CN111548974A - 人工湖水微生物制剂、制备方法及用作水处理的用途 - Google Patents

人工湖水微生物制剂、制备方法及用作水处理的用途 Download PDF

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许帅
张涵仪
冯闪闪
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李文鹏
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张晓威
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Abstract

本发明公开了一种人工湖水微生物制剂、制备方法及用作水处理的用途,该人工湖微生物制剂包括种子培养液制备和放大培养两步,第一步为:将西徽假单胞菌、不动杆菌和枯草芽孢杆菌分别进行单菌种培养得到种子培养液;第二步为:将种子培养液步骤制得的种子培养液接种于同一培养基中,然后进行发酵培养。本发明的有益效果为:西徽假单胞菌在好氧条件下会发生硝化反应NH4 +转化为NO3 ,也会发生反硝化反应,将NO3 最终转化为N2,从而去除水中的氮。在曝气充足的情况下发生反硝化更多;不动杆菌发生好氧反硝化反应,将NO3 转化为N2,将水中的氮去除;枯草芽孢杆菌利用其快速的代谢速率,降解有机物,降低水中的COD。

Description

人工湖水微生物制剂、制备方法及用作水处理的用途
技术领域
本发明涉及微生物领域,尤其涉及一种人工湖水微生物制剂、制备方法及用作水处理的用途。
背景技术
由于具备改善景观、调节气候等作用,人工湖被广泛规划。人工湖水水质处理的方式,大致为:
第一种,人们认识到人工湖不治理的情况下水质会恶化、发臭,严重影响水景观之后,一些技术人员便逐渐开始探索合适的技术进行治理。常用的技术大致有水泵循环、跌水、沙缸过滤、投撒化学药剂、增氧曝气等方式,这些方式大都比较单一,治理效果甚微,基本无效。
第二种,随着时间的推移及技术的进步,部分公司在第一阶段的基础上适当改进,从而发展到了第二阶段,常用的技术大致有全自动精滤机、气浮、生物制剂、人工湿地亦即生态基等。这些技术相对第一阶段在技术含量和处理效果方面有很大进步,但大多都是从其他水处理技术转用过来的,不是专门针对人工湖水处理特点的。有些时候(水面较小时)治理效果好,有些时候(特别是水面较大时)处理效果会很差。
因此,需要一种治理效果好的人工湖水微生物制剂、制备方法及用作水处理的用途。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中人工湖水治理效果差的不足,本发明第一方面提供了一种人工湖微生物制剂,所述人工湖微生物制剂由种子培养液制备步骤和放大培养步骤依序制得,其中,
所述种子培养液制备步骤为:将西徽假单胞菌、不动杆菌和枯草芽孢杆菌分别进行单菌种培养得到种子培养液;
所述放大培养步骤为:将所述种子培养液步骤制得的种子培养液接种于同一培养基中,然后进行发酵培养。
进一步地,所述西徽假单胞菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:氯化铵0.1-3份、氯化钠0.1-2份、七水合硫酸亚铁0.01-1份、磷酸氢二钾0.3-2份、碳酸氢钠1-5份和柠檬酸钠0.5-1份,定容后pH为7.1-7.3;
培养条件为:30-36℃好氧条件下,摇床转速为120-180rpm,培养时间为44-52h。
进一步地,所述西徽假单胞菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:氯化铵0.5份、氯化钠0.3份、七水合硫酸亚铁0.03份、磷酸氢二钾1份、碳酸氢钠3.6份和柠檬酸钠0.75份,定容后pH为7.2;
培养条件为:33℃好氧条件下,摇床转速为150rpm,培养时间为48h。
进一步地,所述不动杆菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:硝酸钾0.5~5份、磷酸氢二钾0.5~5份、磷酸二氢钾0.5~5份、硫酸镁0.05~3份和柠檬酸钠0.5~1份,定容后pH为7.2;
培养条件为:培养条件为:30-36℃好氧条件下,摇床转速为120-180rpm,培养时间为44-52h。
进一步地,所述不动杆菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:硝酸钾2份、磷酸氢二钾1份、磷酸二氢钾1份、硫酸镁0.2份和柠檬酸钠5份,定容后pH为7.2;
培养条件为:33℃好氧条件下,摇床转速为150rpm,培养时间为48h。
进一步地,所述枯草芽孢杆菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:胰酪胨3~15份、氯化钠5份和大豆木瓜蛋白酶水解物1~10份,定容后pH为7.2-7.4;
培养条件为:30-36℃好氧条件下,摇床转速为120-180rpm,培养时间为44-52h。
进一步地,所述枯草芽孢杆菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:胰酪胨15份、氯化钠5份和大豆木瓜蛋白酶水解物5份,用水定容至1000mL,定容后pH为7.3;
