CN111588859B - 一种冻干保护剂及其应用和冻干苗及其制备方法 - Google Patents

一种冻干保护剂及其应用和冻干苗及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111588859B
CN111588859B CN202010487563.3A CN202010487563A CN111588859B CN 111588859 B CN111588859 B CN 111588859B CN 202010487563 A CN202010487563 A CN 202010487563A CN 111588859 B CN111588859 B CN 111588859B
Authority
CN
China
Prior art keywords
freeze
treatment
bcg
protective agent
drying
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010487563.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111588859A (zh
Inventor
马昭明
任昭源
陈山岭
严秋萍
吴盈盈
李泳宏
陈政钦
杨远超
王明珠
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chengdu Keen Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Chengdu Keen Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chengdu Keen Biotechnology Co ltd filed Critical Chengdu Keen Biotechnology Co ltd
Priority to CN202010487563.3A priority Critical patent/CN111588859B/zh
Publication of CN111588859A publication Critical patent/CN111588859A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111588859B publication Critical patent/CN111588859B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/04—Mycobacterium, e.g. Mycobacterium tuberculosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

本发明公开了一种冻干保护剂及其应用和冻干苗及其制备方法，所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐0.5～2.0%、谷氨酸钠1%、KCL1%，或者是蔗糖10%、右旋糖酐1%、海藻糖1~5%、谷氨酸钠1%、KCL1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.3～7.5。该冻干保护剂不含明胶，在制备冻干治疗用卡介苗时使用，可使内毒素含量下降，不易发生过敏反应，并且仍然能保持较高的稳定性和较长的有效期。

Description

一种冻干保护剂及其应用和冻干苗及其制备方法
技术领域
本发明是一种冻干保护剂及其应用和冻干苗及其制备方法，具体涉及一种不含明胶的冻干保护剂及其在治疗用卡介苗中的应用和冻干苗以及制备冻干苗的方法，属于生物制品领域。
背景技术
1970年代中期到1980年代，越来越多的证据显示早期膀胱癌分型之一CIS可以用免疫药物卡介苗（BCG）治疗。BCG是减毒性疫苗，通过导尿管注入到膀胱内（叫做灌注治疗）产生免疫反应治疗肿瘤。多项临床试验结果显示，与单独手术比较，内镜切除CIS后接受BCG治疗可以减少膀胱癌复发风险。随后的试验结果证实，CIS术后接受长期的BCG治疗（叫做维持治疗）可以减少膀胱癌复发风险、延长CIS患者生存时间。
我国使用卡介苗防治膀胱癌术后复发的临床研究很早就开始。目前，国内市面上的治疗用卡介苗为用卡介菌经培养后收集菌体，加入稳定剂分装至安瓿瓶中冻干制成的免疫治疗剂，其中的稳定剂通常含有明胶成分，相关研究表明：明胶或明胶衍生物能直接引起使用者发生过敏等变态反应。为了减轻或避免治疗用卡介苗在使用过程中出现的由明胶引起的不良反应，因此，可以使用明胶替代品或直接生产不含明胶的治疗用卡介苗冻干制品。
国家药典委员会在2007年7月17日至7月19日北京会议纪要中明确要求“作为稳定剂成分的明胶注射到人体后可发生过敏反应，生产企业应进行取代明胶成分的相关研究工作，以进一步提高制品的安全性”。国产明胶内毒素含量偏高，而进口明胶有携带疯牛病病毒的潜在风险，针对这一问题，需研究一系列明胶的替代品来改进传统的配方。
现有专利文献CN101537186A（一种不含明胶的疫苗冻干保护剂，2009.09.23）公开了一种用作疫苗冻干保护剂的组合物，该组合物包括蔗糖、海藻糖、右旋糖酐70、谷氨酸钠、尿素以及精氨酸，并且所述组合物中不含有明胶。可用于提高冻干疫苗的稳定性和安全性。
现有专利文献CN102657870A（一种无明胶及人血蛋白成分的疫苗冻干保护剂，2012.09.12）一种由右旋糖酐40、蔗糖、乳糖、甘露醇、甘氨酸、精氨酸、谷氨酸钠、尿素、199综合培养基等物质构成的保护剂，不含动物源性组分，疫苗的内毒素含量大幅降低，极大地降低了对人体的刺激性及危害性，且赋予了疫苗更好的安全性、稳定性。
现有专利文献CN104117070A（一种含山梨醇成分的水痘疫苗冻干保护剂，2014.10.29）公开了一种含有山梨醇、人血清白蛋白、蔗糖、右旋糖酐、海藻糖、精氨酸、谷氨酸钠和尿素的保护剂，无明胶成分，且去除了动物源性成分，使疫苗内毒素含量明显降低，有效提高了水痘疫苗的稳定性和安全性。
