠在实验过程中均能正常饮食和活动，其体质量变化如表9。从表中可以看出，各组实验小鼠的体重均呈增加趋势，各组之间无差异显著性，不具有统计学意义，这表明灌胃式I化合物对小鼠的正常生长不会产生不良影响。

表9式I化合物对小鼠体重的影响(

n＝6)

2.2式I化合物对小鼠饮食、饮水的影响

对小鼠饮食、饮水的影响结果见表10。在实验过程中，各组小鼠均为正常饮食、饮水，与空白组比较，模型组的小鼠饮食减少，饮水增加(P<0.05)，说明小鼠便秘后对小鼠的饮食、饮水均具有一定的影响。与模型组比较，正十二醇、正十六醇、正十八醇、正二十八醇及正三十醇的低、高剂量组均能够增加便秘小鼠的饮食量(P<0.05)，但对饮水并无明显影响，表明各样品组的低、高剂量组均对便秘小鼠的饮食量具有良好的促进作用。

表10式I化合物对小鼠饮食、饮水的影响(

n＝6)

注：^#与空白组比较，P<0.05；^**与模型组比较，P<0.01；^*与模型组比较，P<0.05。

2.3式I化合物对便秘模型小鼠排便情况的影响

表11为各组小鼠排便情况，结果表明模型组与空白组相比，首次排出黑便的时间增加，并且在5h内排便的粒数减少，粪便的总质量减轻，差异具有显著性(P<0.01)，表明建模成功。由实验结果可知，正十二醇、正十六醇、正十八醇、正二十八醇及正三十醇的低、高剂量组均能明显缩短小鼠首次排便时间(P<0.01)，增加小鼠5h内排便粒数及粪便的总质量(P<0.01)，表明正十二醇、正十六醇、正十八醇、正二十八醇及正三十醇的低、高剂量组均能够对便秘模型小鼠产生促进排便的作用。

表11式I化合物对小鼠各排便指标的影响(

n＝6)

注：^##与空白组比较，P<0.01；^*与模型组比较，P<0.05；^**与模型组比较，P<0.01。

2.4式I化合物对小肠推进功能的影响

表12为小鼠小肠推进实验结果，可以看出，采用复方地芬诺酯药物构建小鼠便秘模型后，与空白组相比，模型组中小鼠的墨汁推进长度和推进率明显下降，并且差异显著，具有统计学意义(P<0.01)，这表明采用复方地芬诺酯药物灌胃模型组小鼠后，小肠蠕动抑制模型建模成功。由实验结果可知，各剂量组处理的小鼠其墨汁推进长度明显增加，表明正十二醇、正十六醇、正十八醇、正二十八醇及正三十醇的低、高剂量组均能显著加快小肠运动，增强小肠蠕动，提高墨汁推进率，且差异显著，具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。

表12式I化合物对小鼠小肠推进率的影响(

n＝6)

注：^##与空白组比较，P<0.01；^*与模型组比较，P<0.05；^**与模型组比较，P<0.01。

表9至表12的实验结果表明，正十二醇、正十六醇、正十八醇、正二十八醇及正三十醇的低、高剂量组均对小鼠的正常生长发育没有不良影响，且可以对便秘模型小鼠的小肠运动产生明显的促进作用，提高小肠推进率，同时能够缩短首便时间，排便粒数和质量明显增加，粪便水分含量提高，这说明式I化合物确实具有增加肠胃蠕动、润肠通便的功能。

实施例5

按实施例3所述方法制备获得的正二十八醇和购买的正十二醇、正十六醇、正十八醇及正三十醇，分别加入片剂常用辅料，按常规制备工艺制备成片剂。

也可将按实施例3所述方法制备获得的正二十八醇和购买的正十二醇、正十六醇、正十八醇及正三十醇按任意比例混合加入片剂常用辅料，按常规制备工艺制备成片剂。

实施例6

按实施例3所述方法制备获得的正二十八醇和购买的正十二醇、正十六醇、正十八醇及正三十醇，分别加入胶囊剂常用辅料，按常规制备工艺制备成胶囊剂。

也可将按实施例3所述方法制备获得的正二十八醇和购买的正十二醇、正十六醇、正十八醇及正三十醇按任意比例混合加入胶囊剂常用辅料，按常规制备工艺制备成胶囊剂。

实施例7

按实施例3所述方法制备获得的正二十八醇和购买的正十二醇、正十六醇、正十八醇及正三十醇，分别加入巴布剂常用辅料，按常规制备工艺制备成巴布剂。

最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (8)

1.式I所示的一种脂肪醇类化合物用于制备通便药物的用途，

式I中，n＝9-30。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述脂肪醇类化合物为式II-式Ⅵ所示化合物中的一种或几种：

式II：

式III：

式Ⅳ：

式Ⅴ：

式Ⅵ：

3.根据权利要求2所述的用途，其中式Ⅴ所示化合物存在于用溶剂提取辣木属植物而得到的浸膏中并以该浸膏的形式使用；其中所述溶剂为氯仿、90～100体积％的乙醇/水、90～100体积％的甲醇/水、或90-100体积％的丙酮/水，其中所述辣木属植物为辣木。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途，其特征在于，其中所述脂肪醇类化合物作为活性成分与药学上可接受的载体或辅料制备成药物组合物。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的用途，其特征在于，所述治疗疾病为便秘。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物选自片剂、胶囊、丸剂。

7.根据权利要求1-5中任一项所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物选自缓释制剂或控释制剂。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的用途，其特征在于，其中所述的药学上可接受的载体或辅料包括口服制剂辅料、胃肠外途径给药或外用给药的辅料，给药途径可以是口服、外用局部给药等；给药剂型可以是液体剂型、固体剂型，液体剂型形式可以是糖浆剂、非水溶液、悬浮液或乳剂，固体剂型形式可以是片剂、锭剂、胶囊、滴丸、丸剂、粒剂、粉剂、霜剂、溶液剂、栓剂等；所用辅料包括：乳糖、碳酸钙、磷酸钙、磷酸钠、淀粉、环糊精、蔗糖、甘露醇、微晶纤维素钠、硫酸钙、水、乙醇、丙醇、甘油、丙二醇、异丙醇、糖浆、蜂蜜、葡萄糖、明胶浆、羧甲基纤维素钠、磷酸钾、干燥淀粉、琼脂粉、碳酸钙、碳酸氢钠、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油、季铵盐、滑石粉、三乙胺硬脂酸镁、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡。

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