CN111593080B - 一种α-半乳糖抗原活性前体及其合成方法和应用 - Google Patents
一种α-半乳糖抗原活性前体及其合成方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111593080B CN111593080B CN202010408607.9A CN202010408607A CN111593080B CN 111593080 B CN111593080 B CN 111593080B CN 202010408607 A CN202010408607 A CN 202010408607A CN 111593080 B CN111593080 B CN 111593080B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- alpha
- active precursor
- antigen active
- organic solvent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000002243 precursor Substances 0.000 title claims abstract description 63
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 60
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 60
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 60
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 title claims abstract description 52
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 title abstract description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 60
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 57
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 30
- HSCJRCZFDFQWRP-UHFFFAOYSA-N Uridindiphosphoglukose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC1C(O)C(O)C(N2C(NC(=O)C=C2)=O)O1 HSCJRCZFDFQWRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 230000009471 action Effects 0.000 claims abstract description 13
- NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N ethyl (e)-3-[3-amino-2-cyano-1-[(e)-3-ethoxy-3-oxoprop-1-enyl]sulfanyl-3-oxoprop-1-enyl]sulfanylprop-2-enoate Chemical compound CCOC(=O)\C=C\SC(=C(C#N)C(N)=O)S\C=C\C(=O)OCC NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N 0.000 claims abstract description 12
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- HSCJRCZFDFQWRP-JZMIEXBBSA-N UDP-alpha-D-glucose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C(NC(=O)C=C2)=O)O1 HSCJRCZFDFQWRP-JZMIEXBBSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 11
- 102100021436 UDP-glucose 4-epimerase Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 108010075202 UDP-glucose 4-epimerase Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 9
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 claims abstract description 8
- DFSFLZCLKYZYRD-UHFFFAOYSA-N 3,4-diethoxycyclobut-3-ene-1,2-dione Chemical compound CCOC1=C(OCC)C(=O)C1=O DFSFLZCLKYZYRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 claims abstract 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical group OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 32
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 31
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 27
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 21
- -1 amino, acetamido, trifluoroacetamido Chemical group 0.000 claims description 18
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims description 18
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical group CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 12