现有专利文献CN104826101A（冻干人用狂犬疫苗及其制备方法，2015.08.12）公开了一种由海藻糖、谷氨酸钠、尿素、L-精氨酸、199培养基等组成的疫苗冻干保护剂，该疫苗冻干保护剂中不含有明胶、人血白蛋白和右旋糖酐。大幅度提高了疫苗的质量和产量，降低了疫苗内杂质的含量，不易发生过敏等反应，极大地提高了疫苗的安全性。
现有专利文献CN105267971A（一种不含明胶和人血白蛋白的疫苗冻干保护剂，2016.01.27）公开了一种以199培养液或PBS缓冲溶液或注射用水为基质液，采用蔗糖、右旋糖酐、山梨醇、谷氨酸钠、L-精氨酸配制而成的保护剂。该保护剂中不含明胶和人血清白蛋白，可以提高疫苗在冻干过程和储存过程中的稳定性，同时还能提高冻干疫苗对人体的安全性，减少了疫苗的不良反应。
由上述现有技术可以知道，在预防性疫苗制品中，由于不含明胶的保护剂能够降低对人体的刺激性，目前已被广泛推广和应用在各类疫苗制品中，但是对菌体的保护效果还有待提高，特别是作为治疗用卡介苗而言，由于是采用活菌生物制剂，因此，加强卡介菌在冻干过程和储存过程中的稳定性以保证临床用药质量尤其重要。因此，本领域中急需一种安全有效的无明胶的治疗用卡介苗冻干保护剂。
发明内容
本发明的目的在于提供一种冻干保护剂及其应用，该冻干保护剂不含明胶，在制备冻干治疗用卡介苗时使用，可使内毒素含量下降，不易发生过敏反应，并且仍然能保持较高的稳定性和较长的有效期。
本发明还提供了一种冻干苗及其制备方法，采用上述冻干保护剂制备得到治疗用卡介苗冻干产品，较同类产品而言具有相同的有效性，且不易发生过敏反应，安全性更高。
本发明通过下述技术方案实现：一种冻干保护剂，所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐0.5～2.0%、谷氨酸钠1%、KCL1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.3～7.5。
所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐1%、谷氨酸钠1%、KCL1%。
所述右旋糖酐为右旋糖酐40。
本发明还提供了一种冻干保护剂，所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐1%、海藻糖1～5%、谷氨酸钠1%、KCL1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.3～7.5。
该冻干保护剂中海藻糖配制浓度可以为：1%、2%、3%、4%或5%。右旋糖酐可以为右旋糖酐40。
本发明还提供了上述冻干保护剂在制备冻干治疗用卡介苗中的应用。
一种制备冻干苗的方法，包括以下步骤：
（1）向治疗用卡介苗菌体中加入权利要求1或4任一项所述冻干保护剂，以制成治疗用卡介苗原液；
（2）向步骤（1）所述治疗用卡介苗原液中加入稀释液，以配制得到治疗用卡介苗半成品；
（3）将步骤（2）所述治疗用卡介苗半成品经冻干处理后制得治疗用卡介苗冻干产品。
所述步骤（2）中，稀释液含有与冻干保护剂相同的成分，且各成分的浓度相同。
所述步骤（2）中，治疗用卡介苗半成品中各成分的终浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐0.5～2.0%、谷氨酸钠1%、KCL1%，或者终浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐1%、海藻糖1~5%、谷氨酸钠1%、KCL1%。
所述步骤（2）中，卡介苗半成品的浓度为120mg/ml。
所述步骤（3）中，所述冻干处理时满足以下条件：
预冻阶段：最低温度≤-40℃，达到最低温度后维持2~3小时；
升华干燥阶段：最终温度-15～ -10℃，达到最终温度的时间为8～14小时，真空压力控制在8～10Pa；
解吸干燥阶段：最终温度34～37℃，真空压力控制在0.5～10Pa，运行15～22小时。
一种冻干苗，采用上述方法制得的治疗用卡介苗冻干产品。
本发明与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：
（1）本发明提供了一种治疗用卡介苗的冻干保护剂，该冻干保护剂采用蔗糖、右旋糖酐、谷氨酸钠、KCL配制而成，或者是蔗糖、右旋糖酐、海藻糖、谷氨酸钠、KCL配制而成，能够合理替代含有明胶的同类保护剂在治疗用卡介苗冻干产品中的应用，不仅能达到同类保护剂相同的有效性，还具有更高的安全性。
（2）本发明涉及的冻干保护剂成分中，由于不含有明胶，不易引发过敏反应，如发热、恶心等，制品的安全性更高，减少了不良反应。
（3）本发明制备得到的治疗用卡介苗冻干产品的质量远高于《中国药典》三部要求的标准，经试验证明，本发明涉及的治疗用卡介苗活菌数的质量均高于《中国药典》三部要求不低于1.0*106CFU/mg的标准；热稳定性试验结果表明活菌率的质量均高于《中国药典》三部要求不低于25%，且不低于2.5*105CFU/mg的标准。
（4）本发明制备得到的治疗用卡介苗冻干产品具有更高的安全性，经试验证明，其水分含量低于2.0%，高于《中国药典》三部要求不高于3.0%的质量标准。
（5）本发明针对治疗用卡介苗的冻干程序，采用特定的冻干曲线，通过预冻、升华干燥以及解吸干燥各阶段中的参数控制，可使得治疗用卡介苗冻干成型好，且冻干成品符合《中国药典》三部要求。
具体实施方式
下面将本发明的发明目的、技术方案和有益效果作进一步详细的说明。
应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对所要求的本发明提供进一步的说明，除非另有说明，本发明使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。本发明所涉及的浓度均为质量浓度。