培养条件为:33℃好氧条件下,摇床转速为150rpm,培养时间为48h。
进一步地,所述放大培养步骤后的菌液调整OD值至1-5,所述西徽假单胞菌、所述不动杆菌和所述枯草芽孢杆菌的菌落数量比例为1-8∶2-8∶1-5。
本发明第二方面提供了上述任一方案的人工湖微生物制剂的制备方法,该方法包括种子培养液制备步骤和放大培养步骤,其中,
所述种子培养液制备步骤为:将西徽假单胞菌、不动杆菌和枯草芽孢杆菌分别进行单菌种培养得到种子培养液;
所述放大培养步骤为:将所述种子培养液步骤制得的种子培养液接种于同一培养基中,然后进行发酵培养。
本发明实施例第三方面公开了一种任一上述的人工湖微生物制剂用作水处理的用途。
本发明的有益效果在于:
西徽假单胞菌在好氧条件下会发生硝化反应NH4 +转化为NO3 -,也会发生反硝化反应,将NO3 -最终转化为N2,从而去除水中的氮。在曝气充足的情况下发生反硝化更多;
不动杆菌发生好氧反硝化反应,将NO3 -转化为N2,将水中的氮去除;
枯草芽孢杆菌利用其快速的代谢速率,可以降解有机物,可降低水中的COD。
使用本发明实施例所述的人工湖水微生物制剂对湖水进行处理效果为:
初NH4 +--N:120mg/L;NO3---N:60mg/L。
在20h时,氨氮(即上述的NH4 +--N)下降11%,硝氮(即上述的NO3---N)下降36.7%;
在30h时,氨氮下降22%,硝氮下降58%;
在50h时,氨氮下降62.4%,硝氮下降45%;
在60h时,氨氮下降64%,硝氮下降53%。
附图说明
图1为西徽假单胞菌的基因序列比对结果图。
具体实施方式
本发明公开了一种人工湖水微生物制剂、制备方法及用作水处理的用途,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
本发明第一方面提供了一种人工湖微生物制剂,人工湖微生物制剂由种子培养液制备步骤和放大培养步骤依序制得,其中,
种子培养液制备步骤为:将西徽假单胞菌、不动杆菌和枯草芽孢杆菌分别进行单菌种培养得到种子培养液;
放大培养步骤为:将种子培养液步骤制得的种子培养液接种于同一培养基中,进行发酵培养。
首先需要说明的是,本发明提供的西徽假单胞菌、微小杆菌、贝莱斯芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和氧化节杆菌均可由市场购得。
本发明的人工湖微生物制剂的作用机制为:
西徽假单胞菌在好氧条件下会发生硝化反应NH4 +转化为NO3 -,也会发生反硝化反应,将NO3 -最终转化为N2,从而去除水中的氮。在曝气充足的情况下发生反硝化更多;
不动杆菌发生好氧反硝化反应,将NO3 -转化为N2,将水中的氮去除;
枯草芽孢杆菌利用其快速的代谢速率,可以降解有机物,可降低水中的COD。
具体地,西徽假单胞菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:氯化铵0.1-3份、氯化钠0.1-2份、七水合硫酸亚铁0.01-1份、磷酸氢二钾0.3-2份、碳酸氢钠1-5份和柠檬酸钠0.5-1份,定容后pH为7.1-7.3;
培养条件为:30-36℃好氧条件下,摇床转速为120-180rpm,培养时间为44-52h。
具体地,西徽假单胞菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:氯化铵0.5份、氯化钠0.3份、七水合硫酸亚铁0.03份、磷酸氢二钾1份、碳酸氢钠3.6份和柠檬酸钠0.75份,定容后pH为7.2;
培养条件为:33℃好氧条件下,摇床转速为150rpm,培养时间为48h。
具体地,不动杆菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:硝酸钾0.5~5份、磷酸氢二钾0.5~5份、磷酸二氢钾0.5~5份、硫酸镁0.05~3份和柠檬酸钠0.5~1份,定容后pH为7.2;
培养条件为:培养条件为:30-36℃好氧条件下,摇床转速为120-180rpm,培养时间为44-52h。
具体地,不动杆菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:硝酸钾2份、磷酸氢二钾1份、磷酸二氢钾1份、硫酸镁0.2份和柠檬酸钠5份,定容后pH为7.2;
培养条件为:33℃好氧条件下,摇床转速为150rpm,培养时间为48h。
具体地,枯草芽孢杆菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:胰酪胨3~15份、氯化钠5份和大豆木瓜蛋白酶水解物1~10份,定容后pH为7.2-7.4;
培养条件为:30-36℃好氧条件下,摇床转速为120-180rpm,培养时间为44-52h。
具体地,枯草芽孢杆菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:胰酪胨15份、氯化钠5份和大豆木瓜蛋白酶水解物5份,用水定容至1000mL,定容后pH为7.3;
培养条件为:33℃好氧条件下,摇床转速为150rpm,培养时间为48h。