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 12
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- DRSHXJFUUPIBHX-UHFFFAOYSA-N COc1ccc(cc1)N1N=CC2C=NC(Nc3cc(OC)c(OC)c(OCCCN4CCN(C)CC4)c3)=NC12 Chemical compound COc1ccc(cc1)N1N=CC2C=NC(Nc3cc(OC)c(OC)c(OCCCN4CCN(C)CC4)c3)=NC12 DRSHXJFUUPIBHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- RMVRSNDYEFQCLF-UHFFFAOYSA-N thiophenol Chemical compound SC1=CC=CC=C1 RMVRSNDYEFQCLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- KZMGYPLQYOPHEL-UHFFFAOYSA-N Boron trifluoride etherate Chemical compound FB(F)F.CCOCC KZMGYPLQYOPHEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 8
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 8
- DPKBAXPHAYBPRL-UHFFFAOYSA-M tetrabutylazanium;iodide Chemical compound [I-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC DPKBAXPHAYBPRL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- CZKMPDNXOGQMFW-UHFFFAOYSA-N chloro(triethyl)germane Chemical group CC[Ge](Cl)(CC)CC CZKMPDNXOGQMFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- UKVIEHSSVKSQBA-UHFFFAOYSA-N methane;palladium Chemical group C.[Pd] UKVIEHSSVKSQBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 7
- FCSKOFQQCWLGMV-UHFFFAOYSA-N 5-{5-[2-chloro-4-(4,5-dihydro-1,3-oxazol-2-yl)phenoxy]pentyl}-3-methylisoxazole Chemical compound O1N=C(C)C=C1CCCCCOC1=CC=C(C=2OCCN=2)C=C1Cl FCSKOFQQCWLGMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N Aniline Chemical group NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical group NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 150000001244 carboxylic acid anhydrides Chemical class 0.000 claims description 6
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical group [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 5
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 4
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 3
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 claims description 3
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 claims description 3
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims 1
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 16
- 239000003053 toxin Substances 0.000 abstract description 15
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 abstract description 15
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 8
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 7
- HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methylphenyl)sulfonylbutane-1,4-dione Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)C(C(=O)C=1C=CC(Cl)=CC=1)CC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- 102000051366 Glycosyltransferases Human genes 0.000 abstract 1
- 108700023372 Glycosyltransferases Proteins 0.000 abstract 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 10
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 6
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HSCJRCZFDFQWRP-ABVWGUQPSA-N UDP-alpha-D-galactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C(NC(=O)C=C2)=O)O1 HSCJRCZFDFQWRP-ABVWGUQPSA-N 0.000 description 4