治疗用卡介苗由于是活菌生物制剂，为保证其临床用药的安全性和质量要求，如何提高治疗用卡介苗产品的稳定性和安全性是本发明的关键。在现有市售的治疗用卡介苗冻干保护剂中，需要使用到明胶，但明胶的使用由于过敏反应而存在安全隐患。我们发现，现有越来越多的疫苗冻干保护剂中会采用其他物质来替代明胶的使用，例如专利文献CN105267971A提到的右旋糖酐70，其与蔗糖、山梨醇、谷氨酸钠、L-精氨酸作为冻干保护剂的成分，被使用在水痘减毒活疫苗或风疹减毒活疫苗的制备过程中，并被证明改进后的冻干保护剂与目前常规使用的含明胶和人血活蛋白保护剂相比，稳定性结果无显著性差异，无过敏反应，提高了疫苗的安全性。但对于治疗用卡介苗而言，目前并未公开任何关于不含明胶的冻干保护剂的配方及其浓度控制，而本发明需要找到的是一种不仅能替代现有含明胶的治疗用卡介苗冻干保护剂，以解决其明胶带来的不良反应外，还需要在此基础上，获得一种更加稳定的，及其除过敏反应外更加安全的一种冻干保护剂。显然，这些技术问题并未在现有专利文献中所涉及。
下面以几个典型实施例来列举说明本发明的具体实施方式，当然，本发明的保护范围并不局限于以下实施例。若未特别指明，实施例中所用试剂均为市售。BCG D2PB302SII甲10株来源于中国食品药品检定研究院。蔗糖、右旋糖酐40、谷氨酸钠、KCL、海藻糖等试剂均为药用级。
实施例1：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗的冻干保护剂。
所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖：10%、右旋糖酐40：0.5%、谷氨酸钠：1%、KCL：1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.33。将该冻干保护剂分装，然后进行高压蒸汽灭菌，灭菌条件为116℃，40分钟。
实施例2：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗的冻干保护剂。
所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖：10%、右旋糖酐40：2.0%、谷氨酸钠：1%、KCL：1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.48。将该冻干保护剂分装，然后进行高压蒸汽灭菌，灭菌条件为116℃，40分钟。
实施例3：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗的冻干保护剂。
所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖：10%、右旋糖酐40：1%、谷氨酸钠：1%、KCL：1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.41。将该冻干保护剂分装，然后进行高压蒸汽灭菌，灭菌条件为116℃，40分钟。
实施例4：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗的冻干保护剂。
所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖：10%、右旋糖酐40：1.2%、谷氨酸钠：1%、KCL：1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.35。将该冻干保护剂分装，然后进行高压蒸汽灭菌，灭菌条件为116℃，40分钟。
实施例5：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗的冻干保护剂。
所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖：10%、右旋糖酐40：0.8%、谷氨酸钠：1%、KCL：1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.43。将该冻干保护剂分装，然后进行高压蒸汽灭菌，灭菌条件为116℃，40分钟。
实施例6：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗冻干产品。
采用以下方法制备得到：
（1）以BCG D2PB302SII甲10株制备卡介菌工作种子，启开卡介菌工作种子批在生产用培养基进行传代培养，培养温度为37~39℃，传代培养结束后，收集菌膜压干，低温研磨，获得卡介菌菌体，将该菌体中加入适量冻干保护剂稀释菌液，制成治疗用卡介苗原液，该冻干保护剂稀释菌液来自于上述实施例1。
（2）测定治疗用卡介苗原液的浓度，将治疗用卡介苗原液按半成品要求的120mg/mL浓度再加入适量的冻干保护剂稀释菌液制成治疗用卡介苗半成品，治疗用卡介苗半成品中各成分的终浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐40 0.5%、谷氨酸钠1%、KCL1%。
（3）将上述治疗用卡介苗半成品在4h内分装入西林瓶中进行冻干处理，即得治疗用卡介苗冻干产品。
冻干处理时对以下参数进行控制：
预冻阶段：温度-55℃，达到最低温度后维持3小时；
升华干燥阶段：最终温度-10℃，达到最终温度的时间为14小时，真空压力控制在8Pa；
解吸干燥阶段：最终温度35℃，真空压力控制在8Pa，运行16小时，极限真空在0.5Pa，运行6小时。
实施例7：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗冻干产品。
采用以下方法制备得到：
（1）以BCG D2PB302SII甲10株制备卡介菌工作种子，启开卡介菌工作种子批在生产用培养基进行传代培养，培养温度为37~39℃，传代培养结束后，收集菌膜压干，低温研磨，获得卡介菌菌体，将该菌体中加入适量冻干保护剂稀释菌液，制成治疗用卡介苗原液，该冻干保护剂稀释菌液来自于上述实施例2。
（2）测定治疗用卡介苗原液的浓度，将治疗用卡介苗原液按半成品要求的120mg/mL浓度再加入适量的冻干保护剂稀释菌液制成治疗用卡介苗半成品，治疗用卡介苗半成品中各成分的终浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐40 2.0%、谷氨酸钠1%、KCL1%。
