CN111671773A - 富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体在制备提高修复急性肾损伤的药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体在制备提高修复急性肾损伤的药物中的应用，属于干细胞外泌体分泌技术领域。经过富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体，显著提高了修复急性肾损伤的作用。

Description

富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体在制备提高修 复急性肾损伤的药物中的应用
技术领域
本发明属于干细胞外泌体分泌技术领域，尤其涉及富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体在制备提高修复急性肾损伤的药物中的应用。
背景技术
急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)是住院患者的常见并发症，其特征是肾功能迅速恶化。住院病人约有8％–16％的AKI患者会发展为慢性肾病，并具有很高的死亡风险和相关费用。尽管肾组织在损伤后显示出内在的再生能力，但在大多数情况下仍无法完全康复。因此，人们正在考虑多种用于肾再生的临床方法。在AKI的新治疗选择中，使用干细胞源性外泌体(Mensenchymal stem cell,MSC-exos)越来越引起人们的关注。外泌体可能通过多种再生过程起作用，包括诱导肾小管细胞存活、增殖、抑制炎症和抑制纤维化，但是现有技术中还未有富血小板血刺激得到的外泌体增强修复急性肾损伤的报道。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体在制备提高修复急性肾损伤的药物中的应用。
为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：
本发明提供了富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体在制备提高修复急性肾损伤的药物中的应用。
优选的，所述脐带间充质干细胞外泌体的方法包括以下步骤：
1)含超离血清的RPMI1640培养基培养脐带间充质干细胞，用浓度为 1×108血小板/mL的富血小板血浆刺激脐带间充质干细胞45～50h，收集富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞的培养上清；所述富血小板血浆的体积与脐带间充质干细胞的数量比为50μL:1×106个；
2)将所述步骤1)得到的培养上清进行第一离心，得到第一清液，将所述第一清液进行第二离心，得到第二沉淀；
所述第一离心的时间为25～35min，所述第二离心的时间为70～90min；
3)将所述步骤2)得到的第二沉淀经缓冲液重悬后进行第三离心，得到的沉淀为富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞；
所述第三离心的时间为70～90min。
优选的，所述步骤1)富血小板血浆的血小板浓度为1.2×1012血小板 /mL。
优选的，所述步骤1)刺激的时间为48h，所述刺激的温度为37℃。
优选的，所述步骤2)第一离心心的离心力为10000g。
优选的，所述步骤2)第一离心的时间为30min，所述第二离心的时间为80min。
优选的，所述步骤2)第二离心心的离心力为100000g。
优选的，所述步骤2)培养上清在500g下离心10min后，将得到的上清液再进行第一离心。
优选的，所述第一离心、第二离心和第三离心的温度分别为4℃。
优选的，所述步骤3)第三离心的离心力为100000g。
本发明提供了富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体在制备提高修复急性肾损伤的药物中的应用。经过富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体，显著提高了修复急性肾损伤的作用。
附图说明
图1为实施例2中脐带间充质干细胞和富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体透射电镜图；
图2为实施例2中脐带间充质干细胞和富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体的纳米粒径仪NTA检测结果；
图3为实施例2中脐带间充质干细胞和富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体表面标记物的western blot检测结果；
图4为实施例3中富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体抑制 NRK-52E凋亡数减少，降低肾小管上皮细胞的cleaved-caspase3阳性表达；
图5为实施例4中富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体对急性肾损伤模型体内修复效果，其中A为血清生化检测肌酐和尿素氮在PRP- MSC-exos干预后降低；B为肾组织HE切片检测PRP-MSC-exos处理后肾小管空泡变性减少组织结构完整；C为westernblot检测PRP-MSC-exos对急性肾组织凋亡蛋白抑制作用；D为肾组织免疫组化检测PRP-MSC-exos对急性肾损伤肾小管凋亡的影响。
具体实施方式