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 4
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 4
- 101000718529 Saccharolobus solfataricus (strain ATCC 35092 / DSM 1617 / JCM 11322 / P2) Alpha-galactosidase Proteins 0.000 description 3
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- NNISLDGFPWIBDF-MPRBLYSKSA-N alpha-D-Gal-(1->3)-beta-D-Gal-(1->4)-D-GlcNAc Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC(=O)C)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 NNISLDGFPWIBDF-MPRBLYSKSA-N 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- 229940125645 monoclonal antibody drug Drugs 0.000 description 3
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 229940125644 antibody drug Drugs 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 125000004177 diethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 2
- 230000036632 reaction speed Effects 0.000 description 2
- 229940126622 therapeutic monoclonal antibody Drugs 0.000 description 2
- 238000002689 xenotransplantation Methods 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- WLHCBQAPPJAULW-UHFFFAOYSA-N 4-methylbenzenethiol Chemical compound CC1=CC=C(S)C=C1 WLHCBQAPPJAULW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241001646719 Escherichia coli O157:H7 Species 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 108010079723 Shiga Toxin Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- MWKXKDBZZAVWKS-UHFFFAOYSA-N diazonio-[1-hydroxy-2-[2-(2-hydroxyethoxy)ethoxy]ethyl]azanide Chemical compound OCCOCCOCC(O)N=[N+]=[N-] MWKXKDBZZAVWKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L magnesium chloride Substances [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000011242 molecular targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 1
- QRUBYZBWAOOHSV-UHFFFAOYSA-M silver trifluoromethanesulfonate Chemical compound [Ag+].[O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F QRUBYZBWAOOHSV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/18—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a glycosyl transferase, e.g. alpha-, beta- or gamma-cyclodextrins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/24—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of an isomerase, e.g. fructose
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
本发明提出了一种α‑半乳糖抗原活性前体及其合成方法和应用。本发明的合成方法包括以下步骤：在化合物I中加入尿苷二磷酸葡萄糖、可溶性镁盐和Tris‑HCl缓冲液，配制成水溶液；在水溶液中添加UDP‑葡萄糖‑4‑差向异构酶和α‑1,3‑半乳糖基转移酶，反应，得初产物；在初产物中添加β‑半乳糖苷酶，反应，得化合物II；将化合物II加氢反应，得化合物III；化合物III与方型酸二乙酯在室温下搅拌反应，浓缩，纯化，得α‑半乳糖抗原活性前体。本发明在糖基转移酶的作用下使糖链延长，通过化学反应转化为活性前体；该合成方法效率高，工艺流程短，操作简单，分离方便，产率高，易于实现产业化，可用于志贺样毒素检测试剂盒。
Description
技术领域
本发明涉及糖类物质合成方法的技术领域，特别是指一种α-半乳糖抗原活性前体及其合成方法和应用。
背景技术
单克隆抗体药物在生物制药行业占据重要的地位，在全球市场中，抗体药物正成为国际制药业争夺的焦点。在这类抗体药物中，利妥昔单抗和曲妥珠单抗为代表的治疗性单抗药物的开发和应用成为肿瘤分子靶向治疗领域最为成功的代表。这类单抗药物以肿瘤靶向抗原作为分子靶标，通过与抗原结合，介导补体依赖的细胞毒性作用，抗体依赖的细胞毒性等多种机制杀伤癌细胞。在单抗药物杀伤癌细胞的过程中，选择合适的靶向抗原是成功设计和开发肿瘤治疗性单抗的前提和关键。