（3）将上述治疗用卡介苗半成品在4h内分装入西林瓶中进行冻干处理，即得治疗用卡介苗冻干产品。
冻干处理时对以下参数进行控制：
预冻阶段：温度-55℃，达到最低温度后维持3小时；
升华干燥阶段：最终温度-10℃，达到最终温度的时间为14小时，真空压力控制在8Pa；
解吸干燥阶段：最终温度35℃，真空压力控制在8Pa，运行16小时，极限真空在0.5Pa，运行6小时。
实施例8：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗冻干产品。
采用以下方法制备得到：
（1）以BCG D2PB302SII甲10株制备卡介菌工作种子，启开卡介菌工作种子批在生产用培养基进行传代培养，培养温度为37~39℃，传代培养结束后，收集菌膜压干，低温研磨，获得卡介菌菌体，将该菌体中加入适量冻干保护剂稀释菌液，制成治疗用卡介苗原液，该冻干保护剂稀释菌液来自于上述实施例3。
（2）测定治疗用卡介苗原液的浓度，将治疗用卡介苗原液按半成品要求的120mg/mL浓度再加入适量的冻干保护剂稀释菌液制成治疗用卡介苗半成品，治疗用卡介苗半成品中各成分的终浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐40 1%、谷氨酸钠1%、KCL1%。
（3）将上述治疗用卡介苗半成品在4h内分装入西林瓶中进行冻干处理，即得治疗用卡介苗冻干产品。
冻干处理时对以下参数进行控制：
预冻阶段：温度-55℃，达到最低温度后维持3小时；
升华干燥阶段：最终温度-10℃，达到最终温度的时间为14小时，真空压力控制在8Pa；
解吸干燥阶段：最终温度35℃，真空压力控制在8Pa，运行16小时，极限真空在0.5Pa，运行6小时。
实施例9：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗冻干产品。
采用以下方法制备得到：
（1）以BCG D2PB302SII甲10株制备卡介菌工作种子，启开卡介菌工作种子批在生产用培养基进行传代培养，培养温度为37~39℃，传代培养结束后，收集菌膜压干，低温研磨，获得卡介菌菌体，将该菌体中加入适量冻干保护剂稀释菌液，制成治疗用卡介苗原液，该冻干保护剂稀释菌液来自于上述实施例4。
（2）测定治疗用卡介苗原液的浓度，将治疗用卡介苗原液按半成品要求的120mg/mL浓度再加入适量的冻干保护剂稀释菌液制成治疗用卡介苗半成品，治疗用卡介苗半成品中各成分的终浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐40 1.2%、谷氨酸钠1%、KCL1%。
（3）将上述治疗用卡介苗半成品在4h内分装入西林瓶中进行冻干处理，即得治疗用卡介苗冻干产品。
冻干处理时对以下参数进行控制：
预冻阶段：温度-55℃，达到最低温度后维持3小时；
升华干燥阶段：最终温度-10℃，达到最终温度的时间为14小时，真空压力控制在8Pa；
解吸干燥阶段：最终温度35℃，真空压力控制在8Pa，运行16小时，极限真空在0.5Pa，运行6小时。
实施例10：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗冻干产品。
采用以下方法制备得到：
（1）以BCG D2PB302SII甲10株制备卡介菌工作种子，启开卡介菌工作种子批在生产用培养基进行传代培养，培养温度为37~39℃，传代培养结束后，收集菌膜压干，低温研磨，获得卡介菌菌体，将该菌体中加入适量冻干保护剂稀释菌液，制成治疗用卡介苗原液，该冻干保护剂稀释菌液来自于上述实施例5。
（2）测定治疗用卡介苗原液的浓度，将治疗用卡介苗原液按半成品要求的120mg/mL浓度再加入适量的冻干保护剂稀释菌液制成治疗用卡介苗半成品，治疗用卡介苗半成品中各成分的终浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐40 0.8%、谷氨酸钠1%、KCL1%。
（3）将上述治疗用卡介苗半成品在4h内分装入西林瓶中进行冻干处理，即得治疗用卡介苗冻干产品。
冻干处理时对以下参数进行控制：
预冻阶段：温度-55℃，达到最低温度后维持3小时；
升华干燥阶段：最终温度-10℃，达到最终温度的时间为14小时，真空压力控制在8Pa；
解吸干燥阶段：最终温度35℃，真空压力控制在8Pa，运行16小时，极限真空在0.5Pa，运行6小时。
将上述实施例1～10所涉及的冻干保护剂制得的治疗用卡介苗冻干品进行毒性和过敏试验，参见下表1所示，其试验结果表明，未添加明胶成分的冻干保护剂，无过敏反应，安全性好。
表1
Figure 1592DEST_PATH_IMAGE001
将上述实施例6～10制得的治疗用卡介苗冻干产品分别于37℃、25℃、4℃放置不同时间，取样进行外观、水分及活菌计数测定，测定方法及标准参见《中华人民共和国药典》三部，测定结果参见下表2。经试验证明，上述实施例6～10制得的治疗用卡介苗冻干产品的质量均高于《中华人民共和国药典》三部要求的标准，稳定性好。
表2
Figure 68905DEST_PATH_IMAGE002
Figure 617698DEST_PATH_IMAGE003
由此证明，本发明在采用特定配比的配方组合（蔗糖、右旋糖酐、谷氨酸钠、KCL）制得冻干保护剂，该冻干保护剂经毒性和安全性测试，无过敏等不良反应，专用于制备治疗用卡介苗的冻干产品，配合特定的冻干曲线，不仅能保证治疗用卡介苗冻干产品的安全性，还能保证其有效性，提高其稳定性，使其质量标准均高于《中华人民共和国药典》三部要求的标准，适宜广泛推广使用。
实施例11：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗的冻干保护剂。
所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖：10%、海藻糖：1%、右旋糖酐40：1%、谷氨酸钠：1%、KCL：1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.32。将该冻干保护剂分装，然后进行高压蒸汽灭菌，灭菌条件为116℃，40分钟。