本发明提供了本发明提供了富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体在制备提高修复急性肾损伤的药物中的应用。本发明对所述药物的剂型没有特殊限定，采用富血小板血浆在医学上可接受的剂型即可。
在本发明中，所述脐带间充质干细胞外泌体的方法优选包括以下步骤：
1)含超离血清的RPMI1640培养基培养脐带间充质干细胞，用浓度为 1×108血小板/mL的富血小板血浆刺激脐带间充质干细胞45～50h，收集富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞的培养上清；所述富血小板血浆的体积与脐带间充质干细胞的数量比为50μL:1×106个；
2)将所述步骤1)得到的培养上清进行第一离心，得到第一清液，将所述第一清液进行第二离心，得到第二沉淀；
所述第一离心的时间为25～35min，所述第二离心的时间为70～90min；
3)将所述步骤2)得到的第二沉淀经缓冲液重悬后进行第三离心，得到的沉淀为富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞；
所述第三离心的时间为70～90min。
本发明用含超离血清的RPMI1640培养基培养脐带间充质干细胞，用浓度为1×108血小板/mL的50μL富血小板血浆刺激1×106脐带间充质干细胞45～50h，收集富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞的培养上清。在本发明中，所述富血小板血浆的体积与脐带间充质干细胞的数量比优选为 50μL:1×106个。本发明对所述含超离血清的RPMI1640培养基的来源没有特殊限定，采用常规市售产品即可。在本发明中，所述刺激的时间优选为 48h(细胞培养增殖的指数期为48h，增殖速度最快，细胞状态好)。本发明对收集培养上清的方法没有特殊限定，采用常规收集的方法即可。
本发明将培养上清进行第一离心，得到第一清液，将所述第一清液进行第二离心，得到第二沉淀；所述第一离心的时间为25～35min，所述第二离心的时间为70～90min。在本发明中，所述第一离心的时间优选为30min ，所述第一离心的温度优选为4℃，所述第一离心的离心力优选为10000g 。在本发明中，所述第二离心的时间优选为80min，所述第二离心的温度优选为4℃，所述第二离心的离心力优选为100000g。在本发明中，所述第三离心的时间优选为80min，所述第三离心的温度优选为4℃，所述第三离心的离心力优选为100000g。在本发明中，所述培养上清优选在500g、4℃下离心10min后，将得到的上清液再进行第一离心。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
富血小板血浆刺激脐带间充质干细胞外泌体的提取与鉴定
脐带间充质干细胞培养试剂：1.2×1012血小板/mL的富血小板血浆(购买于镇江中心血站)，RPMI1640、胎牛血清(Gibco公司产品)、胰蛋白酶(Sigma公司产品)、二氧化碳培养箱(Forma公司)、无血清培养基(上海依科赛公司；倒置显微镜，超净工作台，台式离心机，超速离心机(美国贝克曼公司)。
Exosome提取试剂：成品PBS(PBS，上海创赛公司)，兔抗人CD9 抗体(美国BioworldTechnology公司)，兔抗人CD63抗体(美国 Epitomics公司)，兔抗人CD81抗体(美国Epitomics公司)，辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔IgG二抗(北京康为世纪公司)，HRP化学发光底物，透射电子显微镜(FEI Tecnai 12，Philips公司)。
1)用含超离血清的RPMI1640培养脐带间充质干细胞，用1.2×1012血小板/mL的富血小板血浆刺激干细胞，培养48h后，取培养上清进行差速离心(500g离心10min，10000g离心30min，收集上清液进行100000g离心80min)，弃掉上清，得到富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体。
2)透射电镜和Nanoparticle Tracking Analysis观察外泌体形态特征：脐带间充质干细胞和富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体20μL，混匀后滴加于直径2mm的载样铜网上，静置5min后，用滤纸吸去残余液体，将铜网倒扣于30g/L磷钨酸(pH 6.8)液滴上，25℃条件下负染5min，白炽灯下烘干，透射电镜下观察拍照，图1所示血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体粒径大小约为105nm左右的囊泡状结构。图2所示 NanoparticleTracking Analysis检测富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体浓度为5.1×109粒子数/ml。
实施例2
富血小板血浆刺激脐带间充质干细胞外泌体的表面标志物检测
western blot检测外泌体表面标记蛋白：配制浓度为12％SDS-PAGE电泳胶，PRP-MSC-exos充分裂解加入1/3体积的5×SDS上样缓冲液，煮沸 10min，按150μg蛋白总量上样，跑电泳，将蛋白质转至PVDF膜上电转移 (350mA，120min)，5％脱脂牛奶室温封闭1h，兔抗人CD9抗体、兔抗人CD63抗体和兔抗人CD81抗体(1:500)4℃反应过夜，次日 TBS/0.5％Tween20洗膜3次，与HRP标记的山羊抗兔IgG二抗37℃温育1 h)，TBS/0.5％Tween 20洗膜3次，加入预混HRP化学发光底物，化学发光凝胶成像系统曝光检测，如图3所示富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体的标记，由图3可以看出，富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体高表达CD9、CD63和CD81。