α-半乳糖抗原活性前体(英文简称α-gal)是广泛存在于猪、牛、鼠等非灵长类哺乳动物体内的一类碳水化合物表位，然而，人体α-1,3半乳糖基转移酶 (α-1,3Galactosyltransferase，α-1,3GT)基因功能失活而不表达α-半乳糖基 (α-galactosyl，α-gal)表位，但是，天然存在着大量抗α-gal抗体；异种器官移植研究结果提示，在人肿瘤细胞上重新表达异种移植抗原α-gal，可能诱发类似于宿主抗移植物超急性排斥反应的抗肿瘤效应。
志贺样毒素又称为VT毒素(vero toxin，VT)，O157:H7大肠埃希菌产生志贺样毒素。1982年发现以来，O157:H7大肠埃希菌感染的发病率在发达国家呈上升趋势。1996年5月至8月间，在日本发生了一次世界上最大的暴发流行， 10 000余人感染，近10人死亡，受到了全世界的关注。而α-半乳糖抗原活性前体对志贺样毒素具有抑制作用，有望作为先导分子发展成为高灵敏性的诊断试剂，用以早期诊断志贺毒素产生菌感染。
目前，现有技术中α-半乳糖抗原活性前体大多采用纯化学合成的方式来制备，具体地，先将寡糖链用化学合成的方式制备出来，然后，通过化学偶连法将保护的寡糖分子和连接分子进行偶连，最后，再将连接分子的末端转化为活化基团。这种化学方法合成α-半乳糖抗原活性前体的过程中需要涉及繁琐官能团的保护以及脱官能团保护的操作，工艺路线长，分离困难，产率低，不利于实现工业化生产。
发明内容
本发明提出一种α-半乳糖抗原活性前体及其合成方法和应用，旨在解决了现有技术中在化学方法合成α-半乳糖抗原活性前体的过程中存在繁琐的官能团保护和脱官能团操作而导致其工艺路线长、分离困难和产率低的问题。
为了解决上述技术问题，本发明的技术方案是这样实现的：
在一个方面，本发明的一种α-半乳糖抗原活性前体的合成方法，包括以下步骤：
1)取结构式为式I的化合物I，加入尿苷二磷酸葡萄糖、可溶性镁和Tris-HCl 缓冲液，配制成水溶液；尿苷二磷酸葡萄糖与化合物I的摩尔比为1.3-3.0:1，可溶性镁与化合物I的摩尔比为10-30:1，Tris-HCl缓冲液与化合物I的摩尔比为 20-40:1，Tris-HCl缓冲液的pH值为5-9；
R为羟基、氨基、醋酰胺基、三氟乙酰氨基，n为自然数，取值为1-10；
2)在所述水溶液中，添加UDP-葡萄糖-4-差向异构酶和α-1,3-半乳糖基转移酶，UDP-葡萄糖-4-差向异构酶的添加量为0.3-3.0％，α-1,3-半乳糖基转移酶的添加量为0.2-2.0％，在15-40℃下，反应5-100h，得初产物；
3)将所述初产物的pH值调节至6.5-9.0，添加β-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷酶的添加量为0.5-5.0％，在20-40℃下，反应1-24h，纯化，得结构式为式II的化合物II；
4)取所述化合物II，溶解于有机溶剂中，添加催化剂，并在氢气条件下，室温反应20-30h，过滤，浓缩，得化合物III，结构式如式III的化合物III；
5)取所述化合物III，溶解于有机溶剂中，得溶液A，采用有机碱，使溶液 A的pH值调节至7-9，将型酸二乙酯添加至溶液A中，并在室温下搅拌反应10-20h，浓缩，纯化，得α-半乳糖抗原活性前体，α-半乳糖抗原活性前体的结构式如式IV；
本发明的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法中，首先，在α-1,3-半乳糖基转移酶的催化作用下，将糖链延长；其中，尿苷二磷酸葡萄糖(UDP-glucose)在 UDP-葡萄糖-4-差向异构酶(GalE)的作用下差向异构化为尿苷二磷酸半乳糖 (UDP-galactose)，也可以直接使用尿苷二磷酸半乳糖(UDP-galactose)；然后，通过化学反应方法与方型酸二乙酯反应转化为活性前体。本发明通过酶法和化学法的有机结合，集成了化学法的结构普适性和酶法的高效专一性，可以高效的合成α-半乳糖抗原活性前体及其衍生物，该合成方法具有很强的普适性，这种合成方法工艺流程短，操作简单，分离方便，产率高，易于实现产业化；该抗原活性前体对志贺样毒素具有抑制作用，可用于志贺样毒素检测试剂盒。
作为一种优选的实施方案，所述步骤3)中，纯化之前，还需要在反应液中加入与反应液等体积的无水乙醇，孵育20-60min，无水乙醇的温度为2-6℃，孵育的温度为2-6℃。本发明在酶法延长糖链的过程中，采用β-半乳糖苷酶(LacZ) 将未反应的二糖水解除掉，以提高糖的纯度。
作为一种优选的实施方案，所述步骤4)中，有机溶剂为甲醇，催化剂为钯碳，钯碳中钯的质量百分含量为10％，钯碳与化合物II的质量比为0.01-0.1:1。利用钯碳催化剂对三糖化合物的末端进行加氢，这种方法操作方便，易于实现产业化。
作为一种优选的实施方案，所述步骤5)中，溶液A所用的有机溶剂为水和乙醇的混合液，水和乙醇的体积比为2:1；所述有机碱为二乙胺、三乙胺、季胺、苯胺、苄胺中的任意一种。本发明中化合物III与方型酸二乙酯均在溶液中进行反应，反应易于控制，还提高了反应速度。
作为一种优选的实施方案，所述化合物I的制备方法为：
S1：以结构式如式V的化合物V为原料，在羧酸酐和羧酸钠的作用下，于 135-140℃下，回流反应4-8h，使化合物V中羟基被保护，得结构式如式VI的化合物VI；
S2：取步骤S1所得的化合物VI，溶解于有机溶剂中，添加对甲苯硫酚，在催化剂的作用下，于室温下，反应2-4h，得结构式如式VII的化合物VII；
S3：取步骤S2所得的化合物VII，溶解于有机溶剂中，添加多缩乙二醇叠氮，在催化剂的作用下，于室温下，偶联反应0.5-1.5h，得结构式如式VIII的化合物VIII；
S4：取步骤S3所得的化合物VIII，溶解于有机溶剂中，添加烷基醇钠，调节pH值为9-10，于室温下进行取代反应，反应时间为10-20h，得化合物I。
本发明的化合物I采用化学法合成，充分发挥了化学的结构普适性，进一步提高了α-半乳糖抗原活性前体及其衍生物的普适性。
作为一种优选的实施方案，所述步骤S1中，羧酸酐为醋酸酐，羧酸钠为醋酸钠。在二糖的羟基保护过程中，以醋酸酐为保护，在醋酸钠的作用下，使反应充分进行，不会带来额外杂质，提高了产品的纯度和收率。
作为一种优选的实施方案，所述步骤S2中，所用的有机溶剂为二氯甲烷，所用的催化剂为三氟化硼乙醚。本发明中在二糖活性基团的取代过程中，采用二氯甲烷为有机溶剂，采用三氟化硼乙醚为催化剂，反应速度快，效率高。
作为一种优选的实施方案，所述步骤S3中，所用的有机溶剂为二氯甲烷，所用的催化剂为三氟甲磺酸银和四丁基碘化铵，三氟甲磺酸银和四丁基碘化铵的摩尔比为1:20-30；优选地，所述步骤S4中，所用的有机溶剂为甲醇，所用的烷基醇钠为甲醇钠。本发明在二糖与连接臂的偶联反应过程中，采用二氯甲烷为有机溶剂，采用三氟甲磺酸银和四丁基碘化铵为催化剂，使连接臂分子准确有效地连接在二糖的活性取代基团上；同时，在化合物VIII的脱保护过程中，在甲醇钠的保护作用下，使甲醇中的羟基与化合物VIII上的钠离子进行取代反应，从而得到化合物I。