实施例12：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗的冻干保护剂。
所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖：10%、海藻糖：2%、右旋糖酐40：1%、谷氨酸钠：1%、KCL：1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.38。将该冻干保护剂分装，然后进行高压蒸汽灭菌，灭菌条件为116℃，40分钟。
实施例13：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗的冻干保护剂。
所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖：10%、海藻糖：3%、右旋糖酐40：1%、谷氨酸钠：1%、KCL：1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.48。将该冻干保护剂分装，然后进行高压蒸汽灭菌，灭菌条件为116℃，40分钟。
实施例14：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗的冻干保护剂。
所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖：10%、海藻糖：4%、右旋糖酐40：1%、谷氨酸钠：1%、KCL：1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.38。将该冻干保护剂分装，然后进行高压蒸汽灭菌，灭菌条件为116℃，40分钟。
实施例15：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗的冻干保护剂。
所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖：10%、海藻糖：5%、右旋糖酐40：1%、谷氨酸钠：1%、KCL：1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.43。将该冻干保护剂分装，然后进行高压蒸汽灭菌，灭菌条件为116℃，40分钟。
实施例16：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗冻干产品。
采用以下方法制备得到：
（1）以BCG D2PB302SII甲10株制备卡介菌工作种子，启开卡介菌工作种子批在生产用培养基进行传代培养，培养温度为37~39℃，传代培养结束后，收集菌膜压干，低温研磨，获得卡介菌菌体，将该菌体中加入适量冻干保护剂稀释菌液，制成治疗用卡介苗原液，该冻干保护剂稀释菌液来自于上述实施例11。
（2）测定治疗用卡介苗原液的浓度，将治疗用卡介苗原液按半成品要求的120mg/mL浓度再加入适量的冻干保护剂稀释菌液制成治疗用卡介苗半成品，治疗用卡介苗半成品中各成分的终浓度为：蔗糖10%、海藻糖：1%、右旋糖酐40 1%、谷氨酸钠1%、KCL1%。
（3）将上述治疗用卡介苗半成品在4h内分装入西林瓶中进行冻干处理，即得治疗用卡介苗冻干产品。
冻干处理时对以下参数进行控制：
预冻阶段：温度-50℃，达到最低温度后维持3小时；
升华干燥阶段：最终温度-12℃，达到最终温度的时间为12小时，真空压力控制在8Pa；
解吸干燥阶段：最终温度37℃，真空压力控制在8Pa，运行14小时，极限真空在0.5Pa，运行5小时。
实施例17：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗冻干产品。
采用以下方法制备得到：
（1）以BCG D2PB302SII甲10株制备卡介菌工作种子，启开卡介菌工作种子批在生产用培养基进行传代培养，培养温度为37~39℃，传代培养结束后，收集菌膜压干，低温研磨，获得卡介菌菌体，将该菌体中加入适量冻干保护剂稀释菌液，制成治疗用卡介苗原液，该冻干保护剂稀释菌液来自于上述实施例12。
（2）测定治疗用卡介苗原液的浓度，将治疗用卡介苗原液按半成品要求的120mg/mL浓度再加入适量的冻干保护剂稀释菌液制成治疗用卡介苗半成品，治疗用卡介苗半成品中各成分的终浓度为：蔗糖10%、海藻糖：2%、右旋糖酐40 1%、谷氨酸钠1%、KCL1%。
（3）将上述治疗用卡介苗半成品在4h内分装入西林瓶中进行冻干处理，即得治疗用卡介苗冻干产品。
冻干处理时对以下参数进行控制：
预冻阶段：温度-50℃，达到最低温度后维持3小时；
升华干燥阶段：最终温度-12℃，达到最终温度的时间为12小时，真空压力控制在8Pa；
解吸干燥阶段：最终温度37℃，真空压力控制在8Pa，运行14小时，极限真空在0.5Pa，运行5小时。
实施例18：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗冻干产品。
采用以下方法制备得到：
（1）以BCG D2PB302SII甲10株制备卡介菌工作种子，启开卡介菌工作种子批在生产用培养基进行传代培养，培养温度为37~39℃，传代培养结束后，收集菌膜压干，低温研磨，获得卡介菌菌体，将该菌体中加入适量冻干保护剂稀释菌液，制成治疗用卡介苗原液，该冻干保护剂稀释菌液来自于上述实施例13。
（2）测定治疗用卡介苗原液的浓度，将治疗用卡介苗原液按半成品要求的120mg/mL浓度再加入适量的冻干保护剂稀释菌液制成治疗用卡介苗半成品，治疗用卡介苗半成品中各成分的终浓度为：蔗糖10%、海藻糖：3%、右旋糖酐40 1%、谷氨酸钠1%、KCL1%。
（3）将上述治疗用卡介苗半成品在4h内分装入西林瓶中进行冻干处理，即得治疗用卡介苗冻干产品。
冻干处理时对以下参数进行控制：
预冻阶段：温度-50℃，达到最低温度后维持3小时；
升华干燥阶段：最终温度-12℃，达到最终温度的时间为12小时，真空压力控制在8Pa；