实施例3
富血小板血浆刺激脐带间充质干细胞外泌体抑制NRK-52E凋亡
本实施例所使用的主要材料和来源分别如下：
24孔细胞培养板(JET Biofil)，细胞爬片15mm(NEST)，肾小管上皮细胞NRK-52E，The slides were visualized with Confocal microscope(GE 公司)。
实施步骤：
1.NRK-52E细胞接种于细胞爬片上，待细胞贴壁以后加入5％甘油共培养24h，然后同时加入200μg的PRP-MSC-exos处理24h，检测western blot 外泌体干预后NRK-52E细胞凋亡蛋白的表达；
2.用4％多聚甲醛固定NRK-52E细胞，进行细胞组化染色(Cleaved- caspase3染细胞内凋亡蛋白，DAB显色，苏木素复染细胞核)；
3.利用正置显微镜对细胞进行拍照。
图4中的A为PRP-MSC-exos抑制NRK-52E细胞凋亡蛋白Bax表达，由图4中的B可知PRP-MSC-exos干预降低甘油诱导的肾小管上皮细胞胞质内Cleaved-caspase3阳性表达。
实施例4
富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体修复急性肾损伤
本实施例所使用的主要材料和来源分别如下：
细胞培养皿(Excel公司)，甘油(福麦斯，南京)，Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒(福麦斯，南京)，正置显微镜(Nikon公司，日本)，血清生化仪(CaliburBD公司，美国)，免疫组化试剂盒(博士德，武汉) 。
实施步骤：
1.采用大鼠两侧臀部肌肉注射50％甘油(10ml/kg)构建急性肾损伤模型，造模三天，其中每天尾静脉注射一次PRP-MSC-exos(15mg/kg)，采集大鼠血清检测肾功能指标肌酐和尿素氮，发现PRP-MSC-exos注射组血清肾功能指标较损伤组明显降低。
2.肾组织HE切片检测各组肾脏病理结构改变，发现甘油损伤组中肾小管空泡变性明显增加，透明管型明显增多，在PRP-MSC-exos注射干预后肾组织结构完整，空泡样变性明显减少。
3.超声裂解提取四组肾组织蛋白，按100μg蛋白总量上样，跑电泳，将蛋白质转至PVDF膜上电转移(350mA，120min)，5％脱脂牛奶室温封闭1h，兔抗人Bax抗体、兔抗人Cleaved-caspase3(1:500)4℃反应过夜，次日TBS/0.5％Tween 20洗膜3次，与HRP标记的山羊抗兔IgG二抗37℃温育1h)，TBS/0.5％Tween 20洗膜3次，加入预混HRP化学发光底物，化学发光凝胶成像系统曝光检测。
4.肾组织石蜡切片先蜡入水，用30％双氧水灭火内源性酶30min，组化PBS清洗3次，加入抗原修复液煮沸30min修复抗原，5％BSA封闭1h ，孵育Cleaved-caspase3一抗4℃过夜，组化PBS清洗3次，孵育辣根酶标羊抗兔IgG聚合物37℃2h，组化PBS清洗3次，DAB显色，苏木素复染细胞核。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞外泌体在制备提高修复急性肾损伤的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述脐带间充质干细胞外泌体的方法包括以下步骤：
1)含超离血清的RPMI1640培养基培养脐带间充质干细胞，用浓度为1×108血小板/mL的富血小板血浆刺激脐带间充质干细胞45～50h，收集富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞的培养上清；所述富血小板血浆的体积与脐带间充质干细胞的数量比为50μL:1×106个；
2)将所述步骤1)得到的培养上清进行第一离心，得到第一清液，将所述第一清液进行第二离心，得到第二沉淀；
所述第一离心的时间为25～35min，所述第二离心的时间为70～90min；
3)将所述步骤2)得到的第二沉淀经缓冲液重悬后进行第三离心，得到的沉淀为富血小板血浆刺激的脐带间充质干细胞；
所述第三离心的时间为70～90min。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤1)富血小板血浆的血小板浓度为1.2×1012血小板/mL。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤1)刺激的时间为48h，所述刺激的温度为37℃。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤2)第一离心心的离心力为10000g。
6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤2)第一离心的时间为30min，所述第二离心的时间为80min。
7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤2)第二离心心的离心力为100000g。
8.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤2)培养上清在500g下离心10min后，将得到的上清液再进行第一离心。
9.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述第一离心、第二离心和第三离心的温度分别为4℃。