在另一个方面，本发明的一种α-半乳糖抗原活性前体，所述α-半乳糖抗原活性前体是根据上面任意一项所述的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法制备而成的。本发明的α-半乳糖抗原活性前体具有很强的普适性，合成工艺流程短，操作简单，分离方便，产率高，易于实现产业化。
在再一个方面，本发明的一种α-半乳糖抗原活性前体的应用，根据上面任意一项所述的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法制备而成的α-半乳糖抗原活性前体用于志贺样毒素检测试剂盒。该抗原活性前体对志贺样毒素具有抑制作用，可用于志贺样毒素检测试剂盒。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法中，首先，在α-1,3-半乳糖基转移酶的催化作用下，将糖链延长；然后，通过化学反应方法与方型酸二乙酯反应转化为活性前体；本发明通过酶法和化学法的有机结合，集成了化学法的结构普适性和酶法的高效专一性，可以高效的合成α-半乳糖抗原活性前体及其衍生物，该合成方法具有很强的普适性，这种合成方法工艺流程短，操作简单，分离方便，产率高，易于实现产业化；该抗原活性前体对志贺样毒素具有抑制作用，可用于志贺样毒素检测试剂盒。
附图说明
图1为本发明所得α-半乳糖抗原活性前体的1H-NMR图；
图2为本发明所得α-半乳糖抗原活性前体的13C-NMR图；
图3为本发明所得α-半乳糖抗原活性前体的质谱图。
具体实施方式
下面将结合本发明的具体实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明的一种α-半乳糖抗原活性前体的合成方法，包括以下步骤：
1)取结构式为式I的化合物I，加入尿苷二磷酸葡萄糖、可溶性镁和Tris-HCl 缓冲液，配制成水溶液；尿苷二磷酸葡萄糖与化合物I的摩尔比为1.3-3.0:1，可溶性镁与化合物I的摩尔比为10-30:1，Tris-HCl缓冲液与化合物I的摩尔比为 20-40:1，Tris-HCl缓冲液的pH值为5-9；
R为羟基、氨基、醋酰胺基、三氟乙酰氨基，n为自然数，取值为1-10；
2)在所述水溶液中，添加UDP-葡萄糖-4-差向异构酶和α-1,3-半乳糖基转移酶，UDP-葡萄糖-4-差向异构酶的添加量为0.3-3.0％，α-1,3-半乳糖基转移酶的添加量为0.2-2.0％，在15-40℃下，反应5-100h，得初产物；
3)将所述初产物的pH值调节至6.5-9.0，添加β-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷酶的添加量为0.5-5.0％，在20-40℃下，反应1-24h，纯化，得结构式为式II的化合物II；
4)取所述化合物II，溶解于有机溶剂中，添加催化剂，并在氢气条件下，室温反应20-30h，过滤，浓缩，得化合物III，结构式如式III的化合物III；
5)取所述化合物III，溶解于有机溶剂中，得溶液A，采用有机碱，使溶液 A的pH值调节至7-9，将型酸二乙酯添加至溶液A中，并在室温下搅拌反应 10-20h，浓缩，纯化，得α-半乳糖抗原活性前体，α-半乳糖抗原活性前体的结构式如式IV；
优选地，所述步骤3)中，纯化之前，还需要在反应液中加入与反应液等体积的无水乙醇，孵育20-60min，无水乙醇的温度为2-6℃，孵育的温度为2-6℃。
进一步地，所述步骤4)中，有机溶剂为甲醇，催化剂为钯碳，钯碳中钯的质量百分含量为10％，钯碳与化合物II的质量比为0.01-0.1:1。
具体地，所述步骤5)中，溶液A所用的有机溶剂为水和乙醇的混合液，水和乙醇的体积比为2:1；所述有机碱为二乙胺、三乙胺、季胺、苯胺、苄胺中的任意一种。
再次优选地，所述化合物I的制备方法为：
S1：以结构式如式V的化合物V为原料，在羧酸酐和羧酸钠的作用下，于 135-140℃下，回流反应4-8h，使化合物V中羟基被保护，得结构式如式VI的化合物VI；
S2：取步骤S1所得的化合物VI，溶解于有机溶剂中，添加对甲苯硫酚，在催化剂的作用下，于室温下，反应2-4h，得结构式如式VII的化合物VII；
S3：取步骤S2所得的化合物VII，溶解于有机溶剂中，添加多缩乙二醇叠氮，在催化剂的作用下，于室温下，偶联反应0.5-1.5h，得结构式如式VIII的化合物VIII；
S4：取步骤S3所得的化合物VIII，溶解于有机溶剂中，添加烷基醇钠，调节pH值为9-10，于室温下进行取代反应，反应时间为10-20h，得化合物I。
优选地，所述步骤S1中，羧酸酐为醋酸酐，羧酸钠为醋酸钠。
优选地，所述步骤S2中，所用的有机溶剂为二氯甲烷，所用的催化剂为三氟化硼乙醚。
优选地，所述步骤S3中，所用的有机溶剂为二氯甲烷，所用的催化剂为三氟甲磺酸银和四丁基碘化铵，三氟甲磺酸银和四丁基碘化铵的摩尔比为1:20-30；优选地，所述步骤S4中，所用的有机溶剂为甲醇，所用的烷基醇钠为甲醇钠。
本发明的一种α-半乳糖抗原活性前体，所述α-半乳糖抗原活性前体是根据上面任意一项所述的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法制备而成的。
本发明的一种α-半乳糖抗原活性前体的应用，根据上面任意一项所述的α- 半乳糖抗原活性前体的合成方法制备而成的α-半乳糖抗原活性前体用于志贺样毒素检测试剂盒。
实施例1：Step.1化合物SM-C的合成
向1000mL圆底烧瓶中，加入化合物SM-A(100g，292.1mmol)、醋酐(575mL) 和醋酸钠(96g)，在139℃反应条件下，回流搅拌6h；TLC检测PE:EA＝1:1， Rf＝0.4，反应完全后，减压浓缩；所得固体复溶于600mL二氯甲烷中，依次采用饱和食盐水、饱和碳酸氢钠溶液和水洗涤，之后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得淡黄色固体；将淡黄色固体采用热乙醇重结晶，得到全β构型的化合物SM-C(134.8g，68.0％)。
实施例2：Step.2化合物SM-D的合成
将三氟化硼乙醚(37.2mL)滴加到化合物SM-C(100.0g，147.3mmol)、二氯甲烷(1.0L)和对甲苯硫酚(22.0g，176.8mmol)的混合溶液中，控制滴加温度为0℃；滴加完毕后，在25℃下，搅拌3h，TLC检测PE:EA＝1:1，Rf＝0.5；反应混合体系依次采用饱和食盐水、饱和碳酸氢钠溶液和水洗涤，之后有机相采用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得粗品；粗品经过硅胶柱层析纯化，PE:EA＝ 9:1-1:1，得白色固体粉末化合物SM-D(65.0g，59.4％)。
实施例3：Step.3化合物SM-E的合成