解吸干燥阶段：最终温度37℃，真空压力控制在8Pa，运行14小时，极限真空在0.5Pa，运行5小时。
实施例19：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗冻干产品。
采用以下方法制备得到：
（1）以BCG D2PB302SII甲10株制备卡介菌工作种子，启开卡介菌工作种子批在生产用培养基进行传代培养，培养温度为37~39℃，传代培养结束后，收集菌膜压干，低温研磨，获得卡介菌菌体，将该菌体中加入适量冻干保护剂稀释菌液，制成治疗用卡介苗原液，该冻干保护剂稀释菌液来自于上述实施例14。
（2）测定治疗用卡介苗原液的浓度，将治疗用卡介苗原液按半成品要求的120mg/mL浓度再加入适量的冻干保护剂稀释菌液制成治疗用卡介苗半成品，治疗用卡介苗半成品中各成分的终浓度为：蔗糖10%、海藻糖：4%、右旋糖酐40 1%、谷氨酸钠1%、KCL1%。
（3）将上述治疗用卡介苗半成品在4h内分装入西林瓶中进行冻干处理，即得治疗用卡介苗冻干产品。
冻干处理时对以下参数进行控制：
预冻阶段：温度-50℃，达到最低温度后维持3小时；
升华干燥阶段：最终温度-12℃，达到最终温度的时间为12小时，真空压力控制在8Pa；
解吸干燥阶段：最终温度37℃，真空压力控制在8Pa，运行14小时，极限真空在0.5Pa，运行5小时。
实施例20：
本实施例涉及一种治疗用卡介苗冻干产品。
采用以下方法制备得到：
（1）以BCG D2PB302SII甲10株制备卡介菌工作种子，启开卡介菌工作种子批在生产用培养基进行传代培养，培养温度为37~39℃，传代培养结束后，收集菌膜压干，低温研磨，获得卡介菌菌体，将该菌体中加入适量冻干保护剂稀释菌液，制成治疗用卡介苗原液，该冻干保护剂稀释菌液来自于上述实施例15。
（2）测定治疗用卡介苗原液的浓度，将治疗用卡介苗原液按半成品要求的120mg/mL浓度再加入适量的冻干保护剂稀释菌液制成治疗用卡介苗半成品，治疗用卡介苗半成品中各成分的终浓度为：蔗糖10%、海藻糖：5%、右旋糖酐40 1%、谷氨酸钠1%、KCL1%。
（3）将上述治疗用卡介苗半成品在4h内分装入西林瓶中进行冻干处理，即得治疗用卡介苗冻干产品。
冻干处理时对以下参数进行控制：
预冻阶段：温度-50℃，达到最低温度后维持3小时；
升华干燥阶段：最终温度-12℃，达到最终温度的时间为12小时，真空压力控制在8Pa；
解吸干燥阶段：最终温度37℃，真空压力控制在8Pa，运行14小时，极限真空在0.5Pa，运行5小时。
将上述实施例11～20所涉及的冻干保护剂制得的治疗用卡介苗冻干品进行毒性和过敏试验，参见下表3所示，其试验结果表明，未添加明胶成分的冻干保护剂，无过敏反应，安全性更好。
表3
Figure 659735DEST_PATH_IMAGE004
将上述实施例16～20所制得的治疗用卡介苗冻干产品分别于37℃、25℃、4℃放置不同时间，取样进行外观、水分及活菌计数测定，测定方法及标准参见《中华人民共和国药典》三部，测定结果参见下表4。经试验证明，上述实施例6～10所制得的治疗用卡介苗冻干产品的质量均高于《中华人民共和国药典》三部要求的标准，稳定性好。
表4
Figure 130030DEST_PATH_IMAGE005
Figure 797772DEST_PATH_IMAGE006
由此证明，本发明在采用特定配比的配方组合（蔗糖、右旋糖酐、海藻糖、谷氨酸钠、KCL）制得冻干保护剂，该冻干保护剂经毒性和安全性测试，无过敏等不良反应，专用于制备治疗用卡介苗的冻干产品，配合特定的冻干曲线，不仅能保证治疗用卡介苗冻干产品的安全性，还能保证其有效性，提高其稳定性，使其质量标准均高于《中华人民共和国药典》三部要求的标准，适宜广泛推广使用。
上述试验过程涉及的毒性试验方法如下：
用18～20g昆明小白鼠5只，每只腹腔注射 0.5ml 菌液（30mg），观察 1 周，到期称总体重，比较试验前体重是否减轻或死亡。
上述试验过程涉及的过敏试验方法如下：
取健康豚鼠24只，分为高、低剂量组，阴性对照组和阳性对照组，每组6只，雌雄各半。致敏给药3次，隔日分别腹腔注射给予高、低剂量，阴性对照和阳性对照。在末次注射后的第14天静脉给予供试品高、低剂量、阴性对照及阳性对照进行攻击。观察动物注射后有无抓鼻竖毛、呼吸困难、痉挛、休克甚至死亡等过敏反应症状。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化，均落入本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.冻干保护剂在制备冻干治疗用卡介苗中的应用，其特征在于：所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐0.5～2.0%、谷氨酸钠1%、KCl 1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.3～7.5。
2.根据权利要求1所述冻干保护剂在制备冻干治疗用卡介苗中的应用，其特征在于：所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐1%、谷氨酸钠1%、KCl 1%。
3.根据权利要求1所述冻干保护剂在制备冻干治疗用卡介苗中的应用，其特征在于：所述右旋糖酐为右旋糖酐40。
4.冻干保护剂在制备冻干治疗用卡介苗中的应用，其特征在于：所述冻干保护剂各成分配制浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐1%、海藻糖1～5%、谷氨酸钠1%、KCl 1%，配制冻干保护剂的溶剂为注射用水，用10%氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值为7.3～7.5。
5.一种制备冻干苗的方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）向治疗用卡介苗菌体中加入权利要求1或4任一项所述冻干保护剂，以制成治疗用卡介苗原液；