10.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤3)第三离心的离心力为100000g。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114832015A (zh) * 2022-04-22 2022-08-02 西安初源赛尔生物科技有限责任公司 一种基于prp与干细胞外泌体的面部修复注射剂及其制备方法
CN114984049A (zh) * 2022-05-23 2022-09-02 上海市东方医院（同济大学附属东方医院） 人脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备治疗急性肾损伤的药物中的用途
CN115029309A (zh) * 2021-03-05 2022-09-09 杭州市萧山区中医院 富血小板血浆来源性外泌体的分离方法及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108103017A (zh) * 2018-02-28 2018-06-01 江苏大学 人脐带间质干细胞外泌体的分离纯化方法和人脐带间质干细胞外泌体的应用
WO2018183194A1 (en) * 2017-03-25 2018-10-04 University Of Miami Biological scaffold comprising therapeutic cells
CN108883138A (zh) * 2015-12-30 2018-11-23 加利福利亚大学董事会 增强细胞衍生的囊泡的生产和分离的方法
CN110038032A (zh) * 2019-05-10 2019-07-23 江苏大学 人脐带msc外泌体的新型抗肾纤维化的生物制剂及制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108883138A (zh) * 2015-12-30 2018-11-23 加利福利亚大学董事会 增强细胞衍生的囊泡的生产和分离的方法
WO2018183194A1 (en) * 2017-03-25 2018-10-04 University Of Miami Biological scaffold comprising therapeutic cells
CN108103017A (zh) * 2018-02-28 2018-06-01 江苏大学 人脐带间质干细胞外泌体的分离纯化方法和人脐带间质干细胞外泌体的应用
CN110038032A (zh) * 2019-05-10 2019-07-23 江苏大学 人脐带msc外泌体的新型抗肾纤维化的生物制剂及制备方法

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JI CHENG 等: "Platelet-rich Plasma Enhanced MSCs Repair for Glycerin-induced Acute Kidney Injury via AKT/Rab27 Paracrine Pathway", 《，RESEARCH SQUARE》 *
LI TINGFEN 等: "Exosomes Derived from Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells Alleviate Liver Fibrosis", 《STEM CELLS AND DEVELOPMENT》 *
SUN YAOXIANG 等: "Human Mesenchymal Stem Cell Derived Exosomes Alleviate Type 2 Diabetes Mellitus by Reversing Peripheral Insulin Resistance and Relieving β‑Cell Destruction", 《ACS NANO》 *
ZHOU YING 等: "Exosomes released by human umbilical cord mesenchymal stem cells protect against cisplatin-induced renal oxidative stress and apoptosis in vivo and in vitro", 《STEM CELL RESEARCH & THERAPY》 *
中国癌症基金会《中国肿瘤临床年鉴》编辑部: "《2015 中国肿瘤临床年鉴》", 30 September 2016, 北京：中国协和医科大学出版社 *
于源华: "《生物工程与技术专业基础实验教程》", 30 June 2016, 北京：北京理工大学出版社 *
梁馨苓 等: "《医院获得性急性肾损伤》", 30 June 2015, 北京：人民军医出版社 *
纪成 等: "间充质干细胞来源外泌体在肾脏疾病中的研究进展", 《第二军医大学学报》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115029309A (zh) * 2021-03-05 2022-09-09 杭州市萧山区中医院 富血小板血浆来源性外泌体的分离方法及其应用
CN114832015A (zh) * 2022-04-22 2022-08-02 西安初源赛尔生物科技有限责任公司 一种基于prp与干细胞外泌体的面部修复注射剂及其制备方法
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