将三氟甲磺酸银(106.7mg，0.41mmol)和四丁基碘化铵(1.86g，8.28mmol) 加入到化合物SM-D(3.0g，4.14mmol)、二氯甲烷(10.8mL)和三乙二醇叠氮 (0.73g，4.14mmol)的混合溶液中，控制加入温度为25℃；滴加完毕后，缓慢升温至25℃，并搅拌1h，TLC检测PE:EA＝1:2，Rf＝0.3；反应混合体系依次采用饱和食盐水、饱和碳酸氢钠溶液和水洗涤，之后有机相采用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得粗品；粗品经硅胶柱层析纯化PE:EA＝4:1-2:1，得白色固体粉末化合物SM-E(1.1g，34.0％)。
实施例4：Step.4化合物SM-F的合成
将甲醇钠加入到化合物SM-E(1.1g，1.4mmol)和甲醇(16mL)的混合溶液中，控制pH值为9.5；升温至25℃，并搅拌15h，TLC检测PE:EA＝1:2， Rf＝0；反应混合体系采用阳离子交换树脂调节pH值为7，过滤浓缩，得化合物 SM-F(0.69g，95％)。
实施例5：Step.5化合物SM-G的合成
将二糖化合物I(1.1g，1.4mmol)、1.5当量尿苷二磷酸葡萄糖(UDP-glucose)、20mmol MgCl2以及50mmol且pH值为7.5的Tris-HCl缓冲液，配制水溶液；然后，将反应体系的pH值调节至7.0，再添加UDP-葡萄糖-4-差向异构酶(GalE)、α-1,3-半乳糖基转移酶(α-1,3GalT)，反应温度为25℃，反应时间为48h；之后将反应体系的pH值调节至7.5，向其中添加β-半乳糖苷酶(LacZ)，反应温度为37℃，反应时间为4h；待反应完成后，向反应体系中加入与反应液等体积的 4℃无水乙醇，并在4℃下孵育40min；待反应完成后，纯化，即化合物SM-G (0.78g，85％)。
实施例6：Step.6化合物SM-H的合成
将10％钯碳Pd/C(160mg)加入到化合物SM-G(200mg，0.3mmol)和甲醇(30mL)的溶液中，并在氢气条件下，室温搅拌24h，TLC检测DCM:MeOH:H2O ＝10:10:1，Rf＝0；过滤浓缩，得化合物SM-H(170mg，85％)。
实施例7：Step.7化合物SM-I的合成
将方型酸二乙酯FS(69.0mg，0.4mmol)和三乙胺(26.2mg，0.25mmol) 加入到化合物SM-H(170mg，0.27mmol)和水/乙醇(12mL/6mL)的混合液中，加入温度控制在0℃，加完后，在室温条件下搅拌16h；TLC检测DCM:MeOH:H2O ＝10:10:1，Rf＝0.5，减压浓缩，得粗品；粗品经硅胶柱层析纯化，DCM:MeOH:H2O ＝10:1:0.1-10:10:0.1，得白色固体粉末，得α-半乳糖抗原活性前体(152mg，74％)，即化合物SM-I。
本发明的合成方法所得的α-半乳糖抗原活性前体产率为74％。由附图1、附图2、附图3可以看出，产物只有α构型。本发明中α-半乳糖抗原活性前体的合成路线如下：
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法中，首先，在α-1,3-半乳糖基转移酶的催化作用下，将糖链延长；然后，通过化学反应方法与方型酸二乙酯反应转化为活性前体；本发明通过酶法和化学法的有机结合，集成了化学法的结构普适性和酶法的高效专一性，可以高效的合成α-半乳糖抗原活性前体及其衍生物，该合成方法具有很强的普适性，这种合成方法工艺流程短，操作简单，分离方便，产率高，易于实现产业化；该抗原活性前体对志贺样毒素具有抑制作用，可用于志贺样毒素检测试剂盒。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种α-半乳糖抗原活性前体的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)取结构式为式I的化合物I，加入尿苷二磷酸葡萄糖、可溶性镁盐和Tris-HCl缓冲液，配制成水溶液；尿苷二磷酸葡萄糖与化合物I的摩尔比为1.3-3.0:1，可溶性镁盐与化合物I的摩尔比为10-30:1，Tris-HCl缓冲液与化合物I的摩尔比为20-40:1，Tris-HCl缓冲液的pH值为5-9；
R为羟基、氨基、醋酰胺基、三氟乙酰氨基，n为自然数，取值为1-10；
2)在所述水溶液中，添加UDP-葡萄糖-4-差向异构酶和α-1,3-半乳糖基转移酶，UDP-葡萄糖-4-差向异构酶的添加量为0.3-3.0％，α-1,3-半乳糖基转移酶的添加量为0.2-2.0％，在15-40℃下，反应5-100h，得初产物；
3)将所述初产物的pH值调节至6.5-9.0，添加β-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷酶的添加量为0.5-5.0％，在20-40℃下，反应1-24h，纯化，得结构式为式II的化合物II；
4)取所述化合物II，溶解于有机溶剂中，添加催化剂，并在氢气条件下，室温反应20-30h，过滤，浓缩，得化合物III，结构式如式III的化合物III；
5)取所述化合物III，溶解于有机溶剂中，得溶液A，采用有机碱，使溶液A的pH值调节至7-9，将方型酸二乙酯添加至溶液A中，并在室温下搅拌反应10-20h，浓缩，纯化，得α-半乳糖抗原活性前体，α-半乳糖抗原活性前体的结构式如式IV；
2.根据权利要求1所述的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法，其特征在于：
所述步骤3)中，纯化之前，还需要在反应液中加入与反应液等体积的无水乙醇，孵育20-60min，无水乙醇的温度为2-6℃，孵育的温度为2-6℃。
3.根据权利要求1所述的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法，其特征在于：
所述步骤4)中，有机溶剂为甲醇，催化剂为钯碳，钯碳中钯的质量百分含量为10％，钯碳与化合物II的质量比为0.01-0.1:1。
4.根据权利要求1所述的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法，其特征在于：
所述步骤5)中，溶液A所用的有机溶剂为水和乙醇的混合液，水和乙醇的体积比为2:1；所述有机碱为二乙胺、三乙胺、季胺、苯胺、苄胺中的任意一种。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法，其特征在于，所述化合物I的制备方法为：
S1：以结构式如式V的化合物V为原料，在羧酸酐和羧酸钠的作用下，于135-140℃下，回流反应4-8h，使化合物V中羟基被保护，得结构式如式VI的化合物VI；
S2：取步骤S1所得的化合物VI，溶解于有机溶剂中，添加对甲苯硫酚，在催化剂的作用下，于室温下，反应2-4h，得结构式如式VII的化合物VII；