具体地,放大培养步骤后的菌液调整OD值至1-5,所述西徽假单胞菌、所述不动杆菌和所述枯草芽孢杆菌的菌落数量比例为1-8∶2-8∶1-5。
本发明第二方面提供了上述任一方案的人工湖微生物制剂的制备方法,该方法包括种子培养液制备步骤和放大培养步骤,其中,
种子培养液制备步骤为:将西徽假单胞菌、不动杆菌和枯草芽孢杆菌分别进行单菌种培养得到种子培养液;
放大培养步骤为:将种子培养液步骤制得的种子培养液接种于同一培养基中,然后进行发酵培养。
本发明实施例第三方面公开了一种任一上述的人工湖微生物制剂用作水处理的用途。
上述的西徽假单胞菌的16S RDNA全长序列为:
Figure BDA0002524809850000071
Figure BDA0002524809850000081
从序列比对结果上,如图1所示,可看出,第一个比对结果显示该菌的中文名称为西徽假单胞菌。
使用本发明实施例所述的人工湖水微生物制剂对湖水进行处理效果为:
初NH4 +--N:120mg/L;NO3---N:60mg/L。
在20h时,氨氮(即上述的NH4 +--N)下降11%,硝氮(即上述的NO3---N)下降36.7%;
在30h时,氨氮下降22%,硝氮下降58%;
在50h时,氨氮下降62.4%,硝氮下降45%;
在60h时,氨氮下降64%,硝氮下降53%。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种人工湖微生物制剂,其特征在于,所述人工湖微生物制剂由种子培养液制备步骤和放大培养步骤依序制得,其中,
所述种子培养液制备步骤为:将西徽假单胞菌、不动杆菌和枯草芽孢杆菌分别进行单菌种培养得到种子培养液;
所述放大培养步骤为:将所述种子培养液步骤制得的种子培养液接种于同一培养基中,然后进行发酵培养。
2.根据权利要求1所述的人工湖微生物制剂,其特征在于,所述西徽假单胞菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:氯化铵0.1-3份、氯化钠0.1-2份、七水合硫酸亚铁0.01-1份、磷酸氢二钾0.3-2份、碳酸氢钠1-5份和柠檬酸钠0.5-1份,定容后pH为7.1-7.3;
培养条件为:30-36℃好氧条件下,摇床转速为120-180rpm,培养时间为44-52h。
3.根据权利要求2所述的人工湖微生物制剂,其特征在于,所述西徽假单胞菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:氯化铵0.5份、氯化钠0.3份、七水合硫酸亚铁0.03份、磷酸氢二钾1份、碳酸氢钠3.6份和柠檬酸钠0.75份,定容后pH为7.2;
培养条件为:33℃好氧条件下,摇床转速为150rpm,培养时间为48h。
4.根据权利要求1所述的人工湖微生物制剂,其特征在于,所述不动杆菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:硝酸钾0.5~5份、磷酸氢二钾0.5~5份、磷酸二氢钾0.5~5份、硫酸镁0.05~3份和柠檬酸钠0.5~1份,定容后pH为7.2;
培养条件为:培养条件为:30-36℃好氧条件下,摇床转速为120-180rpm,培养时间为44-52h。
5.根据权利要求4所述的人工湖微生物制剂,其特征在于,所述不动杆菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:硝酸钾2份、磷酸氢二钾1份、磷酸二氢钾1份、硫酸镁0.2份和柠檬酸钠5份,定容后pH为7.2;
培养条件为:33℃好氧条件下,摇床转速为150rpm,培养时间为48h。
6.根据权利要求1所述的人工湖微生物制剂,其特征在于,所述枯草芽孢杆菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:胰酪胨3~15份、氯化钠5份和大豆木瓜蛋白酶水解物1~10份,定容后pH为7.2-7.4;
培养条件为:30-36℃好氧条件下,摇床转速为120-180rpm,培养时间为44-52h。
7.根据权利要求6所述的人工湖微生物制剂,其特征在于,所述枯草芽孢杆菌的种子培养液制备中,
培养基为由以下重量份的成分定容至1000mL制得:胰酪胨15份、氯化钠5份和大豆木瓜蛋白酶水解物5份,用水定容至1000mL,定容后pH为7.3;
培养条件为:33℃好氧条件下,摇床转速为150rpm,培养时间为48h。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的人工湖微生物制剂,其特征在于,所述放大培养步骤后的菌液调整OD值至1-5,所述西徽假单胞菌、所述不动杆菌和所述枯草芽孢杆菌的菌落数量比例为1-8∶2-8∶1-5。
9.一种权利要求1至7中任一项所述的人工湖微生物制剂的制备方法,其特征在于,包括种子培养液制备步骤和放大培养步骤,其中,
所述种子培养液制备步骤为:将西徽假单胞菌、不动杆菌和枯草芽孢杆菌分别进行单菌种培养得到种子培养液;
所述放大培养步骤为:将所述种子培养液步骤制得的种子培养液接种于同一培养基中,然后进行发酵培养。
10.一种权利要求1至7中任一项所述的人工湖微生物制剂用作水处理的用途。
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