（2）向步骤（1）所述治疗用卡介苗原液中加入稀释液，以配制得到治疗用卡介苗半成品，稀释液含有与冻干保护剂相同的成分，且各成分的浓度相同；
（3）将步骤（2）所述治疗用卡介苗半成品经冻干处理后制得治疗用卡介苗冻干产品。
6.根据权利要求5所述的一种制备冻干苗的方法，其特征在于：所述步骤（2）中，治疗用卡介苗半成品中各成分的终浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐0.5～2.0%、谷氨酸钠1%、KCl 1%，或者终浓度为：蔗糖10%、右旋糖酐1%、海藻糖1~5%、谷氨酸钠1%、KCl 1%。
7.根据权利要求5所述的一种制备冻干苗的方法，其特征在于：所述步骤（2）中，卡介苗半成品的浓度为120mg/ml。
8.根据权利要求5所述的一种制备冻干苗的方法，其特征在于：所述步骤（3）中，所述冻干处理时满足以下条件：
预冻阶段：最低温度≤-40℃，达到最低温度后维持2~3小时；
升华干燥阶段：最终温度-15～-10℃，达到最终温度的时间为8～14小时，真空压力控制在8～10Pa；
解吸干燥阶段：最终温度34～37℃，真空压力控制在0.5～10Pa，运行15～22小时。
9.一种冻干苗，其特征在于：采用权利要求5所述方法制得的治疗用卡介苗冻干产品。
CN202010487563.3A 2020-06-02 2020-06-02 一种冻干保护剂及其应用和冻干苗及其制备方法 Active CN111588859B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010487563.3A CN111588859B (zh) 2020-06-02 2020-06-02 一种冻干保护剂及其应用和冻干苗及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010487563.3A CN111588859B (zh) 2020-06-02 2020-06-02 一种冻干保护剂及其应用和冻干苗及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111588859A CN111588859A (zh) 2020-08-28
CN111588859B true CN111588859B (zh) 2021-09-03

Family

ID=72185905

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010487563.3A Active CN111588859B (zh) 2020-06-02 2020-06-02 一种冻干保护剂及其应用和冻干苗及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111588859B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114652840A (zh) * 2022-02-25 2022-06-24 长春西诺生物科技有限公司 一种犬类病毒四联活疫苗的冻干保护剂及其制备方法和应用
CN114748615A (zh) * 2022-04-29 2022-07-15 成都安永鼎业生物技术有限公司 一种治疗用重组卡介苗的冻干制剂及其制备方法和用途

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1460521A (zh) * 2003-06-06 2003-12-10 长春生物制品研究所 重组乙型肝炎卡介苗联合疫苗及制备方法
CN1485095A (zh) * 2003-07-22 2004-03-31 青岛易邦生物工程有限公司 动物用疫苗冻干保护剂的制备方法
CN101537186A (zh) * 2009-04-30 2009-09-23 长春百克生物科技有限公司 一种不含明胶的疫苗冻干保护剂
CN102657870A (zh) * 2012-06-04 2012-09-12 长春祈健生物制品有限公司 一种无明胶及人血蛋白成分的疫苗冻干保护剂
CN105267971A (zh) * 2014-08-13 2016-01-27 科兴（大连）疫苗技术有限公司 一种不含明胶和人血白蛋白的疫苗冻干保护剂
CN105582534A (zh) * 2014-10-22 2016-05-18 上海生物制品研究所有限责任公司 一种无明胶水痘疫苗冻干制剂及其制备方法
CN109789200A (zh) * 2016-08-03 2019-05-21 武田疫苗股份有限公司 用改善的配制剂使黄病毒稳定化的组合物和方法
CN111840534A (zh) * 2020-08-06 2020-10-30 中国医学科学院医学生物学研究所 一种f基因型腮腺炎减毒活疫苗的规模化制备方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5524114A (en) * 1978-08-08 1980-02-21 Nippon B C G Seizo Kk Oral bcg capsules and their preparation
EP2087898A1 (en) * 2008-02-06 2009-08-12 Institut Pasteur A preparation of mycobacterium bovis BCG killed by extended freeze drying (EFD) for treating rheumatoid arthritis
WO2011069529A1 (en) * 2009-12-09 2011-06-16 Curevac Gmbh Mannose-containing solution for lyophilization, transfection and/or injection of nucleic acids
CN104324365B (zh) * 2014-10-24 2016-03-16 孙二琳 重组人干扰素-α-2b-BCG的干粉剂制备方法