S3：取步骤S2所得的化合物VII，溶解于有机溶剂中，添加多缩乙二醇叠氮，在催化剂的作用下，于室温下，偶联反应0.5-1.5h，得结构式如式VIII的化合物VIII；
S4：取步骤S3所得的化合物VIII，溶解于有机溶剂中，添加烷基醇钠，调节pH值为9-10，于室温下进行取代反应，反应时间为10-20h，得化合物I。
6.根据权利要求5所述的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法，其特征在于：
所述步骤S1中，羧酸酐为醋酸酐，羧酸钠为醋酸钠。
7.根据权利要求5所述的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法，其特征在于：
所述步骤S2中，所用的有机溶剂为二氯甲烷，所用的催化剂为三氟化硼乙醚。
8.根据权利要求5所述的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法，其特征在于：
所述步骤S3中，所用的有机溶剂为二氯甲烷，所用的催化剂为三氟甲磺酸银和四丁基碘化铵，三氟甲磺酸银和四丁基碘化铵的摩尔比为1:20-30。
9.根据权利要求5所述的α-半乳糖抗原活性前体的合成方法，其特征在于：
所述步骤S4中，所用的有机溶剂为甲醇，所用的烷基醇钠为甲醇钠。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010408607.9A CN111593080B (zh) | 2020-05-14 | 2020-05-14 | 一种α-半乳糖抗原活性前体及其合成方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010408607.9A CN111593080B (zh) | 2020-05-14 | 2020-05-14 | 一种α-半乳糖抗原活性前体及其合成方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111593080A CN111593080A (zh) | 2020-08-28 |
| CN111593080B true CN111593080B (zh) | 2022-06-10 |
Family
ID=72188978
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010408607.9A Active CN111593080B (zh) | 2020-05-14 | 2020-05-14 | 一种α-半乳糖抗原活性前体及其合成方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111593080B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113087807B (zh) * | 2021-03-30 | 2022-06-17 | 江南大学 | 用于检测糖类抗原的基于志贺毒素b亚基重组蛋白的探针、制备方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1993018784A1 (en) * | 1992-03-26 | 1993-09-30 | Microcarb, Inc. | Monospecific polyclonal antibodies to shiga-like toxins |
| US5962423A (en) * | 1998-08-07 | 1999-10-05 | The Governors Of The University Of Alberta | Treatment of bacterial dysentery |
| CN102015772A (zh) * | 2008-05-09 | 2011-04-13 | 瑞科非玛Ab公司 | 用于抑制志贺毒素和志贺样毒素的组合物和方法 |
| CN105611924A (zh) * | 2013-07-25 | 2016-05-25 | 泰莱托恩基金会 | Fapp2的抑制剂及其用途 |
| CN105886571A (zh) * | 2016-04-22 | 2016-08-24 | 山东大学 | 人血型抗原p1五糖的合成方法 |
| CN108251474A (zh) * | 2018-01-15 | 2018-07-06 | 山东大学 | Abh人血型抗原的合成方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20020132320A1 (en) * | 2001-01-10 | 2002-09-19 | Wang Peng George | Glycoconjugate synthesis using a pathway-engineered organism |
-
2020
- 2020-05-14 CN CN202010408607.9A patent/CN111593080B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1993018784A1 (en) * | 1992-03-26 | 1993-09-30 | Microcarb, Inc. | Monospecific polyclonal antibodies to shiga-like toxins |
| US5962423A (en) * | 1998-08-07 | 1999-10-05 | The Governors Of The University Of Alberta | Treatment of bacterial dysentery |
| CN102015772A (zh) * | 2008-05-09 | 2011-04-13 | 瑞科非玛Ab公司 | 用于抑制志贺毒素和志贺样毒素的组合物和方法 |
| CN105611924A (zh) * | 2013-07-25 | 2016-05-25 | 泰莱托恩基金会 | Fapp2的抑制剂及其用途 |
| CN105886571A (zh) * | 2016-04-22 | 2016-08-24 | 山东大学 | 人血型抗原p1五糖的合成方法 |
| CN108251474A (zh) * | 2018-01-15 | 2018-07-06 | 山东大学 | Abh人血型抗原的合成方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Alteration of the carbohydrate binding specificity of verotoxins from Galα1-4Gal to GalNAcβ1-3Gala1-4Gal and vice versa by site-directed mutagenesis of the binding subunit;G. J. TYRRELL 等;《Proc. Natl. Acad. Sci.》;19920131;第89卷;第524-528页 * |
| Oligosaccharides and Discordant;DAVID K. C. COOPER 等;《Immunological Reviews 》;19941231;第141卷;第31-58页 * |
| The α-gal epitope (Galα1-3Galβ1-4GlcNAc-R) in xenotransplantation;Uri Galili;《Biochimie》;20010731;第83卷(第7期);第557-563页 * |
| 异种器官移植中的GaIα(1，3)Gal抗原表位的研究进展;邢力 等;《细胞生物学杂志》;20011231;第23卷(第4期);第191-195页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111593080A (zh) | 2020-08-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2189356A1 (en) | Process for preparation of glycosides of tumor-associated carbohydrate antigens | |
| US5874411A (en) | Oligosaccharide glycosides having mammalian immunosuppresive and tolerogenic properties | |
| CN111593080B (zh) | 一种α-半乳糖抗原活性前体及其合成方法和应用 | |
| US6867194B2 (en) | Enzyme activated nitric oxide donors | |
| EP0977763A1 (en) | Protected aminosugars | |
| JP2022511591A (ja) | 緑膿菌ｏ１１血清型ｏ抗原オリゴ糖の化学合成方法 | |
| NZ235578A (en) | 1,4-dideoxy-1,4-imino-d-arabinitol derivatives and their use as #a#-glucosidase inhibitors | |
| JPH05247078A (ja) | 糖化合物、シアル酸含有糖鎖類生合成阻害剤、その製造方法、並びに新規な中間体 | |
| EP0199920A1 (en) | New antitumor anthracyclines | |
| CA2206881C (en) | Acylating agent and a method of producing thereof | |
| Dekany et al. | A novel amino protecting group: DTPM | |
| JPH0631298B2 (ja) | 新規アンスラサイクリン誘導体，抗腫瘍剤，及び製造法 | |
| JPH0660189B2 (ja) | ２，６−ジデオキシ−２−フルオロ−ｌ−タロピラノ−ス又はその誘導体とその製造法 | |
| US4447600A (en) | N-Acetylneuraminic acid derivatives and the preparation thereof | |
| US5696246A (en) | Process for the specific synthesis of β-glycosidically linked N-acetylpyranoside derivatives | |
| Ogawa et al. | Synthesis of Ether‐and Imino‐Linked Octyl N‐Acetyl‐5a′‐carba‐β‐lactosaminides and‐isolactosaminides: Acceptor Substrates for α‐(1→ 3/4)‐Fucosyltransferase, and Enzymatic Synthesis of 5a′‐Carbatrisaccharides | |
| JPH06510746A (ja) | 免疫抑制性および寛容原性修飾ルイスｘおよびルイスａ化合物 | |
| US6174867B1 (en) | 1-galactose derivatives having a carbon- or nitrogen-containing aglycon linkage | |
| Li et al. | Synthesis of a spacer-armed disulfated tetrasaccharide of SB1a, a carbohydrate hapten associated with human hepatocellular carcinoma | |
| CN112209976B (zh) | 一种地西他滨中间体化合物ⅴ | |
| KR920000620B1 (ko) | 신규 안트라사이클린 글리코사이드 유도체 | |
| AU1213999A (en) | Quinolinone glycoside, production process, and anti-allergic agent | |
| WO2016097989A1 (en) | Process for the preparation of gemcitabine hydrochloride | |
| Sahoo et al. | Synthesis of 1, 3-divalent glycoconjugates with diverse structures and their functionalization | |
| JP2843695B2 (ja) | １０，１１，１２，１３−テトラヒドロ−デスマイコシン誘導体、その製造法及びその医薬としての用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: one kind a- Galactose antigen active precursor and its synthesis method and application Granted publication date: 20220610 Pledgee: Guanggu Branch of Wuhan Rural Commercial Bank Co.,Ltd. Pledgor: Wuhan Tangzhi Pharmaceutical Co.,Ltd. Registration number: Y2024980008902 |