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1460521A (zh) * 2003-06-06 2003-12-10 长春生物制品研究所 重组乙型肝炎卡介苗联合疫苗及制备方法
CN1485095A (zh) * 2003-07-22 2004-03-31 青岛易邦生物工程有限公司 动物用疫苗冻干保护剂的制备方法
CN101537186A (zh) * 2009-04-30 2009-09-23 长春百克生物科技有限公司 一种不含明胶的疫苗冻干保护剂
CN102657870A (zh) * 2012-06-04 2012-09-12 长春祈健生物制品有限公司 一种无明胶及人血蛋白成分的疫苗冻干保护剂
CN105267971A (zh) * 2014-08-13 2016-01-27 科兴（大连）疫苗技术有限公司 一种不含明胶和人血白蛋白的疫苗冻干保护剂
CN105582534A (zh) * 2014-10-22 2016-05-18 上海生物制品研究所有限责任公司 一种无明胶水痘疫苗冻干制剂及其制备方法
CN109789200A (zh) * 2016-08-03 2019-05-21 武田疫苗股份有限公司 用改善的配制剂使黄病毒稳定化的组合物和方法
CN111840534A (zh) * 2020-08-06 2020-10-30 中国医学科学院医学生物学研究所 一种f基因型腮腺炎减毒活疫苗的规模化制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Freeze-drying of live virus vaccines: a review;L.J.J Hansen等;《Vaccine》;20151031;第33卷(第42期);第5507-5519页 *
冻干保护剂在活疫苗生产中的应用进展;李键;《中国生物制品学杂志》;20170228;第30卷(第2期);第221-224页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111588859A (zh) 2020-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8900639B2 (en) Process for obtaining a rabbit skin comprising biological active substances
CN111588859B (zh) 一种冻干保护剂及其应用和冻干苗及其制备方法
US20050163803A1 (en) Non-animal origin stabilizers and processes for producing the same
RU2708393C1 (ru) Лиофилизированные композиции антибактериального белка
TWI649087B (zh) 用於活減毒阿爾法病毒配方之組成物及方法
CN103006586B (zh) 一种盐酸表柔比星冻干粉针及其制备方法
CN106668867B (zh) 一种不含明胶和人血白蛋白的腮腺炎疫苗冻干保护剂
US3214340A (en) Stabilized viable attenuated measles virus vaccines and their production
CN103251564A (zh) 一种注射用阿扎胞苷及其制备方法
CN102973922A (zh) 一种融合蛋白的应用
WO2023056962A1 (zh) 戈氏梭菌芽孢联合帕博利珠单抗的应用
US6726913B1 (en) Treatment of dermal tumors, warts, and viral infections of the respiratory tract in humans using heat-killed P. acnes
CN115040656A (zh) 狂犬疫苗冻干保护剂、应用和疫苗及其制备方法
CA2383626A1 (en) Treatment of dermal tumors, warts, and viral infections using heat-killed p. acnes
JP2023544310A (ja) プロバイオティクス成分の使用及びプロバイオティクス成分を含む医薬組成物
CN114652840A (zh) 一种犬类病毒四联活疫苗的冻干保护剂及其制备方法和应用
EP2461679B1 (en) Vaccine stabilizer
WO2004108156A1 (fr) Vaccin combine a injection intradermique contenant hevac et bcg et son procede de preparation
CN110870913A (zh) 氨基酸类营养素作为疫苗佐剂的应用以及包含氨基酸营养素作为佐剂的疫苗
CN114748615A (zh) 一种治疗用重组卡介苗的冻干制剂及其制备方法和用途
CN113081977B (zh) 一种抗感染的抗菌肽冻干制剂及其制备方法
CN111265594A (zh) 用于修复伤口的药物制剂及制备方法
CN113694032B (zh) 一种注射用甲泼尼龙琥珀酸钠冻干粉针剂及其制备方法
RU2380405C2 (ru) Способ получения рекомбинантного альфа 16-интерферона человека и фармацевтическая композиция для лечения вирусных заболеваний на основе рекомбинантного альфа 16-интерферона человека
RU2389505C1 (ru) Вакцина ассоциированная против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant